KR20130125379A - 후생적 효소의 조절자로서의 치환된 퓨린 및 7-데아자퓨린 화합물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 치환된 퓨린 및 7-데아자퓨린 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 화합물을 함유하는 약학적 조성물, 및 상기 화합물 및 약학적 조성물을 본 치료를 필요로 하는 대상에게 투여함으로써 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 장애, 예컨대 암 및 신경학적 장애를 치료하는 방법에 관한 것이다.

Description

후생적 효소의 조절자로서의 치환된 퓨린 및 7-데아자퓨린 화합물{SUBSTITUTED PURINE AND 7-DEAZAPURINE COMPOUNDS AS MODULATORS OF EPIGENETIC ENZYMES}
관련 출원에 대한 교차 참조
본원은 2010년 12월 3일자로 출원된 미국 가특허출원 제61/419,661호에 대한 우선권 및 그 이익을 주장하며, 이의 전문 내용은 본원에 참조 인용된다.
진핵 세포에서, DNA는 히스톤과 함께 팩키징되어, 크로마틴을 형성한다. DNA의 대략 150개의 염기 쌍은 히스톤(히스톤 2A, 2B, 3, 및 4의 각 2개)의 10량체 주위에 2번 래핑되어, 크로마틴의 기본 단위인 뉴클레오좀을 형성한다. 크로마틴의 규칙 구조의 변화는 결합 유전자의 전사의 변경을 가져올 수 있다. 이 과정은, 유전자 발현 패턴의 변화가 분화, 증식 및 괴사와 같은 기본적 세포 과정에 깊은 영향을 미칠 수 있어 매우 조절된다. 크로마틴 구조의 변화(및 이에 따른 전사)의 조절은 히스톤, 가장 특히 그것의 N-말단 꼬리로의 공유 변형에 의해 매개된다. 이 변형들은, 유전자 발현의 유전 변화를 초래할 수 있으나 DNA 자체의 서열에는 영향을 미치지 않기 때문에, 종종 후생적이라 칭해진다. 아미노산의 측쇄의 공유 변형(예를 들어, 메틸화, 아세틸화, 인산화 및 유비퀴틴화)은 효소에 의해 매개된다.
메틸기가 히스톤 상의 특정 아미노산 부위로 선택적으로 부가되는 것은 히스톤 메틸트랜스퍼라제(HMT)로 알려진 헌 고유 계열의 효소의 작용에 의해 조절된다. 특정 유전자의 발현 수준은 관련 히스톤 부위 내 메틸기의 존재 또는 부재에 의해 영향을 받는다. 특정 히스톤 부위 내 메틸기의 특정 효과는, 그 메틸기가 히스톤 디메틸라제(demethylase)에 의해 제거될 때까지, 혹은 변형된 히스톤이 뉴클레오좀 턴오버를 통해 치환될 때까지 지속된다. 마찬가지 방식으로, 다른 효소 부류가 DNA 및 히스톤을 다른 화학종으로 장식할 수 있고, 또 다른 효소가 상기 종을 제거하여 유전자 발현의 일시 조절을 제공하도록 할 수 있다.
전사 제어 뒤의 생화학 시스템의 조직된 집합은 세포 성장 및 분화가 최적으로 진행되도록 하기 위해서는 엄격히 조절되어야 한다. 이러한 조절이 DNA 및 히스톤 변형의 원인이 되는 효소의 이상 발현 및/또는 활성에 의해 방해될 때, 질환 상태가 초래된다. 예를 들어, 인간 암에서, 결핍 제한 후생적 효소 활성이 암 및 기타 암 관련 표현형과 연관된 비조절 세포 증식, 예컨대 증진된 세포 이동 및 침습에 기여한다는 것을 제시하는 증거물들이 점차 늘고 있다. 암 외에도, 대사성 질환(예컨대, 당뇨병), 염증성 질환(예컨대, 크론씨병), 신경병성 질환(예컨대, 알츠하이머병) 및 심혈관계 질환을 포함한, 다수의 다른 인간 질환들에서의 후생적 효소의 역할에 대한 증거가 늘고 있다. 그러므로, 후생적 효소의 이상 작용의 선택적 조절이 일정 범위의 질환들을 치료할 수 있는 가망성이 크다.
현재 후생적 효소의 이상 작용을 조절하는 신규 제제가 요망되고 있다. 본 발명은 이러한 요망을 충족시키는 화합물을 제공한다.
발명의 개요
본 발명은 후생적 효소의 이상 작용을 조절하는 데 유용한 화합물을 제공한다. 본 발명은 또한 상기 화합물의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 및/또는 N-산화물을 제공한다
한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 치환된 퓨린 또는 7-데아자퓨린 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 특징으로 한다:
[화학식 I]
Figure pct00001
[이 화학식에서,
A는 O 또는 CH2이고;
G 및 J는 각기 독립적으로 H, 할로, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬 또는 ORa(Ra는 H, C1-C6 알킬 또는 C(O)-C1-C6 알킬임(여기서, C(O)O-C1-C6 알킬, C1-C6 알킬 또는 C(O)-C1-C6 알킬은 할로, 시아노 히드록실, 카르복실, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
Q는 H, NH2, NHRb, NRbRc, Rb, 또는 ORb(여기서, Rb 및 Rc는 각기 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 -M1-T1(여기서, M1은 결합, 또는 할로, 시아노, 히드록실 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T1는 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이거나, Rb 및 Rc는 이들이 부착된 N 원자와 함께 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 N 원자에 대한 0 또는 1개의 부가적 이종 원자를 가지는 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬을 형성하고, Rb, Rc, 및 T1은 각기 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
X는 N 또는 CRx(여기서, Rx는 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS1(RS1은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이고;
L1은 N(Y), S, SO, 또는 SO2이며;
L1이 N(Y)일 때 L2는 CO이거나 부재하거나, L1이 S, SO, 또는 SO2일 때 L2는 부재하고(여기서, L2가 부재할 때 Y는 H, Rd, SO2Rd, 또는 CORd이거나, L2가 CO일 때 Y는 H 또는 Rd(Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬술포닐, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 및 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 추가로 치환된 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환됨)임);
R1, R2, R3, R4, R5, R6, 및 R7는 각기 독립적으로 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS2(RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R8는 H, 할로 또는 RS3(RS3은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이고, RS3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노 아미노, C1-C6 알콕실, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R9는
Figure pct00002
(여기서, Re, Rf, Rg, 및 Rh는 각기 독립적으로 M2-T2(여기서, M2는 결합, SO2, SO, S, CO, CO2, O, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, NH, 또는 N(Rt)(Rt은 C1-C6 알킬임)이며, T2는 H, 할로, 또는 RS4(RS4은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이며, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, Rt, 및 RS4은 각기 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고, Ri은 H, 또는 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 할로이며, D는 O, NRj, 또는 CRjRk(Rj 및 Rk는 각기 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나, Rj 및 Rk는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여, C3-C10 시클로알킬 환을 형성함)이고, E는 M3-T3(M3은 결합, 또는 할로 또는 시아노로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이며, T3은 C3-C10 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 4 내지 10-원 헤테로시클로알킬이고, T3은 할로, 히드록실, 티올, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬티오, C1-C6 알킬술포닐, C1-C6 할로알킬술포닐, C1-C6 알킬카르보닐, C1-C6 알콕시카르보닐, 옥소, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C4-C12 알킬시클로알킬, C6-C10 아릴, C6-C10 아릴옥실, C7-C14 알킬아릴, C6-C10 아미노아릴옥실, C6-C10 아릴티오; 할로, C1-C4 알킬 또는 C1-C4 할로알킬로 임의적으로 치환된 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬; 할로 또는 C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴; 및 히드록시, 할로, C1-C6 알콕시카르보닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 할로, 히드록실, 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 추가 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴로치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이고;
q는 0, 1, 2, 3, 또는 4이며;
m은 0, 1 또는 2이고;
n은 0, 1 또는 2임].
화학식 (I)의 화합물의 한 하위부류는 화학식 (II)의 것들이다:
[화학식 II]
Figure pct00003
화학식 (I)의 화합물의 또 다른 하위부류는 화학식 (IIIa), (IIIb) 또는 (IIIc)의 것들이다:
Figure pct00004
Figure pct00005
.
화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 및 (IV)의 화합물은 하기 특성들 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
m 및 n의 총합은 1 이상이다.
m은 1 또는 2이고, n은 0이다.
m은 2이고, n은 0이다.
A는 CH2이다.
A는 O이다.
L1은 N(Y)이다.
L1은 SO 또는 SO2이다.
Y는 Rd이다.
Rd는 C1-C6 알킬이다.
L2는 부재한다.
Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 할로(예컨대, F, Cl, 및 Br), 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알콕실(예컨대, OCH3, OCH2CH3, O-iPr, 및 OCF3), 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬술포닐(예컨대, SO2CF3), 또는 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬(예컨대, CH3, i-Pr, t-Bu, 및 CF3)이다.
Ri은 H 또는 C1-C6 알킬이다.
R9는
Figure pct00006
이다.
D는 O이다.
D는 NRj, 예를 들어 NH이다.
D는 CRjRk, 예를 들어 CH2, CHCH3, 또는 C(CH3)2이다.
E는 M3-T3(여기서, M3은 결합 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 페닐, 나프틸, 티에닐, 시클로프로필, 또는 시클로헥실이며, T3은 할로, 히드록실, 티올, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬티오, C1-C6 알킬술포닐, C1-C6 알킬카르보닐, C1-C6 알콕시카르보닐, 옥소, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C4-C12 알킬시클로알킬, C6-C10 아릴, C6-C10 아릴옥실, C7-C14 알킬아릴, C6-C10 아미노아릴옥실, C6-C10 아릴티오, C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴, 및 히드록시, C1-C6 알콕시카르보닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이다.
T3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬술포닐, C6-C10 아릴, 및 C6-C10 아릴옥실, 및 C7-C14 알킬아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 페닐이다.
X는 N이다.
X는 CRx, 예를 들어 CH이다.
Q는 NH2 또는 NHRb(여기서, Rb는 -M1-T1(M1은 결합 또는 C1-C6 알킬 연결기이며, T1은 C3-C8 시클로알킬임)임)이다.
Q는 H이다.
R9는
Figure pct00007
이다.
Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 F, Cl, CF3, OCF3, SO2CF3, C1-C4 알킬, 및 C1-C4 알콕실로 이루어진 군으로부터 선택된다.
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8는 각기 H이다.
본 발명은 또한 화학식 (IV)의 화합물 또는 이의 N-산화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
[화학식 IV]
Figure pct00008
[여기서,
A는 O 또는 CH2이고;
Q는 H, NH2, NHRb, NRbRc, OH, Rb, 또는 ORb(여기서, Rb 및 Rc는 각기 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 -M1-T1(여기서, M1은 결합, 또는 할로, 시아노, 히드록실 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T1는 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이거나, Rb 및 Rc은 이들이 부착된 N 원자와 결합되어, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 N 원자에 대한 0 또는 1개의 부가적 이종 원자를 가지는 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬을 형성하고, Rb, Rc, 및 T1는 각기 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
X는 N 또는 CRx(여기서, Rx는 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS1(RS1은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이며;
Y는 H, Rd, SO2Rd, 또는 CORd(Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬술포닐, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 및 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 추가로 치환된 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로임의적으로 치환됨)이고;
R1 및 R2는 각기 독립적으로 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS2(RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이며;
Re, Rf, Rg, 및 Rh는 각기 독립적으로 M2-T2(여기서, M2는 결합, SO2, SO, S, CO, CO2, O, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, NH, 또는 N(Rt)(Rt은 C1-C6 알킬임)이며, T2는 H, 할로, 또는 RS4(RS4은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이고, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, Rt, 및 RS4은 각기 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이며,
m은 0, 1 또는 2임].
예를 들어, A는 O이다. 화학식 (IV)의 일부 화합물에서, A는 O이고, m은 2이다.
화학식 (IV)의 일부 화합물에서, X는 N이다.
예를 들어, 일부 화합물에서, Q는 NH2 또는 NHRb(여기서, Rb는 -M1-T1(M1은 결합 또는 C1-C6 알킬 연결기이고, T1은 C3-C8 시클로알킬임)임)이다.
예를 들어, 화학식 (IV)의 일부 화합물에서, R1 및 R2는 각기 H이다.
화학식 (IV)의 일부 화합물, Y는 Rd이다. 예를 들어, Rd는 C3-C8 시클로알킬 또는 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다. 예를 들어, Rd는 C1-C6 알킬 또는 할로로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬이다.
본 발명은 또한 Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 할로, 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알콕실; 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬술포닐; CN, 할로, C3-C8 시클로알킬, 히드록시, 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬; 하나 이상의 C1-C6 알킬 또는 CN으로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬; 또는 CN, 할로, 히드록시, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬인 화학식 (IV)의 화합물에 관한 것이다. 예를 들어, 화학식 (IV)의 화합물에서, Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 F; Cl; Br; CF3; OCF3; SO2CF3; CN, 할로, 히드록시, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 옥세타닐; C1-C4 알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬; 및 할로, C3-C8 시클로알킬, 히드록시 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 선택된 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C4 알킬이다.
예를 들어, 본 발명은 Rf 및 Rg 중 하나 이상은 히드록실로 임의적으로 치환된 알킬인 화학식 (IV)의 화합물에 관한 것이다. 예를 들어, 본 발명은 Rf 및 Rg 중 하나 이상이 히드록실로 치환된 t-부틸인 화합물에 관한 것이다.
본 발명은 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 염에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 N-산화물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 N-산화물의 염에 관한 것이다. 예를 들어, 본 발명은 화합물 1 내지 7, 9-109, 및 111-140으로부터 선택되는 화합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의 화학식 (IV)의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의 화학식 (IV)의 화합물의 염 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의 화학식 (IV)의 화합물의 수화물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 염 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 N-산화물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 염의 N-산화물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 수화물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 하나 이상의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물, 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 암을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 본 발명은 암을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 암을 예방하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), 또는 (IIIc)의 화합물을 투여하는 단계를 포함한다. 암은 혈액암일 수 있다. 바람직하게, 암은 백혈병이다. 보다 바람직하게, 암은 급성 골수성 백혈병, 급성 림프성 백혈병 또는 혼합 계통 백혈병(mixted lineage leukemia)이다.
본 발명은 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 본 발명은 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 예방하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 질환 또는 장애 또는 DOT1 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 본 발명은 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 질환 또는 장애 또는 DOT1 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 질환 또는 장애 또는 DOT1 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 예방하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 세포 내 DOT1L 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 세포를 유효량의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물 중 하나 이상과 접촉시키는 단계를 포함한다.
본 발명의 또 다른 한 측면은 세포 내 히스톤 H3 리신 잔기 79(H3-K79) 메틸화의 수준을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 세포를 본 발명의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 상기 방법은 H3-K79 메틸화를 통해 DOT1의 활성에 의해 유발 또는 증강되는 임의의 상태를 개선시키기 위해 사용될 수 있다.
본 발명은 암의 치료 또는 예방용 의약을 제조하기 위한, 본원에 개시된 화합물의 용도에 관한 것이다. 상기 용도는 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량으로 투여하기 위한 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 포함한다. 암은 혈액암일 수 있다. 바람직하게, 암은 백혈병이다. 보다 바람직하게, 암은 급성 골수성 백혈병, 급성 림프성 백혈병 또는 혼합 계통 백혈병이다.
본 발명은 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방용 의약을 제조하기 위한, 본원에 개시된 화합물의 용도를 제공한다. 상기 용도는 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량으로 투여하기 위한 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 포함한다.
본 발명은 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 질환 또는 장애 또는 DOT1 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방용 의약을 제조하기 위한, 본원에 개시된 화합물의 용도를 제공한다. 상기 용도는 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량으로 투여하기 위한 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 포함한다.
본 발명은 세포 내 DOT1L 활성을 억제하기 위한, 본원에 개시된 화합물의 용도를 제공한다. 상기 용도는 세포를 유효량의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물 중 하나 이상과 접촉시키는 단계를 포함한다.
본 발명의 또 다른 한 측면은 세포 내 히스톤 H3 리신 잔기 79(H3-K79) 메틸화의 수준을 감소시키기 위한, 본원에 개시된 화합물의 용도에 관한 것이다. 상기 용도는 세포를 본 발명의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 그러한 용도는 H3-K79 메틸화를 통해 DOT1의 활성에 의해 유발 또는 증강되는 임의의 상태를 개선할 수 있다.
본원에 제시된 화학식에서, 변수는 본원에 상세한 설명에 이후에 정의되는 화학 부분구조의 각 기들로부터 선택될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화합물의 합성 방법을 제공한다. 합성 후, 치료 유효량의 화합물 중 하나 이상은 후생적 효소의 조절에 사용하기 위해 포유동물, 특히 인간에게 투여하기 위한 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 제형될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 암의 위험의 치료, 예방 또는 감소, 또는 암의 위험의 치료, 예방 또는 감소용 의약의 제조에 유용하다. 따라서, 화합물 또는 제형은 예를 들어, 경구, 비경구, 귀, 눈, 코 또는 국소 경로를 통해 투여되어, 유효량의 화합물을 포유동물에 제공할 수 있다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용되는 모든 기술 용어 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 당업계 숙련가에 의해 통상 이해되어지는 바와 동일한 의미를 가진다. 본 명세서에서, 단수 형태는 문백상 명백히 달리 지시되지 않는 한, 복수 형태도 포함한다. 본원에 기재된 방법 및 물질과 유사하거나 균등한 방법 및 물질이 본 발명의 수행 또는 시험에 사용될 수 있으나, 적당한 방법들 및 물질들이 이하에 기재된다. 본원에 언급된 모든 공보, 특허 출원 및 기타 참고문헌들은 본원에 참조 인용된다. 본원에 언급된 참조 문헌은 청구 발명 이전의 것으로 인정되지 않는다. 상충하는 경우, 정의를 비롯한 본 명세서가 우선할 것이다. 또한, 물질, 방법 및 실시예는 단지 예시적이며 제한하지 않는 것으로 한다.
본 발명의 기타 특성 및 이점은 하기 상세한 설명 및 청구범위로부터 명백해질 것이다.
도 1A 및 1B는 각기 MLL-재배열 및 비-MLL-재배열 인간 백혈병 세포주의 패널을 이용하여 화합물 2의 항증식 활성의 강도 및 선택도를 입증하는 표 및 플롯이다. 본 연구에 사용된 세포들이 도 1A에 열거되어 있다.
도 2는 투약 21일간에 걸친 종양 성장을 도시하는 플롯이다.
도 3A는 7, 14 및 21일째 취해진 평균 혈액 시료에 의해 결정되는, 제4군 및 제5군에서의 화합물 2의 정상 상태(steady state)의 혈장 내 평균 농도를 도시하는 플롯이다.
도 3B는 ip 주사 후 시간 대비 플롯팅한 화합물 2의 혈장 내 농도를 도시하는 플롯이다.
본 발명은 후생적 효소의 이상 작용을 선택적으로 조절하기 위해 사용될 수 있는 한 계열의 화합물을 제공한다. 또한, 상기 화합물은 후생적 효소의 이상 작용에 의해 유발되거나 매개되는 포유동물 내 질환 상태를 치료 또는 예방하기 위해 사용될 수 있다. 본 발명은 상기 화합물의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 호변체, 및 N-산화물을 포함한다.
본 발명은 신규의 치환된 퓨린 및 7-데아자퓨린 화합물, 상기 화합물의 합성 방법, 상기 화합물을 함유하는 약학적 조성물, 및 상기 화합물의 각종 용도를 제공한다.
1. 치환된 퓨린 화합물 및 치환된 7-데아자퓨린 화합물
본 발명은 화학식 (I)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 제공한다:
[화학식 I]
Figure pct00009
[여기서,
A는 O 또는 CH2이고;
G 및 J는 각기 독립적으로 H, 할로, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬 또는 ORa(Ra은 H, C1-C6 알킬 또는 C(O)-C1-C6 알킬임)(여기서, C(O)O-C1-C6 알킬, C1-C6 알킬 또는 C(O)-C1-C6 알킬은 할로, 시아노 히드록실, 카르복실, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
Q는 H, NH2, NHRb, NRbRc, Rb, 또는 ORb(여기서, Rb 및 Rc는 각기 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 -M1-T1(여기서, M1은 결합, 또는 할로, 시아노, 히드록실 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T1는 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이거나, Rb 및 Rc은 이들이 부착된 N 원자와 결합되어, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 N 원자에 대한 0 또는 1개의 부가적 이종 원자를 가지는 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬을 형성하고, Rb, Rc, 및 T1은 각기 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
X는 N 또는 CRx(여기서, Rx는 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS1(RS1은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이고;
L1은 N(Y), S, SO, 또는 SO2이며;
L1이 N(Y)일 때 L2는 CO이거나 부재하거나, L1이 S, SO, 또는 SO2일 때 L2는 부재하고(여기서, L2가 부재할 때 Y는 H, Rd, SO2Rd, 또는 CORd이거나, L2가 CO일 때 Y는 H 또는 Rd(Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬술포닐, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 및 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 추가로 치환된 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환됨)임;
R1, R2, R3, R4, R5, R6, 및 R7는 각기 독립적으로 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS2(RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R8는 H, 할로 또는 RS3(RS3은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이고, RS3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노 아미노, C1-C6 알콕실, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R9는
Figure pct00010
(여기서, Re, Rf, Rg, 및 Rh는 각기 독립적으로 M2-T2(여기서, M2는 결합, SO2, SO, S, CO, CO2, O, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, NH, 또는 N(Rt)(Rt은 C1-C6 알킬임)이며, T2는 H, 할로, 또는 RS4(RS4은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이며, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, Rt, 및 RS4은 각기 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고, Ri은 H, 또는 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 할로이며, D는 O, NRj, 또는 CRjRk(Rj 및 Rk는 각기 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나, Rj 및 Rk는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여, C3-C10 시클로알킬 환을 형성함)이고, E는 M3-T3(M3은 결합, 또는 할로 또는 시아노로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이며, T3은 C3-C10 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 4 내지 10-원 헤테로시클로알킬이고, T3은 할로, 히드록실, 티올, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬티오, C1-C6 알킬술포닐, C1-C6 할로알킬술포닐, C1-C6 알킬카르보닐, C1-C6 알콕시카르보닐, 옥소, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C4-C12 알킬시클로알킬, C6-C10 아릴, C6-C10 아릴옥실, C7-C14 알킬아릴, C6-C10 아미노아릴옥실, C6-C10 아릴티오; 할로, C1-C4 알킬 또는 C1-C4 할로알킬로 임의적으로 치환된 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬; 할로 또는 C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴; 및 히드록시, 할로, C1-C6 알콕시카르보닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 할로, 히드록실, 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 추가 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이고;
q는 0, 1, 2, 3, 또는 4이며;
m은 0, 1 또는 2이고;
n은 0, 1 또는 2임].
예를 들어, m 및 n의 총합은 1 이상이다.
예를 들어, m은 1 또는 2이고, n은 0이다.
예를 들어, m은 2이고, n은 0이다.
예를 들어, A는 CH2이다.
예를 들어, A는 O이다.
예를 들어, L1은 N(Y)이다.
예를 들어, L1은 SO 또는 SO2이다.
예를 들어, Y는 Rd이다.
예를 들어, Rd는 C1-C6 알킬이다.
예를 들어, L2는 부재한다.
예를 들어, G 및 J는 각기 독립적으로 ORa이다.
예를 들어, Ra은 H이다.
예를 들어, R9는
Figure pct00011
이다. 예를 들어, R9는
Figure pct00012
이다.
예를 들어, Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 할로(예컨대, F, Cl, 및 Br), 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알콕실(예컨대, OCH3, OCH2CH3, O-iPr, 및 OCF3), 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬술포닐(예컨대, SO2CF3), 또는 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬(예컨대, CH3, i-프로필, n-부틸, 및 CF3)이다.
예를 들어, Ri은 H 또는 C1-C6 알킬(예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 및 n-헥실)이다.
예를 들어,
Figure pct00013
는 비치환된 벤지이미다졸릴 또는 하기 기들 중 하나이다:
Figure pct00014
.
예를 들어, R9는
Figure pct00015
이다.
예를 들어, D는 O이다.
예를 들어, D는 NRj이다.
예를 들어, Rj은 H이다.
예를 들어, D는 CRjRk이다.
예를 들어, 각각의 Rj 및 Rk은 H이다.
예를 들어, E는 M3-T3(여기서, M3은 결합 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 페닐, 나프틸, 티에닐, 시클로프로필, 또는 시클로헥실이며, T3은 할로, 히드록실, 티올, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬티오, C1-C6 알킬술포닐, C1-C6 알킬카르보닐, C1-C6 알콕시카르보닐, 옥소, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C4-C12 알킬시클로알킬, C6-C10 아릴, C6-C10 아릴옥실, C7-C14 알킬아릴, C6-C10 아미노아릴옥실, C6-C10 아릴티오, C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴, 및 히드록시, C1-C6 알콕시카르보닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이다.
예를 들어, T3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬(예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 및 n-헥실), C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬술포닐, C6-C10 아릴(예를 들어, 페닐 또는 나프틸), 및 C6-C10 아릴옥실, 및 C7-C14 알킬아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 페닐이다.
예를 들어, E는
Figure pct00016
Figure pct00017
이다.
예를 들어, X는 N이다.
예를 들어, X는 CRx이다.
예를 들어, X는 CH이다.
예를 들어, Q는 NH2 또는 NHRb(여기서, Rb는 -M1-T1(M1은 결합 또는 C1-C6 알킬 연결기이며, T1은 C3-C8 시클로알킬임)임)이다.
예를 들어, Q는 H이다.
예를 들어, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8는 각기 H이다.
예를 들어, R8가 할로이고 J와 동일한 탄소 원소에 부착된 경우, J는 히드록실이 아니다.
예를 들어, R8가 할로이고 G와 동일한 탄소 원소에 부착된 경우, G는 히드록실이 아니다.
예를 들어, M2이 SO2, SO, S, CO 또는 O일 때, T2는 할로가 아니다.
예를 들어, T2은 이종 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
예를 들어, T2은 N 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
예를 들어, T2은 C 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
본 발명은 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 제공한다:
[화학식 II]
Figure pct00018
[여기서,
A는 O 또는 CH2이고;
Q는 H, NH2, NHRb, NRbRc, Rb, 또는 ORb(여기서, Rb 및 Rc는 각기 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 -M1-T1(여기서, M1은 결합, 또는 할로, 시아노, 히드록실, 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T1는 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이거나, Rb 및 Rc은 이들이 부착된 N 원자와 결합되어, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 N 원자에 대한 0 또는 1개의 부가적 이종 원자를 가지는 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬을 형성하고, Rb, Rc, 및 T1은 각기 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
X는 N 또는 CRx(여기서, Rx는 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS1(RS1은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이고;
L1은 N(Y), S, SO, 또는 SO2이며;
L1이 N(Y)일 때 L2는 CO이거나 부재하거나, L1이 S, SO, 또는 SO2일 때 L2는 부재하고(여기서, L2가 부재할 때 Y는 H, Rd, SO2Rd, 또는 CORd이거나, L2가 CO일 때 Y는 H 또는 Rd(Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬술포닐, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 및 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 추가로 치환된 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환됨)임);
R1, R2, R3, R4, R5, R6, 및 R7는 각기 독립적으로 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS2(RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R8는 H, 할로 또는 RS3(RS3은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이고, RS3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노 아미노, C1-C6 알콕실, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R9는
Figure pct00019
(여기서, Re, Rf, Rg, 및 Rh는 각기 독립적으로 M2-T2(여기서, M2는 결합, SO2, SO, S, CO, CO2, O, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, NH, 또는 N(Rt)(Rt은 C1-C6 알킬임)이며, T2는 H, 할로, 또는 RS4이며, RS4은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이며, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, Rt, 및 RS4은 각기 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고, Ri은 H, 또는 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 할로이며, D는 O, NRj, 또는 CRjRk(Rj 및 Rk는 각기 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬이거나, Rj 및 Rk는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여, C3-C10 시클로알킬 환을 형성함)이고, E는 M3-T3(M3은 결합, 또는 할로 또는 시아노로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이며, T3은 C3-C10 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 4 내지 10-원 헤테로시클로알킬이고, T3은 할로, 히드록실, 티올, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬티오, C1-C6 알킬술포닐, C1-C6 할로알킬술포닐, C1-C6 알킬카르보닐, C1-C6 알콕시카르보닐, 옥소, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C4-C12 알킬시클로알킬, C6-C10 아릴, C6-C10 아릴옥실, C7-C14 알킬아릴, C6-C10 아미노아릴옥실, C6-C10 아릴티오; 할로, C1-C4 알킬 또는 C1-C4 할로알킬로 임의적으로 치환된 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬; 할로 또는 C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴; 및 히드록시, 할로, C1-C6 알콕시카르보닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 할로, 히드록실, 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 추가 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
q는 0, 1, 2, 3, 또는 4이며;
m은 0, 1 또는 2이고;
n은 0, 1 또는 2임].
예를 들어, m 및 n의 총합은 1 이상이다.
예를 들어, m은 1 또는 2이고, n은 0이다.
예를 들어, m은 2이고, n은 0이다.
예를 들어, A는 CH2이다.
예를 들어, A는 O이다.
예를 들어, L1은 N(Y)이다.
예를 들어, L1은 SO 또는 SO2이다.
예를 들어, Y는 Rd이다.
예를 들어, Rd는 C1-C6 알킬이다.
예를 들어, L2는 부재한다.
예를 들어, R9는
Figure pct00020
이다. 예를 들어, R9는
Figure pct00021
이다.
예를 들어, Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 할로(예컨대, F, Cl, 및 Br), 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알콕실(예컨대, OCH3, OCH2CH3, O-iPr, 및 OCF3), 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬술포닐(예컨대, SO2CF3), 또는 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬(예컨대, CH3, i-프로필, n-부틸, 및 CF3)이다.
예를 들어, Ri은 H 또는 C1-C6 알킬(예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 및 n-헥실)이다.
예를 들어,
Figure pct00022
는 비치환된 벤지이미다졸릴 또는 하기 기들 중 하나이다:
Figure pct00023
.
예를 들어, R9는
Figure pct00024
이다.
예를 들어, D는 O이다.
예를 들어, D는 NRj이다.
예를 들어, Rj은 H이다.
예를 들어, D는 CRjRk이다.
예를 들어, 각각의 Rj 및 Rk은 H이다.
예를 들어, E는 M3-T3(여기서, M3은 결합 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 페닐, 나프틸, 티에닐, 시클로프로필, 또는 시클로헥실이며, T3은 할로, 히드록실, 티올, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬티오, C1-C6 알킬술포닐, C1-C6 알킬카르보닐, C1-C6 알콕시카르보닐, 옥소, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C4-C12 알킬시클로알킬, C6-C10 아릴, C6-C10 아릴옥실, C7-C14 알킬아릴, C6-C10 아미노아릴옥실, C6-C10 아릴티오, C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴, 및 히드록시, C1-C6 알콕시카르보닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이다.
예를 들어, T3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬(예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 및 n-헥실), C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬술포닐, C6-C10 아릴(예를 들어, 페닐 또는 나프틸), 및 C6-C10 아릴옥실, 및 C7-C14 알킬아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 페닐이다.
예를 들어, E는
Figure pct00025
Figure pct00026
이다.
예를 들어, X는 N이다.
예를 들어, X는 CRx이다.
예를 들어, X는 CH이다.
예를 들어, Q는 NH2 또는 NHRb(여기서, Rb는 -M1-T1(M1은 결합 또는 C1-C6 알킬 연결기이며, T1은 C3-C8 시클로알킬임)임)이다.
예를 들어, Q는 H이다.
예를 들어, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8는 각기 H이다.
예를 들어, R8가 할로이고 J와 동일한 탄소 원소에 부착된 경우, J는 히드록실이 아니다.
예를 들어, R8가 할로이고 G와 동일한 탄소 원소에 부착된 경우, G는 히드록실이 아니다.
예를 들어, M2이 SO2, SO, S, CO 또는 O일 때, T2는 할로가 아니다.
예를 들어, T2은 이종 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
예를 들어, T2은 N 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
예를 들어, T2은 C 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
본 발명은 화학식 (IIIa) 또는 (IIIb)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 제공한다:
Figure pct00027
[여기서,
A는 O 또는 CH2이고;
G 및 J는 각기 독립적으로 H, 할로, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬 또는 ORa(Ra는 H, C1-C6 알킬 또는 C(O)-C1-C6 알킬임(여기서, C(O)O-C1-C6 알킬, C1-C6 알킬 또는 C(O)-C1-C6 알킬은 할로, 시아노 히드록실, 카르복실, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
Q는 H, NH2, NHRb, NRbRc, Rb, 또는 ORb(여기서, Rb 및 Rc는 각기 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 -M1-T1(여기서, M1은 결합, 또는 할로, 시아노, 히드록실 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T1는 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이거나, Rb 및 Rc은 이들이 부착된 N 원자와 결합되어, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 N 원자에 대한 0 또는 1개의 부가적 이종 원자를 가지는 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬을 형성하고, Rb, Rc, 및 T1은 각기 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
X는 N 또는 CRx(여기서, Rx는 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS1(RS1은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이고;
L1은 N(Y), S, SO, 또는 SO2이며;
L1이 N(Y)일 때 L2는 CO이거나 부재하거나, L1이 S, SO, 또는 SO2일 때 L2는 부재하고(여기서, L2가 부재할 때 Y는 H, Rd, SO2Rd, 또는 CORd이거나, L2가 CO일 때 Y는 H 또는 Rd(Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬술포닐, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 및 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 추가로 치환된 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환됨)임);
R1, R2, R3, R4, R5, R6, 및 R7는 각기 독립적으로 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS2(RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R8는 H, 할로이거나, RS3(RS3은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이고, RS3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노 아미노, C1-C6 알콕실, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
Re, Rf, Rg, 및 Rh는 각기 독립적으로 M2-T2(여기서, M2는 결합, SO2, SO, S, CO, CO2, O, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, NH, 또는 N(Rt)(Rt은 C1-C6 알킬임)이며, T2는 H, 할로, 또는 RS4(RS4은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이고, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, Rt, 및 RS4은 각기 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
Ri은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된, H 또는 C1-C6 알킬이고;
q는 0, 1, 2, 3, 또는 4이며;
m은 0, 1 또는 2이고;
n은 0, 1 또는 2임].
예를 들어, m 및 n의 총합은 1 이상이다.
예를 들어, m은 1 또는 2이고, n은 0이다.
예를 들어, m은 2이고, n은 0이다.
예를 들어, A는 CH2이다.
예를 들어, A는 O이다.
예를 들어, L1은 N(Y)이다.
예를 들어, L1은 SO 또는 SO2이다.
예를 들어, Y는 Rd이다.
예를 들어, Rd는 C1-C6 알킬이다.
예를 들어, L2는 부재한다.
예를 들어, G 및 J는 각기 독립적으로 ORa이다.
예를 들어, Ra은 H이다.
예를 들어, Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 할로(예컨대, F, Cl, 및 Br), 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알콕실(예컨대, OCH3, OCH2CH3, O-iPr, 및 OCF3), 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬술포닐(예컨대, SO2CF3), 또는 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬(예컨대, CH3, i-프로필, n-부틸, 및 CF3)이다.
예를 들어, Ri은 H 또는 C1-C6 알킬(예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 및 n-헥실)이다.
예를 들어,
Figure pct00028
는 비치환된 벤지이미다졸릴 또는 하기 기들 중 하나이다:
Figure pct00029
.
예를 들어, X는 N이다.
예를 들어, X는 CRx이다.
예를 들어, X는 CH이다.
예를 들어, Q는 NH2 또는 NHRb(여기서, Rb는 -M1-T1(M1은 결합 또는 C1-C6 알킬 연결기이며, T1은 C3-C8 시클로알킬임)임)이다.
예를 들어, Q는 H이다.
예를 들어, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8는 각기 H이다.
예를 들어, R8가 할로이고 J와 동일한 탄소 원소에 부착된 경우, J는 히드록실이 아니다.
예를 들어, R8가 할로이고 G와 동일한 탄소 원소에 부착된 경우, G는 히드록실이 아니다.
예를 들어, M2이 SO2, SO, S, CO 또는 O일 때, T2는 할로가 아니다.
예를 들어, T2은 이종 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
예를 들어, T2은 N 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
예를 들어, T2은 C 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
본 발명은 화학식 (IIIc)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 에스테르를 제공한다:
[화학식 IIIc]
Figure pct00030
[여기서,
A는 O 또는 CH2이고;
G 및 J는 각기 독립적으로 H, 할로, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬 또는 ORa(Ra는 H, C1-C6 알킬 또는 C(O)-C1-C6 알킬임(여기서, C(O)O-C1-C6 알킬, C1-C6 알킬 또는 C(O)-C1-C6 알킬은 할로, 시아노 히드록실, 카르복실, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
Q는 H, NH2, NHRb, NRbRc, Rb, 또는 ORb(여기서, Rb 및 Rc는 각기 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 -M1-T1(여기서, M1은 결합, 또는 할로, 시아노, 히드록실 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T1는 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이거나, Rb 및 Rc은 이들이 부착된 N 원자와 결합되어, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 N 원자에 대한 0 또는 1개의 부가적 이종 원자를 가지는 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬을 형성하고, Rb, Rc, 및 T1은 각기 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
X는 N 또는 CRx(여기서, Rx는 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS1(RS1은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이고;
L1은 N(Y), S, SO, 또는 SO2이며;
L1이 N(Y)일 때 L2는 CO이거나 부재하거나, L1이 S, SO, 또는 SO2일 때 L2는 부재하고(여기서, L2가 부재할 때 Y는 H, Rd, SO2Rd, 또는 CORd이거나, L2가 CO일 때 Y는 H 또는 Rd(Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬술포닐, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 및 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 추가로 치환된 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환됨)임);
R1, R2, R3, R4, R5, R6, 및 R7는 각기 독립적으로 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS2(RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
R8는 H, 할로 또는 RS3(RS3은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이고, RS3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노 아미노, C1-C6 알콕실, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, 및 C3-C8 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
D는 O, NRj, 또는 CRjRk(Rj 및 Rk는 각기 독립적으로 H 또는 C1-C6 알킬, 또는 Rj 및 Rk는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 결합하여, C3-C10 시클로알킬 환을 형성함)이고;
E는 M3-T3(M3은 결합, 또는 할로 또는 시아노로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T3은 C3-C10 시클로알킬, C6-C10 아릴, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 4 내지 10-원 헤테로시클로알킬이며, T3은 할로, 히드록실, 티올, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬티오, C1-C6 알킬술포닐, C1-C6 할로알킬술포닐, C1-C6 알킬카르보닐, C1-C6 알콕시카르보닐, 옥소, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C4-C12 알킬시클로알킬, C6-C10 아릴, C6-C10 아릴옥실, C7-C14 알킬아릴, C6-C10 아미노아릴옥실, C6-C10 아릴티오, 및 할로, C1-C4 알킬, C1-C4 할로알킬, 및 할로, C1-C4 알킬, 및 히드록시, 할로, C1-C6 알콕시카르보닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 할로, 히드록실, 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 추가 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴로 치환된 C1-C6 알킬로 임의적으로 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
q는 0, 1, 2, 3, 또는 4이며;
m은 0, 1 또는 2이고;
n은 0, 1 또는 2임].
예를 들어, m 및 n의 총합은 1 이상이다.
예를 들어, m은 1 또는 2이고, n은 0이다.
예를 들어, m은 2이고, n은 0이다.
예를 들어, A는 CH2이다.
예를 들어, A는 O이다.
예를 들어, L1은 N(Y)이다.
예를 들어, L1은 SO 또는 SO2이다.
예를 들어, Y는 Rd이다.
예를 들어, Rd는 C1-C6 알킬이다.
예를 들어, L2는 부재한다.
예를 들어, G 및 J는 각기 독립적으로 ORa이다.
예를 들어, Ra은 H이다.
예를 들어, D는 O이다.
예를 들어, D는 NRj이다.
예를 들어, Rj은 H이다.
예를 들어, D는 CRjRk이다.
예를 들어, 각각의 Rj 및 Rk은 H이다.
예를 들어, E는 M3-T3(여기서, M3은 결합 또는 C1-C3 알킬 연결기이고, T3은 페닐, 나프틸, 티에닐, 시클로프로필, 또는 시클로헥실이며, T3은 할로, 히드록실, 티올, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬티오, C1-C6 알킬술포닐, C1-C6 알킬카르보닐, C1-C6 알콕시카르보닐, 옥소, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C4-C12 알킬시클로알킬, C6-C10 아릴, C6-C10 아릴옥실, C7-C14 알킬아릴, C6-C10 아미노아릴옥실, C6-C10 아릴티오, C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, C1-C4 알킬로 임의적으로 치환된 5 내지 6-원 헤테로아릴, 및 히드록시, C1-C6 알콕시카르보닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 치환된 C1-C6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이다.
예를 들어, T3은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 니트로, C1-C6 알킬(예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 및 n-헥실), C1-C6 알콕실, C1-C6 할로알킬, C1-C6 할로알콕실, C1-C6 알킬술포닐, C6-C10 아릴(예를 들어, 페닐 또는 나프틸), 및 C6-C10 아릴옥실, 및 C7-C14 알킬아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 페닐이다.
예를 들어, E는
Figure pct00031
Figure pct00032
이다.
예를 들어, X는 N이다.
예를 들어, X는 CRx이다.
예를 들어, X는 CH이다.
예를 들어, Q는 NH2 또는 NHRb(여기서, Rb는 -M1-T1(M1은 결합 또는 C1-C6 알킬 연결기이며, T1은 C3-C8 시클로알킬임)임)이다.
예를 들어, Q는 H이다.
예를 들어, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, 및 R8는 각기 H이다.
예를 들어, R8가 할로이고 J와 동일한 탄소 원소에 부착된 경우, J는 히드록실이 아니다.
예를 들어, R8가 할로이고 G와 동일한 탄소 원소에 부착된 경우, G는 히드록실이 아니다.
예를 들어, M2이 SO2, SO, S, CO 또는 O일 때, T2는 할로가 아니다.
예를 들어, T2은 이종 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
예를 들어, T2은 N 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
예를 들어, T2은 C 원자를 통해 M2에 결합된 4-8 원 헤테로시클로알킬이다.
본 발명은 또한 화학식 (IV)의 화합물 또는 이의 N-산화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
[화학식 IV]
Figure pct00033
[여기서,
A는 O 또는 CH2이고;
Q는 H, NH2, NHRb, NRbRc, OH, Rb, 또는 ORb(여기서, Rb 및 Rc는 각기 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 -M1-T1(여기서, M1은 결합, 또는 할로, 시아노, 히드록실 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T1는 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이거나, Rb 및 Rc은 이들이 부착된 N 원자와 결합되어, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 N 원자에 대한 0 또는 1개의 부가적 이종 원자를 가지는 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬을 형성하고, Rb, Rc, 및 T1는 각기 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이고;
X는 N 또는 CRx(여기서, Rx는 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS1(RS1은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)임)이고;
Y는 H, Rd, SO2Rd, 또는 CORd(Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬술포닐, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기, 및 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 추가로 치환된 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴 임의적으로 치환됨)이고;
R1 및 R2는 각기 독립적으로 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS2(RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환됨)이며;
Re, Rf, Rg, 및 Rh는 각기 독립적으로 M2-T2(여기서, M2는 결합, SO2, SO, S, CO, CO2, O, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, NH, 또는 N(Rt)(Rt은 C1-C6 알킬임)이며, T2는 H, 할로, 또는 RS4(RS4은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴임)이고, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, Rt, 및 RS4은 각기 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되며,
m은 0, 1 또는 2임].
예를 들어, A는 O이다. 화학식 (IV)의 일부 화합물에서, A는 O이고, m은 2이다.
화학식 (IV)의 일부 화합물에서, X는 N이다.
예를 들어, 일부 화합물에서, Q는 NH2 또는 NHRb(여기서, Rb는 -M1-T1(M1은 결합 또는 C1-C6 알킬 연결기이고, T1은 C3-C8 시클로알킬임)이다.
예를 들어, 화학식 (IV)의 일부 화합물에서, R1 및 R2는 각기 H이다.
화학식 (IV)의 일부 화합물에서, Y는 Rd이다. 예를 들어, Rd는 C3-C8 시클로알킬 또는 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬이다. 예를 들어, Rd는 C1-C6 알킬 또는 할로로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬이다.
본 발명은 또한 Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 할로, 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알콕실; 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬술포닐 ; 하나 이상의 C1-C6 알킬 또는 CN으로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬; 하나 이상의 C1-C6 알킬 또는 CN으로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬; 또는 CN, 할로, 히드록시, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬인 화학식 (IV)의 화합물에 관한 것이다. 예를 들어, 화학식 (IV)의 화합물에서, Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 F; Cl; Br; CF3; OCF3; SO2CF3; CN, 할로, 히드록시, C1-C6 알킬 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 옥세타닐; C1-C4 알킬로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬; 및 할로, C3-C8 시클로알킬, 히드록시 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C4 알킬로부터 선택된다.
예를 들어, 본 발명은 Rf 및 Rg 중 하나 이상이 히드록실로 임의적으로 치환된 알킬인 화학식 (IV)의 화합물에 관한 것이다. 예를 들어, 본 발명은 Rf 및 Rg 중 하나 이상이 히드록실로 임의적으로 치환된 t-부틸인 화합물에 관한 것이다.
본 발명은 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 염에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 N-산화물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 N-산화물의 염에 관한 것이다. 예를 들어, 본 발명은 화합물 1 내지 7, 9-109, 및 111-140으로부터 선택되는 화합물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의 화학식 (IV)의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의 화학식 (IV)의 화합물의 염 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의 화학식 (IV)의 화합물의 수화물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 염 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 N-산화물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 염의 N-산화물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 치료 유효량의, 화합물 1 내지 140으로부터 선택되는 화합물의 수화물 및 약학적으로 허용가능한 담체의 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 하나 이상의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), 또는 (IIIc)의 화합물, 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의, 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), 또는 (IIIc)의 화합물의 염, 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 관한 것이다.
본 발명은 또한 치료 유효량의, 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), 또는 (IIIc)의 화합물의 수화물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 관한 것이다.
본 발명은 암을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 본 발명은 암을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 암을 예방하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 화학식 (I)의 화합물, (II), (IIIa), (IIIb), 또는 (IIIc)을 투여하는 단계를 포함한다. 암은 혈액암일 수 있다. 바람직하게, 암은 백혈병이다. 보다 바람직하게, 암은 급성 골수성 백혈병, 급성 림프성 백혈병 또는 혼합 계통 백혈병이다.
본 발명은 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 본 발명은 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 예방하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 질환 또는 장애 또는 DOT1 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 본 발명은 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 질환 또는 장애 또는 DOT1 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 질환 또는 장애 또는 DOT1 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 예방하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 세포 내 DOT1L 활성을 억제하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 세포를 유효량의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물 중 하나 이상과 접촉시키는 단계를 포함한다.
본 발명의 또 다른 한 측면은 세포 내 히스톤 H3 리신 잔기 79(H3-K79) 메틸화의 수준을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 세포를 본 발명의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 그러한 방법은 H3-K79 메틸화를 통해 DOT1의 활성에 의해 유발 또는 증강되는 임의의 상태를 개선하기 위해 사용될 수 있다.
본 발명은 암 치료 또는 예방용 의약을 제조함에 있어서의, 본원에 개시된 화합물의 용도에 관한 것이다. 상기 용도는 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량으로 투여하기 위한 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 포함한다. 암은 혈액암일 수 있다. 바람직하게, 암은 백혈병이다. 보다 바람직하게, 암은 급성 골수성 백혈병, 급성 림프성 백혈병 또는 혼합 계통 백혈병이다.
본 발명은 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방용 의약을 제조함에 있어서의, 본원에 개시된 화합물의 용도를 제공한다. 상기 용도는 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량으로 투여하기 위한 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 포함한다.
본 발명은 DOT1 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 질환 또는 장애 또는 DOT1 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방용 의약을 제조함에 있어서의, 본원에 개시된 화합물의 용도를 제공한다. 상기 용도는 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량으로 투여하기 위한 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물을 포함한다.
본 발명은 세포 내 DOT1L 활성을 억제하기 위한, 본원에 개시된 화합물의 용도를 제공한다. 상기 용도는 세포를 유효량의 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물 중 하나 이상과 접촉시키는 단계를 포함한다.
본 발명의 또 다른 한 측면은 세포 내 히스톤 H3 리신 잔기 79(H3-K79) 메틸화의 수준을 감소시키기 위한, 본원에 개시된 화합물의 용도에 관한 것이다. 상기 용도는 세포를 본 발명의 화합물과 접촉시키는 단계를 포함한다. 그러한 용도는 H3-K79 메틸화를 통해 DOT1의 활성에 의해 유발 또는 증강되는 임의의 상태를 개선할 수 있다.
본원에 제시된 화학식에서, 변수는 본원에 상세한 설명에 정의된 이후 화학 부분구조의 각 기들로부터 선택될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화합물의 합성 방법을 제공한다. 합성 후, 치료 유효량의 화합물 중 하나 이상은 후생적 효소의 조절에 사용하기 위해 포유동물, 특히 인간에게 투여하기 위한 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 제형될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 암의 위험의 치료, 예방 또는 감소, 또는 암의 위험의 치료, 예방 또는 감소용 의약의 제조에 유용하다. 따라서, 화합물 또는 제형은 예를 들어, 경구, 비경구, 귀, 눈, 코 또는 국소 경로를 통해 투여되어, 유효량의 화합물을 포유동물에 제공될 수 있다.
본 발명의 대표적 화합물은 표 1에 열거된 화합물들을 포함한다.
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본원에 사용되는, "알킬", "C1, C2, C3, C4, C5 또는 C6 알킬" 또는 "C1-C 6 알킬"이란 C1, C2, C3, C4, C5 또는 C6 직쇄 (선형) 포화 지방족 탄화수소기 및 C3, C4, C5 또는 C6 분지쇄 포화 지방족 탄화수소기를 포함하는 것으로 한다. 예를 들어, C1-C6 알킬은 C1, C2, C3, C4, C5 및 C6 알킬기를 포함하는 것으로 한다. 알킬의 예에는 1 내지 6개의 탄소 원자를 가지는 부분구조, 예컨대, 단 이들에 국한되는 것은 아니나, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, s-부틸, t-부틸, n-펜틸, s-펜틸 또는 n-헥실을 포함한다.
일부 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알킬은 6 이하의 탄소수를 가지고(예를 들어, 직쇄의 경우에는 C1-C6, 분지쇄의 경우에는 C3-C6), 또 다른 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알킬은 4 이하의 탄소수를 가진다.
본원에 사용되는 "시클로알킬"이란 용어는 탄소수 3 내지 30(예를 들어, C3-C10)의, 포화 또는 불포화 비방향족 탄화수소 단환 또는 다환계를 지칭한다. 시클로알킬의 예에는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 시클로옥틸, 시클로펜테닐, 시클로헥세닐, 시클로헵테닐, 및 아다만틸이 포함되나 이들에 국한되지 않는다. "헤테로시클로알킬"이란 용어는 하나 이상의 이종 원자(예컨대, O, N, S, 또는 Se)를 포함하는 포화 또는 불포화 비방향족 5-8 원 단환식, 8-12 원 이환식, 또는 11-14 원 삼환식 환계를 지칭한다. 헤테로시클로알킬기의 예에는 피페라지닐, 피롤리디닐, 디옥사닐, 모르폴리닐, 및 테트라히드로푸라닐이 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
"임의적으로 치환된 알킬"이란 용어는 비치환된 알킬, 또는 표시된 치환기가 탄화수소 골격의 하나 이상의 탄소 상의 하나 이상의 수소 원자를 치환한 알킬을 지칭한다. 그러한 치환기에는, 예를 들어 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 히드록실, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐옥시, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 알콕실, 인산염, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카르바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 술프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 술페이트, 알킬술피닐, 술포네이토, 술파모일, 술폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 이종방향족 부분구조가 포함될 수 있다.
"아릴알킬" 또는 "아르알킬" 부분구조는 아릴로 치환된 알킬(예를 들어, 페닐메틸(벤질))이다. "알킬아릴" 부분구조는 알킬로 치환된 아릴(예를 들어, 메틸페닐)이다.
본원에 사용되는 "알킬 연결기"는 C1, C2, C3, C4, C5 또는 C6 직쇄 (선형) 포화 2가 지방족 탄화수소기 및 C3, C4, C5 또는 C6 분지쇄 포화 지방족 탄화수소기를 포함하는 것으로 한다. 예를 들어, C1-C6 알킬 연결기는 C1, C2, C3, C4, C5 및 C6 알킬 연결기를 포함하는 것으로 한다. 알킬 연결기의 예에는 1 내지 6의 탄소수를 가지는 부분구조, 예컨대 단 이들에 국한되는 것은 아니나, 메틸(-CH2-), 에틸(-CH2CH2-), n-프로필(-CH2CH2CH2-), i-프로필(-CHCH3CH2-), n-부틸(-CH2CH2CH2CH2-), s-부틸(-CHCH3CH2CH2-), i-부틸(-C(CH3)2CH2-), n-펜틸(-CH2CH2CH2CH2CH2-), s-펜틸(-CHCH3CH2CH2CH2-) 또는 n-헥실(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)이 포함된다.
"알케닐"은 길이가 유사하고 상기 알킬에 치환 가능하며, 하나 이상의 이중 결합을 함유하는 불포화 지방족 기를 포함한다. 예를 들어, "알케닐"이란 용어는 직쇄 알케닐기(예를 들어, 에테닐, 프로페닐, 부테닐, 펜테닐, 헥세닐, 헵테닐, 옥테닐, 노네닐, 데세닐), 및 분지쇄 알케닐기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알케닐기는 그 골격의 탄소수가 6 이하(예를 들어, 직쇄의 경우에는 C2-C6, 분지쇄의 경우에는 C3-C6)이다. "C2-C6"이란 용어는 2 내지 6의 탄소수를 가지는 알케닐기를 포함한다. "C3-C6"이란 용어는 3 내지 6의 탄소수를 가지는 알케닐기를 포함한다.
"임의적으로 치환된 알케닐"이란 용어는 비치환된 알케닐, 또는 표시된 치환기가 탄화수소 골격의 하나 이상의 탄소 상의 하나 이상의 수소 원자를 치환한 알케닐을 지칭한다. 그러한 치환기에는, 예를 들어 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 히드록실, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐옥시, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 알콕실, 인산염, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카르바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 술프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 술페이트, 알킬술피닐, 술포네이토, 술파모일, 술폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 이종방향족 부분구조가 포함될 수 있다.
"알키닐"은 길이가 유사하고 상기 알킬이 치환 가능하며, 하나 이상의 이중 결합을 함유하는 불포화 지방족 기를 포함한다. 예를 들어, "알키닐"이란 용어는 직쇄 알키닐기(예를 들어, 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 펜티닐, 헥시닐, 헵티닐, 옥티닐, 노니닐, 데시닐), 및 분지쇄 알키닐기를 포함한다. 일부 실시양태에서, 직쇄 또는 분지쇄 알키닐기는 그 골격의 탄소수가 6 이하(예를 들어, 직쇄의 경우에는 C2-C6, 분지쇄의 경우에는 C3-C6)이다. "C2-C6"이란 용어는 2 내지 6의 탄소수를 가지는 알키닐기를 포함한다. "C3-C6"이란 용어는 3 내지 6의 탄소수를 가지는 알키닐기를 포함한다.
"임의적으로 치환된 알키닐"이란 용어는 비치환된 알키닐, 또는 표시된 치환기가 탄화수소 골격의 하나 이상의 탄소 상의 하나 이상의 수소 원자를 치환한 알키닐을 지칭한다. 그러한 치환기에는, 예를 들어 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 히드록실, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐옥시, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 알콕실, 인산염, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카르바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 술프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 술페이트, 알킬술피닐, 술포네이토, 술파모일, 술폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 이종방향족 부분구조가 포함될 수 있다.
기타 임의적으로 치환된 부분구조(예컨대, 임의적으로 치환된 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴)는 비치환된 부분구조 및 표시된 치환기들 중 하나 이상을 가지는 부분구조를 모두 포함한다.
"아릴"은 하나 이상의 방향족 환을 가지나 환 구조 내에 어떠한 이종 원자도 포함하지 않는 "공액" 또는 "다환식" 계를 포함하는 방향성을 가지는 기를 포함한다. 예에는 페닐, 벤질, 1,2,3,4-테트라히드로나프탈레닐 등이 포함된다.
"헤테로아릴"기는 상기 정의된 바와 같은 아릴기이나, 단 환 구조 내에 1 내지 4개의 이종 원자를 가지는 것을 제외하고, "아릴 복소환" 또는 "이종방향족물"로도 칭해질 수 있다. 본원에 사용되는 "헤테로아릴"이란 용어는 탄소 원자 및 하나 이상의 이종 원자, 예를 들어 1 또는 1 내지 2 또는 1 내지 3 또는 1 내지 4 또는 1 내지 5 또는 1 내지 6개의 이종 원자, 또는 예를 들어¸ 질소, 산소 및 황으로 이루어진 군으로부터 선택되는 각기 독립적으로 선택되는 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 이종 원자로 이루어지는 안정한 5- 또는 6-원 단환식 또는 7-, 8-, 9-, 10-, 11- 또는 12-원 이환식 방향족 복소환식 환을 포함하는 것으로 한다. 질소 원자는 치환 또는 비치환될 수 있다(즉, N 또는 NR(여기서, R은 H 또는 상기 정의된 바와 같은 기타 치환기임)). 질소 및 황 이종 원자는 임의적으로 산화될 수 있다(즉, N→O 및 S(O)p(여기서, p = 1 또는 2임)). 방향족 복소환 내의 S 및 O 원의 총수는 1 이하임을 주목한다.
헤테로아릴기의 예에는 피롤, 푸란, 티오펜, 티아졸, 이소티아졸, 이미다졸, 트리아졸, 테트라졸, 피라졸, 옥사졸, 이속사졸, 피리딘, 피라진, 피리다진, 피리미딘 등이 포함된다.
또한, "아릴" 및 "헤테로아릴"이란 용어는 다환식 아릴 및 헤테로아릴기, 예를 들어 삼환식, 이환식, 예를 들어 나프탈렌, 벤족사졸, 벤조디옥사졸, 벤조티아졸, 벤조이미다졸, 벤조티오펜, 메틸렌디옥시페닐, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 나프티리딘, 인돌, 벤조푸란, 퓨린, 벤조푸란, 데아자퓨린, 인돌리진이 포함된다.
다환식 방향족 환의 경우, 환들 중 단 하나만이 방향족일 필요가 있으나(예를 들어, 2,3-디히드로인돌), 환들 모두가 방향족일 수 있다(예를 들어, 퀴놀린). 두 번째 환도 또한 축합 또는 가교될 수 있다.
아릴 또는 헤테로아릴 방향족 환은 하나 이상의 환 위치에서 상기 기재된 바와 같은 치환기들, 예를 들어 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 히드록실, 알콕시, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐옥시, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 알킬카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 아르알킬아미노카르보닐, 알케닐아미노카르보닐, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 아르알킬카르보닐, 알케닐카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 인산염, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카르바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 술프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 술페이트, 알킬술피닐, 술포네이토, 술파모일, 술폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 이종방향족 부분구조로 치환될 수 있다. 아릴기는 또한 시스템 다환식 계(예를 들어, 테트랄린, 메틸렌디옥시페닐)를 형성하기 위해 방향족이 아닌 지환족 또는 복소환식 환과 융합 또는 가교될 수도 있다.
본원에 사용되는 "탄소환" 또는 "탄소환식 환"은 포화, 불포화, 또는 방향족일 수 있는, 특정 탄소수를 가지는 임의의 안정된 단환식, 이환식 또는 삼환식 환을 포함하는 것으로 한다. 예를 들어, C3-C14 탄소환은 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 또는 14의 탄소수를 가지는 단환식, 이환식 또는 삼환식 환을 포함하는 것으로 한다. 탄소환의 예에는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로부테닐, 시클로펜틸, 시클로펜테닐, 시클로헥실, 시클로헵테닐, 시클로헵틸, 시클로헵테닐, 아다만틸, 시클로옥틸, 시클로옥테닐, 시클로옥타디에닐, 플루오레닐, 페닐, 나프틸, 인다닐, 아다만틸 및 테트라히드로나프틸이 포함되나 이들에 국한되지 않는다. 가교 환이 또한 탄소환의 정의에 포함되며, 이에는 예를 들어 [3.3.0]비시클로옥탄, [4.3.0]비시클로노난, [4.4.0]비시클로데칸및 [2.2.2]비시클로옥탄이 포함된다. 가교 환은 하나 이상의 탄소 원자가 비인접 탄소 원자를 연결할 때 발생된다. 한 실시양태에서, 가교 환은 1 또는 2의 탄소수를 가진다. 가교는 항상 단환식 환을 삼환식 환으로 전환함을 주목한다. 환이 가교될 때, 환에 대해 언급된 치환기가 가교 상에 존재할 수도 있다. 축합 환(예를 들어, 나프틸, 테트라히드로나프틸) 및 스피로 환도 또한 포함된다.
본원에 사용되는 "복소환"은 하나 이상의 환 이종 원자(예를 들어, N, O 또는 S)를 포함하는 임의의 환 구조(포화 또는 부분 불포화)를 포함한다. 복소환의 예에는 모르폴린, 피롤리딘, 테트라히드로티오펜, 피페리딘, 피페라진 및 테트라히드로푸란이 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
복소환기의 예에는 아크리디닐, 아조시닐, 벤지이미다졸릴, 벤조푸라닐, 벤조티오푸라닐, 벤조티오페닐, 벤족사졸릴, 벤족사졸리닐, 벤즈티아졸릴, 벤즈트리아졸릴, 벤즈테트라졸릴, 벤즈이속사졸릴, 벤즈이소티아졸릴, 벤즈이미다졸리닐, 카르바졸릴, 4aH-카르바졸릴, 카르볼리닐, 크로마닐, 크로메닐, 신놀리닐, 데카히드로퀴놀리닐, 2H,6H-1,5,2-디티아지닐, 디히드로푸로[2,3-b]테트라히드로푸란, 푸라닐, 푸라자닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸리닐, 이미다졸릴, 1H-인다졸릴, 인돌닐, 인돌리닐, 인돌리지닐, 인돌릴, 3H-인돌릴, 이사티노일, 이소벤조푸라닐, 이소크로마닐, 이소인다졸릴, 이소인돌릴, 이소인돌릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 메틸렌디옥시페닐, 모르폴리닐, 나프티리디닐, 옥타히드로이소퀴놀리닐, 옥사디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,2,5-옥사디아졸릴, 1,3,4-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸5(4H)-온, 옥사졸리디닐, 옥사졸릴, 옥신돌릴, 피리미디닐, 페난트리디닐, 페난트롤리닐, 페나지닐, 페노티아지닐, 페녹사티닐, 페녹사지닐, 프탈라지닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피레리도닐, 4-피페리도닐, 피페로닐, 프테리디닐, 퓨리닐, 피라닐, 피라지닐, 피라졸리디닐, 피라졸리닐, 피라졸릴, 피라지닐, 피리도옥사졸, 피리도이미다졸, 피리도티아졸, 피리디닐, 피리딜, 피리미디닐, 피롤리디닐, 피롤리닐, 2H-피롤릴, 피롤릴, 퀴나졸리닐, 퀴놀리닐, 4H-퀴놀리지닐, 퀴녹살리닐, 퀴누클리디닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라졸릴, 6H-1,2,5-티아디아지닐, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1,2,5-티아디아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 티안트레닐, 티아졸릴, 티에닐, 티에노티아졸릴, 티에노옥사졸릴, 티에노이미다졸릴, 티오페닐, 트리아지닐, 1,2,3-트리아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,2,5-트리아졸릴, 1,3,4-트리아졸릴 및 잔테닐이 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
본원에 사용되는 "치환된"이란 용어는 표시된 원자 상의 임의의 하나 이상의 수소 원자가 지정된 기들로부터 선택된 것으로 치환되고, 단 표시된 원자의 정상 원자가가 초과되지 않음을 의미하고, 또한 치환이 안정된 화합물을 초래함을 의미한다. 치환기가 옥소 또는 케토(즉, =O)일 때, 원자 상의 2개의 수소 원자가 치환된다. 케토 치환기가 방향족 부분구조 상에 존재하지 않는다. 본원에 사용되는 환 이중 결합은 2개의 인접한 환 원자들 간에 형성된 이중 결합(예를 들어, C=C, C=N 또는 N=N)이다. "안정된 화합물" 및 "안정된 구조"는 반응 혼합물로부터의유용한 순도로의 단리 및 효능적 치료제로의 제형에도 생존할 수 있도록 충분히 강한 화합물을 가리키는 것으로 의미된다.
치환기로의 결합이 환 내 2개의 원자들을 연결하는 교차 결합을 나타내는 경우, 그러한 치환기는 환 내 임의의 원자에 결합될 수 있다. 치환기가 그 치환기가 소정의 화학식의 화합물 나머지에 결합될 때 경유하게 되는 원자를 나타내지 않고 열거될 때, 그 치환기는 그 화학식 내 임의의 원자를 통해 결합될 수 있다. 치환기 및/또는 변수의 조합이 허용가능하나, 단 그러한 조합이 안정된 화합물을 초래할 경우에 그러하다.
임의의 변수(예를 들어, R1)가 화합물에 대한 임의의 구성요소 또는 화학식에서 1회 초과 나타나면, 그것의 정의는 각 경우에 다른 모든 경우들에 대해 독립적이다. 따라서, 예를 들어 한 기가 0-2 R1 부분구조로 치환된 것으로 나타날 경우, 그 기는 2개 이하의 R1 부분구조로 임의로 치환될 수 있고, 각 경우의 R1은 각기 독립적으로 R1의 정의로부터 선택된다. 또한, 치환기 및/또는 변수의 조합이 허용가능하나, 단 그러한 조합이 안정된 화합물을 초래할 경우에 그러하다.
"히드록시" 또는 "히드록실"이란 용어는 -OH 또는 -O-를 가지는 기를 포함한다.
본원에 사용되는 "할로" 또는 "할로겐"이란 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도를 지칭한다. "과할로겐화된"이란 용어는 일반적으로 모든 수소 원자들이 할로겐 원자로 치환된 부분구조를 지칭한다. "할로알킬" 또는 "할로알콕실"이란 용어는 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 알킬 또는 알콕실을 지칭한다.
"카르보닐"이란 용어는 이중 결합으로 산소 원자에 연결된 탄소를 함유하는 화합물 및 부분구조를 지칭한다. 카르보닐을 포함하는 부분구조의 예에는 알데히드, 케톤, 카르복실산, 아미드, 에스테르, 무수물 등이 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
"카르복실"이란 용어는 -COOH 또는 이의 C1-C6 알킬 에스테르를 지칭한다.
"아실"은 아실 라디칼(R-C(O)-) 또는 카르보닐기를 함유하는 부분구조를 포함한다. "치환된 아실"은 수소 원자들 중 하나 이상이, 예를 들어 알킬기, 알키닐기, 할로겐, 히드록실, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐옥시, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 알콕실, 인산염, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카르바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 술프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 술페이트, 알킬술피닐, 술포네이토, 술파모일, 술폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 이종방향족 부분구조로 치환된 아실기를 포함한다.
"아로일"은 아릴 또는 이종방향족 부분구조가 카르보닐기에 결합되어 있는 부분구조를 포함한다. 아로일기의 예에는 페닐카르복시, 나프틸 카르복시 등이 포함된다.
"알콕시알킬," "알킬아미노알킬," 및 "티오알콕시알킬"은 산소, 질소, 또는 황 원자는 하나 이상의 탄화수소 골격 탄소 원자를 치환하고 있는 상기 기재된 바와 같은 알킬기를 포함한다.
"알콕시" 또는 "알콕실"이란 용어는 산소 원자에 공유 연결된, 치환된 및 비치환된 알킬, 알케닐 및 알키닐기를 포함한다. 알콕시기 또는 알콕실 라디칼의 예에는메톡시기, 에톡시기, 이소프로필옥시기, 프로폭시기, 부톡시기 및 펜톡시기가 포함되나 이들에 국한되지 않는다. 치환된 알콕시기의 예에는 할로겐화 알콕시기가 포함된다. 알콕시기는 알케닐, 알키닐, 할로겐, 히드록실, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐옥시, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 알콕실, 인산염, 포스포네이토, 포스피네이토, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노, 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카르바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 술프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 술페이트, 알킬술피닐, 술포네이토, 술파모일, 술폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 이종방향족 부분구조와 같은 기로 치환될 수 있다. 할로겐으로 치환된 알콕시기의 예에는 플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 트리플루오로메톡시, 클로로메톡시, 디클로로메톡시 및 트리클로로메톡시가 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
"에테르" 또는 "알콕시"라는 용어는 2개의 탄소 원자 또는 이종 원자에 결합된 산소를 함유하는 화합물 또는 부분구조를 포함한다. 예를 들어, 상기 용어는 알킬기에 공유 결합된 산소 원자에 공유 결합된 알킬, 알케닐, 또는 알키닐기를 가리키는 "알콕시알킬"을 포함한다.
"에스테르"라는 용어는 카르보닐기의 탄소에 결합된 산소 원자에 결합된 탄소 또는 이종 원자를 함유하는 화합물 또는 부분구조를 포함한다. "에스테르"라는 용어는 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐, 프로폭시카르보닐, 부톡시카르보닐, 펜톡시카르보닐 등과 같은 알콕시카르복시기를 포함한다.
"티오알킬"라는 용어는 황 원자에 연결된 알킬기를 함유하는 화합물 또는 부분구조를 포함한다. 티오알킬기는 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로겐, 히드록실, 알킬카르보닐옥시, 아릴카르보닐옥시, 알콕시카르보닐옥시, 아릴옥시카르보닐옥시, 카르복실레이트, 카르복시산, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알콕시카르보닐, 아미노카르보닐, 알킬아미노카르보닐, 디알킬아미노카르보닐, 알킬티오카르보닐, 알콕실, 아미노(알킬아미노, 디알킬아미노, 아릴아미노, 디아릴아미노 및 알킬아릴아미노를 포함함), 아실아미노(알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카르바모일 및 우레이도를 포함함), 아미디노, 이미노, 술프히드릴, 알킬티오, 아릴티오, 티오카르복실레이트, 술페이트, 알킬술피닐, 술포네이토, 술파모일, 술폰아미도, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, 아지도, 헤테로시클릴, 알킬아릴, 또는 방향족 또는 이종방향족 부분구조과 같은 기로 치환될 수 있다.
"티오카르보닐" 또는 "티오카르복시"라는 용어는 이중 결합로 황 원자에 연결된 탄소를 함유하는 화합물 및 부분구조를 포함한다.
"티오에테르"란 용어는 2개의 탄소 원자 또는 이종 원자에 결합된 황 원자를 함유하는 부분구조를 포함한다. 티오에테르의 예에는 알크티오알킬, 알크티오알케닐, 및 알크티오알키닐이 포함되나 이들에 국한되지 않는다. "알크티오알킬"의 예에는 알킬, 알케닐, 또는 알키닐기가 알킬기에 결합된 황 원자에 결합된 부분구조가 포함된다. 유사하게, "알크티오알케닐"이란 용어는 알킬, 알케닐 또는 알키닐기이 알케닐기에 공유 결합된 황 원자에 결합된 부분구조를 지칭하고; "알크티오알키닐"은 알킬, 알케닐 또는 알키닐기가 알키닐기에 공유 결합된 황 원자에 결합된 부분구조가 포함된다.
본원에 사용되는 "아민" 또는 "아미노"는 비치환된 또는 치환된 -NH2를 지칭한다. "알킬아미노"는 -NH2의 질소가 하나 이상의 알킬기에 결합된 화합물의 기를 포함한다. 알킬아미노기의 예에는 벤질아미노, 메틸아미노, 에틸아미노, 페네틸아미노 등이 포함된다. "디알킬아미노"에는 -NH2의 질소가 2개 이상의 부가 알킬기에 결합된 기가 포함된다. 디알킬아미노기의 예에는 디메틸아미노 및 디에틸아미노가 포함되나 이들에 국한되지 않는다. "아릴아미노" 및 "디아릴아미노"에는 질소가 1 또는 2개 이상의 아릴기에 각기 결합된 기가 포함된다. "아미노아릴" 및 "아미노아릴옥시"는 아미노로 치환된 아릴 및 아릴옥시를 지칭한다. "알킬아릴아미노," "알킬아미노아릴" 또는 "아릴아미노알킬"은 하나 이상의 알킬기 및 하나 이상의 아릴기에 결합된 아미노기를 지칭한다. "알크아미노알킬"은 알킬기에 역시 결합된 질소 원자에 결합된 알킬, 알케닐, 또는 알키닐기를 지칭한다. "아실아미노"에는 질소가 아실기에 결합된 기가 포함된다. 아실아미노의 예에는 알킬카르보닐아미노, 아릴카르보닐아미노, 카르바모일 및 우레이도기가 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
"아미드" 또는 "아미노카르복시"란 용어는 카르보닐 또는 티오카르보닐기의 탄소에 결합된 질소 원자를 함유하는 화합물 또는 부분구조를 포함한다. 상기 용어는 카르보닐 또는 티오카르보닐기의 탄소에 결합된 아미노기에 결합된 알킬, 알케닐 또는 알키닐기를 포함하는 "알크아미노카르복시"기를 포함한다. 그것은 또한 카르보닐 또는 티오카르보닐기의 탄소에 결합된 아미노기에 결합된 아릴 또는 헤테로아릴 부분구조를 포함하는 "아릴아미노카르복시"기를 포함한다. "알킬아미노카르복시", "알케닐아미노카르복시", "알키닐아미노카르복시" 및 "아릴아미노카르복시"란 용어는 알킬, 알케닐, 알키닐 및 아릴 부분구조가 각기 질소 원자에 결합되고, 이는 다시 카르보닐기의 탄소에 결합되는 부분구조를 포함한다. 아미드는 직쇄 알킬, 분지쇄 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 또는 복소환과 같은 치환기로 치환될 수 있다. 아미드기 상의 치환기는 추가 치환될 수 있다.
질소를 함유하는 본 발명의 화합물은 산화제(예를 들어, 3-클로로퍼옥시벤조산(mCPBA) 및/또는 과산화수소)를 이용한 처리로 N-산화물로 전환되어, 다른 본 발명의 화합물을 제공할 수 있다. 따라서, 나타내고 청구된 모든 함질소 화합물은, 원자가 및 구조에 의해 허용되는 한, 나타낸 바와 같은 화합물 및 이의 N-산화물 유도체(N→O 또는 N+-O-로 표시될 수 있음)를 포함하는 것으로 간주된다. 또한, 다른 예로서, 본 발명의 화합물 내의 질소는 N-히드록시 또는 N-알콕시 화합물로 전환될 수 있다. 예를 들어, N-히드록시 화합물은 m-CPBA와 같은 산화제에 의해 모(parent) 아민의산화에 의해 제조될 수 있다. 나타내고 청구된 모든 함질소 화합물은, 원자가 및 구조에 의해 허용되는 한, 나타낸 바와 같은 화합물 및 이의 N-히드록시 (즉, N-OH) 및 N-알콕시 (즉, N-OR(여기서, R은 환된 또는 비치환된 C1-C 6 알킬, C1-C6　알케닐, C1-C6 알키닐, 3-14-원 탄소환 또는 3-14-원 복소환임) 유도체를 포함하는 것으로 간주된다.
본 명세서에서, 화합물의 구조식은 일부 경우에 편의상 일부 이성질체를 나타내나, 본 발명은 모든 이성질체, 예컨대 기하 이성질체, 비대칭 탄소에 기초한 광학 이성질체, 입체 이성질체, 호변체 등을 포함한다. 또한, 화학식에 의해 나타낸 화합물에 대해 결정 다형체가 존재할 수 있다. 임의의 결정형, 결정형 혼합물, 또는 이들의 무수물 또는 수화물이 본 발명의 범주 내에 포함된다. 또한, 생체내 본 화합물의 분해에 의해 생성되는 소위 대사물도 본 발명의 범주 내에 포함됨을 주목한다.
"이성질화"는 분자 화학식은 동일하나 원자의 결합 순서 또는 공간 내 원자의 배열이 상이한 화합물을 의미한다. 공간 내 원자의 배열은 "입체이성질체"로 칭해진다. 서로에 대해 거울상이 아닌 입체이성질체는 "부분입체 이성질체"로 칭해지고, 서로에 대해 겹쳐지지 않는 입체 이성질체는 "거울이성질체" 또는 경우에 따라서는 광학 이성질체로 칭해진다. 키랄성이 상반되는 동등량의 개별 거울이성질체 형태들을 포함하는 혼합물은 "라세미 혼합물"로 칭해진다.
동일하지 않는 치환기에 결합된 탄소 원자는 "키랄 중심"으로 칭해진다.
"키랄 이성질체"는 하나 이상의 키랄 중심을 가지는 화합물을 의미한다. 하나 초과의 키랄 중심을 가지는 화합물은 개별 부분입체이성질체 또는 "부분입체이성질체성 혼합물"로 칭해지는 부분입체이성질체들의 혼합물로서 존재할수 있다. 하나의 키랄 중심이 존재하는 경우, 입체 이성질체가 그 키랄 중심의 절대 형태(R 또는 S)에 의해 특징화될 수 있다. 절대 형태는 키랄 중심에 부착된 치환기의 공간 내 배열을 지칭한다. 고려되는 키랄 중심에 부착된 치환기는 문헌[Sequence Rule of Cahn, Ingold and Prelog. (Cahn et al., Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511; Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn and Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (London), 612; Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116)]에 따라 등급 분류된다.
"기하 이성질체"는 이중 결합 또는 시클로알킬 연결기(예를 들어, 1,3-시클로부틸) 주변의 장애 회전으로 인해 존재하게 되는 부분입체이성질체를 의미한다. 이 형태는 시스 및 트랜스, Z 및 E라는 접두 표현에 의해 그 이름이 구분되며, 혹은 이는 그 기가 칸-인골드-프레로그(Cahn-Ingold-Prelog) 법칙에 따라 분자 내의 이중 결합의 동일 또는 반대 측면에 있음을 가리킨다.
본 발명의 화합물은 상이한 키랄 이성질체 또는 기하 이성질체로 표시될 수 있음을 이해하도록 한다. 화합물이 키랄 이성질체성 또는 기하 이성질체성 형태를 가질 때, 모든 이성질체성 형태가 본 발명의 범주 내에 포함되도록 하고, 화합물의 명명은 어떠한 이성질체성 형태도 배재하지 않는 것도 이해하도록 한다.
예를 들어, 화학식 (I)의 화합물은 하기 키랄 이성질체 및 기하 이성질체의 것들을 포함한다.
Figure pct00069
Figure pct00070
또한, 본 발명에서 논의되는 구조 및 기타 화합물은 이의 모든 아트로픽 이성질체도 포함한다. "위축 이성질체"는 2개의 이성질체의 원자들이 공간 내 상이하게 배열되어 있는 입체 이성질체의 유형이다. 위축 이성질체는 중심 결합 주변에 큰 기가 회전하는 것이 방해됨으로써 유발되는 제한 회전으로 인해 존재하게 된다. 그러한 위축 이성질체는 통상 혼합물로서 존재하나, 최근 크로마토그래피 기술의 진보 결과, 선택의 경우, 2개의 위축 이성질체의 혼합물을 분리하는 것이 가능하게 되었다.
"호변체"는 평형 상태로 존재하고 한 이성질체성 형태에서 또 다른 이성질체성 형태로 바로 전환되는 2개 이상의 구조 이성질체들 중 하나이다. 이 전환은 인접 공액 잊우 결합의 교차가 동반되는 수소 원자의 정식 이동을 초래한다. 호변체는 용액 내 호변체성 세트의 혼합물로서 존재한다. 호변화가 가능한 용액에서, 호변체의 화학 평형이 도달되게 된다. 호변체의 정확한 비율은 온도, 용매 및 pH를 포함한 수가지 인자들에 의해 좌우된다. 호변화에 의해 상호 전환가능한 호변체의 개념은 호변성으로 칭해진다.
가능한 각종 유형의 호변성들 중, 2가지 통상 관찰된다. 케토-에톨 호변성에서는, 전자 및 수소 원자의 동시 이동이 일어난다. 환-쇄 호변성은 당쇄 분자 내의 알데히드기(-CHO)가 동일 분자 내 히드록시기(-OH) 중 하나와 반응하여 포도당에 의해 나타나게 되는 환식(환형) 형태를 수득함에 따른 결과로서 일어난다.
통상의 호변체성 쌍은 복소환식 환(예를 들어, 구나인, 티아민 및 시토신과 같은 뉴클레오염기) 내의 케톤-에놀, 아미드-니트릴, 락탐-락팀, 아미드-이미드산 호변성, 아민-엔아민 및 엔아민-엔아민이다. 벤즈이미다졸은 또한, 그 벤즈이미다졸이 4, 5, 6 또는 7 위치에 하나 이상의 치환기를 포함할 때 호변성을 나타내고, 상이한 이성질체의 가능성이 일어난다. 예를 들어, 2,5-디메틸-1H-벤조[d]이미다졸은 호변화를 통해 그것의 이성질체인 2,6-디메틸-1H-벤조[d]이미다졸과 평형을 이루어 존재할 수 있다.
Figure pct00071
호변화의 또 다른 예가 이하에 나와 있다:
Figure pct00072
본 발명의 화합물은 상이한 호변체로 표시될 수 있음을 이해하도록 한다. 화합물이 호변체성 형태를 가질 때, 모든 호변체성 형태가 본 발명의 범주 내에 포함되도록 하고, 화합물의 명명은 어떠한 호변체성 형태도 배재하지 않는 것도 이해하도록 한다.
"결정 다형체", "다형체" 또는 "결정형"이란 용어는 화합물(또는 이의 염 또는 용매화물)이 각기 모두 동일한 원자 조성을 가지는 상이한 결정 팩킹 배열로 결정화할 수 있는 결정 구조를 의미한다. 상이한 결정형은 주로 상이한 X-선 회절 패턴, 적외선 분광도, 융점, 밀도 경도, 결정 형상, 광학 및 전기 성질, 안정성 및 용해도를 가진다. 재결정화 용매, 결정화 속도, 저장 온도, 및 기타 인자들이 한 결정형이 우세하도록 할 수 있다. 화합물의 결정 다형체는 상이한 조건 하에서 결정화함으로써 제조될 수 있다.
본 발명의 화합물은 결정형, 반결정형, 비결정형, 부정형, 중간형 등일 수 있다.
화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)의 화합물은 화합물 자체, 및 적용가능한 경우에는 이의 N-산화물, 염, 이의 용매화물, 및 이의 프로드러그를 포함한다. 예를 들어 염은 치환된 퓨린 또는 7-데아자퓨린 화합물 상에 음이온과 양 하전 기(예를 들어, 아미노) 사이에 형성될 수 있다. 적당한 음이온에는 염화물, 브롬화물, 요오드화물, 황화물, 이황화물, 술팜산염, 질산염, 인산염, 시트르산염, 메탄술폰산염, 트리플루오로아세트산염, 글루탐산염, 글루쿠론산염, 글루타르산염, 말산염, 말레산염, 숙신산염, 푸마르산염, 주석산염, 토실산염, 살리실산염, 락트산염, 황산나프탈렌, 및 아세트산염이 포함된다. 마찬가지로, 염이 또한 치환된 퓨린 또는 7-데아자퓨린 화합물 상에 양이온과 음 하전 기(예를 들어, 카르복실레이트) 사이에 형성될 수 있다. 적당한 양이온에는 나트륨 이온, 칼륨 이온, 마그네슘 이온, 칼슘 이온, 및 암모늄 양이온, 예컨대 테트라메틸암모늄 이온이 포함된다. 치환된 퓨린 또는 7-데아자퓨린 화합물은 또한 대상에게 4급 질소 원자를 함유하는 상기 염들도 포함한다. 프로드러그의 예에는 에스테르 및 기타 약학적으로 허용가능한 유도체가 포함되고, 이는 대상에게 투여서 활성 치환된 퓨린 또는 7-데아자퓨린 화합물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 화합물, 예를 들어 상기 화합물의 염은 수화 또는 비수화(무수) 형태로서 또는 기타 용매 분자와의 용매화물로서 존재할 수 있다. 수화물의 비제한적 예에는 반수화물, 일수화물, 이수화물, 삼수화물 등이 포함된다. 용매화물의 비제한적 예에는 에탄올 용매화물, 아세톤 용매화물 등이 포함된다.
"용매화물"은 화학양론 또는 비화학양론 양의 용매를 함유하는 용매 부가 형태를 의미한다. 일부 화합물은 결정형 고체 상태의 용매 분자의 고정 몰비를 한정시키고, 용매화물을 형성하는 경향이 있다. 용매가 물인 경우, 형성된 용매화물은 수화물이고; 용매가 알코올인 경우, 형성된 용매화물은 알코올화물이다. 수화물은, 1 개 이상의 물 분자가 물이 H2O로서의 분자 상태로 잔류하는 1 개의 물질 분자가 조합함으로써 형성된다. 반수화물은, 1 개의 물 분자가 물이 H2O로서의 분자 상태로 잔류하는 1 개 초과의 물질 분자가 조합함으로써 형성된다.
본원에 사용되는 "유사체"라는 용어는 (한 원자의 다른 원소의 원자로의 치환, 또는 특정 작용기의 존재, 또는 한 작용기의 또 다른 작용기로의 치환에서와 같이) 구조적으로는 상호 유사하나 조성이 약간 상이한 화학 화합물을 지칭한다. 따라서, 유사체는 기능 및 외관에 있어서는 유사하거나 필적하나, 참조 화합물과는 구조 또는 기원이 상이한 화합물이다.
본원에 정의되는 "유도체"라는 용어는 공통된 코어 구조를 가지고 본원에 기재된 바와 같은 각종 기들로 치환된 화합물을 지칭한다. 예를 들어, 화학식 (I)로 표시되는 모든 화합물들은 치환된 퓨린 화합물 또는 치환된 7-데아자퓨린 화합물이고, 공통된 코어로서 화학식 (I)을 가진다.
"생물학적 동족체(bioisotere)" 라는 용어는 원자의 교환 또는 원자의 한 기가 또 다른, 대체로 유사한 원자 또는 원자 군으로의 교환으로 초래되는 화합물을 지칭한다. 생물학적 동족체성 치환의 목적은 모 화합물과 생물학적 성질이 유사한 신규 화합물을 창출하는 것이다. 생물학적 동족체성 치환은 생리화학적으로나 위상수학적으로 기초를 둔 것일 수 있다. 카르복실산 생물학적 동족체의 예에는 아실 술폰아미드, 테트라졸, 술폰산염 및 포스폰산염이 포함되나 이들에 국한되지 않는다. 예를 들어, 문헌[Patani and LaVoie, Chem. Rev. 96, 3147-3176, 1996]을 참조한다.
본 발명은 모 화합물에서 발생하는 원자의 모든 동위원소를 포함하는 것으로 한다. 동위원소는 동일한 원자가를 가지나 질량수는 상이한 것들을 포함한다. 일반적 예로서 또한 비제한적으로, 수소의 동위원소는 삼중수소 및 이중수소를 포함하고, 탄소의 동위원소는 C-13 및 C-14를 포함한다.
2. 치환된 퓨린 화합물 및 치환된 7-데아자퓨린 화합물의 합성
본 발명은 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 및 (IV)의 화합물의 합성 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 실시예에 나와 있는 바와 같은 하기 반응식에 따른, 본 발명의 개시된 각종 화합물들의 상세한 합성 방법을 제공한다.
전문에 걸쳐, 조성물이 특정 성분을 가지거나 포함하거나 함유하는 것으로 기재되는 경우, 이는 조성물이 또한 인용된 성분들로 본질적으로 구성되거나 이로 이루어진 것으로 사료된다. 마찬가지로, 방법 또는 공정이 특정 공정 단계를 가지거나, 포함하거나, 함유하는 것으로 기재되는 경우, 이는 공정이 또한 인용된 공정 단계들로 본질적으로 구성되거나 이로 이루어진 것으로 사료된다. 또한, 단계 순서 또는 일부 작용을 수행하기 위한 순서는, 본 발명이 작동가능하게 유지되는 한, 중요하지 않다. 또한, 2개 이상의 단계 또는 작용은 동시에 수행될 수 있다.
본 발명의 합성 공정에는 매우 다양한 작용기들이 허용될 수 있고, 이에 따라 각종 치환 출발 물질이 사용될 수 있다. 공정은 일반적으로 일부 예에서, 화합물을 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 또는 프로드러그로 추가로 전환시키는 것이 바람직할 수 있으나, 모든 공정의 종료 시에 또는 그 종료 부근에 요망되는 최종 화합물을 제공한다.
본 발명의 화합물은 당업계의 숙련가에게 공지되어 있거나, 본원의 교시 내용의 측면에서 당업자에게 자명한 표준 합성 방법 및 절차를 이용함으로써, 상업적으로 이용가능한 출발 물질, 문헌에 공지되어 있거나 용이하게 제조된 중간체로부터의 화합물을 이용하는 각종 방식들로 제조될 수 있다. 유기 분자의 제조 및 작용기 변환 및 조작을 위한 표준 합성 방법 및 절차가 관련 화학 문헌 또는 당 분야의 표준 지침서로부터 수득될 수 있다. 임의 하나 또는 수가지 출처에 제한되지 않으나, 본원에 참조 인용되는, 문헌[Smith, M. B., March, J., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structures, 5th edition, John Wiley & Sons: New York, 2001]]; 문헌[Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons: New York, 1999]; 문헌[R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); 문헌[L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); 및 문헌[L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)]과 같은 정통 문헌이 유용하고, 당업자에게 공지된 유기 합성 지침서로 인지된다. 합성 방법에 대한 하기 기재는 본 발명의 화합물의 제조를 위한 일반 절차를 설명하기 위한 것이나, 제한하고자 함은 아니다.
본 발명의 화합물은 당업계의 숙련가에게 자명한 각종 방법들에 의해 편리하게 제조될 수 있다. 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 및 (IV)를 가지는 본 발명의 화합물은 상업적으로 허용가능한 출발 물질 또는 문헌 절차를 이용하여 제조될 수 있는 출발 물질을 이용하여 하기 반응식 A 내지 W에 설명된 절차에 따라 제조될 수 있다. 반응식 A 내지 P에서의 R기(예컨대, R, R' 및 Ra)는 달리 명시되지 않는 한, 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 또는 (IV)에 정의된 바와 같은 변수(즉, R1, R2, Rb, 및 Rc)에 상응할 수 있다. 화학식 내 "PG"는 보호기를 지칭한다.
당업계의 통상의 숙련가는 본원에 기재된 반응 순서 및 합성 반응식 동안, 예를 들어 보호기의 도입 및 제거와 같이 일부 단계의 순서가 변경될 수 있음을 주지할 것이다.
당업계의 통상의 숙련가는 보호기의 사용을 통해 반응으로부터 보호를 필요로 할 수 있음을 인식할 것이다. 보호기는 또한 분자 내 유사한 작용기를 구분하는 데 사용될 수도 있다. 보호기 목록 및 이들 기의 도입 및 제거 방법은 문헌[Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons: New York, 1999]에서 찾아볼 수 있다.
바람직한 보호기에는 하기의 것들이 포함되나 이들에 국한되지 않는다:
히드록실 부분구조의 경우: TBS, 벤질, THP, Ac
카르복실산의 경우: 벤질 에스테르, 메틸 에스테르, 에틸 에스테르, allyl 에스테르
아민의 경우: Cbz, BOC, DMB
디올의 경우: Ac(x2) TBS(x2), 또는 아세토나이드와 조합 시
티올의 경우: Ac
벤즈이미다졸의 경우: SEM, 벤질, PMB, DMB
알데히드의 경우: 디알킬 아세탈, 예컨대 디메톡시 아세탈 또는 디에틸 아세틸.
본원에 기재된 반응 반응식에서, 다중 입체 이성질체가 생성될 수 있다. 특정 입체 이성질체가 표시되지 않는 한, 반응으로부터 생성될 수 있는 모든 가능한 입체 이성질체를 의미하는 것으로 이해된다. 당업계 숙련가는 반응은 한 이성질체가 우선적으로 생성되도록 최적화될 수 있거나, 신규 반응식이 단일 이성질체를 생성하도록 창안될 수 있도록 인식할 것이다. 혼합물이 생성될 경우, 분취 박층 크로마토그래피, 분취 HPLC, 분취 키랄 HPLC, 또는 분취 SFC와 같은 기법이 사용되어, 이성질체를 분리할 수 있다.
하기 약어들이 명세서 전반에 걸쳐 사용되고, 이하 정의되어 있다:
AA 아세트산암모늄
Ac 아세틸
ACN 아세토니트릴
AcOH 아세트산
atm 대기
Bn 벤질
BOC tert-부톡시카르보닐
BOP (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로인산염
Cbz 벤질옥시카르보닐
COMU (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로인산염
d 일(days)
DBU 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔
DCE 1,2 디클로로에탄
DCM 디클로로메탄
DEA 디에틸아민
DEAD 디에틸 아조디카르복실레이트
DIAD 디이소프로필 아조디카르복실레이트
DiBAL-H 수소화디이소부틸알루미늄
DIPEA N,N-디이소프로필에틸아민(후니히 염기)
DMAP N,N-디메틸-4-아미노피리딘
DMB 2,4-디메톡시벤질
DMF 디메틸포름아미드
DMSO 디메틸술폭시드
DPPA 디페닐포스포릴 아지드
EA 또는 EtOAc 아세트산에틸
EDC 또는 EDCI N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드
ELS 증발 광 산란
ESI- 전기분무 음성 모드
ESI+ 전기분무 양성 모드
Et2O 디에틸 에테르
Et3N 또는 TEA 트리에틸아민
EtOH 에탄올
FA 포름산
FC 플래쉬 크로마토그래피
h 시간
H2O 물
HATU O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로인산염
HCl 염산
HOAT 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸
HOBt 1-히드록시벤조트리아졸
HOSu N-히드록시숙신이미드
HPLC 고성능 액체 크로마토그래피
Inj. Vol. 주사 체적
I.V. 또는 IV 정맥
KHMD 칼륨 헥사메틸디실라지드
LC/MS 또는 LC-MS 액체 크로마토그래피 질량 스펙트럼
LDA 리튬 디이소프로필아미드
LG 이탈기
LiHMs 리튬 헥사메틸디실라지드
M 몰
m/z 질량/전하 비
m-CPBA 메타-클로로퍼벤조산
MeCN 아세토니트릴
MeOD d4-메탄올
MeOH 메탄올
MgSO4 황산마그네슘
min 분(minutes)
MS 질량 분광법 또는 질량 스펙트럼
Ms 메실
MsCl 염화메탄술포닐
MsO 메실레이트
MWI 초음파 조사
Na2CO3 탄산나트륨
NaHCO3 중탄산나트륨
NaHMDs 나트륨 헥사메틸디실라지드
NaOH 수산화나트륨
NIS N-요오도숙신이미드
NMR 핵 자기 공명
o/n 또는 O/N 하룻밤동안
PE 석유 에테르
PG 보호기
PMB 파라-메톡시벤질
PPAA 1-프로판포스폰산 환식 무수물
ppm 백만분율(parts per million)
prep HPLC 분취 고성능 액체 크로마토그래피
prep TLC 분취 박층 크로마토그래피
p-TsOH 파라-톨루엔술폰산
rt 또는 RT 실온
SEM 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸
SEMCl 염화(트리메틸실릴)에톡시메틸
SFC 초임계 크로마토그래피
SGC 실리카 겔 크로마토그래피
STAB 트리아세톡시수소화붕소화나트륨
TBAF 불화테트라-n-부틸암모늄
TFA 트리플루오로아세트산
TfO 트리플레이트(triflates)
THF 테트라히드로푸란
THP 테트라히드로피란
TLC 박층 크로마토그래피
Ts 토실
TsOH 토식산
UV 자외선
본 발명은 본 발명의 화합물의 제조 방법을 제공한다. 하기 반응식은 본 발명의 화합물의 합성에 유용한 예시적 화학 공정을 나타낸다.
반응식 A: 5'-아미노 퓨린 리보스(A-V) 합성
Figure pct00073
상기 반응식 A에 나타낸 바와 같이, 5'-아미노 퓨린-리보스 중간체(A-V)가 합성될 수 있다. 보호된 적당한 6-Cl 아데노신 유도체(A-I)는 MeCN 또는 DMF, THF, iPrOH 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서 Et3N, K2CO3 또는 후니히 염기와 같은 염기의 존재 하에 적절한 아민(암모니아 포함)을 이용한 처리에 의해 6-아미노 유도체(A-II)로 전환된다. 필요한 경우, 반응은 100℃로 가열될 수 있다(필요 온도가 혼합물 내 성분들 중 하나 이상의 비점 초과인 경우, 반응은 밀봉관 내에서 수행될 수 있다). 반응식 내의 R기는 알킬 보호기(예를 들어, 2,4-디메톡시벤질)를 나타낼 수 있다. 6-아미노 생성물(A-II)은 CH2Cl2, THF, MeCN, DMF 또는 이들의 혼합물과 같은 불활성 용매 중에서 Et3N, 피리딘 또는 K2CO3과 같은 염기의 존재 하에 염화메탄술포닐(MsCl)을 이용한 처리에 의해 5'-히드록실기를 MsO(즉, CH3S(O)2O)와 같은 이탈기로 전환시킴으로써 5'-아지도 중간체(A-III)로 변환될 수 있다. 이어서, 5'-이탈기는 DMF와 같은 불활성 용매 중에서 NaN3로부터의 아지드 음이온으로 대체된다. 대안적으로, (A-II)는 THF와 같은 용매 중에서 DPPA, Ph3P, 및 DIAD를 이용한 처리에 의해 (A-III)로 직접 변환될 수 있다. (A-III)의 아지도기는 금속 촉매(예를 들어 Pd/C, PtO2)의 존재 하에서의 H2를 이용한 환원에 의해, 혹은 Ph3P 또는 PMe3과 같은 포스핀을 이용한 슈타우딩거(Staudinger) 반응에 의해 일차 아민(A-IV)으로 환원될 수 있다. 일차 아민(A-IV)은 NaBH(OAc)3 또는 NaCNBH3과 같은 적당한 환원제의 존재 하에 적절한 케톤 또는 알데히드를 이용한 처리에 의해 이차 아민(A-V)으로 전환될 수 있다. Ti(OiPr)4와 같은 부가적 제제가 첨가될 수 있다.
대안적으로, 5'-히드록시 중간체(A-II)는 THF와 같은 불활성 용매 중에서 술폰아미드(A-VI), DEAD 및 Ph3P로 처리될 수 있다. 생성되는 술폰아미드 생성물은 K2CO3, Cs2CO3과 같은 염기의 존재 하에 벤젠티올로 처리되어, 이차 아민(A-V)이 제공될 수 있다.
이들 상기 반응 순서는 또한 (A-VII)로부터 출발하는 자일로스 유도체에 적용되어, 5' 위치에 반대 형태를 가지는 부분입체이성질체가 제공될 수 있다.
Figure pct00074
상기 2'-데옥시, 또는 3'-데옥시, 또는 치환된 리보스 또는 자일로스(A-VIII)에 대해 유사 세트의 반응 순서를 이용하여, 5'-아미노 퓨린-리보스/자일로스 중간체가 수득될 수 있다.
이하에 나타낸 바와 같은, 6-NH2 기의 도입을 위한 한 대안 방법은 (A-IX) 유도체를 NaN3로 처리하여 6-아지도 중간체를 생성시킨 후, PMe3 또는 PPh3과 같은 트리알킬포스핀을 이용하여 NH2 부분구조(A-X)로 환원시킴에 의한 것이다:
Figure pct00075
반응식 B: 5' 아미노 7-데아자퓨린 리보스 합성
Figure pct00076
상기 반응식 B에 나타낸 바와 같이, 5'-아미노-7-데아자퓨린-리보스 중간체(B-V)가 합성될 수 있다. 6-클로로 치환기(B-I)를 함유하는, 보호된 적당한 7-데아자퓨린-리보스 중간체는 MeCN 또는 DMF, THF, iPrOH 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서 Et3N, K2CO3 또는 후니히 염기와 같은 염기의 존재 하에 적절한 아민(암모니아 포함)을 이용한 처리에 의해 6-아미노 유도체(B-II)로 전환된다. 필요한 경우, 반응은 100℃로 가열될 수 있다(필요 온도가 혼합물 내 성분들 중 하나 이상의 비점 초과인 경우, 반응은 밀봉관 내에서 수행될 수 있다). 반응식 내의 R기는 알킬 보호기(예를 들어, 2,4-디메톡시벤질)를 나타낼 수 있다. 6-아미노 생성물(B-II)은 CH2Cl2, THF, MeCN, DMF 또는 이들의 혼합물과 같은 불활성 용매 중에서 Et3N, 피리딘 또는 K2CO3과 같은 염기의 존재 하에 염화메탄술포닐(MsCl)을 이용한 처리에 의해 5'-히드록실기를 MsO(즉, CH3S(O)2O)와 같은 이탈기로 전환시킴으로써 5'-아지도 중간체(B-III)로 변환될 수 있다. 이어서, 5'-이탈기는 DMF와 같은 불활성 용매 중에서 NaN3로부터의 아지드 음이온으로 대체된다. 대안적으로, (B-II)는 THF와 같은 용매 중에서 DPPA, Ph3P, 및 DIAD를 이용한 처리에 의해 (B-III)로 직접 변환될 수 있다. (B-III)의 아지도기는 금속 촉매(예를 들어 Pd/C, PtO2)의 존재 하에서의 H2를 이용한 환원에 의해, 혹은 Ph3P 또는 PMe3과 같은 포스핀을 이용한 슈타우딩거 반응에 의해 일차 아민(B-IV)으로 환원될 수 있다. 일차 아민(B-IV)은 NaBH(OAc)3 또는 NaCNBH3과 같은 적당한 환원제의 존재 하에 적절한 케톤 또는 알데히드를 이용한 처리에 의해 이차 아민(B-V)으로 전환될 수 있다. Ti(OiPr)4와 같은 부가적 제제가 첨가될 수 있다. 대안적으로, 5'-히드록시 중간체(B-II)는 THF와 같은 불활성 용매 중에서 술폰아미드(B-VI), DEAD 및 Ph3P로 처리될 수 있다. 생성되는 술폰아미드 생성물은 K2CO3, Cs2CO3과 같은 염기의 존재 하에 벤젠티올로 처리되어, 이차 아민(B-V)이 제공될 수 있다. 이들 상기 반응 순서는 또한 (B-VII)로부터 출발하는 자일로스 유도체에 적용되어, 5' 위치에 반대 형태를 가지는 부분입체이성질체가 제공될 수 있다.
Figure pct00077
상기 2'-데옥시, 또는 3'-데옥시, 또는 치환된 리보스 또는 자일로스(B-VIII)에 대해 유사 세트의 반응 순서를 이용하여, 5'-아미노 7-데아자퓨린-리보스/자일로스 중간체가 수득될 수 있다.
이하 나타낸 바와 같은, 6-NH2 기의 도입을 위한 한 대안 방법은 (B-IX) 유도체를 NaN3로 처리하여 6-아지도 중간체를 생성시킨 후, PMe3 또는 PPh3과 같은 트리알킬포스핀을 이용하여 NH2 부분구조 (B-X)로 환원시킴에 의한 것이다:
Figure pct00078
반응식 C: 퓨린-탄소환식 중간체 합성
Figure pct00079
상기 반응식 C에 나타낸 바와 같이, 5'-아미노 퓨린 탄소환식 중간체(C-X)가 제조될 수 있다. 시클로펜탄(C-I)은 임의적으로 당업계의 통상의 숙련가에게 공지된 방법에 의해 보호되어, (C-II)를 제공한다. (C-II)은 n-부탄올과 같은 양성자성 용매 중에서 Et3N과 같은 염기의 존재 하에 적절한 4,6-디클로로피리미딘-5-아민으로 처리된다. 반응은 가열되거나 초음파 조건에 적용되어, 중간체(C-III)를 제공한다. 퓨린 중간체(C-V)는 산, 예컨대 AcOH의 존재 하에 (C-III)를 오르토에스테르(C-IV)로 처리함으로써 생성된다. 반응은 통상 가열된다. 6-아미노 치환기는 MeCN 또는 DMF, THF, iPrOH, 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서 Et3N, K2CO3 또는 후니히 염기와 같은 염기의 존재 하에 적절한 아민(암모니아 포함)을 이용한 처리에 의해 도입될 수 있다. 필요한 경우, 반응은 100℃로 가열될 수 있다(필요 온도가 혼합물 내 성분들 중 하나 이상의 비점 초과인 경우, 반응은 밀봉관 내에서 수행될 수 있다). 반응식 내의 R기는 알킬 보호기(예를 들어, 2,4-디메톡시벤질)를 나타낼 수 있다. 6-아미노 생성물(C-VI)은 CH2Cl2, THF, MeCN, DMF 또는 이들의 혼합물과 같은 불활성 용매 중에서 Et3N, 피리딘 또는 K2CO3과 같은 염기의 존재 하에 염화메탄술포닐(MsCl)을 이용한 처리에 의해 5'-히드록실기를 MsO(즉, CH3S(O)2O)와 같은 이탈기로 전환시킴으로써 5'-아지도 중간체(C-VII)로 변환될 수 있다. 이어서, 5'-이탈기는 DMF와 같은 불활성 용매 중에서 NaN3로부터의 아지드 음이온으로 대체된다. 대안적으로, (C-VI)는 THF와 같은 용매 중에서 DPPA, Ph3P, 및 DIAD를 이용한 처리에 의해 (C-VII)로 직접 변환될 수 있다. (C-III)의 아지도기는 금속 촉매(예를 들어 Pd/C, PtO2)의 존재 하에서의 H2를 이용한 환원에 의해, 혹은 Ph3P 또는 PMe3과 같은 포스핀을 이용한 슈타우딩거 반응에 의해 일차 아민(C-VIII)으로 환원될 수 있다. 일차 아민(C-IV)은 NaBH(OAc)3 또는 NaCNBH3과 같은 적당한 환원제의 존재 하에 적절한 케톤 또는 알데히드를 이용한 처리에 의해 이차 아민(C-X)으로 전환될 수 있다. Ti(OiPr)4와 같은 부가적 제제가 첨가될 수 있다. 대안적으로, 5'-히드록시 중간체(C-VI)는 THF와 같은 불활성 용매 중에서 술폰아미드(C-IX), DEAD 및 Ph3P로 처리될 수 있다. 생성되는 술폰아미드 생성물은 K2CO3, Cs2CO3과 같은 염기의 존재 하에 벤젠티올로 처리되어, 이차 아민(C-X)이 제공될 수 있다.
반응식 D: 7-데아자퓨린-탄소환식 중간체 합성
Figure pct00080
상기 반응식 D에 나타낸 바와 같이, 5'-아미노 7-데아자퓨린 탄소환식 중간체(D-X)가 제조될 수 있다. 시클로펜탄(D-I)은 임의적으로 당업계의 통상의 숙련가에게 공지된 방법에 의해 보호되어, (D-II)를 제공한다. (D-II)은 EtOH, n-부탄올과 같은 양성자성 용매 중에서 Et3N과 같은 염기의 존재 하에 적절한 4,6-디클로로피리미딘(D-III)으로 처리된다. 반응은 가열되어, 중간체(D-IV)를 제공한다. 중간체(D-V)는 (D-IV)를 산, 예컨대 HCl 또는 AcOH로 처리함으로써 처리함으로써 생성된다.
(D-V)의 5'-히드록실은 초기에 CH2Cl2, THF, MeCN, DMF 또는 이들의 혼합물과 같은 불활성 용매 중에서 Et3N, 피리딘 또는 K2CO3과 같은 염기의 존재 하에 MsCl을 이용한 처리에 의해 5'-히드록실기를 MsO와 같은 이탈기로 전환시킨 후, DMF와 같은 불활성 용매 중에서 이탈기를 NaN3으로부터의 아지드 음이온으로 교체함으로써, 5'-아지도 중간체(D-VI)로 변환될 수 있다. 대안적으로, (D-V)는 THF와 같은 용매 중에서 DPPA, Ph3P, 및 DIAD를 이용한 처리에 의해 (D-VI)로 직접 변환될 수 있다.
6-아미노 치환기는 MeCN 또는 DMF, THF, iPrOH, 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 중에서 Et3N, K2CO3 또는 후니히 염기와 같은 염기의 존재 하에 (D-VI)를 적절한 아민(암모니아 포함)을 이용한 처리에 의해 도입될 수 있다. 필요한 경우, 반응은 100℃로 가열될 수 있다(필요 온도가 혼합물 내 성분들 중 하나 이상의 비점 초과인 경우, 반응은 밀봉관 내에서 수행될 수 있다). 반응식 내의 R기는 알킬 보호기(예를 들어, 2,4-디메톡시벤질)를 나타낼 수 있다. (D-III)의 아지도기는 금속 촉매(예를 들어 Pd/C, PtO2)의 존재 하에서의 H2를 이용한 환원에 의해, 혹은 Ph3P 또는 PMe3과 같은 포스핀을 이용한 슈타우딩거 반응에 의해 일차 아민(D-VIII)으로 환원될 수 있다. 일차 아민(D-VIII)은 NaBH(OAc)3 또는 NaCNBH3과 같은 적당한 환원제의 존재 하에 적절한 케톤 또는 알데히드를 이용한 처리에 의해 이차 아민(D-X)으로 전환될 수 있다. Ti(OiPr)4와 같은 부가적 제제가 첨가될 수 있다. 대안적으로, 5'-히드록시 중간체(D-V)는 THF와 같은 불활성 용매 중에서 술폰아미드(D-IX), DEAD 및 Ph3P로 처리될 수 있다. 생성되는 술폰아미드 생성물은 K2CO3, Cs2CO3과 같은 염기의 존재 하에 벤젠티올로 처리되어, 이차 아민(D-X)이 제공될 수 있다.
통상의 숙련가는 적절하게 치환된 디클로로피리미딘(D-III)을 가짐으로써 7-데아자퓨린 부분구조 상의 치환이 가능함을 인식할 것이다.
반응식 E: 5'-위치에서의 입체화학의 반전
Figure pct00081
5'-위치에서의 반대 입체화학의 적절한 중간체를 발생시키기 위해, 반응식 E에 나타낸 바와 같은 반응 순서도 준수될 수 있다. 시클로펜탄(E-I)은 임의적으로 보호되고, 이 때 5'-히드록실은 CH2Cl2와 같은 용매 중에서 Et3N의 존재 하에 MsCl로 처리함으로써 이탈기로 전환된다. 5'-이탈기는 밀봉관 내에서 THF 중의 2.0 M 용액으로서의 Me2NH를 이용한 처리에 의해 Me2NH로 교체된다. 생성되는 3차 아민은 CH2Cl2와 같은 용매 중에서 Mcpba와 같은 산화제로 산화시켜, 상응하는 N-산화물을 제공한다. 이어서, N-산화물은 N,N-디메틸아세트아미드와 같은 불활성 용매 중에서 50-120℃로 가열하여, 알켄(E-III)을 제공한다. 알켄은 수소붕소화/산화 워크업에 적용하여, 역전된 5' 입체 이성질체(E-IV)를 생성시킨다. 적당한 수소붕소화 시약은 BH3-THF를 포함하고, 적당한 산화 워크업 조건은 H2O2/NaOH를 포함한다. 이어서, 중간체(E-IV)는 반응식 C 및 D에 나타낸 반응 순서에 적용되어, 중간체(E-V) 및 (E-VI)를 제공할 수 있다.
반응식 F: 2' 및 3' 데옥시시클로펜탄 및 리보스
Figure pct00082
반응식 C 및 D에 나와 있는 절차에서의 중간체(F-I) 및 (F-III)의 사용은 퓨린 및 7-데아자퓨린 데옥시 탄소환식 유도체가 합성되도록 한다. 리보스 기재의 중간체(F-V), (F-VI), (F-VIII) 및 (F-IX)는 상기 반응식 A 및 B에 기재된 것들에 유사한 반응 절차에 사용될 수 있다.
반응식 G: 시클로부탄 합성
Figure pct00083
Figure pct00084
반응식 G에 나타낸 바와 같이, 화학식 (G-VIII), (G-XV) 및 (G-XXI)의 시클로부탄이 합성될 수 있다. 알케닐 에스테르(G-I)는 Et2O, DME, THF 또는 이들의 혼합물과 같은 불활성 용매 중에 Zn/Cu 쌍의 존재 하에 염화트리클로로아세틸로의 [2+2] 시클로부가에 적용될 수 있다. 대안적으로, [2+2] 시클로부가 반응은 초음파 조건 하에서 Zn 더스트를 이용하여 수행될 수 있다. 이염화물(G-II)은 MeOH와 같은 용매 중에서 NH4Cl과 같은 양성자 도너의 존재 하에 Zn 분말을 이용한 처리를 통해 환원된다. ((G-III)를 포함하는) 시클로부타논(G-IV)은 포스폰산염(G-V)을 이용한 처리에 의해 추가 정밀처리되어, α, β 불포화 에스테르(G-VI)를 제공할 수 있다. 산(VI)은 표준 조건(예를 들어, 이소-부틸 클로로포름산염, 후니히 염기, N,O-디메틸 히드록실아민) 하에 바인렙(Weinreb) 아미드(G-VII)로 전환된다. 이어서, 이중 결합은 Pd/C, PtO2 또는 Pd(OH)2와 같은 금속 촉매의 존재 하에 H2를 이용하여 수소화를 통해 환원되어, 시클로부탄 중간체(G-VIII)를 제공할 수 있다.
시클로부타논(G-IX)은 위티그(Wittig) 시약(G-X)으로 처리하여, 시클로부탄 에놀 에테르(G-XI)를 제공할 수 있고, 이는 탈보호 시에 상응하는 산(G-XII)을 제공한다.
시클로부타논(G-IX)은 또한 불활성 용매 중에 KOtBu, LDA, NaHMDS, KHMDS 또는 LiHMDS와 같은 염기의 존재 하에 안정화된 포스폰산염(G-V)으로, 혹은 LiCl의 존재 하에 Et3N로 처리되어, α, β 불포화 에스테르(G-XIII)를 제공할 수 있고, 이는 불활성 용매 중에서 Pd/C, Pd(OH)2 또는 PtO2와 같은 금속 촉매의 존재 하에 H2를 이용한 처리에 의해 (G-XIV)로 처리될 수 있다. (G-XIV)의 산 작용기는 이소-부틸클로로포름산염 과 같은 적당한 커플링제 및 후니히 염기와 같은 염기의 존재 하에 N,O-디메틸히드록실아민을 이용한 처리에 의해 바이렙 아미드로 전환되어, (G-XV)을 제공할 수 있다.
시클로부타논(G-XVI)은 또한 이소-부틸클로로포름산염과 같은 적당한 커플링제 및 후니히 염기와 같은 염기의 존재 하에 N,O-디메틸히드록실아민으로 처리되어, 상응하는 바인렙 아미드(G-XVII)를 제공할 수 있고, 이는 암모니아 균등체로 환원 아민화(amination)한 후, 필요에 따라 탈보호함으로써 아민(G-XVIII)이 제공된다. 적당한 암모니아 균등체에는 케톤(G-XVII) 및 NaCN(BH3) 또는 Na(OAc)3BH와 같은 적당한 환원제로, 필요한 경우, HCl 또는 AcOH와 같은 산의 존재 하에, 처리될 수 있는 벤즈히드릴 아민, NH3, NH4Cl, BnNH2, PMB-NH2, 2,4 DMB-NH2이 포함된다. 환원 아민화 생성물 상의 보호기는 당업계의 통상의 숙련가에게 공지된 방법에 의해 제거될 수 있다. 대안적으로, 케톤(G-XVII)은 히드록실 아민으로 처리되어, 상응하는 옥심을 형성할 수 있고, 이는 이어서 Pd/C, PtO2 또는 Pd(OH)2와 같은 금속 촉매의 존재 하에 H2로 환원되어, 중간체(G-XVIII)를 제공할 수 있다.
시클로부탄(G-IV)은 (G-IV)를 포스포란(G-V)으로 처리하는 것을 포함하는 다단계 순서를 통해 아민(G-XXI)으로 전환되어, 에테르(G-XIX)를 생성시킬 수 있다. 이소-부틸 클로로포름산염과 같은 적당한 커플링제 및 후니히 염기와 같은 염기의 존재 하에 N,O-디메틸히드록실아민과 반응하게 되는 (G-XIX)를 이용한 처리로써, 상응하는 바인렙 아미드(G-XX)가 생성되고, 이는 에놀 에테르(예를 들어 TsOH/H2O, HCl/H2O)의 수성 가수분해 및 암모니아 균등체를 이용한 환원 아민화 후, 필요에 따라 탈보호함으로써 아민(G-XXI)이 제공된다. 적당한 암모니아 균등체에는 벤즈히드릴 아민, NH3, NH4Cl, BnNH2, PMB-NH2, 2,4 DMB-NH2가 포함된다. 환원 아민화를 위한 적당한 환원제에는, 필요한 경우 HCl 또는 AcOH와 같은 산의 존재 하에 사용되는 NaCN(BH3) 또는 Na(OAc)3BH가 포함된다. 환원 아민화 생성물 상의 보호기는 당업계의 통상의 숙련가에게 공지된 방법에 의해 제거될 수 있다.
반응식 H: 시클로부탄의 정밀처리
Figure pct00085
반응식 H에 나타낸 반응 순서를 통해, 시클로부타논(H-I)은 벤즈이미다졸(H-III), 우레아(H-IV) 및 아미드(H-V)로 전환될 수 있다. 염기(예를 들어, Et3N, 후니히 염기, K2CO3)의 존재 하에, 적당한 커플링제(예를 들어, HATU, PPAA, COMU, EDC, EDCI)의 존재 하, 산(H-I)을 적절한 벤젠 디아민(H-II)으로 처리함으로써, 벤즈이미다졸(H-III)이 형성될 수 있다. HOAT, HOBt 또는 HOSu와 같은 부가적 시약이 필요에 따라 첨가될 수 있다. 이어서, 생성되는 아미노-아미드는 용매로서도 작용할 수 있는, 산, 예를 들어 AcOH의 존재 하에 벤즈이미다졸로 환화된다. 반응은 정상적으로 RT 내지 80℃ 범위의 온도에서 수행된다. 우레아(H-IV)는 이하와 같이 산(H-I)을 전환시킴으로써 제조될 수 있다. 산은 THF 중에서 LiAlH4 또는 BH3과 같은 시약을 이용하여 상응하는 일차 알코올로 환원된다. 필요한 경우, 케톤 작용기는 환원되기 전에 먼저 (예를 들어, 케탈로서) 보호된 후, 탈보호될 수 있다. 이어서, 일차 알코올은 메실산염과 같은 이탈기로 전환된다. 생성되는 이탈기는 NaN3과 같은 소스로부터의 아지드로 교체된다. 아지도 생성물 화합물은 Pd/C와 같은 금속 촉매의 존재 하에 또는 PMe3 또는 PPh3와 같은 포스핀과의 슈타우딩거 반응을 통해 H2을 이용하여 상응하는 아미노 화합물로 환원된다. 이어서, 우레아(H-IV)는 CH2Cl2와 같은 불활성 용매 중에서 Et3N 또는 K2CO3와 같은 염기의 존재 하에 적절한 이소시아네이트, R-C=N=O로 일차 아민을 처리함으로써 형성된다. 아미드(H-V)는 염기(예를 들어 Et3N, 후니히 염기, K2CO3)의 존재 하에, 적당한 커플링제(예를 들어 HATU, PPAA, COMU, EDC, EDCI)의 존재 하, 산(H-I)을 적절한 아민 R-NH2로 처리함으로써 형성된다. 필요에 따라, HOAT, HOBt 또는 HOSu와 같은 부가적 시약이 첨가될 수 있다.
반응식 I: 시클로부탄 바인렙 아미드의 정밀처리
Figure pct00086
Figure pct00087
상기 반응식 I에 나와 있는 바와 같이, 바인렙 아미드(I-I) 및 (I-V)는 반응식 H에 기재된 바와 같은 유사 절차를 이용한 후, 바인렙 아미드 환원에 의해 벤즈이미다졸 알데히드(I-III), 우레아 알데히드(I-IV) 및 (I-VI) 및 아미드 알데히드(I-V)로 변환될 수 있다. 바인렙 아미드의 환원은 10 내지 -78℃의 온도에서 CH2Cl2, THF와 같은 불활성 용매 중에서 DiBAL-H를 이용하여 수행될 수 있다. 아미노 바인렙 아미드(I-V)는 또는 적절한 이소시아네이트를 이용하여 처리한 후, DiBAL-H를 이용하여 환원함으로써 우레아(I-VI)로 전환될 수 있다.
반응식 J: 시클로부탄의 정밀처리
Figure pct00088
Figure pct00089
반응식 J에 나타낸 바와 같이, 벤즈이미다졸(J-V), 우레아(J-VI) 및 아미드(J-VII) 중간체가 합성될 수 있다. 시클로부타논(J-I)은 포스포란(J-II)을 이용하여 위티크 반응에 적용하여, 에놀 에테르(J-III)를 생성시킬 수 있다. 이어서, 에놀 에테르 산을 반응식 H에 기재된 바와 유사한 반응 조건에 적용하여, 상응하는 에놀 에테르 벤즈이미다졸, 우레아 및 아미드를 생성시키고, 이는 수성 산, 예컨대 TsOH/H2O, HCl를 이용한 처리 시에, 상응하는 알데히드 중간체(J-V), (J-VI) 및 (J-VII)를 각기 생성시킨다.
반응식 K: 시클로부탄의 아민으로의 커플링
Figure pct00090
Figure pct00091
상기 반응식 K 내의 화학식 (K-V)
Figure pct00092
는 반응식 A 내지 F에 합성이 기재되어 있는, 하기 중간체(K-I 내지 K-IV) 및 이의 상응하는 2'- 또는 3'-데옥시 중간체를 나타낸다.
Figure pct00093
반응식 K에 나와 있는 바와 같이, 케톤(K-VI), (K-VII) 및 (K-VIII) 및 알데히드(K-XII), (K-XIII) 및 (K-XIV)는 (K-V)를 이용한 환원 아민화를 통해 상응하는 벤즈이미다졸(K-IX) 및 (K-XV), 우레아(K-X) 및 (K-XVI) 및 아미드(K-XI) 및 (K-XVII)로 전환된다. 환원 아민화는 필요한 경우, HCl 또는 AcOH와 같은 산 또는 루이스산/탈수화제, 예컨대 Ti(OiPr)4 또는 MgSO4의 존재 하에, NaCN(BH3) 또는 Na(OAc)3BH와 같은 적당한 환원제를 이용하여 수행될 수 있다.
반응식 L: 대안적 커플링
Figure pct00094
Figure pct00095
대안적 반응 순서에서, 반응식 L에 나타낸 바와 같이, 표적 벤즈이미다졸(L-V), 우레아(L-VI) 및 아미드(L-VII)가 반응 순서에 의해 제조될 수 있다. 아민 (L-I)(여기서, Q 및 RC는 반응식 K에서와 동일한 정의를 가짐)을, HCl 또는 AcOH와 같은 산 또는 Ti(OiPr)4와 같은 루이스산의 존재 하에, NaCNBH3 또는 Na(OAc)3BH와 같은 환원제를 이용하여 환원 아민화 조건 하에 시클로부탄 (L-II)으로 처리하여, 산(L-III)을 제공한다. 산은 반응식 H에서의 반응 조건과 유사한 반응 조건을 이용하여 상응하는 표적 벤즈이미다졸(L-V), 우레아(L-VI) 및 아미드(L-VII)로 전환될 수 있다.
반응식 M: 대안적 커플링
Figure pct00096
Figure pct00097
에놀 에테르(M-1)는 산성 조건(예를 들어 TsOH/H2O, HCl/H2O) 하에서 가수분해되어, 알데히드(M-II)를 제공할 수 있다. (M-II)의 환원 아민화는 HCl 또는 AcOH와 같은 산 또는 루이스산/탈수화제, 예컨대 Ti(OiPr)4 또는 MgSO4의 존재 하에서, NaCNBH3 또는 Na(OAc)3BH를 이용하여, 아민 (M-III)(여기서, Q 및 RC는 반응식 K에서와 동일한 정의를 가짐)으로 수행된다. 이어서, 후속되는 에스테르 보호기 제거를 수행하여, 산(M-IV)을 제공한다. (산(M-IV)을 포함하는) 산(M-V)은 반응식 H에 기재된 반응 조건과 유사한 반응 조건을 이용하여 상응하는 표적 벤즈이미다졸(M-VII), 우레아(M-VIII) 및 아미드(M-IX)로 변환될 수 있다.
반응식 N: 아미드의 합성
Figure pct00098
Figure pct00099
반응식 N에 나타낸 바와 같이, 화학식 (N-XIII)의 벤즈이미다졸, 우레아 및 아미드가 합성될 수 있다. 알데히드(N-I)(여기서, X는 벤즈이미다졸, 우레아 또는 아미드 작용기임)는 NaClO2과 같은 시약을 이용한 산화를 통해 상응하는 산으로 전환될 수 있다. 화학식 (N-III)의 시클로부타논은 불활성 용매 중에서 화학식 (N-IV)의 포스폰산염 및 LiHMDS, NaHMDS, KHMDS, KOtBu, LDA 또는 Et3N/LiCl과 같은 적당한 염기로 처리되어, 시클로부탄 (N-V)을 제공할 수 있고, 이는 Pd/C, PtO2 또는 Pd(OH)2와 같은 적당한 금속 촉매의 존재 하에 H2로의 처리를 통해 환원 시에 산(N-VI)을 제공한다.
화학식 (N-VI)의 산을 포함하는 화학식 (N-VII)의 산은 반응식 H에 나타낸 바와 유사한 일련의 반응들을 통해 상응하는 벤즈이미다졸(N-IX), 우레아(N-X) 및 아미드(N-XI)로 전환될 수 있다. 이어서, 화학식 (N-II)의 벤즈이미다졸, 우레아 및 아미드는 CH2Cl2와 같은 불활성 용매 중에서 Et3N 또는 K2CO3와 같은 염기의 존재 하에 적절한 이소시아네이트, R-C=N=O로 일차 아민을 처리함으로써 형성된다. 아미드(H-V)는 염기(예를 들어 Et3N, 후니히 염기, K2CO3)의 존재 하에, 적당한 커플링제(예를 들어 HATU, PPAA, COMU, EDC, EDCI)의 존재 하, 아민(N-XIII)(여기서, Rc 및 Q는 반응식 K에서와 동일한 정의를 가짐)과의 아미드 커플링 반응을 통해 화학식 (N-XIII)의 벤즈이미다졸, 우레아 및 아미드로 전환도리 수 있다. 필요에 따라, HOAT, HOBt 또는 HOSu와 같은 부가적 시약이 첨가될 수 있다.
반응식 O: 5'-함황 유사체
Figure pct00100
반응식 O에 나타낸 바와 같이 티오에테르(O-XIII), 술폭시드(O-XIV) 및 술폰(O-XV)이 합성될 수 있다. 시클로부타논(O-I)(여기서, X는 벤즈이미다졸, 우레아 또는 아미드 작용기를 나타냄)은, NaBH4와 같은 환원 시약으로 환원되어, 상응하는 알코올을 제공할 수 있고, 이는 다시 불활성 용매 중에서 K2CO3와 같은 염기와 함께 MsCl로 처리함으로써, MsO와 같은 이탈기로 전환될 수 있다. 이어서, 시클로부탄(O-II)은, 먼저 KSAc와 같은 황 기재 구핵체로 처리한 후, 염기성 조건, 예를 들어 LiOH/H2O/MeOH 하에 티오에스테르를 가수분해함으로써, 상응하는 티올(O-III)로 전환된다.
알데히드(O-IV)는 (O-I)의 (O-III)로의 전환에 대해 기재된 바와 유사한 반응 순서를 통해 상응하는티올로 전환될 수 있다.
시클로부타논(O-VII)은 적당한 염기(Cs2CO3, K2CO3, LiHMDS, NaHMDS, KHMDS, KOtBu, LDA)의 존재 하에 화학식 (O-VIII)의 포스폰산염으로 처리한 후, Pd/C, PtO2 또는 Pd(OH)2와 같은 적당한 금속 촉매의 존재 하에 H2를 이용하여 환원함으로써 산(O-IX)으로 전환될 수 있다. 산은 BH3:THF아 같은 시약을 이용하거나, 카르보닐디이미다졸, Et3N과 반응시킨 후, NaBH4과 반응시킴으로써, 일차 알코올로 선택적으로 환원된다. 일차 알코올은 2차 알코올 중간체로부터 (O-III) 및 (O-VI)의 합성에 대해 사용된 바와 유사한 반응을 이용하여 상응하는 티올로 전환된다.
이어서, 티올(O-XI)은 중간체(O-XII)(여기서, Q'는 이하 나타내는 중간체(O-XVI), (O-XVII), (O-XVIII) 및 (O-XIX)(및 상응하는 2'- 또는 3'-데옥시 중간체도 포함함)를 나타내고, LG는 Cl, TfO 또는 MsO와 같은 이탈기를 나타냄)로 처리될 수 있다. 반응은 K2CO3, Cs2CO3, Et3N 또는 후니히 염기와 같은 적당한 염기의 존재 하에 수행되어, 티오에테르(O-XIII)를 제공할 수 있고, 이는 H2O2 또는 mCPBA와 같은 적당한 산화제와의 처리를 통해 상응하는 술폭시드(O-XIV) 또는 술폰(O-XV)으로 전환될 수 있다.
Figure pct00101
반응식 P: 아민, 아미드 및 술폰아미드 캡
Figure pct00102
아민, 아미드 및 술폰아미드 표적 분자는 표준 반응 조건을 이용하여 아민 (P-I), (P-II) 및 (P-III)으로부터 합성될 수 있다. 아미드 표적 분자는 염기(예를 들어 Et3N, 후니히 염기, K2CO3)의 존재 하에 적당한 커플링제(예를 들어 HATU, PPAA, COMU, EDC, EDCI)의 존재 하, 아민을 적절한 카르복실산으로 처리함으로써 생성될 수 있다. 필요에 따라, HOAt, HOBt 또는 HOSu와 같은 부가적 시약이 첨가될 수 있다. 술폰아미드 표적 분자는 K2CO3, 또는 Et3N과 같은 염기의 존재 하에 아민을 적절한 염화술포닐으로 처리함으로써 생성될 수 있다. 아민 표적 분자는 NaBH(OAc)3 또는 NaCNBH3과 같은 적당한 환원제의 존재 하에 적절한 알데히드 또는 케톤과의 환원 아민화 반응을 통해 형성될 수 있다. 산 AcOH 또는 HCl과 같은 부가적 시약 또는 루이스산/탈수제 Ti(OiPr)4 또는 MgSO4이 첨가될 수 있다.
반응식 Q: 4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)벤젠-1,2-디아민의 제조
Figure pct00103
반응식 R: 4-시클로부틸벤젠-1,2-디아민의 제조
Figure pct00104
반응식 S: 1-(3,4-디아미노페닐)시클로부탄카르보니트릴의 제조
Figure pct00105
반응식 T: 4-시클로프로필벤젠-1,2-디아민의 제조
Figure pct00106
반응식 U: 1-(3,4-디아미노페닐)시클로프로판카르보니트릴의 제조
Figure pct00107
Figure pct00108
반응식 V: 4-(2,2,2-트리플루오로에틸)벤젠-1,2-디아민의 제조
Figure pct00109
반응식 W: 2-(3,4-디아미노페닐)-2-메틸프로판니트릴의 제조
Figure pct00110
전문에 걸쳐, 조성물이 특정 성분을 가지거나, 포함하거나, 함유하는 것으로 기재되는 경우, 이는 조성물이 또한 인용된 성분들로 본질적으로 구성되거나 이로 이루어진 것으로 사료된다. 마찬가지로, 방법 또는 공정이 특정 공정 단계를 가지거나, 포함하거나, 함유하는 것으로 기재되는 경우, 이는 공정이 또한 인용된 공정 단계들로 본질적으로 구성되거나 이들로 이루어진 것으로 사료된다. 또한, 단계 순서 또는 일부 작용을 수행하기 위한 순서는, 본 발명이 작동가능하게 유지되는 한, 중요하지 않다. 또한, 2개 이상의 단계 또는 작용은 동시에 수행될 수 있다.
상기 방법에 의해 고안, 선택 및/또는 최적화된 화합물은 일단 생성되면, 당업계의 숙련가에게 공지된 각종 검정법을 이용하여 특징화되어, 화합물이 생물학적 활성을 가지는 여부를 결정할 수 있다. 예를 들어, 분자는 이하에 기재된 것들을 포함하나 이에 국한되지 않는 통상적 검정법들에 의해 특징화되어, 예측 활성, 결합 활성 및/또는 결합 특이성을 가지는 지의 여부를 결정할 수 있다.
또한, 고출력 스크리닝을 사용하여 상기 검정법을 이용한 분석을 가속화할 수 있다. 그 결과, 당업계에 공지된 기법을 이용하여, 활성에 대해 본원에 기재된 분자를 급속히 스크리닝할 수 있다. 고출력 스크리닝을 수행하는 일반 방법이, 예를 들어 문헌[Devlin (1998) High Throughput Screening, Marcel Dekker]; 및 미국 특허 출원 제5,763,263호에 기재되어 있다. 고출력 스크리닝은 본원에 기재된 것들을 포함하나 이들에 국한되지 않는 하나 이상의 상이한 검정 기법을 이용할 수 있다.
화합물의 약물 유사성을 더욱 평가하기 위해, 재조합 인간 효소계 또는 인간 간 마이크로좀과 같은 더욱 복잡한 계를 이용하여 사이토크롬 P450 효소 및 상 II 대사 효소 활성의 억제 측정도 또한 수행될 수 있다. 또한, 화합물은 이 대사성 효소 활성의 기질로서도 역시 평가될 수 있다. 이 활성은 약물-약물 상호작용을 유발하거나 유용한 항미생물 활성을 보유하거나 가지지 않는 화합물의 가능성을 결정하는 데 유용하다.
화합물이 경구적으로 생체유용할 가능성의 평가치를 얻기 위해, 용해도 및 Caco-2 검정법을 수행하는 것도 가능하다. 후자는 1 마이크론 막이 장착된 24-웰 마이크로티터 플레이트의 웰 내에 종종 성장하는 Caco-2 세포 단층을 통해 약물 흡수 및 계대를 측정하도록 하는 인간 상피로부터의 세포주이다. 자유 약물 농도도 또한 단층의 기저측에서 측정될 수 있어, 장내 단층을 통과할수 있는 약물의 양을 평가한다. 단층 강도 및 갭 접합부의 견고성을 확보하기 위해 적절한 조절이 필요하다. 이 동일 시스템을 이용하여, P-당단백질 매개 유출의 평가치를 얻을 수 있다. P-당단백질은 세포의 꼭지면 세포막에 국소화하는 펌프이고, 이에 양극화된 단층을 형성한다. 이 펌프는 Caco-2 세포막을 통한 능동 또는 수동 흡수를 폐지할 수 있고, 이에 따라 장내 상피층을 통과하는 약물이 적어진다. 이 결과는 종종 용해도 측정과 결부되어 얻어지고, 이 두 양자는 모두 포유동물 내 경구 생체유용성에 기여하는 것으로 알려져 있다. 통상적 약물동력학적 실험을 이용한 동물 및 궁극적으로는 인간에서의 경구 생체유용성의 측정은 절대 경구 생체유용성을 결정할 수 있다.
실험 결과는 또한 약물 유사 성질에 기여하는 물리-화학 매개변수를 예측하는 것을 돕는 모델을 구축하기 위해 이용될 수 있다. 그러한 모델이 확인되면, 모델 예측성에 대한 의존도가 증가하면서, 실험 방법이 감소될 수 있다.
3. 치료 방법
혼합 계통 백혈병(MLL)은 유아 백혈병의 70% 초과 및 성인 급성 골수성 백혈병 (AML)의 대략 10%를 구성하는 급성 백혈병의 유전학적으로 구분된 형태이다(문헌[Hess, J. L. (2004), Trends Mol Med 10, 500-507; Krivtsov, A. V., and Armstrong, S. A. (2007), Nat Rev Cancer 7, 823-833]). MLL은 특히 공격적인 형태의 백혈병을 나타내고, 이 질환을 가지는 환자는 일반적으로 좋지 않은 예후를 가지고; 이 환자는 종종 현 화학요법을 이용한 처리 후에 조기 재발을 겪을 수 있다. 따라서, MLL을 앓는 환자에 대한 신규 치료 방식에 대한 필요가 현재 지대하다.
MLL 질환의 한 보편적 특징은 염색체 11q23 상의 MLL 유전자에 영향을 주는 염색체 전위이다(문헌[Hess, 2004; Krivtsov and Armstrong, 2007]). 정상적으로, MLL 유전자는 특정 유전자 위치에서 히스톤 H3(H3K4)의 리신 4의 메틸화를 촉매하는 SET-도메인 히스톤 메틸트랜스퍼라제를 코딩한다(문헌[Milne et al. (2002) Mol Cell 10, 1107-1117]; 문헌[Nakamura et al. (2002), Mol Cell 10, 1119-1128]). 유전자 국지화는 SET-도메인 외부에 있는, MLL 내의 인식 요소와의 특정 상호작용에 의해 부여된다(문헌[Ayton et al. (2004) Mol Cell Biol 24, 10470-10478; Slany et al., (1998) Mol Cell Biol 18, 122-129; 문헌[Zeleznik-Le et al. (1994) Proc Natl Acad Sci U S A 91, 10610-10614]). 질환-연결 전위에서, 촉매 SET-도메인이 소실되고, 잔류하는 MLL 단백질은 AF4, AF9, AF10 및 ENL과 같은 AF 및 ENL 계열의 단백질의 막을 포함한, 각종 파트너들에 융합된다(문헌[Hess, 2004; Krivtsov and Armstrong, 2007; 문헌[Slany (2009) Haematologica 94, 984-993]). 이 융합 파트너는 또 다른 히스톤 메틸트랜스퍼라제, DOT1L과 직접적으로 또는 간접적으로 상호작용할 수 있다(문헌[Bitoun et al. (2007) Hum Mol Genet 16, 92-106; 문헌[Mohan et al. (2010) Genes Dev. 24, 574-589; Mueller et al. (2007) Blood 110, 4445-4454; 문헌[Mueller et al. (2009) PLoS Biol 7, e1000249; Okada et al. (2005) Cell 121, 167-178; 문헌[Park et al. (2010) Protein J 29, 213-223; 문헌[Yokoyama et al. (2010) Cancer Cell 17, 198-212; 문헌[Zhang et al. (2006) J Biol Chem 281, 18059-18068]). 그 결과, 전위 생성물은 MLL 단백질의 나머지 내에 유전자-특이적 인식 요소를 보유하나, 상기 위치에 DOT1L을 보충하는 능력도 얻는다(문헌[Monroe et al. (2010) Exp Hematol. 2010 Sep18. [Epub ahead of print] Pubmed PMID: 20854876; 문헌[Mueller et al., 2007; Mueller et al., 2009; 문헌[Okada et al., 2005]). DOT1L은 H3K79의 메틸화, 능동 전사된 유전자와 결부된 크로마틴 변형을 촉매한다(문헌[Feng et al. (2002) Curr Biol 12, 1052-1058; Steger et al. (2008) Mol Cell Biol 28, 2825-2839]). DOT1L의 MLL 융합 단백질 보충에서 비롯되는 이소성 H3K79 메틸화는 HOXA9 및 MEIS1을 포함한 백혈병유발 유전자의 증진된 발현을 초래한다(문헌[Guenther et al. (2008) Genes & Development 22, 3403-3408; 문헌[Krivtsov et al. (2008) Nat Rev Cancer 7, 823-833; 문헌[Milne et al. (2005) Cancer Res 65, 11367-11374; 문헌[Monroe et al., 2010; 문헌[Mueller et al., 2009; Okada et al., 2005; 문헌[Thiel et al.(2010) Cancer Cell 17, 148-159]). 이에 따라, DOT1L은 그 자체로 질환에서 유전학적으로 변경되지 않으나, 그것의 위치가 잘못된 효소 활성은 MLL 환자에게 영향을 주는 염색체 전위의 직접적 결과이며; 이에 따라서, DOT1L은 상기 질환에서의 백혈병유발의 촉매 주동자인 것으로 제안되었다(문헌[Krivtsov et al., 2008; 문헌[Monroe et al., 2010; 문헌[Okada et al., 2005; Yokoyama et al. (2010) Cancer Cell 17, 198-212]). 또한, MLL 내 DOT1L의 병원성 역할에 대한 지지가 MLL 융합 단백질의 변형 활성을 전파함에 있어서의 DOT1L의 필요성을 입증하는 모델 시스템에서의 연구에서 비롯된다(문헌[Mueller et al., 2007; 문헌[Okada et al., 2005]).
증거는 DOT1L의 효소 활성이 MLL에서의 병원성에 대해 중요하고, DOT1L의 억제는 상기 질환에서의 치료 개입에 대한 약물학적 기초를 제공할 수 있음을 가리킨다. 화합물 처리는 비-MLL 변환 세포에 대한 영향없이 MLL-전위를 가지는 백혈병 세포의 선택적인 농도 의존적 사멸을 초래한다. 억제제 처리 세포의 유전자 발현 분석은, MLL-재배열 백혈병에서 이상 과발현되는 유전자의 하향제어 및 MLL-AF9 백혈병의 마우스 모델에서의 Dot1L 유전자의 유전적 녹아웃에 의해 유발되는 유전자 발현 변화에 대한 유사성을 나타낸다.
본 발명은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 투여함으로써, 본 치료가 필요한 대상의 세포 증식성 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 세포 증식성 장애는 암 또는 전암성 상태일 수 있다. 본 발명은 세포 증식성 장애의 치료에 유용한 의약품의 제조를 위한, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 용도를 추가로 제공한다.
본 발명은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 투여함으로써, 본 치료가 필요한 대상의 혈액암 또는 혈액 종양을 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 혈액암 또는 혈액 종양의 치료에 유용한 의약품의 제조를 위한 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 용도를 추가로 제공한다.
본 발명은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 투여함으로써 본 치료가 필요한 대상의 백혈병을 치료하는 방법을 제공한다. 백혈병은 급성 또는 만성 백혈병일 수 있다. 바람직하게, 백혈병은 급성 골수성 백혈병, 급성 림프성 백혈병 또는 혼합 계통 백혈병이다. 본 발명은 또한 백혈병의 치료에 유용한 의약품의 제조를 위한, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 용도를 제공한다.
본 발명은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 투여함으로써, 본 치료가 필요한 대상의 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 유전자는 MLL 유전자일 수 있다. 본 발명은 또한 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료에 유용한 의약품의 제조를 위한, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 용도를 제공한다.
본 발명은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 투여함으로써, 본 치료가 필요한 대상의, DOT1(예를 들어, DOT1L) 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 DOT1L 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료에 유용한 의약품의 제조를 위한, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 용도를 제공한다.
본 발명은 히스톤 또는 기타 단백질의 메틸화 상태(여기서, 상기 메틸화 상태는 적어도 부분적으로 DOT1L의 활성에 의해 매개됨)를 조절함으로써 그 과정이 영향을 받게 되는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 히스톤의 메틸화 상태의 조절은 다시 메틸화에 의해 활성화되는 표적 유전자, 및/또는 메틸화에 의해 억제되는 표적 유전자의 발현 수준에 영향을 줄 수 있다. 상기 방법은 본 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체, 용매화물, 또는 입체 이성질체를 투여하는 단계를 포함한다.
DOT1L 매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 장애는 암 또는 전암성 상태 또는 신경학적 질환일 수 있다. 본 발명은 또한 암 또는 신경학적 질환의 치료에 유용한 의약품의 제조를 위한, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 용도를 제공한다.
본 발명은 또한 치료 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 본 치료가 필요한 대상에게 투여함으로써 본 치료가 필요한 대상에서 단백질 메틸화가 역할을 하는 장애로부터 보호하는 방법을 제공한다. 장애는 암 또는 신경학적 질환일 수 있다. 본 발명은 또한 세포 증식성 장애의 예방에 유용한 의약품의 제조를 위한, 본 발명의 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체, 용매화물, 또는 입체 이성질체의 용도를 제공한다.
본 발명의 화합물은 단백질(예를 들어, 히스톤) 메틸화의 조절, 예를 들어 히스톤 메틸트랜스퍼라제 또는 히스톤 디메틸라제 효소 활성의 조절을 위해 사용될 수 있다. 히스톤 메틸화는 암에서의 일부 유전자의 이상 발현, 및 비-신경 세포에서의 신경 유전자의 침묵에 연관된 것임이 보고되었다. 본원에 기재된 화합물은 상기 질환의 치료, 즉 메틸화의 감소 또는 짝 정상 세포 내 대략적 그 수준으로의 메틸화 복원을 위해 사용될 수 있다.
일반적으로, 메틸화 조절자인 화합물은 일반적으로 세포 증식의 조절에 사용될 수 있다. 예를 들어, 일부 경우에서 과다 증식은 메틸화를 감소시키는 제제로 감소될 수 있고, 반면 불충분한 증식은 메틸화를 증가시키는 제제로 자극될 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물에 의해 치료될 수 있는 질환에는 과증식성 질환, 예컨대 양성(benign) 세포 성장 및 악성 세포 성장이 포함된다.
본원에 사용되는 "본 치료가 필요한 대상"은 세포 증식성 장애를 가지는 대상, 또는 전체 모집단 대비, 세포 증식성 장애의 증가된 위험에 처한 대상이다. 대상은 암 또는 전암일 수 있다. 바람직하게, 본 치료가 필요한 대상은 암을 가진다. 보다 바람직하게, 혈액 암 또는 백혈병이다. "대상"은 포유동물을 포함한다. 포유동물은 예를 들어, 임의의 포유동물, 예를 들어 인간, 영장류, 새, 마우스, 래트, 가금, 개, 고양이, 염소, 낙타, 양 또는 돼지일 수 있다. 바람직하게, 포유동물은 인간이다.
본원에 사용되는 "세포 증식성 장애"라는 용어는 세포의 비조절 성장 또는 이상 성장, 또는 양자 모두가 암성이거나 암성이 아닐 수 있는 원치 않는 상태 또는 질환의 발달을 초래할 수 있다는 상태를 지칭한다. 본 발명의 예시적 세포 증식성 장애는 세포 분열이 탈조절되는 각종 상태들을 포괄한다. 예시적 세포 증식성 장애에는 신생물, 양성 종양, 악성 종양, 전암성 상태, 인-시츄 종양, 캡슐화 종양, 전이성 종양, 액체 종양, 고형 종양, 면역학적 종양, 혈액 종양, 암, 암종, 백혈병, 림프종, 육종, 및 급속 분열 세포가 포함되나 이들에 국한되지 않는다. 본원에 사용되는 "급속 분열 세포"는 동일 조직 내 이웃하거나 병치된 세포들 간에 기대되거나 관찰되는 속도보다 크거나 초과하는 속도로 분열하는 임의의 세포로 정의된다. 세포 증식성 장애는 전암 또는 전암성 상태를 포함한다. 세포 증식성 장애는 암을 포함한다. 바람직하게, 본원에 제공된 방법은 암의 증상을 치료 또는 경감시키기 위해 사용된다. "암"이란 용어에는 고형 종양, 및 혈액 종양 및/또는 악성 종양이 포함된다. "전암 세포" 또는 "전암 세포"는 전암 또는 전암성 상태인 세포 증식성 상태를 나타내는 세포이다. "암 세포" 또는 "암성 세포"는 암인 세포 증식성 장애를 나타내는 세포이다. 임의의 재현가능한 측정 수단이 암 세포 또는 전암 세포를 동정하기 위해 사용될 수 있다. 암 세포 또는 전암 세포는 조직 샘플(예를 들어, 생검 샘플)의 조직학적 분류 또는 분급에 의해 동정된다. 암 세포 또는 전암 세포는 적절한 분자 마커의 사용을 통해 동정될 수 있다.
예시적 비-암성 상태 또는 장애에는 류마티스성 관절염; 염증; 자가면역 질환; 림프증식성 상태; 말단비대증; 류마티스성 척추염; 골 관절염; 통풍, 기타 관절염 상태; 패혈증; 패혈성 쇼크; 내독소 쇼크; 그람 음성 패혈증; 독성 쇼크 증후군; 천식; 성인 호흡 곤란 증후군; 만성 폐색성 폐 질환; 만성 폐 염증; 염증성 장 질환; 크론씨병; 건선; 습진; 궤양성 대장염; 췌장 섬유증; 간 섬유화; 급성 및 만성 신장 질환; 과민성 장 증후군; 발열; 협착; 대뇌 말라리아; 뇌졸중 및 허혈성 손상; 신경 외상; 알츠하이머병; 헌팅턴병; 파킨슨병; 급성 및 만성 통증; 알레르기성 비염 ; 알레르기성 결막염; 만성 심부전; 급성 관상 동맥 증후군; 악액질; 말라리아; 나병; 리슈마니어증; 라임병; 라이터 증후군; 급성 활막염; 활액낭염 근육 퇴화; 건염; 건초염; 탈장, 파열; 또는 탈항 척추 디스크 증후군; 골화석증; 혈전; 협착; 규폐증; 폐육종; 골 흡수 질환, 예컨대 골다공증; 이식편 대 숙주 반응; 다발성 경화증; 루푸스; 섬유 근육통; AIDS 및 기타 바이러스성 질환, 예컨대 대상 포진; 단순 포진 I 또는 II, 인플루엔자 바이러스 및 거대세포 바이러스; 및 당뇨병이 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
예시적 암에는 부신 피질 암종, AIDS 관련 암, AIDS 관련 림프종, 항문암, 항문직장암, 항문관암, 충수암, 소아 소뇌 성상세포종, 소아 대뇌 성상세포종, 기저 세포 암종, 피부암(비흑색종), 담도암, 간외 담관암, 간내 담관암, 방광암, 비뇨기 방광암, 골 및 관절 암, 골육종 및 악성 섬유 조직 구종, 뇌암, 뇌종양, 뇌간 신경교종, 소뇌 성상세포종, 대뇌 성상세포종/악성 신경교종, 상의 세포종, 모세포종, 천막상 원시 신경외배엽 종양, 시각 통로 및 시상 하부 신경교종, 유방암, 기관지 선종/유암종, 유암종 종양, 위장, 신경계암, 신경계 림프종, 중추신경계암, 중추 신경계 림프종, 자궁경부암, 소아암, 만성 림프성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 골수증식성 장애, 결장암, 결장직장암, 피부 T 세포 림프종, 림프양 신생물, 균상 식육종, 세자리 증후군, 자궁내막암, 식도암, 두개외 생식 세포 종양, 고환외 생식 세포 종양, 간외 담관암, 안암, 안구 흑색종, 망막, 담낭암, 위장(위)암, 위장관 카르시노이드 종양, 위장관 기질 종양(GIST), 생식 세포 종양, 난소 생식 세포 종양 임신성 융모 성 종양 신경교종, 머리 및 목 암, 간세포(간)암, 호지킨 림프종, 하인두암, 안구 흑색종, 안구암, 췌장 세포 종양(내분비 췌장), 카포시 육종, 콩팥암, 신장암, 후두신장암, 신장암, 급성 림프구성 백혈병, 급성 림프성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 림프성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 모세포 백혈병, 입술 및 경구 암, 간암, 폐암, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, AIDS 관련 림프종 비호지킨 림프종, 원발성 중추신경계 림프종, 발덴스트람(Waldenstram) 마크로글로불린혈증, 모세포종, 흑색종, 안내(눈) 흑색종, 메르켈 세포 암종, 악성 중피종, 중피종, 전이성 편평 목 암, 구암, 혀암, 다발성 내분비 신생물형성 증후군, 균상 식육종, 골수이형성 증후군, 골수이형성/골수증식성 질환, 만성 골수성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 다발성 골수종, 만성 골수증식성 장애, 인두암, 신경 아세포종, 구암, 구강암, 구인두암, 난소암, 난소 상피암, 난소 저악성 잠재 종양, 췌장암, 췌장 세포 췌장암, 부비강 및 비강 암, 부갑상선암, 음경암, 인두암, 크롬 친화성 세포종, 송과체아세포종 및 천막상 원시 신경외배엽 종양, 뇌하수체 종양, 플라스마 세포 신생물/다발성 골수종, 흉막과 폐 모세포종, 전립선암, 직장암, 신우 및 요관, 이행세포암, 망막아종, 횡문근육종, 타액선암, 유잉 계열의 육종 종양, 카포시 육종, 연조직 육종, 자궁암, 자궁 육종, 피부암(비흑색종), 피부암(흑색종), 메르켈 세포 피부암, 소장암, 연조직 육종, 편평상피 세포 암, 위장(위)암, 천막상 원시 신경외배엽 종양, 고환암, 인후암, 흉선종, 흉선종 및 흉선 암, 갑상선 암, 신우 및 요관의 이행세포암, 및 기타 비뇨 기관, 임신 영양포 종양, 요도암, 저궁내막 자궁암, 자궁육종, 자궁체부암, 질암, 외음부암, 및 윌름 종양이 포함 되나 이들에 국한되지 않는다.
"혈관계의 세포 증식성 장애"는 혈관계의 세포와 관련된 세포 증식성 장애이다. 혈관계의 세포 증식성 장애에는 림프종, 백혈병, 골수성 신생물, 비만세포 신생물, 골수이형성, 양성 단클론성 감마글로불린장애, 림프종양 육아종증, 림프종양 구진증, 진성다혈구증, 만성 골수성 백혈병, 원인불명 골수성 화생, 및 본태성 혈소판증가증이 포함될 수 있다. 혈관계의 세포 증식성 장애에는 혈관계 세포의 과형성, 이형성, 및 화생이 포함될 수 있다. 바람직하게, 본 발명의 조성물은 본 발명의 암 또는 본 발명의 혈액 세포 증식성 장애로 이루어진 군으로부터 선택되는 암을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 본 발명의 혈액 암에는 다발성 골수종, 림프종(호지킨 림프종, 비호지킨 림프종, 소아 림프종, 및 림프성 및 피부성 기원의 림프종을 포함함), 백혈병 (소아 백혈병, 모세포 백혈병, 급성 림프성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 림프성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 골수기원 백혈병, 및 비만세포 백혈병을 포함함), 골수성 신생물 및 비만세포 신생물이 포함될 수 있다.
"폐의 세포 증식성 장애"는 폐 세포와 관련된 세포 증식성 장애이다. 폐의 세포 증식성 장애에는 폐 세포에 영향을 미치는 모든 형태의 세포 증식성 장애들이 포함될 수 있다. 폐의 세포 증식성 장애에는 폐암, 폐의 전암 또는 전암성 상태, 폐의 양성 성장 또는 병변, 및 폐의 악성 성장 또는 병변, 폐 외의 다른 신체 내 조직 및 기관 내 전이성 병변이 포함될 수 있다. 바람직하게, 본 발명의 조성물은 폐암 또는 폐의 세포 증식성 장애를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 폐암에는 모든 형태의 폐암들이 포함될 수 있다. 폐암에는 악성 폐 신생물, 암종 인-시츄, 전형적 카르시노이드 종양, 및 비전형적 카르시노이드 종양이 포함될 수 있다. 폐암에는 소세포 폐암("SCLC"), 비소세포 폐암("NSCLC"), 편평상피 세포 암종, 선암종, 소세포 암종, 대세포 암종, 선편평상피 세포 암종, 및 중피종이 포함될 수 있다. 폐암에는 "반흔 암종," 기관지 폐포 암종, 거대 세포 암종, 방추 세포 암종, 및 대세포 신경내분비 암종이 포함될 수 있다. 폐암에는 조직학 및 초미세구조 이종성(예를 들어, 혼합 세포 유형)을 가지는 폐 신생물이 포함될 수 있다.
폐의 세포 증식성 장애에는 폐 세포에 영향을 미칠 수 있는 모든 형태들의 세포 증식성 장애들이 포함될 수 있다. 폐의 세포 증식성 장애에는 폐암, 폐의 전암성 상태가 포함될 수 있다. 폐의 세포 증식성 장애에는 폐의 과형성, 화생, 및 이형성이 포함될 수 있다. 폐의 세포 증식성 장애에는 석면 유도 과형성, 편평상피 세포 화생, 및 양성 반응성 중피세포 화생이 포함될 수 있다. 폐의 세포 증식성 장애에는 원주형 상피의 층상의 편평 상피로의 치환, 및 점막 이형성이 포함될 수 있다. 담배 연기 및 석면과 같은 흡입 상해 환경 제제에 노출된 개체는 폐의 세포 증식성 장애가 발달될 수 있는 위험에 처할 수 있다. 개체로 하여금 폐의 세포 증식성 장애의 발달에 대해 취약하게 할 수 있는 기존 폐 질환에는 만성 침입형 폐 질환, 괴사성 폐 질환, 경피증, 류마티스성 질환, 유육종증, 침입형 폐렴, 폐결핵, 반복 폐렴, 특발성 폐섬유증, 육아종, 석면증, 섬유성 폐렴 및 호지킨병이 포함될 수 있다.
"결장의 세포 증식성 장애"는 결장 세포와 관련된 세포 증식성 장애이다. 바람직하게, 결장의 세포 증식성 장애는 결장암이다. 바람직하게, 본 발명의 조성물은 결장암 또는 결장의 세포 증식성 장애를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 결장암은 모든 형태의 결장암들이 포함될 수 있다. 결장암에는 산발성 및 유전성 결장암이 포함될 수 있다. 결장암에는 악성 결장 신생물, 결암종 인-시츄, 전형적 카르시노이드 종양, 및 비전형적 카르시노이드 종양이 포함될 수 있다. 결장암에는선암종, 편평상피 세포 암종, 및 선편평상피 세포 암종이 포함될 수 있다. 결장암은 유전성 비용종증 결장직장암, 가족성 선종 용종증, 가드너 증후군, 포이츠-예커 증후군, 투콧 증후군 및 소아성 용종증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전성 증후군과 연관될 수 있다. 결장암은 유전성 비용종증 결장직장암, 가족성 선종 용종증, 가드너 증후군, 포이츠-예거 증후군, 투콧 증후군 및 소아성 용종증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전성 증후군에 의해 유발될 수 있다.
결장의 세포 증식성 장애에는 결장 세포에 영향을 주는 모든 형태의 세포 증식성 장애들이 포함될 수 있다. 결장의 세포 증식성 장애에는 결장암, 결장의 전암성 상태, 결장의 선종 폴립 및 결장의 후시성 병변이 포함될 수 있다. 결장의 세포 증식성 장애에는 선종이 포함될 수 있다. 결장의 세포 증식성 장애는 결장의 과형성, 화생, 및 이형성을 특징으로 할 수 있다. 개체로 하여금 결장의 세포 증식성 장애의 발달에 대해 취약하게 할 수 있는 기존 결장 질환에는 기존 결장암이 포함될 수 있다. 개체로 하여금 결장의 세포 증식성 장애의 발달에 대해 취약하게 할 수 있는 기존 결장 질환에는 크론씨병 및 궤양성 대장염이 포함될 수 있다. 결장의 세포 증식성 장애는 p53, ras, FAP 및 DCC로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전자의 돌연변이와 연관될 수 있다. 한 개체는 p53, ras, FAP 및 DCC로 이루어진 군으로부터 선택되는 유전자의 돌연변이의 존재로 인해 결장의 세포 증식성 장애를 발달시키는 위험이 상승될 수 있다.
"췌장의 세포 증식성 장애"는 췌장 세포와 관련된 세포 증식성 장애이다. 췌장의 세포 증식성 장애에는 췌장 세포에 영향을 주는 모든 형태의 세포 증식성 장애들이 포함될 수 있다. 췌장의 세포 증식성 장애에는 췌장암, 췌장의 전암 또는 전암성 상태, 췌장의 과형성, 및 췌장의 이형성, 췌장의 양성 성장 또는 병변, 및 췌장의 악성 성장 또는 병변, 및 췌장 외의 다른 신체 내 조직 및 기관 내 전이성 병변이 포함될 수 있다. 췌장암에는 모든 형태의 췌장암들이 포함될 수 있다. 췌장암에는 유관 선암종, 선편평세포 암종, 다형성 거대 세포 암종, 점액성 선암종, 파골 세포 유사 거대 세포 암종, 점액성 낭종 암종, 포상 암종, 비분류 대세포 암종, 소세포 암종, 췌아세포종, 유두 종양, 점액성 낭선종, 유두 낭성 신생물 및 장액 낭선종이 포함될 수 있다. 췌장암에는 또한 조직학 및 초미세구조 이종성(예를 들어, 혼합 세포 유형)을 가지는 췌장 신생물이 포함될 수 있다.
"전립선의 세포 증식성 장애"는 전립선 세포와 관련된 세포 증식성 장애이다. 전립선의 세포 증식성 장애에는 전립선 세포에 영향을 주는 모든 형태의 세포 증식성 장애들이 포함될 수 있다. 전립선의 세포 증식성 장애에는 전립선암, 전립선의 전암 또는 전암성 상태, 전립선의 양성 성장 또는 병변, 및 전립선의 악성 성장 또는 병변, 및 전립선 외의 다른 신체 내 조직 및 기관 내 전이성 병변이 포함될 수 있다. 전립선의 세포 증식성 장애에는 전립선의 과형성, 화생, 및 이형성이 포함될 수 있다.
"피부의 세포 증식성 장애"는 피부 세포와 관련된 세포 증식성 장애이다. 피부의 세포 증식성 장애에는 피부 세포에 영향을 주는 모든 형태의 세포 증식성 장애들이 포함될 수 있다. 피부의 세포 증식성 장애에는 피부의 전암 또는 전암성 상태, 피부의 양성 성장 또는 병변, 흑색종, 악성 흑색종, 및 피부의 기타 악성 성장 또는 병변, 및 피부 외의 다른 신체 내 조직 및 기관 내 전이성 병변이 포함될 수 있다. 피부의 세포 증식성 장애에는 피부의 과형성, 화생, 및 이형성이 포함될 수 있다.
"난소의 세포 증식성 장애"는 난소 세포와 관련된 세포 증식성 장애이다. 난소의 세포 증식성 장애에는 난소 세포에 영향을 주는 모든 형태의 세포 증식성 장애들이 포함될 수 있다. 난소의 세포 증식성 장애에는 난소의 전암 또는 전암성 상태, 난소의 양성 성장 또는 병변, 난소암, 난소의 악성 성장 또는 병변, 및 난소 외의 다른 신체 내 조직 및 기관 내 전이성 병변이 포함될 수 있다. 피부의 세포 증식성 장애에는 난소의 과형성, 화생, 및 이형성이 포함될 수 있다.
"유방의 세포 증식성 장애"는 유방 세포와 관련된 세포 증식성 장애이다. 유방의 세포 증식성 장애에는 유방 세포에 영향을 주는 모든 형태의 세포 증식성 장애들이 포함될 수 있다. 유방의 세포 증식성 장애에는 유방암, 유방의 전암 또는 전암성 상태, 유방의 양성 성장 또는 병변, 및 유방의 악성 성장 또는 병변, 및 유방 외의 다른 신체 내 조직 및 기관 내 전이성 병변이 포함될 수 있다. 유방의 세포 증식성 장애에는 유방의 과형성, 화생, 및 이형성이 포함될 수 있다.
유방의 세포 증식성 장애는 유방의 전암성 상태일 수 있다. 본 발명의 조성물은 유방의 전암성 상태를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 유방의 전암성 상태에는 유방의 비전형적 과형성, 유관 암종 인-시츄(DCIS), 유관내 암종, 소엽 암종 인-시츄(LCIS), 소엽 신생물, 및 유방의 단계 0 또는 등급 0 성장 또는 병변(예를 들어, 단계 0 또는 등급 0의 유방암, 또는 암종 인-시츄)이 포함될 수 있다. 유방의 전암성 상태는 미국 암연합회(American Joint Committee on Cancer(AJCC))에 의해 수용되는 TNM 분류식에 따라 단계 분류될 수 있고, 여기서 일차 종양(T)은 T0 또는 Tis의 단계로 지정되었고, 구역 림프절(N)은 N0의 단계로 지정되었으며; 원위 전이(M)는 M0의 단계로 지정되었다.
유방의 세포 증식성 장애는 유방 암일 수 있다. 바람직하게, 본 발명의 조성물은 유방암을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 유방암에는 모든 형태의 유방암들이 포함될 수 있다. 유방암에는 원발성 상피 유방암이 포함될 수 있다. 유방암에는 유방이 다른 종양, 림프종, 육종 또는 흑색종과 관련된 암들이 포함될 수 있다. 유방암에는 유방 암종, 유방 유관 암종, 유방 소엽 암종, 유방 비분화 암종, 유방 엽상낭 육종, 유방 혈관 육종, 및 유방 원발성 림프종이 포함될 수 있다. 유방암에는 단계 I, II, IIIA, IIIB, IIIC 및 IV 유방암이 포함될 수 있다. 유방 유관 암종에는 면포성, 점액성(콜로이드성), 수질성, 림프구성 잠입물을 이용한 수질성, 관상, 경성암성, 및 튜브상으로 이루어진 군으로부터 선택되는 조직학적 유형을 가지는 유방의, 침습성 암종, 우세한 유관내 성분을 가지는 인-시츄 침습성 암종, 염증성 유방암, 및 유방 유관 암종이 포함될 수 있다. 유방 소엽 암종에는 우세 인-시츄 성분을 가지는 침습성 소엽 암종, 침습성 소엽 암종, 및 잠입 소엽 암종이 포함될 수 있다. 유방암에는 파젯병, 유관내 암종을 가지는 질환, 및 침습성 유관 암종을 가지는 파젯병이 포함될 수 있다. 유방암에는 또한 조직학 및 초미세구조 이종성(예를 들어, 혼합 세포 유형)을 가지는 유방 신생물이 포함될 수 있다.
바람직하게, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체, 또는 용매화물은 유방암을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 피치료 유방암에는 가족성 유방암이 포함될 수 있다. 피치료 유방암에는 산발성 유방암이 포함될 수 있다. 피치료 유방암은 남성 대상에서 발생할 수 있다. 피치료 유방암은 여성 대상에서 발생할 수 있다. 피치료 유방암은 폐경전의 여성 대상 또는 폐경후의 여성 대상에서 일어날 수 있다. 피치료 유방암은 30세 이후의 대성, 또는 30세 미만의 대상에서 일어날 수 있다. 피치료 유방암은 50세 이후의 대성, 또는 50세 미만의 대상에서 일어날 수 있다. 피치료 유방암은 70세 이후의 대성, 또는 70세 미만의 대상에서 일어날 수 있다.
피치료 유방암은 BRCA1, BRCA2, 또는 p53의 가족성 또는 자발성 돌연변이를 동정하기 위해 유형 분류될 수 있다. 피치료 유방암은 HER2/neu 유전자 증폭을 가지거나, HER2/neu를 과발현하거나, 저중 또는 고수준의 HER2/neu 발현을 가지는 것으로 유형 분류될 수 있다. 피치료 유방암은 에스트로겐 수용체(ER), 프로게스테론 수용체(PR), 인간 상피 성장 인자 수용체-2, Ki-67, CA15-3, CA 27-29, 및 c-Met로 이루어진 군으로부터 선택되는 마커에 대해 유형 분류될 수 있다. 피치료 유방암은 ER-미지, ER-풍부 또는 ER-부족으로 유형 분류될 수 있다. 피치료 유방암은 ER-음성 또는 ER-양성으로 유형 분류될 수 있다. 유방암의 ER-유형 분류는 임의의 재현가능한 수단에 의해 수행될 수 있다. 유방암의 ER-유형 분류는 문헌[Onkologie 27: 175-179(2004)]에 나와 있는 바와 같이 수행될 수 있다. 피치료 유방암은 PR-미지, PR-풍부, 또는 PR-부족으로 유형 분류될 수 있다. 피치료 유방암은 PR-음성 또는 PR-양성으로 유형 분류될 수 있다. 피치료 유방암은 수용체 양성 또는 수용체 음성으로 유형 분류될 수 있다. 피치료 유방암은 CA 15-3, 또는 CA 27-29, 또는 그 양자 모두의 상승된 혈중 수준으로서 유형 분류될 수 있다.
피치료 유방암에는 국소화 유방 종양이 포함될 수 있다. 피치료 유방암에는 음성 보초 림프절(SLN) 생검과 연관된 유방 종양이 포함될 수 있다. 피치료 유방암에는 양성 보초 림프절(SLN) 생검이 연관된 유방 종양이 포함될 수 있다. 피치료 유방암에는 임의의 적용가능한 방법에 의해 단계 분류된 보조 림프절이 있는 하나 이상의 양성 보조 림프절과 연관된 유방종양이 포함될 수 있다. 피치료 유방암에는 결절 음성 상태(예를 들어, 결절-음성) 또는 결절 양성 상태(예를 들어, 결절-양성)를 가지는 것으로 유형 분류된 유방 종양이 포함될 수 있다. 피치료 유방암은 신체 내 다른 위치로 전이된 유방 종양이 포함될 수 있다. 피치료 유방암은 뼈, 간 또는 뇌로 이루어진 군으로부터 선택된 위치로 전이된 것으로 분류될 수 있다. 피치료 유방암은 전이, 국소화, 국지, 국소-구역, 구역 진전, 원위, 다심성, 양측성, 동측성, 대측성, 신규 진단, 재발 및 실시불가능으로 이루어진 군으로부터 선택되는 특징에 따라 분류될 수 있다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은 전체 모집단 대비, 유방암을 발달시킬 위험성이 증가된 대상의 유방의 세포 증식성 장애를 치료 또는 예방하거나, 유방암을 치료 또는 예방하기 위해 사용될 수 있다. 전체 모집단 대비, 유방암을 발달시킬 위험성이 증가된 대상은 가족력 또는 개인력의 유방암을 가지는 여성 대상이다. 전체 모집단 대비, 유방암을 발달시킬 위험성이 증가된 대상은 BRCA1 또는 BRCA2, 또는 양자 모두의 생식선 또는 자발성 돌연변이를 가지는 여성 대상이다. 전체 모집단 대비, 유방암을 발달시킬 위험성이 증가된 대상은 가족력의 유방암, 및 BRCA1 또는 BRCA2, 또는 양자 모두의 생식선 또는 자발성 돌연변이를 가지는 여성 대상이다. 전체 모집단 대비, 유방암을 발달시킬 위험성이 증가된 대상은 30세 초과, 40세 초과, 50세 초과, 60세 초과, 70세 초과, 80세 초과, 또는 90세 초과의 여성이다. 전체 모집단 대비, 유방암을 발달시킬 위험성이 증가된 대상은 유방의 비전형적 과형성, 유관 암종 인-시츄(DCIS), 유관내 암종, 소엽 암종 인-시츄(LCIS), 소엽 신생물형성, 또는 유방의 단계 0 성장 또는 병변(예를 들어, 단계 0 또는 등급 0의 유방암, 또는 암종 인-시츄)을 가지는 여성이다.
피치료 유방암은 스카프-블룸-리차드슨(Scarff-Bloom-Richardson) 시스템에 따라 조직학적으로 등급 분류될 수 있고, 여기서 유방 종양은 1, 2, 또는 3의 유사분열 계수 점수; 1, 2, 또는 3의 핵 다형성 점수; 1, 2, 또는 3의 관 형성 점수; 및 3 내지 9의 스카프-블룸-리차드슨 점수를 지정받았다. 피치료 유방암은 유방암 치료에 대한 국제 합의 패널(International Consensus Panel on the Treatment of Breast Cancer)에 따라, 등급 1, 등급 1-2, 등급 2, 등급 2-3, 또는 등급 3으로 이루어진 군으로부터 선택된 종양 등급을 지정받을 수 있다.
피치료 암은 TNM 분류 시스템에 대한 미국 암연합회(AJCC)에 따라 단계 분류될 수 있고, 여기서 종양(T)은 TX, T1, T1mic, T1a, T1b, T1c, T2, T3, T4, T4a, T4b, T4c, 또는 T4d의 단계를 지정받았고; 구역 림프절 (N)은 NX, N0, N1, N2, N2a, N2b, N3, N3a, N3b, 또는 N3c의 단계를 지정받았으며; 원위 전이(M)는 MX, M0, 또는 M1을 지정받았다. 피치료 암은 미국 암연합회(AJCC) 분류에 따라 단계 I, 단계 IIA, 단계 IIB, 단계 IIIA, 단계 IIIB, 단계 IIIC, 또는 단계 IV로 단계 분류될 수 있다. 피치료 암은 AJCC 분류에 따라 등급 GX(예를 들어, 등급이 평가될 수 없음), 등급 1, 등급 2, 등급 3 또는 등급 4로 등급 지정 받을 수 있다. 피치료 암은 pNX, pN0, PN0 (I-), PN0 (I+), PN0 (mol-), PN0 (mol+), PN1, PN1(mi), PN1a, PN1b, PN1c, pN2, pN2a, pN2b, pN3, pN3a, pN3b, 또는 pN3c의 AJCC 병리학적 분류 (pN)에 따라 단계 분류될 수 있다.
피치료 암에는 직경이 약 2 센티미터 이하인 것으로 결정된 종양이 포함될 수 있다. 피치료 암에는 직경이 약 3 센티미터 이상인 것으로 결정된 종양이 포함될 수 있다. 피치료 암에는 직경이 약 5센티미터 이상인 것으로 결정된 종양이 포함될 수 있다. 피치료 암은 현미경 외관에 의해 고 분화, 중 분화, 저 분화 또는 미분화로 분류될 수 있다. 피치료 암은 유사분열 계수(예를 들어, 세포 분열 양) 또는 핵 다형성(예를 들어, 세포 변화)에 대해 미생물 외관에 의해 분류될 수 있다. 피치료 암은 괴사 면적(예를 들어, 사멸 또는 퇴화 세포의 면적)과 연관된 것으로 미생물 외관에 의해 분류될 수 있다. 피치료 암은 이상 핵형을 가지거나, 이상 개수의 염색체를 가지거나, 외관이 이상한 하나 이상의 염색체를 가지는 것으로 분류될 수 있다. 피치료 암은 이수성, 3배수, 4배수이거나 변경된 배수성을 가지는 것으로 분류될 수 있다. 피치료 암은 전체 염색체의 염색체 전위, 또는 결실 또는 중복, 염색체의 결실, 중복 또는 증폭 구역을 가지거는 것으로 분류될 수 있다.
피치료 암은 DNA 혈구계산, 유세포 혈구계산, 또는 이미지 혈구계산에 의해 평가될 수 있다. 피치료 암은 세포 분열의 합성 단계(예를 들어, 세포 분열의 S기)에서 세포의 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 또는 90%를 가지는 것으로 유형 분류될 수 있다. 피치료 암은 저 S기 분기 또는 고 S기 분기를 가지는 것으로 유형 분류될 수 있다.
본원에 사용되는 "정상 세포"는 "세포 증식성 장애"의 부분으로 분류될 수 없는 세포이다. 정상 세포는 비제어 또는 이상 성장, 또는 양자 모두가 결여되어 있고, 이는 원치 않는 상태 또는 질환의 발달을 초래할 수 있다. 바람직하게, 정상 세포는 정상적으로 기능하는 세포 주기 체크포인트 조절 기작을 가진다.
본원에 사용되는 "세포를 접촉시킴"이란 해당 화합물 또는 기타 조성물이 세포와 직접 접촉되어 있거나, 세포 내 요망되는 생물학적 효과를 유도하기에 충분히 근접한 상태를 지칭한다.
본원에 사용되는 "후보 화합물"은 연구원 또는 임상의에 의해 모색되고 있는, 화합물이 세포, 조직, 시스템, 동물 또는 인간에서의 생물학적 또는 의학적 반응을 도출하기 쉬운지에 대한 여부를 결정하기 위해, 하나 이상의 시험관내 또는 생체내 생물학적 검정법으로 시험되었거나 시험될 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 지칭한다. 후보 화합물은 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물이다. 생물학적 또는 의학적 반응은 암의 치료일 수 있다. 생물학적 또는 의학적 반응은 세포 증식성 장애의 치료 또는 예방일 수 있다. 시험관내 또는 생체내 생물학적 검정법에는 효소 활성 검정법, 전기영동 이동도 검정법, 리포터 유전자 검정법, 시험관내 세포 생육성 검정법, 및 본원에 기재된 검정법이 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
본원에 사용되는 "단일요법"이란 본 치료가 필요한 대상에게 단일의 활성 또는 치료 화합물을 투여함을 지칭한다. 바람직하게, 단일요법은 치료 유효량의 단일 활성 화합물을 투여하는 것을 포함할 것이다. 예를 들어, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 유사체 또는 유도체 중 하나를 이용한 암 단일요법은 암 치료를 필요로 하는 대상에게 적용된다. 한 측면에서, 단일 활성 화합물은 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물이다.
본원에 사용되는 "치료하는 것" 또는 "치료하다"란 질환, 상태, 또는 장애를 저지하기 위한 목적의 환자의 관리 및 보호를 기술하고, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 투여하여, 질환, 상태 또는 장애의 증상 또는 합병증을 경감시키거나, 질환, 상태 또는 장애를 제거하는 단계를 포함한다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은 또한 질환, 상태 또는 장애를 예방하기 위해 사용될 수 있다. 본원에 사용되는 "예방하는 것" 또는 "예방하다"란 질환, 상태 또는 장애의 증상 또는 합병증의 개시를 감소시키거나 제거하는 것을 기술한다.
본원에 사용되는 "경감시키다"라는 용어는 장애 표시 또는 증상의 심각도가 감소되는 과정을 기술하는 것으로 의미된다. 중요하게는, 표시 또는 증상이 제거되지는 않으면서 경감될 수 있다. 한 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 약학적 조성물의 투여는 표시 또는 증상의 제거를 초래하나, 제거는 필요하지 않다. 유효 투약량은 표시 또는 증상의 심각도를 감소시킬 것으로 예상된다. 예를 들어, 다중 위치에 일어날 수 있는, 암과 같은 장애의 표시 또는 증상은, 암의 심각도는 다중 위치들 중 하나 이상 내에 감소될 경우, 경감된다.
본원에 사용되는, "심각도"란 용어는 암이 전암, 또는 양성 상태에서 악성 상태로 변환될 가능성을 기술하는 것으로 의미된다. 대안적으로 또는 부가적으로, 심각도는 암 단계를, 예를 들어 (국제암퇴치연맹(UICC) 및 미국 암연합회(AJCC)에 의해 수용되는) TNM 시스템에 따라, 또는 다른 당업계 인지 방법에 의해 기술하는 것으로 의미된다. 암 단계란 원발성 종양의 위치, 종양 크기, 종양 수, 림프절 관련(암의 림프절로의 전파)와 같은 인자들에 기초한, 암의 정도 또는 심각도를 지칭한다. 대안적으로 또는 부가적으로, 심각도는 당업계 인지 방법에 의해 종양 등급을 기술하는 것으로 의미된다(미국 국립 암연구소, www.cancer.gov 참조). 종양 등급은, 종양이 어떻게 현미경으로 이상으로 보여지는지, 또한 종양이 얼마나 빨리 성장하고 전파하기 쉬운지에 대해 암 세포를 분류하기 위해 사용되는 시스템이다. 많은 인자들은 세포의 구조 및 성장 패턴을 포함한, 종양 등급을 결정할 때 고려된다. 종양 등급을 결정하기 위해 사용되는 특정 인자들은 각 유형의 암에 따라 다르다. 심각도는 또한 분화라고 칭해지는 조직학적 등급을 기술하고, 이는 얼마나 많은 종양 세포가 동일 조직 유형의 정상 세포와 유사한지를 가리킨다(미국 국립 암연구소, www.cancer.gov 참조). 또한, 심각도는 종양 세포 내 핵의 크기 및 형상, 및 분열하는 세포의 종양 세포의 백분율을 가리키는 핵 등급을 기술한다(미국 국립 암연구소, www.cancer.gov 참조).
본 발명의 또 다른 측면에서, 심각도는 종양이 성장 인자를 분비하거나, 세포외 기질을 분해하거나, 혈관화되거나, 병치된 조직으로의 부착이 소실되거나, 전이된 정도를 기술한다. 또한, 심각도는 원발성 종양이 전이된 위치의 수를기술한다. 마지막으로, 심각도는 변화하는 유형 및 위치의 종양들을 치료함의 곤란성을 포함한다. 예를 들어, 수술불가능한 종양, 다중 신체 시스템에 접근하기 더 쉬운 암(혈액학적 및 면역학적 종양), 및 통상적 치료법에 가장 내성이있는 암이 가장 심각한 것으로 간주된다. 이 상황에서, 대상의 예상 수명 연장 및/또는 통증 감소, 한 시스템에 대한 암성 세포 또는 제한 세포의 분율 감소, 및 암 단계/종양 등급/면역학적 등급/핵 등급의 향상은 암의 표시 또는 증상을 경감시키는 것으로 간주된다.
본원에 사용되는 "증상"이란 용어는 질환, 병, 상해, 또는 신체 내 무언가 이상이 있음의 표시로 정의된다. 증상은 증상을 겪는 개체에 의해 감지되거나 인식되는 것이나, 다른 이들에 의해 용이하게 인식되지 않을 수도 있다. 다른 이는 보건 관리 전문인이 아닌 것으로 정의된다.
본원에 사용되는 "표시"란 용어는 또한 신체 내 무언가 이상이 있음의 표시로 정의된다. 그러나, 표시는 의사, 간호사 또는 기타 보건 관리 전문인에 의해 관찰될 수 있는 것들로 정의된다.
암은 거의 모든 표시 또는 증상을 유발할 수 있는 질환군이다. 표시 및 증상은 암의 위치, 암 크기, 부근 기관 또는 구조에 영향을 미치는 정도에 의존할 것이다. 암이 전파(전이)되면, 증상이 신체의 상이한 부분들에서 나타날 수 있다.
암이 성장이 증가함에 따라, 이는 부근 기관, 혈관 및 신경에 부담을 주기 시작한다. 이 압력은 암의 표시 및 증상 중 일부를 발생시킨다. 암이 중요 부위, 예컨대 뇌의 일부 부분에 있는 경우, 심지어 가장 작은 종양은 조기 증상을 유발할 수 있다.
그러나, 경우에 따라 암은 암이 매우 큰 크게 성장할 때까지 어떠한 증상도 유발하지 않는 곳에서 개시된다. 예를 들어 췌장암은 신체 외부로부터 감지되기에 충분히 크게 성장하지 않는다. 일부 췌장암은 부근 신경 주위에 성장하기 시작할 때까지(이는 요통을 유발함), 증상을 유발하지 않는다. 다른 암은 담도관 주위에서 성장하고, 이는 담즙의 흐름을 막고 황달로 알려진 피부의 황변을 초래한다. 췌장암이 표시 또는 증상을 유발할 시점에는, 그것은 진전 단계에 도달한 것이다.
암은 또한 열, 피로 또는 체중 감량과 같은 증상을 유발할 수도 있다. 그 이유는 암 세포가 신체 에너지 공급의 상당 부분을 소모하거나, 신체의 대사를 변경시키는 물질을 방출하기 때문일 수 있다. 혹은, 암은 면역계가 상기 증상을 생성시키는 방식으로 반응하도록 할 수 있다.
경우에 따라, 암 세포는 혈류 내로 물질을 방출하고, 이는 통상 암에서 비롯되는 것으로 생각되지 않는다. 예를 들어, 일부 췌장암은 혈전이 다리 정맥에서 발달되도록 하는 물질을 방출할 수 있다. 일부 폐암은 신경 및 근육에 영향을 미치고 연약함 및 어지러움을 유발하는, 혈중 칼슘 수준에 영향을 미치는 호르몬 유사 물질을 만든다.
암은 각종 아형의 암 세포들이 존재할 때 일어나는 수가지 일반 표시 또는 증상을 제시한다. 암을 앓는 대부분의 사람들은 그 질환을 앓는 어느 시기에는 체중이 감량될 것이다. 10 파운드 이상의 설명되지 않는 (비고의) 체중 감량은 암, 특히 췌장암, 위암, 식도암 또는 폐암의 첫 번째 표시일 수 있다.
열은 암에 있어 가장 공통된 것이나, 더욱 종종은 진전된 질환에서 나타난다. 거의 모든 암 환자들은 어느 시기에는, 특히 암 또는 이의 치료가 면역계에 영향을 미치고 신체가 감염에 저항하기 더 어렵게 할 경우에, 열이 있게 된다. 그 보다는 덜한 빈도로, 열은 암, 예컨대 백혈병 또는 림프종의 조기 표시일 수 있다.
피로는 암이 진전됨에 따라 중요한 증상일 수 있다. 그러나, 이는 백혈병과 같은 암에서, 혹은 암이 일부 결장암 또는 위암에서와 같이 진행중 혈액 손실을 유발하고 있는 경우, 조기에 일어날 수 있다.
통증은 골암 또는 고환암과 같은 일부 암의 조기 증상일 수 있다. 그러나, 가장 종종은 통증이 진전된 질환의 증상이다.
피부암(다음 단락 참조)과 함께, 일부 내부 암은 보여질 수 있는 피부 표시를 유발할 수 있다. 이 변화에는 피부가 더욱 어두워짐(과대색소침착), 황변(황달) 또는 홍반(홍진); 가려움; 또는 과다 모(hair) 성장이 포함된다.
대안적으로 또는 부가적으로, 암 아형은 특정 표시 또는 증상을 제시한다. 장 습관 또는 방광 기능의 변화는 암을 가리킬 수 있다. 장기 변비, 설사 또는 대변 크기의 변화는 결장암의 표시일 수 있다. 배뇨 시의 통증, 소변 내 피, 또는 방광 기능의 변화(예컨대, 더욱 빈번하거나 덜 빈번한 배변)는 방광암 또는 전립선암과 관련될 수 있었다.
피부 상태의 변화 또는 새로운 피부 상태의 출현은 암을 가리킬 수 있다. 피부암은 피가 나올 수 있고, 치유되지 않는 발진처럼 보일 수 있다. 입 내의 장기 지속 발진은 경구암일 수 있고, 특히 흡연을 하거나 담배를 씹거나 빈번하게는 알코올을 마시는 환자에 있어 그러하다. 음경 또는 질에서의 발진은 감염 또는 조기암의 표시일 수 있다.
통상의 출혈 또는 방출은 암을 가리킬 수 있다. 비통상적 출혈은 조기암 또는 진전암에서 일어날 수 있다. 가래 (담) 내의 혈액은 폐암의 표시일 수 있다. 대변 내의 혈액(또는 짙은 색이거나 흑색의 대변)은 결장암 또는 직장암의 표시일 수 있다. 자궁경괌암 또는 자궁내막(자궁의 내막)암은 질 출혈을 유발할 수 있다. 소변 내의 피는 방광암 또는 신장암의 표시일 수 있다. 유도로부터의 혈액 방출은 유방암의 표시일 수 있다.
유방 또는 신체의 기타 부분이 두꺼워지거나 덩어리짐은 암의 존재를 가리킬 수 있다. 많은 암들이 피부, 대부분은 신체의 유방, 고환, 림프절(선), 및 연조직을 통해 감지될 수 있다. 덩어리지거나 두꺼워짐은 암의 조기 또는 후기 표시일 수 있다. 덩어리지거나 두꺼워짐은 암을 가리킬 수 있고, 특히 형성이신규하거나 크기가 성장한 경우에 그러하다.
소화불량 또는 삼킴 곤란이 암을 가리킬 수 있다. 이 증상들은 다른 원인들을 가지나, 소화불량 또는 삼킴 문제는 식도암, 위암 또는 인두(목구멍)암의 표시일 수 있다.
무사마귀 또는 사마귀의 최근 변화는 암을 가리킬 수 있다. 색, 크기 또는 형상이 변화하거나 명확한 경계를 소실하는 임의의 무사마귀, 사마귀 또는 주근깨가 암의 발달 가능성을 가리킨다. 예를 들어, 피부 병변은 흑색종일 수 있다.
지속되는 기침 또는 목이 쉼도 암을 가리킬 수 있다. 없어지지 않는기침은 후두(목소리 상자)암 또는 갑상선암의 표시일 수 있다.
상기 열거된 표시들 및 증상들은 암으로 나타내는 것들보다 더 통상적이나, 덜 통상적이고 여기에 열거되지 않은 다른 것들도 많이 있다. 그러나, 당업계에 인지되는 모든 암 표시 및 증상이 고려되고, 본 발명에 포괄된다.
암 치료는 종양 크기의 감소를 초래할 수 있다. 종양 크기의 감소는 또한 "종양 퇴행"으로도 칭해진다. 바람직하게, 치료 후, 종양 크기는 치료 전 크기 대비 5% 이상 감소되고; 보다 바람직하게는 종양 크기가 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 가장 바람직하게, 75% 초과 또는 그 이상 감소된다. 종양 크기는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 종양 크기는 종양의 직경으로서 측정될 수 있다.
암 치료는 종양 체적의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 종양 체적은 치료 전 체적 대비 5% 이상 감소되고; 보다 바람직하게는 종양 체적이 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 가장 바람직하게, 75% 이상 감소된다. 종양 체적은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다.
암 치료는 종양 수의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 종양 수는 치료 전 수 대비 5% 이상 감소되고; 보다 바람직하게는 종양 수가 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 가장 바람직하게, 75% 초과 감소된다. 종양 수는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 종양 수는 육안으로 또는 특정 확대율로 볼 수 있는 종양을 계수함으로써 측정될 수 있다. 바람직하게, 특정 확대율은 2×, 3×, 4×, 5×, 10×, 또는 50×이다.
암 치료는 원발성 종양 부위로부터 떨어진 다른 조직 또는 기관 내 전이성 병변의 수 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 전이성 병변의 수는 치료 전 체적 대비 5% 이상 감소되고; 보다 바람직하게는 전이성 병변의 수가 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 가장 바람직하게, 75% 초과 감소된다. 전이성 병변의 수는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 전이성 병변의 수는 육안으로 또는 특정 확대율로 볼 수 있는 종양을 계수함으로써 측정될 수 있다. 바람직하게, 특정 확대율은 2×, 3×, 4×, 5×, 10×, 또는 50×이다.
암 치료는 담체만을 수용하는 모집단 대비, 피치료 대상의 모집단의 평균 생존 시간의 증가를 초래할 수 있다. 바람직하게, 평균 생존 시간은 30일 초과; 보다 바람직하게, 60일 초과; 보다 바람직하게, 90일 초과; 가장 바람직하게, 120일 초과 증가된다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는, 예를 들어 활성 화합물을 이용한 처리 개시 후, 평균 생존 기간을 모집단에 대해 계산함으로써, 측정될 수 있다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는 또한, 예를 들어 활성 화합물을 이용한 1회 처리 후, 평균 생존 기간을 모집단에 대해 계산함으로써, 측정될 수 있다.
암 치료는 비치료 모집단 대비, 피치료 대상의 모집단의 평균 생존 시간의 증가를 초래할 수 있다. 바람직하게, 평균 생존 시간은 30일 초과; 보다 바람직하게, 60일 초과; 보다 바람직하게, 90일 초과; 가장 바람직하게, 120일 초과 증가된다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 전이성 병변의 수는 육안으로 또는 특정 확대율로 볼 수 있는 종양을 계수함으로써 측정될 수 있다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는, 예를 들어 활성 화합물을 이용한 처리 개시 후, 평균 생존 기간을 모집단에 대해 계산함으로써, 측정될 수 있다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는 또한, 예를 들어 활성 화합물을 이용한 1회 처리 완료 후, 평균 생존 기간을 모집단에 대해 계산함으로써, 측정될 수 있다.
암 치료는 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 유사체 또는 유도체가 아닌 약물인 단일요법제를 수용하는 모집단 대비, 피치료 대상의 모집단의 평균 생존 시간의 증가를 초래할 수 있다. 바람직하게, 평균 생존 시간은 30일 초과; 보다 바람직하게, 60일 초과; 보다 바람직하게, 90일 초과; 가장 바람직하게, 120일 초과 증가된다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 전이성 병변의 수는 육안으로 또는 특정 확대율로 볼 수 있는 종양을 계수함으로써 측정될 수 있다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는, 예를 들어 활성 화합물을 이용한 처리 개시 후, 평균 생존 기간을 모집단에 대해 계산함으로써, 측정될 수 있다. 모집단의 평균 생존 시간의 증가는 또한, 예를 들어 활성 화합물을 이용한 1회 처리 완료 후, 평균 생존 기간을 모집단에 대해 계산함으로써, 측정될 수 있다.
암 치료는 담체만을 수용하는 모집단 대비, 피치료 대상의 모집단의 치사율의 감소를 초래할 수 있다. 암 치료는 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 유사체 또는 유도체가 아닌 약물인 단일요법제를 수용하는 모집단 대비, 피치료 대상의 모집단의 치사율의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치사율은 2% 초과; 보다 바람직하게, 5% 초과; 보다 바람직하게, 10% 초과; 가장 바람직하게, 25% 초과 감소된다. 피처리 대상의 모집단의 치사율의 감소는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 모집단의 치사율의 감소는, 예를 들어 활성 화합물을 이용한 처리 개시 후, 단위 시간 당 질환 관련 사망의 평균 수를 모집단에 대해 계산함으로써, 측정될 수 있다. 모집단의 치사율의 감소는 또한, 예를 들어 활성 화합물을 이용한 1회 처리 후, 단위 시간 당 질환 관련 사망의 평균 수를 모집단에 대해 계산함으로써, 측정될 수 있다.
암 치료는 종양 성장 속도의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 종양 성장 속도는 치료 전 체적 대비 5% 이상 감소되고; 보다 바람직하게는 종양 성장 속도가 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 가장 바람직하게, 75% 이상 감소된다. 종양 성장 속도는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 종양 성장 속도는 단위 시간 당 종양 직경의 변화에 따라 측정될 수 있다.
암 치료는 종양 재성장의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 종양 재성장은 치료 전 체적 대비 5% 미만 감소되고; 보다 바람직하게는 종양 재성장이 10% 미만; 보다 바람직하게, 20% 미만; 보다 바람직하게, 30% 미만; 보다 바람직하게, 40% 미만; 보다 더 바람직하게, 50% 미만; 가장 바람직하게, 75% 미만 감소된다. 종양 재성장은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 종양 재성장은 예를 들어 처리 후 이전 종양 수축 후, 종양의 직경의 증가를 측정함으로써 측정된다. 종양 재성장의 감소는, 처리가 중지된 후 종양이 재발하지 못하는 것으로 나타난다.
세포 증식성 장애의 치료 또는 예방은 세포 증식 속도의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 세포 증식 속도는 5% 이상; 보다 바람직하게, 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 바람직하게, 50% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 및 가장 바람직하게, 75% 이상 감소된다. 세포 증식 속도는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 세포 증식 속도는 예를 들어 단위 시간 당 조직 샘플 내 분열세포의 수를 측정함으로써 측정된다.
세포 증식성 장애의 치료 또는 예방은 증식 세포의 분율의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 증식 세포의 분율은 5% 이상; 보다 바람직하게, 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 바람직하게, 50% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 및 가장 바람직하게, 75% 이상 감소된다. 증식 세포의 분율은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 바람직하게, 증식 세포의 분율은 예를 들어 조직 샘플 내 비분율 세포의 수 대비 분열 세포의 수를 정량화함으로써 측정된다.
세포 증식성 장애의 치료 또는 예방은 세포 증식의 면적 또는 구역 크기의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 세포 증식의 면적 또는 구역 크기는 처리 전 그것의 크기 대비, 5% 이상; 보다 바람직하게, 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 바람직하게, 50% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 및 가장 바람직하게, 75% 이상 감소된다. 세포 증식의 면적 또는 구역 크기는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 세포 증식의 면적 또는 구역 크기는 세포 증식의 면적 또는 구역의 직경 또는 폭으로서 측정될 수 있다.
세포 증식성 장애의 치료 또는 예방은 이상 외관 또는 형태를 가지는 세포의 수 또는 분율의 감소를 초래할 수 있다. 바람직하게, 치료 후, 이상 외관 또는 형태를 가지는 세포의 수는 처리 전 그것의 크기 대비, 5% 이상; 보다 바람직하게, 10% 이상; 보다 바람직하게, 20% 이상; 보다 바람직하게, 30% 이상; 보다 바람직하게, 40% 이상; 보다 바람직하게, 50% 이상; 보다 더 바람직하게, 50% 이상; 및 가장 바람직하게, 75% 이상 감소된다. 이상 세포 외관 또는 형태는 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 이상 세포 형태는 현미경에 의해, 예를 들어 역전 조직 배양 현미경을 이용하여 측정될 수 있다. 이상 세포 형태는 핵 다형태성의 형태를 취할 수 있다.
본원에 사용되는 "선택적으로"라는 용어는 한 모집단에서 또 다른 모집에서보다 더 높은 빈도로 일어나는 경향이 있음을 의미한다. 비교 모집단은 세포 모집단일 수 있다. 바람직하게, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은 암 또는 전암 세포에 대해 선택적으로 작용하나, 정상 세포에서는 작용하지 않는다. 바람직하게, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은 한 분자 표적(예를 들어, 표적 단백질 메틸트랜스퍼라제)을 조절하기 위해 선택적으로 작용하나, 또 다른 분자 표적(예를 들어, 비-표적 단백질 메틸트랜스퍼라제)을 유의적으로 조절하지 않는다. 본 발명은 또한 효소, 예컨대 단백질 메틸트랜스퍼라제의 활성을 선택적으로 억제하는 방법을 제공한다. 바람직하게, 이벤트는 모집단 B에 비해 모집단 A에 2배 초과 더 빈번하게 일어날 경우, 모집단 B에 비해 모집단 A에서 선택적으로 일어나는 것이다. 이벤트는 모집단 A에서 5배 초과 더 빈번하게 일어날 경우, 선택적으로 일어난다. 이벤트는 집단 B에 비해, 모집단 A에서 10배 초과; 보다 바람직하게, 50배 초과; 보다 더 바람직하게는 100배 초과; 가장 바람직하게는 1000배 초과 더 빈번하게 일어날 경우, 선택적으로 일어난다. 예를 들어, 세포 사멸은 그것이 정상 세포에 비해 암 세포에서 2배 초과 더 빈번하게 일어날 경우, 암 세포에서 선택적으로 일어나는 것으로 칭해진다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은 분자 표적(예를 들어, 표적 단백질 메틸트랜스퍼라제)의 활성을 조절할 수 있다. 조절은 분자 표적의 활성을 자극 또는 억제함을 지칭한다. 바람직하게, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은, 그것이 동일하되, 단 상기 화합물의 존재만이 결여된 조건 하에 분자 표적의 활성 대비, 분자 표적의 활성을 2배 이상 자극 또는 억제할 경우, 분자 표적의 활성을 조절하는 것이다. 보다 바람직하게, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은, 그것이 동일하되, 단 상기 화합물의 존재만이 결여된 조건 하에 분자 표적의 활성 대비, 분자 표적의 활성을 5배 이상, 10배 이상, 20배 이상, 50배 이상, 100배 이상 자극 또는 억제할 경우, 분자 표적의 활성을 조절하는 것이다. 분자 표적의 활성은 임의의 재현가능한 측정 수단에 의해 측정될 수 있다. 분자 표적의 활성은 시험관내 또는 생체내 측정될 수 있다. 예를 들어, 분자 표적의 활성은 효소 활성 검정법 또는 DNA 결합 검정법에 의헤 시험관내 측정될 수 있거나, 또는 분자 표적의 활성은 리포터 유전자의 발현에대한 검정법에 의해 생체내 측정될 수 있다.
본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은, 그것이 동일하되, 단 상기 화합물의 존재만이 결여된 조건 하에 분자 표적의 활성 대비, 분자 표적의 활성을 10% 초과 자극 또는 억제할 경우, 분자 표적의 활성을 조절하는 것이다.
본원에 사용되는 "이소자임 선택적"이란 용어는 제2 아형의 효소 대비, 제1 아형의 효소의 우선적 억제 또는 자극(예를 들어, 단백질 메틸트랜스퍼라제 이소자임 베타 대비, 단백질 메틸트랜스퍼라제 이소자임 알파의 우선적 억제 또는 자극)을 의미한다. 바람직하게, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은 생물학적 효과를 달성하는 데 필요한 투약량으로, 최소 4배 차, 바람직하게는 10배 차, 보다 바람직하게 50배 차를 나타낸다. 바람직하게, 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은 억제 범위에 걸쳐 상기 차를 나타내고, 관심 분자 표적에 대해, IC50, 즉, 50% 억제율로 예시된다.
본 치료가 필요한 세포 또는 대상에의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 투여는 관심 단백질 메틸트랜스퍼라제의 활성의 조절(즉, 자극 또는 억제)을 초래할 수 있다.
본 발명은 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 생물학적 활성을 평가하는 방법, 또는 시험 화합물을 DOT1L의 조절자(예를 들어, 억제자)로서동정하는 방법을 제공한다. DOT1L 폴리펩티드 및 핵산은 H3K79 HMT아제 활성, SAM 결합 활성, 히스톤 및/또는 뉴클레오좀 결합 활성, AF10 결합 활성, AF10-MLL 또는 기타 MLL 융합 단백질 결합 활성, 및/또는 임의의 기타 관심 생물학적 활성을 포함하나 이들에 국한되지 않는, DOT1L의 하나 이상의 생물학적 활성을 조절(예를 들어, 증가 또는 감소)시키고/시키거나 그것에 결합하는 화합물에 대해 스크리닝하는 데 사용될 수 있다. DOT1L 폴리펩티드는 전장 DOT1L 폴리펩티드 또는 이의 기능적 균등체의 기능적 단편일 수 있고, 이는 촉매 도메인, SAM 결합 도메인 및/또는 양 하전 도메인, AF10 상호작용 도메인 및/또는 핵 배출 신호가 포함되나 이들에 국한되지 않는 임의의 관심 DOT1 도메인을 포함할수 있다.
히스톤, 뉴클레오좀, 핵산 또는 폴리펩티드에 결합하는 DOT1L의 평가 방법은 당업계의 숙련가에게 자명한 표준 기법을 이용하여 수행될 수 있다(예시적 방법에 대한 예시 참조). 그러한 방법에는 효모 및 포유동물2-하이브리드 검정법 및 공동 면역석출 기법이 포함된다.
예를 들어, DOT1L H3K79 HMT아제 활성을 조절하는 화합물은, DOT1L 폴리펩티드를 시험 화합물의 존재 하에 H3을 포함하는 히스톤 또는 펩티드 기질과 접촉시키고; H3K79 메틸화를 제공하는 데 충분한 조건 하에서 히스톤 또는 펩티드의 H3K79 메틸화의 수준을 검출함(여기서, 화합물의 부재 하에서의 히스톤 H3K79 메틸화의 수준 대비, 시험 화합물의 존재 하에서의 히스톤 H3K79 메틸화의 수준의 상승 또는 감소는 시험 화합물이 DOT1L H3K79 HMT아제 활성을 조절함을 가리킴)에 의해 확인될 수 있다.
본 발명의 스크리닝 방법은 세포 기재 또는 세포 부재 시스템에서 수행될 수 있다. 추가 대안으로서, 검정법은 전 동물(유전자전환 인간외 동물을 포함함) 내에서 또한 세포 기재의 시스템에 대해 수행될 수 있다. 또한, 세포 기재의 시스템에 대해, DOT1L 폴리펩티드 (또는 검정법에 사용된 임의의 기타 폴리펩티드)는 세포에 직접 첨가될 수 있거나, 세포 내 핵산으로부터 생성될 수 있다. 핵산은 세포에 대해 내인성이거나, 외래(예를 들어, 유전 변형 세포)일 수 있다.
일부 검정법에서, 면역학적 시약, 예를 들어 항체 및 항원이 이용된다. 일부 검정법에서 효소 활성의 측정에 형광이 이용될 수 있다. 본원에 사용되는 "형광"은 동일 분자에 의해 보다 높은 에너지의 유입 광자를 흡수함에 따른 결과로서 분자가 광자를 방출하게 되는 과정을 지칭한다. 개시 화합물의 생물학적 활성을 평가하는 특정 방법이 실시예에 기재되어 있다.
본 치료가 필요한 세포 또는 대상에의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 투여는 세포내 표적(예를 들어, 기질)의 활성의 조절(즉, 자극 또는 억제)를 초래한다. 수가지 세포내 표적은 단백질 메틸트랜스퍼라제를 포함하나 이에 국한되지 않는 본 발명의 화합물로 조절될 수 있다.
활성화란 문제의 조성물(예를 들어, 단백질 또는 핵산)을 요망되는 생물학적 기능을 수행하기에 적당한 상태에 둠을 가리킨다. 활성화될 수 있는 문제의 조성물은 또한 비활성화 상태를 가진다. 문제의 활성화 조성물은 억제 또는 자극 생물학적 기능, 또는 양자 모두를 가질 수 있다.
상승이란 문제의 조성물(예를 들어, 단백질 또는 핵산)의 요망되는 생물학적 활성의 증가를 지칭한다. 상승은 문제의 조성물의 농도의 증가를 통해 일어날 수 있다.
본원에 사용되는 "세포 주기 체크포인트 경로"란 세포 주기 체크포인트의 조절과 관련된 생화학 경로를 지칭한다. 세포 주기 체크포인트 경로는 세포 주기 체크포인트를 포함하는 하나 이상의 기능에 대한 자극 또는 억제 효과, 또는 양자 모두를 가질 수 있다. 세포 주기 체크포인트 경로는 양자 모두 세포 주기 체크포인트를 조절하는 2개 이상의 문제의 조성물, 바람직하게 단백질로 이루어진다. 세포 주기 체크포인트 경로는 세포 주기 체크포인트 경로의 하나 이상의 구성원의 활성화를 통해 활성화될 수 있다. 바람직하게, 세포 주기 체크포인트 경로는 생화학 신호전달 경로이다.
본원에 사용되는 "세포 주기 체크포인트 조절자"란 세포 주기 체크포인트의 조절에 있어 적어도 부분적으로 기능할 수 있는 문제의 조성물을 지칭한다. 세포 주기 체크포인트 조절자는 세포 주기 체크포인트를 포함하는 하나 이상의 기능에 대한 자극 또는 억제 효과, 또는 양자 모두를 가질 수 있다. 세포 주기 체크포인트 조절자는 단백질이거나 단백질이 아닐 수 있다.
암 또는 세포 증식성 장애의 치료는 세포 사멸을 초래할 수 있고, 바람직하게 세포 사멸은 모집단 내 세포수의 10% 이상의 감소를 초래할 수 있다. 보다 바람직하게, 세포 사멸은 20% 이상의 감소; 보다 바람직하게, 30% 이상의 감소; 보다 바람직하게, 40% 이상의 감소; 보다 바람직하게, 50% 이상의 감소; 가장 바람직하게, 75% 이상의 감소를 의미한다. 모집단 내 세포수는 임의의 재현가능한 수단에 의해 측정될 수 있다. 모집단 내 다수의 세포들은 형광 활성 세포 분류법(FACS), 면역형광 현미경 및 광 현미경에 의해 측정될 수 있다. 세포 사멸의 측정 방법이 문헌[Li et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 100(5): 2674-8, 2003]에 나와 있는 바와 같다. 한 측면에서, 세포 사멸은 아포프토시스에 의해 일어난다.
바람직하게, 유효량의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물은 정상 세포에 대해 유의적으로 세포독성이 아니다. 치료 유효량의 화합물은, 치료 유효량의 화합물의 투여가 정상 세포의 10% 초과로 세포 사멸을 유도하지 않을 경우, 정상 세포에 대해 유의적으로 세포독성이 아닌 것이다. 치료 유효량의 화합물은, 치료 유효량의 화합물의 투여가 정상 세포의 10% 초과로 세포 사멸을 유도하지 않을 경우, 정상 세포의 생육성에 유의적으로 영향을 미치지 않는다.한 측면에서, 세포 사멸은 아포프토시스에 의해 일어난다.
세포의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물과의 접촉은 암 세포에서 세포 사멸을 선택적으로 유도 또는 활성화할 수 있다. 본 치료가 필요한 대상에 대한 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 투여는 암 세포에서 세포 사멸을 선택적으로 유도 또는 활성화할 수 있다. 세포의 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물과의 접촉은 세포 증식성 장애에 의해 영향을 받는 하나 이상의 세포에서 세포 사멸을 선택적으로 유도할 수 있다. 바람직하게, 본 치료가 필요한 대상에 대한 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 투여는 세포 증식성 장애에 의해 영향을 받는 하나 이상의 세포에서 세포 사멸을 선택적으로 유도한다.
본 발명은 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물을 본 치료가 필요한 대상에게 투여함으로써 암을 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이며, 여기서 본 발명의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 프로드러그, 대사물, 다형체 또는 용매화물의 투여는 하기의 것들 중 하나 이상을 초래한다: 세포 주기의 G1기 및/또는 S기에서의 세포 축적, 정상 세포 내 유의량의 세포 사멸없이 암 세포 내 세포 사멸을 통한 세포독성, 2 이상의 치료 지수를 가지는 항종양 활성, 및 세포 주기 체크포인트의 활성화. 본원에 사용되는 "치료 지수"는 최대 내인 용량을 효능있는 용량으로 나눈 것이다.
당업계의 숙련가는 본원에 논의된 공지된 기법 또는 이와 균등한 기법에 대한 상세한 설명에 대한 일반 참조 문헌을 참조할 수 있다. 이 문헌들에는 문헌들[Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons, Inc. (2005)]; 문헌[Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual (3rd edition), Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, New York (2000)]; 문헌[Coligan et al., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, N.Y.]; 문헌[Enna et al., Current Protocols in Pharmacology, John Wiley & Sons, N.Y.]; 문헌[Fingl et al., The Pharmacological Basis of Therapeutics (1975), Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 18th edition (1990)]이 포함된다. 물론 이들 문헌은 본 발명의 측면을 수행하고 이용할 때 참조될 수 있다.
본 발명의 화합물은 신경 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하기 위해 이용될 수도 있다. 본 발명의 화합물로 처리될 수 있는 신경 질환 또는 장애에는 간질, 정신분열병, 조울 장애 또는 기타 생리학적 및/또는 정신의학 장애, 신경장해, 골격근 위축증, 및 신경병성 질환, 예를 들어 신경병성 질환이 포함된다. 예시적 신경병성 질환에는 알츠하이머병, 근위축성 측색 경화증(Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS)), 및 파킨슨병이 포함된다. 또 다른 부류의 신경병성 질환에는 적어도 부분적으로 폴리-글루타민의 응집에 의해 유발되는 질환들이 포함된다. 이 부류의 질환에는 헌팅턴병, 척수 구 근육 위축증(Spinalbulbar Muscular Atrophy (SBMA 또는 케네디병)), 치아적핵담창구루이체 위축증(Dentatorubropallidoluysian Atrophy (DRPLA)), 척수소뇌실조증(Spinocerebellar Ataxia 1(SCA1)), 척수소뇌실조증 2(SCA2), 마카도-조셉(Machado-Joseph) 질환(MJD; SCA3), 척수소뇌실조증 6(SCA6), 척수소뇌실조증 7(SCA7), 및 척수소뇌실조증 12(SCA12)가 포함된다.
DOT1에 의해 매개되는 후생적 메틸화가 역할을 하는 임의의 기타 질환이 본원에 기재된 화합물 및 방법을 이용하여 치료 또는 예방가능할 수 있다.
4. 약학적 조성물
본 발명은 또한 화학식 (I), (II), (IIIa), (IIIb), (IIIc) 및 (IV)의 화합물을 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체와 조합하여 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
"약학적 조성물"은 대상에게 투여하기에 적당한 형태의 본 발명의 화합물을 함유하는 제형이다. 한 실시양태에서, 약학적 조성물은 벌크 또는 단위 투약 형태이다. 단위 투약 형태는 예를 들어 캡슐, IV 백, 정제, 에어로졸 흡인기 또는 바이얼 상의 단일 펌프를 비롯한 각종 형태들 중 임의의 것이다. 탄위 투약량의 조성물 내의 활성 성분(예를 들어, 개시된 화합물, 또는 이의 염, 수화물, 용매화물 또는 이성질체의 제형)의 양은 유효량이고, 관련된 특정 치료에 따라 변화된다. 당업계의 숙련가는 경우에 따라 환자의 연령 및 상태에 따라 투약량을 통상적으로 변화시키는 것이 필요하다는 것을 인식할 것이다. 투약량은 또한 투여 경로에 의존할 것이다. 경구, 폐, 직장, 비경구, 경피, 피하, 정맥, 근육내, 복강내, 흡입, 구강, 설하, 흉막내, 척추강내, 비내 등을 포함한 각종 경로들이 고려된다. 본 발명의 조성물의 국소 또는 경피 투여를 위한 투약 형태애는 분말, 스프레이, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 젤, 용액, 패치 및 흡입제가 포함된다. 한 실시양태에서, 활성 화합물은 무균 조건 하에서 약학적으로 허용가능한 담체, 및 필요한 임의의 보존제, 완충제 또는 추진제와 조합된다.
본원에 사용되는 "약학적으로 허용가능한"이란 어구는 합당한 이익/위험 비로 적합한, 과다 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 기타 문제, 혹은 합병증 없이, 인간 및 동물의 조직과 접촉시키기에 적당한, 건전한 의료 판단 범주 내에 속하는 상기 화합물, 물질, 조성물, 담체, 및/또는 투약 형태가 포함된다.
"약학적으로 허용가능한 부형제"란 일반적으로 안전하고 비독성이며 생물학적으로나 다른 방식으로도 바람직한 약학적 조성물을 제조하는 데 유용한 부형제를 의미하고, 이에는 수의학적 용도 및 인간 약학적 용도에 허용가능한 부형제가 포함된다. 본 명세서 및 청구범위에 사용된 "약학적으로 허용가능한 부형제"에는 하나 및 하나 초과의 상기 부형제가 포함된다.
본 발명의 약학적 조성물은 의도된 투여 경로에 상용적이도록 제형된다. 투여 경로의 예에는 비경구, 예를 들어 정맥, 피내, 피하, 경구(예를 들어, 흡입), 경피(국소), 및 경점막 투여가 포함된다. 비경구, 피내 또는 피하 용도에 사용되는 용액 또는 현탁액에는 하기 성분들이 포함될 수 있다: 무균 희석제, 예컨대 주입용 물, 염액, 고정 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 합성 용매; 항세균제, 예컨대 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예컨대 아스코르브산 또는 이황솨나트륨; 킬레트화제, 예컨대 에틸렌 디아민테트라아세트산; 완충제, 예컨대 아세트산염, 시트르산염 또는 인산염, 및 등장성 조정제, 예컨대 염화나트륨 또는 덱스트로스. pH는 산 또는 염기, 예컨대 염산 또는 수산화나트륨으로 조정될 수 있다. 비경구 제제가 유리 또는 플라스틱으로 제조된, 앰퓰, 1회용 주사기 또는 다회용 바이얼 내에 봉입될 수 있다.
본 발명의 화합물 또는 약학적 조성물은 화학요법 치료에 현재 사용되고 있는 다수의 공지 방법들로 대상에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 암 치료를 위해, 본 발명의 화합물은 종양에 직접 주사되거나, 혈류 또는 체강 내에 주사되거나, 패치로 피부를 통해 적용될 수 있다. 선택된 용량은 유효 치료를 구성하기에 충분해야 하나, 허용되지 않는 부작용을 유발할만큼 높아서는 안된다. 질환 상태(예를 들어, 암, 전암 등)의 현 상태 및 환자의 건강은 치료 후 합당한 기간 동안 바람직하게 면밀히 모니터링되어야 한다.
본원에 사용되는 "치료 유효량"이란 용어는 규명된 질환 또는 상태를 치료, 개선 또는 예방하거나, 검출가능한 치료 또는 억제 효과를 나타내기 위한 약학적 제제의 양을 지칭한다. 효과는 당업계에 공지된 임의의 검정 방법에 의해 검출될 수 있다. 대상에 대한 정확한 유효량은 대상의 체중, 크기 및 건강; 상태의 성질 및 정도; 및 투여를 위해 선택된 치료제에 의존할 것이다. 소정의 상황에 대한 치효 유효량은 임상의 능력 및 판단 내에 속하는 통상의 실험에 의해 결정될 수 있다. 한 바람직한 측면에서, 피치료 질환 또는 상태는 암이다. 한 측면에서, 피치료 질환 또는 상태는 세포 증식성 장애이다.
임의의 화합물에 대해, 치료 유효량은 세포 배양 검정법, 예를 들어 신생물 세포의 배양 검정법에서, 또는 동물 모델, 통상은 래트,마우스, 토끼, 개 또는 돼지에서 초기에 평가될 수 있다. 동물 모델은 또한 적절한 농도 범위 및 투여 경로를 결정하기 위해 사용될 수 있다. 이어서, 그러한 정보는 인간에서의 유용한 용량 및 투여 경로를 결정하기 위해 사용될 수 있다. 치료/예방 효능 및 독성이 세포 배양액 또는 실험 동물에서의 표준 약학 절차, 예를 들어 ED50(모집단의 50%에서 치료학적으로 유효한 용량) 및 LD50(모집단의 50%에서 치사적인 용량)에 의해 결정될 수 있다. 독성 효과와 치료 효과 간의 용량비는 치료 지수이고, 이는 LD50/ED50 비로 나타내어질 수 있다. 큰 치료 지수를 나타내는 약학적 조성물이 바람직하다. 투약량은 이용되는 투약 형태, 환자의 심각도 및 투여 경로에 따르는 상기 범위 내에서 변화할 수 있다.
투약량 및 투여는 활성제(들)의 충분한 수준을 제공하거나, 요망되는 효과를 유지하기 위해 조정된다. 고려될 수 있는 인자에는 질환 상태의 심각도, 대상의 건강 상태, 대상의 연령, 체중 및 성별, 식이법, 투여 시간 및 빈도, 약물 상호작용(들), 반응 감도 및 요법에 대한 내인성/반응이 포함된다. 장기 작용 약학적 조성물은 특정 제형물의 반감기 및 클리어런스 비율에 따라 3 내지 4일마다, 매주, 또는 격주 1회 투여될 수 있다.
본 발명의 활성 화합물을 함유하는 약학적 조성물은 일반적으로 공지된 방식으로, 예를 들어 통상적 혼합, 용해, 과립화, 당의정 제조, 분체화, 유화, 캡슐화, 포획 또는 동결건조 공정에 의해 제조될 수 있다. 약학적 조성물은 약학적으로 사용될 수 있는 제제로 활성 화합물을 가공하는 것을 용이하게 하는 부형제 및/또는 보조제를 포함하는 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 이용하여 통상적 방식으로 제형될 수 있다. 물론, 적절한 제형은 선택된 투여 경로에 의존한다.
주사용 용도에 적당한 약학적 조성물에는 무균 수용액(수용성인 경우) 또는 분산액, 및 무균 주사용 용액 또는 분산액의 제조를 위한 분산액 및 무균 분말이 포함된다. 정맥 투여의 경우, 적당한 담체에는 생리 식염수, 제균수, 크레모포르(Cremophor) EL™(바스프(BASF), 미국 뉴저지 파르시파니 소재) 또는 인산염 완충 식염수(PBS)가 포함된다. 모든 경우들에서, 조성물은 무균성이어야 하고, 용이한 주사가능성이 존재하는 정도로 유동적이어야 한다. 그것은 제조 및 저장 조건 하에서 안정되어야 하고, 진균 및 곰팡이와 같은 미생물의 오염 작용으로부터 보존되어야 한다. 담체는, 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 이들의 적당한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅물의 사용, 분산액의 경우에 필요한 입자 크기의 유지, 및 계면활성제의 사용에 의해 적절한 유동성이 유지될 수 있다. 미생물 작용의 방지가 각종 항세균 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산, 티메로살 등에 의해 달성될 수 있다. 많은 경우들에서, 조성물 내에 등장제, 예를 들어 당, 당알코올, 예컨대 만니톨 및 소르비톨, 및 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사용 조성물의 연장 흡수는 흡수를 지여시키는 제제, 예를 들어 일스테아르산알루미늄 및 젤라틴을 조성물 내에 포함시킴으로써 초래될 수 있다.
무균 주사용 용액은 필요량의 활성 화합물을 필요에 따라 상기 열거된 성분들 중 하나 또는 조합과 함께 적절한 용매 중에 혼입한 후, 여과 무균함으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산액은 활성 화합물을 염기성 분산 매질 및 상기 열거된 것들로부터의 다른 필요 성분들을 함유하는 무균 비히클 내에 혼입함으로써 제조된다. 무균 주사용 용액의 제조를 위한 무균 분말의 경우, 제조 방법은 진공 건조 및 동결 건조이고, 이는 사전에 무균 여과된 그 용액으로부터 임의의 요망되는 부가 성분들과 조합된 활성 성분의 분말을 생성시킨다.
경구 조성물은 일반적으로 불활성 희석제 또는 식용성의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함한다. 이들은 젤라틴 캡슐 내에 밀봉될 수 있다. 경구 치료 투여의 목적을 위해, 활성 화합물은 부형제와 함께 혼입되어, 정제, 트로키 또는 캡슐의 형태로 사용될 수 있다. 경구 조성물은 또한 마우스워시로서 사용하기 위해 플루이드 담체를이용하여 제조될 수도 있고, 여기서 플루이드 담체 내의 화합물은 경구 적용되어, 휙하고 뱉거나 삼켜진다. 약학적으로 상용적인 결합제 및/또는 보조 물질은 조성물의 부분으로서 포함될 수 있다. 정제, 환약, 캡슐, 트로키 등은 하기 성분들 중 임의의 것, 또는 유사 성질의 화합물을 함유할 수 있다: 결합제, 예컨대 미세결정성 셀룰로스, 트라가칸트검 또는 젤라틴; 부형제, 예컨대 전분 또는 락토스, 붕해제, 예컨대 알긴산, 프리모겔(Primogel), 또는 옥수수 전분; 윤활제, 예컨대 스테아르산마그네슘 또는 스테로테스(Sterotes); 활주제, 예컨대 콜로이드성 이산화규소; 감미제, 예컨대 수크로스 또는 삭카린; 또는 풍미제, 예컨대 페퍼민트, 살리실산메틸 또는 오렌지 풍미제.
흡입에 의한 투여를 위해, 화합물은 가압 컨테이너 또는 디스펜서로부터 에어로졸 스프레이의 형태로 전달되고, 이는 적당한 추진제, 예를 들어 이산화탄소와 같은 기체 또는 네뷸라이저를 함유한다.
전신 투여는 또한 경점막 또는 경피 수단에 의해 이루어질 수 있다. 경점막 또는 경피 투여를 위해, 투과되는 배리어에 적절한 투과제가 제형 내에 사용된다. 그러한 투과제는 일반적으로 당업계에 공지되어 있고, 이에는 예를 들어 경점막 투여를 위해서는, 세제, 담즙 염 및 퓨시딕산 유도체가 포함된다. 경점막 투여는 코 스프레이 또는 좌약제의 사용을 통해 달성될 수 있다. 경점막 투여를 위해, 활성 화합물은 당업계에 일반적으로 공지된 바와 같이, 연고, 살브, 젤 또는 크림으로 제형된다.
활성 화합물은 신체로부터의 급속 제거로부터 화합물을 보호하게 되는 약학적으로 허용가능한 담체, 예컨대 임플란트 및 미세캡슐화 전달계를 포함한 조절 방출 제형을 이용하여 제조될 수 있다. 생물분해성의 생체적합성 중합체, 예컨대 에틸렌 비닐 아세트산염, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르, 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 상기 제형의 제조 방법은 당업계의 숙련가에게 자명할 것이다. 물질은 또한 알자 코포레이션(Alza Corporation) 및 노바 파마슈티칼즈 인코포레이티드(Nova Pharmaceuticals, Inc.)로부터 상업적으로 수득될 수 있다. 리포좀형 현탁액(바이러스성 항원에 대한 단클론 항체를 가지는 감염 세포에 표적화된 리포좀을 포함함)은 또한 약학적으로 허용가능한 담체로 사용될 수 있다. 이들은 당업계의 숙련가에게 공지된 방법, 예를 들어 미국 특허 제4,522,811호에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있다.
투여 용이성 및 투약 균일성을 위해 경구 또는 비경구 조성물을 투약 단위 형태 내로 제형하는 것이 특히 유리하다. 본원에 사용된 투약 단위 형태는 피처리 대상에 대해 단위 투약으로서 적합화된 물리적으로 구분된 단위를 지칭하고; 각 단위는 필요한 약학적 담체와 연관된 요망되는 치료 효과를 생성시키도록 계산된 소정량의 활성 화합물을 함유한다. 본 발명의 투약 단위 형태에 대한 상세 내역은 활성 화합물의 고유의 특성 및 달성하고자 하는 특정 치료 효과에 의해 좌우되고 직접 의존한다.
치료 용도에서, 본 발명에 따라 사용되는 약학적 조성물의 투약량은 선택된 투약량에 영향을 미치는 기타 인자들 중, 수령 환자의 제제, 연령, 중량 및 임상 상태, 및 요법을 투여하는 임상의 또는 수행자의 경험 및 판단에 따라 변화한다. 일반적으로, 용량은 종양의 성장을 저속화하고, 바람직하게는 퇴행시키고 또한 바람직하게 암의 완전 퇴행을 유발하기에 충분해야 한다. 투약량은 약 0.01 mg/kg/일 내지 약 5000 mg/kg/일의 범위 내일 수 있다. 바람직한 측면에서, 투약량은 약 1 mg/kg/일 내지 약 1000 mg/kg/일의 범위 내일 수 있다. 한 측면에서, 용량은 단일, 분할 또는 연속 투약(이 용량은 환자의 체중(kg), 체표면적(m2) 및 연령(세)에 따라 조정될 수 있음)으로, 약 0.1 mg/일 내지 약 50 g/일; 약 0.1 mg/일 내지 약 25 g/일; 약 0.1 mg/일 내지 약 10 g/일; 약 0.1 mg 내지 약 3 g/일; 또는 약 0.1 mg 내지 약 1 g/일의 범위 내일 수 있다. 약학적 제제의 유효량은 임상의 또는 기타 적격의 관찰자에 의해 주목되는 객관적으로 규명가능한 향상을 제공하는 양이다. 예를 들어, 환자의 종양의 퇴행은 종양의 직경을 참조하여 측정될 수 있다. 종양의 직경의 감소는 퇴행을 가리킨다. 퇴행은 또한 치료가 중단된 후 종양이 재발하지 못하게 되는 것으로 나타난다. 본원에 사용되는 "투약 유효 방식"이란 용어는 대상 또는 세포 내 요망되는 생물학적 효과를 산출하는 활성 화합물의 양을 지칭한다.
약학적 조성물은 투여에 대한 사용설명서와 함께 컨테이너, 팩 또는 디스펜서 내에 포함될 수 있다.
본 발명의 화합물은 추가로 염을 형성할 수 있다. 이들 형태 모두는 또한 청구된 발명의 범주 내에 고려된다.
본원에 사용되는 "약학적으로 허용가능한 염"은 본 발명의 화합물의 유도체를 지칭하고, 여기서 모 화합물은 이의 산 또는 염기 염을 제조함으로써 변형된다. 약학적으로 허용가능한 염의 예에는 염기성 잔기, 예컨대 아민의 무기산 또는 유기산, 산성 잔기, 예컨대 카르복실산의 알칼리염 또는 유기 염 등이 포함된다. 약학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어 비독성 무기산 또는 유기산으로부터 형성되는 모 화합물의 통상적 비독성 염 또는 4차 암모늄 염을 포함한다. 예를 들어, 그러한 통상적 비독성 염에는 2-아세톡시벤조산, 2-히드록시에탄 술폰산, 아세트산, 아스코르브산, 벤젠 술폰산, 벤조산, 중탄산, 탄산, 시트르산, 에테틱산, 에탄 디술폰산, 1,2-에탄 술폰산, 푸마르산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루탐산, 글리콜산, 글리콜리아르사닐산, 헥실레소르신산, 히드라밤산, 수소화붕소산, 염화수소산, 요오드화수소산, 말레수소산, 나프토수소산, 이세티온산, 락트산, 락토비온산, 라우릴술폰산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄술폰산, 나프실산,니트르산, 옥살산,파모산,판토텐산, 페닐아세트산, 인산, 폴리갈락투론산, 프로피온산, 살리실산, 스테아르산, 수바세트산, 숙신산, 술팜산, 술파닐산, 황산, 탄산, 주석산, 톨루엔 술폰산 및 통상 발생하는 아민 산, 예를 들어 글리신, 알라닌, 페닐알라닌, 아르기닌 등으로부터 선택되는 무기산 및 유기산으로부터 유도된 것들이 포함되나 이들에 국한되지 않는다.
약학적으로 허용가능한 염의 다른 예에는 헥산산, 시클로펜탄 프로피온산, 피루브산, 말론산, 3-(4-히드록시벤조일)벤조산, 신남산, 4-클로로벤젠술폰산, 2-나프탈렌술폰산, 4-톨루엔술폰산, 캄포르 술폰산, 4-메틸비시클로-[2.2.2]-옥트-2-엔-1-카르복실산, 3-페닐프로피온산, 트리메틸아세트산, 3차 부틸아세트산, 뮤콘산 등이 포함된다. 본 발명은 또한 모 화합물 내에 존재하는 산성 양성자가 금속 이온, 예를 들어 알칼리 금속 이온, 알칼리 토금속 이온, 또는 알루미늄 이온에 의해 치환되거나; 또는 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, 트로메타민, N-메틸글루카민 등과 같은 유기 염기와 배위할 때 형성되는 염을 포함한다.
약학적으로 허용가능한 염에 대한 모든 표현은 동일 염의, 본원에 정의된 바와 같은 용매 부가형(용매화물) 또는 결정형(다형체)을 포괄함을 이해하도록 한다.
본 발명의 화합물은 또한 에스테르, 예를 들어 약학적으로 허용가능한 에스테르로서 제조될 수 있다. 예를 들어, 화합물 내의 카르복실산 작용기는 그것의 상응하는 에스테르, 예를 들어 메틸, 에틸 또는 기타 에스테르로 전환될 수 있다. 또한, 화합물 내의 알코올기는 이의 상응하는 에스테르, 예를 들어 아세트산염, 프로피온산염 또는 기타 에스테르로 전환될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 프로드러그, 예를 들어 약학적으로 허용가능한 프로드러그로서 제조될 수도 있다. "프로-드러그" 및 "프로드러그"는 본원에 상호 혼용되고, 생체내 활성 모 약물을 방출하는 임의의 화합물을 지칭한다. 프로드러그는 약학 물질의 다수의 요망되는 특징(예를 들어, 용해도, 생체유용성, 제조 등)을 증진시키는 것으로 공지되어 있어, 본 발명의 화합물은 프로드러그 형태 내에 포함되어 전달될 수 있다. 따라서, 본 발명은 본 청구 화합물의 프로드러그, 이의 전달 방법, 및 이를 포함하는 조성물을 포괄하는 것으로 의도된다. "프로드러그"는, 상기 프로드러그를 대상에게 투여 시에 생체내 본 발명의 활성 모 약물을 방출하는 임의의 공유 결합된 담체를 포함하도록 의도된다. 본 발명에서의 프로드러그는 변형이 통상의 조작 또는 생체내 모 화합물로 전달되도록 하는 방식으로 화합물 내에 존재하는 작용기를 변형시킴으로써 제조된다. 프로드러그는 히드록시, 아미노, 술프히드릴, 카르복시 또는 카르보닐기가 생체내 절단되어, 유리 히드록실, 유리 아미노, 유리 술프히드릴, 유리 카르복시 또는 유리 카르보닐기를 각기 형성할 수 있는 임의의 기에 결합된 본 발명의 화합물을 포함한다.
프로드러그의 예에는 본 발명의 화합물 내의 에스테르(예를 들어, 아세트산염, 디알킬아미노아세트산염, 포름산염, 인산염, 황산염 및 벤조산염 유도체) 및 히드록실 작용기의 카르밤산염(예를 들어, N,N-디메틸아미노카르보닐), 카르복실 작용기의 에스테르(예를 들어, 에틸 에스테르, 모르폴리노에탄올 에스테르), N-아실 유도체(예를 들어, N-아세틸) N-만니히 염기, 쉬프(Schiff) 염기 및 아미노 작용기의 에나미논, 케톤 및 알데히드 작용기의 옥심, 아세탈, 케탈 및 에놀 에스테르 등이 포함되나 이들에 국한되지 않는다(문헌[Bundegaard, H., Design of Prodrugs, p1-92, Elesevier, New York-Oxford (1985)] 참조).
화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르 또는 프로드러그는 경구, 비강, 경피, 폐, 흡입, 구강, 설하, 복강내, 피하, 근육내, 정맥, 직장, 흉막내, 척추강내 및 비경구 투여된다. 한 실시양태에서, 화합물은 경구 투여된다. 당업계의 숙련가는 일부 투여 경로의 이점을 인식할 것이다.
상기 화합물을 이용하는 투약 방식(regimen)은 환자의 유형, 종, 연령, 체중, 성별 및 의료 상태; 피처리상태의 심각도; 투여 경로; 환자의 간 및 간장 기능; 및 이용되는 특정 화합물 또는 이의 염에 따라 선택된다. 통상의 숙련된 의사 또는수의자라면 그 상태를 예방, 대응 또는 저지하는 데 필요한 약물의 유효량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다.
본 발명의 개시된 화합물을 제형하고 투여하는 기법은 문헌[Remington: the Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, Mack Publishing Co., Easton, PA(1995)]에서 찾아볼 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제와 조합하여 약학적 제제 내에 사용된다. 적당한 약학적으로 허용가능한 담체에는 불활성 고체 충전제 또는 희석제 및 무균 수용액 또는 유기 용액이 포함된다. 화합물은 본원에 기재된 범위 내의 요망되는 투약량을 제공하는 데 충분한 양으로 상기 약학적 조성물 내에 존재할 것이다.
본원에 사용되는 모든 백분율 및 비는 달리 명시되지 않는 한, 중량 기준이다. 본 발명의 다른 특성 및 이점은 다른 실시예들로부터 명백하다. 제공된 실시예는 본 발명을 수행하는 데 유용한 상이한 성분 및 방법을 설명한다. 실시예는 청구된 발명을 제한하지 않는다. 본 개시내용에 기초하여, 당업자라면 본 발명을 수행하는 데 유용한 다른 성분 및 방법을 규명하고 이용할 수 있다.
본원에 기재된 합성 반응식에서, 화합물은 단순화를 위해 한 특정 형태로 그려질 수 있다. 그러한 특정 형태는 본 발명을 하나 또는 또 다른 이성질체, 호변체, 구조이성질체 또는 입체 이성질체로 제한하는 것으로 간주되어서도 안되고, 이성질체, 호변체, 구조이성질체 또는 입체 이성질체의 혼합물를 배제하지도 않는다.
본원에 기재된 화합물은 이하 실시예에 기재된, 활성, 예를 들어 히스톤 메틸화의 조절, 세포 성장의 조절 및/또는 IC50에 대해 검정된다. IC50 값은 A = <0.1 μM; B = > 0.1 μM 및 <1 μM; C = > 1 μM 및 < 10 μM; 및 D = > 10 μM 및 < 50 μM로서 제시된다.
Figure pct00111
본원에 인용된 모든 공보 및 특허 문헌은, 각각의 그러한 공보 또는 문헌이 구체적이고 개별적으로 본원에 참조 인용되는 것으로 표시되는 것과 같이 본원에 참조 인용된다. 공보 및 특허 문헌의 인용은, 그것이 임의의 것이 적절한 종래 기술인 것으로 의도되는 것도 아니고, 이의 내용 또는 일자에 대해서도 어떠한 인용을 구성하지 않는다. 본 발명은 지금 서술 기재 방식으로 기재된 바, 당업자는 본 발명이 각종 실시양태들로 수행될 수 있고 상기 기술내용 및 이하 실시예가 이후 청구범위를 설명하기 위한 것으로 이를 제한하지 않는다.
5. 실시예
400.130 MHz의 필드 강도에서 작동하는 브루커 아반스(Bruker Avance) 400에서 핵 자기 공명 (NMR) 스펙트럼이 수득되거나, 500 MHz 브루커 어반스 III 분광계에서 브루커 DRX 500 MHz NMR 또는 HNMR 스펙트럼이 수득되었다. 통상의 반응 용매는 달리 언급되지 않는 한 제조업체로부터 수득된 무수물, 및 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 등급 또는 미국 화학 학회(American Chemical Society (ACS)) 등급이었다. 워터스 2795 세퍼레이션 모듈(Separations Module) 및 워터스 996 광다이오드 어레이 검출기가 장착된 워터스 마이크로매스(Waters Micromass) ZMD, 및 워터스 2695 세퍼레이션 모듈 및 워터스 996 광다이오드 어레이 검출기가 장착된 워터스 마이크로매스 ZQ, 또는 워터스 600 용매 전달 모듈, 워터스 515 보조 펌프, 워터스 2487 UV 검출기 및 길슨(Gilson) 215 오토샘플러 및 분획 수집기가 장착된 워터스 마이크로매스 플랫폼 LCZ 단일 4중극 질량분광계 질량 분광계에서 LCMS를 수행하였다. 혹은, 아질런트(AGILENT) 1200 시리즈 HPLC에 결합된 SQ 질량 분광계를 이용하여 LCMS 분석을 수행하였다. 입수가능한 경우, LCMS 데이터가 이하 실시예 및 표 1에 제공되어 있다. 포맷, [M + H]+으로 m/z에 대한 규약을 이용하여, MS 데이터를 제공한다.
처해진 특정 상황에 따라 적합화된 공지된 화학 변형을 이용하여, 본 발명의 화합물을 제조할 수 있다.
제조예 1: 출발 물질 또는 중간체
단계 1: (1 R ,2 S ,3 R ,5 R )-3-((5-아미노-6-클로로피리미딘-4-일)아미노)-5-(히드록시메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00112
에탄올(45 mL) 중의 (1R,2S,3R,5R)-3-아미노-5-(히드록시메틸)시클로펜탄-1,2-디올 염산염(16.9 g, 45.1 mmol) 및 4,6-디클로로피리미딘-5-아민(5.7 g, 35 mmol)의 혼합물을 3개 관들 중에 균일하게 분배시키고, 초음파 조건(CEM 장치, 300 W max, 150℃ max, 250 psi max, 3분 상승, 30분 유지)에 적용하여, 갈색 용액을 제공하였고; HPLC/LC MS는 요망되는 생성물로의 전환을 나타냈다. 3개의 반응 혼합물을 조합하고, 진공 하에 농축시켜, 미정제 표제 화합물을 갈색 오일로서 제공하였고, 이를 톨루엔 (2×30 mL)으로부터 농축하고, 정제하지 않고 진행시켰다: C10H15ClN4O3에 대한 MS (ESI+) m/z 275.0 (M+H)+; C10H15ClN4O3에 대한 MS (ESI-) m/z 273.0 (M-H)-
단계 2: ((3a R ,4 R ,6 R ,6a S )-6-(6-클로로-9 H -퓨린-9-일)-2-에톡시테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)메탄올
Figure pct00113
상기 미정제 (1R,2S,3R,5R)-3-((5-아미노-6-클로로피리미딘-4-일)아미노)-5-(히드록시메틸)시클로펜탄-1,2-디올을 오르토포름산에틸(120 mL, 720 mmol) 및 10-캄포르술폰산(8.11 g, 34.9 mmol)으로 처리하였다. 이질성 갈색 혼합물을 격렬하게 교반하여, 10분 후에 거의 균질한 갈색 용액을 수득하였다. 5시에, LC MS는 요망되는 생성물을 주요 생성물로서 나타냈고, 반응을 포화 NaHCO3 수용액(120 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 물(75 mL)로 희석하고, CH2Cl2(3×200 mL)로 추출하였고, 조합한 유기물을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 미정제 표제 화합물을 암갈색 액체로서 제공하였고, 이를 추가 조작없이 진행시켰다: C14H17ClN4O4에 대한 MS (ESI+) m/z 341.0 (M+H)+.
단계 3: ((3a R ,4 R ,6 R ,6a S )-6-(6-클로로-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)메탄올
Figure pct00114
상기 미정제 ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-클로로-9H-퓨린-9-일)-2-에톡시테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올을 2,2-디메톡시프로판(214 mL, 1740 mmol) 중에 취하고, p-톨루엔술폰산 모노수화물(13.2 g, 69.5 mmol)로 처리하여, 탁한 용액 중에 부분 현탁된 갈색 오일을 제공하였고, 실온에서 1시간 20분 동안 교반하였고; HPLC/LC MS는 목적 생성물로의 완전 전환을 가리켰다. 반응을 중탄산나트륨(8.76 g, 104 mmol) 및 최소량의 물을 주의하여 첨가함으로써 켄칭하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔존 수성층을 물(100 mL)로 희석하고 CH2Cl2(3×400 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 갈색 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(7×16 cm 실리카; 0-5% MeOH/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(3단계에 걸쳐 8.30 g, 74%)을 황색 발포체로서 제공하였다: C14H17ClN4O3에 대한 MS (ESI+) m/z 325.1 (M+H)+; C14H17ClN4O3에 대한 MS (ESI-) m/z 369.0 (M+HCO2)- HPLC 순도 >95 면적%.
단계 4: 9-((3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(아지도메틸)-2 , 2-디메틸테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)-6-클로로-9 H -퓨린
Figure pct00115
THF(100 mL) 중의 ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-클로로-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올(7.9 g, 24 mmol) 및 중합체-지지 트리페닐포스핀 (3 mmol/g 로딩; 11 g, 34 mmol)의 혼합물을 0℃로 냉각시키고(빙/염수 조), 디이소프로필 아조디카르복실레이트(6.7 mL, 34 mmol)로 적가 처리하였다. 황갈색 슬러리를 15분 동안 교반하였고, THF(24 mL) 중의 디페닐포스폰산 아지드(7.3 mL, 34 mmol)의 용액으로 적가 처리하였다. 갈색 반응 혼합물을 빙조 처리가 완료됨에 따라 18.5시간 동안 교반하였고; HPLC는 목적 생성물로의 전환을 가리켰다. 21.5시간째에서, 반응 혼합물을 여과하였고, 고형물을 CH2Cl2로 세정하였고, 여과액을 진공 하에 농축하였다. 적갈색 잔기를 CH2Cl2(300 mL) 중에 취하고, 포화 NaHCO3 수용액(1×100 mL), 물(1×100 mL), 및 염수(1×150 mL)로 세정하였다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 적색-오렌지색 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(7×16 cm 실리카; 0-10% 아세톤/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(4.82 g, 57%)을 황색 오일/발포체로서 제공하였다: C14H16ClN7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 350.1 (M+H)+; C14H16ClN7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 394.1 (M+HCO2)- HPLC 순도 >95 면적%.
단계 5: 9-((3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)- N -(2,4-디메톡시벤질)-9 H -퓨린-6-아민
Figure pct00116
1-부탄올(10 mL) 중의 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-6-클로로-9H-퓨린(1.29 g, 3.69 mmol) 및 (2,4-디메톡시페닐)메탄아민(0.71 mL, 4.7 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.93 mL, 5.3 mmol)으로 처리하고, 16.5시간 동안 80℃에서 가열하였고; HPLC/LC MS는 목적 생성물로의 전환을 가리켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고, 휘발물을 기류 하에 제거하여, 갈색-오렌지색 페이스트를 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(2×8 cm 실리카; 0-10% 아세톤/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.72 g, 97%)을 황색-오렌지색 발포체/오일로서 제공하였다: C23H28N8O4에 대한 MS (ESI+) m/z 481.2 (M+H)+; HPLC 순도 >95 면적%.
단계 6: 9-((3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)- N -(2,4-디메톡시벤질)-9 H -퓨린-6-아민
Figure pct00117
THF(16 mL) 중의 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-9H-퓨린-6-아민(1.72 g, 3.58 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고(빙/염수 조), THF 중의 트리메틸포스핀의 1.0 M 용액(6.30 mL, 6.30 mmol)로 적가 처리하였다. 30분 후에 냉조를 제거하였고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 교반하였고; HPLC/LC MS은 출발 아지드의 완전 소모를 가리켰다. 물(2.84 mL, 157 mmol)을 오렌지색 용액(기체 진화가 관찰됨)에 첨가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 2.75시간 동안 교반하였고; HPLC은 목적 아민으로의 완전 전환을 가리켰다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜, 오렌지색 오일을 제공하였다. 잔류물을 CH2Cl2(150 mL) 중에 취하고, 물(2×50 mL) 및 염수(1×75 mL)로 세정하였다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 표제 화합물(1.6 g, 98%)을 담황색 발포체로 제공하였다: C23H30N6O4에 대한 MS (ESI+) m/z 455.2 (M+H)+; HPLC 순도 >95 면적%.
단계 1: 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00118
트리아세톡시수소화붕소화나트륨(0.839 g, 3.96 mmol)을 1,2-디클로로에탄(26.0 mL, 3.30E2 mmol) 중의 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-9H-퓨린-6-아민(1.5 g, 3.3 mmol), 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(0.562 g, 3.30 mmol) 및 아세트산(0.188 mL, 3.30 mmol)의 용액에 첨가하였고, 반응물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 그 다음 날, 출발 물질이 HPLC에 의해 소모되었고, NaHCO3을 첨가하였고, 수성물을 DCM으로 3회 추출하였다. 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고, FC(MeOH 중의 DCM/7N NH3 95:5)로 정제하여, 에틸 3-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.5 g; 75%)을 농축 황색 수지/발포체로서 생성시켰다. C32H44N6O6에 대한 MS (ESI+) m/z 609.3 [M+H]+.
단계 2: 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00119
에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(0.06 g, 0.1 mmol)을 아세토니트릴(2.6 mL, 50 mmol) 중에 취하였고, 요오드화이소프로필(0.098 mL, 0.98 mmol) 및 트리에틸아민(0.21 mL, 1.5 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 12시간 동안 80℃로 가열하였고, 이 시점에서는 반응이 감속되는 것으로 나타난다. 또 다른 15 당량의 트리에틸아민 및 또 다른 15 당량의 요오드화이소프로필을 첨가하였고, 반응은 8시간 더 지속되었다. 반응이 다시 감속되는 것으로 나타났고, 이에 따라 15 당량의 각각의 요오드화이소프로필 및 트리에틸아민을 첨가하였다. 출발 물질의 소모 시에, 반응물을 농축시켰고, 포화 Na2CO3(20 ml) 및 DCM(20 ml)을 첨가하였다. 잔류물을 유기층과 수성층 간에 분획화하였다. 수성층을 DCM으로 3회 추출한 후, 조합한 유기물을 건조시키고, FC(MeOH 중의 DCM/7N NH3 97:3)에 의해 정제하였다. 생성물이 여전히 TEA-H+I-로 오염되어, DCM 중의 생성물의 30 ml 용액에 20 ml의 포화 NaHCO3 및 10 ml의 1N NaOH를 첨가하였다. 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 수성물을 DCM으로 3회 추출하였다. 조합된 유기물을 MgSO4로 정제하고, 용매를 제거하여, NMR에 의해 제시되는 바 더 이상 아민 염이 없는 순수 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염(0.045 g; 70%)을 갈색 발포체/고체로서 생성시켰다. C35H50N6O6에 대한 MS (ESI+) m/z 651.3 [M+H]+.
Figure pct00120
수산화리튬 모노수화물(0.838 g, 20.0 mmol)을 테트라히드로푸란(30 mL, 300 mmol) 및 메탄올(6.5 mL, 160 mmol) 중의 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.3 g, 2.0 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하였고, 그 다음 날 출발 물질이 소모되어 산으로 변환되었다. 반응물을 1N HCl를 이용하여 pH = 6으로 산성화하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류수를 에탄올과 함께 공비 증류함으로써 제거한 후, 24시간 동안 동결건조시켰다. 수득된 갈색 고체를 추가 정제 없이 사용하였다.
에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00121
아민 에틸 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-디메톡시벤질)아미노]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노)시클로부틸]프로판산염(1.8 g, 3.0 mmol)을 메탄올(20 mL, 600 mmol) 중에 취하였고, 시안화수소화붕소화나트륨(0.19 g, 3.0 mmol)을 첨가하였다. pH를 MeOH 중의 AcOH의 10% 용액을 이용하여 약 6으로 조정한 후, 포르말린(0.29 mL, 3.9 mmol)을 한 번에 첨가하였다. 반응을 3시간 동안 진행되도록 하였고, 이 때 MS는 출발 물질의 완전 소모를 가리켰다. NaHCO3(포화)을 반응 혼합물에 첨가한 후, DCM으로 3회 추출하였다. 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시킨 후, 황색 수지로 농축시켰다. 이 잔류물을 FC(MeOH 중의 DCM/7N NH3 93:7)에 의해 정제하여, 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.6 g; 87%)을 무색 발포체로서 생성시켰다. C34H47N5O6에 대한 MS (ESI+) m/z 622.3 [M+H]+.
1H NMR (400 MHz, d3-클로로포름) δH 8.282 (s, 1H), 7.203 - 7.168 (m, 1H), 6.877 - 6.865 (m, 1H), 6.399 - 6.334 (m, 2H), 6.242 - 6.236 (m, 1H), 5.330 (s, 1H), 4.890 - 4.835 (m, 2H), 4.664 - 4.650 (d, J=5.6 Hz, 2H), 4.391 - 4.354 (m, 1H), 4.067 - 4.000 (m, 2H), 3.757 (s, 3H), 3.710 (s, 3H), 2.864 - 2.784 (m, 0.5H(트랜스 이성질체의 메틴)), 2.553 - 2.474 (m, 0.5H(시스 이성질체의 메틴), 2.432 - 2.370 (m, 1H), 2.322 - 2.278 (m, 2H), 2.212 - 2.089 (m, 4H), 2.022 & 2.018 (s, 3H(시스 및 트랜스 이성질체의 N-메틸로 인한 중첩 단중항), 1.964 - 1.908 (m, 3H), 1.778 - 1.584 (m, 4H), 1.486 (s, 3H), 1.363 - 1.296 (m, 1H), 1.219 (s, 3H), 1.182 - 1.146 (m, 3H).
((3a R ,4 R ,6 R ,6a S )-6-(6-클로로-9 H -퓨린-9-일)-2-에톡시테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)메탄올
Figure pct00122
상기 미정제 (1R,2S,3R,5R)-3-((5-아미노-6-클로로피리미딘-4-일)아미노)-5-(히드록시메틸)시클로펜탄-1,2-디올을 오르토포름산에틸(120 mL, 720 mmol) 및 10-캄포르술폰산(8.11 g, 34.9 mmol)으로 처리하였다. 이질성 갈색 혼합물을 격렬하게 교반하여, 10분 후에 거의 균질한 갈색 용액을 제공하였다. 5시간 째에, LC MS는 주요 생성물로서 목적 생성물을 가리켰고, 반응을 포화 NaHCO3 수용액(120 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 물(75 mL)로 희석하고, CH2Cl2(3×200 mL)로 추출하였으며, 조합한 유기물을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 미정제 표제 화합물을 암갈색 액체로서 제공하였고, 이를 추가 조작없이 진행시켰다: C14H17ClN4O4에 대한 MS (ESI+) m/z 341.0 (M+H)+.
단계 3: ((3a R ,4 R ,6 R ,6a S )-6-(6-클로로-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)메탄올
Figure pct00123
상기 미정제 ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-클로로-9H-퓨린-9-일)-2-에톡시테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올을 2,2-디메톡시프로판(214 mL, 1740 mmol) 중에 취하고, p-톨루엔술폰산 모노수화물(13.2 g, 69.5 mmol)로 처리하여, 탁한 용액에 부분 현탁된 갈색 오일을 제공하였고, 이를 1시간 20분 동안 교반하였고; HPLC/LC MS는 목적 생성물로의 완전 전환을 가리켰다. 반응을 중탄산나트륨(8.76 g, 104 mmol) 및 최소량의 물을 주의하여 첨가함으로써 켄칭하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔존 수성층을 물(100 mL)로 희석하고 CH2Cl2(3×400 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 갈색 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(7×16 cm 실리카; 0-5% MeOH/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(3단계에 걸쳐 8.30 g, 74%)을 황색 발포체로서 제공하였다: C14H17ClN4O3에 대한 MS (ESI+) m/z 325.1 (M+H)+; C14H17ClN4O3에 대한 MS (ESI-) m/z 369.0 (M+HCO2)-
단계 4: 9-((3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)-6-클로로-9 H -퓨린
Figure pct00124
THF(100 mL) 중의 ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(6-클로로-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올(7.9 g, 24 mmol) 및 중합체-지지 트리페닐포스핀 (3 mmol/g 로딩; 11 g, 34 mmol)의 혼합물을 0℃로 냉각시키고(빙/염수 조), 디이소프로필 아조디카르복실레이트(6.7 mL, 34 mmol)로 적가 처리하였다. 황갈색 슬러리를 15분 동안 교반하였고, THF(24 mL) 중의 디페닐포스폰산 아지드(7.3 mL, 34 mmol)의 용액으로 적가 처리하였다. 갈색 반응 혼합물을 빙조 처리가 완료됨에 따라 18.5시간 동안 교반하였고; HPLC는 목적 생성물로의 전환을 가리켰다. 21.5시간째에서, 반응 혼합물을 여과하였고, 고형물을 CH2Cl2로 세정하였고, 여과액을 진공 하에 농축하였다. 적갈색 잔기를 CH2Cl2(300 mL) 중에 취하고, 포화 NaHCO3 수용액(1×100 mL), 물(1×100 mL), 및 염수(1×150 mL)로 세정하였다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 적-오렌지색 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(7×16 cm 실리카; 0-10% 아세톤/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(4.82 g, 57%)을 황색 오일/발포체로서 제공하였다: C14H16ClN7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 350.1 (M+H)+; C14H16ClN7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 394.1 (M+HCO2)-
단계 5: 9-((3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)- N -(2,4-디메톡시벤질)-9 H -퓨린-6-아민
Figure pct00125
1-부탄올(10 mL) 중의 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-6-클로로-9H-퓨린(1.29 g, 3.69 mmol) 및 (2,4-디메톡시페닐)메탄아민(0.71 mL, 4.7 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.93 mL, 5.3 mmol)으로 처리하고, 16.5시간 동안 80℃에서 가열하였고; HPLC/LC MS는 목적 생성물로의 전환을 가리켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고, 휘발물을 기류 하에 제거하여, 갈색-오렌지색 페이스트를 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(2×8 cm 실리카; 0-10% 아세톤/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.72 g, 97%)을 황색-오렌지색 발포체/오일로서 제공하였다: C23H28N8O4에 대한 MS (ESI+) m/z 481.2 (M+H)+.
단계 6: 9-((3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3a H -시클로펜타[ d ][1,3]디옥솔-4-일)- N -(2,4-디메톡시벤질)-9 H -퓨린-6-아민
Figure pct00126
THF(16 mL) 중의 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-9H-퓨린-6-아민(1.72 g, 3.58 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고(빙/염수 조), THF 중의 트리메틸포스핀의 1.0 M 용액(6.30 mL, 6.30 mmol)로 적가 처리하였다. 30분 후에 냉조를 제거하였고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 교반하였고; HPLC/LC MS은 출발 아지드의 완전 소모를 가리켰다. 물(2.84 mL, 157 mmol)을 오렌지색 용액(기체 진화가 관찰됨)에 첨가하였고, 반응 혼합물을 실온에서 2.75시간 동안 교반하였고; HPLC은 목적 아민으로의 완전 전환을 가리켰다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜, 오렌지색 오일을 제공하였다. 잔류물을 CH2Cl2(150 mL) 중에 취하고, 물(2×50 mL) 및 염수(1×75 mL)로 세정하였다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 표제 화합물(1.6 g, 98%)을 담황색 발포체로 제공하였다: C23H30N6O4에 대한 MS (ESI+) m/z 455.2 (M+H)+.
단계 1: 에틸 3-(3-((((3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4- d ][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00127
메탄올(10 mL) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(0.50 g, 1.6 mmol) 및 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(0.27 g, 1.6 mmol)의 혼합물을 실온에서 아세트산(0.09 mL, 2 mmol)으로 처리하고, 플라스크를 진공처리하고, 질소(×3)로 플러슁하였다. 반응 혼합물을 실온에서 시안화수소화붕소화나트륨(0.26 g, 4.1 mmol)으로 처리하고, 이로써 몇분 후 즉각적 기체 진화 및 거의 무색인 투명 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였고; HPLC/LC MS는 생성물 대 출발 아민의 ~2:1 혼합물을 가리켰다. 1.5시간째에, 부가적 MeOH(1.0 mL) 중의 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(66 mg, 0.39 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였고; HPLC/LC MS는 ~70% 전환 및 약간의 디알킬화를 가리켰다. 2 시간 15분 째에, 물(4.0 mL)을 첨가하였고, 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류 수성층을 포화 중탄산나트륨 수용액(10 mL, pH 9로)으로 희석하였고, CH2Cl2(3×15 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 환원 아민화 생성물을 백색 발포체를 제공하였고, 이를 추가 정제없이 진행시켰다: C22H32N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 461.1 (M+H)+, 483.1 (M+Na)+.
단계 2: 에틸 3-(3-((((3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4- d ][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00128
상기 미정제 2차 아민을 메탄올(10 mL) 중에 취하고, 시안화수소화붕소화나트륨(0.30 g, 4.8 mmol)으로 처리하였다. 메탄올 중의 10% v/v 아세트산의 용액을 첨가하여, pH를 ~6으로 조정한 후, 37% 수성 포름알데히드(0.65 mL, 6.3 mmol)를 적가하였고, 이로써 기체 진화가 제공되었다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고; HPLC/LC MS는 목적 생성물로의 완전 전환을 가리켰다. 1.5시간째에 물(5.0 mL)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 진공 하에 농축하였다. 잔류물을 포화 NaHCO3 수용액(10 mL, pH ~9로)으로 희석하고, CH2Cl2(3×15 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 소량의 EtOH로 추출하여, 투명 용액을 제공하였고, 이를 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 거의 무색인 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(4×17 cm 실리카; 0-5% 7 N 메탄올성 NH3/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(0.50 g, 60%)을 백색 발포체/무색 오일로서 제공하였다: C23H34N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 475.1 (M+H)+, 497.1 (M+Na)+.
단계 1: 에틸 3-(3-((((3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4- d ][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00129
메탄올(41 mL) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(2.04 g, 6.66 mmol) 및 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(1.2 g, 7.0 mmol)의 혼합물을 실온에서 아세트산(0.37 mL, 6.5 mmol)으로 처리하였고, 플라스크를 진공처리하고, 질소(×3)로 플러슁하였다. 반응 혼합물을 실온에서 시안화수소화붕소화나트륨(1.0 g, 16 mmol)으로 처리하고, 이로써 몇분 후 즉각적 기체 진화 및 거의 무색인 투명 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였고; HPLC/LC MS는 출발 물질이 남음을 가리켰다. 1시간 20분째에, 부가적 MeOH(3 mL) 중의 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(0.50 g, 2.93 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였고, 물(12 mL)로 처리하였다. 혼합물을 진공 하에 농축하였고, 잔류 수성층을 포화 중탄산나트륨 수용액(40 mL, pH 9로)으로 희석하였고, CH2Cl2(3×60 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 미정제 표제 화합물을 백색 발포체/매우 담황색인 오일로서 제공하였고, 이를 추가 정제없이 진행시켰다: C22H32N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 461.2 (M+H)+ 및 483.1 (M+Na)+.
단계 2: 에틸 3-(3-((((3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4- d ][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00130
아세토니트릴(30 mL) 중의 상기 미정제 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염의 용액을 탄산칼륨(6.3 g, 46 mmol) 및 요오드화이소프로필(3.9 mL, 39 mmol)로 처리하였다. 밀봉관 내의 반응 혼합물을 6.5시간 동안 90℃에서 가열하였고; HPLC는 생성물 대 출발 물질의 4:1 혼합물을 가리켰다. 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤동안 (17.5시간) 교반하고, 부가적 요오드화이소프로필(2.0 mL, 20 mmol)로 처리하고, 3시간 동안 90℃에서 가열하였고; HPLC/LC MS는 거의 완전한 전환을 가리켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고, 고형물을 진공여과에 의해 제거하 CH3CN으로 헹구었으며, 여과액을 진공 하에 농축시켜, 석출물과 함께 둔탁한 오렌지색 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(5×14.5 cm 실리카; 0-10% 7 N 메탄올성 NH3/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(0.49 g, 15%)을 백색 발포체/무색 오일로서 제공하였다. 생성물을 함유하는 혼합 분획을 칼럼 크로마토그래피(4×10.5 cm 실리카; 0-5% 7 N 메탄올성 NH3/CH2Cl2)에 의해 재정제하여, 표제 화합물(1.66 g, 40%)을 단계 1로부터의 비스환원 아민화 부산물로 오염된 백색 발포체/무색 오일로서 제공하였다: C25H38N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 503.2 (M+H)+.
에틸 3-(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,3-디히드록시시클로펜틸)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00131
트리아세톡시수소화붕소화나트륨(2.43 g, 11.5 mmol)을 1,2-디클로로에탄(20 ml) 중의 (1S,2R,3R,5R)-3-(아미노메틸)-5-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)시클로펜탄-1,2-디올(2.6 g, 5.7mmol) 및 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(0.976 g, 5.73 mmol) 및 아세트산(0.326 ml, 5.73 mmol)의 용액에 첨가하였고, 반응물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. NaHCO3를 첨가하였고, 수성층을 DCM로 3회 추출하였다. 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시키며, 플래쉬 크로마토그래피(MeOH 중의 DCM/7N NH3 90:10)에 의해 정제하여, 목적 화합물(1.8 g)을 짙은 황색 수지로서 제공하였다.
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00132
1,2-디클로로에탄(140 mL, 1800 mmol) 중의 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(7.50 g, 16.5 mmol)의 용액을 아세톤(1.34 mL, 18.2 mmol) 및 아세트산(0.94 mL, 16 mmol)으로 적가 처리한 후, 트리아세톡시수소화붕소화나트륨(4.20 g, 19.8 mmol)으로 처리하였고, 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. HPLC 분석은 반응이 완전하였음을 가리켰다. 반응 혼합물을 200 mL CH2Cl2로 희석하고, 150 mL 포화 NaHCO3 수용액으로 세정하였다. 수성상을 100 mL CH2Cl2로 세정하고, 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜, 고진공 하에 둘 때 견고한 발포체를 생성시키는 오일을 발생시켰다. 미정제 물질(9.3 g)을 다음 단계로 바로 진행시켰다.
에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00133
1,2-디클로로에탄(75 mL, 950 mmol) 중의 N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(9.50 g, 15.3 mmol)의 용액을 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(3.92 g, 23.0 mmol) 및 아세트산(1.0 mL, 18 mmol)으로 적가 처리한 후, 트리아세톡시수소화붕소화나트륨(4.58 g, 21.6 mmol)으로 처리한 후, 혼합물을 6일 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 150 mL CH2Cl2로 희석하고, 100 mL 포화 NaHCO3 수용액으로 세정하였다. 수성상을 100 mL CH2Cl2로 세정하고, 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 담갈색 점성 유리를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 2-3% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 약간 유리질/견고한 발포체(7.10 g)를 생성시켰다.
에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00134
1,2-디클로로에탄(119.5 mL, 1517 mmol) 중의 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(8.00 g, 15.2 mmol)의 용액을 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(2.58 g, 15.2 mmol) 및 아세트산(0.86 mL, 15 mmol)으로 적가 처리한 후, 트리아세톡시수소화붕소화나트륨(3.86 g, 18.2 mmol)으로 처리하였고, 혼합물을 19시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 150 mL CH2Cl2로 희석하고, 150 mL 포화 NaHCO3로 세정하였다. 수성상을 70 mL CH2Cl2로 세정하고, 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 고진공 하에 둘 때 점질 발포체를 생성시키는 황갈색유리를 발생시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(CH3OH/CH2Cl2 중의 3-4% 7N NH3로 용리하는 SiO2)에 의해 정제하여, 고진공 하에 점질의 발포체를 생성시키는 담황색 점성 오일(5.03 g)을 발생시켰다. MS 608.3 (M+H).
실시예 1: 1-((3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-3,4-디히드록시테트라히드로푸란-2-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)메틸)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아(화합물 110)의 합성
단계 1: 메틸 3-옥소시클로부탄카르복실레이트의 합성
Figure pct00135
DCM(20 ml) 중의 DCC (5.96 g, 28.95 mmol)의 용액에 DCM(30 ml) 중의 3-옥소시클로부탄카르복실산(3.0 g, 26.31 mmol), MeOH(1.68 g, 52.62 mmol) 및 DMAP (2.57 g, 21.05 mmol)의 혼합물을 적가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여과액을 0.5 M HCl 용액(50 ml)으로 세정하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 SGC(PE:EA = 5:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(4.0 g)을 수득하였다. 1H N.R (500 MHz, CDCl3): δ 3.77 (s, 3H), 3.42-3.26 (m, 5H) ppm.
단계 2: 메틸3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부탄카르복실레이트의 합성
Figure pct00136
MeOH(50 mL) 중의 메틸 3-옥소시클로부탄카르복실레이트(1.28 g crude), 9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(2.0 g, 6.25 mmol) (문헌[Townsend et al Org Lett 2009, 11, 2976-2679]) 및 Ti(iPrO)4 (1.78 g, 6.25 mmol)의 용액을 2시간 동안 45℃에서 교반한 후, NaCNBH3(0.79 g, 12.50 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 반응을 포화 NaHCO3 수용액(40 mL)으로 켄칭하고, 여과하며, DCM(40 mL×3)으로 추출하고, Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 SGC(DCM:MeOH = 12:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.7 g, 수율 63%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28-8.27 (m, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.20-6.18 (m, 1H), 5.52 (dd, J = 1.5, 6.0 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 3.0, 6.0 Hz, 1H), 5.33 (brs, 1H), 3.65-3.63 (m, 3H), 2.77-2.55 (m, 4H), 2.19-2.11 (m, 5H), 2.00-1.82 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.38 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 433.2[M+1]+.
단계 3: (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)메탄올의 합성
Figure pct00137
THF(40 ml) 중의 메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부탄카르복실레이트(1.0 g, 2.31 mmol)의 용액에 0℃에서 LiAlH4(0.53 g, 13.89 mmol)를 첨가하였고, 혼합물을 하룻밤동안 교반하였다. 물(1.0 g) 및 15% NaOH 용액(3.0 g)을 혼합물에 천천히 첨가하였고, 15분 동안 교반 시에, 혼합물을 여과하였다. 여과액을 농축하여, 미정제 표제 화합물을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
단계 4: (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)메틸 메탄술폰산염의 합성
Figure pct00138
DCM(25 ml) 중의 이전 단계로부터 직접 취한 (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)메탄올의 용액에 DCM(5 ml) 중의 용액으로서 Et3N(467 mg, 4.62 mmol) 및 MsCl(264 mg, 2.31 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 물(20 ml) 및 DCM(30 ml×2)를 첨가하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시키며, 분취-TLC(DCM:MeOH = 10:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(390 mg, 2 단계에 대해 수율 35%)을 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.203-6.200 (m, 1H), 5.529 (dd, J = 2.0, 7.0 Hz, 1H), 5.010 (dd, J = 3.0, 6.0 Hz, 1H), 4.354 (dd, J = 3.5, 8.0 Hz, 1H), 4.197-4.182 (m, 2H), 3.585 (brs, 1H), 3.073-2.948 (m, 5H), 2.595-2.513 (m, 2H), 2.394(brs, 1H), 2.207(brs, 1H), 2.107(s, 3H), 2.030-1.989 (m, 1H), 1.840-1.811(m, 2H), 1.586 (s, 3H), 1.390 (brs, 1H), 1.329-1.280(m, 6H), 0.905-0.878(m, 1H) ppm; ESI-MS (m/z): 483.3[M+1]+.
단계 5: 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(아지도메틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민의 합성
Figure pct00139
DMF (3 ml) 중의 (3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)메틸 메탄 술폰산염(150 mg, 0.31 mmol)의 용액에 NaN3(81 mg, 1.24 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 70℃에서 가열하였다. 물(30 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 아세트산에틸(20 ml×3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 분취-TLC(DCM:MeOH = 30:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(90 mg, 수율 67%)을 수득하였다. ESI-MS (m/z): 430.2[M+1]+.
단계 6: 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(아미노메틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민의 합성
Figure pct00140
Pd/C(10 mg)을 MeOH(6 ml) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(아지도메틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(90 mg, 0.21 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 H2의 대기 하에서 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축하여, 표제 화합물을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
단계 7: 1-((3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)메틸)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아의 합성
Figure pct00141
DCM(4 ml) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(아미노메틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민의 용액에 1-tert-부틸-4-이소시아네이토벤젠(37 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 분취-TLC(DCM:MeOH = 10:1)를 통해 정제하여, 표제 화합물(55 mg, 2 단계에 대해 수율 45%)을 제공하였다. ESI-MS (m/z): 578.3[M+1]+.
단계 8: 화합물 110의 합성
HCl/MeOH(2.5 mol/L) (2 mL) 중의 1-((3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)메틸)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아(55 mg)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 농축 건조시켰다. 물(0.5 mL) 및 MeOH(5 mL) 중의 K2CO3(52 mg)를 첨가하였다. 생성되는 혼합물을 실온에서 추가 10분 동안 교반하고, 여과하였고, 여과액을 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 화합물 110(10 mg, 수율: 25%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1HNMR (500 MHz, MeOD): δH 8.26 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.26-7.19 (m, 4H), 5.96 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.674-4.655 (m, 1H), 4.24-4.16 (m, 2H), 3.15 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.83-2.73 (m, 3H), 2.20-1.59 (m, 8H), 1.26 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 539.3 [M+1]+.
실시예 2: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올(화합물 2)의 합성
단계 1: 시스 및 트랜스 메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부탄카르복실레이트의 합성
Figure pct00142
MeOH(80 mL) 중의 메틸 3-옥소시클로부탄카르복실레이트(4.60 g, 35.94 mmol), 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(11.0 g, 35.94 mmol) 및 Ti(iPrO)4 (4.0 g, 14.08 mmol)의 용액을 2시간 동안 45℃에서 교반한 후, NaCNBH3 (4.5 g, 71.87 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 반응을 포화 NaHCO3 수용액(40 mL)으로 켄칭하고, 여과하며, DCM(80 mL×3)로 추출하고, Na2SO4로 건조시키며, 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 표제 화합물(6.2 g, 수율 41%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.38-8.34 (m, 1H), 7.90 (s, 1H), 5.98 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.75 (br s, 2H), 5.48-5.46 (m, 1H), 5.03-5.01 (m, 1H), 4.35-4.33 (m, 1H), 3.69-3.66 (m, 3H), 3.50-3.17 (m, 1H), 3.05-2.73 (m, 3H), 2.48-2.44 (m, 2H), 1.95-1.91 (m, 2H), 1.62 (s, 3H), 1.39 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 419.2[M+1]+.
메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부탄카르복실레이트(6.2 g)의 시스/트랜스 혼합물을 키랄 HPLC(키랄CEL AD-H 20*250 mm, 5um (다이셀(Daicel)), 칼럼 온도: 35℃, 이동상: CO2/메탄올(0.1% DEA) = 70/30, 유속: 50 g/분)을 통해 분리하여, 순수 시스 생성물(3.5 g) 및 순수 트랜스 생성물(1.7g)을 수득하였다.
단계 2: (1S,3s)-메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부탄카르복실레이트의 합성
Figure pct00143
CH3CN(15 ml) 중의 시스 메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부탄카르복실레이트(2.0 g, 4.78 mmol)의 용액에 2-요오도프로판(4.0 g, 23.92 mmol) 및 K2CO3(1.0 g, 7.18 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 밀봉관에서 하룻밤동안 95℃로 가열하였다. 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축시키고, SGC(DCM:MeOH = 12:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.9 g, 수율 86%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.37 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.03 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.53-5.48 (m, 3H), 5.00 (br s, 1H), 4.25 (brs, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.19-3.18 (m, 1H), 2.96 (brs, 1H), 2.80-2.78(m, 1H), 2.67-2.58 (m, 2H), 2.20-2.12 (m, 4H), 1.62 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.00 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 461.4[M+1]+.
단계 3: (1S,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부탄카르브알데히드의 합성
Figure pct00144
DCM(50 ml) 중의 (1S,3s)-메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부탄카르복실레이트(1.2 g, 2.60 mmol)의 용액에 DIBAL-H를 TLC에 의해 결정 시에 모든 출발 물질이 소모될 때까지 -78℃에서 적가하였다. MeOH(2 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였고, 이 때 물(50 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(50 ml×2)으로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켜, 미정제 표제 화합물(1.0 g)을 수득하였고, 이를 다음 단계에 직접적으로 사용하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 9.56 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.66 (br s, 2H), 5.50 (dd, J = 2.0, 6.5 Hz, 1H), 5.01 (dd, J = 3.5, 6.5 Hz, 1H), 3.331-3.337 (m, 1H), 2.96-2.97 (m, 1H), 2.77-2.59 (m, 3H), 2.14-2.05 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.01 (d, J = 6.5Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm.
단계 4: (E)-에틸 3-((1S,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)아크릴레이트의 합성
Figure pct00145
CH3CN:DCM = 5:1(50 ml) 중의 (1S,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부탄 카르브알데히드(930 mg, 2.16 mmol)의 용액에 에틸 2-(디에톡시포스포릴)아세트산염(484 mg, 2.16 mmol), DBU(328 mg, 2.16 mmol) 및 LiCl(91 mg, 2.16mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반한 후, 농축시켰다. 물(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(25 ml×3)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰으며, 잔류물을 SGC(DCM:MeOH = 30:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(900 mg, 수율 83%)을 수득하였다.1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.36 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.94-6.90 (m, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.72-5.89 (m, 1H), 5.57 (s, 2H), 5.52 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 3.5, 6.0 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.21-4.17 (m, 2H), 3.14 (brs, 1H), 2.961-2.936 (m, 1H), 2.74-2.52 (m, 3H), 2.22-2.14 (m, 2H), 1.79-1.76 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.30-1.27 (m, 3H), 1.00 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 501.4[M+1] +.
단계 5: 에틸 3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염의 합성
Figure pct00146
MeOH(50 ml) 중의 (E)-에틸 3-((1S,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸) 아크릴레이트(900 mg, 1.8 mmol)의 용액에 Pd/C (20 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소의 대기 하에 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축시켜, 표제 화합물(700 mg, 수율 78%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.36 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H), 5.51 (dd, J = 2.5, 8.0 Hz, 1H), 4.99 (dd, J = 4.0, 7.5 Hz, 1H), 4.26 (brs, 1H), 4.13-4.08 (m, 2H), 2.99-2.92 (m, 2H), 2.706-2.655 (m, 1H), 2.539-2.486 (m, 1H), 2.18-2.02 (m, 4H), 1.76 (brs, 1H), 1.65-1.60 (m, 5H), 1.43-1.37 (m, 5H), 1.26-1.23 (m, 2H), 0.97 (d, J = 9.0 Hz, 3H), 0.79(d, J = 8.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 503.4[M+1] +.
단계 6: 3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산의 합성
Figure pct00147
THF:MeOH = 5:1(30 ml) 중의 에틸 3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸) (이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염(650 mg, 1.29 mmol)의 용액에 LiOH.H2O(543 mg, 1.29 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하고, 농축시킨 후, MeOH(10 ml) 중에 취하였다. 1M HCl 용액을 pH = 7이 될 때까지 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 농축시키고, 분취-HPLC에 의해 정제하여, 표제 화합물(170 mg)을 제공하였다.
단계 7: N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드의 합성
Figure pct00148
DCM(15 ml) 중의 3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산(170 mg, 0.36 mmol)의 용액에 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(117 mg, 0.72 mmol), EDCI (137 mg, 0.72 mmol), HOBT (97 mg, 0.72 mmol) 및 TEA(217 mg, 2.15 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하고, 농축시켰다. 포화 NaHCO3 용액(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(20 ml×3)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰다. 미정제물을 분취-TLC(DCM:MeOH = 12:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(110 mg 미정제)을 제공하였다.
단계 8: 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민의 합성
Figure pct00149
AcOH(10 ml) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드(110 mg)의 하룻밤동안 65℃로 가열하였다. 혼합물을 농축시키고, 포화 NaHCO3 용액(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(20 ml×3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켜, 표제 화합물(105 mg 미정제)을 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.36 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.48-7.24 (m, 3H), 6.01 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.60-5.53 (m, 3H), 4.98 (dd, J = 3.0, 6.5 Hz, 1H), 4.22 (brs, 1H), 2.97 (brs, 1H), 2.874-2.847 (m, 1H), 2.56-2.50 (m, 3H), 1.87-1.78 (m, 2H), 1.70-1.54 (m, 7H), 1.35-1.17 (m, 14H), 0.90 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.80 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 603.5[M+1]+.
단계 9: 화합물 2의 합성
HCl/MeOH(2.5 mol/L) (10 mL) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(105 mg)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반한 후, 농축 건조시켰다. 물(0.5 mL) 및 MeOH(5 mL) 중의 K2CO3(96 mg)을 첨가하였고, 생성되는 혼합물을 실온에서 추가 10분 동안 교반한 후, 여과하였다. 여과액을 농축시키고, 잔류물을 분취-HPLC(x브릿지(xbridge) 30 mm*150 mm, 이동상: A: 물(10 mM NH4HCO3) B: CAN, 구배: 10분간 35-45% B, 6분간 45-45% B, 20분에 중단, 유속: 50 ml/분)에 의해 정제하여, 화합물 2 (50 mg, 수율: 51%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1HNMR (500 MHz, MeOD): δH 8.29 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.47-7.39 (m, 3H), 5.96 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.70-4.75 (m, 1H), 4.26-4.27 (m, 1H), 4.05-4.06 (m, 1H), 3.140-3.155 (m, 1H), 3.00-2.76 (m, 5H), 2.18-2.16 (m, 2H), 1.87-1.85 (m, 2H), 1.57-1.55 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.01 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 563.4 [M+1]+.
실시예 3: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올(화합물 3)의 합성
단계 1: (1R,3r)-메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부탄카르복실레이트의 합성
Figure pct00150
CH3CN(15 ml) 중의 (1R,3r)-메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부탄카르복실레이트(1.7 g, 4.07 mmol)의 용액에 2-요오도프로판(3.5 g, 20.3 mmol) 및 K2CO3(0.84 g, 6.10 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 밀봉관에서 하룻밤동안 95℃로 가열하였다. 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축시키며, SGC(DCM:MeOH = 12:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.35 g, 수율 72%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.36 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.03 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.55 (m, 2H), 5.49 (dd, J = 1.5, 6.0 Hz, 1H), 5.01 (dd, J = 3.5, 6.0 Hz, 1H), 4.254-4.247 (m, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.60-3.50 (m, 1H), 2.930-2.917 (m, 1H), 2.79-2.74 (m, 2H), 2.59-2.57 (m, 1H), 2.25-2.12 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.00 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 7.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 461.3[M+1] +.
단계 2: (1R,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부탄카르브알데히드의 합성
Figure pct00151
TLC에 의해 결정 시에 출발 물질들이 완전히 소모될 때까지, DCM(50 ml) 중의 (1R,3r)-메틸 3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부탄카르복실레이트(1.35 g, 2.93 mmol)의 용액에 -78℃에서 DiBAL-H를 적가하였다. MeOH(2 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 30분 동안 실온(RT)에서 교반하였다. 물(50 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(50 ml×2)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켜, 미정제 표제 화합물(1.1 g)을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 9.80 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.56 (s, 2H), 5.50 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.028-5.026 (m, 1H), 4.26 (brs, 1H), 3.33-3.30 (m, 1H), 2.956-2.930 (m, 1H), 2.80-2.55 (m, 3H), 2.27-2.07 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.00 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm.
단계 3: (E)-에틸 3-((1R,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)아크릴레이트의 합성
Figure pct00152
CH3CN:DCM = 5:1(50 ml) 중의 (1R,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부탄카르브알데히드(1.1 g, 2.56 mmol)의 용액에 에틸 2-(디에톡시포스포릴)아세트산염(573 mg, 2.56 mmol), DBU(389 mg, 2.56 mmol) 및 LiCl(107 mg, 2.56 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하고, 농축시키고, 이 때 물(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(25 ml×3)으로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 SGC(DCM:MeOH = 30:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.0 g, 수율 78%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.35 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.16-7.11 (m, 1H), 6.03 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.79-5.76 (m, 1H), 5.56 (s, 2H), 5.51 (dd, J = 1.5, 6.0 Hz, 1H), 5.02 (dd, J = 3.0, 6.0 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.22-4.17 (m, 2H), 3.44 (brs, 1H), 2.93 (brs, 1H), 2.78-2.56 (m, 3H), 2.27-2.16 (m, 2H), 1.93-1.91 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.31-1.27 (m, 3H), 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 501.4[M+1] +.
단계 4: 에틸 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염의 합성
Figure pct00153
MeOH(50 ml) 중의 (E)-에틸 3-((1R,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)아크릴레이트(1.0 g, 2.0 mmol) 및 10% Pd/C (30 mg)의 혼합물에 Pd/C (30 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기 하에 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 생성되는 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축시켜, 표제 화합물(1.0 g, 수율 100%)을 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.36 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 6.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.58 (s, 2H), 5.51 (dd, J = 2.0, 6.5 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 3.5, 6.0 Hz, 1H), 4.276-4.269 (m, 1H), 4.13-4.09 (m, 2H), 3.38-3.37 (m, 1H), 2.94-2.54 (m, 3H), 2.22-1.97 (m, 5H), 1.79-1.62 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.28-1.23 (m, 2H), 0.97 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.79(d, J = 7.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 503.4[M+1]+.
단계 5: 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산의 합성
Figure pct00154
THF:MeOH = 5:1(30 ml) 중의 에틸 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염(360 mg, 0.72 mmol)의 용액에 LiOH.H2O(301 mg, 7.20 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하고, 농축시킨 후, MeOH(10 ml)에 용해시켰다. 1 M HCl 용액을 0℃에서 pH = 7가 될 때까지 적가하였다. 혼합물을 농축시켜, 미정제 표제 화합물을 수득하였고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
단계 6: N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드의 합성
Figure pct00155
DMF (5 ml) 중의 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산의 용액에 4-(tert-부틸)벤젠-1,2-디아민(235 mg, 1.43 mmol), EDCI (274 mg, 1.43 mmol), HOBT (193 mg, 1.43 mmol) 및 TEA(435 mg, 4.30 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤동안 45℃로 가열하고, 농축시켰다. 포화 NaHCO3 용액(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(20 ml×3)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰다. 미정제물을 분취-TLC(DCM:MeOH = 12:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(110 mg)을 제공하였고, 이를 추가 정제없이 다음 단계에서 계속 진행시켰다.
단계 7: 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민의 합성
Figure pct00156
AcOH(15 ml) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드(110 mg)의 용액을 하룻밤동안 65℃에서 가열하였다. 혼합물을 농축시키고, 포화 NaHCO3 용액(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(20 ml×3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켜, 표제 화합물(100 mg 미정제)을 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δH 8.36 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.48-7.27 (m, 3H), 6.07 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.64-5.58 (m, 3H), 5.02 (dd, J = 3.0, 6.0 Hz, 1H), 4.30 (brs, 1H), 3.38-3.37 (m, 1H), 2.97-2.95 (m, 1H), 2.76-2.55 (m, 3H), 1.97-1.74 (m, 5H), 1.67-1.57 (m, 5H), 1.45-1.40 (m, 12H), 0.99 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 603.5[M+1]+.
단계 8: 화합물 3의 합성
HCl/MeOH(2.5 mol/L) (15 mL) 중의9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(190 mg)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하고, 농축 건조시켰다. 물(0.5 mL) 및 MeOH(5 mL) 중의 K2CO3(161 mg)을 첨가하였다. 생성되는 혼합물을 실온에서 추가 10분 동안 교반한 후, 여과하였다. 여과액을 농축시키고, 잔류물을 분취 HPLC(x브릿지 30 mm*150 mm, 이동상: A: 물(10 mM NH4HCO3) B: CAN, 구배: 10분간 35-45% B, 6분간 45-45% B, 20분에 중지, 유속: 50 ml/분)에 의해 정제하여, 화합물 3 (65 mg, 수율: 70%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1HNMR (500 MHz, MeOD): δH 8.29 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.47-7.28 (m, 3H), 5.95 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.744-4.724 (m, 1H), 4.27-4.26 (m, 1H), 4.07-4.06 (m, 1H), 3.56 (brs, 1H), 3.01-2.78 (m, 5H), 2.17 (brs, 2H), 2.00-1.93 (m, 2H), 1.80-1.79(m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.02 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 563.5 [M+1]+.
실시예 4: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-클로로-6-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올(화합물 4)의 합성
단계 1: N-(2-아미노-4-클로로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드의 합성
Figure pct00157
DCM(30 ml) 중의 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산(250 mg, 0.53 mmol)의 용액에 4-클로로-5-(트리플루오로메틸)벤젠-1,2-디아민(221 mg, 1.05 mmol), EDCI (201 mg, 1.05 mmol), HOBT (142 mg, 1.05 mmol) 및 TEA(320 mg, 3.15 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였고, 이 때 포화 NaHCO3 용액(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(20 ml×3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제물을 분취-TLC(DCM:MeOH = 12:1)을 통해 정제하여, 표제 화합물(250 mg 미정제)을 제공하였다.
단계 2: 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-클로로-6-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민의 합성
Figure pct00158
AcOH(15 ml) 중의 N-(2-아미노-4-클로로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드(250 mg)를 하룻밤동안 65℃로 가열하였다. 혼합물을 농축시키고, 포화 NaHCO3 용액(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(20 ml×3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켜, 표제 화합물(200 mg 미정제)을 제공하였다.
단계 3: 화합물 4의 합성
HCl/MeOH(2.5 mol/L) (15 mL) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-클로로-6-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(200 mg)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반하였고, 이 때 그것을 농축 건조시켰다. 물(0.5 mL) 및 MeOH(5 mL) 중의 K2CO3(166 mg)를 첨가하였고, 생성되는 혼합물을 실온에서 추가 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 화합물 4 (80 mg, 수율: 43%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1HNMR (500 MHz, MeOD): δH 8.29 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 5.96 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.748-4.730 (m, 1H), 4.284-4.263 (m, 1H), 4.09 (br s, 1H), 3.65-3.50 (m, 1H), 3.03-2.85 (m, 5H), 2.191-2.176 (m, 2H), 2.03-2.00 (m, 2H), 1.80 (brs, 2H), 1.02 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6.6 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 609.2 [M+1]+.
실시예 5: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-클로로-6-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올(화합물 5)의 합성
단계 1: N-(2-아미노-4-클로로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드의 합성
Figure pct00159
DCM:DMF = 15:1(30 ml) 중의 3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산의 용액에 4-클로로-5-(트리플루오로메틸)벤젠-1,2-디아민(334 mg, 1.60 mmol), EDCI(304 mg, 1.60 mmol), HOBT(215 mg, 1.60 mmol) 및 TEA(483 mg, 4.80 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 포화 NaHCO3 용액(20 ml)을 첨가하였고, 생성되는 혼합물을 DCM(20 ml×3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰다. 미정제 잔류물을 분취 TLC(DCM:MeOH = 12:1)을 통해 정제하여, 표제 화합물(220 mg)을 제공하였다.
단계 2: 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-클로로-6-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민의 합성
Figure pct00160
AcOH(15 ml) 중의 N-(2-아미노-4-클로로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-3-((1S,3r)-3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드(220 mg)의 용액을 하룻밤동안 65℃에서 가열하였다. 혼합물을 농축시키고, 포화 NaHCO3 용액(20 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(20 ml×3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켜, 표제 화합물(190 mg)을 제공하였다.
단계 3: 화합물 5의 합성
HCl/MeOH(2.5 mol/L) (15 mL) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-클로로-6-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(190 mg)의 용액을 2시간 동안 실온에서 교반한 후, 농축 건조시켰다. 물(0.5 mL) 및 MeOH(5 mL) 중의 K2CO3(161 mg)을 첨가하였고, 생성되는 혼합물을 실온에서 추가 10분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 화합물 5(90 mg, 수율: 51%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1HNMR (500 MHz, MeOD): δH 8.29 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.95 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.736-4.716 (m, 1H), 4.268-4.246 (m, 1H), 4.070-4.051 (m, 1H), 3.15 (brs, 1H), 3.00-2.71 (m, 5H), 2.17 (brs, 2H), 1.93-1.88 (m, 2H), 1.58-1.56 (m, 2H), 1.01 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 609.2 [M+1]+.
실시예 6: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-((5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)메틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올(화합물 6)의 합성
단계 1: 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성
Figure pct00161
건조 테트라히드로푸란(32 mL) 중의 ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올(2.83 g, 6.20 mmol) 및 트리페닐포스핀 (2.28 g, 8.68 mmol)의 용액을 빙/수조에서 0℃에서 냉각시켰다. 디이소프로필 아조디카르복실레이트(1.71 mL, 8.68 mmol)을 적가한 후, 테트라히드로푸란(5.3 mL, 66 mmol) 중의 디페닐포스폰산 아지드(1.87 mL, 8.68 mmol)의 용액을 적가하였다. DPPA 용액의 첨가 시에, 백색 유백색 석출물이 형성되었다. 약 30분 후, 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 하룻밤동안 교반하였다. 24시간 후, HPLC는 모든 출발 물질들이 소모되었음을 가리켰다. 반응 혼합물을 원체적의 약 1/2로 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피(175 g 실리카 겔, 10-55% EA/헵탄)에 의해 정제하여, 표제 화합물(2.49 g, 83%)을 약간 황색인 견고한 발포체로서 생성시켰다: C23H27N7O5에 대한 MS (ESI+) m/z 482.2 (M+H)+; C23H27N7O5에 대한 (ESI-) m/z 480.1 (M+H)-, m/z 526.1 (M+CO2H)-; HPLC 순도 97%.
단계 2: 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성
Figure pct00162
테트라히드로푸란(50 mL, 600 mmol) 중의 ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(2.49 g, 5.17 mmol)의 용액을 테트라히드로푸란(7.24 mL, 7.24 mmol) 내의 1.0 M 트리메틸포스핀으로 적가 처리하였고, 혼합물을 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(1.80 mL, 99.9 mmol)로 처리하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 미정제 생성물을 90 mL CH2Cl2 중에 취하며, 4회 30 mL 분량의 H2O 및 15 mL의 염수로 세정하였다. 용액을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(120 g 실리카 겔, CH3OH/CH2Cl2 중의 3-10% 7N NH3)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.76 g, 75%)을 발포체로서 생성시켰다: C23H29N5O5에 대한 MS (ESI+) m/z 456.2 (M+H)+; C26H35N5O5에 대한 (ESI-) m/z 454.1 (M-H)-; HPLC 순도 92% (체류 시간, 2.65분).
단계 3: 메틸 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)아세트산염의 합성
Figure pct00163
1,2-디클로로에탄(12 mL) 중의 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(400 mg, 0.88 mmol) 및 2-(3-옥소시클로부틸)아세트산메틸(100 mg, 0.70 mmol) [미국 특허 출원 제2009/0118287호에 나와 있는 절차를 이용하여 제조됨]을 아세트산(50 uL, 0.88 mmol)으로 적가 처리하였다. 용액을 1회 분량의 트리아세톡시수소화붕소화나트륨(260 mg, 1.2 mmol)으로 처리하고, HPLC에 의해 완전할 때까지 실온에서 교반하였다. 4시간 후, HPLC는 반응이 약 80% 완전하였음을 가리켰다. 부가적 20 mg의 케톤을 첨가하였고, 2.5시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 30 mL CH2Cl2로 희석하고, 15 mL 포화 NaHCO3으로 세정하였다. 수성상을 15 mL CH2Cl2로 세정하고, 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시켰다. 유기상을 여과하였고, 농축시켜, 밝은 황색 유리를 생성시켰고, 이를 플래쉬 크로마토그래피(70 g 실리카 겔; CH3OH/CH2Cl2 중의 2% 7N NH3)에 의해 정제하여, 표제 화합물(270 mg, 66%)을 무색 유리로서 생성시켰다: C30H39N5O7에 대한 MS (ESI+) m/z 582.2 (M+H)+; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 2.88분).
단계 4: 메틸 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)아세트산염의 합성
Figure pct00164
메탄올(12 mL) 중의 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)아세트산메틸(267 mg, 0.459 mmol)의 용액을 시안화수소화붕소화나트륨(380 mg, 6.1 mmol)으로 처리하였다. 용액의 pH를 메탄올 중의 빙초산의 10% (v/v) 용액을 적가함으로써 ~6으로 조정하였다. 혼합물을 37% 포름알데히드(0.57 mL, 7.6 mmol)로 적가 처리하였고, 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였고, 이 때 HPLC는 출발 물질이 소모되었음을 가리켰다. 반응 혼합물을 농축시켜, 메탄올을 제거하였다. 잔류하는 수용액을 25 mL NaHCO3로 희석하였고, 수성상을 3회 20 mL 분량의 CH2Cl2으로 추출하였다. 유기상을 20 mL 포화 NaHCO3으로 세정하며, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 표제 화합물(272 mg, 100%)을 무색의 견고한 발포체를 생성시켰고, 이는 다음 단계에 사용하기에 충분한 순도를 가지는 것으로 나타냈다: C31H41N5O7에 대한 MS (ESI+) m/z 596.5 (M+H)+; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 2.89분).
단계 5: 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)아세트산의 합성
Figure pct00165
메탄올(8.6 mL) 중의 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)아세트산메틸(270 mg, 0.453 mmol)의 용액을 용액 물(0.9 mL, 50 mmol) 중의 수산화나트륨(36 mg, 0.91 mmol)의 용액으로 적가 처리하였고, 혼합물을 50℃에서 가열하였다. 17시간 후, HPLC는 반응이 완전하였음을 가리켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고, 0.91 mL 1.0N HCl로 처리하여, pH를 ~7로 조정하였다. 용액을 농축시켜, 메탄올을 제거하였고, 생성되는 수성 현탁액을 동결건조시켜, 백색 고체을 생성시켰다. 물질을 정량적 회수의 가정 하에, 다음 단계에서와 같이 사용하였다: C30H39N5O7에 대한 MS (ESI+) m/z 582.4 (M+H)+; C30H39N5O7에 대한 MS (ESI-) m/z 580.4 (M-H)-; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 2.72분).
단계 6: N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)아세트아미드의 합성
Figure pct00166
N,N-디메틸포름아미드(4.5 mL) 중의 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)아세트산 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(89.4 mg, 0.545 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.261 mL, 1.50 mmol)으로 적가 처리한 후, N,N,N',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(259 mg, 0.681 mmol)으로 처리하였다. 용액을 18시간 동안 실온에서 교반시켰고, 그 동안 LCMS는 출발 물질이 소모되었음을 가리켰다. 반응 혼합물을 고진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 30 mL 아세트산에틸 및 20 mL 1/1 H2O/포화 NaHCO3 용액 중에 취하였다. 혼합물을 추출하였고, 수성상을 35 mL 아세트산에틸로 세정하였다. 조합된 유기상을 2회 20 mL 분량의 H2O 및 20 mL 염수로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 황갈색빛의 갈색 유리/견고한 발포체를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(35 g 실리카 겔; CH3OH/CH2Cl2 중의 4% 7N NH3)에 의해 정제하여, 표제 화합물(272 mg, 82%)을 밝은 황갈색 유리/견고한 발포체로서 생성시켰고, 이는 구조이성질체성 아미드들의 혼합물이었다: C41H53N7O6에 대한 MS (ESI+) m/z 728.8 (M+H)+; C41H53N7O6에 대한 MS (ESI-) m/z 726.9 (M-H)-; HPLC 순도 >95%, (체류 시간, 3.14, 3.17분) 아미드 구조이성질체로 인해 2개의 피크가 관찰됨.
단계 7: 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-((5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)메틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성
Figure pct00167
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)아세트아미드(272 mg, 0.374 mmol)를 아세트산(7.2 mL) 중에 취하였고, 용액을 65℃에서 가열하였다. 1.5시간 후, HPLC는 반응이 완전하였음을 가리켰다. 반응물을 실온으로 냉각시켰고, 고진공 하에 용매를 제거하였다. 잔류물을 35 mL CH2Cl2 중에 취하였고, 유기상을 25 mL 포화 NaHCO3 용액 및 20 mL 2% Na2CO3 용액으로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 밝은 황갈색의 유리/견고한 발포체를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(30 g 실리카 겔; CH3OH/CH2Cl2 중의 4% 7N NH3)에 의해 정제하여, 표제 화합물(224 mg, 84%)을 밝은 황갈색의 유리로서 생성시켰고, 이는 시클로부틸 환에 대한 시스 및 트랜스 부분입체이성질체의 혼합물이었다: C40H51N7O5에 대한 MS (ESI+) m/z 710.6 (M+H)+; C41H51N7O5에 대한 MS (ESI-) m/z 708.7 (M-H)-; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 3.29, 3.33분), 시클로부틸 환에 대한 부분입체이성질체로 인해 2개의 피크가 관찰됨.
단계 8: 화합물 6의 합성
7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-((5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)메틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(170 mg, 0.24 mmol)을, 빙조에서 0℃에서 예비 냉각시킨 트리플루오로아세트산(5.0 mL) 및 물(0.5 mL)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 30분 동안 0℃에서 교반하고, 실온으로 가온하였다. 실온에서 5시간 후, 현재의 매우 핑크색인 반응 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 10 mL MeOH 중에 취하고, 농축시켰다. 이 절차를 2회 반복하였고, 잔류물을 1시간 동안 고진공 상에 두었다. 물질을 7 mL MeOH 중에 취했다. 130 mg K2CO3 및 5소적의 물로 처리하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반시키고, 그 시간 동안 용액은 염기성인 것으로 나타났다. 혼합물을 미세 프릿을 통해 여과하였고, 고형물을 10 mL MeOH로 세정하였으며, 여과액을 농축시켜, 거의 무색인 고체를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(30 g 실리카 겔; CH3OH/CH2Cl2 중의 12% 7N NH3)에 의해 정제하여, 화합물 6(81 mg, 65%)을 무색 유리/견고한 발포체로서 생성시켰다: C28H37N7O3에 대한 MS (ESI+) m/z 520.4 (M+H)+; C28H37N7O3에 대한 MS (ESI-) m/z 518.5 (M-H)-; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 2.51분); 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH ppm 8.08 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (d, J=8.50 Hz, 1 H), 7.29 (dd, J=8.40, 4.87 Hz, 1 H), 6.63 (m, 1 H), 6.12 (d, J=4.15 Hz, 1 H), 4.40 (m, 1 H), 4.09 (m, 2 H), 3.15 (m, 0.5 H), 3.02 (d, J=8.09 Hz, 1 H), 2.92 (d, J=7.26 Hz, 1 H), 2.84 (m, 0.5 H), 2.65 (m, 2 H), 2.43 (m, 1 H), 2.29 (m, 1 H), 2.20 (d, J=5.80 Hz, 3 H), 2.13 (m, 1 H), 1.99 (br. s., 1 H), 1.67 (m, 1 H), 1.37 (d, J=3.94 Hz, 9 H), 1.30 (dd, J=13.99, 4.66 Hz, 1 H).
실시예 7: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올(화합물 7)의 합성
단계 1: 4,6-디클로로-5-(2,2-디에톡시에틸)피리미딘의 합성
Figure pct00168
표제 화합물을 문헌[Montgomery, [Montgomery, J. A.; Hewson, K. J. Med. Chem. 10, 665 (1967)] 참조]의 방법에 의해 제조하였다.
단계 2: (1R,2S,3R,5R)-3-((6-클로로-5-(2,2-디에톡시에틸)피리미딘-4-일)아미노)-5-(히드록시메틸)시클로펜탄-1,2-디올의 합성
Figure pct00169
4,6-디클로로-5-(2,2-디에톡시에틸)피리미딘(5.35 g, 20.2 mmol) 및 염화 (1R,2S,3R,4R)-2,3-디히드록시-4-(히드록시메틸)시클로펜탄알루미늄(9.29 g, 24.3 mmol)의 혼합물을 에탄올(236 mL) 중에 취하고, Et3N(11.2 mL, 80.8 mmol)으로 처리하며, 23시간 동안 환류 하에 가열하였고; HPLC/LC MS는 출발 물질의 소모 및 생성물의 존재를 가리켰다. 반응 혼합물을 농축시켜, 황갈색의 슬러리를 생성시켰고, 이를 미정제로 진행시켰다: C16H26ClN3O5에 대한 MS (ESI+) m/z 376.2 (M+H)+; C16H26ClN3O5에 대한 MS (ESI-) m/z 374.2 (M-H)-; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 2.436분). 문헌[Variation on route from J. Med. Chem. 10, 665 (1967)].
단계 3: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(히드록시메틸)시클로펜탄-1,2-디올의 합성
Figure pct00170
1,4-디옥산 (160 mL) 중의 미정제 (1R,2S,3R,5R)-3-((6-클로로-5-(2,2-디에톡시에틸)피리미딘-4-일)아미노)-5-(히드록시메틸)시클로펜탄-1,2-디올의 현탁액을 HCl의 1 M 수용액(30 mL, 30 mmol)으로 처리하고, 69.5시간 동안 실온에서 교반하였고; HPLC는 한 생성물로의 명백한 전환을 가리켰고, LC MS는 목적 생성물에 대한 질량을 나타냈다. 반응 혼합물을 농축 NH4OH 수용액으로 중화하였고(pH 7로), 휘발물을 진공 제거하여, 갈색 슬러리를 제공하였고, 이를 추가 정제없이 진행시켰다: C12H14ClN3O3에 대한 MS (ESI+) m/z 284.1 (M+H)+; C12H14ClN3O3에 대한 MS (ESI-) m/z 282.2 (M-H)-, 328.2 (M+HCO2)- HPLC 순도 >95% (체류 시간, 1.947분). 문헌[J. Med. Chem. 10, 665 (1967)로부터의 경로에 대한 변경).
단계 4: ((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올의 합성
Figure pct00171
미정제 (1R,2S,3R,5R)-3-(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(히드록시메틸)시클로펜탄-1,2-디올(10 g, ~20 mmol, NMR에 의한 54% 순수) 및 2,2-디메톡시프로판(100 mL, 800 mmol)의 혼합물을 p-톨루엔술폰산 모노수화물(7.28 g, 38.3 mmol)로 처리하였고, 황색-갈색 반응 혼합물을 1.25시간 동안 격렬하게 교반하였으며, 이 때 단지 고체만이 미세 황갈색의 석출물이었다. HPLC는 출발 물질의 거의 완전한 소모를 가리켰다. 반응 혼합물을 물(30 mL)로 희석하고, 고체 NaHCO3(4.80 g, 57.1 mmol)로 중화시켰다. 휘발물을 주의하여 진공 제거하였고, 생성되는 갈색 수용액을 EtOAc(3×100 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 황갈색의 페이스트를 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(4×22 cm 실리카; 0-6% EtOAc/Hex)에 의해 정제하여, 표제 화합물(4.38 g, 70%, 한 단계)을 무색 발포체/유리로서 제공하였다: C15H18ClN3O3에 대한 MS (ESI+) m/z 324.2 (M+H)+; C15H18ClN3O3에 대한 MS (ESI-) m/z 368.2 (M+HCO2)- HPLC 순도 >95% (체류 시간, 3.034분).
단계 5: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘의 합성
Figure pct00172
((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올(2.68 g, 8.28 mmol)을 THF(32 mL)에 용해시키고, PPh3 (3.05 g, 11.6 mmol)로 처리하였으며, 반응 용기를 빙-염수조에서 냉각시켰다. 디이소프로필 아조디카르복실레이트 [DIAD] (2.3 mL, 12 mmol)를 주사기를 통해 적가하였고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. THF(7.8 mL) 중의 디페닐포스폰산 아지드 [DPPA] (2.50 mL, 11.6 mmol)의 용액을 주사기를 통해 적가하여, 회백색 혼합물을 제공하였고, 이를 21시간 동안 교반하였으며, 빙조를 RT로 가온하였으며; HPLC/LC MS는 출발 물질의 완전 소모 및 생성물의 형성을 가리켰다. 22.5시간째에, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜, 칼럼 크로마토그래피(4×22 cm 실리카; 0-25% EtOAc/Hex)에 의해 정제하여, 표제 화합물(2.27 g, 78%)을 투명, 무색 오일로서 제공하였다: C15H17ClN6O2에 대한 MS (ESI+) m/z 349.2 (M+H)+; C15H17ClN6O2에 대한 MS (ESI-) m/z 393.2 (M+HCO2)- HPLC 순도 >95% (체류 시간, 4.169분).
단계 6: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성
Figure pct00173
1-부탄올(18.6 mL) 중의 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 및 2,4-디메톡시벤질아민(1.2 mL, 7.8 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(1.4 mL, 7.8 mmol)으로 처리하고, 22시간 동안 80℃에서 가열하였고; HPLC/LC MS는 목적 생성물로의 ~90% 전환을 가리켰다. 휘발물을 제거하였고, 황색-갈색 페이스트를 CH2Cl2(90 mL) 중에 취하고, 물(2×30 mL) 및 염수(1×45 mL)로 세정하였다. 분리된 유기층을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 오렌지색 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(2×22 cm 실리카; 0-50% EtOAc/Hex)에 의해 정제하여, 표제 화합물(2.23 g, 72%)을 담황색 유리/발포체로서 제공하였다: C24H29N7O4에 대한 MS (ESI+) m/z 480.5 (M+H)+; C24H29N7O4에 대한 MS (ESI-) m/z 524.3 (M+HCO2)- HPLC 순도 >95% (체류 시간, 3.551분).
단계 7: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성
Figure pct00174
THF(33 mL, 410 mmol) 중의 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(2.23 g, 4.65 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고, THF 중의 트리메틸포스핀의 1.0 M 용액(9.3 mL, 9.3 mmol)으로 적가 처리하였다. 빙조를 제거하였고, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반 하에 실온으로 가온시켰으며; HPLC에 의해 출발 물질이 남지 않았다. 1.5시간째에 물(4.3 mL, 240 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 1시간 15분 동안 교반하였고; TLC는 한 생성물을 가리켰다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜, 밝은 오렌지색 페이스트를 제공하였다. 잔류물을 제공하였고, 이를 CH2Cl2(120 mL)로 희석하고, 물(2×40 mL) 및 염수(1×40 mL)로 세정하였다. 유기층을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 오렌지색 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(2×22 cm 실리카; CH3OH/CH2Cl2 중의 0-5% 7 N NH3)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.97 g, 3 단계에 걸쳐 53%)을 무색 발포체로서 제공하였다: C24H31N5O4에 대한 MS (ESI+) m/z 454.3 (M+H)+; HPLC 순도 >95 % (체류 시간, 2.541분).
단계 8: 에틸 3-(2,2-디클로로-3-옥소시클로부틸)프로판산염의 합성
Figure pct00175
디에틸 에테르(170 mL) 및 1,2-디메톡시에탄(25 mL) 중의 4-펜텐산 에틸 에스테르(7.07 g, 55.2 mmol) 및 아연-구리 커플 (10.2 g, 140 mmol)의 혼합물을 염화트리클로로아세틸(25 g, 140 mmol)로 적가 처리하였다. 혼합물을 3일 동안 실온에서 교반하였다. 적색빛 이질성 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과하였고, 패드를 300 mL Et2O로 세정하였다. 여과액을 원체적의 대략 절반으로 농축하였고, 유기상을 2회 150 mL 분량의 H2O 및 1회 분량의 150 mL의 포화 NaHCO3으로 세정하였다. 유기상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 농축시켜, 갈색 액체를 생성시켰다. 물질을 진공 증류(90-100℃ @0.044 torr)에 의해 정제하여, 표제 화합물(10.49 g, 80%)을 밝은 황색 액체로서 생성시켰다: GC 순도 95.8 % (체류 시간, 4.92분).
단계 9: 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염의 합성
Figure pct00176
메탄올(310 mL, 7600 mmol) 중의 에틸 3-(2,2-디클로로-3-옥소시클로부틸)프로판산염(10.49 g, 43.87 mmol) 및 염화암모늄 (12 g, 220 mmol)을 소량으로 아연 분말(14 g, 220 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 환류 가열하였고, 그 시간 후에 GC는 반응이 완전하였음을 가리켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고, 패드를 Et2O로 세정하면서 셀라이트를 통해 여과하였다. 여과액을 진공 하에 농축시켜, 담황색 용액을 제공하였다. 용액을 200 mL Et2O로 희석하고, 100 mL 물로 세정하였다. 분리된 수성층을 다시 100 mL Et2O로 추출하였고, 조합된 유기상을 100 mL 1:1 물/염수, 50 mL 물, 및 150 mL 포화 NaHCO3 수용액으로 세정하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 진공 하에 농축시켜, 표제 화합물(4.49 g, 60%)을 담황색 오일로서 제공하였고, 이는 다음 단계에서 사용하기에 충분한 순도를 가졌다: GC 순도 >95% (체류 시간, 4.24분).
단계 10: 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산의 합성
Figure pct00177
메탄올(4 mL) 중의 에틸 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(200 mg, 1.18 mmol)의 용액을 물(0.75 mL) 및 수산화나트륨(0.75 mL, 1.41 mmol)의 2N 용액으로 처리하였고, TLC에 의해 출발 물질이 소모될 때까지(25% EA/헵탄) 용액을 55℃에서 가열하였다. 1시간 후, 출발 물질이 소모된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고, 농축시켜, MeOH를 제거하였다. 수성상을 2 mL H2O 및 말레산으로 희석하고, 1N HCl로 pH ~2로 조정하였다. 용액을 NaCl로 포화시키고, 3회 10 mL 분량의 아세트산에틸로 추출하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 표제 화합물(157 mg, 94%)을 밝은 오렌지색 점성 오일로서 생성시켰고, 이를 다음 단계에서와 같이 사용하였다: GC 순도 63.2% (체류 시간, 4.27분).
단계 11: N-(2-아미노-4-클로로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-3-(3-옥소시클로부틸)프로판아미드의 합성
Figure pct00178
N,N-디메틸포름아미드(2.5 mL) 중의 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산(157 mg, 0.696 mmol) 및 4-클로로-5-(트리플루오로메틸)벤젠-1,2-디아민(146 mg, 0.696 mmol)의 용액을 0℃에서 냉각시켰다. 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.364 mL, 2.09 mmol)으로 적가 처리한 후, 1회 분량의 N,N,N',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(291 mg, 0.765 mmol)으로 처리하였다. 용액을 교반시키고, 실온으로 천천히 가온하였다. 40시간 후, 반응 혼합물을 고진공 하에 부분 농축시켰다. 잔존 갈색 액체를 25 mL EA 및 15 mL 1/1 포화 NaHCO3/H2O 중에 취하고, 추출하였다. 수성상을 2회 15 mL 분량의 아세트산에틸로 세정하고, 조합된 유기상을 30 mL 부분의 H2O 및 염수로 세정하였다. 유기상을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 황갈색빛의 갈색 점성 오일/유리를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(40 g 실리카 겔, 50-80% EA/헵탄)에 의해 정제하여, 표제 화합물(72 mg, 31%)을 약간 황갈색인 유리/견고한 발포체로서 생성시켰다: C14H14ClF3N2O2에 대한 MS (ESI+) m/z 335.2 (M+H)+; C14H14ClF3N2O2에 대한 MS (ESI-) m/z 333.3 (M-H)-; HPLC 순도 78.2% (체류 시간, 3.56분).
단계 12: 3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부타논의 합성
Figure pct00179
N-(2-아미노-4-클로로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-3-(3-옥소시클로부틸)프로판아미드(72 mg, mmol)를 아세트산(3.2 mL) 중에 취하고, 용액을 26시간 동안 65℃에서 가열하였고, 이 때 HPLC는 출발 물질이 소모되었고 신규 생성물이 형성되었음을 가리켰다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 용매를 고진공 하에 제거하였다. 밝은 갈색의 잔류물을 20 mL 아세트산에틸 중에 취하고, 유기상을 10 mL 부분의 포화 NaHCO3 및 H2O로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 밝은 갈색 유리를 생성시켰다. 미정제 물질을 예비 TLC(20 cm×20 cm×1.0 mm 분취 TLC 플레이트, 3% MeOH/EA)에 의해 정제하여, 표제 화합물(45 mg, 66%)을 황갈색의 유리로서 생성시켰다: C14H12ClF3N2O에 대한 MS (ESI+) m/z 317.2 (M+H)+; C14H12ClF3N2O에 대한 MS (ESI-) m/z 315.2 (M-H)-; HPLC 순도 84.1% (체류 시간, 2.98분).
단계 13: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성
Figure pct00180
1,2-디클로로에탄(2.4 mL) 중의 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(80 mg, 0.18 mmol) 및 3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부타논(45 mg, 0.14 mmol)의 용액을 아세트산(10 uL, 0.18 mmol)으로 적가 처리하였다. 용액을 1회 분량의 트리아세톡시수소화붕소화나트륨(53 mg, 0.25 mmol)으로 적가 처리하고, HPLC에 의해 완전해질 때까지 실온에서 교반시켰다. 4시간 후, 반응 혼합물을 10 mL CH2Cl2로 희석하고, 10 mL 포화 NaHCO3으로 세정하였다. 수성상을 10 mL CH2Cl2로 세정하고, 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시켰다. 용액을 여과하였고, 농축시켜, 밝은 황갈색의 유리/견고한 발포체를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(25 g 실리카 겔; CH3OH/CHCl3 중의 5% 7N NH3)에 의해 정제하여, 표제 화합물(76 mg, 71%)을 무색 유리/견고한 발포체로서 생성시켰다: C38H43ClF3N7O4에 대한 MS (ESI+) m/z 754.3 (M+H)+; C38H43ClF3N7O4에 대한 MS (ESI-) m/z 752.3 (M-H)-; HPLC 순도 90.5% (체류 시간, 3.24분).
단계 14: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성
Figure pct00181
메탄올(2.5 mL) 중의 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(76 mg, 0.10 mmol)의 용액을 시안화수소화붕소화나트륨(84 mg, 1.3 mmol)로 처리하였다. 용액의 pH를 메탄올 중의 10% (v/v) 용액의 적가에 의해 ~6으로 조정하엿다. 혼합물을 37% 수성 포름알데히드(0.12 mL, 1.7 mmol)로 적가 처리하였고, 혼합물을 LCMS에 의해 완전해질 때까지 실온에서 교반하였다. 2시간 후, 반응이 완전해졌고, 반응 혼합물을 농축시켜, 메탄올을 제거하였다. 잔류하는 수용액을 7 mL의 NaHCO3로 희석하였고, 수성상을 3회 10 mL 분량의 CH2Cl2로 추출하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 농축시켜, 무색 견고한 발포체/유리를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(20 g 실리카 겔; CH3OH/CH2Cl2 중의 4% 7N NH3)에 의해 정제하여, 표제 화합물(62 mg, 80%)을 무색 유리로서 생성시켰다: C39H45ClF3N7O4에 대한 MS (ESI+) m/z 768.0 (M+H)+; C39H45ClF3N7O4에 대한 MS (ESI-) m/z 766.3 (M-H)-; HPLC 순도 92.1% (체류 시간, 3.29분).
단계 15: 화합물 7의 합성
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(60 mg, 0.078 mmol)을 빙조에서 0℃에서 예비 냉각된 트리플루오로아세트산(3.6 mL) 및 물(0.4 mL)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 30분 동안 0℃에서 교반한 후, 실온으로 가온하였다. 실온에서 3시간 후, HPLC는 반응이 완전하였음을 가리켰다. 이제 매우 분홍색인 반응 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 10 mL MeOH 중에 취하고, 농축시켰다. 이 절차를 2회 반복하였고, 잔류물을 1시간 동안 고진공 상에 두었다. 그 물질을 7 mL MeOH 중에 취하고, 120 mg K2CO3 및 10 소적의 물로 처리하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반시키고, 혼합물을 미세 프릿을 통해 여과하였고, 고형물을 10 mL MeOH로 세정하였고, 여과액을 농축시켜, 거의 무색인 고체를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(30 g 실리카 겔; CH3OH/CH2Cl2 중의 10-15% 7N NH3)에 의해 정제하여, 화합물 7 (31 mg, 69%)을 무색 유리/견고한 발포체로서 생성시켰다: C27H31ClF3N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 578.3 (M+H)+; C27H31ClF3N7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 576.4 (M-H)-; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 2.57분); 1H NMR (400 MHz, d4-MeOD) δH 8.06 (s, 1 H), 7.89 (d, J=2.07 Hz, 1 H), 7.69 (d, J=2.28 Hz, 1 H), 7.21 (dd, J=3.42, 1.76 Hz, 1 H), 6.59 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.33 (t, J=6.84 Hz, 1 H), 3.89 (q, J=5.25 Hz, 1 H), 3.03 (m, 0.5 H), 2.89 (m, 2 H), 2.70 (m, 0.5 H), 2.49 (m, 1 H), 2.40 (m, 2 H), 2.27 (br. s., 2 H), 2.16 (d, J=7.26 Hz, 4 H), 2.06 (m, 2 H), 1.91 (m, 2 H), 1.62 (m, 1 H), 1.52 (m, 1 H).
실시예 8: 화합물 8-140의 합성
실시예 1-7에 대해 기재된 것들과 유사한 방법 또는 일반 반응식에 나타낸 반응식에 의해 화합물 8-140을 합성하였다. 이들 중 일부의 제조 방식에 관한 상세한 설명이 이하에 제공된다. 화합물 2-140의 MS 및 NMR 데이터가 표 1 또는 본원에 제공된 실시예에 제공된다.
화합물 8: 1-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-3,4-디히드록시테트라히드로푸란-2-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아
벤질(3-옥소시클로부틸)카르밤산염
톨루엔 (8 mL) 중의 3-옥소시클로부탄카르복실산(1.0 g, 8.77 mmol) 및 DIEA(1.92 g, 14.92 mmol)의 용액에 실온에서 DPPA(2.89 g, 10.52 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 아르곤 하에 60℃로 가열한 후, 벤질 알코올(1.14 g, 10.52 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤 동안 60℃에서 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 SGC(PE:EA = 8:1)에 의해 정제하여, 목적 화합물(240 mg, 수율 50%)을 제공하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3): δH 7.38-7.33 (m, 5H), 5.12 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 4.34-4.33 (brs, 1 H), 3.44-3.39 (m, 2H), 3.10-3.07 (brs, 2H) ppm; ESI-MS (m/z): 220.2 [M+1]+.
벤질(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)카르밤산염
MeOH(5 mL) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(190 mg, 0.59 mmol) 및 벤질(3-옥소시클로부틸)카르밤산염(240 mg, 1.37 mmol)의 용액에 Ti[OCH(CH3)2]4 (216 mg, 0.59 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, NaCNBH3 (95 mg, 1.52 mmol)를 첨가하였고, 반응물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 반응을 여과하고, 증발시켰고, 잔류물을 분취-TLC(DCM:MeOH = 20:1)에 의해 정제하여, 목적 화합물(90 mg, 수율 29%)을 수득하였다.
1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8.28 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.33-7.28 (m, 5H), 6.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.52-5.51 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 5.00-4.98 (m, 1H), 4.34 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 3.70 (m, 1H), 2.58-2.47 (m, 4H), 2.38-2.26 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.69-1.67 (m, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.37 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 524.3 [M+1] +.
N1-(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)-N1-메틸시클로부탄-1,3-디아민
MeOH(5 mL) 중의 벤질(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)카르밤산염(190 mg, 0.17 mmol) 및 Pd(OH)2 (14 mg, 0.1 mmol)의 용액에 H2를 충전하였다. 반응물을 5시간 동안 35℃에서 교반하였다. 반응을 셀라이트를 이용하여 여과하고, 농축 건조시켰다. 잔류물을 분취-TLC(DCM:MeOH = 10:1)에 의해 정제하여, 목적 화합물(28 mg, 수율 42%)을 제공하였다. 1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8.29 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 6.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.51 (dd, J = 6.5 및 2.0 Hz, 1H), 5.00 (dd, J = 6.0 및 3.5 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.14-3.11 (m, 1 H), 2.60-2.57 (m, 1 H), 2.52-2.48 (m, 2 H), 2.34-2.31 (m, 2 H), 2.10 (s, 3 H), 1.66 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.48 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 1.37 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 390.2[M+1] +.
1-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아
THF(3 mL) 중의 N1-(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)-N1-메틸시클로부탄-1,3-디아민(28 mg, 0.072 mmol) 및 TEA(22 mg, 0.22 mmol)의 용액에 DCM(0.5 mL) 중의 1-tert-부틸-4-이소시아네이토벤젠(18 mg, 0.11 mmol)을 적가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 분취-TLC(2회, DCM:MeOH:NH4OH = 300:30:8, V/V)에 의해 정제하여, 목적 화합물(28 mg, 수율: 88%)을 담백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8. 29 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.28-7.22 (m, 4H), 6.25 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.52-5.50 (m, 1H), 5.07-5.05 (m, 1H), 4.46-4.44 (m, 1H), 3.88-3.85 (m, 1H), 2.97 (brs, 1H), 2.80-2.78 (m, 2H), 2.48-2.42 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.84-1.82 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.58-1.56 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.28 (s, 9 H) ppm;　ESI-MS (m/z): 565.3 [M+1] +.
1-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-3,4-디히드록시테트라히드로푸란-2-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아
Figure pct00182
TFA(0.90 mL) 및 0.10 mL의 물 중의 1-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아(125 mg, 0. 23 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축 건조시키고, MeOH(5 mL)에 용해시키며, 0.5 mL의 물 중의 K2CO3(60 mg)을 적가하였다. 반응물을 0.5시간 동안 실온에서 교반하고, 농축시켜, 잔류물을 수득하였고, 이를 분취-TLC(DCM:MeOH:NH4OH = 300:30:8, V/V)에 의해 정제하여, 목적 화합물(75 mg, 수율: 65%)을 담백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8. 27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.28-7.20 (m, 4H), 6.00-5.99 (m, 1H), 4.77-4.75 (m, 1H), 4.28-4.23 (m, 2H), 3.92-3.88 (m, 1H), 2.92 (brs, 1H), 2.83-2.81 (m, 2H), 2.59-2.56 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.74-1.64 (m, 2H), 1.27 (s, 9 H) ppm; ESI-MS (m/z): 525.3 [M+1] +.
화합물 9 및 12
Figure pct00183
화합물 9: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올:
1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.07 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.22 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.89 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 2.88 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.74-2.68 (m, 1H), 2.55-2.49 (m, 1H), 2.46-2.35 (m, 2H), 2.32-2.22 (m, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.00-1.90 (m, 3H), 1.68-1.60 (m, 1H), 1.58-1.48 (m, 2H) ppm; LC-MS (m/z): 578.3 [M+1]+.
화합물 12: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올:
1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.07 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.22 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 7.0 및 6.0 Hz, 1H), 3.90 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 3.05-3.00 (m, 1H), 2.92 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.55-2.49 (m, 1H), 2.47-2.35 (m, 2H), 2.32-2.22 (m, 1H), 2.20-2.02 (m, 8H), 1.93-1.86 (m, 2H), 1.70-1.60 (m, 1H) ppm; LC-MS (m/z): 578.3 [M+1]+.
화합물 10 및 11
Figure pct00184
화합물 10: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸((1r,3S)-3-(2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올:
1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.06 (s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.62 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.32-3.31 (m, 1H), 2.89-2.86 (m, 2H), 2.67-2.66 (m, 1H), 2.48-2.26 (m, 6H), 2.14 (s, 3H), 1.95-1.93 (m, 3H), 1.62-1.48 (m, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 544.3 [M+1]+.
화합물 11: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸((1s,3R)-3-(2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올:
1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.06 (s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.62 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.33-4.31 (m, 1H), 3.90-3.87 (m, 1H), 3.01-3.0 (m, 1H), 2.92-2.89 (m, 2H), 2.48-2.03 (m, 13H), 1.93-1.89 (m, 2H), 1.63-1.61 (m, 1H) ppm; LC-MS (m/z): 544.3 [M+1]+.
화합물 13: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
N-(2-아미노-4-(트리플루오로메틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00185
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(0.44 g, 1.2 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(5 mL) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(460 mg, 0. 77 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민(0.44 mL, 2.6 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 부분 농축한 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 수성층을 EtOAc로 3회 추출하였고, 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시키며, 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.34 g)을 고체로서 제공하였다.
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00186
N-(2-아미노-4-(트리플루오로메틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(0.38 g, 0.50 mmol) 및 아세트산(5 ml)을 65℃에서 하룻밤동안 교반하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류하는 물을 에탄올과 함께 공비 증류함으로써 제거한 후, 1시간 동안 고진공 하에 두었다. 생성되는 잔류물을 NaHCO3(포화)와 DCM 간에 분획화하였다. 수성층을 추출하였고(3×), 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시킨 후, 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 93:7)에 의해 정제하여, 회백색 발포체를 생성시켰다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00187
트리플루오로아세트산(5 ml)을 실온에서 물(0.5 ml), N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.31 g, 0.42 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응을 트리에틸실란(0.13 ml, 0.84 mmol)으로 켄칭할 때, 하룻밤 동안 진행시켰다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 포화 NaHCO3과 DCM/MeOH(10:1) 간에 분획화하였다. 수성층을 DCM/MeOH(10:1)로 더 추출하였고(3×) 및 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 87:13)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.12 g)을 회백색 발포체/검으로서 제공하였다. C27H32F3N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 544.5 [M+H]+; C27H32F3N7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 542.3 [M-H]-; HPLC 순도 >85% (체류 시간, 2.418분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.078 (s, 1H), 7.812 (s, 1H), 7.654 - 7.634 (m, 1H), 7.507 - 7.487 (m, 1H), 7.229 - 7.214 (m, 1H), 6.617 - 6.608 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 4.361 - 4.322 (m, 1H), 3.927 - 3.887 (m, 1H), 3.062 - 3.024 (m, 0.5H(트랜스 이성질체의 메틴)), 2.944 - 2.873 (m, 2H), 2.758 - 2.554 (m, 0.5H(시스 이성질체의 메틴)), 2.554 - 2.507 (m, 1H), 2.447 - 2.351 (m, 2H), 2.291 - 2.263 (m, 2H), 2.194 - 2.054 (m, 6H), 1.960 - 1.887 (m, 3H), 1.686 - 1.480 (m, 2H). 체류 시간: 2.418 HPLC 조건: 아질런트 조르박스 엑스립스(Agilent Zorbax Exlipse) XDB-C18 칼럼, 4.6×50 mm (1.8 um 팩킹), 용매 A- 물(0.1% TFA),용매 B- 아세토니트릴(0.07% TFA). 5 내지 95% B의 6분 구배; 1분 보류; 이어서 리사이클.
화합물 14: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00188
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일}우로늄 헥사플루오로인산염(0.44 g, 1.2 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(5 mL, 60 mmol) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(460 mg, 0.77 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.44 mL, 2.6 mmol) 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(0.15 g, 0.93 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하고, 부분 약 2 ml로 농축시키며, 이어서 NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하였고(3×), 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키며, 농축시켰다. 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, 고체(0.24 g)를 생성시켰다.
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00189
아세트산(5 ml, 90 mmol) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(0.24 g, 0.32 mmol)의 용액을 60℃에서 하룻밤동안 교반하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류하는 잔류물을 Na2CO3(2N)와 DCM 간에 분획화하였다. 수성층을 DCM으로 3회 추출하였고, 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 94:6)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.20 g)을 고체로서 생성시켰다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00190
트리플루오로아세트산(5 ml)을 실온에서 물(0.5 ml) 및 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.20 g, 0.28 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응을 하룻밤동안 진행시켰고, 이 때 트리에틸실란(0.088 ml, 0.55 mmol)으로 켄칭하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 포화 NaHCO3와 DCM/MeOH(10:1) 간에 분획화하였다. 수성물을 DCM/MeOH(10:1)로 3회 더 추출하였고, 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시키며, 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 87:13)에 의해 정제하여, 목적 생성물을 회백색 발포체(0.060 g)로서 제공하였다. C30H41N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 532.3 [M+H]+; C30H41N7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 530.4 [M-H]-; HPLC 순도 >94% (체류 시간, 2.723분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.079(s, 1H), 7.500 (s, 1H), 7.418 - 7.398 (m, 1H), 7.310 - 7.307 (m, 1H), 7.230 - 7.216 (m, 1H), 6.619 - 6.610 (m, 1H), 4.355 - 4.316 (m, 1H), 3.926 - 3.887 (m, 1H), 3.088 - 3.017 (m, 0.5H(트랜스 이성질체의 메틴)), 2.879 - 2.809 (m, 2H), 2.745 - 2.685 (m, 0.5H(시스 이성질체의 메틴), 2.532 - 2.512 (m, 1H), 2.446 - 2.373 (m, 2H), 2.294 - 2.276 (m, 2H), 2.202 - 2.012 (m, 5H), 1.685 - 1.603 (m, 1H), 1.545 - 1.504 (m, 1H), 1.383 (s, 1H). 체류 시간: 2.723분 HPLC 조건:아질런트 조르박스 엑스립스 XDB-C18 칼럼, 4.6×50 mm (1.8 um 팩킹), 용매 A- 물(0.1% TFA), 용매 B- 아세토니트릴(0.07% TFA) 5 내지 95% B의 6분 구배; 1분 보류; 이어서 리사이클.
화합물 15: (1 R ,2 S ,3 R ,5 R )-3-{4-아미노-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-{[프로판-2-일({4-[5-(트리플루오로메틸)-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]부틸})아미노]메틸}시클로펜탄-1,2-디올
단계 1: 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-{[프로판-2-일({4-[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]부틸})아미노]메틸}-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00191
DCE(10 ml) 중의 3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부탄-1-카르브알데히드(243 mg, 0.59 mmol), 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-[(프로판-2-일아미노)메틸]-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(170 mg, 0.49 mmol) 및 MgSO4 (710 mg, 5.90 mmol)의 용액을 15분 동안 교반하였다. 이어서, STAB(175 mg, 0.83 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였고, 1시간후에 아민이 관찰되지않았다. 포화 NaHCO3(20 ml)을 반응 혼합물에 첨가하고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, 염수(10 ml)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 생성물을 DCM(2×30 ml)로 추출하고, Na2SO4로 건조시키며, 여과하고, 증발시켰다. MeOH:DCM(1:99 - 4:96) 중의 7N NH3로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물(170 mg, 47%)을 오일로서 수득하였다; C38H54F3N7O3Si에 대한 MS (ESI+) m/z 742.40 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 1.78분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm -0.25 - 0.11 (9 H, m), 0.66 - 1.04 (8 H, m), 1.17 - 1.48 (5 H, m), 1.49 - 1.61 (3 H, m), 1.77 - 2.04 (2 H, m), 2.19 - 2.37 (5 H, m), 2.37 - 2.51 (2 H, m), 2.52 - 2.80 (2 H, m), 2.81 - 2.91 (1 H, m), 2.91 - 3.22 (2 H, m), 3.34 - 3.79(2 H, m), 4.29 - 4.52 (1 H, m), 4.78 - 5.12 (2 H, m), 5.28 - 5.70 (4 H, m), 6.34 (1 H, d, J=3.63 Hz), 6.80 - 7.16 (1 H, m), 7.29 - 7.71 (2 H, m), 7.71 - 8.11 (1 H, m), 8.11 - 8.46 (1 H, m)
단계 2. (1R,2S,3R,5R)-3-{4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-{[프로판-2-일({4-[5-(트리플루오로메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]부틸})아미노]메틸}시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00192
12N HCl(3 ml)을 MeOH(3 ml) 중의 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-({프로판-2-일[(3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸]아미노}메틸)-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(170 mg, 0.23 mmol)의 용액에 천천히 첨가하고, 2.5시간 동안 40℃에서 교반하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였고, 2.5시간 후에 출발 물질이 관찰되지 않았다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시킨 후, MeOH 중의 7N NH3로 염기성화하였다. 이어서, 이를 증발 건조시켰다. MeOH 중의 7N NH3:DCM(1:9)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물(100 mg, 76%)을 백색 고체로서 수득하였다; C29H36F3N7O3에 대한 MS (ESI+) m/z 572.40 [M+H]+; HPLC 순도 99% (체류 시간, 2.17분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 0.78 - 1.19 (6 H, m), 1.35 - 1.69 (2 H, m), 1.80 - 2.04 (1 H, m), 2.11 - 2.87 (10 H, m), 2.88 - 3.18 (3 H, m), 3.79 - 4.06 (1 H, m), 4.15 - 4.47 (1 H, m), 4.82 - 5.12 (1 H, m), 6.43 - 6.77 (1 H, m), 7.19 (1 H, d, J=3.47 Hz), 7.47 (1 H, d, J=8.35 Hz), 7.63 (1 H, d, J=8.51 Hz), 7.79(1 H, s), 7.95 - 8.24 (1 H, m).
화합물 18: (1 R ,2 S ,3 R ,5 R )-3-{4-아미노-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-({메틸[(3-{[5-(트리플루오로메틸)-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸]아미노}메틸)시클로펜탄-1,2-디올
단계 1: 3-[2-(벤질옥시)-2-옥소에틸리덴]시클로부탄-1-카르복실산
Figure pct00193
THF(250 ml) 중의 시클로부타논-3-카르복실산(5 g, 43.82 mmol), 벤질-2-(디메톡시포스포릴)아세트산염(13.58 g, 52.59 mmol), LiOH(4.20 g, 23.95 mmol) 및 3Å 활성 분자체(25 g, 분말 형태)의 혼합물을 4시간 동안 질소 하에 환류 가열하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, EtOAc(100 ml) 및 HCl(1N, 100 ml)을 차례로 첨가하였다. 이 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 상을 분리하였고, 수성층을 EtOAc(4×50 ml)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 무색 오일을 생성시켰다. 7:3 내지 1:1의 Hept:EtOAc로 용리하는 SiO2를 통한 건조 플래쉬 크로마토그래피로써, 목적 생성물을 무색 오일(5.2 g, 39%)로서 수득하였다; C14H14O4에 대한 MS (ESI+) m/z 269.05 [M+Na]+; C14H14O4에 대한 MS (ESI-) m/z 245.15 [M-H]-; HPLC 순도 81% (체류 시간, 1.85분); 1H NMR (250 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 2.95 - 3.62 (5 H, m), 4.96 - 5.31 (2 H, m), 5.75 (1 H, t, J=2.21 Hz), 7.27 - 7.45 (5 H, m).
단계 2. 벤질 2-{3-[메톡시(메틸)카르바모일]시클로부틸리덴}아세트산염
Figure pct00194
DCM(50 ml) 중의 3-[2-(벤질옥시)-2-옥소에틸리덴]시클로부탄-1-카르복실산(2.0 g, 8.12 mmol), N-메틸-모르폴린(2.70 ml, 24.36 mmol)의 빙냉 용액에 이소부틸 클로로포름산염(1.70 ml, 12.99 mmol)을 5분간에 걸쳐 적가하였다. 추가 5분 후, 메톡시(메틸)아민 염산염(1.58 g, 16.24 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 실온으로 가온하면서 하룻밤동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 DCM(30 ml)로 여과하고, 0.1N HCl(50 ml) 및 포화 NaHCO3(50 ml)로 차례로 세정하며, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켰다. 1:9 내지 3:7의 EtOAc:헵탄으로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물(1.54 g, 65%)을 제공하였다; C16H19NO4에 대한 MS (ESI+) m/z 290.10 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 1.86분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 2.96 (1 H, ddd, J=16.98, 8.79, 1.81 Hz), 3.17 - 3.30 (4 H, m), 3.30 - 3.48 (2 H, m), 3.51 - 3.63 (1 H, m), 3.64 - 3.75 (3 H, m), 5.15 (2 H, s), 5.73 (1 H, quin, J=2.25 Hz), 7.29 - 7.42 (5 H, m).
단계 3. 2-{3-[메톡시(메틸)카르바모일]시클로부틸}아세트산
Figure pct00195
차콜 상의 팔라듐(10%, 0.1 g)을 EtOH(20 ml) 중의 벤질 2-{3-[메톡시(메틸)카르바모일]시클로부틸리덴}아세트산염(1.54 g, 5.32 mmol)의 용액에 첨가하고, 6시간 동안 실온에서 수소의 대기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 증발 건조시켜, 무색 오일(1.04 g, 89%)을 제공하였다; C9H15NO4에 대한 MS (ESI+) m/z 202.00 [M+H]+; C9H15NO4에 대한 MS (ESI)- m/z 200.05 [M-H]-; HPLC 순도 92% (체류 시간, 1.10분); 1H NMR (500 MHz, MeOD) δH ppm 1.84 - 2.08 (2 H, m), 2.28 - 2.53 (4 H, m), 2.56 - 2.72 (1 H, m), 3.06 - 3.22 (3 H, m), 3.38 - 3.56 (1 H, m), 3.68 (3 H, d, J=8.04 Hz).
단계 4i. 3-({[2-아미노-5-(트리플루오로메틸)페닐]카르바모일}메틸)- N -메톡시- N -메틸시클로부탄-1-카르복사미드
Figure pct00196
TEA(1.49 ml, 10.70 mmol)을 0℃에서 DCM(20 ml) 중의 2-{3-[메톡시(메틸)카르바모일]시클로부틸}아세트산, EDC.HCl 1.18 g, 6.20 mmol), HOBt.xH2O(0.77 g, 5.69 mmol)의 현탁액에 첨가하였고, 4-(트리플루오로메틸)벤젠-1,2-디아민(1.04 g, 10.34 mmol)을 첨가하기 전에 5분 동안 교반하였다. 이를 0℃에서 추가 20분 동안 교반한 후, 실온으로 가온하였다. 반응을 LC MS에 의해 모니터링하였고, 2 시간 후에 반응 혼합물을 1N HCl(50 ml) 및 포화 NaHCO3(50 ml)로 차례로 세정하였다. 이를 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발 건조시켰다. EtOAc로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물(0.83 g, 44%)을 베이지색 고체를 수득하였다; C16H20N3O3에 대한 MS (ESI+) m/z 360.00 [M+H]+; HPLC 순도 90% (체류 시간, 1.64분); 1H NMR (500 MHz, MeOD) δH ppm 2.02 - 2.16 (2 H, m), 2.31 - 2.68 (4 H, m), 2.69 - 2.88 (1 H, m), 3.18 (3 H, d, J=4.41 Hz), 3.36 - 3.59 (1 H, m), 3.65 - 3.76 (3 H, m), 6.81 - 6.97 (1 H, m), 7.02 - 7.27 (1 H, m), 7.28 - 7.48 (1 H, m).
단계 4ii. N -메톡시- N -메틸-3-{[5-(트리플루오로메틸)-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸} -시클로부탄-1-카르복사미드
Figure pct00197
AcOH(10 ml) 중의 3-({[2-아미노-5-(트리플루오로메틸)페닐]카르바모일}메틸)-N-메톡시-N-메틸시클로부탄-1-카르복사미드(0.82 g, 2.29 mmol)의 용액을 2.5시간 동안 교반하면서 가열 환류시켰다(~125℃). 반응을 LC MS에 의해 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 진공 하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM(30 ml)에 용해시키고, 포화 NaHCO3(50 ml)로 세정하며, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켰다. 미정제물을 MeOH:DCM(2:98 - 5:95)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 황색-갈색 오일(0.75 g, 94%)을 제공하였다; C16H18F3N3O2에 대한 MS (ESI+) m/z 342.10 [M+H]+; HPLC 순도 97% (체류 시간, 1. 40분); 1H NMR (500 MHz, MeOD) δH ppm 1.96 - 2.17 (2 H, m), 2.27 - 2.55 (2 H, m), 2.66 - 2.92 (1 H, m), 2.97 - 3.15 (2 H, m), 3.15 - 3.22 (3 H, m), 3.32 - 3.62 (1 H, m), 3.63 - 3.73 (3 H, m), 7.37 - 7.53 (1 H, m), 7.53 - 8.00 (2 H, m).
단계 5. N -메톡시- N -메틸-3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부탄-1-카르복사미드
Figure pct00198
K2CO3(381 mg, 2.76 mmol) 및 SEM-Cl(430 μl, 2.43 mmol)을 실온에서 DMF (10 ml) 중의 N-메톡시-N-메틸-3-{[5-(트리플루오로메틸)-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부탄-1-카르복사미드(754 mg, 2.21 mmol)의 용액에 차례로 첨가하고, 하룻밤동안 교반하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였고, 반응 혼합물을 물(3 ml), 염수(30 ml)로 희석한 후, EtOAc(2×50 ml)로 추출하였다. 이를 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켜, 투명 오렌지색 오일을 제공하였다. EtOAc:헵탄(1:1 - 1)으로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물을 베이지색 이하 형태의 오일로서 제공하였다: 단일 구조이성질체(217 mg, 21%); C22H32F3N3O3Si에 대한 MS (ESI+) m/z 472.55 [M+H]+; HPLC 순도 99% (체류 시간, 2.37분); 1H NMR (250 MHz, 클로로포름-d) δH ppm -0.31 - 0.22 (9 H, m), 0.83 - 1.00 (2 H, m), 2.03 - 2.25 (2 H, m), 2.30 - 2.74 (2 H, m), 2.85 - 3.14 (3 H, m), 3.18 (3 H, s), 3.32 - 3.60 (3 H, m), 3.61 - 3.72 (3 H, m), 5.52 (2 H, s), 7.51 (1 H, dd, J=8.38, 1.22 Hz), 7.70 (1 H, s), 7.79(1 H, d, J=8.53 Hz), 또한 구조이성질체(280 mg, 27%)의 혼합물; C22H32F3N3O3Si m/z 472.55 [M+H]+; HPLC 순도 72% & 21% (체류 시간, 2.39 & 2.36분); 1H NMR (250 MHz, 클로로포름-d) δ ppm -0.08 - -0.01 (9 H, m), 0.81 - 0.99 (2 H, m), 1.94 - 2.24 (2 H, m), 2.38 - 2.74 (2 H, m), 2.90 - 3.14 (3 H, m), 3.14 - 3.22 (3 H, m), 3.33 - 3.63 (3 H, m), 3.63 - 3.70 (3 H, m), 5.40 - 5.64 (2 H, m), 7.40 - 7.74 (2 H, m), 7.75 - 8.14 (1 H, m).
단계 6. 3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부탄-1-카르브알데히드
Figure pct00199
DIBAL(0.69 ml, 0.69 mmol, THF 중의 1M)을 교반하면서 -10℃에서 THF 중의 N-메톡시-N-메틸-3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부탄-1-카르복사미드의 용액에 적가하였다. 반응을 -10℃에서 3시간 동안 지속시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 로쉘(Rochelle's) 염(20 ml)에 주입하고, Et2O(50 ml)로 희석하며, 30분 동안 교반하였다. 이어서 이를 분리하였고, 유기층을 로쉘 염(30 ml), 포화 NaHCO3(30 ml) 및 염수(30 ml)로 세정하였다. 이를 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켜, 무색 검(190 mg, 87%)을 제공하였다; C20H27F3N2O2Si에 대한 MS (ESI+) m/z 413.6 [M+H]+; HPLC 순도 87% (체류 시간, 2.25분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm -0.10 - 0.09 (9 H, m), 0.88 - 1.00 (4 H, m), 1.63 - 1.97 (2 H, m), 2.07 - 2.23 (2 H, m), 2.24 - 2.37 (0 H, m), 2.37 - 2.42 (1 H, m), 2.43 - 2.66 (2 H, m), 2.93 - 3.34 (4 H, m), 5.49 - 5.61 (2 H, m), 7.16 - 7.31 (2 H, m), 7.32 - 7.32 (2 H, m), 7.49 - 7.61 (1 H, m), 7.73 (1 H, s), 7.83 (1 H, d, J=8.35 Hz).
단계 7. 7-[(3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-2,2-디메틸-6-({[(3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸]아미노}메틸)-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
DCE(10 ml) 중의 3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부탄-1-카르브알데히드(190 mg, 0.46 mmol), (1R,2S,3R,5R)-3-{4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-(아미노메틸)시클로펜탄-1,2-디올(140 mg, 0.46 mmol) 및 MgSO4 (554 mg, 4.61 mmol)의 용액을 15분 동안 교반하였다. 이어서, STAB(137 mg, 0.645 mmol)를 이어서 반응 혼합물에 첨가하고, 교반하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였고, 그 후 아민이 관찰되지 않았다. 포화 NaHCO3(20 ml)를 반응 혼합물에 첨가하고, 5분 동안 교반하였다. 염수(10 ml)를 반응 혼합물에 첨가하였고, 생성물을 DCM(2×30 ml)로 추출하며, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켰다. MeOH 중의 7N NH3:DCM(1:99 - 5:95)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물을 분홍색 발포체성 고체를 수득하였다. 혼합 분획을 조합하고, MeOH 중의 7N NH3:DCM(2×4:96)로 용리하는 분취 TLC 플레이트에서 정제하여, 총 170 mg, 53%를 제공하였다. C35H48F3N7O3Si에 대한 MS (ESI+) m/z 700 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 1.79분); 1H NMR (250 MHz, 클로로포름-d) δH ppm -0.26 - 0.16 (9 H, m), 0.72 - 0.97 (2 H, m), 1.30 (3 H, s), 1.38 - 1.60 (5 H, m), 1.91 - 2.59 (8 H, m), 2.60 - 3.27 (6 H, m), 3.35 - 3.70 (2 H, m), 4.52 (1 H, t, J=5.94 Hz), 4.78 - 5.20 (4 H, m), 5.39 - 5.66 (2 H, m), 6.36 (1 H, d, J=3.65 Hz), 7.03 (1 H, d, J=3.65 Hz), 7.42 - 7.59 (1 H, m), 7.69 (1 H, s), 7.79(1 H, d, J=8.53 Hz), 8.32 (1 H, s).
단계 8. 7-[(3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-2,2-디메틸-6-({메틸[(3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸]아미노}메틸)-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00201
포름알데히드(36 μl, 0.49 mmol, 37%(수성)) MeOH(5 ml) 및 THF(5 ml) 중의 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-({[(3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸]아미노}메틸)-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 용액에 첨가하였고, 반응물을 30분 동안 교반하였다. NaCNBH3 (18 mg, 0.29 mmol)를 조금씩 첨가하였고, 반응물을 실온에서 추가 2시간 동안 교반한 후, LC MS는 반응이 완전함을 나타냈다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰고, 잔류물을 물(20 ml)과 DCM(20 ml) 간에 분획화하였고, 층을 분리하였다. 수성층을 DCM(2×20 ml)로 추출하였고, 이어서 조합한 유기물을 Na2SO4로 건조시키고, 농축시켰다. MeOH 중의 7N NH3:DCM(5:95)로 용리하는 분취 TLC에 의해 정제하여, 목적 생성물(114 mg, 66%)을 무색 오일로서 수득하였다; C36H50F3N7O3Si에 대한 MS (ESI+) m/z 714.45 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 1.77분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm -0.14 - 0.05 (9 H, m), 0.85 - 0.99 (2 H, m), 1.18 - 1.35 (3 H, m), 1.37 - 1.53 (2 H, m), 1.52 - 1.64 (3 H, m), 1.89 - 2.15 (3 H, m), 2.18 - 2.28 (2 H, m), 2.29 - 2.70 (6 H, m), 2.72 - 2.96 (1 H, m), 2.97 - 3.20 (2 H, m), 3.48 (3 H, s), 3.50 - 3.58 (2 H, m), 4.37 - 4.58 (1 H, m), 4.85 - 5.05 (2 H, m), 5.11 - 5.38 (2 H, m), 5.41 - 5.57 (2 H, m), 6.35 (1 H, d, J=3.63 Hz), 6.84 - 7.19 (1 H, m), 7.50 (1 H, d, J=8.35 Hz), 7.68 (1 H, s), 7.78 (1 H, d, J=8.35 Hz), 8.13 - 8.52 (1 H, m)
단계 9. (1 R ,2 S ,3 R ,5 R )-3-{4-아미노-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-({메틸[(3-{[5-(트리플루오로메틸)-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸]아미노}메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00202
MeOH(1:1, 3 ml) 중의 HCl의 용액을 0℃에서 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-({메틸[(3-{[5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸]아미노}메틸)-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민에 첨가하고, 교반하였다. 이어서, 이를 4시간 동안 40℃에서 즉시 교반하였다(반응을 LCMS에 의해 모니터링함). 반응을 추가 1시간 동안 지속시켰다. LCMS는 여전히 30% 아세탈이 SM를 탈보호함을 나타냈다. 추가 1 ml의 HCl(36% 수성)을 반응 혼합물에 첨가하였고, 추가 1시간 동안 40℃에서 지속시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 진공 하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM(100 ml)+MeOH(1 ml)에 용해시키고, 포화 NaHCO3(2×50 ml)로 세정하며, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켰다. MeOH 중의 7N NH3:DCM(1:9)로 용리하는 분취 TLC에 의해 정제하였다; C27H32F3N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 544 [M+H]+; HPLC 순도 96% (체류 시간, 2.03분); 1H NMR (500 MHz, MeOD) δH ppm 1.47 - 1.58 (1 H, m), 1.58 - 1.69 (1 H, m), 1.87 - 2.12 (1 H, m), 2.12 - 2.54 (10 H, m), 2.53 - 2.91 (3 H, m), 2.93 - 3.15 (2 H, m), 3.88 - 4.08 (1 H, m), 4.32 (1 H, dd, J=7.57, 6.15 Hz), 4.88 - 5.01 (1 H, m), 6.59 (1 H, d, J=3.63 Hz), 7.20 (1 H, d, J=3.63 Hz), 7.42 - 7.53 (1 H, m), 7.63 (1 H, d, J=8.20 Hz), 7.79(1 H, s), 7.95 - 8.22 (1 H, m).
화합물 19: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
N,N-디메틸포름아미드(8.1 ml) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산(490 mg, 0.79 mmol) 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(155 mg, 0.946 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.453 ml, 2.60 mmol)로 적가 처리한 후, 1회 분량의 N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(449 mg, 1.18 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공 하에 농축하였고, 잔류물을 50 ml EtOAc와 50 ml 1/1 H2O/포화 NaHCO3 간에 분획화하였다. 수성상을 30 ml EtOAc로 추출하고, 조합된 유기상을 30 ml 부분의 H2O 및 염수로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 유리/견고한 발포체를 제공하였다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 4% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 중간체를 아미드 구조이성질체(400 mg)의 혼합물로서 제공하였다. 아세트산(15 ml) 중의 중간체(0.40 g)의 용액을 2.5시간 동안 65℃에서 가열하였고, 반응 혼합물을 냉각시키며, 고진공 상에 두어, 아세트산을 제거하였다. 잔류물을 60 ml CH2Cl2 중에 취하고, 40 ml 부분의 포화 NaHCO3 및 2% Na2CO3 용액으로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 유리/견고한 발포체를 생성시켰다. 물질을 고진공 하에 두고, 다음 단계에서 직접 사용하였다(380 mg)
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00203
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(390 mg, 0.52 mmol)을, 빙조에서 0℃에서 예비 냉각시킨 트리플루오로아세트산(7.2 ml) 및 물(0.8 ml)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 30분 동안 0℃에서 교반하고, 실온으로 가온하였다. 실온에서 2.5시간 후, 잔류물을 15 mL MeOH 중에 취하고, 농축시켰다. 이 절차를 2회 반복하였고, 잔류물을 고진공 상에 두었다. 물질을 15 mL MeOH 중에 취하고(슬러리가 수득됨), 이를 500 mg K2CO3 및 8소적의 물로 처리하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반시키고, 그 시간 동안 용액은 염기성인 것으로 나타났다. 혼합물을 미세 프릿을 통해 여과하였고, 고형물을 10 mL MeOH로 세정하였으며, 여과액을 농축시켜, 회백색 고체를 생성시켰다. 물질을 하룻밤 동안 고진공 상에 두었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 8-10% 7N NH3)에 의해 정제하여, 유리/견고한 발포체(0.22 g)를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (m, 1 H), 7.27 (m, 1 H), 7.20 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 6.60 (m, 1 H), 4.32 (t, J=6.43 Hz, 1 H), 3.93 (t, J=5.29 Hz, 1 H), 3.54 (m, 0.2 H), 3.11 (t, J=9.33 Hz, 1 H), 3.02 (m, 1 H), 2.82 (m, 2 H), 2.66 (dd, J=1 3.68, 8.09 Hz, 1 H), 2.46 (m, 1 H), 2.36 (m, 1 H), 2.23 (m, 3 H), 2.05 (m, 1 H), 1.91 (m, 3 H), 1.59 (m, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.02 (m, 6 H).
화합물 20: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00204
N,N-디메틸포름아미드(1.3 ml) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산(78. 5 mg, 0.126 mmol) 및 4-클로로-5-(트리플루오로메틸)벤젠-1,2-디아민(31.9 mg, 0.151 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(72.5 ul, 0.416 mmol)로 적가 처리한 후, 1회 분량의 N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(72.0 mg, 0.189 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 7.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 하룻밤동안 냉장고에 두었다. 반응 혼합물을 고진공 하에 농축하였고, 잔류물을 20 ml EtOAc와 20 ml 1/1 H2O /포화 NaHCO3 간에 분획화하였다. 수성상을 10 ml EtOAc로 추출하였고, 조합된 유기상을 10 ml 부분의 H2O 및 염수로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 3% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 중간체를 유리/견고한 발포체(입체 아미드 및 시스/트랜스 부분입체이성질체, 87 mg)로서 제공하였다. 중간체(0.087 g)를 아세트산(4.5 ml) 중에 취하고, 6시간 동안 65℃에서 가열하며, 이를 실온으로 냉각시키고, 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응물을 8시간 동안 65℃에서 가열한 후, 실온 o/n 65℃에서 추가 6.5시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키며, 고진공 하에 두어, 아세트산을 제거하였다. 잔류물을 15 ml CH2Cl2 중에 10 ml 부분의 포화 NaHCO3 및 2% Na2CO3 용액으로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 유리/견고한 발포체를 생성시켰다. 물질을 하룻밤동안 고진공 상에 두었다. 미정제 물질을 CH3OH/CH2Cl2 중의 4% 7N NH3으로 2회 용리하는, 20 cm×20 cm×1.0 mm 분취 TLC 플레이트 상의 분취 TLC로 정제하였다. 생성물 밴드를 단리하여, 생성물을 백색 고체(48 mg)로서 생성시켰다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00205
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(525 mg, 0.683 mmol)을 빙조에서 0℃에서 예비 냉각된 트리플루오로아세트산(9 ml) 및 물(1 ml)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 30분 동안 0℃에서 교반한 후, 실온으로 가온하였다. 실온에서 4시간 후, 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 20 ml의 MeOH 중에 취하고, 농축시켰다. 이 절차를 2회 반복하였고, 잔류물 고진공 상에 두었다. 물질을 15 ml의 MeOH 중에 취하고슬러리가 수득됨), 500 mg K2CO3 및 15 소적의 물로 처리하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반시키고, 그 시간 동안 용액이 염기성인 것으로 나타났다. 혼합물을 미세 프릿을 통해 여과하였고, 고형물을 10 ml의 MeOH로 세정하였고, 여과액을 농축시켜, 회백색 고체를 생성시켰다. 물질을 하룻밤동안 고진공 상에 두었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 12% 7N NH3로 용리함)에 의해 정제하여, 무색 유리/견고한 발포체를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.89 (d, J=2.07 Hz, 1 H), 7.69 (d, J=2.28 Hz, 1 H), 7.21 (dd, J=3.42, 1.76 Hz, 1 H), 6.59 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.33 (t, J=6.84 Hz, 1 H), 3.89 (q, J=5.25 Hz, 1 H), 3.03 (m, 0.5 H), 2.89 (m, 2 H), 2.70 (m, 0.5 H), 2.49 (m, 1 H), 2.40 (m, 2 H), 2.27 (br. s., 2H), 2.16 (d, J=7.26 Hz, 4 H), 2.06 (m, 2 H), 1.91 (m, 2 H), 1.62 (m, 1 H), 1.52 (m, 1 H).
화합물 21: (1 R ,2 S ,3 R ,5 R )-3-{4-아미노-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-({[(3-{[6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸](프로판-2-일)아미노}메틸)시클로펜탄-1,2-디올
단계 1: 7-[(3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-6-({[(3-{[6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸](프로판-2-일)아미노}메틸)-2,2-디메틸-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00206
DCE(10 ml) 중의 3-{[6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부탄-1-카르브알데히드(223 mg, 0.50 mmol), 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-[(프로판-2-일아미노)메틸]-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(172 mg, 0.50 mmol) 및 MgSO4 (600 mg, 5.00 mmol)의 용액을 15분 동안 교반하였다. STAB(148 mg, 0.70 mmol)를 이어서 반응 혼합물에 첨가하였고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였고, 2.5시간 후에 아민이 관찰되지 않았다. 포화 NaHCO3(20 ml)을 반응 혼합물에 첨가하였고, 5분 동안 교반하였다. 이어서, 염수(20 ml)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 생성물을 DCM(2×30 ml)로 추출하며, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켰다. 분취 HPLC에 의해 정제하여, 목적 생성물(174 mg, 45%)을 백색 고체로서 제공하였다; C38H53ClF3N7O3Si에 대한 MS (ESI+) m/z 776.30 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 1.68분); 1H NMR (500 MHz, MeOD) δH ppm -0.25 - 0.11 (9 H, m), 0.90 (2 H, td, J=7.88, 3.47 Hz), 1.30 (3 H, s), 1.37 (6 H, t, J=7.49 Hz), 1.55 (3 H, s), 1.63 - 1.84 (1 H, m), 1.99 - 2.37 (2 H, m), 2.37 - 3.03 (6 H, m), 3.04 - 3.28 (3 H, m), 3.34 - 3.50 (1 H, m), 3.61 (2 H, td, J=7.92, 2.29 Hz), 3.79(1 H, br. s.), 4.68 (1 H, t, J=6.70 Hz), 4.95 - 5.27 (2 H, m), 5.55 - 5.81 (1 H, m), 6.88 (1 H, d, J=3.63 Hz), 7.06 - 7.62 (2 H, m), 7.61 - 7.94 (1 H, m), 7.94 - 8.16 (1 H, m), 8.22 (1 H, s)
단계 2. (1 R ,2 S ,3 R ,5 R )-3-{4-아미노-7 H -피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-({[(3-{[6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸](프로판-2-일)아미노}메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00207
12N HCl(1.5 ml)을 MeOH(1.5 ml) 중의 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-6-({[(3-{[6-클로로-5-(트리플루오로메틸)-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]메틸}시클로부틸)메틸](프로판-2-일)아미노}메틸)-2,2-디메틸-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(174 mg, 0.22 mmol)의 용액에 천천히 첨가하였고, 6시간 동안 40℃에서 교반하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였고, 2.5시간 후에 출발 물질이 관찰되지 않았다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시킨 후, MeOH 중의 7N NH3 (5 ml)로 염기화하였다. 이어서, 이를 증발 건조시켰다. MeOH 중의 7N NH3:DCM(1:9)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물(36 mg, 27%)을 백색 고체로서 수득하였다; C29H35ClF3N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 606.30 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 2.59분); 1H NMR (500 MHz, MeOD) δH ppm 0.93 - 1.09 (6 H, m), 1.41 - 1.64 (2 H, m), 1.76 - 2.06 (1 H, m), 2.15 - 2.65 (9 H, m), 2.65 - 2.88 (1 H, m), 2.91 - 3.13 (3 H, m), 3.80 - 4.09 (1 H, m), 4.19 - 4.46 (1 H, m), 4.88 - 4.94 (1 H, m), 6.46 - 6.77 (1 H, m), 7.19 (1 H, d, J=3.63 Hz), 7.69 (1 H, s), 7.89 (1 H, s), 8.06 (1 H, s)
화합물 22: (1 R ,2 S ,3 R ,5 R )-3-{4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-{[({3-[(5-tert-부틸-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]시클로부틸}메틸)(프로판-2-일)아미노]메틸}시클로펜탄-1,2-디올
단계 1: 3-{[(2-아미노-4-tert-부틸페닐)카르바모일]메틸}- N -메톡시- N -메틸시클로부탄-1-카르복사미드
Figure pct00208
N,N-디이소프로필에틸아민(5.19 ml, 29.82 mmol)을 디클로로메탄(60 ml) 중의 2-{3-[메톡시(메틸)카르바모일]시클로부틸}아세트산(3 g, 14.91 mmol), 4-tBu 페닐렌 디아민(2.69 g, 16.4 mmol) 및 (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)디메틸아미노-모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로인산염(7.02 g, 16.4 mmol)의 현탁액에 0℃에서 첨가하여, 실온으로 가온하기 전에 20분 동안 교반하였다. 반응을 4시간 동안 실온에 방치하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 EtOAc(60 ml)에 재용해시켰다. 용액을 물(3×60 ml)로 세정한 후, 염수(60 ml)로 세정하고, 건조시키고(MgSO4), 감압 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 100 % EtOAc로 용리하는 건조 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여, 표제 화합물(3.74 g, 46%)을 갈색 오일로서 제공하였다: C19H29N3O3에 대한 MS (ESI+) m/z 348.5 [M+H]+; LC 순도 26% 및 44% (UV), 18% 및 68% (ELS), (체류 시간, 1.65 및 1.71분).
단계 2: 3-[(5-tert-부틸-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]- N -메톡시- N -메틸시클로부탄-1-카르복사미드
Figure pct00209
아세트산(25 ml) 중의 3-{[(2-아미노-4-tert-부틸페닐)카르바모일]메틸}-N-메톡시-N-메틸시클로부탄-1-카르복사미드(70%, 2.62 g, 5.28 mmol)의 교반 용액을 1시간 동안 가열 환류하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 NaHCO3(수성) (25 ml)와 EtOAc(25 ml) 간에 분획화하고, 층을 분리하였다. 수성층을 EtOAc(2×25 ml)로 추출하였고, 조합한 유기물을 염수(50 ml)로 세정하고, 건조시키며(MgSO4), 농축시켰다. 미정제 물질을 DCM 내 MeOH 중의 1 - 10 % 2M NH3로 용리하는 실리카 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 표제 화합물(2.02 g, 93%)을 황색 검으로서 제공하였다: C19H27N3O2에 대한 MS (ESI+) m/z 330.5 [M+H]+; LC 순도 80% (UV), 100% (ELS), (체류 시간, 1.51분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 7.56 (br. s., 1 H), 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 7.30 (dd, J = 8.5, 1.7 Hz, 1 H), 3.80-3.90 (m, 1 H), 3.65 (s, 3 H), 3.47-3.57 (m, 1 H), 3.20 (s, 3 H), 2.94-3.13 (m, 2 H), 2.88 (dt, J = 16.1, 8.1 Hz, 1 H), 2.32-2.60 (m, 2 H), 2.01-2.17 (m, 2 H), 1.38 (s, 9 H).
단계 3: 3-[(5-tert-부틸-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]- N -메톡시- N -메틸시클로부탄-1-카르복사미드
Figure pct00210
N2하에 N,N-디메틸포름아미드(40 ml) 중의 3-[(5-tert-부틸-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]-N-메톡시-N-메틸시클로부탄-1-카르복사미드(80%, 2.02 g, 4.91 mmol)의 용액에 탄산칼륨(1.36 g, 9.81 mmol)을 첨가하였고, 반응물을 1시간 동안 교반하였다. 염화 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸(1.31 ml, 7.36 mmol)을 천천히 첨가하였고, 20시간 동안 교반을 유지시켰다. 반응 혼합물을 여과하였고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc(50 ml) 중에 취하고, 물(3×50 ml)로 세정한 후, 염수(50 ml)로 세정시킨 후, 건조시키고(MgSO4) 농축시켰다. 미정제 물질을 헵탄 중 50 - 100 % EtOAc로 용리하는 실리카 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.21 g, 54%)을 무색 검으로서 제공하였다: C25H41N3O3Si에 대한 MS (ESI+) m/z 461.0 [M+H]+; LC 순도 97% (UV), 100% (ELS), (체류 시간, 1.98분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.58-7.89 (m, 1 H), 7.33 (s, 2 H), 5.39-5.53 (m, 2 H), 3.65 (s, 3 H), 3.49-3.58 (m, 2 H), 3.41 (br. s., 1 H), 3.10-3.23 (m, 3 H), 3.03 (s, 3 H), 2.32-2.63 (m, 2 H), 2.00-2.18 (m, 2 H), 1.32-1.45 (m, 9 H), 0.91 (td, J = 8.1, 4.9 Hz, 2 H), -0.13-0.07 (m, 9 H).
단계 4: 3-[(5-tert-부틸-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]시클로부탄-1-카르브알데히드
Figure pct00211
N2 하에 -10℃에서 테트라히드로푸란(15 ml) 중의 3-[(5-tert-부틸-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]-N-메톡시-N-메틸시클로부탄-1-카르복사미드(0.61 g, 1.32 mmol)의 용액에 톨루엔 (3.29 ml) 중의 1M 수소화디이소부틸알루미늄 용액을 첨가하였다 반응물을 이 온도에서 2.5시간 동안 교반한 후, 메탄올(2 ml)의 첨가에 의해 켄칭하고, 5분 동안 교반하였다. 용액을 포화 수성 로쉘 염(20 ml)에 주입하고, Et2O(30 ml)로 희석하며, 30분 동안 교반하였다. 이어서, 이를 분리하였고, 유기층을 로쉘 염(30 ml), 포화 NaHCO3(30 ml), 및 염수(30 ml)로 세정하였다. 이를 건조시키고(MgSO4), 농축시켜, 표제 화합물(0.69 g, 130%)을 무색 검으로서 제공하였고, 이를 다음 반응에서 미정제로 사용되었다.
단계 5: 7-[(3a S ,4 R ,6 R ,6a R )-6-{[({3-[(5-tert-부틸-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]시클로부틸}메틸)(프로판-2-일)아미노]메틸}-2,2-디메틸-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00212
3-[(5-Tert-부틸-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]시클로부탄-1-카르브알데히드(282.3 mg, 0.7 mmol), 7-[(3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-[(프로판-2-일아미노)메틸]-헥사히드로시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(243.41 mg, 0.7 mmol) 및 황산마그네슘 (127.22 mg, 1.06 mmol)을 15분 동안 1,2-디클로로에탄(10 ml) 중에 교반하였다. 트리아세톡시수소화붕소화나트륨(179.21 mg, 0.85 mmol)을 첨가하였고, 반응물을 하룻밤동안 교반하였다. 반응물을 포화 Na2CO3(10 ml)의 첨가에 의해 켄칭하였고, 용액을 DCM(3×10 ml)으로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고(MgSO4), 농축시켰다. 미정제 물질을 질량 지정 분취 HPLC에 의해 정제하였다(산성 방법). 분획들을 조합한 후, MeOH 중의 소량의 7M NH3을 첨가하여 용액을 염기성화하였다. 농축 후, 잔류물을 물(5 ml)과 DCM(5 ml) 간에 분획화하였고, 층을 분리하였다. 수성층을 DCM(2×3 ml)으로 추출하였고, 조합한 유기물을 건조시키며(MgSO4), 농축시켜, 표제 화합물(58.7 mg, 11%)을 무색 검으로서 제공하였다: C41H63N7O3Si에 대한 MS (ESI+) m/z 730.2 [M+H]+; LC 순도 95% (UV), 100% (ELS), (체류 시간, 1.65분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH 8.30 (s, 1 H), 7.75 (s, 1 H), 7.32 (s, 2 H), 7.04 (d, J = 3.6 Hz, 1 H), 6.37 (d, J = 3.6 Hz, 1 H), 5.40-5.50 (m, 2 H), 5.24 (br. s., 2 H), 4.89-5.04 (m, 2 H), 4.45 (d, J = 5.2 Hz, 1 H), 3.50 (s, 3 H), 2.11-3.09 (m, 13 H), 2.01 (s, 6 H), 1.34-1.49 (m, 6 H), 1.29 (s, 3 H), 0.85-1.02 (m, 8 H), -0.11-0.05 (m, 9 H).
단계 6: (1 R ,2 S ,3 R ,5 R )-3-{4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-5-{[({3-[(5-tert-부틸-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]시클로부틸}메틸)(프로판-2-일)아미노]메틸}시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00213
7-[(3aS,4R,6R,6aR)-6-{[({3-[(5-tert-부틸-1-{[2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸}-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)메틸]시클로부틸}메틸)(프로판-2-일)아미노]메틸}-2,2-디메틸-헥사히드로시클로펜타[d][1,3] 디옥솔-4-일]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(58.7 mg, 0.08 mmol)을 농축 HCl 용액(5 ml) 및 메탄올(5 ml)에 용해시키고, 2시간 동안 40℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하였고, 잔류물을 포화 NaHCO3(수성) (10 ml)와 EtOAc(10 ml) 간에 분획화하였다. 층을 분리하였고, 수성층을 EtOAc(2×10 ml)로 추출한 후, 조합한 유기물을 건조시키고(MgSO4), 농축시켰다. 미정제 물질을 DCM 중의 MeOH 내 10% 2M NH3로 용리하는 예비 TLC에 의해 정제하여, 표제 화합물(24.7 mg, 55%)을 무색 검으로서 제공하였다: C32H45N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 560.4 [M+H]+; LC 순도 100% (UV), (체류 시간, 5.10분); 1H NMR (500 MHz, 아세톤) δH 8.12 (s, 1 H), 7.30-7.60 (m, 2 H), 7.13-7.28 (m, 2 H), 6.54 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 6.33 (br. s., 1 H), 4.85 - 5.07 (m, 1 H), 4.36 (t, J = 6.2 Hz, 1 H), 4.08 (t, J = 5.2 Hz, 1 H), 3.01 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 2.93 (d, J = 7.4 Hz, 2 H), 2.78 (br. s., 2 H), 2.59-2.73 (m, 2 H), 2.15-2.56 (m, 7 H), 1.68 (dt, J = 12.4, 9.7 Hz, 1 H), 1.44-1.62 (m, 2 H), 1.35 (s, 9 H), 0.90-1.07 (m, 6 H).
화합물 23: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5,6-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5,6-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00214
N,N-디메틸포름아미드(7.8 ml) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(450 mg, 0.76 mmol) 및 4,5-디클로로-1,2-페닐렌디아민(161 mg, 0.910 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.44 ml, 2.5 mmol)로 적가 처리한 후, 1회 분량의 N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일}우로늄 헥사플루오로인산염(432 mg, 1.14 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 5.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 고진공 하에서 농축시켰고, 잔류물을 50 ml EtOAC와 50 ml 1/1 H2O /포화 NaHCO3 간에 분획화하였다. 수성상을 30 ml EtOAc로 세정하였고, 조합된 유기상을 30 ml 부분의 H2O 및 염수로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 발포체를 제공하였다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 5% 7N NH3)에 의해 정제하여, 중간체 아미드(아미드 구조이성질체의 혼합물, 520 mg)를 제공하였다.
아세트산(16 ml) 중의 중간체 아미드(0.52 g)를 65℃에서 5.5시간 동안 가열하였고, 반응 혼합물을 냉각시키며, 고진공 하에 두어, 아세트산을 제거하였다. 잔류물을 70 ml CH2Cl2 중에 취하고, 50 ml 부분의 포화 NaHCO3 및 2% Na2CO3 용액으로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 발포체를 생성시켰다. 물질을 하룻밤동안 고진공 상에 두고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 4% 7N NH3로 용리, 2-6% EtOH 포화 w/NH3/ CH2Cl2로 용리하는 제2 칼럼)에 의해 2회 정제하여, 목적 화합물(377 mg)을 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.10 (s, 1 H), 7.63 (d, J=1.66 Hz, 2 H), 7.21 (m, 1 H), 7.13 (d, J=8.29Hz, 1 H), 6.62 (d, J=3.32 Hz, 1 H), 6.54 (d, J=2.07 Hz, 1 H), 6.43 (dd, J=8.40, 2.38 Hz, 1 H), 4.96(m, 2 H), 4.65 (s, 2 H), 4.51 (m, 1 H), 3.84 (d, J=1.04 Hz, 3 H), 3.76 (s, 3H), 2.99 (m, 0.5 H), 2.83 (m, 2 H), 2.66 (m, 0.5 H), 2.38 (m, 4 H), 2.22 (m, 1 H), 2.15 (d, J=7.67 Hz, 3 H), 2.08 (m, 2 H), 2.00 (m, 2 H), 1.90 (m, 1 H), 1.84 (m, 1 H), 1.53 (s, 3 H), 1.46 (m, 1 H), 1.29 (s, 3 H)
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5,6-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00215
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5,6-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(377 mg, 0.513 mmol)을 빙조에서 0℃에서 예비 냉각된 트리플루오로아세트산(7.1 ml) 및 물(0.8 ml)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 30분 동안 0℃에서 교반한 후, 실온으로 가온하고 실온에서 3시간 동안 교반을 계속하였다. 현탁액을 농축시키고, 잔류물을 15 ml의 MeOH 중에 취하고, 농축시켰다. 이 절차를 2회 반복하였고, 잔류물을 고진공 상에 두었다. 물질을 10 ml의 MeOH 중에 취하고(슬러리가 수득됨), 500 mg K2CO3 및 0.2 ml의 물로 세정하였다. 혼합물을 1.5시간 동안 교반하였고, 그 시간 동안 용액의 pH를 ~9로 조정하였다. 혼합물을 프릿을 통해 여과하였고, 고형물을 20 ml의 MeOH로 세정하며, 여과액을 농축시켜, 회백색 고체를 생성시켰다. 물질을 하룻밤동안 고진공 상에 두고, 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 10-12% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 생성물(227 mg)을 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.63 (m, 2 H), 7.21 (dd, J=3.63, 2.38 Hz, 1 H), 6.59 (d,J=3.52 Hz, 1 H), 4.32 (m, 1 H), 3.88 (m, 1 H), 3.01 (m, 0.5 H), 2.84 (m, 2 H), 2.70 (m, 0.5 H), 2.51 (m, 1 H), 2.40 (m, 2 H), 2.26 (m, 2 H), 2.17 (d, J=7.05 Hz, 3 H), 2.11 (m, 2 H), 2.02 (m, 1 H), 1.90 (m, 3 H), 1.62 (m, 1 H), 1.49 (m, 1 H).
화합물 24: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
N-(2-아미노-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00216
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(1.2 g, 3.2 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(10 mL) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(1.25 g, 2.10 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.2 mL, 6.9 mmol) 및 4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민(0.48 g, 2.5 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 약 2 ml로 부분 농축시킨 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(3×)로 추출하였고, 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, 목적 화합물(2 g)을 오일로서 제공하였다.
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00217
아세트산(4 ml) 중의 N-(2-아미노-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(2 g, 2 mmol)의 용액을 60/도에서 하룻밤동안 교반하였다. 휘발물을 진공 하에 제거하고, 잔류하는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 92:8)에 의해 정제하여, 목적 화합물(1 g)을 고체로서 제공하였다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00218
트리플루오로아세트산(20 ml)을 실온에서 물(2 ml) 및 N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(1 g, 1 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 1.5시간 동안 교반한 후, 트리에틸실란(0.43 ml, 2.7 mmol)으로 켄칭하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 87:13)에 의해 2회 정제하여, 목적 생성물(0.28 g)을 발포체로서 제공하였다. C27H32F3N7O3에 대한 MS (ESI+) m/z 560.2 [M+H]+; C27H32F3N7O3에 대한 MS (ESI-) m/z 558.2 [M-H]-; HPLC 순도 >93% (체류 시간, 2.504분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.081 (s, 1H), 7.551 - 7.530 (m, 1H), 7.414 (s, 1H), 7.230 - 7.216 (m, 1H), 7.156 - 7.134 m, 1H), 6.621 - 6.613 (d, J=3.2 Hz, 1H), 4.362 - 4.326 (m, 1H), 3.952 - 3.915 (m, 1H), 3.237 - 3.182 (m, 0.5H(트랜스 이성질체의 메틴), 2.927 - 2.857 (m, 2.5H(시스 이성질체의 메틴 포함)), 2.697 - 2.646 (m, 1H), 2.590 - 2.515 (m, 1H), 2.479 - 2.408 (m, 1H), 2.343 - 2.305 (m, 5H), 2.210 - 2.174 (m, 2H), 2.086 - 1.949 (m, 4H), 1.721 - 1.545 (m, 2H). 체류 시간: 2.52분 1HPLC 조건:아질런트 조르박스 엑스립스 XDB-C18 칼럼, 4.6×50 mm (1.8 um 팩킹), 용매 A- 물(0.1% TFA), 용매 B- 아세토니트릴(0.07% TFA) 5 내지 95% B의 6분 구배; 1분 보류; 이어서 리사이클.
화합물 25: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00219
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(0.84 g, 2.2 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(9 ml) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판산(0.89 g, 1.5 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.84 ml, 4.8 mmol) 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(0.29 g, 1.8 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하고, 약 2 ml로 부분 농축시킨 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(3×)로 추출하였고, 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 94:6)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.88 g)을 무색 고체로서 제공하였다. 체류 시간 C: 3.363분.
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00220
아세트산(3 mL) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(0.88 g, 1.2 mmol)의 용액을 60℃에서 하룻밤동안 교반하였고, 휘발물을 진공 하에 제거하였고, 잔류 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 93:7)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.85 g)을 발포체로서 제공하였다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00221
트리플루오로아세트산(20 mL)을 실온에서 물(2 mL) 및 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.85 g, 1.2 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응을 1시간 동안 진행되도록 하였고, 이 때 트리에틸실란(0.37 mL, 2.3 mmol)를 첨가하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 MeOH(3 ml) 중에 취하고, 1 ml의 K2CO3(포화)을 첨가하였으며, 반응을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 H2O와 DCM/MeOH(9: 1) 간에 분획화하였다. 수성층을 추출하였고(3×), 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 생성되는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 90:10)에 의해 정제하여, 목적 생성물(0.150 g)을 회백색 발포체로서 생성시켰다. C31H43N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 546.3 [M+H]+; C31H43N7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 544.3 [M-H]-; HPLC 순도 >91% (체류 시간, 2.734분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.081 (s, 1H), 7.493 (s, 1H), 7.414 - 7.393 (m, 1H), 7.291 - 7.266 (m, 1H), 7.215 - 7.202 (m, 1H), 6.619 - 6.609 (d, J=4.0 Hz, 1H), 4.345 - 4.312 (m, 1H), 3.923 - 3.885 (m, 1H), 2.994 - 2.915 (m, 0.5 H(트랜스 이성질체의 메틴)), 2.860 - 2.793 (m, 2H), 2.701 - 2.578 (m, 3H), 2.501 - 2.380 (m, 2H), 2.259 - 2.234 (m, 2H), 2.109- 2.008 (m, 3H), 1.920 - 1.880 (m, 3H), 1.658 - 1.499 (m, 2H), 1.364 (s, 9H), 1.036 - 0.991 (m, 3H). 체류 시간: 2.734분. HPLC 조건:아질런트 조르박스 엑스립스 XDB-C18 칼럼, 4.6×50 mm (1.8 um 팩킹), 용매 A- 물(0.1% TFA),용매 B- 아세토니트릴(0.07% TFA). 5 내지 95% B의 6분 구배; 1분 보류; 이어서 리사이클
화합물 26: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-브로모-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
N-(2-아미노-4-브로모페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00222
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7 -아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(1.20 g, 3.16 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(13.0 ml) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(1.25 g, 2.10 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.21 ml, 6.95 mmol) 및 4-브로모벤젠-1,2-디아민(0.472 g, 2.53 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하고, 약 2 ml로 부분 농축시킨 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하였고(3×), 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, 목적 화합물(1.2 g)을 고체로서 제공하였다.
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-브로모-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00223
아세트산(4 ml, 70 mmol) 중의 N-(2-아미노-4-브로모페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.2 g, 1.6 mmol)의 용액을 60℃에서 하룻밤동안 교반하였고, 휘발물을 진공 제거하였으며, 잔류하는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 91:9)에 의해 직접 정제하여, (0.9 g)을 발포체로서 제공하였다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-브로모-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00224
트리플루오로아세트산(20 ml)을 실온에서 물(2 ml) 및 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-브로모-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.9 g, 1 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였고, 트리에틸실란(0.39 ml, 2.4 mmol)를 첨가하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 87:13)에 의해 2회 정제하였다. 잔류물을 MeOH/ H2O(5:0.5 ml) 중에 취하고, K2CO3(100 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 87:13)에 의해 정제하여, 목적 생성물(0.15 g)을 회백색 발포체/검으로서 제공하였다. 시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올(0.15 g; 20%)을 회백색 발포체/검로서 제공하였다. C26H32BrN7O2에 대한MS (ESI+) m/z 554.1 [M+H]+; C26H32BrN7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 552.1 [M-H]-; HPLC 순도 >90% (체류 시간, 2.298분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.080 (s, 1H), 7.652 (s, 1H), 7.425 - 7.403 (m, 1H), 7.342 - 7.7.312 (m, 1H), 7.232 - 7.217 (m, 1H), 6.620 - 6.611 (d, J=3.6 Hz, 1H), 4.358 - 4.318 (m, 1H), 3.928 - 3.888 (m, 1H), 3.099 - 3.039 (m, 0.5H(트랜스 이성질체의 메틴)), 2.898 - 2.829 (m, 2H), 2.777 - 2.726 (m, 0.5H(시스 이성질체의 메틴)), 2.580 - 2.529 (m, 1H), 2.453 - 2.397 (m, 2H), 2.307 -2.141 (7H), 2.068 - 2.017 (m, 1H), 1.955 - 1.891 (m, 3H), 1.695 - 1.506 (m, 2H).
화합물 27: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((이소프로필(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민
Figure pct00225
N,N-디메틸포름아미드(10 ml) 중의 5'-{[3-(2-카르복시에틸)시클로부틸](이소프로필)아미노}-5'-데옥시-2',3'-0-이소프로필리덴아데노신(0.463 g, 0.976 mmol) 및 4-(1-메틸시클로부틸)벤젠-1,2-디아민(0.184 g, 1.04 mmol)의 용액을 0℃에서 냉각시켰다. 상기 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.462 ml, 2.65 mmol)로 적가 처리한 후, 1회 분량의 N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(0.367 g, 0.965 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반한 후, 실온으로 천천히 가온하였다. 실온에서 5시간 후, 반응 혼합물을 냉장고에서 하룻밤동안 저장하였고, 반응 혼합물을 고진공 하에 두었다. 생성되는 유리를 30 ml H2O 중에 취하고, 30 ml 부분의 10% MeOH/EtOAc로 처리하였다. 수성상을 30 ml 분량의 EtOAc로 추가 추출하였다. 조합된 유기상을 25 ml 부분의 포화 NaHCO3 및 염수로 세정하고, Na2SO4로 건조시켰다. 혼합물을 여과하였고, 농축시켜, 유리/발포체(700 mg)를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, 4-5% MeOH 중의 7N NH3/CH2C12)에 의해 정제하여, 중간체 아미드(~80% 순도, 390 mg)를 제공하였다.
중간체 아미드(110 mg, 0.174 mmol)를 4 ml 아세트산 중에 취하고, 용액을 65℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키며, 휘발물을 고진공 하에 제거하여, 유리를 생성시켰다. 미정제 생성물을 25 ml CH2Cl2 중에 취하고, 20 ml 포화 NaHCO3 및 2% Na2CO3 용액으로 세정하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 유리/견고한 발포체를 생성시켰다. 미정제 물질을 분취 TLC(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 7% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 생성물을 견고한 발포체(54 mg)로서 제공하였다. 중간체 아미드(389 mg)의 추가 회분에서 이 상기 절차를 반복하여(단, 정제는 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 4-5% 7N NH3로 용리)에 의한 것임), 추가 368 mg의 목적 화합물을 생성시켰고, 이를 상기 벤즈이미다졸과 조합하였다.
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((이소프로필(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00226
9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(422 mg, 0.686 mmol)을 빙조에서 0℃에서 예비 냉각된 트리플루오로아세트산(6.3 ml, 82 mmol) 및 물(0.7 ml, 40 mmol)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 30분 동안 0℃에서 교반하고, 이 때 빙조를 제거하였고, 혼합물을 실온으로 가온하였다. 혼합물을 2.5시간 동안 실온에서 교반하였고, 이 때 잔류물을 12 ml의 MeOH 중에 취하고, 농축 건조시켰다. 이를 2회 반복하였고, 생성되는 유리를 고진공 하에 두었다. 미정제 잔류물을 11 ml의 MeOH로 희석하고, 600 mg K2CO3 및 0.5 ml H2O로 처리하며, pH 페이퍼에 의해 결정 시, 용액이 염기성이 될 때까지 실온에서 교반시켰다. 혼합물을 여과하였고, 고형물을 20 ml의 MeOH로 세정하였다. 용액을 농축시켜, 잔류물을 제공하였고, 이를 고진공 하에 두었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 10-12% 7N NH3로 용리함)에 의해 정제하여, 목적 화합물을 견고한 발포체/유리 (256 mg)로서 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.30 (m, 1 H), 8.20 (d, J=1.04 Hz, 1 H), 7.38 (d, J=8.09 Hz, 1 H), 7.22(br. s., 1 H), 6.98 (dd, J=8.50,1.66 Hz, 1 H), 5.96 (m, 1 H), 4.74 (t, J=4.87 Hz, 1 H), 4.27 (d. J=3.11 Hz, 1 H), 4.08 (m, 1 H), 3.56 (m, 1 H), 3.13 (m, 1 H), 3.00 (m, 1 H), 2.90 (dd, J=14.51, 4.35 Hz, 1 H), 2.75 (m, 3 H), 2.41 (m, 2 H), 2.12 (m, 5 H), 2.00 (m, 1 H), 1.84 (m, 3 H), 1.58 (m, 1 H), 1.46 (s, 3 H), 1.02 (m, 3 H), 0.95 (d, J=6.63 Hz, 3 H).
화합물 28 (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((이소프로필((1r,3S)-3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
부분입체이성질체를 SFC에 의해 분리하였다. 물질을 MeOH/ H2O 중에 취하고, 백색 분말(132 mg)로서 동결 건조시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) d ppm 8.30 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.38 (d, J=8.09 Hz, 1 H), 7.22 (s, 1 H), 6.99 (dd, J=8.40, 1.55 Hz, 1 H), 5.96 (d, J=4.56 Hz, 1 H), 4.73 (m, 1 H), 4.26 (t, J=5.29 Hz, 1 H), 4.07 (m, 1 H), 3.13 (m, 1 H), 3.00 (m, 1 H), 2.90 (dd, J=14.41, 4.46 Hz, 1 H), 2.76 (t, J=7.15 Hz, 2H), 2.70 (m, 1 H), 2.42 (m, 2 H), 2.18 (m, 2 H), 2.11 (m, 3 H), 1.85 (m, 4 H), 1.57 (q, J=8.85 Hz, 2 H), 1.47 (s, 3 H), 1.02 (d, J=6.84 Hz, 3 H), 0.95 (d, J=6.63 Hz, 3 H).
화합물 29: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
(1-메틸시클로부틸)벤젠
Figure pct00227
벤젠(5.0 ml, 56 mmol) 및 황산(1.17 ml, 21.9 mmol)의 교반 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 1시간에 걸쳐 벤젠(3.0 ml, 34 mmol) 중의 메틸렌시클로부탄(1.00 ml, 10.8 mmol)의 용액으로 적가 처리하였다. 첨가 완료 시에, 반응 혼합물을 실온으로 가온하면서 부가적 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 15 ml의 헥산으로 추출하였다. 유기상을 10 ml H2O 및 10 ml 포화 NaHCO3로 세정하고, Na2SO4로 건조시키며, 여과하고, 농축시켜, 무색 액체를 생성시켰다. 액체를 쿠겔로(kugelrohr) 증류(5 내지 10 torr)에 의해 정제하여, 목적 화합물을 무색 액체로서 생성시켰다. 제1 분획을 75 내지 85℃에서 수집하여, 무색 액체(330 mg)의 생성물을 무색 액체로서 제공하였다.
1-(1-메틸시클로부틸)-4-니트로벤젠
Figure pct00228
70% 질산(7:3, 질산:물, 0.375 ml, 5.92 mmol)을 60분간에 걸쳐 0℃에서 냉각된 아세트산 무수물(1.4 mL, 15 mmol) 중의 (1 -메틸시클로부틸)벤젠(346 mg. 2.37 mmol)의 용액에 적가하였다. 용액을 첨가하는 동안 5℃ 미만에 유지시켰다. 첨가 완료 시에, 반응물을 60분 도안 냉각하면서 교반하였다. 반응 혼합물을 40 ml 빙수에 주입하였고, 얼음을 용융시켰다. 수성상을 20 ml 부분의 Et2O로 3회 추출하였고, 조합된 유기상을 25 ml의 H2O 및 2회 20 ml 분량의 포화 NaHCO3 용액으로 차례로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 밝은 생성물을 오일(418 mg)로서 생성시켰고, 이를 다음 단계에서와 같이 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) d ppm 8.16 (d. J=8.71 Hz, 2 H), 7.29 (d, J=8.71 Hz, 2 H), 2.41 {m, 2 H), 2.15 (m, 3 H), 1.88 (m, 1 H). 1.48 (s, 3 H)
4-(1-메틸시클로부틸)아닐린
Figure pct00229
에탄올(24 mL, 410 mmol) 중의 1-(1-메틸시클로부틸)-4-니트로벤젠(708 mg, 3.70 mmol)의 용액을 5% Pd/탄소 (87 mg. 0.041 mmol)로 주의하여 처리하였다. 반응 플라스크를 비우고, 수소 기체로 3회 충전하였으며, 반응 혼합물을 19시간 동안 수소 대기 하에서 교반하였다. 반응 혼합물을 솔카 플록(
Figure pct00230
)의 패드를 통해 여과하였고, 패드를 25 mL EtOH로 세정하였다. 용매를 제거하여, 오일을 생성시켰고, 이를 잠깐 고진공 하에 두어, 목적 화합물(609 mg)을 생성시켰으며, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. 1H NMR (400 MHZ, CDCl3) o ppm 6.99 (m, 2 H), 6.66 (m, 2 H), 3.39 (br. s., 2 H), 2.35 (m, 2 H), 2.05 (m, 3 H), 1.82 (m, 1 H), 1.42 (s, 3 H).
2,2,2-트리플루오로-N-(4-(1-메틸시클로부틸)-2-니트로페닐)아세트아미드
Figure pct00231
4-(1-메틸시클로부틸)아닐린(500 mg, 2.79 mmol) 및 질산암모늄 (220 mg, 2.8 mmol)을 트리플루오로아세트산 무수물(1.97 mL, 14.0 mmol)로 처리한 후, 클로로포름(10 mL, 120 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 실온에서 교반하고, 이 때 모든 고체가 용해되었다. 반응 혼합물을 50 ml H2O에 용해하고, 25 ml 부분의 CH2Cl2로 3회 추출하였다. 조합된 유기상을 10 mL 포화 NaHCO3로 세정하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 오일을 제공하였다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, 2.5-3.5% 에틸 에테르/헥산으로 용리함)에 의해 정제하여, 목적 화합물(800 mg)을 제공하였다.
4-(1-메틸시클로부틸)-2-니트로아닐린
Figure pct00232
메탄올(18 ml, 440 mmol) 중의 2,2,2-트리플루오로-N-[4-(1-메틸시클로부틸)-2-니트로페닐]아세트아미드(580 mg, 1.9 mmol)의 용액을 물(4.5 ml, 250 mmol) 중의 탄산칼륨(788 mg, 5.70 mmol)의 용액으로 처리하였고, 혼합물을 50분 동안 45℃에서 처리하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰고, 메탄올을 진공 하에 제거하였다. 잔류 수성상을 10 ml H2O로 희석하고, 3회 20 ml 분량의 EtOAc로 처리하였다. 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 오일을 생성시켰다. 그 물질을 고진공 상에 두었고, 이 때 고화되어, 목적 화합물(400 mg)을 수득하였다. 그 물질을 다음 단계에서 직접 사용하였다 1H NMR (400 MHz. CDCl3) d ppm 7.90 (d, J=2.07 Hz, 1 H), 7.23 (dd, J=8.50, 2.28 Hz, 1 H), 6.77 (d, J=8.71 Hz, 1 H), 5.96 (br. s., 2 H), 2.33 (m, 2 H), 2.13 (m, 1 H), 2.04 (m, 2 H), 1.84 (m, 1 H), 1.43 (s, 3 H).
4-(1-메틸시클로부틸)벤젠-1,2-디아민
Figure pct00233
에탄올(8.5 mL, 140 mmol) 중의 4-(1-메틸시클로부틸)-2-니트로아닐린(138 mg. 0.668 mmol)의 용액을 에탄올 중의 10% 팔라듐/탄소(14.2 mg, 0.0134 mmol) 슬러리로 처리하였다. 반응 플라스크를 진공처리하고, 수소 기체로 3회 충전하였으며, 반응 혼합물을 4시간 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 솔카 플록
Figure pct00234
의 패드를 통해 여과하였고, 패드를 20 ml의 MeOH로 세정하였다. 여과액을 농축시켜, 오일을 생성시켰고, 이를 고진공 하에 두어, 목적 화합물을 고체(119 mg)로 생성시켰다. 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. 1H NMR (400 MHZ. CDCl3) δH ppm 6.66 (m, 1 H), 6.53 (m, 2 H), 3.34 (br. s., 4 H), 2.33 (m, 2 H), 2.08 (m, 1 H), 1.99 (m. 2 H). 1.80 (m, 1H), 1.42 (s, 3 H).
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00235
N,N-디메틸포름아미드(6.7 ml, 87 mmol) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(387 mg, 0.652 mmol) 및 [8]4-(1 -메틸시클로부틸)벤젠-1,2-디아민(120 mg, 0.68 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.38 ml, 2.2 mmol)로 적가 처리한 후, 1회 분량의 N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(372 mg, 0.978 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 2.5시간 동안 실온에서 교반한 후, 반응 혼합물을 고진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 40 ml EtOAc(일부 CH2Cl2를 첨가하여, 생성물의 용해를 보조하였다)와 40 ml 1/1 H2O /포화 NaHCO3 간에 분획화하였다. 수성상을 30 ml 1/1 EA/ CH2Cl2로 추출하고, 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 5-6% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 중간체를 아미드 구조이성질체의 혼합물로서 제공하였다.
중간체를 아세트산(5.4 ml, 95 mmol) 중에 취하였고, 용액을 65℃에서 3 시간 동안 가열하였다. 아세트산을 따뜻한 수조를 이용하여 고진공 하에 제거하였다. 미정제 생성물을 30 ml CH2Cl2 중에 취하였고, 유기상을 10 ml 부분의 포화 NaHCO3 및 2% K2CO3 용액으로 세정하며, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 유리를 생성시켰고, 이에 따라 고진공 하에 발포체가 생성되었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 5% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 생성물(140 mg)을 생성시켰다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00236
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(128 mg, 0.17 4 mmol)을 빙조에서 0℃에서 예비 냉각된 트리플루오로아세트산(3.60 ml, 46.7 mmol) 및 물(0.4 ml, 20 mmol)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 30분 동안 0℃에서 교반한 후, 빙조를 제거하였고, 혼합물을 실온으로 가온하였으며, 이 때 이 온도를 추가 2.5 시간 동안 유지시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 3 ml의 MeOH 중에 취하고, 농축시키며, 공정을 2회 반복하였다. 생성되는 백색 잔류물을 고진공 상에 두었다. 미정제 잔류물을 또 다른 회분의 미정제 물질(동일하게 제조됨, 본 반응에 사용된 양의 ~1/3)과 조합하고, 5 mL MeOH로 희석하며, 140 mg K2CO3, 10 소적의 H2O로 처리하고, pH 페이퍼에 의해 용액이 염기성이 될 때까지 실온에서 교반시켰다. 혼합물을 여과하였고, 고형물을 15 ml의 MeOH로 세정하였다. 용액을 농축시켜, 오일을 생성시켰고, 이를 고진공 상에 두었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 10-15% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 생성물을 유리/견고한 발포체(68 mg)로서 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8 06 (s, 1 H), 7.39 (d, J=7.88 Hz, 1 H), 7.23 (s, 1 H), 7.21 (dd, J=3.63, 1.76 Hz, 1 H), 6.99 (m, 1 H), 6.60 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.93 (m, 1 H), 4.32 (m, 1 H), 3.89 (m, 1 H), 3.03 (m, 1 H), 2.83 (m, 2 H), 2.70 (q, J=8.15 Hz, 1 H), 2.52 (m, 1 H), 2.40 (m, 4 H), 2.27 (m, 2H), 2.18 (d, J=6.22 Hz, 3 H), 2.11 (m, 4 H), 2.03 (m, 1 H), 1.86 (m, 4 H), 1.62 (m, 1 H), 1.51 (m, 1 H), 1.47 (s, 3H).
화합물 30: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((메틸((1r,3S)-3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00237
부분입체이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/ H2O 중에 취하고, 백색 분말(67 mg)로 동결건조시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.27 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.38 (d, J=8.29 Hz, 1 H), 7.22 (br. s., 1 H), 6.99 (dd, J=8.40, 1.55 Hz, 1 H), 5.97 (d, J=4.15 Hz, 1 H), 4.69 (dd, J=5.18, 4.15 Hz, 1 H), 4.22 (t, J=5.60 Hz, 1 H), 4.16 (m, 1 H), 2.77 (m, 2 H), 2.72 (d, J=8.09 Hz, 1 H), 2.67 (m, 2 H), 2.42 (m, 2 H), 2.21 (m, 2 H), 2.15 (s, 3 H), 2.10 (m, 3 H), 1.85 (m, 4 H), 1.47 (s, 3 H), 1.46 (m, 2 H).
화합물 31: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((이소프로필((1s,3R)-3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00238
부분입체이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 NMR에 의해 트랜스 부분입체이성질체인 것으로 나타났다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 백색 분말(63 mg)로 동결건조시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.31 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.38 (d, J=8.29 Hz, 1 H), 7.22 (s, 1 H), 6.99 (dd, J=8.29, 1.66 Hz, 1 H), 5.97 (d, J=4.56 Hz, 1 H), 4.74 (m, 1 H), 4.27 (t, J=5.39 Hz, 1 H), 4.09 (m, 1 H), 3.53 (m, 1 H), 3.01 (m, 1 H), 2.93 (dd, J=14.72, 4.35 Hz, 1 H),2.80 (t, J=7.46 Hz, 2H), 2.73 (dd, J=1 4.51, 7.46 Hz, 1 H), 2.42 (m, 2 H), 2.13 (m, 5 H), 2.01 (m, 3 H), 1.82 (m, 3 H), 1.47 (s, 3 H), 1.02 (d, J=6.63 Hz, 3 H), 0.95 (d, J=6.63 Hz, 3 H).
화합물 32: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00239
부분입체이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. (이하 열거된 조건) 120 mg이 생성되었다. 분취 방법: IC (2×15 cm), 35% 이소프로판올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar, 60 mL/분, 220 nm., inj vol.: 0.75 mL, 4 mg/mL 메탄올 피크 1: 5.27분. 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.080 (s, 1H), 7.495 (s, 1H), 7.417 - 7.395 (m, 1H), 7.303 - 7.281 (m, 1H), 7.220 - 7.212 (m, 1H), 6.619 - 6.610 (m, 1H), 4.349 - 4.315 (m, 1H), 2.837 - 2.802 (m, 2H), 2.718 - 2.641 (m, 1H), 2.508 - 2.365 (m, 3H), 2.284 - 2.258 (m, 3H), 2.156 (s, 3H), 1.954 - 1.906 (m, 1H), 1.549 - 1.460 (m, 2H), 1.375 (s, 9H).
화합물 33: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00240
9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민
Figure pct00241
N,N-디메틸포름아미드(11 ml, 140 mmol) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(0.461 g, 1.03 mmol) 및 4-(1-메틸시클로부틸)벤젠-1,2-디아민(0.150 g, 0.851 mmol)의 용액을 0℃에서 냉각시켰다. 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.489 ml, 2.81 mmol)로 적가 처리한 후, 1회 분량의 N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(0.388 g, 1.02 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반한 후, 실온으로 천천히 가온하였고, 6시간 동안 실온에서 교반을 계속했다. 반응 혼합물을 30 ml H2O로 희석하고, 25 ml 부분의 10% MeOH/EtOAc로 추출하였다. 수성상을 2회 20 ml 분량의 EtOAc로 추가 추출하였다. 조합된 유기상을 25 ml 부분의 포화 NaHCO3, 염수로 세정하고, Na2SO4로 건조시켰다. 용액을 여과하였고, 농축시켜, 유리를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, 5% MeOH 중의 7N NH3/CH2C12로 용리함)에 의해 정제하였다. 중간체 아미드를 아세트산(7.0 ml, 120 mmol) 중에 취하고, 용액을 2.5시간 동안 65℃에서 가열하였으며, 반응 혼합물을 냉각시키며, 아세트산을 고진공 하에 제거하여, 유리를 생성시켰다. 미정제 생성물을 25 ml CH2Cl2 중에 취하고, 20 ml 포화 NaHCO3, 2% Na2CO3 용액으로 세정하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 진공 하에 농축시켜, 유리/견고한 발포체를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 5-7% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 화합물(214 mg)을 제공하였다.
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00242
9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(188 mg, 0.320 mmol)을 빙조에서 0℃에서 예비 냉각된 트리플루오로아세트산(4.00 ml, 51.9 mmol) 및 물(0.4 ml, 20 mmol)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 0℃에서 교반하였다. 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 빙조를 제거하였고, 혼합물을 실온으로 가온하였고, 이 때 추가 2시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 10 ml의 MeOH 중에 취하고, 농축시키며, 공정을 2회 반복하였다. 생성되는 유리를 1시간 동안 고진공 하에 두었다. 미정제 잔류물을 7 ml의 MeOH로 희석하고, 150 mg K2CO3 및 10 소적의 H2O로 처리하고, pH 페이퍼에 의해 용액이 염기성이 될 때까지 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 고형물을 10 ml의 MeOH로 세정하였다. 용액을 농축시켜, 잔류물을 생성시켰고, 이를 고진공 하에 두었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 10-15% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 화합물을 유리/견고한 발포체(66%)로서 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.28 (m, 1 H), 8.20 (m, 1 H), 7.38 (d, J=8.29 Hz, 1 H), 7.23 (s, 1 H), 7.00 (dd, J=8.40, 1.55 Hz, 1 H), 5.98 (t, J=3.21 Hz, 1 H), 4.70 (m, 1 H), 4.24 (q, J=5.18 Hz, 1 H), 4.17 (m, 1 H), 3.10 (m, 0.4 H), 2.80 (m, 3 H), 2.71 (d, J=5.60 Hz, 2 H), 2.43 (m, 2 H), 2.23 (dd, J=11.71, 6.12 Hz, 1 H), 2.19 (m, 3 H), 2.12 (m, 4 H), 1.99 (m, 1 H), 1.85 (m, 4 H), 1.48 (s, 3 H), 1.48 (m, 1 H).
화합물 34: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((메틸((1s,3R)-3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00243
부분입체이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/ H2O 중에 취하고, 백색 분말(30 mg)로 동결건조시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.28 (s, 1 H), 8.19 (s, J=4.15 Hz, 1 H), 4.69 (m, 1 H), 4.23 (t, J=5.49 Hz, 1 H), 4.17 (m, 1 H), 3.07 (m, 1 H), 2.81 (t, J=7.57 Hz, 2 H), 2.68 (m, 2 H), 2.42 (m, 2H), 2.17 (s, 3 H), 2.09 (m, 6 H), 1.97 (m, 2 H), 1.84 (m, 3 H), 1.47 (s, 3 H).
35: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00244
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다 하기 SFC 분리 (120 mg).
분취 방법: IC (2×15 cm), 35% 이소프로판올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar, 60 mL/분, 220 nm., inj vol.: 0.75 mL, 4 mg/mL 메탄올. 피크 2: 6.24분. 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.078 (s, 1H), 7.501 (s, 1H), 7.422 - 7.401 (m, 1H), 7.310 - 7.285 (m, 1H), 7.228 - 7.219 (m, 1H), 6.618 - 6.609 (m, 1H), 4.355 - 4.320 (m, 1H), 3.053 - 2.977 (m, 1H), 2.874 - 2.836 (m, 2H), 2.535 - 2.268 (m, 4H), 2.177 - 2.003 (m, 8H), 1.909 - 1.869 (m, 2H), 1.677 - 1.595 (m, 1H), 1.381 (s, 9H).
화합물 36: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸((1r,3S)-3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00245
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 백색 고체(15 mg)로 동결건조시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.38 (d, J=8.09 Hz, 1 H), 7.23 (br. s., 1 H), 7.20 (d, J=3.32 Hz, 1 H), 6.99 (m, 1 H), 6.60 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.95 (m, 1 H), 4.31 (t, J=6.74 Hz, 1 H), 3.88 (m, 1 H), 2.81 (m, 2 H), 2.66 (m, 1 H), 2.40 (m, 5 H), 2.25 (m, 3 H), 2.14 (br. s., 3 H), 2.11 (m, 3 H), 1.91 (m, 2 H), 1.83 (m, 1 H), 1.61 (m, 1 H), 1.51 (m, 1 H), 1.47 (s, 3 H).
화합물 37: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸((1r,3S)-3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00246
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 동결건조에 의해, 목적 생성물을 무색 고체(0.060 g)로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.079(s, 1H), 7.546 - 7.524 (m, 1H), 7.409 (s, 1H), 7.226 - 7.217 (m, 1H), 7.150 - 7.124 (m, 1H), 6.619 - 6.610 (m, 1H), 4.355 - 4.320 (m, 1H), 3.912 - 3.885 (m, 1H), 2.881 - 2.845 (m, 2H), 2.727 - 2.674 (m, 1H), 2.538 - 2.262 (m, 6H), 2.172 (s, 3H), 1.955 - 1.916 (m, 3H), 1.670 - 1.492 (m, 3H).
화합물 38: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00247
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 동결건조 후, 목적 생성물을 무색 고체(32 mg)로서 회수하였다.
분취 방법: Lux-3 (2×15 cm), 30% 에탄올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar, 65 mL/분, 220 nm., inj vol.: 0.4 mL, 6.2 mg/mL 메탄올. 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.082 (s, 1H), 7.493 (s, 1H), 7.415 - 7.393 (m, 1H), 7.295 - 7.270 (m, 1H), 7.215 - 7.206 (m, 1H), 6.621 - 6.612 (m, 1H), 4.343 - 4.309 (m, 1H), 3.924 - 3.897 (m, 1H), 3.044 - 2.962 (m, 1H), 2.834 - 2.798 (m, 2H), 2.728 - 2.695 (m, 1H), 2.660 - 2.607 (m, 2H), 2.543 - 2.380 (m, 2H), 2.281 - 2.257 (m, 3H), 1.932 - 1.906 (m, 3H), 1.660 - 1.523 (m, 3H), 1.368 (s, 9H), 1.050 - 1.014 (t, J=7.2 Hz, 3H).
화합물 39: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸((1s,3R)-3-(2-(5-(1-메틸시클로부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00248
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 백색 분말(19 mg)로 동결건조시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8 06 (s, 1 H), 7.39 (d. J=8.50 Hz, 1 H), 7.21 (m, 2 H), 6.99 (dd, J=8.29, 1.45 Hz, 1 H), 6.59 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.94 (m, 1 H), 4.32 (dd, J=7.77, 5.91 Hz, 1 H), 3.89 (m,1 H), 3.00 (m, 1 H), 2.83 (t, J=7.57 Hz, 2 H), 2.49 (m, 1 H), 2.38 (m, 4 H), 2.23 (m, 1 H), 2.16 (s. 3 H), 2.11 (m, 5 H), 2 01 (m, 2 H), 1.84 (m. 3 H), 1.61 (m, 1 H), 1.46 (s, 3 H).
화합물 40: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로프로필메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00249
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 동결건조시켜, 백색 분말(45 mg)을 생성시켰다.1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (d, J=8.29 Hz, 1 H), 7.27 (m, 1 H), 7.20 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 6.60 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.32 (dd, J=7.36, 6.12 Hz, 1 H), 3.90 (m, 1 H), 3.06 (m, 1 H), 2.81 (t, J=6.84 Hz, 2 H), 2.74 (m, 1 H), 2.55 (dd, J=12.75, 7.77 Hz, 1 H), 2.41 (m, 1 H), 2.37 (d, J=6.84 Hz, 2 H), 2.29 (m, 3 H), 1.91 (m, 3 H), 1.60 (m, 1 H), 1.50 (m, 2 H), 1.36 (s, 9 H), 0.87 (m, 1 H), 0.48 (d, J=8.09 Hz, 2 H), 0.10 (m, 2 H).
화합물 41: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시킨 후, H2O/MeOH/CH3CN으로부터 동결건조시켜, 백색 분말(100 mg)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (m, 1 H), 7.27 (m, 1 H), 7.20 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 6.60 (m, 1 H), 4.32 (t, J=6.43 Hz, 1 H), 3.93 (t, J=5.29 Hz, 1 H), 3.54 (m, 0.2 H), 3.1 1 (t, J=9.33 Hz, 1 H), 3.02 (m, 1 H), 2.82 (m, 2 H), 2.66 (dd, J=13.68, 8.09 Hz, 1 H), 2.46 (m, 1 H), 2.36 (m, 1 H), 2.23 (m, 3 H), 2.05 (m, 1 H), 1.91 (m, 3 H), 1.59 (m, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.02 (m, 6 H).
화합물 42: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
단계 1: 에틸 3-((1S,3r)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00250
아민 에틸 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-디메톡시벤질)아미노]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노)시클로부틸]프로판산염(1.8 g, 3.0 mmol)을 메탄올(20 mL, 600 mmol) 중에 취하고, 시안화수소화붕소화나트륨(0.37 g, 5.9 mmol)를 첨가하였다. 메탄올 중의 AcOH의 10% 용액을 이용하여 pH를 약 6으로 조정한 후, 1회 분량의 시클로부탄카르복스알데히드(0.32 g, 3.8 mmol)을 첨가하였다. 반응을 5시간 동안 진행시키고, 이 때 HPLC는 반응이 중지되었음을 가리켰다. 추가 1.3 당량의 시클로부탄카르복스알데히드를 첨가하였고, 반응을 하룻밤동안 지속시켰다. NaHCO3(포화)을 반응 혼합물에 첨가한 후, 이를 DCM으로 3회 추출하였고, 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키며, 황색 수지로 농축시켰다. 시스 및 트랜스 이성질체를 실리카 상에 분리하였다. FC(DCM/MeOH 중의 7N NH3 96:4)에 의한 정제로써, 생성물의 2개의 분리된 회분을 생성시켰고, 각기 하나의 각 이성질체를 약 90%로 풍부하게 가지고 있었다. 상부 이성질체: 0.38 g(11:1 혼합물, 시스) 하부 이성질체: 0.31 g(6:1 혼합물, 트랜스). C35H49N5O6에 대한 MS (ESI+) m/z 676.7 [M+H]+; HPLC 순도 > 69% (체류 시간, 3.791).
단계 2: N-(2-아미노-5-(tert-부틸)페닐)-3-((1S,3r)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00251
상부 이성질체(시스): 수산화리튬 모노수화물(0.236 g, 5.62 mmol)을 에틸 3-((1S,3r)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(6 mL, 70 mmol) 및 메탄올(1.5 mL, 37 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 다음 날 아침에 출발 물질이 소모되어 산으로 변환되었다. 반응을 1N HCl를 이용하여 pH = 6으로 산성화하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류하는 물을 에탄올과 함께 공비 증류한 후, 72시간 동안 동결건조기에 두어 제거하였다. 생성되는 회백색 고체를 추가 정제 없이 사용하였다. 체류 시간: 3.330분 C36H49N5O6에 대한 MS (ESI+) m/z 648.4 [M+H]+; C36H49N5O6에 대한 MS (ESI-) m/z 646.4 [M-H]-; HPLC 순도 > 97% (체류 시간, 3.329).
N,N,N',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(0.334 g, 0.880 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(3.63 mL, 46.9 mmol) 중의 3-{시스-3-[(시클로부틸메틸){[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-디메톡시벤질)아미노]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노]시클로부틸}프로판산(0.38 g, 0.59 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.337 mL, 1.94 mmol) 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(0.116 g, 0.704 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 다음 날 아침에 출발 물질이 소모되었고, 반응을 약 2 mL로 부분 농축시킨 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc으로 3회 추출하였고, 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키며, 농축시켰다. 생성되는 잔류물을 FC(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, N-(2-아미노-5-(tert-부틸)페닐)-3-((1S,3r)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(0.30 g; 64%)를 자주색-갈색 비정형 고체로서 생성시켰다. HPLC 순도 >19% (체류 시간, 3.574분)
단계 3: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00252
아세트산(1.0 mL, 20 mmol) 중의 N-(2-아미노-4-tert-부틸페닐)-3-{시스-3-[(시클로부틸메틸){[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-디메톡시벤질)아미노]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노]시클로부틸}프로판아미드(0.3 g, 0.4 mmol)의 용액을 65℃에서 하룻밤동안 교반하였고, 그 다음 날 아침 출발 물질이 소모되었고, 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 FC(DCM/MeOH 중의 7N NH3 93:7)에 의해 정제하여, 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 회백색 고체로서 생성시켰다. C46H61N7O4에 대한 MS (ESI+) m/z 777.7 [M+H]+; HPLC 순도 >64% (체류 시간, 3.690분).
단계 4: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00253
트리플루오로아세트산(5 mL, 60 mmol)을 실온에서 물(0.5 mL, 20 mmol) 및 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.2 g, 0.2 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응을 하룻밤동안 진행시켰고, 이 때 밝은 분홍색의 현탁액을 트리에틸실란(0.082 mL, 0.52 mmol)으로 켄칭하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 메탄올(15 ml) 중에 취하였다. 500 mg의 K2CO3 및 8 소적의 H2O를 첨가하였고, 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 필터 케이크를 10 mL의 메탄올로 세정하였다. 여과액을 농축시키고, 생성되는 잔류물을 FC(DCM/MeOH 중의 7N NH3 90:10)에 의해 정제하여, (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올(0.037 g; 20%)을 무색 고체로서 생성시켰다. C34H47N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 586.3 [M+H]+; HPLC 순도 >89% (체류 시간, 2.970분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.083 (s, 1H), 7.498 (s, 1H), 7.417 - 7.396 (m, 1H), 7.302 - 7.277 (m, 1H), 7.206 - 7.197 (m, 1H), 6.621 - 6.612 (m, 1H), 4.347 - 4.314 (m, 1H), 3.912 - 3.885 (m, 1H), 2.973 - 2.922 (m, 1H), 2.836 - 2.800 (m, 2H), 2.662 - 2.366 (m, 6H), 2.282 - 2.241 (m, 3H), 2.061 - 2.034 (m, 2H), 1.912 - 1.494 (m, 10H), 1.374 (s, 9H).
화합물 43: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00254
에틸 3-(3-(시클로부틸(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00255
에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(0.84 g, 1.4 mmol)을 메탄올(10 ml) 중에 취하고, 시안화수소화붕소화나트륨(0.087g, 1.4 mmol)를 첨가하였다. MeOH 중의 AcOH의 10% 용액을 이용하여 pH를 약 6으로 조정한 후, 시클로부타논(0.15 ml, 2.1 mmol)을 1회 분량으로 첨가하였다. 반응을 3일 동안 실온에서 교반하였다. NaHCO3(포화)을 반응 혼합물에 첨가하였고, 이를 이어서 DCM으로 추출하였다(3×). 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 물질을 추가 정제 없이 사용하였다.
3-(3-(시클로부틸(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산
Figure pct00256
수산화리튬 모노수화물(0.58 g, 14 mmol)을 테트라히드로푸란(12 ml, 150 mmol) 및 메탄올(3 ml, 60 mmol) 중의 에틸 3-(3-(시클로부틸(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(0.91 g, 1.4 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였다, 이 때 그것을 1 N HCl을 이용하여 pH=6으로 산성화하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류하는 물을 에탄올과 함께 공비 증류한 후, 18시간 동안 동결건조기에 두어, 제거하였다. 생성되는 회백색 고체를 추가 정제 없이 사용하였다.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-(시클로부틸(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00257
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(0.783 g, 2.06 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(8.50 ml) 중의 3-(3-(시클로부틸(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(0.87 g, 1.4 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.789 ml, 4.53 mmol) 및 [8)4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(0.270 g, 1.65 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 이 때 혼합물을 약 2 ml로 부분 농축시킨 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하였고(3×), 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM / MeOH 중의 7NNH3 95:5)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0. 76 g)을 고체로서 제공하였다.
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00258
아세트산(2 ml) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-(시클로부틸(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(0.76 g, 0.97 mmol) 중의 용액을 60℃에서 하룻밤동안 교반하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류하는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 91:9)에 의해 직접적으로 정제하여, 목적 화합물(0.61 g)을 발포체로서 제공하였다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00259
트리플루오로아세트산(10 ml, 200 mmol)을 실온에서 물(1 ml, 80 mmol) 및 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.61 g, 0.80 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 o/n 교반하고, 트리에틸실란(0.26 ml, 1.6mmol)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 MeOH(15 ml) 중에 취하고, 500 mg의 K2CO3 및 8 소적의 물을 첨가하였으며, 반응을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 필터 케이크를 MeOH(10 ml)로 세정하였다. 여과액을 농축시키고, 생성되는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 90:10)에 의해 정제하여, 목적 생성물(0.13 g)을 무색 발포체로서 제공하였다. C33H45N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 572.2 [M+H]+; C33H45N7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 570.2 [M-H]-; HPLC 순도 >90% (체류 시간, 2.850분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.083 (s, 1H), 7.492 (s, 1H), 7.412 - 7.392 (m, 1H), 7.309 - 7.286 (m, 1H), 7.220 - 7.205 (m, 1H), 6.620 - 6.610 (d, J= 4.0 Hz, 1H), 4.321 - 4.283 (m, 1H), 3.888 - 3.848 (m, 1H), 3.505 - 3.417 (m, 0.5H(트랜스 이성질체의 메틴)), 3.231 - 3.147 (m, 0.5H) (시스 이성질체의 메틴)), 3.051 - 2.953 (m, 1H), 2.871 - 2.732 (m, 3H), 2.583 - 2.501 (m, 1H), 2.441 - 2.368 (m, 1H), 2.244 - 2.205 (m, 3H), 2.170 - 1.833 (m, 9H), 1.695 - 1.560 (m, 4H), 1.384 (s, 9H).
화합물 44: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로프로필메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
에틸 3-(3-((시클로프로필메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00260
아민 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(0.90 g, 1.5 mmol)을 메탄올(10 mL) 중에 취하고, 시안화수소화붕소화나트륨(0.093 g, 1.5 mmol)를 첨가하였다. MeOH 중의 AcOH의 10% 용액을 이용하여 pH를 약 6으로 조정하였다. 반응물을 실온에서 o/n 교반하였다. NaHCO3(포화)을 혼합물에 첨가하고, 이를 다시 DCM으로 추출하였다(3×). 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 물질을 추가 정제 없이 사용하였다.
3-(3-((시클로프로필메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산
Figure pct00261
수산화리튬, 모노수화물(0.62 g, 15 mmol)을 테트라히드로푸란(13 ml) 및 메탄올(3 ml) 중의 에틸 3-(3-((시클로프로필메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(0.98 g, 1.5 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 24시간 동안 교반하고, 1 N HCl을 이용하여 pH=6으로 조정하였다. 휘발물을 진공 하에 제거하였고, 잔류수를 에탄올과 함께 공비 증류한 후, 18시간 동안 동결건조기에 둠으로써 제거하였다. 생성되는 회백색 고체를 추가 정제 없이 사용하였다.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((시클로프로필메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00262
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(0.846 g, 2.22 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(9.19 mL, 119 mmol) 중의3-(3-((시클로프로필메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(0.94 g, 1.5 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.852 mL, 4.89 mmol) 및 [8]4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(0.292 g, 1.78 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하고, 약 2 ml로 부분 농축시켜, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하였고(3×), 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.92 g)을 고체로서 제공하였다.
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로프로필메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00263
아세트산(5 ml) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((시클로프로필메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.1 g, 1.4 mmol)의 용액을 하룻밤동안 60℃에서 가열하였다. 용액을 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피(DCM /7N NH3 이온 MeOH 93:7)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.57 g)을 무색 발포체로서 생성시켰다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로프로필메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00264
트리플루오로아세트산(10 mL)을 실온에서 물(1 mL) 및 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로프로필메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.52 g, 0.68 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 트리에틸실란(0.22 mL, 1.4 mmol)을 첨가하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 MeOH(15 ml) 중에 취하고, 500 mg의 K2CO3 및 8 소적의 H2O를 첨가하였고, 반응을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 필터 케이크를 10 ml의 MeOH로 세정하였다. 여과액을 농축시키고, 생성되는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 90:1 0)에 의해 정제하여, 목적 생성물(0.196 g)을 회백색 발포체로서 제공하였다. C33H45N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 572.6 [M+H]+; C33H45N7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 570.3 [M-H]-; HPLC 순도 >90% (체류 시간, 2.850분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 7.944 (s, 1H), 7.361 (s, 1H), 7.280 - 7.259 (m, 1H), 7.172 - 7.150 (m, 1H), 7.092 - 7.078 (m, 1H), 6.484 - 6.475 (d, J=3.6 Hz, 1H), 4.222 - 4.185 (m, 1H), 3.815 - 3.779(m, 1H), 3.329 (m, 0.5H(트랜스 이성질체의 메틴)), 2.961 (m, 0.5H(시스 이성질체의 메틴), 2.745 - 2.627 (m, 3H), 2.503 - 2.450 (m, 1H), 2.301 - 2.187 (m, 5H), 2.036 - 1.890 (m, 2H), 1.793 - 1.776 (m, 3H), 1.529 - 1.385 (m, 2H), 1.246 (s, 9H), 0.808 - 0.739 (m, 1H), 0.394 - 0.362 (m, 2H), 0.012 - 0.013 (m, 2H). 체류 시간:2.850분. HPLC 조건:아질런트 조르박스 엑스립스 XDB-C18 칼럼, 4.6×50 mm (1.8 um 팩킹), 용매 A- 물(0.1% TFA),용매 B- 아세토니트릴(0.07% TFA) 5 내지 95% B의 6분 구배; 1분 보류; 이어서 리사이클.
화합물 45: 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소부틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
아민 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.7 g, 2.8 mmol)을 메탄올(20 ml) 중에 취하고, 시안화수소화붕소화나트륨(0.35 g, 5.6 mmol)를 첨가하였다. MeOH 중의 AcOH의 10% 용액을 이용하여 pH를 약 6으로 조정한 후, 1회 분량의 이소부티르알데히드(0.33 ml, 3.6 mmol)를 첨가하였다. 반응 3시간 동안 실온에서 교반하였다. 1.3 당량의 이소부티르알데히드를 첨가하고, 하룻밤동안 교반을 계속하였다. NaHCO3(포화)을 반응 혼합물에 첨가한 후, DCM으로 추출하였다(3×). 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키며, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 97:3)에 의해 정제하여, 목적 화합물(1.75 g)을 무색 발포체로서 제공하였다.
3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소부틸)아미노)시클로부틸)프로판산
Figure pct00265
수산화리튬, 모노수화물(1.11 g, 26.4 mmol)을 테트라히드로푸란(13 ml, 160 mmol) 및 메탄올(3 ml, 70 mmol) 중의 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소부틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.75 g, 2.64 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 24 시간 동안 교반하고, 1 N HCl을 이용하여 pH=6으로 조정하였으며, 휘발물을 진공 하에 제거하였고, 잔류수를 에탄올과 함께 공비 증류한 후, 18시간 동안 동결건조기에 둠으로써 제거하였다. 생성되는 회백색 고체를 추가 정제 없이 사용하였다.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소부틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00266
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(1.52 g, 4.01 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(16.6 ml) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소부틸)아미노)시클로부틸)프로판산(1.7 g, 2.7 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.54 ml, 8.82 mmol) 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(0.527 g, 3.21 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하고, 약 2 ml로 부분 농축시킨 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였고, 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키며, 여과하고, 농축시키며, 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, 목적 아미드(1.71 g)를 고체로서 생성시켰다.
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00267
아세트산(6 ml) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소부틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.71 g, 2.19 mmol)의 용액을 60℃에서 하룻밤동안 교반하였고, 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류하는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, DCM/MeOH 중의 7N NH3 94:6)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.9 g)을 발포체로서 생성시켰다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00268
트리플루오로아세트산(20 ml, 300 mmol)을 실온에서 물(2 ml, 100 mmol) 및 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.9 g, 1 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응을 하룻밤동안 교반하고, 트리에틸실란(0.38 ml, 2.4 mmol)을 첨가하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 MeOH(15 ml) 중에 취하고, 500 mg의 K2CO3 및 8 소적의 H2O을 첨가하고, 반응을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 필터 케이크를 10 ml의 MeOH으로 세정하였다. 여과액을 농축시키고, 생성되는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 90:1 0)에 의해 정제하여, 목적 생성물(0.274 g)을 회백색 발포체로서 생성시켰다. C33H47N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 574.6 [M+H]+; C33H45N7O2에 대한 MS (ESI-) m/z 572.4 [M-H]-; HPLC 순도 >86% (체류 시간, 2.918분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.078 (s, 1H), 7.497 (s, 1H), 7.416 - 7.396 (m, 1H), 7.305 - 7.284 (m, 1H), 7.216 - 7.200 (m, 1H), 6.621 - 6.612 (d, J=3.6 Hz, 1H), 4.368 - 4.334 (m, 1H), 3.930 - 3.894 (m, 1H), 2.934 - 2.918 (m, 1H), 2.866 - 2.797 (m, 2H), 2.652 - 2.583 (m, 1H), 2.444 - 2.361 (m, 2H), 2.287 - 2.199 (m, 2H), 2.166 - 2.119 (m, 3.5H(트랜스 이성질체의 메틴 포함)), 2.048 - 2.012 (m, 1H), 1.921 - 1.748 (m, 3.5H(시스 이성질체의 메틴 포함)), 1.622 - 1.494 (m, 2H), 1.380 (s, 9H), 1.269 - 1.252 (m, 1H), 0.932 - 0.879(m, 6H).
화합물 46: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 백색 분말(23.7 mg)로 동결건조시켰다. 1H NMR (400 MHZ, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (d. J=8.71 Hz, 1 H), 7.28 (dd, J=8.60, 1.76 Hz, 1 H), 7.19 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 6.60 (d. J=3.52 Hz, 1 H), 4.84 (m, 1 H), 4.28 (dd, J=7.26, 6.22 Hz, 1 H), 3.84 (t, J=5.70 Hz, 1 H), 3.16 (m, 1 H), 2.99 (m,1 H), 2.80 (t, J=7.15 Hz, 2 H), 2.73 (dd, J=13.68, 6.22 Hz, 1 H), 2.49 (dd, J=13.68, 7.67 Hz, 1 H), 2.38 (m, 1 H), 2.22 (m, 3 H), 2.00 (m, 4H), 1.91 (m, 3 H), 1.60 (m, 5 H), 1.36 (s, 9 H).
화합물 47: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-브로모-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 동결건조시켜, 백색 분말(21 mg)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s. 1 H), 7.63 (br. s., 1 H), 7.39 (m, 1 H), 7.30 (dd, J=8.50, 1.66Hz, 1 H), 7.20 (d. J=3.52 Hz, 1 H), 6.60 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.32 (dd, J=7.67, 6.01 Hz, 1 H). 3.88(m, 1 H), 2.82 (t, J=7.15 Hz, 2 H), 2.71 (m, 1 H), 2.52 (m, 1 H), 2.41 (m, 2H), 2.25 (m, 2 H), 2.18 (s, 3 H), 2.03 (m, 1 H), 1.92 (m, 3 H), 1.62 (m, 1 H), 1.51 (m, 2 H).
화합물 48: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리하였다. 동결건조 후에, (78 mg)의 무색 고체가 수득되었다.
화합물 49: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다.
Lux-3 (2×15 cm), 30% 에탄올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar, 65 mL/분, 220 nm. Inj vol.: 0.4 mL, 6.2 mg/mL 메탄올. 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.081 (s, 1H), 7.499 (s, 1H), 7.416 - 7.395 (m, 1H), 7.308 - 7.282 (m, 1H), 7.226 - 7.216 (m, 1H), 6.619 - 6.610 (m, 1H), 4.344 - 4.310 (m, 1H), 3.922 - 3.895 (m, 1H), 3.410 - 3.329 (m, 1H), 2.875 - 2.837 (m, 2H), 2.738 - 2.689 (m, 1H), 2.659 - 2.607 (m, 2H), 2.535 - 2.483 (m, 1H), 2.452 - 2.380 (m, 1H), 2.311 - 2.224 (m, 1H), 2.158 - 2.121 (m, 3H), 2.061 - 2.030 (m, 2H), 1.913 - 1.863 (m, 2H), 1.674 - 1.590 (m, 1H), 1.381 (s, 9H), 1.056 - 1.020 (t, J= 7.2 Hz, 3H).
화합물 50: (1R,2S,3R,5R)-3-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
에틸 3-(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,3-디히드록시시클로펜틸)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00269
아민 에틸 3-(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,3-디히드록시시클로펜틸)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.5 g, 2.5 mmol)을 아세토니트릴(66 mL) 중에 취하고, 요오드화이소프로필(2.5 mL, 25 mmol) 및 트리에틸아민(5.2 mL, 37 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 12 시간 동안 80℃로 가열하였다. 또 다른 15 당량의 TEA 및 또 다른 15 당량의 iPrI를 첨가하였고, 반응을 추가 8시간 동안 지속시켰다. 또 다른 15 당량의 각각의 iPrI 및 TEA를 첨가하였고, 가열을 하룻밤동안 지속하였다. 반응을 농축시키고, 포화 Na2CO3(20 ml) 및 DCM(20 ml)을 첨가하였다. 층을 분리하였고, 수성층을 3회 더 추출하였고, 조합한 유기물을 건조시키고, 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, DCM/MeOH 중의 7N NH3 97:3)에 의해 정제하였다.
수득된 잔류물을 30 ml DCM에 용해하고, 20 ml의 포화 NaHCO3 및 10 ml의 1 N NaOH로 세정하였다. 수성물을 DCM으로 3회 추출하였고, 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키고, 용매를 제거하여 목적 생성물(1.3 g)을 발포체/고체로서 생성시켰다.
(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,3-디히드록시시클로펜틸)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산
Figure pct00270
수산화리튬, 모노수화물(0.838 g, 20.0 mmol)을 테트라히드로푸란(30 ml, 300 mmol) 및 메탄올(6.5 ml, 160 mmol) 중의 에틸 3-(3 (3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,3-디히드록시시클로펜틸)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산(1.3 g, 2.0 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 1 N HCl를 이용하여 pH = 6으로 산성화하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류수를 에탄올과 함께 공비 증류함으로써 제거한 후, 동결건조시켰다. 생성되는 고체를 추가 정제 없이 사용하였다.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,3-디히드록시시클로펜틸)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00271
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(1.19 g, 3.13 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(12.9 ml) 중의 3-{3-[{[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{6-[(2,4-디메톡시벤질)아미노]-9H-퓨린-9-일}-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}{이소프로필)아미노]시클로부틸}프로판산(1.30 g, 2.09 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.20 ml, 6.89 mmol) 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(0.411 g, 2.50 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 교반하고, NaHCO3(포화)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc로 추출하였고(3×), 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키고 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM→DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, 목적 아미드(1.4 g)을 고체로서 생성시켰다.
9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-9H-퓨린-6-아민
Figure pct00272
아세트산(5 ml, 90 mmol) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((1R,2R,3S,4R)-4-(6-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-9H-퓨린-9-일)-2,3-디히드록시시클로펜틸)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.4 g, 1.8 mmol)를 60℃에서 하룻밤동안 교반하였다. 반응을 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피(DCM → DCM/MeOH 중의 7N NH3 94:6)에 의해 정제하여, 목적 화합물(0.91 g)을 발포체로서 생성시켰다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00273
트리플루오로아세트산(10 ml, 100 mmol)을 실온에서 물(1 ml, 60 mmol) 및 9-((3aS,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-9H-퓨린-6-아민(0.91 g,1.2 mmol)의의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였다. 이어서, 반응을 35℃로 가열하고, 트리에틸실란(0.39 ml, 2.4 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 추가 2시간 동안 35℃에서 교반하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 MeOH(15 ml) 중에 취하였다. 500 mg의 K2CO3 및 8 소적의 H2O를 첨가하였고, 반응을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 필터 케이크를 10 ml의 MeOH로 세정하였다. 여과액을 농축시키고, 생성되는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 90:1 0)에 의해 정제하여, 수일간의 동결건조 후에 목적 생성물(0.142 g)을 무색 고체로서 생성시켰다.
화합물 51: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다 (25 mg). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.38 (d, J=7.88 Hz, 1 H), 7.27 (dd, J=8.60, 1.55 Hz, 1 H), 7.19 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 6.60 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 4.85 (m, 1 H), 4.29 (m, 1 H), 3.85 (t, J=5.60 Hz, 1H), 3.41 (m, 1 H), 3.17 (m, 1 H), 2.83 (t, J=7.36 Hz, 2 H), 2.74 (dd, J=13.68, 6.63 Hz, 1 H), 2.51 (dd, J=13.79, 7.57 Hz, 1 H), 2.38 (m, 1 H), 2.18 (m, 3 H), 2.09 (m, 1 H), 2.02 (m, 5H), 1 83 (m, 2 H), 1.60 (m, 3 H), 1.36 (s, 9 H).
화합물 52: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5,6-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 크림색 고체(64 mg)로 동결건조시켰다.1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.63 (s, 2 H), 7.20 (d. J=3.52 Hz, 1 H), 6.59 (d, J=3.73Hz, 1 H), 4.32 (dd. J=7.88, 6.01Hz. 1 H), 3.88 (dd, J=5.60, 4.77 Hz, 1 H), 2.82 (t, J=7.26 Hz, 2 H), 2.69 (m, 1 H), 2.48 (m, 1 H), 2.38 (m, 2 H), 2.24 (m, 3 H), 2.15 (s, 3 H),1.91 (m, 3 H), 1.61 (m, 1 H), 1.50 (m, 2 H).
화합물 53: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체이성질체를 SFC에 의해 분리하였다. 동결건조 후, 무색 고체(85 mg)가 회수되었다.
화합물 54: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로프로필메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 동결건조시켜, 백색 분말(53 mg)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.39 (d, J=8.50 Hz, 1 H), 7.28 (dd, J=8.60, 1.76 Hz, 1 H), 7.21 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 6.60 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.32 (dd, J=7.67, 5.80 Hz,1 H), 3.91 (m, 1 H), 3.44 (m, 1 H), 2.84 (t, J=7.57 Hz, 2 H), 2.78 (dd, J=13.27, 7.05 Hz, 1 H), 2.58 (dd, J=13.06, 7.67 Hz, 1 H), 2.40 (m, 3 H), 2.11 (t, J=6.22 Hz, 3 H), 2.02 (m, 2 H). 1.87 (m, 2 H), 1.62 (m, 1H), 1.37 (s, 9 H), 0.87 (m, 1 H), 0.49 (m, 2 H), 0.12 (m, 2 H).
화합물 55: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-브로모-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리하였다. 1H NMR (400 MHZ, MeOD) δH ppm 8.05 (s, 1 H), 7.63 (s. 1 H), 7.39 (m, 1 H), 7.30 (dd, J=8.50, 1.66 Hz, 1 H), 7.20 (d. J=3.52 Hz. 1 H), 6.59 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 4.32 (dd, J=7.77, 5.91 Hz, 1 H), 3.88 (dd, J=5.70, 4.66 Hz, 1 H), 2.99 (m. 1 H), 2.84 (t, J=7.57 Hz, 2 H). 2.48 (m, 1 H), 2.41 (dd, J=7.98, 4.87 Hz, 1 H), 2.34 (m, 1 H), 2.24 (m, 1 H), 2.15 (s, 3 H). 2.10 (m. 3 H), 2.01 (m, 2 H), 1.86 (t. J=8.19 Hz, 2 H), 1.61 (m, 1 H).
화합물 56: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((이소프로필(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
N-(2-아미노-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00274
N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(1.19 g, 3.14 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(13.0 mL, 167 mmol) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산(1.3 g, 2.1 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(1.20 mL, 6.90 mmol) 및 4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민(0.482 g, 2.51 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반하고, 약 2 ml로 부분 농축시킨 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하였고(3×), 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키며, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, 목적 아미드(1.4 g)를 고체로서 제공하였다.
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00275
N-(2-아미노-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.4 g, 1.8 mmol)를 60℃에서 하룻밤동안 AcOH 중에 가열하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜, 미정제 생성물을 수득하였다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((이소프로필(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00276
트리플루오로아세트산(10 mL, 100 mmol)을 실온에서 물(1 mL, 60 mmol) 및 N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.91 g, 1.2 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 하룻밤동안 교반한 후, 트리에틸실란(0.37 mL, 2.3 mmol)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 MeOH(15 ml) 중에 취하였다. 500 mg의 K2CO3 및 8 소적의 H2O를 첨가하였고, 반응을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 필터 케이크를 10 ml의 MeOH로 세정하여다. 여과액을 농축시키고, 생성되는 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(DCM/MeOH 중의 7N NH3 90:10)에 의해 정제하여, 목적 생성물(0.232 g)을 회백색 발포체로서 생성시켰다. C29H36F3N7O3에 대한 MS (ESI+) m/z 588.2 [M+H]+; C29H36F3N7O3에 대한 MS (ESI-) m/z 586.2 [M-H]-; HPLC 순도 >90% (체류 시간, 2.570분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.082 & 8.079(s, 1H, 시스 및 트랜스 이성질체로 인한 중첩 피크), 7.554 - 7.524 (m, 1H), 7.414 (s, 1H), 7.225 - 7.209 (m, 1H), 7.155 - 7.127 (m, 1H), 6.618 - 6.609 (m, 1H), 4.363 - 4.323 (m, 1H), 3.976 - 3.932 (m, 1H), 3.606 - 3.524 (m, 0.5H(트랜스 이성질체로부터의 메틴)), 3.156 - 3.110 (m, 0.5H(시스 이성질체로부터의 메틴), 3.089 - 3.006 (m, 1H), 2.731 - 2.679(m, 1H), 2.544 - 2.360 (m, 2H), 2.256 - 2.239 (m, 3H), 2.093 - 2.061 (m, 2H), 1.987 - 1.861 (m, 3H), 1.648 - 1.568 (m, 2H), 1.072 - 1.006 (m, 6H).
화합물 57: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸((1s,3R)-3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 동결건조시켜, 고체(78 mg)를 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.076 (s, 1H), 7.548 - 7.527 (m, 1H), 7.414 (s, 1H), 7.227 - 7.218 (m, 1H), 7.148 - 7.123 (m, 1H), 6.616 - 6.607 (m, 1H), 4.361 - 4.327 (m, 1H), 3.926 - 3.899 (m, 1H), 3.037 - 3.000 (m, 1H), 2.907 - 2.870 (m, 2H), 2.538 - 2.283 (m, 4H), 2.178 - 2.013 (m, 8H), 1.913 - 1.872 (m, 2H), 1.680 - 1.599 (m, 1H).
화합물 58: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5,6-디클로로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체는 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/H2O 중에 취하고, 동결건조시켜, 황갈색의 분말(73 mg)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.64 (s, 2 H), 7.21 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 6.59 (d, J=3.52Hz, 1 H), 4.32 (dd, J=7.77, 6.12 Hz, 1 H), 3.89 (m, 1 H), 3.01 (m, 1 H), 2.86 (t, J=7.67 Hz, 2 H), 2.51 (m, 1 H), 2.40 (m, 2 H), 2.27 (m, 1 H), 2.18 (s, 3 H), 2.11 (m, 3 H), 2.02 (q, J=6.43 Hz. 2 H),1.88 (t, J=8.19 Hz, 2 H), 1.63 (m, 1 H).
화합물 59: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
단계 1: 에틸 3-((1R,3s)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
Figure pct00277
아민 에틸 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-디메톡시벤질)아미노]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노)시클로부틸]프로판산염(1.8 g, 3.0 mmol)을 메탄올(20 mL, 600 mmol) 중에 취하고, 시안화수소화붕소화나트륨(0.37 g, 5.9 mmol)를 첨가하였다. 메탄올 중의 AcOH의 10% 용액을 이용하여 pH를 약 6으로 조정한 후, 1회 분량의 시클로부탄카르복스알데히드(0.32 g, 3.8 mmol)을 첨가하였다. 반응을 5시간 동안 진행시키고, 이 때 HPLC는 반응이 중지되었음을 가리켰다. 추가 1.3 당량의 시클로부탄카르복스알데히드를 첨가하였고, 반응을 하룻밤동안 지속시켰다. NaHCO3(포화)을 반응 혼합물에 첨가한 후, 이를 DCM으로 3회 추출하였고, 조합된 유기물을 MgSO4로 건조시키며, 황색 수지로 농축시켰다. 시스 및 트랜스 이성질체를 실리카 상에 분리하였다. FC(DCM/MeOH 중의 7N NH3 96:4)에 의한 정제로써, 생성물의 2개의 분리된 회분을 생성시켰고, 각기 하나의 각 이성질체를 약 90%로 풍부하게 가지고 있었다. 상부 이성질체: 0.38 g(5:1 혼합물, 시스) 하부 이성질체: 0.31 g(7:1 혼합물, 트랜스). C35H49N5O6에 대한 MS (ESI+) m/z 676.7 [M+H]+; HPLC 순도 > 69% (체류 시간, 3.791).
단계 2: N-(2-아미노-5-(tert-부틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00278
하부 이성질체(트랜스): 수산화리튬 모노수화물(0.192 g, 4.59 mmol)을 테트라히드로푸란(6 mL, 70 mmol) 및 메탄올(1.5 mL, 37 mmol) 중의 에틸 3-((1R,3s)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(0.31 g, 0.46 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 다음 날 아침에 출발 물질이 소모되어 산으로 변환되었다. 반응을 1N HCl를 이용하여 pH = 6으로 산성화하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 잔류하는 물을 에탄올과 함께 공비 증류한 후, 24시간 동안 동결건조기에 두어 제거하였다. 생성되는 회백색 고체를 추가 정제 없이 사용하였다. HPLC 순도 > 94% (체류 시간, 3.344).
N,N,N',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(0.273 g, 0.718 mmol)을 N,N-디메틸포름아미드(2.96 mL, 38.3 mmol) 중의 3-{트랜스-3-[(시클로부틸메틸){[(3aR,4R,6R,6aS)-6-{4-[(2,4-디메톡시벤질)아미노]-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일}-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노]시클로부틸}프로판산(0.31 g, 0.48 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(0.275 mL, 1.58 mmol) 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(0.0943 g, 0.574 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응을 실온에서 하룻밤동안 교반하였고, 다음 날 아침에 출발 물질이 소모되었고, 반응을 약 2 mL로 부분 농축시킨 후, NaHCO3(포화)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc으로 3회 추출하였고, 조합한 유기물을 MgSO4로 건조시키며, 농축시켰다. 생성되는 잔류물을 FC(DCM/MeOH 중의 7N NH3 95:5)에 의해 정제하여, N-(2-아미노-5-(tert-부틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(0.29 g; 76%)를 자주색-갈색 비정형 고체로서 생성시켰다. HPLC 순도 >20% (체류 시간, 3.650분)
단계 3: 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00279
아세트산(1.0 mL, 20 mmol) 중의 N-(2-아미노-5-(tert-부틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((시클로부틸메틸)(((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(0.3 g, 0.4 mmol)의 용액을 65℃에서 하룻밤동안 교반하였고, 그 다음 날 아침 출발 물질이 소모되었고, 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 FC(DCM/MeOH 중의 7N NH3 93:7)에 의해 정제하여, 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 회백색 고체로서 생성시켰다. HPLC 순도 >73% (체류 시간, 3.709분).
단계 4: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00280
트리플루오로아세트산(5 mL, 70 mmol)을 실온에서 물(0.5 mL, 30 mmol) 및 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(0.23 g, 0.30 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응을 하룻밤동안 진행시켰고, 이 때 밝은 분홍색의 현탁액을 트리에틸실란(0.095 mL, 0.59 mmol)으로 켄칭하였다. 휘발물을 진공 제거하였고, 생성되는 잔류물을 메탄올(15 ml) 중에 취하였다. 500 mg의 K2CO3 및 8 소적의 H2O를 첨가하였고, 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 필터 케이크를 10 mL의 메탄올로 세정하였다. 여과액을 농축시키고, 생성되는 잔류물을 FC(DCM/MeOH 중의 7N NH3 90:10)에 의해 정제하여, (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(시클로부틸메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올(0.018 g, 10%)을 무색 고체로서 생성시켰다. C34H47N7O2에 대한 MS (ESI+) m/z 586.4 [M+H]+; HPLC 순도 >93% (체류 시간, 2.070분) 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δH 8.083 (s, 1H), 7.501 (s, 1H), 7.421 - 7.400 (m, 1H), 7.315 - 7.290 (m, 1H), 7.218 - 7.209 (m, 1H), 6.621 - 6.612 (m, 1H), 4.350 - 4.317 (m, 1H), 3.930 - 3.903 (m, 1H), 3.403 - 3.367 (m, 1H), 2.880 - 2.843 (m, 2H), 2.722 - 2.360 (m, 6H), 2.323 - 2.241 (m, 2H), 2.173 - 1.606 (m, 13H), 1.387 (s, 9H).
화합물 60: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((이소프로필((1r,3S)-3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리하였다. 동결건조 후, 무색 고체(62 mg)가 회수되었다.
화합물 61: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((이소프로필((1s,3R)-3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
부분입체 이성질체를 SFC에 의해 분리하였다. 물질을 MeOH/ H2O 중에 취하고, 동결건조시켜, 회백색 분말(89 mg)을 생성시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.52 (d, J=8.71 Hz, 1 H), 7.40 (s, 1 H), 7.19 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 7.12 (m, 1 H), 6.59 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 4.88 (m, 1 H), 4.33 (m, 1 H), 3.94 (t, J=5.39 Hz, 1 H), 3.52 (m, 1 H), 3.01 (m, 1 H), 2.87 (t, J=7.15 Hz, 2 H), 2.68 (dd, J=13.48, 7.88 Hz, 1 H), 2.47 (dd, J=13.27, 7.46 Hz, 1 H), 2.37 (m, 1 H), 2.21 (m, 3 H), 2.04 (m, 3 H), 1.84 (m, 2 H), 1.58 (m, 1 H), 1.02 (d, J=6.63 Hz, 3 H), 0.98 (d, J=6.43 Hz, 3 H).
화합물 62: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
N-(4-(옥세탄-3-일)페닐)아세트아미드
Figure pct00281
(4-아세트아미도페닐)보론산{670 mg, 3. 7 mmol), 요오드화니켈(II) (35 mg, 0.11 mmol), 트랜스-2-아미노시클로헥사놀 (17 mg, 0.11 mmol), 및 나트륨 헥사메틸디실라잔(690 mg, 3.7 mmol)을 초음파 반응 바이얼 내로 칭량 주입하였다. 상부 위에 중격(septum)을 두고, 질소를 퍼징하며, 이소프로필 알코올(5.7 ml, 75 mmol)을 첨가하였다. 바이얼을 10분간 질소로 퍼징하였고, 3-요오도옥세탄(344 mg, 1.87 mmol)을 0.75 ml 이소프로필 알코올 내에 첨가하였다. 중격을 초음파 바이얼 캡으로 겨체하고, 혼합물을 초음파 반응기(초음파 조건: CEM 디스커버리 익스플로러(CEM Discovery Explorer) 초음파 반응기; 상승시간: 10분; 30분간 80℃; 전력: 300 W)에서 가열하였다. 미정제 반응 혼합물을 8 ml의 EtOH로 희석하였고, 현탁액을 솔카 플록
Figure pct00282
의 패드를 통해 여과하였다. 패드를 35 ml의 MeOH로 세정하고, 여과액을 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, 40-60% EtOAc/CH2Cl2로 용리함}에 의해 정제하여, 목적 생성물을 오일(200 mg)로서 제공하였다.
N-(2-니트로-4-(옥세탄-3-일)페닐)아세트아미드
Figure pct00283
황산(9.4 ml, 180 mmol)을 70% 질산(7:3, 질산:물, 11 ml, 170 mmol)에 주의하애 첨가하였고, 이를 약 5-10분에 걸쳐 0℃에서 냉각시켰다. 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반한 후, 빙조의 제거에 의해 실온으로 가온하였다. 산 용액을 분별깔대기로 옮기고, 염화메틸렌(20 mL, 300 mmol)을 첨가하였다. 깔대기를 5분 동안 진탕하고, 상이 분리되도록 하였다.
유기상 (상부상)을 단리하였고, 공정을 부가적 20 ml CH2Cl2를 이용하여 반복하였다. 유기 추출물을 조합하였고, 유기상은 유기상 약 5 g(-80 mmol)의 무수 HNO3을 함유하는 것으로 가정된다. 50 배 과량을 이용할 때, 이는 약 25 ml의 용액을 필요로 하였다. 질산 용액을 빙조 내에 냉각시켰다. N-(4-옥세탄-3-일페닐)아세트아미드(21 0 mg, 0.70 mmol)를 25 ml의 냉각 HNO3/CH2Cl2 용액으로 처리하고, 약 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 45 ml의 10% NH4OH 용액에 주의하여 주입하고, 주의하여 진탕하였다. 상을 분리하였고, 수성상을 20 ml CH2Cl2로 세정하였다. 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, 25-35% EtOAc/CH2Cl2에 의해 용리)에 의해 정제하여, 목적 생성물을 고체(170 mg)로서 생성시켰다.
2-니트로-4-(옥세탄-3-일)아닐린
Figure pct00284
수성 히드라진(8 ml, 160 mmol) 중의 N-(2-니트로-4-옥세탄-3-일페닐)아세트아미드(125 mg, 0.529 mmo)의 현탁액을 2시간 동안 70℃에서 가열하였고, 반응 혼합물을 45℃로 냉각시키며, 히드라진을 진공 하에 제거하여, 고체를 생성시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, 20% EtOAc/CH2Cl2에 의해 용리)에 의해 정제하여, 목적 생성물(71 mg)을 생성시켰다.
4-(옥세탄-3-일)벤젠-1,2-디아민
Figure pct00285
에탄올(6.1 ml) 중의 2-니트로-4-옥세탄-3-일아닐린(91 mg, 0.47 mmol)의 용액을 에탄올 중의 10% 팔라듐/탄소 (10 mg, 0.009 mmol) 슬러리로 처리하였다. 반응 플라스크를 진공처리하고, 수소 기체로 3회 충전하였으며, 반응 혼합물을 2시간 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 솔카 플록
Figure pct00286
의 패드를 통해 여과하였고, 패드를 25 ml의 MeOH로 세정하였다. 여과액을 농축시켜, 오일을 생성시켰고, 이를 고진공 하에 두어, 목적 화합물(72 mg)을 제공하였다. 물질을 다음 단계에서와 같이 사용하였다. 1H NMR (400 MHZ, CDC13) δH ppm 6.81 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 6.70 (m, 2 H), 5.02 (dd, J=8.34, 5.81 Hz, 2 H), 4.74 (m, 2 H), 4.09 (m, 1 H),3.45 (br. s., 2 H), 3.37 (br. s., 2 H).
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure pct00287
N,N-디메틸포름아미드(4.3 ml, 56 mmol) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(250 mg. 0.42 mmol) 및 4-옥세탄-3-일벤젠-1,2-디아민(72 mg, 0.44 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.24 ml, 1.4 mmol)로 적가 처리한 후, 1회 분량의 N,N,N',N'-테트라메틸-0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염(240 mg, 0.632 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 6 시간 동안 실온에서 교반하였고, 이 때 반응 혼합물을 고진공 하에 농축하였다. 잔류물을 30 ml의 EtOAc(약간의 MeOH를 첨가하여, 생성물의 가용화를 도움)와 30 ml의 1/1 H2O/포화 NaHCO3 간에 분획화하였다. 성상을 30 mL EtOAc로 추출하고, 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 유리/견고한 발포체를 제공하였다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 6-7% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하였다. 2 세트의 생성물, 즉 덜 극성인 쌍과 더 극성인 쌍이 발견되었고, 이들은 2개의 보조 구조이성질체에 상응한다. 각 구조이성질체는 다음 단계에서 분리하여 가공된다.
아미드(130 mg)를 5 ml의 빙초산 중에 취하고, 2.25시간 동안 65℃에서 가열하였고, 냉각시키며, 하룻밤동안 플릿지에 두었다. 따뜻한 수조를 이용하여 고진공 하에서 아세트산을 제거하였다. 2개 회분의 미정제 생성물을 30 ml CH2Cl2 중에 취하였고, 유기상을 10 ml 부분의 포화 NaHCO3 및 2% Na2CO3 용액으로 세정하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(SiO2, CH3OH/CH2Cl2 중의 5.5-6.5% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 목적 화합물(140 mg)을 제공하였다.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00288
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aS,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(115 mg, 0.159 mmol)을 빙조에서 0℃에서 예비 냉각된 트리플루오로아세트산(4.00 ml, 51.9 mmol) 및 물(0.40 ml, 22 mmol)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 2시간 동안 0℃에서 교반하였고, 반응 혼합물을 실온으로 가온하였다. 1시간 후에, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 6 ml의 MeOH 중에 취하고, 농축시키고, 공정을 2회 반복하였다. 생성되는 잔류물을 고진공 상에 두었다. 미정제 잔류물을 2 ml의 MeOH로 희석하고, 140 mg K2CO3 및 10 소적의 H2O로 처리하고, pH 페이퍼에 의해 용액이 염기성이 될때까지 실온에서 교반시켰다. 용액을 미세 프릿을 통해 여과하였고, 고체를 MeOH로 세정하였다. 여과액을 고체로 농축시켰고, 이를 하룻밤동안 고진공 상에 두었다. 미정제 물질을 분취 TLC(2개의 20 cm×20 cm×1.0 mm 분취 TLC 플레이트 상, CH3OH/CH2Cl2 중의 14% 7N NH3로 용리)에 의해 정제하여, 생성물을 무색 유리 (37 mg)로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.06 (s, 1 H), 7.52 (br. s., 1 H), 7.48 (d, J=8.29 Hz, 1 H), 7.28 (m, 1 H), 7.20 (t, J=3.42 Hz, 1 H), 6.60 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 5.12 (m, 2 H), 4.80 (m, 2 H), 4.38 (m, 1 H), 4.32 (m, 1 H), 3.89 (q, J=5.60 Hz, 1 H), 3.04 (m, 1 H), 2.85 (m, 2 H), 2.70 (m,1 H), 2.52 (m, 1 H), 2.41 (m. 2 H), 2.27 (dd, J=10.99, 6.63 Hz, 2 H), 2.19 (s, 3 H), 2.17 (s, 3 H), 2.14 (m, 1 H), 2.03 (d, J=7.88 Hz, 1 H), 1.91 (m, 3 H), 1.62 (m, 1 H), 1.51 (m, 1 H).
화합물 63: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((메틸((1r,3S)-3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
부분입체 이성질체는 SFC에 의해 분리시켰다. 물질을 MeOH/ H2O 중에 취하고, 황갈색의 분말(58 mg)로 동결건조시켰다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.26 (s, 1 H), 8.19 (s, 1 H), 7.51 (s, 1 H), 7.47 (d, J=8.29 Hz, 1 H), 7.26 (dd, J=8.29, 1.45 Hz, 1 H), 5.97 (d, J=3.94 Hz, 1 H), 5.11 (dd, J=8.29, 6.01 Hz, 2 H), 4.79(t,J=6.32 Hz, 2 H), 4.69 (m, 1 H), 4.36 (m, 1 H), 4.22 (t, J=5.60 Hz, 1 H), 4.15 (m, 1 H), 2.79(t, J=7.15 Hz, 2 H), 2.72 (m, 1 H), 2.66 (m, 2 H), 2.21 (m, 2 H), 2.14 (s, 3 H), 1.88 (m, 3 H), 1.45 (m, 2H).
화합물 64: (2 R ,3 R ,4 S ,5 R )-2-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
단계 1: 3-(3-((((3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4- d ][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산
Figure pct00289
메탄올(14 mL) 중의 에틸 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(0.39 g, 0.82 mmol)의 용액을 수산화나트륨(1.56 mL, 1.56 mmol)의 1 M 수용액으로 처리하였고, 반응 혼합물을 3.5시간 동안 교반하면서 50℃에서 가열하였고; HPLC/LC MS는 목적 생성물로의 전환을 가리켰다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켜, 수성 잔류물을 물(10 mL)로 희석하고, CH2Cl2(3×5 mL)로 추출하였다. 수성층을 염화수소(1.44 mL, 1.44 mmol)의 1 M 수용액으로 처리하여, pH 7로 조정하였다. 투명한 무색 용액을 동결건조하여, 미정제 표제 화합물(0.487 g, 110%)을 약간 회백색인 고체로서 제공하였고, 수율은 1.56 mmol NaCl(91 mg)이었다: C21H30N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 447.1 (M+H)+; C21H30N6O5에 대한 MS (ESI-) m/z 445.2 (M-H)-; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 1.949분).
단계 2: N -(2-아미노-5-(옥세탄-3-일)페닐)-3-(3-((((3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4- d ][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
Figure pct00290
염화메틸렌 (8.0 mL) 중의 상기 미정제 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산 및 4-(옥세탄-3-일)벤젠-1,2-디아민(0.135 g, 0.822 mmol)의 현탁액을 N,N-디이소프로필에틸아민(0.716 mL, 4.11 mmol)으로 처리하고, -5℃ (빙/염수)로 냉각시켰다. N,N,N',N'-테트라메틸-O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로인산염[HATU](0.469 g, 1.23 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 15℃로 가온하면서 5.25시간 동안 교반하였고; HPLC/LC MS는 완전 전환을 가리켰다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, CH2Cl2(15 mL) 및 물(7.5 mL)로 희석하였다. 분리된 수성층을 CH2Cl2(2×10 mL)로 추출하였다. 조합된 유기물을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 갈색-자주색 반투명 오일/발포체를 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(2×8 cm 실리카; 0-5% 7 N 메탄올성 NH3/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(0.45 g, 82%)의 양 아미드 구조이성질체를 반투명 분홍색 발포체로서 제공하였다: C30H40N8O5에 대한 MS (ESI+) m/z 593.3 (M+H)+; C30H40N8O5에 대한 MS (ESI-) m/z 591.3 (M-H)- 및 637.4 (M+HCO2)-; HPLC 순도 90% (체류 시간, 2.097분).
단계 3: 9-((3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4- d ][1,3]디옥솔-4-일)-9 H -퓨린-6-아민
Figure pct00291
N-(2-아미노-5-(옥세탄-3-일)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(0.446 g, 0.752 mmol)을 아세트산(7.7 mL, 140 mmol) 중에 취하고, 3.5시간 동안 65℃에서 가열하였고; HPLC/LC MS는 완전 전환을 가리켰다. 3.75시간째에, 아세트산을 최소의 가온과 함께 증류에 의해 제거하여, 오렌지색 오일을 제공하였고, 이를 CH2Cl2(45 mL) 중에 취하고, 포화 수성 NaHCO3(2×30 mL)로 세정하였다. 수성층을 포화 시까지 NaCl로 처리하고, CH2Cl2(2×20 mL)로 처리하였다. 조합된 유기층을 건조시키고(Na2SO4), 진공 하에 농축시켜, 밝은 오렌지색 오일을 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피 2×8 cm 실리카; 0-5% 7 N 메탄올성 NH3/CH2Cl2)에에 의해 정제하여, 표제 화합물(0.28 g, 65%)을 밝은 오렌지색 발포체로서 제공하였다: C30H38N8O4에 대한 MS (ESI+) m/z 575.3 (M+H)+; C30H38N8O4에 대한 MS (ESI-) m/z 573.3 (M-H)-; HPLC 순도 >95% (체류 시간 2.142분).
단계 4: (2 R ,3 R ,4 S ,5 R )-2-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-5-((메틸(3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00292
9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(0.28 g, 0.42 mmol)을 포함하는 냉각된(빙조) 플라스크에 물(0.75 mL, 42 mmol) 중의 트리플루오로아세트산(6.4 mL, 84 mmol)의 예비 냉각된(빙조) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 5.75시간 동안 교반하였고; HPLC/LC MS는 출발 물질의 거의 완전한 소모를 가리켰다. 6시간째에, 플라스크를 빙조로부터제거하고, 휘발물을 실온에서 증류에 의해 제거하였다. 잔류물을 MeOH(15 mL)로 희석하고, 탄산칼륨(0.32 g, 2.3 mmol) 및 물(1 mL)로 처리하며, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다; pH 2. 부가적 탄산칼륨(0.20 g, 1.4 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 20분 동안 교반하였다; pH 8-9. 용액을 미세 프릿을 통해 여과하고; MeOH로 헹구고, 여과액을 진공 하에 농축시켜, 황갈색의 반고체를 제공하였다. 칼럼 크로마토그래피(3×8 cm 실리카; 10-20% 7 N 메탄올성 NH3/CH2Cl2)에 의해 정제하여, 표제 화합물(123 mg, 55%)을 거의 무색인 유리로서 제공하였다: C27H34N8O4에 대한 MS (ESI+) m/z 535.3 (M+H)+; C27H34N8O4에 대한 MS (ESI-) m/z 533.3 (M-H)-; HPLC 순도 >95% (체류 시간 1.765분); 1H NMR (400 MHz, d4-MeOH) 혼합물 of 시스/트랜스 이성질체 δH 8.29-8.25 (m, 1H), 8.21-8.17 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.26 (dd, J = 1.6, 8.3 Hz, 1H), 6.00-5.96 (m, 1H), 5.11 (dd, J = 5.8, 8.3 Hz, 2H), 4.81-4.76 (m, 2H), 4.73-4.68 (m, 1H), 4.40-4.31 (m, 1H), 4.27-4.13 (일련의 m, 2H), 3.13-3.03 (m, 0.4H), 2.86-2.66 (일련의 m, 4.6H), 2.30-1.80 (일련의 m, 8.6 H), 1.55-1.40 (m, 1.4H).
화합물 65: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((메틸((1s,3R)-3-(2-(5-(옥세탄-3-일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
부분입체이성질체를 SFC에 의해 분리하였다. 물질을 MeOH/ H2O 중에 취하고, 백색 분말(35 mg)로 동결건조하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δH ppm 8.28 (s, 1 H), 8.19 (s, 1 H), 7.51 (s, 1 H), 7.48 (d, J=8.29 Hz, 1 H), 7.27 (dd, J=8.29, 1.45 Hz, 1 H), 5.98 (d, J=4.15 Hz, 1 H), 5.12 (dd, J=8.40, 5.91 Hz, 2 H), 4.79(t,J=6.32 Hz, 2 H), 4.69 (dd, J=5.39, 4.15 Hz, 1 H), 4.36 (m, 1 H), 4.23 (t, J=5.60 Hz, 1 H), 4.17 (m,1 H), 3.05 (m. 1 H), 2.83 (t, J=7.46 Hz, 2 H), 2.67 (m. 2 H), 2.16 (s, 3 H), 2.08 (m, 2 H), 1.98 (m, 3 H), 1.83 (m, 2 H).
화합물 67: (2 R ,3 R ,4 S ,5 R )-2-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-5-[({3-[2-(5-시클로부틸-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일)에틸]시클로부틸}(프로판-2-일)아미노)메틸]옥솔란-3,4-디올
단계 1: 벤질 3-[3-({[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2 H -푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노)시클로부틸]프로판산염
Figure pct00293
DCE:iPrOH(4:1, 50 ml) 중의 9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]-9H-퓨린-6-아민(1.45 g, 4.736 mmol), 벤질 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(1.21 g, 5.209 mmol) 및 아세트산(246.45 μl, 4.31 mmol)의 현탁액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 추가 분취량의 DCE(40 ml) 및 iPrOH(5 ml)을 반응 혼합물에 첨가하였고, 1시간 동안 지속하였다. 이어서, STAB(1.28 g, 6.03 mmol)를 첨가하였고, 반응 혼합물을 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 1N Na2CO3(10 ml)로 켄칭하였고, 생성물을 DCM(2×30 ml)로 추출하였다. 이를 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발 건조시켰다. MeOH 중의 7N NH3:DCM(1:99 - 3:97)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물을 무색 오일(1.51 g(58%))로서 수득하였다; C27H34N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 523.65 [M+H]+; HPLC 순도 97% (체류 시간, 1.43분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 8.35 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 33.8 Hz, 1H), 7.40 - 7.29 (m, 5H), 6.08 - 5.94 (m, 1H), 5.59 - 5.42 (m, 3H), 5.10 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 5.03 - 4.96 (m, 1H), 4.33 (dq, J = 7.3, 3.9 Hz, 1H), 3.12 (ddd, J = 23.0, 14.6, 7.5 Hz, 1H), 2.85 - 2.77 (m, 1H), 2.74 (dd, J = 12.5, 6.6 Hz, 1H), 2.39 - 2.07 (m, 4H), 1.90 - 1.64 (m, 5H), 1.61 (s, 4H), 1.38 (s, 3H), 1.28 - 1.06 (m, 1H).
단계 2. 벤질 3-[3-({[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2 H -푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(프로판-2-일)아미노)시클로부틸]프로판산염
Figure pct00294
K2CO3(528.92 mg, 3.83 mmol)을 MeCN 벤질 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노)시클로부틸]프로판산염(1.00 g, 1.91 mmol) 및 2-요오도프로판(0.57 ml, 5.74 mmol)의 용액을 첨가하고, 18시간 동안 밀봉관에서 95℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(20 ml)로 희석하고, 여과하며, 증발 건조시켰다. MeOH 중의 7N NH3:DCM(1:99 - 5:95)로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 생성물을 무색 오일(700 mg(65%))로서 수득하였다; C30H40N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 565.70 [M+H]+; HPLC 순도 96% (체류 시간, 1.48분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 8.35 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.44 - 7.29 (m, 5H), 6.03 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 5.62 - 5.42 (m, 3H), 5.10 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 5.06 - 4.92 (m, 1H), 4.26 (dt, J = 9.9, 3.4 Hz, 1H), 3.46 - 2.84 (m, 2H), 2.88 - 2.61 (m, 1H), 2.51 (ddd, J = 14.0, 9.1, 7.5 Hz, 1H), 2.33 - 2.15 (m, 2H), 2.50 - 2.13 (m, 2H), 2.16 - 1.74 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.43 - 1.35 (m, 4H), 0.96 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.79 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
단계 3. 3-[3-({[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2 H -푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(프로판-2-일)아미노)시클로부틸]프로판산
Figure pct00295
10% Pd-C (70 mg)을 EtOH(20 ml) 중의 벤질 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(프로판-2-일)아미노)시클로부틸]프로판산염(790 mg, 1.40 mmol)의 용액에 첨가하고 실온에서 18시간 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 추가 분취량의 10% Pd-C (70 mg)을 첨가하였고, 반응을 4시간 동안 수소 하에 교반 하에 지속시켰다. 이를 여과하였고, 진공 하에 증발시킨 후, DCM(2×20 ml)로 추출하여, 680 mg(정량)의 백색 발포체성 고체를 제공하였다; C23H34N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 475.20 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 1.11분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 8.29 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 6.86 (s, 2H), 6.05 (dd, J = 4.3, 1.7 Hz, 1H), 5.66 - 5.43 (m, 1H), 5.00 (ddd, J = 19.3, 6.3, 3.2 Hz, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.47 - 2.85 (m, 2H), 2.60 (ddd, J = 38.8, 24.1, 13.5 Hz, 2H), 2.19 (ddd, J = 14.7, 11.9, 7.1 Hz, 2H), 2.07 - 1.94 (m, 2H), 1.81 (dd, J = 65.1, 6.9 Hz, 3H), 1.66 - 1.46 (m, 5H), 1.45 - 1.22 (m, 4H), 1.00 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.89 (dd, J = 12.2, 6.6 Hz, 3H).
단계 4. 3-[3-({[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2 H -푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(프로판-2-일)아미노)시클로부틸]-N-(2-아미노-4/5-시클로부틸페닐)프로판아미드
Figure pct00296
TEA(0.54 ml, 3.90 mmol)을 실온에서 DCM(15 ml) 중의 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(프로판-2-일)아미노)시클로부틸]프로판산(308.46 mg, 0.65 mmol), 4-시클로부틸벤젠-1,2-디아민(210.90 mg, 1.30 mmol), 에틸(2E)-시아노(히드록시이미노)에타노에이트(184.75 mg, 1.30 mmol), 및 EDC.HCl(249.21 mg, 1.30 mmol)의 용액에 첨가하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시킨 후, DCM(50 ml)를 첨가하였다. 이를 포화 NaHCO3(2×30 ml)로 세정하였다. 수성물을 DCM(50 ml)로 추출하였다. 조합된 유기물을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켰다. 생성물을 EtOAc, 및 이어서 MeOH 중의 7N NH3:DCM(5:95)로 용리하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 회색 오일(468 mg(93%))을 제공하였다; C33H46N8O4에 대한 MS (ESI+) m/z 619.35 [M+H]+; HPLC 순도 80% (체류 시간, 1.44분).
단계 5. 9-[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-[({3-[2-(5-시클로부틸-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일)에틸]시클로부틸}(프로판-2-일)아미노)메틸]-2,2-디메틸-테트라히드로-2 H -푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]-9 H -퓨린-6-아민
Figure pct00297
AcOH(10 ml)을 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(프로판-2-일)아미노)시클로부틸]-N-(2-아미노-4/5-시클로부틸페닐)프로판아미드(468 mg, 0.61 mmol)에 첨가하고, 4시간 동안 교반하면서 65℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시킨 후, DCM(100 ml)에 용해시키고, 포화 NaHCO3(2×80 ml)로 세정하며, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발시켰다. MeOH:DCM(0 - 1:9) 중의 3N 암모니아로 용리하는 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(바이오타지(Biotage), 이소레라(Isolera), 25 g 카트리지)에 의해 정제하여, 목적 생성물을 순도 약 80%로 수득하였다. 분취 HPLC에 의해 추가 정제하여, 목적 생성물을 회색 오일(120 mg(27%))로서 제공하였다; C33H44N8O3에 대한 MS (ESI+) m/z 601 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 1.43분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 8.62 (d, J = 53.1 Hz, 6H), 8.57 (s, 2H), 8.25 (d, J = 19.3 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 20.3 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 8.3, 3.9 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.18 - 7.06 (m, 1H), 6.52 (d, J = 96.3 Hz, 2H), 6.07 (dd, J = 10.2, 1.3 Hz, 1H), 5.52 - 5.39 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 6.2, 3.4 Hz, 1H), 4.44 (td, J = 9.3, 5.1 Hz, 1H), 3.59 (dq, J = 17.4, 8.7 Hz, 1H), 3.36 - 3.10 (m, 2H), 3.08 - 2.92 (m, 2H), 2.87 - 2.72 (m, 2H), 2.43 - 2.27 (m, 2H), 2.24 - 1.65 (m, 10H), 1.57 (s, 4H), 1.37 (s, 3H), 1.10 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.91 (dd, J = 8.9, 6.8 Hz, 3H).
단계 6. (2 R ,3 R ,4 S ,5 R )-2-(6-아미노-9 H -퓨린-9-일)-5-[({3-[2-(5-시클로부틸-1 H -1,3-벤조디아졸-2-일)에틸]시클로부틸}(프로판-2-일)아미노)메틸]옥솔란-3,4-디올
Figure pct00298
12N HCl(24 mmol, 2 ml)을 0℃에서 MeOH(2 ml) 중의 9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[({3-[2-(5-시클로부틸-1H-1,3-벤조디아졸-2-일)에틸]시클로부틸}(프로판-2-일)아미노)메틸]-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]-9H-퓨린-6-아민(120 mg, 0.164 mmol)의 용액에 교반 하에 적가하였다. 이어서, 이를 실온으로 가온하고, 6 시간 동안 지속시켰다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, MeOH 중의 7N NH3 (10 ml)으로 염기성화하였다. 이어서, 이를 진공 하에 증발시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 (1 ml)에 흡수시키고, 이소루트 플래쉬 Si 카트리지(10 g)에 두고, MeOH 중의 7N NH3:DCM(1:9)로 용리하여 정제하여, 백색 고체(36 mg(38)를 제공하였다; C30H40N8O3에 대한 MS (ESI+) m/z 561.45 [M+H]+; HPLC 순도 100% (체류 시간, 1.13분); 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δH ppm 8.29 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.50 - 7.18 (m, 2H), 7.06 (ddd, J = 8.3, 4.6, 1.3 Hz, 1H), 6.01 - 5.90 (m, 1H), 4.73 (dd, J = 9.8, 5.1 Hz, 1H), 4.26 (q, J = 5.4 Hz, 1H), 4.14 - 4.03 (m, 1H), 3.60 - 3.15 (m, 2H), 3.07 - 2.86 (m, 2H), 2.84 - 2.67 (m, 3H), 2.42 - 2.31 (m, 2H), 2.25 - 2.11 (m, 4H), 2.10 - 1.95 (m, 2H), 1.92 - 1.74 (m, 4H), 1.57 (dd, J = 12.2, 6.2 Hz, 1H), 1.02 (dd, J = 6.6, 4.0 Hz, 3H), 0.95 (dd, J = 6.6, 2.3 Hz, 3H).
화합물 68: (2 R ,3 R ,4 S ,5 R )-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-{[(3-{2-[5-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]에틸}시클로부틸)(메틸)아미노]메틸}옥솔란-3,4-디올
단계 1: 벤질 3-[3-({[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노)시클로부틸]프로판산염
Figure pct00299
DCE:iPrOH(7:2) (90 ml) 중의 9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]-9H-퓨린-6-아민(5.00 g, 16.3 mmol), 벤질 3-(3-옥소시클로부틸)-프로판산염(4.17 g, 18.0 mmol) 및 아세트산(0.85 ml, 14.8 mmol)의 현탁액을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 트리아세톡시수소화붕소화나트륨(4.40 g, 20.8 mmol)을 조금씩 첨가하였고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 1M Na2CO3 용액(10 ml)으로 켄칭하였고, 생성물을 DCM(3×30 ml)로 추출하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 증발 건조시켰다. 1% MeOH 중의 7M NH3:99% DCM으로 용리하는 실리카 겔 플래쉬 칼럼 크로마토그래피로 정제하여, 생성물을 황색 오일로서 수득하였다(5.25 g, 55%, 89% 순수): C27H34N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 523.6 [M+H]+; LC 순도 89% (체류 시간, 1.60분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 8.35 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.30-7.39 (m, 5H), 6.01 (dd, J = 3.0 Hz, 1.6, 1H), 5.72 (br. s., 2H), 5.50 (dt, J = 6.4 Hz, 3.3, 1H), 5.10 (d, J = 3.8 Hz, 2H), 4.98-5.04 (m, 1H), 4.31-4.38 (m, 1H), 2.97-3.34 (m, 1H), 2.72-2.85 (m, 2H), 2.22-2.35 (m, 3H), 2.14 (td, J = 8.3, 4.3 Hz, 1H), 1.73-1.90 (m, 4H), 1.64-1.71 (m, 1H,), 1.62 (d, J = 1.4 Hz, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.10-1.27 (m, 1H).
단계 2: 벤질 3-[3-({[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(메틸)아미노)시클로부틸]프로판산염
Figure pct00300
벤질 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}아미노)시클로부틸]프로판산염(3.2 g, 6.12 mmol)을 메탄올(32 ml)에 용해시켰다. 물(37%) (0.92 ml, 12.3 mmol) 중의 포름알데히드를 첨가하고, 45분 동안 교반한 후, 시안화수소화붕소화나트륨(0.54 g, 8.57 mmol)을 적가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 물(1 ml)을 첨가하고 실온에서 용매를 증발 제거하였다. 잔류물을 메탄올/DCM 중의 7M 암모니아를 이용한 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 화합물을 황색 오일(부분입체이성질체의 혼합물) (2.05 g, 62%, 82% 순수)로서 제공하였다: C28H36N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 537.6 [M+H]+; LC 순도 82% (체류 시간, 1.60분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 8.32-8.38 (m, 1H), 7.91-7.97 (m, 1H), 7.32-7.39 (m, 5H), 6.05-6.10 (m, 1H), 5.61 (br. s., 2H), 5.53 (ddd, J = 16.5, 6.4, 1.8 Hz, 1H), 5.11 (m, 2H), 4.93-5.00 (m, 1H), 4.32-4.40 (m, 1H), 2.50-2.88 (m, 1H), 2.37-2.49 (m, 2H), 2.21-2.30 (m, 2H), 2.10 (m, 3H), 1.91-2.04 (m, 1H), 1.73-1.79(m, 2H), 1.64-1.72 (m, 2H), 1.56-1.63 (m, 4H), 1.41 (s, 3H), 1.15 (q, J = 9.7 Hz, 1H).
단계 3: 3-[3-({[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(메틸)아미노)시클로부틸]프로판산
Figure pct00301
벤질 3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(메틸)아미노)시클로부틸]프로판산염(1.19 g, 2.22 mmol)을 에탄올(24 ml)에 용해시키고, 10% 팔라듐/차콜 (50% 습윤 페이스트) (0.24 g)을 첨가하였다. 현탁액을 18시간 동안 수소 대기 하에 교반하였다. 이어서, 그것을 여과하였고, 고체를 에탄올(10 ml)로 세정하였다. 반응이 불완전할 때, 추가 팔라듐/차콜 (0.21 g)을 첨가하였고, 추가 24시간 동안 반응을 수소 하에 지속시켰다. 이중 유리 섬유를 통해 여과하고, 에탄올로 세정하며, 증발 건조시켜, 목적 화합물을 백색 발포체(부분입체이성질체의 혼합물) (0.85 g, 86%)로서 제공하였다: C21H30N6O5에 대한 MS (ESI+) m/z 447.5 [M+H]+; LC 순도 86% (체류 시간, 1.08분); 1H NMR (500 MHz, d4-MeOD) δH 8.18-8.35 (m, 2H), 6.14-6.30 (m, 1H), 5.25-5.56 (m, 1H), 5.01-5.11 (m, 1H), 4.35-4.52 (m, 1H), 3.63-3.81 (m, 1H), 3.24-3.30 (m, 1H), 2.98-3.16 (m, 1H), 2.89 (ddd, J = 17.2, 13.4, 3.7 Hz, 1H), 2.36 (m, 2H), 2.17-2.26 (m, 1H), 1.98-2.17 (m, 3H), 1.67-1.92 (m, 3H), 1.49-1.64 (m, 4H), 1.39 (s, 3H), 1.20-1.33 (m, 1H).
단계 4: 메틸 2-(4-플루오로페닐)-2-메틸프로판산염
Figure pct00302
수소화나트륨(미네랄 오일 중의 60% 현탁액) (2.64 g, 66 mmol)을 헵탄으로 세정하고(2×20 ml), THF(40 ml)에 현탁시켰다. THF(10 ml) 중의 및 메틸 2-(4-플루오로페닐)아세트산염(5.05 g, 30 mmol)의 용액을 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 요오드화메틸(5.6 ml, 90 mmol)을 30분에 걸쳐 1 ml 분량으로 첨가하였고, 이 때 처음에는 10℃로 냉각시킨 후, 기체 진화가 중지되면 50℃로 완만하게 가온하였다. 4.5시간 후, 물(50 ml)을 첨가하였고, 혼합물을 EtOAc(2×50 ml)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수(30 ml)로 세정하며, MgSO4로 건조시킨 후, 여과하고 증발건조시켜, 오렌지색 오일을 남겼다(5.08 g, 79%, 1H NMR에 의한 순도 91%): C11H13FO2에 대한 MS (ESI+) m/z 196.2 [M+H]+; LC 순도 80% (체류 시간, 1.94분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 7.29-7.34 (m, 2H), 6.98-7.05 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 1.58 (s, 6H).
단계 5: 2-(4-플루오로페닐)-2-메틸프로판-1-올
Figure pct00303
메틸 2-(4-플루오로페닐)-2-메틸프로판산염(5.08 g, 26.9 mmol)을 THF(51 ml)에 용해시키고, 0℃로 냉각시킨 후, 수소화알루미늄리튬 용액(THF 중의 1M) (38.8 ml, 38.8 mmol)을 30분에 걸쳐 적가하였다. 첨가가 완료되면, 반응을 실온으로 가온하고, 3시간 동안 교반하였다. 빙상에서 재냉각시킨 후, 물(1.35 ml)을 주의하여 첨가한 후, 물(1.35 ml) 중의 15% NaOH 및 추가 물(4.05 ml)을 첨가하였다. 현탁액을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 고체를 여과하고, THF(2×30 ml)로 세정하였다. 용매를 증발시키고, 생성물을 EtOAc/헵탄을 이용한 크로마토그래피로 정제하여, 투명 오일(3.48 g, 80%)을 제공하였다: C10H13FO에 대한 MS (ESI+) m/z 168.2 [M+H]+; LC 순도 94% (체류 시간, 1.76분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 7.41-7.32 (m, 2H), 7.15-7.00 (m, 2H), 3.62 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.35 (s, 6H).
단계 6: 1-플루오로-4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)벤젠
Figure pct00304
수소화나트륨(1.664 g, 41.6 mmol, 미네랄 오일 중의 60% 분산액)을 N2 하에서 건조 THF(18 ml)에 현탁시키고, 건조 THF(18 ml) 중의 2-(4-플루오로페닐)-2-메틸프로판-1-올(3.500 g, 20.8 mmol)을 0℃에서 현탁액에 천천히 첨가하였다. 완전 첨가 후, 반응을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 방치하였다. 요오드화메탄(6.5 ml, 0.104 mmol)을 실온에서 천천히 첨가하였고, 반응을 3시간 동안 방치하였다. H2O(35 ml)을 천천히 첨가함으로써 반응을 켄칭하였다. 층을 분리하였고, 수성층을 EtOAc(3×35 ml)로 추출하였다. 조합된 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 진공 하에 농축시켜, 미정제 생성물을 생성시켰다. 생성물을 100% 헵탄 내지 10% EtOAc:90% 헵탄을 용리액으로 이용하는 실리카 플래쉬 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하여, 생성물을 무색 오일(2.991 g, 79%)로서 제공하였다: LC 순도 98% (체류 시간, 2.16분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 7.40-7.32 (m, 2H), 7.11-6.96 (m, 2H), 3.39 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 1.33 (s, 6H).
단계 7: 1-플루오로-4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)-2-니트로벤젠
Figure pct00305
플루오로-4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)벤젠(2.987 g, 16.4 mmol)을 염 빙/수 조에서 -20℃로 냉각시키고, 황산(27 ml)을 교반 하에 천천히 적가하였다. 황산 첨가 시에, 용액은 밝은 오렌지색으로 변하였다. 질산(3 ml)을 15-20분에 걸쳐 천천히 적가하였다. 질산 첨가 시에, 용액은 암황색/갈색으로 변하였고, 약간의 백색 고체가 석출되었다. 이어서, 반응을 30분 동안 방치한 후, 얼음에 주입하였다(450 g). 혼합물을 DCM(2×225 ml)로 추출하였고, 조합된 유기 추출물을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 진공 하에 농축시켜, 미정제 생성물을 제공하였다. 생성물을 100% 헵탄 내지 20% EtOAc:80% 헵탄을 용리액으로 이용하는 실리카 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 생성물을 황색 오일(2.239 g, 60%)로서 제공하였다: LC 순도 96% (체류 시간, 2.18분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 8.08 (dd, J = 7.1, 2.5 Hz, 1H), 7.67 (ddd, J = 8.7, 4.1, 2.5 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 10.6, 8.8 Hz, 1H), 3.41 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 1.37 (s, 6H).
단계 8: 1-아지도-4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)-2-니트로벤젠
Figure pct00306
플루오로-4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)-2-니트로벤젠(2.227 g, 9.80 mmol)을 DMF (25 ml)에 용해시키고, 나트륨 아지드(1.274 g, 19.6 mmol)를 실온에서 첨가하였고, 반응을 하룻밤동안 교반하였다. 반응을 물(75 ml)로 켄칭하였고, 혼합물을 TBME(3×75 ml)로 추출하였다. 조합된 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 진공 하에 농축시켜, 미정제 생성물을 제공하였다. 생성물을 100% 헵탄 내지 15% EtOAc:85% 헵탄을 용리액으로 이용하는 실리카 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 생성물을 황색 오일(2.301 g, 75%, 80% 순수)로서 제공하였다: LC 순도 79% (체류 시간, 2.15분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 7.97 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 8.5, 2.2 Hz, 1H), 7.33-7.22 (m, 1H), 3.40 (s, 2H), 3.33 (s, 3H), 1.36 (s, 6H).
단계 9: 4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)벤젠-1,2-디아민
Figure pct00307
아지도-4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)-2-니트로벤젠(1.102 g, 3.52 mmol)을 EtOH(30 ml)에 용해시키고, Pd/C (10% wt.) (0.110 g, 10% wt.)를 첨가하였다. 반응을 N2로 3회 퍼징한 후, H2로 퍼징하였고, 반응을 실온에서 하룻밤동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였고, 여과액을 진공 하에 농축시켜, 미정제 생성물을 제공하였다. 생성물을 100% 헵탄 내지 100% EtOAc를 용리액으로 이용하는 실리카 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 생성물을 담갈색 오일로서 제공하였고, 이를 암오렌지색 고체(0.481 g, 63%, 90% 순수)로서 고화하였다: C11H18N2O에 대한 MS (ESI+) m/z 195.1 [M+H]+; LC 순도 87% (체류 시간, 0.99분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 6.65 (dd, J = 11.2, 1.9 Hz, 2H), 6.58 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.26 (s, 2H), 3.24 (s, 3H), 1.20 (s, 6H).
단계 10: 3-[3-({[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(메틸)아미노)시클로부틸]- N -[2-아미노-4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)페닐]프로판아미드
Figure pct00308
3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(메틸)아미노)시클로부틸]프로판산(0.620 g, 1.39 mmol), 4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)벤젠-1,2-디아민(0.466 g, 2.08 mmol, 87% 순수), EDC.HCl(0.532 g, 2.78 mmol) 및 OXYMA(에틸-시아노(히드록시이미노)아세트산염) (0.395 g, 2.78 mmol)을 교반기가 장착된 플라스크에 첨가한 후, N2로 퍼징하였다. 건조 DCM(22 ml) 및 건조 Et3N(1.2 ml, 8.33 mmol)를 실온에서 첨가하였고, 반응을 하룻밤동안 방치하였다. 포화 NaHCO3 용액(25 ml)의 첨가에 의해 반응을 켄칭하였고, 유기층을 분리하였다. 수성층을 DCM(2×25 ml)으로 추출하였고, 조합된 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 진공 하에 농축시켜, 미정제 생성물을 제공하였다. 생성물을 용리액으로서 먼저 디아닐린을 용리하기 위한 100% EtOAc를 이용한 후, 100% DCM 내지 MeOH 중의 20% 2M NH3:80% DCM를 이용하는 실리카 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 생성물을 갈색 오일(1.081 g, 정량)으로서 제공하였다: C32H46N8O5에 대한 MS (ESI+) m/z 623.4 [M+H]+; LC 순도 98% (체류 시간, 1.36분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 8.39 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.427.30 (m, 1H), 7.247.00 (m, 1H), 6.966.81 (m, 1H), 6.12 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 5.77 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.63 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.144.93 (m, 1H), 4.604.31 (m, 1H), 4.283.69 (m, 2H), 3.483.03 (m, 5H), 2.652.48 (m, 1H), 2.462.33 (m, 1H), 2.342.10 (m, 7H), 2.101.98 (m, 1H), 2.001.66 (m, 4H), 1.62 (d, J = 15.7 Hz, 13H), 1.44 (d, J = 6.5 Hz, 4H), 1.30 (t, J = 3.3 Hz, 7H), 1.12 (d, J = 52.3 Hz, 1H).
단계 11: 9-[(3a R ,4 R ,6 R ,6a R )-6-{[(3-{2-[5-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]에틸}시클로부틸)(메틸)아미노]메틸}-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]-9H-퓨린-6-아민
Figure pct00309
3-[3-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]메틸}(메틸)아미노)시클로부틸]-N-[2-아미노-4-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)페닐]프로판아미드(1.036 g, 1.66 mmol)을 AcOH(17 ml)에 용해시키고, 5시간 동안 50℃로 가열하였다. 반응을 진공 하에 농축시켰고, 잔류물을 DCM(75 ml)에 용해시키며, 포화 NaHCO3 용액(75 ml)를 첨가하였다. 유기층을 분리하였고, 수성층을 DCM(2×75 ml)로 추출하였다. 조합된 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 진공 하에 농축시켜, 미정제 생성물을 암오렌지색 오일(0.850 g, 94%)로서 제공하였다. 생성물을 중성 분취-HPLC에 의해 정제하여, 생성물을 담황색 오일(0.485 g, 47%, 88% 순수)로서 제공하였다: C32H44N8O4에 대한 MS (ESI+) m/z 605.4 [M+H]+; LC 순도 88% (체류 시간, 1.25분); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δH 10.44 (dd, J = 207.7, 22.9 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 7.89-7.58 (m, 1H), 7.54-7.29 (m, 2H), 6.15 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 5.92-5.56 (m, 3H), 4.98 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.76-4.39 (m, 1H), 3.47 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.33 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 2.98-2.43 (m, 4H), 2.42-2.00 (m, 6H), 1.99-1.88 (m, 2H), 1.77-1.66 (m, 1H), 1.64 (s, 3H), 1.61-1.48 (m, 1H), 1.44 (d, J = 8.1 Hz, 3H), 1.40 (d, J = 7.9 Hz, 6H), 1.28 (dd, J = 16.0, 9.0 Hz, 1H).
단계 12: (2 R ,3 R ,4 S ,5 R )-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-{[(3-{2-[5-(1-메톡시-2-에틸프로판-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]에틸}시클로부틸)(메틸)아미노]메틸}옥솔란-3,4-디올
Figure pct00310
9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-{[(3-{2-[5-(1-메톡시-2-메틸프로판-2-일)-1H-1,3-벤조디아졸-2-일]에틸}시클로부틸)(메틸)아미노]메틸}-2,2-디메틸-테트라히드로-2H-푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일]-9H-퓨린-6-아민(0.485 g, 0.706 mmol, 88% 순수)을 MeOH(20 ml)에 용해시키고, 농축 HCl(4.9 ml, 10 vol)을 실온에서 첨가하였으며, 반응을 2.5시간 동안 방치하였다. 반응을 진공 하에 농축시켜, 잔류물을 최소량의 MeOH(~2 ml)에 용해시켰다. 반응을 포화 NaHCO3 용액(10 ml) 및 EtOAc(30 ml)의 첨가에 의해 켄칭하였다. 층을 분리하였고, 수성층을 EtOAc(2×30 ml)로 추출하였다. 조합된 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 여과하며, 진공 하에 농축시켜, 미정제 생성물을 제공하였다. 생성물을 용리액으로서 100% DCM 내지 MeOH 중의 20% 2M NH3:80% DCM을 이용하는 실리카 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 생성물을 백색 발포체(0.213 g, 53%)로서 제공하였다: C29H40N8O4에 대한 MS (ESI+) m/z 565.4 [M+H]+; LC 순도 100% (체류 시간, 2.11분) (7분); 1H NMR (500 MHz, d4-MeOD) δH 8.28 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.42 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H), 6.01 (t, J = 3.9 Hz, 1H), 4.84-4.74 (m, 1H), 4.41-4.29 (m, 1H), 4.29-4.19 (m, 1H), 3.48 (s, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.14-2.98 (m, 1H), 2.99-2.89 (m, 1H), 2.90-2.73 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.37-2.30 (m, 1H), 2.28-2.10 (m, 2H), 2.08-1.86 (m, 4H), 1.70-1.51 (m, 1H), 1.38 (s, 6H).
화합물 69: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올.
Figure pct00311
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.06 (s, 1H), 7.47 (brs, 1H), 7.38 (d, J = 8.0 HZ, 1H), 7.27 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.32 (s, 1H), 3.88 (s, 1H), 2.80 (brs, 2H), 2.68 (brs, 1H), 2.49-2.10 (m, 9H), 1.90 (brs, 2H), 1.62-1.49 (m, 3H), 1.35 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 532.3 [M+1] +.
벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
DCE(200 mL) 중의 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(20 g, 43.91 mmol), 벤질 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(12.2 g, 52.69 mmol) 및 HOAc(15 mL)의 용액을 3시간 동안 30℃에서 교반하였다. NaBH(OAc)3 (18.6 g, 87.81 mmol)을 첨가하였고, 반응 혼합물을 추가 1시간 동안 30℃에서 교반하였다. 혼합물을 물(100 mL×2) 및 염수(100 mL)로 세정하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로서 EA:DCM:MeOH = 10:10:1를 이용하는 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여, 목적 화합물(21 g, 수율: 65 %, 시스/트랜스 = 52/47)을 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.16 (brs, 1H), 7.36-7.29 (m, 5H), 7.22 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.66 (brs, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 8.5 및 2.0 Hz, 1H), 6.20 (brs, 1H), 5.41-5.39 (m, 1H), 5.08 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.99-4.95 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.30-4.25 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.38-3.35 (m, 0.5H), 3.11-3.06 (m, 0.5H), 2.92-2.82 (m, 2H), 2.29-2.18 (m, 3H), 2.12-2.05 (m, 0.5H), 1.90-1.68 (m, 4H), 1.63-1.61 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.35-1.28 (m, 0.5H), 1.25 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.15-1.12 (m, 0.5 H) ppm; ESI-MS (음성 mode, m/z): 670.3 [M-1]+.
벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염
CH3CN(50 mL) 중의 벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(4 g, 5.95 mmol), 2-요오도프로판(6 g, 35.72 mmol) 및 K2CO3(2.5 g, 17.86 mmol)의 혼합물을 2일 동안 환류 하에 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 여과하며, 필터 케이크를 CH3CN(20 mL)로 세정하였다. 여과액을 농축시키고, 잔류물을 콤비(Combi)-플래쉬(80 g 실리카 겔, 개시 EA:DCM:MeOH = 10:10:0 내지 10:10:1의 구배, 60 mL/분, 40 분, 2.4 L 총 용매 체적)에 의해 정제하여, 목적 화합물(3 g, 수율: 71%)을 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.15 (s, 1H), 7.38-7.29 (m, 5H), 7.19 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 8.5 및 2.0 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.36-5.32 (m, 1H), 5.09 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.94-4.89 (m, 3H), 4.65 (s, 2H), 4.17-4.14 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.41-3.35 (m, 0.5H), 3.04-2.95 (m, 0.5H), 2.94-2.86 (m, 1H), 2.72-2.52 (m, 2H), 2.25 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 2.21 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 2.05-1.90 (m, 2H), 1.90-1.82 (m, 0.5H), 1.76-1.70 (m, 0.5H), 1.65-1.55 (m, 5H), 1.42-1.34 (m, 4H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83-0.80 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 714.4 [M+1]+.
3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산
THF/MeOH(15 mL/15 mL) 중의 벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염(2.7 g, 3.78 mmol)의 용액에 물(5 mL) 중의 LiOH.H2O(1.6 g, 37.82 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 30℃에서 교반하였다. 휘발물을 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 물(10 mL)로 희석하고, EA(15 mL×2)로 추출하였다. 현탁액 수층을 1 N HCl 용액을 이용하여 pH = 3-4로 조정하고, EA(30 mL×3)로 추출하였다. 조합된 유기층을 염수(50 mL)로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 목적 화합물을 황색 고체(2.9 g)로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.20 (s, 1H), 7.92 (s, 0.5H), 7.38-7.32 (m, 3H), 7.28-7.23 (m, 1.5H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.68 (brs, 1H), 6.56 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.51-5.47 (m, 1H), 5.18-5.13 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.61 (s, 1H), 4.43-4.40 (m, 1H), 3.96-3.90 (m, 0.5H), 3.85 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.65-3.58 (m, 0.5H), 3.50-3.40 (m, 2H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.20-2.00 (m, 4H), 1.98-1.70 (m, 2.5H), 1.70-1.58 (m, 4.5H), 1.40 (s, 3H), 1.18 (d, J = 5.0 Hz, 3H), 0.90 (t, J = 6.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 624.3 [M+1]+.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드
DCM(30 mL) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산(2.7 g, 4.33 mmol), 4-(트리플루오로메톡시)벤젠 -1,2-디아민(1.23 g, 6.49 mmol), HATU (2.5 g, 6.49 mmol) 및 HOAT (0.88 g, 6.49 mmol)의 용액에 TEA(1.8 mL, 12.99 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(70 mL)로 희석하고, 물(20 mL×2) 및 염수(50 mL)로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 콤비-플래쉬(80 g 실리카 겔, 개시 EA:DCM:MeOH = 10:10:0 내지 10:10:2의 구배, 60 mL/분, 40 분, 2.4 L 총 용매 체적)에 의해 정제하여, 목적 화합물(2.2 g, 수율: 67% (2 단계)을 갈색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.21 (s, 1H), 7.28-7.12 (m, 3H), 6.73 (brs, 1H), 6.69 (brs, 1H), 6.56-6.52 (m, 2H), 6.42 (dd, J = 8.0 및 2.5 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.48 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.20-5.16 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.46-4.42 (m, 1H), 4.08-3.98 (m, 0.5H), 3.84 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.75-3.69 (m, 0.5H), 3.60-3.38 (m, 2H), 2.60-2.30 (m, 3H), 1.92-1.86 (m, 1H), 1.80-1.70 (m, 1H), 1.59 (d, J = 3.5 Hz, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.25 (t, J = 7.5 Hz, 3H),), 1.00-0.80 (m, 2H) ppm; ESI-MS (m/z): 798.3 [M+1]+.
N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
HOAc(20 mL) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드(2.2 g, 2.5 mmol)의 용액을 5시간 동안 65℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰고, 농축시켰다. 잔류물을 DCM(50 mL)에 용해시키고, 15% Na2CO3 용액(20 mL×2), 물(20 mL) 및 염수(30 mL)로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 콤비-플래쉬(80 g 실리카 겔, 개시 EA:DCM:MeOH = 10:10:0 내지 10:10:2 구배, 60 mL/분, 35 분, 2.1 L 총 용매 체적)에 의해 정제하여, 목적 화합물(1.4 g)을 갈색 고체로서 제공하였고, 이를 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 시스-이성질체(600 mg, 수율: 28%) 및 트랜스 이성질체(480 mg, 수율: 22%)를 제공하였다.
시스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.17 (s, 1H), 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.20 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.68 (brs, 1H), 6.49 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.39 (dd, J = 8.5 및 2.0 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.35 (dd, J = 6.0 및 2.0 Hz, 1H), 4.68-4.60 (m, 2H), 4.18-4.13 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.10-3.02 (m, 1H), 2.95-2.88 (m, 1H), 2.78-2.72 (m, 2H), 2.69-2.57 (m, 2H), 2.12-2.02 (m, 2H), 1.86-1.76 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.52-1.40 (m, 2H), 1.37 (s, 3H), 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 780.4 [M+1]+.
트랜스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.15 (s, 1H), 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.20 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.68 (brs, 1H), 6.51 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.40 (dd, J = 8.0 및 2.5 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.35 (dd, J = 6.0 및 2.0 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.20-4.16 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.50-3.42 (m, 1H), 2.95-2.90 (m, 1H), 2.80 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.75-2.58 (m, 2H), 2.12-1.95 (m, 4H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 0.97 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 780.4 [M+1]+.
화합물 70: (1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
Figure pct00312
메틸 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
MeOH(25 mL) 중의 메틸 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.85 g, 3.12 mmol) 및 NaBH3CN(590 mg, 9.36 mmol)의 용액을 AcOH를 이용하여 pH=6으로 조정한 후, 포름알데히드(936 mg, 31.2 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 하룻밤동안 25℃에서 교반하였다. 반응을 포화 NaHCO3(5 mL)으로 켄칭하고, 증발시키며, 물(10 mL)을 첨가하고, DCM(150 mL×3)로 추출하며, 염수(80 mL)로 세정하고, 건조시키며, 농축시켰다. 잔류물을 SGC에 의해 정제하여, 목적 화합물(1.85 g, 수율 97%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8.12 (s, 1H), 7.22 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.44 (dd, J = 8.5 및 2.5 Hz, 1H), 5.01-4.98 (m, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.60-4.58 (m, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.44-3.38 (m, 1H), 2.80-2.73 (m, 2H), 2.48-2.43 (m, 4H), 2.32 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.20-2.16 (m, 4H), 1.95-1.94 (m, 2H), 1.82-1.81 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.31 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 608.3 [M+1] +.
3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산
THF/MeOH/ H2O(1:1:1, 30 mL) 중의 메틸 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.85 g, 3.04 mmol) 및 LiOH(382 mg, 15.24 mmol)의 용액을 2시간 동안 50℃에서 교반하였다. 반응을 농축시켜, 목적 화합물(2.25 g, 염, 순도 85%)을 백색 고체로서 수득하였다. 미정제물을 추가 정제없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8.11 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.30 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.44 (dd, J = 10.0 및 2.5 Hz, 1H), 5.05-5.03 (m, 2H), 4.73 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.90-3.85 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.30-3.18 (m, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.65-2.55 (m, 1H), 2.53-2.46 (m, 3H), 2.27-2.20 (m, 3H), 2.12-2.11 (m, 2H), 1.83-1.82 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 594.3 [M+1] +.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
DCM(60 mL) 중의 3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(2.25 g, 3.8 mmol) HOAt (680 mg, 5 mmol) 및 HATU (1.9 g, 5 mmol)의 용액을 1시간 동안 실온에서 교반한 후, DCM(3 mL) 중의 4-tert-부틸벤젠디아민(656 mg, 4 mmol) 및 TEA(1.21 g, 12 mmol)을 적가하였다. 반응물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 반응에 물(20 mL) 및 DCM(60 mL)을 첨가하고, DCM(60 mL×2)로 추출하며, 염수(10 mL)로 세정하고, 건조시키며, 농축시켰다. 잔류물을 SGC에 의해 정제하여, 목적 화합물(1.1 g, 수율 46%)을 황색빛 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8.11 (s, 1H), 7.21 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 8.0 및 1.5 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 8.0 및 1.5 Hz, 1H), 5.02-4.99 (m, 2H), 4.65-4.61 (m, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.60-3.52 (m, 1H), 2.97-2.83 (m, 2H), 2.58 (s, 3H), 2.54-2.38 (m, 4H), 2.33-2.29 (m, 2H), 2.18-2.04 (m, 3H), 1.94-1.91 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 740.5 [M+1] +.
7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
AcOH(8 mL) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-((1R,3s)-3-((((3aR,4R,6R,6aS)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.1 g, 1.49 mmol)의 용액을 3시간 동안 65℃로 가열하였다. 반응을 증발시키며, MeOH(5 mL)에 용해시키며, 포화 NaHCO3 용액을 이용하여 pH=8로 조정하고, 농축시키며, 분취-TLC에 의해 정제하여, 목적 화합물(620 mg, 58%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8.10 (s, 1H), 7.48 (brs, 1H), 7.38 (brs, 1H), 7.28 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.13(d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.62 (brs, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.42 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.98-4.90 (m, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.50 (brs, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.01-2.98 (m, 1H), 2.83 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 2.44-2.34 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.12-1.96 (m, 6H), 1.84 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.53 (s, 3H), 1.36 (s, 9H), 1.28 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 722.4 [M+1] +.
(1R,2S,3R,5R)-3-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)시클로펜탄-1,2-디올
TFA(5 mL, 90%) 중의 7-((3aS,4R,6R,6aR)-6-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로-3aH-시클로펜타[d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(620 mg, 0.86 mmol)의 용액을 1시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응을 농축 건조시키고, MeOH(5 mL)에 용해시키며, 포화 K2CO3 용액을 이용하여 pH=8로 조정하였다. 혼합물을 0.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응을 농축시켜, 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 화합물(330 mg, 수율 73%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500MHz, MeOD): δH 8.07 (s, 1H), 7.49 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 11.0 및 2.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.92-4.89 (m, 1H), 4.33 (dd, J = 9.5 및 8.5 Hz, 1H), 3.90 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 3.03-2.99 (m, 1H), 2.85 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 2.50-2.22 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.15-1.98 (m, 5H), 1.88 (t, J = 10.0 Hz, 2H), 1.68-1.59 (m, 1H), 1.37 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 532.3 [M+1] +.
화합물 71: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00313
3 M HCl/MeOH(20 mL) 중의 시스-9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(920 mg, 1.60 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 35℃에서 교반하고, 증발 건조시켰다. 잔류물을 MeOH(15 mL)에 용해시키고, 포화 K2CO3 용액을 첨가하여 용액을 pH 8로 조정하였다. 이어서, 혼합물을 5분 동안 교반하고, 여과하였다. 여과액을 농축시키고, 미정제물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 표적물(400 mg, 수율: 47%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.27 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 5.98 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.69 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.24-4.20 (m, 1H), 4.18-4.15 (m, 1H), 2.81-2.76 (m, 2H), 2.75-2.69 (m, 1H), 2.67-2.62 (m, 2H), 2.25-2.18 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 1.90-1.85 (m, 3H), 1.49-1.41 (m, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 535.3 [M+1] +.
화합물 72: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00314
3 M HCl/MeOH(20 mL) 중의 트랜스-9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(420 mg, 0.73 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 35℃에서 교반하고, 증발 건조시켰다. 잔류물을 MeOH(15 mL)에 용해시키고, 포화 K2CO3 용액을 첨가하여 용액을 pH 8로 조정하였다. 이어서, 혼합물을 5분 동안 교반하고, 여과하였다. 여과액을 농축시키고, 미정제물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 표적물 (198 mg, 수율: 51%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.38 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.28-7.26 (m, 1H), 5.98 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.69 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.23 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.19-4.16 (m, 1H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.80 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.68-2.64 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.09-1.95 (m, 5H), 1.85-1.80 (m, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 535.3 [M+1] +.
벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
MeOH(40 mL) 중의 벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(3.76 g, 7.2 mmol) 및 NaBH3CN(5.9 g, 93.6 mmol)의 혼합물에 AcOH를 첨가하여, pH=6으로 조정하였다. 이어서, 40% MeCHO(8.7 mL, 122.5 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 1.5시간 동안 30℃에서 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하였고, 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 이어서, 혼합물을 DCM(30 mL×3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수로 세정하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 농축시켰다. 미정제물을 SGC(DCM: MeOH=100:1-20:1)에 의해 정제하여, 표적물(2.6 g, 수율: 66%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.26 (s, 1H), 8.23 (m, 1H), 7.37-7.28 (m, 5H), 6.24 (s, 1H), 5.52-5.49 (m, 1H), 5.10-5.06 (m, 3H), 4.41-4.40 (m, 1H), 3.20-2.90 (m, 2H), 2.80-2.60 (m, 2H), 2.12-1.77 (m, 4H), 1.74-1.60 (m, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.26-1.22 (m, 3H), 0.94-0.89 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 551.3 [M+1]+.
3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판산
MeOH(40 mL) 중의 벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(2.6 g, 4.73 mmol)의 용액에 10% Pd/C (2.3 g)를 첨가하였고, 혼합물을 20시간 동안 50℃에서 H2 대기 하에 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축시켜, 표적물(2 g, 수율: 92%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.27 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 5.52-5.49 (m, 1H), 5.14-5.12 (m, 1H), 4.51-4.47 (m, 1H), 3.43-3.36 (m, 2H), 3.22-3.15 (m, 1H), 2.94-2.89 (m, 2H), 2.28-2.05 (m, 4H), 1.96-1.80 (m, 2H), 1.74-1.69 (m, 1H), 1.65-1.59 (m, 5H), 1.41-1.36 (m, 4H), 1.03-0.99 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 461.3 [M+1]+.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
DCM(40 mL) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판산(2 g, 4.35 mmol), HOAT (768 mg, 5.65 mmol), HATU (2.2 g, 5.65 mmol) 및 TEA(3 mL, 21.3 mmol)의 용액에 4-tert-부틸벤젠-1, 2-디아민(785 mg, 4.79 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(30 mL×2)으로 추출하였다. 조합된 유기상을 H2O(20 mL×2)로 세정하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제물을 SGC(DCM: MeOH=70: 1-20:1)에 의해 정제하여, 표적물(1.6 g, 수율: 61%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28-8.27 (m, 1H), 8.24-8.23 (m, 1H), 7.10-6.92 (m, 2H), 6.81-6.76 (m, 1H), 6.22 (s, 1H), 5.54-5.52 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 3.03-2.50 (m, 5H), 2.32-2.26 (m, 2H), 2.16-1.80 (m, 4H), 1.73-1.69 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.28-1.24 (m, 9H), 0.94-0.85 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 607.3 [M+1]+.
9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민
AcOH(20 mL) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(에틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.6 g, 2.64 mmol)의 용액을 15시간 동안 65℃에서 교반하였다. 용액을 진공 하에 농축시켜, DCM(30 mL)으로 희석하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 용액(20 mL×2) 및 염수(20 mL×1)로 세정하였다. 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 표적물 1.5 g(수율: 97%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28-8.26 (m, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.30-7.27 (m, 1H), 6.20-6.18 (m, 1H), 5.52-5.49 (m, 1H), 5.02-4.98 (m, 1H), 4.34-4.31 (m, 1H), 2.95-2.92 (m, 1H), 2.79-2.68 (m, 4H), 2.56-2.50 (m, 2H), 2.09-1.81 (m, 5H), 1.71-1.63 (m, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (s, 9H), 1.35-1.28 (m, 1H), 0.89-0.85 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 589.3 [M+1]+.
3 M HCl/MeOH(20 mL) 중의 9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(1.35 g, 2.30 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 35℃에서 교반하고, 증발 건조시켰다. 잔류물을 MeOH(15 mL)에 용해시키고, 포화 K2CO3 용액을 첨가하여, 용액을 pH 8로 조정하였다. 이어서, 혼합물을 5분 동안 교반하고, 여과하였다. 여과액을 농축시키고, 미정제물을 키랄 HPLC에 의해 분리하고, 분취-HPLC에 의해 정제하여, 시스 생성물(280 mg, 총 수율: 22%) 및 트랜스 생성물(150 mg, 총 수율: 12%)을 백색 고체로서 수득하였다.
화합물 73: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00315
시스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.27 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.39-7.37 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 5.97 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.67 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.18-4.14 (m, 1H), 3.06-3.03 (m, 1H), 2.91-2.81 (m, 2H), 2.79-2.75 (m, 2H), 2.64-2.58 (m, 2H), 2.25-2.19 (m, 1H), 1.89-1.86 (m, 3H), 1.52-1.47 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 0.98 (t, J = 7.0 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 549.3 [M+1] +.
화합물 74: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(에틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00316
트랜스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.39-7.37 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 5.97 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.67 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.18-4.14 (m, 1H), 3.42-3.35 (m, 1H), 2.91-2.78 (m, 4H), 2.64-2.58 (m, 2H), 2.10-2.07 (m, 3H), 1.99-1.96 (m, 2H), 1.85-1.79(m, 2H), 1.35 (m, 9H), 0.98 (t, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 549.3 [M+1] +.
화합물 76: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((이소프로필((1s,3R)-3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00317
90% TFA(5 mL) 중의 트랜스- N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(480 mg, 0.62 mmol)의 용액을 2시간 동안 30℃에서 교반하였다. 휘발물을 감압 하에 제거하였다. 잔류물에 MeOH(6 mL)을 첨가하고, NH3.H2O를 이용하여 pH=9~10로 조정하였다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하고, 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 화합물(182 mg, 수율: 50%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD): δH 8.09 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.27 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.12 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.06-4.01 (m, 1H), 3.62-3.53 (m, 1H), 3.10-3.00 (m, 1H), 2.92-2.65 (m, 4H), 2.25-2.15 (m, 2H), 2.10-1.98 (m, 3H), 1.85-1.76 (m, 2H), 1.03 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.4 Hz, 3H) ppm; 19F NMR (400 MHz, MeOD): δ -59.80 ppm; ESI-MS (m/z): 590.3 [M+1]+.
화합물 77 및 78
Figure pct00318
화합물 78: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올:
Figure pct00319
1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.09 (s, 1H), 7.48 (brs, 1H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.28 (dd, J = 10.5 및 1.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.13-4.08 (m, 2H), 3.30-3.15 (m, 3H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.97-2.90 (m, 1H), 2.78 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 2.28-2.20 (m, 2 H), 1.92-1.78 (m, 3H), 1.55-1.45 (m, 2H), 1.37 (s, 9H) ppm; LC-MS (m/z): 602.3 [M+1]+.
화합물 77: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(2,2,2-트리플루오로에틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올:
Figure pct00320
1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.09 (s, 1H), 7.48 (brs, 1H), 7.39 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 10.5 및 2.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.45 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.14-4.09 (m, 2H), 3.68-3.60 (m, 1H), 3.30-3.15 (m, 2H), 3.11-3.04 (m, 1H), 2.97-2.90 (m, 1H), 2.80 (t, J = 9.5 Hz, 2H), 2.12-2.03 (m, 3 H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.90-1.80 (m, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm; LC-MS (m/z): 602.3 [M+1]+.
벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
MeOH(40 mL) 중의 벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(3.76 g, 7.2 mmol) 및 NaBH3CN(5.9 g, 93.6 mmol)의 혼합물에 AcOH를 첨가하여, pH=6으로 조정하였다. 이어서, 37% HCHO(8.7 mL, 122.4 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 1.5시간 동안 30℃에서 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하였고, 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 이어서, 혼합물을 DCM(30 mL×3)로 추출하였다. 조합된 유기상을 염수로 세정하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하며, 농축시켰다. 미정제물을 SGC(DCM: MeOH=100: 1-20:1)에 의해 정제하여, 표적물(2.4 g, 수율: 67%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.27(s, 1H), 8.22 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35-7.30 (m, 5H), 6.22 (s, 1H), 5.55-5.52 (m, 1H), 5.09 (s, 2H), 5.04-5.01 (m, 1H), 4.40-4.38 (m, 1H), 2.76-2.65 (m, 3H), 2.29-2.22 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.11-1.95 (m, 2H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.64-1.61 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.41-1.39 (m, 1H), 1.38 (s, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 537.3 [M+1]+.
3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산
MeOH(40 mL) 중의 벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(2.4 g, 4.48 mmol)의 용액에 10% Pd/C (2.3 g)를 첨가하였고, 혼합물을 20시간 동안 50℃에서 H2 대기 하에 교반하였다. 혼합물을 여과하였고, 여과액을 농축시켜, 표적물(1.9 g, 수율: 95%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.27(s, 1H), 8.24 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.54-5.52 (m, 1H), 5.09-5.07 (m, 1H), 4.50-4.47 (m, 1H), 3.17-3.07 (m, 2H), 3.02-2.90 (m, 1H), 2.39-2.35 (m, 3H), 2.31-2.05 (m, 4H), 1.91-1.70 (m, 2H), 1.64-1.51 (m, 5H), 1.39 (s, 3H), 1.23-1.15 (m, 1H) ppm; ESI-MS (m/z): 447.2 [M+1]+.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
DCM(40 mL) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(1.9 g, 4.26 mmol), HOAT (753 mg, 5.54 mmol), HATU (2.1 g, 5.54 mmol) 및 TEA(3 mL, 21.3 mmol)의 용액에 4-tert-부틸벤젠-1, 2-디아민(769 mg, 4.69 mmol)을 첨가하였고, 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하였고, 혼합물을 DCM(30 mL×2)으로 추출하였다. 조합된 유기상을 H2O(20 mL×2)로 세정하였다. 조합된 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제물을 SGC(DCM: MeOH=70: 1-20:1)에 의해 정제하여, 표적물(1.8 g, 수율: 72%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28 (s, 1H), 8.23 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.10-6.92 (m, 2H), 6.81-6.76 (m, 1H), 6.21 (s, 1H), 5.56 (s, 1H), 5.49 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 2.69-2.49 (m, 3H), 2.31-2.27 (m, 2H), 2.13-2.00 (m, 5H), 1.88-1.81 (m, 2H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.41-1.35 (m, 4H), 1.28-1.25 (m, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 593.4 [M+1]+.
9-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(메틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민
AcOH(20 mL) 중의 N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.8 g, 3.04 mmol)의 용액을 15시간 동안 65℃에서 교반하였다. 용액을 진공 하에 농축시켜, DCM(30 mL)으로 희석하였다. 혼합물을 포화 NaHCO3 용액(20 mL×2) 및 염수(20 mL×1)로 세정하였다. 조합된 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하며 농축시켜, 1.7 g(수율: 97%)의 목적 생성물을 수득하였다.
생성물을 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 920 mg의 시스-이성질체 및 420 mg의 트랜스-이성질체를 수득하였다.
시스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.27 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 6.19 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.55-5.52 (m, 1H), 4.99-4.97 (m, 1H), 4.35-4.31 (m, 1H), 2.77-2.73 (m, 2H), 2.62-2.46 (m, 3H), 2.10-2.01 (m, 4H), 1.84-1.81 (m, 3H), 1.58 (s, 3H), 1.38-1.36 (m, 12H), 1.19-1.14 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 575.3 [M+1]+.
트랜스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.40-7.38 (m, 1H), 7.30-7.27 (m, 1H), 6.19 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 5.55-5.52 (m, 1H), 5.01-4.98 (m, 1H), 4.36-4.34 (m, 1H), 2.96-2.92 (m, 2H), 2.77 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.58-2.50 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.04-1.90 (m, 4H), 1.82-1.79(m, 1H), 1.70-1.66 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (s, 9H) ppm; ESI-MS (m/z): 575.3 [M+1]+.
화합물 87: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((이소프로필((1r,3S)-3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00321
90% TFA(5 mL) 중의 시스-N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(600 mg, 0.77 mmol)의 용액을 2시간 동안 30℃에서 교반하였다. 휘발물을 감압 하에 제거하였다. 잔류물에 MeOH(6 mL)을 첨가하고, NH3.H2O를 이용하여 pH=9~10로 조정하였다. 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하고, 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 화합물(260 mg, 수율: 57%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD): δH 8.09 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.27 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 8.4 및 0.8 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.11 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.05-4.01 (m, 1H), 3.20-3.10 (m, 1H), 3.08-3.00 (m, 1H), 2.88-2.65 (m, 4H), 2.25-2.15 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 3H), 1.65-1.55 (m, 2H), 1.02 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.4 Hz, 3H) ppm; 19F NMR (400 MHz, MeOD): δ -59.80 ppm; ESI-MS (m/z): 590.3 [M+1]+.
화합물 90 및 75: 벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염
DCE(40 mL) 중의 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(2.5 g, 5.49 mmol), 벤질 3-(3-옥소시클로부틸)프로판산염(1.66 g, 7.14 mmol) 및 HOAc(329 mg, 5.49 mmol)의 용액에 1회 분량의 NaB(OAc)3H(2.33 g, 11 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 생성되는 반응 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3(40 mL)을 첨가하여, 반응을 켄칭한 후, DCM(50 mL×3)으로 추출하고, 무수 Na2SO4로 건조시키며, 농축시켰다. 미정제물을 SGC(DCM:MeOH = 100:1 내지 50:1)에 의해 정제하여, 목적 화합물(2.3 g, 수율: 64%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.14 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.35-7.28 (m, 5H), 7.20 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.40-5.39 (m, 1H), 5.08-5.07 (m, 2H), 4.96-4.94 (m, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.26-4.24 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.10-3.05 (m, 0.55H), 2.86-2.82 (m, 2H), 2.26-2.20 (m, 3 H), 2.10-1.59 (m, 5H), 1.58 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.35-1.25 (m, 0.6H), 1.15-1.08 (m, 0.5H) ppm; LC-MS (m/z): 672.4 [M+1]+.
벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염
벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)아미노)시클로부틸)프로판산염(2.3 g, 3.43 mmol)을 밀봉관에서 MeCN(25 mL) 중의 K2CO3(3.3 g, 24 mmol) 및 2-요오도프로판(5.8 g, 34.3 mmol)과 혼합한 후, 20시간 동안 교반 하에 95℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하였고, MeCN(30 mL)으로 헹구었고, 여과액을 진공 하에 증발시켜, 목적 화합물(2.1 g, 수율: 88%)을 백색 고체로서 제공하였고, 이를 추가 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.13 (s, 1H), 7.35-7.29 (m, 5H), 7.18 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.41 (dd, J = 8.5 및 2.5 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.33-5.32 (m, 1H), 5.08-5.06 (m, 2H), 4.90-4.89 (m, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.15-4.14 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.37-3.36 (m, 0.43H), 3.01-2.98 (m, 0.59H), 2.92-2.88 (m, 1H), 2.70-2.40 (m, 3 H), 2.24-2.18 (m, 2 H), 2.10-1.80 (m, 3 H), 1.75-1.69 (m, 2H), 1.61-1.52 (m, 5H), 1.38 (s, 3H), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.81-0.79(m, 3 H) ppm; LC-MS (m/z): 714.0 [M+1]+.
3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산
벤질 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산염(1.5 g, 2.1 mmol)을 MeOH(25 mL)에 용해시키고, Pd/C (10 % on 탄소, 70 % 물, 742 mg)을 첨가하였고, 생성되는 혼합물을 하룻밤동안 1 atm H2 하에 35℃에서 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하며, MeOH(15 mL× 3)로 헹구었고, 여과액을 진공 하에 증발시켜, 목적 화합물(1.12 g, 수율: 85%)을 백색 고체로서 제공하였고, 이를 추가 정제없이 다음 단계에서 사용하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.18 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.35-7.32 (m, 1H), 7.23-7.22 (m, 1H), 7.12 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.66 (brs, 1H), 6.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.43-6.41 (m, 1H), 6.24-6.23 (m, 1H), 5.47-5.46 (m, 1H), 5.13-5.12 (m, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.41-4.37 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.64-3.58 (0.6H), 3.46-3.40 (m, 1.7H), 2.45-1.60 (m, 9H), 1.57 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.11 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 624.0 [M+1]+.
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드
DCM(30 mL) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판산(1.1 g, 1.76 mmol), HATU (1 g, 2.64 mmol), HOAT (359 mg, 2.64 mmol)의 용액에 DCM(10 mL) 중의 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민(433 mg, 2.64 mmol) 및 TEA(533 mg, 5.28 mmol)의 용액을 적가한 후, 생성되는 반응 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. DCM(50 mL)으로 희석한 후, 혼합물을 물(30 mL× 3)로 세정하고, 건조시키며, 농축시켰다. 미정제물을 SGC(DCM:MeOH = 100:1 내지 40:1)에 의해 정제하여, 목적 화합물(680 mg, 수율: 50%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.16 (s, 1H), 7.19 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.14-7.10 (m, 1.7H),6.99-6.97 (m, 0.6H), 6.92 (s, 0.6H), 6.77 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 6.66-6.65 (m, 1H), 6.54-6.53 (m, 1H), 6.42 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.36-5.35 (m, 1H), 4.96-4.95 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.17-2.73 (m, 4H), 2.33-1.71 (m, 8H), 1.58 (s, 3H), 1.53-1.50 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.28 (s, 9H), 1.0 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 5.0 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 770.0 [M+1]+.
7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)시클로부틸)프로판아미드(670 mg, 0.87 mmol)을 HOAc(8 mL)에 용해시킨 후, 하룻밤동안 65℃로 가온하면서 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 DCM(60 mL)에 용해시킨 후, NaHCO3(포화 20 mL) 및 물(20 mL)로 세정하였고, 유기상을 건조시키며, 농축시켰다. 미정제물을 분취-TLC(DCM:MeOH = 10:1)에 의해 정제하여, 목적 화합물(470 mg, 수율: 73%)을 백색 고체로서 제공하였고, 이를 이어서 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 시스(243 mg) 및 트랜스 이성질체(180 mg)을 백색 고체로서 제공하였다.
시스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.15 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38-7.37 (m, 1H), 7.27 (dd, J = 8.5 및 1.5 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.38 (dd, J = 8.0 및 2.5 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.33 (dd, J = 6.5 및 2.5 Hz, 1H), 4.92-4.91 (m, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.16-4.15 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.08-3.07 (m, 1H), 2.97-2.96 (m, 1H), 2.72-2.66 (m, 4H), 2.09-2.03 (m, 2 H), 1.82-1.78 (m, 3H), 1.56 (s, 3H), 1.48-1.40 (m, 2H), 1.38 (s, 3H), 1.36 (s, 9H), 0.95 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.81 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 752.0 [M+1]+.
트랜스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.14 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38-7.37 (m, 1H), 7.27 (dd, J = 8.5 및 1.5 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.39-6.37 (m, 1H), 6.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.33 (dd, J = 6.0 및 2.5 Hz, 1H), 4.90 (dd, J = 6.5 및 3.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.17-4.15 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.44-3.43 (m, 1H), 2.93-2.90 (m, 1H), 2.77-2.68 (m, 3H), 2.62-2.60 (m, 1H), 2.05-1.93 (m, 5H), 1.68-1.67 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.36 (s, 12H), 0.95 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 0.81 (d, J = 6.5 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 752.0 [M+1]+.
화합물 90: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00322
TFA(2.7 mL) 및 물(0.3 mL)의 혼합물에 시스 이성질체-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(235 mg, 0.31 mmol)을 첨가하였다. 용액을 2시간 동안 35℃에 방치하고, 증발 건조시켰다. 잔류물을 메탄올과 함께 2회 공동 증발시켰다. 이어서, 잔류물을 MeOH(20 mL)에 용해시켰다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반 하에 K2CO3(124 mg, 1 mL의 H2O에 용해됨)에 의해 중화시켰다. 용매를 진공 하에 제거한 후, 미정제물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 화합물(90 mg, 수율: 51%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.08 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.39-7.37 (m, 1H), 7.28 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.43-4.41 (m, 1H), 4.12-4.09 (m, 1H), 4.04-4.01 (m, 1H), 3.15-3.13 (m, 1H), 3.04-3.01 (m, 1H),2.86-2.68 (m, 4H), 2.21-2.17 (m, 2H), 1.88-1.85 (m, 3H), 1.60-1.57 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.01 (d, J = 8.0 Hz, 3H), 0.97 (d, J = 8.0 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 562.5 [M+1]+.
화합물 75: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00323
TFA(2.7 mL) 및 물(0.3 mL)의 혼합물에 트랜스 이성질체 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(175 mg, 0.23 mmol)을 첨가하였다. 용액을 2시간 동안 35℃에 방치하고, 증발 건조시켰다. 잔류물을 메탄올과 함께 2회 공동 증발시켰다. 이어서, 잔류물을 MeOH(20 mL)에 용해시켰다. 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하면서 K2CO3(97 mg, 1 mL의 H2O에 용해됨)에 의해 중성화하였다. 용매를 진공 하에 제거한 후, 미정제물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 화합물(95 mg, 수율: 71%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.09 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.41-7.39 (m, 1H), 7.30-7.27 (m, 2H), 6.64 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.45-4.42 (m, 1H), 4.13-4.11 (m, 1H), 4.05-4.03 (m, 1H), 3.58-3.54 (m, 1H), 3.06-3.02 (m, 1H), 2.89-2.80 (m, 3H), 2.74-2.70 (m, 1H), 2.20-2.17 (m, 2H), 2.03-1.99 (m, 3H), 1.84-1.81 (m, 3H), 1.38 (s, 9H), 1.03 (d, J = 8.5 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 8.0 Hz, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 562.5 [M+1]+.
화합물 96: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((메틸((1r,3S)-3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00324
N-(2-아미노-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드
DCM(17 mL) 중의 3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판산(1.2 g, 2.91 mmol), HATU (2.17 g, 5.83 mmol) 및 HOAT (0.91 g, 5.83 mmol)의 용액에 4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민(1.1 g, 5.83 mmol) 및 TEA(2.05 mL, 14.56 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL)로 희석하고, 물(15 mL×3) 및 염수(30 mL)로 세정하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 콤비-플래쉬(40 g 실리카 겔, 개시 EA:DCM:MeOH = 10:10:0 내지 10:10:8의 구배, 40 mL/분, 50 분, 2.0 L 총 용매 체적)에 의해 정제하여, 목적 화합물(1.0 g, 수율: 60%)을 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.29 (s, 1H), 8.25-8.24 (m, 1H), 7.20-7.13 (m, 1H), 6.95-6.85 (m, 0.4H), 6.73 (brs, 0.8H), 6.54 (d, J = 7.5 Hz, 0.8H), 6.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.60-5.55 (m, 1H), 5.03-5.00 (m, 1H), 4.40-4.35 (m, 1H), 3.40-3.35 (m, 0.3H), 3.00-2.92 (m, 0.7H), 2.70-2.47 (m, 3H), 2.36-2.28 (m, 2H), 2.20-1.80 (m, 6H), 1.76-1.66 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.26-1.16 (m, 1H) ppm; ESI-MS (m/z): 621.3 [M+1]+.
9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민
HOAc(10 mL) 중의 N-(2-아미노-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-2,2-디메틸테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)시클로부틸)프로판아미드(1.0 g, 1.61 mmol)의 용액을 65℃에서 하룻밤동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 DCM(50 mL)에 용해시키고, 포화 NaHCO3 용액(10 mL×2), 물(20 mL) 및 염수(30 mL)로 세정하였다. 잔류물을 키랄 HPLC에 의해 분리하여, 시스 이성질체(460 mg, 수율: 47%) 및 트랜스 이성질체(220 mg, 수율: 23%)를 제공하였다.
시스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.53 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.13 (dd, J = 8.5 및 1.0 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.55 (dd, J = 6.5, 2.5 Hz, 1H), 5.01 (q, J = 3.5 Hz, 1H), 4.33-4.37 (m, 1H), 2.81-2.78 (m, 2H), 2.66-2.58 (m, 2H), 2.53-2.49 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 5H), 1.86-1.84 (m, 3H), 1.59 (s, 3H), 1.43-1.39 (m, 4H), 1.22-1.17 (m, 1H) ppm; LC-MS (m/z): 603.3 [M+1]+.
트랜스-이성질체: 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.29 (s, 1 H), 8.22 (s, 1 H), 7.52 (brs, 1H), 7.40 (s, 1 H), 7.13 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.55 (dd, J = 6.5 및 2.0 Hz, 1H), 5.01 (q, J = 3.0 Hz, 1H), 4.38-4.34 (m, 1H), 2.96-2.92 (m, 1H), 2.84-2.81 (m, 2H), 2.59-2.49 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.05-1.91 (m, 4H), 1.85-1.79(m, 1H), 1.73-1.66 (m, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 3H) ppm; LC-MS (m/z): 603.3 [M+1]+.
화합물 96
1 N HCl/MeOH(10 mL) 중의 시스-9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(460 mg, 0.77 mmol)의 용액을 4시간 동안 30℃에서 교반하였다. 휘발물을 감압 하에 제거하였다. 잔류물에 MeOH(10 mL)를 첨가하고, NH3.H2O를 이용하여 pH=10~11로 조정하였다. 혼합물을 30분동안 실온에서 교반하고, 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 화합물(215 mg, 수율: 43%)을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.28 (s, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1 H), 7.12 (dd, J = 8.5 및 0.5 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.71 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.18 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.84-2.81 (m, 2H), 2.77-2.68 (m, 3H), 2.25-2.22 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.91-1.89 (m, 3H), 1.51-1.45 (m, 2H) ppm; LC-MS (m/z): 563.3 [M+1]+.
화합물 97: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((메틸((1s,3R)-3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올
Figure pct00325
1 N HCl/MeOH(5 mL) 중의 트랜스-9-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸(3-(2-(5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)아미노)메틸)테트라히드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-9H-퓨린-6-아민(220 mg, 0.37 mmol)의 용액을 4시간 동안 30℃에서 교반하였다. 휘발물을 감압 하에 제거하였다. 잔류물에 MeOH(10 mL)를 첨가하고, NH3.H2O를 이용하여 pH=10~11로 조정하였다. 혼합물을 30분동안 실온에서 교반하고, 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 화합물(80 mg, 수율: 39%))을 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.29 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.52 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.40 (s, 1 H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.00 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.72 (t, J = 4.5 Hz, 1H), 4.25 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.18-4.20 (m, 1H), 3.04-3.08 (m, 1H), 2.83-2.86 (m, 2H), 2.64-2.72 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.97-2.10 (m, 5H), 1.82-1.85 (m, 2H) ppm; LC-MS (m/z): 563.3 [M+1]+.
화합물 106
Figure pct00326
30% 디옥산 수용액(20 mL) 중의 (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1r,3S)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올(300 mg, 0.53 mmol)의 용액에 MCPBA(91 mg, 0.53 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 농축시켰다. 미정제물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 생성물(160 mg, 수율: 45%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.24 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.49 (brs, 1H), 7.42-7.38 (m, 1H), 7.31-7.29 (m, 1H), 6.00-5.96 (m, 1H), 4.68-4.65 (m, 2H), 4.43-4.36 (m, 1H), 4.05-4.00 (m, 1H), 3.88-3.76 (m, 1H), 3.68-3.49 (m, 1H), 3.46-3.37 (m, 1H), 2.84-2.81 (m, 2H), 2.42-2.15 (m, 4H), 1.95-1.89 (m, 3H), 1.39 (s, 1H), 1.35-1.27 (m, 3H), 1.25-1.21 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 579.4 [M+1] +.
화합물 107
Figure pct00327
30% 디옥산 수용액(20 mL) 중의 (2R,3R,4S,5R)-2-(6-아미노-9H-퓨린-9-일)-5-((((1s,3R)-3-(2-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)시클로부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라히드로푸란-3,4-디올(300 mg, 0.53 mmol)의 용액에 MCPBA(91 mg, 0.53 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 농축시켰다. 미정제물을 분취-HPLC에 의해 정제하여, 목적 생성물(80 mg, 수율: 26%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR (500 MHz, MeOD): δH 8.25-8.22 (m,2H), 7.49 (brs, 1H), 7.42-7.38 (m, 1H), 7.31-7.28 (m, 1H), 6.02-5.97 (m, 1H), 4.69-4.60 (m, 2H), 4.47-4.32 (m, 2H), 3.86-3.74 (m, 1H), 3.70-3.54 (m, 1H), 3.45-3.35 (m, 1H), 2.97-2.72 (m, 4H), 2.15-1.75 (m, 5H), 1.39 (s, 1H), 1.34-1.28 (m, 3H), 1.26-1.22 (m, 3H) ppm; ESI-MS (m/z): 579.7 [M+1] +.
실시예 9: 초임계 유체 크로마토그래피
로투스 세퍼레이션(Lotus Separations; LLC. 미국 뉴저지주 프린스톤 소재)에 의해 이용되는 방법과 같은 공지된 기법을 이용하여 초임계 유체 크로마토그래피(SFC)에 의해 화합물을 정제하였다. 예를 들어, http://www.lotussep.com를 참조한다. 또한, http://www.greenchemistrygroup.org/Program2009.html를 참조한다.
일부 실시예에 대한 SFC 분리 조건이 이하 열거되어 있다. 본원에 기재된 다른 화합물들도 유사 방법에 의해 분리될 수 있다.
화합물 로투스(Lotus) 예비 분리 조건 로투스 분석 분리 조건
28 AD-H(2×15 cm) 40% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1 mL, 2.5 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 5 mL/분, 220 및 254nm
30 AD-H(2×15 cm) 35% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5-2 mL, 13 mg/mL 에탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
31 AD-H(2×15 cm) 40% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1 mL, 2.5 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 5 mL/분, 220 및 254nm
34 AD-H(2×15 cm) 35% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5-2 mL, 13 mg/mL 에탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
35 IC (2×15 cm) 35% 이소프로판올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.75 mL, 4 mg/mL 메탄올 IC (15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
36 AD-H(2×15 cm) 35% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 6.7 mg/mL 9:1 메탄올:DCM AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
37 IC (2×15 cm) 30% 이소프로판올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1 mL, 2.6 mg/mL 메탄올 IC(15×0.46 cm) 30% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
38 Lux-3 (2×15 cm) 30% 에탄올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.4 mL, 6.2 mg/mL 메탄올 Lux-3 (15×0.46 cm) 25% 에탄올(NH4OH)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
39 AD-H(2×15 cm) 35% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 6.7 mg/mL 9:1 메탄올:DCM AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
40 AD-H(2×15 cm) 40% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5-1 mL, 8.1 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
41 프리미어(Premier) (2×25 cm) 30% 메탄올(0.1% DEA))CO2, 100 bar 60 ml/분, 220 nm. Inj vol.: 1 mL, 20 mg/mL 메탄올 프리미어 (25×0.46 cm) 25% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
46 Lux-3 (2×15 cm) 25% 에탄올(0.1% NH4OH))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.3 mL, 2 mg/mL 메탄올 Lux-3 (15×0.46 cm) 30% 에탄올(NH4OH)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
47 AD-H(2×15 cm) 30% 에탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 12 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 에탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
48 AD-H(2×15 cm) 40% 1:1 헵탄:에탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 25 mg/mL 에탄올 AD-H(15×0.46 cm) 50% 1:1 헵탄:에탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
49 Lux-3 (2×15 cm) 30% 에탄올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.4 mL, 6.2 mg/mL 메탄올 Lux-3 (15×0.46 cm) 25% 에탄올(NH4OH)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
51 Lux-3 (2×15 cm) 25% 에탄올(0.1% NH4OH))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.3 mL, 2 mg/mL 메탄올 Lux-3 (15×0.46 cm) 30% 에탄올(NH4OH)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
52 AD-H(2×15 cm) 40% 에탄올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 10 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 에탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
53 AD-H ((2×15 cm) 40% 1:1 헵탄:에탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 25 mg/mL 에탄올 AD-H(15×0.46 cm) 50% 1:1 헵탄:에탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
54 AD-H ((2×15 cm) 40% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5-1 mL, 8.1 mg/mL 메탄올 AD-H ((15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
55 AD-H ((2×15 cm) 30% 에탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 12 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 에탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
57 IC (2×15 cm) 30% 이소프로판올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1 mL, 2.6 mg/mL 메탄올 IC(15×0.46 cm) 30% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
58 AD-H ((2×15 cm) 40% 에탄올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 10 mg/mL 메탄올 AD-H ((15×0.46 cm) 40% 에탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
60 AD-H ((2×15 cm) 30% 에탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 10 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 25% 에탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
61 AD-H ((2×15 cm) 30% 에탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 10 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 25% 에탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 280 nm
63 AD-H ((2×15 cm) 38% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1.5 mL, 11.8 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
65 AD-H ((2×15 cm) 38% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1.5 mL, 11.8 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
69 IC (2×15 cm) 35% 이소프로판올(0.2% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.75 mL, 4 mg/mL 메탄올 IC (15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
114 LUX2 (2×15 cm) 45% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.75 mL, 5.6 mg/mL 메탄올:DCM LUX2 (15×0.46 cm) 45% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 5 mL/분, 220 및 254nm
114 OZ-H ((3×25 cm) 40% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1.75 mL, 10 mg/mL 메탄올 OZ-H(15×0.46 cm) 40% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
115 LUX2 (2×15 cm) 45% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.75 mL, 5.6 mg/mL 메탄올:DCM LUX2 (15×0.46 cm) 45% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 5 mL/분, 220 및 254nm
115 OZ-H ((3×25 cm) 40% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1.75 mL, 10 mg/mL 메탄올 OZ-H(15×0.46 cm) 40% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
116 LUX-2 (2×15 cm) 35% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1 mL, 8.5 mg/mL 메탄올 LUX-2(15×0.46 cm) 45% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
119 LUX-2 (2×15 cm) 35% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1 mL, 8.5 mg/mL 메탄올 LUX-2(15×0.46 cm) 45% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 nm
121 OZ-H ((3×25 cm) 40% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 2 mL, 14 mg/mL 메탄올 OZ-H(15×0.46 cm) 40% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
122 OZ-H ((3×25 cm) 40% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 2 mL, 14 mg/mL 메탄올 OZ-H(15×0.46 cm) 40% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
123 OZ-H ((3×25 cm) 40% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.8 mL, 19 mg/mL 메탄올 OZ-H(15×0.46 cm) 40% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
124 OZ-H ((3×25 cm) 40% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.8 mL, 19 mg/mL 메탄올 OZ-H(15×0.46 cm) 40% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
128 AD-H ((2×15 cm) 30% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5-2 mL, 20 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
129 AD-H ((2×15 cm) 30% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 65 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5-2 mL, 20 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 40% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
131 AD-H ((2×15 cm) 30% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1 mL, 15 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 30% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
132 AD-H ((2×15 cm) 30% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 1 mL, 15 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 30% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
133 AD-H ((2×15 cm) 30% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 7.7 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 30% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 4 mL/분, 220 및 254nm
134 AD-H ((2×15 cm) 30% 메탄올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 7.7 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 30% 메탄올(DEA)/CO2, 100 bar 4 mL/분, 220 및 254nm
135 AD-H ((2×15 cm) 30% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.75 mL, 15 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 30% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
136 AD-H ((2×15 cm) 30% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 70 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.75 mL, 15 mg/mL 메탄올 AD-H(15×0.46 cm) 30% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
137 IC (2×15 cm) 35% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 10 mg/mL 메탄올 IC(15×0.46 cm) 35% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
138 IC (2×15 cm) 35% 이소프로판올(0.1% DEA))/CO2, 100 bar 60 mL/분, 220 nm. inj vol.: 0.5 mL, 10 mg/mL 메탄올 IC(15×0.46 cm) 35% 이소프로판올(DEA)/CO2, 100 bar 3 mL/분, 220 및 254nm
실시예 10: 생물검정법 프로토콜 및 일반 방법
세포 배양. 인간 혈액 종양 세포주 THP-1, RS4;11, 및 MV4-11는 ATCC로부터 수득하였고, MOLM-13 세포는 DSMZ로부터 수득하였다. 모든 세포주를 10% FBS 함유의 RPMI 1640 중에서 성장시켰고, 벤더 추천 세포 밀도 및 환경 조건을 이용하여 유지시켰다. 배지를 비필수 아미노산 및 L-글루타민으로 보충하였다. THP-1 세포를 또한 0.05 mM β-머캅토에탄올로 보충하였다.
메틸화 분석. 세포를 최종 체적이 2 mL가 되도록 12웰 플레이트에 5×105 세포/mL로 씨딩하였다. 세포에 화합물을 50 mM DMSO 스톡 용액으로부터 적절한 농도가 되도록 투입하였다. 화합물 및 배지를, 트핍판 블루 배제(바이셀(Vicell))을 이용하여 세포를 계수하고, 5분간 200 g으로 펠렛팅하며, 5X105 세포/mL의 최종 세포 농도로 화합물을 함유하는 새 배지 중에 재현탁함으로써, 7일간의 인큐베이션 과정에 걸쳐 격일로 교체하였다. 화합물 인큐베이션 후, 상업적 히스톤 추출 키트(액티브 모티프(Active Motif))를 이용하여 히스톤을 1×106 세포로부터 추출하였다. 정제된 히스톤을 BSA 표준 곡선을 이용한 BCA 단백질 검정법(피어스(Pierce))을 이용하여 정량화하였다.. 400 ng의 단리된 히스톤을 4-20% 겔 상에서의 SDS-PAGE에 의해 분획화하고, 니트로셀룰로스 막에 옮겼다. 막을 각종 1차 및 2차 항체와 함께 인큐베이션하여, 리코르(Licor) 촬영 시스템(오딧세이(Odyssey))를 이용하여 촬영하였다. 다클론성 H3K79-Me2 토끼를 압캅(Abcam)으로부터 구매하였다. H3K4-Me3, H3K9-Me3, H3K27-Me2, 및 H3K27-Me3을 포함한 다른 토끼 다클론성 항체들은 셀 시그널링 테크놀로지즈(Cell Signaling Technologies)(CST)로부터 구매하였다. 마우스 단클론성 총 H3 항체를 로딩 대조군(CST)으로 사용하였다. 형광 표지된 2차 항체는 오딧세이로부터 구매하였다.
세포 성장 및 생육성 분석. 세포를 기하급수적으로 성장하는 세포 배양으로부터 수확하여, 웰 당 3×104 세포로 씨딩하였다. 샘플을 96웰 흑색 벽이 있는 클리어 바닥 플레이트(코닝(Corning))내에 유지시켰디. 0일째에 0.2% DMSO 중의 최종 농도의 50 uM 화합물을 적절한 웰에 첨가하였다. MV4-11 및 MOLM-13의 처리는 14일 지속된 반면, THP-1 세포는 18일 동안 처리하였다. 샘플을 V-바닥 플레이트(코닝)에 옮기고, 실온 로토르에서 5분 동안 200 g로 회전하며, 화합물을 함유하는 새 배지 내에 재현탁하고, 검정 플레이트에 다시 옮김으로써, 화합물 및 배지를 인큐베이션 중에 격일로 교체하였다. 구아바 바이어카운트(Guava Viacount) 검정법을 이용하여 세포를 계수하고, 이제사이트플러스(EasyCyte Plus) 기기(밀리포어(Millipore))로 판독하였다. 검정 플레이트를 필요에 따라 권장 세포 밀도 내가 되도록 분할하였다. 세포 계수를 조정하여 세포 분할을 고려하고, 총 생육성 세포/웰로 보고하였다.
HOXA9(qPCR). 메틸화 검정과 유사하게 7일 동안 세포를 화합물로 처리하였다. 세포를 실온 로토르에서 200 g으로 펠렛화하였고, 총 RNA를 키아젠 RM이지(Qiagen RNeasy) 키트를 이용하여 단리하였다. 나노뷰(Nanovue)(GE 헬쓰케어(GE Healthcare))를 이용하여 RNA 농도 및 품질을 결정하였다. 고용량 cDNA 역전사 키트(어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems))를 이용하여 총 RNA를 역전사하였다. HOXA9에 대한 기지정 표지의 프라이머 세트를 어플라이드 바이오시스템즈로부터 구매하였다. qPCR 반응물은 50 ng cDNA, 1X 표지 프라이머 및 1X 타크만(Taqman) 유니버셜 PCR 마스터 믹스(어플라이드 바이오시스템즈)를 함유하였다. 2분 50℃, 10분 95℃, 및 15초 95℃ 및 1분 60℃에서의 40 주기의 PCR 조건을 이용하여 7900 HT 고속 실시간 PCR 기기(Fast Real Time PCR machine)(어플라이드 바이오시스템즈)에 샘플을 적용하였다. HOXA9 주기수를 유전자 B2 마이크로글로불린(어플라이드 바이오시스템즈로부터의 B2M 기지정 대조군)를 보유하는 하우스에 대해 정규화하였다. DMSO 대조군의 백분율을 하기 방정식을 이용하여 계산하였다: 대조군 백분율 = (2^-ΔΔCT)*100(여기서, ΔΔCT는 정규화 HOXA9 샘플 및 대조군 간의 차이이다(ΔCT 샘플 - ΔΔCT 대조군 = ΔΔCT).
IC 50 의 결정. 시험 화합물을 10점에 대해 DMSO중에 3배로 일련 희석하였고, 1 μl를 384웰 마이크로티터 플레이터에 플레이팅하였다. 양성 대조군(100% 표준 억제율)은 2.5 uM 최종 농도의 S-아데노실-L-호모시스테인이었고, 음성 대조군 (0% 표준 억제율)은 1 μl의 DMSO를 함유하였다. 이어서, 화합물을 40 μl/웰의 DOT1L(1-416) (검정 완충액 내 0.25 nM 최종 농도: 20 mM 트리스, pH 8.0, 10 mM NaCl, 0.002% 트윈(Tween) 20, 0.005% 소 피부 젤라틴, 100 mM KCl, 및 0.5 mM DTT)과 함께 30분 동안 인큐베이션하였다. 10 μl/웰의 기질 믹스(200 nM S-[메틸-3H]-아데노실-L 메티오닌, 600 nM의 비표지 S-[메틸-3H]-아데노실-L 메티오닌, 및 20 nM 올리고뉴클레오좀)를 첨가하여, 반응을 개시하였다. 반응물을 실온에서 120분 동안 인큐베이션하였고, 10 μl/웰의 100 μM S-메틸-아데노실-L-메티오닌으로 켄칭하였다. 검출을 위해, 50 μl의 반응물로부터의 기질을 384 웰 스트렙타비딘(Streptavidin) 코팅 플래쉬플레이트(퍼킨 엘머(Perkin Elmer)) (0.2% 폴리에틸렌이민으로도 코팅됨)에서 고정화하여, 탑 카운트 섬멸 계수기(Top Count scintillation counter)(퍼킨 엘머)로 판독하였다. IC50 값이 이하 표에 제시되어 있다. 이 표에서, "A"는 <0.1 μM의 IC50 값을 가리키고; "B"는 > 0.1 μM 및 <1 μM의 IC50 값을 가리키며; "C"는 > 1 μM 및 < 10 μM의 IC50 값을 가리키고; "D"는 > 10 μM 및 < 50 μM의 IC50 값을 가리킨다.
화합물# DOT1L IC50
2 A
3 A
4 A
5 A
6 A
7 A
8 D
9 A
10 A
11 A
12 A
13 A
14 A
15 C
16 C
17 B
18 B
19 A
20 A
21 C
22 B
23 A
24 A
25 A
26 A
27 A
28 A
29 A
30 A
31 A
32 A
33 A
34 A
35 A
36 A
37 A
38 A
39 A
40 A
41 A
42 A
43 A
44 A
45 A
46 A
47 A
48 A
49 A
50 A
51 A
52 A
53 A
54 A
55 A
56 A
57 A
58 A
59 A
60 A
61 B
62 B
63 B
64 B
65 B
66 B
67 A
68 A
69 A
70 A
71 A
72 A
73 A
74 A
75 A
76 A
77 B
78 C
79 A
80 B
81 B
82 B
83 B
84 C
85 D
86 A
87 A
88 A
89 A
90 A
91 A
92 A
93 A
94 A
95 A
96 A
97 A
98 A
99 A
100 A
101 B
102 B
103 C
104 C
105 C
106 A
107 A
110 A
111 A
112 A
114 A
115 A
116 A
117 A
118 A
119 A
120 A
121 A
122 A
123 A
124 A
128 A
129 A
130 A
131 A
132 A
133 A
134 A
135 A
136 A
137 A
138 A
139 A
140 A
실시예 11: 종양 항증식 검정법
시험관내 항증식성 검정법. 본 발명의 화합물의 항증식 활성의 강도 및 선택도를 MLL-재배열 및 비-MLL-재배열 인간 백혈병 세포주의 패널을 이용하여 평가하였다. 연구에 이용된 세포주가 도 1A에 열거되어 있다. MLL-재배열 패널은 MLL-AF4, MLL-AF9 또는 MLL-ENL 융합체에 포함된 ALL, AML 및 이표현형 백혈병을 포함하였다. 이 세포주들은 DOT1L을 보충한다. 패널은 또한 MLL-재배열을 포함하지 않는 5개의 세포주, 및 MLL 유전자(MLL-PTD)의 부분 탄뎀 중복을 가지는 1개의 세포주를 포함하였다.
기하급수적으로 성장하는 세포를, 삼중으로 150 μl의 최종 체적의 3×104 세포/웰의 밀도로 96웰 플레이트에 플레이팅하였다. 세포를 증가하는 농도의 화합물 2의 존재 하에 인큐베이션하였다. 14일 이하 동안 매 3 내지 4일마다 세포 생육성에 의해 항증식성 활성을 결정하였다. 세포 계수 일에는, 성장 배지 및 화합물 2를 교체하였고, 세포를 분할물은 5×104 세포/웰의 밀도로 다시 분할하였다.
도 1에서의 반 최대(half maximal) 억제 농도 (IC50) 결과는, 화합물 2이 시험한 4개의 MLL-재배열 세포주 (MV4;11 (MLL - AF4), MOLM-13 (MLL - AF9), 및 KOPN-8 (MLL - ENL) 중2개에 대해 강한 나노몰 항증식 활성을 나타냄을 도시한다. MLL-PTD를 발현하는 EOL-1 세포는 또한 화합물 2에 대해 매우 반응성이었다(IC50 = 11 nM). RS4;11 세포 및 2개의 비 MLL-재배열 세포 (Reh 및 Kasumi-1)는 1-3 로그 차수로 덜 민감하고, 2개의 비-MLL-재배열 세포 (Jurkat 및 HL-60)는 활성을 나타내지 않았다. 전반적으로, 결과는 화합물 2가 강하게 또한 선택적으로 MLL-재배열 백혈병 세포주 및 비-MLL-재배열 백혈병 세포주의 하위부류의 증식을 억제함을 가리킨다.
생체내 항증식성 검정법. 본 발명의 화합물의 생체내 항종양 활성을 MLL-재배열 백혈병의 마우스 이종이식 모델에서 평가하였다.
크기가 80 내지 120 mm3 범위인 MV4-11 이종이식 종양을 가지는 20마리 여성 누드 마우스로 된 4개의 군(군1, 3, 4 및 5), 및 8 마리 상기 여성 누드 마우스로 된 1개의 군(군 2) 여성 누드 마우스(0.023 kg의 평균 중량)에 미니펌프(알제트 모델(Alzet Model) 2001)를 피하 이식하였다. 군 1에는 펌프로부터 비히클만을 주입하였다. 군 2에는 펌프와 ip 주사로 일일 3회(8 시간 간격) 비히클만을 주입하였다. 군 3에는 20 mg/kg의 화합물 2을 ip 주사로 일일 3회(8 시간 간격)로, 또한 펌프로부터 112 mg/kg/일을 주입하여 총 일일 용량을 172 mg/kg/일이 되도록 하였다. 군 4 및 5에는 각기 112 및 56 mg/kg/일의 화합물 2를 펌프로부터 주입하였다. 펌프는 7일 동안 지속하도록 고안하였고, 21일의 총 투입 기간을 제공하도록 2회 교환하였다.
단일 혈액 샘플을 7, 14, 및 21일째 군 4 및 5의 모든 동물로부터 취하여, 혈장 내 화합물 2의 수준에 대해 시험하였다. 혈액 샘플을 하기 시점들(시점 당 3마리 동물)에 7 및 14일째에 군 3으로부터 취하였다: 5 분 ip 전 투약, 및 15분, 30분, 1, 2, 및 4 시간 ip 후 투약. 21일째에, 마지막 ip 주사 후 3시간째에 단일 혈액 샘플을 군 3으로부터 취하였다. 종양 크기를 4일마다 측정하였다. 21일 후, 연구를 종료하였고, 평균 TGI를 계산하였다.
도 2는 21일간의 투약에 걸친 종양 성장을 도시한다. 2개의 비히클 대조군 간에 종양 크기의 차이는 없었다. ip 투약으로 보충된 고용량 미니펌프 군은 대조군에 비해 > 70%의 통계학적으로 유의한 TGI를 나타냈다. 56 및 112 mg/kg/일 군은 대조군에 비해 각기 43 및 38%의 통계학적으로 유의하지 않은 TGI 값을 나타냈다. 화합물 2는 도 2에서 Ex. 2로 칭해진다.
도 3A는 7, 14, 및 21일째에 취해진 평균 혈액 샘플에 의해 결정되는, 군 4 및 5에서의 화합물의 평가된 혈장 내 농도를 도시한다. 데이터는 군 4에 대해 99 내지 152 ng/ml 범위의 평균 정상 상태 화합물 2의 혈장 내 수준이 52 내지 238 ng/ml임을 제시한다. 21일째 마지막 샘플링으로부터의 평균 혈장내 수준은 군 4에 대해서는 99 ng/ml이었고, 군 5에 대해서는 52 ng/ml이었다.
도 3B는 ip 주사 후 시간 대비 플로팅된 화합물 2의 혈장 내 농도를 도시한다. ip 주사로써, 연속 투입으로부터 비롯되는 정상 상태의 혈장 내 수준 대비, 각각의 tid 주사 후의 Cmax (4200 내지 5000 ng/ml) 및 일일 AUC 모두에 대해 화합물 2에의 혈장 노출의 유의한 증가가 초래되었다. 전반적으로, 결과는 화합물 2가 MLL-재배열 백혈병의 마우스 이종이식 모델에서 유의적 항종양 활성을 나타냈다.
참조 인용
본원에 언급된 각각의 특허 문헌 및 과학 문헌의 전 개시내용은 모든 목적을 위해 본원에 참조 인용된다.
균등 양태
본 발명은 그것의 사상 또는 본질적 특성으로부터 벗어나지 않으면서 다른 특정 형태로 구현될 수 있다. 그러므로, 상기 실시양태는 본원에 기재된 본 발명을 제한하기 보다 모든 측면에서 예시적인 것으로 간주되도록 한다. 따라서, 본 발명의 범주는 상기 설명에 의해서라기보다 첨부한 청구범위에 의해 나타내어지고, 청구범위의 의미 및 균등성 범위 내에 속하는 모든 변화는 본 발명에 포함되는 것으로 한다.

Claims (20)

  1. 화학식 (IV)의 화합물 또는 이의 N-산화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 IV]
    Figure pct00328

    상기 식에서,
    A는 O 또는 CH2이고;
    Q는 H, NH2, NHRb, NRbRc, OH, Rb, 또는 ORb이며, 여기서 Rb 및 Rc는 각기 독립적으로 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬, 5 내지 10-원 헤테로아릴, 또는 -M1-T1이고, 여기서, M1은 결합, 또는 할로, 시아노, 히드록실 또는 C1-C6 알콕실로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬 연결기이고, T1는 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이거나, Rb 및 Rc은 이들이 부착된 N 원자와 결합되어, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 치환된 N 원자에 대한 0 또는 1개의 부가적 이종 원자를 가지는 4 내지 7-원 헤테로시클로알킬을 형성하고, Rb, Rc, 및 T1은 각기 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되고;
    X는 N 또는 CRx이며, 여기서, Rx는 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS1이고, RS1은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, RS1은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되고;
    Y는 H, Rd, SO2Rd, 또는 CORd이며, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴이고, Rd은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬술포닐, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되며, 이들 각각의 Rd 상의 C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴 치환기는 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, 할로, 히드록실, 카르복실, C(O)OH, C(O)O-C1-C6 알킬, OC(O)-C1-C6 알킬, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 6-원 헤테로아릴로 임의적으로 추가로 치환되고;
    R1 및 R2는 각기 독립적으로 H, 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, 또는 RS2이며, RS2은 아미노, C1-C6 알콕실, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, 또는 C2-C6 알키닐이며, 각 RS2은 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되고;
    Re, Rf, Rg, 및 Rh는 각기 독립적으로 M2-T2이며, 여기서, M2는 결합, SO2, SO, S, CO, CO2, O, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, NH, 또는 N(Rt)(Rt은 C1-C6 알킬임)이며, T2는 H, 할로, 또는 RS4이고, RS4은 C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이고, O-C1-C4 알킬 연결기, C1-C4 알킬 연결기, Rt, 및 RS4은 각기 할로, 히드록실, 카르복실, 시아노, C1-C6 알킬, C2-C6 알케닐, C2-C6 알키닐, C1-C6 알콕실, 아미노, 모노-C1-C6 알킬아미노, 디-C1-C6 알킬아미노, C3-C8 시클로알킬, C6-C10 아릴, 4 내지 6-원 헤테로시클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환되고,
    m은 0, 1 또는 2이다.
  2. 제1항에 있어서, A는 O인 화합물.
  3. 제1항에 있어서, A는 O이고, m은 2인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, X는 N인 화합물.
  5. 제1항에 있어서, Q는 NH2 또는 NHRb이며, 여기서, Rb는 -M1-T1이고, M1은 결합 또는 C1-C6 알킬 연결기이며, T1은 C3-C8 시클로알킬인 화합물.
  6. 제1항에 있어서, R1 및 R2는 각기 H인 화합물.
  7. 제1항에 있어서, Y는 Rd인 화합물.
  8. 제7항에 있어서, Rd는 C3-C8 시클로알킬 또는 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬인 화합물.
  9. 제7항에 있어서, Rd는 C1-C6 알킬 또는 할로로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬인 화합물.
  10. 제1항에 있어서, Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 할로, 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알콕실, 하나 이상의 할로로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬술포닐, 할로, 히드록시, 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C6 알킬, 하나 이상의 C1-C6 알킬로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬, 또는 하나 이상의 C1-C6 알킬로 임의적으로 치환된 4 내지 8-원 헤테로시클로알킬인 화합물.
  11. 제10항에 있어서, Re, Rf, Rg, 및 Rh 중 하나 이상은 F, Cl, Br, CF3, OCF3, SO2CF3, 옥세타닐, C1-C4 알콕실; C1-C4 알킬 및 CN로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C3-C8 시클로알킬; 및 CN, 할로, C3-C8 시클로알킬, 히드록시 및 C1-C6 알콕실로부터 선택되는 하나 이상의 치환기로 임의적으로 치환된 C1-C4 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 화합물.
  12. 제1항에 있어서, 화합물 1 내지 7, 9-109, 및 111-140로부터 선택되는 것인 화합물.
  13. 치료 유효량의 제1항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
  14. 치료 유효량의 제12항의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
  15. 암의 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 제13항 또는 제14항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 암의 치료 방법.
  16. 혈액암의 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 제13항 또는 제14항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 혈액암의 치료 방법.
  17. 백혈병의 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 제13항 또는 제14항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 백혈병의 치료 방법.
  18. 제17항에 있어서, 상기 백혈병은 급성 골수성 백혈병, 급성 림프성 백혈병 또는 혼합 계통 백혈병인 치료 방법.
  19. 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 장애의 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 제13항 또는 제14항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 염색체 11q23 상의 유전자의 전위에 의해 매개되는 장애의 치료 방법.
  20. DOT1L 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 장애의 치료가 필요한 대상에게 치료 유효량의 제13항 또는 제14항의 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, DOT1L 매개 단백질 메틸화에 의해 매개되는 장애의 치료 방법.
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