CN112237287B - 一株能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌lr519及其组合物 - Google Patents

Abstract

本发明属于益生菌技术领域，提出了一株能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519及其组合物，所述组合物包括质量比为1：(1‑2)的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。通过上述技术方案，解决了现有技术中益生菌缓解便秘效果依旧不够好的问题。

Description

一株能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519及其组合物

技术领域

本发明属于益生菌技术领域，涉及一株能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519及其组合物。

背景技术

便秘(constipation)，主要是指排便频率减少，一周内大便次数少于2-3次，或者2-3天才大便1次，粪便量少且干结时称为便秘。由于便秘是一种较为普遍的症状，症状轻重不一，所以一般不会引起人们的注意，大部分人并不把便秘当成疾病来对待，因而也就忽视了便秘的危害，其实便秘的危害很大，便秘的局部影响就是粪便干硬，排便时可能会引起肛裂，肛周脓肿、出血，出现失血性贫血等全身症狀；粪便长时间储存于肠道内，其中未完全消化的蛋白质、脂肪等物质，在肠道这种厌氧的环境下，发酵产生酚、胺等22种毒素，从而被肠道反复吸收，导致皮肤粗糙、痤疮、面部皱纹、肥胖、失眠及内分泌失调，让美丽的青春暗淡无光，美丽的容颜悄悄逃走；便秘可导致患者出现食欲不振、腹部胀满口苦、肛门排气多等表现；便秘也会诱发心绞痛，心肌梗死，脑出血，颅内压增高等，中老年人特别是患有高血压、心脏病人群，便秘则会诱发心肌梗塞，甚至猝死。脱硫弧菌和绿脓杆菌是重要的内毒素产生菌，其丰度与便秘状态的发生高度相关。益生菌因其具有突出的优势被人们广泛用于调节肠道，缓解便秘，但是现有的益生菌仍存在缓解便秘效果依旧不够好。

发明内容

本发明提出一株能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519及其组合物，解决了现有技术中益生菌缓解便秘效果依旧不够好的问题。

本发明的技术方案是这样实现的：一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物，所述组合物包括质量比为1：(1-2)的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

进一步地，所述组合物包括质量比为1：(1-2)的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

上述能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物的应用，用于制备缓解便秘的食品。

进一步地，按质量份数计，所述食品包括3-5份混合菌粉A，30-50份圆苞车前子壳，20-30份低聚果糖，4-10份菊粉，4-6份柳橙果粉；

所述混合菌粉A包括质量比为1：(1-2)的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

进一步地，按质量份数计，所述食品包括3-5份混合菌粉A，30-50份圆苞车前子壳，20-30份低聚果糖，4-10份菊粉，4-6份柳橙果粉；

所述混合菌粉A包括质量比为1：1的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

本发明的工作原理及有益效果为：

1、本发明中通过对鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉的复配，提高了单一菌种对于绿脓杆菌和脱硫弧菌的抑制效果，抑制绿脓杆菌的抑菌圈直径在17.62-17.70mm，抑制脱硫弧菌的抑菌圈直径在20.95-21.04mm，用于改善便秘，连续服用14天，痊愈62.96％，有效33.33％，总有效率为96.30％，解决了现有技术中益生菌缓解便秘效果依旧不够好的问题。

2、本发明中不仅通过菌种的复配，结合辅料的设计，使得菌种得到有效的吸收。其中低聚果糖是一种天然活性物质，甜度是蔗糖的0.3-0.6倍，具有调节肠道菌群，增殖双歧杆菌、免疫调节等作用。低聚果糖在酸性条件下稳定性优于蔗糖，即使经过人体胃酸、胆汁的洗礼，也能够达到大肠中，为大肠中的双歧杆菌提供营养物质，使双歧杆菌迅速繁殖。此外，低聚果糖可抑制外源致病菌和肠内固有腐败细菌的生长繁殖、减少肠内腐败物质的积累，促进肠道蠕动和清洁，润肠通便，降低了有害毒素长时间滞留的现象，防止便秘或腹泻，改善消化系统的新陈代谢。

菊粉(天然果聚糖)和低聚果糖(FOS)有着亲缘关系。低聚果糖的糖链较短，而菊粉较长；因而菊粉的发酵速度更慢，产气速度也更慢。菊粉甜度是蔗糖的十分之一，不含卡路里，不会被人体自身消化，当它进入大肠后，它会被我们的肠道细菌利用。菊粉有着较好的选择性，它基本只会被“益菌”所利用，因而菊粉属于公认的益生元之一。菊粉还可以降低血糖，防便秘及治疗肥胖症膳食纤维减少食物在胃肠的停留时间，以及增加粪便量，有效地治疗便秘。适量摄入菊粉能帮助改善高血脂、缓解便秘以及帮助减肥。

柳橙果粉是以新鲜柳橙为原料，采用常温或低温喷雾干燥技术加工而成。柳橙果粉作为一种矫味剂，提供橘汁香味和甜度。柳橙甜美、略带酸味、口感清爽、富含维生素C。柳橙果粉均衡地含有水溶性纤维和非水溶性纤维，水溶性纤维具有降低血液中胆固醇指数及控制血糖水平的作用，而非水溶性纤维则能促进消化，帮助新陈代谢。维生素C可提高机体免疫力,有助于铁的吸收，协助肝脏内蛋白转氨、转硫等功能，将肠道吸收到肝脏的植物和动物蛋白氨基酸，转化成人体所需的各种酶、辅酶、神经递质、激素、谷胱甘肽等重要原料，保证身体更新修复代谢所需的营养原料。维生素C能促进胶原蛋白的正常合成，防止发生细胞连接障碍，缓解痔疮带来的痛苦。此外，维生素C又称l-抗坏血酸，是酸性的，而植物乳杆菌也最适宜在弱酸性(pH 6.5)环境下生存。维生素C是一种重要的自由基清除剂，它通过逐级供给电子而转变成半脱氢抗坏血酸和脱氢抗坏血酸，以达到清除氧自由基目的。维生素C与鼠李糖乳杆菌LR519协同起到清除体内自由基的作用。

圆苞车前子外壳富含胶质，由树胶醛醣、木糖、半乳胶醛酸、半干燥脂肪油及少量珊瑚木苷(Aucubine)组成。圆苞车前子壳中富含膳食纤维，高达80％以上，而其中可溶性膳食纤维与不溶性膳食纤维的比例高达7:3。其他营养成分主要包括葡萄糖甙、蛋白质、多糖、维生素B1和胆碱。圆苞车前子纤维可用于防止/治疗便秘或腹泻。它可充分吸收水分，增大体积至可排泄团块，增加肠道蠕动，减少粪便在肠内运送时间，并逐渐变得有规律。其可以帮助低聚果糖发挥对益生菌的定植作用。

3、本发明通过圆苞车前子外壳与低聚果糖的复配添加，进一步提高了鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉缓解便秘的作用。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

图1为本发明实施例1益生菌组合物抑制绿脓杆菌的效果图。

图2为本发明实施例1益生菌组合物抑制脱硫弧菌的效果图。

图3为本发明比较例1益生菌组合物抑制绿脓杆菌的效果图。

图4为本发明比较例1益生菌组合物抑制脱硫弧菌的效果图。

图5为本发明比较例2益生菌组合物抑制绿脓杆菌的效果图。

图6为本发明比较例2益生菌组合物抑制脱硫弧菌的效果图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明涉及到的益生菌均由河北一然生物科技有限公司提供，其中鼠李糖乳杆菌LR519与两歧双歧杆菌TMC3115均已在专利公报中公开，公开的专利申请文件申请号为201911301091.1，申请日2019.12.17，发明名称为缓解便秘及痔疮的益生菌组合物，并且已经经过国家知识产权局承认的用于专利程序的保藏机构保藏，两歧双歧杆菌(Bifidobacteriumbifidum)TMC3115，保藏编号为CGMCC No.8462；鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)LR519，保藏编号为CGMCC No.15969；可以认定为公众可以得到、而不要求进行保藏的情形。

一、实施例

实施例1

一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物，所述组合物包括质量比为1：1的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

实施例2

一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物，所述组合物包括质量比为1：2的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

实施例3

一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物，所述组合物包括质量比为1：1.5的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

比较例1

与实施例1相比，区别仅在于，未包括鼠李糖乳杆菌LR519菌粉。

比较例2

与实施例1相比，区别仅在于，未包括两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

比较例3

一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物，所述组合物包括质量比为10：1的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

比较例4

一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物，所述组合物包括质量比为2：1的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

脱硫弧菌、绿脓杆菌与便秘状态的发生高度相关，因此以实施例1-3及比较例1～3的益生菌为目标菌，进行如下目标菌体外抑菌实验：

脱硫弧菌活化三代后，用1×10⁸CFU/mL浓度的脱硫弧菌涂布到新鲜的哥伦比亚血平板上，立即放入牛津杯，加入各待测目标菌100μL，微需氧条件下固定1h。培养72h后，测量抑菌环直径；绿脓杆菌活化三代后，用1×10⁸CFU/mL浓度的绿脓杆菌涂布到新鲜的营养肉汁琼脂平板上，立即放入牛津杯，加入各待测目标菌100μL，微需氧条件下固定1h。培养72h后，测量抑菌环直径结果如下表1，效果图见图1-6。

表1

从上表中数据可以看出，目标菌体外抑菌实验加入的目标菌总量是相同的，实施例1-3采用鼠李糖乳杆菌LR519和两歧双歧杆菌TMC3115协同，抑制绿脓杆菌的抑菌圈直径在17.62-17.70mm，抑制脱硫弧菌的抑菌圈直径在20.95-21.04mm，比较例1-2单独采用鼠李糖乳杆菌LR519或两歧双歧杆菌TMC3115，相较于实施例1-3，比较例1-2抑菌圈的直径减小，可见本发明采用鼠李糖乳杆菌LR519和两歧双歧杆菌TMC3115复配协同提高了抑菌效果。

二、应用实施例

应用实施例1

按质量份数计，所述食品包括4份混合菌粉A，40份圆苞车前子壳，25份低聚果糖，8份菊粉，5份柳橙果粉；

所述混合菌粉A包括质量比为1：1的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

应用实施例2

按质量份数计，所述食品包括3份混合菌粉A，50份圆苞车前子壳，20份低聚果糖，10份菊粉，4份柳橙果粉；

所述混合菌粉A包括质量比为1：2的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

应用实施例3

按质量份数计，所述食品包括5份混合菌粉A，30份圆苞车前子壳，30份低聚果糖，4份菊粉，6份柳橙果粉；

所述混合菌粉A包括质量比为1：1.5的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉。

对比应用实施例1

一种辅助缓解便秘及痔疮症状的益生菌组合物，其包括组分A：称取3.5份植物乳杆菌LP45菌粉、2份嗜酸乳杆菌La28菌粉、1份鼠李糖乳杆菌LR519菌粉和0.1份两歧双歧杆菌TMC3115菌粉混合均匀；组分B：称取41.2份乳糖醇，38份低聚果糖，9份菊粉，5份柳橙果粉，0.2份维生素C混合均匀。

对比应用实施例2

与应用实施例1相比，区别仅在于不包括圆苞车前子壳。

对比应用实施例3

与应用实施例1相比，区别仅在于不包括低聚果糖。

便秘人群试服

1、试服方法

选取符合入组条件的人群120人，分四组，四组受试者每天早饭前分别温水冲服应用实施例1、对比应用实施例1-3制备的产品，每次一袋，2g/袋，连续服用14天。试服期间要求受试者每天根据自身情况填写试服情况记录表。以患者自身试服前后症状作为对照，比较患者排便情况的改善程度。

2、入选标准：年龄18-60岁；符合便秘罗马III标准；病程最少半年；近一周内未服用影响胃肠道动力药物；诊断IBS依据不足；结肠镜或结肠造影检查排除肠道器质性病变及由全身性疾病引起的便秘；近三月满足以下两项或两项以上症状：①至少25％的排便感到费力②至少25％的排便为干球状便或硬便③至少25％的排便有不尽感④至少25％的排便有肛门直肠的阻塞感⑤排便次数每周少于3次。

3、排除标准：因其他疾病及药物导致的便秘，如帕金森氏综合症，巨结肠及长期服用止痛药患者；部分功能性便秘，如直肠前膨出，盆地痉挛综合症等；因嗜酒、滥用药物及精神因素依从性差者；长期滥用泻剂者。如观察期间出现患者自行使用胃肠道动力药(如开塞露)，自行放弃观察等情况，则终止观察。

观察指标：比较患者治疗前后排便次数、排便指标、排便时间、粪便硬度、排便感觉。

表2评分标准

评分	排便次数	排便时间	粪便硬度	排便感觉
					0	每日一到两次	<5min	很软	很轻松
1	每周四次	<10min	软	轻松
					2	每周三次	10-15min	一般	一般
3	每周两次	15-25min	硬	费力
					4	每周一次	>25min	很硬	很费力

4、试服结果

本次研究完成试服人数117人，应用实施例1的结果：除2人服用后症状没有得到有效改善外，其余25人均有效果。在试服两周后27名受试者中有17人的便秘症状完全消失，9人部分症状得到缓解，1人没有改善，即痊愈62.96％，有效33.33％，总有效率为96.30％。

以患者自身试服前后症状作为对照，根据患者排便情况进行量化打分。治疗前后四个排便症状包括粪便硬度、排便时间、频率、和排便感觉的量化积分值都有显著降低。说明本发明制备的复合益生菌粉可以显著改善患者便秘症状。

表3为治疗前后症状体征量化积分值变化表

注：P<0.05。

以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物，其特征在于，所述组合物由质量比为1：(1-2)的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉组成。

2.根据权利要求1所述的一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物，其特征在于，所述组合物由质量比为1：1的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉组成。

3.根据权利要求1或2所述的一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物的应用，其特征在于，用于制备缓解便秘的食品。

4.根据权利要求3所述的一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物的应用，其特征在于，按质量份数计，所述食品包括3-5份混合菌粉A，30-50份圆苞车前子壳，20-30份低聚果糖，4-10份菊粉，4-6份柳橙果粉；

所述混合菌粉A由质量比为1：(1-2)的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉组成。

5.根据权利要求3所述的一种能够缓解便秘的鼠李糖乳杆菌LR519组合物的应用，其特征在于，按质量份数计，所述食品包括3-5份混合菌粉A，30-50份圆苞车前子壳，20-30份低聚果糖，4-10份菊粉，4-6份柳橙果粉；

所述混合菌粉A由质量比为1：1的鼠李糖乳杆菌LR519菌粉与两歧双歧杆菌TMC3115菌粉组成。

Images