KR20080101916A

KR20080101916A - 천녀목란 추출물을 함유하는 광노화 방지용 및피부주름개선용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20080101916A
Application number: KR1020087020012A
Authority: KR
Inventors: 이강태; 이정노; 유영경; 이승지; 이건국
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 2007-01-08
Filing date: 2007-12-13
Publication date: 2008-11-21
Also published as: KR101040507B1; EP2101723A1; US20100055210A1; JP5322948B2; CN101588788B; JP2010515675A; WO2008084923A1; EP2101723B1; EP2101723A4; CN101588788A

Abstract

본 발명은 천녀목란 추출물을 유효 성분으로 함유하는 광노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다. 또한 본 발명은 천녀목란 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부주름개선용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 천녀목란 추출물은 피부 세포의 사멸을 억제하고 세포의 DNA 손상 억제하는 등 자외선 및 피부 손상으로부터 피부를 보호해주며, 콜라겐 생합성을 증진시키고, 콜라겐을 분해하는 효소의 합성을 억제함으로써 피부주름을 개선할 수 있다. 또한 본 발명의 천녀목란 추출물을 적용한 화장료는 자외선에 의한 피부손상 억제 효과 및 주름개선효과가 탁월하다.

Description

천녀목란 추출물을 함유하는 광노화 방지용 및 피부주름개선용 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION FOR PROTECTING SKIN AGAINST UV LIGHT AND WRINKLE IMPROVEMENT CONTAINING THE EXTRACT OF MAGNOLIA SIEBOLDII FLOWER EXTRACTS}

본 발명은 천녀목란 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 천녀목란 추출물을 함유하여 자외선에 의해 손상되는 DNA 및 피부를 보호하며, 콜라겐 생합성의 증진 및 콜라겐 분해효소의 생합성을 억제하는 광노화 방지용 및 피부주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

대부분의 사람들이 성장기에는 일광에 대하여 피부가 쉽게 대응을 하지만, 연령이 높아지면서 피부 조직이 점차 변화함에 따라 일광으로 인한 거칠어짐, 주름, 착색 반점, 혈색이 나쁨, 설사, 모세혈관확장, 흑점, 자반 및 쉬운 타박상, 위축, 섬유증 탈색 부위 및 극심하게는 전암성 종양 및 악성 종양 등의 현상이 발생하게 된다.

자외선은 UVA, UVB, UVC 영역으로 나누어지며 지구상에는 UVA, UVB만 이 작용을 하고, UVC영역은 오존층에 의해 차단된다. UVB는 피부에 가장 많은 영향을 주며 주로 표피에 까지 침투하여 피부세포에 영향을 준다. UVA는 피부속 진피까지 침투하여 주로 콜라겐 합성 관련 피부 세포에 영향을 준다. 이들 자외선은 직접적으 로 영향을 주거나 간접적으로는 활성 산소를 발생시켜 피부에 영향을 준다. 자외선에 의한 피부 세포의 영향을 살펴보면 다음과 같다. 먼저, 피부세포 중 케라티노사이트 (keratinocyte)는 자외선이 조사되면 염증성 사이토카인 (cytokine)들을 분비하고 또한 산화적 스트레스가 유발되어 세포내에서 여러 종류의 단백질 키나제 및 포스포리파제가 활성화된다. 활성화된 이들 효소는 세포막 지질을 가수분해시켜 아라키돈산을 분비되게 한다. 상기의 분비된 아라키돈산은 시클로옥시게나제의 작용으로 프로스타글란딘 E2 (PGE2)로 변화된다. 이렇게 형성된 아라키돈산 및 PGE2는 사이토카인들과 협동하여 피부에서 발적을 비롯한 여러 가지의 염증 반응을 일으키며, 궁극적으로는 피부의 노화를 촉진한다.

또한, 피부세포 중 섬유아세포도 자외선의 조사에 의하여, 상기에 기재된 케라티노사이트의 활성화와 유사한 과정으로 활성화가 이루어지며, 자외선 양이 증가됨에 따라 사멸되기도 하며 DNA가 손상되어 궁극적으로는 피부암을 발생시키고 노화를 촉진한다. 즉, 자외선은 피부의 발적, 면역억제, 주름 생성 및 궁극적으로는 피부노화와 피부암을 일으킬 수 있으므로, 자외선 조사의 차단 및 방지는 피부암의 예방 및 노화의 지연에 중요한 요소가 된다.

최근 들어 대기오염 등 환경오염으로 인한 오존층의 파괴로 지상에 도달되는 자외선 양이 증가되고, 자외선의 영역 또한 변화되어 피부노화 및 피부암이 증가되고 있으며, 앞으로 더욱 증가할 것으로 예측된다. 따라서, 자외선으로부터 피부를 보호하는 것이 화장품 분야에서 매우 중요한 부분을 차지하고 있으며, 많은 화장품 제조회사에서 관련 상품을 출시하기 위해 많은 연구를 하고 있다. 현재 이용되고 있는 방법으로서는 단순한 자외선 차단제 혹은 자외선 흡수제를 사용하여 자외선으로부터의 피해를 방지하고 있는 실정이며 최근에는 이들 자외선 차단제 자체가 돌연변이를 유발하여 피부암 발생 가능성을 가지고 있다는 보고가 있다.

이러한 자외선에 의한 피부 손상은 궁극적으로 피부 노화와 연관이 있으므로, 이들을 방어할 수 있는 방법은 화장품 업계의 관심사항 중 하나이다. 자외선에 의한 피부 손상을 막기 위해서는 활성 산소를 억제하거나, 생성을 저해하는 방법이 있으며, 다른 하나는 직접적으로 자외선을 차단하는 것이 있다. 대부분의 자외선 관련 제품들은 자외선을 차단하는 특징을 가지고 있으며, 최근에는 천연물을 이용하여 자외선에 의해 발생하는 활성 산소를 억제하는 방법들을 많이 사용하고 있다.

기술적 과제

본 발명자들은 기존의 자외선 차단제와 같은 단순한 차단 작용만을 나타내는 것이 아니라, 독성을 나타내지 않고 피부 세포가 자외선 조사에 의해서 손상되는 것을 근본적으로 억제하여 장기적으로 피부 노화 및 피부암을 원천적으로 예방할 수 있는 식물생리활성 물질을 찾고자 예의 연구 노력한 결과 천녀목란 추출물이 자외선에 의한 피부 손상 방지에 탁월한 효과가 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.

기술적 해결방법

따라서, 본 발명의 목적은 천녀목란 추출물을 유효 성분으로 포함하는 광노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 천녀목란 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 천녀목란 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장 방법을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.

유리한 효과

본 발명은 천녀목란 추출물을 유효 성분으로 함유하는 광노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다. 또한 본 발명은 천녀목란 추출물을 유효 성분으로 함유하는 주름개선용 화장료 조성물을 제공한다. 발명의 천녀목란 추출물은 자외선 조사에 의한 피부 세포의 사멸을 억제하고 세포의 DNA 손상을 억제하는 등 자외선 및 피부 손상으로부터 피부를 보호해주며, 콜라겐 생합성을 증진시키고, 콜라겐을 분해하는 효소의 합성을 억제함으로써 피부주름을 개선할 수 있다. 또한 본 발명의 천녀목란 추출물을 적용한 화장료는 자외선에 의한 피부손상 억제 효과 및 주름개선효과가 탁월하다.

발명의 실시를 위한 최선의 형태

본 발명의 양태에 따르면, 본 발명은 천녀목란 추출물을 포함하는 광노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 천녀목란 추출물을 포함하는 피부주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 화장료 조성물의 유효성분인 천녀목란은 목련과의 낙엽 활엽 소교목인 함박꽃 나무(Magnolia sieboldii)이며, 천녀목란 추출물은 천녀목란의 다양한 부위 중에서 꽃으로부터 추출한 것이다.

함박꽃 나무는 높이는 7미터 정도이며, 잎은 어긋나고 긴 타원형으로 광택이 난다. 5-6월에 흰색의 큰 꽃이 밑을 향해 피고 열매는 9월에 익는다. 관상용이고 깊은 산의 중턱 골짜기에서 자라는데 함북을 제외한 한국 각지와 일본, 중국 등지에 분포한다.

본 발명에서 이용되는 천녀목란은 천녀목란 나무의 꽃, 잎, 가지, 뿌리로부터 얻을 수 있으며, 바람직하게는 꽃 또는 가지, 가장 바람직하게는 꽃으로부터 얻을 수 있다.

본 발명에서 이용되는 천녀목란 추출물은, 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 얻어질 수 있고, 바람직하게는 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (예: 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 아세톤, (d) 에틸 아세테이트, (e) 클로로포름 또는 (f) 1,3-부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 상기 천녀목란으로부터 얻은 것이다. 보다 바람직하게는, 추출 용매는 에탄올이며, 가장 바람직하게는 약 70％ 에탄올이다. 추출의 재료가 되는 천녀목란은 이를 건조하여 사용하거나 또는 그대로 사용할 수 있으며, 바람직하게는 건조하여 사용하는 것이다. 건조법으로는 자연 건조 또는 열풍 건조법을 이용할 수 있다.

본 발명의 하기 특정 제조예를 참조하여 천녀목란 추출물의 제조방법을 설명하면 다음과 같다: 건조된 천녀목란에 함수 에탄올을 첨가하여 실온에서 수일 동안 침출한다. 이를 여과하고 여액을 진공농축하여 건조 추출물을 얻는다.

한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출용매 뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 천녀목란 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물 뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 천녀목란 추출물에 포함되는 것이다.

본 발명의 천녀목란 추출물은 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

본 발명의 천녀목란 추출물은 자외선 등의 외적요인에 의한 피부 손상으로부터 피부를 보호하는 활성을 갖는다.

UVB는 피부에 가장 많은 영향을 주며 주로 표피에 까지 침투하여 피부세포에 영향을 준다. UVA는 피부속 진피까지 침투하여 주로 콜라겐 합성 관련 피부 세포에 영향을 준다. 이들 자외선은 직접적으로 영향을 주거나 간접적으로는 활성 산소를 발생시켜 피부에 영향을 준다.

상기의 외적요인에는 자외선, 스트레스 및 외부 유해 화학물질 등이 있으며, 상기 요인은 자유라디칼 (예컨대, 히드록실 라디칼, 슈퍼옥사이드 라디칼, 활성산소 및 과산화수소)을 발생시켜 피부의 산화적 스트레스를 높여 염증, 피부 세포 사멸 및 피부 세포 DNA 손상등이 일어나고 결과적으로 피부암 발생 또는 피부의 노화를 촉진한다.

본 발명의 용어 "피부 손상"은 피부가 그 정상적인 기능을 수행하지 못하는 것을 의미하며, 피부의 구성물질 (콜라겐 및 엘라스틴 등)의 손상, 피부 세포의 기능 손상 및 피부 세포의 사멸 등을 포함한다.

본 발명의 피부 세포는 피부에 존재하는 모든 세포를 포함하며, 바람직하게는 케라티노사이트 및 섬유아세포이다.

본 발명의 용어 "피부 보호"는 피부의 손상을 방지하고 손상된 피부를 개선하는 것을 포함한다.

따라서, 본 명세서에서 자외선에 의한 피부손상 방지 및 피부보호, 즉 "광노화 방지"는 활성산소 생성을 억제하고, 콜라겐 합성을 촉진시키며 콜라게나아제의 생성을 억제시킴으로써 피부주름을 개선하는 것과 동일한 의미로 사용된다.

본 발명의 천녀목란 추출물은 자외선에 의해 피부가 받는 산화적 스트레스를 제거함으로써 피부 세포의 사멸을 억제하고 DNA 손상을 방지하여 피부를 보호하게 되며, 장기적으로는 피부암 발생 및 피부 노화 등을 원천적으로 예방하고, 피부주름을 효과적으로 개선할 수 있게 된다.

본 발명의 천녀목란 추출물은 피부에 국소적으로 바르는 거나 뿌리는 것에 의해 그 효과를 달성할 수 있다. 따라서, 본 발명의 바람직한 일 양태에 따르면, 본 발명의 조성물은 크림, 로션 및 유연수 등의 화장료 조성물 또는 스프레이 및 연고 등의 약제학적 조성물 형태로 제조될 수 있다.

본 발명의 천녀목란 추출물의 함량은 총 조성물에 대하여 0.0001-20.0 중량％이며, 바람직하게는 0.01-10 중량％이다.

본 발명의 조성물이 화장품으로 제형되는 경우, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 천녀목란 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 피부 보호용 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명의 천녀목란 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 보호 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 천녀목란 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 화장방법을 수행하면, 자외선에 의해 손상되는 DNA 및 피부를 보호, 콜라겐 생합성의 증진 및 콜라겐 분해효소의 생합성 억제를 포함하는 광노화 방지 효과 및 피부주름개선 효과를 얻을 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

제조예 1. 천녀목란의 꽃 추출물의 제조

건조된 천녀목란의 꽃(경동시장, 국내산) 100 g에 물 및 에탄올의 비율을 7:3으로 조정한 70％ 에탄올 1.0L를 가하여 실온에서 3일 동안 침출하였다. 이를 여과하고 여액을 진공 농축하여 건조 추출물을 얻었으며, 추출 수율은 7.8g/100g이었다. 상기 건조 추출물을 1％ (w/v) 농도가 되도록 30％ 1,3-부틸렌 글리콜용액으로 용해하고 여과한 후 본 발명의 실험에 적용하였다.

제조예 2. 천녀목란의 전초 추출물의 제조

건조된 천녀목란의 전초 100 g에 물 및 에탄올의 비율을 7:3으로 조정한 70％ 에탄올 1.0L를 가하여 실온에서 3일 동안 침출하였다. 이를 여과하고 여액을 진공 농축하여 건조 추출물을 얻었으며, 추출 수율은 7.0g/100 g이었다. 상기 건조 추출물을 1％ (w/v) 농도가 되도록 30％ 1,3-부틸렌 글리콜용액으로 용해하고 여과한 후 본 발명의 실험에 적용하였다.

실험예 1: 자외선에 의한 인체 케라티노사이트의 세포 사멸 억제 효과

케라티노사이트에 자외선이 조사되면 세포 내에서 활성 산소가 분비된다. 상기 현상을 인위적으로 유도하기 위하여 인체의 정상 각질 세포인 Hacat 세포(한국 세포주은행)를 48-웰 마이크로 플레이트(48-well microplate)의 각 웰에 1 × 10⁴ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지 (시그마사, 미합중국)에서 24시간 동안 37℃에서 배양하였다. 여기에 자외선(UVB)를 조사한 후, 각각의 웰에 제조예 1의 천녀목란 추출물을 배양액에 0.1, 0.5, 1.0, 2.0％(v/v)로 첨가한 후 24시간 경과 후 세포 활성을 MTT 분석법을 통해 확인하였다.

표 1

상기 표 1에서 보는 바와 같이 본 발명의 천녀목란 추출물은 과산화수소에 의한 케라티노사이트의 사멸을 농도 의존적으로 억제하였으며 그 효과가 탁월하였다.

실험예 2: 자외선에 의한 인체 섬유아 세포 사멸 억제 효과

섬유아세포에 자외선이 조사되면 세포 내에서 활성 산소가 분비되며 세포는 손상을 입게 된다. 상기 현상을 인위적으로 유도하기 위하여 인체의 섬유아세포(한국 세포주은행)를 48-웰 마이크로 플레이트(48-well microplate)의 각 웰에 1 × 10⁴ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지 (시그마사, 미합중국)에서 24시간 동안 37℃에서 배양하였다. 여기에 자외선(UVA)를 조사한 후, 각각의 웰에 제조예 1의 천녀목란 추출물을 0.1, 0.5, 1.0, 2.0％(v/v)로 조정하여 배양액에 첨가한 후 24시간 경과후 세포 활성을 MTT 분석법를 통해 확인하였다.

표 2

상기 표2에서 보는 바와 같이, 본 발명의 천녀목란 추출물은 자외선에 의한 섬유아세포의 사멸을 농도 의존적으로 억제하였으며 그 효과가 탁월하였다.

실험예 3: 자외선에 의한 섬유아세포 DNA의 손상 억제 효과

섬유아세포는 자외선 조사에 의하여 DNA 손상이 유발되는데 이의 방지는 피부암의 예방 및 노화의 지연에 중요한 요소가 된다. 따라서 본 발명의 천녀목란 추출물이 상기 DNA 손상 유발을 억제하는 효과가 있는지 확인하기 위하여 다음의 실험을 실시하였다.

24-웰 세포배양 플레이트에 5×10⁴ 세포/웰로 섬유아세포 (한국세포주 은행)를 접종하였다. 여기에 자외선(UVA)을 조사한 후 각각의 웰에 제조예 1의 천녀목란 추출물을 배양액에 1.0, 2.0％(v/v) 첨가한 후 24시간 경과 후에 단세포 전기영동(Comet 분석)을 실시하였다(실시예 1 및 실시예 2). 이때, 비교를 위해서 자외선 조사 및 천녀목란 추출물을 처리하지 않은 대조군(대조예1)과 자외선 조사만 실시하고 천녀목란 추출물을 처리하지 않은 비교예(비교실시예1)를 함께 실시하였다. 영상분석기 (image analyzer: Komet, 3.1, Kinetic imaging, 잉글랜드)를 사용하여 꼬리 길이 (tail length: ㎛)를 측정하고 이를 척도로 하여 DNA 손상정도를 분석하였다.

표 3

상기 표 3에서 보는 바와 같이, 본 발명의 천녀목란 추출물은 자외선에 의한 섬유아세포의 DNA 손상(비교실시예 1 참조)을 농도 의존적으로 억제하였으며(실시예1 및 실시예2 참조), 본 발명의 제조예 1의 천녀목란 추출물을 2 부피％로 처리한 실시예2의 결과는 대조군과 거의 유사한 값을 얻음으로써 자외선에 의한 섬유아세포의 DNA 손상 억제 효과가 매우 탁월함을 증명하였다.

실험예 4: 천녀목란 추출물의 콜라겐 분해 효소 생성 억제 효과

상기 실시예 1에서 얻은 시료를 이용하여 본 실험을 실시하였는데 실험은 다음과 같이 진행되었다. 먼저, 인체의 정상 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트(넝크사, 덴마크)의 각 웰에 1×10⁶ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(시그마사, 미합중국)에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 제조예 1 및 제조예 2의 천녀목란 추출물을 0.01, 0.1, 1.0, 2.0 및 5.0％(v/v)로 하여 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 후 48시간 동안 추가로 배양하였다. 이때 대조군으로 천녀목란 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체하여 실험하였다(대조예 2). 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 콜라겐 분해 효소 분석 킷트(Amersham, 미합중국)를 이용하여 콜라겐 분해 효소 생성 정도를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 4 에 나타내었다.

표 4

천년목란 추출물의 콜라겐 분해효소 생성 억제 효과

상기 표 4의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 천녀목란 추출물은 아무것도 처리하지 않은 대조예 2에 비해 콜라겐 분해효소의 생성을 억제하였으며, 실시예 3 내지 7 및 실시예 8 내지 12의 결과에서도 알 수 있듯이 농도 의존적으로 콜라겐 분해효소의 생성을 억제함을 알 수 있었다. 또한 본 발명의 천녀목란 추출물에 있어서, 천녀목란 전초로부터 추출한 천녀목란 전초 추출물에 비해 천녀목란 꽃 추출물이 콜라겐 분해효소의 생성을 억제효과가 더 우수한 것을 알 수 있었다.

실험예 5. 천녀목란 추출물의 콜라겐 합성 증진 효과

인체의 정상 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 1 × 10⁶ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 제조예 1 및 제조예 2의 천녀목란 추출물을 0.01, 0.10, 1.0, 2.0 및 5.0 v/v％로 하여 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군(실시예 13∼22)과 천녀목란 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군(대조예 3)을 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐(procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PICP) 양을 키트 (Takara, 일본)를 이용하여 새로 합성된 콜라겐 양을 측정하여 하기 표 5 에 나타내었다.

표 5

천년목란 추출물의 콜라겐 합성 증진 효과

상기 표 5 의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 천녀목란 추출물은 아무것도 처리하지 않은 대조예 3에 비해 콜라겐 생성량이 훨씬 증가한 것을 확인함으로써 본 발명의 천녀목란 추출물이 콜라겐 생성 증진 효과가 우수함을 입증하였다. 또한 실시예 13 내지 17 및 실시예 18 내지 22의 결과에서도 알 수 있듯이 천녀목란 추출물의 농도 의존적으로 콜라겐 생성 증진 효과가 우수하였으며, 상기 실험예 4와 마찬가지로 천녀목란 전초 추출물에 비해 천녀목란 꽃 추출물이 더 우수한 효과를 나타내었다.

이하, 제형예에는 본 발명의 제조예 1로부터 제조된 천녀목란 꽃 추출물을 사용하였으나, 제조예 2의 천녀목란 전초 추출물을 사용하여도 무방하다.

제형예 1. 유연 화장수(스킨)

상기에서 수득한 천녀목란 추출물을 포함하는 화장료 중 유연 화장수(스킨)의 제형예는 다음과 같다:

표 6

제형예 2. 영양화장수(밀크로션)

상기에서 수득한 천녀목란 추출물을 포함하는 화장료 중 영양화장수(밀크로션)의 제형예는 다음과 같다:

표 7

제형예 3. 영양크림

상기에서 수득한 천녀목란 추출물을 포함하는 화장료 중 영양크림의 제형예는 다음과 같다:

표 8

제형예 4. 맛사지 크림

본 발명의 천녀목란 추출물을 함유한 화장료 중 맛사지 크림의 제형에는 다음과 같다:

표 9

제형예 5. 팩

상기에서 수득한 천녀목란 추출물을 포함하는 화장료 중 팩의 제형예는 다음과 같다:

표 10

실험예 6. 자외선에 의한 피부 보호 효과

본 발명의 천녀목란 추출물이 함유된 화장료의 자외선에 의한 피부 보호를 확인하기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다. 우선, 인위적으로 사람의 피부에 자외선을 조사한 후(1.5MED) 제형예 3에서 제조한 영양크림을 6시간 간격으로 도포하여 주었다. 비교예로는 제형에 3에서 천녀목란 추출물을 뺀 것을 사용하였다. 실험은 20명을 대상으로 하였으며 자외선 조사 후 48시간 후 홍반 생성 정도를 육안 평가 및 기기 평가를 실시하였다. 기기 평가는 피부 색도계(Skin colorimeter, Minolta사, 일본)를 이용하여 측정하였으며 결과는 하기 표 9에 나타내었다.

표 11

*사용전 : 자외선 조사 전

**사용후 : 자외선 조사후 48시간 경과 후

***a value : 피부의 홍반 정도를 나타내며 이 값은 평균(20명)값을 나타냄

상기 표 11의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 천녀목란 추출물이 함유된 제형의 홍반 생성 정도가, 천녀목란 추출물이 첨가되지 않은 제형에서보다 현저하게 감소하는 것을 확인하였으며, 이는 천녀목란 추출물이 자외선에 의한 피부 손상을 억제하는 효과가 매우 탁월하다는 것을 보여 준다.

실험예 7: 천녀목란 추출물을 함유한 화장료의 주름 개선 효과 평가

본 발명의 화장료의 주름 개선 효과를 실제 사용 테스트를 통하여 평가 하였다. 제조예 1의 천녀목란 추출물을 1％(v/v)를 함유하고 있는 제형예 3의 영양 크림 및 제형예 3의 영양크림에서 천녀목란 추출물을 정제수로 대체한 크림을 비교예로 사용하였다. 30명의 여성을 대상으로 얼굴의 한쪽 면에는 제형예 3의 영양 크림을 다른쪽 면에는 비교예의 크림을 사용하여 6주 후의 주름 개선 효과를 전문가의 육안 평가를 통하여 주름의 개선 정도를 평가하였다. 이 평가를 토대로 한 주름 개선 효과 결과는 하기의 표 12에 나타낸 바와 같다.

표 12

천년목란 추출물을 함유한 영양크림의 주름 개선 효과(육안평가)

상기 표 12의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 천녀목란 추출물을 함유한 제형예 3의 영양크림은 천녀목란 추출물을 함유하지 않은 비교예의 크림에 비하여 높은 주름개선 효과를 보여주었으며, 본 화장료를 피부에 도포한 대부분의 피검자들에게서 피부 자극을 관찰할 수 없었다.

Claims

천녀목란 추출물을 유효 성분으로 포함하는 광노화 방지용 화장료 조성물.
천녀목란 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부주름개선용 화장료 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 천녀목란 추출물은 자외선에 의한 피부세포 손상을 억제하며, 자외선에 의한 피부 세포의 DNA손상을 억제함으로써 피부를 보호하고, 피부주름을 개선하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 천녀목란 추출물의 함량은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.0001-20.0 중량％인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장 방법.