KR20100132541A

KR20100132541A - 2-페닐-4-시클로프로필-피리미딘 유도체

Info

Publication number: KR20100132541A
Application number: KR1020107024690A
Authority: KR
Inventors: 에바 카로프; 엠마누엘 메이어
Original assignee: 액테리온 파마슈티칼 리미티드
Priority date: 2008-04-11
Filing date: 2009-04-09
Publication date: 2010-12-17
Also published as: JP5374578B2; CN101998953B; CA2719569C; US8466156B2; EP2283011B1; KR101610417B1; AR071653A1; JP2011516539A; WO2009125365A1; CN101998953A; IL208548A0; MA32277B1; CA2719569A1; TW200944516A; NZ589169A; AU2009235123A1; US20110028484A1; MX2010010932A; ZA201008052B; EP2283011A1

Abstract

본 발명은 2-페닐-4-시클로프로필-피리미딘 유도체 및 인간과 다른 포유동물에서 혈전증(thrombosis)을 비롯한, 혈소판 응집(platelet aggregation)과 연관된 말초 혈관(peripheral vascular), 내장 혈관(visceral vascular), 간혈관(hepatic vascular), 신혈관(renal vascular), 심혈관(cardiovascular)과 뇌혈관(cerebrovascular) 질환이나 장애의 치료 및/또는 예방에서 P2Y₁₂ 수용체 길항물질(receptor antagonist)로서 이들의 용도에 관계한다.

Description

2-페닐-4-시클로프로필-피리미딘 유도체{2-PHENYL-4-CYCLOPROPYL-PYRIMIDINE DERIVATIVES}

본 발명의 기술분야:

본 발명은 일정한 2-페닐-4-시클로프로필-피리미딘 유도체 및 인간과 다른 포유동물에서 혈전증(thrombosis)을 비롯한, 혈소판 응집(platelet aggregation)과 연관된 말초 혈관(peripheral vascular), 내장 혈관(visceral vascular), 간혈관(hepatic vascular), 신혈관(renal vascular), 심혈관(cardiovascular)과 뇌혈관(cerebrovascular) 질환이나 장애의 치료 및/또는 예방에서 P2Y₁₂ 수용체 길항물질(receptor antagonist)로서 이들의 용도에 관계한다.

본 발명의 배경기술:

지혈(haemostasis)은 혈관계(vascular system)에서 혈액의 유동성(fluidity)을 유지하면서 고형 응혈(solid blood clot)의 신속한 형성에 의한 혈관 손상(blood vessel injury) 이후 과도한 혈액 손실을 예방하는 자연적 균형(natural balance)을 지칭한다. 혈관 손상후, 혈관의 수축과 혈소판 유착(platelet adhesion)이 진행되고, 그 직후에 혈소판의 응집, 응고 캐스케이드(coagulation cascade)의 활성화와 최종적으로, 섬유소 용해계(fibrinolytic system)의 활성화가 진행된다. 지혈 비정상(haemostatic abnormality)은 치명적인 과도한 출혈(bleeding) 또는 혈전증(thrombosis)을 유발할 수 있다.

상이한 작용 기전(action mechanism)에 기초한 일련의 항혈소판제(antiplatelet agent)가 과거 수년 동안 개발되었다. 항혈소판 치료에서 가장 폭넓게 이용되는 작용제는 아스피린(aspirin)인데, 이는 사이클로옥시게나제(cyclooxygenase)-1을 비가역적으로 저해하고, 따라서 트롬복산 경로(thromboxane pathway)에 영향을 준다. 최적으로 효과적인 것은 아니지만, 아스피린 치료는 새로운 치료제가 비교되고 판단되는 표준 요법(standard therapy)이다.

다른 약제, 예를 들면, 포스포디에스테라아제 저해물질(phosphodiesterase inhibitor) 디피리다몰(dipyridamole)과 실로스타졸(cilostazol), 그리고 비타민 K 길항물질(와파린(warfarin))이 시판되고 있긴 하지만 이들 약물에서 바람직한 특징만 관찰되는 것은 아니다. 혈소판 응집을 차단하는 정맥내 적용가능한 3가지 강력한 GPIIb/IIIa 수용체 길항물질(압식시맙(abciximab), 엡티피바타이드(eptifibatide), 티로피반(tirofiban))이 시판되고 있다. 이들 이외에, 일부 경구 활성 GPIIb/IIIa 길항물질(가령, 시브라피반(sibrafiban), 세밀로피반(xemilofiban) 또는 오르보피반(orbofiban))은 현재까지 임상적 개발에서 성공적이지 못하였다.

아데노신 5'-디포스페이트(Adenosine 5'-diphosphate, ADP)는 혈소판 활성화와 응집에서 핵심 매개인자이고, 2가지 혈소판 ADP 수용체 P2Y₁과 P2Y₁₂를 간섭한다.

혈소판 ADP 수용체의 길항물질은 혈소판 응집의 저해와 항혈전 활성(antithrombotic activity)을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 현재까지 알려진 가장 효과적인 길항물질은 티에노피리딘 티클로피딘(thienopyridines ticlopidine), 클로피도그렐(clopidogrel)과 CS-747인데, 이들은 항혈전제(antithrombotic agent)로서 임상적으로 이용되고 있다. 이들 약물은 그들의 반응성 대사물질(reactive metabolite)을 통하여, ADP 수용체 아형 P2Y₁₂를 비가역적으로 차단하는 것으로 밝혀졌다.

일부 P2Y₁₂ 길항물질, 예를 들면, AR-C69931MX(Cangrelor) 또는 AZD6140은 III기 임상 연구 중에 있다. 이들 저해물질은 선별적 혈소판 ADP 수용체 길항물질인데, 이들은 ADP-의존성 혈소판 응집을 저해하고 생체내에서 효과적이다.

피페라지노-카르보닐메틸아미노카르보닐-나프틸 또는 -퀴놀릴 유도체는 WO 02/098856과 WO 2004/052366에서 ADP 수용체 길항물질로서 기술되었다.

WO 2006/114774에서는 P2Y₁₂ 수용체 길항물질로서 2-페닐-4-(카르보닐메틸아미노카르보닐)-피리미딘 유도체를 기술한다.

본 발명의 상세한 설명:

본 발명자들은 본 발명에 따른 2-페닐-4-시클로프로필-피리미딘 유도체가 놀랍게도, 상기 분자의 피페라진 기의 질소 원자 중에서 하나에서 에톡시카르보닐 치환을 보유하는 당업자에게 이전에 공지된 상응하는 유도체와 비교하여, 현저하게 향상된 생물학적 특성을 나타낸다는 것을 확인하였다.

본 발명의 다양한 구체예가 하기에 제공된다:

i) 본 발명은 먼저, 화학식 I의 화합물, 그리고 이런 화합물의 염(특히, 제약학적으로 허용되는 염)에 관계한다:

[화학식 I]

여기서

R¹은 할로겐, 메틸, 메톡시, 트리플루오르메틸 또는 트리플루오르메톡시에 의해 선택적으로 1회 치환된 페닐이고; 그리고

R²는 수소, 히드록시메틸 또는 알콕시메틸이다.

화학식 I 화합물은 하나 이상의 입체생성 중심(stereogenic center) 또는 비대칭 중심(asymmetric center), 예를 들면, 하나 이상의 비대칭 탄소 원자를 보유한다. 따라서 화학식 I 화합물은 입체이성질체의 혼합물, 또는 바람직하게는, 순수한 입체이성질체로서 존재한다. 입체이성질체의 혼합물은 당업자에게 공지된 방식으로 분리될 수 있다.

화학식 I의 화합물은 P2Y₁₂ 수용체 길항물질(receptor antagonist)이다. 따라서 이들은 요법(복합 요법(combination therapy) 포함)에 유용한데, 여기서 이들은 혈소판 활성화(activation), 응집(aggregation)과 탈과립(degranulation)의 저해물질(inhibitor)로서, 혈소판 세분(disaggregation)의 촉진물질(promoter)로서, 또는 항혈전제(anti-thrombotic agent)로서 폭넓게 이용될 수 있다.

아래의 단락에서는 본 발명에 따른 화합물에서 다양한 화학적 모이어티(chemical moiety)의 정의를 제공한다. 이들 정의는 달리 명시된 정의가 더욱 넓은 또는 더욱 좁은 정의를 제공하지 않으면, 명세서와 특허청구범위 전반에서 균일하게 적용된다.

본 명세서에서, “할로겐”은 플루오르, 클로르, 브롬 또는 요오드, 바람직하게는, 플루오르, 클로르 또는 브롬, 더욱 바람직하게는, 플루오르를 지칭한다.

본 명세서에서, “알킬”(단독으로 또는 조합으로)은 1개 내지 7개의 탄소 원자(가령, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸, sec-부틸, tert-부틸, n-펜틸, 네오펜틸, 이소-펜틸, n-헥실, 이소-헥실, n-헵틸 또는 이소-헵틸), 바람직하게는, 1개 내지 4개의 탄소 원자를 보유하는 포화된 직쇄 또는 분지쇄 알킬 기를 지칭한다. 바람직한 알킬 기의 대표적인 실례에는 메틸, 에틸, 프로필, 이소-프로필, n-부틸, 이소-부틸, sec-부틸과 tert-부틸이 포함된다.

본 명세서에서, “알콕시”(단독으로 또는 조합으로)는 1개 내지 6개의 탄소 원자(가령, 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소-프로폭시, n-부톡시, 이소-부톡시, sec-부톡시, tert-부톡시, n-펜톡시, 네오펜틸옥시, 이소-펜틸옥시, n-헥실옥시 또는 이소-헥실옥시), 바람직하게는, 1개 내지 4개의 탄소 원자를 보유하는 포화된 직쇄 또는 분지쇄 알콕시 기를 지칭한다. 바람직한 알콕시 기의 대표적인 실례에는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소-프로폭시, n-부톡시, 이소-부톡시, sec-부톡시와 tert-부톡시가 포함된다.

본 명세서에서, “알콕시메틸”은 하나의 수소 원자가 앞서 정의된 바와 같은 알콕시 기로 치환된 메틸 기를 지칭한다. 알콕시메틸 기의 실례에는 메톡시메틸과 에톡시메틸이 포함되지만 이들에 국한되지 않는다.

이들 이외에, 아래의 단락에서는 다양한 다른 용어의 정의를 제공한다. 이들 정의는 달리 명시된 정의가 더욱 넓은 또는 더욱 좁은 정의를 제공하지 않으면, 명세서와 특허청구범위 전반에서 균일하게 적용된다.

“제약학적으로 허용되는 염”은 비-독성의 무기 또는 유기 산 및/또는 염기 부가염(addition salt)을 지칭한다. "Salt selection for basic drugs", Int . J. Pharm . (1986), 33, 201-217을 참조할 수 있다 .

본 명세서에서, “실온”은 25℃의 온도를 지칭한다.

온도와 관련하여 이용되지 않으면, 수치(numerical value) “X” 앞에 놓인 “대략”은 본 명세서에서, X - X의 10% 내지 X + X의 10% 범위의 간격(interval), 바람직하게는, X - X의 5% 내지 X + X의 5% 범위의 간격을 지칭한다. 온도의 특정 사례에서, 온도 “Y” 앞에 놓인 “대략”은 본 명세서에서, 온도 Y - 10℃ 내지 Y + 10℃ 범위의 간격, 바람직하게는, 온도 Y - 5℃ 내지 Y + 5℃ 범위의 간격을 지칭한다.

ii) 특히, 본 발명은 화학식 I_CE의 화합물, 그리고 화학식 I_CE의 화합물의 염(특히, 제약학적으로 허용되는 염)인 화학식 I의 화합물에 관계한다:

[화학식 I_CE]

여기서

R¹은 할로겐(특히 플루오르)에 의해 선택적으로 1회 치환된 페닐이고; 그리고

R²는 수소, 히드록시메틸 또는 알콕시메틸이다.

iii) 본 발명의 바람직한 구체예에 따라, 상기 구체예 i)에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이들의 염(그중에서도 특히, 제약학적으로 허용되는 염이 바람직할 것이다)은 R¹이 할로겐, 메틸 또는 트리플루오르메틸에 의해 선택적으로 1회 치환된 페닐일 것이다.

iv) 바람직하게는, 상기 구체예 i) 또는 ii)에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이들의 염(그중에서도 특히, 제약학적으로 허용되는 염이 바람직할 것이다)은 R¹이 할로겐에 의해 선택적으로 1회 치환된 페닐일 것이다.

v) 더욱 바람직하게는, 상기 구체예 i) 또는 ii)에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이들의 염(그중에서도 특히, 제약학적으로 허용되는 염이 바람직할 것이다)은 R¹이 플루오르에 의해 선택적으로 1회 치환된 페닐일 것이다(특히 R¹이 페닐 또는 4-플루오르페닐이고, 그중에서도 특히, R¹이 페닐일 것이다).

vi) 본 발명의 특정 구체예에 따라서, 상기 구체예 i) 내지 v) 중에서 한 가지에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이들의 염(그중에서도 특히, 제약학적으로 허용되는 염이 바람직할 것이다)은 R²가 수소일 것이다.

vii) 본 발명의 다른 특정 구체예에 따라서, 상기 구체예 i) 내지 v) 중에서 한 가지에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이들의 염(그중에서도 특히, 제약학적으로 허용되는 염이 바람직할 것이다)은 R²가 히드록시메틸 또는 알콕시메틸일 것이다.

viii) 구체예 vii)의 한 가지 이형에 따라서, 상기 구체예 vii)에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이들의 염(그중에서도 특히, 제약학적으로 허용되는 염이 바람직할 것이다)은 R²가 히드록시메틸일 것이다.

ix) 구체예 vii)의 다른 이형에 따라서, 상기 구체예 vii)에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 이들의 염(그중에서도 특히, 제약학적으로 허용되는 염이 바람직할 것이다)은 R²가 알콕시메틸(특히, 메톡시메틸)일 것이다.

x) 구체예 i) 또는 ii)에서 정의된 바와 같은 아래의 화학식 I의 화합물이 특히 바람직하다:

- 4-{(S)-4-카르복시-2-[(6-시클로프로필-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐)-아미노]-부티릴}-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;

- 4-((S)-4-카르복시-2-{[6-(트랜스-2-메톡시메틸-시클로프로필)-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;

- 4-((S)-4-카르복시-2-{[6-((1S,2S)-2-메톡시메틸-시클로프로필)-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;

- 4-((S)-4-카르복시-2-{[6-((1S,2S)-2-히드록시메틸-시클로프로필)-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;

- 4-((S)-4-카르복시-2-{[2-(4-플루오르-페닐)-6-((1S,2S)-2-메톡시메틸-시클로프로필)-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;

- 4-((S)-4-카르복시-2-{[6-(시스-2-메톡시메틸-시클로프로필)-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;

그리고, 이들의 염(특히, 제약학적으로 허용되는 염).

xi) 본 발명의 다른 목적은 약제(medicament)로서, 상기 구체예 i) 내지 x) 중에서 한 가지에서 정의된 바와 같은 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물 또는 이들의 제약학적으로 허용되는 염이다.

화학식 I의 화합물 및 이들의 제약학적으로 허용되는 염은 예로써, 장관(enteral) 또는 비경구(parental) 투여를 위한 제약학적 조성물 형태의 약제로서 이용될 수 있다.

xii) 본 발명은 또한, 상기 구체예 i) 내지 x) 중에서 한 가지에 따른 최소한 하나의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염 및 제약학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 함유하는 제약학적 조성물에 관계한다. 특히, 본 발명은 최소한 하나의 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물 및 한 가지 이상의 제약학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 함유하는 제약학적 조성물에 관계한다.

이들 제약학적 조성물의 생산은 다른 치료 물질과 선택적으로 조합되는 상기한 화학식 I의 화합물 또는 이들의 제약학적으로 허용되는 염을 적절한 비-독성의 불활성 치료적합성 고형 또는 액상 담체 물질 및 원하는 경우 통상적인 제약학적 어쥬번트와 함께 생약 투여 형태로 통합함으로써 당업자에게 익숙한 방식으로 달성될 수 있다(참조: Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition (2005), Part 5, “Pharmaceutical Manufacturing” [published by Lippincott Williams & Wilkins]).

xiii) 상기 구체예 i) 내지 x)에서 정의된 바와 같은 화학식 I에 따른 화합물 및 이들의 제약학적으로 허용되는 염은 약제의 제조에 이용될 수 있고, 아래의 용도에 적합하다:

- 안정형 협심증(stable angina), 불안정형 협심증(unstable angina), 심근 경색(myocardial infarction), 색전증(embolism)(동맥경화증(atherosclerosis)의 합병증, 특히, 색전성 뇌졸중(embolic stroke) 포함), 동맥 혈전증(arterial thrombosis)(동맥경화증의 원발성 동맥 혈전성 합병증(primary arterial thrombotic complication), 특히, 혈전성 뇌졸중(thrombotic stroke) 포함), 정맥 혈전증(특히, 심부 정맥 혈전증(deep vein thrombosis)), 혈관 손상이나 염증에 수반되는 혈전증(맥관염(vasculitis), 동맥염(arteritis)과 사구체신염(glomerulonephritis) 포함), 정맥폐쇄성 질환(venoocclusive disease), 일과성 허혈 발작(transient ischaemic attack), 말초 혈관 질환(peripheral vascular disease), 혈전용해(thrombolysis)를 수반하거나 수반하지 않는 심근 경색(myocardial infarction), 골수증식성 질환(myeloproliferative disease), 혈소판증가증(thrombocythaemia), 겸상 적혈구 질환(sickle cell disease), 염증성 장 질환(inflammatory bowel disease), 혈전성 혈소판감소 자반증(thrombotic thrombocytopaenic purpura), 또는 용혈성 요독성 증후군(haemolytic uraemic syndrome)을 비롯한 질환의 치료 또는 예방;

- 패혈증(septicaemia)의 혈전성 합병증(thrombotic complication), 성인 호흡 장애 증후군(adult respiratory distress syndrome), 항인지질 증후군(anti-phospholipid syndrome), 헤파린-유도된 혈소판감소증(heparin-induced thrombocytopaenia), 또는 자간전증(pre-eclampsia)/경련(eclampsia)의 예방;

- 특정의 수술 절차(surgery procedure)(특히, 경피적 관상동맥 성형술 (Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty, PTCA)과 같은 관상동맥 재개통(coronary revascularisation), 다른 혈관 이식 수술(vascular graft surgery), 동맥 내막 절제술(endarterectomy) 또는 스텐트 배치(stent placement)) 이후, 또는 사고로 인한 외상(accidental trauma) 이후 심혈관 합병증(cardiovascular complication)의 예방;

- 장기 이식 거부반응(organ graft rejection)의 예방.

xiv) 다른 구체예에서, 상기 구체예 i) 내지 x)에서 정의된 바와 같은 화학식 I의 화합물 및 이의 제약학적으로 허용되는 염은 약제의 제조에 이용될 수 있고, 혈관경련(vasospasm)이 혈관수축(vasoconstriction) 및 이로 인한 조직-허혈(tissue-ischemia) 또는 조직-사멸(tissue-death)(괴사)로 이어지는 질환에서 합병증을 예방하는데 적합하다.

xv) 이런 이유로, 본 발명의 특정 목적은 상기 구체예 xiii) 및/또는 xiv)(특히, 구체예 xiii))에 열거된 용도를 위한 약제의 제조에서, 그리고 전반적인 폐쇄성 혈관 질환(occlusive vascular disorder)의 치료를 위한 약제의 제조에서 상기 구체예 i) 내지 x) 중에서 한 가지에서 정의된 바와 같은 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염의 용도이다.

xvi) 더욱 일반적으로, 본 발명은 폐쇄성 혈관 질환(occlusive vascular disorder)의 치료 및/또는 예방을 위한 약제의 제조에서 상기 구체예 i) 내지 x) 중에서 한 가지에서 정의된 바와 같은 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염의 용도, 그리고 인간과 다른 포유동물에서 혈전증(thrombosis)을 비롯한, 혈소판 응집(platelet aggregation)과 연관된 말초 혈관(peripheral vascular), 내장 혈관(visceral vascular), 간혈관(hepatic vascular), 신혈관(renal vascular), 심혈관(cardiovascular)과 뇌혈관(cerebrovascular) 질환이나 장애의 치료 및/또는 예방을 위한 약제의 제조에서 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물의 용도에 관계한다.

xvii) 상기 구체예 xv)에 따른 약제의 제조를 위한 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염의 상기한 용도 중에서, 심근 경색(myocardial infarction), 동맥 혈전증(arterial thrombosis)(특히, 혈전성 뇌졸중(thrombotic stroke)), 일과성 허혈 발작(transient ischaemic attack), 말초 혈관 질환(peripheral vascular disease), 안정형 협심증(stable angina)과 불안정형 협심증(unstable angina)의 치료 또는 예방을 위한 약제의 제조에서 용도가 바람직할 것이다.

xviii) 본 발명은 또한, 시험관내에서 혈액 산물의 보관(가령, 혈소판 농축물(platelet concentrate)의 보관), 또는 인공(extra-corporeal) 혈액이나 혈액 산물 처리 기계(가령, 신장 투석 기계(renal dialysis machine) 또는 혈장분리방출 기계(plasmapheresis machine))에서 폐색(occlusion)의 예방을 위한 상기 구체예 i) 내지 x) 중에서 한 가지에서 정의된 바와 같은 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염의 용도에 관계한다.

xix) 본 발명은 또한, 상기 구체예 xiii) 및/또는 xiv)(특히, 구체예 xiii))에서 언급된 질환의 치료 방법에 관계하는데, 상기 방법은 상기 구체예 i) 내지 x) 중에서 한 가지에서 정의된 바와 같은 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염의 효과량을 필요한 환자에 투여하는 단계를 포함한다.

본 명세서에서 화학식 I 또는 화학식 I_CE의 화합물에 대한 언급은 적절한 경우에, 이런 화합물의 염(특히, 제약학적으로 허용되는 염) 역시 언급하는 것으로 암묵적으로 이해된다. 화학식 I의 화합물에 대하여 지시된 선호(preference)는 화학식 I_CE의 화합물, 그리고 화학식 I 또는 화학식 I_CE의 화합물의 염과 제약학적으로 허용되는 염에 필요에 따라 변경 적용된다. 이는 약제로서 이들 화합물, 활성 성분(active principle)으로 이들 화합물을 함유하는 제약학적 조성물, 본 발명에 따른 질환의 치료를 위한 약제의 제조에서 이들 화합물의 용도, 또는 본 발명에 따른 질환의 치료를 위한 이들 화합물에 동일하게 적용된다.

본 발명에 따라, 화학식 I(또는 화학식 I_CE)의 화합물은 아래에 기술된 공정으로 제조될 수 있다.

화학식 I의 화합물의 제조

약어:

명세서 및 실시예 전반에서 아래의 약어가 이용된다:

Ac 아세틸

ADP 아데노신 디포스페이트

AIBN 2,2′-아조비스(2-메틸프로피온니트릴)

aq. 수성

BSA 소 혈청 알부민

CC 칼럼 크로마토그래피

DCM 디클로로메탄

de 부분입체이성질성 과잉(diastereomeric excess)

DIPEA 디이소프로필에틸아민

DME 1,2-디메톡시에탄

DMF N,N-디메틸포름아미드

dpm 분당 붕괴(decay per minute)

EA 에틸 아세테이트

EDCI N-(3-디메틸아미노프로필)-N’-에틸카보디이미드

EDTA 에틸렌디아민테트라아세트산

Et 에틸

Hept 헵탄

HOBT 1-히드록시벤조트리아졸

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

HV 높은 진공

LC-MS 액체 크로마토그래피 - 질량 분석법

Me 메틸

MTBE 2-메톡시-2-메틸프로판

n-BuLi n-부틸 리튬

org. 유기

Pd/C 탄소에서 팔라듐

Ph 페닐

PyBOP 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오르포스페이트

Rf 체류 인자

RT 실온

SDS 도데실황산나트륨

tBu tert-부틸

TCCA 트리클로로이소시아누르산

TEMPO 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 1-옥실 라디칼

TFA 트리플루오르아세트산

THF 테트라히드로푸란

TLC 박층 크로마토그래피

t_R 체류 시간

Tris 트리스(히드록시메틸)아미노메탄

Z 벤질옥시카르보닐

전반적인 제조 경로:

화학식 I의 다양한 화합물은 하기 반응식 1에 요약된 전반적인 경로를 이용하여 제조될 수 있다.

[반응식 1]

.

화학식 I의 화합물은 당업자에게 널리 공지된 표준 조건 하에, 바람직하게는 TFA를 이용한 상응하는 화학식 II의 화합물의 가수분해에 의해 제조될 수 있다(반응식 1).

그 외에, 화학식 I의 화합물이 부분입체이성질체(diasteromer)의 혼합물 형태로 획득될 때는 언제든지, 이들은 실리카 겔 크로마토그래피, HPLC와 결정화 기술의 적절한 조합에 의해 분리될 수 있다.

다양한 합성 중간물질의 제조:

화학식 II 의 화합물의 제조

화학식 II의 화합물은 하기 반응식 2에 요약된 경로를 이용하여 제조될 수 있다.

[반응식 2]

따라서 화학식 III의 중간물질은 4-((S)-2-아미노-4-tert-부톡시카르보닐-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르에 결합되고 화학식 IV의 화합물로 이어질 수 있다. 이는 선택적으로, 적절한 염기, 예를 들면, NEt₃, DIPEA 또는 N-메틸모르폴린의 존재에서, 그리고 적절한 용매, 예를 들면, DCM, THF 또는 DMF에서, 바람직하게는 대략 RT의 온도에서 표준 결합제(standard coupling agent), 예를 들면, HOBT, EDCI 염산염, 1,3-디시클로헥실카보디이미드, PyBOP, 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스-(디메틸아미노)-포스포늄헥사플루오르포스페이트를 이용하여, 또는 적절한 용매, 예를 들면, DCM 또는 MeCN에서, 그리고 RT 내지 80℃의 온도에서 옥살릴 염화물 또는 티오닐 염화물을 이용하여 표준 펩티드 결합 방법에 의해 달성될 수 있다.

화학식 II의 화합물은 이후, 적절한 용매, 예를 들면, 톨루엔에서 Stille 반응에 대한 표준 조건, 그리고 바람직하게는 트리부틸스타난 유도체를 이용하여 화학식 IV의 중간생성물을 화학식 V(M은 -SnR₃이고, R은 알킬)의 시약과 반응시키고, 그리고 바람직하게는, 110℃ 내지 130℃에서 가열함으로써 수득될 수 있다.

대안으로, 화학식 II의 화합물은 적절한 염기, 예를 들면, K₃PO₄, Na₂CO₃ 또는 K₂CO₃의 존재에서, 적절한 팔라듐 촉매, 예를 들면, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐의 존재에서, 적절한 용매, 예를 들면, DME/물 또는 디옥산에서 Suzuki 반응에 대한 표준 조건, 그리고 바람직하게는 보론산 또는 에스테르 유도체를 이용하여 화학식 IV의 중간생성물을 화학식 V(M은 -B(OR’)₂이고, R’은 수소 또는 알킬)의 시약과 반응시키고, 그리고 바람직하게는 80℃ 내지 110℃에서 가열함으로써 수득될 수 있다.

화학식 III 의 화합물의 제조

화학식 III의 화합물은 하기 반응식 3에 도시된 바와 같이 제조될 수 있다.

[반응식 3]

화학식 III의 화합물은 적절한 용매, 예를 들면, 디옥산/물, 아세톤/aq. NaHCO₃ 용액에서, 그리고 5℃ 내지 RT의 온도에서 표준 산화제(standard oxidizing agent), 예를 들면, 과망간산칼륨(potassium permanganate), TCCA/TEMPO를 이용하여 화학식 VI의 화합물을 산화시킴으로써 제조될 수 있다(이들의 제조와 관련하여, WO/114774, Preparation of the compounds of formula IV, Schemea 참조).

화학식 V의 화합물의 제조

상업적으로 가용하지 않으면, 화학식 V의 화합물은 당업자에게 공지된 절차에 따라 제조될 수 있다. 특히, 화학식 V(M은 -SnR₃(R은 알킬)이고, R²는 -CH₂-OR’(R’은 수소 또는 알킬)이고, 이들 SnR₃과 R² 기는 trans 정렬로 존재)의 화합물은 하기 반응식 4에서 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.

[반응식 4]

화학식 VII(R²는 -CH₂-OH)의 화합물은 Belanger G. et al. in J. Org . Chem . (2000), 7070-7074에서 기술된 절차에 따른 히드로스타닐화(hydrostannylation) 반응을 통해, 화학식 VIII(R²는 -CH₂-OH)의 상응하는 스타난으로 전환될 수 있다(반응식 4). 화학식 VIII의 상기 화합물은 이후, Charette A. B. et al. in J. Am . Chem . Soc . (1998), 120, 11943-11952에서 기술된 절차에 따른 시클로프로판화(cyclopropanation) 반응을 통해 화학식 V(R²는 -CH₂-OH)의 화합물로 전환될 수 있다. 상기에서 기술된 바와 같이, 시클로프로판화 반응은 디옥사보롤란(dioxaborolane) 리간드의 존재에서 수행되는 경우에 입체선택성(stereoselective)이고, 단일 거울상이성질체(single enantiomer)로서 화학식 V(R²는 -CH₂-OH)의 화합물로 이어진다.

대안으로, 화학식 V(M은 -SnR₃(R은 알킬)이고, R²는 -CH₂-OR”(R”은 수소 또는 알킬)이고, 그리고 이들 -SnR₃과 R² 기는 cis 정렬로 존재)의 화합물은 하기 반응식 5에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.

[반응식 5]

화학식 VII(R²는 -CH₂-OH)의 화합물은 Sheppard G. S. et al. in J. Med . Chem . (2006), 38323849에서 기술된 절차에 따른 히드로스타닐화(hydrostannylation) 반응을 통해 화학식 IX(R²는 -CH₂-OH)의 상응하는 스타난으로 전환될 수 있다. 화학식 V의 화합물로 이어지는 다음 단계는 화학식 VIII의 화합물의 화학식 V의 화합물로의 전환(반응식 4 참조)과 관련하여 이미 기술된 방법을 이용하여 수행될 수 있다. 최종적으로, 화학식 V(R²는 -CH₂-OH)의 화합물은 이후, 적절한 염기, 예를 들면, NaH의 존재에서 화학식 R’-X(X는 이탈기(leaving group), 예를 들면, 할로겐)의 알킬화제를 이용하는 히드록시 기의 알킬화를 위한 표준 조건에서 화학식 V(R²는 -CH₂-OR’이고, R’은 알킬)의 화합물로 알킬화될 수 있고, 상기 반응은 적절한 용매, 예를 들면, THF, MeCN 또는 DMF에서, 그리고 바람직하게는 대략 RT에서 수행된다.

4-((S)-2-아미노-4- tert - 부톡시카르보닐 - 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르의 제조

상기 화합물의 합성은 실시예(실시예 1, 단계 1.4)에서 기술된다.

본 발명의 특정 구체예는 아래의 실시예에서 기술되는데, 이들 실시예는 본 발명을 더욱 상세하게 설명하는 역할을 하며, 본 발명의 범위를 결코 제한하지 않는다.

실시예

이용된 특성화 방법:

¹H-NMR (400 MHz)은 Brucker Avance 400 장치에서 수행되었다. 화학적 변화 (chemical shift)는 이용된 용매와 관련하여 ppm으로 표시된다; 다양성(multiplicity): s = 단일항(singlet), d = 이중항(doublet), t = 삼중항(triplet), q=사중항(quadruplet), p = 오중항(pentuplet), hex = 육중항(hexet), hept = 칠중항(heptet), m = 다중항(multiplet), br = 넓음(broad)

LC-MS 체류 시간은 아래의 용리(elution) 조건을 이용하여 획득되었다:

Zorbax® 칼럼 (Zorbax SB.AQ 5 ㎛, 4.6x50mm)이 이용되었다. 2가지 용리 용매는 아래와 같았다: 용매 A = 물 + 0.04% TFA; 용매 B = MeCN. 용리제 유속(eluent flow rate)은 4.5㎖/min이고, 용리의 시작으로부터 시간 t의 함수에서 용리 혼합물 비율의 특징은 하기 표에 요약된다 (2개의 연속 시점 간에 선형 구배가 이용된다):

t (min) 0 1 1.45 1.55

용매 A (%) 95 5 5 95

용매 B (%) 5 95 95 5

부분입체이성질성 과잉의 측정을 위한 키랄 HPLC 체류 시간은 아래의 용리(elution) 조건을 이용하여 획득되었다:

Chiralcel 칼럼 (AD-H 250x4.6mm ID, 5㎛)이 25℃에서 등용매(isocratic) 조건 하에 이용되었다. 2가지 용리 용매는 아래와 같았다: 용매 A = 70% 헥산; 용매 B = EtOH 30%, 0.1% TFA. 용리제 유속(eluent flow rate)은 0.8㎖/min이고, 검출 파장(detection wavelength)은 210 nM이었다.

이용된 예비 LC-MS 방법:

I) 예비 LC-MS (I):

Phenomenex® 칼럼 (Gemini 10u C18 110A Ax 50x21.2 mm)이 이용되었다. 2가지 용리 용매는 아래와 같았다: 용매 A = 물 + 1% 포름산; 용매 B = MeCN + 1% 포름산. 용리제 유속은 50 ㎖/min이었다. 용리의 시작으로부터 시간 t의 함수에서 용리 혼합물 비율의 특징은 하기 표에 요약된다(2개의 연속 시점 사이에 선형 구배가 이용된다):

I) 예비 LC-MS (I):

t (min) 0 0.4 2.6 3 3.4 3.8 3.9 5

용매 A (%) 55 55 35 35 4.5 4.5 55 55

용매 B (%) 45 45 65 65 95.5 95.5 45 45

II) 예비 LC-MS (II):

X-terra® 칼럼 (Prep MS C18 OBD^TM 10u 30x75 mm)이 이용되었다. 2가지 용리 용매는 예비 LC-MS (I)와 관련하여 기술된 바와 같았다. 용리제 유속(eluent flow rate)은 100㎖/min이었다. 용리의 시작으로부터 시간 t의 함수에서 용리 혼합물 비율의 특징은 하기 표에 요약된다 (2개의 연속 시점 간에 선형 구배가 이용된다):

t (min) 0 0.6 3.3 3.9 4.5 5.1 6

용매 A (%) 40 40 21 21 0 0 40

용매 B (%) 60 60 79 79 100 100 60

CC에 이용된 정지상(stationary phase):

CC에 의한 정제는 달리 명시되지 않으면, 실리카 겔 (silica gel)을 이용하여 수행되었다.

실시예 1: 4-{( S )-4-카르복시-2-[(6-시클로프로필-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐)-아미노]-부티릴}-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르:

1.1. 피페라진-1,4-디카르복실산 부틸 에스테르 tert-부틸 에스테르:

4℃에서 냉각된 DCM (1.05 ℓ)에 녹인 피페라진-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (150 g)의 용액에 30분에 걸쳐, NEt₃ (123.6 ㎖), 그 이후에 n-부틸 클로로포름산염 (107 ㎖)을 방울방울 첨가하였다. 냉각 중탕을 제거하고, 반응 혼합물을 2.5시간에 걸쳐 RT로 가온하였다. 물을 첨가하고, 상을 분리하고, 그리고 수성 상을 DCM으로 추출하였다. 모아진 유기 상을 건조시키고 (Na₂SO₄) 증발시켜 오일 (242.8 g)을 수득하였다. 상기 화합물은 다음 단계에 직접적으로 이용되었다.

TLC: (EA/Hept 1/1) Rf = 0.7.

1.2. 피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르 염산염:

MeOH (1 ℓ)에 녹인 중간생성물 1.1 (230.5 g)의 냉각된 (15℃) 용액에, 디옥산 (604 ㎖)에서 4M HCl을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 RT에서 하룻밤동안 교반하고 증발 건조시켰다. 잔류물을 MTBE (800 ㎖)에서 현탁시키고, 그리고 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하고 여과하였다. 생성된 고체를 HV 하에 건조시켜 백색 고체 (176 g)를 수득하였다.

¹H NMR (CDCl₃): 10.05 (br. s, 2 H), 4.21 (t, J = 6.5 Hz, 2 H), 3.85 (t, J = 4.8 Hz, 4 H), 3.22 (s, 4 H), 1.69 (m, 2 H), 1.39 (m, 2 H), 0.96 (t, J = 7.5 Hz, 3 H).

1.3. 4-((S)-2- 벤질옥시카르보닐아미노 -4- tert - 부톡시카르보닐 - 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

DCM/THF (240㎖/60㎖)에 녹인 Z-(L)Glu(OtBu)-OH (25.2 g)의 용액에 EDCI 염산염 (17.2 g), HOBT 수화물 (13.7 g)과 DIPEA (28.2 ㎖)를 첨가하였다. RT에서 5분 동안 교반한 이후, 중간생성물 1.2 (20 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 RT에서 하룻밤동안 교반하였다. DCM과 물을 첨가하고, 그리고 상을 분리하였다. 유기 상을 2M Na₂CO₃, 1M NaHSO₄와 염수로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 증발시켰다. HV 하에 건조로, 원하는 화합물을 오렌지색 오일 (40 g)로서 수득하였다.

LC-MS: t_R = 1.04 min; [M+H]⁺: 506.49.

1.4. 4-((S)-2-아미노-4- tert - 부톡시카르보닐 - 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

중간생성물 1.3 (40 g)을 MeOH (300 ㎖)에서 Pd/C (습성, 5%, 194 ㎎)로 24시간 동안 수소화시켰다. 생성된 혼합물을 셀리트를 통하여 여과하고 증발시켰다. HV 건조로, 원하는 화합물을 밝은 갈색 오일 (28 g)로서 수득하였다.

LC-MS: t_R = 0.79 min; [M+H]⁺: 372.58.

1.5. 6- 클로로 -2- 페닐 -피리미딘-4- 카르복실산 :

아세톤 (2 ℓ)에 녹인 (6-클로로-2-페닐-피리미딘-4-일)-메탄올 (240 g; WO 2006/114774, 실시예 24, 중간생성물 24.2에서 기술된 방법과 유사한 방법을 이용하여 제조됨)의 용액에 aq. NaHCO₃ 용액 (15%, 961 ㎖)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 5℃로 냉각하고 NaBr (11.2 g), 그 이후에 TEMPO (8.56 g)를 첨가하였다. 이후, TCCA (506 g)를 1.5시간에 걸쳐 일부분씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 RT에서 1.5시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 셀리트 패드를 통하여 여과하고, 그리고 생성된 용액을 증발시켰다. 잔류물을 물/EA에서 희석하였다. 수성 상을 EA로 추출하고, 그리고 모아진 유기 상을 건조시키고 (Na₂SO₄) 증발시켰다. 잔류물 (EA/Hept)의 재결정화로, 원하는 산물을 베이지색 고체 (162.1 g)로서 수득하였다.

LC-MS: t_R = 0.94 min; [M+H]⁺: 235.18.

1.6. 4-{(S)-4- tert - 부톡시카르보닐 -2-[(6- 클로로 -2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐)-아미노]- 부티릴 }-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

MeCN (600 ㎖)에 녹인 중간생성물 1.5 (17.5 g)의 현탁액에 옥살릴 염화물 (12.6 ㎖)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 환류에서 가열하고, 0℃로 냉각하고, NEt₃ (31 ㎖)을 천천히 첨가하고, 그 이후에 중간생성물 1.4 (27.6 g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 RT로 가온하고, RT에서 1시간 동안 교반하고, 증발시켰다. 잔류물을 CC (Hept/EA 1/0 내지 1/1)로 정제하여 원하는 산물을 베이지색 고체 (18 g)로서 수득하였다.

LC-MS: t_R = 1.18 min; [M+H]⁺: 588.79.

1.7. 4-{(S)-4- tert - 부톡시카르보닐 -2-[(6- 시클로프로필 -2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐)-아미노]- 부티릴 }-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

디옥산 (0.5 ㎖)에 담긴 중간생성물 1.6 (80 ㎎), 시클로프로필보론산 (17 ㎎), K₃PO₄ (58 ㎎)와 Pd(PPh₃)₄ (7.9 ㎎)의 혼합물을 아르곤 하에 110℃에서 하룻밤동안 교반하였다. 상기 용매를 증발시켰다. 가공되지 않은 산물을 예비 TLC (EA)로 정제하여 원하는 화합물을 황색 오일 (25 ㎎)로서 수득하였다.

LC-MS: t_R = 1.20 min; [M+H]⁺: 594.44.

1.8. 4-{(S)-4- 카르복시 -2-[(6- 시클로프로필 -2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐)-아미노]- 부티릴 }-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

중간생성물 1.7 (20 ㎎)을 TFA (0.5 ㎖)와 DCM (1 ㎖)에 용해시키고, 그리고 생성된 혼합물을 RT에서 4시간 동안 교반하였다. 이들 용매를 제거하고, 그리고 잔류물을 예비 LC-MS (I)로 정제하여 원하는 화합물을 백색 분말 (3 ㎎)로서 수득하였다.

LC-MS: t_R = 1.06 min; [M+H]⁺: 538.58.

실시예 2: 4-(( S )-4- 카르복시 -2-{[6-( 트랜스- 2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

2.1. (E)-3- 트리부틸스타난닐 - 프로프 -2-엔-1-올:

순수한 프로파르길 알코올 (5 ㎖)에 수소화트리부틸틴 (29.2 ㎖), 그 이후에 AIBN (716 ㎎)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 2.75시간 동안 가열하고, RT로 냉각하고, CC (EA/Hept 5/95)로 직접적으로 정제하여 원하는 화합물 (12.9 g)을 수득하였다.

¹H-NMR (CDCl₃): 6.21 (m, 2H); 4.20 (m, 2H); 1.56-1.29 (m, 18H); 0.92 (t, 9H).

2.2. (트랜스-2- 트리부틸스타난닐 - 시클로프로필 )-메탄올:

내부 온도를 대략 -7℃에 유지하면서, -5℃에서 냉각된 무수성 DCM (10 ㎖)에 녹인 디메톡시에탄 (0.186 ㎖)의 용액에 아르곤 하에, 디에틸아연 (헥산에서 1 M, 1.9 ㎖), 그 이후에 디요오드메탄 (0.309 ㎖)을 20분에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 첨가의 완결후, 생성된 용액을 -5℃에서 10분 동안 교반하였다. DCM (2 ㎖)에 녹인 중간생성물 2.1 (500 ㎎)의 용액을 방울방울 첨가하였다. 냉각 중탕을 제거하고, 그리고 반응 혼합물을 RT로 가온하고 RT에서 하룻밤동안 교반하였다. 반응물을 aq. NH₄Cl 용액 (1 ㎖)과 1M aq. HCl 용액 (1 ㎖)으로 진정시켰다. 생성된 혼합물을 H₂O로 희석하고, 유기상을 분리하고, 그리고 수성 상을 Et₂O로 추출하였다. 모아진 유기 상을 MgSO₄에서 건조시키고 증발시켰다. CC (Hept/EA 95/5)로, 원하는 화합물 (374 ㎎)을 수득하였다.

¹H-NMR (CDCl₃): 3.58 (m, 1H); 3.42 (m, 1H); 1.57-1.47 (m, 6H); 1.38-1.28 (m, 6H); 1.10 (m, 1H); 0.92 (t, 9H); 0.83 (m, 6H); 0.78 (m, 1H); 0.55 (m, 2H); -0.30 (m, 1H).

2.3. 트리부틸 -(트랜스-2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )- 스타난 :

THF (50 ㎖)에 녹인 중간생성물 2.2 (250 ㎎)의 용액에 RT에서 NaH (83 ㎎, 광유에서 60%)를 첨가하고, 그리고 생성된 혼합물을 RT에서 45분 동안 교반하였다. CH₃I (0.150 ㎖)를 첨가하고 RT에서 15시간 동안 교반을 지속하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, 그리고 수성 상을 DCM으로 수회 추출하였다. 모아진 유기 상을 Na₂SO₄에서 건조시키고 증발시켰다. 가공되지 않은 산물을 CC (Hept/EA 100/0 내지 95/5)로 정제하여 원하는 산물 (248 ㎎)을 수득하였다.

¹H-NMR (CDCl₃): 3.45 (dd, 1H); 3.38 (s, 3 H); 3.12 (dd, 1H); 1.55-1.47 (m, 6H); 1.37-1.28 (m, 6H); 1.04 (m, 1H); 0.91 (t, 9H); 0.83 (m, 6H); 0.55 (m, 2H); -0.30 (m, 1H).

2.4. 4-((S)-4- tert - 부톡시카르보닐 -2-{[6-(트랜스-2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

톨루엔 (1 ㎖)에 녹인 중간생성물 2.3 (70 ㎎), 중간생성물 1.6 (100 ㎎)과 Pd(PPh₃)₄ (11 ㎎)의 용액을 탈기하고 아르곤 하에 130℃에서 하룻밤동안 가열하였다. 생성된 혼합물을 증발시키고, 그리고 가공되지 않은 산물을 CC (Hept/EA 6/4 내지 1/1)로 정제하여 원하는 화합물을 황색 오일 (66 ㎎)로서 수득하였다.

LC-MS: t_R = 1.18 min; [M+H]⁺: 638.29.

2.5. 4-((S)-4- 카르복시 -2-{[6-(트랜스-2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 2.4가 중간생성물 1.7을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 1, 단계 1.8의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다. 하지만, 상기 화합물은 CC (Hept/EA 1/1), 그 이후에 예비 LC-MS (I)로 정제되었다.

LC-MS: t_R = 1.01 min; [M+H]⁺: 582.33.

실시예 3: 4-(( S )-4- 카르복시 -2-{[6-(( 1S , 2S )-2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

3.1. ((1R,2S)-2- 트리부틸스타난닐 - 시클로프로필 )-메탄올:

내부 온도를 대략 -10℃로 유지하면서, -10℃에서 냉각된 무수성 DCM (17 ㎖)에 녹인 디메톡시에탄 (0.465 ㎖)의 용액에 아르곤 하에, 디에틸아연 (헥산에서 1 M, 4.88 ㎖), 그 이후에 디요오드메탄 (0.768 ㎖)을 20분에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 첨가의 완결후, 생성된 용액을 -10℃에서 10분 동안 교반하였다. DCM (7 ㎖)에 녹인 (4R,5R)-2-부틸-N,N,N',N'-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-4,5-디카르복사미드 (0.72 ㎖)의 용액을 5분에 걸쳐 첨가하고, 그 직후에 DCM (7 ㎖)에 녹인 중간생성물 2.1 (826 ㎎)의 용액을 방울방울 첨가하였다. 냉각 중탕을 제거하고, 그리고 반응 혼합물을 RT로 가온하고 RT에서 하룻밤동안 교반하였다. 반응물을 aq. NH₄Cl 용액 (2 ㎖)과 1M aq. HCl 용액 (2 ㎖)으로 진정시켰다. 생성된 혼합물을 H₂O로 희석하고, 유기 상을 분리하고, 그리고 수성 상을 DCM과 Et₂O로 추출하였다. 모아진 유기 상을 MgSO₄에서 건조시키고 증발시켰다. CC (Hept/EA 95/5)로, 원하는 화합물 (660 ㎎)을 수득하였다.

¹H-NMR (CDCl₃): 3.55 (dd, 1H); 3.39 (dd, 1H); 1.54-1.44 (m, 6H); 1.37-1.24 (m, 6H); 1.141.03 (m, 1H); 0.89 (t, 9H); 0.81 (t, 6H); 0.80-0.75 (m, 1H); 0.55-0.50 (m, 2H); -0.20 - -0.30 (m, 1H).

선광도 (optical rotation) (589 nm, CHCl₃, 25℃, l = 10 cm, 10 ㎖에서 101.6 ㎎, c = 1.016):

비선광도 (specific optical rotation) = +14.033ㅀ.

3.2. 트리부틸 -((1S,2R)-2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )- 스타난 :

상기 화합물은 중간생성물 3.1이 중간생성물 2.2를 대체하는 점을 제외하고, 실시예 2, 단계 2.3의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다.

¹H-NMR (CDCl₃): 3.42 (dd, 1H); 3.36 (s, 3 H); 3.09 (dd, 1H); 1.54-1.43 (m, 6H); 1.36-1.24 (m, 6H); 1.03 (m, 1H); 0.89 (t, 9H); 0.80 (m, 6H); 0.54 (m, 2H); -0.30 (m, 1H).

3.3. 4-((S)-4- tert - 부톡시카르보닐 -2-{[6-((1S,2S)-2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 3.2가 중간생성물 2.3을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 2, 단계 2.4의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다.

LC-MS: t_R = 1.17 min; [M+H]⁺: 638.3.

3.4. 4-((S)-4- 카르복시 -2-{[6-((1S,2S)-2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 3.3이 중간생성물 1.7을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 1, 단계 1.8의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다. 하지만, 사기 화합물은 CC (EA)로 정제되었다.

LC-MS: t_R = 1.05 min; [M+H]⁺: 582.20.

¹H-NMR (CDCl₃): 9.13 (d, 1H); 8.50 (m, 2H); 7.84 (s, 1H); 7.51 (m, 3H); 5.32 (m, 1H); 4.14 (t, 2H); 3.80-3.48 (m, 9H); 3.42 (dd, 1 H); 3.40 (s, 3H); 2.60-2.48 (m, 2H); 2.24 (m, 1H); 2.12 (m, 1H); 2.06 (m, 1H); 1.97 (m, 1H); 1.68-1.58 (m, 3H); 1.46-1.36 (m, 2H); 1.18 (m, 1H); 0.96 (t, 9H).

키랄 HPLC: t_R = 21.87 min; 93% de.

실시예 4: 4-(( S )-4- 카르복시 -2-{[6-(( 1S , 2S )-2- 히드록시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

4.1. 4-((S)-4- tert - 부톡시카르보닐 -2-{[6-((1S,2S)-2- 히드록시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 3.1이 중간생성물 2.3을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 2, 단계 2.4의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다. 하지만, 상기 화합물은 CC (Hept/EA 1/1 내지 3/7, 이후 EA)로 정제되었다.

LC-MS: t_R = 1.11 min; [M+H]⁺: 624.26.

4.2. 4-((S)-4- 카르복시 -2-{[6-((1S,2S)-2- 히드록시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 4.1이 중간생성물 1.7을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 1, 단계 1.8의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다. 하지만, 가공되지 않은 화합물을 MeOH/NaOH (3 ㎖/1M, 3㎖)에 집어넣고, 그리고 생성된 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 산성화시키고 (1M HCl) DCM으로 추출하였다. 모아진 유기 상을 MgSO₄에서 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 예비 TLC (Hept/EA/AcOH 95/5/0.1)로 정제하였다.

LC-MS: t_R = 0.97 min; [M+H]⁺: 568.45.

실시예 5: 4-(( S )-4- 카르복시 -2-{[2-(4-플루오르- 페닐 )-6-(( 1S , 2S )-2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

5.1. 4-플루오르- 벤자미딘 :

Et₂O (40 ㎖)에 녹인 헥사메틸디실라잔 (7 ㎖)의 얼음같이 차가운 용액에 n-BuLi (헥산에서 1.6M, 20.6 ㎖), 그 이후에 Et₂O (10 ㎖)에 녹인 4-플루오르벤조니트릴 (2 g)의 용액을 첨가하였다. 0℃에서 10분 동안 교반한 이후, 생성된 혼합물을 RT로 가온하고 RT에서 20시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 1M HCl 용액을 첨가함으로써 pH 1로 산성화시키고 CHCl₃으로 세척하였다. 이후, 수성 층을 Na₂CO₃과 NaOH를 첨가함으로써 pH 14로 염기화시키고 CHCl₃으로 2회 추출하였다. 유기 층을 건조시키고 (Na₂SO₄) 증발시켜 원하는 화합물 (1.59 g)을 수득하였다.

LC-MS: t_R = 0.33 min; [M+H]⁺: 139.21.

5.2. 6- 클로로 -2-(4-플루오르- 페닐 )-피리미딘-4- 카르복실산 :

상기 화합물은 WO 2006/114774, 실시예 1, 단계 1.3, 그리고 실시예 24, 단계 24.1, 24.2와 24.3에 기술된 것들과 유사한 방법을 이용하여, 중간생성물 5.1로부터 4 단계로 제조되었다.

LC-MS: t_R = 0.90 min; [M+H]⁺: 253.24.

5.3. 4-((S)-4- tert - 부톡시카르보닐 -2-{[6- 클로로 -2-(4-플루오르- 페닐 )-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 5.2가 중간생성물 1.5를 대체하는 점을 제외하고, 실시예 1, 단계 1.6의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다.

LC-MS: t_R = 1.19 min; [M+H]⁺: 606.09.

5.4. 4-((S)-4- tert - 부톡시카르보닐 -2-{[2-(4-플루오르- 페닐 )-6-((1S,2S)-2-메톡시메틸- 시클로프로필 )-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 5.3이 중간생성물 2.3을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 2, 단계 2.4의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다. 하지만, 상기 화합물은 예비 LC-MS (II)로 정제되었다.

LC-MS: t_R = 1.19 min; [M+H]⁺: 656.22.

5.5. 4-((S)-4- 카르복시 -2-{[2-(4-플루오르- 페닐 )-6-((1S,2S)-2- 메톡시메틸 -시클로프로필)-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 5.4가 중간생성물 1.7을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 1, 단계 1.8의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다. 하지만, 상기 화합물은 예비 TLC (DCM/아세톤/AcOH 5/3/0.1)로 정제되었다.

LC-MS: t_R = 1.06 min; [M+H]⁺: 600.32.

실시예 6: 4-(( S )-4- 카르복시 -2-{[6-( 시스 - 2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

6.1. ( 시스 -2- 트리부틸스타난닐 - 시클로프로필 )-메탄올:

상기 화합물은 (Z)-3-트리부틸스타난닐-프로프-2-엔-1-올 (Sheppard et al., J. Med . Chem. (2006), 49, 3832)이 중간생성물 2.1을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 2, 단계 2.2의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다.

¹H-NMR (CDCl₃): 3.56-3.60 (m, 1 H); 3.25-3.30 (m, 1 H); 1.48-1.60 (m, 6H); 1.28-1.44 (m, 8H); 0.84-0.94 (m, 16 H); 0.20-0.24 (m, 1 H); -0.02-0.04 (m, 1 H).

6.2. 트리부틸 -( 시스 -2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )- 스타난 :

상기 화합물은 중간생성물 6.1이 중간생성물 2.2를 대체하는 점을 제외하고, 실시예 2, 단계 2.3의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다.

¹H-NMR (CDCl₃): 3.35 (s, 3 H); 3.30-3.34 (m, 1 H); 3.09-3.13 (m, 1 H); 1.48-1.57 (m, 6H); 1.28-1.39 (m, 8H); 0.83-0.94 (m, 16 H); 0.24-0.28 (m, 1 H); -0.04-0.02 (m, 1 H).

6.3. 4-((S)-4- tert - 부톡시카르보닐 -2-{[6-( 시스 -2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 6.2가 중간생성물 2.3을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 2, 단계 2.4의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다. 하지만, 상기 화합물은 CC (일차 CC: Hept/EA 1/1 내지 3/7, 이후 EA; 이차 CC: Hept/EA 1/0 내지 1/1)로 2회 정제되었다.

LC-MS: t_R = 1.17 min; [M+H]⁺: 638.38.

6.4. 4-((S)-4- 카르복시 -2-{[6-( 시스 -2- 메톡시메틸 - 시클로프로필 )-2- 페닐 -피리미딘-4-카르보닐]-아미노}- 부티릴 )-피페라진-1- 카르복실산 부틸 에스테르:

상기 화합물은 중간생성물 6.3이 중간생성물 1.7을 대체하는 점을 제외하고, 실시예 1, 단계 1.8의 방법에서와 유사한 방법을 이용하여 제조되었다.

LC-MS: t_R = 1.03 min; [M+H]⁺: 582.42.

생물학적 검사

P2Y ₁₂ 수용체 결합 분석

절차

인간 P2Y₁₂ 수용체의 재조합 발현을 나타내는 중국 햄스터 난소 (Chinese Hamster Ovary, CHO) 세포를 24 웰 세포-배양 평판에서 배양하였다. 세포를 결합 완충액 (binding buffer)(50 mM Tris pH 7.4, 100 mM NaCl, 1 mM EDTA, 0.5 % BSA)으로 3회 세척하였다. 이후, 이들 세포를 트리튬-표지된 2-메틸-티오-아데노신 5'-디포스페이트 (2-메틸-S-ADP) (웰당 100,000 내지 300,000 dpm)과 다양한 농도의 검사 화합물을 포함하는, 웰당 0.5 ㎖ 결합 완충액과 함께 배양하였다. 실온에서 2시간 동안 배양후, 세포를 결합 완충액으로 3회 세척하였다. 이후, 이들 세포를 0.5㎖ 용해 완충액 (solubilization buffer)(SDS, NaOH, EDTA)의 첨가로 용해시켰다. 이후, 각 웰의 내용물을 베타-카운터 바이알 (beta-counter vial)로 이전하고, 2.0㎖의 Ultima Gold 신틸레이션 액 (scintillation liquid)을 첨가하였다. 세포-연관된 신호의 정량후, 과량의 차가운 2-메틸-S-ADP의 첨가에 의해 나타나는 가능한 최대 저해에 상대적인 저해 정도를 산정하였다.

결과

P2Y₁₂ 수용체 결합 분석에 관련하여 앞서 기술된 절차를 이용하여, 실시예 화합물 및 참고 화합물에 대하여 하기 표에 도시된 결과가 획득될 수 있었다:

실시예 No .	IC₅₀ (nM)
1	6
2	3
3	5
4	4
5	2
6	9

화합물 구조	IC₅₀ (nM)
[WO 2006/114774의 실시예 90의 화합물]	43
[본 출원의 실시예 1의 화합물]	6
[WO 2006/114774의 실시예 500의 (1S,2S)-와 (1R,2R)-부분입체이성질체의 1:1 혼합물]	23
[본 출원의 실시예 4의 화합물]	4

Claims

화학식 I의 화합물 또는 이런 화합물의 염:
[화학식 I]

여기서
R¹은 할로겐, 메틸, 메톡시, 트리플루오르메틸 또는 트리플루오르메톡시에 의해 선택적으로 1회 치환된 페닐이고; 그리고
R²는 수소, 히드록시메틸 또는 알콕시메틸이다.
청구항 1에 있어서, 화학식 I_CE의 화합물인 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물 또는 이런 화합물의 염:
[화학식 I_CE]

R¹은 할로겐에 의해 선택적으로 1회 치환된 페닐이고; 그리고
R²는 수소, 히드록시메틸 또는 알콕시메틸이다.
청구항 1 또는 2에 있어서, R¹은 플루오르에 의해 선택적으로 1회 치환된 페닐인 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1 내지 3중 어느 한 항에 있어서, R²는 수소인 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1 내지 3중 어느 한 항에 있어서, R²는 히드록시메틸 또는 알콕시메틸인 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 5에 있어서, R²는 히드록시메틸인 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 5에 있어서, R²는 알콕시메틸인 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물 또는 이런 화합물의 염
청구항 1에 있어서, 아래와 같이 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물 또는 이런 화합물의 염:
- 4-{(S)-4-카르복시-2-[(6-시클로프로필-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐)-아미노]-부티릴}-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;
- 4-((S)-4-카르복시-2-{[6-(트랜스-2-메톡시메틸-시클로프로필)-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;
- 4-((S)-4-카르복시-2-{[6-((1S,2S)-2-메톡시메틸-시클로프로필)-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;
- 4-((S)-4-카르복시-2-{[6-((1S,2S)-2-히드록시메틸-시클로프로필)-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르;
- 4-((S)-4-카르복시-2-{[2-(4-플루오르-페닐)-6-((1S,2S)-2-메톡시메틸-시클로프로필)-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르; 그리고
- 4-((S)-4-카르복시-2-{[6-(시스-2-메톡시메틸-시클로프로필)-2-페닐-피리미딘-4-카르보닐]-아미노}-부티릴)-피페라진-1-카르복실산 부틸 에스테르.
약제로서, 청구항 1 내지 8중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염.
청구항 1 내지 8중 어느 한 항에 따른 최소한 하나의 화학식 I의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염 및 한 가지 이상의 제약학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 함유하는 제약학적 조성물.
폐쇄성 혈관 질환(occlusive vascular disorder)의 치료를 위한 약제의 제조에서 청구항 1 내지 8중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염의 용도.
폐쇄성 혈관 질환(occlusive vascular disorder)의 치료를 위한 청구항 1 내지 8중 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물, 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염.