KR20080101843A - 박하 추출물의 화장 용도 - Google Patents

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KR20080101843A
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Abstract

본 발명은 특히 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도되는 멜라닌의 합성 및/또는 방출을 예방 및/또는 감소시키기 위한 비치료적 트리트먼트 방법에 관한 것으로서, 활성 물질로서 박하 과의 하나 이상의 식물 세포의 하나 이상의 추출물을 포함하는 화장용 조성물이 이용된다.
박하

Description

박하 추출물의 화장 용도{Cosmetic use of an extract of Mentha}
본 발명은 특히 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 멜라닌형성 저해제로서 및/또는 탈색제로서 박하 과의 하나 이상의 식물 세포의 추출물의 용도에 관한 것이다.
멜라닌형성은 세포 색소침착과 관련된 멜라닌을 합성하는 과정이다. 이는 L-티로신 아미노산의 히드록실화에 의해 개시되는 복잡한 생화학적 과정이며, L-디히드록시페닐알라민 (L-DOPA)의 형성을 초래한다. L-DOPA는 차례로 특이적인 멜라닌세포 관련 효소인 티로시나아제의 작용에 의해 DOPAchrome으로 전환되며, 이은 환원 및 산화 반응은 DOPAchrome의 멜라닌으로의 전환을 초래한다. 티로시나아제의 생산 및 이의 활성은 부분적으로 생성된 멜라닌의 양을 결정한다. 각질세포로 전달된 멜라닌의 양 및 유형은 인간 피부의 가시적 색소침착의 정도를 결정한다.
멜라닌은 주로 일광, 더욱 일반적으로 UV 광선에 대한 피부에 관한 보호 기능을 제공하는 것으로 알려져 있다. 멜라닌은 상기 광선을 흡수하므로, 조사(irradiation) 동안 생성된 자유 라디칼에 의해 야기될 수 있는 손상의 징후의 위험을 현저하게 감소시킨다.
그러나, 멜라닌은 각질세포, 내피세포, 섬유모세포 및 랑게르한스세포에서, 오염 또는 UV 광선과 같은 외부의 자극, 및/또는 노화 또는 내부 스트레스로 인한 내재하는 자극에 반응하여 과도하게, 또는 심지어 비정상적으로 합성될 수 있다.
실제로, 상기 2가지 자극 방법 중의 몇 개가 공존할 수 있다.
그리하여, UV 방사선은 첫째로 멜라닌세포를 직접 자극함으로써 멜라닌 합성을 유도하며, 둘째로, 매개자를 통해 각질세포, 내피세포 및 섬유모세포에 의한 메시지를 개시 및/또는 촉진함으로써 멜라닌형성을 간접적으로 자극한다. 특히, 각질세포는 알파-MSH (알파-멜라닌세포 자극 호르몬), 엔도텔린, E2 프로스타글란딘 및 NO와 같은 합성 매개자를 통해 멜라닌세포와 연락하는 것 같다.
특히 외부 자극에 의해 유도된 과도한 색소침착의 발생에 대항하는, 특히 피부의 정상적인 착색을 회복하는 활성 물질이 이미 제안되어 왔다. 상기 활성 물질의 예로는, 특히 L-아스코르브산, 코지산, 히드로퀴논 등을 언급할 수 있다.
그러나, 상기 활성 물질은 더욱 특히 내부 스트레스에 의해 유도된 과도한 색소침착을 치료하는 것이 가능하지 않다.
그러므로, 자극의 후자 방법에 의해 유도된 과도한 색소침착을 치료하는 것을 가능하게 하는 활성 물질을 갖는 요구가 여전히 존재한다.
본 발명가는 박하 과의 식물의 세포 추출물이 새롭게 기재된 활성을 나타내는 내부 스트레스에 의해 특히 유도되는 멜라닌형성 과정을 저해할 수 있는 활성 물질로서 이용될 수 있다는 것을 완전히 예기치않게 정확하게 입증하였다.
박하(Mentha piperita)의 유도체는 문헌 WO 2004/058282에서 피부에 대한 진 정 효과를 갖는 활성 물질로서 이미 제안되어 왔다. 그러나, 상기 문헌은 내부 스트레스에 의해 유도된 멜라닌형성 과정에 관한 상기 유형의 추출물의 특성을 언급하지 않았으며, 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 멜라닌형성의 과다와 관련된 피부 질환을 예방 및/또는 치료하는데 이의 유효성에 대해서는 더욱이 언급하지 않았다.
본 발명가에 의해 개발된 신규 활성은 멜라닌의 합성 및/또는 방출을 예방 및/또는 감소시키고, 내부 스트레스에 따라 발생하는 피부 색소침착의 과다 또는 피부 질환과 싸우는데 바람직하다.
본 발명의 명세서에서, 표현 "내부 스트레스" 및 "정서적 유형의 스트레스"는 동등하며, 양자는 심리적 스트레스 또는 피로에 의해 유도, 즉, 야기 또는 증폭되는 내재적인 변형을 나타낼 목적이다.
정서적 유형의 스트레스는 특히 호르몬 및/또는 신경호르몬, 예를 들면 카테콜아민의 혈액으로 및 말초 조직으로 방출을 통해 나타난다.
특히 노르아드레날린인 것 중에서 카테콜아민의 양의 증가에 의해 반영될 수 있다: 노르아드레날린형 스트레스를 참고한다.
내부 스트레스에 의해 유도된 멜라닌형성에 대한 박하 추출물의 효과를 증명하기 위해, 본 발명가는 시험관 내 다세포 각질세포/멜라닌세포/신경세포 모델을 이용하였다. 상기 노르아드레날린에 의해 자극된 시험관 내 모델은 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 멜라닌형성에 대한 잠재적인 활성 물질의 효과를 평가하는데 적합한 것으로 밝혀졌다.
본 발명가는 그리하여 상기 모델에서 박하 추출물의 활성이 멜라닌형성의 또 다른 간접적인 파트너, 즉 폴리펩티드 화학 성분인 칼시토닌 유전자 관련 펩티드 (CGRP)의 방출의 저해에 의해 반영된다는 것을 주목하였다.
지금, 각질세포는 CGRP에 의한 자극에 반응하여 멜라닌세포의 성장, 멜라닌 합성 및 수상돌기형성(dendricity)을 조절하는 흑화성(melanotrophic) 인자를 생산하는 것으로 알려져 있다 (Mashiko Toyoda et al., The society for investigate dermatology, Inc, Vol. 4, No 2, September 1999).
CGRP는 칼시토닌 유전자로부터 생성되는 37개 아미노산 펩티드이며, 가장 널리 분포되며, 가장 풍부한 감각 신경펩티드이다. 또한 UV 방사선과 같은 외부 자극에 반응하여 신경 말단에 의해 분비되는 것으로 알려져 왔으며 (Scholzen et al, Journal of investigative dermatology symposium proceedings, 1999, 4 (1):55-60), 이의 분비는 오염과 같은 외부 공격에 의해 자극된다는 것이 알려져 왔다.
더욱 최근에, 또한 CGRP의 생성은 정서적 유형의 스트레스에 반응하여 촉진될 수 있다는 것이 알려져 왔다. 그리하여, CGRP 분비는 노르아드레날린 및 아드레날린과 같은 스트레스 호르몬에 의해 촉진될 수 있다는 것이 밝혀졌다.
따라서, 본 발명가는 박하 추출물이 CGRP 방출을 저해하는 성질을 가지므로, 멜라닌형성을 조절하고, 특히 멜라닌형성이 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도될 때, 멜라닌형성을 저해하는 것이 가능하다는 것을 발견하였다.
상기 이유로, 이의 양태에 따라, 본 발명은 특히 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 멜라닌의 합성 및/또는 방출을 예방 및/또는 감소시키기 위한 치료적 또는 비치료적 트리트먼트, 특히 화장 트리트먼트 방법에 관한 것으로, 활성 물질로서 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 화장용 조성물이 이용된다.
본 발명의 또 다른 양태에 따라, 본 발명은 특히 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 피부 색소침착의 과다를 예방 및/또는 치료하기 위한 치료적 또는 비치료적 트리트먼트, 특히 화장 트리트먼트 방법에 관한 것으로, 전술한 조성물이 이용된다.
본 발명의 여전히 또 다른 양태에 따라, 본 발명은 특히 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 과도한 멜라닌형성과 관련된 피부 질환을 예방 및/또는 치료하기 위한 치료적 또는 비치료적 트리트먼트, 특히 화장 트리트먼트 방법에 관한 것으로, 전술한 화장용 조성물이 이용된다.
본 발명의 또 다른 양태에 따라, 본 발명은 또한 박하 추출물이 CGRP의 저해 에 의해 작용하는 기작과 상이한 기작에 따라 멜라닌형성에 작용하는 부가적인 탈색제와 박하 추출물이 유리하게 조합될 수 있는 신규 조성물에 관한 것이다. 상기 부가적인 탈색제는 예를 들면, 티로시나아제의 저해 또는 멜라닌형성을 간접적으로 자극하는 NO 또는 프로스타글란딘과 같은 2차 전달자의 저해의 기작에 따라 작용할 수 있다.
다양한 작용 방법에 따라 동시에 작용하는 상기 조합은 착색 반점 및 흠에 대한 개선된 전반적인 효과를 수득할 수 있게 한다.
그리하여, 본 발명의 주제는 또한 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 티로시나아제의 저해 또는 멜라닌형성을 간접적으로 자극하는 NO 또는 프로스타글란딘과 같은 2차 전달자의 저해의 기작에 따라 작용하는 하나 이상의 탈색제와 조합된 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 화장용 및/또는 피부학적 조성물이다.
특정 구현예에 따라, 본 발명은 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 하나 이상의 각질용해제, 박리제, 항-NO제 및/또는 킬레이트제와 조합된 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 피부학적 및/또는 화장용 조성물에 관한 것이다. 상기 물질은 아스코르브산 및 이의 유도체와 상이하다.
또 다른 특정 구현예에 따라, 본 발명은 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 하나 이상의 각질용해제, 박리제, 항-NO제, 항-UV제, 화이트닝제, 항염증제, 킬레이트제 및/또는 항산화제와 조합된 하나 이상의 탈색제 및 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 피부학적 및/또는 화장용 조성물에 관한 것이다.
또 다른 특정 구현예에 따라, 본 발명은 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 하나 이상의 아스코르브산(비타민 C), 또는 하나 이상의 이의 유도체, 예를 들면, 마그네슘 아스코르빌 포스페이트(비타민 C PMg), 글리코실 아스코르베이트(비타민 C G), 소듐 아스코르빌 포스페이트(비타민 C PNa) 및 3-O-에틸 아스코르브산과 조합된 멘타 피페리타(Mentha piperita) 속의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 피부학적 및/또는 화장용 조성물에 관한 것이다.
그리하여, 본 발명의 목적은 또한 일광 등에 의해 야기된 피부 색소침착, 예를 들면 흑색점(단순 유형 또는 일광 유형 또는 노인성 유형), PUVA 흑색사마귀, 선베드(sunbed) 흑색사마귀, 망상 흑색점, 주근깨 또는 기미 (chloasmae)를 예방 및 치료하는데 특히 효과적며, 멜라닌형성 과정을 저해하는데 더욱 특히 효과적인 박하 추출물 및/또는 신규 조성물을 제안하는 것이다.
본 발명가는 특히 박하 추출물, 특히 박하 과의 식물의 세포 추출물과 이후에 기재되는 부가적인 탈색제의 조합이 상기 효과를 제공하는데 특히 유용한 것으로 증명된다는 것을 발견하였다.
본 발명은 또한 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 조성물의 총 중량에 대해 0.4 중량% 미만의 건조 활성 물질의 비율로 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 피부학적 및/또는 화장용 조 성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은 국부 또는 경구 투여용으로 제형화될 수 있다.
본 발명은 또한 탈색제로서 본 발명에 따른 박하 과의 하나 이상의 식물의 세포 추출물 및/또는 조성물의 생체 내 또는 시험관 내 용도에 대한 것이다.
본 발명은 또한 특히 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 멜라닌형성을 저해하기 위한 물질로서 본 발명에 따른 박하 과의 하나 이상의 식물의 세포 추출물 및/또는 조성물의 생체 내 또는 시험관 내 용도에 관한 것이다.
본 발명은 또한 피부 화이트닝제로서 본 발명에 따른 박하 과의 하나 이상의 식물의 세포 추출물 및/또는 조성물의 용도에 관한 것이다.
본 발명의 목적상, 용어 "멜라닌형성"은 예를 들면, 멜라닌의 화학 전구체, 이의 중간체 중의 하나, 또는 부산물을 합성하는 과정에 관한 효소학적 및/또는 비효소학적 반응 모두를 포함하는 멜라닌 합성의 과정을 나타낸다.
본 발명의 목적상, 용어 "저해"는 작용 또는 과정의 기능을 감소, 제한 또는 막는 것을 의미한다.
본 발명의 목적상, 멜라닌형성이 일어나는 표피 멜라닌세포의 생명에 직접 작용하고/하거나 멜라닌형성에 관련된 효소 중의 하나를 저해하거나, 또는 멜라닌 합성 사슬의 화합물 중의 하나의 구조 유사체로서 삽입하여 상기 사슬이 봉쇄되어 탈색을 보증함으로써 멜라닌 생합성의 단계 중의 하나를 방해한다면 물질은 탈색된 것으로 인정된다.
추출물의 정의
용어 "하나 이상의 박하의 추출물"은 "박하 세포의 추출물"로서 이해되어야 하므로, "박하 과의 하나 이상의 식물 세포의 추출물"로서 이해되어야 한다.
하나 이상의 박하의 추출물은 박하 과로부터 유래된 임의의 식물 물질로부터 제조된 추출물일 수 있으며, 상기 물질은 시험관 내 또는 생체 내 배양에 의해 수득되어 왔다.
용어 "시험관 내 배양"은 인공적으로 식물 또는 식물 부위를 수득하게 하는 당업자에게 공지된 모든 기술을 의미할 의도이다.
그리하여, 예를 들면 본 발명에 따라, 상기 추출물은 시험관 내 배양에 의해 수득된 하나 이상의 박하의 기관(뿌리, 줄기, 잎), 또는 심지어 기관의 세포의 추출물, 또는 하나 이상의 박하의 미분화된 세포의 추출물일 수 있다. 바람직하게는, 시험관 내 배양에 의해 수득된 미분화된 세포로부터 수득된 추출물이 이용된다.
용어 "미분화된 식물 세포"는 구체적인 전문화의 임의의 특성을 나타내지 않으며, 그 자체로 살아 있으며, 기타 세포에 의존 상태가 아닌 임의의 식물 세포를 의미할 의도이다. 상기 미분화된 식물 세포는 유도 효과하에 아마도 이의 게놈에 따라 임의의 분화를 할 수 있다.
상기 박하 과는 몇 가지 종을 포함한다.
본 발명에 따라 이용될 수 있는 박하 과의 속 중에서, 예를 들면, 멘타 아쿠아티카(Mentha aquatica), 멘타 아르벤시스(Mentha arvensis), 멘타 론기폴리아(Mentha longifolia), 멘타 피페리타(Mentha piperita), 멘타 풀레기움(Mentha pulegium) 및 멘타 스피카타(Mentha spicata) 속을 언급할 수 있다.
본 발명에 따라 더욱 구체적으로 고려된 종은 멘타 피페리타(Mentha piperita) 속으로부터 유래된다.
당업자에게 공지된 임의의 추출 방법이 본 발명에 따라 이용될 수 있다. 알코올 추출물, 특히 에탄올 추출물, 및 수성-알코올 추출물을 언급할 수 있다. 또한, 문헌 WO 04/058282에 기재된 방법에 의해 제조된 추출물을 이용할 수 있다. 상기 추출물은 10 내지 110　g/l, 또는 심지어 45 내지 75　g/l의 건조 활성 물질을 포함할 수 있다. 예를 들면, 상기 추출물은 2 내지 30　g/l의 당 (M. Dubois et al., Analytical Chemistry 28, No 3, 페이지 350-356, 1956의 방법에 의해 측정) 및 히드록시신남산 화합물, 플라본, 플라보논 및 쿠마린을 포함하는 0.2 내지 2.7　g/l의 폴리페놀 (포타슘 페리사아니드를 이용한 비색 분석에 의해 측정)을 포함할 수 있다.
박하 추출물은 또한 시판된다. 그리하여, GREENTECH 사가 판매하는 캐나다 박하 잎의 물-글리콜 추출물, ALBAN MULLER 사가 판매하는 프로필렌 글리콜을 이용한 멘타 피페리타(Mentha piperita) 잎의 추출물, 및 SILAB 사의 상표명 CALMISKIN
Figure 112008074535590-PAT00001
하에 판매하는 멘타 피페리타(Mentha piperita) 잎의 추출물이 본 발명에 따라 이용될 수 있다.
박하 추출물은 제형화된 조성물에 본 발명에 따른 필요한 성질을 부여하는데 효과적인 양으로 존재한다.
다르게 언급되지 않는다면, 박하 추출물의 양은 건조 활성 물질로서 나타낸 다. 용어 "건조 활성 물질"은 당업자에게 공지된 임의의 방법에 의해 측정될 수 있는 바와 같이, 추출물의 건조 후에 잔류 물질의 양을 나타낼 의도이다. 상기 측정은 예를 들면, 출원 WO 2004/058282에 기재된 프로토콜에 따라 수행될 수 있다.
그리하여, 본 발명의 화장용 또는 피부학적 조성물은 조성물의 총 중량에 대해 0.4 중량% 미만, 특히 0.1 중량% 미만, 심지어 0.05 중량% 내지 0.001 중량% 범위의 박하 추출물의 건조 활성 물질의 양을 포함할 수 있다.
명백한 이유로, 상기 박하 추출물의 양은 상당히 변할 수 있으며, 특히 원하는 CGRP-저해 활성 및/또는 해당하는 조성물에 대해 선택된 투여 방법, 즉 국부 또는 경구 투여에 의존할 수 있다.
예를 들면, 박하 추출물은 본 발명에 따른 조성물 중에, 더욱 특히 국부 적용으로 의도한 조성물 중에, 0.001 내지 0.4 중량%, 특히 0.002 내지 0.35 중량%, 및 특히 0.003 내지 0.1 중량%의 범위의 건조 활성 물질의 양으로 이용될 수 있다.
박하 추출물과 탈색제의 조합
전술한 바와 같이, 본 발명은 또한 CGRP 저해 기작과 상이한 기작에 따라 멜라닌형성에 작용하는 하나 이상의 탈색제와 조합된 하나 이상의 박하 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 이는 특히 티로시나아제의 저해, 또는 멜라닌형성을 간접적으로 자극하는 2차 전달자의 저해 기작에 따라 작용하는 탈색제를 포함할 수 있다.
본 발명에 따라 이용될 수 있는 탈색제의 비제한적인 예로서, 특히 코지산, 아르부틴, 엘라그산, 루시놀, S 리놀레산, 트라넥삼산, 포타슘 4-메톡시살리실레이 트, 디소듐 아데노신 모노포스페이트 OT, 또는 디히드록시디프로필비페닐 (DDB)을 언급할 수 있다.
특정 구현예에 따라, 본 발명은 또한 하나 이상의 아스코르브산(비타민 C), 또는 이의 유도체, 예를 들면, 마그네슘 아스코르빌 포스페이트(비타민 C PMg), 글리코실 아스코르베이트(비타민 C G), 소듐 아스코르빌 포스페이트(비타민 C PNa) 및 3-O-에틸 아스코르브산과 조합된 멘타 피페리타(Mentha piperita) 속의 하나 이상의 식물 세포의 하나 이상의 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물이 티로시나아제의 저해, 또는 멜라닌형성을 간접적으로 자극하는 2차 전달자의 저해 기작에 따라 작용하는 하나 이상의 탈색제, 특히 상기 열거한 탈색제와 조합된 하나 이상의 박하 추출물을 포함할 때, 이후에 기재될 하나 이상의 각질용해제, 박리제, 항-NO제, 항-UV제, 화이트닝제, 항염증제, 킬레이트제 및/또는 항산화제를 부가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 화장용 및/또는 피부학적 조성물은 조성물의 총 중량에 대해 0.1 내지 7 중량%, 바람직하게는 0.5 내지 7 중량%의 탈색제를 포함할 수 있다.
당연히, 상기 양은 특히, 이용된 탈색제의 성질에 따라, 자체로 또한 상당히 변할 수 있으며, 또한 원하는 탈색 활성 및/또는 해당하는 조성물에 대해 선택된 투여 방법에 의존할 수 있다.
피부 질환
전술한 바와 같이, 본 발명에 따른 박하 추출물 및/또는 조성물은 특히 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 피부 색소침착의 과다, 특히 과도한 멜라닌형성 과 관련된 피부 질환을 예방 및/또는 치료하는데 특히 유리한 것으로 증명되었다.
더욱이, 본 발명에 따른 박하 추출물 및/또는 조성물은 또한 멜라닌과다증을 예방 및/또는 치료하는데 유용할 수 있다.
멜라닌과다증은 피부에서 멜라닌의 과부하 또는 멜라닌의 비정상적인 분포에 해당한다.
멜라닌과다증에서, 표피와 관련된 비정상인 멜라닌피부증은 진피의 비정상인 건피증과 구별될 수 있다.
멜라닌피부증은 표피의 기저층에 활성 멜라닌세포의 수의 증가 또는 멜라닌세포의 수의 임의의 변형 없이 표피에서 멜라닌의 양의 증가에 기인할 수 있다. 후자의 경우는 대부분의 피부 과다색소침착을 구성한다.
이는 특히 티로시나아제의 증가된 합성, 멜라닌소체 멜라닌화의 증가, 각질세포로의 전달의 증가 및/또는 각질세포에서 멜라닌소체의 생존의 증가에 의해 유도될 수 있다.
멜라닌과다증의 예로서, 흑색점, PUVA 흑색사마귀, 선베드(sunbed) 흑색사마귀, 망상 흑색점, 주근깨 및 기미 (또는 기미)를 더욱 특히 언급할 수 있다.
흑색점은 표피 과다멜라닌세포증이다. 이는 이의 색깔이 햇빛에 의해 변형되지 않는다면 단순한 유형이거나, 또는 일광 유형 또는 노인성 유형이다. 후자는 일반적으로 크기가 더 크다. 이는 광노출된 영역에서 관찰된다. 이는 화상 후에 젊은이 및 일광에 노출에 따른 노인에서 나타난다. 나이가 70 이상인 개인의 90% 이상이 특히 손 등, 얼굴, 팔, 등의 상단 부분 및 목 및 어깨에 일광 흑색점을 나 타낸다. 몇 가지 일광 흑색점은 연결되어, 큰 피복을 형성한다.
PUVA 흑색사마귀는 일광 흑색점과 약간 상이하며, 장기간 PUVA 치료를 받는 환자에서 나타나는 평형반이다. 이는 UVA 방사선에 노출된 영역에서 발견된다.
선베드(sunbed) 흑색사마귀는 단일의 강한 노출 후 또는 만성 및 규칙적인 노출 후에 소라렌(psoralene) 없이 선베드를 이용하는 밝은 포토타입을 갖는 환자에서 나타난다.
망상 흑색점은 색깔이 매우 어두운, 거의 흑색인 일광 흑색점의 변이체이다.
주근깨(ephelide), 또는 주근깨(freckle)는 가장 특히 매우 밝은 피부를 갖는 개인에서 광노출된 영역(얼굴, 손 등, 아래팔)에서 나타난다. 이의 착색은 일광에 노출 후에 강화된다.
기미(melasma) 또는 기미(chloasma)에 관해, 광노출된 영역에 배타적으로 존재하는 과다색소침착이다. 임신 또는 호르몬 치료 동안, 또는 특정 약물을 복용할 때 나타난다.
본 발명에 따라 고려되는 박하 추출물 및/또는 조성물은 상기 모든 표피 과다멜라닌세포증을 예방 및/또는 치료하는데 효과적인 것으로 밝혀졌다. 본 발명의 유리한 구현예에 따라, 박하 추출물은 또한 피부에 활성인, 특히 원하는 탈색 효과와 협력할 수 있는 또 다른 물질과 조합될 수 있다.
상기 활성 물질은 특히 각질용해제, 박리제, 항-NO제, 항-UV제, 화이트닝제, 항염증제, 킬레이트제 및/또는 항산화제로부터 선택될 수 있으며, 동일한 화합물은 상기 특성 중의 몇 가지를 가질 수 있는 것으로 이해된다.
본 발명의 목적상, 각질용해제 또는 박리제는 표피의 상단층을 박리하고, 멜라닌으로 적재된 사멸 세포를 제거할 물질이다.
이에 대해, 페놀 유도체, 및 더욱 특히 살리실산 또는 이의 유도체 중의 하나 및/또는 너도밤나무 싹 추출물이 가장 특히 적합하다.
그리하여, 바람직하게는, 상기 페놀 유도체는 N-(4-히드록시페놀)아세트아미드 또는 대안적으로 아세트아미노펜이라 불리는 파라세타몰, 살리실산 및 살리실산 유도체로부터 선택된다.
상기 페놀 유도체가 살리실산 유도체인 경우에, 바람직하게는 5-n-옥타노일살리실산, 5-n-데카노일살리실산 및 5-n-도데카노일살리실산, 또는 이의 염 중의 하나로부터 선택된다.
또한, AHA, BHA, 및 유도체, 아미노산 및 산 유도체를 언급할 수 있다.
UV 광선 흡수제(또는 항-UV제)의 비제한적인 예로서, 더욱 특히 p-아미노벤조산 (PABA), 글리세릴 p-아미노벤조에이트, 에틸디히드록시프로필 p-아미노벤조에이트, 옥틸메톡시 신나메이트, 2-에톡시에틸 p-메톡시신나메이트, 2,4-디히드록시벤조페논, 2-히드록시-4-메톡시벤조페논, 2-히드록시-4-메톡시-4-메틸벤진벤조페논, 2-히드록시-4-메톡시-4-메틸벤조페논-5-설포네이트, 에틸 우로카네이트, 2-페닐-5-메틸벤족사졸, 4-메톡시-4-t-부틸디벤조일메탄 및 에틸헥실 p-메톡시신나메이트, 및 유사체를 언급할 수 있다.
항산화제로서, 특히 폴리페놀 유도체를 언급할 수 있다.
본 발명의 조성물에 이용될 수 있는 폴리페놀 화합물은 예를 들면, 하기로부 터 선택될 수 있다:
a) 플라보노이드,
b) 카르노스산 또는 카르노솔,
c) 임의 치환된 (2,5-디히드록시-페닐)카르복실산 및 (2,5-디히드록시페닐)알킬렌카르복실산, 및 이의 유도체, 특히 이의 염, 에스테르 또는 아미드,
d) 카페산 에스테르 또는 아미드,
e) 탄닌산, 및 이의 혼합물.
본 발명에 따라 이용될 수 있는 플라보노이드 중에서, 특히 탁시폴린, 카테킨, 에피카테킨, 에리오딕티올, 나린게닌, 루틴, 트록세루틴, 크리신, 탄게레틴, 루테올린, 에피갈로카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트, 쿠에르세틴, 피세틴, 카엠프페롤, 갈란긴, 갈로카테킨, 및 에피카테킨 갈레이트를 언급할 수 있다.
이용될 수 있는 특정 폴리페놀은 공지의 방식으로 추출될 수 있는 식물에 존재한다. 차 잎(카멜리아 시넨시스(Camellia sinensis) 또는 카멜리아 자포니카(amellia japonica))의 추출물이 이용될 수 있다. 특히, 플라보노이드를 포함하는 Nikko 사에서 상표명 Sunphenon 하에 판매하는 녹차 추출물을 언급할 수 있다.
상기 정의된 폴리페놀은 조성물의 총 중량에 대해 0.1 중량% 내지 1 중량%의 비율로 존재할 수 있다.
상기 항-NO제는 은행(gingko biloba), 산사나무, 올리브나무, 포도, 나륵풀, 생강, 마늘 및 녹차 추출물, 및 이의 혼합물로부터 더욱 특히 선택될 수 있다.
은행(gingko biloba) 추출물은 가장 특히 유리한 것으로 밝혀졌다. 상기 추 출물은 특히 시판되는 형태로 분포된다. 본 발명에 따른 화장용 또는 피부학적 조성물에서, 은행 추출물은 일반적으로 고체 기재로, 조성물의 총 중량에 대해 0.01 중량% 내지 10 중량%의 농도로 존재한다.
본 발명에 따라 이용될 수 있는 킬레이트제의 비제한적인 예로서, 특히 테트라소듐 헤데테이트 및/또는 시트르산을 언급할 수 있다.
본 발명에 따라 이용될 수 있는 화이트닝제의 비제한적인 예로서, 특히 아스코르브산(비타민 C) 및 유도체, 예를 들면, 마그네슘 아스코르빌 포스페이트(비타민 C PMg), 글리코실 아스코르베이트(비타민 C G), 소듐 아스코르빌 포스페이트(비타민 C PNa) 및 3-O-에틸 아스코르브산, 카모밀, 폴리페놀, 예를 들면, 엘라그산, 코지산, 또는 감초 추출물을 언급할 수 있다.
이는 특히 적어도 비타민 C　G 및/또는 감초 추출물을 포함할 수 있다.
비타민 C　G는 비타민 C로부터 유도되며, 상기 비타민 및 시클로덱스트린 글루카노트랜스퍼라아제 (CGTase) 효소를 이용하여 전분으로부터 생명공학에 의해 수득된다. 이는 동시에 화이트닝제, 자유 라디칼 스캐빈저 및 각질용해제로서 작용한다.
실행의 하나의 변이체에 따라, 특히 국부 적용을 의도한 상기 화장용 및/또는 피부학적 조성물은 박하 추출물 외에, 하나 이상의 항-NO제, 예를 들면, 은행(gingko biloba) 추출물 및 화이트닝제, 예를 들면, 비타민 C　G를 포함할 수 있다.
예를 들면, 본 발명에 따른 조성물은 하나 이상의 멘타 피페리타(Mentha piperita) 추출물, 은행(gingko biloba) 추출물, 비타민 C　G, 감초 추출물, 살리실산 및 너도밤나무 싹 추출물을 포함할 수 있다.
당연히, 본 발명에 따른 조성물은 박하 추출물 외에, 하나 이상의 기타 활성 물질과 적당하게 조합되는 경우에, 조성물에 대해 고려 중인 투여 방법에 관하여 더욱 특히 선택된 제형용 첨가제 및/또는 담체를 포함할 수 있다.
특히, 본 발명에 따른 조성물은 선택된 적용 또는 투여 방법에 따라 통상적으로 이용되는 임의의 약학 형태일 수 있다.
더욱 구체적으로, 본 발명에 따른 조성물은 국부 적용 또는 경구 투여용으로 제형화될 수 있다.
더욱 특히 국부 적용에 대해 의도한 조성물에 관하여, 이는 수성, 수성-알코올성 또는 오일성 용액, 용액 형태의 분산액 또는 로션 또는 혈청형의 분산액, 우유 형태의 액체 또는 반-액체 점도를 갖는 에멀션, 크림 또는 수성 또는 무수 겔 형태의 현탁액 또는 에멀션, 미세에멀션, 미세캡슐, 미립자 또는 이온성 및/또는 비이온성 형태의 소낭 분산액일 수 있다.
이는 예를 들면, 케어 크림, 케어 겔, 지지체 상의 마스크, 파운데이션, 위장 제품, 컨실러(concealer), 아이 섀도우, 아이 펜슬, 콜(kohl), 마스카라 또는 화장 제거 제품일 수 있다.
본 발명의 조성물이 에멀션인 경우에, 지방상의 비율은 조성물의 총 중량에 대해 5 내지 80 중량%, 바람직하게는 5 내지 50 중량 범위일 수 있다. 에멀션 형태로 조성물에 이용되는 오일, 유화제 및 코-유화제(co-emulsifier)는 화장품 및/ 또는 피부학 분야에 통상적으로 이용되는 것으로부터 선택된다. 상기 유화제 및 코-유화제는 조성물 중에, 조성물의 총 중량에 대해, 0.3 내지 30 중량%, 바람직하게는 0.5 내지 20 중량%의 범위의 비율로 존재할 수 있다.
본 발명의 조성물이 오일 용액 또는 겔인 경우에, 지방상은 조성물의 총 중량의 90% 이상을 나타낼 수 있다.
상기 조성물은 통상적인 방법에 따라 제조된다.
공지된 방식으로, 본 발명의 화장용 또는 피부학적 조성물은 화장품 또는 피부학 분야에 통상적인 보조제, 예를 들면, 지방 물질, 유화제, 친수성 또는 친유성 겔화제, 친수성 또는 친유성 활성 물질, 보존제, 항산화제, 방향제, 충전제, 스크리닝제 및 염료를 포함할 수 있다.
본 발명에 이용될 수 있는 지방 물질로서, 미네랄 오일, 예를 들면, 수소화된 폴리이소부텐 및 액상 석유 젤리, 식물 오일, 예를 들면, 시어 버터(shea butter)의 액상 분획, 해바라기유 및 살구 핵 오일, 동물성 오일, 예를 들면, 퍼히드로스쿠알렌, 합성 오일, 특히 푸르셀린 오일, 이소프로필 미리스테이트 및 에틸헥실 팔미테이트, 및 플루오로 오일, 예를 들면, 퍼플루오로폴리에테르를 언급할 수 있다. 또한, 지방 알코올, 지방산, 예를 들면, 스테아르산, 및 예를 들면, 왁스, 특히 파라핀 왁스, 카나우바 왁스 및 밀랍을 이용할 수 있다. 또한, 실리콘 화합물, 예를 들면 실리콘 오일 및 예를 들면, 시클로메티콘 및 디메티콘, 및 실리콘 고무, 수지 및 왁스를 이용할 수 있다.
본 발명에 이용될 수 있는 유화제로서, 예를 들면, 글리세릴 스테아레이트, 폴리소르베이트 60, HENKEL 사의 상표명 Sinnowax AO
Figure 112008074535590-PAT00002
하에 판매되는 33　mol의 에틸렌 옥시드를 포함하는 세틸스테아릴 알코올/옥시에틸렌화된 세틸스테아릴 알코올의 혼합물, GATTEFOSSE 사의 상표명 Tefose
Figure 112008074535590-PAT00003
63하에 판매되는 PEG-6/PEG-32/글리콜 스테아레이트의 혼합물, PPG-3 미리스틸 에테르, 실리콘 유화제, 예를 들면, 세틸 디메티콘 코폴리올 및 소르비탄 모노- 또는 트리스테아레이트, PEG-40 스테아레이트, 또는 옥시에텔렌화된 소르비탄 모노스테아레이트 (20　EO)를 언급할 수 있다.
본 발명에 이용될 수 있는 용매로서, 저급 알코올, 특히 에탄올 및 이소프로판올, 및 프로필렌 글리콜을 언급할 수 있다.
친수성 겔화제로서, 카르복실산 중합체, 예를 들면, CARBOMER
Figure 112008074535590-PAT00004
, 아크릴산 공중합체, 예를 들면, 아크릴레이트/알킬 아크릴레이트 공중합체, 폴리아크릴아미드, 및 특히 폴리아크릴아미드의 혼합물, C13-14-이소파라핀 및 SEPPIC 사의 상표명 Sepigel 305
Figure 112008074535590-PAT00005
하에 판매되는 라우레트-7, 다당류, 예를 들면 셀룰로오스 유도체, 예를 들면, 히드록시알킬셀룰로오스 및 특히, 히드록시프로필셀룰로오스 및 히드록시에틸셀룰로오스, 천연 고무, 예를 들면, 구아, 카로브 및 잔탄, 및 점토를 언급할 수 있다.
친유성 겔화제로서, 변형 점토, 예를 들면, 벤톤, 지방산의 금속염, 예를 들면, 알루미늄 스테아레이트, 및 소수성 실리카, 또는 에틸셀룰로오스 및 폴리에틸렌을 언급할 수 있다.
상기 다양한 보조제의 양은 화장품 및/또는 피부학 분야에서 통상적으로 이 용되는 것이며, 예를 들면, 조성물의 총 중량의 0.01% 내지 20%이다. 이의 성질에 따라, 상기 보조제는 지방상, 수성상 및/또는 지질 소낭으로 도입될 수 있다.
본 발명에 따른 화장 방법은 예를 들면, 겔, 로션, 또는 에멀션의 형태로 제형화될 수 있는 본 발명에 따른 조성물의 매일의 국부 적용에 의해 수행될 수 있다.
그리하여, 본 발명에 따른 방법은 단일 적용을 포함할 수 있다.
또 다른 구현예에 따라, 상기 적용은 예를 들면, 적당하게 1회 이상의 중지와 함께 1일 이상, 일반적으로 4주, 또는 심지어 4 내지 15주의 지속된 기간에 걸쳐 1일 2 내지 3회 반복된다.
본 발명에 따른 조성물의 경구 투여의 경우에, 섭취가능한 지지체의 이용이 바람직하다.
섭취를 위해, 경구 조성물, 특히 식품 보조제의 수많은 구현예가 가능하다. 이의 제형화는 드라제, 젤라틴 캡슐, 겔, 에멀션, 정제 또는 캡슐을 제조하는 통상적인 방법을 통해 수행된다. 분말은 경구로 투여되기 전에 섭취가능한 액체, 예를 들면, 물에 희석될 수 있다.
본 발명의 박하 추출물은 CGRP 방출을 저해하는 성질을 가지므로, 멜라닌형성을 조절하고, 특히 멜라닌형성이 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도될 때, 멜라닌형성을 저해할 수 있다.
하기 실시예는 본 발명의 분야의 비제한적인 예시를 통해 생성된다.
실시예 1
본 발명에 따른 추출물을 이용한 인간 피부의 모델에서 피부 색소침착 및 CGRP (칼시토닌 유전자 관련 펩티드) 유도된 멜라닌형성의 조절의 평가는 생존 조건하에 유지하였다.
재료 및 방법
이용된 추출물은 상표명 CALMISKIN
Figure 112008074535590-PAT00006
하에 SILAB 사에 의해 분배되는 제품이다. 이는 물 중에 100% (v/v)의 박하 (Mentha piperita) 잎 추출액이다. 2 중량%의 비율로 이용된다.
피부 색소침착은 멜라닌세포 및 인접한 각질세포의 수준에서 Fontana-Masson 염색에 의해 노출(revelation) 후에 광학 현미경하에 조직학적으로 평가한다. 활성 멜라닌세포의 수는 또한 총 표피 상의 Dopa-반응 후에 정량화한다.
탈색 또는 착색전 제품을 대상화하는 것은 미처리된 피부와 비교하여, 상기 제품으로 처리된 피부에서, 멜라닌세포 및 인접한 각질세포에 존재하는 멜라닌 색소의 양을 평가하는데 있다.
시험 프로토콜
6명의 상이한 공여자 유래의 정상적인 인간 피부의 단편을 배양 웰에 위치한 인서트에 위치하였다. 생존 조건하에 유지에 특이적으로 적합한 배양 배지(항생제, FCS)를 웰의 바닥에 첨가하고, 다공성 막(3 ㎛)을 통해 2개의 구획 사이에 느린 확산에 의해 계대를 하였다.
CGRP를 10-7　M의 농도로 DO에 배양 배지에 첨가한다. 본 발명에 따른 생성물을 2%로 국부적으로 적용한다(D0, D1 및 D2).
하기 비교를 하였다:
- 대조군 (미처리) 피부
- 피부 + 10-7　M CGRP
- 피부 + 10-7　M CGRP + 2% 박하 추출물
전체를 72시간 동안 생존 조건하에 유지한다.
Fontana-Masson 염색에 의한 조직학적 노출(revelation)
상기 피부 단편을 Boulin 용액에 이전 프로토콜의 말기에 고정하고, Fontana-Masson 염색 후에 조직학적 연구를 위해 파라핀에 포매하였다. 멜라닌 알갱이를 포함하는 세포 수의 정량적인 평가를 기저층의 300 내지 400개 세포 상에서 현미경으로 수행하였다. 세포의 3개의 카테고리를 카운트하였다:
- 스코어 1: 비-색소침착된 세포 또는 몇 개의 알갱이를 나타내는 세포, 액포 외관을 갖는 세포;
- 스코어 2: 적당한 멜라닌 부하를 나타내는 세포 (분산되고, 균일하지 않은 멜라닌 알갱이);
- 스코어 3: 상당한 멜라닌 부하를 나타내는 세포 (세포의 세포질의 반 이상을 커버하는 균일한 흑색 침착물).
Dopa-반응에 의한 멜라닌세포 의 조직학적 노출
활성 멜라닌세포의 수를 0.5　M, pH 7.5의 EDTA.2Na 용액을 이용하여 탈착된 신선한 표피를 이용하여 평가하였다(60℃에서 90초).
상기 멜라닌세포를 0.1% Dopa 용액을 이용하여 노출하였다(37℃에서 밤새 인큐베이션).
Dopa-양성 세포의 수를 광학 현미경(배율 40으로 10-12 필드)하에 필드 단위당으로 평가하였다. 필드당 존재하는 활성 멜라닌세포의 평균 수를 각 조건에 대해 계산하였다.
통계학적 분석
6가지 피부에 대해 수득된 결과에 기초하여 각 파라미터에 대한 평균을 생성하였다. 통계학적 분석을 5%의 위험도를 가지고, Z-스코어로서 언급되는 Student 시험, 또는 대응표본시험(paired sample test)를 통해 수행하였다.
결과
Fontana-Masson 염색에 의한 조직학적 노출
표 1은 각 색소침착 스코어에 대한 표피세포의 퍼센트를 보여준다.
처리 스코어 1 스코어 2 스코어 3
대조군 39.8 ± 11.2 40.5 ± 6.9 19.7 ± 7
피부 + CGRP 24.9 ± 18.38* 45 ± 7.5 30.3 ± 12.4
피부 + CGRP + 2% 박하 추출물 50.1 ± 16.6** 32.6 ± 8.3** 17.3 ± 10**
표 1: Fontana-Masson 염색 후에 조직학적 분석. 결과를 분석된 총 수에 대한 세포의 퍼센트로서 나타낸다 (n = 6 상이한 피부).
*: 대조군 피부와 비교하여 통계학적으로 유의한 차이 (대응 Student 시험, p < 0.05).
**: 피부 + CGRP와 비교하여 통계학적으로 유의한 차이 (대응 Student 시험, p < 0.05).
생존 조건하에 유지된 CGRP-자극된 인간 피부 모델에서, 멜라닌세포에서 인접한 각질세포로 멜라닌 알갱이의 전달의 증가를 주목한다. 구체적으로, 매우 색소침착된 세포 (스코어 3)의 퍼센트는 10-7　M CGRP를 이용한 자극 후에 현저하게 증가한다: 대조군 피부에서 19.7%에 대해 Fontana-양성 세포의 30.3%. 동시에, 거의 또는 전혀 색소침착이 없는 세포 (스코어 1)의 퍼센트는 대조군 피부와 비교하여 CGRP의 적용 후에 현저하게 감소한다 (24.9% 대 39.8%, p = 0.03). 스코어 2를 갖는 세포의 퍼센트는 CGRP의 적용 후에 변하지 않는다.
따라서, 2%에서 시험한 박하 추출물은 CGRP-유도된 색소침착을 현저하게 저해한다 (CGRP를 이용한 24.9%에 대해 50.1%의 스코어-1 세포, p = 0.004). 동시에, 매우 색소침착된 세포 (스코어 3)의 수는 현저하게 감소한다 (CGRP를 이용한 30.3%에 대해 17.3%).
스코어-2 세포의 퍼센트에서 통계학적으로 유의한 감소가 또한 발견된다 (CGRP 단독을 이용한 45%에 대해 32.6%).
Dopa-반응에 의한 멜라닌세포의 조직학적 노출
처리 Dopa-양성 멜라닌세포의 수
대조군 31 ± 22
피부 + CGRP 56 ± 33*
피부 + CGRP + 2% 박하 추출물 38 ± 34**
표 2: 표피층 상에 멜라닌세포의 수(Dopa-반응 후)(n = 8).
*: 대조군 피부와 비교하여 통계학적으로 유의한 차이 (대응 Student 시험, p < 0.05).
**: 피부 + CGRP와 비교하여 통계학적으로 유의한 차이 (대응 Student 시험, p < 0.05).
Dopa-반응에 의해 증명된 멜라닌세포의 수는 CGRP에 의해 현저하게 유도된 멜라닌형성을 나타낸다: 대조군 피부에 대한 31에 대해 56 Dopa-양성 세포 (p = 0.01).
2%에서 시험한 박하 추출물은 상기 CGRP-유도된 멜라닌형성을 현저하게 저해한다 (각각, 38 양성 세포).
실시예 2
박하 추출물을 이용한, 시험관 내에서 다세포 각질세포/멜라닌세포/신경세포 모델 상에 정서적 스트레스의 과정에 피부 색소침착 및 CGRP (칼시토닌 유전자 관련 펩티드)-유도된 멜라닌형성의 조절의 평가.
이용된 추출물은 상표명 CALMISKIN
Figure 112008074535590-PAT00007
하에 SILAB 사에 의해 분배되는 제품이다. 이는 물 중에 100% (v/v)로 박하 (Mentha piperita) 잎 추출물 용액이다. 이는 0.03 중량%의 비율로 이용된다.
다세포 각질세포/멜라닌세포/신경세포 모델
제1 배양물을 2mM L-글루타민 (Invitrogen 25030024), 50　IU/ml 페니실린- 50　㎍/ml 스트렙토마이신 (Invitrogen 15070063), N2 보충물 (17502-048), 신경성장인자 (신경성장인자, NGF, Invitrogen 13290.010) 및 뉴로트로핀 3 (NT-3, Tebu 450-03-b)으로 보충된 DMEM-HAM F12 배양 배지 (Invitrogen 21331-020)에서 침적물 (ThinCertTM, Greiner bio-one ref. 662　610) 당 20,000 세포의 비율로 24-웰 플레이트에 대한 배양 인서트에서 배양된 신경세포 (N)으로부터 제조하고, 5일 동안 습기로 포화된 5% CO2 및 37℃의 인큐베이터에서 유지하였다.
제2 배양물을 PMA (Tebu 058S-016-5) 없는 HMGS-2 및 50　IU/ml 페니실린 및 50　㎍/ml 스트렙토마이신 (Invitrogen 15070063)의 혼합물로 보충된 배지 (Medium 254 (Tebu 058M-254-500))에서 24-웰 플레이트에서 100,000 세포/웰의 비율로 접종된 각질세포 (K) (성형외과로부터 분리되고, 3번째 계대(R3 K015)에서 이용된 통상적인 인간 각질세포 (NHEK)) 및 각질세포 배양에서 50,000 세포/웰의 비율로 접종된 멜라닌세포 (M) (6번째 계대에 이용된 통상적인 인간 표피 멜라닌세포 (NHEM-2))를 이용하여 제조하였다.
4일 배양 후에, 신경세포를 포함하는 인서트를 각질세포/멜라닌세포 공동배양물을 포함하는 웰에 위치하여(공동 배양물을 1일 배양 후에), 신경세포-각질세포-멜라닌세포(N/K/M) 배양 배지의 존재하에 다세포 N/K/M 모델을 수득하였다.
상기 N/K/M 배양 배지는 2mM L-글루타민 (Invitrogen 25030024), 50　IU/ml 페니실린, 50　㎍/ml 스트렙토마이신 (Invitrogen 15070063), N2 보충물 (17502-048), 신경성장인자 (NGF, Invitrogen) 및 뉴로트로핀 3 (NT-3)로 보충된 50% DMEM-HAM F12 (Invitrogen 21331-020), 0.2　mM CaCl2 (Tebu S-013-154) 및 각질세포 성장인자 (인간 각질세포 성장 보충물 (HKGS) Tebu S-001-5)로 보충된 33% M　154 배지 (Tebu M　154 CF/PRF), 및 17% M　154 배지 (Tebu M　154 CF/PRF)를 포함한다.
상기 수득된 다세포 모델을 10일 이상 동안 배양물에 유지하였다.
웰 및 인서트의 배양 배지는 매일 50% 갈아 주었다.
멜라닌형성에 대한 노르아드레날린 유형의 정서적 스트레스의 효과
상기 수득된 다세포 모델의 세포를 10-5　M 노르아드레날린의 존재 또는 부재하에 10일 동안 유지하고, 여기에 0.03% CALMISKIN
Figure 112008074535590-PAT00008
또는 10-6　M CGRP8-37 을 전술한 것과 유사한 프로토콜에 따라, 첨가하거나 또는 첨가하지 않았다.
CGRP8-37 은 기준 CGRP-수용체 길항제이다.
인큐베이션 말기에, 멜라닌을 0.5　N NaOH 용액을 이용하여 각질세포/멜라닌세포 공동 배양물로부터 추출한 후, 흡광도(405　nm)를 측정함으로써 분석하고, 외래 멜라닌 (0.39-100　㎍/ml의 멜라닌, Sigma M8631)의 표준곡선과 비교하였다.
상기 실험 데이타를 PRISM
Figure 112008074535590-PAT00009
소프트웨어 (Graph Pad Software)를 통해 분석하였다.
그룹간 비교를 Dunnett의 다중비교검정을 이용한 분산 분석(ANOVA)에 의해 수행하였다.
2개의 시료 사이의 비교를 T 시험을 이용한 분석에 의해 수행하였다.
수득된 결과를 하기 표에 제공한다. 이는 4개의 독립적인 실험의 평균을 나타낸다. 이는 ml당 멜라닌 ㎍으로서 표시한다.
노르아드레날린 부재 노르아드레날린 존재
대조군 22.4 ± 1.12 25.77 ± 0.72#
10-6　M CGRP8-37 19.33 ± 0.48 21.35 ± 0.91#
0.03%의 CALMISKIN 22.57 ± 1.30 23.89 ± 1.32*
10-5　M 노르아드레날린의 존재는 공동배양에서 합성된 멜라닌의 양을 현저하게 촉진한다(#; p < 0.01) (+15%).
0.03% 농도의 CALMISKIN
Figure 112008074535590-PAT00010
제품, 및 또한 CGRP-수용체 길항제 CGRP8-37는 노르아드레날린의 존재하에 멜라닌의 양을 현저하게 감소시킨다 (각각 -7.3% 및 -17.2%)(*; p < 0.05 및 #; p < 0.01).
CGRP 방출의 측정
이전 실험의 말기에, 웰 및 인서트로부터의 상층액을 별도로 모으고, -80℃에서 즉시 동결하여 CGRP 함량을 분석하였다.
CGRP 함량을 공급자에 의해 추천된 프로토콜에 따라 ELISA 분석(Rat CGRP enzyme Immuno Assay Kit, Spi Bio A05482)을 통해 배양물 상층액에서 측정하였다.
결과를 배지 ml 당 CGRP pg으로 나타낸다.
결과 분석을 전술한 바와 같이 수행하였다.
배양 웰 인서트
노르아드레날린 부재 159.31 ± 21.24 417.12 ± 37.33
10-5　M 노르아드레날린 존재 170.48 ± 19.47 493.86 ± 11.57
10-5　M 노르아드레날린 + 0.03% CALMISKIN 134.11 ± 14.66* 474.19 ± 12.46
* p < 0.05
노르아드레날린의 존재하에, 대조군 배양 인서트에서 방출된 CGRP의 양은 매우 실질적이다. CALMISKIN
Figure 112008074535590-PAT00011
제품은 CGRP 방출을 약간 조절하였다.
(각질세포/멜라닌세포 공동 배양물과 대조적으로) 웰의 배양 배지에서 분석된 CGRP의 양은 CGRP가 다공성 인서트를 교차하는 신경 말단에 의해 확산되거나 또는 방출되었다는 것을 보여준다. 상기 수준에서, CALMISKIN 제품은 CGRP 방출을 현저하게 감소시켰다 (대조군의 -21%; p < 0.05).
결론
본 발명에 따른 다세포 모델에 노르아드레날린의 첨가는 신경세포에 의해 배양 배지 내로 방출된 CGRP의 양의 증가를 유도한다.
상기 양은 신경세포의 수준에서 더 크나, 또한 각질세포/멜라닌세포 공동 배양물에 인접하여 측정될 수 있다.
그리하여 노르아드레날린은 CGRP 방출을 통해 각질세포/멜라닌세포 공동 배양에서 측정가능한 방식으로, 멜라닌형성을 증가시키는 것 같다(+15%).
상기 자극은 0.03%의 농도의 CALMISKIN 제품의 적용에 의해 감소되었다.
실시예 3
모든 유형의 피부에 대한 화이트닝제 혈청의 제형물 예.
당업자에 대해 통상적이며, 하기 조성을 갖는 방식으로 제조된 수중유 에멀션이다.
각질용해제 1.1%
항산화제 0.2%
항-NO제 0.01%
화이트닝제 2.5%
박하 추출물* 0.05%
오일 7%
증점제 1%
유화제 2.6%
겔화제 1.6%
금속이온봉쇄제 0.05%
중화제 0.8%
보존제 1%
향료 0.1%
글리콜 3.5%
분말 0.5%
완충액 0.35%
물 qs 100%
* CALMISKIN
Figure 112008074535590-PAT00012
제품의 형태

Claims (28)

  1. 활성 물질로서 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 화장용 조성물이 이용되는, 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 멜라닌의 합성 및/또는 방출을 예방 및/또는 감소시키기 위한 비치료적 트리트먼트 방법.
  2. 활성 물질로서 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 조성물이 이용되는, 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 피부 색소침착의 과다를 예방 및/또는 치료하기 위한 비치료적 트리트먼트 방법.
  3. 활성 물질로서 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 조성물이 이용되는, 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 과도한 멜라닌형성과 관련된 피부 질환을 예방 및/또는 치료하기 위한 비치료적 트리트먼트 방법.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물이 멘타 아쿠아티카(Mentha aquatica), 멘타 아르벤시스(Mentha arvensis), 멘타 론기폴리아(Mentha longifolia), 멘타 피페리타(Mentha piperita), 멘타 풀레기움(Mentha pulegium) 및 멘타 스피카타(Mentha spicata)로부터 선택된 박하 속에서 기원한 세포로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제 4 항에 있어서, 상기 추출물이 멘타 피페리타(Mentha piperita) 속의 박하에서 기원한 세포로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물이 시험관 내 배양물로부터 유래된 박하 식물 물질에서 기원한 세포로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 방법.
  7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물이 조성물의 총 중량에 대해, 0.001 내지 0.4 중량%, 특히 0.002 내지 0.35 중량%, 및 특히 0.003 내지 0.1 중량%의 범위의 건조 활성 물질의 양으로 이용되는 것을 특징으로 하는 방법.
  8. 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 티로시나아제의 저해 또는 멜라닌형성을 간접적으로 자극하는 2차 전달자의 저해의 기작에 따라 작용하는 하나 이상의 탈색제와 조합된 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 화장용 조성물.
  9. 제 8 항에 있어서, 상기 탈색제는 코지산, 아르부틴, 엘라그산, 루시놀, S 리놀레산, 트라넥삼산, 포타슘 4-메톡시살리실레이트, 디소듐 아데노신 모노포스페 이트 OT, 또는 디히드록시디프로필비페닐 (DDB)로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 제 8 항 또는 제 9 항에 있어서, 하나 이상의 각질용해제, 박리제, 항-NO제, 항-UV제, 화이트닝제, 항염증제, 킬레이트제 및/또는 항산화제를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  11. 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 적어도 아스코르브산(비타민 C), 또는 하나 이상의 이의 유도체, 예를 들면, 마그네슘 아스코르빌 포스페이트(비타민 C PMg), 글리코실 아스코르베이트(비타민 C G), 소듐 아스코르빌 포스페이트(비타민 C PNa) 및 3-O-에틸 아스코르브산과 조합된 멘타 피페리타(Mentha piperita) 속의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 화장용 조성물.
  12. 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 하나 이상의 각질용해제, 박리제, 항-NO제 및/또는 킬레이트제와 조합된 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함하는 화장용 조성물.
  13. 생리학적으로 허용가능한 매질 중에 하나 이상의 각질용해제, 박리제, 항-NO제, 항-UV제, 화이트닝제, 항염증제, 킬레이트제 및/또는 항산화제와 조합된 하나 이상의 탈색제 및 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물을 포함 하는 화장용 조성물.
  14. 제 8 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물이 조성물의 총 중량에 대해, 건조 활성 물질이 0.4 중량% 미만의 비율로 존재하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  15. 제 8 항 내지 제 10 항 및 제 12 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 박하 과의 하나 이상의 식물의 하나 이상의 세포 추출물이 제 4 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 정의된 것을 특징으로 하는 조성물.
  16. 제 8 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물이 조성물의 총 중량에 대해, 0.001 내지 0.4 중량%, 특히 0.002 내지 0.35 중량%, 및 특히 0.003 내지 0.1 중량%의 범위의 건조 활성 물질의 양으로 이용되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  17. 제 10 항 및 제 12 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 각질용해제가 페놀 유도체, 및 특히 살리실산 또는 이의 유도체 중의 하나 또는 너도밤나무 싹 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  18. 제 17 항에 있어서, 상기 각질용해제가 파라세타몰, 살리실산 및 살리실산 유도체, 및 특히 5-n-옥타노일살리실산, 5-n-데카노일살리실산 및 5-n-도데카노일살리실산, 또는 이의 염 중의 하나로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  19. 제 8 항 내지 제 18 항 중 어느 한 항에 있어서, 살리실산 및/또는 너도밤나무 싹 추출물로부터 선택된 하나 이상의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  20. 제 10 항 및 제 12 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-NO제가 은행(gingko biloba) 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  21. 제 8 항 내지 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서, p-아미노벤조산 (PABA), 글리세릴 p-아미노벤조에이트, 에틸디히드록시프로필 p-아미노벤조에이트, 옥틸메톡시 신나메이트, 2-에톡시에틸 p-메톡시신나메이트, 2,4-디히드록시벤조페논, 2-히드록시-4-메톡시벤조페논, 2-히드록시-4-메톡시-4-메틸벤진벤조페논, 2-히드록시-4-메톡시-4-메틸벤조페논-5-설포네이트, 에틸 우로카네이트, 2-페닐-5-메틸벤족사졸, 4-메톡시-4-t-부틸디벤조일메탄 및 에틸헥실 p-메톡시신나메이트, 및 유사체로부터 선택된 하나 이상의 항-UV제를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  22. 제 10 항 및 제 12 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 킬레이트제가 테트라소듐 헤데테이트 및/또는 시트르산인 것을 특징으로 하는 조성물.
  23. 제 10 항 및 제 12 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화이트닝제가 비타민 C　G 및/또는 감초 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  24. 제 8 항 내지 제 23 항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 멘타 피페리타(Mentha piperita) 추출물, 은행(gingko biloba) 추출물, 비타민 C　G, 감초 추출물, 살리실산 또는 너도밤나무 싹 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  25. 제 8 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 정의된 조성물의 탈색제로서의 용도.
  26. 제 8 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 정의된 조성물의 피부 화이트닝제로서의 용도.
  27. 박하 과의 하나 이상의 식물의 세포 추출물 및/또는 제 8 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 정의된 조성물의, 정서적 유형의 스트레스에 의해 유도된 멜라닌형성을 저해하는 물질로서의 용도.
  28. 제 27 항에 있어서, 상기 추출물이 제 4 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 정의된 것을 특징으로 하는 용도.
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