KR20130140812A - 1,2-프로판디올을 대사하는 미생물을 위한 간접 기질 - Google Patents

1,2-프로판디올을 대사하는 미생물을 위한 간접 기질 Download PDF

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KR20130140812A
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Abstract

요약
본 발명은 일반적으로 특정 프로바이오틱스(probiotics)의 증진된 활성도에 관한 것이다. 증가된 효능은 프로바이오틱스에 특이적인 에너지원을 간접적으로 공급하는 특정 기질 성분을 이용함으로써 성취된다. 기질 성분은 1,2-프로판디올 산물을 자극하도록 특이적으로 설계된다. 기질은 람노오스, 푸코오스, 높은 퍼세트의 람노오스를 가진 펙틴, 및 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단으로 예시화된다.

Description

1,2-프로판디올을 대사하는 미생물을 위한 간접 기질{INDIRECT SUBSTRATES FOR MICROORGANISMS METABOLIZING 1,2-PROPANEDIOL}
본 발명의 분야
본 발명은 일반적으로 포유류내 특정 프로바이오틱스(probiotics)의 활성도를 증진하는 것에 관한 것이다. 추가로, 본 발명은 기질 성분 및 특정 프로바이오틱스를 포함하는 제조물에 관한 것이며, 기질 성분은 상기 프로바이오틱스의 효능을 증진하도록 특이적으로 설계된다. 기질 성분은 1,2-프로판디올을 발생시키기 위해 선택되며, 여기서 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 균주를 에너지원으로서 및/또는 외부 전자 수용체(electron acceptor)로서 독자적으로 가장 활용할 수 있다.
본 발명의 배경
국제 연합의 식량 농업 기구 (The Food and Agricultural Organization of the United Nations)는 프로바이오틱스를 "충분한 양으로 투여될 때 숙주 상에 건강 혜택을 부여하는 살아있는 미생물"로 정의한다. 요즘에는, 다수의 상이한 박테리아가 프로바이오틱스, 예를 들어, 락토바실러스(Lactobacillus)와 비피더스균(Bifidobacterium)의 균주와 같은 유산균으로서 이용된다.
프로바이오틱스의 유효성은 균주-특이적이고, 그리고 각각의 균주는 상이한 메커니즘을 통하여 숙주의 건강상태(host health)에 기여할 수 있다. 상이한 프로바이오틱스는 병원체의 증식을 예방하거나 저해할 수 있고, 병원체에 의한 독성 인자의 생성을 억제할 수 있고, 전-염증성(pro-inflammatory) 또는 항-염증성 방식으로 면역 반응을 조절할 수 있고 그리고 다수의 기타 방식으로 숙주에 영향을 줄 수 있다.
프리바이오틱스(prebiotics)는 "숙주의 건강을 향상시킬 수 있는, 결장 내 하나 또는 제한된 수의 박테리아의 성장 및/또는 활성도를 선택적으로 자극함으로써 숙주에 유익하게 영향을 끼치는 비-소화 식품 성분"으로 정의된다. 프리바이오틱스에 대한 표적은 주로 비피더스균(bifidobacteria) 및 락토바실러스(lactobacilli)이다; 하지만, 프리바이오틱스는 종종 선택적이지 않으며, 따라서 유익한 속(genera) 또는 프로바이오틱스 균주 단독의 자극은 달성하는 데에 있어 어려울 수 있다. 특정 프로바이오틱스에 대해 선택적인 프리바이오틱을 찾는 것이 어렵기 때문에, 본 발명의 발명자는 특이적 프로바이오틱스에 에너지 수득률을 증가시킬 에너지원 및/또는 외부 전자 수용체를 간접적으로 공급할 특이적 기질 성분 (specific substrate component, SSC)을 어떻게 이용하는 지에 대하여 알아내었다.
락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)는 헤테로발효 유산균이며 인간 및 기타 동물의 위장관 내에서 자주 발견된다. 락토바실러스 루테리(L. reuteri)는 인간 위장관의 원산 유기체로 간주되고 예를 들어 위체(gastric corpus), 위방(gastric antrum), 십이지장, 및 회장의 점막 상에 존재한다. 예를 들어, 미국 특허 제5,439,678호, 제5,458,875호, 제5,534,253호, 제5,837,238호, 및 제5,849,289호를 참고한다. 글리세롤의 존재에서 혐기 조건(anaerobic condition) 하에 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 세포가 성장할 때, 상기 세포는 루테린(reuterin) (β-하이드록시 프로피온알데하이드)으로 공지된 항미생물 물질을 생성한다. 루테린을 생성하는 능력은 프로판디올 활용 (pdu) 오페론에 기인한다. pdu 오페론은 1,2-프로판디올 (PD)에서도 또한 성장할 수 있는 대사 장치(metabolic machinery)이다. 인간에서 대량 서식하고 박테리아의 전체적인 잠재성을 이용할 때 이 pdu 오페론은 락토바실러스 루테리(L. reuteri)에 대하여 매우 중요한 특징이 된다. 이 장치는 기타 락토바실러스(lactobacilli) 중에서 드물며 따라서 pdu-장치가 없는 락토바실러스는 1,2-PD에서 성장할 수 없고 어느 것도 전자 수용체로서 1,2-PD를 이용할 수 없다.
상이한 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 균주는 장에서 대량 서식하는 능력을 가지고, 설사 치료제로서 작용하고, 소화관 운동을 조절하고, 박테리아 병원체의 저해제로서 기능하고, 위장 점막을 면역학적으로 조절하며, 위 등에서 항-염증제로서 기능한다.
특허 출원 WO2009/151391에서, 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 pdu 장치는 박테리아를 동결-건조하기 전에 1,2-PD 또는 글리세롤로 프라이밍(priming)된다. 이 제조 설계를 이용하여, 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 동결-건조된 pdu 장치는 루테린을 만들고 저장하는 능력으로 프라이밍된다.
Emma Årskold et. al., Phosphoketolase Pathway Dominates in Lactobacillus reuteri ATCC 55730 Containing Dual Pathways for Glycolysis (Journal of Bacteriology, Jan 2008, p. 206-212)는 글루코오스 상에서 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 성장 성과가 외부 전자 수용체로서 과당을 첨가함으로써 향상시킬 수 있다는 점을 설명한다. 하지만 이 명세서에서는 특정 프로바이오틱스에 오직 pdu-장치를 가진 박테리아에 의해서만 활용될 수 있는 1,2-PD를 간접적으로 공급하는 이들의 능력에 기반하여 특정한 SSC를 어떻게 선택하는지에 대하여 어떠한 것도 교시하지 않는다.
프로바이오틱 박테리아의 경구 투여에 대한 일반적인 문제점은 프로바이오틱 박테리아가 그들의 효과를 발휘할 장관의 위치에서의 프로바이오틱 박테리아의 불충분한 양 및/또는 활성도이다. 이는 프로바이오틱 박테리아의 복용량은 증가되어야만 하고 및/또는 더욱 잦은 투여가 필요하며 그리고 활성도의 손실을 또한 야기할 수 있다는 결과를 가질 수 있다. 이는 불필요한 비용, 바람직하지 않은 섭취 빈도 및/또는 감소된 건강 혜택을 초래한다. 본 발명에서, 예를 들어 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 국부량 및/또는 대사 활성도가 증진되며, 이는 예를 들어 프로바이오틱의 복용량을 낮추는 가능성을 초래하고 추가적으로 부위-지향성 건강 혜택이 가능하다.
1,2-프로판디올 (1,2-PD)은, 기타 공존하는 미생물에 의해 국부적으로 생성될 수 있고, 특정 프로바이오틱 종, 가령 락토바실러스 루테리(L. reuteri)에 의해 추가적인 당과 조합하여 가능한대로, 활용될 수 있는 에너지원이다. 본 발명의 발명자는 놀랍게도, 이들 공존하는 미생물은 자극되어 매우 선택적인 SSC의 경구 투여에 의해 1,2-PD를 생성하고 그렇게 함으로써 유기체, 가령 락토바실러스 루테리(L. reuteri)를 활용하는 1,2-PD의 활성도를 간접적으로 증진할 수 있다는 점을 알아내었다.
펙틴은 식물 세포벽으로부터의 다당류이다. 호모갈락투로난 (homogalacturonan, HG), 자일로갈락투로난 (xylogalacturonan, XGA), 아피오갈락투로난(apiogalacturonan), 람노갈락투로난(rhamnogalacturonan) I (RGI), 및 람노갈락투로난(rhamnogalacturonan) II (RGII)를 포함하여, 다양한 펙틴 다당류가 세포벽에서 탐지될 수 있다. HG, XGA, RGI 및 RGII 사이의 비는 다양하지만, 전형적으로 HG가 약 65%의 펙틴을 구성하는 가장 풍부한 다당류인 반면에, RGI는 20% 내지 35%를 구성한다. XGA 및 RGII는 소수 성분이며, 각각은 10% 미만을 구성한다. 상이한 펙틴 다당류는 분리된 분자가 아니지만 공유결합으로 연결된 도메인이다. 펙틴 구조 RGI 및 RGII내 구성요소로서 L-람노오스가 발견된다. RGII 구조내 구성요소로서 L-푸코오스가 또한 발견된다. L-람노오스 또는 L-푸코오스를 전환할 수 있는 GI-관에서 발견되는 박테리아는 대장균(E. coli) 박테리아를 포함하여, 예를 들어 박테로이데스(Bacteroides) 및 장내세균(Enterobacteria) 속(genera)에 속한다.
펙틴은 인간의 소화력에 대해 저항력이 있지만, 소장 및 결장내 박테리아에 의해, 당으로 분해되고 그리고 이후에, 예를 들어 1,2-프로판디올로 추가로 대사된다. 펙틴은 소낭 및 결장내 박테리아 성장을 자극한다. 펙틴은 설사에 대한 치료제로서 이용되고, 향상된 장 환경과 관련되고 그리고 항-암 특성을 갖는 것으로 또한 공지된다. 변형된 시트러스 펙틴(Modified citrus pectin, MCP)은 덜 복잡한 분자로 분해된 시트러스 펙틴이며 그리고 세포 성장 및 증식을 지원하는 데에 이용된다.
푸코이단은 다양한 종의 갈조류 및 갈색 해조류, 가령 모즈크(mozuku), 콤부(kombu), 리무(limu), 무이(moui), 블래더랙(bladderwrack), 와카메(wakame) 및 히지키(hijiki)에서 주로 발견되는 황산 다당류이고 푸코이단의 다양한 형태가 해삼을 포함한 동물 종에서 발견되었다. 갈락토-올리고당 (GOS)은 말단 글루코오스 유닛과 함께, 연속적인 갈락토실화 전이반응(transgalactosylation reaction)을 통하여 생기는 갈락토오스 유닛(unit)의 사슬을 일반적으로 포함하며, 이는 프리바이오틱으로서 분류된다.
Lynch MB et al., The effect of dietary Laminaria-derived laminarin and fucoidan on nutrient digestablility, nitrogen utilisation, intestinal microflora and volatile fatty acid concentration in pigs (J Sci Food Agric. 2010 Feb;90(3):430-7)는 푸코이단을 함유한 식단이 제공된 돼지에서 비-푸코이단 식단과 비교하여 근위 결장 및 원위 결장내 락토바실러스 종(Lactobacillus spp.)이 증가된다는 것을 확인하였다. 따라서 돼지에서 내장 건강을 향상시키는 식이 수단으로 푸코이단을 제공할 수 있다는 것이 제시된다. 푸코이단 식단에 기인한 배설물내 증가된 락토바실러스(Lactobacillus) 모집단이 또한 J.V. O' Doherty et. al., The effect of dietary laminarin and fucoidan diet of the weanling piglet on performance and selected faecal microbial populations (Livestock science 2010 September)에 의해 확인되었다.
하지만, 박테리아 발효를 통하여, 1,2-PD를 발생시키기 위해 L-람노오스 및/또는 L-푸코오스의 양에 기반하여, 예를 들어, 펙틴 및 푸코이단, 또는 이의 단편을 선택하는 것 및 높은 데옥시당 함량, 특히 다량의 1,2-PD를 초래하여 따라서 특정한 미생물, 예를 들어 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)에 대부분의 기타 미생물은 Pdu 장치의 결핍때문에 활용할 수 없는 에너지원 및/또는 외부 전자 수용체를 간접적으로 공급할 L-람노오스 및/또는 L-푸코오스 함량을 가진 이러한 조성물을 이용하는 것이 이전에는 공지되지 않았다.
미국 출원 WO2010/117274는 C5 및/또는 C6 단쇄 지방산(Short Chain Fatty Acid, SCFA)의 탐지가능한 증가를 유도할 수 있는 탄수화물에 관한 것이다. SCFA는 치료된 개체의 위장 건강에 긍정적인 효과가 있다. 사용된 탄수화물은 펙틴을 포함한다. 그들이 극미량의 람노오스를 포함할 수 있는 펙틴을 선택함에도 불구하고, 그들은 L-람노오스 또는 L-푸코오스에서 높은 특이적 펙틴을 어떻게 선택하고 이용하여 프로바이오틱스에 특이적 에너지원 및/또는 외부 전자 수용체를 가진 pdu-장치를 공급하여, 따라서 그들의 활성도를 증진하는 지에 대해서는 개시하지 않는다.
미국 특허 제7,101,565호는 프리바이오틱 및 프로바이오틱을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 프리바이오틱은 펙틴 또는 펙틴 다당류를 포함할 수 있다. 하지만 본 발명에서는 pdu　장치를 가진 프로바이오틱스에 이로운,　위장관내 다량의　1,2-PD을 발생시킬 특정한 펙틴을 어떻게 선택하거나,　또는 펙틴 및　L-람노오스 또는L-푸코오스와의 조합을 어떻게 이용하는 지에 대해서는　개시되지 않는다.
미국 특허 제5,902,578호에서, 본 발명은 락토바실러스(Lactobacillus)를 이용함으로써 감염원, 가령 로타바이러스와 연관된 설사, 또는 항생 요법과 연관된 설사를 예방하는 방법에 관한 것이 개시된다. 하지만 본 발명에서 락토바실러스(Lactobacillus)는 더 나은 효능을 위한 추가적 SSC와 연관되지 않는다.
어느 누구도 지금까지 프로바이오틱, 가령 락토바실러스 루테리(L. reuteri)와 함께, SSC를 투여함으로써 특정 프로바이오틱스의 건강 촉진 효과를 어떻게 증진하여 이러한 프로바이오틱스에 특유한 에너지원 및/또는 외부 전자 수용체를 간접적으로 공급하는 지에 대해서는 개시하지 않았다. 높은 함량의 L-람노오스 및/또는 L-푸코오스와 함께, SSC의 경구 투여는 1,2-프로판디올의 공급을 확실하게 할 것이고 그렇게 함으로써 특정 프리바이오틱스에 에너지원 및/또는 외부 전자 수용체를 간접적으로 공급할 것이다. 이것은 건강 촉진 미생물, 가령 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 국부량을 증가시킬 것이고, 그리고 더 나은 효능을 제공할 것이며, 이는 부위 지향 효과를 가능하게 한다.
예를 들어, 프로바이오틱스와 함께 펙틴을 이용하는 것이 이전에 공지되었음에도 불구하고, 특정 프로바이오틱스에 특이적 에너지원 및/또는 특이적 외부 전자 수용체의 간접적인 공급을 위한 1,2-PD를 형성하는 이들의 능력에 기반하여 SSC를 어떻게 선택하는 지에 대해서는 이전에 공지되지 않았다.
본 발명의 요약
본 발명은 특정 프로바이오틱스의 활성도를 증진 및 제조하는 방법 및 기질 성분 및 선택적으로 프로바이오틱을 포함하는 산물의 용도를 개시한다. 본 발명의 산물은 예를 들어, 포유류내 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 활성도를 증진하는 데에 이용될 수 있다. 이 산물은 숙주 건강을 향상시키기 위해 이용될 수 있다. 이용된 프로바이오틱 균주에 따라, 산물은 예를 들어, 위장 건강을 향상, 면역-관련 건강을 향상, 설사 및 변비를 치료 및/또는 예방, 배설물 굳기(fecal consistency)를 정상화, 위장 운동을 향상, 감염 질환을 치료 및/또는 예방, 염증 및 항-병원성 효과를 조절하는 데에 이용될 수 있다.
프로바이오틱스의 증가된 효능은 1,2-프로판디올 (1,2-PD)을 생성하기 위해 공존하는 미생물을 자극함으로써 성취될 수 있다. 공존하는 미생물은 본 명세서에서 설명된 바와 같은 특정한 특이적 기질 성분 (SSC)으로 자극된다. SSC는 위장내 1,2-PD의 존재를 보장할 것이고 그리고 특정한 유익한 유기체에 1,2-PD을 간접적으로 공급할 것이다.
에너지원 및/또는 외부 전자 수용체 중 어느 하나로서 1,2-PD를 활용하는 능력은 pdu-장치를 가진 박테리아에 대해 특유하고 따라서 SSC의 투여는 특정 프로바이오틱스의 활성도만을 증진할 것이다.
SSC는 공동-투여된 프로바이오틱스의 활성도를 증진하기 위해 프로바이오틱스와 함께 투여될 수 있다. 또한 SSC는 단독으로 투여되어, 예를 들어, 이전에 투여된 프로바이오틱스의 활성도를 증가시킬 수 있다.
단독 투여되거나 또는 SSC에 의해 발생된 1,2-PD는 갈락토-올리고당 (GOS) 또는 당류를 함유한 기타 갈락토오스와 추가로 결합되어 미생물에 대해 좀 더 나은 에너지원을 제공할 수 있다.
헤테로발효 유산균은 포스포케톨라아제 경로 (PKP)를 이용하여, 젖산, 에탄올 및 이산화탄소를 생성한다. PKP는 엠덴-마이어호프(Embden-Meyerhof) 경로 (EMP)와 비교하여 불량한 에너지 수득률을 가진다. 이 단점은 외부 전자 수용체의 첨가에 의해 보상될 수 있다.
본 발명자는 위장관내 1,2-프로판디올의 존재를 보장함으로써, 프로바이오틱스에 적합한 외부 전자 수용체가 공급될 것이며, 그렇게 됨으로써 프로바이오틱의 활성도가 증진할 것이라는 점을 놀랍게도 알아내었다.
본 발명의 SSC는 그들이 박테리아에 증진된 활성도를 가능하게 하는 적합한 전자 수용체를 제공할 것이기 때문에, 헤테로발효 유산균, 가령 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)의 성장을 선택적으로 증가시킬 것이다.
락토바실러스 루테리(L. reuteri)는 특정한 환경에서 성장을 위해 좋은 전자 수용체에 의존하고, 그리고 본 발명의 발명자는 1,2-프로판디올이 좋은 전자 수용체로서 역할을 할 것이고 SSC의 투여에 의해 공급될 수 있다는 점을 놀랍게도 알아내었다.
본 발명 첫 번째 측면에 따라서, 개체의 위장관 내, pdu-오페론을 가진 프로바이오틱 박테리아의 활성도를 증진하기 위한 방법이 제공되며, 이는 상기 개체에게 물질을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 물질은 상기 개체의 위장관에서 1,2-프로판디올로 대사되도록 하는 능력을 가진다.
방법의 구체예에서, 물질은 상기 개체의 위장관에서 1,2-프로판디올로 대사되도록 하는 능력을 가진 데옥시당을 포함한다. 구체예에서, 데옥시당은 람노오스 또는 푸코오스이다.
방법의 구체예에서, 물질은 a) 람노오스, (b) 푸코오스, (c) 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴, (d) 펙틴과 조합한 람노오스, (e) 펙틴과 조합한 푸코오스, (f) 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단, 또는 (g) 람노오스, 푸코오스 및 펙틴의 조합을 포함한다.
본 발명의 구체예에서, 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴은 5-15% 람노오스, 가령 5, 6, 7, 8, 9,　10, 11, 12, 13, 14　또는 15 % 람노오스를 포함하는 것으로서 정의된다. 본 발명의 구체예에서, 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단은 15 %보다 더 많은 푸코오스를 포함하는 것으로서 정의된다.
방법의 구체예에서, 물질은 pdu 오페론을 가진 박테리아와 동시에 투여된다.
본 발명의 바람직한 구체예에서, 물질은 개체에게 경구로 투여된다.
방법의 또 다른 바람직한 구체예에서, pdu-오페론을 가진 박테리아는 락토바실러스 루테리(Lactobacilllus reuteri)를 포함한다.
방법의 구체예에서, 물질은 0.25-25 g, 바람직하게는 1-2 g의 일일 분량으로 개체에게 투여된다.
본 발명의 구체예에서, 방법은 갈락토올리고당 또는 갈락토오스를 포함한 기타 당류를 동시에 투여하는 단계를 추가로 포함한다.
본 발명의 두 번째 측면에 따라서, 개체의 위장관내, pdu-오페론을 가진 프로바이오틱 박테리아의 활성도를 증진하거나 또는 성장을 증가시키는 것에서 이용하기 위한 물질이 제공되며, 여기서 물질은 상기 개체의 위장관에서 1,2-프로판디올로 대사되도록 하는 능력을 가진 데옥시당을 포함한다.
구체예에서, 데옥시당은 람노오스 또는 푸코오스이다.
본 발명의 구체예에서, 물질은 a) 람노오스, (b) 푸코오스, (c) 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴, (d) 펙틴과 조합한 람노오스, (e) 펙틴과 조합한 푸코오스, (f) 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단, 또는 (g) 람노오스, 푸코오스 및 펙틴의 조합을 포함한다.
본 발명의 구체예에서, 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴은 5-15% 람노오스, 가령 5, 6, 7, 8, 9,　10, 11, 12, 13, 14　또는 15 % 람노오스를 포함하는 것으로서 정의된다. 본 발명의 구체예에서, 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단은 15 %보다 더 많은 푸코오스를 포함하는 것으로서 정의된다.
물질에 관한 바람직한 구체예에서, pdu-오페론을 가진 박테리아는 락토바실러스 루테리(Lactobacilllus reuteri)이다.
본 발명의 구체예에서, 물질은 0.25-25 g, 바람직하게는 1-2 g의 일일 분량으로 개체에게 투여된다.
본 발명의 구체예에서, 물질은 갈락토올리고당 또는 갈락토오스를 포함하는 기타 당류와 조합하여 이용하기 위한 것이다.
본 발명의 세 번째 측면에 따라서, (i) pdu-오페론을 가진 박테리아 및 (ii) 데옥시당을 포함하는 물질을 포함하는 조성물이 제공되며, 여기서 데옥시당은 개체의 위장관에서 1,2-프로판디올로 대사되도록 하는 능력을 가진다.
구체예에서, 조성물은 (a) 람노오스, (b) 푸코오스, (c) 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴, (d) 펙틴과 조합한 람노오스, (e) 펙틴과 조합한 푸코오스, (f) 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단, 또는 (g) 람노오스, 푸코오스 및 펙틴의 조합과 조합하여, pdu-오페론을 가진 박테리아를 포함한다.
본 발명의 구체예에서, 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴은 5-15% 람노오스, 가령 5, 6, 7, 8, 9,　10, 11, 12, 13, 14　또는 15 % 람노오스를 포함하는 것으로서 정의된다. 본 발명의 구체예에서, 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단은 15 %보다 더 많은 푸코오스를 포함하는 것으로서 정의된다.
또 다른 구체예에서, 조성물은 갈락토올리고당 또는 갈락토오스를 포함하는 기타 당류를 추가로 포함한다.
조성물에 관한 구체예에서, pdu-오페론을 가진 박테리아는 락토바실러스 루테리 (Lactobacilllus reuteri)이다.
조성물의 구체예에서, 물질은 가령 0.25-25 g, 바람직하게는 1-2 g의 일일 분량을 제공하기 위한 양으로 존재한다.
본 발명의 또 다른 구체예에 따라서, 상기-설명된 조성물은 개체의 위장관내, pdu-오페론을 가진 프로바이오틱 박테리아의 활성도를 증진하거나 또는 성장을 증가시키는 것에서 이용하기 위한 것이다.
도면의 간단한 설명
도 1은 1,2-PD, 갈락토오스 및 이의 조합의 첨가와 함께 변형된 MRS (글루코오스 및 시트르산염이 없음)내 락토바실러스 루테리(L. reuteri) DSM 17938의 성장을 나타내는 그래프이다.
본 발명의 상세한 설명 및 이의 바람직한 구체예
특정한 프로바이오틱스, 특히 예를 들면 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)의 프로판디올 활용　(pdu)　장치는 에너지원으로서　1,2-프로판디올　(1,2-PD)　상에서 성장을 가능하게 하고 그리고 외부 전자 수용체로서　1,2-PD를 이용하는 능력을 가능하게 한다.
본 발명의 발명자는 특정한 특이적 기질 성분 (SSC)를 이용하여 프로바이오틱 유기체에 에너지원 또는 외부 전자 수용체로서 활용될 수 있는 1,2-PD를 간접적으로 지원하여, 특정 프로바이오틱스의 활성도를 증진하는 방식을 놀랍게도 알아내었다.
SSC는 물질이다. 본 발명의 구체예에 따라서, 물질은 기질이다. 한 가지 구체예에서, 물질은 오로지 한 가지 성분만으로 구성된다. 또 다른 구체예에서 물질은 두 가지 이상의 성분을 포함한다.
신중하게 선택된 이들 SSC의 경구 투여는 공존하는 미생물을 자극하여 1,2-PD를 생성하며, 이는 pdu-장치를 가진 특정한 미생물, 가령 락토바실러스 루테리(L. reuteri)를 위한 에너지원으로서 또는 외부 전자 수용체로서 역할을 할 수 있는 국부적으로 생성된 1,2-PD를 야기한다. SSC는 단독으로 또는 프로바이오틱스와 함께 투여될 수 있다.
1,2-PD의 존재는 특정한 미생물을 위한 성장 조건을 향상시킬 것이고, 더욱이 본 발명자는 도 1에서 나타날 수 있는 바와 같이, 갈락토-올리고당 (GOS) 또는 갈락토오스의 존재에서 추가로 증진될 수 있다는 점을 알아내었다.
본 발명의 SSC는 특이적 프로바이오틱에 에너지원 또는 외부 전자 수용체로서 이용될 수 있는 1,2-PD를 간접적으로 지원하는 이들의 능력을 위해 선택된다. 본 발명의 발명자는 다량의 L-람노오스 또는 L-푸코오스를 가진 SSC가 특정 프로바이오틱스의 활성도를 증진하는 데에 이용될 때 가장 효과적이라는 점을 알아내었다. 그러므로 본 발명에서 이용된 SSC는 L-람노오스 및 L-푸코오스의 양에 관련하여 신중하게 선택된다.
펙틴, 바람직하게는 높은 퍼센트의 L-람노오스를 포함한 특정한 펙틴 단편, 가령 람노갈락투로난 I 및 II가 SSC로서 이용될 수 있다. 바람직하게, 이들 바람직한 펙틴 단편은 5-15% 람노오스를 포함한다. 이들 펙틴 단편은, 분해될 때, 본 원문에서 펙틴, 일반적인 펙틴, 표준적인 펙틴으로 불릴 수 있는 비단편화된 펙틴보다 더 많은 람노오스를 야기할 것이다. 따라서 이러한 바람직한 펙틴 단편의 특정한 일일 분량, 가령 2 g은 표준적인 팩틴의 동일한 일일 분량 (2 g)과 비교하여 더 많은 양의 1,2-PD를 발생시킬 것이다. L-람노오스 또는 L-푸코오스와 함께 투여된다면, 간접적으로 그리고 동일한 방식으로 특정한 미생물, 가령 락토바실러스 루테리(L. reuteri)에 대한 장점이 되는 데에 일반적인 펙틴이 또한 이용될 수 있다. 이 조합은, 1,2-PD 뿐만 아니라, 특정 프로바이오틱스에 기타 기질, 가령 펙틴 분해의 결과로서 갈락토오스, 아라비노오스 및 갈락투론산을 또한 공급할 것이다. 본 발명의 발명자는 특정한 펙틴 구성요소, 가령 갈락토오스, 아라비노오스 및 갈락투론산과 조합한 1,2-PD가 도 1에서 나타난 바와 같이, 특정 프로바이오틱스, 가령 락토바실러스 루테리(L. reuteri)를 위한 1,2-PD의 활용을 증진하는 상승 효과(synergistic effect)를 발생시킬 것이라는 점을 나타내었다.
푸코이단, 바람직하게는 다량의 L-푸코오스를 포함한 특정한 푸코이단 단편은 본 발명에서 SSC로서 이용될 수 있고, 그리고 바람직하게 이들 푸코이단 단편은 15 %보다 더 많은 푸코오스를 포함한다. 이들 푸코이단 단편은, 분해될 때, 일반적인 푸코이단보다 더 많은 푸코오스를 야기할 것이고 따라서 더 많은 양의 1,2-PD를 발생시킬 것이다.
L-람노오스 또는 L-푸코오스는 본 발명의 SSC로서 단독으로 이용될 수 있다.
기타 SSC, 가령 검 및 기타 다당류는 그들이 L-람노오스, L-푸코오스 등을 함유한다면 본 발명에 따라서 이용될 수 있다. 검은 카라야(karaya gum) 검 및 아라비아 검(arabic gum)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 추가적으로, 인간 모유로부터의 몇 가지 모유 올리고당 (human milk oligosaccharide, HMO's)이 본 발명에서 SSC로서 이용될 수 있다.
본 발명의 SSC를 단독으로 또는 프로바이오틱, 가령 락토바실러스 루테리(L. reuteri)와 함께 투여하는 단계는 특이적 프로바이오틱을 위한 에너지원의 공급을 확실하게 하고 및/또는 에너지 수득률을 증가시킬 외부 전자 수용체의 존재를 확실하게 하고, 따라서 상기 프로바이오틱의 국부적 활성도 및 효능을 증진한다.
기타 구체예에서 그리고 이 효과를 지지하기 위해, 1,2-PD를 활용하는 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 능력을 증가시키기 위하여 GOS 또는 갈락토오스를 첨가하는 것이 추가로 가능하다.
표적 표시에 따라, 다수의 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 균주는 장에서 대량 서식하고, 설사 치료제로서 작용하고, 소화관 운동을 조절하고, 박테리아 병원체의 저해제로서 기능하고, 위장 점막을 면역학적으로 조절하며, 위 등에서 항-염증제로서 기능하는 상이한 능력으로 본 명세서의 발명에서 이용될 수 있다.
펙틴, L-람노오스 및 L-푸코오스는 인간의 소화력에 대해 저항력이 있지만, 인간에서 발견된 공존하는 미생물에 의해 당으로 분해되고 그리고 이후에 예를 들어 1,2-프로판디올로 추가로 대사되고 그리고 인간 GI-관의 특정한 위치에서, 예를 들어 위체, 위방, 십이지장, 및 소장의 점막 상에서 이용가능하다. 그러므로 본 명세서내 발명은 인간 GI-관에서의 부위-지향 효과를 조력하는 것을 또한 가능하게 한다. 예를 들어, 프로바이오틱으로서 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 선택된 균주를 이용함으로써, 회장에서 이 균주의 항-염증 효과를 증진하는 것이 가능하다.
SSC를 1,2-PD로 전환할 수 있는, 일반적으로 발견된 공존하는 미생물의 결핍을 포함하여, 예를 들어, 매우 교란된 미생물상(microflora)을 가진 인간내 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 특이적 균주와 함께, 본 발명내 특정 SSC의 설명된 시스템을 이용할 때, 고, 또한 투여된 SSC의 효능을 보장하는 수용자에게 이러한 공존하는 미생물, 가령 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus)를 활발하게 공급하는 것이 본 명세서내 발명의 또 다른 가능성이다.
본 발명의 SSC를 포함하는 산물은 단독으로 또는 특정 프로바이오틱스와 조합하여 정제, 캡슐, 분말 샤셋 등로서 바람직하게 조제된다. 산물은 식품-보충제, 제약학적 산물 등이 될 수 있다. 이러한 산물에서, 이제 SSC에 의한 증진된 효과를 또한 고려하면, 프로바이오틱 공급물(probiotic feed)의 양은 특이적 균주의 원하는 효과를 줄 수 있는 데에 충분한 양으로 되어야 한다. 이러한 레벨은 전형적으로, 일 당(per day) 10E+4 CFU 내지 10E+11 CFU, 바람직하게는, 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 10E+6 CFU 내지 10E+9 CFU의 범위에 있지만, 이에 제한되지는 않는다.
SSC의 양은 다량의 L-람노오스 및/또는 L-푸코오스와 함께 펙틴을 이용할 때 일 당 0.25 내지 25 그램의 범위에 있어야 한다. 분리된 L-람노오스 및/또는 L-푸코오스와의 일반적인 펙틴의 조합을 이용할 때, SSC의 전체량은 일당 0.25 내지 25g의 범위에 있어서야 한다. 두 가지 경우 모두에서, 0.25-25 g의 일일 분량은 예를 들어, 0.25, 0.5, 1, 1.5, 2, 5, 10, 15, 20 또는 25 g, 바람직하게는 1-2 g, 가령 1, 1.25, 1.5, 1.75 또는 2 g일 수 있다. 일반적인 펙틴 및 L-람노오스 또는 L-푸코오스 중 하나, 또는 이의 조합 사이의 비는 95:5 내지 0:100, 하지만 바람직하게는 80:20 내지 20:80 그리고 더욱 바람직하게는 70:30의 범위에 있어야 한다.
본 명세서내 발명에서 사용될 때 또 다른 선택권은 SSC 및 프로바이오틱을 함께 대안적으로 공급하기 위함이고, 그리고 첫 번째 공급 후 하나 이상의 경우에는, 치료 비용을 낮추기 위한 셔틀 프로그램(shuttle program)과 같은 것에서 SSC만을 공급하기 위함이다.
이용된 프로바이오틱스는 pdu-장치를 가진다는 것이 본 발명에 있어서 필수적이며, 이것은 에너지원으로서 및/또는 외부 전자 수용체로서 1,2-PD를 이용하는 능력에 있어서 필수적이기 때문이다. 그러므로 본 발명의 또 다른 구체예에서, 프로바이오틱스의 pdu 장치는 증진된 효능을 위해 프로바이오틱 균주의 생성 동안에 1,2-PD로 프라이밍된다. 이것은 박테리아를 배양할 때 발효 단계의 시작에서 1,2-PD 또는 글리세롤 및 가능하게는 코발트 또는 비타민 B-12 (비타민 B-12 및 코발트는 루테인 생성에 있어 중요하기 때문에)를 첨가함으로써 이루어진다. 이 제조 설계와 함께, 다음 단계에서 이용되어야 할 동결-건조된 박테리아는 더 잘 제조되어 pdu-장치를 더욱 빠르게 활성화시킨다. Pdu 장치의 이 증진된 효능은 결과적으로 본 발명의 투여된 SSC의 효능을 증진할 것이다. 투여된 SSC의 효능을 증진하는 또 다른 방식은 이들을 GOS 또는 갈락토오스와 결합시키기 위한 것이고, 그리고 발명자는 1,2-PD 및 갈락토오스의 조합이 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 성장에서 예상치 못한 혜택을 가진다는 점을 나타내었다.
수 많은 변형 및 변화가 해당 분야의 통상의 기술자에게 쉽게 발생할 것이므로, 보여지고 설명되는 정확한 구성 및 작업으로 본 발명을 제한하는 것은 바람직하지 않으며, 그리고 이에 따라, 첨부된 청구범위에 의해 정의된 바와 같은 본 발명의 범위 내에서, 모든 적합한 변형 및 등가물이 고려될 수 있다.
실시예 1
펙틴, 람노오스 및 갈락토-올리고당과 함께 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 조성물을 함유한 샤셋(sachet)의 제조.
상기 조성물은 다음으로 만든다:
락토바실러스 루테리 (L. Reuteri) DSM 17938: 10E+8 CFU / 샤셋
펙틴 (GENU®펙틴 (시트러스) 유형 USP/200, CP Kelco France SARL, France): 840 mg / 샤셋
L-람노오스: (람노오스 1수화물 L-(+), Kaden Biochemicals GmbH, Hamburg, Germany) 360 mg / 샤셋
GOS15 (VIVINAL® FrieslandCampina Domo, The Netherlands) 800 mg / 샤셋
LAF 벤치 (덴마크의 Heto-Holten A/S로부터의 Holten Laminair Model S-2010 1.2)내 주변 온도에서 건조제 (10 cm x 12 cm, Alcan으로부터의 포장 물질 PET12/PE/ALU 12/PE/PE+건조제/PE를 사용함)와 함께 상기 조성물을 해당 분야에서 공지된 알루미늄 박 자루(aluminum foil bag) 내로 채운다. 독일의 Denver Instrument GmbH로부터의 밸런스 XP-600을 사용하여 각각의 자루에, 락토바실러스 루테리 (L. Reuteri), 펙틴, L-람노오스 및 갈락토-올리고당이 있는 2 g의 분말을 첨가한다. 이후 채워진 알루미늄 박 자루를 독일의 Kettenbaum Folienschweisstechnik GmbH & Co. KG로부터의 필름 밀봉 기기 모델 F460/2로 밀봉한다.
실시예 2
람노오스와 함께 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 조성물을 함유한 샤셋의 제조.
상기 조성물은 다음으로 만든다:
2 g L-람노오스: (람노오스 1수화물 L-(+), Kaden Biochemicals GmbH, Hamburg, Germany)) 10E+8 CFU 락토바실러스 루테리(L. reuteri)DSM 17938 / 샤셋을 함유함
실시예 1에서와 같이 알루미늄 박 자루 내에 상기 조성물을 채운다.
실시예 3
갈락토-올리고당 및 람노오스와 함께 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 조성물을 함유한 샤셋의 제조.
상기 조성물은 다음으로 만든다:
1 g GOS15 (VIVINAL® FrieslandCampina Domo, The Netherlands) 및 1 g L-람노오스: (람노오스 1수화물 L-(+), Kaden Biochemicals GmbH, Hamburg, Germany) 10E+8 CFU 락토바실러스 루테리(L. reuteri) DSM 17938 / 샤셋을 함유함
실시예 1에서와 같이 알루미늄 박 자루 내에 상기 조성물을 채운다.
실시예 4
프라이밍된 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 균주의 제조
이 실시예는 활성화된 pdu-장비로 락토바실러스 루테리(L. reuteri)의 동결-건조 분말을 어떻게 제조하는 지 설명한다. 이후 프라이밍된 락토바실러스 루테리(L. reuteri) 균주를 실시예 1-3의 샤셋을 만들 때 이용할 수 있다.
발효 배지 조성물
덱스트로오스 1수화물 60 g/l
효모 추출물 KAV 20 g/l
펩톤 유형 PS (돼지 기원) 20 g/l
시트르산 수소 이암모늄 5 g/l
아세트산 나트륨 (x 3 H2O) 4.7 g/l
인산 수소 이칼륨 2 g/l
트윈80 0.5 g/l
실리비온(Silibione) (거품 억제) 0.14 g/l
황산 마그네슘 0.10 g/l
황산 망간 0.03 g/l
황산 아연 7 수화물 0.01 g/l
물 q.s.
원심분리 배지
펩톤 O-24 오르타나(Orthana) (돼지 기원)
동결보호제(Cryoprotectants)
락토오스 (소 기원) 33 %
젤라틴 가수분해물 (소 기원) 22 %
글루타민산 나트륨 22 %
말토덱스트린 11 %
아스코르빈산 11 %
동결 건조 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 분말의 생산 단계
1. 작업용 세포 은행 유리병(working cell bank vial)으로부터의 0.6 ml의 동결-건조 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 분말로 20 ml의 발효 배지를 접종한다. 교반 또는 pH 조절 없이, 즉 정지 상태로 병 안에서 18-20시간 동안 37℃에서 발효를 수행한다.
2. 1-리터 플라스크의 발효 배지 두 개를 (단계 1에서의) 배지의 리터 당 9 ml 세포 슬러리(cell slurry)로 접종한다. 교반 또는 pH 조절 없이, 즉 정지 상태로 20-22시간 동안 37℃에서 발효를 수행한다.
3. 600 리터 발효 배지를 함유한 600-리터 용기를 접종하는 데에 단계 제 2로부터의 1리터 세포 슬러리 두 개를 이용한다. 교반 및 pH 조절을 하면서 13시간 동안 37℃에서 발효를 수행한다. 발효의 시작에서, pH는 6.5이다. pH가 5.4 아래로 떨어질 때 20% 수산화 나트륨 용액을 이용하여 pH 조절을 시작한다. pH 5.5까지 pH 조절을 설정한다.
4. 4번째 및 최종 발효 단계는 단계 제3에서의 접종으로 15,000-리터 용기에서 수행한다. 교반 및 pH 조절을 하면서 9 내지 12시간 동안 37℃에서 발효를 수행한다. 발효의 시작에서, pH는 6.5이다. pH가 5.4 아래로 떨어질 때 20% 수산화 나트륨 용액을 이용하여 pH 조절을 시작한다. pH 5.5까지 pH 조절을 설정한다. 배양균이 정지상에 도달하기 바로 직전에, 발효의 최종 단계에서 100 mM 글리세롤을 첨가한다. 배양균이 수산화 나트륨 용액 첨가의 감소에 의해 볼 수 있는 정지상에 도달하면 발효를 완료한다. 발효 동안에 대략적으로 930 리터의 수산화 나트륨 용액을 10,200 리터의 배지 및 600 리터의 접종원에 첨가한다.
Alfa Laval로부터의 연속 원심분리기에서 10℃로 최종 발효 (단계 4)로부터의 세포 슬러리를 두 번 분리한다. 첫 번째 원심분리에 의해, 세포 슬러리의 용량은 대략적으로 11,730 리터에서 1200 리터로까지 감소된다. 이 용량을 3000-리터 용기내 1200 리터의 펩톤 (펩톤 0-24, Orthana) 용액으로 세척하고 동결보호제와 혼합하기 전에 다시 분리한다 (아래 참고). 펩톤으로의 세척 단계를 수행하여 동결-건조 공정에서의 임의의 어는점 감소를 방지한다.
두 번째 원심분리에 의해 세포 슬러리의 용량은 495 리터까지 감소된다. 이 용량을 156 kg의 동결보호제 용액과 혼합하여 대략적으로 650 리터의 세포 슬러리에 도달시킨다.
1000-리터 용기에 세포 슬러리를 퍼낸다. 이후 용기를 동결-건조 플랜트(freeze-drying palnt)에 옮긴다.
동결-건조 플랜트에서, 정확하게 2 리터의 세포 슬러리를 동결 건조기내 각각의 플레이트에 따라준다. 동결 건조기의 최대 수용량은 600 리터이고 모든 초과 세포 슬러리 용량은 버린다.
락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)의 세포 슬러리는 18%의 건조물 함량을 가지며 4 내지 5일 동안 동결건조된다.
동결-건조 공정 동안에, 공정내 압력은 0.176 mbar 내지 0.42 mbar이다. 압력이 0.42 mbar에 도달하면 진공 펌프를 시작한다. 공정이 언제 완료되는지 결정하는 데에 PRT (가압 검사)를 이용한다. PRT 또는 압력의 증가가 120초 후에 0.02 mbar 미만이라면, 상기 공정을 중지한다.
실시예 5
1,2-PD 및 갈락토오스의 조합은 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)의 활성도를 증진하는 상승 효과를 발생시킨다
1,2-PD (0.3%), 갈락토오스 (0.3%) 또는 이 둘의 조합의 첨가와 함께, 변형된 MRS 브로스(broth) (글루코오스 및 시트르산염이 없음)에서 락토바실러스 루테리 (L. reuteri) DSM 17938을 성장시켰다. 37℃에서 24시간 동안 박테리아를 성장시켰다. 1,2-PD 및 갈락토오스 둘 모두의 존재에서 성장시킨 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)는 놀랍게도 도 1에서 나타난 바와 같이 분리시킨 물질 상의 성장보다 상당히 더 높은 성장을 나타내었다.
실시예 6
공급되어야할 셔틀 프로그램의 예시
본 명세서에서 설명된 SSC로 유도된 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)의 증진된 활성도 덕분에, 셔틀 프로그램에서, 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)가 제외되지만 그 외에는 실시예 1에 따라 제조된 샤셋 (샤셋 B)으로 실시예 1의 샤셋 (샤셋 A)의 대체가 가능하다. 이 셔틀 프로그램은 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)의 효능을 감소시키지 않으며 치료 비용을 낮출 수 있다.
1일에 수용자에게 샤셋 A을 투여하고, 2 및 3일에 수용자에게 샤셋 B를 제공한다. 이 투여 계획을 전체 치료 기간 동안 반복한다.
실시예 7
인간의 생체내 장내 군체형성(Intestinal colonization)
락토바실러스 루테리 (L. reuteri) 단독 및 SSC와 함께 투여된 동일한 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)에 의한 장내 군체형성 간의 비교를 임상적 연구에서 시행한다. 12명의 건강한 자원자를 각 그룹내 6명의 참가자로 두 그룹 (A 및 B)으로 나눈다. 그룹 A는 펙틴, 람노오스 및 갈락토-올리고당의 형태로 SSC와 함께 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)의 조성물을 함유한, 실시예 1의 분말 샤셋을 받는다. 그룹 B는 동일한 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)이지만 상기 SSC가 없는 것을 받는다. 두 그룹 모두 60일 동안 일 당 10E+8 CFU의 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)를 제공받는다. 연구 초반에, 그리고 치료 기간의 30 및 60일 후 배설물 샘플 검사에 의해 단독으로 또는 SSC와 함께 제공된 균주에 의한 장내 군체형성의 정량적 평가를 한다. 배설물의 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)의 수를 세고, 그룹 A 및 그룹 B의 배설물량을 비교한다.
표 1에서 나타난 바와 같이, 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)가 단독으로 투여된 환자와 비교하여, 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)가 SSC와 함께 투여된 환자에서 배설물의 락토바실러스 루테리 (L. reuteri)량에서의 상당한 증가가 나타난다. 배설물 ± SEM의 그램 당 평균 log10 CFU로서 값이 주어진다.
Figure pct00001

Claims (15)

  1. 개체의 위장관내, pdu-오페론을 가진 프로바이오틱 박테리아의 활성도를 증진하기 위한 방법이되, 상기 개체에게 물질을 투여하는 단계를 포함하고, 여기서 물질은 상기 개체의 위장관에서 1,2-프로판디올로 대사되도록 하는 능력을 가지는 것인 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 물질은 (a) 람노오스, (b) 푸코오스, (c) 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴, (d) 펙틴과 조합한 람노오스, (e) 펙틴과 조합한 푸코오스, (f) 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단, 또는 (g) 람노오스, 푸코오스 및 펙틴의 조합을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 물질은 pdu 오페론을 가진 박테리아와 동시에 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 임의의 전술한 청구항에 있어서, pdu-오페론을 가진 박테리아는 락토바실러스 루테리 (Lactobacilllus reuteri)를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 임의의 전술한 청구항에 있어서, 물질은 0.25-25 g, 바람직하게는 1-2 g의 일일 분량으로 개체에게 투여되는 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 임의의 전술한 청구항에 있어서, 갈락토올리고당 또는 갈락토오스를 포함한 기타 당류를 동시에 투여하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 개체의 위장관내, pdu-오페론을 가진 프로바이오틱 박테리아의 활성도를 증진하거나 또는 성장을 증가시키는 것에서 이용하기 위한 물질이되, 여기서 물질은 상기 개체의 위장관에서 1,2-프로판디올로 대사되도록 하는 능력을 가진 데옥시당을 포함하는 물질.
  8. 제7항에 있어서, (a) 람노오스, (b) 푸코오스, (c) 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴, (d) 펙틴과 조합한 람노오스, (e) 펙틴과 조합한 푸코오스, (f) 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단, 또는 (g) 람노오스, 푸코오스 및 펙틴의 조합을 포함하는 것을 특징으로 하는 물질.
  9. 제7항 또는 제8항 중 어느 한 항에 있어서, pdu-오페론을 가진 프로바이오틱 박테리아는 락토바실러스 루테리 (Lactobacilllus reuteri)인 것을 특징으로 하는 물질.
  10. 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 갈락토올리고당 또는 갈락토오스를 포함한 기타 당류와 조합하여 이용하기 위한 것임을 특징으로 하는 물질.
  11. 데옥시당을 포함하는 물질 및 pdu-오페론을 가진 박테리아를 포함하는 조성물이되, 여기서 데옥시당은 개체의 위장관에서 1,2-프로판디올로 대사되도록 하는 능력을 가진 조성물.
  12. 제11항에 있어서, (a) 람노오스, (b) 푸코오스, (c) 높은 퍼센트의 람노오스를 가진 펙틴, (d) 펙틴과 조합한 람노오스, (e) 펙틴과 조합한 푸코오스, (f) 높은 퍼센트의 푸코오스를 가진 푸코이단, 또는 (g) 람노오스, 푸코오스 및 펙틴의 조합과 조합하여, pdu-오페론을 가진 박테리아를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제11항 또는 제12항에 있어서, 갈락토올리고당 또는 갈락토오스를 포함하는 기타 당류를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  14. 제11항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, pdu-오페론을 가진 박테리아는 락토바실러스 루테리 (Lactobacilllus reuteri)인 것을 특징으로 하는 조성물.
  15. 제11항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 개체의 위장관내, pdu-오페론을 가진 프로바이오틱 박테리아의 활성도를 증진하거나 또는 성장을 증가시키는것에서 이용하기 위한 것임을 특징으로 하는 조성물.
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