CN110092804A - 一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法 - Google Patents

一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110092804A
CN110092804A CN201910260879.6A CN201910260879A CN110092804A CN 110092804 A CN110092804 A CN 110092804A CN 201910260879 A CN201910260879 A CN 201910260879A CN 110092804 A CN110092804 A CN 110092804A
Authority
CN
China
Prior art keywords
base
amino
methyl
purine
heptane
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910260879.6A
Other languages
English (en)
Inventor
李静荣
李安虎
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GUANGZHOU YINGSHENG BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
GUANGZHOU YINGSHENG BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by GUANGZHOU YINGSHENG BIO-TECHNOLOGY Co Ltd filed Critical GUANGZHOU YINGSHENG BIO-TECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201910260879.6A priority Critical patent/CN110092804A/zh
Publication of CN110092804A publication Critical patent/CN110092804A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/167—Purine radicals with ribosyl as the saccharide radical
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供了一类如式(I)和式(II)所示的一种含双环基团的嘌呤化合物化合物及其药学上可接受的盐与其制备方法。所述化合物是组蛋白甲基转移酶DOT1L的抑制剂，可用于治疗因这种酶活性异常所引起的疾病，例如肿瘤等。

Description

一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种涉含双环基团的嘌呤化合物及其药学上可接受的盐和制备方法。
背景技术
DOT1L(Disruptor of telomeric silencing 1-like)是一种组蛋白甲基转移酶(Histone methyltransferase)，其功能是促使组蛋白H3分子中的Lys79(赖氨酸79，简称H3K79)发生甲基化。DOT1L在端粒沉默(telomeric silencing)和转录延长(transcriptionelongation)等基因调节过程中发挥重要的作用，其作用的分子机制是通过与RNA聚合酶II(RNA polymerase II)以及组蛋白H2B分子中的E3泛酸连接酶(E3ubiquitin ligase ofhistone H2B)等遗传学和表观遗传学的调控分子相互反应来实现的。此外，DOT1L还参与DNA损伤与细胞周期的调节。DOT1L在肿瘤，比如乳腺癌、头颈癌、神经母细胞瘤、脑癌、卵巢癌等多种肿瘤，特别是MLL重排白血病的发病中扮演重要角色，是治疗的重要靶点之一。目前DOT1L抑制剂还处于早期的研发阶段，尚未有批准的药物，本发明提供因DOT1L的异常活性而引起的多种肿瘤的治疗药物，具有较大的实用意义。
发明内容
本发明提供了一种具有组蛋白甲基转移酶DOT1L抑制活性的含双环基团的嘌呤化合物或其药学上可接受的盐和其药物组合物，所述化合物包括其消旋体、对映异构体或非对映异构体。并进一步公开它们的制备方法。
本发明的化合物分子结构如式(I)和(II)所示：
式中，
L代表如下所示的螺双环基团A或B，或者稠双环基团C：
其中，s、t、n和m分别独立地为0-2；Q选自氢、氘或-OH；
R1选自氢、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C1-8烯基、C1-8炔基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，且R1可选择性地被一个或多个G1取代；
R2代表1-4个取代基，分别独立地选自氢、氘、卤素、-CN、-NO2、-OH、-CF3、-OCF3、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C1-8烯基、C1-8炔基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、C1-8烷氧基、C1-8环烷氧基或C3-8杂脂环氧基，且R2可选择性地被一个或多个G2取代；
R3和R4分别独立选自氢、氘、卤素、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，且R3和R4可选择性地被一个或多个G3取代；
X选自N或C-R5；Y选自CR6R7、N-R8、O或S；W为N或N＝O；
R5、R6、R7及R8分别独立选自氢、氘、卤素、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，且R5、R6、R7及R8可选择性地被一个或多个G4取代；
其中：G1、G2、G3及G4分别独立地选自氢、氘、卤素、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C1-8烷氧基、C1-8环烷氧基、C3-8杂脂环氧基、C1-8烯基、C1-8炔基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、-OH、-CN、-NO2、-CF3、-OCF3、
-OCH3、-OCH2CH3、-O(i-Pr)、-O(c-Pr)、-SCH3、-S(O)CH3、-SO2CH3、-CO2H、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)NH2、
-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)NHCH3、-OC(O)N(CH3)2、-NHC(O)NHCH3、-NHC(O)N(CH3)2、-NHSO2NHCH3、
-NHSO2N(CH3)2、-SO2NHCH3或-SO2N(CH3)2。
一种如式(I)和(II)所示的化合物，其中，L选自结构式如图1所示，A-1至A-7、A-11至A-77、B-1至B-7或C-1至C-7所示的任何一个基团。
其中，优选W为N；L选自A-1、A-2、A-4、A-7、A-22、A-44、A-77、B-2、B-4、B-7、C-2、C-4或C-7的化合物。
再优选图2所示，如式(III)至(VI)所示的化合物，其中，X、Y、R1、R2、R3和R4的定义同上。
再优选图3所示，如式(VII)至(IX)所示的化合物，其中，X、Y、R1和R的定义同上。
又优选，一种如式(X)至(XI)所示的化合物：
其中，R88选自氢、C1-8烷基或C1-8环烷基，且R88可选择性地被一个或多个G4取代；R1、R2和G4定义同上。
又优选图4所示，(XII)至(XVII)所示化合物，其中，R11选自氢、C1-8烷基或C1-8环烷基，且R11可选择性地被一个或多个G1取代；R22代表1-4个取代基，分别独立地选自氢、氘、卤素、-CN、-NO2、-OH、-CF3、-OCF3、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C1-8烯基、C1-8炔基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、C1-8烷氧基、C1-8环烷氧基或C3-8杂脂环氧基，且R22可选择性地被一个或多个G2取代；
R88选自氢、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，且R88可选择性地被一个或多个G4取代；G1、G2和G4的定义同上。
又优选如式(XII)至(XVII)所示的化合物，其中，R11选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；
R22选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、1-(甲氧基甲基)-1-甲基乙基、1-(羟甲基)-1-甲基乙基、1-甲氧基-1-甲基乙基、1-羟基-1-甲基乙基、-OH、-CN、-NO2、-CF3、-OCH3、-OCH2CH3、-O(i-Pr)、-O(c-Pr)、-OCF3、-OCH2CF3、乙烯基、乙炔基、苯基、吡啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、恶唑基、噻唑基、吡咯烷基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、-SCH3、-S(O)CH3、-SO2CH3、-CO2H、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)NHCH3、-OC(O)N(CH3)2、-NHC(O)NHCH3、-NHC(O)N(CH3)2、-NHSO2NHCH3、-NHSO2N(CH3)2、-SO2NHCH3或-SO2N(CH3)2；R88选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基及叔丁基。
优选如图5所示，如式(XVIII)至(XXII)所示的化合物：其中，R11选自氢、C1-8烷基或C1-8环烷基，且R11可选择性地被一个或多个G1取代；R22代表1-4个取代基，分别独立地选自氢、氘、卤素、-CN、-NO2、-OH、-CF3、-OCF3、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C1-8烯基、C1-8炔基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、C1-8烷氧基、C1-8环烷氧基或C3-8杂脂环氧基，且R22可选择性地被一个或多个G2取代；
R88选自氢、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，且R88可选择性地被一个或多个G4取代；G1、G2和G4的定义同上。
又优选，如式(XVIII)至(XXII)所示的化合物，其中，R11选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；R22选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、1-(甲氧基甲基)-1-甲基乙基、1-(羟甲基)-1-甲基乙基、1-甲氧基-1-甲基乙基、1-羟基-1-甲基乙基、-OH、-CN、-NO2、-CF3、-OCH3、-OCH2CH3、-O(i-Pr)、-O(c-Pr)、-OCF3、-OCH2CF3、乙烯基、乙炔基、苯基、吡啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、恶唑基、噻唑基、吡咯烷基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、-SCH3、-S(O)CH3、-SO2CH3、-CO2H、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)NHCH3、-OC(O)N(CH3)2、-NHC(O)NHCH3、-NHC(O)N(CH3)2、-NHSO2NHCH3、-NHSO2N(CH3)2、-SO2NHCH3或-SO2N(CH3)2；R88选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基及叔丁基。
特别优选如权利要求书第7项所述的化合物。
本发明化合物可通过如下方法制备：
1、结构式如图6所示的E-7、E-8、E-9化合物的制备方法(反应路线图Scheme 1如图6所示)：
第一步：起始化合物E-1与含螺环的酮(E-2)在还原剂存在下发生还原胺化反应生成化合物E-3；
第二步：化合物E-3在三甲基铝存在下与二胺化合物E-4反应得到中间体E-5；
第三步：E-5在酸存在下关环生成苯并咪唑产物E-6；
第四步：化合物E-6通过酸水解得到产物E-7，为非对映异构体的混合物；
第五步：化合物E-7通过手性拆分得到非对映异构体产物E-8和E-9。
2、结构式如图7所示的F-7、F-8、F-9化合物的制备方法(反应路线图Scheme 2如图7所示)：
第一步：起始化合物E-3在还原剂存在下被还原成化合物F-1；
第二步：化合物F-1与溴化试剂发生溴化反应(Bromination)得到中间体F-2；
第三步：F-2通过碱促进的消除反应给出中间体F-3；
第四步：F-3中的双键被氧化断裂生成酮中间体F-4；
第五步：化合物F-5用丁基锂处理生成中间体锂试剂，再与F-4发生加成反应得到中间体醇F-6；
第六步：F-6通过酸性条件下水解得到化合物F-7，为非对映异构体的混合物；
第七步：化合物F-7通过手性拆分得到非对映异构体产物F-8和F-9。
3、结构式如图8所示的G-6化合物的制备方法(反应路线图Scheme 3如图8所示)：
第一步：起始化合物E-1通过与酮G-1在还原剂存在下发生还原胺化反应得到化合物G-2；
第二步：中间体G-2用酸脱去保护基生成胺类化合物G-3；
第三步：G-3在碱存在下与苯并咪唑化合物G-4发生取代反应得到产物G-5；
第四步：化合物G-5通过酸水解得到目标产物G-6。
G-6化合物也可通过以下方法制备(反应路线图Scheme 4如图9所示)：
第一步：氯化物H-1与胺H-2在碱存在下或不额外加碱的条件下发生取代反应生成化合物H-3；
第二步：化合物H-3通过还原胺化反应或者与R1-LG(H-4)在碱(Base)的存在下发生取代反应得到化合物H-5；
第三步：中间体H-5用酸脱去保护基生成胺H-6；
第四步：H-6在碱存在下与苯并咪唑化合物G-4反应得到目标产物G-6。
经试验证明，本发明化合物或其药学上可接受的盐对组蛋白甲基转移酶DOT1L具有很强的抑制作用，可用于抑制肿瘤，尚未发现毒性。
本发明化合物施用于包括人在内的哺乳动物的有效剂量为每日每千克体重0.1－500毫克，优化的剂量为每日每千克体重使用1－100毫克。
附图说明
图1本发明化合物L取代基团的结构式图示；
图2是本发明(III)至(VI)所示化合物的结构式；
图3是本发明(VII)至(IX)所示化合物的结构式；
图4是本发明XII至XVII所示化合物的结构式；
图5是(XVIII)至(XXII)所示的化合物结构式；
图6是本发明E-7、E-8、E-9化合物的反应路线图；
图7是本发明F-7、F-8、F-9化合物的反应路线图；
图8是本发明G-6化合物的反应路线图；
图9是本发明G-6化合物的另一反应路线图；
图10是实施例1反应路线图；
图11是实施例2 2a/b、2a和2b化合物的反应路线图；
图12是实施例3a/b、3a和3b化合物的反应路线图；
图13是实施例4化合物的反应路线图；
图14是实施例6 6a/b、6a和6b化合物的反应路线图；
图15是实施例7 7a/b、7a和7b化合物的反应路线图；
图16是实施例8 8a化合物的反应路线图；
图17是实施例8 8b化合物的反应路线图；
图18是实施例9化合物的反应路线图；
图19是实施例10化合物的反应路线图；
图20是实施例11化合物的反应路线图；
图21是实施例12化合物的反应路线图；
图22是实施例13化合物的反应路线图；
图23是实施例14化合物的反应路线图；
图24是实施例15化合物的结构通式图。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。
下面列出在实施例中出现的英文缩写及相应的中文含义。如果实施例中出现没有列于此的缩写，则代表普遍接受的含义。
HPLC：高效液相色谱；SFC：超临界流体色谱；[M+H]+：质谱中的分子离子峰；m/z：质荷比；δ：化学位移；DMSO-d6：六氘代二甲基亚砜；CDCl3：氘代氯仿；CD3OD：氘代甲醇；TMS：四甲基硅烷；HCl：氯化氢或盐酸；pTSA：对甲基苯磺酸；Pd/C：钯/碳催化剂；DEAD：偶氮二甲酸二乙酯；mCPBA：间氯过氧苯甲酸。
一般实验条件：
核磁共振氢谱及碳谱于Varian 300或400MHz或Bruker 300或400MHz仪器上获得(氘代DMSO，氘代氯仿，氘代甲醇等为溶剂，TMS为内标)。质谱由液相色谱-质谱联用仪获得(采用ESI或APCI离子源ZQ4000，美国Waters公司)。紫外光谱由日本日立公司的UV-3010紫外分光光度计测得。红外光谱使用NICOLET6700红外光谱分析仪(KBr压片)。高效液相色谱使用Waters 2695 ZORBAX高效液相色谱仪(Bx-C85μ150×4.6mm色谱柱)或另外说明。熔点的测定使用Electrothermal数字式熔点仪IA9100，并且未校正。
起始原料、试剂及溶剂从下列供应商购买：Beta-Pharma；Shanghai PIChemicals；AndaChem；Taiyuan；Shanghai FWD Chemicals；Sigma-Aldrich,Milwaukee,WI,USA；Acros,Morris Plains,NJ,USA；Frontier Scientific,Logan,Utah,USA；Alfa Aesar,Ward Hill,MA,USA等或利用文献报道的方法合成。除非特别指出，溶剂一般不经干燥，而直接使用供应商的产品或经过分子筛干燥。
实施例1
9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-([[6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(1)：
其制备反应路线如图10所示，方法如下：
第一步：[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲醇(I-2)的合成：
往(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-(羟甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(腺苷,I-1,50.0g,187mmol)的丙酮(1L)溶液中，依次加入对甲基苯磺酸(96.6g,561mmol)和原甲酸三乙酯(83.1g,561mmol)，所得溶液在室温下搅拌14小时，然后用饱和碳酸钾水溶液碱化至pH≈8。将反应混合物过滤，滤液进一步真空浓缩至出现白色固体。过滤收集固体产物，并用乙酸乙酯洗涤，真空干燥，得到45g(产率：78％)[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲醇(I-2)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),8.34(s,1H),7.34(s,2H),6.12(d,J＝3.2Hz,1H),5.34(dd,J＝6.4,3.2Hz,1H),5.24(s,1H),4.96(dd,J＝6.4,2.4Hz,1H),4.22-4.19(m,1H),3.58-3.50(m,2H),1.54(s,3H),1.35(s,3H).MS(ESI+)m/z:308.1[M+1]+。
第二步：2-[[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基]-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-酮(I-4)的合成：
在0℃及氮气下，往[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲醇(I-2,50.0g,163mmol)，邻苯二甲酰亚胺(I-3,28.7g，195mmol)和三苯基膦(46.9g,179mmol)的四氢呋喃(500mL)溶液中滴加偶氮二甲酸二乙酯(DEAD,31.1g,179mmol)，所得溶液在室温下搅拌3小时，逐渐出现黄色沉淀，过滤收集固体产物，用乙醚(200mL)洗涤，真空干燥，得到52g(产率：73％)的2-[[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基]-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-酮(I-4)，为黄色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,1H),7.87(s,1H),7.85-7.79(m,4H),7.29(s,2H),6.17(d,J＝1.6Hz,1H),5.43(dd,J＝6.4,2.0Hz,1H),5.17(dd,J＝6.4,4.0Hz,1H),4.37(dd,J＝10.0,6.0Hz,1H),3.94-3.84(m,2H),1.52(s,3H),1.31(s,3H).MS(ESI+)m/z:437.1[M+1]+。
第三步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(氨基甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(I-5)的合成：
2-[[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基]-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-酮(I-4,30.0g,68.7mmol)的乙醇(300mL)溶液中加入水合肼(64％,50mL,1.0mol)，所得溶液加热回流2小时，然后冷却至室温，过滤除去白色沉淀，将滤液真空浓缩，干燥得到15g(产率：64％)的9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(氨基甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(I-5)，为灰白色固体(64％)。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),8.16(s,1H),7.32(s,2H),6.07(d,J＝3.2Hz,1H),5.44(dd,J＝6.4,3.6Hz,1H),4.97(dd,J＝6.4,2.8Hz,1H),4.10-4.07(m,1H),2.74-2.65(m,2H),1.53(s,3H),1.32(s,3H).MS(ESI+)m/z:307.1[M+1]+。
第四步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-二甲基-6-[[(丙烷-2-基)氨基]甲基]-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(I-6)的合成：
往9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(氨基甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(I-5,2.35g,39.1mmol)的甲醇(60mL)和丙酮(60mL)溶液中依次加入乙酸(2.35g,39.1mmol)和氰基硼氢化钠(3.70g,58.7mmol)，将所得溶液在室温下搅拌2小时，然后用饱和碳酸钠水溶液(40mL)稀释。分离收集有机相，水相用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。将有机层合并，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残余物用硅胶柱色谱法纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到5.2g(产率：76％)的9-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-二甲基-6-[[(丙烷-2-基)氨基]甲基]-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(I-6)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),8.16(s,1H),7.35(s,2H),6.16(d,J＝2.7Hz,1H),5.48(dd,J＝6.3,2.7Hz,1H),5.00(dd,J＝6.3,3.0Hz,1H),4.28-4.23(m,1H),2.86-2.76(m,3H),1.54(s,3H),1.33(s,3H),0.97(d,J＝6.6Hz,3H),0.93(d,J＝6.3Hz,3H).MS(ESI+)m/z:349.2[M+1]+。
第五步：6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(I-8)的合成：
往9-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-二甲基-6-[[(丙烷-2-基)氨基]甲基]-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(I-6,2.28g，6.54mmol)和6-氧代螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(I-7,1.00g,5.95mmol)的1,2-二氯乙烷(20mL)溶液中依次加入乙酸(1.08g,18.0mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(3.80g,17.9mmol)，所得溶液混和物加热回流14小时，然后冷却至室温，用二氯甲烷(30mL)稀释，用饱和碳酸钠水溶液(15mL×2)洗涤，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到1.8g(产率：54％)的6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(I-8)，为浅黄色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.31(s,1H),8.16(s,1H),7.32(s,2H),6.14(s,1H),5.56(d,J＝5.4Hz,1H),4.96(d,J＝3.9Hz,1H),4.10-4.07(m,1H),3.57(s,3H),3.02-2.96(m,2H),2.83-2.79(m,1H),2.65-2.57(m,1H),2.32-1.86(m,7H),1.77-1.71(m,2H),1.52(s,3H),1.33(s,3H),0.94(d,J＝6.6Hz,3H),0.72(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:501.1[M+1]+。
第六步：6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-(2-氨基-4-叔丁基苯基)螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺及6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-(2-氨基-5-叔丁基苯基)螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺(I-10a和I-10b)的合成：
在0℃和氮气下，往4-叔丁基苯-1,2-二胺(I-9,200mg,1.22mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三甲基铝的己烷溶液(2.0N,5.0mL,10mmol)，所得溶液在0℃下搅拌1小时，然后加入6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(I-8,500mg,1mmol)。反应混合物继续于室温下搅拌4小时，冷却至0℃，用饱和氯化铵溶液(10mL)淬灭，剧烈搅拌10分钟，然后用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并有机相，用硫酸钠干燥并过滤，将滤液真空浓缩得到6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-(2-氨基-4-叔丁基苯基)螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺及6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-(2-氨基-5-叔丁基苯基)螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺(I-10a和I-10b)的混合物，其为棕色固体，将其不经进一步纯化用于下一步反应。分析数据：MS(ESI+)m/z:633.5[M+1]+。
第七步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-([[6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(1)：
未经纯化的6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-(2-氨基-4-叔丁基苯基)螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺及6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-(2-氨基-5-叔丁基苯基)螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺(I-10a和I-10b)的混合物(1.30g,～2.05mmol)的乙酸(20mL)溶液在60℃下搅拌4小时，然后真空浓缩，用2N氨水溶液调节至pH≈9，并将得到的混合物用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)，得到750mg(产率：59％)的9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-([[6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(1)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.93(s,1H),8.32(s,1H),8.18(s,1H),7.50-7.16(m,5H),6.15(d,J＝1.8Hz,1H),5.57(d,J＝4.5Hz,1H),4.99(dd,J＝6.0,2.4Hz,1H),4.13-4.10(m,1H),3.54-3.48(m,1H),3.10-3.04(m,1H),2.88-2.81(m,1H),2.68-2.62(m,1H),2.40-2.15(m,6H),1.94-1.75(m,3H),1.53(s,3H),1.34(s,3H),1.32(s,9H),0.94(d,J＝6.6Hz,3H),0.75-0.72(m,3H).MS(ESI+)m/z:615.6[M+1]+。
实施例2a/b、2a和2b
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(2a/b)、(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(2a)和(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(2b)：
其制备反应路线图如图11所示，方法如下：
0℃下，将9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-([[6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(实施例1,700mg,1.14mmol)溶解于2.5N氯化氢的甲醇溶液(15mL)中，将所得溶液在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩，用2N氨水溶液将pH值调节至～9。浓缩至干，残留物用反相HPLC纯化(仪器：GILSON(GX-281)；柱：Xbridge RP18,19x150mm,5um；流动相：20～45％乙腈的水溶液(含0.05％碳酸氢铵))得到(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(2a/b)。该混合物进一步使用手性SFC拆分成两个纯对映异构体(柱：CHIRALCEL OD-H,20x250mm,5um；流动相35％甲醇的CO2(含0.1％二乙基胺)；流速：45g min-1)，结果如下：
异构体1(暂定为2a)：在手性SFC上的保留时间较短(3.66min)：240mg(产率：37％)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ8.32(s,1H),8.23(s,1H),7.49(s,1H),7.40(d,J＝8.4Hz,1H),7.28(d,J＝8.4Hz,1H),6.00(d,J＝4.0Hz,1H),4.78(t,J＝4.8Hz,1H),4.31(t,J＝5.2Hz,1H),4.14-4.09(m,1H),3.63-3.59(m,1H),3.33-3.25(m,1H),3.04-3.01(m,1H),2.93(dd,J＝14.8,4.4Hz,1H),2.73(dd,J＝14.8,7.6Hz,1H),2.49-2.30(m,5H),2.11-1.96(m,3H),1.36(s,9H),1.04(d,J＝6.4Hz,3H),0.96(d,J＝6.4Hz,3H).MS(ESI+)m/z:575.3[M+1]+。
异构体2(暂定为2b)：在手性SFC上的保留时间较短(4.88min)：269mg(产率：41％)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ8.32(s,1H),8.23(s,1H),7.49(s,1H),7.40(d,J＝8.4Hz,1H),7.26(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),6.01(d,J＝4.4Hz,1H),4.80(t,J＝4.8Hz,1H),4.31(t,J＝5.6Hz,1H),4.12-4.10(m,1H),3.62-3.57(m,1H),3.30-3.22(m,1H),3.08-3.01(m,1H),2.91(dd,J＝14.4,4.4Hz,1H),2.70(dd,J＝14.4,7.2Hz,1H),2.49-2.26(m,5H),2.06-2.01(m,2H),1.97-1.92(m,1H),1.35(s,9H),1.03(d,J＝6.4Hz,3H),0.95(d,J＝6.4Hz,3H).MS(ESI+)m/z:575.3[M+1]+。
实施例3a/b、3a和3b
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-(S/R)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)亚硝基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(3a/b)、(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-(S)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)亚硝基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(3a)和(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-(R)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)亚硝基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(3b)：
其制备反应路线图如图12所示，方法如下：
往(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(2a,20mg,0.03mmol)的二恶烷/水(2mL/0.6mL)溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(mCPBA,6mg)，所得混合物在室温下搅拌12小时，真空浓缩，残留物(3a/b)用制备型HPLC纯化(柱：Xbridge C1819*150mm,5um；流动相A：10mmol/L碳酸氢铵水溶液,流动相B:乙腈；流速:30mL/min；梯度:8min时间15％B→65％B；检测：UV 254nm)，得到如下结果：
异构体1(暂定为3a)：3.3mg(产率：16％)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.48(s,1H),8.29(s,1H),7.72-7.58(m,3H),5.97(d,J＝3.4Hz,1H),4.55(q,J＝8.0Hz,1H),4.47(t,J＝4.0Hz,1H),4.35-4.26(m,2H),4.13(dd,J＝14.3,7.2Hz,1H),4.02-3.73(m,3H),2.78-2.74(m,1H),2.70-2.53(m,5H),2.38-2.35(m,1H),1.34(s,12H),1.28(d,J＝6.4Hz,3H).MS(ESI+)m/z:591[M+1]+。
异构体2(暂定为3b)：4.3mg(产率：24％)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),8.30(s,1H),7.74-7.58(m,3H),5.99(d,J＝3.8Hz,1H),4.54(dd,J＝5.0,3.8Hz,1H),4.52-4.38(m,2H),4.34(t,J＝5.4Hz,1H),4.25-4.10(m,1H),4.08-3.81(m,2H),3.75(d,J＝14.5Hz,1H),2.75-2.52(m,5H),2.39-2.22(m,2H),1.34(s,9H),1.29(d,J＝6.5Hz,3H),1.23(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI+)m/z:591[M+1]+。
实施例4
9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[([6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基)甲基]-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(4)：
其制备反应路线图如图13所示，方法如下：
第一步：2-(4-氟苯基)-2-甲基丙酸甲酯(IV-2)的制备：
在0℃搅拌下，向氢化钠(60％在矿物油中,2.62g,65.5mmol)的无水四氢呋喃(60mL)悬浮液中滴加2-(4-氟苯基)乙酸甲酯(IV-1,5g,29.73mmol)。所得混合物在0℃下搅拌0.5小时，然后缓慢加入碘甲烷(12.7g,89.4mmol)，加完后，反应混合物在50℃下搅拌5小时后，用冰水(100mL)淬灭，乙酸乙酯(40mL×3)萃取，合并有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色油状的2-(4-氟苯基)-2-甲基丙酸甲酯(IV-2,5.7g,产率：98％)。分析数据：1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ7.32-7.26(m,2H),7.03-6.97(m,2H),3.65(s,3H),1.56(s,6H)。
第二步：2-(4-氟苯基)-2-甲基丙烷-1-醇(IV-3)的制备：
在0℃下，往2-(4-氟苯基)-2-甲基丙酸甲酯(IV-2,5.7g,29.05mmol)的无水四氢呋喃(50mL)溶液中缓慢滴加氢化铝锂(1.65g,43.6mmol)的无水四氢呋喃(40mL)溶液。加完后，将反应温热至室温并搅拌4小时，用冰水(50mL)淬灭反应，然后加入15％氢氧化钠水溶液(5mL)。过滤除去固体，滤液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色油状粗产物2-(4-氟苯基)-2-甲基丙烷-1-醇(IV-3,5.5g)。无需进一步纯化，直接用于下一步反应。分析数据：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38-7.35(m,2H),7.06-7.02(m,2H),3.61(s,2H),1.35(s,6H)。
第三步：1-氟-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯(IV-4)的制备：
在0℃下，往氢化钠(60％在矿物油中,2.4g,60mmol)的无水四氢呋喃(40mL)混悬液中缓慢加入2-(4-氟苯基)-2-甲基丙烷-1-醇(IV-3,5.1g,粗品)的无水四氢呋喃(15mL)溶液，加完后，将反应升温至室温并搅拌1小时，缓慢加入碘甲烷(8.6g,60.5mmol)并搅拌5小时。将反应混合物用冰水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-30％乙酸乙酯的石油醚溶液)，得到浅黄色油状的1-氟-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯(IV-4,4.1g，两步产率：77％)。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.41-7.36(m,2H),7.12-7.06(m,2H),3.32(s,2H),3.20(s,3H),1.24(s,6H)。
第四步：1-氟-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-2-硝基苯(IV-5)的制备：
将1-氟-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯(IV-4,3.6g,19.75mmol)冷却至-20℃，并在此温度和搅拌下，缓慢滴加浓硫酸(32mL)，随后在-20℃下缓慢加入硝酸(3.6mL)，将所得混合物搅拌30分钟，然后倒入冰(500g)中，并用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-5％乙酸乙酯的石油醚溶液)，得到黄色油状产物1-氟-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-2-硝基苯(IV-5,2.4g，产率：53％)。分析数据：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(dd,J＝7.2,2.5Hz,1H),7.67(ddd,J＝8.8,4.2,2.5Hz,1H),7.23(dd,J＝10.6,8.8Hz,1H),3.41(s,2H),3.33(s,3H),1.36(s,6H)。
第五步：1-叠氮基-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-2-硝基苯(IV-6)的制备：
往1-氟-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-2-硝基苯(IV-5,3.4g,15mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(25mL)溶液中加入叠氮化钠(1.95g,30mmol)，所得混合物在室温下搅拌12小时后，用水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色油状的粗产物1-叠氮基-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-2-硝基苯(IV-6,4.1g,纯度：90％，产率：99％)。分析数据：1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝2.3Hz,1H),7.65(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.26(d,J＝8.5Hz,1H),3.38(s,2H),3.31(s,3H),1.34(s,6H)。
第六步：4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯-1,2-二胺(IV-7)的制备：
往1-叠氮基-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-2-硝基苯(IV-6,2.9g,11.59mmol)的乙醇(30mL)溶液中加入10％Pd/C(0.5g)，所得混合物在室温下搅拌氢化12小时。过滤除去固体，滤液真空浓缩至干，得到深红色固体状的4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯-1,2-二胺(IV-7,2.1g,产率：91％)。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.54(d,J＝2.1Hz,1H),6.42(d,J＝8.0Hz,1H),6.37(dd,J＝8.0,2.1Hz,1H),4.32(s,2H),4.25(s,2H),3.22(s,2H),3.21(s,3H),1.16(s,6H).MS(ESI+)m/z:195[M+1]+。
第七步：6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-[2-氨基-5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯基]螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺和6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-[2-氨基-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯基]螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺(IV-8a和IV-8b)的制备：
在0℃下，往4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯-1,2-二胺(IV-7,580mg,2.99mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中，缓慢地加入2M的三甲基铝己烷溶液(10mL,20mmol)。所得溶液在0℃下搅拌1小时，然后加入6–([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(I-8,1g,2.00mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，所得混合物在室温下搅拌12小时，然后在0℃下用饱和氯化铵水溶液(20mL)淬灭，用二氯甲烷(30mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90/10/1))得到6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-[2-氨基-5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯基]螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺和6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-[2-氨基-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯基]螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺的混合物(IV-8a和IV-8b)，为浅棕色固体(920mg,产率：69％)。分析数据：MS(ESI+)m/z:663[M+1]+。
第八步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[([6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基)甲基]-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(4)的制备：
6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-[2-氨基-5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯基]螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺和6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-N-[2-氨基-4-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)苯基]螺[3.3]庚烷-2-甲酰胺的混合物(IV-8a和IV-8b,850mg,1.28mmol)的乙酸(20mL)溶液在65℃搅拌12小时，然后真空浓缩，用2N碳酸氢钠水溶液将将pH值调节至～9，混合物用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(90/10/1))得到9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[([6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基)甲基]-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(4,720mg,产率：87％)。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.95(s,1H),8.32(s,1H),8.18(s,1H),7.50-7.20(m,4H),7.15(d,J＝9.0Hz,1H),6.15(d,J＝1.8Hz,1H),5.56(d,J＝4.5Hz,1H),4.98(dd,J＝6.3,2.7Hz,1H),4.13-4.11(m,1H),3.54-3.46(m,1H),3.37(s,2H),3.20(s,3H),3.12-3.04(m,1H),2.85-2.78(m,1H),2.64-2.57(m,1H),2.38-2.14(m,6H),1.96-1.72(m,3H),1.53(s,3H),1.33(s,3H),1.22(s,6H),0.94(d,J＝6.6Hz,3H),0.75-0.72(m,3H).MS(ESI+)m/z:645[M+1]+。
实施例5a/b、5a和5b
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)/(2R,6S)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇(5a/b)、(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇(5a)和(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6S)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇(5b)：
其制备方法如下：
9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[([6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基)甲基]-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(4,840mg,1.30mmol)溶于2N的氯化氢的甲醇溶液(20mL)中，所得溶液在室温下搅拌12小时。将所得混合物真空浓缩，残余物用反相HPLC纯化(柱:X Bridge C18,19*150mm,5um；流动相A:Water/10mmol/L碳酸氢铵,流动相B:乙腈；流速:30mL/min；梯度:20％B to 70％B in 10min；UV:254nm)，得到5a和5b的混合物(5a/b)，该混合物进一步使用手性SFC分离(仪器：Prep SFC80-2；柱：CHIRALCEL OD-H,20*250mm；流动相：CO2(65％)+甲醇(含0.1％异丙醇)(35％)；流速:50mL/min；检测：UV:254nm)，得到如下结果：
异构体1(暂定为5a)：在手性SFC上的保留时间较短(1.094min)：21.3mg(产率：2.7％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.30(s,1H),8.23(s,1H),7.50(d,J＝1.7Hz,1H),7.41(d,J＝8.5Hz,1H),7.28(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),6.01(d,J＝4.2Hz,1H),4.78(dd,J＝5.4,4.3Hz,1H),4.36(t,J＝5.5Hz,1H),4.15(d,J＝6.5Hz,1H),3.62(q,J＝8.7Hz,1H),3.50-3.43(m,1H),3.47(s,2H),3.29(s,3H),3.25-2.91(m,3H),2.56-2.32(m,5H),2.19-2.08(m,3H),1.36(s,6H),1.13(d,J＝6.6Hz,3H),1.07(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI+)m/z:605[M+1]+。
异构体2(暂定为5b)：在手性SFC上的保留时间较长(1.640min)：70.2mg(产率：8.9％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.32(s,1H),8.22(s,1H),7.50(s,1H),7.41(d,J＝8.5Hz,1H),7.27(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),5.99(d,J＝4.4Hz,1H),4.78(dd,J＝5.4,4.4Hz,1H),4.31(t,J＝5.3Hz,1H),4.15-4.04(m,1H),3.63(q,J＝8.7Hz,1H),3.47(s,2H),3.29(s,3H),3.06–2.92(m,2H),2.79-2.72(m,1H),2.58-2.26(m,5H),2.17-1.93(m,3H),1.36(s,6H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),0.99(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:605[M+1]+。
实施例6a/b、6a和6b
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)/(2R,6S)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇(6a/b)、(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇(6a)和(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6S)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇(6b)：
其制备反应路线图如图14所示，方法如下：
在-78℃及氮气下，往9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[([6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基)甲基]-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(4,600mg,0.93mmol)，碘化钠(200mg)和15-冠-5(300mg)的二氯甲烷(20mL)溶液中缓慢滴加1M的三溴化硼二氯甲烷溶液(1.8mL,1.8mmol)，加完后升至室温，继续搅拌2小时，加入30mL水淬灭反应。所得混合物用二氯甲烷(50mL)萃取，收集水相并真空浓缩，残余物用反相HPLC纯化(柱：XbridgeC18 19*150mm,5um；流动相A:10mmol碳酸氢铵水溶液,流动相B:乙腈；流速:25ml/min；梯度:10％B to 64％B in 17min；检测：254nm)，得到得到(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇(6a)和(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6S)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇(6b)的混合物(6a/6b)，该混合物进一步使用手性SFC分离(仪器：Prep SFC80-2；柱：CHIRALCEL OD-H,20*250mm；流动相：CO2(65％)+甲醇(含0.1％异丙醇)(35％)；流速:50mL/min；检测：UV:254nm)，得到如下结果：
异构体1(暂定为6a)：在手性SFC上的保留时间较短(1.190min)：78.6mg(产率：14％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.31(s,1H),8.22(s,1H),7.51(s,1H),7.42(d,J＝8.5Hz,1H),7.27(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),5.98(d,J＝4.4Hz,1H),4.77(dd,J＝5.4,4.3Hz,1H),4.30(t,J＝5.4Hz,1H),4.11(dt,J＝7.2,4.8Hz,1H),3.69-3.52(m,3H),3.37-3.29(m,1H),3.11–2.86(m,2H),2.87-2.67(m,1H),2.57-2.23(m,5H),2.15-1.92(m,3H),1.36(s,6H),1.06(d,J＝6.6Hz,3H),1.00(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:591[M+1]+。
异构体2(暂定为6b)：在手性SFC上的保留时间较长(1.678min)：75.6mg(产率：14％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.32(s,1H),8.22(s,1H),7.52(s,1H),7.42(d,J＝8.5Hz,1H),7.27(dd,J＝8.6,1.7Hz,1H),5.99(d,J＝4.4Hz,1H),4.78(t,J＝4.9Hz,1H),4.31(t,J＝5.3Hz,1H),4.11(dt,J＝7.5,4.8Hz,1H),3.69-3.51(m,3H),3.36-3.21(m,1H),3.15–2.88(m,2H),2.86–2.69(m,1H),2.59-2.22(m,5H),2.19-2.04(m,3H),1.36(s,6H),1.08(d,J＝6.7Hz,3H),0.99(d,J＝6.5Hz,3H).MS(ESI+)m/z:591[M+1]+。
实施例7 7a/b、7a和7b
(2R,6R)/(2S,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7a/b)、(2R,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7a)和(2S,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7b)：
其制备反应路线图如图15所示，方法如下：
第一步：5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑(VII-1)的合成：
4-叔丁基苯-1,2-二胺(I-9,2g,12.18mmol)和甲酸(1mL)在三甲氧基甲烷(20mL)中的溶液在80℃下搅拌12小时。将反应混合物真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：乙酸乙酯)，得到5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑(VII-1)，为白色固体(2g,产率：94％)。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.28(s,1H),8.14(s,1H),7.61-7.45(m,2H),7.26(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),1.33(s,10H).MS(ESI+)m/z:175[M+1]+。
第二步：5-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑(VII-2a)和6-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑(VII-2b)的合成：
往5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑(VII-1,2g,11.48mmol)和三甲氧基甲烷(3.7g)的甲苯(30mL)溶液中加入对甲苯磺酸(200mg)。将所得混合物加热回流12小时，真空浓缩，将残余物用甲苯(20mL)稀释。在冰水冷却下，依次加入N,N-二异丙基乙胺(1mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，所得溶液用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，残留物硅胶柱色谱纯化(洗脱液：乙酸乙酯(含1％三乙胺))，得到黄色油状的5-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑(VII-2a)及其区域异构体6-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑(VII-2b)(1.6g,产率：56％)。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,0.55H),8.25(s,0.45H),7.68-7.49(m,2H),7.37-7.34(m,1H),6.48(s,0.45H),6.41(s,0.55H),3.35(s,3H),3.31(s,3H),1.34(s,9H).MS(ESI+)m/z:249[M+1]+。
第三步：[6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基]甲醇(VII-3)的合成：
往氢化锂铝(410mg,10.80mmol)的无水四氢呋喃(30mL)悬浮液中加入6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-羧酸甲酯(I-8,3g,6.0mmol)的无水四氢呋喃(10mL)溶液。反应混合物在0℃下搅拌3小时，然后加入水(10mL)和1M氢氧化钠水溶液(10mL)淬灭反应。过滤除去固体，滤液用乙酸乙酯(30mL×4)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到[6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基]甲醇(VII-3,2.8g,纯度：～90％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.27(s,1H),8.24(s,1H),6.18(d,J＝2.1Hz,1H),5.56(dd,J＝6.2,2.1Hz,1H),5.02(dd,J＝6.3,3.2Hz,1H),4.27-4.22(m,1H),3.44(d,J＝6.8Hz,2H),3.10-3.04(m,1H),2.95-2.84(m,1H),2.72-2.62(m,1H),2.58-2.50(m,1H),2.38-2.23(m,1H),2.10-1.98(m,2H),1.94-1.69(m,5H),1.66-1.62(m,1H),1.59(s,3H),1.39(s,3H),0.96(d,J＝6.7Hz,3H),0.77(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:473[M+1]+。
第四步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[6-(溴甲基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(VII-4)的合成：
往[6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-基]甲醇(VII-3,2.8g,～5.9mmol)和四溴甲烷(2.2g,6.63mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入三苯基膦(2.0g,7.63mmol)。所得混合物在室温下搅拌12小时，加入水(25mL)淬灭反应，用4N盐酸将pH值调节至3～4。用二氯甲烷(25mL×4)萃取，收集水相，用饱和碳酸钾溶液碱化至pH8～9，用二氯甲烷(30mL×4)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[6-(溴甲基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(VII-4,1.8g，产率：54％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.27(s,1H),8.25(s,1H),6.20(d,J＝2.1Hz,1H),5.57(dd,J＝6.2,2.1Hz,1H),5.03(dd,J＝6.3,3.2Hz,1H),4.26-4.23(m,1H),3.39(d,J＝6.8Hz,2H),3.10-3.01(m,1H),2.93-2.88(m,1H),2.68-2.66(m,1H),2.58-2.51(m,2H),2.18-1.75(m,8H),1.60(s,3H),1.41(s,3H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H),0.79(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:535[M+1,79Br]+,537[M+1,81Br]+。
第五步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-甲基-6-[({6-亚甲基螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(VII-5)的合成：
往9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[6-(溴甲基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(VII-4,1.8g,3.36mmol)和PEG600(5g)的甲苯(20mL)溶液中加入氢氧化钠(1.35g,33.75mmol)的水(10mL)溶液。所得混合物在90℃下搅拌12小时后，用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(15/1/0.05))，得到9-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-甲基-6-[({6-亚甲基螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(VII-5,500mg，产率：33％)，为无色油状物。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.27(s,1H),8.24(s,1H),6.19(d,J＝2.1Hz,1H),5.56(dd,J＝6.4,2.1Hz,1H),5.04(dd,J＝6.4,3.2Hz,1H),4.70(q,J＝2.4Hz,2H),4.26-4.22(m,1H),3.16-3.08(m,1H),2.92(q,J＝6.6Hz,1H),2.78-2.55(m,4H),2.51(d,J＝2.6Hz,2H),2.10-1.92(m,2H),1.85-1.76(m,2H),1.59(s,3H),1.39(s,3H),0.98(d,J＝6.7Hz,3H),0.78(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:455[M+1]+。
第六步：6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-酮(VII-6)的合成：
往9-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-甲基-6-[({6-亚甲基螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(VII-5,500mg,1.10mmol)的二恶烷(10mL)和水(3mL)溶液中依次加入高碘酸钠(235mg)和四氧化锇(5％水溶，0.5mL)，所得溶液在室温下搅拌3小时，将混合物用20mL水稀释并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(15/1/0.05))，得到6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-酮(VII-6,170mg，产率：34％)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.28(s,1H),8.24(s,1H),6.19(d,J＝2.2Hz,1H),5.56(td,J＝6.1,2.1Hz,1H),5.04(td,J＝6.3,2.9Hz,1H),4.32-4.18(m,1H),3.24-3.18(m,1H),3.06(q,J＝2.9Hz,2H),3.00-2.85(m,3H),2.80-2.49(m,2H),2.22-1.99(m,4H),1.59(s,3H),1.43(s,3H),1.06(d,J＝6.4Hz,3H),0.84(d,J＝6.4Hz,3H).MS(ESI+)m/z:457[M+1]+。
第七步：6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-[5-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-二醇(VII-7a)和6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-[6-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-二醇(VII-7b)的合成：
-78℃下，往5-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑(VII-2a)和6-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑(VII-2b)的混合物(VII-2a/b,522mg,2.10mmol)的无水四氢呋喃(15mL)溶液中加入正丁基锂(0.85mL,2.5M己烷溶液)，所得混合物在-78℃搅拌40分钟，然后滴加6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)螺[3.3]庚烷-2-酮(VII-6,240mg,0.53mmol)的干燥四氢呋喃(3mL)溶液。反应混合物在-78°～-20℃下搅拌2小时后，在-78℃下用饱和氯化铵水溶液(1mL)淬灭反应。所得混合物用饱和盐水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：乙酸乙酯/甲醇/三乙胺(15/1/0.1))，得到6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-[5-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-二醇(VII-7a)和6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-[6-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-二醇(VII-7b)的混合物(170mg，产率：32％)，为白色固体。分析数据：MS(ESI+)m/z:705[M+1]+。
第八步：(2R,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7a)、(2S,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7b)和(2R,6R)/(2S,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇的混合物(7a/b)的合成：
6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-[5-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-二醇(VII-7a)和6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-[6-叔丁基-1-(二甲氧基甲基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-二醇(VII-7b)的混合物(170mg,0.24mmol)溶于2.5N的氯化氢的甲醇溶液(5mL)中，所得溶液在室温下搅拌2小时，真空浓缩，粗产物用反相HPLC纯化(柱：XBridgePrep Shield RP18 OBD Column,19*150mm 5um 13nm；流动相：含10mmol/L碳酸氢铵的水溶液及乙腈；梯度：8分钟乙腈20.0％→65.0％；检测：254/220nm)得到(2R,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7a)和(2S,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7b)的混合物(7a/b)，该混合物进一步使用手性SFC拆分((仪器：Prep SFC80-2；柱：CHIRALCEL OD-H,20*250mm；流动相：CO2(65％)+乙腈(含0.1％异丙醇)(35％)；流速:50mL/min；检测：UV:254nm)，得到如下结果：
异构体1(暂定为7a)：在手性SFC上的保留时间较短(4.048min)：17mg(产率：11％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.26(s,1H),8.23(s,1H),7.56-7.46(m,2H),7.32(dd,J＝8.6,1.8Hz,1H),6.17(d,J＝2.1Hz,1H),5.53(dd,J＝6.3,2.2Hz,1H),5.02(dd,J＝6.4,3.3Hz,1H),4.30-4.18(m,1H),3.18-3.12(m,1H),2.90(dd,J＝12.0,3.4Hz,2H),2.81-2.64(m,2H),2.59-2.51(m,1H),2.48-2.36(m,1H),2.30(dd,J＝12.4,2.7Hz,1H),2.19(dd,J＝11.2,6.1Hz,1H),2.06(q,J＝10.3,9.1Hz,2H),1.89(t,J＝10.0Hz,1H),1.56(s,3H),1.38(s,12H),0.97(d,J＝6.6Hz,3H),0.76(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:631[M+1]+。
异构体2(暂定为7b)：在手性SFC上的保留时间较长(4.386min)：19mg(产率：12％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,Methanol-d4)δ8.26(s,1H),8.24(s,1H),7.56-7.47(m,2H),7.32(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),6.17(d,J＝2.2Hz,1H),5.54(dd,J＝6.4,2.2Hz,1H),5.02(dd,J＝6.4,3.3Hz,1H),4.25(td,J＝6.7,6.2,3.1Hz,1H),3.26-3.09(m,1H),2.98-2.84(m,2H),2.81-2.51(m,3H),2.47-2.37(m,1H),2.34-2.18(m,2H),2.12-1.86(m,3H),1.57(s,3H),1.39(s,12H),0.96(d,J＝6.6Hz,3H),0.77(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:631[M+1]+。
实施例8a
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(8a)：
其制备反应路线图如图16所示，方法如下：
将(2R,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7a,17mg,0.03mmol)溶于2.5N的氯化氢的甲醇溶液(2mL)中，所得溶液在室温下搅拌48小时，真空浓缩残留物使用反相HPLC纯化(柱：XBridge Prep Shield RP18 OBD Column,19*150mm 5um13nm；流动相：含10mmol/L碳酸氢铵的水溶液及乙腈；梯度：8分钟乙腈20.0％→65.0％；检测：254/220nm)得到(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(8a,7.6mg,产率：48％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.31(s,1H),8.21(s,1H),7.55-7.48(m,2H),7.32(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),5.97(d,J＝4.4Hz,1H),4.75(t,J＝4.9Hz,1H),4.28(t,J＝5.3Hz,1H),4.10(d,J＝5.7Hz,1H),3.38-3.34(m,1H),3.11-2.87(m,3H),2.81-2.76(m,2H),2.45(d,J＝12.4Hz,1H),2.33(d,J＝12.9Hz,2H),2.16(d,J＝9.9Hz,2H),2.05-1.96(m,1H),1.39(s,9H),1.05(d,J＝6.6Hz,3H),0.95(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:591[M+1]+。
实施例8b
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(8b)：
其制备反应路线图如图17所示，方法如下：
将(2S,6R)-6-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-醇(7b,18mg,0.02854mmol)溶于2.5N的氯化氢的甲醇溶液(2mL)中，所得溶液在室温下搅拌48小时，真空浓缩残留物使用反相HPLC纯化(柱：XBridge Prep Shield RP18 OBD Column,19*150mm5um 13nm；流动相：含10mmol/L碳酸氢铵的水溶液及乙腈；梯度：8分钟乙腈20.0％→65.0％；检测：254/220nm)得到(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇(8b,13.2mg,产率：78％)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,Methanol-d4)δ8.29(s,1H),8.21(s,1H),7.53-7.44(m,2H),7.31(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),5.96(d,J＝4.5Hz,1H),4.76(dd,J＝5.3,4.6Hz,1H),4.28(t,J＝5.3Hz,1H),4.09(q,J＝5.4Hz,1H),3.30-3.26(m,1H),3.03-2.95(m,1H),2.98-2.86(m,2H),2.81-2.77(m,2H),2.52-2.39(m,1H),2.32(dd,J＝12.1,3.2Hz,2H),2.15(t,J＝9.8Hz,2H),2.01(t,J＝10.1Hz,1H),1.38(s,9H),1.04(d,J＝6.6Hz,3H),0.98(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:591[M+1]+。
实施例9
9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-([[2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(9)：
其制备反应路线图如图18所示，方法如下：
第一步：5-叔丁基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(IX-1)的合成：
在0℃下，往4-叔丁基苯-1,2-二胺(I-9,5.02g，30.5mmol)的四氢呋喃(400mL)溶液中加入1,1'-羰基二咪唑(CDI,5.43g,33.6mmol)，将所得溶液在室温下搅拌12小时，然后用二异丙基醚(50mL)稀释，将混合物在室温下再搅拌30分钟。白色沉淀逐渐出现，过滤收集产品，用二异丙基醚(50mL)洗涤，真空干燥，得到4.05g(产率：70％)的5-叔丁基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(IX-1)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.44(s,2H),6.95(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),6.89(d,J＝1.2Hz,1H),6.82(d,J＝8.4Hz,1H),1.25(s,9H).MS(ESI+)m/z:191.1[M+1]+。
第二步：5-叔丁基-2-氯-1H-苯并[d]咪唑(IX-2)的合成：
将5-叔丁基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(IX-1,4.05g，21.3mmol)与三氯氧磷(15mL)的混合物在95℃下搅拌12小时，然后，在0℃下小心加入到饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)中，将得到的混合物在室温剧烈搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残余物用异丙醚(40mL)洗涤，过滤，得到2.66g(产率：60％)5-叔丁基-2-氯-1H-苯并[d]咪唑(IX-2)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.04(br,1H),7.42(br,2H),7.30(d,J＝8.4Hz,1H),1.33(s,9H).MS(ES+)m/z:209.1[M+1]+。
第三步：6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(IX-4)的合成：
在氮气下，9-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-二甲基-6-[[(丙烷-2-基)氨基]甲基]-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(I-6,4.12g,11.8mmol)，6-氧代-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(IX-3,2.50g,11.8mmol)和四异丙氧基钛(50mL)的混合物于25℃下搅拌16小时，然后用甲醇(45mL)稀释。冷却至0℃，往上述溶液中分批量加入硼氢化钠(4.50g,118mmol)，所得反应液在室温搅拌30分钟，小心加入0.1N氢氧化钠水溶液(50mL)，用过滤，滤液用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到1.61g(产率：25％)的6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(IX-4)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(s,1H),8.16(s,1H),7.34(s,2H),6.14(d,J＝2.4Hz,1H),5.54-5.52(m,1H),4.96-4.94(m,1H),4.09-4.03(m,1H),3.80(s,2H),3.64(s,2H),3.05-2.95(m,1H),2.85-2.75(m,1H),2.70-2.61(m,1H),2.35-2.25(m,1H),2.13-2.02(m,2H),1.91-1.87(m,1H),1.85-1.80(m,1H),1.51(s,3H),1.35(s,9H),1.32(s,3H),0.91(d,J＝6.4Hz,3H),0.72(d,J＝6.4Hz,3H).MS(ESI+)m/z:544.3[M+1]+。
第四步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[([2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基)甲基]-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺三氟乙酸盐(IX-5)的合成：
往6-([[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(IX-4,1.61g,2.96mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入三氟乙酸(5mL)，所得溶液在室温下搅拌18小时，然后真空浓缩，将残余物与氯仿共沸三次以彻底除去三氟乙酸，得到1.76g粗品9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[([2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基)甲基]-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺三氟乙酸盐(IX-5)，为黄色粘性油状物，将其不经进一步纯化用于下一步。分析数据：MS(ESI+)m/z:444.3[M+1]+。
第五步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-([[2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(9)的合成：
粗品9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-[([2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基)甲基]-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺三氟乙酸盐(IX-5,1.76g,～2.96mmol)，5-叔丁基-2-氯-1H-苯并[d]咪唑(IX-2,1.25g,5.98mmol)，N,N-二异丙基乙基胺(1.94g,15.0mmol)和碘化钾(50mg,0.30mmol)的叔丁醇(10mL)溶液在置于微波炉反应器中于130℃加热4小时，然后真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到490mg(两步产率：25％)的9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-([[2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(9)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.13(s,1H),8.32(s,1H),8.17(s,1H),7.34(s,2H),7.12-6.90(m,3H),6.15(s,1H),5.54-5.52(m,1H),4.96-4.94(m,1H),4.09-4.05(m,1H),3.99(s,2H),3.85(s,2H),3.15-3.05(m,1H),2.85-2.75(m,1H),2.70-2.61(m,1H),2.35-2.25(m,1H),2.13-2.02(m,2H),1.91-1.87(m,1H),1.85-1.80(m,1H),1.52(s,3H),1.33(s,3H),1.28(s,9H),0.90(d,J＝6.8Hz,3H),0.70(d,J＝6.8Hz,3H).MS(ESI+)m/z:616.4[M+1]+。
实施例10
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-([[2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(10)：
其制备反应路线图如图19所示，方法如下：
在0℃下，将9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-([[2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(9,500mg,0.81mmol)溶解于2.5N氯化氢的甲醇溶液(10mL)中，所得溶液在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩，用2N氨水溶液调节pH至～9。真空浓缩，残留物使用反相HPLC纯化(柱:X Bridge C18,19x150mm,5um；流动相:10～47％乙腈的水溶液(含10mM碳酸氢铵)；流速:20mL min-1)得到224mg(产率：48％)的(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-([[2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(10)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ8.33(s,1H),8.23(s,1H),7.27(s,1H),7.15-7.08(m,2H),5.99(d,J＝4.4Hz,1H),4.78(t,J＝4.8Hz,1H),4.31(t,J＝5.2Hz,1H),4.13(s,2H),4.11-4.09(m,1H),3.99(s,2H),3.33-3.31(m,1H),3.07-3.03(m,1H),2.97-2.92(m,1H),2.78-2.71(m,1H),2.39-2.33(m,2H),2.22-2.18(m,2H),1.35(s,9H),1.10(d,J＝6.8Hz,3H),0.99(d,J＝6.8Hz,3H).MS(ESI+)m/z:576.3[M+1]+。
实施例11
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(1R,5S,6S)-3-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(11)：
其制备反应路线图如图20所示，方法如下：
第一步：(2R,3R,4S,5S)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-(氯甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(XI-1)的合成：在0℃下，往乙腈(100mL)中，依次加入(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-(羟基甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(I-1,腺苷,10.0g,37.4mmol)，吡啶(5.91g,74.8mmol)和二氯亚砜(22.0g,185mmol)，将所得溶液在室温下搅拌18小时，然后小心地用冰水(30mL)淬灭。真空除去有机溶剂后，用饱和碳酸钠水溶液将pH值调节至～8，然后用乙酸乙酯(150mL×3)萃取，将有机相合并，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到9.0g(产率：84％)的(2R,3R,4S,5S)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-(氯甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(XI-1)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),8.16(s,1H),7.30(s,2H),5.94(d,J＝5.7Hz,1H),5.59(d,J＝6.0Hz,1H),5.45(d,J＝5.1Hz,1H),4.78-4.73(m,1H),4.25-4.20(m,1H),4.11-4.06(m,1H),3.98-3.92(m,1H),3.87-3.81(m,1H).MS(ESI+)m/z:286.1[M+1,35Cl]+,288.1[M+1,37Cl]+。
第二步：(1R,5S,6R)-6-([[(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基氧杂环戊烷-2-基]甲基]氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯(XI-3)的合成：
(2R,3R,4S,5S)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-(氯甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(XI-1,300mg,1.05mmol)和(1R,5S,6R)-6-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯(XI-2,416mg,2.10mmol)混合物于100℃搅拌17小时，冷却至室温后用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0～10％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到110mg(产率：23％)的(1R,5S,6R)-6-([[(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基氧杂环戊烷-2-基]甲基]氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯(XI-3)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ8.28(s,1H),8.21(s,1H),5.98(d,J＝5.2Hz,1H),4.82(t,J＝5.2Hz,1H),4.27-4.19(m,2H),3.49-3.43(m,2H),3.36-3.33(m,2H),3.03-2.99(m,2H),1.94(s,1H),1.61-1.58(m,2H),1.43(s,9H).MS(ESI+)m/z:448.2[M+1]+。
第三步：(1R,5S,6S)-6-([[(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基氧杂环戊烷-2-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯(XI-4)的合成：
(1R,5S,6R)-6-([[(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基氧杂环戊烷-2-基]甲基]氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯(XI-3,340mg,0.76mmol)，2-碘丙烷(700mg,4.12mmol)和碳酸钾(330mg,2.37mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在95℃下搅拌18小时，然后真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液(含1％三乙胺))得到310mg(产率：67％)的(1R,5S,6S)-6-([[(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基氧杂环戊烷-2-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯(XI-4)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ8.29(s,1H),8.23(s,1H),5.99(d,J＝4.8Hz,1H),4.81-4.77(m,1H),4.28-4.23(m,2H),3.46-3.40(m,2H),3.38-3.29(m,2H),3.14-2.92(m,3H),1.70-1.63(m,3H),1.47(s,9H),1.13-0.99(m,6H).MS(ESI+)m/z:490.3[M+1]+。
第四步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(1R,5S,6S)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇的三氟乙酸盐(XI-5)的合成：
在0℃下，(1R,5S,6S)-6-([[(2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基氧杂环戊烷-2-基]甲基](丙烷-2-基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-羧酸叔丁酯(XI-4,100mg,0.20mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(0.7mL)，所得溶液在室温下搅拌7小时，然后真空浓缩，将残余物与氯仿共沸三次以彻底除去残留的三氟乙酸，得到110mg粗产物(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(1R,5S,6S)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇的三氟乙酸盐(XI-5)，为黄色油状物，无需进一步纯化，直接用于下一步反应。分析数据：MS(ESI+)m/z:390.2[M+1]+。
第五步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(1R,5S,6S)-3-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(11)的合成：
粗产物(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(1R,5S,6S)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇的三氟乙酸盐(XI-5,370mg,～0.72mmol)，5-叔丁基-2-氯-1H-苯并[d]咪唑(IX-2,180mg,0.86mmol)，N,N-二异丙基乙基胺(470mg,3.63mmol)和碘化钾(12mg,0.072mmol)的叔丁醇(5mL)溶液在90℃搅拌52小时，然后真空浓缩，残留物用反相HPLC纯化(仪器：GILSON(GX-281)；柱:Xbridge RP18,5um,19x 150mm；流动相:28～50％乙腈的水溶液(含0.05％碳酸氢铵))得到157mg(两步产率：39％)的(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(1R,5S,6S)-3-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(11)，为白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.25(s,1H),8.19(s,1H),7.22(d,J＝1.5Hz,1H),7.08(d,J＝8.1Hz,1H),7.01(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),5.97(d,J＝4.5Hz,1H),4.77(t,J＝4.8Hz,1H),4.26-4.21(m,2H),3.66-3.62(m,2H),3.49-3.45(m,2H),3.11-2.98(m,2H),2.92-2.85(m,1H),1.83-1.78(m,3H),1.29(s,9H),1.08(d,J＝6.6Hz,3H),1.02(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:562.3[M+1]+。
实施例12
(2R,3S,4R,5R)-2-({[(3aR,5S,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(12)：
其制备反应路线图如21所示，合成方法如下：
第一步：(3aR,5r,6aS)-5-羟基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-2)的合成：
在0℃下，往(3aR,6aS)-5-氧代-八氢环戊并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(XII-1,500mg，2.22mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入硼氢化钠(165mg,4.36mmol)，将所得溶液在室温下搅拌2小时，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)稀释，真空下浓缩除去有机溶剂后，将水相用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。将有机相合并，用盐水(30mL)洗涤，硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩得到400mg(产率：79％)的(3aR,5r,6aS)-5-羟基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-2)，为黄色油状物。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.62(d,J＝4.5Hz,1H),4.10-4.02(m,1H),3.43-3.37(m,2H),3.20-3.11(m,2H),2.53-2.47(m,2H),2.03-1.93(m,2H),1.39(s,9H),1.38-1.32(m,2H).
第二步：(3aR,5r,6aS)-5-(甲基磺酰氧基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-3)的合成：
往(3aR,5r,6aS)-5-羟基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-2,200mg,0.88mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三乙胺(180mg,1.78mmol)和甲磺酰氯(121mg,1.05mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时，然后在0℃下加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)。将得到的混合物在室温搅拌10分钟，然后用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。将有机相合并，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-50％乙酸乙酯的正己烷溶液)，得到230mg(产率：87％)的(3aR,5r,6aS)-5-(甲基磺酰氧基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-3)，为黄色油。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.07-5.03(m,1H),3.48-3.35(m,2H),3.20-3.17(m,2H),3.15(s,3H),2.62(br,2H),2.31-2.22(m,2H),1.71-1.63(m,2H),1.39(s,9H).
第三步：(3aR,5s,6aS)-5-叠氮基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-4)的合成：
(3aR,5r,6aS)-5-(甲基磺酰氧基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-3,1.00g,3.27mmol)，叠氮化钠(430mg,6.61mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液在90℃搅拌6小时，然后用水(30mL)稀释，并用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。将有机相合并，用硫酸钠干燥并过滤，将滤液真空浓缩，得到500mg粗产物(3aR,5s,6aS)-5-叠氮基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-4)，为黄色油状物，将其用于直接用于下一步反应，无需进一步纯化。
第四步：(3aR,5s,6aS)-5-氨基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-5)的合成：
往(3aR,5s,6aS)-5-叠氮基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-4,500mg,～1.98mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入10％Pd/C(50mg)。将反应烧瓶抽真空，然后充氢气(2大气压)，上述操作重复三次。将得到的混合物在室温下搅拌氢化(2大气压)5小时，然后用过滤，将滤液真空浓缩得到300mg的(3aR,5s,6aS)-5-氨基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-5)，为黄色油状物(两步收率41％)。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ3.44-3.33(m,3H),3.05-2.97(m,2H),2.75-2.67(m,2H),1.63-1.57(m,2H),1.52-1.47(m,2H),1.45(s,9H).
第五步：(3aR,5s,6aS)-5-(((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基-四氢呋喃-2-基)甲基氨基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-6)的合成：
(2R,3R,4S,5S)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-(氯甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(XI-1,567mg,1.99mmol)与(3aR,5s,6aS)-5-氨基-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-5,600mg,2.65mmol)的混合物在100℃下搅拌17小时，然后通过硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到550mg(产率：43％)的(3aR,5s,6aS)-5-(((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基-四氢呋喃-2-基)甲基氨基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-6)，为黄色半固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),8.13(s,1H),7.30(s,2H),5.82(d,J＝5.4Hz,1H),5.40(s,1H),5.15(s,1H),4.73(s,1H),4.12-4.10(m,1H),3.99-3.96(m,1H),3.43-3.36(m,2H),3.18-3.14(m,1H),3.02-2.97(m,2H),2.80-2.68(m,4H),2.10-2.00(m,1H),1.62-1.58(m,3H),1.39-1.34(m,1H),1.35(s,9H).MS(ESI+)m/z:476.3[M+1]+。
第六步：(3aR,5s,6aS)-5-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基-四氢呋喃-2-基)甲基)(异丙基)氨基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-7)的合成：
(3aR,5s,6aS)-5-(((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基-四氢呋喃-2-基)甲基氨基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-6,210mg,0.44mmol)和2-碘丙烷(376mg,2.21mmol)在乙腈(5mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.3mL)中的混合溶剂在85℃下搅拌18小时，然后用水(10mL)稀释。真空下浓缩除去有机溶剂后，将水相用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将有机相合并，用硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)，得到35mg(产率：15％)的(3aR,5s,6aS)-5-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基-四氢呋喃-2-基)甲基)(异丙基)氨基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-7)，为黄色的固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),8.14(s,1H),7.27(s,2H),5.83(d,J＝5.4Hz,1H),5.41-5.39(m,1H),5.13-5.10(m,1H),4.76-4.74(m,1H),4.12-4.10(m,1H),3.88-3.86(m,1H),3.43-3.36(m,2H),3.23-3.20(m,2H),3.02-2.90(m,3H),2.80-2.75(m,1H),2.59-2.51(m,2H),1.63-1.51(m,4H),1.38(s,9H),0.99(d,J＝6.4Hz,3H),0.89(d,J＝6.4Hz,3H).MS(ESI+)m/z:518.3[M+1]+。
第七步：(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-((异丙基((3aS,5s,6aR)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基)氨基)甲基)-四氢呋喃-3,4-二醇的三氟乙酸盐(XII-8)的合成：
往(3aR,5s,6aS)-5-((((2R,3S,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,4-二羟基-四氢呋喃-2-基)甲基)(异丙基)氨基)-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-7,35mg,0.068mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。将所得溶液在室温下搅拌8小时，然后真空浓缩，得到30mg的(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-((异丙基((3aS,5s,6aR)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基)氨基)甲基)-四氢呋喃-3,4-二醇的三氟乙酸盐(XII-8)，为黄色油状物，无需进一步纯化，直接用于下一步反应。分析数据：MS(ESI+)m/z:418.3[M+1]+。
第八步：(2R,3S,4R,5R)-2-({[(3aR,5S,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(12)的合成：
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-((异丙基((3aS,5s,6aR)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基)氨基)甲基)-四氢呋喃-3,4-二醇的三氟乙酸盐(XII-8,30mg,～0.072mmol)，5-叔丁基-2-氯-1H-1,3-苯并咪唑(IX-2,29.9mg,0.144mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(1mL)在叔丁醇(5mL)中的混合物在90℃搅拌52小时，然后真空浓缩。残留物用反相HPLC纯化(柱:X Bridge C18,19x150mm,5um；流动相:20～39％乙腈的水溶液(含10mM碳酸氢铵)；流速:20mL/min)得到3.1mg(产率：7％)的(2R,3S,4R,5R)-2-({[(3aR,5S,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(12)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ8.30(s,1H),8.22(s,1H),7.29(s,1H),7.15(d,J＝8.0Hz,1H),7.09(d,J＝8.4Hz,1H),5.97(d,J＝4.4Hz,1H),4.79(t,J＝4.8Hz,1H),4.31(t,J＝5.2Hz,1H),4.11-4.09(m,1H),3.70-3.66(m,2H),3.32-3.27(m,3H),3.15-3.10(m,1H),2.97(dd,J＝14.8,4.4Hz,1H),2.90(br,2H),2.81(dd,J＝15.2,7.2Hz,1H),1.89-1.74(m,4H),1.37(s,9H),1.09(d,J＝6.4Hz,3H),1.02(d,J＝6.4Hz,3H).MS(ESI+)m/z:590.4[M+1]+。
实施例13
9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[(3aR,5R,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(13)：
其制备反应路线图如图22所示，方法如下：
第一步：(3aR,5R,6aS)-5-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-八氢环戊并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(XIII-1)的合成：
9-[(3aR,4R,6R,6aR)-2,2-二甲基-6-[[(丙烷-2-基)氨基]甲基]-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(I-6,6.96g,12.4mmol)和(3aR,6aS)-5-氧代-六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(XII-1,4.50g,20.0mmol)在纯四异丙醇钛(100mL)中的混合物在25℃下搅拌16小时，然后用甲醇(100mL)稀释。在0℃下，往上述溶液中分批加入硼氢化钠(7.61g,200mmol)，所得混合物在室温下搅拌30分钟，再缓慢加入0.1N氢氧化钠水溶液(100mL)。将所得混悬液通过过滤，滤液用乙酸乙酯(150mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥并过滤，滤液真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)得到1.53g(产率：14％)的(3aR,5R,6aS)-5-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-八氢环戊并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(XIII-1)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(s,1H),8.15(s,1H),7.32(s,2H),6.12(s,1H),5.52(d,J＝5.4Hz,1H),4.95(d,J＝3.9Hz,1H),4.12-4.08(m,1H),3.35-3.25(m,2H),3.08-3.02(m,2H),3.01-2.83(m,2H),2.71-2.61(m,1H),2.49-2.38(m,3H),1.87-1.71(m,2H),1.51(s,3H),1.39(s,9H),1.32(s,3H),1.18-1.02(m,2H),0.94(d,J＝6.6Hz,3H),0.74(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:558.3[M+1]+。
第二步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[(3aR,5R,6aS)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺的三氟乙酸盐(XIII-2)的合成：
(3aR,5R,6aS)-5-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]甲基}(丙烷-2-基)氨基)-八氢环戊并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(XIII-1,1.53g,2.75mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入三氟乙酸(5mL)，将所得溶液在25℃搅拌18小时，然后真空浓缩，得到890mg粗产物9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[(3aR,5R,6aS)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺的三氟乙酸盐(XIII-2)，为黄色油状物，无需进一步纯化，直接用于下一步反应。分析数据：MS(ESI+)m/z:458.3[M+1]+。
第三步：9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[(3aR,5R,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(13)的合成：
9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[(3aR,5R,6aS)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺的三氟乙酸盐(XIII-2,890mg,～1.95mmol)，5-叔丁基-2-氯-1H-苯并[d]咪唑(IX-2,810mg,3.90mmol)和N,N-二异丙基乙胺(755mg,5.85mmol)的叔丁醇(5mL)溶液在85℃下搅拌48小时，然后真空浓缩，残留物用硅胶柱色谱纯化(洗脱液：0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液)，得到580mg(产率：48％)的9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[(3aR,5R,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(13)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.16(br,1H),8.32(s,1H),8.16(s,1H),7.35(s,2H),7.20(s,1H),7.10(d,J＝8.1Hz,1H),6.99(d,J＝7.8Hz,1H),6.13(s,1H),5.53(d,J＝4.8Hz,1H),4.98(d,J＝3.9Hz,1H),4.13(br,1H),3.50-3.38(m,2H),3.10-2.90(m,2H),2.79-2.70(m,1H),2.48-2.32(m,5H),2.05-1.90(m,2H),1.52(s,3H),1.34(s,3H),1.32(s,9H),1.30-1.10(m,2H),0.98(d,J＝6.6Hz,3H),0.79(d,J＝6.6Hz,3H).MS(ESI+)m/z:630.4[M+1]+。
实施例14
(2R,3S,4R,5R)-2-({[(3aR,5R,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(14)：
其制备反应路线图如图23所示，方法如下：
在0℃下，将9-[(3aR,4R,6R,6aR)-6-({[(3aR,5R,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-2,2-二甲基-四氢-2H-呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烷-4-基]-9H-嘌呤-6-胺(13,580mg,0.92mmol)溶于2.5N氯化氢的甲醇(10mL)溶液中，所得溶液在25℃下搅拌13小时，然后真空浓缩，用2N氨水溶液将pH调节至～9。浓缩，残留物用反相HPLC纯化(柱:X Bridge C18,19x150mm,5um；流动相:20-55％乙腈的水溶液(含10mM碳酸氢铵)；流速:20mL/min)得到298mg(产率：55％)的(2R,3S,4R,5R)-2-({[(3aR,5R,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)氧杂环戊烷-3,4-二醇(14)，为类白色固体。分析数据：1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ8.25(s,1H),8.18(s,1H),7.28(s,1H),7.14(d,J＝8.4Hz,1H),7.07(d,J＝8.4Hz,1H),5.94(d,J＝4.5Hz,1H),4.75(t,J＝4.8Hz,1H),4.29(t,J＝5.1Hz,1H),4.11-4.05(m,1H),3.55-3.41(m,4H),3.21-3.09(m,2H),2.97(dd,J＝15.0,4.5Hz,1H),2.77(dd,J＝15.0,6.9Hz,1H),2.68(br,2H),2.15-2.09(m,2H),1.47-1.43(m,2H),1.35(s,9H),1.05(d,J＝6.4Hz,3H),0.98(d,J＝6.4Hz,3H).MS(ESI+)m/z:590.4[M+1]+。
实施例15
结构通式如图24所示，取代基如下表所列的化合物也可按实施例1-14描述相同或类似方法合成：
实施例16
对组蛋白甲基转移酶DOT1L的抑制活性：本发明中化合物对DOT1L酶的抑制活性数据委托美国Reaction Biology Corp测定(1Great Valley Parkway,Suite 2,Malvern,PA19355,USA。网站：www.reactionbiology.com)测定。具体情况如下：
测定方式：本方法是基于放射性同位素的HotSpot方式，具体测定从氚标记的SAM上转移的底物的甲基化。甲基化的底物使用滤膜结合方式捕捉，并用Reaction Biology公司的专利技术检测。
试剂：DOT1L:RBC Cat#HMT-11-101,Lot#1182；HeLa细胞寡核小体：RBC Cat#HMT-35-130.Lot#1753；S-[甲基-3H]-腺苷-L-蛋氨酸(3H-SAM)：PerkinElmer Cat#NET155H,Lot#2063083；其他试剂都是从Sigma-Aldrich(St.Louis,MO)购买；缓冲液：50mM Tris-HCl,pH8.5,5mM MgCl2,50mM NaCl,0.01％Brij35,1mM DTT,and 1％DMSO。
反应条件：40nM DOT1L；0.05mg/mL的寡核小体；1μM 3H-SAM；反应时间：30℃，30min to 1h；
底物转化率：5％-20％。
反应步骤：
1、反应缓冲液中加入底物；2、往缓冲液中加入DOT1L，并且轻轻搅拌均匀；3、将化合物的DMSO溶液加入到上述反应混合物中，室温下孵化20min；4、加入3H-SAM引发反应；5、在30℃反应1h；6、将反应混合物转移到滤纸以便检测；7、使用Excel及GrapPad Prism软件分析数据。
数据分析：从信号中去掉背景，使用下面方程式计算相对于DMSO对照组的酶活性百分比：
％酶活性＝产物/(DMSO对照平均值)*100；使用GraphPad Prism软件进行IC50曲线拟合。
表1、本发明中部分化合物对DOT1L酶的抑制IC50值：
*SAH：S-腺苷-L-高半胱氨酸；#A代表：≤100nM；B代表：>100nM-≤1.0μM；C代表：>1.0μM-≤100μM。
由上述数据可知，本发明化合物对DOT1L具有很强的抑制活性，其IC50值在个别情况下小于100纳摩尔水平。因而，本发明中的化合物可以用于治疗因DOT1L酶的异常活性引起的疾病，例如肿瘤等。
实施例17：药物组成及制剂：注射剂(50毫克/毫升)
实施例2a制备的化合物：5％； 1M氢氧化钠溶液:15％；
0.1M盐酸溶液(调节pH＝7.6)； 聚乙二醇400：5％；
注射用水调节至100％；
适用人群：适用于各种因DOT1L酶活性异常所引起的疾病人群。
实施例18：药物组成及制剂：气雾剂(毫克/毫升)
实施例8b制备的化合物：10； 失水山梨醇油酸酯：13.5；
三氯氟甲烷：910.0； 二氯二氟甲烷：490.0；
适用人群：适用于各种因DOT1L酶活性异常所引起的疾病人群。
实施例19：药物组成及制剂：软膏(/毫升)
实施例2a制备的化合物：40毫克； 乙醇：300微升；
水：300微升； 1-十二烷基氮杂环庚酮：50微升；
丙二醇：至1毫升；
适用人群：适用于各种因DOT1L酶活性异常所引起的疾病人群。
上述实施例中的实施方案可以进一步组合或者替换，且实施例仅仅是对本发明的优选实施例进行描述，并非对本发明的构思和范围进行限定，在不脱离本发明设计思想的前提下，本领域中专业技术人员对本发明的技术方案作出的各种变化和改进，均属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种含双环基团的嘌呤化合物或其药学上可接受的盐，该化合物分子结构如式(I)和(II)所示：
式中，
L代表如A-1,A-2,A-3,A-4或A-5所示的双环基团：
R1选自氢、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C1-8烯基、C1-8炔基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，且R1可选择性地被一个或多个G1取代；
R2代表1-4个取代基，分别独立地选自氢、氘、卤素、-CN、-NO2、-OH、-CF3、-OCF3、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C1-8烯基、C1-8炔基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、C1-8烷氧基、C1-8环烷氧基或C3-8杂脂环氧基，且R2可选择性地被一个或多个G2取代；
R3和R4分别独立选自氢、氘、卤素、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C6-12芳基或C5-12杂芳基，且R3和R4可选择性地被一个或多个G3取代；
W为N或N＝O；
其中：
G1、G2及G3分别独立地选自氢、氘、卤素、C1-8烷基、C1-8环烷基、C3-8杂脂环基、C1-8烷氧基、C1-8环烷氧基、C3-8杂脂环氧基、C1-8烯基、C1-8炔基、C6-12芳基、C5-12杂芳基、-OH、-CN、-NO2、-CF3、-OCF3、-OCH3、-OCH2CH3、-O(i-Pr)、-O(c-Pr)、-SCH3、-S(O)CH3、-SO2CH3、-CO2H、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)NHCH3、-OC(O)N(CH3)2、-NHC(O)NHCH3、-NHC(O)N(CH3)2、-NHSO2NHCH3、-NHSO2N(CH3)2、-SO2NHCH3或-SO2N(CH3)2。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于化学结构式如(III)至(IX)所示：
3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于其化学结构式如(X)至(XI)所示：
其中，
R11的定义与权利要求1中的R1相同；R22的定义与权利要求1中的R2相同。
4.根据权利要求3所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于其化学结构式如(XII)至(XVII)所示：
其中，
R111选自R1中的氢、C1-8烷基或C1-8环烷基；R222定义与权利要求1中R2相同。
5.根据权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述：
R111选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；
R222选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、1-(甲氧基甲基)-1-甲基乙基、1-(羟甲基)-1-甲基乙基、1-甲氧基-1-甲基乙基、1-羟基-1-甲基乙基、-OH、-CN、-NO2、-CF3、-OCH3、-OCH2CH3、-O(i-Pr)、-O(c-Pr)、-OCF3、-OCH2CF3、乙烯基、乙炔基、苯基、吡啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、恶唑基、噻唑基、吡咯烷基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、-SCH3、-S(O)CH3、-SO2CH3、-CO2H、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-C(O)N(CH3)2、-OC(O)NHCH3、-OC(O)N(CH3)2、-NHC(O)NHCH3、-NHC(O)N(CH3)2、-NHSO2NHCH3、-NHSO2N(CH3)2、-SO2NHCH3或-SO2N(CH3)2。
6.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于化学结构式如(XVIII)至(XXII)所示：
其中，
R111和R222的定义与权利要求5相同。
7.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物为下列任意一种：
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](环丙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](环丙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](环丙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](甲基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](甲基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](甲基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](乙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](乙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](乙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](叔丁基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](叔丁基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](叔丁基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-三氟甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-三氟甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-三氟甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-(S/R)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)亚硝基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-(S)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)亚硝基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-(R)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)亚硝基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)/(2R,6S)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6S)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)/(2R,6S)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(环丙基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(环丙基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6S)-6-[5-(1-甲氧基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(环丙基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)/(2R,6S)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6S)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(丙烷-2-基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)/(2R,6S)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(环丙基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6R)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(环丙基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-[({(2R,6S)-6-[5-(1-羟基-2-甲基丙烷-2-基)-1H-1,3-苯并咪唑-2-基]螺[3.3]庚烷-2-基}(环丙基)氨基)甲基]氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](环丙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](环丙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](环丙基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)/(2R,6S)-6-(5-三氟甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6R)-6-(5-三氟甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(2R,6S)-6-(5-三氟甲氧基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-6-羟基螺[3.3]庚烷-2-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-([[2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基](丙烷-2-基)氨基]甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-({[(1R,5S,6S)-3-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)氧杂环戊烷-3,4-二醇；
(2R,3S,4R,5R)-2-({[(3aR,5S,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)氧杂环戊烷-3,4-二醇；或
(2R,3S,4R,5R)-2-({[(3aR,5R,6aS)-2-(5-叔丁基-1H-1,3-苯并咪唑-2-基)-八氢环戊并[c]吡咯-5-基](丙烷-2-基)氨基}甲基)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)氧杂环戊烷-3,4-二醇。
8.权利要求1所述化合物中，如E-7、E-8、E-9、F-7、F-8、F-9或G-6所示化合物的制备方法，其特征在于，制备反应路线图及步骤如下：
(1)E-7、E-8和E-9的制备方法：
第一步：起始化合物E-1与含螺环的酮(E-2)在还原剂存在下发生还原胺化反应生成化合物E-3；
第二步：化合物E-3在三甲基铝存在下与二胺化合物E-4反应得到中间体E-5；
第三步：E-5在酸存在下关环生成苯并咪唑产物E-6；
第四步：化合物E-6通过酸水解得到产物E-7，为非对映异构体的混合物(a mixture ofdiastereomers)；
第五步：化合物E-7通过手性拆分得到非对映异构体产物E-8和E-9；
(2)F-7、F-8和F-9的制备方法：
第一步：起始化合物E-3在还原剂存在下被还原成化合物F-1；
第二步：化合物F-1与溴化试剂发生溴化反应得到中间体F-2；
第三步：F-2通过碱促进的消除反应给出中间体F-3；
第四步：F-3中的双键被氧化断裂生成酮中间体F-4；
第五步：化合物F-5用丁基锂处理生成中间体锂试剂，再与F-4发生加成反应得到中间体醇F-6；
第六步：F-6通过酸性条件下水解得到化合物F-7，为非对映异构体的混合物；
第七步：化合物F-7通过手性拆分得到非对映异构体产物F-8和F-9；
(3)G-6的制备方法：
第一步：起始化合物E-1通过与酮G-1发生还原胺化反应得到化合物G-2；
第二步：中间体G-2用酸脱去保护基生成胺类化合物G-3；
第三步：G-3在碱存在下与苯并咪唑化合物G-4发生取代反应得到产物G-5；
第四步：化合物G-5通过酸水解得到目标产物G-6；
或按如下方法制备：
第一步：氯化物H-1与胺H-2在碱存在下或不额外加碱的条件下发生取代反应生成化合物H-3；
第二步：化合物H-3通过还原胺化反应或者与R1-LG(H-4)在碱(Base)的存在下发生取代反应得到化合物H-5；
第三步：中间体H-5用酸脱去保护基生成胺H-6；
第四步：H-6在碱存在下与苯并咪唑化合物G-4反应得到目标产物G-6。
9.权利要求1-8任一项所述含化合物或其药学上可接受的盐，在制备治疗因组蛋白甲基转移酶DOT1L异常活性所引起的疾病中的应用；
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的疾病为肿瘤。
CN201910260879.6A 2019-03-29 2019-03-29 一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法 Pending CN110092804A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910260879.6A CN110092804A (zh) 2019-03-29 2019-03-29 一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910260879.6A CN110092804A (zh) 2019-03-29 2019-03-29 一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110092804A true CN110092804A (zh) 2019-08-06

Family

ID=67444290

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910260879.6A Pending CN110092804A (zh) 2019-03-29 2019-03-29 一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110092804A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113024620A (zh) * 2021-03-11 2021-06-25 沈阳药科大学 一种嘌呤衍生物及其制备方法和用途
US11878968B2 (en) 2021-07-09 2024-01-23 Plexium, Inc. Aryl compounds and pharmaceutical compositions that modulate IKZF2

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120142625A1 (en) * 2010-12-03 2012-06-07 Epizyme, Inc. Substituted Purine And 7-Deazapurine Compounds
CN103339139A (zh) * 2010-12-03 2013-10-02 Epizyme股份有限公司 组蛋白甲基转移酶的7-氮杂嘌呤调节剂及其使用方法
US20130310333A1 (en) * 2010-12-03 2013-11-21 Epizyme, Inc. Modulators of Histone Methyltransferase, and Methods of Use Thereof
US20150284422A1 (en) * 2012-08-10 2015-10-08 Epizyme, Inc. Inhibitors of protein methyltransferase dot1l and methods of use thereof
US20150342979A1 (en) * 2012-12-21 2015-12-03 Epizyme, Inc. Dot1l inhibitors for use in the treatment of leukemia
US20160045531A1 (en) * 2013-03-14 2016-02-18 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
US20160060269A1 (en) * 2014-08-27 2016-03-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. DOT1L Inhibitors
US20160168185A1 (en) * 2013-07-22 2016-06-16 Baylor College Of Medicine Non-ribose containing inhibitors of histone methyltransferase dot1l for cancer treatment
US20180127451A1 (en) * 2013-07-03 2018-05-10 Epizyme, Inc. Substituted purine compounds

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120142625A1 (en) * 2010-12-03 2012-06-07 Epizyme, Inc. Substituted Purine And 7-Deazapurine Compounds
CN103339139A (zh) * 2010-12-03 2013-10-02 Epizyme股份有限公司 组蛋白甲基转移酶的7-氮杂嘌呤调节剂及其使用方法
CN103391939A (zh) * 2010-12-03 2013-11-13 Epizyme股份有限公司 作为表观遗传酶调节剂的经取代的嘌呤和7-氮杂嘌呤化合物
US20130310334A1 (en) * 2010-12-03 2013-11-21 Epizyme, Inc. 7-Deazapurine Modulators of Histone Methyltransferase, and Methods of Use Thereof
US20130310333A1 (en) * 2010-12-03 2013-11-21 Epizyme, Inc. Modulators of Histone Methyltransferase, and Methods of Use Thereof
US20150284422A1 (en) * 2012-08-10 2015-10-08 Epizyme, Inc. Inhibitors of protein methyltransferase dot1l and methods of use thereof
US20150342979A1 (en) * 2012-12-21 2015-12-03 Epizyme, Inc. Dot1l inhibitors for use in the treatment of leukemia
US20160045531A1 (en) * 2013-03-14 2016-02-18 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
US20180127451A1 (en) * 2013-07-03 2018-05-10 Epizyme, Inc. Substituted purine compounds
US20160168185A1 (en) * 2013-07-22 2016-06-16 Baylor College Of Medicine Non-ribose containing inhibitors of histone methyltransferase dot1l for cancer treatment
US20160060269A1 (en) * 2014-08-27 2016-03-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. DOT1L Inhibitors

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ARAVIND,等: "Nonclinical pharmacokinetics and metabolism of EPZ‐5676, a novel DOT1L histone methyltransferase inhibitor", 《BIOPHARMACEUTICS & DRUG DISPOSITION》 *
LIU,等: "Preparation of 5′-deoxy-5′-amino-5′-C-methyl adenosine derivatives and their activity against DOT1L", 《BIOORGANIC AND MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS》 *
TONGCHAO,等: "Convenient preparation of pinometostat and related 5′-deoxy-5′-amino adenosine derivatives as well as their activity against DOT1L", 《TETRAHEDRON LETTERS》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113024620A (zh) * 2021-03-11 2021-06-25 沈阳药科大学 一种嘌呤衍生物及其制备方法和用途
CN113024620B (zh) * 2021-03-11 2023-02-28 沈阳药科大学 一种嘌呤衍生物及其制备方法和用途
US11878968B2 (en) 2021-07-09 2024-01-23 Plexium, Inc. Aryl compounds and pharmaceutical compositions that modulate IKZF2

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2019283921B2 (en) Indole carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
JP7140337B2 (ja) ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－３－オンの大環状誘導体、その医薬組成物及び応用
US11053197B2 (en) Carbazole derivatives
EP2137158A1 (en) Small molecule inhibitors of protein arginine methyltransferases (prmts)
EP3209652B1 (en) Tricyclic atropisomer compounds
JP7372686B2 (ja) Ｔｒｋ阻害剤としてのヘテロ環化合物
KR20150119926A (ko) 비시클로 2,3-벤조디아제핀 및 스피로시클릭 치환된 2,3-벤조디아제핀
WO2016100166A1 (en) SUBSTITUTED DIHYDRO-1H-PYRROLO[3,2-c]PYRIDIN-4(5H)-ONES AS RIPK3 INHIBITORS
WO2021247969A1 (en) Inhibitors of fibroblast growth factor receptor kinases
JP2019513792A (ja) テトラヒドロイソキノリン誘導体
CN116635371A (zh) 一种作为sos1抑制剂的多环哒嗪酮类衍生物、其制备方法及用途
CN110092804A (zh) 一种含双环基团的嘌呤化合物及其制备方法
CN110655520A (zh) 嘧啶并环化合物及其制备方法和应用
CN112457308A (zh) 新型三环芳香杂环化合物，及其制备方法、药物组合物和应用
CN114805311A (zh) 螺环茚
AU2019310889B2 (en) Pyridopyrimidines as histamine H4-receptor inhibitors
CN112457305A (zh) 含三环结构的芳香杂环化合物，及其制备方法和应用
EP4055013B1 (en) Wdr5 inhibitors and modulators
AU2019424628B2 (en) 1,2,3,4-tetrahydroquinoxaline derivative, preparation method therefor and application thereof
CN109928998A (zh) 一种含螺环基团的吡咯并[2,3-d]嘧啶化合物及其制备方法
CN113583020B (zh) 一种jak2抑制剂及应用
WO2023222762A1 (en) N6-adenosine-methyltransferase protacs and methods of use thereof
CN116332948A (zh) 一种含氮四环化合物及其制备方法和药用用途
JP2023526548A (ja) 新規三環芳香族複素環化合物、ならびにその調製方法、医薬組成物および適用
NZ731946B2 (en) Indole carboxamide compounds useful as kinase inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20190806