KR20110102420A

KR20110102420A - 생분해성 및 생체적합성 캄토테신-중합체 접합체의 약학 제제

Info

Publication number: KR20110102420A
Application number: KR1020117015636A
Authority: KR
Inventors: 제임스 롤케; 러셀 씨 피터; 마오 인; 알렉산드르 유르코베츠키; 귀 리우; 에밀 파르한
Original assignee: 메르사나 테라퓨틱스, 인코포레이티드
Priority date: 2008-12-10
Filing date: 2009-12-10
Publication date: 2011-09-16
Also published as: CN102307473A; TW201036639A; US20100179181A1; PA8853201A1; PE20100746A1; AR074584A1; US8491880B2; US20140004074A1; WO2010068759A1; CL2009002167A1

Abstract

본 발명은 액체 상태 및 동결건조 상태 둘 다에서 안정한 캄토테신/중합체 이중 단계 약물 배출 시스템을 기재한다. 상기 중합체는 아세탈 및/또는 케탈을 포함한다.

Description

생분해성 및 생체적합성 캄토테신-중합체 접합체의 약학 제제{PHARMACEUTICAL FORMULATIONS OF BIODEGRADABLE BIOCOMPATIBLE CAMPTOTHECIN-POLYMER CONJUGATES}

관련 출원

본원은 35 U.S.C. § 119(e) 하에 2008년 12월 10일자에 출원된 미국 가출원 제61/121,384호에 대한 우선권을 주장하고, 이것은 그 전문이 참조문헌으로 본원에 포함된다.

기술분야

본원은 약물 전달 시스템, 더욱 특히 생분해성 및 생체적합성 중합체 접합체를 위한 제제 분야에 관한 것이다.

정부 지원 연구 또는 개발

미국 정부는 국립연구자원센터(National Center for Research Resources) 및 국립위생연구소(National Institutes of Health)에 의해 지원되는 승인 R21-RR14221호 및 T32 GM07035호에 따라 본 발명에 대한 일정 권리를 가질 수 있다.

캄토테신("CPT")은 중국 나무 캄프토테카 아쿠미네이트(Camptotheca acuminate)로부터 분리된 알카로이드이다. CPT는 항종양 및 항암 특성을 갖는 토포이소머라제 I 억제제(즉, 데옥시리보핵산 복제가 CPT에 노출된 세포에서 차단됨)이다. 이의 활성은 화학치료제로서의 CPT의 평가에 동기 부여하지만, 방광에서의 출혈성 방광염 및 설사와 같은 심각하고 예상가능하지 않은 용량 제한 독성이 관찰되었을 때 그 개발이 중단되었다. 또한, 직접 비경구 투여는 CPT의 빈약한 용해도에 의해 제한된다.

CPT 유도체 및 유사체는 유사하게 실망스럽다. CPT의 카르복실레이트 염 형태는 덜 활성이고 심각하고 예상가능하지 않은 독성을 야기하였다. 토포테칸(Hycamptin) 및 이리노테칸(CAMPTOSAR^®)의 2종의 CPT 유사체가 항암 약물로서 미국에서 임상적인 사용에 대해 승인을 받았음에도, 이 유사체는 골수 압박 및 설사와 관련된다. 이리노테칸 유발 설사는 치명적일 수 있다(Garcia-Carbonero and Supko (2002) Clin. Cancer Re. 8:641-661).

CPT의 독성 효과를 경감시킴과 동시에 이의 치료학적 효과를 유지시키기 위해, 제제 및 약물 배출 시스템이 개발되었다. WO 제2005/023294호에는 CPT의 항암 활성을 보유함과 동시에 독성을 제한하고 CPT를 아세탈 및/또는 케탈을 포함하는 중합체 골격에 연결하여 용해도 및 혈장 반감기를 증가시키는 약물 배출 시스템이 기재되어 있다. 이 중합체 골격은 생분해성 및 생체적합성이다. 아세탈 및 케탈 중합체는 수용액 중에 분해하는 것으로 알려져 있다(Papisov et al, Biomacromolecules (2005) 6: 2659-70)(그 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨). 또한, CPT는 용액 중에 가수분해되는 경향이 있는 에스테르 및 아미드 결합을 통해 중합체에 연결된다. 이러한 특징은 저장, 특히 CPT-중합체 접합체의 수용액의 저장을 어렵게 만든다.

따라서, CPT의 항암 활성을 보유함과 동시에 독성을 제한하고 용해도를 증가시키는 CPT-중합체 접합체의 저장 안정성이 있는 제제에 대한 수요가 당해 분야에 존재한다. 주사용 동결건조된 용액 분말은 점적을 위해 주사용 무균수(USP) 또는 주사용 식염수(USP)에서 용시조제될 필요가 있다. 따라서, 병원 또는 약국에서 제조 시간을 최소화하기 위해 용이하게 용해되는 제제에 대한 수요가 존재한다.

본 발명은 액체 상태 및 동결건조 상태 둘 다에서 안정한 CPT/중합체 이중 단계 약물 배출 시스템을 기재한다.

따라서, 본 발명은 분자량이 약 10 kD 내지 약 500 kD인 하기 화학식 (I)의 화합물; 안정화제; 1종 이상의 완충제; 및 계면활성제를 포함하는 정맥 투여에 적합한 약학 제제를 제공한다:

[상기 식 중,

R₁ 중 하나는 H 또는

이고, 다른 하나는

이며;

R₂ 중 하나는 H 또는

이고, 다른 하나는

이며;

CPT는 캄토테신이고;

n은 32∼3320이며;

m은 0∼833이고;

k는 1∼216이며;

k, m 및 n은 화학식 (I)의 화합물의 약 1 중량% 내지 약 15 중량%가 캄토테신이도록 선택된다].

또한, 본 발명은 분자량이 약 10 kD 내지 약 500 kD인 하기 화학식 (I)의 화합물; 안정화제; 1종 이상의 완충제; 및 계면활성제의 수용액을 포함하는, 정맥 투여에 적합하고 pH가 약 4.2 내지 약 4.8인 저장 안정성이 있는 약학 제제를 제공한다:

[상기 식 중,

R₁ 중 하나는 H 또는

이고, 다른 하나는

이며;

R₂ 중 하나는 H 또는

이고, 다른 하나는

이며;

CPT는 캄토테신이고;

n은 32∼3320이며;

m은 0∼833이고;

k는 1∼216이며;

본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물; 안정화제; 1종 이상의 완충제; 및 계면활성제를 포함하는 동결건조 및 용시조제에 적합한 약학 제제를 더 제공한다:

[상기 식 중,

R₁ 중 하나는 H 또는

이고, 다른 하나는

이며;

R₂ 중 하나는 H 또는

이고, 다른 하나는

이며;

CPT는 캄토테신이고;

n은 32∼3320이며;

m은 0∼833이고;

k는 1∼216이며;

본 발명의 다른 양태는 분자량이 약 10 kD 내지 약 500 kD인 하기 화학식 (I)의 화합물; 안정화제; 1종 이상의 완충제; 및 계면활성제를 포함하는 주사액으로서, 액체를 사용하여 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 동결건조된 케이크를 용시조제하여 제조되는 것인 주사액에 관한 것이다:

[상기 식 중,

R₁ 중 하나는 H 또는

이고, 다른 하나는

이며;

R₂ 중 하나는 H 또는

이고, 다른 하나는

이며;

CPT는 캄토테신이고;

n은 32∼3320이며;

m은 0∼833이고;

k는 1∼216이며;

달리 기재되지 않은 한, 본원에 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 분야의 당업자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 가진다. 본원에 기재된 것과 유사한 또는 동등한 방법 및 물질을 본 발명의 실행 또는 시험에서 사용할 수 있지만, 적합한 방법 및 물질을 하기 기재하였다. 모든 공보, 특허 출원, 특허 및 본원에 언급된 다른 참조문헌은 그 전문이 참조문헌으로 포함된다. 또한, 물질, 방법 및 실시예는 예시만을 위한 것이고 제한으로서 의도되지 않는다.

본 발명의 다른 특징 및 이점은 구체적인 내용, 도면 및 특허청구범위로부터 명확할 것이다.

도 1은 중합체 골격으로부터 CPT의 배출에 대한 경로를 도시하는 다이아그램이다.
도 2는 중합체 골격으로부터 CPT의 배출에 대한 대안적인 경로를 도시하는 다이아그램이다.
도 3은 pH 4.0 및 여러 온도에서 26 일 동안 저장된 액체 벌크로서의 CPT-중합체 접합체의 안정성을 도시하는 그래프이다. 결과를 CPT-중합체 접합체에 대한 전체 반응과 비교하여 분해 생성물 CPT-SI의 곡선하 면적(%)으로서 나타냈다.
도 4는 pH 5.2 및 여러 온도에서 26 일 동안 저장된 액체 벌크로서의 CPT-중합체 접합체의 안정성을 도시하는 그래프이다. 결과를 접합체에 대한 전체 반응과 비교하여 분해 생성물 CPT-SI의 곡선하 면적(%)으로서 나타냈다.
도 5는 폴리[1-하이드록시메틸에틸렌 하이드록시메틸-포르말]("PHF")의 합성을 보여주는 다이아그램이다.
도 6은 CPT-글리신-tert-부틸옥시카르보닐("CPT-Gly-BOC")의 합성을 보여주는 다이아그램이다.
도 7은 CPT-글리신-트리플루오로아세트산("CPT-Gly-TFA")의 합성을 보여주는 다이아그램이다.
도 8은 폴리[하이드록시메틸에틸렌 하이드록시메틸포르말]-숙신산("PHF-SA")의 합성을 보여주는 다이아그램이다.
도 9는 PHF-SA 및 CPT-Gly-TFA의 커플링을 보여주는 다이아그램이다.
도 10은 CPT-중합체 접합체의 최종 정제를 보여주는 다이아그램이다.
도 11은 CPT-중합체 접합체의 제제 및 최종 여과를 보여주는 다이아그램이다.

본원에는 캄토테신("CPT")-중합체 접합체의 제제가 개시되어 있다. 이 제제는 긴 저장 동안 안정한 CPT-중합체 접합체를 제공한다. 적합한 CPT-중합체 접합체에 대한 추가의 상세 내용은 발명의 명칭이 "이중 단계 약물 배출 시스템(Dual Phase Drug Release System)"인 공개된 국제 출원 WO 제2005/023294호(이는 그 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)에 기재되어 있다.

정의

본원에 사용되는 용액이 특정 물질을 포함하지 않고 일반적으로 투명한 경우, 이것은 "정맥 투여에 적합"하다. 정맥액에 존재하는 특정 물질에 대한 제한은 미국 약전에 정의되어 있다(National Formulary USP31-NF26, volume 1, page 311, physical tests <788> (2008)(이는 그 전문이 본원에 참조문헌으로 포함됨)).

본원에 사용되는 용액이 정맥 투여에 적합한 경우, 이것은 "주사 가능"하다.

본원에 사용되는 "안정화제"는 용액의 동결건조를 최적화하고/하거나 용액 중의 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 안정성을 개선하기 위해 용액에 첨가되는 부형제이다. 적합한 안정화제를 포함하는 용액은, 동결건조될 때, 용이하게 용시조제할 수 있는 분리된 케이크를 형성할 것이다.

용액 중의 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물이 2∼8℃에서 저장될 때 적어도 60 일 동안 용액 중에 안정한 경우, 즉 용액 중의 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 90% 이상이 2∼8℃에서 저장될 때 60 일 후에 분해되지 않는 경우, 본원에 사용되는 용액은 "저장 안정성이 있다". 용액 중의 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 95% 이상이 2∼8℃에서 저장될 때 60 일 후에 분해되지 않는 경우, 본원에 사용되는 용액은 "저장 안정성이 크다".

동결건조된 케이크 중의 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물이 2∼8℃에서 저장될 때 적어도 12 달 동안 안정한 경우, 즉 동결건조된 케이크 중의 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 90% 이상이 2∼8℃에서 저장될 때 13 달 후에 분해되지 않는 경우, 본원에 사용되는 동결건조된 케이크는 "저장 안정성이 있다". 동결건조된 케이크 중의 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 95% 이상이 2∼8℃에서 저장될 때 60 일 후에 분해되지 않는 경우, 본원에 사용되는 동결건조된 케이크는 "저장 안정성이 크다".

"저장 안정성"의 문맥에서 본원에 사용되는 "분해"라는 용어는 본원에 기재된 방법을 이용하여, SEC에 의해 측정되는 분자량에 의해 결정될 때, 또는 RP-HPLC에 의해 측정되는 전체 AUC(%)에 의해 결정될 때, 0 시간과 비교하여 특정 시점에 화학식 Ⅰ 또는 화학식 Ⅱ의 화합물의 양을 의미한다.

본원에 사용되는 "CPT-중합체 접합체", "PHF-CPT 접합체", "접합체" 및 "PHF-CPT"란 구는 화학식 Ⅰ의 화합물 및 화학식 Ⅱ의 화합물을 의미한다.

본원에 사용되는 "약물 로딩"이란 용어는 중합체 골격에 결합된 CPT의 양을 의미하고, 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ 내 "k"의 값에 의해; 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ 내 "m" 및 "n"의 값에 대한 "k"의 값의 비에 의해; 또는 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ 내 "k" 및 "m" 및 "n"의 값에 대한 "k"의 값의 비로 표시할 수 있다. 약물 로딩을 또한 CPT-중합체 접합체의 중량에 대한 CPT(%)의 측면으로 표시할 수 있다. 약물 로딩을 또한 본원에서 "CPT 로딩"이라 칭할 수 있다.

1. CPT -중합체 접합체

CPT-중합체 접합체의 비제한적인 예는 폴리[1-하이드록시메틸에틸렌 하이드록시메틸-포르말](PHF)의 중합체 폴리아세탈 골격이 숙신아미도에스테르 링커를 통해 CPT에 접합된 하기 도시된 화학식 Ⅱ의 화합물이다:

.

화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 중합체 골격은 중합체 골격을 따라 무작위로 배치되는 3개의 별개의 단량체 블록: 글리세롤-글리콜알데하이드를 포함하는 무작위로 분포된 단량체(단량체 블록 "n"); 숙신화에 의해 변형되어 펜던트 숙시네이트 에스테르를 형성하는 글리세롤-글리콜알데하이드의 무작위로 분포된 단량체(단량체 블록 "m"); 및 숙신화되고 이후 공유 결합에 의해 아미드 결합을 통해 CPT-글리시네이트로 추가로 변형되는 글리세롤-글리콜알데하이드의 무작위로 분포된 단량체(단량체 블록 "k")로 이루어진다. 일 실시양태에서, CPT와 중합체 골격 단량체 블록 k 사이의 링커는 숙시네이트-글리시네이트이다. 숙시네이트 링커는 에스테르 결합이 중합체 골격 측면에서 형성되고 반대편 카르복실이 CPT-글리시네이트와 아미드 결합을 형성하도록 화학식 Ⅰ 및 화학식 Ⅱ의 화합물에서 배향된다.

CPT-중합체 접합체는 중합체 골격으로부터 CPT 약물의 배출의 하나 이상의 방식이 2단계로 발생한다고 생각되므로 "이중 단계" 약물 전달 시스템이라 칭하는 것을 포함한다. 도 1은 2단계의 중합체 골격으로부터 CPT의 배출을 도시한 것이다. 임의의 이론에 제한되고자 바라지 않으면서, 우선, 숙신아미드의 질소가 숙시네이트를 중합체에 연결하는 근처 에스테르를 공격하고, 이 반응의 속도가 온도 및 pH가 증가하면서 증가하는 것으로 생각된다. 분자내 아실기전이를 보장하면 PHF 폴리아세탈 중합체로부터 수불용성 캄토테신-글리시네이트-숙신이미드(CPT-SI)가 방출된다. 제2 단계에서, CPT-SI의 글리신 에스테르가 아마도 세포내 리파제를 통해 가수분해되어, 부산물로서 CPT 및 숙신이미도-글리신을 생성시킨다.

CPT는 또한 도 2에 도시된 대안적인 3단계 경로에 의해 중합체 접합체로부터 배출될 수 있다. CPT-SI의 숙신이미드 환은 가수분해되어 캄토테신-숙신아미드(CPT-SA)를 생성시키고, 이것은 효소 또는 완충제에 의해 촉매된다. 한편, CPT-SA는 고리화되어 CPT-SI를 형성시킬 수 있다. 남은 글리신 에스테르를 후속적으로 가수분해하면 CPT가 방출된다.

중합체 골격은 낮은 pH에서 가수분해하는 경향이 있는 아세탈을 포함한다. CPT는 높은 pH에서 가수분해하는 경향이 있는 에스테르 및 아미드 결합을 통해 중합체에 연결된다. 따라서, 접합체는 낮은 pH 및 높은 pH에서 개별적으로 탈안정화되는 성분을 갖는다.

이러한 가능한 불안정성은 특히 수용액으로서 CPT-중합체 접합체를 저장할 때 문제가 된다. 약학 조성물의 제조, 저장 및 사용 동안의 다양한 단계에서, CPT-중합체 접합체는 긴 시간 기간 동안 수용액 중에 안정해야 한다. 예를 들면, 동결건조 전에 용액 중에 60 일 이하 동안 CPT-중합체 접합체를 포함하는 제제를 저장할 필요가 있을 수 있다. 용액이 일정 시간 기간 동안 수중 안정성을 나타내는 것이 바람직하다.

2. PHF 중합체 상의 CPT 로딩

일 양태에서, 중합체 골격에 결합된 CPT 약물 부분의 수치를 조절함으로써 CPT-중합체 접합체의 약물(CPT) 로딩을 조정할 수 있다. 높은 수준의 약물 로딩이 약물을 다량 전달하고 따라서 약학 제제에서 유리한 것으로 예상되면서, 놀랍게도 비교적 높은 수준(예를 들면, 약 15 중량% 초과, 또는 몇몇 실시양태에서 7 중량% 초과)의 약물 로딩을 갖는 약물 제제가 약물 전달에 가장 유리한 제제를 제공하지 않는다는 것을 발견하였다. 선택된 약물 로딩(예를 들면, 몇몇 실시양태에서 약 4 중량% 내지 약 7 중량%)을 갖는 CPT-중합체 접합체 및 이의 수용액은 약학 제제에 여러 이점을 제공한다.

몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 10 kD 내지 약 500 kD의 중량 평균 분자량을 갖는다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 45 kD 내지 약 375 kD, 약 55 kD 내지 약 135 kD 또는 약 135 kD 내지 약 500 kD의 중량 평균 분자량을 갖는다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 10 kD, 약 15 kD, 약 25 kD, 약 35 kD, 약 45 kD, 약 55 kD, 약 75 kD, 약 100 kD, 약 125 kD, 약 135 kD, 약 150 kD, 약 175 kD, 약 200 kD, 약 225 kD, 약 250 kD, 약 275 kD, 약 300 kD, 약 325 kD, 약 350 kD, 약 375 kD, 약 400 kD, 약 425 kD, 약 450 kD, 약 475 kD 또는 약 500 kD의 중량 평균 분자량을 갖는다.

몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 32 내지 약 3320의 n의 단량체 블록, 0 내지 약 833의 m의 단량체 블록 및 약 1 내지 약 216의 k의 단량체 블록을 포함한다.

(m+n)에 대한 k의 비는 약 0.0029 내지 약 0.045이다. 특정 실시양태에서, 약 0.0029 내지 약 0.0431의 CPT:중합체 비(즉, k/(k+m+n))를 포함하는 제제를 제공하도록 'k', 'm' 및 'n'에 대한 값을 선택한다. 다른 추가 실시양태에서, m/(k+m+n)은 약 0 내지 약 0.167이고; n/(k+m+n)은 약 0.787 내지 약 0.955이다.

몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 200 내지 약 600의 n의 단량체 블록, 약 300 내지 약 500의 n의 단량체 블록 또는 약 350 내지 약 450의 n의 단량체 블록을 포함한다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 39 내지 약 3196, 약 40 내지 약 3154, 약 500 내지 약 1000, 약 1000 내지 약 2000 또는 약 2000 내지 약 3154의 n의 단량체 블록을 포함한다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 300, 약 325, 약 350, 약 375, 약 400, 약 425, 약 450, 약 475 또는 500의 n의 단량체 블록을 포함한다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 750, 약 1000, 약 1500, 약 2000, 약 2500, 약 3000 또는 약 3154의 n의 단량체 블록을 포함한다.

몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 0 내지 약 60의 m의 단량체 블록, 약 10 내지 약 50의 m의 단량체 블록, 약 20 내지 약 40의 m의 단량체 블록 또는 약 25 내지 약 35의 m의 단량체 블록을 포함한다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 2 내지 약 790, 약 2 내지 약 776, 약 60 내지 약 700, 약 200 내지 약 500 또는 약 300 내지 약 400의 m의 단량체 블록을 포함한다. 다른 CPT-중합체 접합체는 0, 약 5, 약 10, 약 20, 약 30, 약 40, 약 50, 약 60, 약 100, 약 200, 약 300, 약 400, 약 500, 약 600 또는 약 700의 m의 단량체 블록을 포함한다.

몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 3 내지 약 20의 k의 단량체 블록, 약 5 내지 약 15의 k의 단량체 블록 또는 약 7 내지 약 12의 k의 단량체 블록을 포함한다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 1 내지 약 101, 약 1 내지 약 86, 약 20 내지 약 40, 약 40 내지 약 60, 약 60 내지 약 80, 약 80 내지 약 100, 약 100 내지 약 125, 약 125 내지 약 150, 약 150 내지 약 175, 약 175 내지 약 200 또는 약 175 내지 약 216의 k의 단량체 블록을 포함한다. 몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 1, 약 2, 약 3, 약 4, 약 5, 약 6, 약 7, 약 8, 약 9, 약 10, 약 11, 약 12, 약 13, 약 14, 약 15, 약 16, 약 17, 약 18, 약 19 또는 약 20의 k의 단량체 블록을 포함한다. 몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 약 30, 약 40, 약 50, 약 60, 약 70, 약 80, 약 90, 약 100, 약 110, 약 120, 약 130, 약 140, 약 150, 약 160, 약 170, 약 180, 약 190, 약 200, 약 210 또는 약 216의 k의 단량체 블록을 포함한다.

몇몇 실시양태에서, k/(m+n)의 비는 약 0.012 내지 약 0.045, 약 0.02 내지 약 0.035, 약 0.015 내지 약 0.04 또는 약 0.025 내지 약 0.03이다. 몇몇 실시양태에서, k/(m+n)의 비는 약 0.0116 내지 약 0.0205 또는 약 0.0146 내지 약 0.0175이다. 다른 실시양태에서, k/(m+n)의 비는 약 0.030 낸지 약 0.040 또는 약 0.035 내지 약 0.0375이다. 다른 실시양태에서, k/(m+n)의 비는 약 0.003, 약 0.004, 약 0.005, 약 0.006, 약 0.007, 약 0.008, 약 0.009, 약 0.010, 약 0.011, 약 0.012, 약 0.013, 약 0.014, 약 0.015, 약 0.016, 약 0.017, 약 0.018, 약 0.019, 약 0.02, 약 0.021, 약 0.022, 약 0.023, 약 0.024, 약 0.025, 약 0.026, 약 0.027, 약 0.028, 약 0.029, 약 0.03, 약 0.031, 약 0.032, 약 0.033, 약 0.034, 약 0.035, 약 0.036, 약 0.037, 약 0.038, 약 0.039, 약 0.04, 약 0.041, 약 0.042, 약 0.043, 약 0.044 또는 약 0.045이다.

몇몇 실시양태에서, k/(k+m+n)의 비는 약 0.0115 내지 약 0.0201 또는 약 0.0144 내지 약 0.0172이다. 몇몇 실시양태에서, k/(k+m+n)의 비는 약 0.015, 약 0.016, 약 0.017, 약 0.018, 약 0.019, 약 0.02, 약 0.021, 약 0.022, 약 0.023, 약 0.024, 약 0.025, 약 0.026, 약 0.027, 약 0.028, 약 0.029, 약 0.03, 약 0.031, 약 0.032, 약 0.033, 약 0.034, 약 0.035, 약 0.036, 약 0.037, 약 0.038, 약 0.039, 약 0.04, 약 0.041, 약 0.042, 약 0.043, 약 0.044 또는 약 0.045이다.

몇몇 실시양태에서, m/(k+m+n)의 비는 약 0.07, 약 0.08, 약 0.09, 약 0.1, 약 0.11, 약 0.12, 약 0.13, 약 0.14, 약 0.15, 약 0.16 또는 약 0.167이다. 다른 실시양태에서, m/(k+m+n)의 비는 약 0.08 내지 약 0.12 또는 약 0.09 내지 0.11이다. 다른 실시양태에서, m/(k+m+n)의 비는 약 0.07 내지 약 0.10, 약 0.08 내지 약 0.11, 약 0.09 내지 약 0.012 또는 약 0.1 내지 약 0.13이다. 다른 실시양태에서, m/(k+m+n)의 비는 약 0.022 내지 약 0.158 또는 약 0.025 내지 약 0.155이다.

몇몇 실시양태에서, n/(k+m+n)의 비는 약 0.08 내지 약 0.095, 약 0.085 내지 약 0.090, 약 0.86 내지 약 0.89, 약 0.87 내지 0.88, 약 0.85 내지 약 0.87, 약 0.86 내지 약 0.88, 약 0.87 내지 약 0.89 또는 약 0.88 내지 약 0.9이다. 다른 실시양태에서, n/(k+m+n)의 비는 약 0.81 내지 약 0.946 또는 약 0.813 내지 약 0.943이다. 다른 실시양태에서, n/(k+m+n)의 비는 약 0.787, 약 0.8, 약 0.81, 약 0.82, 약 0.83, 약 0.84, 약 0.85, 약 0.86, 약 0.87, 약 0.88, 약 0.89, 약 0.90, 약 0.91, 약 0.92, 약 0.93, 약 0.94, 약 0.95 또는 약 0.955이다.

다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 단량체 블록의 수의 약 85% 내지 약 90%가 단량체 블록 n이고, 단량체 블록의 수의 7% 내지 약 13%가 단량체 블록 m이고, 단량체 블록의 수의 약 2% 내지 약 3%가 단량체 블록 k이도록 하는 중합체 블록의 분포를 갖는다.

다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 단량체 블록의 수의 약 85%, 약 86%, 약 87%, 약 88%, 약 89% 또는 약 90%가 단량체 블록 n이도록 하는 중합체 블록의 분포를 갖는다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 단량체 블록의 수의 약 85% 내지 약 87%, 약 86% 내지 약 88%, 약 87% 내지 약 89% 또는 약 88% 내지 약 90%가 단량체 블록 n이도록 하는 중합체 블록의 분포를 갖는다.

다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 단량체 블록의 수의 약 7%, 약 8%, 약 9%, 약 10%, 약 11%, 약 12% 또는 약 13%가 단량체 블록 m이도록 하는 중합체 블록의 분포를 갖는다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 단량체 블록의 수의 약 7% 내지 약 9%, 약 8% 내지 약 10%, 약 9% 내지 약 11%, 10% 내지 약 12% 또는 약 11% 내지 약 13%가 단량체 블록 m이도록 하는 중합체 블록의 분포를 갖는다.

다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 단량체 블록의 수의 2%, 약 2.1%, 약 2.2%, 약 2.3%, 약 2.4%, 약 2.5%, 약 2.6%, 약 2.7%, 약 2.8%, 약 2.9% 또는 약 3%가 단량체 블록 k이도록 하는 중합체 블록의 분포를 갖는다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 단량체 블록의 수의 약 2% 내지 약 2.2%, 약 2.1% 내지 약 2.3%, 약 2.2% 내지 약 2.4%, 약 2.3% 내지 약 2.5%, 약 2.4% 내지 약 2.6%, 약 2.5% 내지 약 2.7%, 약 2.6% 내지 약 2.8%, 약 2.7% 내지 약 2.9% 또는 약 2.8% 내지 약 3%가 단량체 블록 k이도록 하는 중합체 블록의 분포를 갖는다.

다른 실시양태에서, k, m 및 n을 CPT-중합체 접합체가 CPT의 약 1 중량% 내지 약 15 중량%이도록 선택한다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체가 CPT의 약 4 중량% 내지 약 7 중량% 또는 약 5 중량% 내지 약 6 중량%이다. 또 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체가 CPT의 약 1 중량% 내지 약 4 중량%, 약 7 중량% 내지 약 10 중량%, 약 4 중량% 내지 약 12 중량% 또는 약 10 중량% 내지 약 15 중량%이다. 또 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체가 CPT의 약 4 중량% 내지 약 5.5 중량%, 4.5 중량% 내지 약 6 중량%, 약 5 중량% 내지 약 6.5 중량%, 약 5.5 중량% 내지 약 7 중량%, 약 6 중량% 내지 약 7.5 중량%, 약 6.5 중량% 내지 약 8 중량%, 약 7 중량% 내지 약 8.5 중량%, 약 7.5 중량% 내지 약 9 중량%, 약 8 중량% 내지 약 9.5 중량%, 약 8.5 중량% 내지 약 10 중량%, 약 9 중량% 내지 약 11 중량%, 약 10 중량% 내지 약 12 중량%, 약 11 중량% 내지 약 13 중량%, 약 12 중량% 내지 약 14 중량% 또는 약 13 중량% 내지 약 15 중량%이다. 또 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체가 CPT의 약 1 중량%, 약 2 중량%, 약 3 중량%, 약 4 중량%, 약 4.5 중량%, 약 5 중량%, 약 5.5 중량%, 약 6 중량%, 약 6.5 중량%, 약 7 중량%, 약 8 중량%, 약 9 중량%, 약 10 중량%, 약 11 중량%, 약 12 중량%, 약 13 중량%, 약 14 중량% 또는 약 15 중량%이다.

중량 평균 분자량이 약 10 kD 내지 약 100 kD인 CPT-중합체 접합체에서, PHF-SA는 중합체 골격을 따라 약 30∼75개의 이용 가능한 부착 부위를 갖는다. 이론상, 이러한 많은 부착 부위는 CPT 약물 부분에 연결될 수 있다. CPT-중합체 접합체가 중합체 골격에 결합된 CPT의 양이 증가하면서 덜 가용성이라는 것을 발견하였다. 중량 평균 분자량이 약 40 kD 내지 약 100 kD인 중합체에서 약 10개 내지 약 15개의 CPT 부분에 해당하는 약 4 내지 약 7 중량/중량(%)의 CPT/중합체의 선택된 약물 로딩은 접합체의 용해도와 활성 사이에 바람직한 균형을 유지시킨다.

약물 로딩이 약 15 중량% 초과일 때 또는 몇몇 실시양태에서 약 7 중량% 초과일 때, 소수성 CPT 분자는 함께 응집하여 미쉘형 구조를 형성할 수 있어서, 친수성 중합체만이 물에 노출된다. 이 미쉘형 구조는 또한 효과 감소를 나타낼 수 있고 약물 용액의 용액 특성에 부정적으로 영향을 미칠 수 있다. 예를 들면, 약물 로딩이 너무 높을 때, CPT-중합체 접합체는 0.2 마이크론 필터를 통해 여과하기 어려울 수 있어서, 무균화에 접선 유동 여과의 이용을 요한다. 또한, 과로딩은, 여과될 수 있을지라도, 0.2 마이크론 제한을 초과하는 CPT-중합체 접합체가 상당히 손실되는 비균일한 CPT-중합체 접합체를 형성할 수 있다. 또한, 약물 로딩이 증가하면서, CPT는 몇몇 환자에서 면역 반응을 발생시킬 수 있는 3차 구조를 형성할 수 있다. 약물 로딩이 증가하면서, CPT-중합체 접합체의 입자 크기가 증가한다. 많은 CPT-중합체 접합체 입자 크기가 과민반응과 관련될 수 있다.

3. 저장 안정성이 있는 수용액

하나 이상의 양태에서, 정맥 투여에 적합한 저장 안정성이 있는 수용액은 CPT-중합체 접합체에 저장 안정성을 제공하도록 선택된 pH에서 CPT-중합체 접합체 및 안정화제를 포함한다. 다양한 실시양태에서, 저장 안정성이 있는 CPT-중합체 접합체는 약 4.0 내지 약 5.0의 pH로 완충된 CPT-중합체 접합체의 수용액을 포함한다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체의 수용액은 약 4.2 내지 약 4.8 또는 약 4.4 내지 약 4.6의 pH로 완충된다. 다른 실시양태에서, CPT-중합체 접합체의 수용액은 약 4.0, 약 4.1, 4.2, 약 4.3, 약 4.4, 약 4.5, 약 4.6, 약 4.7, 약 4.8, 약 4.9 또는 약 5.0의 pH로 완충된다. 본원에 기재된 수용액은 저장 안정성을 나타낸다. CPT-중합체 접합체의 중합체가 pH 5.2 아래서 분해되는 것으로 알려지면서, 이러한 사실은 놀랍다. 본원에 기재된 CPT-중합체 접합체를 포함하는 용액은 2∼8℃에서 저장될 때 적어도 60 일 동안 안정하다.

CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액을 종래 완충제를 사용하여 원하는 pH로 완충할 수 있다. 몇몇 실시양태에서, 약학적으로 허용되는 완충제로부터 완충제를 선택한다. 상기 용액과 사용하기에 적합한 완충제의 비제한적인 예로 시트르산나트륨, 아스코르브산염, 숙신산염, 젖산염, 시트르산, 붕산, 붕사, 염산, 인산수소이나트륨, 아세트산, 포름산, 글리신, 중탄산염, 타르타르산, 트리스-글리신, 트리스-NaCl, 트리스-에틸렌디아민 테트라아세트산("EDTA"), 트리스-보레이트-EDTA, 트리스-아세테이트-EDTA("TAE") 완충제 및 트리스-완충 식염수, 4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산("HEPES"), 3-(N-모르폴리노)프로판설폰산("MOPS"), 피페라진-1,4-비스(2-에탄설폰산)("PIPES"), 2-(N-모르폴리노)에탄설폰산("MES"), 인산염 완충 식염수("PBS"), 식염수-시트르산나트륨("SSC"), 식염수-트리스-EDTA("STE") 및 트리스-마그네슘 중 하나 이상을 들 수 있다. 일 실시양태에서, 저장 안정성이 있는 수용액은 시트르산나트륨 2수화물 및 약 1 M HCl을 포함하는 pH 4.0∼5.0 완충제 용액에 의해 완충된다. 일 실시양태에서, 저장 안정성이 있는 수성 제제는 시트르산나트륨 및 시트르산의 pH 4.5 완충제 용액에 의해 완충된다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 시트르산나트륨을 약 0.1 중량% 내지 약 10 중량%, 약 1 중량% 내지 약 9 중량% 또는 약 2.5 중량% 내지 약 8 중량% 포함한다. 몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 시트르산나트륨을 약 0.1 중량%, 약 0.5 중량%, 약 0.9 중량%, 약 1 중량%, 약 1.5 중량%, 약 2 중량%, 약 2.5 중량%, 약 3 중량%, 약 3.5 중량%, 약 4 중량%, 약 4.5 중량%, 약 4.8 중량%, 약 5 중량%, 약 5.5 중량%, 약 6 중량%, 약 6.5 중량%, 약 7 중량%, 약 7.5 중량%, 약 7.7 중량%, 약 7.6 중량%, 약 8 중량%, 약 8.5 중량%, 약 9 중량%, 약 9.5 중량% 또는 약 10 중량% 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 시트르산나트륨을 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 10 ㎎/㎖, 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 4.5 ㎎/㎖ 또는 약 0.5 ㎎/㎖ 내지 약 5 ㎎/㎖ 포함한다. 몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 시트르산나트륨을 약 0.1 ㎎/㎖, 약 0.5 ㎎/㎖, 약 0.6 ㎎/㎖, 약 0.9 ㎎/㎖, 약 1 ㎎/㎖, 약 1.4 ㎎/㎖, 약 1.5 ㎎/㎖, 약 2 ㎎/㎖, 약 2.5 ㎎/㎖, 약 2.8 ㎎/㎖, 약 3 ㎎/㎖, 약 3.5 ㎎/㎖, 약 3.5 ㎎/㎖, 약 4 ㎎/㎖, 약 4.4 ㎎/㎖, 약 4.5 ㎎/㎖, 약 5 ㎎/㎖, 약 6 ㎎/㎖, 약 7 ㎎/㎖, 약 8 ㎎/㎖, 약 9 ㎎/㎖ 또는 약 10 ㎎/㎖ 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 시트르산을 약 0.1 중량% 내지 약 10 중량%, 약 1 중량% 내지 약 9 중량% 또는 약 2.5 중량% 내지 약 8 중량% 포함한다. 몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 시트르산을 약 0.1 중량%, 약 0.5 중량%, 약 0.9 중량%, 약 1 중량%, 약 1.5 중량%, 약 2 중량%, 약 2.5 중량%, 약 3 중량%, 약 3.5 중량%, 약 4 중량%, 약 4.2 중량%, 약 4.5 중량%, 약 4.8 중량%, 약 4.9 중량%, 약 5 중량%, 약 5.5 중량%, 약 6 중량%, 약 6.5 중량%, 약 7 중량%, 약 7.5 중량%, 약 7.7 중량%, 약 7.6 중량%, 약 8 중량%, 약 8.5 중량%, 약 9 중량%, 약 9.5 중량% 또는 약 10 중량% 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 시트르산을 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 10 ㎎/㎖, 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 4.5 ㎎/㎖ 또는 약 0.5 ㎎/㎖ 내지 약 5 ㎎/㎖ 포함한다. 몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 시트르산을 약 0.1 ㎎/㎖, 약 0.5 ㎎/㎖, 약 0.6 ㎎/㎖, 약 0.9 ㎎/㎖, 약 1 ㎎/㎖, 약 1.4 ㎎/㎖, 약 1.5 ㎎/㎖, 약 2 ㎎/㎖, 약 2.5 ㎎/㎖, 약 2.8 ㎎/㎖, 약 3 ㎎/㎖, 약 3.5 ㎎/㎖, 약 3.5 ㎎/㎖, 약 4 ㎎/㎖, 약 4.4 ㎎/㎖, 약 4.5 ㎎/㎖, 약 5 ㎎/㎖, 약 6 ㎎/㎖, 약 7 ㎎/㎖, 약 8 ㎎/㎖, 약 9 ㎎/㎖ 또는 약 10 ㎎/㎖ 포함한다.

이 수용액은 응집하고 종종 심지어는 안정화제 없이 저장될 때 겔을 형성하고, 이것은 CPT-중합체를 사용에 부적합하게 한다. 어느 특정한 작업 방식에 구속되지 않으면서, 겔화는 무거운 응집체로 인한 것일 수 있는 것으로 생각된다. 가교 결합이 또한 발생할 수 있다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, CPT-중합체 접합체를 포함하는 수용액은 안정화제를 더 포함한다. 안정화제는 겔화를 방지함으로써 용액을 안정화시킨다. 상기 제제와 사용하기에 적합한 안정화제의 비제한적인 예로 소르비톨, 만니톨, 수크로스, 락토스, 글루코스, 크실리톨, 말토스, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 락티톨, 덱스트로스, 글리세린 및 말티톨을 들 수 있다. 몇몇 실시양태에서, 안정화제는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함된다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 수용액은 소르비톨을 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함한다. 다른 실시양태에서, 수용액은 소르비톨을 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 250 ㎎/㎖, 약 50 ㎎/㎖ 내지 약 250 ㎎/㎖ 또는 약 250 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 소르비톨을 약 1 ㎎/㎖, 약 25 ㎎/㎖, 약 50 ㎎/㎖, 약 75 ㎎/㎖, 약 95.7 ㎎/㎖, 약 100 ㎎/㎖, 약 125 ㎎/㎖, 약 150 ㎎/㎖, 약 175 ㎎/㎖, 약 200 ㎎/㎖, 약 250 ㎎/㎖, 약 300 ㎎/㎖, 약 350 ㎎/㎖, 약 400 ㎎/㎖, 약 450 ㎎/㎖ 또는 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 수용액은 소르비톨을 약 20 중량% 내지 약 90 중량%, 약 30 중량% 내지 약 80 중량%, 약 40 중량% 내지 약 70 중량% 또는 약 50 중량% 내지 약 60 중량%의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 소르비톨을 약 20 중량% 내지 약 40 중량%, 약 30 중량% 내지 약 50 중량%, 약 40 중량% 내지 약 60 중량% 또는 약 50 중량% 내지 약 70 중량%, 약 60 중량% 내지 약 80 중량% 또는 약 70 중량% 내지 약 90 중량%의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 소르비톨을 약 20 중량%, 약 30 중량%, 약 40 중량%, 약 50 중량%, 약 60 중량%, 약 70 중량%, 약 80 중량%, 약 85.8 중량% 또는 약 90 중량%의 농도로 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 수용액은 만니톨을 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함한다. 다른 실시양태에서, 수용액은 만니톨을 200 ㎎/㎖ 미만의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 만니톨을 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 200 ㎎/㎖, 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 80 ㎎/㎖, 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 25 ㎎/㎖, 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 15 ㎎/㎖, 약 4 ㎎/㎖ 내지 약 20 ㎎/㎖, 약 15 ㎎/㎖ 내지 약 50 ㎎/㎖, 약 30 ㎎/㎖ 내지 약 80 ㎎/㎖ 또는 약 80 ㎎/㎖ 내지 약 200 ㎎/㎖의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 만니톨을 약 1 ㎎/㎖, 약 2.5 ㎎/㎖, 약 4.1 ㎎/㎖, 약 4.3 ㎎/㎖, 약 5 ㎎/㎖, 약 6.3 ㎎/㎖, 약 7.5 ㎎/㎖, 약 10 ㎎/㎖, 약 10.3 ㎎/㎖, 약 15 ㎎/㎖, 약 20 ㎎/㎖, 약 20.3 ㎎/㎖, 약 25 ㎎/㎖, 약 50 ㎎/㎖, 약 75 ㎎/㎖, 약 100 ㎎/㎖, 약 125 ㎎/㎖, 약 150 ㎎/㎖, 약 175 ㎎/㎖, 약 200 ㎎/㎖, 약 250 ㎎/㎖, 약 300 ㎎/㎖, 약 350 ㎎/㎖, 약 400 ㎎/㎖, 약 450 ㎎/㎖ 또는 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 수용액은 만니톨을 약 20 중량% 내지 약 90 중량%, 약 30 중량% 내지 약 80 중량%, 약 40 중량% 내지 약 70 중량% 또는 약 50 중량% 내지 약 60 중량%의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 만니톨을 약 20 중량% 내지 약 40 중량%, 약 30 중량% 내지 약 50 중량%, 약 40 중량% 내지 약 60 중량% 또는 약 50 중량% 내지 약 70 중량%, 약 60 중량% 내지 약 80 중량% 또는 약 70 중량% 내지 약 90 중량%의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 만니톨을 약 20 중량%, 약 30 중량%, 약 34 중량%, 약 34.6 중량%, 약 35 중량%, 약 40 중량%, 약 44.6 중량%, 약 50 중량%, 약 60 중량%, 약 70 중량%, 약 80 중량%, 약 85.8 중량% 또는 약 90 중량%의 농도로 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, CPT-중합체 접합체는 화학식 Ⅱ의 화합물이다. 몇몇 실시양태에서, CPT-중합체 접합체는 수용액 중에 약 150 ㎎/㎖ 이하의 양으로 포함된다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 CPT-중합체 접합체를 약 5 ㎎/㎖ 내지 약 150 ㎎/㎖ 또는 약 15 ㎎/㎖ 내지 약 50 ㎎/㎖ 포함한다. 다른 실시양태에서, 수용액은 CPT-중합체 접합체를 약 5 ㎎/㎖ 내지 약 25 ㎎/㎖, 약 20 ㎎/㎖ 내지 약 50 ㎎/㎖, 약 30 ㎎/㎖ 내지 약 60 ㎎/㎖, 약 40 ㎎/㎖ 내지 약 70 ㎎/㎖, 약 50 ㎎/㎖ 내지 약 80 ㎎/㎖, 약 60 ㎎/㎖ 내지 약 90 ㎎/㎖, 약 70 ㎎/㎖ 내지 약 100 ㎎/㎖, 약 80 ㎎/㎖ 내지 약 110 ㎎/㎖, 약 90 ㎎/㎖ 내지 약 120 ㎎/㎖, 약 100 ㎎/㎖ 내지 약 130 ㎎/㎖, 약 110 ㎎/㎖ 내지 약 140 ㎎/㎖ 및 약 120 ㎎/㎖ 내지 약 150 ㎎/㎖ 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 CPT-중합체 접합체를 약 5 ㎎/㎖, 약 10 ㎎/㎖, 약 15 ㎎/㎖, 약 20 ㎎/㎖, 약 25 ㎎/㎖, 약 30 ㎎/㎖, 약 40 ㎎/㎖, 약 50 ㎎/㎖, 약 60 ㎎/㎖, 약 70 ㎎/㎖, 약 80 ㎎/㎖, 약 90 ㎎/㎖, 약 100 ㎎/㎖, 약 110 ㎎/㎖, 약 120 ㎎/㎖, 약 130 ㎎/㎖, 약 140 ㎎/㎖ 또는 약 150 ㎎/㎖ 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 화학식 Ⅱ의 화합물을 포함하는 수용액의 밀도는 약 1.0 g/㎖ 내지 약 1.7 g/㎖이다.

몇몇 실시양태에서, 수용액은 추가 성분을 포함할 수 있다. 예의 방식으로, 용액을 약학 제제의 제조에서 사용할 수 있고, 수용액은 제조 공정에 적합한 첨가제를 포함할 수 있다. 특히, 용액은 CPT-중합체 접합체의 동결건조에서 사용되는 가용성 또는 불용성 첨가제를 포함할 수 있다. 하나 이상의 실시양태에서, 수용액은 약학 제제에서 통상적으로 발견되는 가용성 또는 불용성 첨가제를 포함할 수 있다. 본 개시내용의 수용액에 유용한 첨가제의 비제한적인 예로는 약학적으로 허용되는 부형제, 예컨대 계면활성제, 항습윤제, 항산화제, 증점제, 염 및 보존제를 들 수 있다. 하나 이상의 실시양태에서, 수용액은 계면활성제 또는 계면활성제의 혼합물, 예컨대 폴리소르베이트(Polysorbate) 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머(Poloxamer) 407, 솔루톨(Solutol) HS 15, 폴록사머 188, 라우릴황산나트륨, 에테르 황산염, 황산화유, 세트리미드 BP, 염화벤즈알코늄, 레시틴, 세트로마크로겔 1000 BPC 및 화학식 RCOOX(여기서, R은 C10-C20 알킬 기이고, X는 나트륨, 칼륨 또는 암모늄임)의 알칼리 금속 비누(이들로 제한되지는 않음)를 포함할 수 있다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 수용액은 폴리소르베이트 80을 약 0.05 중량% 내지 약 20 중량%의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 폴리소르베이트 80을 약 0.05 중량%, 약 0.5 중량%, 약 1 중량%, 약 2 중량%, 약 2.5 중량%, 약 2.7 중량%, 약 3 중량%, 약 3.5 중량%, 약 4 중량%, 약 4.5 중량%, 약 5 중량%, 약 6 중량%, 약 7 중량%, 약 8 중량%, 약 9 중량%, 약 10 중량%, 약 15 중량% 또는 약 20 중량%의 농도로 포함한다. 다른 실시양태에서, 수용액은 폴리소르베이트 80을 약 0.05 중량% 내지 약 10 중량%, 약 0.75 중량% 내지 약 5 중량%, 약 0.5 중량% 내지 약 3 중량%, 약 1 중량% 내지 약 2.7 중량%, 약 5 중량% 내지 약 15 중량% 또는 약 10 중량% 내지 약 20 중량%의 농도로 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 수용액은 폴리소르베이트 80을 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 10 ㎎/㎖, 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 4.5 ㎎/㎖, 약 0.5 ㎎/㎖ 내지 약 5 ㎎/㎖ 또는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 1 ㎎/㎖의 농도로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 수용액은 폴리소르베이트 80을 약 0.1 ㎎/㎖, 약 0.2 ㎎/㎖, 약 0.3 ㎎/㎖, 약 0.4 ㎎/㎖, 약 0.5 ㎎/㎖, 약 0.6 ㎎/㎖, 약 0.7 ㎎/㎖, 약 0.8 ㎎/㎖, 약 0.9 ㎎/㎖, 약 1 ㎎/㎖, 약 약 1.5 ㎎/㎖, 약 2 ㎎/㎖, 약 2.5 ㎎/㎖,, 약 3 ㎎/㎖, 약 3.5 ㎎/㎖, 약 3.5 ㎎/㎖, 약 4 ㎎/㎖, 약 4.5 ㎎/㎖, 약 5 ㎎/㎖, 약 6 ㎎/㎖, 약 7 ㎎/㎖, 약 8 ㎎/㎖, 약 9 ㎎/㎖ 또는 약 10 ㎎/㎖의 농도로 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 수용액은 보존제 또는 보존제의 혼합물, 예컨대 벤질 알콜, 벤조산나트륨, 질산나트륨, 이산화황, 소르브산나트륨 및 소르브산칼륨(이들로 제한되지는 않음)을 1% 이하로 포함할 수 있다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 수용액은 무균이다. 여과는 수용액에 유용한 무균 방법의 비제한적인 예이다. 몇몇 실시양태에서, 수용액을 0.1 마이크론 필터 및/또는 0.2 마이크론 필터를 통해 여과하여 무균화한다.

4. 동결건조 제제

일 양태에서, 본 발명은 건조 분말 또는 건조 케이크 형태의 CPT-중합체 접합체의 동결건조된 약학 제제를 제공한다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 0.0125 내지 약 0.05의 CPT:중합체 비(즉, k/(k+m+n))로 CPT-중합체 접합체를 포함한다. 다른 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 0.015 내지 약 0.045, 약 0.02 내지 약 0.04, 약 0.025 내지 약 0.035 또는 약 0.0275 내지 약 0.03의 CPT:중합체 비로 CPT-중합체 접합체를 포함한다. 다른 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 0.0125 내지 약 0.03, 약 0.02 내지 약 0.0375, 약 0.03 내지 약 0.0475 또는 약 0.0325 내지 약 0.05의 CPT:중합체 비로 CPT-중합체 접합체를 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 동결건조 제제는 약 50 중량% 내지 약 55 중량%의 CPT-중합체 접합체를 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 50 중량%, 약 50.5 중량%, 약 51 중량%, 약 51.5 중량%, 약 52 중량%, 약 52.5 중량%, 약 53 중량%, 약 53.5 중량%, 약 54 중량%, 약 54.5 중량% 또는 약 55 중량%의 CPT-중합체 접합체를 포함한다. 다른 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 2 중량% 내지 약 4 중량%의 CPT를 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 2 중량%, 약 2.1 중량%, 약 2.2 중량%, 약 2.3 중량%, 약 2.4 중량%, 약 2.5 중량%, 약 2.6 중량%, 약 2.7 중량%, 약 2.8 중량%, 약 2.9 중량%, 약 3 중량%, 약 3.1 중량%, 약 3.2 중량%, 약 3.3 중량%, 약 3.4 중량%, 약 3.5 중량%, 약 3.6 중량%, 약 3.7 중량%, 약 3.8 중량%, 약 3.9 중량% 또는 약 4 중량%의 CPT를 포함한다.

약학 조성물은 운송을 위해 대개 동결건조되고 사용 직전에 용시조제된다. 그러나, 본원에 기재된 CPT-중합체 접합체는 동결건조 동안 비가역적으로 응집되는 경향이 있어 용시조제하기 어렵다. 예를 들면, 안정화제 없이 동결건조된 CPT-중합체는 수 중에서 용시조제하기 매우 어렵다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 동결건조 제제가 용시조제될 수 있게 하는 안정화제를 포함한다. 동결건조 제제와 사용하기에 적합한 안정화제의 비제한적인 예로 소르비톨, 만니톨, 수크로스, 락토스, 글루코스, 크실리톨, 말토스, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린 및 락티톨을 들 수 있다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 동결건조 제제는 소르비톨을 약 80 중량% 내지 약 90 중량% 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 소르비톨을 약 80 중량% 내지 약 82 중량%, 약 82 중량% 내지 약 84 중량%, 약 84 중량% 내지 약 86 중량%, 약 86 중량% 내지 약 88 중량% 또는 약 88 중량% 내지 약 90 중량%의 범위로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 소르비톨을 약 80 중량% 내지 약 83 중량%, 약 82 중량% 내지 약 85 중량%, 약 84 중량% 내지 약 87 중량% 또는 약 86 중량% 내지 약 90 중량%의 범위로 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제 중의 소르비톨의 중량 백분율은 약 80 중량%, 약 81 중량%, 약 82 중량%, 약 83 중량%, 약 84 중량%, 약 85 중량%, 약 85.8 중량%, 약 86 중량%, 약 87 중량%, 약 88 중량%, 약 89 중량% 또는 약 90 중량%이다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 동결건조 제제는 만니톨을 약 30 중량% 내지 약 50 중량% 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제 중의 만니톨의 중량 백분율은 약 30 중량% 내지 약 40 중량%, 약 35 중량% 내지 약 45 중량% 또는 약 40 중량% 내지 약 50 중량%이다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제 중의 만니톨의 중량 백분율은 약 30%, 약 31%, 약 32%, 약 33%, 약 34%, 약 35%, 약 36%, 약 37%, 약 38%, 약 39%, 약 40%, 약 41%, 약 42%, 약 43%, 약 43%, 약 44%, 약 45%, 약 46%, 약 47%, 약 48%, 약 49% 또는 약 50%이다. 다른 실시양태에서, 동결건조 제제 중의 만니톨의 중량 백분율은 약 34.5 중량% 또는 약 44.6 중량%이다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 동결건조 제제가 안정화제 및 약 0.5 중량% 내지 약 10 중량%의 1종 이상의 계면활성제를 포함할 때, 이를 즉시 용해시킨다. 동결건조 제제와 사용하기에 적합한 계면활성제의 비제한적인 예로 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머 407, 솔루톨 HS 15 및 폴록사머 188을 들 수 있다. 하나 이상의 실시양태에서, 수용액은 보존제 또는 보존제의 혼합물, 예컨대 벤질 알콜, 벤조산나트륨, 질산나트륨, 이산화황, 소르브산나트륨 및 소르브산칼륨(이들로 제한되지는 않음)을 포함할 수 있다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 동결건조 제제는 물을 약 4 중량% 미만 포함한다. 따라서, 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 4.0 내지 약 5.0의 pH로 완충된다. 다른 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 4.2 내지 약 4.8 또는 약 4.4 내지 약 4.6의 pH로 완충된다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 약 4.2, 약 4.3, 약 4.4, 약 4.5, 약 4.6, 약 4.7 또는 약 4.8의 pH로 완충된다.

상기 제제와 사용하기에 적합한 완충제의 비제한적인 예로 시트르산나트륨, 아스코르브산염, 숙신산염, 젖산염, 시트르산, 붕산, 붕사, 염산, 인산수소이나트륨, 아세트산, 포름산, 글리신, 중탄산염, 타르타르산, 트리스-글리신, 트리스-NaCl, EDTA, TAE 완충제 및 트리스-완충 식염수, HEPES, MOPS, PIPES, MES 및 PBS 중 1종 이상을 들 수 있다. 동결건조 이전의 저장 안정성이 있는 수용액 및 동결건조된 건조 제제 둘 다에서 pH 안정성을 제공하도록 완충제를 선택할 수 있다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 동결건조 제제는 시트르산나트륨을 약 1 중량% 내지 약 10 중량%, 약 2 중량% 내지 약 9 중량% 및 약 4 중량% 내지 약 7 중량% 포함한다. 몇몇 실시양태에서, 동결건조 제제는 시트르산나트륨을 약 1 중량%, 약 1.5 중량%, 약 2 중량%, 약 2.5 중량%, 약 3 중량%, 약 3.5 중량%, 약 4 중량%, 약 4.5 중량%, 약 5 중량%, 약 5.5 중량%, 약 6 중량%, 약 6.5 중량%, 약 7 중량%, 약 8 중량%, 약 9 중량% 또는 약 10 중량% 포함한다.

특정한 일 실시양태 또는 본원에 기재된 다른 실시양태 중 어느 하나에서, 동결건조 제제는 시트르산을 약 1 중량% 내지 약 10 중량%, 약 2 중량% 내지 약 9 중량% 및 약 3 중량% 내지 약 5 중량% 포함한다. 다른 실시양태에서, 동결건조 제제는 시트르산을 약 1 중량%, 약 2 중량%, 3 중량%, 4 중량%, 4.2 중량%, 5 중량%, 6 중량%, 7 중량%, 8 중량%, 9 중량% 또는 10 중량% 포함한다.

다른 실시양태에서, 동결건조 제제는 시트르산나트륨을 약 6.5 중량% 및 시트르산을 4.2 중량% 포함한다.

5. 정맥 투여용 용액

다른 양태에서, 동결건조 제제는 주사용 무균수 또는 0.9% 생리 주사용 염화나트륨(식염수)(USP)에 의한 용시조제 후 정맥 투여에 적합하다. 일 실시양태에서, 약 695 ㎎의 동결건조 제제를 주사용 무균수 약 15 ㎖에 의해 용시조제하여, 삼투질농도가 약 219 mOsmol/kg인 등장성 용액을 생성시킨다. 일 실시양태에서, 약 695 ㎎의 동결건조 제제를 주사용 무균수 약 10 ㎖에 의해 용시조제하여, 삼투질농도가 약 333 mOsmol/kg인 등장성 용액을 생성시킨다. 다른 실시양태에서, 약 168 ㎎의 동결건조 제제를 0.9% 주사용 염화나트륨(USP) 약 10 ㎖에 의해 용시조제하여, 삼투질농도가 약 331 mOsmol/kg인 등장성 용액을 생성시킨다. 다른 실시양태에서, 약 260 ㎎의 동결건조 제제를 0.45% 주사용 염화나트륨(USP) 10 ㎖에 의해 용시조제하여, 삼투질농도가 약 302 mOsmol/kg인 등장성 용액을 생성시킨다.

몇몇 실시양태에서, 용시조제 후, 용시조제된 물질은 시트르산나트륨을 약 0.5 ㎎/㎖ 내지 약 3.0 ㎎/㎖의 농도로, 시트르산을 약 0.3 ㎎/㎖ 내지 약 2.0 ㎎/㎖의 농도로 포함한다.

[실시예]

하기 실시예에 의해 본 발명을 추가로 설명한다. 실시예는 예시 목적으로만 제공된다. 실시예는 어떠한 방식으로든 본 발명의 범위 또는 내용을 한정하는 것으로 해석되지 않는다.

방법

실시예에서 다음의 방법을 사용한다:

역상 HPLC( RP - HPLC )

샘플 및 일련의 CPT 표준품을 주입하여 유리 CPT(및 불순물)의 전체 농도를 측정하였다. 피분석물을 컬럼 내 이의 보유 시간에 의해 분리하고, 360 ㎚에서의 UV 흡수에 의해 전체 곡선하 면적을 측정하였다. CPT, CPT-SA 및 CPT-SI의 표준품을 사용하여 보정 곡선을 생성시키고, 이를 사용하여 유리 CPT 및 샘플 중 연관 중간체의 수치를 정량화하였다. 결과를 AUC(%)로서 나타내고, 여기서 유리 CPT(또는 CPT-SA 또는 CPT-SI와 같은 특정한 불순물)의 AUC를 PHF-CPT의 AUC로 나눴다. 또는, 결과를 질량(%)으로서 나타내고, 유리 CPT(또는 특정한 불순물)의 질량을 PHF-CPT의 질량으로 나눈다.

CPT - SA 표준품의 제법

CPT-Gly-TFA(50 ㎎, 0.096 mmol) 및 숙신산 무수물(18 ㎎, 0.190 mmol)을 무수 피리딘 2 ㎖ 중에 용해시켰다. 상온에서 18 시간 교반 후, 진공하에 피리딘을 제거하였다. 고체 잔류물을 탈이온수 중에 현탁시키고 염화메틸렌으로 추출하고 0.01 N HCl로 세척하고 황산마그네슘으로 건조시켰다. 진공하에 용매를 제거하여 90% 초과의 CPT-SA(360 ㎚ 검출을 갖는 HPLC)를 포함하는 담황색 고체(41.4 ㎎, 85% 수율)를 생성시켰다. LC-MS: m/z 506.2(M+H).

CPT - SI 표준품의 제법

PHF-CPT(500 ㎎)를 0.1 M 인산염(pH 7.6) 10 ㎖ 중에 용해시키고 37℃에서 24 시간 동안 항온처리하였다. 얻어진 현탁액을 150 ㎖로 희석하고 염화메틸렌(3×150 ㎖)으로 추출하였다. 염화메틸렌 층을 합하고 0.01 N HCl로 세척하고 황산마그네슘으로 건조시켰다. 진공하에 용매를 제거하였다. 담황색 잔류물을 염화메틸렌 중에 재용해시키고 여과시키고 진공하에 건조시켜, RP-HPLC에 따라 93% CPT-SI를 포함하는 생성물 38 ㎎을 생성시켰다.

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃): δ 1.01 (τ, 3H, J = 7.4 Hz, C19), δ 2.05-2.32 (m, 2H, C 18), δ 2.66 (s, 4H, 숙신이미드), δ 4.32-4.51 (AB, 2H, 17.2 Hz, C-α Gly), δ 5.32 (s, 2H, C-5), δ 5.29-5.65 (AB, 2H, 17.3 Hz, C-17), δ 7.20 (s, 1H, C-14), δ 7.60 (t, 1H, J = 7.5 Hz, C-11), δ 7.76 (t, 1H, J = 7.7 Hz), δ 7.86 (d, 1H, J = 8.3, C-12), δ 8.20 (d, 1H, J = 8.3, C-9), δ 8.32 (s, 1H, C-7).

¹³C NMR: 7.23, 28.36, 29.89, 32.04, 39.53, 50.17, 67.31, 77.45, 96.29, 120.54, 128.23, 128.33, 128.64, 130.00, 130.80, 131.35, 145.14, 146.70, 149.08, 152.46, 157.48, 166.27, 166.78, 175.95.

핵 자기 공명( NMR )

NMR을 사용하여 숙시네이트와 글리신-CPT 사이의 아미드 결합을 검증하고 중합체 골격에 로딩된 CPT의 양을 결정하였다.

CPT 로딩 속도의 측정을 위한 UV 분석

289 ㎚에서의 광학 밀도를 측정하여 CPT 로딩 속도를 결정하고 배경 보정을 500 ㎚에서 설정하였다. 유리 0(2O)-CPT 유도체 및 중합체 결합 0(2O)-CPT 유도체 모두에 대한 소광 계수가 본질적으로 동일하므로 289 ㎚의 UV 흡광도 최대를 사용하였다. 이 데이터로부터, 소광 계수를 사용하여 계산에 의해 결합 CPT 등가물/㎖의 양을 결정하였다. 이후, 동결건조를 사용하여 건조 중량 분석에 의해 측정되는 용액 중의 CPT-중합체 접합체의 전체 농도로 나눠 CPT 등가물/㎎을 계산하였다.

소르비톨의 농도(㎎/㎖)

양이온 교환 HPLC를 사용하여 USP 소르비톨 외부 표준품을 굴절률("RI") 검출과 비교하여 CPT-중합체 접합체의 수용액 중의 소르비톨의 농도를 결정하였다.

만니톨의 농도(㎎/㎖)

양이온 교환 HPLC를 사용하여 USP 만니톨 외부 표준품을 RI 검출과 비교하여 CPT-중합체 접합체의 수용액 중의 만니톨의 농도를 결정하였다.

시트르산나트륨의 농도(㎎/㎖)

역상 이온 쌍 HPLC를 사용하여 USP 시트르산 외부 표준품을 UV 검출과 비교하여 CPT-중합체 접합체의 수용액 중의 시트르산나트륨 2수화물의 농도를 결정하였다.

비결합 숙신산의 농도(㎎/㎖)

UV 검출에 의해 역상 음이온 교환 HPLC를 사용하여 CPT-중합체 접합체의 수용액 중의 비결합 숙신산의 농도를 결정하였다. UV 검출기를 200 ㎚에서 설정하였다. 숙신산 보정 곡선(Sigma-Aldrich(미국 미조리주 세인트 루이스))과 비교하여 샘플 중의 비결합 숙신산의 수치를 정량화하였다.

분자량 분포( Mw , D90 , D50 , D10 )

RI 검출과 함께 고압 크기 배제 크로마토그래피(HPSEC)에 의해 CPT-중합체 접합체 및 PHF 및 PHF-SA의 분자량 분포를 측정하였다. 풀룰란(Pullulan) 폴리사카라이드 중합체(Polymer Laboratories(미국 메사추세츠주 앰허스트))를 사용하여 표준 곡선을 생성시켰다. 폴리사카라이드 표준 곡선에 기초하여 분자량 분포(중량 평균 분자량("Mw"), D90, D50, D10)를 계산하였다.

삼투질농도

증기압 삼투압계(Vapor)에 의해 CPT-중합체 접합체의 수용액의 삼투질농도를 측정하였다.

용시조제 시간을 측정하기 위한 방법

바이알 내에 압력 축적(build-up)을 회피하기 위해 바늘 끝이 고무 마개 바로 아래 위치할 때까지 바늘을 고무 마개의 중심에 삽입하였다. 이후, 바이알로부터 플립-탑(flip-top)을 제거하고 주사기를 사용하여 희석제를 첨가하여 샘플을 용시조제하였다. 압력 방출 바늘 및 주사기를 제거하고, 내용물이 용해될 때까지 바이알을 천천히 뒤집었다. 용해에 걸리는 시간을 스탑워치를 사용하여 전체 초로 기록하였다.

수성 PHF - CPT 접합체의 제조

1단계: 폴리[ 하이드록시메틸에틸렌 하이드록시메틸포르말 ](" PHF ")의 합성(도 5)

덱스트란을 문헌[Papisov et al, Biomacromolecules (2005) 6: 2659-70]에 기재된 바대로 수성 NaIO₄ 중에 완전 산화시켜, 각 글루코스 잔기의 3번 위치에서의 탄소가 포르메이트로서 밀려나온 중합체 폴리-알데하이드를 생성시켰다. 산화된 덱스트란을 우선 진공 여과(이에 의해 침전된 무기 염을 제거)에 의해, 이후 공칭 분획 분자량(MWCO)이 10 kD인 필터를 사용하는 막 정용여과 또는 접선 유동 여과("TFF")에 의해 탈염시켰다. 이후, 폴리-알데하이드를 수성 NaBH₄를 사용하여 완전히 감소시켜 PHF를 생성시키고, 이후 이것을 공칭 MWCO이 10,000 달톤인 필터를 사용하는 막 정용여과 또는 TFF에 의해 탈염시켰다. 정제된 PHF를 0.2 마이크론 여과시키고 벌크로 동결건조시키고 4단계에서 필요할 때까지 2℃ 내지 8℃에서 저장하였다.

2단계: 캄토테신 -글리신- tert - 부틸옥시카르보닐("CPT-Gly-BOC")의 합성(도 6)

CPT의 tert-알콜은 BOC-글리신 및 디이소프로필 카르보디이미드(DIC)의 존재하에 에스테르를 형성하였고, 이것을 WO 제2005/023294호에 기재된 방법에서처럼 일련의 농축 탄산수소나트륨 용액 중의 추출, 증류, 메탄올 중의 재결정화 및 진공 하 건조에 의해 후속적으로 정제하였다. 정제된 CPT-Gly-BOC를 3단계에서 필요할 때까지 2℃ 내지 8℃에서 벌크로 저장하였다.

3단계: 캄토테신 -글리신- 트리플루오로아세트산("CPT-Gly-TFA")의 합성(도 7)

염화메틸렌 중의 트리플루오로아세트산("TFA")을 사용하여 실온에서 BOC 보호기를 제거하고, CPT-글리시네이트를 TFA 염으로서 분리시키고, 이것을 WO 제2005/023294호에 기재된 방법에서처럼 디에틸 에테르로부터 침전시키고, 여과지를 통해 여과시키고, 에테르로 세척하고, 진공하에 건조시켜 정제하였다. 정제된 CPT-글리신-TFA를 5단계에서 필요할 때까지 -18℃ 내지 -25℃에서 벌크로 저장하였다.

4단계: 폴리 [ 하이드록시메틸에틸렌 하이드록시메틸포르말 ]-숙신산(" PHF - SA ")의 합성(도 8)

PHF(10.00 g, 75.6 mmol), 숙신산 무수물(0.76 g, 7.6 mmol) 및 DMAP(1.2 ㎎, 0.01 mmol)를 무수 피리딘 5 ㎖ 중에 용해시켰다. 4O℃에서 교반 18 시간 후, 피리딘을 진공하에 제거하고, 잔류물을 탈이온수 중에 현탁시켰다. 숙시닐화의 정도는 대략 이용 가능한 알콜 기의 10 몰%였다. 이후, PHF-SA를 공칭 MWCO이 10,000 달톤인 필터를 사용하는 막 정용여과 또는 TFF에 의해 탈염시켰다. 정제된 PHF-SA를 0.1 마이크론 여과시키고, 5단계에서 필요할 때까지 2℃ 내지 8℃에서 벌크로 저장하였다.

5단계: PHF - SA 및 CPT -글리신- TFA 의 커플링(도 9)

PHF-SA의 숙시네이트를 에틸 디메틸아미노프로필 카르보디이미드(EDC)를 사용하여 활성화하고, CPT-글리신과 커플링하여 미정제 수성 접합체를 생성시켰다. PHF-SA(15.Og, 10.7 mmol SA)를 탈이온수 150 ㎖ 중에 용해시키고, 디메틸포름아미드("DMF") 30 ㎖와 혼합하고, -2℃로 냉각시키고, CPT-Gly.TFA 용액(3:1 아세토니트릴/물 혼합물 20 ㎖ 중의 2.0 g/13.85 mmol)과 합하였다. 강하게 교반하면서, EDC(2.0 g)를 반응 혼합물에 분액으로 첨가하였다. pH를 5.9∼6.0로 조정하였다. 교반 30 분 후, 반응 혼합물의 온도를 주위 온도로 만들고, 추가로 3 시간 동안 계속해서 교반하였다. CPT를 RP-HPLC(360 ㎚에서의 UV)에 의해 모니터링하였다. pH를 5.5로 조정하여 접합체로부터 CPT 배출을 막고, 반응 혼합물을 8℃에서 밤새 저장하였다. 이후, 혼합물을 DMF 및 물로 600 ㎖(DMF 함량 10% v/v)로 희석하고, 접합체를 Sephadex G-25에서 탈염시키고, 동결건조시키고, -20℃에서 저장하였다. 생성물은 (360 ㎚에서 분광광도계에 의해 측정할 때) CPT 함량이 7.48 w/w%인 회백색 내지 담황색 고체였다. CPT 함량에 기초한 수율은 80%였다.

대안적인 5단계: 변형 방법에 의한 PHF - SA 및 CPT -글리신- TFA 의 커플링

PHF-SA(7.0 g)를 탈이온수 150 ㎖ 중에 용해시키고, 아세토니트릴 30 ㎖와 혼합하고, 0∼5℃로 냉각시키고, CPT-Gly.TFA 용액(아세토니트릴 7 ㎖ 중의 0.9 g/1.73 mmol)과 합하였다. pH를 5.9∼6.0으로 조정한 후, 아세토니트릴 5 ㎖ 중의 EDC(1.0 g)의 용액 및 탈이온수 몇 액적을 강하게 교반하면서 반응 혼합물에 적하하였다. 교반 30 분 후, 반응 혼합물의 온도를 주위 온도로 만들고, 추가로 3 시간 동안 계속해서 교반하였다. 반응 동안, pH를 모니터링하고, 지속적으로 5.9∼6.0으로 조정하였다. CPT 전환을 RP-HPLC(360 ㎚에서의 UV)에 의해 모니터링하였다. pH를 4.5로 조정하고, 0.2 ㎛ 필터를 통해 여과시키고, 이후 Sephadex G-25에서 또는 정용여과(10 kD MWCO)에 의해 정제하였다. CPT 로딩은 6.19 중량%였다. 이 방법에 의해 합성된 PHF-CPT는 상기 방법(도 12)에 의해 합성된 것보다 더 균일하였다.

6단계: 수성 PHF - CPT 접합체의 최종 정제(도 10)

미정제 수성 PHF-CPT 접합체를 우선 0.1 마이크론 또는 0.2 마이크론 TFF 필터를 통해 통과시켜 미립자를 제거하여 정제한 후, 공칭 MWCO이 10,000 달톤인 필터를 사용하는 TFF에 의해 정제(낮은 MW 시약 및 물질의 제거)하였다. 또는, TFF 대신에 막 정용여과를 사용하였다.

7단계: 수성 PHF - CPT 접합체의 제제 및 최종 여과(도 11)

수성 PHF-CPT 접합체를 주사용수 및 완충제, 안정화제 및/또는 본원에 개시된 다른 첨가제와 제제화하여, 벌크 수성 접합체를 생성시켰다. 이 부형제를 6단계 완료 24 시간 내에 첨가하였다(부형제는 항상 6단계 완료 24 시간 내에 첨가되어야 한다). 이후, 제제화된 PHF-CPT 접합체를 0.2 마이크론 여과시키고, 무균 20ℓ들이 폴리카르보네이트 카보이에 포장하고, 2℃ 내지 8℃에서 저장하고, 광으로부터 보호하였다.

동결건조된 PHF - CPT 접합체의 제조

8단계: 동결건조 제제: 바이알 충전, 동결건조 및 실링

각 바이알(20 ㎖)에 상기 7단계로부터 얻은 수성 PHF-CPT 접합체 약 6 ㎖를 충전하고, 이후 동결건조시켜 동결건조된 케이크를 생성시켰다. 이 물질을 점진적으로 -50℃로 온도를 감소시켜 동결시키고, 이후 -50℃에서 2 시간 동안 유지시켰다. 진공을 이 물질에 인가하고, 온도를 점진적으로 -35℃로 증가시키고, 이후 -35℃에서 약 60 시간 동안 유지시켰다. 이후, 이 물질을 -5℃에서 약 40 시간 동안 동결건조시키고, 이후 +15℃에서 약 15 시간 동안 동결건조시켰다. 동결건조 사이클을 완료한 후, 바이알을 질소 하에 실링하였다.

대안적인 8단계: 동결건조 제제: 바이알 충전, 동결건조 및 실링

각 바이알(30 ㎖)에 상기 7단계로부터 얻은 수성 PHF-CPT 접합체 약 9 ㎖를 충전하고, 이후 동결건조시켜 동결건조된 케이크를 생성시켰다. 이 물질을 점진적으로 -45℃로 온도를 감소시켜 동결시키고, 이후 -45℃에서 2 시간 동안 유지시켰다. 진공을 이 물질에 인가하고, 온도를 점진적으로 -15℃로 증가시키고, 이후 -15℃에서 약 60 시간 동안 유지시켰다. 이후, 이 물질을 -5℃에서 약 4 시간 동안 동결건조시키고, 이후 +15℃에서 약 21 시간 동안 동결건조시켰다. 동결건조 사이클을 완료한 후, 바이알을 순수한 질소에 의해 95% 대기로 막았다.

실험

실시예 1: CPT -중합체 접합체의 수용액의 안정성 - 온도 및 pH 의 효과

수성 CPT-중합체 접합체 60 ㎎/㎖의 액적을 pH 4.0 및 5.2에서 제제화하고, 5℃, 2O℃ 및 4O℃에서 저장하였다. 이 액적의 조성을 하기 표 1에 기재하였다. 이 액적을 역상 HPLC를 사용하여 0 일, 1 일, 3 일, 6 일, 10 일, 12 일 및 26 일 시점에서 시험하였다.

[표 1] 소르비톨과 제제화된 수성 CPT-중합체 접합체의 조성

도 3 및 도 4에 도시된 바대로, CPT-SI 배출은 pH 및 온도에 의존하였다. CPT-중합체 접합체는 수용액으로 저장될 때 주로 가수분해를 통해 분해되고, CPT-SI를 용액으로 배출시켰다. 따라서, 시간에 걸쳐 관찰된 CPT-SI의 증가는 CPT-중합체 접합체의 분해를 나타낸다. 따라서, 낮은 pH 및 온도는 수성 CPT-중합체 접합체에 대한 바람직한 저장 조건이다.

실시예 2: pH 4.4 내지 4.6에서의 CPT -중합체 접합체의 수용액의 안정성

CPT-중합체 접합체의 수용액을 상기 표 1에 따라 제조하고, 시트르산나트륨 완충제에 의해 pH 4.6에서 유지시켰다. CPT-중합체 접합체의 수용액을 2∼8℃에서 저장하고, 역상 HPLC 및 HPSEC를 사용하여 0 일, 15 일, 30 일, 45 일, 60 일 및 90 일 시점에서 시험하였다. 용액 중의 유리 CPT, CPT-SA 및 CPT-SI의 양 및 분자량 분포가 0 시간에 및 90 일 후에 비슷하였다. 따라서, pH 4.6으로 완충된 CPT-중합체 접합체의 수용액은 적어도 90 일 동안 저장 안정하였다. 이 결과를 표 2에 요약하였다.

[표 2] pH 4.6에서의 수성 CPT-중합체 접합체의 안정성

실시예 3: 1%, 5% 및 10%에서의 중합체 골격으로의 CPT 의 로딩

중합체 골격에 대략 CPT 1 중량%를 로딩하기 위해, "5단계: PHF-SA 및 CPT-글리신-TFA의 커플링" 하에 실시예 섹션에 기재된 절차에 의해 CPT-Gly-TFA 1 그람을 PHF-SA 65±6 g과 커플링하였다.

중합체 골격에 대략 CPT 5 중량%를 로딩하기 위해, "5단계: PHF-SA 및 CPT-글리신-TFA의 커플링" 하에 실시예 섹션에 기재된 절차에 의해 CPT-Gly-TFA 1 그람을 PHF-SA 12±1 g과 커플링하였다.

중합체 골격에 대략 CPT 10 중량%를 로딩하기 위해, "5단계: PHF-SA 및 CPT-글리신-TFA의 커플링" 하에 실시예 섹션에 기재된 절차에 의해 CPT-Gly-TFA 1 그람을 PHF-SA 5.5±0.5 g과 커플링하였다.

실시예 4: 소르비톨 제제

CPT-중합체 접합체의 수용액을 표 3에 도시된 바대로 85% 소르비톨 및 2.5% 시트르산나트륨과 제제화하고, 이후 동결건조시켰다. 동결건조된 바이알을 2∼8℃에서 저장하였다. 각 바이알은 CPT-중합체 접합체 약 695 ㎎을 포함하였다. 바이알을 15 ㎖ 주사용 무균수에 의해 용시조제하고, 0 달, 1 달, 3 달 및 6 달 시점에서 분자량, 유리 SA(%), pH, 삼투질농도, 입자 물질(HPSEC), 다른 불순물(RP-HPLC) 및 유리 CPT, CPT-SA 및 CPT-SI에 대해 시험하였다. 이 결과를 표 4에 요약하였다.

[표 3] 안정화제로서의 소르비톨과의 제제

[표 4] 동결건조된 소르비톨 제제에 대한 안정성 결과

실시예 5: 만니톨 제제

CPT-중합체 접합체의 3가지 수용액을 표 5, 표 6 및 표 7에 도시된 바대로 6.5% 시트르산나트륨 및 4.2% 시트르산 및 44.6% 만니톨, 35% 만니톨 또는 34% 만니톨 + 2.7% 폴리소르베이트 80과 제제화하고, 이후 동결건조시켰다. 이후, 동결건조된 바이알을 2∼8℃에서 저장하였다. 각 바이알은 CPT-중합체 접합체 약 168 ㎎을 포함하였다. 각 바이알을 0.9% 생리 식염수 10 ㎖에 의해 용시조제하고, O 달, 0.5 달 및 1 달 시점에서 분자량에 대해 시험하였다. 이 결과를 표 8에 요약하였다.

[표 5] 만니톨 제제 1호(44.6% 만니톨)

[표 6] 만니톨 제제 2호(35% 만니톨)

[표 7] 만니톨 제제 3호(34% 만니톨 + 2.7% 폴리소르베이트 80)

[표 8] 2∼8℃에서 동결건조된 만니톨 제제 1호, 2호 및 3호에 대한 안정성 결과

제2 실험에서, CPT-중합체 접합체의 2가지 수용액을 표 9 및 표 10에 도시된 바대로 만니톨 및 폴리소르베이트 80과 제제화하였다. 각 수용액 일 분액을 30 ㎖ PETG 무균 정사각형 매질 병에서 액체로서 저장하고, 다른 분액을 바이알에서 동결건조시켰다. 액체 물질 및 동결건조된 바이알을 2∼8℃에서 저장하였다. 액체 물질을 0 달, 0.5 달, 1 달, 2 달, 3 달, 4 달 및 6 달 시점에서 분자량 및 불순물에 대해 시험하였다. 이 결과를 표 11 및 표 12에 요약하였다. 각 동결건조된 바이알을 0.9% 생리 식염수에 의해 용시조제하고, 0 달, 1 달, 3 달 및 6 달 시점에서 분자량 및 불순물에 대해 시험하였다. 이 결과를 표 13 및 표 14에 요약하였다.

[표 9] 만니톨 제제 4호(30 ㎎/㎖ PHF-CPT. 34.6% 만니톨 및 1.0% 폴리소르베이트 80)

[표 10] 만니톨 제제 5호(15 ㎎/㎖ PHF-CPT. 34.6% 만니톨 및 1.0% 폴리소르베이트 80)

[표 11] 2∼8℃에서 액체 만니톨 제제 4호(30 ㎎/㎖ PHF-CPT)에 대한 안정성 결과

[표 12] 2∼8℃에서 액체 만니톨 제제 5호(15 ㎎/㎖ PHF-CPT)에 대한 안정성 결과

[표 13] 2∼8℃에서 동결건조된 만니톨 제제 4호(30 ㎎/㎖ PHF-CPT)에 대한 안정성 결과

[표 14] 2∼8℃에서 동결건조된 만니톨 제제 5호(15 ㎎/㎖ PHF-CPT)에 대한 안정성 결과

제3 실험에서, PHF-CPT를 하기 표 15에 도시된 바대로 제제화하고, 이후 바이알에서 동결건조시키고, 2∼8℃에서 저장하였다. 각 동결건조된 바이알을 10 ㎖ 0.45% 생리 식염수에 의해 용시조제하고, 0 달, 3 달, 6 달, 9 달 및 13 달 시점에서 분자량 및 불순물에 대해 시험하였다. 이 결과를 표 16에 요약하였다.

[표 15] 만니톨 제제 6호(15 ㎎/㎖ PHF-CPT. 34.6% 소르비톨 및 1% 폴리소르베이트 80)

[표 16] 동결건조 후 만니톨 제제 6호에 대한 안정성 데이터

실시예 5: 용시조제 연구

용시조제에 필요한 시간을 상기 기재된 방법을 사용하여 하기 표 17에 기재된 동결건조 제제에 대해 결정하였다. 샘플을 하기한 바대로 수 중에서 제제화하였다.

75 ㎎ PHF - CPT , 100 ㎎ 만니톨 제제: 20 ㎖ 바이알에서, 7.5 ㎎/㎖ PHF-CPT 용액 10.0 ㎖를 100 ㎎/㎖ 만니톨 용액 1.0 ㎖ 및 50 ㎎/㎖ 시트르산나트륨 용액 0.5 ㎖와 혼합하였다.

75 ㎎ PHF - CPT , 75 ㎎ 만니톨 제제: 20 ㎖ 바이알에서, 7.5 ㎎/㎖ PHF-CPT 용액 10.0 ㎖를 100 ㎎/㎖ 만니톨 용액 0.75 ㎖ 및 50 ㎎/㎖ 시트르산나트륨 용액 0.5 ㎖와 혼합하였다.

75 ㎎ PHF - CPT , 50 ㎎ 만니톨 제제: 20 ㎖ 바이알에서, 7.5 ㎎/㎖ PHF-CPT 용액 10.0 ㎖를 100 ㎎/㎖ 만니톨 용액 0.5 ㎖ 및 50 ㎎/㎖ 시트르산나트륨 용액 0.5 ㎖와 혼합하였다.

75 ㎎ PHF - CPT , 50 ㎎ 만니톨 , 15 ㎎ 폴리소르베이트 80 제제: 20 ㎖ 바이알에서, 7.5 ㎎/㎖ PHF-CPT 용액 10.0 ㎖를 100 ㎎/㎖ 만니톨 용액 0.5 ㎖, 50 ㎎/㎖ 시트르산나트륨 용액 0.5 ㎖ 및 30 ㎎/㎖ 폴리소르베이트 용액 0.5 ㎖와 혼합하였다.

이후, 용액을 바이알에서 동결건조시키고 2∼8℃에서 저장하였다. 각 동결건조된 바이알을 표 17에 기재된 바대로 물 또는 0.9% 생리 식염수에 의해 용시조제하고, 모든 고체가 용해될 때까지 약하게 진탕시켰다. 이 결과를 표 17에 요약하였다.

[표 17] 용시조제 실험 1호

용시조제에 필요한 시간을 상기 기재된 방법을 사용하여 하기 표 18에 기재된 동결건조 제제에 대해 결정하였다. 샘플을 하기한 바대로 수 중에서 제제화하였다.

75 ㎎ PHF - CPT , 75 ㎎ 만니톨 제제: 20 ㎖ 바이알에서, 7.5 ㎎/㎖ PHF-CPT 용액 10.0 ㎖를 100 ㎎/㎖ 만니톨 용액 0.75 ㎖, 20 ㎎/㎖ 시트르산나트륨 용액 0.55 ㎖ 및 10 ㎎/㎖ 시트르산 용액 0.6 ㎖와 혼합하였다.

75 ㎎ PHF - CPT , 50 ㎎ 만니톨 제제: 20 ㎖ 바이알에서, 7.5 ㎎/㎖ PHF-CPT 용액 10.0 ㎖를 100 ㎎/㎖ 만니톨 용액 0.5 ㎖, 20 ㎎/㎖ 시트르산나트륨 용액 0.55 ㎖ 및 10 ㎎/㎖ 시트르산 용액 0.6 ㎖와 혼합하였다.

75 ㎎ PHF - CPT , 50 ㎎ 만니톨 , 4 ㎎ 폴리소르베이트 80 제제: 20 ㎖ 바이알에서, 7.5 ㎎/㎖ PHF-CPT 용액 10.0 ㎖를 100 ㎎/㎖ 만니톨 용액 0.5 ㎖, 20 ㎎/㎖ 시트르산나트륨 용액 0.55 ㎖, 10 ㎎/㎖ 시트르산 용액 0.6 ㎖ 및 8 ㎎/㎖ 폴리소르베이트 용액 0.5 ㎖와 혼합하였다.

이후, 용액을 바이알에서 동결건조시키고 2∼8℃에서 저장하였다. 각 동결건조된 바이알을 0.9% 생리 식염수 10 ㎖에 의해 용시조제하고, 약하게 10 회 뒤집고, 이후 모든 고체가 용해될 때까지 정치시켰다. 이 결과를 표 18에 요약하였다.

[표 18] 용시조제 실험 2호

실시예 6. 추가 제제

표 19에 기재된 제제를 제조하고, 바이알마다 수성 PHF-CPT 9 ㎖를 사용하여 30 ㎖ 바이알에 충전하였다. 이후, 바이알을 동결건조시켰다.

[표 19] 만니톨 및 폴리소르베이트 80과의 30 ㎎/㎖ PHF-CPT 제제

다른 실시양태

본 발명은 이의 구체적인 내용과 함께 기재되어 있고, 상기 내용은 본 발명을 예시하고자 의도되며 본 발명의 범위를 제한하지 않으며, 그 범위는 특허청구범위에 의해 한정되는 것으로 이해되어야 한다. 다른 양태, 이점 및 변형은 특허청구범위 내에 있다.

Claims

분자량이 약 10 kD 내지 약 500 kD인 하기 화학식 (I)의 화합물; 안정화제; 1종 이상의 완충제; 및 계면활성제를 포함하는 정맥 투여에 적합한 약학 제제:

[상기 식 중,
R₁ 중 하나는 H 또는
이고, 다른 하나는
이며;
R₂ 중 하나는 H 또는
이고, 다른 하나는
이며;
CPT는 캄토테신이고;
n은 32∼3320이며;
m은 0∼833이고;
k는 1∼216이며;
k, m 및 n은 화학식 (I)의 화합물의 약 1 중량% 내지 약 15 중량%가 캄토테신이도록 선택된다].
제1항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 4 중량% 내지 약 7 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제2항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 5 중량% 내지 약 6 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제2항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 6 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제1항에 있어서, 안정화제는 소르비톨, 만니톨, 수크로스, 락토스, 글루코스, 크실리톨, 말토스, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 락티톨, 덱스트로스, 글리세린 및 말티톨로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제5항에 있어서, 안정화제는 소르비톨인 약학 제제.
제6항에 있어서, 소르비톨은 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제5항에 있어서, 안정화제는 만니톨인 약학 제제.
제8항에 있어서, 만니톨은 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제8항에 있어서, 만니톨은 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 200 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제8항에 있어서, 만니톨은 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 25 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제8항에 있어서, 만니톨은 약 10.3 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제8항에 있어서, 만니톨은 약 20.3 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제1항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨, 아스코르브산염, 숙신산염, 젖산염, 시트르산, 붕산, 붕사, 염산, 인산수소이나트륨, 아세트산, 포름산, 글리신, 중탄산염, 타르타르산, 트리스-글리신, 트리스-NaCl, 트리스-에틸렌디아민 테트라아세트산("EDTA"), 트리스-보레이트-EDTA, 트리스-아세테이트-EDTA("TAE") 완충제 및 트리스-완충 식염수, 4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산("HEPES"), 3-(N-모르폴리노)프로판설폰산("MOPS"), 피페라진-1,4-비스(2-에탄설폰산)("PIPES"), 2-(N-모르폴리노)에탄설폰산("MES"), 인산염 완충 식염수("PBS"), 식염수-시트르산나트륨("SSC"), 식염수-트리스-EDTA("STE") 및 트리스-마그네슘으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제14항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨을 포함하는 것인 약학 제제.
제14항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨 및 시트르산을 포함하는 것인 약학 제제.
제1항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트(Polysorbate) 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머(Poloxamer) 407, 솔루톨(Solutol) HS 15, 폴록사머 188, 라우릴황산나트륨, 에테르 황산염, 황산화유, 세트리미드 BP, 염화벤즈알코늄, 레시틴, 세트로마크로겔 1000 BPC 및 화학식 RCOOX의 알칼리 금속 비누(여기서, R은 C10-C20 알킬 기이고, X는 나트륨, 칼륨 또는 암모늄임)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제17항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80인 약학 제제.
제18항에 있어서, 폴리소르베이트 80은 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 10 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제19항에 있어서, 폴리소르베이트 80은 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 4.5 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제20항에 있어서, 폴리소르베이트 80은 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 1.0 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제1항에 있어서, 저장 안정성이 있는 수용액인 약학 제제.
제1항에 있어서, 저장 안정성이 큰 수용액인 약학 제제.
제1항에 있어서, 용시조제 후 정맥 투여에 적합한 동결건조된 케이크인 약학 제제.
분자량이 약 10 kD 내지 약 500 kD인 하기 화학식 (I)의 화합물; 안정화제; 1종 이상의 완충제; 및 계면활성제의 수용액을 포함하는, 정맥 투여에 적합하고 pH가 약 4.2 내지 약 4.8인 저장 안정성이 있는 약학 제제:

[상기 식 중,
R₁ 중 하나는 H 또는
이고, 다른 하나는
이며;
R₂ 중 하나는 H 또는
이고, 다른 하나는
이며;
CPT는 캄토테신이고;
n은 32∼3320이며;
m은 0∼833이고;
k는 1∼216이며;
k, m 및 n은 화학식 (I)의 화합물의 약 1 중량% 내지 약 15 중량%가 캄토테신이도록 선택된다].
제25항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 4 중량% 내지 약 7 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제25항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 5 중량% 내지 약 6 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제25항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 6 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제25항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨, 아스코르브산염, 숙신산염, 젖산염, 시트르산, 붕산, 붕사, 염산, 인산수소이나트륨, 아세트산, 포름산, 글리신, 중탄산염, 타르타르산, 트리스-글리신, 트리스-NaCl, 트리스-에틸렌디아민 테트라아세트산("EDTA"), 트리스-보레이트-EDTA, 트리스-아세테이트-EDTA("TAE") 완충제 및 트리스-완충 식염수, 4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산("HEPES"), 3-(N-모르폴리노)프로판설폰산("MOPS"), 피페라진-1,4-비스(2-에탄설폰산)("PIPES"), 2-(N-모르폴리노)에탄설폰산("MES"), 인산염 완충 식염수("PBS"), 식염수-시트르산나트륨("SSC"), 식염수-트리스-EDTA("STE") 및 트리스-마그네슘으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제29항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨을 포함하는 것인 약학 제제.
제29항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨 및 시트르산을 포함하는 것인 약학 제제.
제25항에 있어서, 안정화제는 소르비톨, 만니톨, 수크로스, 락토스, 글루코스, 크실리톨, 말토스, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 락티톨, 덱스트로스, 글리세린 및 말티톨로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제32항에 있어서, 안정화제는 소르비톨인 약학 제제.
제33항에 있어서, 소르비톨의 농도는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖인 약학 제제.
제32항에 있어서, 안정화제는 만니톨인 약학 제제.
제35항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖인 약학 제제.
제35항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 200 ㎎/㎖인 약학 제제.
제35항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 25 ㎎/㎖인 약학 제제.
제35항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 10.3 ㎎/㎖인 약학 제제.
제35항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 20.3 ㎎/㎖인 약학 제제.
제25항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머 407, 솔루톨 HS 15, 폴록사머 188, 라우릴황산나트륨, 에테르 황산염, 황산화유, 세트리미드 BP, 염화벤즈알코늄, 레시틴, 세트로마크로겔 1000 BPC 및 화학식 RCOOX의 알칼리 금속 비누(여기서, R은 C10-C20 알킬 기이고, X는 나트륨, 칼륨 또는 암모늄임)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제41항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80인 약학 제제.
제42항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 10 ㎎/㎖인 약학 제제.
제42항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 4.5 ㎎/㎖인 약학 제제.
제42항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 1.0 ㎎/㎖인 약학 제제.
제25항에 있어서, 저장 안정성이 큰 약학 제제.
분자량이 약 10 kD 내지 약 500 kD인 하기 화학식 (I)의 화합물; 안정화제; 1종 이상의 완충제; 및 계면활성제를 포함하는 동결건조 및 용시조제에 적합한 약학 제제:

[상기 식 중,
R₁ 중 하나는 H 또는
이고, 다른 하나는
이며;
R₂ 중 하나는 H 또는
이고, 다른 하나는
이며;
CPT는 캄토테신이고;
n은 32∼3320이며;
m은 0∼833이고;
k는 1∼216이며;
k, m 및 n은 화학식 (I)의 화합물의 약 1 중량% 내지 약 15 중량%가 캄토테신이도록 선택된다].
제47항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 4 중량% 내지 약 7 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제47항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 5 중량% 내지 약 6 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제47항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 6 중량%가 캄토테신인 약학 제제.
제47항에 있어서, 안정화제는 소르비톨, 만니톨, 수크로스, 락토스, 글루코스, 크실리톨, 말토스, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 락티톨, 덱스트로스, 글리세린 및 말티톨로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제51항에 있어서, 안정화제는 소르비톨인 약학 제제.
제52항에 있어서, 소르비톨은 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖의 농도로 포함되는 것인 약학 제제.
제51항에 있어서, 안정화제는 만니톨인 약학 제제.
제54항에 있어서, 만니톨은 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖의 농도로 약학 제제 중에 포함되는 것인 약학 제제.
제54항에 있어서, 만니톨은 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 200 ㎎/㎖의 농도로 약학 제제 중에 포함되는 것인 약학 제제.
제54항에 있어서, 만니톨은 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 25 ㎎/㎖의 농도로 약학 제제 중에 포함되는 것인 약학 제제.
제54항에 있어서, 만니톨은 약 10.3 ㎎/㎖의 농도로 약학 제제 중에 포함되는 것인 약학 제제.
제54항에 있어서, 만니톨은 약 20.3 ㎎/㎖의 농도로 약학 제제 중에 포함되는 것인 약학 제제.
제47항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨, 아스코르브산염, 숙신산염, 젖산염, 시트르산, 붕산, 붕사, 염산, 인산수소이나트륨, 아세트산, 포름산, 글리신, 중탄산염, 타르타르산, 트리스-글리신, 트리스-NaCl, 트리스-에틸렌디아민 테트라아세트산("EDTA"), 트리스-보레이트-EDTA, 트리스-아세테이트-EDTA("TAE") 완충제 및 트리스-완충 식염수, 4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산("HEPES"), 3-(N-모르폴리노)프로판설폰산("MOPS"), 피페라진-1,4-비스(2-에탄설폰산)("PIPES"), 2-(N-모르폴리노)에탄설폰산("MES"), 인산염 완충 식염수("PBS"), 식염수-시트르산나트륨("SSC"), 식염수-트리스-EDTA("STE") 및 트리스-마그네슘으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제60항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨을 포함하는 것인 약학 제제.
제60항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨 및 시트르산을 포함하는 것인 약학 제제.
제47항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머 407, 솔루톨 HS 15, 폴록사머 188, 라우릴황산나트륨, 에테르 황산염, 황산화유, 세트리미드 BP, 염화벤즈알코늄, 레시틴, 세트로마크로겔 1000 BPC 및 화학식 RCOOX의 알칼리 금속 비누(여기서, R은 C10-C20 알킬 기이고, X는 나트륨, 칼륨 또는 암모늄임)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 약학 제제.
제63항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80인 약학 제제.
제64항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 10 ㎎/㎖인 약학 제제.
제65항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 4.5 ㎎/㎖인 약학 제제.
제65항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 1.0 ㎎/㎖인 약학 제제.
제47항에 있어서, 저장 안정성이 있는 약학 제제.
제47항에 있어서, 저장 안정성이 큰 약학 제제.
분자량이 약 10 kD 내지 약 500 kD인 하기 화학식 (I)의 화합물; 안정화제; 1종 이상의 완충제; 및 계면활성제를 포함하는 주사액으로서, 액체를 사용하여 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 동결건조된 케이크를 용시조제하여 제조되는 것인 주사액:

[상기 식 중,
R₁ 중 하나는 H 또는
이고, 다른 하나는
이며;
R₂ 중 하나는 H 또는
이고, 다른 하나는
이며;
CPT는 캄토테신이고;
n은 32∼3320이며;
m은 0∼833이고;
k는 1∼216이며;
k, m 및 n은 화학식 (I)의 화합물의 약 1 중량% 내지 약 15 중량%가 캄토테신이도록 선택된다].
제70항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 4 중량% 내지 약 7 중량%가 CPT인 주사액.
제71항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 5 중량% 내지 약 6 중량%가 CPT인 주사액.
제71항에 있어서, 화학식 (I)의 화합물의 약 6 중량%가 CPT인 주사액.
제70항에 있어서, 안정화제는 소르비톨, 만니톨, 수크로스, 락토스, 글루코스, 크실리톨, 말토스, 하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린, 락티톨, 덱스트로스, 글리세린 및 말티톨로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 주사액.
제74항에 있어서, 안정화제는 소르비톨인 주사액.
제75항에 있어서, 소르비톨의 농도는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖인 주사액.
제70항에 있어서, 안정화제는 만니톨인 주사액.
제77항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 500 ㎎/㎖인 주사액.
제77항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 200 ㎎/㎖인 주사액.
제77항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 1 ㎎/㎖ 내지 약 25 ㎎/㎖인 주사액.
제77항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 10.3 ㎎/㎖인 주사액.
제77항에 있어서, 만니톨의 농도는 약 20.3 ㎎/㎖인 주사액.
제70항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80, 폴리소르베이트 20, 폴록사머 407, 솔루톨 HS 15, 폴록사머 188, 라우릴황산나트륨, 에테르 황산염, 황산화유, 세트리미드 BP, 염화벤즈알코늄, 레시틴, 세트로마크로겔 1000 BPC 및 화학식 RCOOX의 알칼리 금속 비누(여기서, R은 C10-C20 알킬 기이고, X는 나트륨, 칼륨 또는 암모늄임)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 주사액.
제83항에 있어서, 계면활성제는 폴리소르베이트 80인 주사액.
제84항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 10 ㎎/㎖인 주사액.
제85항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 4.5 ㎎/㎖인 주사액.
제85항에 있어서, 폴리소르베이트 80의 농도는 약 0.1 ㎎/㎖ 내지 약 1.0 ㎎/㎖인 주사액.
제70항에 있어서, pH가 약 4.2 내지 약 4.8인 주사액.
제70항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨, 아스코르브산염, 숙신산염, 젖산염, 시트르산, 붕산, 붕사, 염산, 인산수소이나트륨, 아세트산, 포름산, 글리신, 중탄산염, 타르타르산, 트리스-글리신, 트리스-NaCl, 트리스-에틸렌디아민 테트라아세트산("EDTA"), 트리스-보레이트-EDTA, 트리스-아세테이트-EDTA("TAE") 완충제 및 트리스-완충 식염수, 4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산("HEPES"), 3-(N-모르폴리노)프로판설폰산("MOPS"), 피페라진-1,4-비스(2- 에탄설폰산)("PIPES"), 2-(N-모르폴리노)에탄설폰산("MES"), 인산염 완충 식염수("PBS"), 식염수-시트르산나트륨("SSC"), 식염수-트리스-EDTA("STE") 및 트리스-마그네슘으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 주사액.
제89항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨을 포함하는 것인 주사액.
제89항에 있어서, 1종 이상의 완충제는 시트르산나트륨 및 시트르산을 포함하는 것인 주사액.
제70항에 있어서, 액체는 무균수인 주사액.
제70항에 있어서, 액체는 0.9% 생리 식염수인 주사액.