KR20130062913A - 산화형 글루타티온의 결정 및 이의 제조 방법 - Google Patents

산화형 글루타티온의 결정 및 이의 제조 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 산화형 글루타티온 6수화물의 신규한 결정을 제공한다. 산화형 글루타티온 6수화물의 결정은, 산화형 글루타티온을 함유하는 수용액을 15℃ 이하로 냉각하여 산화형 글루타티온 6수화물의 결정을 석출시킴으로써 제조된다.

Description

산화형 글루타티온의 결정 및 이의 제조 방법{CRYSTALLINE OXIDIZED GLUTATHIONE AND PRODUCTION METHOD THEREFOR}
본 발명은 건강 보조 식품, 의약품, 화장품 등의 제품, 원료, 중간체 등으로서 유용한 산화형 글루타티온의 결정 및 상기 결정의 제조 방법에 관한 것이다.
산화형 글루타티온은 환원형 글루타티온과 같은 작용을 가지며, 산화형 글루타티온의 작용으로서는, 예컨대 경구 투여에 의한 간장에서의 해독 작용 등이 알려져 있다(비특허 문헌 1). 이 때문에, 산화형 글루타티온은 환원형 글루타티온이 사용되어 온 각종 용도에 사용할 수 있고, 예컨대 건강 보조 식품, 의약품, 화장품 등의 제품, 원료 또는 중간체로서 유용하다.
산화형 글루타티온의 공지된 제조 방법은, 발효법, 효모법 등에 의해 얻어지는 산화형 글루타티온을 함유하는 수용액 또는 효모 엑기스 용액을 원료로 사용하여, 상기 수용액 또는 효모 엑기스 용액 중에서 환원형 글루타티온을 산화형 글루타티온으로 변환시킴으로써 산화형 글루타티온 용액을 얻은 후, 농축, 희석 등을 실시함으로써 산화형 글루타티온을 함유하는 수용액 또는 효모 엑기스 용액을 얻는 방법(특허 문헌 1 및 2); 부형제 등을 첨가하고 동결 건조, 분무 건조 등에 의해 산화형 글루타티온을 함유하는 효모 엑기스 용액의 분말을 얻는 방법(특허 문헌 2), 산화형 글루타티온 함유 수용액에 알콜 등을 적하함으로써 산화형 글루타티온 1수화물의 결정을 제조하는 방법(특허 문헌 3), 산화형 글루타티온 8수화물의 결정을 제조하는 방법(비특허 문헌 2) 등을 포함한다.
그러나, 산화형 글루타티온 용액의 동결 건조에 의한 제조법은 불순물 선택성이 나쁘고 동결 건조에 다량의 에너지를 필요로 하므로 공업화에 적합하지 않은 것이 알려져 있다. 한편, 분무 건조에 기초한 방법은 열접촉으로 인해 불순물이 증가하는 것이 알려져 있다.
또한, 산화형 글루타티온 8수화물의 결정은 결정 중에 함유된 물의 함량이 일정하지 않아 안정성이 나쁘고 결정을 얻는 데 3∼4일까지의 장시간이 필요하다는 것이 문제이고, 산화형 글루타티온 1수화물의 결정은 침상 결정이고 응집하기 쉽기 때문에 결정 분리성이 나쁘다는 점, 불순물 선택성(정제능)이 나쁘다는 점 및 결정 성장 속도가 느리다는 점에서 개선의 여지가 있는 것이 알려져 있다.
따라서, 안정성이 우수하고, 공업적으로 취급이 용이한 산화형 글루타티온의 결정이 필요하다.
[선행 기술 문헌]
[특허 문헌]
특허 문헌 1: 일본 특허 출원 공개 평성 5 - 146279호 공보
특허 문헌 2: 일본 특허 출원 공개 평성 7 - 177896호 공보
특허 문헌 3: 일본 특허 4401775호 공보
[비특허 문헌]
비특허 문헌 1: J. Nutr. Sci., 44, pp613 (1998)
비특허 문헌 2: 1999 International Union of Crystallograpy, pp1538 (1999)
본 발명의 목적은, 건강 보조 식품, 의약품, 화장품 등의 제품, 원료, 중간체 등으로서 유용한 산화형 글루타티온의 결정을 제공하는 것 및 대량 합성 또는 공업화에 적합한 산화형 글루타티온의 결정의 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은, 이하의 (1) 내지 (8)에 관한 것이다.
(1) 산화형 글루타티온 6수화물의 결정.
(2) 분말 X선 회절에서, 8.12°, 9.70°, 10.62°, 12.44°, 14.20°, 16.22°, 16.38°, 17.90°, 18.90°, 19.52°, 20.26°, 21.32°, 21.60°, 22.82°, 23.34°, 24.40°, 24.72°, 24.98°, 25.56°, 26.18°, 26.68°, 27.20°, 28.32°, 29.00°, 29.66°, 31.02°, 31.58°, 32.20°, 32.72°, 32.88°, 34.48°및 41.56°의 회절각(2θ)에서 피크를 갖는 산화형 글루타티온 6수화물의 결정.
(3) 산화형 글루타티온 함유 수용액을 15℃ 이하로 냉각하여 산화형 글루타티온 6수화물의 결정을 석출시킨 후, 이 수용액으로부터 산화형 글루타티온 6수화물의 결정을 채취하는 것을 특징으로 하는 (1) 또는 (2)에 따른 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법.
(4) 15℃ 이하의 산화형 글루타티온 함유 수용액에, 알콜 및 케톤으로 이루어지는 군에서 선택되는 용매를 첨가 또는 적하하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 (1) 또는 (2)에 따른 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법.
(5) 15℃ 이하의 산화형 글루타티온 함유 수용액에, 메탄올, 에탄올, n-프로판올 및 이소프로필 알콜로 이루어지는 군에서 선택되는 용매를 첨가 또는 적하하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 (1) 또는 (2)에 따른 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법.
(6) 15℃ 이하의 산화형 글루타티온 함유 수용액에 메탄올을 첨가 또는 적하하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 (1) 또는 (2)에 따른 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법.
(7) 산화형 글루타티온 함유 수용액이, 산화형 글루타티온 함유 용액을 합성 흡착 수지 또는 이온 교환 수지로 처리함으로써 얻어지는 수용액인 (3) 내지 (6) 중 어느 하나에 따른 방법.
(8) (3) 내지 (7) 중 어느 하나에 따른 방법에 의해 얻어지는 산화형 글루타티온 6수화물의 결정.
본 발명에 의하면, 건강 보조 식품, 의약품, 화장품 등의 제품, 원료, 중간체 등으로서 유용한 산화형 글루타티온의 결정 및 이것의 제조 방법이 제공된다.
본 발명에서, 산화형 글루타티온의 용액은 산화형 글루타티온을 함유하는 임의의 용액일 수 있으나, 이의 예는 예컨대 일본 특허 공고 소화 44-239호 공보, 일본 특허 공고 소화 46-4755호 공보, 일본 특허 공고 소화 46-2838호 공보 또는 일본 특허 출원 공개 소화 61-74595호 공보에 기재된 방법에 따라, 합성법, 발효법 또는 효모로부터의 추출법에 의해 제조되는 환원형 글루타티온을, 환원형 글루타티온을 함유하는 반응 용액으로서 그대로 또는 예컨대 정제한 용액, 동결 건조 분말 등으로서 얻고, 얻어진 환원형 글루타티온을 예컨대 일본 특허 출원 공개 평성 5-146279호 공보 또는 일본 특허 출원 공개 평성 7-177896호 공보에 기재된 방법에 따라, 산소, 과산화수소, 아스코르브산을 산화할 수 있는 효소 등으로 산화함으로써 얻어지는 산화형 글루타티온 함유 수용액, 배양액, 효모로부터의 추출액 및 제균액을 포함할 수 있다.
산화형 글루타티온 함유 수용액은 산화형 글루타티온을 함유하는 임의의 수용액일 수 있으나, 용해 성분 중의 산화형 글루타티온의 순도가 50% 이상인 수용액이 바람직하고, 순도가 70% 이상인 수용액이 더 바람직하다. 상기 수용액은 메탄올, 에탄올, 이소프로필 알콜, n-프로판올 등과 같은 알콜 및 아세톤, 에틸 에틸 케톤 등과 같은 케톤을 포함하는 다른 유기 용매를 함유할 수 있다. 상기 수용액은 바람직하게는 물 함량이 20% 이상이다. 특히, 이의 예는 예컨대 산화형 글루타티온의 용액(이 산화형 글루타티온의 용액은 상기 산화형 글루타티온의 용액과 동일한 의미임)을 전처리함으로써 제조되는 수용액을 포함할 수 있다.
전처리 방법은 막 처리, 겔 여과 처리, 활성탄 처리, 이온 교환 수지 처리, 합성 흡착 수지 처리, 킬레이트 수지 처리, 용매 침전법 등, 바람직하게는 활성탄 처리, 이온 교환 수지 처리, 합성 흡착 수지 처리, 용매 침전법 등을 포함할 수 있고, 이 중에서, 합성 흡착 수지 처리 또는 이온 교환 수지 처리가 더 바람직하며, 이러한 처리를 적절하게 조합하여 이용할 수 있다.
또한, 산화형 글루타티온 함유 수용액은 바람직하게는 이에 함유된 산화형 글루타티온의 농도가 50∼700 g/L인 수용액이다. 특히, 농도가 100∼400 g/L인 수용액이 바람직하며, 이러한 용액은 예컨대 농축법 등에 의해 적합하게 제조된다.
수혼화성 유기 용매로서, 물과 혼화성인 임의의 유기 용매를 사용할 수 있으나, 이의 바람직한 예는 메탄올, 에탄올, 이소프로필 알콜, n-프로판올 등과 같은 알콜 및 아세톤, 에틸 에틸 케톤 등과 같은 케톤을 포함한다.
합성 흡착 수지로서, 예컨대, 비극성 다공질 흡착 수지 등이 사용될 수 있으며, 이의 구체적인 예는 Diaion HP 시리즈(예컨대, HP10, HP20, HP21, HP30, HP40, HP50 등, 미츠비시 화학 제조), Diaion SP800 시리즈(예컨대, SP800, SP825, SP850, SP875 등, 미츠비시 화학 제조), Diaion SP200 시리즈(예컨대, SP205, SP206, SP207, SP207SS 등, 미츠비시 화학 제조), AMBERLITE XAD 시리즈(예컨대, XAD4, XAD7HR, XAD16, XAD1600 등, 롬 앤드 하스사 제조) 등을 포함할 수 있다. 이 중에서, SP207이 바람직하다.
이온 교환 수지는 강염기성 음이온 교환 수지, 약염기성 음이온 교환 수지, 강산성 양이온 교환 수지, 약산성 양이온 교환 수지 등을 포함할 수 있다.
강염기성 음이온 교환 수지의 예는 Diaion PA 시리즈(예컨대, PA306, PA312, PA412 등, 미츠비시 화학 제조) 등을 포함할 수 있으며, 약염기성 음이온 교환 수지의 예는 Diaion WA 시리즈(예컨대, WA10, WA20, WA30 등, 미츠비스 화학 제조) 등을 포함할 수 있다.
강산성 양이온 교환 수지의 예는 AMBERLITE IR 시리즈(예컨대, 124 Na, 252 Na 등, 오르가노사 제조), Dowex(예컨대, XUS-40232.01 등, 다우 케미컬사 제조) 등을 포함할 수 있고, 약산성 양이온 교환 수지의 예는 AMBERLITE IRC 시리즈(예컨대, IRC-50, IRC-70 등, 롬 앤드 하스사 제조) 등을 포함할 수 있다.
다음으로, 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법의 한 예를 상세히 설명한다.
1. 산화형 글루타티온 함유 수용액의 제조
일본 특허 출원 공개 평성 5-146279호 공보 또는 일본 특허 출원 공개 평성 7-177896호에 기재된 방법에 따르면, 환원형 글루타티온을 예컨대 산소, 과산화수소, 아스코르브산을 산화할 수 있는 효소 등으로 산화하여, 산화형 글루타티온 함유 수용액, 배양액, 효모로부터의 추출액, 제균액 등을 얻는다. 이것을 용해 성분 중의 산화형 글루타티온의 순도가 50% 이상, 바람직하게는 70% 이상이 되도록 임의로 전처리할 수 있다.
전처리한 용액 또는 미처리의 용액을, 이에 함유된 산화형 글루타티온의 농도가 50∼700 g/L, 바람직하게는 100∼400 g/L가 되도록 농축함으로써 산화형 글루타티온을 함유하는 수용액을 얻는다. 또한, 전처리한 용액 또는 미처리의 용액을 동결 건조하여 분말을 얻고, 얻어진 분말을 상기 언급한 바와 같은 농도가 되도록 물에 용해함으로써 산화형 글루타티온을 함유하는 수용액을 얻을 수 있다. 이 때, 분말로서 시판되는 산화형 글루타티온도 이용할 수 있다.
산화형 글루타티온 함유 수용액을 얻기 위한 전처리 방법은, 막 처리, 겔 여과 처리, 활성탄 처리, 이온 교환 수지 처리, 합성 흡착 수지 처리, 킬레이트 수지 처리(킬레이트 수지 처리에 사용되는 킬레이트 수지의 예는 스미토모 화학 공업 주식회사 제조의 Duolite C467 등을 포함함), 용매 침전법 등, 바람직하게는 활성탄 처리, 이온 교환 수지 처리, 합성 흡착 수지 처리, 용매 침전법 등을 포함할 수 있으며, 이 중에서, 합성 흡착 수지 처리 또는 이온 교환 수지 처리가 더 바람직하고, 이러한 처리를 적절하게 조합하여 이용할 수 있다.
더 구체적으로는, 예컨대, 산화형 글루타티온을 함유하는 수용액, 배양액, 효모로부터의 추출액, 제균액 등을 합성 흡착 수지, 바람직하게는 SP207에 로딩하고, 용출액으로서 물 또는 수혼화성 유기 용매(이 수혼화성 유기 용매는 상기와 동일한 의미임)를 단독으로 또는 2종 이상을 조합하여 사용하여 분리 및 정제하거나, 또는 산화형 글루타티온을 함유하는 수용액, 배양액, 효모로부터의 추출액, 제균액 등을 가교도 12% 이상의 강산성 양이온 교환 수지(H+ 형), 바람직하게는 SK112 또는 SK116에 로딩한 후, 가교도 4% 이하의 강산성 양이온 교환 수지(H+ 형), 바람직하게는 SK102 또는 XUS-40232.01에 로딩하고, 물 또는 수혼화성 유기 용매(이 수혼화성 유기 용매는 상기와 동일한 의미임) 단독 또는 2종 이상의 조합과 혼합한 용출액, 암모니아 수용액, 염화나트륨 수용액 등으로 용출하여 분리 및 정제함으로써, 고순도의 산화형 글루타티온 함유 수용액을 얻을 수 있다.
원료인 환원형 글루타티온으로서는, 시판품 또는 공지된 방법(예컨대, 일본 특허 공고 소화 44-239호 공보, 일본 특허 공고 소화 46-4755호 공보, 일본 특허 공고 소화 46-2838호 공보 또는 일본 특허 출원 공개 소화 61-74595호 공보 등에 기재된 방법)에 따라 합성법, 발효법 또는 효모로부터의 추출법에 의하여 얻어지는 환원형 글루타티온 함유 수용액, 정제한 용액 또는 동결 건조 분말을 사용할 수 있다.
2. 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조
1.에서 얻어진 산화형 글루타티온 함유 수용액을 필요에 따라 염산 또는 황산 또는 수산화나트륨 수용액 등으로 pH를 2.5∼3.5로 조절한 후, 이 수용액을 -20∼15℃, 바람직하게는 0∼10℃의 온도에서 1분 내지 48시간 동안, 더 바람직하게는 1∼24시간 동안 정치 또한 교반하여 냉각 결정화를 실시한다. 또한, 1분 내지 48시간, 바람직하게는 1∼24시간에 걸쳐 상기 온도로 냉각함으로써 결정화를 실시할 수 있다.
또한, 냉각 결정화를 실시할 때, 산화형 글루타티온 함유 수용액에 알콜 및 케톤으로부터 선택되는 용매를 첨가 또는 적하함으로써, 산화형 글루타티온 6수화물의 결정을 석출시킬 수 있다.
알콜 용매의 예는 에탄올, 프로판올, n-프로판올, 이소프로필 알콜을 포함하고, 케톤 용매의 예는 아세톤, 에틸 에틸 케톤 등을 포함한다.
용매는 산화형 글루타티온 함유 수용액의 0.1∼100배, 바람직하게는 0.1∼10배, 더 바람직하게는 0.1∼3배의 양으로 첨가될 수 있다. 또한, 용매를 적하하는 경우, 1분 내지 10시간, 바람직하게는 1∼7 시간에 걸쳐 상기한 양의 용매를 적하할 수 있다.
냉각 결정화를 실시할 때, 용매의 첨가 또는 적하 여부에 따라, 필요에 따라 종결정을 첨가할 수 있다. 종결정은 0.001∼50 g/L, 바람직하게는 0.01∼5 g/L의 농도로 첨가할 수 있고, 적하하는 경우는 최종 농도가 상기 농도가 될 때까지 적하할 수 있다.
석출된 결정을 예컨대 원심 분리, 디캔테이션 등에 의하여 분리하고, 물 또는 수혼화성 용기 용매로 세정한 후, 얻어진 결정을 감압 또는 통풍하에서 건조함으로써, 산화형 글루타티온 6수화물의 결정을 얻는다. 또한, 상기 결정을 세정, 건조, 재결정화 등과 같은 추가의 조작에 의하여 더 정제할 수 있다.
상기 방법으로 얻어지는 산화형 글루타티온 6수화물의 결정은 각종 수혼화성 유기 용매와의 부가물로서 얻을 수 있는데, 이러한 각종 수혼화성 유기 용매와의 부가물도 본 출원의 결정에 포함된다.
또한, 상이한 결정형 또는 상이한 입도를 갖는 결정이 상기 방법으로 얻어지는 산화형 글루타티온 6수화물의 결정에 존재할 수 있는 경우가 있고, 이들은 단독으로 또는 혼합물로 얻어질 수 있는데, 이러한 상이한 결정형 또는 입도를 갖는 결정의 단독 또는 혼합물도 본 출원의 결정에 포함된다.
다음으로, 본 발명에 따른 산화형 글루타티온의 결정의 보존 안정성(흡습성)을 시험예에 의해 상세히 설명한다.
시험예: 산화형 글루타티온 6수화물의 결정과 산화형 글루타티온 동결 건조분말의 흡습성 비교
실시예 3에서 얻어진 산화형 글루타티온 6수화물의 결정과 참고예 1에서 얻어진 산화형 글루타티온 동결 건조 분말에 대하여 23℃, 상압 및 습도 70%의 조건하에서 흡습성을 추적하였다. 그 결과, 참고예 1에서 얻어진 산화형 글루타티온 동결 건조 분말은 현저히 수분을 흡수하여 2일 후에는 조해하였다. 반면, 실시예 3에서 얻어진 산화형 글루타티온 6수화물의 결정은 수분 함량 변화를 거의 보이지 않고 매우 안정한 것으로 발견되었다.
실시예 1
산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조(1)
참고예 1에서 얻어진 산화형 글루타티온의 동결 건조 분말(3.0 g)을 물에 용해하여 산화형 글루타티온 함유 수용액(30 mL, 산화형 글루타티온의 농도: 100 g/L)을 제공하였다. 상기 수용액을 5℃에서 48시간 동안 정치시켜 결정을 석출시켰다. 석출된 결정을 여과에 의해 분리하고 통풍 건조하여 산화형 글루타티온 6수화물의 결정(1.0 g)을 얻었다. 또한, 단결정 X선 구조 해석은 상기 결정이 6수화물로서 제공됨을 나타내었다.
이하, 얻어진 산화형 글루타티온 6수화물의 물리화학적 특질을 설명한다.
수화수: 6수화물
융점: 191℃
분말 X선 회절[회절각(2θ°), 괄호 안의 숫자는 상대 강도비(I/I0)를 나타냄]: 8.12°(100), 9.70°(33), 10.62°(43), 12.44°(14), 14.20°(13), 16.22°(71), 16.38°(22), 17.90°(18), 18.90°(9), 19.52°(76), 20.26°(17), 21.32°(13), 21.60°(22), 22.82°(41), 23.34°(26), 24.40°(34), 24.72°(23), 24.98°(33), 25.56°(12), 26.18°(18), 26.68°(34), 27.20°(9), 28.32°(12), 29.00°(13), 29.66°(11), 31.02°(10), 31.58°(10), 32.20°(9), 32.72°(11), 32.88°(12), 34.48°(18) 및 41.56°(13).
상기 개시한 바와 같이 얻어진 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 포화 용해도를 산화형 글루타티온 1수화물의 포화 용해도와 비교한 결과를 이하의 표 1에 나타낸다.
산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 포화 용해도
포화 용해도(g/L) <H2O, 30℃>
산화형 글루타티온 6수화물 173
산화형 글루타티온 1수화물 13.5
실시예 2
산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조(2)
참고예 1에서 얻어진 산화형 글루타티온의 동결 건조 분말(10.0 g)을 물에 용해하여, 산화형 글루타티온 함유 수용액(33 mL, 산화형 글루타티온의 농도: 300 g/L)을 제공하였다. 이 수용액을 5℃로 냉각하고, 여기에 실시예 1에서 얻어진 결정(0.1 g)을 종결정으로서 첨가하였다. 생성된 용액에 메탄올(66 mL)을 5시간에 걸쳐 첨가하여 결정화를 실시하였다. 결정화 용액을 1시간 동안 숙성시키고, 석출된 결정을 여과에 의해 분리하고, 통풍 건조함으로써 산화형 글루타티온 6수화물의 결정(8.5 g)을 얻었다.
실시예 3
산화형 글루타티온의 결정의 제조(3)
일본 특허 출원 공개 소화 61-74595호 공보의 실시예 2에 기재된 방법에 따라 얻어진 환원형 글루타티온 함유 수용액을, 일본 특허 출원 공개 평성 5-146279호 공보에 기재된 방법에 따라 수산화나트륨 수용액으로 pH 7.5로 조절한 후, 계내에 산소를 불어 넣어 산화함으로써, 산화형 글루타티온 함유 수용액(48.1 L, 산화형 글루타티온의 농도: 18.0 g/L)을 얻었다.
이 수용액을 황산으로 pH 3.0으로 조절하고, 제균 처리하여 산화형 글루타티온의 제균액(55.5 L, 산화형 글루타티온의 농도: 14.4 g/L)을 얻었다. 상기 제균액을 Diaion SK116(22L)에 로딩한 다음 Dowex XUS-40232.01(13L)에 로딩하여 산화형 글루타티온을 흡착시킴으로써, 암모니아 수용액(20 L, 농도: 2 mol/L)으로 산화형 글루타티온을 용출시켰다.
이 용출액을 SK116(7L)에 로딩하여 프리체를 제조하고 암모니아를 제거함으로써 산화형 글루타티온 함유 수용액(19 L, 산화형 글루타티온의 농도: 35.4 g/L)을 얻었다. 상기 수용액에 활성탄(130 g)을 첨가한 다음, 40℃에서 1시간 교반한 후, 여과에 의해 활성탄을 제거하였다. 얻어진 여액을 2.24 L(산화형 글루타티온의 농도: 300 g/L)까지 농축하고, 5℃로 냉각하였다.
상기 농축액에, 실시예 1에 기재된 방법에 의해 얻어진 결정(13 g)을 종결정으로서 첨가하고, 메탄올(4.6 L)을 5시간에 걸쳐 첨가하여 결정화를 실시하였다. 석출된 결정을 여과에 의해 분리하고, 통풍 건조하여 산화형 글루타티온 6수화물의 결정(610 g)을 얻었다.
참고예 1
산화형 글루타티온의 동결 건조 분말의 수득
일본 특허 출원 공개 평성 5-146279호에 기재된 방법에 의해 얻어진 환원형 글루타티온 4.8 g을 물(24 mL)에 용해한 후, 얻어진 환원형 글루타티온 함유 수용액을 수산화나트륨 수용액으로 pH 7.5로 조절하고, 황산구리의 존재하에 교반하였다. 반응 혼합물을 Diaion SK116(32 mL) 및 Duolite C467(4 ml, 스미토모 화학 공업 주식회사 제조)에 로딩하고, 처리액을 농축하여 산화형 글루타티온 함유 수용액(11 mL, 산화형 글루타티온의 농도: 300 g/L)을 얻었다. 이 수용액을 동결 건조하여 산화형 글루타티온의 동결 건조 분말 3.0 g을 얻었다.
산업상의 이용가능성
본 발명에 따르면, 건강 보조 식품, 의약품, 화장품 등의 제품, 원료, 중간체 등으로서 유용한 산화형 글루타티온의 결정 및 대량 합성 또는 공업화에 적합한 산화형 글루타티온의 결정의 제조 방법이 제공된다.

Claims (8)

  1. 산화형 글루타티온 6수화물의 결정.
  2. 분말 X선 회절에서, 8.12°, 9.70°, 10.62°, 12.44°, 14.20°, 16.22°, 16.38°, 17.90°, 18.90°, 19.52°, 20.26°, 21.32°, 21.60°, 22.82°, 23.34°, 24.40°, 24.72°, 24.98°, 25.56°, 26.18°, 26.68°, 27.20°, 28.32°, 29.00°, 29.66°, 31.02°, 31.58°, 32.20°, 32.72°, 32.88°, 34.48°및 41.56°의 회절각(2θ)에서 피크를 갖는 산화형 글루타티온 6수화물의 결정.
  3. 산화형 글루타티온 함유 수용액을 15℃ 이하로 냉각하여 산화형 글루타티온 6수화물의 결정을 석출시킨 후, 이 수용액으로부터 산화형 글루타티온 6수화물의 결정을 채취하는 것을 특징으로 하는 제1항 또는 제2항에 따른 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법.
  4. 15℃ 이하의 산화형 글루타티온 함유 수용액에, 알콜 및 케톤으로 이루어지는 군에서 선택되는 용매를 첨가 또는 적하하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제1항 또는 제2항에 따른 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법.
  5. 15℃ 이하의 산화형 글루타티온 함유 수용액에, 메탄올, 에탄올, n-프로판올 및 이소프로필 알콜로 이루어지는 군에서 선택되는 용매를 첨가 또는 적하하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제1항 또는 제2항에 따른 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법.
  6. 15℃ 이하의 산화형 글루타티온 함유 수용액에 메탄올을 첨가 또는 적하하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 제1항 또는 제2항에 따른 산화형 글루타티온 6수화물의 결정의 제조 방법.
  7. 제3항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 산화형 글루타티온 함유 수용액이, 산화형 글루타티온 함유 용액을 합성 흡착 수지 또는 이온 교환 수지로 처리함으로써 얻어지는 수용액인 방법.
  8. 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 방법에 의해 얻어지는 산화형 글루타티온 6수화물의 결정.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016159317A1 (ja) 2015-03-31 2016-10-06 公立大学法人大阪市立大学 還元型グルタチオンの結晶
CN105566445B (zh) * 2016-01-13 2021-11-02 浙江海正药业股份有限公司 一种分离纯化还原型谷胱甘肽的方法
CN108779147B (zh) 2016-03-17 2023-12-08 协和发酵生化株式会社 还原型谷胱甘肽的晶体及其制造方法
US11186610B2 (en) 2016-12-20 2021-11-30 Kyowa Hakko Bio Co., Ltd. Crystal of glutathione trisulfide dihydrate and method for producing same
JP6902897B2 (ja) * 2017-03-30 2021-07-14 株式会社カネカ グルタチオン含有組成物の製造方法
WO2018225790A1 (ja) 2017-06-08 2018-12-13 協和発酵バイオ株式会社 酸化型グルタチオン・二カチオン塩の結晶及びその製造方法
CN108129550B (zh) * 2017-12-21 2021-07-02 广州白云山天心制药股份有限公司 一种还原型谷胱甘肽的晶型及其制备方法
CN110606868A (zh) * 2018-10-30 2019-12-24 中国科学院化学研究所 一种制备多肽或蛋白质单晶或无定型物的方法
KR20240122544A (ko) 2021-12-21 2024-08-12 선양 싱치 파마수티컬 컴퍼니 리미티드 산화된 글루타치온의 제조 방법 및 결정형 및 이의 불순물

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6174595A (ja) 1984-09-21 1986-04-16 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 物質の製造方法
JP3160335B2 (ja) 1991-11-26 2001-04-25 協和醗酵工業株式会社 グルタチオン含有飲料
JP3315158B2 (ja) * 1992-08-10 2002-08-19 株式会社興人 グルタチオンの精製法
JPH07177896A (ja) 1993-12-22 1995-07-18 Kohjin Co Ltd アスコルビン酸を酸化する酵素を用いた酸化型グルタチオ ンの製法。
ATE425176T1 (de) 2001-10-25 2009-03-15 Kyowa Hakko Kogyo Kk Kristall von oxidiertem glutathion und verfahren zu dessen herstellung
CN101541827A (zh) 2006-10-16 2009-09-23 协和发酵生化株式会社 谷胱甘肽的结晶及其制造方法

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