KR20140001211A

KR20140001211A - 암 치료에 유용한 피크로포도필린 b 또는 c

Info

Publication number: KR20140001211A
Application number: KR1020137011882A
Authority: KR
Inventors: 미카엘 비스랫; 마그너스 브리산더
Original assignee: 악셀라르 아베
Priority date: 2010-10-08
Filing date: 2011-10-07
Publication date: 2014-01-06
Also published as: EP2624827A4; JP2013538872A; CN103269700A; SG189295A1; US9314525B2; CA2812921A1; BR112013008232A2; RU2013120990A; AU2011312905A1; US20130317099A1; IL225465A0; WO2012047171A1; EP2624827A1; MX2013003859A

Abstract

본 발명은 새로운 피크로포도필린의 다형체, 상기 다형체의 제조방법 및 상기 다형체를 포함하는 약학 조성물뿐만 아니라, 암 치료와 같은 치료에서 상기 다형제의 용도에 관한 것이다.

Description

암 치료에 유용한 피크로포도필린 B 또는 C {PICROPODOPHYLLIN POLYMORPHS B OR C FOR USE IN CANCER THERAPY}

본 발명은 새로운 피크로포도필린 (picropodophyllin)의 다형체 (polymorph), 이들의 제조방법, 치료에 이들의 용도뿐만 아니라, 상기 다형체를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

약학적 고체 (Pharmaceutical solids)는 결정형, 무정형, 또는 유리와 같은, 다른 형태 및 또한 용해된 또는 수화된 형태로 존재할 수 있다. 다형체는 상기 고체 상태에서 화합물의 분자의 적어도 두개의 결정성 배열의 가능성을 결과하는 상기 화합물의 고체 결정 상 (solid crystalline phase)이다.

동일한 약물 (drug)의 다른 형태가 안정성, 용해성, 용해 속도, 결정형 (crystal habit) 및 정제 거동 (tableting behavior)과 같이, 어떤 약학적으로 중요한 물리화학적 특성에서 차이점을 제공한다는 사실은 잘 알려져 있다. 이들 물리화학적 특성의 어떤 변화는 결국 상기 약물의 생물학적 이용도에 영향을 미칠 수 있다.

피크로포도필린은 하기 화학식 1을 갖는, 시클로리그난 (cyclolignans)으로 명명되는 화합물의 부류에 속하는 화합물이다:

오랜 시간 동안, 피크로포도필린은 생물학적 활성이 없거나 또는 낮다고 믿어왔기 때문에 많은 관심을 받지 못했다. 반면, 락톤 고리에 트랜스 (trans ) 구조를 갖는, 이의 입체이성질체 (stereoisomer)인 하기 화학식 2로 표시되는 포도필로톡신 (podophyllotoxin)은 이의 세포독성 특성 때문에 십 년간 연구되어왔다.

그러나, 연구는 피크로포도필린이 흥미로운 생물학적 특성 및 약제로서의 잠재성을 나타내는 것을 입증했다.

WO 02/102804호에서는 피크로포도필린이 인슐린-유사 성장 인자-1 수용체 (insulin-like growth factor-1 receptor) (IGF-1R)의 특이적이고 강력한 억제제이고, 다양한 타입의 암, 동맥경화증 (artheriosclerosis), 건선 (psoriasis), 및 관상동맥 혈관 확장술 (coronary angioplasty)에 수반되는 협착증 (restenosis)과 같은 IGF-1R 의존성 질환의 치료에 유용할 수 있다는 것을 개시하고 있다.

WO 2007/097707호에서는 2형 당뇨병, 신장병, 망막병증 (retinopathy), 황반 변성 (macular degeneration), 미숙아 망막 병증, 망막 중심 정맥 폐쇄 (central retinal vein occlusion), 망막 분지 정맥 폐쇄 (branch retinal vein occlusion), 신생혈관 녹내장 (rubeotic glaucoma), 갑상선 안구 질환 (thyroid eye disease), 각막 이식 거부 (graft rejection) 및 각막 화학 화상임의 예방 및 치료; 및 피임에 대한 피크로포도필린의 용도를 개시하고 있다.

WO 2009/157858호에서는 류마티스 관절염, 크론 병 (Crohn's disease), 궤양성 대장염 (ulcerative colitis), 다발성 경화증 (multiple sclerosis), 알츠하이머 질환 (Alzheimer's disease), 천식 (asthma), 습진성 피부염 (eczematous dermatitis), 및 이식에 수반되는 이식 거부와 같은 과활성 면역 시스템 (hyperactive immune system)을 특징으로 하는 질병 또는 상태의 예방 또는 치료를 위한 피크로포도필린의 용도를 개시하고 있다.

Z. Kristallogr. 215 (2000) pp. 45-47에서는 결정 데이터가 보고된 피크로포도필린의 결정 구조를 공개하였다.

피크로포도필린 일수화물 (monohydrate) 및 피크로포도필린 다형체 A는Schrecker et al in Helvetica Chimica Acta (1954); 37; pp.1541-1543에 공개되었다.

본 발명의 관점은 피크로포도필린의 새로운 다형체를 제공하는 데 있다.

본 발명의 관점은 낮은 흡습성 (hygroscopicity)을 나타내는 새로운 다형체를 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 관점은 새롭고 물리적으로 안정한 다형체를 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 관점은 우수한 용해도를 나타내는 새로운 다형체를 제공하는 데 있다.

본 발명의 피크로포도필린 다형체 B는 5.7 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공한다.

본 발명의 피크로포도필린 다형체 C는 5.5 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공한다.

본 발명은 새로운 피크로포도필린의 다형체, 상기 다형체의 제조방법 및 상기 다형체를 포함하는 약학 조성물뿐만 아니라, 암 치료와 같은 치료에서 상기 다형제의 용도를 제공한다.

도 1은 제로 백그라운드 석영 단결정 표본 지지체 (zero background quarts single crystal specimen support)에서 측정된 피크로포도필린 다형체 B의 X-선 분말 회전패턴 (X-ray powder diffractogram) (XRPD)이다.
도 2는 모세관 (capillary)에서 측정된 피크로포도필린 다형체 B의 X-선 분말 회전패턴 (XRPD)이다.
도 3은 제로 백그라운드 석영 단결정 표본 지지체에서 측정된 피크로포도필린 다형체 C의 X-선 분말 회전패턴 (XRPD)이다.
도 4는 모세관에서 측정된 피크로포도필린 다형체 C의 X-선 분말 회전패턴 (XRPD)이다.
도 5는 피크로포도필린 다형체 B의 적외선 (IR) 스펙트럼이다.
도 6은 피크로포도필린 다형체 C의 적외선(IR) 스펙트럼이다.
도 7은 안정성 연구의 개시 시간에서 (하부), 25℃ / 60% RH에서 저장된 3개월동안 (중간) 및 40℃ / 75% RH에서 정장된 3 개월동안 (상부) 피크로포도필린 다형체 B의 강조된 X-선 분말 회전패턴(XRPD)이다. 상기 XRPD 패턴은 가시적 비교를 증가시키기 위해 상쇄 (offset)된다.
도 8은 안정성 연구의 개시 시간에서 (하부), 25℃ / 60% RH에서 저장된 3개월동안 (중간) 및 40℃ / 75% RH에서 저장된 3 개월동안 (상부) 피크로포도필린 다형체 C의 강조된 X-선 분말 회전패턴(XRPD)이다. 상기 XRPD 패턴은 가시적 비교를 증가시키기 위해 상쇄된다.

하기의 정의는 특별한 언급이 없는 한, 상세한 설명 및 첨부된 청구항을 통해 적용될 것이다:

낮은 흡습성은 40℃/75% RH 및 25℃/60% RH에서 3 개월동안 각각 저장 후, 1% 이하와 같이, 2% 이하의 질량 증가로서 본 발명에 정의된다. 낮은 흡습성은 취급을 용이하게 하고, 약학적 제조 및 저장 안정성의 관점에서 장점이 있다.

우수한 용해도는 물의 1% SDS에 24 시간동안 교반 후, 피크로포도필린 일수화물 (monohydrate)의 용해도 이상, 즉, 0.2 ㎎/㎖ 이상인 용해도로 본 발명에서 정의된다.

물리적으로 안정한 이란 대략 760 mmHg에서, 20 내지 25 ℃ 또는 25 내지 120 ℃의 온도와 같은, 대기 온도에서 존재하는 것을 유지할 수 있는 형태 및 형성된 화합물의 형태로 본 발명에서 정의된다.

회절 (Diffraction) 및 스펙트럼 데이터 (spectral data)는 X-선 분말 회절계 (X-ray powder diffractometry) (XRPD) 및 적외선 분광광도계 (Infrared Spectroscopy) (IR) 각각을 사용하여 다형체에 대해 기록될 수 있다. 상기 샘플 제조가 측정의 결과에 영향을 미칠 수 있다는 것으로 이해된다. 따라서, 만약 상기 다형체 샘플이 본 발명에 기술된 바와 같은 제로 백그라운드 석영 단결정 표본 지지체 또는 모세관을 사용하여 측정된다면, 동일한 다형체에 대한 XRPD 패턴은, 예를 들어, 피크 위치 및 강도에 의존하여 변화될 수 있다.

본 발명의 관점은 피크로포도필린 다형체 B를 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 관점은 낮은 흡습성을 나타내는 피크로포도필린 다형체 B를 제공하는 데 있다.

피크로포도필린 다형체 B는 제로 백그라운드 석영 단결정 표본 지지체로 측정된 경우, 이하 본 발명에 기술된 바와 같은 것이 특징이 될 수 있다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.7 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴 (X-ray powder diffraction pattern)을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.7 및 10.0 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.7, 10.0, 10.1 및 11.3 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.7, 10.0, 10.1, 11.3, 13.9 및 14.1 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

피크로포도필린 다형체 B는 모세관을 사용하여 측정된 경우, 이하 본 발명에 기술된 바와 같은 것이 특징이 될 수 있다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.7, 및 9.9 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 다른 관점은 5.6, 9.9, 10.0 및 11.2 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B이다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.6, 9.9, 10.0, 11.2, 13.8 및 14.0 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 1736.9 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 1736.9; 2841.5; 2936.0; 2970.9 및 3425.5 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 1465.7; 1482.5; 1590.0; 1736.9; 2841.5; 2936.0; 2970.9; 3425.5 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B 가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 1032.3; 1129.0; 1243.4; 1273.3; 1465.7; 1482.5; 1590.0; 1736.9; 2841.5; 2936.0; 2970.9 및 3425.5 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 상술된 바와 같은 XRPD 패턴과 함께 IR 스펙트럼를 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 1에서 도시된 바와 같이, 필수적으로 XRPD 패턴을 나타내는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 2에서 도시된 바와 같이, 필수적으로 XRPD 패턴을 나타내는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 5에서 도시된 바와 같이, 필수적으로 IR 패턴을 나타내는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 1 및 도 5에서 도시된 바와 같이, 필수적으로 XRPD 패턴 및 IR 패턴을 나타내는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 2 및 도 5에서 도시된 바와 같이, 필수적으로 XRPD 패턴 및 IR 패턴을 나타내는 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 다른 관점에 있어서, 하기 단계를 포함하여, 피크로포도필린 다형체 B를 피크로포도필린 다형체 C로 전환시키는 방법이 제공된다:

a) 유기 용매하의 피크로포도필린의 포화된 용액에서 피크로포도필린 다형체 B와 피크로포도필린 다형체 C를 혼합시키는 단계;

b) 침전물을 얻기 위하여 단계 a)에서 얻어진 상기 혼합물을 교반시키는 단계; 및

c) 상기 얻어진 침전물을 여과시키는 단계.

다른 관점에 있어서, 아세톤, 에틸 아세테이트 또는 메시틸렌 (mesitylene)으로부터 선택된 상기 유기용매가 상술한 바와 같은 방법에 제공된다.

다른 관점에 있어서, 단계 a), b) 또는 c) 중 적어도 하나의 단계가 실온, 즉 20 내지 25 ℃의 온도에서 수행되는, 상술된 바와 같은 방법이 제공된다.

다른 관점에 있어서, 단계 a), b) 또는 c) 중 적어도 하나의 단계가 실온 이상, 특히, 약 70 ℃의 온도 또는 약 120 ℃에서 수행되는, 상술된 바와 같은 방법이 제공된다.

본 발명의 다른 관점은 피크로포도필린이 m-크실렌 (xylene), p-크실렌, 메시틸렌, o-크실렌 아니졸, 이소부틸 아세테이트, 및 이의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로부터 재결정되는 본 발명에 기술된 바와 같은 피크로포도필린 다형체 B의 제조방법이다.

본 발명의 다른 관점은 피크로포도필린 다형체 C를 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 관점은, 피크로포도필린이 프로피오니트릴 (propionitrile), 메틸에틸케톤, n-부틸 아세테이트, 이소부틸니트릴, n-부틸포미에이트 (butylformiate) 또는 iso-부틸포미에이트 또는 tert-부틸포미에이트와 같은 부틸포미에이트, 벤조니트릴, 큐멘 (cumene), 디프로필 카보네이트, 및 이의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로부터 재결정되는 본 발명에 기술된 바와 같은 피크로포도필린 다형체 C의 제조방법이다.

본 발명의 다른 관점은 낮은 흡습성을 나타내는 피크로포도필린 다형체 C를 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 관점은 대략 760 mmHg에서, 20 내지 25 ℃ 또는 25 내지 120 ℃의 온도와 같은, 대기 온도에서 물리적 안정성을 나타내는 피크로포도필린 다형체 C이다.

피크로포도필린 다형체 C는 제로 백그라운드 석영 단결정 표본 지지체로 측정된 경우, 이하 본 발명에 기술된 바와 같은 것이 특징이 될 수 있다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.5 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.5 및 7.0 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.5, 7.0, 8.3 및 11.0± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.5, 7.0, 8.3, 11.0, 11.6 및 11.8 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

피크로포도필린 다형체 C는 모세관으로 측정된 경우, 이하 본 발명에 기술된 바와 같은 것이 특징이 될 수 있다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.4 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.4 및 6.9± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.4, 6.9, 8.2 및 9.7 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.4, 6.9, 8.2, 9.7, 10.0 및 10.9 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 5.4, 6.9, 8.2, 9.7, 10.0, 10.9, 11.5 및 11.7 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 1773.8 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 1773.8; 2842.2; 2943.2; 2993.8 및 3436.0 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 1425.8; 1462.5; 1479.0; 1592.8; 1773.8; 2842.2; 2943.2; 2993.8 및 3436.0 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 1031.2; 1129.0; 1184.5; 1233.6; 1425.8; 1462.5; 1479.0; 1592.8; 1773.8; 2842.2; 2943.2; 2993.8 및 3436.0 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 전술된 바와 같은 XRPD 패턴 및 IR 스펙트럼를 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 3에서 도시된 바와 같은, 필수적으로 XRPD 패턴을 나타내는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 4에서 도시된 바와 같은, 필수적으로 XRPD 패턴을 나타내는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 6에서 도시된 바와 같은, 필수적으로 IR 스펙트럼을 나타내는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 3 및 도 6 각각에서 도시된 바와 같은, 필수적으로 XRPD 패턴 및 IR 스펙트럼을 나타내는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 도 4 및 도 6 각각에서 도시된 바와 같은, 필수적으로 XRPD 패턴 및 IR 스펙트럼을 나타내는 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점은 피크로포도필린의 어떤 다른 다형체 및/또는 어떤 다른 결정 및/또는 어떤 다른 비-결정 형태가 실질적으로 없는 피크로포도필린 다형체 B이다.

본 발명의 어떤 관점은 피크로포도필린의 어떤 다른 다형체 및 또는 어떤 다른 결정 및/또는 어떤 다른 비-결정 형태가 실질적으로 없는 피크로포도필린 다형체 C이다.

상기 용어 "피크로포도필린의 어떤 다른 다형체 및 또는 어떤 다른 결정 및/또는 어떤 다른 비-결정 형태가 실질적으로 없는"은 피크로포도필린 다형체 B가 피크로포도필린의 어떤 다른 다형체 및/또는 어떤 다른 결정 및/또는 어떤 다른 비-결정 형태의 10% 미만, 특히 5% 미만 또는 1% 미만을 함유한다는 것을 의미하는 것으로 이해될 수 있다.

상기 용어 "피크로포도필린의 어떤 다른 다형체 및 또는 어떤 다른 결정 및 /또는 어떤 다른 비-결정 형태가 실질적으로 없는"은 피크로포도필린 다형체 C가 피크로포도필린의 어떤 다른 다형체 및/또는 어떤 다른 결정 및/또는 어떤 다른 비-결정 형태의 10% 미만, 특히 5% 미만 또는 1% 미만을 함유한다는 것을 의미하는 것으로 이해될 수 있다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 치료에 사용하기 위한 피크로포도필린 다형체 B가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 치료에 사용하기 위한 피크로포도필린 다형체 C가 제공된다.

본 발명의 또 다른 관점은, 암과 같은 IGF-1R 의존성 질병에 대한 약제 (medicament)의 제조에 사용하기 위한 피크로포도필린 다형체 B의 용도이다.

본 발명에 기술된 바와 같은 피크로포도필린 다형체 B가 유용할 수 있는 암의 예로는 비-소세포 폐암 (NSCLC) 또는 소세포 폐암과 같은 폐암; 유방암; 구강, 굴혈관 (sinusoidal) 또는 인두 암 (pharyngeal cancer)과 같은 두경부암 (head and neck cancer); 식도암, 위암 (stomach cancer), 대장암, 직장암, 위장관 기질 종양 (gastrointestinal stromal tumor), 간암 또는 췌장암과 같은 위장관암 (genitourinary cancer); 전립선암, 방광암 또는 신장암과 같은 비뇨생식기암 (genitourinary cancer); 난소암, 자궁경부암, 자궁내막 암 (endometric cancer) 또는 자궁육종 (uterine sarcoma)과 같은 부인과 암; 골수성 백혈병 (myeloid leukemia), 림프구성 백혈병, 림프종 (lymphomas) 또는 다발성 골수종과 같은 혈액암; 유잉 육종 (Ewings sarcoma), 골육종 (osteosarcoma) 또는 연조직 육종과 같은 근골격계 암; 악성 흑색종 (malignant melanoma), 기저 세포암 (basal cell cancer), 편평 세포암 (squamous cell cancer) 또는 카포시 육종 (Kaposi's sarcoma)과 같은 피부암; 신경교종 (gliomas), 아교모세포종 (glioblastoma), 성상세포종 (astrocytoma), 수모세포종 (medulloblastoma), 두개인두종 (craniopharyngeoma) 또는 신경모세포종 (neuroblastoma)과 같은 뇌 및 신경계 암; 부신피질암, 부신경절종 (paraganglioma), 크롬친화세포종 (pheochromocytoma) 또는 갑상선암과 같은 내분비 암; 또는 망막모세포종 (retinoblastoma) 또는 포도막 악성흑색종 (uveal melanoma)과 같은 눈 암이다.

본 발명에 정의된 바와 같이 피크로포도필린 다형체 B가 유용할 수 있는 비-소세포 폐암종 (non-small cell lung carcinoma (NSCLC))의 예로는 선암종 (adenocarcinoma), 편평세포암종 (squameous cell carcinoma) 또는 대세포 암종 (carcinoma)이다.

본 발명의 다른 관점은 건선; 관상 동맥 혈관 성형술 후 재 협착 (restenosis after coronary angioplasty); 2형 당뇨병; 신장병; 망막병증 (retinopathy) 또는 황반변성 (macular degeneration)과 같은 안 질환; 류마티스 관절염; 크론 병 (Crohns disease) 또는 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)과 같은 염증성 장질환; 다발성 경화증; 알츠하이머 병; 또는 이식 거부에 대한 치료 약제를 제조하기 위한 피크로포도필린 다형체 B의 용도이다.

본 발명의 또 다른 관점은 암과 같은 IGF-1R 의존성 질병에 대한 약제를 제조하기 위한 피크로포도필린 다형체 C의 용도이다.

본 발명에 기술된 바와 같은 피크로포도필린 다형체 C가 유용할 수 있는 암의 예로는 비-소세포 폐암 (NSCLC) 또는 소세포 폐암과 같은 폐암; 유방암; 구강, 굴혈관 또는 인두암과 같은 두경부암; 식도암, 위암, 대장암, 직장암, 위장관 기질 종양, 간암 또는 췌장암과 같은 위장관 암; 전립선암, 방광암 또는 신장암과 같은 비뇨생식기암; 난소암, 자궁경부암, 자궁내막암 또는 자궁육종과 같은 부인과 암; 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 림프종 또는 다발성 골수종과 같은 혈액암; 유잉 육종, 골육종 또는 연조직 육종과 같은 근골격계 암; 악성 흑색종, 기저 세포암, 편평 세포암 또는 카포시 육종과 같은 피부암; 신경교종, 아교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종 또는 신경모세포종과 같은 뇌 및 신경계 암; 부신피질암, 부신경절종, 크롬친화세포종 또는 갑상선암과 같은 내분비 암; 또는 망막모세포종 또는 포도막 악성흑색종과 같은 눈 암이다.

본 발명에 정의된 바와 같이 피크로포도필린 다형체 C가 유용할 수 있는 비-소세포 폐암종의 예로는 선암종, 편평세포암종 또는 대세포 암종이다.

본 발명의 다른 관점은 건선; 관상 동맥 혈관 성형술 후 재 협착 ; 2형 당뇨병; 신장병; 망막병증 또는 황반변성과 같은 안 질환; 류마티스 관절염; 크론병 또는 궤양성 대장염과 같은 염증성 장질환; 다발성 경화증; 알츠하이머 병; 또는 이식 거부에 대한 치료 약제를 제조하기 위한 피크로포도필린 다형체 C의 용도이다.

본 발명의 또 다른 관점은 암과 같은 IGF-1R 의존성 질병에 대한 치료에 사용하기 위한 피크로포도필린 다형체 B이다.

본 발명에 기술된 바와 같은 피크로포도필린 다형체 B가 유용할 수 있는 암의 예로는 비-소세포 폐암 (NSCLC) 또는 소세포 폐암과 같은 폐암; 유방암; 구강, 굴혈관 또는 인두 암과 같은 두경부암; 식도암, 위암, 대장암, 직장암, 위장관 기질 종양, 간암 또는 췌장암과 같은 위장관 암; 전립선암, 방광암 또는 신장암과 같은 비뇨생식기 암; 난소암, 자궁경부암, 자궁내막암 또는 자궁육종과 같은 부인과 암; 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 림프종 또는 다발성 골수종과 같은 혈액암; 유잉 육종, 골육종 또는 연조직 육종과 같은 근골격계 암; 악성 흑색종, 기저 세포암, 편평 세포암 또는 카포시 육종과 같은 피부암; 신경교종, 아교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종 또는 신경모세포종과 같은 뇌 및 신경계 암; 부신피질암, 부신경절종, 크롬친화세포종 또는 갑상선암과 같은 내분비 암; 또는 망막모세포종 또는 포도막 악성흑색종과 같은 눈 암이다.

본 발명의 다른 관점은 건선; 관상 동맥 혈관 성형술 후 재 협착 ; 2형 당뇨병; 신장병; 망막병증 또는 황반변성과 같은 안 질환; 류마티스 관절염; 크론병 또는 궤양성 대장염과 같은 염증성 장질환; 다발성 경화증; 알츠하이머 병; 또는 이식 거부에 대한 치료에 사용하기 위한 피크로포도필린 다형체 B이다.

본 발명의 또 다른 관점은 암과 같은 IGF-1R 의존성 질병에 대한 치료에 사용하는 피크로포도필린 다형체 C이다.

본 발명에 기술된 바와 같은 피크로포도필린 다형체 C가 유용할 수 있는 암의 예로는 비-소세포 폐암 (NSCLC) 또는 소세포 폐암과 같은 폐암; 유방암; 구강, 굴혈관 또는 인두 암과 같은 두경부암; 식도암, 위암, 대장암, 직장암, 위장관 기질 종양, 간암 또는 췌장암과 같은 위장관 암; 전립선암, 방광암 또는 신장암과 같은 비뇨생식기 암; 난소암, 자궁경부암, 자궁내막암 또는 자궁육종과 같은 부인과 암; 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 림프종 또는 다발성 골수종과 같은 혈액암; 유잉 육종, 골육종 또는 연조직 육종과 같은 근골격계 암; 악성 흑색종, 기저 세포암, 편평 세포암 또는 카포시 육종과 같은 피부암; 신경교종, 아교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종 또는 신경모세포종과 같은 뇌 및 신경계 암; 부신피질암, 부신경절종, 크롬친화세포종 또는 갑상선암과 같은 내분비 암; 또는 망막모세포종 또는 포도막 악성흑색종과 같은 눈 암이다.

본 발명의 다른 관점은 건선; 관상 동맥 혈관 성형술 후 재 협착; 2형 당뇨병; 신장병; 망막병증 또는 황반변성과 같은 안 질환; 류마티스 관절염; 크론병 또는 궤양성 대장염과 같은 염증성 장질환; 다발성 경화증; 알츠하이머 병; 또는 이식 거부에 대한 치료에 사용하기 위한 피크로포도필린 다형체 C이다.

본 발명의 어떤 관점은 암, 좀더 구체적으로는 비-소세포 폐암 (NSCLC) 또는 소세포 폐암과 같은 폐암; 유방암; 구강, 굴혈관 또는 인두암과 같은 두경부암; 식도암, 위암, 대장암, 직장암, 위장관 기질 종양, 간암 또는 췌장암과 같은 위장관 암; 전립선암, 방광암 또는 신장암과 같은 비뇨생식기 암; 난소암, 자궁경부암, 자궁내막암 또는 자궁육종과 같은 부인과 암; 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 림프종 또는 다발성 골수종과 같은 혈액암; 유잉 육종, 골육종 또는 연조직 육종과 같은 근골격계 암; 악성 흑색종, 기저 세포암, 편평 세포암 또는 카포시 육종과 같은 피부암; 신경교종, 아교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종 또는 신경모세포종과 같은 뇌 및 신경계 암; 부신피질암, 부신경절종, 크롬친화세포종 또는 갑상선암과 같은 내분비 암; 또는 망막모세포종 또는 포도막 악성흑색종과 같은 눈 암과 같은 IGF-1R 의존성 질병의 치료를 위한 방법이다.

본 발명의 다른 관점은 건선; 관상 동맥 혈관 성형술 후 재 협착; 2형 당뇨병; 신장병; 망막병증 또는 황반변성과 같은 안 질환; 류마티스 관절염; 크론병 또는 궤양성 대장염과 같은 염증성 장질환; 다발성 경화증; 알츠하이머 병; 또는 이식 거부에 대한 치료 방법이고; 여기서 치료학적으로 유효량의 피크로포도필린 다형체 B가 상기 치료가 필요한 환자에게 투여된다.

본 발명의 어떤 관점은 암, 좀더 구체적으로는 비-소세포 폐암 (NSCLC) 또는 소세포 폐암과 같은 폐암; 유방암; 구강, 굴혈관 또는 인두암과 같은 두경부암; 식도암, 위암, 대장암, 직장암, 위장관 기질 종양, 간암 또는 췌장암과 같은 위장관 암; 전립선암, 방광암 또는 신장암과 같은 비뇨생식기 암; 난소암, 자궁경부암, 자궁내막암 또는 자궁육종과 같은 부인과 암; 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 림프종 또는 다발성 골수종과 같은 혈액암; 유잉 육종, 골육종 또는 연조직 육종과 같은 근골격계 암; 악성 흑색종, 기저 세포암, 편평 세포암 또는 카포시 육종과 같은 피부암; 신경교종, 아교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종 또는 신경모세포종과 같은 뇌 및 신경계 암; 부신피질암, 부신경절종, 크롬친화세포종 또는 갑상선암과 같은 내분비 암; 또는 망막모세포종 또는 포도막 악성흑색종과 같은 눈 암과 같은 IGF-1R 의존성 질병의 치료 방법이다.

본 발명에 정의된 바와 같이 피크로포도필린 다형체 C가 유용할 수 있는 비-소 세포 폐암종 (NSCLC)의 예로는 선암종, 편평세포암종 또는 대세포 암종이다.

본 발명의 다른 관점은 건선; 관상 동맥 혈관 성형술 후 재 협착; 2형 당뇨병; 신장병; 망막병증 또는 황반변성과 같은 안 질환; 류마티스 관절염; 크론병 또는 궤양성 대장염과 같은 염증성 장 질환; 다발성 경화증; 알츠하이머 병; 또는 이식 거부의 치료방법이고; 여기서 치료학적으로 유효량의 피크로포도필린 다형체 C가 상기 치료가 필요한 환자에게 투여된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 약학적으로 허용가능한 보조제 (adjuvant), 희석제 및/또는 담체 (carrier)의 혼합물에 피크로포도필린 다형체 B를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 및/또는 담체의 혼합물에 피크로포도필린 다형체 C를 포함하는 약학적 조성물이 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 순차적, 개별적 또는 동시 투여를 위한,

(i) 피크로포도필린 다형체 B; 및

(ⅱ) 항-암 약물;

을 포함하는 분리형 키트가 제공된다.

(i) 피크로포도필린 다형체 C; 및

(ⅱ) 항-암 약물;

을 포함하는 분리형 키트가 제공된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 치료에 사용하기 위한, 본 발명에 기술된 바와 같은 분리형 키트가 제공된다.

본 발명의 다른 관점은 비-소세포 폐암 (NSCLC) 또는 소세포 폐암과 같은 폐암; 유방암; 구강, 굴혈관 또는 인두암과 같은 두경부암; 식도암, 위암, 대장암, 직장암, 위장관 기질 종양, 간암 또는 췌장암과 같은 위장관 암; 전립선암, 방광암 또는 신장암과 같은 비뇨생식기 암; 난소암, 자궁경부암, 자궁내막암 또는 자궁육종과 같은 부인과 암; 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 림프종 또는 다발성 골수종과 같은 혈액암; 유잉 육종, 골육종 또는 연조직 육종과 같은 근골격계 암; 악성 흑색종, 기저 세포암, 편평 세포암 또는 카포시 육종과 같은 피부암; 신경교종, 아교모세포종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종 또는 신경모세포종과 같은 뇌 및 신경계 암; 부신피질암, 부신경절종, 크롬친화세포종 또는 갑상선암과 같은 내분비 암; 또는 망막모세포종 또는 포도막 악성흑색종과 같은 눈 암과 같은 암의 치료용, 본 발명에 기술된 바와 같은, 분리형 키트이다.

본 발명에 기술된 바와 같은 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C는 약학적으로 허용가능한 투여 형태를 포함하는 약학적 조성물의 형태로 경구, 비경구, 정맥, 근육, 피하 또는 주사가능한 투여 경로, 구강, 항문, 질, 경피 비강 또는 안과 (ophtalmic) 경로, 또는 흡입을 통한 제형을 포함 의약 조성물의 형태로 흡입을 통해 투여될 수 있다. 투여 경로 및 치료할 질환 및 환자의 상태에 의존하여, 상기 조성물은 다양한 투여량으로 투여될 수 있다. 본 발명에 기술된 바와 같은, 본 발명의 어떤 관점에 있어서 다형체 B 또는 다형체 C는 상기 약학적 조성물의 총 중량의 1-95중량%의 양으로 제공된다.

본 발명의 관점은 약학적 및 약리학적으로 허용가능한 보조제 및/또는 담체를 혼합한, 본 발명에 기술된 바와 같은 다형체 B 또는 다형체 C를 포함하는 약학적 조성물이다. 바람직한 약학적 조성물에 대해 적절한 상기 약학적 및 약리학적으로 허용가능한 담체는 약학적 조성물의 기술분야에서 당업자에게는 자명할 것이다. 상기 약학적 조성물은 치료된 암 또는 약학적 질병의 타입에 대해 적절한 투여 경로로 대상 또는 환자에게 투여될 수 있다. 비경구 투여에 있어서, 본 발명에 기술된 다형체 B 또는 다형체 C는 본 발명에 기술된 다형체 B 또는 다형체 C를 포함하는 상기 조성물을 주사가능한 단일 투여, 또는 연속 주입형태로, 또는 현탁액으로서 투여될 수 있다.

경구 투여에 있어서, 본 발명에 기술된 다형체 B 또는 다형체 C는 캡슐, 정제, 알약 (pill)과 같은 고체 약학 조성물, 또는 분말로서 투여될 수 있다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 다형체 B 또는 다형체 C의 투여량 (dosage)은 1일당 1-40 ㎎/㎏ 체중의 범위일 수 있다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 다형체 B 또는 다형체 C는, 매일 두 번씩 400 ㎎의 투여량으로 투여된다.

본 발명의 다른 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 다형체 B 또는 다형체 C는 매일 두 번씩 390 ㎎의 투여량으로 투여된다.

본 발명의 또 다른 관점은 본 발명에 기술된 바와 같은 적어도 하나의 항-암 약물 및 피크로포도필린 다형체의 조합이다.

본 발명의 또 다른 관점은 본 발명에 기술된 바와 같은 적어도 하나의 항-암 약물 및 피크로포도필린 다형체 C의 조합이다.

본 발명에 기술된 바와 같은 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C의 조합에 유용한 항-암 약물의 예로는 본 발명에 기술된 세포활성억제제 (cytostatics); 단클론 항체 또는 선택적인 소-분자 억제제 (small-molecule inhibitors)인 표적화 항암제; 호르몬; 항호르몬; 또는 면역 자극제이다.

본 발명에 기술된, 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C의 조합 치료에서 유용한 세포활성억제제의 예로는 멜팔란 (melphalan)과 같은 알킬화제 (alkylating agents); 메토트렉세이트 (methotrexate) 또는 젬시타빈 (gemcitabine)과 같은 대사길항제 (antimetabolites); 탁산 오르빈카 알칼로이드 (taxanes orvinca alkaloids)와 같은 유사분열 억제제 (mitotic inhibitors); 독소루비신 (doxorubicin)과 같은 세포독성 항생제; 에토포시드 (oposide)와 같은 국소이성질화효소 Ⅱ 억제제 (topoisomerase Ⅱ inhibitors); 또는 시스플라틴 (cisplatin) 또는 카보플라틴 (carboplatin)과 같은 다른 세포활성억제제이다.

본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C의 조합 치료에 유용한 단클론 항체의 예로는 표피 성장 인자 수용체 (epidermal growth factor receptor) (EGFR), HER2, 및 트라스토주마 (trastozumab) 또는 베베시주마 (bevacizumab)와 같은 혈관내피 성장인자 (vascular endothelial growth factor)을 타겟으로 하고 있다.

본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C의 조합 치료에서 유용한 선택적 소분자 억제제의 예로는, 이를 표적화하는 표피 성장 인자 수용체, 히스톤 디알킬라아제 (histone deacetylase) (HDAC), Raf, 혈소판 유래 성장 인자 수용체 (platelet-derived growth factor receptors), 혈관내피 성장인자 수용체, 또는 제페티닙 (gefitinib) 및 이매티닙 (imatinib)과 같은, c-키트 (c-Kit)가 있다.

본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C의 조합 치료에서 유용한 호르몬의 예로는 에스트로겐 또는 게스타겐이다.

본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C의 조합 치료에서 유용한 항호르몬의 예로는 항에스트로겐, 항안드로겐 또는 효소 억제제이다.

본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C의 조합 치료에서 유용한 면역자극 제의 예로는 인터페론이다.

제조 방법

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 B의 제조 방법이 제공되며, 이에 의해, 무정형 (amorphous form)의 피크로포도필린이 m-크실렌, p-크실렌, 메시틸렌, 아니졸, 이소부틸 아세테이트, 또는 이의 혼합물로부터 선택된 용매로부터 재결정된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 B의 제조 방법이 제공되며, 이에 의해, 결정형 피크로포도필린이 m-크실렌, p-크실렌, 메시틸렌, 아니졸, 이소부틸 아세테이트, 또는 이의 혼합물로부터 선택된 용매로부터 재결정된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 B의 제조 방법이 제공되며, 이에 의해, 피크로포도필린 일수화물이 m-크실렌, p-크실렌, 메시틸렌, 아니졸, 이소부틸 아세테이트, 또는 o-크실렌, m-크실렌, p-크실렌의 혼합물, 또는 이의 혼합물로부터 선택된 용매로부터 재결정된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 C의 제조 방법이 제공되며, 이에 의해, 무정형의 피크로포도필린이 프로피오니트릴, 메틸에틸케톤, n-부틸 아세테이트, 이소부틸니트릴, n-부틸포미에이트 또는 iso-부틸포미에이트 또는 tert-부틸포미에이트와 같은 부틸포미에이트, 벤조니트릴, 큐멘, 디프로필 카보네이트, 또는 이의 혼합물로부터 선택된 용매로부터 재결정된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 C의 제조방법이 제공되며, 이에 의해, 결정형의 피크로포도필린이 프로피오니트릴, 메틸에틸케톤, n-부틸 아세테이트, 이소부틸니트릴, n-부틸포미에이트 또는 iso-부틸포미에이트 또는 tert-부틸포미에이트와 같은 부틸포미에이트, 벤조니트릴, 큐멘, 디프로필 카보네이트, 또는 이의 혼합물로부터 선택된 용매로부터 재결정된다.

본 발명의 어떤 관점에 있어서, 본 발명에 기술된 바와 같은, 피크로포도필린 다형체 C의 제조방법이 제공되며, 이에 의해, 피크로포도필린 일수화물이 프로피오니트릴, 메틸에틸케톤, n-부틸 아세테이트, 이소부틸니트릴, n-부틸포미에이트 또는 iso-부틸포미에이트 또는 tert-부틸포미에이트와 같은 부틸포미에이트, 벤조니트릴, 큐멘, 디프로필 카보네이트, 또는 이의 혼합물로부터 선택된 용매로부터 재결정된다.

상기 출발 물질인 피크로포도필린 일수화물은 하기 실시 예 1에 기술된 바와 같이 얻어진다.

약어 ( Abbreviations )

g 그램 (gram(s))

DVS 동적 증기 수착 (Dynamic Vapor Sorption)

DSC 시차 주사 열량계 (Differential Scanning Calorimetry)

IR 적외선 (Infrared)

LC 액체 크로마토그래피 (Liquid Chromatography)

LC UV UV 검출기를 갖는 액체 크로마토그래피 (Liquid Chromatography with UV detection)

㎖ 밀리미터 (milliliter)

L 리터 (Liter)

PVDF 불화 폴리비닐리덴 (Polyvinylidene fluoride)

RH 상대 습도 (Relative Humidity)

SDS 소듐 도데실 설페이트 (Sodium Dodecyl Sulfate)

XRPD X-선 분말 회절 (X-Ray Powder Diffraction)

%T % 투과율 (% Transmittance)

TM 상표명 (Trade Mark)

rpm 분당 회전수 (Revolutions Per Minute)

UV UV 자외선 (Ultraviolet)

PhB 인산 버퍼 (Phosphate buffer)

FeSSIF 섭취 후 모의 장 흐름 (Fed state simulated intestinal fluid)

IDR 고유 분해 속도 (Intrinsic Dissolution Rate)

실시 예

제로 백그라운드 석영 단결정 표본 지지체를 사용한 X-선 분말 회절 (XRPD)

X-선 분말 회절 (XRPD) 실험은 Bragg-Brentano 지오매트리 (geometry)에 고정된 X'pert Pro 회절 분석기 (diffractometer) (PANanalytical B.V., Netherlands)로 수행된다. 상기 회절분석기는 Ge(111) 프라이머리 단색분광기 (monochromator) 및 PIX셀 디텍터 (PIXcell detector)로 장착된다. 대표적인 샘플은 제로 백그라운드 석영 다결정 표본 지지체 (Siltronix, France)에 놓인다.

실험은 대기 온도 및 습도에서 Cu K_a1 선 (radiation) (45kV 및 40 mA)을 이용하여 수행된다. 스캔은 10 mm의 길이, 0.0131^o 2θ의 단계 크기 및 217.770 초의 일반적 계산 시간에서 관찰된 자동 다이버전스 (automatic divergence) 및 비산란 슬릿 (antiscatter slits)을 사용하여 2-50^o2θ의 범위의 연속 스캔 모드에서 수행된다. 상기 샘플은 2초의 회전 시간으로 회전된다.

상기 X-선 분말 회절 패턴의 2-쎄타 도 (2-theta degree) 값은 어떤 기계에서 다른 기계까지 미세하게 변화할 수 있다는 것은 기술분야에서의 당업자에게는 이해될 것이다. 몇몇 변형은 또한 배치 (batches) 사이에 샘플 제조 및 변형 때문에 존재될 수 있다.

데이터 수집은 응용 소프트웨어 X'Pert Data Collector 버전 2.2d 및 인스트루먼트 컨트롤 소프트 웨어 (instrument control software) 버전 1.9D로 수행되고, 패턴 분석 및 프로파일 세분화 (profile refinement)는 X'Pert HighScore Plus 버전 2.2.3로 수행된다. 모든 소프트웨어는 PANanalytical B.V., Netherlands사 제품이다.

모세관을 이용한 X-선 분말 회절 (XRPD)

X-선 분말 회절 (XRPD) 실험은 모세관 회전자 구조 (capillary spinner configuration)에 고정된 반경 240.0 mm (PANanalytical, Netherlands)을 갖는 X'Pert Pro 다목적 회절분석기로 수행된다. 상기 회절분석기는 2.122^o2θ의 활성 길이를 갖는 55.3 mm 빔 Cu W/Si 미러 (mirror) 및 X'Celerator 실시간 다중 스트라이프 검출기 (real time multi strip detector)로 장착된다. 대표적인 샘플은 80 mm의 길이, 1.0 mm의 외부 직경 및 0.01 mm의 벽 두께를 갖는 석영 모세관 (Hampton research, U.S.A.)에 배치된다.

실험은 대기 온도 및 습도에서 Cu K_a 선 (45kV 및 40 mA)을 이용하여 수행된다. 스캔은 0.0167^o2θ의 단계 크기 및 151.765 초의 계산 시간을 갖는 2-50^o2θ범위의 연속 스캔 모드에서 수행된다. 상기 샘플은 2초의 회전 시간으로 회전된다. 상기 입사광 (incident beam) 경로는 0.02 래드 오픈닝 (rad opening)을 갖는 솔러 슬릿 (soller slit), 20.00 mm의 너비를 갖는 고정된 마스크 (fixed mask) 및 고정된 산란 방지 (anti-scatter) 및 0.76 mm의 높이를 갖는 다이버전스 슬릿 (divergence slits)을 함유한다. 상기 회절된 빔 경로는 모세관에 대한 고정된 산란 방지 슬릿 및 2.5 mm의 높이를 갖는 투과 제품 (transmission applications) 및 래드 오프닝 (rad opening)을 갖는 솔러 슬릿을 함유한다.

상기 X-선 분말 회절 패턴의 2-쎄타 도 값은 어떤 기계에서 다른 기계까지 미세하게 변화할 수 있다는 것은 기술분야에서의 당업자에게는 이해될 것이다. 몇몇 변형은 또한 배치 (batches) 사이에 샘플 제조 및 변형 때문에 존재할 수 있다.

데이터 수집은 응용 소프트웨어 X'Pert Data Collector 버전 2.2h 및 인스트루먼트 컨트롤 소프트 웨어 (instrument control software) 버전 2.0A 로 수행되고, 패턴 분석은 X'Pert HighScore Plus 버전 2.2c로 수행된다. 모든 소프트웨어는 PANanalytical B.V., Netherlands사 제품이다.

적외선 분광기 (Infrared Spectroscopy ) ( IR )

IR 스펙트라는 Perkin Elmer　 2000 FTIR 분광계 (spectrometer)로 4000 ㎝^- ¹ 에서 시작하여 400 ㎝^-1을 끝으로 기록된다. 상기 해상도는 4 ㎝^-1이다. 상기 IR 샘플은 약 1 ㎎의 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C와 약 300 ㎎의 KBR을 혼합하여 이의 정제를 만들어 준비한다.

실시 예 1

피크로포도필린 일수화물의 제조

17.3 ㎏ (127 moles)의 NaOAc x 3H₂O는 물에서 용해되고, 여과되며, 에탄올에서 10.5 ㎏ (25 moles)의 피크로포도필린의 여과된 용액 (물 95%에, 198 L)에 첨가된다. 상기 반응 혼합물은 적어도 2 시간 동안 70-75 ℃에서 유지된 후, 냉각시킨다. 상기 생산물 피크로포도필은 Nutch 필터를 통해 분리되고, 에탄올 (물에서 약 50%)로 세척되며, 진공하에서 건조된다. 따라서 얻어진 생산물은 물로 조절되는데, 즉, 상기 생성물은 피크로포도필린 일수화물 (8 킬로미터)을 산출하기 위해 적어도 96 시간 동안, 물로 채워진 비이커에 저장된다.

실시 예 2

피크로포도필린 다형체 B의 결정화

실시 예 1에서 얻어진 0.503 g의 피크로포도필린 일수화물은 환류 (reflux)하에서 45.0 ㎖ p-크실렌에 용해된다. 상기 용액은 1 시간 동안 80 ℃에 놓아둔, 가열 플레이트로부터 제거되어, 이후, 추가적인 5시간 동안 실온에 놓아둔다. 상기 결정은 여과하여 0.310 g (수율 64.3%)의 피크로포도필린 다형체 B을 얻기 위해 진공하에서 밤새도록 건조된다.

피크로포도필린 다형체 B는 순차적으로 다음과 같이 대량으로 합성된다: 피크로포도필린 (20 g, 일수화물)은 환류하에서 p-크실렌 (1.9 L)에 용해된다. 상기 용액은 끓는 온도에서 상기 용매 (약 1.1 L)의 증발에 의해 농축된다. 상기 생성물은 증발 동안 결정화되기 시작하고, 얇은 슬러리는 얻어진다. 상기 슬러리는 상기 가열 용기로부터 제거되고 실온까지 천천히 냉각시킨다. 더 많은 결정 석출물 (crystalline precipitate)은 얻어지고, 상기 슬러리는 더 두꺼워진다. 상기 슬러리는 실온에서 밤새도록 평형상태가 되도록 남긴다. 상기 결정은 그 다음 여과되고 상기 여과물은 3일 동안 실온 및 대기압에서 건조된다.

상기 물 함량은 다음과 같은, 상기 방법 AM/General/물 함량에 따라 KF-1 기기에 상기 Karl Fischer 방법을 사용하여 결정된다. 상기 샘플은 600초 동안 150 ℃에서 가열된다. 상기 방출된 가스 (물)은 적정제 (titrant) (히드라날 (hydranal))와 반응된다. 상기 화학 반응의 종료점 (endpoint)에 도달된 경우, 사용된 적정제의 양은 %로 전환된다. Karl-Fischer에 의한 물: 0.2 %.

수율:18.3 g (95.6 %)

피크로포도필린 다형체 B에 대한 XRPD 피크 위치

제로 백그라운드 석영 단결정 표본 지지체에서 측정된 피크로포도필린 다형체 B에 대한 XRPD :

정제된 2θ 값:

5.7 ± 0.2^o2θ

10.0 ± 0.2^o2θ

10.1 ± 0.2^o2θ

11.3 ± 0.2^o2θ

13.9 ± 0.2^o2θ

14.1 ± 0.2^o2θ

모세관을 사용하여 피크로포도필린 다형체 B에 대한 XRPD :

정제된 2θ 값:

5.6 ± 0.2^o 2θ

9.9 ± 0.2^o2θ

10.0 ± 0.2^o2θ

11.2 ± 0.2^o 2θ

13.8 ± 0.2^o2θ

14.0 ± 0.2^o 2θ

실시 예 3

피크로포도필린 다형체 C의 결정화

실시 예 1에서 얻어진 0.502 g의 피크로포도필린 일수화물은 환류하에서 13.0 ㎖ 메틸에틸케톤 (MEK)에 용해되고, 이후에 상기 용액의 온도는 70 ℃까지 감소되고, 30 분 동안 이 온도를 유지한다. 상기 온도는 이후 2 시간 동안 30 ℃까지 10 ℃ 단계로 점진적으로 감소시키고, 이후 추가적인 2 시간 동안 대기 온도에 유지시킨다. 상기 결정은 여과하여 0.230 g (수율 47.8%)의 피크로포도필린 다형체 C를 얻기 위해 공기 중에서 밤새도록 건조된다.

피크로포도필린 다형체 C는 순차적으로 다음과 같이 대량으로 합성된다:

피크로포도필린 (22 g, 일수화물)은 환류하에서 메틸에틸케톤 (760 ㎖)에 용해된다. 상기 용액은 끓는 온도에서 상기 용매 (약 200 ㎖)의 증발에 의해 농축된다. 상기 용액의 온도는 55 ℃로 감소되고, 30분 동안 상기 온도로 유지시킨다. 상기 생성물은 결정화를 시작한다. 이후 상기 온도는 40 ℃까지 감소시킨다. 두꺼운 슬러리는 얻어지고, 이것은 조작하기 어렵다. 상기 온도는 50 ℃까지 증가되고, 1시간 동안 상기 온도에서 유지시킨다. 상기 슬러리는 두께가 조금 줄어든다. 상기 온도는 그 다음 천천히 실온까지 감소시키고, 밤새도록 평형상태가 되도록 남긴다. 그 다음 부가적인 메틸에틸케톤은 감소된 압력에서 증발되고, 상기 슬러리는 4 시간동안 평형상태로 놓아둔다.

상기 결정은 최종적으로 여과되고, 상기 여과물은 2 시간동안 실온 및 대기압에서 건조된다. 상기 물 함량은 전술한 Karl Fischer 방법을 사용하여 결정된다. Karl-Fischer에 의한 물: 0.1 %.

수율: 16.4 g (77 %)

피크로포도필린 다형체 C에 대한 XRPD 피크 위치

제로 백그라운드 석영 단결정 표본 지지체에서 측정된 피크로포도필린 다형체 C에 대한 XRPD:

정제된 2θ 값:

5.5 ± 0.2^o2θ

7.0 ± 0.2^o2θ

8.3 ± 0.2^o2θ

11.0 ± 0.2^o2θ

11.6 ± 0.2^o2θ

11.8 ± 0.2^o2θ

모세관을 사용하여 피크로포도필린 다형체 C에 대한 XRPD :

정제된 2θ 값:

5.4 ± 0.2^o2θ

6.9 ± 0.2^o 2θ

8.2 ± 0.2^o2θ

9.7 ± 0.2^o2θ

10.0 ± 0.2^o2θ

10.9 ± 0.2^o2θ

11.5 ± 0.2^o2θ

11.7 ± 0.2^o2θ

실시 예 4

안정성 연구

물에서 교반된 다형체 B

대략 27 ㎎ 다형체 B 및 2 ㎖ 물은 24 시간 동안 회전된다. 상기 슬러리는 원심분리되고, 상기 상층액은 제거된다. 상기 고체는 밤새동안 진공하에서 건조되고, 이후에 상기 샘플은 대기 조건에서 저장된다.

XRPD 분석은 24시간 동안 물에서 교반된 다형체 B가 주로 피크로포도필린 일수화물 및 약간의 피크로포도필린 다형체 B의 혼합물로 전환된다는 것을 나타낸다.

물에서 교반된 다형체 C

대략 60 ㎎ 다형체 C의 슬러리 및 2 ㎖ 정제된 물은 24 시간동안 회전된다. 상기 슬러리는 원심분리되고, 상기 상층액은 제거된다. 상기 고체는 밤새도록 진공하에서 건조되고 이후에, 상기 샘플은 대기 조건에서 저장된다.

5분동안 초음파처리된 다형체 C

15.0 ㎖ 정제수에서 105 ㎎의 다형체 C는 얼음에서 냉각되고, 이득 2 (gain 2)로 펄스 초음파처리하는, Sonicator XL Misonix을 사용하여 5분 동안 초음파 처리된다. 상기 슬러리는 10분 동안 3000 rpm으로 원심분리되고, 상기 상층액은 제거된다. 상기 고체는 냉동 (냉동기에서)되고, 밤새도록 냉동-건조된다. 상기 샘플은 상기 XRPD 분석 전에 2 시간동안 대기 조건에서 유지된다.

5분동안 모르타르된 다형체 C

대략 50 ㎎ 다형체 C는 마노 유발기 (agate mortar)에서 5분 동안 모르타르된다 (mortared).

XRPD에 의해 나타낸 바와 같이, 피크로포도필린 다형체 C가 (a) 물에서 분산되고 24 시간동안 회전, (b) 5분 동안 초음파처리, 또는 (c) 5분 동안 모르타르된 경우 발생된 상 변화는 없다.

대기 온도에서 다형체 B 및 C로 슬러리 실험

대략 50㎎의 다형체 C는 5.0 ㎖ 아세톤, 에틸아세테이트 및 메시틸렌에서 각각 대기 조건로 밤새도록 교반된다. 상기 고체는 여과되고, 상기 포화된 피크로포도필린 용액은 이하 슬러리 실험에 사용된다.

아세톤에서 교반된 다형체 B 및 C의 혼합물

15.3 ㎎ 다형체 B 및 15.0 ㎎ 다형체 C의 슬러리는 대기 조건에서 5일 동안 피크로포도필린 (상기 참조)으로 포화된 아세톤 3.0 ㎖에서 교반된다. 상기 고체는 유리 필터를 사용하여 여과되고, 2 시간동안 대기 조건에서 저장된다.

에틸 아세테이트에서 교반된 다형체 B 및 C의 혼합물

15.2 ㎎ 다형체 B 및 15.1 ㎎ 다형체 C의 슬러리는 대기 조건에서 5일 동안 피크로포도필린 (상기 참조)으로 포화된 에틸 아세테이트 3.0 ㎖에서 교반된다. 상기 고체는 유리 필터를 사용하여 여과되고, 30 분동안 상기 유리 필터에 남겨둔다.

메시틸렌에서 교반된 다형체 B 및 C의 혼합물

16.0 ㎎ 다형체 B 및 15.5 ㎎ 다형체 C의 슬러리는 대기 조건에서 5일 동안 피크로포도필린 (상기 참조)으로 포화된 메시틸렌 3.0 ㎖에서 교반된다. 상기 고체는 유리 필터를 사용하여 여과되고, 30 분동안 상기 유리 필터에 남겨둔다.

70 ℃ 및 120 ℃에서 다형체 B 및 C로 슬러리 실험

70℃로 메시틸렌에서 교반된 다형체 B 및 C의 혼합물

대략 40 ㎎의 다형체 C는 70 ℃로 1 시간동안 4.0 ㎖ 메시틸렌에서 교반된다. 상기 고체는 여과되고 3.0 ㎖의 포화된 피크로포도필린 용액은 70 ℃에서 15.3 ㎎ 다형체 B 및 15.0 ㎎ 다형체 C에 첨가된다. 상기 슬러리는 천천히 밤새도록 교반된다. 상기 슬러리는 상기 오일 용기로부터 제거되고, 즉시 유리 필터를 통해 여과된다. 상기 고체는 30 분 동안 유리 필터에 남겨둔다.

120 ℃로 메시틸렌에서 교반된 다형체 B 및 C의 혼합물

대략 40 ㎎의 다형체 C는 120 ℃로 1 시간동안 4.0 ㎖ 메시틸렌에서 교반된다. 상기 고체는 여과되고 3.0 ㎖의 포화된 피크로포도필린 용액은 120 ℃에서 15.2 ㎎ 다형체 B 및 15.6 ㎎ 다형체 C에 첨가된다. 상기 슬러리는 4 시간동안 천천히 교반된다. 상기 슬러리는 상기 오일 용기로부터 제거되고, 즉시 유리 필터를 통해 여과된다. 상기 고체는 30 분 동안 유리 필터에 남겨둔다.

아세톤, 에틸 아세테이트 및 메시틸렌 각각에서 교반된 다형체 B 및 다형체 C의 혼합물로 대기 온도에서의 슬러리 실험은 다형체 C, 즉, 상기 특정한 조건하에서 다형체 B가 다형체 C로 전환된 것을 제공한다.

70 ℃ 및 120 ℃로 메시틸렌에서 다형체 B 및 다형체 C의 혼합물로의 슬러리 실험은 다형체 C, 즉, 상기 특정 조건하에서 다형체 B가 다형체 C로 전환된 것을 제공한다.

실시 예 5

안정성 연구

상기 용해도는 LC-UV 크로마토그래피의 사용으로 3회 결정된다. 초과된 물질 (substance)의 양 (즉, 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C)은 바이알에서 측량되고, 물에서 0.5 ㎖의 1% SDS는 첨가된다. 상기 물질은 24 시간동안 대기 온도로 상기 특정 매체에서 회전되고, 그 후, 친수성 PVDF (Millipore Corp.) 0.22 ㎛ 필터를 사용하여 상기 상층액을 여과한다. 상기 샘플은 그 다음 이동상 A 및 B (하기 참조)의 1:1 혼합물로 희석되고, 288 nm에서 UV 검출로 Xterra™ MS C₁₈, 50 x 2.1 mm 컬럼을 사용하여 분석된다. 상기 이동상은 5:95:0.1(A) 및 99:1:0.1(B)의 아세토니트릴, 물 및 트리플루오로아세트산로 이루어진다. 상기 구배 프로파일 (gradient profile)은 20%에서 100%까지 이동상 B의 선형 증가를 갖는 0-3분이고, 100% B를 갖는 2분이 수반된다. 상기 용해도는 1:1 이동상 A 및 B의 혼합물로 다른 농도로 용해 및 희석된, 상기 물질의 양을 정확하게 측량한 검정 곡선 (calibration curve)으로 계산된다.

용해도 결정은 물의 1% 소듐 도데실 설페이트 (SDS)에서 수행된다.

24 시간 회전 후 물의 1% SDS에서의 상기 용해도는 피크로포도필린 다형체 B에 대해 0.7 ㎎/㎖이다.

24 시간 회전 후 물의 1% SDS에서의 상기 용해도는 피크로포도필린 다형체 C에 대해 0.4 ㎎/㎖이다.

실시 예 6

동적 증기 수착 (DVS)

상기 샘플의 흡습성은 DVS-1 (Surface Measurement Ltd., UK)을 사용하여 Dynamic Vapor Sorption Gravimetry (DVS)에 의해 연구된다.

대략 10 ㎎의 물질 (즉, 피크로포도필린 다형체 B 또는 피크로포도필린 다형체 C)은 유리컵에서 측량된다. 상기 상대 중량은 상기 샘플에 대한 타겟 상대 습도 (RH)가 0%에서 90%까지 단계적으로 증가된 경우, 20 초 간격에서 기록되고, 그 다음 유사하게 단계 당 10% RH로, 0% RH까지 감소된다. 각 샘플은 세 개의 연속적인 완전 사이클 (cycles)로 수행된다. RH의 다음 수준까지 진행된 조건은 24시간의 스텝 당 최대 총 시간으로, 15분 이내에 0.001% 이하의 중량 증가이다. 상기 온도는 25 ℃에서 유지된다.

상기 DVS 실험은 0 내지 99% RH까지, 피크로포도필린 다형체 B 및 피크로포도필린 다형체 C 각각에 대해 0.2% 질량 증가를 결과한다.

실시 예 7

열무게 분석법 (Thermogravimetric analysis) (TGA)

피크로포도필린 다형체 B 및 피크로포도필린 다형체 C은 이하 기술된 바와 같이 열무게 분석법을 사용하여 분석된다.

열무게 분석법 (TGA)은 Seiko TG/DTA 6200 및 샘플의 ca 10 내지 25 ㎎을 갖는 입구 90 ㎕ Pt-pans 및 질소 흐름 200 ㎖/min에서 수행된다. 상기 온도 프로그램은 가열 속도 10 ℃/min로 대기 (20 ℃) 내지 400 ℃까지이다. 대조구는 제외하고 상기 TG 데이터는 샘플 크기에 대해 표준화되고, Muse Standard Analysis 소프트웨어, 버전 6.1 U (Seiko, Japan)을 사용하여 분석된다.

대기 온도에서 150 ℃까지의 피크로포도필린 다형체 B 질량 손실은 0.0 ± 0.1%로 확인된다.

대기 온도에서 150 ℃까지의 피크로포도필린 다형체 C 질량 손실은 0.0 ± 0.1%로 확인된다.

상기 TG 분석은 수화물 또는 용매 형성이 발생하지 않는 것으로 나타난다.

실시 예 8

고체 상태 안정성 연구 ( Solid state stability study )

다형체 B 및 다형체 C 각각의 3 개월 고체 상태 안정성 연구는 수행된다. 분석은 X-선 분말 회절 (XRPD) 및 열무게분석 (TGA)를 사용하여 수행된다.

40 ℃/75% RH로 3개월 동안 개방 컨테이너 (containers)에서 저장 한 후 및 25 ℃/60% RH로 3개월 저장한 후 각각, 0 일 이후 (즉, 연구의 개시 시간) 다형체 B 또는 다형체 C에서도 외관에 대한 변화는 없었다.

X-선 분말 회절 ( XRPD )

실험은 대기 온도 및 습도에서 Cu K_a1 선 (radiation) (45kV 및 40 mA)을 이용하여 수행된다. 스캔은 10 mm의 길이, 0.013^o 2θ의 단계 크기 및 97.920 초의 일반적 계산 시간에서 관찰된 자동 다이버전스 및 비산란 슬릿을 사용하여 2-50^o2θ의 범위의 연속 스캔 모드에서 수행된다.

데이터 수집은 응용 소프트웨어 X'Pert Data Collector 버전 2.2d 및 인스트루먼트 컨트롤 소프트 웨어 (instrument control software) 버전 1.9D로 수행되고, 패턴 분석은 X'Pert Data Viewer 버전 1.2c로 수행된다. 모든 소프트웨어는 PANanalytical B.V., Netherlands사 제품이다.

다형체 B의 40 ℃/75% RH로 3개월 동안 저장 후 및 25 ℃/60%RH로 3개월 동안 저장 후의 상기 개시 분석의 X-선 분말 회절 (XRPD) 패턴을 도 7에 도시하였다.

40 ℃/75% RH로 3개월 동안 저장 후 및 25 ℃/60%RH로 3개월 동안 저장 후의 상기 개시 분석의 X-선 분말 회절 (XRPD)은 다형체 C를 도 8에 도시하였다.

열무게 분석 ( TGA )

열무게 분석법 (TGA)은 Seiko TG/DTA 6200 및 샘플의 ca 10 내지 20 ㎎을 갖는 입구 90 ㎕ Pt-pans 및 질소 흐름 200 ㎖/min에서 수행된다. 상기 온도 프로그램은 가열 속도 10 ℃/min로 대기 (20 ℃) 내지 400 ℃까지이다. 대조구는 제외하고 상기 TG 데이터는 샘플 크기에 대해 표준화되고, Muse Standard Analysis 소프트웨어, 버전 6.1 U (Seiko, Japan)을 사용하여 분석된다.

피크로포도필린 다형체 B에 대하여, 대기 온도에서 150 ℃까지의 질량 손실은 40 ℃/75% RH에서 3 개월 저장 후 0.0 ± 0.1%임을 알 수 있다.

피크로포도필린 다형체 C에 대하여, 대기 온도에서 150 ℃까지의 질량 손실은 40 ℃/75% RH에서 3 개월 저장 후 0.0 ± 0.1%임을 알 수 있다.

다형체 B 뿐만 아니라 다형체 C에 대한 수행된 고체 상태 분석은 25 ℃/60% RH 및 40 ℃/75% RH에서 각각 3 개월 저장 후 고체-상태 불안정성의 어떤 징후도 나타나지 않았다.

실시 예 9

분해 연구

버퍼 pH 6.5 및 섭취 후 (fed state) 모의 장 흐름에서 다형체 B 및 다형체 C의 분해 속도 및 겉보기 용해도 (Apparent Solubility)는 검토된다. 상기 용어 "겉보기 용해도"는 겉보기 평형 (과포화)에서 다형체 B 또는 다형체 C의 농도에 관한 것이다.

방법

인산 버퍼 pH 6.5 (PhB 6.5)는 Galia 및 공동작업자 (Galia, E., et al . Evaluation of various dissolution media for predicting in vivo performance of class I and Ⅱ drugs. Pharm Res 15, pp. 698-705 (1998))에 의한 프로토콜에 따라 제조된다. 간략하게는, 1000 ㎖의 150 mM Na₂HPO₄ 버퍼 pH 6.5는 부피 플라스크 (volumetric flask)내의 3.95g Na₂HPO₄xH₂O, 6.19 g NaCl 및 0.42 g NaOH를 정제수를 첨가하여 용해시켜 제조된다. 상기 pH는 0.5 M NaOH로 적정하여 6.5까지 조정되고, 상기 부피는 정제수로 1000 ㎖로 조정된다. 상기 버퍼는 멸균 여과되고 그 이후에 냉장고에 저장된다. 섭취 후 모의 장 흐름 (FeSSIF pH 6.5)은 100 ㎖ PhB에 1.12 g의 Na-타우로콜산염/레시틴 (taurocholate/lecithin) 분말 (ePhares, Switzerland)을 용해시켜 상기 실험 당일에 신선하게 제조된다 ((Galia, E., et al . Evaluation of various dissolution media for predicting in vivo performance of class I and Ⅱ drugs. Pharm Res 15, pp. 698-705 (1998)). 상기 메디아 (media)는 15 mM 타우로콜산염 및 3.75 mM 레시틴의 혼합된 마이셀 시스템 (mixed micelle system)을 함유하는 pH 6.5의 깨끗한 용액을 결과하도록 교반되고 37±1 ℃로 미리 가열된다.

분해 프로파일링-분말 실험

용해 속도 및 겉보기 용해도는 미리 가열된 (37℃) 분해 매체가 첨가된 바이알에서 측량된 0.3-1.3 ㎎ 화합물로부터 μDISS Profiler™ (pION INC, MA, USA)로 측정된다. 각 실험에서, 분해 속도 및 용해도는 100 rpm의 교반 속도를 사용하여 37±1 ℃로 15 ㎖ 용매에서 조사된다. 각 UV 프로브는 상기 실험 이전에 자체의 표준 곡선으로 측정된다. 상기 얻어진 결과는 상기 μDISS 장비에 수반된 소프트웨어로 분석된다.

이론적 배경을 포함하는, 분말 분해 실험의 상세한 절차는, Avdeef, A., Tsinman, K., Tsinman, O., Sun, N. & Voloboy, D. Miniaturization of powder dissolution measurement and estimation of particle size. Chem Biodivers 6, 1796-1811 (2009); Fagerberg, J.H., et al . Dissolution Rate and Apparent solubility of Poorly Soluble Drugs in Biorelevant Dissolution Media. Mol Pharm 7, 1419-1430, (2010); 및 Tsinman, K., Avdeef, A., Tsinman, O. & Voloboy, D. Powder dissolution method for estimating rotating disk intrinsic dissolution rates of low solubility drugs. Pharm Res 26, 2093-2100 (2009)에서 확인할 수 있다.

PhB 6.5 및 FeSSIF에서 다형체 B 및 다형체 C 각각의 고유 분해 속도 (IDR) 및 겉보기 용해도는 표 1 및 표 2에 나타내었다.

얻어진 데이터는 분석을 반복 및 2시간 초과로부터 29시간까지의 시간 프레임으로 연장한 경우에도 또한 일치하는 것을 보여주고 있다.

PhB 6.5에서 피크로포도필린 다형체 B 및 피크로포도필린 다형체 C에 대한 결과

	겉보기 용해도 분석 1 [㎍/㎖]	IDR 분석 1 [㎍/min/㎠]	겉보기 용해도 분석 2 [㎍/㎖]	IDR 분석 2 [㎍/min/㎠]	겉보기 용해도 분석 1+2 [㎍/㎖]	IDR 분석 1+2 [㎍/min/㎠]
B	11.72±0.22	1.12±0.02	n.d.	n.d.	n.d.	n.d.
C	5.88±0.09	0.57±0.03	5.81±0.38	0.56±0.05	5.85±0.25	0.57±0.03

분석 시간: 분석 1: 다형체 B: 19 시간; 다형체 C: 1.7 시간; 분석 2: 피크로포도필린 다형체 C: 29 시간 (기록된 값은 상기 화합물 오버 타임 (over time)이 프로브에 달라붙고, 리딩 (readings)에 심각한 영향을 미치지만, 상기 값에 영향을 준다고 고려되지 않기 때문에, 50 분 후에 얻어진다). 값은 평균 ± 표준 편차 (mean ± standard deviation)으로 기록된다. 분석 1 및 2는 각각 3회 수행된다. n.d.= 결정되지 않음.

FeSSIF pH 6.5에서 피크로포도필린 다형체 B 및 피크로포도필린 다형체 C에 대한 결과.

	겉보기 용해도 분석 1 [㎍/㎖]	IDR 분석 1 [㎍/min/㎠]	겉보기 용해도 분석 2 [㎍/㎖]	IDR 분석 2 [㎍/min/㎠]	겉보기 용해도 분석 1+2 [㎍/㎖]	IDR 분석 1+2 [㎍/min/㎠]
B	25.51±0.51	2.45±0.05	n.d.	n.d.	n.d.	n.d.
C	12.94±0.17	1.24±0.02	12.21±0.07	1.29±0.09	12.58±0.80	1.23±0.11

분석 시간: 분석 1: 피크로포도필린 다형체 B: 16 시간; 피크로포도필린 다형체 C: 1.3 시간. 분석 2: 피크로포도필린 다형체 C: 25 시간. 분석 1 및 2는 각각 3회 수행된다. n.d.= 결정되지 않음.

천연의 이용가능한 장내 지질의 효과는 FeSSIF 분해 프로파일에 의해 조사된다. 상기 다형체는 PhB 6.5과 비교하여 FeSSIF에서 피크로포도필린 다형체 B: 2.2-배, 및 피크로포도필린 다형체 C: 2.2-배 더 높은 용해도로 증가한다는 것을 나타낸다.

Claims

5.7 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 1에 있어서,
5.7 및 10.0 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 1 또는 2에 있어서,
5.7, 10.0, 10.1, 11.3, 13.9 및 14.1 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
5.6 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 4에 있어서,
5.6 및 9.9 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 4 또는 5에 있어서,
5.6, 9.9, 10.0, 11.2, 13.8 및 14.0 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 1-6 중 어느 한 항에 있어서,
도 1에 도시된 바와 같은 XRPD 스펙트럼을 필수적으로 나타내는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 1-6 중 어느 한 항에 있어서,
도 2에 도시된 바와 같은 XRPD 스펙트럼을 필수적으로 나타내는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 1-8 중 어느 한 항에 있어서,
상기 피크로포도필린 다형체 B는 1736.9 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 더욱 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 9에 있어서,
1032.3; 1129.0; 1243.4; 1273.3; 1465.7; 1482.5; 1590.0; 1736.9; 2841.5; 2936.0; 2970.9 및 3425.5 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 더욱 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 1-10 중 어느 한 항에 있어서,
도 5에 도시된 바와 같은 IR 스펙트럼을 필수적으로 나타내는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
5.5 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 12에 있어서,
5.5 및 7.0 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 12 또는 13에 있어서,
5.5, 7.0, 8.3, 11.0, 11.6 및 11.8 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
5.4 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 15에 있어서,
5.4 및 6.9 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 15 또는 16에 있어서,
5.4, 6.9, 8.2, 9.7, 10.0, 10.9, 11.5 및 11.7 ± 0.2^o2θ에서 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 제공하는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 12-17 중 어느 한 항에 있어서,
도 3에 도시된 바와 같은 XRPD 스펙트럼을 필수적으로 나타내는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 12-17 중 어느 한 항에 있어서,
도 4에 도시된 바와 같은 XRPD 스펙트럼을 필수적으로 나타내는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 12-17 중 어느 한 항에 있어서,
상기 피크로포도필린 다형체 C는 1773.8 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 더욱 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 12-17 중 어느 한 항에 있어서,
상기 피크로포도필린 다형체 C는 1031.2; 1129.0; 1184.5; 1233.6; 1425.8; 1462.5; 1479.0; 1592.8; 1773.8; 2842.2; 2943.2; 2993.8; 및 3436.0 ㎝^-1에서 피크를 나타내는 IR 스펙트럼을 더욱 갖는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 12-21 중 어느 한 항에 있어서,
상기 피크로포도필린 다형체 C는 도 6에 도시된 바와 같은 IR 스펙트럼을 필수적으로 더욱 나타내는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
청구항 1-11 중 어느 한 항에 있어서,
상기 피크로포도필린 다형체 B는 피크로포도필린의 다른 다형체 및/또는 다른 결정 및 비-결정 형태가 실질적으로 없는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 B.
청구항 12-22 중 어느 한 항에 있어서,
상기 피크로포도필린 다형체 C는 피크로포도필린의 다른 다형체 및/또는 다른 결정 및 비-결정 형태가 실질적으로 없는 것을 특징으로 하는 피크로포도필린 다형체 C.
치료에 사용하기 위한 청구항 1-11 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 B.
치료에 사용하기 위한 청구항 12-22 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 C.
암 치료용 약제의 제조를 위한 청구항 1-11 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 B의 용도.
암 치료용 약제의 제조를 위한 청구항 12-22 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 C의 용도.
청구항 27 또는 28에 있어서,
상기 암은 폐암; 유방암; 두경부암; 위장암; 비뇨생식기암; 부인과 암; 혈액암; 근골격계 암; 피부암; 뇌 및 신경계 암; 내분비 암; 또는 눈 암 중 하나 인 것을 특징으로 하는 용도.
청구항 29에 있어서,
상기 암은 비-소 세포 폐암종 (NSCLC)인 것을 특징으로 하는 용도.
청구항 30에 있어서,
상기 비-소 세포 폐암종 (NSCLC)은 선암종, 편평세포암종 또는 폐 대세포 악성종양 (large-cell lung carcinoma)인 것을 특징으로 하는 용도.
청구항 29에 있어서,
상기 암은 소세포 폐암; 구강암; 굴혈관 암; 인두암; 식도암; 위암; 대장암; 직장암; 위장관 기질 종양; 간암; 췌장암; 전립선암; 방광암; 신장암; 난소암; 자궁경부암; 자궁내막 암; 자궁육종; 골수성 백혈병; 림프구성 백혈병; 림프종; 다발성 골수종; 유잉 육종; 골육종; 연조직 육종; 악성 흑색종; 기저 세포암; 편평 세포암; 카포시 육종; 신경교종; 아교모세포종; 성상세포종; 수모세포종; 두개인두종; 신경모세포종; 부신피질암; 부신경절종; 크롬친화세포종; 또는 갑상선암; 망막모세포종; 또는 포도막 악성흑색종으로부터 선택된 하나인 것을 특징으로 하는 용도.
청구항 1-11 중 어느 한 항에 있어서,
건선; 관상동맥혈관 성형술 후 재협착; 2형 당뇨병; 신장병; 안 질환; 류마티스 관절염; 염증성 장 질환; 다발성 경화증; 알츠하이머 병; 또는 이식 거부의 치료용 약제의 제조에 사용되는 것을 특징으로 하는 용도.
청구항 12-22 중 어느 한 항에 있어서,
건선; 관상동맥혈관 성형술 후 재협착; 2형 당뇨병; 신장병; 안 질환; 류마티스 관절염; 염증성 장 질환; 다발성 경화증; 알츠하이머 병; 또는 이식 거부의 치료용 약제의 제조에 사용되는 것을 특징으로 하는 용도.
청구항 1-11 중 어느 한 항에 따른 치료학적 유효량의 피크로포도필린 다형체 B을 치료가 필요한 환자에게 투여하는 암의 치료방법.
청구항 12-22 중 어느 한 항에 따른 치료학적 유효량의 피크로포도필린 다형체 C를 치료가 필요한 환자에게 투여하는 암의 치료방법.
청구항 35 또는 36에 있어서,
상기 암은 폐암; 유방암; 두경부암; 위장암; 위장암; 부인과 암; 혈액암; 근골격계 암; 피부암; 뇌 및 신경계 암; 내분비 암; 또는 눈 암 중 하나인 것을 특징으로 하는 암의 치료방법.
청구항 37에 있어서,
상기 암은 비-소 세포 폐암종 (NSCLC)인 것을 특징으로 하는 암의 치료방법.
청구항 38에 있어서,
상기 비-소 세포 폐암종 (NSCLC)은 선암종, 편평세포암종 또는 폐 대세포암종인 것을 특징으로 하는 암의 치료방법.
청구항 37에 있어서,
상기 암은 소세포 폐암; 구강암; 굴혈관 암; 인두 암; 식도암; 위암; 대장암; 직장암; 위장관 기질 종양; 간암; 췌장암; 전립선암; 방광암; 신장암; 난소암; 자궁경부암; 자궁내막 암; 자궁육종; 골수성 백혈병; 림프구성 백혈병; 림프종; 다발성 골수종; 유잉 육종; 골육종; 연조직 육종; 악성 흑색종; 기저 세포암; 편평 세포암; 카포시 육종; 신경교종; 아교모세포종; 성상세포종; 수모세포종; 두개인두종; 신경모세포종; 부신피질암; 부신경절종; 크롬친화세포종; 또는 갑상선암; 망막모세포종; 또는 포도막 악성흑색종으로부터 선택된 하나인 것을 특징으로 하는 암의 치료방법.
약학적 및 약리학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 및/또는 담체와의 혼합물로서, 청구항 1-11 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 B를 포함하는 약학 조성물.
약학적 및 약리학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 및/또는 담체와의 혼합물로서, 청구항 12-22 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 C를 포함하는 약학 조성물.
순차적, 개별적 또는 동시 투여를 위한,
(i) 청구항 1-11 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 B; 및
(ⅱ) 항-암 화합물;
을 포함하는 분리형 키트.
순차적, 개별적 또는 동시 투여를 위한,
(i) 청구항 12-22 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 C; 및
(ⅱ) 항-암 화합물;
을 포함하는 분리형 키트.
피크로포도필린이 m-크실렌, p-크실렌, 메시틸렌, o-크실렌 아니졸, 이소부틸 아세테이트, 및 이의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로부터 재결정되는 청구항 1-11 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 B의 제조방법.
피크로포도필린이 프로피오니트릴, 메틸에틸케톤, n-부틸 아세테이트, 이소부틸니트릴, n-부틸포미에이트 또는 iso-부틸포미에이트 또는 tert-부틸포미에이트와 같은 부틸포미에이트, 벤조니트릴, 큐멘, 디프로필 카보네이트, 및 이의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 용매로부터 재결정되는 청구항 12-22 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 C의 제조방법.
a) 유기 용매하의 피크로포도필린의 포화된 용액에서 피크로포도필린 다형체 B와 피크로포도필린 다형체 C를 혼합시키는 단계;
b) 침전물을 얻기 위하여 단계 a)에서 얻어진 상기 혼합물을 교반시키는 단계; 및
c) 상기 얻어진 침전물을 여과시키는 단계;
를 포함하는 청구항 1-11 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 B를 청구항 12-22 중 어느 한 항에 따른 피크로포도필린 다형체 C로 전환시키는 방법.