KR20110076055A - 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20110076055A
KR20110076055A KR1020090132653A KR20090132653A KR20110076055A KR 20110076055 A KR20110076055 A KR 20110076055A KR 1020090132653 A KR1020090132653 A KR 1020090132653A KR 20090132653 A KR20090132653 A KR 20090132653A KR 20110076055 A KR20110076055 A KR 20110076055A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cosmetic composition
extract
skin
persimmon extract
effect
Prior art date
Application number
KR1020090132653A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101086227B1 (ko
Inventor
이정노
이지영
이강태
이건국
Original Assignee
주식회사 코리아나화장품
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 코리아나화장품 filed Critical 주식회사 코리아나화장품
Priority to KR1020090132653A priority Critical patent/KR101086227B1/ko
Publication of KR20110076055A publication Critical patent/KR20110076055A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101086227B1 publication Critical patent/KR101086227B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9794—Liliopsida [monocotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/896—Liliaceae (Lily family), e.g. daylily, plantain lily, Hyacinth or narcissus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 발명은 나도개감채(Lloydia triflora Bak) 추출물을 유효 성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 나도개감채 추출물을 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.001 ~ 30.0 중량%를 함유하는 것을 특징으로 하며, 본 발명에 따르면, 나도개감채 추출물은 항산화효과뿐만 아니라 MMP-1 생성억제효과, 콜라겐 합성 증진 효과, 멜라닌 생성 억제 효과, 자외선에 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과 및 피부 주름개선 효과가 있어 각종 기능성 화장료를 제공할 수 있다.
나도개감채, 항산화, 항노화, 주름, 미백, 피부 자극 완화, 화장료

Description

나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic Composition Comprising the extract of Lloydia triflora Bak as Active Ingredient}
본 발명은 나도개감채 추출물을 유효 성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부는 노화 과정에서 다양한 물리·화학적인 변화가 일어난다. 그 원인으로는 크게 내적인 노화 (intrinsic aging)와 광노화 (photo-aging)로 구분되며 이에 관한 연구가 활발히 이루어져 왔다. 자외선, 스트레스, 질병 상태, 환경 인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 자유라디칼이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다.
좀 더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성 물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부 세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부 노화 현상이 생겨나는 것이다.
특히, 단백질의 산화는 피부의 결합 조직인 콜라겐 (collagen), 히아루론산 (hyaluronic acid), 엘라스틴 (elastin), 프로테오글리칸 (proteoglycan), 피브로넥틴 (fibronectin) 등이 절단되어 심한 과다 염증 반응과 피부의 탄력에 지장을 주고 이것이 더 심해질 경우 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역 기능 저하의 사태에 이르게 된다.
그러므로, 신체의 대사 과정 중 발생하는 자유라디칼이나 자외선 조사, 염증 반응에 의해 매개되어 발생하는 자유라디칼을 소거하여 세포막을 보호하고, 또 이미 손상 받은 세포는 활발한 신진 대사에 의해 재생시켜서 세포를 증식시켜야 피부는 빠르게 회복되고 건강한 피부를 유지할 수 있다.
노화에는 이러한 자유라디칼 뿐만 아니라 콜라겐 분해효소인 기질 금속 단백질 분해 효소 (Matrix Metalloproteinase; MMP)라는 효소도 관여한다. 즉, 생체 내에서 콜라겐과 같은 세포외기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되나, 노화가 진행되면서 콜라겐 합성이 감소하고, 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속 단백질 분해 효소(MMP)의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다. 또한, 자외선 조사에 의해 이러한 분해 효소가 활성화되기도 한다.
그러므로, 세포 내에서 활성화가 유도되는 MMP 발현을 조절하거나 그 활성을 억제할 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다. 이제까지 화장품의 소재로서 사용된 원료들은 단순히 효소 활성만을 억제하는 것이 대부분이었다. 이에 세포내 자연노화와 광노화에 의해 그 발현이 유도되는 MMP 발현량 및 활성을 조절하고자 하였다.
한편, 색소 침착에 의한 피부 변화가 생긴다. 피부색을 결정하는 인자에는 기본적으로 인종과 지역, 성별, 나이에 따른 차이를 배제하면 기미, 주근깨와 자외 선 노출로 인한 태닝과 같은, 부분 또는 전체적인 색소 침착, 그 외에 여드름 및 흉터, 각질의 분포 상태와 혈액 순환, 스트레스, 건강 상태 등이 있다. 이상의 인자들 가운데에서도 가장 중요한 인자는 색소 침착이다.
피부색에 영향을 주는 색소로는 멜라닌, 멜라노이드, 카로틴, 헤모글로빈 등이 있는데, 이중 가장 중요한 것은 멜라닌으로서, 이 멜라닌의 생합성에 영향을 미치는 가장 큰 요인은 자외선과 체내 호르몬 분비 정도이다.
멜라닌은 자외선을 흡수 또는 산란시켜 자외선으로부터 피부가 손상되는 것을 방지하는데 큰 역할을 하는데, 특별한 최대 흡수 파장이 없고 전 영역의 빛을 흡수한다. 또한 활성 산소종을 제거하는 기능이 탁월하나, 때로는 멜라닌 자체가 활성 산소를 발생시키기도 하며, 멜라닌 구조 내의 카테콜이나 퀴논에 의하여 다른 물질을 환원시키거나 산화시키고, 멜라닌 자체가 자유라디칼의 성질을 나타내기도 한다.
멜라닌의 생합성은 아미노산의 일종인 티로신이 멜라닌 형성 세포의 멜라노좀에서 티로시나제에 의해 산화되어 디하이드록시 페닐알라닌 (dihydroxy phenylalanine)으로 전환되는 것을 시작으로 계속되는 일련의 산화 과정을 거쳐 갈색 (pheomelanin), 흑색 (eumelanin)의 중합체로 형성된다.
이러한 생합성 과정은 멜라노좀이라는 특수한 형태의 갈색 세포 내 소기관에서 진행되며 멜라닌 과립을 포함한 멜라노좀은 핵 주변 부위에서 수지상 돌기 끝부분으로 이동, 각질 세포의 식세포 작용에 의해 세포질 내로 이동하고 이들은 각질 세포의 핵 주변에 축적된다.
멜라닌의 합성과 멜라노좀의 수, 주위의 각질 세포로의 이동은 부분적으로 호르몬과 자외선 등에 영향을 받고 일차적으로는 유전적인 영향을 크게 받는다. 그 밖에 티로시나제의 발현 및 멜라닌의 합성, 전송에 관여하는 세포내 조절인자인 싸이토카인 (cytokine), 구리, 아연, 철 등의 금속 이온 및 인터페론, 프로스타글란딘, 히스타민 등이 관여하는 것으로 알려져 있다.
이미 아스코르빈산 (일본특개평 4-9320), 하이드로퀴논 (일본특개평-192062), 코직산 (일본특개소 56-7710), 알부틴 (일본특개평 4-93150) 및 일부의 추출물 등이 티로시나제 저해 활성을 가지고 있어 미백 화장료로 이용되고 있으나 화장품 제형 중에서의 안정성이 낮으므로 분해되어 착색되거나, 이취의 발생, 생체 레벨에서의 효능, 효과의 불분명 및 안전성 문제 등으로 그 사용이 제한되고 있는 실정이다. 그리고 상기한 물질들은 그 티로시나제 억제 효과가 입증되었으나 실제 생체 레벨과 유사한 실험에서는 그 효과가 낮게 나타난다. 따라서, 생체 레벨과 유사한 흑색종 세포 배양에 의한 저해효과 평가가 요구되고 있는 실정이다. 또한, 하이드로퀴논은 발암성 물질로 규정되어 화장품에서는 그 사용이 금지 또는 제한되고 있다. 코직산과 아스코르빈산은 매우 불안정한 물질이다. 상기 성분들을 소량 함유한 화장료는 실온에서 수 주일동안 보관하면 갈변 현상이 발생한다.
이러한 여러가지 문제점을 해결하기 위하여, 최근 여러 화학 물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 화장품이 많이 개발되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐만 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발 가치가 한층 늘어나고 있 다.
이에, 본 발명자들은 여러 천연물들에 있어서 화장품으로의 응용 가능성을 연구한 결과, 백합과의 나도개감채를 선정하고 이로부터 추출물을 제조하여, 피부 항산화 효과, MMP-1 생성 억제 효과, 콜라겐 합성 증진 효과, 멜라닌 생성 억제 효과, 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과 및 피부 주름개선 효과를 측정한 결과, 그 효능이 매우 우수하므로 화장품으로서의 효능을 기대할 수 있다는 것을 발견하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용, 주름개선용, 미백용, 자외선 조사에 의한 피부손상 억제용 화장료를 제공하는 것이다.
즉, 본 발명의 목적은 나도개감채 추출물을 함유하여 피부화장료에 적용시 피부 항산화 효과, MMP-1 생성 억제 효과, 콜라겐 합성 증진 효과, 멜라닌생성 억제효과, 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제효과가 우수한 항산화, 항노화, 주름개선, 미백 효과 및 피부손상 억제효과 등을 나타내는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 나도개감채 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 이용하는 화장 방법을 제공하는데 있다.
상기와 같은 본 발명의 목적은 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
본 발명의 또 다른 목적은 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 개선용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
본 발명의 또 다른 목적은 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
본 발명의 또 다른 목적은 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선에 의한 피부 손상 억제용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
본 발명의 또 다른 목적은 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선에 의한 피부 자극 완화용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
바람직하게는, 상기 나도개감채 추출물은 상기 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.001 ~ 30.0 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다.
또한, 바람직하게는, 상기 나도개감채 추출물은 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법, (b) 초임계 추출법, (c) 초음파 추출법, 또는 (d) 미생물로부터의 발효나 자연발효대사를 이용하여 발효하여 추출한 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 화장료 조성물을 인간의 피부에 적용하여, 항산화 효과, 피부 주름 개선효과, 피부 미백 효과 또는 자외선에 의한 피부손상 억제 효과를 얻는 것을 특징으로 하는 화장 방법에 의해 달성된다.
본 발명에 따른 나도개감채 추출물은 항산화 효과(실험예 1, 2), MMP-1 생성 억제효과(실험예 3), 콜라겐 합성 증진효과(실험예 4), 멜라닌 생성 억제 효과(실험예 5), 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과(실험예 6) 및 피부 주름개선 효과(실험예 7)를 갖는다.
또한, 나도개감채 추출물은 기미, 주근깨 및 피부 색소 침착의 원인이 되는 물질인 멜라닌 생성 억제 효과 등의 미백 작용 효과를 갖는다.
따라서, 이러한 나도개감채 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 항산화 효과와 콜라겐 분해 효소 활성 조절 효과, 피부 잔주름 개선 효과, 항염증, 미백 등 우수한 효과와 함께 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제하여 우수한 피부 손상 억제효과, 자극 완화 효과를 가짐을 알 수 있다.
본 발명은 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용, 피부노화방지용, 피부주름 개선용, 피부 미백용 및 자외선에 의한 피부 손상 억제용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화장료 조성물 중 유효성분으로 사용되는 나도개감채 (Lloydia triflora Bak)는 백합과의 식물로 일본, 만주, 사할린, 캄차카에 분포한다. 국내에는 지리산과 전남의 무등산이북에서 자생한다. 서식지로는 산지의 초원이며 개화시기 5~6월이다. 관상용으로 많이 재배된다. 비닐줄기에서 잎과 줄기가 각각 1개씩 나와 곧게 선다. 줄기는 연약하고 곧게 서며 가지가 갈라지지 않고 높이가 20cm정도이다.
본 발명에 있어서, 나도개감채 추출물은 나도개감채의 다양한 기관 또는 부분(예: 잎, 꽃, 뿌리, 줄기 및 종자 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하고, 바람직하게는 잎, 줄기, 뿌리로부터 얻은 추출물이고, 보다 바람직하게는 줄기 또는 뿌리로부터 얻은 추출물이며, 가장 바람직하게는 뿌리로부터 얻은 추출물을 의미한다.
또한, 본 발명의 나도개감채 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건 하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있으나, 바람직하게는 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 이용한 용매 추출법 (b) 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법 또는 (c) 초음파 추출법을 이용하여 추출한다. 또는 (d) 각종 미생물로부터의 발효나 자연 발효대사를 이용하여 발효하여 추출한다.
본 발명에서는 바람직하게는 추출용매를 이용한 용매 추출법을 이용하였다.
본 발명에서 나도개감채 추출물은 다양한 추출용매, 예를 들어, 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출 용매를 사용하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 에탄올, 70%(v/v) 에탄올 수용액 또는 물을 사용하여 얻어진 것이고, 가장 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올 수용액을 사용하여 얻어진 것이다.
한편, 본 발명의 나도개감채 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.
또한, 본 발명의 나도개감채 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 및 발효 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 이산화탄소에 의한 감압, 고온에 의한 초임계추출법에 의한 추출, 초음파를 이용한 추출법에 의한 추출, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의해 분리하거나 자연상태나 각종 미생물을 이용한 발효산물에 의한 추출물 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 및 추출방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 추출물에 포함된다.
또한, 본 발명은 상기 추출물이 상온에서 냉침, 가열 여과하여 얻어진 액상물, 추가로 용매를 감압농축 또는 동결 건조하여 얻은 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 이산화탄소에 의한 감압, 고온에 의한 초임계추출법에 의한 추출법은 초임계 유체 추출법(supercritical fluid extraction)을 의미하는 것으로, 일반적으로 초임계 유체는 기체가 고온 고압 조건에서 임계점에 도달하였을 때 갖는 액체 및 기체의 성질을 지니고 있으며, 화학적으로 비극성 용매와 유사한 극성을 지니고 있으며 이러한 특성으로 인해 초임계 유체는 지용성 물질의 추출에 사용되고 있다(J. Chromatogr. A. 1998;479:200-205).
이산화탄소는 초임계 유체기기의 작동으로 압력 및 온도가 임계점까지 이르는 과정을 거치면서 액체 및 기체 성질을 동시에 지닌 초임계 유체가 되고 그 결과 지용성 용질에 대한 용해도가 증가한다. 초임계 이산화탄소가 일정량의 시료를 함유한 추출 용기를 통과하게 되면 시료에 함유된 지용성 물질은 초임계 이산화탄소에 추출되어 나온다.
지용성 물질을 추출한 후 추출 용기에 남아있는 시료에 다시 소량의 공용매가 함유된 초임계 이산화탄소를 흘려 통과시키면 순수한 초임계 이산화탄소만으로는 추출되지 않았던 성분들이 추출되어 나오게 할 수 있다.
본 발명의 초임계추출법에 사용되는 초임계 유체는 초임계 이산화탄소 또는 이산화탄소에 추가적으로 공용매를 혼합한 혼합유체를 사용함으로써 효과적으로 유효 성분을 추출할 수 있다.
이러한 공용매는 클로로포름, 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 및 디에틸에테르로 이루어진 군에서 선택되는 1종 또는 2종 이상의 혼합물을 사용할 수 있다.
추출된 시료는 대부분 이산화탄소를 함유하고 있는데 이산화탄소는 실온에서 공기 중으로 휘발되므로 상기 방법으로 얻은 추출물을 화장료 조성물로서 사용할 수 있으며, 공용매는 감압증발기로 제거할 수 있다.
또한 상기 초음파 추출법은 초음파 진동에 의해 발생되는 에너지를 이용하는 추출방법으로, 초음파가 수용성 용매 속에서 시료에 포함된 불용성인 용매를 파괴시킬 수 있으며, 이때 발생되는 높은 국부온도로 인하여 주위에 위치하는 반응물 입자들의 운동에너지를 크게 하기 때문에 반응에 필요한 충분한 에너지를 얻게 되고, 초음파 에너지의 충격효과로 높은 압력을 유도하여 시료에 함유된 물질과 용매의 혼합 효과를 높여주어 추출효율을 증가시키게 된다.
초음파 추출법에 사용할 수 있는 추출용매는 클로로포름, 에탄올, 메탄올, 물, 에틸아세테이트, 헥산 및 디에틸에테르로 이루어진 군에서 선택되는 1종 또는 2종 이상의 혼합물을 사용할 수 있다. 추출된 시료는 진공 여과하여 여과액을 회수한 후 감압증발기로 제거하고, 동결건조하는 통상의 추출물 제조방법을 통해 추출물을 얻을 수 있다.
본 발명에 따른 나도개감채 추출물은 발효과정을 거친 추출물도 포함하는데, 나도개감채의 발효추출물은 다음과 같이 제조할 수 있다. 나도개감채를 100~500메쉬 정도로 미세하게 파쇄한 다음 통상적인 미생물 배양액을 1~50g/L를 첨가하고 효모균주 또는 유산균등의 미생물을 10,000~100,000 cfu/L의 양으로 첨가한다. 배양온도는 30~37℃의 통상적인 미생물 배양조건으로 배양한다. pH는 5~7로 호기적 또는 통상 혐기(anaerobic)적인 조건으로 약 5 내지 10일간 배양한다. 이후 숙성 및 여과를 통해 얻을 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 활성산소 및 자유라디칼을 소거하고, MMP-1의 생성 억제 및 자외선에 의해 과다생성된 MMP-1의 생성 억제, 콜라겐의 생합성 증진하고, 멜라닌 세포의 멜라닌 생성을 억제하며, 자외선 조사에 의해 발현되는 염증성 사이토카인의 발현을 억제할 수 있으며, 주름 개선에 효과가 있는 유효량의 나도개감채 추출물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 나도개감채 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.001 ~ 30.0 중량% 함유되며, 더욱 바람직하게는, 상기 나도개감채 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.01 ~ 10 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다. 상기 추출물의 함량이 0.001 중량% 미만인 경우에는 피부 개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 개선 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.
상기 나도개감채 추출물을 함유하는 본 발명의 화장료 조성물은 항산화 효과(실험예 1 및 2), MMP-1 생성 억제효과(실험예 3), 콜라겐 합성 증진효과(실험예 4), 멜라닌 생성 억제효과(실험예 5), 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제효과(실험예 6) 및 피부 주름개선 효과(실험예 7)가 뛰어나다.
따라서, 이러한 다양한 기능을 가진 나도개감채 추출물을 포함하는 본 발명의 화장료 조성물은 우수한 항산화 효과, 피부노화 방지효과, 피부주름 개선 효과, 피부 미백 효과, 자외선에 의한 피부 손상 완화 효과 및 자극 완화 효과를 갖는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 상기 유효 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로 필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 본 발명의 나도개감채 추출물을 유효성분으로 포함유하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하여 항산화 효과, 피부주름개선 효과, 피부 미백 효과 및 피부 손상 억제효과를 갖는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.
본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 이용하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 이용하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명 의 화장 방법에 속한다.
본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 나도개감채 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 이용하는 화장방법을 수행하면, 항산화 효과, MMP-1 생성 억제 효과, 콜라겐 합성 증진 효과, 멜라닌 생성 억제 효과(피부 미백 효과), 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과(피부 손상 억제효과) 및 피부 주름개선 효과를 얻을 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
제조예 1: 나도개감채 추출물 제조
세절하여 음건한 나도개감채의 뿌리를 70% (V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50 ℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하였다. 감압 농축물 및 동결 건조물이 1 중량% 가 되도록 80% 부틸렌글리콜 용액을 사용하여 분산/용해하여 나도개감채 추출물을 제조하였다.
실험예 1: 나도개감채 추출물의 NBT 법을 이용한 항산화 효과 측정
본 실험예 1은 제조예 1에서 수득한 나도개감채 추출물의 항산화 효과를 확인하기 위해 항산화 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 BHT(Butylated Hydroxytoluene)를 비교군으로 하여, NBT법으로 항산화 활성을 측정하였다.
항산화 효과를 측정하기 위해서 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 생성되는 활성 산소를 NBT법에 의해 측정하고 피검 물질(나도개감채 추출물, BHT)이 활성산소를 제거하는 효과, 즉 활성산소 소거효과를 평가한다. 크산틴과 크산틴옥시다제에 의해 활성 산소를 생성시킨다. 이 활성 산소가 니트로블루테트라졸리움(Nitro Blue Tetrazolium;NBT)과 반응하여 이것에 의해 생성되는 청색을 파장 560 nm에서 측정하는 것으로 활성 산소 소거율(%)을 측정한다.
측정방법으로서
1. 0.05M Na2CO3 ------------------------------------ 2.4ml
2. 3mM 크산틴 용액---------------------------------- 0.1ml
3. 3mM EDTA 용액------------------------------------ 0.1ml
4. BSA 용액----------------------------------------- 0.1ml
5. 0.72mM NBT 용액---------------------------------- 0.1ml
6. 크산틴 옥시다제 용액----------------------------- 0.1ml
7. 6mM CuCl2 용액----------------------------------- 0.1ml
① 바이알병에 1,2,3,4,5를 가하고 여기에 시료 용액 0.1ml을 첨가하고 25℃에서 10분간 방치한다.
② 6을 가하여 빨리 교반하고 25℃에서 20분간의 배양을 개시한다.
③ 그 후 7을 가하여 반응을 정지시키고 560nm에서의 흡광도 St를 측정한다.
④ 시료 용액의 블랭크(Blank)는 상기 6 대신 증류수를 사용하는 것을 제외하고는 상기 흡광도 St를 측정하는 때와 동일하게 조작하여 흡광도 So를 측정한다.
⑤ 공시험은 상기 시료 용액 대신 증류수를 사용하는 것을 제외하고는 상기 흡광도 St를 측정하는 때와 동일하게 조작하여 흡광도 Bt를 측정한다.
⑥ 공시험의 블랭크(Blank)는 상기 시료 용액 및 6 대신 증류수를 사용하는 것을 제외하고는 상기 흡광도 St를 측정하는 때와 동일하게 조작하여 흡광도 Bo를 측정한다.
활성 산소 소거율(%)은 수학식 1에 의하여 산출하였으며, 결과는 표1과 같다.
Figure 112009081127417-PAT00001
St : 시료 용액의 효소 반응 후의 560nm에서의 흡광도
Bt : 공시험 용액의 효소 반응 후의 560nm에서의 흡광도
So : 시료 용액의 효소 무첨가시 반응 전의 560nm에서의 흡광도
Bo : 공시험 용액의 효소 무첨가시 반응 전의 560nm에서의 흡광도
시료명 처리 농도(%) 활성 산소 소거율(%)
나도개감채 추출물(제조예1) 0.01 92.2
BHT 0.01 90.2
실험 결과는 표 1과 같이 0.01% 농도에서 시험한 시료 모두에서 우수한 활성 산소 소거율(항산화 효과)를 확인할 수 있었다. 본원발명의 나도개감채 추출물은 0.01% 농도에서 BHT와 비교하여 더 우수한 항산화 효과를 가지고 있음이 확인되었다.
실험예 2: 나도개감채 추출물의 DPPH 법을 이용한 항산화 효과 측정
본 실험예 2는 제조예 1에서 수득한 나도개감채 추출물의 항산화 효과를 측정하기 위해, 항산화 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 비타민 C를 비교군으로 하여 DPPH법을 이용하여 항산화 효과(자유라디칼 소거율)를 측정하였다.
DPPH법은 DPPH(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl) 자유라디칼이라는 유리기를 사용하여 환원력에 의한 항산화 효과를 측정한다. 피검 물질(나도개감채 추출물, 비타민 C)에 의해 DPPH가 환원되어 흡광도가 감소하는 정도를 공시험액의 흡광도와 비교하여 파장 560nm에서 자유라디칼 소거율(%)을 측정한다.
사용한 시약으로서는 2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl 자유라디칼(Aldrich Chem. Co., MW=618.76) 0.1 mM 용액으로서 61.88 mg을 메탄올에 용해하여 100ml로 한다.
측정방법으로서
① 96-웰 플레이트에 0.1 mM DPPH 용액 0.15 ml에 시료용액 0.15ml를 가하여 빨리 교반하고 25℃에서 10분간의 배양을 개시한다.
② 그 후 560nm에서의 흡광도 St를 측정한다.
③ 시료 용액의 블랭크 (Blank)는 상기 0.1mM DPPH 용액 대신 메탄올을 사용하는 것을 제외하고는 상기 흡광도 St를 측정하는 때와 동일하게 조작하여 흡광도 So를 측정한다.
④ 공시험은 상기 시료 용액 대신 증류수를 사용하는 것을 제외하고는 상기 흡광도 St를 측정하는 때와 동일하게 조작하여 흡광도 Bt를 측정한다.
⑤ 공시험의 블랭크(Blank)는 상기 0.1mM DPPH 용액 대신 메탄올을 사용하고 상기 시료 용액 대신 증류수를 사용하는 것을 제외하고는 상기 흡광도 St를 측정하는 때와 동일하게 조작하여 흡광도 Bo를 측정한다.
자유라디칼 소거율(%)의 결과는 수학식 2에 의하여 산출하였으며, 결과는 하기의 표 2와 같다.
Figure 112009081127417-PAT00002
St : 시료용액의 자유라디칼 소거 후의 560nm에서의 흡광도
Bt : 공시험용액의 자유라디칼 소거 후의 560nm에서의 흡광도
So : 시료용액의 자유라디칼 무첨가시 반응 전의 560nm에서의 흡광도
Bo : 공시험용액의 자유라디칼 무첨가시 반응 전의 560nm에서의 흡광도
시료명 처리 농도(%) 자유라디칼 소거율(%)
나도개감채 추출물(제조예1) 0.05 88.3
vit-C 0.05 93.5
결과는 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 나도개감채 추출물은 0.05% 농도에서 자유라디칼 소거율(항산화 효과)이 있는 것으로 알려진 물질인 비타민 C의 항산화 효과보다 더욱 우수한 항산화 효과를 갖고 있음이 확인되었다.
실험예 3. 나도개감채 추출물의 MMP -1 생성 억제 효과
본 실험예 3은 제조예 1에서 수득한 나도개감채 추출물이 콜라겐 분해효소인 MMP-1 생성을 억제하는 효과가 있는지의 여부를 측정하기 위해, MMP-1의 생성을 억제하는 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β(100ng/ml, Roche, 미합중국)를 비교군으로 하여 MMP-1의 생성을 억제하는 효과를 측정하였다.
인간 정상 피부 세포인 섬유아세포 (한국 세포주 은행, 대한민국)를 48-웰 마이크로 플레이트(Nunc, 덴마크)에 각 웰당 1× 106 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma, 미합중국) 및 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양한 후 상기 제조예 1 의 나도개감채 추출물을 최종 농도 200 ㎍/㎖로 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 나도개감채 추출물이 포함되지 않은 무혈청 DMEM 배지에서 48시간 동안 추가로 배양하였다.
배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 MMP-1 분석 킷트(Amersham, 미합중국)를 이용하여 새로 합성된 MMP-1의 양(ng/㎖)을 측정하고, 하기 수학식 3에 따라 MMP-1 생성 억제율을 계산하였으며, 그 결과는 표 3에 나타내었다.
Figure 112009081127417-PAT00003
시험 물질 MMP-1 생성 억제율(%)
나도개감채 추출물(제조예 1) 55.7
TGF-β 53.5
상기 표3의 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명의 나도개감채 추출물은 200㎍/㎖ 농도에서 MMP-1 생성 억제율을 측정했을 때, 55.7%의 억제율을 나타냈고, TGF-β는 53.5%의 억제율을 나타내었다. MMP-1 생성 억제효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β의 농도(100ng/ml)와 본원발명의 나도개감채 추출물의 농도(200㎍/㎖) 차이를 감안해도, 여러 종류의 물질이 혼합된 추출물 수준에서 상기와 같은 정도의 MMP-1 억제율을 나타낸 것은 본원발명의 나도개감채 추출물은 MMP-1 생성 억제 효과가 있다는 것을 보여준다.
실험예 4. 나도개감채 추출물의 콜라겐 합성 증진 효과
인간 정상 상피 세포인 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트에 각 웰당 1 x 106 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 24시간 동안 배양하였다. 상기 나도개감채 추출물을 최종농도 100 ㎍/㎖로 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 나도개감채 추출물이 포함되지 않은 무혈청 DMEM 배지에서 48시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 콜라겐 키트(Takara, 일본)를 이용하여 프로콜라겐 (procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PICP) 양을 측정하여 ng/㎖ 환산하였으며, 이에 의해 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. 본 실험의 비교군으로는 콜라겐 합성 증진 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β(100ng/ml, Roche, 미합중국)을 비교군으로 사용하였고, 나도개감채 추출물은 0.01%(w/v) 농도로 실험을 실시하였다. 콜라겐 생합성 증가율은 하기 수학식 4에 따라 계산하였으며, 그 결과는 표 4에 나타내었다.
Figure 112009081127417-PAT00004
시험 물질 콜라겐 생합성증가율(%)
나도개감채 추출물(제조예 1) 71.4
TGF-β 69.6
표 4는 섬유아세포를 이용하여 나도개감채 추출물 및 TGF-β를 첨가한 배양액의 콜라겐 합성 증진 효과를 측정한 결과를 나타낸 것이다. 표 4에 따르면, 본 발명의 나도개감채 추출물은 0.01% 농도에서 콜라겐 생합성 증가율을 측정했을 때, 71.4%의 생합성율을 나타내었고, 콜라겐 합성 증진 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β는 69.6%의 생합성율을 나타내는 것을 알 수 있었다. 콜라겐 합성 증진 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β의 농도(10ng/ml)와 본원발명의 나도개감채 추출물의 농도(0.01%(w/v)) 차이를 감안해도, 여러 종류의 물질이 혼합된 추출물 수준에서 상기와 같은 정도의 콜라겐 생합성율을 나타낸 것은 본원발명의 나도개감채 추출물은 콜라겐 합성 증진 효과가 있다는 것을 보여준다.
실험예 5: 나도개감채 추출물의 B16F1 멜라닌형성세포에 대한 멜라닌 생성 억제 효과
본 실험예 5는 상기 제조예 1에서 수득한 나도개감채 추출물의 미백 효과를 확인하기 위해 B16F1 멜라닌 형성 세포에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 보고 미백 효과를 판단한 것이다. 본 실험예 5에 사용된 B16F1 멜라닌 형성 세포는 마우스에서 유래한 세포균주이며, 멜라닌이라는 흑색 색소를 분비하는 세포이다.
이 세포의 인공 배양 중에 시료를 처리하여 멜라닌 흑색 색소가 감소하는 정도를 비교 평가하였다. 본 실험예에 사용된 B16F1 멜라닌 형성 세포는 ATCC(American Type Culture Collection)로부터 분양받아 사용하였다.
B16F1 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생합성 억제 효과 측정은 다음과 같이 행하였다.
B16F1 멜라닌 형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2 X 106 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 제조예 1에 따른 나도개감채 추출물을 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신-EDTA로 떼어낸 후 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan: Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50 mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1ml를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리 (3,000 rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후 마이크로 플레이트 판독기로 405 nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 하기 수학식 5에 의하여 계산하였으며, 그 결과를 표 5에 기재하였다. 이때 멜라닌 생성 저해 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 하이드로퀴논과 알부틴을 비교군으로 사용하였다.
Figure 112009081127417-PAT00005
A : 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양
B : 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양
시료명 처리농도(%) 멜라닌 생성 저해율 (%)
나도개감채 추출물(제조예 1) 0.1 61
하이드로퀴논 0.1 65
알부틴 0.1 42
상기 표 5의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 나도개감채 추출물은 B16F1 멜라닌 형성 세포에서 멜라닌 생성을 크게 저해하는 것을 알 수 있다. 나도개감채 추출물은 0.1% 농도에서 멜라닌 생성 저해율 값이 61%로 나타났으며, 동일한 농도에서 기존의 미백 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 알부틴 및 하이드로퀴논과 비교했을 때, 하이드로퀴논보다는 낮은 멜라닌 생성 저해효과를 나타내었으나, 알부틴보다는 우수한 멜라닌 생성 저해효과를 나타내었다. 따라서 본 발명의 나도개감채 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 멜라닌 생성 억제에 우수한 효과가 있음을 알 수 있다.
실험예 6: 나도개감채 추출물의 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과
본 실험예 6은 제조예 1에서 수득한 나도개감채 추출물의, 자외선 조사에 의해 발현되는 염증성 사이토카인 발현 억제 효과를 평가하기 위한 것으로서, 사람의 표피 조직에서 분리한 섬유아세포 (Fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 5 X 104개씩 넣고 24 시간 동안 부착시켰다.
각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500㎕의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 자외선 B (UVB) 램프 (Model: F15T8, UV B 15W, Sankyo Dennki사, Japan)를 이용하여 자외선 10 mJ/㎠를 조사한 후 PBS를 덜어내고 세포배양 배지 (DMEM에 FBS가 첨가되지 않은 배지) 350 ㎕를 첨가하였다.
여기에 평가하고자 하는 나도개감채 추출물을 처리한 후 5시간 동안 배양하였다. 배양 상층액을 150㎕ 취하여 IL-1α를 정량함으로서 나도개감채 추출물의, 염증성 사이토카인 발현 억제 효과를 판단하였다. 비교군으로는 염증성 사이토카인 발현 억제물질인 인도메타신 0.1%를 사용하였다. IL-1α의 양은 효소 면역 분석법 (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)을 이용하여 정량화하였으며, 염증성 사이토카인 (IL-1α)의 발현 억제율(%)은 하기 수학식 6에 의해 계산하였고, 그 결과를 표 6에 나타내었다.
Figure 112009081127417-PAT00006
Bo : 자외선 조사하지 않고 시료 처리하지 않은 웰의 IL-1α생성량
Bt : 자외선 조사하고 시료를 처리하지 않은 웰의 IL-1α생성량
St : 자외선 조사하고 시료를 처리한 웰의 IL-1α생성량
시료명 처리 농도(%) 염증성 사이토카인
발현 억제율(%)
나도개감채 추출물 0.1% 55.3
0.2% 62.3
인도메타신 0.1% 53.2
표 6에 따르면, 나도개감채 추출물은 자외선 조사에 의한 염증성 사이토카인인 IL-1α의 발현(생성)을 0.1% 농도에서 55.3% 억제하고, 0.2%의 농도로 처리했을 때는 62.3%의 IL-1α의 발현을 억제하는 것을 알 수 있었다. 특히, 본 발명에 따른 나도개감채 추출물은 동일 농도에서 염증성사이토카인 발현 억제물질인 인도메타신보다도 우수한 염증성 사이토카인 발현율을 보임을 알 수 있었다. 따라서 본 발명의 나도개감채 추출물은 자외선 조사에 의한 염증 발생을 낮은 농도에서도 효과적으로 방어함을 알 수 있다.
이하, 상기한 실험예들의 결과를 근거로 하여 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료를 조성하여 제시하는 것이나 본 발명의 제형이 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.
제형예 1. 유연화장수
유연화장수의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음 표 7과 같이 제조하였다.
성분 함량(단위:중량%)
나도개감채 추출물
글리세린
1.3-부틸렌글리콜
PEG 1500
알란토인
DL-판테놀
이.디.티.에이-2NA
벤조페논-9
소듐 히아루로네이트
에탄올
옥틱도데세스-16
폴리솔베이트 20
방부제, 향, 색소
증류수		 3.0
5.0
3.0
1.0
0.1
0.3
0.02
0.04
5.0
10.0
0.2
0.1
미량
잔량
합계 100
제형예 2. 수렴화장수
수렴화장수의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음 표 8과 같이 제조하였다.
성 분 함량(단위:중량%)
나도개감채 추출물
글리세린
1.3-부틸렌글리콜
알란토인
DL-판테놀
이.디.티.에이-2NA
벤조페논-9
소듐 히아루로네이트
에탄올
폴리솔베이트 20
위치하젤 추출물
구연산
방부제, 향, 색소
증류수		 1.5
2.0
2.0
0.2
0.2
0.02
0.04
3.0
15.0
0.3
2.0
미량
미량
잔량
합 계 100
제형예 3. 영양화장수
영양화장수의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음 표 9와 같이 제조하였다.
성분 함량(단위:중량%)
나도개감채 추출물
스테아릴 알콜
라놀린
폴리솔베이트 60
솔비탄스테아레이트
경화식물유
광물유
스쿠알란
트리옥타노인
디메치콘
초산토코페롤
카르복시비닐폴리머
글리세린
1.3-부틸렌글리콜
소듐히아루로네이트
트리 에탄올아민
방부제, 향, 색소
증류수		 1.5
1.5
1.5
1.3
0.5
1.0
5.0
3.0
2.0
0.8
0.5
0.12
5.0
3.0
5.0
0.12
미량
잔량
합계 100
제형예 4. 영양크림
영양크림의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음 표 10과 같이 제조하였다.
제형예 4 비교 제형예 1 비교 제형예 2
성 분 함량 (단위:중량%)
나도개감채 추출물
레티놀
친유형 모노스테아린산글리세린
세테아릴알콜
스테아린산
밀납
폴리솔베이트 60
솔비탄스테아레이트
경화식물유
스쿠알란
광물유
트리옥타노인
디메치콘
소듐마그네슘실리케이트
글리세린
베타인
트리에타올아민
소듐히아루로네이트
방부제, 향, 색소
정제수		 3.0
-
2.0
2.2
1.5
1.0
1.5
0.6
1.0
3.0
5.0
5.0
1.0
0.1
5.0
3.0
1.0
4.0
미량
잔량		 -
-
2.0
2.2
1.5
1.0
1.5
0.6
1.0
3.0
5.0
5.0
1.0
0.1
5.0
3.0
1.0
4.0
미량
잔량		 -
3000 IU
2.0
2.2
1.5
1.0
1.5
0.6
1.0
3.0
5.0
5.0
1.0
0.1
5.0
3.0
1.0
4.0
미량
잔량
합계 100 100 100
제형예 5. 마사지 크림
마사지 크림의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음 표 11과 같이 제조하였다.
성분 함량(단위:중량%)
나도개감채 추출물
친유형 모노스케아린산 글리세린
스테아릴알콜
스테아린산
폴리솔베이트 60
솔비탄스테아레이트
이소스테아릴이소스테레이트
스쿠알란
광물유
디메치콘
히드록시에칠셀룰로오스
글리세린
트리에타올아민
방부제, 향, 색소
증류수		 3.0
1.5
1.5
1.0
1.5
0.6
5.0
5.0
35.0
0.5
0.12
6.0
0.7
미량
잔량
합 계 100
제형예 6. 에센스
에센스의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음 표 12와 같이 제조하였다.
성분 함량(단위:중량%)
나도개감채 추출물
글리세린
베타인
피이지 1500
알란토인
DL-판테놀
이.디.티.에이-2Na
벤조페논 - 9
히드록시에칠 셀룰로오스
소듐히아루로네이트
카르복시비닐폴리머
트리에탄올아민
옥틸도데칸올
옥틸도데세스 -16
에탄올
방부제, 향, 색소
증류수		 5.0
10.0
5.0
2.0
0.1
0.3
0.02
0.04
0.1
8.0
0.2
0.18
0.3
0.4
6.0
미량
잔량
합계 100
제형예 7. 팩
팩의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음 표 13과 같이 제조하였다.
성 분 함량(단위:중량%)
나도개감채 추출물
폴리비닐알콜
셀룰로오스 검
글리세린
피이지1500
사이크로데스트린
DL - 판테놀
알란토인
글리시리진산모노암모늄
니코틴아미드
에탄올
피이지 40 경화피마자유
향, 색소, 방부제
증류수		 3.0
15.0
0.15
3.0
2.0
0.15
0.4
0.1
0.3
0.5
6.0
0.3
미량
잔량
합계 100
실험예 7. 나도개감채 추출물의 피부 주름 개선효과
본 발명의 나도개감채 추출물을 함유하는 화장료의 피부 주름 개선효과에 대한 임상실험을 실시하였다. 임상시험은 각 화장료의 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다.
실험은 나도개감채 추출물을 함유하고 있는 상기 표 10에 제시한 제형예 4의 영양 크림 및 나도개감채 추출물을 정제수로 대체한 크림을 비교 제형예 1, 주름 개선 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 레티놀을 비교 제형예 2로 하여, 사람을 대상으로 화장료의 사용으로 인한 피부 주름 개선 효과를 확인 및 비교 평가하였다.
이러한 비교 평가 실험에 사용된 상기의 제형예 4 및 비교 제형예 1의 화장료는 크림 형태이고, 그 조성은 표 10에 나타낸 바와 같다. 60명 (20세 - 35세)의 여성을 대상으로 실험군을 각각 20명씩 제형예 4 실험군, 비교 제형예 1 처리군, 비교 제형예 2 처리군의 세 그룹으로 나누고, 얼굴 양쪽면을 사용하여 2개월 후의 주름 개선 효과를 육안으로 평가하여 주름 개선 정도를 확인하였다.
실험 완료 후 피부 주름 개선 효과는 제품 사용 전과 3개월간 사용 후의 각 피검자의 주름 개선 효과를 숙련된 의사의 육안 관찰을 통하여 평가하였다. 실험 결과는 하기의 표 14에 나타낸 바와 같다.
[표 14]
나도개감채 추출물을 함유한 영양크림의 주름 개선 효과(육안평가)
주름 개선 효과 유효율(%)
우수 약간 없음
제형예 4 (나도개감채 추출물) 24 4 2 93.3
비교 제형예 1(정제수) 3 4 23 23.3
비교 제형예 2(레티놀) 22 4 4 86.6
실험 결과에 의하면, 본 발명에 따른 나도개감채 추출물을 함유한 제형예 4의 크림은 나도개감채 추출물을 함유하지 않은 비교 제형예 1의 크림에 비하여 3.4배 이상 우수한 주름개선 효과를 보여주었다. 주름개선효과가 있는 것으로 알려진 물질인 레티놀을 함유하는 비교 제형예 2의 크림보다도 우수한 주름 개선 효과를 나타냄을 알 수 있었다. 또한 본 발명의 화장료 조성물을 피부에 도포한 피검자들의 피부에서는 피부자극을 관찰할 수 없었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (8)

  1. 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물.
  2. 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부주름 개선용 화장료 조성물.
  3. 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물.
  4. 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선에 의한 피부 손상 억제용 화장료 조성물.
  5. 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 자극 완화용 화장료 조성물.
  6. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 나도개감채 추출물은 상기 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.001 ~ 30.0 중량% 함유되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 나도개감채 추출물은 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법, (b) 초임계 추출법, (c) 초음파 추출법 또는 (d) 미생물로부터의 발효나 자연발효대사를 이용하여 발효하여 추출한 것을 이용하여 추출한 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  8. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항의 화장료 조성물을 인간의 피부에 적용하여, 항산화 효과, 피부 주름 개선효과, 피부 미백 효과 또는 자외선에 의한 피부 손상 억제 또는 자극 완화 효과를 얻는 것을 특징으로 하는 화장 방법.
KR1020090132653A 2009-12-29 2009-12-29 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 KR101086227B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020090132653A KR101086227B1 (ko) 2009-12-29 2009-12-29 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020090132653A KR101086227B1 (ko) 2009-12-29 2009-12-29 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20110076055A true KR20110076055A (ko) 2011-07-06
KR101086227B1 KR101086227B1 (ko) 2011-11-23

Family

ID=44916003

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020090132653A KR101086227B1 (ko) 2009-12-29 2009-12-29 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101086227B1 (ko)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105746222A (zh) * 2016-04-05 2016-07-13 金陵科技学院 一种智能磁悬浮旋转式花盆
WO2018004212A1 (ko) * 2016-06-27 2018-01-04 (주)아모레퍼시픽 피부 항산화 조성물
KR102298390B1 (ko) * 2020-12-02 2021-09-03 동의대학교 산학협력단 히알루론산을 함유하여 우수한 피부 수복효과를 나타내는 조직 수복용 조성물

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4851224A (en) 1986-06-05 1989-07-25 Carrington Laboratories, Inc. Process for preparation of aloe products
US6719964B1 (en) 2001-07-07 2004-04-13 Premier Specialties Inc. Compositions for prevention of chemically induced irritation and discolorations and methods of using same

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105746222A (zh) * 2016-04-05 2016-07-13 金陵科技学院 一种智能磁悬浮旋转式花盆
WO2018004212A1 (ko) * 2016-06-27 2018-01-04 (주)아모레퍼시픽 피부 항산화 조성물
CN109414398A (zh) * 2016-06-27 2019-03-01 株式会社爱茉莉太平洋 用于皮肤的抗氧化组合物
US10952956B2 (en) 2016-06-27 2021-03-23 Amorepacific Corporation Antioxidant composition for skin
KR102298390B1 (ko) * 2020-12-02 2021-09-03 동의대학교 산학협력단 히알루론산을 함유하여 우수한 피부 수복효과를 나타내는 조직 수복용 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
KR101086227B1 (ko) 2011-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101176529B1 (ko) 황칠나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101086225B1 (ko) 청미래덩굴 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101176528B1 (ko) 배암차즈기 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR100874114B1 (ko) 개여뀌 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR100874115B1 (ko) 백리향 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101086227B1 (ko) 나도개감채 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101176526B1 (ko) 조팝나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR20110121775A (ko) 금꿩의다리 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101775485B1 (ko) 계혈등 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101817129B1 (ko) 구주소나무 솔방울 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR100816267B1 (ko) 천상초 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR20140056967A (ko) 배롱나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101176525B1 (ko) 벌나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR20110122448A (ko) 지리터리풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101323068B1 (ko) 아왜나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR100891387B1 (ko) 히어리 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR20130026678A (ko) 참지네고사리 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 이를 이용하는 화장방법
KR101086226B1 (ko) 매미꽃 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR20120000673A (ko) 빗죽이나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR102009204B1 (ko) 구주소나무 솔방울 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101142009B1 (ko) 수송나무 추출물을 활성성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101176522B1 (ko) 복주머니란 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101497501B1 (ko) 들메나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101445643B1 (ko) 닻꽃 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101207559B1 (ko) 윤노리나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
LAPS Lapse due to unpaid annual fee