KR20100084209A - 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20100084209A
KR20100084209A KR1020090003561A KR20090003561A KR20100084209A KR 20100084209 A KR20100084209 A KR 20100084209A KR 1020090003561 A KR1020090003561 A KR 1020090003561A KR 20090003561 A KR20090003561 A KR 20090003561A KR 20100084209 A KR20100084209 A KR 20100084209A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
extract
cosmetic composition
alithiamine
fermented
saccharomyces cerevisiae
Prior art date
Application number
KR1020090003561A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101129239B1 (ko
Inventor
박성민
박지영
백순엽
이상화
안준배
Original Assignee
서원대학교산학협력단
주식회사 코씨드바이오팜
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 서원대학교산학협력단, 주식회사 코씨드바이오팜 filed Critical 서원대학교산학협력단
Priority to KR1020090003561A priority Critical patent/KR101129239B1/ko
Publication of KR20100084209A publication Critical patent/KR20100084209A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101129239B1 publication Critical patent/KR101129239B1/ko

Links

Classifications

    • H—ELECTRICITY
    • H02—GENERATION; CONVERSION OR DISTRIBUTION OF ELECTRIC POWER
    • H02G—INSTALLATION OF ELECTRIC CABLES OR LINES, OR OF COMBINED OPTICAL AND ELECTRIC CABLES OR LINES
    • H02G3/00—Installations of electric cables or lines or protective tubing therefor in or on buildings, equivalent structures or vehicles
    • H02G3/02—Details
    • H02G3/04—Protective tubing or conduits, e.g. cable ladders or cable troughs
    • H02G3/0437—Channels
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F16—ENGINEERING ELEMENTS AND UNITS; GENERAL MEASURES FOR PRODUCING AND MAINTAINING EFFECTIVE FUNCTIONING OF MACHINES OR INSTALLATIONS; THERMAL INSULATION IN GENERAL
    • F16L—PIPES; JOINTS OR FITTINGS FOR PIPES; SUPPORTS FOR PIPES, CABLES OR PROTECTIVE TUBING; MEANS FOR THERMAL INSULATION IN GENERAL
    • F16L3/00—Supports for pipes, cables or protective tubing, e.g. hangers, holders, clamps, cleats, clips, brackets
    • F16L3/08—Supports for pipes, cables or protective tubing, e.g. hangers, holders, clamps, cleats, clips, brackets substantially surrounding the pipe, cable or protective tubing
    • F16L3/12—Supports for pipes, cables or protective tubing, e.g. hangers, holders, clamps, cleats, clips, brackets substantially surrounding the pipe, cable or protective tubing comprising a member substantially surrounding the pipe, cable or protective tubing
    • F16L3/13—Supports for pipes, cables or protective tubing, e.g. hangers, holders, clamps, cleats, clips, brackets substantially surrounding the pipe, cable or protective tubing comprising a member substantially surrounding the pipe, cable or protective tubing and engaging it by snap action
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F16—ENGINEERING ELEMENTS AND UNITS; GENERAL MEASURES FOR PRODUCING AND MAINTAINING EFFECTIVE FUNCTIONING OF MACHINES OR INSTALLATIONS; THERMAL INSULATION IN GENERAL
    • F16L—PIPES; JOINTS OR FITTINGS FOR PIPES; SUPPORTS FOR PIPES, CABLES OR PROTECTIVE TUBING; MEANS FOR THERMAL INSULATION IN GENERAL
    • F16L3/00—Supports for pipes, cables or protective tubing, e.g. hangers, holders, clamps, cleats, clips, brackets
    • F16L3/26—Supports for pipes, cables or protective tubing, e.g. hangers, holders, clamps, cleats, clips, brackets specially adapted for supporting the pipes all along their length, e.g. pipe channels or ducts

Abstract

본 발명은 비타민 B1이 함유되어 있는 식물의 추출물 및 알리신이 함유되어 있는 식물을 분쇄하여 분말을 수득하는 단계; 수득된 분말을 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)의 배양액과 혼합한 후, 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)을 배양하는 단계; 배양을 한 후, 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 제거하고, 배양액을 에탄올 60~80%(v/v)로 추출하는 단계;로부터 수득된 발효 알리티아민 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 우수한 미백효과, 항산화 및 피부 자극 완화 효과를 발휘한다.
노화, 미백, 발효 알리티아민, 비타민 B1, 자극완화, 조성물, 항산화, 항염증, 화장료

Description

발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물{Cosemtics composition containing the extract of allithiamine fermented}
본 발명은 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부는 나이를 먹으면서 피부노화와 색소침착에 의해 끊임없이 변한다. 피부노화는 크게 자연 노화(혹은 내인성 노화)와 외적 노화로 구분되며(EB Doris, Cosmetics & Toiletories, 111: 31-37, 1996), 자연 노화는 유전적인 요소에 영향을 받기 때문에 인위적인 조절이 어려운 반면, 외적 노화는 환경적인 요소에 영향을 받기 때문에 인위적인 조절이 비교적 용이하다. 대표적인 외적 노화인자로는 중금속, 황사, 오존, 자외선, 화학물질 등을 들 수 있으며, 가장 두드러진 외적인 노화현상이 바로 주름 형성이다(HW Daniel, Ann Intern Med, 75(6): 873-880, 1971; GL Grove, et al., J Am Acad Dermatol, 21: 631-637, 1989; CE Griffiths, et al., Arch Dermatol, 128: 347-351, 1992).
이러한 외적 자극인자들은 자유 라디칼 경로를 경유한다(D Harman, J Gerontol, 11(3): 298-301, 1956). 자유 라디칼들은 피부세포의 활성을 억제하고, 피부세포의 괴사와 변성을 유도하여 피부 콜라겐 등의 결합조직형성 파괴, 세포막 기능저해, DNA 변이촉진, 단백질 작용 변형, 세포간 에너지 전이, 신진대사와 관련된 분자들의 변형 등을 유발하는 것으로 알려져 있다(AF Kligman and RM Lavker, J Cutan Aging Cosmet Dermatol, 1: 5-12, 1988). 노화에 자유 라디칼이 관여한다는 사실은 자유 라디칼을 불활성화시키는 항산화제 또는 여러 가지 화학적 소거제들을 사용하여 노화과정을 지연시킬 수 있다는 것을 의미한다.
종래에는 기미, 주근깨, 색소침착 등과 같은 피부색소 이상 침착 증상과 자외선 노출 등에 의해 발생된 과도한 멜라닌 색소 침착을 치료 또는 경감시켜주기 위해서, 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 티로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합 사용하여 왔다. 그러나 이들은 불충분한 미백효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합시 제형 및 안정성 문제를 불러일으켜 그 사용이 제한되고 있다.
한편, 여러 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용하는 화장품이 활발하게 개발되고 있을 뿐만 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치도 한층 늘어나고 있으나, 아직까지 발효 알리티아민을 함유하는 화장료 조성물에 대해서는 개시된 적이 없다.
이에 본 발명은 여러 천연물에 있어서, 화장품으로의 응용 가능성을 연구한 결과, 발효 알리티아민 추출물이 피부 항산화, 미백, 피부자극 효과가 우수하다는 점을 확인한 바, 이를 함유하는 화장료 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.
상기의 목적을 달성하기 위해 본 발명은 비타민 B1이 함유되어 있는 식물의 추출물 및 알리신이 함유되어 있는 식물을 분쇄하여 분말을 수득하는 단계; 수득된 분말을 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)의 배양액과 혼합한 후, 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)을 배양하는 단계; 배양을 한 후, 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 제거하고, 배양액을 에탄올 60~80%(v/v)로 추출하는 단계;로부터 수득된 발효 알리티아민 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공한다.
이하 본 발명의 과제 해결 수단에 대해 상세히 설명하고자 한다.
건강한 피부를 유지하기 위해서는 신체의 대사 과정 중 발생하는 염증반응에 의해 매개되는 프리라디칼을 소거하여 세포막을 보호하고, 이미 손상받은 세포는 활발한 신진대사에 의해 재생화시켜야 한다.
색소 침착에 의해 피부가 노화될 수 있는데, 피부색에 영향을 주는 색소로는 멜라닌, 멜라조이드, 카로틴, 헤모글로빈 등이 있다. 이중 가장 중요한 것은 멜라닌으로, 멜라닌의 생합성은 아미노산의 일종인 티로신이 멜라노사이트의 멜라노좀에서 티로시나제에 의해 산화되어 디하이드록시 페닐알라닌(dihydroxy phenylalanine)으로 전환되는 것을 시작으로 계속되는 일련의 산화과정을 거쳐 갈색(pheomelanin), 흑색(eumelanin)의 중합체로 형성된다. 이러한 생합성 과정은 멜라노좀이라는 특수한 형태의 갈색 세포내 소기관에서 진행되며 멜라닌 과립을 포함한 멜라노좀은 핵 주변 부위에서 수지상 돌기 끝부분으로 이동, 케라티노사이트의 식세포작용에 의해 세포질 내로 이동하고 이들은 케라티노사이트의 핵 주변에 축적된다.
한편, 본 발명은 상기와 같은 프리라디칼, 멜라닌, 염증유발 관련 효소 등을 통해 야기되는 피부 노화를 예방 및 개선하기 위해 반드시 발효 알리티아민 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공하는데, 이때 발효 알리티아민 추출물은 비타민 B1이 함유되어 있는 식물의 추출물 및 알리신이 함유되어 있는 식물을 분쇄하여 분말을 수득하는 단계; 수득된 분말을 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)의 배양액과 혼합한 후, 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)을 배양하는 단계; 배양을 한 후, 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 제거하고, 배양액을 에탄올 60~80%(v/v)로 추출하는 단계;로부터 수득된 것이다.
발효 알리티아민 추출물은 항산화 효과, 염증유발관련 효소(Hyaluronidase)의 활성과 멜라닌 생성 억제 효과가 뛰어날 뿐만 아니라 피부 자극을 완화시키는 피부세포 사멸 억제효과도 뛰어나다는 사실을 본 발명에서 확인하였다.
한편, 본 발명에 함유되는 발효 알리티아민 추출물은 바람직하게 화장료 조성물 전체에 대해 0.001~30.0 중량% 포함되는 것이 좋다. 그리고 이때, 발효 알리티아민 추출물은 가장 바람직하게 발효 알리티아민 함량이 0.01 내지 70 중량%인 것이 좋다.
한편, 본 발명에서는 발효 알리티아민 추출물을 수득하는 방법에 있어서, 바람직하게 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 제거하고, 배양액을 에탄올 60~80%(v/v)로 추출하는 단계; 이후 추가적으로, 수득된 추출물을 55~75℃에서 감압농축한 후, 동결건조하여 분말을 수득하는 단계; 수득된 분말을 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄 및 헥산 중에서 선택되는 어느 하나 이상의 용매를 사용하여 용해하는 단계;를 포함하여 수득되는 것이 좋다. 그리고 본 발명에서 사용되는 비타민 B1이 함유되어 있는 식물의 추출물은 바람직하게 감자가 속하는 가지과, 맥주효모, 소맥배아, 쌀겨, 알팔파 및 맥아 중 선택되는 어느 하나 이상의 식물 추출물이고, 알리신이 함유되어 있는 식물의 추출물은 마늘이 속하는 백합과 및 파(allium) 속 중 선택되는 어느 하나 이상의 식물 추출물인 것이 좋다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물의 제형은 바람직하게 화장수, 젤, 수용성 리 퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형으로 이루어진 기초화장료제형, 수중유형 또는 유중수형의 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형 중에서 선택되는 어느 하나인 것이 좋다.
한편, 본 발명의 화장료 조성물은 특정 용도에 한정되는 것은 아니나, 하기의 실험 결과, 미백능, 항산화능, 피부자극완화능이 확인되었는데, 그로부터 본 발명은 바람직하게 피부미백용, 노화방지용, 피부자극 완화용으로 사용되는 것이 좋다.
상기에서 설명한 바와 같이, 본 발명의 발효 알리티아민 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물은 기미, 주근깨 및 피부 색소 침착의 원인이 되는 물질인 멜라닌 생성을 막아주는 티로시나제 활성 억제효과, 멜라닌 합성 억제효과 등의 미백효과와 자유라디칼 소거효과 등의 항산화 효과가 우수하고, 화장품 기재에 의해 야기되는 피부자극을 감소시키는 피부세포 사멸 억제효과, 염증 유발관련 효소 활성억제 효과 등의 피부자극 완화효과가 우수하다.
이하, 본 발명의 구성 및 작용에 대해 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
실시예 1: 천연물을 이용한 발효 알리티아민 추출물 제조
감자, 소맥배아, 쌀겨, 알팔파, 맥아 추출물, 마늘, 파를 충분히 세척한 다음 300 mesh로 분쇄하여 분말을 수득하였다. 이것을 10g/L되게 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisisae KCTC 7904) 균주 배양액에 첨가하였다. 배양액에 탄소원으로 포도당 2%(v/v)를 첨가하였고, 펩톤 1%(v/v)를 첨가하였다.
배양은 5L 발효조를 이용하여 2일간, 24℃, pH 5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심분리하여 배양균을 1차 제거한 후 0.25uM 여과지를 이용하여 최종 여과하였다. 여과된 배양액을 최종 70%(v/v) 에탄올 수용액이 되도록 에탄올을 첨가하여 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(whatman) #10 여과지로 여과하여 여과액을 수득하였다. 수득된 여과액을 4℃의 저온 창고에서 약 10일간 숙성시킨 후, 0.25uM의 여과기를 이용하여 최종 여과하였다. 여과가 완료되면 최종 여과된 여과액을 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결건조하였다. 감압농축물 및 동결건조물이 35 중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜의 혼합 용매를 사용하여 용해한 후, 천연물을 이용한 발효 알리티아민 추출물(이하, '발효 알리티아민 추출물'이라고 칭함)을 제조하였다.
제조예 1: 알리티아민 추출물 제조
구입한 알리티아민을 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 혼합용매를 사용하여 용해함으로써, 알리티아민 추출물을 제조하였다. 제조된 알리티아민 추출물을 하기 실험예에서 양성 대조군으로 사용하였다.
실험예 1: 머쉬룸 티로시나제를 이용한 티로시나제 활성 저해효과 측정
상기 실시예 1에서 수득된 발효 알리티아민 추출물의 티로시나제 활성 저해효과를 확인하기 위해 기존 미백제인 알부틴, 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 샘플을 비교 사용하였고, 양성대조군으로 제조예 1에서 수득한 알리티아민 추출물을 사용하였다.
티로시나제는 생체 내에서 티로신(tyrosine)이라는 물질의 산화과정을 촉진하여 멜라닌이 생성되게 도와주는 효소이다. 본 실험예에서는 이 효소의 기능을 억제하여 티로신이 산화되어 멜라닌이라는 흑색의 고분자형성을 억제하는 정도를 측정(SH Pomerantz, J Biol chem, 241: 161-168, 1966)함으로써, 미백효과를 판정하였다.
시료 15㎕를 96공 평판배양기(96-well plate)에 넣고, 50mM 인산 완충액(pH 6.5) 150㎕, 1.5mM L-티로신 용액 25㎕를 넣은 후, 머쉬룸 티로시나제(1,500 units/㎖, Sigma) 10㎕를 첨가하여 37℃에서 20분간 반응시킨 후, 흡광 광도계(microplate reader, ELx800, 미국)를 사용하여 490nm에서 흡광도를 측정함으로써 각 시료들의 티로시나제 활성 저해효과를 확인하였다. 반응샘플 중 시료는 0.05%(w/w) 첨가하였다.
티로시나제에 대한 활성 저해율(%)은 수학식 1에 의하여 계산하였으며, IC50 값은 티로시나제 효소 활성을 50% 저해하는 물질의 농도이다.
티로시나제 활성 저해율(%) = [(D-C)-(B-A)/(D-C)] X 100
A : 시료를 넣은 웰의 반응 전 흡광도
B : 시료를 넣은 웰의 반응 후 흡광도
C : 시료를 넣지 않은 웰의 반응 전 흡광도
D : 시료를 넣지 않은 웰의 반응 후 흡광도
시료명 티로시나제 활성 저해효과 (IC50)
발효 알리티아민 추출물 0.011%
알리티아민 추출물 0.010%
알부틴 0.385%
상백피 추출물 0.900%
유용성 감초 추출물 0.028%
머쉬룸 티로시나제를 이용한 티로시나제의 활성 저해효과를 측정한 결과(표 1), 발효 알리티아민 추출물과 알리티아민 추출물의 티로시나제 활성 저해효과가 미백제로 사용되고 있는 알부틴, 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물에 비해 우수한 것을 확인할 수 있었으며, 특히, 천연물을 이용하여 제조한 발효 알리티아민 추출물이 알리티아민 추출물과 티로시나제 활성 저해효과가 비슷한 수준인 것을 확인할 수 있었다.
상기의 결과로부터 발효 알리티아민 추출물의 우수한 미백효과를 확인할 수 있었고, 그로부터 본 발명의 화장료 조성물의 미백효과도 추론할 수 있었다.
실험예 2: B16F1 멜라노싸이트를 이용한 세포내 티로시나제 효소 활성 저해효과 측정
상기 실시예 1에서 수득된 발효 알리티아민 추출물의 세포내 티로시나제 활성 저해효과를 확인하기 위해 기존 미백제인 알부틴, 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 샘플을 비교 사용하였고, 양성대조군으로 제조예 1에서 수득한 알리티아민 추출물을 사용하였으며, 미백효과를 측정하기 위해 B16F1 멜라노싸이트내 티로시나제 효소 활성 저해 정도를 측정하였다.
본 실험예에 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 마우스에서 유래한 세포주이며, 티로시나제라는 효소를 합성하는 세포이다. 이 세포의 인공배양 중에 시료를 처리하고 세포에서 티로시나제를 분리하여 효소의 활성을 측정함으로써 티로시나제 효소활성 저해 정도를 비교하여 평가했다. 본 실험예에 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 ATCC(American Type Culture Collection, 기탁번호 : 6323)로부터 분양받은 것이었다. B16F1 멜라노싸이트의 티로시나제 효소 활성 저해 효과 측정은 다음과 같이 행하였다.
B16F1 멜라노싸이트를 6공 평판배양기에 각 웰 당 2×106 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 시료를 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신(Trypsin)-EDTA로 떼어낸 후 세포수를 측정한 다음 원심 분리하여 세포를 회수하였다. 세포 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼(50mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2mM PMSF) 1㎖를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하고, 원심분리(3,000rpm, 10분)하여 상등액을 회수하였다. 50mM 소듐 포스페이트 버퍼(pH 6.5)에 1.5mM L-티로신, 0.06mM L-도파, 세포 상등액을 각각 넣고, 37℃에서 30분간 배양한 후 흡광 광도계로 490㎚에서 흡광도를 측정하여 티로시나제 효소 활성 저해효과를 측정하였다. 반응샘플 중 시료는 0.05%(w/w) 첨가하였다.
B16F1 멜라노싸이트의 티로시나제 효소 활성 저해율(%)은 수학식 2에 의하여 계산하였으며, IC50 값은 세포내 티로시나제 효소의 활성을 50% 저해하는 물질의 농도이다
티로시나제의 저해율(%) = [(A-B)/A] × 100
A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 흡광도
B: 시료를 첨가한 웰의 흡광도
시료명 세포내 티로시나제 활성저해 효과 (IC50)
발효 알리티아민 추출물 0.016%
알리티아민 추출물 0.014%
알부틴 0.350%
상백피 추출물 1.050%
유용성 감초 추출물 0.040%
B16F1 멜라노싸이트의 티로시나제 효소 활성 저해효과를 측정한 결과(표 2), 발효 알리티아민 추출물과 알리티아민 추출물의 IC50 값은 각각 0.016%, 0.014%로 나타나 기존의 미백제인 알부틴, 유용성 감초 추출물, 상백피 추출물에 비해 낮은 농도에서도 티로시나제의 활성을 효과적으로 저해하는 것을 확인하였다. 또한, 발효 알리티아민 추출물과 알라티아민 추출물의 IC50 값이 비슷한 수준인 것을 확인할 수 있었는데, 그로부터 발효 알리티아민 추출물의 우수한 미백효과를 확인할 수 있었다.
상기의 결과로부터 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 본 발명의 화장료 조성물의 우수한 미백효과를 추론할 수 있었다.
실험예 3: B16F1 멜라노싸이트를 이용한 멜라닌 생성 억제효과 측정
상기 실시예 1에서 수득된 발효 알리티아민 추출물의 멜라닌 생성 억제효과를 확인하기 위해 기존 미백제인 알부틴, 상백피 추출물, 유용성 감초 추출물 샘플을 비교 사용하였고, 양성대조군으로 제조예 1에서 수득한 알리티아민 추출물을 사용하였으며, 미백효과를 측정하기 위해 B16F1 멜라노싸이트를 이용하여 멜라닌 생성 억제를 측정하였다.
본 실험예 3에 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 마우스에서 유래한 세포주이며, 멜라닌이라는 흑색색소를 분비하는 세포이다. 이 세포의 인공배양 중에 시료를 처리하여 멜라닌 흑색색소가 감소하는 정도를 비교 평가하였다. 본 실험예에 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 ATCC(American Type Culture Collection, 기탁번호 : 6323)로부터 분양받은 것이었다.
B16F1 멜라노싸이트의 멜라닌 생합성 억제효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16F1 멜라노싸이트를 6공 평판배양기에 각 웰당 2×106 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 시료를 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신-EDTA로 떼어낸 후 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(R Lotan and D Lotan, Cancer Res, 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 세포 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2mM PMSF) 1㎖를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후 흡광광도계로 405㎚에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음, 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. 반응샘플 중 시료는 0.05%(w/w) 첨가하였다.
B16F1 멜라노싸이트의 멜라닌 생성 저해율(%)은 수학식 3에 의하여 계산하였으며, IC50 값은 멜라닌 생성을 50% 저해하는 물질의 농도이다.
멜라민 생성 저해율(%) = [(A-B)/A] × 100
A : 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양
B : 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양
시료명 멜라닌 합성 저해 효과 (IC50)
발효 알리티아민 추출물 0.003%
알리티아민 추출물 0.002%
알부틴 0.450%
상백피 추출물 0.500%
유용성 감초 추출물 0.040%
B16F1 멜라노싸이트를 이용한 멜라닌 생성 억제효과를 측정한 결과(표 3), 발효 알리티아민 추출물과 알리티아민 추출물의 IC50 값은 각각 0.003%, 0.002%로 나타나 기존의 미백제인 알부틴, 유용성 감초 추출물, 상백피 추출물에 비해 우수한 효과를 나타내었다.
상기의 결과로부터 본 발명의 유효성분인 발효 알리티아민 추출물은 알리티아민 추출물과 멜라닌 합성 저해 효과가 비슷한 수준인 것을 확인할 수 있었고 그로부터 본 발명의 화장료 조성물의 우수한 미백효과를 추론할 수 있었다.
실험예 4: NBT 법을 이용한 항산화 효과 측정
상기 실시예 1에서 수득된 발효 알리티아민 추출물의 항산화 수준을 확인하기 위해 항산화제인 레티놀, BHT 샘플을 비교 사용하였고, 양성대조군으로 제조예 1에서 수득한 알리티아민 추출물을 사용하였으며, 항산화 측정은 NBT법을 이용하였다.
NBT법은 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 활성산소를 생성시키고, 생성된 활성산소와 니트로블루테트라졸리움(Nitro Blue Tetrazolium;NBT)가 반응하여 생성된 청색을 파장 560nm에서 측정하는 방법으로, 활성산소 소거율을 측정하였으며, 측정방법은 하기와 같다.
바이엘병에 0.05M의 Na2CO3 2.4ml, 3mM의 크산틴 용액 0.1ml, 3mM의 EDTA 용액 0.1ml, BSA 용액 0.1ml, 0.72mM의 NBT 용액 0.1ml를 가하고 여기에 시료용액을 각각 첨가한 후, 25℃에서 10분간 방치하였다. 방치 후, 크산틴 옥시다제 용액 0.1ml를 가하여 빠르게 교반한 다음, 25℃에서 20분간의 배양을 하였고, 여기에 6mM의 CuCl2용액 0.1ml을 가하여 반응을 정지시키고 560nm에서의 흡광도(St)를 측정하였다. 공시험은 시료용액 대신 증류수를 사용한 것으로 상기와 동일한 방법으로 흡광도(Bt)를 측정하였다. 시료용액의 블랭크(Blank)는 크산틴 옥시다제 용액 대신 증류수를 사용해 상기와 동일한 방법으로 흡광도(Bo)를 측정하였다. 반응샘플 중 시료는 0.05%(w/w) 첨가하였다.
측정 결과는 수학식 4에 의하여 산출하였다.
활성산소 소거율(%) = [1-(St-So)/(Bt-Bo)] × 100
St : 시료용액의 효소 반응 후의 560㎚에서의 흡광도
Bt : 공시험용액의 효소 반응 후의 560㎚에서의 흡광도
So : 효소 무첨가 시료용액의 효소 반응 전의 560㎚에서의 흡광도
Bo : 효소 무첨가 공시험용액의 효소 반응 전의 560㎚에서의 흡광도
시료명 활성산소 소거율(항산화 효과;%)
발효 알리티아민 추출물 96.0%
알리티아민 추출물 97.0%
레티놀 92.0%
BHT 89.0%
NBT법을 이용한 항산화 효과를 측정한 결과(표 4), 발효 알리티아민 추출물과 알리티아민 추출물의 활성산소 소거율이 각각 96.0%, 97.0%로 나타나 기존 항산화제인 레티놀과 BHT보다 항산화 효과가 우수함을 확인하였다.
상기의 결과로부터 본 발명의 유효성분인 발효 알리티아민 추출물은 알리티아민 추출물과 항산화 효과가 비슷한 수준인 것을 확인할 수 있었고, 그로부터 본 발명의 우수한 항산화 효과를 추론할 수 있었다.
실험예 5: DPPH 법을 이용한 항산화 효과 측정
상기 실시예 1에서 수득된 발효 알리티아민 추출물의 항산화 수준을 확인하기 위해 항산화제인 레티놀 BHT 샘플을 비교 사용하였고, 양성대조군으로 제조예 1에서 수득한 알리티아민 추출물을 사용하였으며, 항산화 측정은 DPPH법을 이용하였다.
DPPH법은 DPPH(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl free radical)라는 유리기를 사용하여 환원력에 의한 항산화 활성을 측정하는 것이다. 피검물질에 의해 DPPH가 환원되어 흡광도가 감소하는 정도를 공시험액의 흡광도와 비교하여 파장 560nm에서 자유라디칼 소거율을 측정하는 것이다. 사용한 시약으로는 DPPH (Aldrich, chem. co,. MW=618.76) 0.1mM 용액으로서 61.88mg을 메탄올에 용해하여 100ml로 하여 평가하였다.
실험방법으로는 96-웰 프레이트에 0.1mM DPPH 용액 0.15ml에 시료용액 0.15ml를 가하여 빨리 교반하고 25℃에서 10분간 반응시킨 후 560nm에서 흡광도 St를 측정하였다. 공시험은 시료용액 대신에 증류수를 사용한 것을 상기와 똑같이 조작하여 흡광도 Bt를 측정하고 시료용액의 블랭크(Blank)는 0.1mM DPPH 용액 대신에 메탄올을 사용해 똑같이 조작하여 흡광도 Bo를 측정하였다. 반응샘플 중 시료는 0.05%(w/w) 첨가하였다.
항산화 효과는 수학식 5에 의하여 산출하였으며, 결과는 표 5에 나타내었다.
자유라디칼 소거율(%) = [1-(St-<83> So)/(Bt-Bo)] X 100
St : 시료용액의 자유라디칼 소거 후의 560㎚에서의 흡광도
Bt : 공시험용액의 자유라디칼 소거 후의 560㎚에서의 흡광도
So : 시료용액의 자유라디칼 무첨가시 반응 전의 560㎚에서의 흡광도
Bo : 공시험용액의 자유라디칼 무첨가시 반응 전의 560㎚에서의 흡광도
시료명 자유라디칼 소거율(항산화 효과; %)
발효 알리티아민 추출물 96.0%
알리티아민 추출물 97.0%
레티놀 89.0%
BHT 92.0%
DPPH 법을 이용하여 항산화 효과를 측정한 결과(표 5), 발효 알리티아민 추출물과 알리티아민 추출물의 자유라디칼 소거율이 기존 항산화제인 레티놀과 BHT에 비해 우수한 것을 확인할 수 있었다.
상기의 결과로부터 발효 알리티아민 추출물의 항산화 효과가 알리티아민 추출물과 비슷한 수준인 것을 확인할 수 있었고, 그로부터 본 발명의 우수한 항산화 효과를 추론할 수 있었다.
실험예 6: 염증유발관련 효소( hyaluronidase ) 활성 저해효과 측정
상기 실시예 1에서 수득된 발효 알리티아민 추출물의 염증유발효소인 히아루로니디아제(hyaluronidase) 활성 저해효과를 확인하기 위해 컴프리 추출물, 시소 추출물, 삼백초 추추물 샘플을 비교 사용하였고, 양성대조군으로 제조예 1에서 수득한 알리티아민 추출물을 사용하였다.
히아루로니디아제(hyaluronidase)는 히아루론산을 가수분해하는 효소로 염증유발 기능을 가지고 있다.
본 실시예에서는 항염증효과를 측정하는 방법(Y Kakegawa, et al., Japanese J of Inflammation, 4: 437-438, 1984)을 응용해 이 효소의 활성을 저해함으로써 항염증 효과를 판정하였다.
시료 100㎕와 히아루로니디아제 용액(type Ⅳ-S, Sigma, 400U/㎖) 50㎕를 넣고 37℃에서 20분간 반응시킨 후, 효소활성화용액(compound 48/80 CaCl2ㆍ2H2O, Sigma, 0.1㎎/㎖)을 100㎕를 첨가하고 다시 37℃에서 20분간 반응시켰다. 히아루론산(hyaluronic acid) 용액(0.4㎎/㎖)을 250㎕ 넣고 37℃에서 40분간 반응시키고, 0.4N NaOH 100㎕를 넣어 반응을 종결시켰다. 포타슘보레이트 용액을 100㎕ 첨가하여 95℃에서 3분간 반응시키고 냉각시킨 다음 ρ-디메틸아미노벤즈알데히드 용액을 3㎖ 넣고 다시 20분간 37℃에서 반응시킨 후 발색시켰다. 565㎚에서 흡광도를 측정하여 히아루로니디아제에 대한 저해율을 측정하였다. 반응샘플 중 시료는 0.05%(w/w) 첨가하였다.
히아루로니디아제에 대한 저해율(%)은 수학식 6에 의하여 계산하였으며, IC50 값은 히아루로니디아제 효소 활성을 50% 저해하는 물질의 농도이다.
히아루로니디아제의 활성 저해율(%) = [(A-B)/A] × 100
A : 시료를 첨가하지 않은 웰의 효소활성
B : 시료를 첨가한 웰의 효소 활성
시료명 히아루로니디아제 활성 저해효과 (IC50)
발효 알리티아민 추출물 0.025%
알리티아민 추출물 0.020%
컴프리 추출물 0.350%
시소 추출물 0.600%
삼백초 추출물 0.250%
히아루로니디아제(hyaluronidase)의 활성 저해효과를 측정한 결과(표 6), 발효 알리티아민 추출물과 알리티아민 추출물의 IC50값은 각각 0.025%, 0.020%로 나타나 히아루로니디아제 저해효과가 뛰어나다고 알려진 기존의 항염증제인 컴프리 추출물, 시소 추출물, 삼백초 추출물보다 히아루로니디아제(hyaluronidase)의 활성 저해 효과가 뛰어남을 확인할 수 있었다.
상기의 결과로부터 발효 알리티아민 추출물의 히아루로니디아제의 활성 저해효과가 알리티아민 추출물과 비슷한 수준임을 확인하였고 그로부터 본 발명의 우수한 항염증 효과를 추론할 수 있었다.
실험예 7: 세포 배양기술을 이용한 자극완화 효과 평가
상기 실시예 1에서 수득된 발효 알리티아민 추출물의 자극완화 효과를 평가하기 위해 세포배양 기술을 이용하여 피부자극을 유발하는 물질인 소듐라우릴설페이트(Sodium Lauryl Sulfate; SLS)에 의한 세포사멸을 저해시키는 정도로 자극완화 효과를 평가하였다.
SLS는 화장품 기재의 피부자극 평가의 기준이 되는 물질로 세포막에 결합되어 세포대사 억제와 세포막을 파괴하여 피부자극을 유발하는 물질이다.
본 실험예 7은 사람 섬유아세포에 SLS와 발효 알리티아민 추출물을 첨가하였을 때 SLS에 의한 세포사멸을 감소시키는 효과를 평가한 것이다.
본 실험예 7에 사용된 Hs68 섬유아세포는 사람의 피부 진피세포로 ATCC (American Type Culture Collection, 기탁번호 : 1635)에서 분양받아 사용하였다.세포배양기술을 이용한 자극완화 평가실험은 다음과 같이 행하였다.
사람 유래의 섬유아세포를 96공 평판 배양기에 각 웰당 1×105 농도로 분주하고, 24시간 동안 배양한 후 '0.002% SLS 단독', '0.002% SLS와 발효 알리티아민 추출물 0.01%)', '0.002% SLS와 알리티아민 추출물(0.01%)'을 각각 처리하고 24시간 동안 추가 배양하였다. 배양 후 MTT(Sigma) 시약을 첨가하고 4시간 동안 배양한 후, 배양액을 제거하고 1N NaOH/이소프로판올용액을 첨가하여 20분간 교반한 후, 흡광광도계로 565㎚에서 흡광도를 측정하여 발효 알리티아민 추출물과 알리티아민 추출물이 SLS에 의한 세포사멸을 저해하는지를 측정하였다.
시료명 섬유아세포 생존율(%)
0.002% SLS 50
0.002% SLS+0.01% 발효 알리티아민 추출물 88
0.002% SLS+0.01% 알리티아민 추출물 83
자극완화 효과를 측정한 결과(표 7), 발효 알리티아민 추출물과 알리티아민 추출물은 SLS에 의해서 유발되는 세포사멸을 억제시킴으로써 피부 자극을 감소시키는 것을 확인하였다.
상기의 결과로부터 발효 알리티아민 추출물의 피부 자극완화 효과가 알리티아민 추출물 비슷한 수준인 것을 확인할 수 있었고, 그로부터 본 발명의 화장료 조성물의 피부자극 완화효과를 추론할 수 있었다.
실시예 2: 발효 알리티아민을 함유하는 화장료 조성물 제조
본 실시예 2에서는 상기 실시예 1에서 수득한 발효 알리티아민 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제조하였다.
제조된 화장료는 크림형태이고, 그 조성은 하기 표 8에 나타낸 바와 같다. 우선 표 8에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존하였다. 이것에 가)상을 가하여 예비 유화 후 호모믹서로 균일하게 유화한 다음 서서히 냉각하여 실시예 2 내지 4 및 비교예 1을 제조하였다.
단위: 중량%
원료
 실시예 비교예 1
실시예 2 실시예 3 실시예 4
가 스테아릴알콜 8 8 8 8
스테아린산 2 2 2 2
스테아린산콜레스테롤 2 2 2 2
스쿠알란 4 4 4 4
2-옥틸도데실알콜 6 6 6 6
폴리옥시에틸렌(25몰부가) 알콜에스테르 3 3 3 3
글리세릴모노스테아린산에스테르 2 2 2 2
나 발효 알리티아민 추출물 10 1 0.1 -
프로필렌글리콜 5 5 5 5
정제수 100에 대해 나머지 100에 대해 나머지 100에 대해 나머지 100에 대해 나머지
실험예 8: 피부 미백효과 평가
상기 실시예 2에서 제조된 화장료의 피부미백효과를 평가하기 위해 발효 알리티아민 추출물이 가장 적게 함유된 실시예 4와 비교예 1에 대한 피부 미백효과를 평가하였다.
실험자(20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 4를, 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다.
시험 완료 후 얼굴 좌우 양편의 도포 부위 피부를 화상분석기 및 색차계로 얼굴색을 비교하여 가장 어두운색을 5, 중간색을 3, 가장 환한 색을 1로 정하고 그 중간 정도를 어림잡아 평가하였다.
사용제품 실시예 4 비교예 1
실험 인원 번호 오른쪽 피부색 왼쪽 피부색
1 2.0 2.5
2 2.0 3.5
3 1.5 2.5
4 2.0 2.5
5 2.5 3.0
6 1.5 2.0
7 2.0 3.0
8 2.0 3.0
9 2.5 3.5
10 1.5 2.0
11 2.0 3.0
12 1.5 2.5
13 1.5 2.5
14 2.0 2.5
15 2.5 3.0
16 1.5 2.5
17 2.5 3.5
18 2.0 3.5
19 1.5 2.5
20 2.0 3.0
화장료 조성물의 피부 미백효과를 평가한 결과(표 9), 발효 알리티아민 추출물을 함유한 실시예 4를 도포한 실험자의 안면 피부에서 미백효과가 나타남을 확인하였다.
실험예 9: 피부 자극 완화효과 평가
본 실험예 9는 실시예 2에서 수득한 실시예 2의 피부 자극 완화 효과를 평가하기 위해 인체 첩포실험을 실시하였다. 본 평가는 실시예 2를 인체에 직접 적용하여 얻어진 평가의 결과이다.
일반적 화장품 처방(크림, 로션, 스킨, 에센스)에 자극을 일으키는 SLS와 상기 실시예 2를 혼용하여 24시간, 48시간, 72시간 동안 첩포한 후, 나타나는 자극 유발지수를 바탕으로 자극완화 효과를 평가하였다.
20~50세의 건강한 남녀 50명의 팔 상박부위에 FINN CHAMBER (FINLAND)를 이용하여 제품을 0.2mg씩 첩포하고, 24시간 후 급성 자극 지수를 평가하였다. 평가 후 재차 동일한 부위에 동량의 제품을 첩포하고 48시간 및 72시간 후의 지연성 자극 지수를 평가하였다.
피부 자극 완화효과를 평가한 결과, 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 실시예 2는 첩포하고 24시간, 48시간, 72 시간 경과 후에도 아무런 피부 발적을 일으키지 않았다.
상기의 결과로부터 발효 알리티아민이 화장료에 혼용되었을 때 자극을 유발시키는 기재(계면 활성제, 향, 알콜)에 의한 피부 자극을 감소시킬 수 있다는 사실을 확인하였고, 본 발명의 화장료 조성물이 피부 자극 완화효과가 우수함도 확인할 수 있었다.

Claims (9)

  1. 비타민 B1이 함유되어 있는 식물의 추출물 및 알리신이 함유되어 있는 식물을 분쇄하여 분말을 수득하는 단계; 수득된 분말을 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)의 배양액과 혼합한 후, 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)을 배양하는 단계; 배양을 한 후, 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 제거하고, 배양액을 에탄올 60~80%(v/v)로 추출하는 단계;로부터 수득된 발효 알리티아민 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 발효 알리티아민 추출물은,
    화장료 조성물 전체에 대해 0.001~30.0 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 발효 알리티아민 추출물은,
    발효 알리티아민 함량이 0.01 내지 70 중량%인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 사카로마이에스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)를 제거하고, 배양액을 에탄올 60~80%(v/v)로 추출하는 단계; 이후 추가적으로,
    수득된 추출물을 55~75℃에서 감압농축한 후, 동결건조하여 분말을 수득하는 단계;
    수득된 분말을 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄 및 헥산 중에서 선택된 어느 하나 이상의 용매를 사용하여 용해하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 비타민 B1이 함유되어 있는 식물은,
    감자가 속하는 가지과, 맥주효모, 소맥배아, 쌀겨, 알팔파 및 맥아 중 선택되는 어느 하나 이상의 식물이고,
    상기 알리신이 함유되어 있는 식물은 마늘이 속하는 백합과 및 파(allium) 속 중 선택되는 어느 하나 이상의 식물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에 있어서,
    상기 화장료 조성물의 제형은,
    화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형으로 이루어진 기초화장료제형, 수중유형 또는 유중수형의 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형 중에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    화장료 조성물은,
    피부 미백용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  8. 제1항에 있어서,
    화장료 조성물은,
    노화 방지용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  9. 제1항에 있어서,
    화장료 조성물은,
    피부자극 완화용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
KR1020090003561A 2009-01-16 2009-01-16 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물 KR101129239B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020090003561A KR101129239B1 (ko) 2009-01-16 2009-01-16 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020090003561A KR101129239B1 (ko) 2009-01-16 2009-01-16 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20100084209A true KR20100084209A (ko) 2010-07-26
KR101129239B1 KR101129239B1 (ko) 2012-03-26

Family

ID=42643666

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020090003561A KR101129239B1 (ko) 2009-01-16 2009-01-16 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101129239B1 (ko)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101365735B1 (ko) * 2012-04-19 2014-02-21 부산대학교 산학협력단 효모로 발효된 마늘의 헥산 추출물을 포함하는 혈액종양의 예방 또는 치료용 의약 조성물
KR20160082029A (ko) * 2014-12-30 2016-07-08 대한민국(농촌진흥청장) 배암차즈기 잎 추출물 및 발효 삼채 뿌리의 추출물을 포함하는 천식 치료용조성물
KR20160139632A (ko) 2015-05-28 2016-12-07 배재대학교 산학협력단 생리활성을 가지는 달래추출물
WO2019139307A1 (ko) * 2018-01-12 2019-07-18 코스맥스 주식회사 플록쿨린을 포함하는 피부 미용을 위한 조성물

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101444177B1 (ko) 2013-01-18 2014-09-29 이노뉴트리바이오 주식회사 미강을 이용한 식품용 천연 유화안정제의 제조방법
KR102654423B1 (ko) * 2016-06-28 2024-04-04 윤충호 마늘의 발효 추출물을 함유한 화장품 및 그 제조방법

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100708802B1 (ko) 2006-04-06 2007-04-18 주식회사 신원에프아이 건강 증진용 마늘 소재 및 이의 제조방법
KR20060108567A (ko) * 2006-07-26 2006-10-18 주식회사 코씨드바이오팜 감자 추출물 및/또는 육쪽 마늘 추출물을 유효성분으로함유하는 화장료 조성물
KR20080046830A (ko) * 2006-11-23 2008-05-28 주식회사 코씨드바이오팜 바실러스 속 미생물을 이용하여 배양한 흑 마늘 발효액을함유하는 화장료 조성물

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101365735B1 (ko) * 2012-04-19 2014-02-21 부산대학교 산학협력단 효모로 발효된 마늘의 헥산 추출물을 포함하는 혈액종양의 예방 또는 치료용 의약 조성물
KR20160082029A (ko) * 2014-12-30 2016-07-08 대한민국(농촌진흥청장) 배암차즈기 잎 추출물 및 발효 삼채 뿌리의 추출물을 포함하는 천식 치료용조성물
KR20160139632A (ko) 2015-05-28 2016-12-07 배재대학교 산학협력단 생리활성을 가지는 달래추출물
WO2019139307A1 (ko) * 2018-01-12 2019-07-18 코스맥스 주식회사 플록쿨린을 포함하는 피부 미용을 위한 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
KR101129239B1 (ko) 2012-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101129239B1 (ko) 발효 알리티아민 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR20090003144A (ko) 알리티아민을 함유하는 화장료 조성물
KR20090096256A (ko) 발효 푸코잔틴 제조법 및 이를 함유하는 화장료 조성물
KR100732564B1 (ko) 진피 추출물을 주요 활성 성분으로 함유하는 피부외용제조성물
KR20160004568A (ko) 인삼잎추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR20160137900A (ko) 인삼잎추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR100992042B1 (ko) 나노리포좀으로 안정화된 산삼 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조방법
KR101402193B1 (ko) 아위버섯 자실체 추출물 또는 아위버섯 균사체 추출물 또는 아위버섯 균사체 배양액을 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물
KR100542446B1 (ko) 매생이 추출물을 주요 활성성분으로 하는 화장료 조성물
KR101146634B1 (ko) 온주 밀감 과피 추출물의 분획물 및 그것의 용도
KR100781957B1 (ko) 포황 추출물을 주요 활성성분으로 함유하는 화장료 조성물
TWI767168B (zh) 薔薇屬植物萃取物用於提升粒線體活性之用途
KR100525994B1 (ko) 복방 생약 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR101458496B1 (ko) 아위버섯 자실체 추출물 또는 아위버섯 균사체 추출물 또는 아위버섯 균사체 배양액을 함유하는 항염용 피부 외용제 조성물
KR20140081137A (ko) 곰보버섯 자실체 추출물 또는 곰보버섯 균사체 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물
KR20110076055A (ko) 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR20110122448A (ko) 지리터리풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR20030086933A (ko) 잘피 추출물을 주요 활성성분으로 하는 화장료 조성물
KR100552269B1 (ko) 금등화 추출물 또는 비자 추출물로부터 선택된 1종 이상을 주요 활성성분으로 함유하는 피부외용 화장료 조성물
KR101280306B1 (ko) 발효 지실 추출물을 함유하는 항노화 화장료 조성물
KR20080098925A (ko) 목단피 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR100588830B1 (ko) 백렴 추출물을 함유 하는 노화방지 화장료 조성물
KR20140081982A (ko) 만가닥버섯 자실체 추출물 또는 만가닥버섯 균사체 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물
CN108653150B (zh) 一种防晒抗衰老修复乳液及其制备方法
KR100559278B1 (ko) 혈갈 추출물을 함유하는 화장료 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20150304

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170321

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180226

Year of fee payment: 7

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20200203

Year of fee payment: 9