KR20120032483A

KR20120032483A - 항암 화합물 및 이를 포함하는 제약 조성물

Info

Publication number: KR20120032483A
Application number: KR1020117030136A
Authority: KR
Inventors: 장-크리스토프 카리; 미쉘 셔베; 프랑수아 클레르; 세실 콤보; 실비 공티에; 알랑 크리크; 실베트 라쇼; 로랑 쉬오
Original assignee: 사노피
Priority date: 2009-05-18
Filing date: 2010-05-17
Publication date: 2012-04-05
Also published as: MX2011012356A; WO2010133794A1; JP5656981B2; DK2432766T3; EP2432766B1; JO2852B1; MA33356B1; HK1167388A1; US9221817B2; EP2432766A1; SG176169A1; NZ596464A; CN102459193B; CA2762233C; SI2432766T1; CY1114850T1; MY152995A; CA2762233A1; AR076686A1; HRP20130959T1

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 보다 구체적으로 그의 좌선성 형태(Ia), 특히 메탄올 중의 0.698 ㎎/㎖의 농도에서 광 회전 [α]_D=-38.6+0.7을 갖는 형태에 관한 것이다. 화합물은 염기 형태 또는 산, 특히 제약상 허용되는 산과의 부가 염 형태로 존재할 수 있다. 화합물은 선택적 오로라 A 및 B 키나제 억제제이며, 항암 약물로서 사용될 수 있다.
<화학식 I>

Description

항암 화합물 및 이를 포함하는 제약 조성물{ANTICANCER COMPOUND AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING THE SAME}

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 이를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다.

<화학식 I>

이러한 화합물은 좌선성 화합물 (Ia)인 것이 바람직하다. 이러한 화합물은 항암 성분으로서 사용될 수 있다. 또한, 본 발명은 화합물 (I) 또는 화합물 (Ia)의 제조 방법 및 이러한 방법에서의 일부 중간체에 관한 것이다.

[기술적 문제]

다수의 항암 치료 전략은 유사분열의 조절에 관련된 오로라(Aurora)-타입 키나제, 특히 오로라 A 및 B를 억제하기 위한 것이며; 이와 관련하여 문헌[Nature Reviews 2004, 4, 927-936], [Cancer Res. 2002, 94, 1320], [Oncogene 2002, 21, 6175], [Mol. Cell. Biol. 2009, 29(4), 1059-1071], [Expert Opin. Ther. Patents 2005, 15(9), 1169-1182], [Clin. Cancer Res. 2008, 14(6), 1639]을 참조한다.

일부 오로라 억제제 화합물[예를 들면 밀레니엄(Millennium)으로부터의 MLN-8237, 아스트라-제네카(Astra-Zeneca)로부터의 AZD-1152 또는 선에시스(Sunesis)로부터의 SNS-314]는 현재 임상 시험에서 평가 중에 있다. MLN-8237은 오로라 A에 대하여 선택성을 갖는 반면, AZD-1152는 오로라 B에 대하여 선택성을 갖는다. 키나제인 오로라 A 및 B 모두가 암에서 조절해제되므로, 오로라 A 및 B 모두를 억제하는 것은 하나의 키나제 또는 다른 키나제의 선택적 억제와 관련한 잇점을 제공한다. 게다가, 오로라 A 및 B를 비롯한 다수의 키나제를 억제하는 아스텍스(Astex)로부터의 화합물 AT-9283과 같은 멀티키나제 화합물이 존재한다. 이러한 유형의 화합물의 경우, 오로라 키나제의 억제는 실질적으로 임상적으로 이용될 수도 있는 것으로 예상하기는 어려운데, 이는 오로라 A 및 B를 제외한 키나제의 억제제가 부작용을 발생시킬 수도 있기 때문이다. 그러므로, 본 발명이 해소하고자 하는 기술적 문제점의 하나는 오로라 A 및 B의 유효하며 선택적인 억제제인 화합물을 개발하는 것이다.

시클릭 뉴클레오티드 포스포디에스테라제 효소 PDE3은 심장 및 혈관 평활근의 근육세포에서 발생하는 시클릭 뉴클레오티드 cAMP 및 cGMP에 의하여 매개되는 시그날링에 주로 작용한다. 소분자에 의한 PDE3의 억제는 수축촉진 및 혈관이완 작용을 가져서 심장 수축에서의 결함이 특징인 특정한 심근병증의 치료를 위하여 단시간에 유용한 것으로 입증될 수 있다. 그러나, 이러한 분자의 장시간 사용은 이와 같은 유형의 환자에서의 사망률을 증가시키는 것으로 밝혀졌다. 게다가, 이러한 유형의 병리학을 나타내지 않는 환자, 예컨대 암에 걸린 환자에서의 PDE3 억제제의 장시간 사용은 심박에 원치않는 효과를 야기할 수 있다. 그러므로, 항암 요법에서 PDE3를 억제하지 않는 것이 중요하다. 이와 관련하여, 문헌[Exp. Opin. Invest. Drugs 2002, 11, 1529-1536 "Inhibitors of PDE3 as adjunct therapy for dilated cardiomyopathy"], [Eur. Heart J. supplements 2002, 4(supplement D), D43-D49 "What is wrong with positive inotropic drugs? Lessons from basic science and clinical trials"]을 참조한다. 본 발명이 해소하고자 하는 또다른 기술적 문제점은 오로라 A 및 B 억제제 화합물이 효소 PDE3을 억제하지 못한다는 점이다.

또한, 항암 성분은 대사 안정성을 나타내는 것이 중요하다. 문헌[section 10.2.2 of "Chimie pharmaceutique" G.L. Patrick, De Boeck, published 2003, ISBN=2-7445-0154-9]을 참조한다. 그 이유는 제약 화합물의 약물동태학의 부적절함이 이의 개발에서의 실패에 대한 주요한 원인 중 하나가 되기 때문이다. 문헌[Curr . Pharm . 2005, 11, 3545 "Why drugs fail-a study on side effects in new chemical entities"]. 게다가, 대사는 종종 청소율, 약물 상호작용, 약물동태학에서의 개인간 변동성 및 임상적 유효성 및 독성의 주요한 결정요인이 된다. 문헌[Curr. Drug Metab. 2004, 5(5), 443-462 "Human hepatocytes in primary culture: the choice to investigate drug metabolism in man"]. 본 발명이 해소하고자 하는 또다른 기술적 문제점은 오로라 A 및 B 억제제 화합물이 높은 화학적 및 대사 안정성을 나타낸다는 점이다.

[종래 기술]

문헌[Bioorg. Med. Chem. Lett. 2002, 12, 1481-1484]에는 상이한 삼중환 구조를 갖는 화합물 6A가 표 II에 기재되어 있다.

WO01/36422에는 상이한 삼중환 구조를 갖는 화합물이 기재되어 있다.

WO2004/005323에는 하기 화학식 a의 화합물 E5A29가 상이한 삼중환 구조를 갖는 EPO 수용체로서 기재되어 있다.

<화학식 a>

게다가, 이 화합물은 삼중환 고리계의 상부에서 기 -O-벤즈이미다졸릴로 치환된 페닐 고리를 포함하지 않는다.

WO2005/016245에는 하기 화학식 b의 상이한 삼중환 구조를 갖는 항암 화합물이 기재되어 있다.

<화학식 b>

(상기 화학식에서, R₄는 치환된 페닐기를 나타낼 수 있음). -O-벤즈이미다졸릴 기에 의한 치환은 기재되어 있지 않으며 또한 시사되지도 않았다.

WO2007/012972 및 유럽 특허 공고 공보 제1,746,097호에는 하기 화학식 c 및 한 실시양태에서는 하기 화학식 c'의 함암 화합물이 기재되어 있다.

<화학식 c>

<화학식 c'>

(상기 화학식에서, R₂는 치환된 아릴 또는 헤테로아릴 기를 나타내며, X는 N 또는 CR₇을 나타내며, R₅ 및 R₆은 모두 H 또는 CH₃를 나타낼 수 있음). WO2007/012972에는 화학식 I의 화합물의 특징이 되는 기

를 포함하는 예가 없다. 게다가, 분해된 화합물 중에서, WO2007/012972에는 우선성 화합물이 오로라 A 또는 B에 대하여 활성이 가장 큰 것으로 교시되어 있다(참고, 제147면의 표에서 실시예 119 및 120).

WO02/062795에는 하기 화학식 d의 화합물이 개시되어 있다.

<화학식 d>

(상기 화학식에서, R₄ 및 R₅는 임의로 5- 또는 6-원 고리를 형성할 수 있음).

[발명의 간단한 설명]

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 보다 구체적으로는 그의 좌선성 형태(Ia), 특히 메탄올 중의 0.698 ㎎/㎖의 농도에서 광회전 [α]_D=-38.6±0.7을 나타내는 것에 관한 것이다. 화합물은 염기 형태 또는 산, 특히 제약상 허용되는 산과의 부가 염 형태로 존재할 수 있다. 이러한 화합물은 오로라 A 및 B 키나제의 선택적 억제제이다. 이는 항암 성분으로서 사용될 수 있다.

<화학식 I>

또한, 본 발명은 상기 화합물 및 1종 이상의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물 및, 상기 화합물을 포함하는 의약에 관한 것이다.

또한, 본 발명은

? 3종의 성분

,

을 함께 반응시켜 화합물

(여기서 PG는 벤즈이미다졸의 NH 관능기에 대한 보호기를 나타냄)을 얻는 단계;

? 벤즈이미다졸의 NH 관능기를 탈보호시켜 화학식 I의 화합물을 얻는 단계;

? 적절하게는 좌선성 화합물을 분리하는 단계

를 포함하는, 상기 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

3종의 화합물 사이의 반응은 환류중인 알콜, 특히 1-부탄올 중에서 실시된다. 하기와 같은 중간체도 또한 본 발명의 일부를 형성한다.

,

(상기 식에서, PG는 예를 들면 기

가 될 수 있음).

[발명의 설명]

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.

<화학식 I>

이러한 화합물은 라세미 형태로 또는 2종의 좌선성(Ia) 및 우선성(Ib) 거울상이성체의 형태로 존재할 수 있다. 좌선성 화합물 (Ia)은 오로라 A 및 B 키나제에 대한 선택적 억제제 활성이 우선성 거울상이성체(Ib)보다 훨씬 더 크다. 좌선성 화합물 (Ia)은 또한 항증식성 활성이 우선성 거울상이성체(Ib)보다 더 크다(하기 표 I 참조).

3종의 화합물 (I), 화합물 (Ia) 및 화합물 (Ib)은 염기 형태 또는 산과의 부가 염 형태로 존재할 수 있다. 예를 들면 정제 또는 분리 단계에서 사용될 수 있는 산의 임의의 기타의 형태의 염도 또한 본 발명의 일부를 형성하기는 하나, 염은 제약상 허용되는 산을 사용하여 생성되는 것이 이롭다. 문헌[P. Stahl, C. Wermuth; Handbook of Pharmaceutical Salts; Wiley Ed. ISBN-13: 978-3906390260, ISBN-10: 3906390268].

화합물 (I) 및 화합물 (Ia)은 항암 성분으로서 또는 암을 치료하기 위한 의약의 제조를 위하여 사용될 수 있다. 암은 특히 오로라 A 및/또는 B 키나제(들)가 관련되어 있는 암이다.

화합물 (I), 화합물 (Ia) 및 화합물 (Ib)은 하기 반응식 I에 의하여 얻었다.

<반응식 I>

단계 1: 2-할로-벤즈이미다졸(Hal=Br 또는 Cl)의 NH 관능기는 보호기 PG를 사용하여 보호하여 A1을 얻었다. PG-X는 보호기 PG를 투입한 제제를 나타낸다. PG는 특히 디히드로피란(

)일 수 있으며, 상기의 경우에서 PG-X는 3,4-디히드로-2H-피란(

)을 나타낸다.

단계 2: A1은 염기의 존재하에서 3-포르밀-페놀과 반응하여 해당 페놀레이트 이온을 생성하여 B1을 생성한다. 염기는 알칼리 금속 수소화물, 예컨대 NaH가 될 수 있다. 반응은 극성 비양성자성 용매, 예컨대 DMF 중에서 실시된다.

단계 3: B1, 3-아미노-2-에톡시카르보닐피롤 및 1,3-시클로헥산디온을 예를 들면 알콜(예, 1-부탄올) 중에서 환류하에 서로 반응시켜 C1을 생성하였다.

단계 4: C1의 NH 관능기를 탈보호시켜 화학식 I의 화합물을 얻었다. 탈보호 조건은 PG의 성질에 따라 결정된다. 예를 들면, PG가 디히드로피란을 나타낼 경우 강산을 사용하였다.

단계 5: 예를 들면 키랄 크로마토그래피를 사용하여 2종의 거울상이성체(Ia) 및 (Ib)를 분리하였다.

각각의 단계 1 내지 5의 경우, 실시예 1에 기재된 특정한 조건을 참조할 수 있다.

실시예

분석 방법

방법 LC/MS-A

70℃에서 온도조절되고 1 ㎖/분의 유속으로 0.1% 포름산를 포함하는 아세토니트릴(용매 B)로부터 0.1% 포름산을 포함하는 물(용매 A)까지의 구배로 용출시키는 액큐어티(Acquity) Beh C18 UPLC 컬럼, 1.7 ㎛ 2.1×50 ㎜(워터스) 상에서 분석용 생성물을 분리하였다. 용출 프로그램: 5%의 용매 B에서 0.15 분 동안 등용매 단계, 3.15 분 이내에 5%로부터 100%까지의 용매 B 구배, 그후 다시 0.1 분에 걸쳐 초기 조건으로 복귀. 생성물을 액큐어티 PDA 다이오드-어레이 UV/vis 검출기(워터스, 파장 범위 스캔: 192-400 ㎚), 세덱스(Sedex) 85 광 산란 검출기[세데레(Sedere), 분무 기체: 질소, 분무 온도: 32℃, 분무 압력: 3.8 bar] 및 액큐어티 SQD 질량 분석계(워터스, 양의 및 음의 모드로 작동함, 질량 범위 스캔: 80 내지 800 amu)에 의하여 검출하였다.

방법 LC/MS-B

워터스 UPLC-SQD 기기 상에서 양의 및/또는 음의 전기분무 이온화 방식(ES+/-)으로 하기와 같은 액체 크로마토그래피 조건하에서 스펙트럼을 얻었다: 컬럼: 액큐어티 BEH C18 1.7 ㎛, 2.1×50 ㎜; T_컬럼: 50℃; 유속: 1 ㎖/분; 용매: A: H₂O(0.1% 포름산); B: CH₃CN(0.1% 포름산); 구배(2 분): 5%로부터 50% B, 0.8 분; 1.2 분: 100% B; 1.85 분 100% B; 1.95 분 5% B.

¹ H NMR

스펙트럼을 브루커(Bruker) 분광계 상에서 기록하였으며, 생성물을 DMSO-d₆에 용해시켰다. 화학적 이동 δ는 ppm 단위로 기재하였다.

IR

적외선 스펙트럼은 니콜렛 넥서스(Nicolet Nexus) 분광계 상에서 KBr 디스크 상에서 2 ㎝^-1의 해상도로 기록하였다.

광회전의 측정

광회전은 퍼킨-엘머(Perkin-Elmer) 341 편광계 상에서 기록하였다.

원소 분석

원소 분석은 써모(Thermo) EA1108 분석기 상에서 실시하였다.

오로라 A 및 B 상에서의 활성 측정

효소의 키나제 활성을 억제하는 능력은 상이한 농도의 테스트 화합물 (일반적으로 0.17 내지 10,000 nM)의 존재하에서 효소의 잔류 키나제 활성을 측정하여 평가하였다. 투여량-반응 곡선을 생성하였으며, 이는 IC₅₀(50% 억제 농도)가 측정되도록 하였다. 키나제 활성은 37℃에서 30 분 배양후 단백질 NuMA(핵 유사분열 구조 단백질)의 단편에 혼입된 방사성 인산염(33P)의 양의 방사성 분석으로 측정하였다. 테스트 화합물을 우선 디메틸 설폭시드(DMSO)에 상이한 농도로 용해시켰다. 플래쉬플레이트(FlashPlate) 미량 역가판[(니켈 킬레이트(Nickel Chelate) 플래쉬플레이트-96, 퍼킨-엘머]의 웰에서 실시하였다. 각각의 웰(100 ㎕)은 50 mM 트리스-HCl, pH=7.5; 10 mM MgCl₂; 50 mM NaCl, 1 mM 디티오트레이톨의 완충제 중에 10 nM 오로라 A, 500 nM NuMA, 1 μM ATP 및 0.2 μCi ATP-γ-33P를 포함한다. DMSO의 최종 비율은 3%이다. 교반에 의하여 균질화시킨 후, 평판을 37℃에서 30 분 동안 배양하였다. 그후, 웰의 내용물을 제거하고, 웰을 PBS 완충제로 세정하였다. 그후, 방사능은 TRILUX I450 마이크로베타(Microbeta) 계수기(WALLAC)를 사용하여 측정하였다. 각각의 평판에서, 효소 및 기재의 존재하에서 그리고 본 발명의 화합물의 부재하에서 측정을 실시하는 4개의 양성 대조군(최대 키나제 활성) 및, 효소, 기재 및 테스트 화합물의 부재하에 측정을 실시하는 4 개의 음성 대조군(배경)인 8개의 대조군 웰이 존재한다. 측정을 하기 표 I에 제시하였다.

오로라 A

사용한 재조합 인간 효소 오로라 A는 N-말단 위치에서 폴리-히스티딘 태그를 갖는 전체 형태로 발현되며, 이. 콜라이에서 생성된다. C-말단 위치에서 폴리-히스티딘 태그를 갖는 인간 단백질 NuMA의 단편(아미노산 1701-2115)은 이. 콜라이에서 재조합 형태로 발현된다.

오로라 B/Incenp

전체 인간 효소 오로라 B는 바쿨로바이러스계에서 인간 단백질 Incenp의 단편(aa 821-918)으로 동시발현되며, 곤충 세포에서 발현된다. 오로라 B는 N-말단 위치에서 폴리-히스티딘 태그를 갖는 반면, Incenp 단편은 N-말단 위치에서 글루타티온-S-트랜스퍼라제(GST) 태그를 갖는다. 2개의 단백질은 오로라 B/Incenp로 지칭되는 복합체를 형성한다. C-말단 위치에서 폴리-히스티딘 태그를 갖는 인간 단백질 NuMA의 단편(aa1701-2115)은 이. 콜라이에서 재조합 형태로 발현된다. 이러한 단편은 기질로서 사용된다.

세포 증식의 측정

세포(종양 세포주 HeLa - 참고: ATCC CCL-2 및 HCT116 참고: ATCC CCL-247)를 테스트 화합물과 96 시간 동안 접촉시키고, ¹⁴C-티미딘을 마지막 24 시간 동안 첨가하였다. 세포 증식은 세포 중에 투입된 ¹⁴C-티미딘의 양에 의하여 평가하였다.

테스트 화합물을 용해시켜 DMSO 중의 10 mM로 스톡 용액을 형성하고, 이러한 스톡 용액을 사용하여 소정 범위의 계열 희석, 일반적으로 10,000 μM 내지 0.3 μM을 생성하였으며, 이러한 계열 희석은 그 자체를 세포 배양 평판에서 1/20 희석에 대하여 사용하는 세포 배양 배지(20배 용액) 중에서 1/50으로 희석하였다. 테스트 화합물의 최종 농도는 일반적으로 10,000 내지 0.3 nM이다.

D0: 세포를 96-웰 사이토스타(Cytostar) 평판에 180 ㎕의 배양 배지에 파종하였다. 그후, 평판을 인큐베이터 내에서 37℃, 5% CO₂에서 4 시간 동안 두었다. 그후, 테스트 생성물을 웰당 10 ㎕의 부피로 20× 용액으로부터 출발하여 첨가하였다. 이 용액은 배양 배지 중에 2%의 DMSO를 포함한다. 그러므로, DMSO의 최종 농도는 0.1%이었다. 그후, 평판을 인큐베이터 내에서 37℃/5% CO₂에서 72 시간 동안 두었다.

D3: 72 시간후, 배양 배지 중에서 10 μCi/㎖로 웰당 10 ㎕의 ¹⁴C-티미딘을 첨가하였다. 그후, 평판을 인큐베이터 내에서 37℃/5% CO₂에서 24 시간 동안 두었다.

D4: ¹⁴C 티미딘의 혼입은 마이크로-베타(Micro-Beta) 방사능 계수기(퍼킨-엘머) 상에서 24 시간, "펄스" 기간후 측정하였다. 테스트 생성물로 세포를 처리한 총 시간은 96 시간이다.

억제율 IC₅₀은 하기의 수학식을 사용하여 엑셀로 계산하였다.

X=샘플에 대한 측정치

CC=세포 대조군

공시험=세포가 없는 웰에서의 측정치

IC₅₀은 XLfit 소프트웨어(IDBS, 영국 소재)를 사용하여 포뮬러 205를 사용하여 계산하였으며, 변수 D[힐(Hill) 넘버]는 1의 값으로 고정하였다. 결과를 하기 표 I에 제시하였다.

효소 PDE3의 활성에 대한 본 발명의 화합물의 효과 평가

효소 PDE3의 활성에 대한 본 발명의 화합물의 효과는 컴파니 세렙(프랑스 86600 셀르 레베스꼬 르 브와 레베끄 소재; http://www.cerep.fr)에 의하여 그의 표준 프로토콜에 의하여 평가하였다. (문헌[Bender, A.T., Beavo, J.A. Pharmacol Rev. 2006, 58, 488-520]을 참조하며, 재조합 형태의 효소 PDE3A를 Sf9 세포 중에서 발현시키고, 기질은 cAMP이고, 잔류 AMPc는 HTRF에 의하여 측정하였다. 테스트에서의기준 억제제는 밀리논이며, 이는 IC₅₀이 270 nM이다. 잔류 활성(%)은 억제제가 없는 대조군에 관한 것이다). 결과는 억제를 50% 유발하는 농도(IC₅₀) 또는 화합물의 세트 농도에서 측정한 억제율로서 나타냈다. 결과를 하기 표 I에 제시하였다.

화합물의 화학적 안정성의 측정

화합물의 화학적 안정성은 50/50 (v/v) 물/아세토니트릴 혼합물 중에서 0.05 N 염산; 50/50 (v/v) 물/아세토니트릴 혼합물 중의 0.05 N 수산화나트륨; 50/50 (v/v) 물/아세토니트릴 혼합물 중의 인산나트륨 완충제, 25 mM, pH=7.4; 1% (w/v)의 벤질아민 히드로클로라이드를 포함하는 50/50 (v/v) 물/아세토니트릴 혼합물 중의 인산나트륨 완충제 25 mM, pH=7.4; 1% (v/v)의 2-머캅토에탄올을 포함하는 50/50 (v/v) 물/아세토니트릴 혼합물 중의 인산나트륨 완충제, 25 mM, pH=7.4의 다양한 배지 중에서 측정하였다. 화합물을 DMSO 중의 10 mM 스톡 용액의 희석에 의하여 100 μM의 최종 농도로 실험중인 배지 중에서 희석하였다. 용액을 20℃에서 총 48 시간 동안 저장하고, 실험중인 화합물의 농도를 HPLC로 시간에 대하여(t=0, 1, 6, 12, 24 및 48 시간) 측정하였다. HPLC 분석은 아세토니트릴(용매 B)로부터 0.5% (v/v)의 포름산을 포함하는 물(용매 A)로의 구배로 1.5 ㎖/분의 유속 및 25℃의 온도에서 용출시키는 루나(Luna) C18 컬럼, 30×4.6 ㎜, 3 ㎛[페노메넥스(Phenomenex)] 상에서의 다이오드 어레이 검출기가 장착된 아질런트(Agilent) 시스템 1100 기기 상에서 실시하였다. 용출 프로그램은 5 분간 10%로부터 90% 용매 B의 구배에 이어서, 90%의 용매 B에서 1 분의 등용매 단계로 이루어지며, 다시 1분에 걸쳐 초기 조건으로 복귀한다. 실험중인 생성물의 농도는 각각의 생성물의 최대 파장에서의 크로마토그램 상에서 실험중인 생성물의 특징적인 피크의 높이 및 면적으로부터 평가하였다. 각각의 샘플링 시점에서 측정한 면적 및 높이는 시간 0에서 샘플에 대하여 얻은 면적 및 높이에 관한 것이다. 분해가 관찰될 경우, 생성된 시간-농도 곡선으로부터 반감기를 측정하였다. 결과를 하기 표 II에 제시하였다.

인간 및 쥐 간의 마이크로좀 제제의 존재하에서의 대사의 평가

마이크로좀 제제는 제약 화합물의 대사 안정성을 측정하는데 중요한 반면, 1차 간세포 배양액은 그의 고유 청소율의 더욱 상세한 평가를 가능케 하며, 더 우수한 시험관-생체 상관 관계는 인간에서의 간 청소율을 시사한다.

본 발명의 화합물 (5 μM)을 인간 및 쥐 마이크로좀 간 분획(1 ㎎/㎖의 단백질)에 대하여 생리적 온도에서 배양시키고, 소 혈청 알부민(1 ㎎/㎖ BSA) 및 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트의 환원된 형태(1 mM NADPH)의 존재하에서 포스페이트 완충제 중에서 희석하였다. 배양을 종료시키기 위하여, 내부 표준물(IS)로서 코르티코스테론을 포함하는 4배 부피의 아세토니트릴을 첨가하였다. 샘플을 원심분리하고, 상청액을 액체 크로마토그래피/탠덤 질량 분광학 커플링(LC/MS-MS)에 의하여 분석하였다. LC/MS-MS 분석은 1100 시리즈 크로마토그래피 시스템(아질런트) 및 Pal CTC 자동 주입기가 장착된 QTRAP API4000 질량 분광계(Sciex) 상에서 실시하였다. 데이타를 얻고, 애널리스트(Analyst) 1.4.1 소프트웨어를 사용하여 분석하였다. 샘플을 0.7 ㎖/분의 유속에서 아세토니트릴(용매 B)로부터 0.1% 포름산을 포함하는 물(용매 A)의 구배로 용출시키는 3 ㎛ C18 폴라리스(Polaris) 컬럼 상에서 분리하였다. 용출 프로그램은 2 분 이내에 20%로부터 90%의 용매 B의 구배, 0.9 분 동안 90%의 용매 B에서의 등용매 단계 및 0.1 분 동안 초기 조건으로의 복귀로 이루어진다. 화합물 및 내부 표준물에 대한 크로마토그래피 피크의 면적은 애널리스트-클래식(Analyst-Classic) 알고리즘을 사용하여 적분하였다. 본 발명의 생성물의 대사 안정성은 0 분(t0) 및 20 분(t20)의 배양후 측정한 적분비(화합물의 이온 전류/이온 전류 IS)를 비교하여 평가하였다. 그후, 대사 안정성은 하기 수학식에 의하여 소실율로서 나타냈다.

대사율(%)=(t0에서의 피크의 비-t20에서의 피크의 비)/t0에서의 피크의 비

결과를 하기 표 III에 제시하였다.

인간 간세포의 존재하에서 청소율의 평가

본 발명의 화합물 (0.5 또는 5 μM)은 24 시간 동안 콜라겐이 피복된 48-웰 평판 상에서 특이성 공여자로부터 얻은 새로운 또는 냉동보존된 인간 간세포(약 200,000개의 세포/웰)의 존재하에서 인큐베이터 내에서 생리적 온도에서 배양하였다. 배양은 배양 배지(HAM F12 - 윌리엄 E)를 사용하여 실시하였다. 다양한 시간(0; 0.5; 1; 2; 4; 6; 8 및 24 시간)에서, 100 ㎕를 각각의 웰로부터 샘플링하고, 내부 표준물(IS)로서 코르티코스테론을 포함하는 700 ㎕의 70/30 (v/v) 아세토니트릴/물 혼합물을 첨가하여 동역학을 중지시켰다. 그후, 세포를 분해하고, 세포내 및 세포외 배지를 혼합하고, 그의 분석 전 냉동된 형태로 -20℃에서 보관하였다. 해동후, 샘플을 300 g에서 20 분 동안 원심분리하고, 상청액을 액체 크로마토그래피/탠덤 질량 분광학 커플링(LC/MS-MS)에 의하여 분석하였다. LC/MS-MS 분석은 1100 시리즈 크로마토그래피 시스템(아질런트) 및 Pal CTC 자동 주입기가 장착된 QTRAP API4000 질량 분광계(Sciex) 상에서 실시하였다. 데이타를 얻고, 애널리스트(Analyst) 1.4.1 소프트웨어를 사용하여 분석하였다. 샘플을 0.7 ㎖/분의 유속에서 아세토니트릴(용매 B)로부터 0.1% 포름산을 포함하는 물(용매 A)의 구배로 용출시키는 3 ㎛ C18 폴라리스 컬럼 상에서 분리하였다. 용출 프로그램은 2 분 이내에 20%로부터 90%의 용매 B의 구배, 0.9 분 동안 90%의 용매 B에서의 등용매 단계 및 0.1 분 동안 초기 조건으로의 복귀로 이루어진다. 본 발명의 생성물의 농도는 내부 표준물(IS)에 대한 생성물의 특징적 이온의 이온 전류를 적분하여 측정하였다. 얻은 화합물/IS 비는 기지의 농도의 보정 표준물에 관한 것이며, 그에 의하여 본 발명의 생성물의 농도를 확인하도록 한다. 그후, 고유의 청소율(㎖.h^-1.10^-6 세포)은 WinNonLin 소프트웨어(5.0)를 사용하여 동역학적 프로파일(농도/시간)로부터 측정하였다. 결과를 하기 표 IV에 제시하였다.

실시예 1: 에틸 8-옥소-9-[3-(1H-벤즈이미다졸-2-일옥시)페닐]-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트(I)의 제조

A1. 2-클로로-1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸(CAS No. 208398-29-2)

10 ℓ 반응기를 아르곤하에서 교반하면서 2.5 ℓ의 THF, 180 g의 2-클로로벤즈이미다졸(1.18 mol) 및 325 ㎖의 3,4-디히드로-2H-피란(6.56 mol, 3 eq.)을 채웠다. 용해가 발생될 때까지(혼합물의 온도: 40℃) 반응기를 가열하였다. 그후, 6.3 g의 파라-톨루엔설폰산(0.033 mol, 0.028 eq.)을 투입하였다. 온도를 49℃ 내지 52℃에서 2.5 시간 동안 유지하였다. 냉각을 12℃에서 실시하고, 7.65 g의 나트륨 메톡시드(0.142 mol, 0.12 eq.)를 총 15 분 동안 교반을 유지하면서 첨가하였다. 그후, 온도를 18℃로 하고, 5 ℓ의 n-헵탄을 첨가하고, 혼합물 전체를 300 g의 Clarcel FLO-M 상에서 여과하고, 보유액을 5 ℓ의 n-헵탄으로 세정하였다. 여과액을 감압하에 무수 상태로 농축시켜 292.6 g의 2-클로로-1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸을 약한 황색 오일의 형태로 얻었다(정량적 수율).

B1: 3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]벤즈알데히드

응축기, 온도계 및 교반기 샤프트가 각각 장착된 2개의 2 ℓ 3목 둥근 바닥 플라스크에 아르곤하에서 N,N-디메틸포름아미드(플라크스당 0.4 ℓ) 및 3-히드록시벤즈알데히드(68.5 g, 플라크스 1; 64.2 g, 플라크스 2; 1.08 mol)를 가하였다. 그후, 수소화나트륨(광유 중의 60% 분산물)을 여러 부분으로 나누어 첨가하고(플라크스 1: 26 g; 플라크스 2: 24 g; 1.25 mol, 1.2 eq.), 첨가 동안 최대 온도는 32℃이었다. 2-클로로-1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸(A1)(순도는 85%로 평가됨)을 투입하였다(플라크스 1: 0.5 ℓ의 N,N-디메틸포름아미드 중의 151 g; 플라크스 2: 0.5 ℓ의 N,N-디메틸포름아미드 중의 142 g; 1.05 mol, 0.97 eq.). 그후, 혼합물을 환류 가열하고(온도 140℃, 온도 상승 시간 40 분), 환류를 1 시간 동안 지속시켰다. 그후, 가열을 중지하고, 혼합물을 1.5 시간에 걸쳐 냉각되도록 하였다. 2개의 플라스크의 내용물을 합하였다. 합한 혼합물을 5 ℓ의 빙수에 서서히 혼합하였다. 얻은 수성상을 4×2.5 ℓ의 에틸 아세테이트(AcOEt)로 추출하였다. 유기상을 합하고, 3 ℓ의 물로 세정한 후, 2 ℓ의 포화 NaCl 용액으로 세정하고, 마지막으로 MgSO₄의 첨가로 밤새 건조시켰다. 그후, 얻은 유기상을 유리 프릿(다공도 4) 상에서 여과하고, 감압하에 무수 상태로 농축시켜 385 g의 갈색 오일을 얻었다 (LC/MS-A, tr (체류 시간)=1.86 분, MS 양의 모드: m/z=323.16).

상기에서 얻은 158 g의 미정제 생성물 분획을 1.5 ℓ의 n-헵탄/AcOEt 혼합물(8/2 부피) 중에서 고온에서 용해시키고, 500 g의 실리카(70-30 메쉬)와 합하고, 혼합물을 45 분 동안 교반하였다. 생성된 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 3 ℓ의 n-헵탄/AcOEt 혼합물(8/2 부피)로 세정하였다. 얻은 유기상을 감압하에 무수 상태로 농축시켰다. 잔류물을 200 ㎖의 이소프로필 에테르에 기계적 교반 및 초음파 처리에 의하여 재현탁시킨 후, 유리 프릿(다공도 3) 상에서 여과하였다. 생성된 고체를 2×40 ㎖의 이소프로필 에테르로 세정하고, 감압하에서 40℃에서 16 시간 동안 건조시켜 68 g의 고체를 얻었다. 유사한 처리를 미정제 생성물 나머지에 적용하여 87.8 g의 고체를 얻었다. 얻은 고체를 합하고, 균질화시켜 155.8 g의 3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]벤즈알데히드를 옅은 베이지색 결정의 형태로 얻었다(LC/MS-A, tr=1.87 분, MS 양의 모드 m/z=323.13). MS(LC/MS-B): tr=1.00 분; [M+H]⁺: m/z 323.

2 ℓ의 n-헵탄/AcOEt 혼합물(1/1 부피)로 상기 사용한 실리카 상을 세정하여 67 g의 생성물을 무수 상태로 감압하에서 농축시킨 후 얻었다. 이러한 생성물을 2 ℓ의 n-헵탄/AcOEt 혼합물(9/1 부피)에서 취하고, 285 g의 실리카(70-30 메쉬)와 합하고, 교반하고, 초음파로 1 시간 동안 처리하였다. 그후, 현탁액을 셀라이트 상에서 여과하고, 고체상을 2 ℓ의 n-헵탄/AcOEt 혼합물(9/1 부피)로 세정하였다. 여과액을 감압하에 무수 상태로 농축시키고, 잔류물을 400 ㎖의 n-헵탄/에탄올 혼합물(95/5 부피)로 연화처리하고, 유리 프릿(다공도 3) 상에서 여과하고, 감압하에서 건조시켜 35 g의 3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]벤즈알데히드를 옅은 베이지색 결정의 형태로 얻었다 (LC/MS-A, tr=1.93 분, MS 양의 모드 m/z=323.16).

C1: 에틸 8-옥소-9-{3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]페닐}-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트

2 ℓ 원추형 플라크스에 자기 교반하면서 50 g의 3-아미노-2-에톡시카르보닐피롤 히드로클로라이드 및 0.204 ℓ의 2N 수산화나트륨 용액을 넣었다. 혼합물을 15 분 동안 상온(AT)에서 교반한 후, 3×0.3 ℓ의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기상을 합하고, MgSO₄에서 건조시키고, 무수 상태로 감압하에서 농축시켰다. 잔류물을 n-펜탄으로 연화처리하고, 여과하고, 감압하에서 일정한 중량으로 건조시켜 36.4 g의 3-아미노-2-에톡시카르보닐피롤을 갈색 고체의 형태로 얻었다.

교반 샤프트, 온도계 및 응축기가 장착된 2 ℓ 3목 둥근 바닥 플라스크에 1.2 ℓ의 1-부탄올, 145 g의 3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]벤즈알데히드(0.405 mol, B1), 62.4 g의 3-아미노-2-에톡시카르보닐피롤(1 eq., 0.405 mol), 46.8 g의 97% 형태의 1,3-시클로헥산디온(1 eq., 0.405 mol) 및 70.5 ㎖의 N,N-디이소프로필에틸아민(1 eq.)을 넣고, 혼합물을 환류하에 (온도 상승 시간 55 분, 30 분 동안 환류 유지, 온도 114℃) 얻었다. 그후, 혼합물을 AT로 냉각시키고, 감압하에 무수 상태로 농축시켜 에틸 8-옥소-9-{3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]페닐}-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트(LC/MS-A, tr=1.96 분, MS 양의 모드 m/z=553.33)를 포함하는 290 g의 갈색 오일을 얻었다. 35 g의 3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]-벤즈알데히드(0.098 mol, 실시예 B1)를 사용하여 유사한 절차를 실시하여 에틸 8-옥소-9-{3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]페닐}-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트를 포함하는 72 g의 갈색 오일을 얻었다 (LC/MS-A, tr=1.96 분, MS 양의 모드 m/z=553.35).

D1: 에틸 8-옥소-9-[3-(1H-벤즈이미다졸-2-일옥시)페닐]-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트(화합물 I)

2 ℓ 둥근 바닥 플라스크에 에틸 8-옥소-9-{3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]페닐}-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트(실시예 1.3)를 포함하는 224 g의 갈색 오일, 0.7 ℓ의 에탄올 및 0.243 ℓ의 2N 염산을 넣었다. 혼합물을 AT에서 16 시간 동안 교반한 후, 유리 프릿(다공도 4) 상에서 여과하였다. 여과액을 감압하에 무수 상태로 농축시키고, 잔류물을 0.5 ℓ의 이소프로필 에테르로 연화처리하였다. 얻은 고체를 감압하에서 일정한 중량으로 건조시켜 에틸 8-옥소-9-[3-(1H-벤즈이미다졸-2-일옥시)페닐]-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트를 포함하는 253 g의 갈색 고체를 얻었다 (LC/MS-A, tr=1.46 분, MS 양의 모드 m/z=469.29). 에틸 8-옥소-9-{3-[1-(테트라히드로-피란-2-일)-1H-벤즈이미다졸-2-일옥시]페닐}-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트(C1)을 포함하는 54 g의 갈색 오일로 유사한 절차를 실시하여 에틸 8-옥소-9-[3-(1H-벤즈이미다졸-2-일옥시)페닐]-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트를 포함하는 60 g의 갈색 고체를 생성하였다(LC/MS-A, tr=1.48 분, MS 양의 모드 m/z=469.29).

0.8 g의 얻은 생성물의 분취액 분획을 20 분의 디클로로메탄의 등용매 단계에 이어서 1시간에 걸친 디클로로메탄 중의 0 부피%로부터 1 부피%의 이소프로판올의 구배 및 마지막으로 20 분의 디클로로메탄/이소프로판올(99/1 부피)의 등용매 단계로 용출시키는 50 g 실리카 카트리지(10-90 ㎛)(Biotage SNAP, KP-Sil) 상에서의 크로마토그래피로 정제할 수 있다. 예상 생성물을 포함하는 분획을 합하여 0.21 g의 황색 고체를 얻었다. 동일한 규모로 실시한 2종의 유사한 크로마토그래피 분리의 생성물을 아세토니트릴로부터 결정화시켜 총 0.16 g의 에틸 8-옥소-9-[3-(1H-벤즈이미다졸-2-일옥시)페닐]-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트를 베이지색 결정의 형태로 얻었다 (LC/MS-A, tr=1.61 분, MS 양의 모드 m/z=469.28).

원소 분석: C=68.72%; H=5.10%; N=11.82%; H₂O=0.38%.

실시예 2: 에틸 8-옥소-9-[3-(1H-벤즈이미다졸-2-일옥시)페닐]-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트의 좌선성 거울상이성체(Ia)

좌선성 거울상이성체를 실시예 D1의 미정제 생성물로부터 n-헵탄/디클로로메탄/에탄올/트리에틸아민 혼합물(50/47.5/2.5/0.1 부피)로 용출시키는 Welk-01RR 키랄 컬럼, 10 μM, 80×350 ㎜(레지스, 미국) 상에서 정제하였다. 생성물의 용출은 UV 분광학에 의하여 265 nm에서 검출하였다. 실시예 D1에 기재된 10 g의 미정제 생성물을 각각의 절차에 주입하였다. 이러한 조건하에서, 좌선성 거울상이성체에 해당하는 피크는 50 내지 80 분의 tr로 용출시켰다. 실시예 D1에 기재된 310 g의 미정제 생성물을 정제하여야만 하는 절차에 해당하는 정제된 좌선성 거울상이성체의 분획을 합하고, 균질화시키고, 감압하에 무수 상태로 농축시켜 50 g의 베이지색 고체를 얻었다. 질량 스펙트럼(LC/MS-B): tr=0.77 분; [M+H]⁺: m/z 469; [M-H]^-: m/z 467.

IR: 주요 밴드: 1678; 1578; 1525; 1442; 1188; 1043 및 743 cm^-1. 광회전: 메탄올 중의 c=0.698 ㎎/㎖에서 [α]_D=-38.6±0.7.

원소 분석: C=68.18%; H=5.92%; N=11.22%; H₂O=1.25%.

실시예 3: 에틸 8-옥소-9-[3-(1H-벤즈이미다졸-2-일옥시)페닐]-4,5,6,7,8,9-헥사히드로-2H-피롤로[3,4-b]퀴놀린-3-카르복실레이트의 우선성 거울상이성체(Ib)

우선성 거울상이성체는 n-헵탄/에탄올 혼합물(7/3에 이어서 6/4 부피)로 용출시키는 Welk-01SS 키랄 컬럼, 10 μM, 60×350 ㎜(레지스, 미국) 상에서의 크로마토그래피에 의하여 실시예 D1으로부터의 정제된 생성물의 정제로 얻었다. 생성물의 용출은 UV 분광학에 의하여 검출하였다. 우선성 거울상이성체의 분획을 합하고, 균질화시키고, 감압하에 무수 상태로 농축시켜 1.9 g의 황색 분말을 얻었다. MS (LC/MS-B): tr=0.77 분; [M+H]⁺: m/z=469.2; [M-H]^-: m/z=467.2. 광회전: 메탄올 중의 c=3.6 ㎎/㎖에서 [α]_D=+53.1±1.1.

실시예 4 내지 13: 실시예 4 내지 11의 화합물은 WO2007/012972의 교시(특허청구범위 제26항의 방법 참조)에 의하여 생성하였다. 화학식 II의 삼중환 디히드로피리딘 생성물은 하기 반응식 II에 의하여 생성할 수 있다.

<반응식 II>

1 당량의 피라졸(X=N) 또는 피롤-2-카르복실레이트(X=COOEt), 1 당량의 알데히드 R-CHO 및 1 당량의 디케톤 유도체(Y=CH₂, CMe₂, N-Boc)의 혼합물을 알콜, 예컨대 에탄올 또는 1-부탄올 중에서 ½ 시간 내지 수시간 동안 환류 가열하였다. 그후, 혼합물을 상온으로 냉각시켰다. 목적하는 생성물을 여과에 의하여 분리하거나 또는 용매를 무수 상태로 증발시켰다. 필요할 경우, 미정제 생성물을 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의하여 또는 그밖에 고 성능 정제용 액체 크로마토그래피(HPLC)에 의하여 정제하였다.

Y가 N-Boc를 나타낼 경우, 생성물을 디클로로메탄 중의 트리플루오로아세트산 용액(50/50) 또는 그밖에 디옥산 중의 염산 용액을 사용하여 탈보호시킬 수 있다(하기 반응식 III).

<반응식 III>

화합물 4(R=H)의 제조에 사용되는 화학식 III의 알데히드는 하기 반응식 IV에 의하여 얻을 수 있다. R은 벤즈이미다졸 핵 상에서의 1개(n=1) 또는 1개보다 많은 치환체(n은 2 내지 4임)를 나타내며, 치환체는 1종 이상의 할로겐 원자로 임의로 치환된 페닐, O-알릴, (C₁-C₆)알킬, SCH₂F, OCH₂F, OCHF₂, SCH₃, SCF₃, OCH₃, OCF₃, CF₃, SH, OH, Br, Cl, F, H로부터 선택된다.

<화학식 IV>

단계 1: 3-요오도-벤즈알데히드의 알데히드 관능기는 알콜 보호기 및 보다 특히 디올 보호기(예를 들면 에틸렌 글리콜)를 사용하여 산, 예컨대 파라-톨루엔설폰산의 존재하에서 불활성 용매, 예컨대 톨루엔 중에서 20℃ 내지 반응 혼합물이 비점 온도 사이의 온도에서 보호하였다.

단계 2: 형성된 중간체는 팔라듐 착체, 예컨대 비스(디벤질리덴아세톤)팔라듐, 포스핀 유도체, 예컨대 비스[(2-디페닐포스피노)페닐] 에테르 및 염기, 예컨대 나트륨 tert-부톡시드의 존재하에서 불활성 용매, 예컨대 톨루엔 중에서 20℃ 내지 반응 혼합물의 비점 사이의 온도에서 화학식 IV의 생성물과 반응시켰다.

단계 3: 알데히드 관능기는 수성 산 용액, 예컨대 염산의 존재하에서 임의로 용매, 예컨대 아세톤 중에서 20℃ 내지 반응 혼합물의 비점 사이의 온도에서 탈보호하였다.

하기 표 I는 오로라 A 및 B 억제 활성, 세포주 HeLa 및 HCT116 상에서의 항증식성 활성, PDE3 억제 활성 및 대사를 비교하였다. 화합물 (I) 또는 화합물 (Ia)은 오로라 A 및 B 키나제의 매우 높은 수준의 억제를 나타내며, 세포주 HeLa 및 HCT116에 대하여 매우 우수한 활성을 나타낸다는 것을 알 수 있다.

<표 I>

<표 II>

<표 III>

<표 IV>

Claims

하기 화학식 I의 화합물.
<화학식 I>
제1항에 있어서, 좌선성 형태인 화합물.
제2항에 있어서, 메탄올 중의 0.698 ㎎/㎖의 농도에서 광회전 [α]_D=-38.6±0.7을 나타내는 화합물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 염기 형태 또는 산, 특히 제약상 허용되는 산과의 부가 염 형태인 화합물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 오로라 A 및 B 키나제의 선택적 억제제로서의 화합물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 항암 성분으로서의 화합물.
암을 치료하기 위한 의약의 제조를 위한 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 1종 이상의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 의약.
? 3종의 성분
,
,
을 함께 반응시켜 화합물
(여기서 PG는 벤즈이미다졸의 NH 관능기에 대한 보호기를 나타냄)을 제공하는 단계;
? 벤즈이미다졸의 NH 관능기를 탈보호시켜 화학식 I의 화합물을 얻는 단계;
? 적절하게는 좌선성 화합물을 분리하는 단계
를 포함하는, 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 제조 방법.
제10항에 있어서, 3종의 화합물 사이의 반응이 환류하의 알콜, 특히 1-부탄올 중에서 실시되는 것인 방법.
제10항 또는 제11항에 있어서, PG가 기
를 나타내는 것인 방법.
,
로부터 선택된 화합물.
(상기 식에서, PG는 벤즈이미다졸의 NH 관능기에 대한 보호기를 나타냄)
제14항에 있어서, PG가 기
를 나타내는 것인 화합물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 제조에서 중간체로서의 제13항 또는 제14항에 정의된 화합물의 용도.