KR20120120736A - 정향 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사증후군의 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 대사증후군의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 정향 추출물은 apoA-I의 당화를 강력하게 저해하고 강력한 환원력과 활성산소 제거력, 구리이온 매개된 LDL 산화에 대한 항산화력, 인간 CETP에 대한 저해활성, 체중감소, 항염증 활성 및 저지혈 활성을 나타내어 당뇨, 비만, 동맥경화, 고지혈증을 나타내는 대사증후군 예방 또는 치료에 효과적이므로, 본 발명의 정향 추출물은 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물 및 건강식품에 활용가능할 것이다.
Description
본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고자 한다.
대사증후군은 높은 수치의 혈액 지방, 고혈압, 인슐린 내성 및 중심부 비만 (복부 부위에서의 과도한 지방 조직)을 특징으로 하며, 모든 성인병 즉, 비만, 고혈압, 고지혈증, 고혈당의 기반이 되고 원인이 된다.
대사증후군은 동맥경화, 고혈압, 비만, 당뇨병, 고지혈증 등 위험한 성인병이 한 사람에게 동시다발적으로 나타나는 현상이며 대사증후군 환자들은 당뇨나 고혈압 같은 만성질환뿐 아니라 심혈관 질환으로 인한 돌연사의 위험까지 안고 살게 되기에 비만, 동맥경화, 당뇨, 고지혈증 등 대사증후군에 대한 연구가 지속적으로 이루어지고 있다.
종래의 연구에 따르면, 저밀도 지단백질 (Low-density lipoprotein, LDL)는 혈류에서 주요 콜레스테롤 운반자이고, LDL-콜레스테롤의 농도는 직접적으로 관상동맥심장질환 (coronary heart disease)의 발생과 관계가 있고, 증가된 산화 저밀도지단백질(oxLDL)은 대식세포 증식과 부착신호를 나타낼 뿐만 아니라, 복합 염증반응을 야기시키는 강력한 전구 동맥경화증 요인 (pro-atherogenic factor)으로 작용할 수 있음을 밝혔다.
증가된 oxLDL수준은 죽상동맥경화증 (atherosclerosis)의 독립적인 위험인자로 작용함으로, LDL 산화와 변형을 막는 약물 후보들이 동맥경화 예방에 큰 도움이 될 것이다. 단백질 당화와 증가된 당화 말단 (AGE) 산물이 당뇨 합병증의 중요한 분자적 근거일 수 있다는 증거들이 지속적으로 제시되고 있다 (Curtiss and Witztum, 1985; Gugliucci, 2000). 더욱이, 최근에 Younis et al. (2009)는 특이적으로 관상동맥질환 (coronary heart disease)의 발달과 관계되는 저밀도의 LDL (small dense LDL)이 비당뇨 인간혈청에서 우선적으로 당화 되었다고 보고 하였다.
인간 혈청 지단백질과 아포지단백질들의 비효소적 당화는 CHD와 당뇨병 (diabetes mellitus)과 같은 만성 대사적 질환 증후군의 하나의 요인일 수 있다. Hoang et al. (2007)는 고밀도 지단백질 (high-density lipoprotein, HDL)의 주요 단백질 성분인 apoA-I이 당화되면 동맥경화증에 대한 저항성 (anti-atherogenic properties)이 약화된다고 보고 되었다.
대사증후군 치료를 위한 약물은 아직까지 개발되지 못하고 있는 실정이며, 단지 당뇨병, 고지혈증 및 고혈압의 치료 약물을 이용한 대사증후군의 치료를 시도하고 있는 상황이다. 현재 대사증후군 치료 약물로 사용가능한 약제로는 당뇨병치료제로 사용되는 메트포르민 (metformin), TZD (thiazolidinediones)계열의 약물, 클루코시다아제 저해제 (glucosidase inhibitors), dual PPAR감마/알파 아고니스트 (agonist) 그리고 DDP (dipeptidyl peptidase)IV 저해제가 기대를 모으고 있으며, 이와 함께 혈압치료제와 고지혈증치료제 등이 주목받고 있다. 하지만, 이들 약물로 대사증후군을 개선하는 데는 한계가 있다.
다양한 연구에도 불구하고, 대사증후군의 근본적인 원인은 아직 완전히 규명되지는 않았다. 대사증후군의 원인 및 치료와 관련되어 알려진 인자들을 보면, 운동, 식이습관, 체중, 혈당, 중성지방, 콜레스테롤, 인슐린저항성, 아디포넥틴 (adiponectin), 렙틴 (leptin), AMPK활성, 에스트로겐과 같은 성호르몬, 유전적인자, 말로닐-CoA (malonyl-CoA) 생체내 농도 등이 직간접적으로 관여한다.
이에, 복합적 증상이 있는 대사증후군의 효과적인 관리 또는 치료를 위해서는 정상혈당의 유지를 위한 혈당 강하 효과와 동시에 신병증, 간병증, 고지혈증 등을 동시에 치료할 수 있는 소재의 개발이 이상적이나, 아직까지 이러한 치료제는 개발되지 않았으며, 다만 혈당강하제, 혈압강하제, 콜레스테롤 치료제 등을 각각 개별적으로 복용하고 있다.
본 발명에서는 부작용이 없고 장기간 사용하여도 안전하며 여러 가지 질환이 동시에 나타나는 대사증후군의 예방 및 치료에 효과가 뛰어난 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 물 추출에 의해 얻어진 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물일 수 있다.
상기 추출물은 항산화활성 또는 항염증활성을 나타내는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물일 수 있다.
상기 질환은 당뇨, 동맥경화, 비만 및 고지혈로 구성된 군에서 선택된 질환인 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물일 수 있다.
본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 개선용 건강식품을 제공한다.
본 발명의 정향 추출물은 생체내와 생체외에서 다양한 이로운 활성을 나타내는데, apoA-I의 당화를 강력하게 저해하고 강력한 환원력과 활성산소 제거력, 구리이온 매개된 LDL 산화에 대한 항산화력, 인간 CETP에 대한 저해활성, 체중감소 및 저지혈 활성을 나타내어 당뇨, 비만, 동맥경화, 고지혈증을 나타내는 대사증후군에 효과적임을 확인할 수 있었다. 따라서 본 발명의 정향 추출물을 약학 조성물 및 건강식품 등 다양한 분야에 활용하여 대사증후군 예방 또는 치료제로 유용하게 사용할 수 있을 것이다.
도 1A는 H2O, 추출물의 철이온 환원력을 나타낸 것이고, 도 1B는 활성산소제거 활성을 나타낸 것이다.
도 2A는 추출물에 따른LDL 산화의 저해활성을 나타낸 것이고 도2B는 산화된 LDL 샘플들을 전기영동한 것이다.
도 3은 추출물에 의한 항당화 활성을 나타낸 것이다.
도 4는 추출물 처리된 apoA-I과, 본래의 apoA-I 및 당화된 apoA-I의 현광강도 (fluorescence intensity)를 비교한 것이다.
도 5는 추출물 처리된 apoA-I과, 본래의 apoA-I 및 당화된 apoA-I의 전기영동 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 추출물의 CETP 저해활성을 나타낸 것이다.
도 7은 정상식단, 고콜레스테롤 (HC) 식단 및 HC와 추출물을 혼합한 식단을 먹인 제브라피쉬의 체중 및 크기의 증가를 나타낸 것이다.
도 8은 정상식단, HC 식단 및 HC와 추출물을 혼합한 식단을 먹인 제브라피쉬의 체중 및 크기의 증가를 그래프로 비교한 것이다.
도 9는 정상식단, HC 식단 및 HC와 추출물을 혼합한 식단을 먹인 제브라피쉬 혈청의 철이온환원력 활성을 나타낸 것이다.
도 2A는 추출물에 따른LDL 산화의 저해활성을 나타낸 것이고 도2B는 산화된 LDL 샘플들을 전기영동한 것이다.
도 3은 추출물에 의한 항당화 활성을 나타낸 것이다.
도 4는 추출물 처리된 apoA-I과, 본래의 apoA-I 및 당화된 apoA-I의 현광강도 (fluorescence intensity)를 비교한 것이다.
도 5는 추출물 처리된 apoA-I과, 본래의 apoA-I 및 당화된 apoA-I의 전기영동 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 추출물의 CETP 저해활성을 나타낸 것이다.
도 7은 정상식단, 고콜레스테롤 (HC) 식단 및 HC와 추출물을 혼합한 식단을 먹인 제브라피쉬의 체중 및 크기의 증가를 나타낸 것이다.
도 8은 정상식단, HC 식단 및 HC와 추출물을 혼합한 식단을 먹인 제브라피쉬의 체중 및 크기의 증가를 그래프로 비교한 것이다.
도 9는 정상식단, HC 식단 및 HC와 추출물을 혼합한 식단을 먹인 제브라피쉬 혈청의 철이온환원력 활성을 나타낸 것이다.
본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고자 한다. 또한 본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강식품을 제공하고자 한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
복합적 증상이 있는 대사증후군의 효과적인 관리 또는 치료를 위해서는 정상혈당의 유지를 위한 혈당 강하 효과와 동시에 동맥경화, 당뇨, 고지혈, 비만 등을 동시에 치료할 수 있는 소재의 개발이 이상적이나, 아직까지 이러한 치료제는 개발되지 않았다. 이제 본 발명자들은 천연물질로써 효과가 복합적이고 장기사용에도 부작용이 적으며 다양한 생리활성으로 상기 질환들에 동시에 효과를 나타낼 수 있는 물질을 개발하기 위해 예의 연구 노력한 결과, 본 발명의 정향 추출물을 사용하게 되면 apoA-I의 당화를 강력하게 저해하고 강력한 환원력과 활성산소 제거력, 구리이온 매개된 LDL 산화에 대한 항산화력, 인간 CETP에 대한 저해활성, 체중감소 및 저지혈 활성을 나타내어 당뇨, 비만, 동맥경화, 고지혈을 나타내는 대사증후군에 효과적임을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명에 본 발명에 있어서 유효성분으로 이용되는 정향 (clove)은 도금양과 (Myrtaceae) 식물로서, 유제놀 (eugenol), 아세틸 유제놀 (acetyl eugenol), 차비콜 (chavicol), 유제놀 살실레이트 (eugenol salcylate), 베타-카리오필렌 (beta-caryophyllene) 및 후물렌 (humulene) 등을 주성분으로서 함유할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물에 함유되는 정향 추출물을 얻는 방법은 특별히 한정된 것은 아니며, 정향으로부터 물, 메탄올 또는 메탄올 수용액, 에탄올 또는 에탄올 수용액, 아세톤, 에틸아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜 또는 1,3-부틸렌글리콜 수용액, 헥산, 디에틸 에테르, 노말 프로판올, 이소 프로판올, 노말 부탄올 또는 이들의 혼합용매를 추출용매로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 물, 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 물 추출할 수 있다. 상기 물 추출물은 저렴한 가격에 대량 생산이 가능하여 경제적이고 유해한 유기용매가 포함되어 있지 않아 인체에 무해하므로 바람직할 수 있다. 이때 본 발명의 추출온도는 특별히 한정되는 것은 아니나, 상온에서 이루어지는 것이 바람직할 수 있다.
또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 정향 추출물에 포함되는 것이다.
본 발명의 추출물은 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
본 발명의 일례로, 건조된 정향 중량의 0.5 내지 20배, 바람직하게는 1 내지 10배의 물에 정향의 성분들이 0.5 내지 20시간, 바람직하게는 1 내지 10시간 동안 상온에서 추출 용해될 수 있도록 교반하고, 원심분리 및 여과를 통해 완전히 용해되지 않은 고형물들을 분리한 다음, 동결건조를 통해 수분을 제거하여 분말형태로 제조한 정향 물 추출물을 얻을 수 있으며, 이러한 정향 추출물에는 유제놀을 포함한 다양한 생리활성 물질들이 포함되어 있다.
대사증후군 (Metabolic syndrome)은 신체에서 다른 경로 및 시스템에 영향을 미치는 또 다른 대사 장애일 수 있다. 본 발명의 대사증후군은 고혈압, 고지혈증, 당뇨병과 같은 당 대사이상, 고요산혈증, 관상 또는 동맥경화증, 혈액응고, 인슐린 내성, 비만과 같은 여러 가지 질환이 동시에 발생하는 증후군일 수 있으며, 바람직하게는 비만, 당뇨, 동맥경화 및 고지혈로 이루어진 군에서 선택된 질환이 포함될 수 있다.
또한, 본 발명은 정향 추출물이 항산화활성 또는 항염증활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물일 수 있다.
하기 실시예에 나타난 바와 같이, 본 발명의 정향 추출물은 강력한 항산화력, apoA-I의 당화 및 LDL 식세포작용을 억제하고 CETP를 저해하며 체중감소 효과, 항염증 활성 및 저지혈 활성을 나타내어 당뇨, 동맥경화증, 비만, 고지혈과 같은 대사증후군 예방 및 치료에 도움을 줄 수 있으므로, 본 발명의 조성물은 대사증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물이나 건강식품으로 활용할 수 있을 것이다.
본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물에 함유되는 정향 추출물을 얻는 방법은 특별히 한정된 것은 아니며, 저렴한 가격에 대량 생산이 가능하여 경제적이고 유해한 유기용매가 포함되어 있지 않아 인체에 무해하므로 물 추출이 유용할 수 있다. 이때 본 발명의 추출온도는 특별히 한정되는 것은 아니나, 상온에서 이루어지는 것이 바람직할 수 있다.
본 발명의 대사증후군은 고혈압, 고지혈증, 당뇨병과 같은 당 대사이상, 고요산혈증, 관상 또는 동맥경화증, 혈액응고, 인슐린 내성, 비만과 같은 여러 가지 질환이 동시에 발생하는 증후군일 수 있으며, 바람직하게는 비만, 당뇨, 동맥경화 및 고지혈로 이루어진 군에서 선택된 질환이 포함될 수 있다.
또한, 본 발명은 정향 추출물이 항산화활성 또는 항염증활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물일 수 있다.
본 발명의 유효성분은, 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 99중량%로 포함할 수 있으며, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 약학조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며 (예: 문헌 [Remington's Pharmaceutical Science, 최신판; Mack Publishing Company, Easton PA), 예를 들면 과립제, 세립제, 산제, 경질캡슐제, 연질캡슐제, 시럽제, 유제, 현탁제 또는 액제 등의 경구 투여용 약학 조성물로서 투여해도 되고, 정맥내 투여, 근육내 투여, 또는 피하 투여용 주사제, 점액제, 좌제, 경피흡수제, 경점막 흡수제, 점비제, 점이제, 점안제, 흡입제, 크림제, 연고제, 파프제 등의 비경구 투여용 의약조성물로서 투여하는 것도 가능하다. 분말형태의 약학조성물로서 조제된 제제를 사용시에 용해하여 주사제 또는 점액제로서 사용해도 된다. 특히, 본 발명의 약학조성물은 페이스트 연고, 크림, 밀크, 파프제, 분제, 침투 패드, 용액, 겔, 분무제, 로션 또는 현탁액 형태의 제형인 것이 바람직할 수 있다.
약학 조성물의 제조에는 고체 또는 액체의 제제용 첨가물을 사용할 수 있다. 제제용 첨가물은 유기 또는 무기 중 어느 것이어도 된다. 즉, 경구용 고형제제를 제조하는 경우는, 주약에 부형제, 추가로 필요에 따라 결합제, 붕괴제, 활택제, 착색제 등을 첨가한 후, 통상적인 방법에 의해 정제, 피복정제, 과립제, 산제, 캡슐제 등 형태의 제제를 조제할 수 있다. 사용되는 부형제로서는 예를 들면 유당, 자당, 백당, 포도당, 옥수수 전분 (corn starch), 전분, 탈크, 소르비트, 결정 셀룰로오스, 덱스트린, 카올린, 탄산칼슘, 이산화규소 등을 들 수 있다. 결합제로서는 예를 들면 폴리비닐알코올, 폴리비닐에테르, 에틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 아라비아고무, 트래거캔스 (tragacanth), 젤라틴, 셀락 (shellac), 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 구연산칼슘, 덱스트린, 펙틴 (pectin) 등을 들 수 있다. 활택제로서는 예를 들면 스테아린산마그네슘, 탈크, 폴리에틸렌글리콜, 실리카, 경화식물유 등을 들 수 있다. 착색제로서는 통상 의약품에 첨가하는 것이 허가되어 있는 것이라면 모두 사용할 수 있다. 이들의 정제, 과립제에는 당의 (糖衣), 젤라틴코팅, 기타 필요에 따라 적절히 코팅할 수 있다. 또한, 필요에 따라 방부제, 항산화제 등을 첨가할 수 있다.
경구 투여를 위한 액체제제, 예를 들면 유제, 시럽제, 현탁제, 액제의 제조에는 일반적으로 사용되는 불활성인 희석제, 예를 들면 물 또는 식물유를 사용할 수 있다. 이 제제에는 불활성인 희석제 이외에 보조제, 예를 들면 습윤제, 현탁 보조제, 감미제, 방향제, 착색제 또는 보존제를 배합할 수 있다. 액체제제를 조제한 후, 젤라틴과 같은 흡수될 수 있는 물질의 캡슐 속에 충전해도 된다. 비경구 투여용 제제, 예를 들면 주사제 또는 좌제 등의 제조에 사용되는 용제 또는 현탁제로서는, 예를들면 물, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 벤질알코올, 올레산에틸, 레시틴을 들 수 있다. 좌제의 제조에 사용되는 기제로서는, 예를 들면 카카오버터, 유화 카카오버터, 라우린버터, 위텝졸을 들 수 있다. 제제의 조제방법은 특별히 한정되지 않고, 당업계에서 범용되고 있는 방법은 모두 이용 가능하다.
주사제의 형태로 하는 경우에는, 담체로서 예를 들면 물, 에틸알코올, 마크로골 (macrogol), 프로필렌글리콜, 구연산, 초산, 인산, 젖산, 젖산나트륨, 황산 및 수산화나트륨 등의 희석제; 구연산나트륨, 초산나트륨 및 인산나트륨 등의 pH 조정제 및 완충제; 피로아황산나트륨, 에틸렌디아민사초산, 티오글리콜산 및 티오젖산 등의 안정화제 등을 사용할 수 있다. 또한, 이 경우, 등장성 용액을 조제하기 위해 충분한 양의 식염, 포도당, 만니톨 또는 글리세린을 제제 중에 배합해도 되고, 통상의 용해 보조제, 무통화제 또는 국소 마취제 등을 사용하는 것도 가능하다.
연고제, 예를 들면 페이스트, 크림 및 겔의 형태로 하는 경우에는, 통상 사용되는 기제, 안정제, 습윤제 및 보존제 등을 필요에 따라 배합할 수 있어, 통상적인 방법에 의해 성분을 혼합하여 제제화할 수 있다. 기제로서는 예를 들면 백색 바셀린, 폴리에틸렌, 파라핀, 글리세린, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘 및 벤토나이트 등을 사용할 수 있다. 보존제로서는 파라옥시안식향산 메틸, 파라옥시안식향산 에틸, 파라옥시안식향산 프로필 등을 사용할 수 있다. 첩부제 (貼付劑)의 형태로 하는 경우에는, 통상의 지지체에 상기 연고, 크림, 겔 또는 페이스트 등을 통상적인 방법에 의해 도포할 수 있다. 지지체로서는 면, 스테이플 파이버 (staple fiber) 및 화학섬유로 되는 직포 또는 부직포 ; 연질 염화비닐, 폴리에틸렌 및 폴리우레탄 등의 필름 또는 발포체 시트를 적합하게 사용할 수 있다.
본 발명의 약학의 투여량은 성인 1일당 유효성분인 정향 추출물의 통상적인 투여량은 10 내지 10000mg/kg일 수 있으며, 환자의 연령, 병태, 증상에 따라 적절히 증감(增減)하는 것이 바람직한 것으로 본 발명의 범위가 상기 범위에 한정되는 것은 아니다. 상기 1 일량은 1일에 1회, 또는 적당한 간격을 두고 하루에 2~3회에 나눠 투여해도 되고, 수일 (數日) 간격으로 간헐 (間歇)투여해도 된다. 그러나, 본 발명의 약학 조성물의 상기 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중, 환자의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되는 것이므로 상기 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
본 발명은 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 개선용 건강식품을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물에 함유되는 정향 추출물을 얻는 방법은 특별히 한정된 것은 아니며, 저렴한 가격에 대량 생산이 가능하여 경제적이고 유해한 유기용매가 포함되어 있지 않아 인체에 무해하므로 물 추출이 유용할 수 있다. 이때 본 발명의 추출온도는 특별히 한정되는 것은 아니나, 상온에서 이루어지는 것이 바람직할 수 있다.
본 발명의 대사증후군은 고혈압, 고지혈증, 당뇨병과 같은 당 대사이상, 고요산혈증, 관상 또는 동맥경화증, 혈액응고, 인슐린 내성, 비만과 같은 여러 가지 질환이 동시에 발생하는 증후군일 수 있으며, 바람직하게는 비만, 당뇨, 동맥경화 및 고지혈로 이루어진 군에서 선택된 질환이 포함될 수 있다.
또한, 본 발명은 정향 추출물이 항산화활성 또는 항염증활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물일 수 있다.
상기 유효성분을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.
이때, 식품 또는 음료 중의 상기 유효성분의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 50중량 %로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100ml를 기준으로 0.01 내지 50g의 비율로 가할 수 있으나, 본 발명의 범위가 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 정향 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ml당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g일 수 있으나, 이에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다
이하, 실시예, 실험예 및 제제예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예, 실험예 및 제제예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예, 실험예 및 제제예에 의해 제한되지 않는다.
<
실시예
>
실시예
1. 시료의 준비 및 성분 분석
상업적으로 이용할 수 있는 요리용 허브들 및 향신료들 (로즈마리, 생강, 정향, 및 후추 )는 Ottogi Co. (Anyang, Korea)에 의해 제공되어 졌다. 허브와 향신료 각각 분말 (1g)을 실내에서 2시간 동안 물 (10 mL) 추출하였다. 이러한 추출물들의 고형분을 원심분리 (3000g)로 제거하고, 상층액을 동결건조 (lyophilized) 시켰다. 동결건조된 추출물 분말 (powder)을 무게를 잰 후, 다시 물에 용해시켜 50㎍/mL을 얻었다. 각 추출물의 주요 성분들을 HP-1NNOWAX 컬럼 (crosslinked polyethylene glycol, 60 m x 0.25 mm x 0.25 ㎛)이 장착된 Agilent 6890 (GC/59751 MSD)을 사용한 가스크로마토그래피/ 질량스팩트럼 (GC/MS)에 의해 분석하였다. D-(-)-프록토오스는 시그마 (Sigma, St. Louis, MO, USA)에서 구입하였고 모든 유기 솔벤트는 Merck (Darmstadt, Germany)로부터 HPLC-grade로 구입하였다.
상기 표 1에서 나타난 바와 같이, 물 추출물에서 유제놀 (eugenol)이 정향의 주요성분으로 나타났다. 그러나, 생강과 후추 추출물에서는 주요 성분이 검출되지 않았으며, 생강과 후추에서 각각 방향성 커큐멘 (aromatic-curcumene)은 16.7%를, 유제놀은 27.6%를 나타내었다.
실시예
2.
철이온
환원능력 분석 (
Ferric
reducing
ability
potential
assay
)
철이온 환원능력 (ferric reducing ability, FRA)은 Benzie and Strain (1996)가 기술한 방법과 이를 약간 변형한 방법 (Park et al., 2010)에 의해 결정되었다. 신선하게 준비된 FRA 시약 (300㎕)을 희석된 추출물과 균일하게 섞은 다음, MultiTemp III thermocirculator (Amersham, Uppsala, Sweden)가 장착된 DU800 스펙트로포토미터 (Beckman Coulter, Fullerton, CA, USA)를 사용하여 25℃에서 10분 간격으로 20초마다 593nm에서 흡광도를 측정하였다.
환원력을 비교하기 위한 FRA분석에서, 정향 추출물(최종농도 10㎍/ mL)은 도 1A에서 나타난 바와 같이, A593의 증가에 의해 가장 강력한 철이온 환원력 (180%까지)을 보였으며, 로즈마리 추출물이 2번째로 강력한 FRA능력 (거의 140% 증가)을 보였다. 후추와 생강 추출물은 같은 농도에서 각각 더 약한 FRA 능력 (대략 9%와 20% 증가)을 가졌다.
활성산소제거 활성을 비교하기 위한 DPPH 분석에서, 정향 추출물 (최종농도 10 ㎍ /mL)은 A515에서 가장 강력한 DPPH 활성산소 제거력 (35%까지 감소)를 보인 반면, 다른 추출물은 같은 농도에서 더 낮은 정도의 활성 산소 제거력을 나타내었다 (도 1B).
실시예
3. 구리-매개
LDL
산화에 대한 저해활성 (
Inhibitory
activity
against
copper
-
mediated
LDL
oxidation
)
실시예
3-1.
LDL
정제와 이것의 산화
영남대학교 의학센터 (Daegu, Korea)의 혈액은행으로부터 획득한 건강한 남성의 혈장 (plasma)로부터, 통상적인 프로토콜 (standard protocol, Havel et al., 1955)에 따라 초원심분리함으로 저밀도 지단백질 (LDL, 1.019<d<1.063)을 정제하였다. 밀도는 NaCl를 첨가함으로 적절히 조정되었고 영남대학교 Instrumental Analysis Center에서 Himac CP-90α (Hitachi, Tokyo, Japan)를 사용하여 10℃에서 22시간 동안 원심분리 (100,000g) 하였다.
산화된 LDL (oxLDL)는 37℃에서 4시간 동안 CuSO4 (최종 10μM)와 함께 LDL (1.019<d<1.063) 파편을 배양함으로 형성되었다. 그런후, oxLDL를 여과하고(0.2 ㎛) 종래의 방법에 따라 (Blois, 1958) 산화의 정도를 결정하기 위해 티오바비츄릭산 반응성 기질 (thiobarbituric acid reacting substances, TBARS)을 사용하여 분석하였다.
실시예 3-2. 구리-매개 LDL 산화에 대한 저해활성 ( Inhibitory activity against copper-mediated LDL oxidation )
500㎕ 반응부피에서, 신선한 인간 LDL (300 ㎍ 단백질)와 각각의 추출물(최종농도 1 ㎍/mL)을 10μM (최종농도) CuSO4 과 함께 2시간 동안 배양하였다. 배양하는 동안, 형성된 짝지은 다이엔의 양을 MultiTemp III thermocirculator가 장착된 DU800 스펙트로포토미터를 사용하여 24.5℃, 234 nm에서 모니터하였다.
분광데이터 (spectroscopic data)를 확인하기 위해, 산화된 LDL 샘플들을 0.5% 아가로스젤 상에서 전기영동하여 상대적인 전기이동성을 비교하였다 (Noble, 1968).
사람 LDL은 도 2A에서 나타난 바와 같이 구리이온 (cupric ion)에 의한 산화 스트레스에 민감하다. 후추를 제외한 허브와 향신료 추출물을 처리함으로 구리이온이 매개된 LDL 산화는 저해되었다. 짝지은 다이엔 (conjugated diene (A234)) 수준은 구리이온 첨가에 의해 증가 (259% 까지)되었는데, 이는 도 2A에 나타나 있다.
로즈메리 그리고 생강은 강력한 저해활성 (대략 110%-126%)을 나타내는 반면에, 후추는 가장 약한 억제활성을 나타내었다. 흥미롭게도, 정향 추출물처리는 초기값보다 대략 10% 의 A234 감소를 나타내었는데, 이는 가장 강력한 항산화 활성을 나타냄을 의미한다.
oxLDL은 도 2B에서 나타난 바와 같이 apo-B 분쇄된 결과 네거티브 전하 증가되었고 크기가 감소 되었다. 전기영동 이동성은 정향 추출물 처리된 LDL이 가장 강력한 밴드 강도를 지님과 동시에 가장 느린 움직임을 보였다.
이러한 결과는 A234에서 감소하며 가장 느린 전기영동이동성을 지닌 짝지은 다이엔의 정도를 측정한 결과와 일치하였다.
실시예
4.
apoA
-I 정제 및
비효소적
당화반응
영남대 병원 (Daegu, South Korea)에서 건강한 남성 지원자들에게서 사람 혈장 (plasma)를 얻었다. ApoA-I는 Brewer et al. (1986)가 기술한 방법에 따라 초원심분리와 컬럼 크로마토그래피를 사용하여 사람 혈장 HDL 파편 (1.063<d<1.225)으로부터 정제하였다.
정제된 apoA-I는 사용하기 전까지 -80℃에서 동결건조하였다. apoA-I 당화의 결정은 사람 apoA-I (Jin et al., 2011) 사용을 포함하여, McPherson et al. (1988) 의 방법에 변형을 가하여 수행하였다.
WinLab software package 4.00 (Perkin Elmer)를 사용한 스펙트로플로미터 (LS55, Pekin-Elmer Norwalk, CT)를 이용하여 370 nm (excitation [Ex])및 440 nm (emission [Em])에서 형광측정 강도 (fluorometric intensity)를 확인함으로 당화의 정도를 결정하였다.
각 추출물 (최종 10 ㎍/mL, 10㎕ )을 반응부피 100㎕에서 저해능력을 테스트하기 위해 처리되었다. 당화 저해율은 형광측정 강도 (fluorometric intensity, FI)를 사용한 공식을 이용하여 측정되었다.
당화 저해율% =[1-(시료의 FI-공시료의 FI)]/[음성대조군의 FI-공시료의 FI]×100
이때, 시료 FI= apoA-I (10 mg/ml, 82㎕) + 프록토오스(최종 250 mM, 8㎕ ) + 물추출물 (최종농도 10 ㎍/mL)
공시료의 FI= apoA-I
음성대조군 FI= apoA-I + 프록토오스 + 물
비록 모든 허브들과 향신료들이 상당한 저해 활성을 나타내었지만, 현광분석 (Ex=370 nm/Em=440 nm)에 의할 때 정향 추출물 (10㎍/ml 최종농도)은 도 3에서 나타난 바와 같이, 30시간 배양 후에 강력한 항당화 활성 (88 %까지 저해)을 보였다.
도 4에 나타난 바와 같이 정향 추출물 처리된 apoA-I은 더욱 청색편이 스텍트럼 (blue-shifted spectra (356 nm))을 보였는데, 이는 천연의 apoA-I (WMF=356 nm)와 유사하였다. 그러나 도 4에서 나타난 바와 같이, 다른 추출물 처리된 apoA-I는 당화된 apoA-I과 유사한 더욱 적색편이 스펙트럼 (red-shifted spectra)을 보였다.
당화된 apoA-I의 전기영동된 패턴들은 도 5에서 나타난 바와 같이, 천연의 apoA-I과 비교할 때, 더욱 다중 멀티메릭 (multimerize)된 밴드를 보였다. 정향 추출물로 처리된 apoA-I은 후추나 생강 처리된 apoA-I과 비교할 때 멀티메릭한 밴드가 더 적게 나타났고, 이는 더욱 강력한 저해 활성이 있음을 나타낸다.
이러한 결과들은 정향 추출물이 프록토오스에 의한 비효소적 당화로부터 apoA-I을 보호하여 멀티메릭한 밴드를 더 적게 형성하고 apoA-I 사차구조를 변형시킨다는 것을 제시한다.
실시예
5.
콜레스테릴
에스테르 전이 분석 (
Cholesteryl
ester
transfer
assay
)
apoA-I 과 콜레스테릴올레이트 (cholesteryl oleate)를 지닌 CE-수여체로서 rHDL를 미량의 [3H]-콜레스테릴올레이트 (TRK886, 3.5 .Ci/mg of apoA-I; GE Healthcare, Uppsala, Sweden)를 가지고 Cho (2009a)에 의해 앞서 기술된 방법에 따라 합성하였다.
인간 혈청 (0.05 mL) 및 LDL (0.25 mg/mL, 0.05 mL)가 각각 CETP 및 CE-수용체 소스로서 사용되었다. 다른 농도의 각각의 추출물 (0.01 mL내에서)이 CETP 억제제로서 첨가되었다.
도 6에서 나타난 바와 같이, 정향 추출물은 18% 와 34% 저해 (최종농도 각각 5㎍/ml와 10㎍/ml)를 나타낸 반면, 다른 추출물은 눈에 띠는 저해반응을 나타내지 않았다.
실시예
6.
고콜레스테롤증의
제브라피쉬를
사용한
생체내
테스트
영남대학교 동물관리 및 사용 위원회에 의해 제브라피쉬 관리 (maintenance)와 절차 (procedure)가 승인되었다. 4% 콜레스테롤을 함유한 고콜레스테롤(HC) 식이가 콜레스테롤 디에스테르 솔루션 (Sigma # C-3045)에서 soaking Tetrabit에 의해 만들어졌다 (Tetrabit Gmbh D49304, 47.5% crude protein, 6.5% crude fat, 2.0% crude fiber, 10.5% crude ash, containing vitamin A [29770 IU/kg], vitamin D3 [1860 IU/kg], vitamin E [200 mg/kg], and vitamin C [137 mg/kg]; Melle, Germany)
에테르를 증발 (ether evaporation)시킨 후에, HC 식이 (diet)를 정향 분말 (a final concentration of 10% wt of powder/wt of tetrabit)과 함께 혼합하였다. 각 그룹(n=70) 은 표 1에서 보여준 바처럼, 할당된 식이량을 섭취하였다. 제브라피쉬를 낮:밤의 사이클을 10시간 :14 시간으로 하며 28±1oC 에서 관리하였다.
5주간 할당된 식이량을 섭취시킨 후, 표 2에서 고안된 바처럼, 혈액 (2㎕ )을 건강한 장성한 물고기의 심장으로부터 추출한 후, 5 ㎕ PBS-EDTA와 혼합하고 EDTA-처리된 튜브로 수집하였다 (최종농도 1 mM).
상업적 분석키트 (cholesterol, T-CHO; Wako Pure Chemical, Osaka, Japan; triglycerides, Cleantech TS-S, Wako Pure Chemical)를 사용하여 혈청의 총 콜레스테롤(TC), HDL-콜레스테롤 및 트리글리세리드(TG)를 측정하였다.
상업적으로 이용가능한 분석 키트 (Asan Pharmaceutical, Hwaseong, Korea)를 사용하여 글루탐산-옥살초산 트랜스아미나아제 (Glutamic oxaloacetic transaminase, GOT) 및 글루탐산-피루브산 트란스아미나아제 (glutamic pyruvic transaminase, GPT)농도를 측정하였다.
제브라피쉬 혈청의 콜레스테릴 에스테르 전달 단백질 (Cholesteryl ester transfer protein, CETP) 활성 및 플라스마의 철이온환원력 (ferric reducing ability of plasma, FRAP)을 그룹 사이에 비교하였다.
각 그룹으로부터 간조직 (간 50 mg당 0.5 mL의 PBS에서 ) 분취량 (aliquot)을 조직 균질기 (tissue homogenizer, Euro-ST; Eurostar, IKA-WERKE, Staufen, Germany)를 사용하여 ice bath에서 3분간 (150 rpm) 균질화시킨다.
짧은 원심분리 (10,000g, 3 분)와 단백질 정량분석 (protein determination) 후에, 상층액을 균등하게 희석하였고 (0.05ml) 이를 FRA 분석에서 항산화제 소스로서 사용하였다.
하기 도 7 및 도 8에 나타난 바와 같이, 고안된 식단을 5주간 시행한 뒤, HC-섭취한 그룹 (그룹 2)는 그룹 1과 비교했을 때 상당한 체중의 증가를 보였으며, HC+정향 추출물을 섭취한 그룹 (그룹 3)은 그룹 2에 비해서 체중이 감소 (30%)하였음을 확인할 수 있었다. 또한, HC만을 섭취한 그룹에 비해 정향 추출물을 첨가한 그룹은 35.1±2.3 mm의 키를 가져 더 작았으며, 이러한 결과는 다른 그룹과 비교하였을 때 정향 추출물을 섭취한 그룹은 5주 동안 HC 식단을 섭취해도 체중과 신장을 증가시키지 않음을 알 수 있다.
정향 추출물을 섭취한 그룹은 그룹 2에 비해, 혈청 콜레스테롤과 TG를 낮추고 또한 GOT 및 GTP를 27% 및 18% 감소시키며 혈청 콜레스테롤과 TG를 각각 68% 및 80% 감소시켜, 염증파라미터의 감소와 더불어 강력한 저지혈 활성 및 항비만 활성을 지님을 확인하였다.
혈청 CETP 활성은 정상 식이섭취한 그룹 (43±3% 전달)과 비교하였을 때 그룹 2에서 상당히 증가 되었는데 (53±4%), 정향 추출물을 섭취시킨 그룹은 이보다 더 낮은 CETP 활성(51±3%)을 보였으며, 하기 도 9에서 나타난 바와 같이 FRAP 활성은 정향를 섭취시킨 그룹 3에서는 157%의 증가를 보여 정향 추출물를 먹인 그룹이 항산화 활성을 증가시킴을 확인하였다.
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제제예
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제제예
1. 약학 조성물의
제제예
① 캅셀제의 제조
정향 추출물 10 g
결정성 셀룰로오스 3 g
락토오스 14.8 g
마그네슘 스테아레이트 0.2 g
②
주사제의 제조
정향 추출물 10 g
만니톨 180 g
주사용 멸균 증류수 2974 g
Na2HPO4 12H2O 26 g
③
액제의
제조
정향 추출물 20 mg
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
제제예
2. 건강식품의
제제예
① 건강식품의 제조
정향 추출물 1000 ㎎
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎎
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 90 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
②
건강음료의
제조
정향 추출물 100 ㎎
비타민 C 15 g
비타민 E(분말) 10 g
젖산철 19.75 g
산화아연 3.5 g
니코틴산아미드 3.5 g
비타민 A 0.2 g
비타민 B1 0.25 g
비타민 B2 0.3g
물 정량
Claims (6)
- 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물 추출에 의해 얻어진 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 추출물은 항산화활성 또는 항염증활성을 나타내는 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 대사증후군은 당뇨, 동맥경화, 비만 및 고지혈로 이루어진 군에서 선택된 질환인 대사증후군 예방 또는 치료용 조성물.
- 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 정향 추출물을 유효성분으로 포함하는 대사증후군 예방 또는 개선용 건강식품.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020110038483A KR20120120736A (ko) | 2011-04-25 | 2011-04-25 | 정향 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사증후군의 예방 및 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020110038483A KR20120120736A (ko) | 2011-04-25 | 2011-04-25 | 정향 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사증후군의 예방 및 치료용 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20120120736A true KR20120120736A (ko) | 2012-11-02 |
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ID=47507350
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| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20120120736A (ko) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20190002800A (ko) | 2017-06-29 | 2019-01-09 | (주)셀아이콘랩 | 지방 분해 효능을 갖는 화장료 조성물 |
| CN111658693A (zh) * | 2019-03-06 | 2020-09-15 | 大江生医股份有限公司 | 丁香萃取物与其化合物用于制备调控基因表现量的组合物的用途 |
| CN112843136A (zh) * | 2019-11-12 | 2021-05-28 | 大江生医股份有限公司 | 植物发酵液的用途及植物发酵液的制备方法 |
| KR20220063028A (ko) * | 2020-11-09 | 2022-05-17 | 경희대학교 산학협력단 | 울금 및 정향의 혼합 추출물을 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 |
-
2011
- 2011-04-25 KR KR1020110038483A patent/KR20120120736A/ko not_active Application Discontinuation
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