KR20100081826A - 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트 - Google Patents

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KR20100081826A
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quercetin
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KR1020090001237A
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정유훈
김미경
박광수
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건국대학교 산학협력단
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Abstract

본 발명은 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트 (quercetin-amino acid conjugate)에 관한 것이다.
케르세틴, 프로드러그 (prodrug), QC12, 약동력학적 성질 (pharmacokinetic property)

Description

케르세틴-아미노산 콘쥬게이트{Quercetin-amino acid conjugates with improved pharmacokinetic properties compared with quercetin}
본 발명은 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트 (quercetin-amino acid conjugate)에 관한 것으로 더욱 상세하게는 케르세틴에 알라닌, 발린, 라이신, 페닐알라닌, 아스파르트산, 메티오닌 및 글루탐산으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 잔기가 부착된 개량된 수용성, 안정성 및 흡수성 등을 가지는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트에 관한 것이다
케르세틴은 식물유래 플라보노이드계 화합물로서 사과, 양파, 포도 등에 풍부하며 항염, 진통, 피로회복, 신경안정 등을 위한 건강 보조제로서 판매되고 있다. 케르세틴은 항산화 효과, 항암 효과, 항바이러스 효과를 비롯한 여러 가지 다양한 생리활성을 갖는 것으로 공지되어 있다(Conquer, J. A.; Maiani, G.; Azzini, E.; Raguzzini, A.; Holub, B. J. J. Nutri. 1998, 128, 593-597; Lee, E. -J.; Choi, E. -J.; Choi, C. -I.; Park, J. -S.; Sung. M. -K. FASEB J. 2007, 21, 847.22; Ohnishi, E.; Bannai, H. Antiviral Res. 1993, 22, 327-331; Davis, J. M.; Murphy, E. A.; McClellan, J. L.; Carmichael, M. D.; Gangemi. J. D. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2008, 295, 505-509; Akbay, P.; Basaran, A. A.; Undeger, U.; Basaran. N. Phytother. Res. 2003, 17, 3437; Ferry, D. R.; Smith, A.; Malkhandi, J.; Fyfe, D. W.; deTakats P. G.; Anderson, D.; Baker, J.; Kerr, D. J. Clin Cancer Res, 1996, 2, 659-668).
그러나 케르세틴은 수용성이 낮아 소장에서의 흡수도가 매우 떨어지는 단점이 있다. 소장에서 흡수된 후에 케르세틴은 장세포 전이효소 (enterocytic transferase)에 의해 페놀 수산화기에 메틸기, 술폰기, 그리고 글루쿠론산 등이 결합된 대사체로 전환되는데, 일반적으로 케르세틴 대사체는 케르세틴이 가지는 생리활성을 가지지 못하며 ABC/MDR translocator에 의해 소장강으로 배출된 후 대장 미생물에 의해 분해된다. 따라서, 낮은 수용성, 낮은 세포흡수도, 그리고 빠른 대사작용으로 인해 극히 제한된 양의 케르세틴만이 기저측막과 혈관으로 이동하게 됨으로써 케르세틴은 다양한 생리활성에도 불구하고 낮은 생물학적 이용 가능성 (bioavailability)을 보이는 문제점을 가지고 있다(Wei, Y.; Zhao, X.; Kariya, Y.; Fukata, H.; Teshigawara, K.; Uchida, A. Cancer Res. 1994, 54, 4952-4957; Chebil, L.; Humeau, C.; Anthoni, J.; Dehez, F.; Engasser, J. -M. Ghoul, M. J. Chem. Eng. Data, 2007, 52, 1552-1556).
따라서, 케르세틴의 순환계 내에서의 농도를 증가시켜 약물의 생물학적 이용 가능성 (bioavailability)을 높이기 위해서는 케르세틴의 수용성을 높임과 동시에 소장에서의 흡수를 원활하게 하고, 장세포 전이효소 (enterocytic transferase)에 의한 케르세틴의 대사를 방해할 필요가 있다.
케르세틴의 프로드러그를 개발하여 약동력학적 특성을 개선하기 위한 많은 노력이 있어 왔으나 대부분의 경우에 케르세틴 에스테르의 형태를 갖는 프로드러그들은 화학적 가수분해 및 가수분해 효소에 의한 가수분해에 의해 빠르게 케르세틴으로 전환되는 특성을 가지고 있어 매우 제한된 효용을 가지고 있었다. 케르세틴 프로드러그의 안정성을 향상시키기 위해 에스테르보다 안정한 형태인 카바메이트(carbamate)류의 프로드러그인 케르세틴 글리신 카바메이트(quercetin-glycine carbamate prodrug) QC12 [화학식 2]가 개발되어 임상 실험된 바 있다 (Mulholland, P. J.; Ferry, D. R.; Anderson, D.; Hussain, S. A.; Young, A. M.; Cook, J. E.; Hodgkin, E.; Seymour, L. W.; Kerr, D. J. Ann. Oncol. 2001, 12, 245.) QC12는 케르세틴과 비교하여 월등히 향상된 수용성을 가지고 있으며 37 ℃ 물에서 천천히 케르세틴으로 가수분해(반감기 16.9 시간) 되는 등 프로드러그로서의 우수한 특성을 가지고 있으나 생체 내에서 가수분해 효소에 의해 매우 빠르게 가수분해(반감기 0.39 시간) 되어 경구 투여제로 개발될 수 없는 한계를 가지고 있었다.
Figure 112009000898491-PAT00001
이에 본 발명자들은 케르세틴 프로드러그의 빠른 가수분해를 극복하기 위해 케르세틴에 글리신 이외에 다른 아미노산을 결합시킨 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 개발하고자 예의 노력한 결과, 약물동력학적 (pharmacokinetics) 특성이 월등히 개선된 케르세틴 프로드러그를 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 상기의 문제점을 해결하고 상기의 필요성에 의하여 안출된 것으로서 본 발명의 목적은 케르세틴의 수용성, 세포흡수도 및 대사안정성 등의 약동력학적 특성을 개선하기 위한 방법을 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 케르세틴에 알라닌, 발린, 라이신, 페닐알라닌, 아스파르트산, 메티오닌 및 글루탐산으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 잔기가 부착된 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 제공한다.
본 발명의 일 구체예에 있어서, 상기 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 하기 화학식에 기재된 화합물인 것을 특징으로 하는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트:
Figure 112009000898491-PAT00002
상기 화학식에서 R1은 CH3, CH(CH3)2, (CH2)4NH2, CH2Ph, CH2CO2H, CH2CH2SCH3, 및CH2CH2CO2H로 구성된 군으로부터 선택되고, R2는 OH, (S)NHCH(CH2CO2H)CO2H, 또는 (S)NHCH(CH2CH2CO2H)CO2H인 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.
본 발명의 바람직한 일 실시예에 있어서, 상기 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 케르세틴에 카르복실산을 잔기로 가지는 아미노산이 부착된 것이 바람직하고, 상기 카르복실산을 잔기로 가지는 아미노산은 글루탐산, 또는 아스파르트산인 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다.
또한 본 발명은 상기 본 발명의 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 유효성분으로 하는 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 본 발명의 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 유효성분으로 하 는 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 "프로드러그"란 어떤 약물을 화학적으로 변화시켜 물리·화학적 성질을 조절한 약물로서, 그 자체는 생리 활성을 나타내지 않지만 투여 후 체내에서 화학적으로, 혹은 효소의 작용에 의하여 원래의 약물로 바뀌어 약효를 발휘한다.
또한 본 발명은 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트을 함유한 약제, 음식물, 화장품 등의 조성물에 관한 것이다.
케르세틴은 통상적으로 루틴 (rutin)으로서 식물계에 널리 분포되어 있는데, 케르세틴은 식물로부터 추출 분리하여 수득한 배당체를 산 또는 효소로 가수분해하여 당을 분리함으로써 제조된다. 케르세틴은 화학 구조상 큰 공명구조를 가지고 있고, 산화 방지 작용, 비타민 P 작용, 자외선 흡수 작용등을 가지고 있으므로 음식물, 의약품, 화장품 등에 그 응용이 기대되고 있다.
본 발명에서 사용되는 케르세틴으로서는 루틴을 가수분해하여 제조한 것이어도 좋고 프로폴리스의 경우처럼 케르세틴과 기타 플라보노이드와의 혼합물이어도 좋다.
프로폴리스 유래의 케르세틴으로서는 고도로 정제한 것 뿐만 아니라 프로폴리스를 친수성 유기용매로 추출하여 제조한 엑스제 또는 이것으로부터 탈랍 처리 (dewaxing)한 부분 정제물, 또는 프로폴리스를 끓인 현탄액, 프로폴리스를 알칼리성 용액으로 추출하여 제조한 엑스제 등을 적절히 사용할 수 있다. 또한 필요에 따라서는 케르세틴의 시판품을 사용하는 것도, 그리고 화학적으로 합성하여 사용하는 것도 가능하다.
또한 본 발명의 반응 중의 케르세틴의 분해를 방지하기 위하여 반응을 될 수 있는한 차광, 또는 혐기조건 하에서 실시하는 것이 바람직하다.
본 발명의 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트는 질환 치료용 약제, 비타민 P 강화제, 안전성이 큰 천연형의 황색 착색제, 산화방지제, 탈취제, 안정제, 품질 개량제, 항균제, 예방제, 자외선 흡수제 등으로서 기타 원제료 등과 배합하여 제약, 음식물, 기호물, 사료, 화장품, 플라스틱 제품 등의 용도에 유리하게 이용할 수 있다.
본 발명의 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트의 정제방법은 반응물을 예컨대 실리카겔 을 충전한 칼럼에 공급하여 유기 용매 예를 들자면 디클로로메탄과 아세톤 혼합액 등을 통과시키면 정제하고, 더욱이 이것을 건조하여 분말화함으로써 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트 분말상 제품을 얻게 된다.
이와 같이하여 수득되는 본 발명의 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트는 다음과 같은 특징을 가지고 있다.
(1) 일반 케르세틴과 비교하여 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트는 수용성이 매우 크다.
(2) 일반 케르세틴과 비교하여 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트는 세포 투과성이 크다.
(3) 일반 케르세틴에 비하여 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트는 화학적/효소적 안정성이 크다.
이들 특징으로부터 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트는 수용성, 안정성 등이 높은 항균제, 예방제, 치료제, 비타민 P 강화제 뿐만 아니라, 황색 착색제, 산화 방지제, 탈취제, 안정제, 품질 개량제, 자외선 흡수제 등으로서 기타 원재료 등과 배합하여 음식물, 기호물, 사료, 항감수성 질환 치료제, 피부 미화제와 피부 색백제 등의 화장품, 또 플라스틱 제품 등에 유리하게 이용할 수 있다.
그리고 본 발명의 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트는 화학적/효소적 안정성을 가지므로 보통 일반적인 음식물, 기호물, 예컨대 조미료, 과자, 빙과, 음료, 스프레드, 페이스트, 절임 제품, 병 및 통조림, 육가공 제품 어육 및 수산 가공품, 우유 및 란 가공품, 야채 가공품, 과실 가공품, 곡류 가공품 등에 광범위하게 이용할 수 있다.그리고 가축, 가금, 꿀벌, 누에, 물고기 등의 사육 동물용의 사료 등에 비타민 P 강화제 또는 기호성 향상 등의 목적으로 배합하여 이용할 수도 있다.
기타 담배, 토로치, 간유 드롭, 복합 비타민제, 설하제, 구중청량제, 구중향정, 가아글, 경관 영양제, 생약, 내복약, 주사제, 치마제, 립스틱, 립 크림, 햇빛 그을음 방지등 각종 고상, 페이스트상 및 액상의 기호물, 감수성 질환의 예방제, 치료제, 즉 항감수성 질환제, 피부 미화제, 피부 색백제, 육모제 등의 화장품 등에 배합하여 이용하는 것도 유리하게 실시할 수 있고, 더욱이 자외선 흡수제, 열화 방지제등으로서 플라스틱 제품등에 배합하여 이용하는 것도 유리하게 실시할 수 있다.
그리고 본 발명에서 말하는 '감수성 질환' 이라 함은 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트로 예방되거나 치료되는 질환으로서, 예컨대 바이러스성 질환, 세균성 질 환, 외상성 질환, 면역질환, 루마티스, 당뇨병, 순환기 질환, 악성 종양, 신경성 질환 등인 것이 바람직하나 이에 한정되지 아니한다. 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트의 감수성 질환 예방제 및/또는 치료제는 그 목적에 따라 형상을 자유로 선택할 수 있다. 예를 들자면 분무제, 점안제, 점비제, 가아글제,주사제 등의 액제와, 연고, 찜질제, 크림 등과 같은 페이스트제 및 분제, 과립, 캡슐제, 정제 등의 고형제 등이 있다.
제제화에 있어서는 필요에 따라 기타 성분, 예를 들자면 치료제, 생리활성 물질, 항생물지르 보조제, 증량제, 안정제, 착색제, 착향제 등의 중에서 1 종 또는 2 종 이상과 병용하는 것도 가능하다.
감수성 질환의 예방제 및/또는 치료제의 투여량은 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트의 함량, 투여 경로 및 투여 빈도에 따라 적절히 조절할 수 있는데, 통상적으로는 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트로서 건조 고형분 기준으로 성인 1 일당 약 0.001∼10.0g의 범위가 적당하다.
그리고 화장품의 경우에서도 대체로 앞에 나온 예방제 및/또는 치료제에 준하여 본 발명의 케르세틴-아미노산 콘쥬케이트를 이용할 수 있다.
케르세틴-아미노산 콘쥬케이트를 이용하는 방법으로서는 이들 제품이 완성되기까지의 공정에 있어서, 예컨대 혼화, 반죽, 용해, 침지, 침투, 산포, 도포, 분무, 주입등 공지의 방법을 적절히 선택한다.
소장에 분포하는 human peptide transporter (hPepT1)는 아미노산 및 디펩티드(dipeptide)를 선택적으로 인식하여 아미노산을 소장으로 운반하는 역할을 하는 데, 아미노산을 흡수율이 낮은 drug에 부착한 drug-아미노산 콘쥬게이트(conjugate) 역시 hPepT1에 의해 소장으로 운반된다는 사실이 공지되어있다. 또한, 아미노산은 극성이 큰 분자이므로 케르세틴에 도입하였을 때 수용성 역시 높여줄 수 있으므로 본 발명에서는 아래 화학식 1과 같이 케르세틴에 다양한 아미노산을 도입한 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트(quercetin-amino acid conjugate)를 제작하여 케르세틴의 수용성을 높임은 물론, hPepT1에 의한 수동적 이송(passive transport)을 유도함으로써 케르세틴의 소장으로의 흡수를 원활히 할 수 있음을 기대하였다. 또한, 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 소장에서 흡수될 때 프로드러그(prodrug)의 구조를 유지하나 순환계에서는 케르세틴으로 전환됨으로써 장세포 전이효소에 의한 케르세틴의 대사를 억제하도록 케르세틴의 카바메이트 형태로 고안되었다.
최종적으로 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트들의 수용성, 세포흡수도 및 화학적/효소적 안정성 등에 관한 약물동력학 (pharmacokinetics) 성질을 평가함으로써 케르세틴 프로드러그로서의 유용성을 입증하고 본 발명을 완성하였다.
Figure 112009000898491-PAT00003
따라서, 본 발명은 케르세틴과 다양한 아미노산의 콘쥬게이트를 형성함으로써 케르세틴의 수용성, 세포흡수도 및 화학적/효소적 안정성 등에 관한 약물동력학 (pharmacokinetics) 성질을 개선하는 것을 제공한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 합성하였다. 상기 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 바람직하게는 화학식 1에 기재된 화합물이나 이에 한정되지 아니한다.
구체적으로, 도 1은 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 시중 구입 가능한 출발물질로부터 합성하는 과정을 그림으로 나타낸 것이다.
카르복실산에 가리움기가 도입되어 있는 7개의 아미노산을 bis(4-nitrophenyl) carbonate와 DIPEA (diisopropyl ethyl amine) 존재하에서 반응시키면 아미노산 카바메이트들로 변환된다. 이 때, 테트라히드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 용매로 사용하는 것보다 테트라히드로퓨란과 N,N-디메틸포름아미드 (N,N-dimethylformamide)를 섞어서 사용하면 수율을 높일 수 있다. 얻어진 아미노산 카바메이트를 DIPEA 존재하에서 케르세틴과 반응시키면 아미노산의 카르복실기에 가리움기가 도입된 케르세틴과 아미노산의 콘쥬게이트로 전환되는데, 이 때 케르세틴의 4‘ 위치(화합물 2, 도 1)와 3’ 위치(화합물 3, 도 1)에 아미노산이 결합된 화합물들이 3:1의 비율로 분리되지 않은 채 혼합물로 얻어진다. 각각의 이성질체의 구조는 1H NMR 스펙트럼을 통해 분석되었다, 1H NMR 스펙트럼으로 하기 [화학식 3]으로 표기되는 2는 케르세틴과 비교하였을 때, 4‘-위치에 전자끌게인 카바메이트기가 치환됨으로 인해 옆에 위치한 5’ 수소의 chemical shift (δH5')가 0.3 ppm down-field shift 함을 확인할 수 있으며, 같은 원리로 3‘-위치에 카바메이트기가 치환된 3의 경우에는 카바메이트의 ortho- 및 para- 위치에 있는 2’ 수소 (δH6') 및 6‘ 수소 (δH2')의 chemical shift가 각각 0.3 ppm과 0.23 ppm 만큼 down-field shift함을 확인할 수 있다. 2와 3의 혼합물을 강산인 트리플루오로아세트산 (trifluoroacetic acid)과 반응 시키면 아미노산의 카르복실산의 가리움기가 제거되어 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트인 Qu-A ~ Qu-E로 전환된다 (도 1). 여기서 얻어진 케르세틴-알라닌 콘쥬게이트 (Qu-A)에 아스파르트산 그리고 글루타민산을 각각 EDC [1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide]와 HOBT (N-hydroxybenzotriazole) 존재하에 결합시키고, 강산인 트리플루오로아세트산 (trifluoroacetic acid)과 반응시키면 케르세틴-디펩티드 콘쥬게이트 Qu-AD와 Qu-AE로 전환된다.
Figure 112009000898491-PAT00004
이하, 합성된 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 약동력학적 특성을 분석한 결과를 상세히 설명한다.
합성된 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 수용성을 측정한 결과는 도 2에 나 타낸 바와 같다. 케르세틴과 비교하였을 때, 9개의 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트들 모두 용해도가 높아졌음을 확인 할 수 있는데, 낮게는 6배 (Qu-K)에서부터 높게는 52배 (Qu-E)에 이르기까지 케르세틴 보다 월등히 높은 수용성을 가짐을 규명하였다.
도 3은 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 세포투과성을 측정한 결과이다. 케르세틴과 비교하였을 때, 9개의 콘쥬게이트들 모두 투과성이 좋아졌다는 것을 알 수 있는데, 특히 카르복실산을 잔기로 갖는 아미노산이 부착된 콘쥬게이트들(Qu-D, Qu-E)과 알라닌-글루탐산 디펩티드를 갖는 콘쥬게이트(Qu-AE)의 세포투과성이 케르세틴에 비해 각각 2,9 배, 3.0 배, 그리도 5.2 배 등으로 월등히 향상됨을 알 수 있다.
케르세틴-아미노산 콘쥬게이트들은 pH 7.0의 PBS (phosphate buffered saline) buffer에서 12 시간동안 가수분해되지 않고 안정하게 유지되었으며, 가수분해 효소에 대한 안정성은 도 4에 나타낸 바와 같다. 즉, 세포 용해물(cell lysate)이 포함하는 다양한 가수분해 효소에 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트들을 노출시켰을 때, 콘쥬게이트들이 가수분해되어 케르세틴으로 전환되는 반응의 속도를 반감기의 표로 도 4에 나타냈다. 도 4에서 보이는 바와 같이 Qu-V, Qu-A 및 Qu-F와 같은 콘쥬게이트는 매우 빠르게 가수분해 되지만, Qu-D, Qu-M, Qu-AE 등은 약 1시간 30분의 반감기를 가지며, Qu-K와 Qu-E는 세 시간의 반감기를 갖는다. QC12가 생체 내에서 가수분해 효소에 의해 수분해되는 속도(반감기 0.39 시간)와 비교해 보았을 때, 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트들의 반감기는 세 배 이상 느려진 것을 의 미하며 따라서, 가수분해 효소에 대한 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 안정성이 확연히 증가한 것을 보여준다.
이상과 같이 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 케르세틴 및 QC12에 비해 향상된 약동력학적 특징을 가지는 바, 그 중 가장 유효한 화합물인 Qu-E와 케르세틴, 그리고 QC12의 약동력학적 성질을 비교하면 도 5와 같다.
이상 상세히 기술한 바와 같이, 본 발명은 플라보노이드계 화합물인 케르세틴의 프로드러그로서 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 제조하여 이들의 약동력학적 특성을 검증하였다. 특히 예를 들어 케르세틴-글루탐산 콘쥬게이트 (Qu-E)는 수용성, 가수분해 효소에 대한 안정성, 세포투과성 모두 증가하여 케르세틴 프로드러그로서 이용 가능함을 검증하였다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 아니하는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. tert -부틸-아미노산-케르세틴 카바메이트 콘쥬게이트 (도 1의 2와 3)의 제조:
아미노산 tert-부틸 에스테르 [H-Ala-OtBuHCl (도 1의 1a), H-Val-OtBuHCl (도 1의 1b), H-Lys(Boc)-OtBuHCl (도 1의 1c), H-Phe-OtBuHCl (도 1의 1d), H-Asp(OtBu)-OtBuHCl (도 1의 1e), H-Met-OtBuHCl (도 1의 1f), H-Glu(OtBu)-OtBuHCl (도 1의 1g)] (3 mmol)을 무수 테트라히드로퓨란 (20 mL)에 녹인 후, bis(4-nitrophenyl) carbonate (3 mmol)와 N,N-디메틸포름아미드 (N,N-dimethylformamide) (6 mmol)을 첨가하여 얻어진 혼합물을 상온에서 12 시간동안 교반하였다. 이 혼합물에 케르세틴 (3 mmol)을 첨가한 후 다시 상온에서 12 시간동안 교반하였다. 반응물을 감압농축한 후 얻어진 농축액을 실리카겔 관컬럼크로마토그래피 (디클로로메탄 : 아세톤 = 6 : 1)로 정제하여 위치이성질체 형태인 tert-부틸-아미노산-케르세틴 카바메이트 콘쥬게이트 (2와 3)를 노란색 가루 형태로 얻었다:
1.1. 4'-O-CO-(알라닌-Ot부틸)-케르세틴 (2a), 3'-O-CO-(알라닌- Ot부틸)-케르세틴 (3a) (60% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 473.3 [M + H]+ Calcd for C23H23NO10: 473.13; For 2a, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.02-8.16 (m, 2H), 7.12 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.16-4.23 (m, 1H), 1.46 (s, 12H); For 3a, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.89 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 6.8, 1.8 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.16-4.23 (m, 1H), 1.46 (s, 12H).
1.2. 4'-O-CO-(발린-Ot부틸)-케르세틴 (2b), 3'-O-CO-(발린- Ot부틸)-케르세틴 (3b) (55% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 501.3 [M + H]+ Calcd for C25H27NO10: 501.16; For 2b, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.48 (s, 1H), 8.00-8.24 (m, 2H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.03-4.12 (m, 1H), 2.20-2.28 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.04 (s, 6H); For 3b, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.12 (s, 1H), 7.89 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.52(s, 1H), 6.28(s, 1H), 4.03-4.12 (m, 1H), 2.20-2.28 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.04 (s, 6H).
1.3. 4'-O-CO-[라이신(Boc)-Ot부틸]-케르세틴 (2c), 3'-O-CO-[라이신 (Boc)-Ot부틸]-케르세틴 (3c) (50% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 630.4 [M + H]+ Calcd for C31H38N2O12: 630.24; For 2c, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.03-8.10 (m, 2H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.16 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 3.12 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 2.88 (s, 4H), 1.79-1.93 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.41 (s, 9H); For 3c, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.16 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 3.12 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 2.88 (s, 4H), 1.79-1.93 (m, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.41 (s, 9H).
1.4. 4'-O-CO-(페닐알라닌-Ot부틸)-케르세틴 (2d), 3'-O-CO-(페닐 알라닌-Ot부틸)-케르세틴 (3d) (55% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 549.3 [M + H]+ Calcd for C29H27NO10: 549.16; For 2d, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.34-7.39 (m, 5H), 7.11 (d, J= 8.1 Hz. 1H), 6.56 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.41-4.45 (m, 1H), 3.12-3.22 (m, 2H), 1.46 (s, 9H); For 3d, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.10-7.29 (m, 6H), 6.56 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.41-4.45 (m, 1H), 3.12-3.22 (m, 2H), 1.46 (s, 9H).
1.5. 4'-O-CO-[아스파르트산(Ot부틸)-Ot부틸]-케르세틴 (2e), 3'-O-[아스파르트산(Ot부틸)-Ot부틸]-케르세틴 (3e) (60% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 573.3 [M + H]+ Calcd for C28H31NO12: 573.18; For 2e, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.08 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.49-4.54 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 2.04-2.06 (m, 2H), 1.48 (s, 6H); For 3e, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.90 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.49-4.54 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 2.04-2.06 (m, 2H), 1.48 (s, 6H).
1.6. 4'-O-CO-(메티오닌-Ot부틸)-케르세틴 (2f), 3'-O-CO-(메티오닌 -Ot부틸)-케르세틴 (3f) (55% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 533.2 [M + H]+ Calcd for C25H27NO10S: 533.14; For 2f, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.08 (s, 1H), 7.99-8.10 (m, 2H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.33-4.37 (m, 1H), 3.03-3.12 (m, 2H), 2.63-2.72 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.48 (s, 9H); For 3f, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.05(s, 1H), 7.90 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 6.6, 5.0 Hz, 1H), 7.29 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.33-4.37 (m, 1H), 3.03-3.12 (m, 2H), 2.63-2.72 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.48 (s, 9H).
1.5. 4'-O-CO-[글루탐산(Ot부틸)-Ot부틸]-케르세틴 (2g), 3'-O- [글루탐산(Ot부틸)-Ot부틸]-케르세틴 (3g) (60% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 587.3 [M + H]+ Calcd for C29H33NO12: 587.20; For 2g, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.00-8.10 (m, 2H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.38-4.44 (m, 2H), 2.35-2.59 (m, 4H), 1.48 (s, 6H); For 3g, 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.08 (s, 1H), 7.94 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.38-4.44 (m, 2H), 2.35-2.59 (m, 4H), 1.48 (s, 6H).
실시예 2. 아미노산-케르세틴 카바메이트 콘쥬게이트의 제조:
실시예 1의 tert-부틸-아미노산-케르세틴 카바메이트 콘쥬게이트 (도 1의 2와 3) (2.2 mmol)을 무수 디클로로메탄 (5 mL)에 녹인 후, 0℃로 냉각 시킨 상태에서 트리플루오로아세트산 (trifluoroacetic acid) (2 mL)을 첨가하고 상온에서 4시간 동안 교반한다. 이 혼합물을 감압농축한 후, 얻어진 농축액을 아세톤 (1 mL)에 녹이고 디클로로메탄 (10 mL)을 첨가하여 재결정한다. 이 결과물을 뷰흐너 감입 여과기 (Bor Hirsch funnel)를 이용하여 여과하고 디클로로메탄을 이용하여 씻어내어 케르세틴-아미노산 카바메이트 콘쥬게이트를 노란색 가루 형태로 얻었다:
2.1. Qu-A (95% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 418.2 [M + H]+ Calcd for C19H15NO10: 417.07; For Qu-A (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.00-8.06 (m, 2H), 7.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.27 (s,1H), 4.33-4.38 (m, 1H), 1.51 (s, 3H); For Qu-A (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.16-4.23 (m, 1H), 1.46 (s, 12H).
2.2. Qu-V (89% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 446.2 [M + H]+ Calcd for C21H19NO10: 445.10; For Qu-V (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.48 (s, 1H), 8.00-8.24 (m, 2H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.03-4.12 (m, 1H), 2.20-2.31 (m, 1H), 1.04 (s, 6H); For Qu-V (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.12 (s, 1H), 7.83 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.53(s, 1H), 6.28(s, 1H), 4.03-4.12 (m, 1H), 2.20-2.31 (m, 1H), 1.04 (s, 6H).
2.3. Qu-K (90% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 475.3 [M + H]+ Calcd for C22H22N2O10: 474.13; For Qu-K (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.00-8.03 (m, 2H), 7.15 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.26 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 3.77-3.90 (m, 2H), 1.84-2.00 (m, 4H), 1.67 (q, J = 7.06 Hz, 2H); For Qu-K (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.73 (dd, J = 6.8, 1.8 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.29 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 3.77-3.90 (m, 2H), 1.84-2.00 (m, 4H), 1.67 (q, J = 7.06 Hz, 2H).
2.4. Qu-F (90% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 494.3 [M + H]+ Calcd for C25H19NO10: 493.10; For Qu-F (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.34-7.37 (m, 5H), 7.11 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.51-4.59 (m, 1H), 3.12-3.33 (m, 2H); For Qu-F (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.10-7.29 (m, 6H), 6.57 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.51-4.59 (m, 1H), 3.12-3.33 (m, 2H).
2.5. Qu-D (92% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 462.2 [M + H]+ Calcd for C20H15NO12: 461.06; For Qu-D (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.08 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.68-4.69 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 5.4 Hz, 2H); For Qu-D (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.90 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.68-4.69 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 3.00 (d, J = 5.4 Hz, 2H).
2.6. Qu-M (90% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 478.3 [M + H]+ Calcd for C21H19NO10S: 477.07; For Qu-M (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.08 (s, 1H), 7.98-8.10 (m, 2H), 7.13 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.52-4.56 (m, 1H), 2.63-2.72 (m, 2H), 2.02-2.05 (m, 2H), 1.69 (s, 3H); For Qu-M (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.05 (s, 1H), 7.90 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.52-4.56 (m, 1H), 2.63-2.72 (m, 2H), 2.02-2.05 (m, 2H), 1.69 (s, 3H).
2.7. Qu-E (88% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 476.2 [M + H]+ Calcd for C21H17NO12: 475.08; For Qu-E (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.00-8.10 (m, 2H), 7.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.38-4.44 (m, 2H), 2.35-2.59 (m, 4H); For Qu-E (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.08 (s, 1H), 7.94 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.38-4.44 (m, 2H), 2.35-2.59 (m, 4H).
실시예 3. 디펩티드-케르세틴 카바메이트 콘쥬게이트 (Qu-AD, Qu-AE)의 제조:
알라닌-케르세틴 카바메이트 콘쥬게이드 (Qu-A) (2 mmol)를 N,N-디메틸포름아미드 (4 mL)에 녹인 후, 1-hydroxybenzotriazole (HOBT) (4 mmol)과 H-Glu(OtBu)-OtBuHCl (2 mmol) 또는 H-Asp(OtBu)-OtBuHCl (2 mmol)을 첨가한다. 그리고 이 혼합물에 1-ethyl-3-(3’-dimethylaminopropyl)carbodiimide (EDCI) (2 mmol)을 첨가한다. 이 혼합물을 3일 동안 0 ℃에서 교반한다. 이 반응물을 감압농축한 후 얻어진 농축액을 실리카겔 관컬럼크로마토그래피 (디클로로메탄 : 아세톤 = 6 : 1)로 정제하여 위치이성질체 형태인 tert-부틸-디펩티드-케르세틴 카바메이트 콘쥬게이트를 노란색 가루 형태로 얻었다. 이 화합물 (1.8 mmol)을 무수디클로로메탄 (5 mL)에 녹인 후, 0℃로 냉각 시킨 상태에서 트리플루오로아세트산 (trifluoroacetic acid) (2 mL)를 첨가하고 상온에서 4시간 동안 교반한다. 이 혼합물을 감압농축한 후, 얻어진 농축액을 아세톤 (1 mL)에 녹이고 디클로로메탄 (10 mL)을 첨가하여 재결정한다. 이 결과물을 뷰흐너 감입 여과기 (Bor Hirsch funnel)를 이용하여 여과하고 디클로로메탄을 이용하여 씻어내어 펩티드-케르세틴 카바메이트 콘쥬게이트를 노란색 가루 형태로 얻었다:
3.1. Qu-AD (90% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 547.3 [M + H]+ Calcd for C24H22N2O13: 546.11; For Qu-AD (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.16 (s, 1H), 7.96-8.00 (m, 2H), 7.11 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.50-4.58 (m, 1H), 4.30-4.36 (m, 1H), 2.40-2.50 (m, 4H), 1.46 (s, 3H); For Qu-AD (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.09 (s, 1H), 7.88 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 8.7 Hz. 1H), 7.31 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.50-4.58 (m, 1H), 4.30-4.36 (m, 1H), 2.40-2.50 (m, 4H), 1.46 (s, 3H).
3.2. Qu-AE (92% yield): LC/MS (ESI) m/z Found: 533.3 [M + H]+ Calcd for C23H20N2O13: 532.10; For Qu-AE (4'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.14 (s, 1H), 8.02-8.06 (m, 2H), 7.11 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.33-4.42 (m, 2H), 2.35-2.61 (m, 2H); For Qu-AE (3'-isomer), 1H NMR (400 MHz, Acetone-d6) δ (ppm) 12.08 (s, 1H), 7.92 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.33-4.42 (m, 2H), 2.35-2.61 (m, 2H).
실시예 4. 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 수용성 검증:
9개의 콘쥬게이트들을 각각 디메틸설폭사이드 (DMSO, dimethyl sulfoxide)에 녹이고 99%의 PBS 버퍼로 묽혀 100 , 250 , 500 , 1000 , 1500 , 2000 그리고 2500 의 용액으로 만든다. 이들을 96 well 플레이트에 250 ㎕ 씩 옮긴 후, 용해도 측정 장비인 NEPHELOstar를 이용하여 용해도를 측정한다.
실시예 5. 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 세포투과성 검증:
96-well multiScreen Caco-2 plate에 MDCK cell을 2.5×104 cells/well 로 배양한다. 이 플레이트 (plate)를 37 ℃, 5% CO2 에서 2~4일 동안 배양한다. 모노레이어(monolayer)가 형성되었는지 알기 위하여 Millicell-ERS voltohmmeter를 이용하여 저항을 측정한다. 이때의 저항은 991~1055 Ω 정도여야 한다. donor 플레이트에 1% 디메틸설폭사이드에 녹아있는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트들을 첨가하여 2 시간 후에 UV/VIS (340 nm)를 이용하여 투과성을 측정한다.
실시예 6. 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 안정성 검증:
96-well 플레이트에 MDCK cell을 2.5×104 cells/well 하루동안 배양한다. 여기에 라이시스 (lysis) 버퍼 (1 mM)를 첨가하고 1시간 후, 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 첨가하여 37 ℃에서 배양한다. 매 30분 마다 HPLC 분석을 통해 남아있는 양을 분석하여 반감기를 측정한다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
도 1은 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 제조 방법을 요약해 보여준다.
도 2는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 수용성을 설명한다.
도 3은 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 세포 투과성을 설명한다.
도 4는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트의 세포용해물(cell lysate)에서의 안정성을 반감기의 표로 나타내었다.
도 5는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트중 가장 우수한 약동력학적 특성을 보이는 케르세틴-글루탐산 콘쥬게이트(Qu-E)와 케르세틴, QC12의 약동력학적 성질에 대한 비교를 표로 나타내었다.

Claims (10)

  1. 케르세틴에 알라닌, 발린, 라이신, 페닐알라닌, 아스파르트산, 메티오닌 및 글루탐산으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 잔기가 부착된 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 하기 화학식에 기재된 화합물인 것을 특징으로 하는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트:
    Figure 112009000898491-PAT00005
    상기 화학식에서 R1은 CH3, CH(CH3)2, (CH2)4NH2, CH2Ph, CH2CO2H, CH2CH2SCH3, 및 CH2CH2CO2H로 구성된 군으로부터 선택되고, R2는 OH, (S)NHCH(CH2CO2H)CO2H, 또는 (S)NHCH(CH2CH2CO2H)CO2H.
  3. 제 1항 또는 제2항에 있어서, 상기 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 케르세틴에 카르복실산을 잔기로 가지는 아미노산이 부착된 것을 특징으로 하는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트.
  4. 제 3항에 있어서, 상기 카르복실산을 잔기로 가지는 아미노산은 글루탐산, 또는 아스파르트산인 것을 특징으로 하는 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트.
  5. 제1항 또는 제2항의 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 유효성분으로 하는 조성물.
  6. 제 5항에 있어서, 상기 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 케르세틴에 카르복실산을 잔기로 가지는 아미노산이 부착된 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 카르복실산을 잔기로 가지는 아미노산은 글루탐산, 또는 아스파르트산인 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제1항 또는 제2항의 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트를 유효성분으로 하는 약학 조성물.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 케르세틴-아미노산 콘쥬게이트는 케르세틴에 카르복실산을 잔기로 가지는 아미노산이 부착된 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  10. 제 9항에 있어서, 상기 카르복실산을 잔기로 가지는 아미노산은 글루탐산, 또는 아스파르트산인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110279869A (zh) * 2019-07-01 2019-09-27 大连民族大学 一种葡聚糖-槲皮素前药聚合物的制备方法
CN113304113A (zh) * 2021-05-31 2021-08-27 桂林医学院 一种提高槲皮素溶出的共无定型固体分散体及其制备方法

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