KR20100039867A - 신규한 트롬빈 작용 화합물 및 이들을 기초로 한 약제 조성물 - Google Patents

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KR20100039867A
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파조일 이노야토비치 아타울라크하노프
안드레이 알렉산드로비치 부티린
블라디미르 보리소비치 설리모프.
알렉세이 니콜라예비치 로마노프
알렉세이 알렉스비치 보골류보프
유리 블라디미로비치 쿠즈네쵸프
이리나 블라디미로브나 그리브코프
알렉산더 세르게예비치 고르바텐코
올가 아나톨리예프나 콘다코프
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오브스체스트보 에스 오그라니체노이 오트베트스트베노스트쥬 ‘비오니카’
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Abstract

본 발명은 신규한 화합물, 트롬빈 억제제로서의 이러한 화합물의 적용, 및 이러한 화합물을 기초로 한 약제 조성물에 관한 것으로서, 트롬빈-의존 혈전색전증을 치료 및 예방하기 위해, 및 연구용으로 사용될 수 있다.

Description

신규한 트롬빈 작용 화합물 및 이들을 기초로 한 약제 조성물 {NEW THROMBIN FUNCTION COMPOUNDS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS BASED ON THEM}
본 발명은 신규한 화학적 화합물, 트롬빈 억제제로서의 이러한 화합물의 적용, 및 이러한 화합물을 기초로 한 약제 조성물에 관한 것으로서, 트롬빈-의존 혈전색전증을 치료 및 예방하기 위해, 및 연구 목적으로 사용될 수 있다.
트롬빈은 가용성 혈장 단백질인 피브리노겐을 불용성 섬유소 응괴(fibrin clot)로 전환시키는 혈액 응고 시스템의 주요 효소이다. 섬유소를 중합시키는 공정인 트롬빈 형성과, 트롬빈 활성을 억제하는 공정인 트롬빈 억제 사이에는 깨지기 쉬운 균형이 존재한다. 과도한 트롬빈 형성은 혈전증(thrombosis)을 초래한다.
직접 트롬빈 억제제는 활성 효소 중심에 바로 강력하게 결합되고 활성 중심에서 벗어난 천연 물질인 피브리노겐을 차단하는 억제제에 대한 이름이다. 이러한 차단은 피브리노겐으로부터 트롬빈-촉매화된 섬유소 전환을 정지시키고, 그 결과로서, 섬유소 응고를 방해하고, 혈액 응고를 늦추거나 이를 완전히 방해한다. 이에 따라, 강력한 항트롬빈 활성을 갖기 위하여, 직접 트롬빈 억제제는 활성 트롬빈 중심과 가능한 최대 강도로 결합되어야 한다. 이러한 목적을 위하여, 이러한 것들은 트롬빈 분자의 활성 중심의 구조에 의해 지시된 여러 조건들을 충족하여야 한다.
활성 트롬빈 중심은 편의상 일반적으로 비색 검정(amidolytic assay)이 일어나는 지점 가까이에 이의 피브리노겐 기질 중의 상이한 아미노산을 수용하기 위한, 여러 공동, 또는 포켓으로 나누어진다. 포켓 S1은 소수성 아미노산 잔기에 의해 형성된 벽을 갖는 깊고 좁은 공동이며, 실제로 상기 공동의 하부에서, 아미노산 Asp 189의 카르복실기의 존재하에 음전하 공급원이 생성된다. 포켓 S1은 피브리노겐에서의 펩티드 결합의 분열점 (라이신 또는아르기닌의 C-단부)에서 직접적으로 주요 아미노산 잔기 (라이신 또는 아르기닌)를 결합시키기 위해 제공된다. 주요 아미노산의 긴 비분지된 탄화수소 잔기는 포켓 S1의 전장을 연장시키지만, 탄화수소 잔기의 단부에서 양으로 하전된 주요 분절은 포켓 S1의 하부에서 음으로 하전된 아스파르트 잔기에 염 브릿지(salt bridge)를 형성한다. 이에 따라, 포켓 S1은 피브리노겐의 폴리펩티드 사슬에서 주요 아미노산 잔기를 동정하는데 가장 적합하다.
비-극성 아미노산 잔기에 의해 형성된 다른 포켓인 S2는 포켓 S1에 바로 인접하고, 포켓 S1에서 수용된 주요 아미노산을 지나 피브리노겐의 아미노산 서열에서 (주요 아미노산의 N-단부에서) 미량의 소수성 아미노산 (발린, 이소루신 및 루신)을 동정하기 위해 제공된다. 포켓 S2는 포켓 S1 보다 약간 작은 부피를 가지며, 이는 임의의 하전된 아미노산기를 함유하지 않는다. 이에 따라, 포켓 S2는 이상적으로 비극성 지방족 아미노산의 작은 탄화수소 잔기를 결합시키는데 적합하다.
또다른 포켓 S3는 트롬빈 표면 상에서 포켓 S2 다음에 발견된다. 이는 또한 소수성 포켓으로서, 약간 큰 부피를 가지지만 정확하게 규정되지 않는데, 이의 상당한 부분이 개방되어 있고 용매에 직접적으로 노출되어 있기 때문이다. 포켓 S3는 2개 또는 3개의 링크는 펩티드 사슬에서 분열점으로부터 떨어져 나가는 피브리노겐의 큰 지방족 및 방향족 소수성 아미노산 분절을 수용하기 위해 제공된다.
직접 트롬빈 억제제는 최적의 방식으로 트롬빈 분자의 활성 중심의 이러한 3개의 포켓을 채워야 한다. 예를 들어, 널리 공지된 트리펩티드 억제제인 D-Phe-Pro-Arg는 X-선 구조 분석에 의해 하기와 같이 활성 트롬빈 중심과 반응하는 것으로 밝혀졌다: 아르기닌 잔기는 포켓 S1을 채우며, 프롤린 잔기는 포켓 S2를 차지하며, D-페닐알라닌은 포켓 S3를 점유한다.
혈전증을 조절하기 위해 현재 임상에서 사용되는 약제는 혈액에 이미 형성된 과량의 트롬빈을 억제하는데 항상 적합한 것은 아니다. 의사는 대체로 간접 트롬빈 억제제, 예를 들어 미분획 헤파린 및 저분자량 헤파린, 및 비타민 K 길항제 (와파린)을 사용하는 경향이 있다. 이러한 모든 약제는 그 자체가 시스템(system) 중에 과도한 트롬빈 축적을 억제하지 못한다. 다양한 헤파린은 혈장 중에 존재하는 천연 트롬빈 억제제 - 항트롬빈 III (AT III) -의 억제 효과를 단지 가속시키며, 이에 헤파린은, 환자의 혈장 중 AT III 함량이 이런 저런 이유로 매우 낮은 경우 단지 약한 항응고 효과를 갖는다. 비타민 K 길항제는 간에서 응고 인자의 전구체의 합성을 억제함으로써 응고 속도를 감소시킨다. 분명하게, 이는 혈액 중에 존재하는 트롬빈의 신속한 억제를 필요로 하는 심각한 상황에서 도움이 될 수 없는 비교적 느린 옵션이다.
간접 응고제 치료 요법의 한계로 제약 회사에 의해 강력하고 선택적인 직접 트롬빈 억제제를 개발하려는 시도가 있었다. 지금까지, 다수의 이러한 트롬빈 억제제가 개발되었다. 그러나, 이들 중 대부분은 약물에서 요구되는 모든 성질들을 나타내지 못하였다. 이들의 약리학적 성질, 예를 들어 유효 시간, 낮은 독성, 수용성, 경구 생체 이용률 등을 개선시키기 위해 연구가 계속되고 있다. 이상적인 트롬빈 억제제는 또한 응괴에 고정된 트롬빈에 대해 효과적이야 한다. 이는 섬유소 분해에서 수반되는 프로테아제를 억제하지 않으면서 트롬빈에 대해 선택적이고, 혈액 중에 장기간 잔류하고, 간에서 효소 및 시토크롬 P450의 효과를 방해하고, 수성 매질 중에 유지되고, 혈액 단백질과 조합 (또는 단지 약간의 조합)에 영향을 받지 않고, 비독성이어야 한다. 그러나, 화합물의 사전 시험은 이러한 요건들을 충족시킴에 있어서 이의 적합성에 대해 결론에 이르지 못한다. 심지어 다수의 유효한 저분자량 트롬빈 억제제가 이미 합성되었지만, 일본에서 합성된 아르가트로반(Argatroban) (미국특허 제5,214,052호, 1993년) 단 하나가 모든 필수적인 임상 시험을 통과하여 오늘날 사용되고 있다. 그러나, 이는 이성적인 억제제가 아닌데, 이는 용액 중에서 낮은 안정성을 갖기 때문이다 (혈장 중 T1/2는 36분이다). 이는 신규한 효과적이고 안전한 합성 트롬빈 억제제 개발에 대한 필요성이 과제로 계속 제시됨을 의미한다.
오늘날 입수가능한 공개된 특허 및 과학적 연구는 다수의 트롬빈 억제제를 기술하고 있다. 이러한 문헌의 요약은 하기와 같다:
미국특허출원번호 2006/0014699호 ((Astra Zeneca AB), 2006), 및 미국특허번호 5,795,896호 ((Astra Aktiebolag), 1998)에는 멜라가트란 억제제를 함유한 항혈전 약제학적 화합물이 기술되어 있다.
또한, 미국특허번호 5,510,369호 ((Merck & Co), 1996)에 기술된 피롤리딘 트롬빈 억제제 및 미국특허번호 5,792,779호 ((Merck & Co), 1998)에 기술된 것과 같은 피리딘 트롬빈 억제제가 당해 분야에 공지되어 있다.
본 출원인은 존재하는 억제제의 구조, 및 상기 억제제와 트롬빈 분자 간의 반응 메카니즘에 대한 정보를 포함한 많은 과학 논문 및 문헌들을 연구하였다. 하기 표 1에 기술된 바와 같은 연구된 문헌들은 실제로 트롬빈 억제제로서 공지된 모든 부류의 화학적 화합물을 포함한다. 표 1에 기술된 문헌의 리스트는 완전한 것이 아닐지라도 충분한 것이다. 본 출원인이 본 출원인의 트롬빈 억제제를 개발함에 있어서, 본 출원인은 이러한 문헌들에 기술된 구조들을 신중하게 피하였다. 언급된 문헌들은 본 발명으로서 청구된 신규한 화합물을 특징으로 하는 요소들을 갖는 트롬빈 억제제에 대한 정보를 포함하고 있지 않다.
본 발명의 실질적인 과제는 직접 트롬빈 억제제로서 제공될 수 있는 신규한 화합물을 개발하는 것이다. 이러한 억제제는 다양한 병리학의 효과 하에서 유기체에서 발달하는 급성 혈전 병태들을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 유기체의 엄청난 수의 상이한 병리학적 병태는 지혈 시스템(hemostatic system)에서의 질환과 관련이 있다. 심근경색증, 뇌졸중, 심정맥 또는 폐정맥의 혈전증과 같은 질환의 결과로서 발생하는 혈전색전성 합병증은 세계 각국에서 사망의 주요 원인 중 하나이다. 이후 효과적이고 안전한 임상 약물로서 제공될 수 있는 약제를 개발하기 위해 수년 동안 집중적으로 노력되고 있다. 특히, 이러한 것들로는 항응고제 성질을 나타내는 항혈전 제제가 있다.
달리 명시되지 않는 한, 하기 정의들이 본 명세서에서 사용된다:
활성 암은 생화학적 반응에서 중요한 역할을 하는 단백질 거대분자의 영역이다.
단백질은 단백질 거대분자를 의미한다.
타겟 단백질은 결합 공정에서 수반되는 단백질 거대분자를 의미한다.
리간드는 저분자량 화학 구조물의 집합을 의미한다.
결합 공정은 리간드와 타겟 단백질의 활성 암의 반 데르 발스(Van der Waals) 또는 공유 복합물의 형성을 의미한다.
스크리닝(screening)은 단백질 거대분자의 특정 영역과 선택적으로 반응하는 화학 구조물의 집합에서 화합물의 세트를 확인하는 것을 의미한다.
정확한 포지셔닝(Correct positioning)은 리간드-단백질 복합물의 최소 자유 에너지에 해당하는 위치에 리간드를 배치시키기 위한 포지셔닝을 의미한다.
선택적 리간드는 특정 방식으로 특정 타겟 단백질에 결합되는 리간드를 의미한다.
확인(Validation)은 작동에 있어 이러한 시스템의 특질 및 제공된 타겟 단백질에 신뢰성 있게 결합되는 무작위 세트의 리간드들로부터 리간드를 선택함에 있어 이의 효율을 평가하기 위한 일련의 계산 및 비교 방법을 의미한다.
기준 단백질은 실험 데이타에 따라 또는 작동 시스템을 확인하는 동안에 모델 계산의 파라미터 (스코어)를 조절하거나 특정 억제제의 결합 특이성을 평가하기 위해 사용되는 단백질을 의미한다.
특이적으로 결합한 리간드는 특정 단백질에만 결합되고 임의의 다른 단백질에 결합되지 않는 리간드를 의미한다.
억제제는 특정 타겟 단백질의 활성 암에 결합되고 일반 과정의 생화학 반응을 차단하는 리간드를 의미한다.
도킹(Docking)은 단백질의 활성 암에서 리간드의 포지셔닝을 의미한다.
스코어링(Scoring)은 단백질에 리간드를 결합시키는데 필요로 하는 자유 에너지를 평가하기 위한 계산을 의미한다.
ΔG 결합은 타겟 단백질에 리간드를 결합시키는데 필요로 하는 얻어진 자유 에너지 계산 증가를 의미한다 (SOL 소프트웨어 사용).
C1-6 알킬은 1개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 비분지되거나 분지된 탄화수소 사슬을 포함하는 알킬기, 예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 3차-부틸 등을 의미한다.
C1-6 알콕시는 1개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 비분지되거나 분지된 탄화수소 사슬을 함유한 알콕시기, 예를 들어, 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시 등을 의미한다.
할로겐은 염소, 브롬, 요오드, 또는 불소를 의미한다.
약제학적으로 허용되는 염은 독성을 가지고 있지 않거나 활성 화합물의 흡수 및 약리학적 효과를 억제하지 않는 경우의, 화학식 (I)의 활성 화합물에 의해 생성된 임의의 염을 의미한다. 이러한 염은 화학식 (I)의 화합물과, 유기 염기 또는 무기 염기, 예를 들어 소듐 히드록사이드, 칼륨 히드록사이드, 암모늄 히드록사이드, 메틸아민, 에틸아민 등과의 반응에 의해 생성될 수 있다.
용매화물은 결정상 격자가 화학식 (I)의 활성 화합물을 결정화시키는 물 또는 다른 용매의 분자를 함유하는 화학식 (I)의 활성 화합물의 결정상 형태를 의미한다.
약제학적으로 허용되는 담체는 조성물 중의 다른 성분들과 양립가능하고 수용체에게 해롭지 않는, 즉 사용되는 용량 및 농도에서 세포 또는 포유동물에 비독성이어야 하는 담체를 의미한다. 종종, 약제학적으로 허용되는 담체는 pH 완충 수용액이다. 생리학적으로 허용되는 담체의 예는 완충제, 예를 들어 포스페이트, 시트레이트 또는 유기산의 다른 염을 기초로 한 용액; 아스코르브산, 저분자량 (10개 미만의 잔기)의 폴리펩티드를 포함한 항산화제; 단백질, 예를 들어 혈장 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 폴리머, 예를 들어 폴리비닐 피롤리돈; 아미노산, 예를 들어 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌 또는 라이신; 글루코즈, 만노즈 또는 덱스트린을 포함한, 단당류, 이당류, 및 다른 탄수화물; 킬레이트제, 예를 들어 EDTA; 및 당 알코올, 예를 들어 만니톨 또는 소르비톨을 포함한다.
치료학적 유효량은 포유동물 유기체에서 트롬빈 억제의 요망되는 범위를 달성하기 위해 필요로 하는 양을 의미한다.
본원에서 사용되는 의미에서의 포유동물은 영장류 (예를 들어, 인간, 유인원 원숭이(anthropoid apes), 비-유인원 원숭이(non-anthropoid apes), 및 저급의 몽키), 육식 동물 (예를 들어, 고양이, 개, 및 곰), 설치 동물 (예를 들어, 마우스, 랫트, 및 다람쥐), 식충 동물 (예를 들어, 뒤쥐(shrew) 및 두더지) 등을 포함한다.
본 출원에 의한 실제 과제는 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 개발함으로써 달성된다:
A-B-C (I)
상기 식에서, C는 하기 구조를 포함하는 군으로부터 선택되며:
Figure pct00001
여기서, R1, R2, R3, 및 R4는 서로 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이며;
B는 -(CH2)n-이며, 여기서 n은 1 내지 5의 정수이며;
A는 하기 구조를 포함하는 군으로부터 선택되며:
Figure pct00002
여기서, R5는 수소, C1-6 알콕시, CH2NR10R11, 및 CH(CH3)NR10R11을 포함하는 군으로부터 선택되며;
Figure pct00003
여기서, R6 및 R7은 독립적으로 수소, C1-6 알킬; C1-6 알콕시; 및 할로겐이며;
R8은 수소 또는 C1-6 알킬이며;
R9는 하기 구조를 포함하는 군으로부터 선택되며:
Figure pct00004
R10 및 R12는 서로 독립적으로 수소, C1-6 알킬; (CH2)mCOOR13, 및 (CH2)mCON(R13)2,
Figure pct00005
를 포함하는 군으로부터 선택되며;
여기서, m은 1 내지 4의 정수이며;
R13은 수소 또는 C1-6 알킬이며;
R11은 C1-6 알킬 또는 Ar이며;
Ar은 수소, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 할로겐, N(R13)2, OH, NO2, CN, COOR13, CON(R13)2, 및 SO2R13의 군으로부터 선택된 1개 내지 5개의 치환기를 갖는 페닐, 피리딜, 옥사졸릴, 티아졸릴, 티에닐, 푸라닐, 피리미디닐, 피리다조닐, 피라지닐, 인돌릴, 벤조푸라닐, 또는 벤조티오페닐이며;
단, 하기 구조는 제외된다.
Figure pct00006
이러한 리스트로부터 배제된 화합물들은 이미 공지된 것으로서, 특히 4-아미노-1-[3-[(2-메틸페닐)아미노]-3-옥소프로필]피리디늄 클로라이드는 문헌 [the Journal of Medicinal Chemistry, 17(7), 739-744, 1974, in "Carbocyclic Derivatives Related to Indoramin"]에 기술되어 있으며, 4-아미노-1-(2-페녹시에틸)-피리디늄 브로마이드는 문헌[the Journal of Organic Chemistry, 26, 2740-7, 1961, in "Application of Sodium Borohydride Reduction to Synthesis of Substituted Aminopiperidines, Aminopiperazines, Aminopyridines And Hydrazines"]에 기술되어 있다. 그렇지만, 이러한 문헌들에서 기술된 화합물들이 트롬빈 억제제로서 사용될 가능성에 대해 언급되어 있지 않음에 주목할 가치가 있다.
본 발명의 바람직한 구체예는 청구항 제1항의 하기 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물을 기술한다:
Figure pct00007
상기 식에서, Y는 수소, 할로겐, COOR13, CON(R13)2, 및 SO2R13으로 구성된 군으로부터 선택되며; r은 2 내지 5의 정수이다.
본 출원인은 구조식 A-B-C의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물이 트롬빈을 억제할 수 있다는 것을 발견하였다.
이에 따라, 신규한 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물은 실제로 트롬빈 억제제로서 사용될 수 있다.
트롬빈 억제제로서 실제로 적용하기 위해 고려될 수 있는, 즉 상당한 억제 효과를 나타내는 화합물은 하기와 같이 선택된다: 본 출원인은 구조식 (I)에 의해 기술된 구조를 중심으로 가상 실험실로부터 분자의 3차원 모델을 구성하였다. 다음 단계에서, 얻어진 구조물은 트롬빈 억제제의 활성 중심에 도킹되었고, 가능한 트롬빈 억제제의 분자 구조에 대해 수용된 도킹 결과는 최고의 후보물질(prospect), 즉 -5.0 kcal/mol 보다 낮지 않은 스코어링 함수 수치(도킹 공정에서 측정됨)를 나타내는 분자를 선택하기 위해 사용되었다. 도킹 절차에 의해 제시된 포지셔닝 방법은 이러한 분자들을 시각화하였다. 이러한 포지셔닝 방법이 활성 트롬빈 중심에 결합하는 억제제와 관련하여 상기 가설을 만족시키는 경우에, 이러한 분자는 "가상 히트(virtual hit)"로 여겨졌고, 합성 및 억제 활성의 실험적 측정을 위한 후보물질로서 받아들여졌다. 합성을 개시하기 위한 최종 결정은 가능한 복잡성(probable complexity)의 평가로부터 이루어졌다.
본 발명의 트롬빈 억제제는 트롬빈의 활성 중심과의 효과적인 반응의 상기 요건을 최적으로 충족시킨다. 화학식 (I)의 억제제의 양으로 하전된 화학적 기 C는 포켓 S1의 하부에 위치되어 아미노산 잔기 Asp 189로의 염 브릿지를 형성시킨다. 화학적 기 B는 포켓 S1의 나머지 공간을 차지하여 포켓 벽과의 최적의 소수성 반응을 허용한다. 화학식 (I)의 화학적 기 A는 포켓 S2에 위치되며, 하기 기술된 R 기는 소수성 분절이며, 분자의 별도의 부분을 결합시키고 용매에 노출된 링커는 또한 포켓 S3에 위치되어 있다. 활성 트롬빈 중심으로의 결합의 관점으로부터, 링커는 친수성 및 소수성 분자기 모두로 나타낼 수 있지만, 억제제 분자에 유익한 약물동력학적 성질을 제공하기 위해 대체적으로 친수성 링커를 선택함으로써 억제제 분자의 소수성 특성을 부분적으로 균형을 맞추는 것이 바람직하다. 또한 이러한 목적을 위하여, 포켓 S3에 위치된 소수성 분절은 용매에 대해 노출된 측면에서 포켓에 위치된 소수성 잔기로 개질될 수 있다. 본원에 기술된 트롬빈 억제제는 상기 요건들을 전부 충족시킨다.
본 청구범위는 하기에 기술된 절차 이후에 활성 트롬빈 중심에 대한 본 발명의 트롬빈 억제제의 선택적 포지셔닝 (도킹)에 의해 설명된다. 도킹은 억제제 분자의 전체 에너지의 전체적인 최소화(global minimization)에 의해 달성된다. 전체 억제제 에너지는 활성 트롬빈 중심에 결합하는 억제제에 대한 원인이 되는 형상에서 억제제의 내부 장력 에너지(internal tension energy) 및 트롬빈 범위(thrombin field)에서의 억제제 에너지로 구성된다. 또한, 트롬빈 범위는 억제제 분자와의 정전기적, 반 데르 발스 반응, 및 트롬빈 분자의 개개의 부분 및 리간드의 용매화 및 탈용매화에 의해 개시되는 여러 반응을 유도한다. 이러한 반응들은 많은 문헌들에서 기술되어 있고, 이러한 분야에서 연구자들에게 익숙하다. 전체적인 최소화는 유전학적 알고리즘을 이용하여 여러 차례 반복된다. 최소화 프로그램은 이러한 효소의 활성 중심에서 트롬빈 억제제의 기하학적 포지셔닝 및 본원에 기술된 트롬빈 억제제와 트롬빈 분자의 복합물을 형성하기 위해 사용되는 자유 에너지의 추정치로서 제공되는 스코어링 함수 수치를 초래한다. 본원에 기술된 억제제에 대해, 스코어링 함수는 항상 -5 kcal/mol 보다 작으며, 이는 마이크로몰 범위 이하의 억제 상수와 일치한다. 스코어링 함수를 사용한 예측의 신뢰성은 본 분야의 전문가에게 공지된 다양한 방법의 의해 시험될 수 있으며, 특히 스코어링 함수 수치를 기준으로 랜덤 분자 중에서 공지된 활성 트롬빈 억제제의 선택성을 나타내는 소위 트롬빈 억제제 향상 계수는 0.85이며, 이는 충분히 신뢰성 있는 예측이라는 증거이다. 본원에 기술된 억제제의 기하학적 위치는 상술된 도킹 절차에 의해 달성되고, 또한 활성 트롬빈 중심에 트롬빈 억제제를 결합시키기 위한 최적의 조건을 충족시키며, 여기서 이들의 고유 억제 활성은 트롬빈에 의해 촉매화된 피브리노겐 아미도 분해 반응에 대하여 나타난다.
청구되는 화합물들은 유기 화학에서 전문가에게 공지된 통상적인 방법에 의해 얻어질 수 있다.
유기체의 많은 수의 다양한 병리학적 병태는 지혈 시스템에서 발달하는 질환과 관련이 있다. 심근경색증, 뇌졸중, 심정맥 또는 폐동맥의 혈전증과 같은 이러한 질환에서 발생하는 혈전색전성 합병증은 세계 각국에서 사망의 주요 원인 중 하나이다.
본 발명은 또한 트롬빈-의존 혈전새전증을 치료하고 예방하기 위한 약제 조성물을 포함하며, 이는 치료학적 유효량의 청구항 제1항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다.
본 발명의 화합물은 혈액 중에 이들의 생물 축적을 초래하는 임의의 적합한 방식으로 투여될 수 있다. 이는 정맥내, 근육내, 피부내, 피하, 및 복막내 주사를 포함한 비경구 투여 방법에 의해 달성될 수 있다. 다른 투여 방법, 예를 들어 적절한 조성물의 경구 적용에 의해 위장관을 통한 흡수가 또한 이용될 수 있다. 경구 적용이 용이한 사용으로 인해 바람직하다. 대안적으로, 약제는 질 및 직장 근육 조직을 통해 투여될 수 있으며, 또한 본 발명의 화합물은 피부를 통해 주입될 수 있거나(예를 들어, 경피로), 흡입에 의해 투여될 수 있다. 바람직한 투여 방법은 환자의 상태, 나이, 및 감수성(susceptibility)에 따른다.
경구 적용을 위하여, 약제 조성물은 예를 들어 약제학적으로 허용되는 첨가제, 예를 들어 결합제 (예를 들어, 교질로 용액화된(peptized) 옥수수 전분, 폴리비닐 피롤리디논 또는 히드록시프로필 메틸셀룰로즈), 충전제 (예를 들어, 락토즈, 미정질 셀룰로즈, 칼슘 히드로포스페이트; 마그네슘 스테아레이트, 탈크 또는 실리콘 옥사이드: 감자 전분 또는 녹말질의 소듐 글리콜레이트); 또는 습윤제 (예를 들어, 소듐 라우릴설페이트)와 함께 정제 또는 캡슐로 포장될 수 있다. 정제가 코팅될 수 있다. 액체 경구 조성물은 예를 들어, 용액, 시럽 또는 현탁액의 형태로 제조될 수 있다. 이러한 액체 제조물은 약제학적으로 허용되는 첨가제, 예를 들어 현탁화제 (예를 들어, 셀룰로즈 유도체); 유화제 (예를 들어, 레시틴), 희석제 (정제된 식물성 오일); 및 보존제 (예를 들어, 메틸 또는 프로필-n-히드록시벤조에이트 또는 소르브산)을 이용하여 통상적인 방법에 의해 수득될 수 있다. 상기 조성물은 또한 적절한 완충염, 착향제, 안료 및 감미제를 함유할 수 있다.
이러한 조성물 중의 활성 성분의 함량은 조성물 중량의 0.1% 내지 99.9%, 바람직하게는 5% 내지 90%로 다양하다.
이러한 트롬빈 억제제의 독성은 LD50 (집단의 50%에 대한 치사량)을 측정하기 위해 실험 동물에서 표준 약제학적 절차를 이용하여 측정되었다. 본 발명의 바람직한 화합물에 대해, LD50 용량은 367 mg/kg을 초과하였으며, 이는 LD50 = 475 mg/kg을 갖는 임상 시험 후의 아르고트로반의 치사량과 일치하는 것이다.
본 발명의 대상을 더욱 이해하기 위하여, 신규한 화합물의 합성 및 이러한 합성의 중간 생성물인 물질을 설명하고, 본 발명으로서 청구된 신규한 화합물의 항혈전 활성을 연구하기 위해 사용되는 방법의 설명을 포함하는 여러 실시예가 하기에 기술되었다.
실시예는 일예로서, 본 발명의 사상은 결코 하기 제공된 실시예의 범위로 제한되지 않는다.
실시예 1
3-(3-클로로프로폭시)-5-메틸페놀의 중간 생성물의 합성
Figure pct00008
3.8 g (27 mmol)의 오르신(orcin) 수화물, 4.8 g (30 mmol)의 1-브로모-3-클로로프로판, 및 4.0 g (29 mmol)의 칼륨 카르보네이트의 혼합물을 30 ml의 아세토니트릴 중에서 교반시키면서 36 시간 동안 비등시켰다. 이후 상기 반응 혼합물을 증발시키고, 30 ml의 에테르 중에 용해시키고, 15 ml의 칼륨 카르보네이트의 포화 용액으로 2회 세척하고, 수층을 폐기하고, 에테르층을 15 ml의 10% 소듐 히드록사이드 용액으로 3 차례 추출하였다. 상기 에테르층을 폐기하고, 수층을 진한 HCl로 조심스럽게 산성화시키고, 이후 15 ml의 에스테르로 3 차례 추출하였다. 에테르 추출물을 합치고, 소량의 소듐 히드로카르보네이트 포화 용액으로 세척하고, 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 대략 1/3 부피부의 헥산으로 희석시키고, 실리카겔의 층을 통해 여과하였다. 이를 증발시켜 1.7 g의 황색 오일의, 약 70% 오르신 (Rf 0.10) 및 약 30% 3-(2-클로로프로폭시)-5-메틸페놀 (Rf 0.26, 수율: 약 1.2 g (순수한 물질에 대해 22%))의 혼합물을 수득하였다.
유사한 방법을 이용하여 오르신 수화물 및 1-브로모-2-클로로에탄으로부터 3-(2-클로로에톡시)-5-메틸페놀 (Rf 0.26, 수율: 약 1.1 g (순수한 물질에 대해 20%))을 수득하고, 오르신 수화물 및 1-브로모-4-클로로부탄으로부터 3-(4-클로로부톡시)-5-메틸 페놀을 수득하였다.
실시예 2
벤젠 설폰산의 3-(3-클로로프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르의 중간 생성물의 합성
Figure pct00009
3 g (17 mmol)의 벤젠 설포클로라이드 및 2 g (20 mmol)의 트리에틸아민을 30 ml의 무수 테트라히드로푸란 (THF) 중의 1.6 g의 상기 실시예의 혼합물의 용액에 첨가하였다. 상기 혼합물을 7 시간 동안 교반하고, 트리에틸암모늄 히드로클로라이드의 침전물을 여과하고 증발시켰다. 얻어진 오일을 20 ml의 에테르 중에 용해시키고, 10 ml의 10-12% 암모니아 수용액 중에서 수차례 세척하여 과량의 미반응된 벤젠 설포클로라이드 (박막 크로마토그래피 (TLC)에 의해 조절)를 분리한 후에, 10 ml의 대략 20% 염산으로 세척하였다. 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 증발시켜 TLC에 따라 1.94 g의 대략 동일한 양의 벤젠 설폰산의 3-(3-클로로프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르 (Rf 0.36) 및 오르신의 디벤조일설폰산 에스테르 (Rf 0.25)를 함유한 황색 오일을 수득하였다.
유사하게, 3-(2-클로로에톡시)-5-메틸페놀, 3-(3-클로로프로폭시)-5-메틸페놀, 및 3-(4-클로로부톡시)-5-메틸페놀 및 적절한 아릴설포클로라이드를 수득하였다:
2-클로로벤젠 설폰산의 3-(3-클로로프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르 (순수한 물질에 대해 77%)
2-플루오로벤젠 설폰산의 3-(3-클로로프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르 (88%)
2-카르보메톡시 벤젠 설폰산의 3-(3-클로로프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르 (56%)
벤젠 설폰산의 3-(2-클로로에톡시)-5-메틸페닐 에스테르 (72%)
2-클로로벤젠 설폰산의 3-(2-클로로에톡시)-5-메틸페닐 에스테르 (35%)
2-플루오로벤젠 설폰산의 3-(2-클로로에톡시)-5-메틸페닐 에스테르 (34%)
2-카르보메톡시 벤젠 설폰산의 3-(2-클로로에톡시)-5-메틸페닐 에스테르 (37%)
벤젠 설폰산의 3-(4-클로로부톡시)-5-메틸페닐 에스테르 (45%)
2-클로로벤젠 설폰산의 3-(4-클로로부톡시)-5-메틸페닐 에스테르(27%)
2-플루오로벤젠 설폰산의 3-(4-클로로부톡시)-5-메틸페닐 에스테르 (32%)
2-카르보메톡시 벤젠 설폰산의 3-(4-클로로부톡시)-5-메틸페닐 에스테르 (21%).
실시예 3
2-클로로벤젠 설폰산의 3-(3-아이오도프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르의 중간 생성물의 합성
Figure pct00010
2 g (13 mmol)의 하소된 소듐 아이오다이드를 30 ml의 무수 아세톤 중 2.6 g의 상기 실시예에서 유사하게 제조된 2-클로로벤젠 설폰산의 3-(3-클로로프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르 함유 혼합물에 첨가하고, 48 시간 동안 비등시켰다. 상기 반응 혼합물을 이후 10 ml의 헥산으로 희석시키고, 증발시켰다. 얻어진 결과물은 2.45 g의, 벤젠 설폰산의 3-(2-아이오도에톡시)-5-메틸페닐 에스테르 (Rf 0.35) 및 각각의 오르신의 디벤조일 설폰산 에스테르 (Rf 0.25)를 함유한 엷은 황색 오일이다.
유사한 기술을 이용하여 적절한 염화물을 하기 화합물로 처리하였다:
벤젠 설폰산의 3-(3-아이오도프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르
2-플루오로벤젠 설폰산의 3-(3-아이오도프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르
2-카르보메톡시 벤젠 설폰산의 3-(3-아이오도프로폭시)-5-메틸페닐 에스테르
벤젠 설폰산의 3-(2-아이오도에톡시)-5-메틸페닐 에스테르
2-클로로벤젠 설폰산의 3-(2-아이오도에톡시)-5-메틸페닐 에스테르
2-플루오로벤젠 설폰산의 3-(2-아이오도에톡시)-5-메틸페닐 에스테르
2-카르보메톡시 벤젠 설폰산의 3-(2-아이오도에톡시)-5-메틸페닐 에스테르
벤젠 설폰산의 3-(4-아이오도부톡시)-5-메틸페닐 에스테르
2-클로로벤젠 설폰산의 3-(4-아이오도부톡시)-5-메틸페닐 에스테르
2-플루오로벤젠 설폰산의 3-(4-아이오도부톡시)-5-메틸페닐 에스테르
2-카르보메톡시 벤젠 설폰산의 3-(4-아이오도부톡시)-5-메틸페닐 에스테르
실시예 4
4-아미노-1-(3-(3-메틸-5-(2-클로로벤젠 설포닐옥시)페녹시)프로필)-피리디늄 아이오다이드 (HC_023s_IOC)의 합성
Figure pct00011
10 ml의 무수 디옥산 중의 0.55 g의 "미정제 아이오다이드" (상기 실시예로부터) (70%의 활성 물질에 대해 계산됨) 및 0.08 g (0.85 mmol)의 4-아미노피리딘의 혼합물을 20 시간 동안 비등시켰다. 상기 혼합물을 냉각시킨 후에, 상기 용액을 증발시키고, 얻어진 오일을 고체로 변할 때까지 일부분의 에테르로 빻았다. 상기 고체 침전물을 여과하고, 디옥산과 아세토니트릴의 혼합물(5:1)로부터 2회 재결정화하고, 상기 염 침전물을 여과하고, 에스테르로 세척하였다. 진공 중에서 건조하여 0.35 g (65%)의 백색 염을 수득하였다.
Figure pct00012
유사한 기술을 이용하여 적절한 아이오다이드 및 헤테로사이클 화합물, 티오우레아, 및 티오우레아 유도체를 하기 화합물로 처리하였다:
4-아미노-1-(3-(3-메틸-5-(벤젠 설포닐옥시)페녹시)프로필)-피리디늄 아이오다이드 (HC_016s_IOC)
Figure pct00013
2-아미노-1-(3-(3-메틸-5-(벤젠 설포닐옥시)페녹시)프로필)-티아졸리윰 아이오다이드 (HC_017s_IOC)
Figure pct00014
3-(3-메틸-5-(벤젠 설포닐옥시)페녹시)프로필-이소티오우로늄 아이오다이드 (HC_018s_IOC)
Figure pct00015
4-아미노-1-(2-(3-메틸-5-(벤젠 설포닐옥시)페녹시)에틸)-피리디늄 아이오다이드 (HC_019s_IOC)
Figure pct00016
2-(3-메틸-5-(벤젠 설포닐옥시)페녹시)에틸-이소티오우로늄 아이오다이드 (HC_020s_IOC)
Figure pct00017
2-(3-메틸-5-(2-클로로벤젠 설포닐옥시)페녹시)에틸-이소티오우로늄 아이오다이드 (HC_024s_IOC).
Figure pct00018
3-(3-메틸-5-(2-클로로벤젠 설포닐옥시)페녹시)프로필-이소티오우로늄 아이오다이드 (HC_026s_IOC)
Figure pct00019
4-아미노-1-(2-(3-메틸-5-(2-클로로벤젠 설포닐옥시)페녹시)에틸)-피리디늄 아이오다이드 (HC_025s_IOC).
Figure pct00020
유사한 방식으로, 실시예 1-4에 기술된 기술을 이용하여, 화합물을 다양한 아릴 설포닐 클로라이드 및 헤테로사이클 설포닐 클로라이드로부터 합성하였다. 합성된 화합물의 화학식, 질량 분석 파라미터, 및 컴퓨터처리 스코어링 함수는 하기 표 2에 나타내었다. 상기 화합물들은 아이오다이드, 브로마이드, 클로라이드, 또는 다른 염의 형태로 수득될 수 있다.
실시예 5
하기 화합물들의 합성
Figure pct00021
1. 4-클로로-3-니트로벤젠-1-설포닐 클로라이드
o-니트로클로로아닐린 (15 g)을 교반하면서 30 ml의 클로로설폰산에 첨가하고, 100℃에서 2 시간 동안 가열한 후에, 110℃에서 2 시간 및 127℃에서 5 시간 동안 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 분쇄된 얼음 (140 g)에 부었다. 침전물을 여과하고, 필터 케이크(filter cake)를 얼음물로 세정하고, 공기 중에서 건조시켰다. 결과물은 15 g의 4 클로로-3-니트로벤젠-1 설포닐 클로라이드이었다.
2. 4-클로로-N-메틸-3-니트로-N-페닐벤젠 설폰아미드
Figure pct00022
4-클로로-3-니트로벤젠-1-설포닐 클로라이드 (10.6 g, 0.041 mol)를 톨루엔 (50 ml) 중에 용해시키고; 트리에틸아민 (4.14 g, 0.041 mol)을 첨가하였다. 얻어진 용액에, N-메틸아닐린 (4.4 g, 0.041 mol)을 교반하에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 70-80℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 이후에, 이를 냉각시켰다. 냉각된 용액을 30 ml의 물로 2차례 세척하고, 진공하에서 농축시켰다. 상기 잔류물을 에탄올로부터 재결정화하였다. 4-클로로-N-메틸-3-니트로-N-페닐벤젠 설폰아미드의 수율은 9.4 g (61%)이었다.
3. N-메틸-4-(메틸아미노)-3-니트로-N-페닐벤젠 설폰아미드
Figure pct00023
에탄올 (50 ml) 중의 4-클로로-N-메틸-3-니트로-N-페닐벤조일 설폰아미드 (9.4 g, 0.029 mol)의 용액을 25 ml의, 40% 메틸아민의 수용액과 합쳤다. 상기 반응 혼합물을 70℃로 가열하고, 상기 온도에서 1 시간 동안 교반하였다. 냉각 및 여과 후에, 필터 케이크를 에탄올로 세척하고, 60℃에서 건조시켰다. N-메틸-4-(메틸아미노)-3-니트로-N-페닐벤조일 설폰아미드의 수율은 9.0 g (97%)이었다.
4. 3-아미노-N-메틸-4-(메틸아미노)-N-페닐벤젠 설폰아미드
Figure pct00024
N-메틸-4-(메틸아미노)-3-니트로-N-페닐벤조일 설폰아미드 (9 g, 0.028 mol)를 이소프로판올 (90 ml) 중에 용해시켰다. 상기 용액에, 히드라진 수화물 (11 ml), 활성탄 (2 g), 및 FeCl3·6H2O (10 ml 에탄올 중 0.5 g)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 8 시간 동안 비등시켰다. 상기 활성탄을 여과로 제거하였다. 여과물을 건조상태로 증발시켰다. 3-아미노-N-메틸-4-(메틸아미노)-N-페닐벤젠 설폰아미드의 수율은 8.1 g (99%)이었다.
5. 3-클로로-N-(5-(N-메틸-N-페닐 설파모일)-2-(메틸아미노)페닐)프로판아미드
Figure pct00025
얼음 (~5℃)으로 냉각된 디메틸포름아미드 (16 ml) 중의 3-아미노-N-메틸-4-(메틸아미노)-N-페닐벤젠 설폰아미드 (5.4 g, 0.018 mol) 및 트리에틸아민 (1.81 g, 0.018 mol)의 용액에, 클로로프로피오닐 클로라이드 (2.32 g, 0.018 mol)를 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 이후에, 물 (14 ml) 및 아세토니트릴 (5 ml)을 5 시간 동안 첨가하였다. 형성된 침전물을 여과하였다. 3-클로로-N-(5-(N-메틸-N-페닐설파모일)-2-(메틸아미노)페닐)프로판아미드의 수율은 3.1 g (45%)이었다.
6. 4-아미노-1-(3-(5-(N-메틸-N-페닐설파모일)-2-(메틸아미노)페닐아미노)-3 -옥소프로필)피리디늄 클로라이드
Figure pct00026
3-클로로-N-(5-(N-메틸-N-페닐설파모일)-2-(메틸아미노)페닐)프로판아미드 (1 g, 0.0026 mol) 및 4-아미노피리디늄 (0,73 g, 0.0078 mol)을 무수 아세톤 (50 ml) 중에서 50 시간 동안 비등시켰다. 잔류물을 여과하고, 아세토니트릴과 에탄올의 10:1 혼합물로부터 결정화하였다.
4-아미노-1-(3-(5-(N-메틸-N-페닐설파모일)-2-(메틸아미노)페닐아미노)-3-옥소프로필)피리디늄 클로라이드의 수율은 0.54 g (43%)이었다.
7. 4-아미노-1-(2-(1-메틸-5-(N-메틸-N-페닐설파모일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸)피리디늄 클로라이드.
Figure pct00027
아세토니트릴 (8 ml) 중의 4-아미노-1-(3-(5-(N-메틸-N-페닐설파모일)-2-(메틸아미노)페닐아미노)-3-옥소프로필)피리디늄 클로라이드 (0.2 g, 0.00042 mol)의 현탁액에, 티오닐 클로라이드 (0.2 ml)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 10 분 동안 비등시킨 후에, 이를 실온에서 24 시간 동안 정치시키고, 이후 디에틸 에테르 (8 ml)로 희석시켰다. 형성된 침전물을 여과로 수집하고, 아세토니트릴과 탈수화된 에탄올의 10:1 혼합물로부터 결정화하였다. 4-아미노-1-(2-(1-메틸-5-(N-메틸-N-페닐설파모일)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)에틸) 피리디늄 클로라이드의 수율은 0.055 g (26%)이었다.
유사한 방식으로, 실시예 5에 기술된 기술에 의해, 여러 화합물들을 합성하였으며, 화학식, 질량 분석 파라미터, 및 컴퓨터처리된 스코어링 함수는 표 3에 나타내었다. 상기 화합물들은 아이오다이드, 브로마이드, 클로라이드 또는 다른 염의 형태로 수득될 수 있다.
실시예 6
트롬빈 활성에 대한 시험 화합물의 효과의 연구
트롬빈 활성에 대한 합성된 물질의 효과를, 이러한 화합물의 부재 및 존재하에 완충 수용액 중에 트롬빈을 갖는 특정 저분자량 기질의 가수분해 속도를 측정함으로써 연구하였다. 이러한 기질들 중 하나는 색소성 기질 크로모짐(Chromozim) TH (CTH): N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Arg-pNA이었다 [Sonder SA, Fenton JW 2nd. Thrombin Specificity with Tripeptide Chromogenic Substrates: Comparison of Human and Bovine Thrombins with and without Fibrinogen Clotting Activities. Clin. Chem., 1986, 32(6):934-937]. 다수의 실험에서 사용된 다른 기질은 형광 기질 BOC-Ala-Pro-Arg-AMC (S)이었으며, 여기서 BOC는 부톡시카르보닐 잔기이며, AMC는 7-아미노-4-메틸쿠마릴이다 [Kawabata S, Miura T, Morita T, Kato H, Fujikawa K, Ivanaga S, Takada K, Kimura T, Sakakibara S. Highly Sensitive peptide-4-methylcoumaryl-7-amide Substrates for Blood-Clotting Proteases and Trypsin. Eur. J. Biochem., 1988, 172(1): 17- 25].
통상적인 96-홀 보드의 홀을 pH=8.0에서 40 mM의 NaCl, 20 mM의 HEPES, 및 0.1% 폴리에틸렌 글리콜 (Mw=6,000)을 함유한 완충액으로 채웠다. 상이한 농도(0.002 mM 내 3.3 mM)의 기질 (홀의 최종 농도 - 100 mcM), 트롬빈 (최종 농도 - 190 pM), 및 시험 화합물 (제안된 트롬빈 억제제)를 첨가하였다. 색소성 기질을 사용하는 경우, 착색된 반응 생성물 - 파라-니트로아릴린의 축적은 분광학적 분자 장치 보드 리더기(spectrophotometric molecular devices board reader) (Thermomax, U.S.)에서 수행되었으며, 이는 405 nm 파장에서 광학 밀도의 증가를 측정한다. 형광 기질의 경우에, 트롬빈은 이를 가수분해 동안 자유 형태로 현저하게 형광을 내는 아미노메틸 코우마릴로 분리시킨다 (여기 λ - 380 nm 및 방출 λ - 440 nm). 반응 동력학은 형광학적 Titertek Fluoroskan 보드 리더기 (LabSystem, Finland)에서 기록되었다.
초기 반응 속도를 직선 섹션 상에서 동력학적 곡선 경사각의 탄젠트로서 측정하였다 (최초 10 내지 15 분에 기록). 억제제 없는 반응 속도는 100%인 것으로 가정되었다. 두개의 독립적 측정의 중간 산술적 수치는 최종 결론으로서 사용하였다.
도 1은 상이한 농도의 화합물 HC-019s-IOC의 존재 중, 트롬빈 효과 하에서 색소성 기질 크로모짐 TH (CTH)에 대한 특징적인 동력학 가수분해 곡선의 예를 도시한 것이다 (참조: 표 4). 억제제의 부재 중의 동력학 가수분해 곡선은 대조군으로서 사용되었다.
도 2는 CTH 가수분해 억제의 범위와 매우 효과적인 트롬빈 억제제인 다른 신규하게 합성된 화합물 (HC-018s-IOC)의 시스템에서의 농도 간의 관계를 도시한 것이다 (참조: 표 4).
트롬빈 활성에 대한 다수의 새로이 합성된 화합물의 억제 효과의 범위에 대한 데이타는 하기 표 4에 제공된다.
이에 따라 상기와 같이 얻어진 결과는 모든 새로이 합성된 화합물이 직접 트롬빈 억제제임을 나타낸다. 억제의 범위는 상이한 화합물에 대해 상이하지만, 대부분의 신규한 화합물은 고도로 효과적인 트롬빈 억제제이며, 이는 트림빈-의존 혈전색전증을 조절하기 위해 사용되는 약제 조성물을 기본으로 사용하고, 또한 연구에서 사용하기 위해 적합하다.
표 1. 다양한 트롬빈 억제제에 대한 공개된 중요 문헌의 리스트.
Figure pct00028
Figure pct00029
Figure pct00030
Figure pct00031
Figure pct00032
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Figure pct00035
Figure pct00036
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Figure pct00038
Figure pct00039
Figure pct00040
Figure pct00041
Figure pct00042
표 2. 실시예 1-4에 기술된 방법에 의해 합성된 트롬빈 억제제에 대한 질량 분석 파라미터 및 컴퓨터처리된 스코어링 함수
Figure pct00043
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
Figure pct00047
표 3. 실시예 5에 기술된 방법에 의해 합성된 트롬빈 억제제에 대한 질량 분석 파라미터 및 컴퓨터처리된 스코어링 함수
Figure pct00048
Figure pct00049
표 4. 상이한 농도의 일련의 신규하게 합성된 화합물의 존재하에 트롬빈 기질의 가수분해 속도의 변화의 예
Figure pct00050
Figure pct00051
Figure pct00052
Figure pct00053
Figure pct00054

Claims (5)

  1. 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물:
    A-B-C (I)
    상기 식에서, C는 하기 구조를 포함하는 군으로부터 선택되며:
    Figure pct00055

    여기서, R1, R2, R3, 및 R4는 서로 독립적으로 수소 또는 C1-6 알킬이며;
    B는 -(CH2)n-이며, 여기서 n은 1 내지 5의 정수이며;
    A는 하기 구조를 포함하는 군으로부터 선택되며:
    Figure pct00056

    여기서, R5는 수소, C1-6 알콕시, CH2NR10R11, 및 CH(CH3)NR10R11을 포함하는 군으로부터 선택되며;
    Figure pct00057

    여기서, R6 및 R7은 독립적으로 수소, C1-6 알킬; C1-6 알콕시; 및 할로겐이며;
    R8은 수소 또는 C1-6 알킬이며;
    R9는 하기 구조를 포함하는 군으로부터 선택되며:
    Figure pct00058

    R10 및 R12는 서로 독립적으로 수소, C1-6 알킬; (CH2)mCOOR13, 및 (CH2)mCON(R13)2,
    Figure pct00059
    를 포함하는 군으로부터 선택되며;
    여기서, m은 1 내지 4의 정수이며;
    R13은 수소 또는 C1-6 알킬이며;
    R11은 C1-6 알킬 또는 Ar이며;
    Ar은 수소, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, 할로겐, N(R13)2, OH, NO2, CN, COOR13, CON(R13)2, 및 SO2R13의 군으로부터 선택된 1개 내지 5개의 치환기를 갖는 페닐, 피리딜, 옥사졸릴, 티아졸릴, 티에닐, 푸라닐, 피리미디닐, 피리다조닐, 피라지닐, 인돌릴, 벤조푸라닐, 또는 벤조티오페닐이며;
    단, 하기 구조는 제외된다.
    Figure pct00060
  2. 제 1항에 있어서, 하기 구조의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물:
    Figure pct00061

    상기 식에서, Y는 수소, 할로겐, COOR13, CON(R13)2, 및 SO2R13을 포함하는 군으로부터 선택되며;
    r은 2 내지 5의 정수이다.
  3. 제 1항에 있어서, 트롬빈을 억제할 수 있는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물.
  4. 트롬빈 억제제로서의 제 1항의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물의 적용.
  5. 치료학적 유효량의 제 1항의 화합물, 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 용매화물, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 트롬빈-의존 혈전색전증의 치료 및 예방에서 사용하기 위한 약제 조성물.
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