FR2895678A1 - Utilisation cosmetique d'un extrait de menthe - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne un procédé de traitement non thérapeutique pour prévenir et/ou diminuer la synthèse et/ou la libération de mélanine, dans lequel on utilise une composition cosmétique comprenant à titre d'actif, au moins un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes.
Description
La présente invention se rapporte à l'utilisation d'extraits de cellules
d'au moins un végétal de la famille des menthes, à titre d'inhibiteur de la mélanogénèse et/ou d'agent dépigmentant. La mélanogénèse est un processus de synthèse de la mélanine, qui est responsable de la pigmentation cellulaire. Il s'agit d'un procédé biochimique complexe initié par l'hydroxylation de l'acide aminé L-tyrosine qui résulte dans la formation de L-dihydroxyphénylalamine (L-DOPA). Le L-DOPA est converti à son tour en DOPA chrome par l'action d'une enzyme spécifique associée aux mélanocytes, la tyrosinase et des réactions de réduction et d'oxydation consécutives conduisent à la conversion du DOPA chrome en mélanine. La production de la tyrosinase et son activité déterminent en partie la quantité de mélanine produite. La quantité et le type de mélanine transférées aux kératinocytes déterminent, quant à eux, le degré de pigmentation visuelle d'une peau humaine. On sait que la mélanime assure principalement une fonction protectrice à l'égard de la peau vis-à-vis du soleil et plus généralement des rayons UV. La mélamine absorbe ces rayons et réduit ainsi significativement le risque de manifestation de dommages susceptibles d'être occasionnés par les radicaux libres générés lors de l'irradiation. Toutefois, la mélanine peut être synthétisée de manière excessive voire 20 anarchique en réponse à une stimulation exogène telle que la pollution et les rayons UV, et/ou une stimulation endogène, par exemple due au vieillissement, au niveau des kératinocytes, cellules endothéliales, fibroblastes et cellules de Langerhans. En fait, plusieurs de ces deux modes de stimulation peuvent coexister. Ainsi les radiations UV induisent d'une part la synthèse de mélanine en 25 stimulant directement les mélanocytes et d'autre part stimulent indirectement la mélanogénèse en initiant et/ou favorisant des messages par les kératinocytes les cellules endothéliales et les fibroblastes via des médiateurs. Notamment, les kératinocytes communiquent semble-t-il avec les mélanocytes via des médiateurs de synthèse tels que l'alpha MSH (alpha Mélanocyte Stimulating Hormone), les endothélines, les 30 prostaglandines E2 et NO. Un autre partenaire indirect de la mélanogénèse semble être l'élément chimique polypeptidique Calcitonine Gene Related Peptide (CGRP).
Ainsi, les kératinocytes produisent, en réponse à une stimulation par le CGRP, des facteurs mélanotrophiques qui modulent la croissance, la synthèse de mélanine et la dendricité des mélanocytes. (Mashiko Toyoda et al., The society for investigate dermatology, Inc, Vol 4, N 2, september 1999).
Le CGRP est un peptide de 37 acides aminés, produit à partir du gène de la calcitonine et est le neuropeptide sensoriel le plus largement distribué et le plus abondant. Il a aussi été montré qu'il est secrété par les terminaisons nerveuses en réponse à des stimulations externes telles que le rayonnement UV (Scholzen et al, Journal of investigative dermatology symposium proceedings, 1999, 4 (1):55-60), et que sa sécrétion est stimulée par des agressions extérieures telles que la pollution. Plus récemment, il a également été constaté que la production de CGRP pouvait être stimulée en réponse à un stress interne, c'est-à-dire d'ordre émotionnel. Ainsi, il a été montré que la sécrétion de CGRP pouvait être stimulée par des hormones de stress telles que la noradrénaline et l'adrénaline.
Le CGRP forme donc une cible potentielle pour moduler et en particulier inhiber la mélanogénèse induite par des stimulations externes à l'image des rayonnements UV et de la pollution mais également provoquée par du stress interne, notamment d'ordre émotionnel. Par ailleurs, des études ont indiqué que la mélanogénèse est associée avec une résistance accrue des cellules de mélanome pigmenté en thérapie de radiations et/ou chimiothérapie. Ces traitements sont donc rendus inefficaces contre le mélanome mélanotique. Une méthode pour bloquer la mélanogénèse pourrait donc être utile en approche clinique, afin de rendre plus sensible les cellules à la fois à la chimiothérapie et à la radiothérapie.
Des actifs sont déjà proposés pour s'opposer au développement d'une pigmentation excessive et en particulier restaurer une coloration normale de la peau. A titre de ces actifs, on peut notamment citer l'acide L-ascorbique, l'acide kojique, l'hydroquinone et analogues. Toutefois, l'acide L-ascorbique ne s'avère pas suffisamment stable et l'acide 30 kojique est connu pour manifester une activité dépigmentante insuffisante. En ce qui concerne l'hydroquinone, son utilisation soulève des problèmes en raison d'une prédisposition à causer des réactions allergiques et/ou irriter la peau.
En conséquence, il demeure à ce jour un besoin en actifs dépigmentants et/ou susceptibles d'inhiber le processus de mélanogénèse. La présente invention a précisément pour objet de proposer un nouvel actif à ce titre, notamment efficace pour prévenir et traiter les pigmentations cutanées, telles que par exemple les lentigos (de type simple ou de type solaire ou sénile), les PUVA lentigines, les lentigines de lampe à bronzer, les lentigos réticulaires, les éphélides ou les mélasmae (chloasmae), causés par le soleil ou analogues et plus particulièrement pour inhiber le processus de mélanogénèse. Les inventeurs ont ainsi découvert qu'un extrait de cellules d'un végétal de la 10 famille des menthes s'avère particulièrement utile pour assurer un tel effet. Des dérivés de mentha piperita sont proposés à des fins d'actifs ayant un effet apaisant pour la peau dans le document WO 2004/058282. Toutefois, ce document ne fait aucunement état des propriétés de ce même type d'extraits à l'égard du processus de mélanogénèse, notamment induit par du stress interne, et encore moins de son efficacité 15 pour prévenir et/ou traiter les désordres cutanés associés à un excès de mélanogénèse. En conséquence, selon un de ses aspects, la présente invention concerne un procédé de traitement thérapeutique ou non thérapeutique et notamment cosmétique pour prévenir et/ou diminuer la synthèse et/ou la libération de mélanine, dans lequel on utilise une composition cosmétique comprenant à titre d'actif au moins un extrait de cellules d'au 20 moins un végétal de la famille des menthes. Selon un autre de ses aspects, la présente invention concerne un procédé de traitement thérapeutique ou non thérapeutique et notamment cosmétique pour prévenir et/ou traiter un excès de pigmentation cutanée dans lequel on utilise une composition telle que définie ci-dessus. 25 Selon encore un autre de ses aspects, la présente invention concerne un procédé de traitement thérapeutique ou non thérapeutique et notamment cosmétique pour prévenir et/ou traiter des désordres cutanés associés à une mélanogénèse excessive, en particulier induite par un stress d'ordre émotionnel, dans lequel on utilise une composition cosmétique telle que définie ci-dessus. 30 La présente invention vise également l'utilisation in vivo ou in vitro d'un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes à titre d'agent dépigmentant.
La présente invention concerne également l'utilisation in vivo ou in vitro d'un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes à titre d'agent inhibiteur de la mélanogénèse. Au sens de l'invention, "mélanogénèse" désigne le processus de synthèse de la mélanine incluant par exemple toutes les réactions enzymatiques et/ou non enzymatiques se rapportant au procédé de synthèse d'un précurseur chimique de la mélanine, d'un de ses intermédiaires ou sous-produit. Au sens de l'invention le terme "inhiber" signifie diminuer, limiter ou bloquer l'action ou le fonctionnement d'un procédé.
La présente invention concerne également l'utilisation d'un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes à titre d'agent de blanchiment cutané. Elle concerne en outre une composition dermatologique et/ou cosmétique caractérisée en ce qu'elle comprend dans un milieu physiologiquement acceptable au moins un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes à raison de moins de 0,4 % en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. Selon un autre de ses aspects, la présente invention vise également une composition dermatologique et/ou cosmétique caractérisée en ce qu'elle comprend dans un milieu physiologiquement acceptable au moins un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes associé à au moins un agent kératolytique, desquamant, anti-NO, anti-UV, de blanchiment, chélatant et/ou anti-oxydant. Les compositions selon l'invention peuvent être formulées pour une administration par voie topique ou par voie orale.
DEFINITION DE L'EXTRAIT Le terme "extrait d'au moins une menthe" doit s'entendre comme "extrait de cellules de menthe" et donc comme "extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes". L'extrait d'au moins une menthe peut être un extrait préparé à partir de tout matériel végétal issu de la famille des menthes, ledit matériel ayant été obtenu par culture 30 in vitro ou in vivo.
Par culture in vitro, on entend l'ensemble des techniques connues de l'homme du métier qui permet de manière artificielle l'obtention d'un végétal ou d'une partie d'un végétal. Ainsi, par exemple selon l'invention l'extrait peut être un extrait d'organe, voire de cellules d'organe, d'au moins une menthe obtenue par culture in vitro (racines, tige, feuille) ou encore un extrait de cellules indifférenciées d'au moins une menthe. De préférence on utilise un extrait obtenu à partir de cellules indifférenciées obtenues par culture in vitro. Par cellules végétales indifférenciées, on entend toute cellule végétale ne présentant aucun des caractères d'une spécialisation particulière et capable de vivre par elle-même et non en dépendance avec d'autres cellules. Ces cellules végétales indifférenciées sont éventuellement aptes, sous l'effet d'une induction, à toute différenciation conforme à leur génome. La famille des menthes compte plusieurs espèces.
Parmi les genres de la famille des menthes utilisables selon l'invention, on peut citer à titre d'exemple les genres mentha aquatica, mentha arvensis, mentha longifolia, mentha piperita, mentha pulegium et mentha spicata. Plus particulièrement selon l'invention on utilise du matériel végétal issu du genre mentha piperita.
Toute méthode d'extraction connue de l'homme du métier peut être utilisée selon l'invention. On peut en particulier citer les extraits alcooliques, notamment éthanoliques, les extraits hydroalcooliques. On peut également utiliser un extrait préparé par la méthode décrite dans le document WO 04/058282. Un tel extrait peut comprendre de 10 à 110 g/1 voire de 45 à 75 g/1 en matières sèches. Par exemple cet extrait peut comprendre de 2 à 30 g/1 de sucres (déterminée par la méthode de Dubois M et al. Analytical Chemistry 28, n 3 pages 350-356, 1956) et de 0,2 à 2,7 g/1 de polyphénols (dosés par dosage colorimétrique avec du ferricyanure de potassium) dont des composés hydroxycinnamiques, des flavones, des flavanones et de la coumarine. Des extraits de menthe sont également disponibles commercialement. Ainsi, l'extrait hydroglycolique de feuilles de menthe du Canada, commercialisé par la société GREENTECH, l'extrait de feuilles de mentha piperita avec du propylène glycol commercialisé par la société ALBAN MULLER, et l'extrait de feuilles de mentha piperita commercialisé sous la dénomination CALMISKIN par la société SILAB peuvent être utilisés selon la présente invention. L'extrait de menthe est présent en une quantité efficace pour conférer aux compositions dans lesquelles il est formulé, les propriétés requises selon l'invention.
Sauf mention contraire, les quantités d'extrait de menthe sont indiquées en matière sèche. Par "matière sèche", on entend désigner la quantité de matière résiduelle après dessication de l'extrait, telle qu'elle peut être mesurée par toute méthode connue de l'homme de l'art. La mesure peut par exemple être effectuée selon le protocole décrit dans la demande WO 2004/058282.
Ainsi, les compositions cosmétiques ou dermatologiques de l'invention peuvent comprendre une quantité en matière sèche d'extrait de menthe inférieure à 0,4% en poids, notamment inférieure à (0% en poids, voire allant de 0,05 à 0,001 % en poids par rapport au poids total de la composition. Pour des raisons manifestes, cette quantité en extrait de menthe peut varier dans une large mesure et peut dépendre notamment de l'activité dépigmentante désirée et/ou du mode d'administration, à savoir par voie topique ou par voie orale, retenu pour la composition correspondante. Par exemple, l'extrait de menthe peut être mis en oeuvre en une quantité en matière sèche allant de 0,001 à 0,4% en poids, notamment allant de 0,002 à 0,35 % en poids, et en particulier allant de 0,003 à 0,1 % en poids dans des compositions selon l'invention et plus particulièrement dans celles destinées à une application topique.
DESORDRES CUTANES Comme précisé précédemment, les extraits de menthe s'avèrent particulièrement intéressants pour prévenir et/ou traiter un excès de pigmentation cutané et en particuliers les désordres cutanés associés à une mélanogénèse excessive ou encore les hypermélanoses. Les hypermélanoses correspondent à une surcharge de mélanine ou à une répartition anormale de la mélanine dans la peau.
Dans les hypermélanoses, on distingue les mélanodermies, anomalies associées à l'épiderme et les cérulodermies, anomalies dermiques.
Les mélanodermies peuvent résulter soit d'une augmentation du nombre de mélanocytes actifs au niveau de la couche basale de l'épiderme soit à une augmentation de la quantité de mélanine dans l'épiderme sans modification du nombre de mélanocytes. Ce dernier cas constitue la plupart des hyperpigmentations cutanées.
Elles peuvent notamment être induites par une synthèse accrue de tyrosinase, une augmentation de la mélanisation des mélanosomes, une augmentation du transfert aux kératinocytes, et/ou une augmentation de la survie des mélanosomes dans les kératinocytes. A titre illustratif, des hypermélanoses, on peut plus particulièrement citer les lentigos, la PUVA lentigines, les lentigines de lampe à bronzer, les lentigos réticulaires, les éphélides et les mélasmae (ou chloasmae). Les lentigos sont des hypermélanocytoses épidermiques. Ils sont de type simple si leur couleur n'est pas modifiée par le soleil, ou de type solaire ou sénile. La taille de ces derniers est généralement plus grande. Ils sont constatés dans les zones photo- exposées. Ils apparaissent chez les sujets jeunes après un coup de soleil et chez les sujets plus âgés à la suite d'expositions solaires. Après 70 ans, plus de 90 % des personnes présentent des lentiligos solaires notamment sur le dos des mains, le visage, les bras, les parties supérieures du dos et le décolleté. Plusieurs lentiligos solaires peuvent confluer formant ainsi de larges nappes.
Les PUVA lentigines sont des macules légèrement différentes des lentigos solaires qui apparaissent chez les patients recevant une PUVA thérapie prolongée. On les trouve au niveau des zones exposées aux UVAs. Les lentigines de lampes à bronzer apparaissent chez les patients à photoype claire utilisant des lampes à bronzer sans psoralène soit après une seule exposition intense soit après des expositions chroniques et régulières. Les lentigos réticulaires sont des variantes du lentigo solaire de couleur très foncée, presque noire. Les éphélides, ou encore tâches de rousseur, apparaissent dans les zones photoexposées (visage, dos des mains, avant des bras) tout particulièrement chez les sujets à peau très claire. Leur coloration s'accentue après exposition solaire.
Quant au mélasme ou chloasme, il s'agit d'une hyperpigmentation siégeant exclusivement en zone photo-exposée. Il se voit au cours de la grossesse, de traitements hormonaux ou de la prise de certains médicaments. Les extraits de menthe considérés selon l'invention s'avèrent efficaces pour 5 prévenir et/ou traiter l'ensemble de ces hypermélanocytoses épidermiques.
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'extrait de menthe peut être associé à un autre agent actif au niveau de la peau et notamment susceptible de coopérer à l'effet dépigmentant recherché. 10 Cet actif peut notamment être choisi parmi les agents kératolytiques, desquamants, anti-NO, anti-UV, de blanchiment, chélatant et/ou anti-oxydant.
Au sens de l'invention, un agent kératolitique est un agent qui va exfolier les couches supérieures de l'épiderme et éliminer les cellules mortes chargées de mélanine. 15 Conviennent tout particulièrement à ce titre, les dérivés de phénols et plus particulièrement l'acide salicylique ou un de ses dérivés et/ou un extrait de bourgeons de hêtre. Ainsi, de manière préférentielle, le dérivé du phénol est choisi parmi le paracétamol, dénommé le N-(4-hydroxyphényl)acétamide ou encore acétaminophène, 20 l'acide salicylique et les dérivés de l'acide salicylique. Lorsque le dérivé du phénol est un dérivé de l'acide salicylique, il est préférentiellement choisi parmi les acides n-octanoyl-5-salicylique, n-décanoyl-5-salicylique, et n-dodécanoyl-5-salicylique, ou un de leurs sels.
25 Comme agent desquamant, on peut notamment citer les AHA, BHA, et dérivés, les dérivés d'acide et acides aminés.
A titre représentatif et non limitatif des agents absorbant les rayons UV (ou anti-UV), on peut plus particulièrement citer l'acide p-aminobenzoïque (PABA), le p- 30 aminobenzoate de glycéryle, le p-aminobenzoate d'éthyl-dihydroxypropylique, le lecynamate d'octylméthoxy, le p-méthoxycynamate de 2-éthoxyéthyle, le 2,4- dihydroxybenzophénone, le 2-hydroxy-4-méthoxybenzophénone, le 2-hydroxy-4-méthoxy-4-méthylbenzinebenzophénone, le 2-hydroxy-4-méthoxy-4-méthylbenzophénone-5-sulfonate, l'urocanate d'éthyle, le 2-phényl-5-méthylebenzoxazole, le 4-méthoxy-4-tbutyldibenzoyleméthane, le p-méthoxycynamate d'éthylhexyle et analogues Comme agents anti-oxydants, on peut notamment citer les dérivés polyphénols. Les composés polyphénoliques utilisables dans la composition de l'invention peuvent être choisis par exemple parmi : a) les flavonoïdes, b) l'acide carnosique ou le carnosol, c) les acides (2,5-dihydroxyphényl) carboxylique et (2,5-dihydroxy phényl)alkylène carboxylique, éventuellement substitués, et leurs dérivés, notamment leurs sels, esters ou amides, d) les esters ou amides de l'acide caféique, e) l'acide tannique et leurs mélanges.
Parmi les flavonoïdes utilisables selon l'invention, on citera notamment la taxifoline, la catéchine, l'épicatéchine, l'eriodictyol, la naringénine, la rutine, la troxérutine, la chrysine, la tangérétine, la lutéoline, l'épigallocatéchine, le gallate de l'épigailocatéchine, la quercétine, la fisétine, le kaëmpférol, la galangine, la gallocatéchine, et le gallate d'épicatéchine.
Certains polyphénols utilisables sont présents dans des végétaux dont ils peuvent être extraits de façon connue. On peut utiliser des extraits de feuilles de thé (Camellia sinensis ou Camellia japonica). On citera en particulier les extraits de thé vert vendus sous la dénomination Sunphenon par la Société Nikko, qui contiennent notamment des flavonoïdes.
Le polyphénol tel que défini ci-dessus peut être présent en une proportion comprise entre 0, 1 et 1 % en poids par rapport au poids total de la composition.
Les agents anti-NO peuvent être plus particulièrement choisi parmi les extraits de gingko biloba, d'aubépine, d'olivier, de raisin, de basilic, de gingembre, d'ail, de thé vert, et leurs mélanges. Les extraits de ginkgo biloba s'avèrent tout particulièrement intéressants. De tels extraits sont notamment distribués sous forme commerciale Dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques selon l'invention, l'extrait de ginkgo est généralement présent à une concentration en matière sèche comprise entre 0,01 et 10 % en poids par rapport au poids total de la composition.
A titre représentatif et non limitatif des agents chélatants susceptibles d'être mis en oeuvre selon l'invention, on peut notamment citer l'hédétate de tétrasodium et/ou de l'acide citrique. A titre représentatif et non limitatif des agents de blanchiment susceptibles d'être mis en oeuvre selon l'invention, on peut notamment citer la vitamine C et dérivés comme par exemple la vitamine CG, les polyphénols comme l'acide ellagique, l'acide kojique, ou encore un extrait de réglisse. La vitamine CG dérive de la vitamine C et est obtenue par biotechnologie à partir de cette vitamine et d'amidon en utilisant l'enzyme cyclodextrine glucanotransérase (CGTase). Elle agit à la fois en tant qu'agent de blanchiment, d'agent capteur de radicaux libres et d'agent kératolytique.
Selon une variante de réalisation, la composition cosmétique et/ou dermatologique notamment destinée à une application topique, peut contenir outre l'extrait de menthe au moins un agent anti-NO tel que par exemple un extrait de ginkgo biloba et un agent de blanchiment tel que par exemple la vitamine CG. Par exemple, la composition selon l'invention peut comprendre au moins un extrait de mendia piperita, un extrait de ginkgo biloba, de la vitamine CG, un extrait de réglisse, de l'acide salicylique, et un extrait de bourgeons de hêtre. Bien entendu, les compositions selon l'invention peuvent contenir outre l'extrait de menthe, le cas échéant en associant à un ou plusieurs autres actifs, des additifs et/ou support de formulation sélectionnés plus particulièrement au regard du mode d'administration considéré pour la composition.
En particulier, les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous 30 toutes les formes galéniques normalement utilisées selon le mode d'application ou d'administration retenu.
Plus précisément, les compositions selon l'invention peuvent être formulées pour une application topique ou pour une administration par voie orale. En ce qui concerne plus particulièrement les compositions destinées à une application topique, il peut s'agir de solutions aqueuses, hydroalcooliques ou huileuses, de dispersions du type des solutions ou dispersions du type lotion ou sérum, d'émulsions de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, de suspensions ou émulsions du type crème, de gel aqueux ou anhydre, de microémulsions, de microcapsules, de microparticules, ou de dispersions vésiculaires de type ionique et/ou non ionique. Il peut s'agir par exemple de crèmes de soin, de gels de soin, de masques sur support, de fonds de teint, de camoufleurs, d'anti-cernes, de fards à paupières, de crayons contour des yeux, de khôl, de mascaras ou de démaquillants. Lorsque la composition de l'invention est une émulsion, la proportion de la phase grasse peut aller de 5 à 80 % en poids, et de préférence de 5 à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les huiles, les émulsionnants et les coémulsionnants utilisés dans la composition sous forme d'émulsion sont choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine cosmétique et/ou dermatologique. L'émulsionnant et le coémulsionnant peuvent être présents, dans la composition, en une proportion allant de 0,3 à 30 % en poids, et de préférence de 0,5 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition.
Lorsque la composition de l'invention est une solution ou un gel huileux, la phase grasse peut représenter plus de 90 % du poids total de la composition. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles. De façon connue, les compositions cosmétiques ou dermatologiques de l'invention peuvent contenir des adjuvants habituels dans le domaine cosmétique ou dermatologique, tels que les matières grasses, les émulsionnants, les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les parfums, les charges, les filtres et les matières colorantes. Comme matières grasses utilisables dans l'invention, on peut citer les huiles minérales comme par exemple le polyisobutène hydrogéné et l'huile de vaseline, les huiles végétales comme par exemple une fraction liquide du beurre de karité, huile de tournesol et d'amandes d'abricot, les huiles animales comme par exemple le perhydrosqualène, les huiles de synthèse notamment l'huile de Purcellin, le myristate d'isopropyle et le palmitate d'éthyl hexyle, et les huiles fluorées comme par exemple les perfluoropolyéthers. On peut aussi utiliser des alcools gras, des acides gras comme par exemple l'acide stéarique et comme par exemple des cires notamment de paraffine, carnauba et la cire d'abeilles. On peut aussi utiliser des composés siliconés comme les huiles siliconées et par exemple les cyclométhicone et diméthicone, les cires, les résines et les gommes siliconées. Comme émulsionnants utilisables dans l'invention, on peut citer par exemple le stéarate de glycérol, le polysorbate 60, le mélange alcool cétylstéarylique/alcool cétylstéarylique oxyéthyléné à 33 moles d'oxyde d'éthylène vendu sous la dénomination Sinnowax AO par la société HENKEL, le mélange de PEG-6/PEG-32/Glycol Stéarate vendu sous la dénomination de Tefose 63 par société GATTEFOSSE, le PPG-3 myristyl éther, les émulsionnants siliconés tels que le cétyldiméthicone copolyol et le mono- ou tristéarate de sorbitane, le stéarate de PEG-40, le monostéarate de sorbitane oxyéthyléné (200E). Comme solvants utilisables dans l'invention, on peut citer les alcools inférieurs, notamment l'éthanol et l'isopropanol, le propylène glycol. Comme gélifiants hydrophiles, on peut citer les polymères carboxyliques tel que le CARBOMER , les copolymères acryliques tels que les copolymères d'acrylates/alkylacrylates, les polyacrylamides et notamment le mélange de polyacrylamide, C13-14-Isoparaffine et Laureth-7 vendu sous le nom de Sepigel 305 par la société SEPPIC, les polysaccharides comme les dérivés cellulosiques tels que les hydroxyalkylcelluloses et en particulier les hydroxypropylcellulo se et hydroxyéthylcellulose, les gommes naturelles telles que les guar, caroube et xanthane et les argiles. Comme gélifiants lipophiles, on peut citer les argiles modifiées comme les bentones, les sels métalliques d'acides gras comme les stéarates d'aluminium et la silice hydrophobe, ou encore l'éthylcellulose et le polyéthylène. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans les domaines cosmétique et/ou dermatologique, et par exemple de 0,01 % à 20 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse, dans la phase aqueuse et/ou dans les vésicules lipidiques.
Les procédés cosmétiques selon l'invention peuvent être mis en oeuvre par application topique, journalière par exemple, de la composition selon l'invention qui peut être par exemple formulée sous forme de gels, lotions ou émulsions. Ainsi, les procédés selon l'invention peuvent comprendre une application unique. Selon un autre mode de réalisation, l'application est répétée par exemple 2 à 3 fois quotidiennement sur une journée ou plus et généralement sur une durée prolongée d'au moins 4 semaines, voire 4 à 15 semaines, avec le cas échéant une ou plusieurs périodes d'interruption.
Dans le cas de l'administration d'une composition conforme à l'invention par voie orale, on privilégie l'utilisation d'un support ingérable. Pour l'ingestion, de nombreuses formes de réalisation de compositions orales etnotamment de compléments alimentaires sont possibles. Leur formulation est réalisée par les procédés usuels pour produire des dragées, gélules, gels, émulsions, comprimés, capsules. Les poudres peuvent être diluées dans un liquide ingérable, par exemple de l'eau préalablement à leur administration par voie orale.
Les exemples figurant ci-après sont produits à titre illustratif et non limitatif du 20 domaine de l'invention.
FIGURES ET LEGENDES Figure 1 : Représente schématique d'un modèle multicellulaire de tri-culture kératinocytes/mélanocytes/cellules nerveuses. 25 L'insert est introduit dans le puits de culture de telle sorte que les kératinocytes, les mélanocytes et les cellules nerveuses sont cultivés dans le même milieu de culture afin de permettre des échanges chimiques intracellulaires.
Figure 2 : Représente la modulation de la mélanogénèse par l'activité des 30 cellules nerveuses. Les cellules nerveuses d'un modèle multicellulaire selon l'invention sont stimulées, ou non, par de la noradrénaline pendant 10 jours, et le cas échéant en présence de CGRP8_37 ou de CALMISKIN à 0,03 %.
EXEMPLE 1 Evaluation de la modulation par un extrait conforme à l'invention de la pigmentation cutanée et de la mélanogenèse CGRP (Calcitomine-Gene-Related-Peptide)-induite dans un modèle de peau humaine maintenue en survie.
Matériel et Méthode L'extrait utilisé est un produit distribué par la société SILAB sous la dénomination commerciale CALMISKIN . Il s'agit d'une solution d'extrait de feuille de menthe (mentha piperita) à 100 % (v/v) dans l'eau. Il est mis en oeuvre à raison de 2 % en 10 poids. La pigmentation cutanée est évaluée histologiquement au microscope optique après révélation par la coloration de Fontana-Masson au niveau des mélanocytes et des kératinocytes adjacents. Le nombre de mélanocytes actifs est également quantifié après Dopa-réaction sur épiderme total. 15 L'objectivation d'un produit dépigmentant ou propigmentant consiste à évaluer la quantité de pigments mélaniques présents dans les mélanocytes et dans les kératinocytes adjacents au niveau de peau traitées par le produit en comparaison avec des peaux non traitées.
20 Protocole de test Des fragments de peau humaine normale de 6 donneurs différents sont déposés dans des inserts eux-mêmes positionnés sur des puits de culture. Le milieu de culture spécifiquement adapté au maintien en survie (antibiotiques, SVF) est ajouté dans le fond des puits, un passage s'effectuant par diffusion lente entre les deux compartiments par 25 l'intermédiaire d'une membrane poreuse (3 m). Le CGRP est ajouté à JO dans le milieu de culture à la concentration de 10-' M. Le produit conforme à l'invention est appliqué en topique à 2 % (JO, J1 et J2). Les comparaisons suivantes ont été effectuées : - peau témoin (non traitée) 30 - peau + CGRP 10-' M - peau + CGRP 10-7 M + extrait de menthe à 2 % L'ensemble est maintenu en survie 72 heures.
Révélation histologique par la coloration de Fontana-Masson Les fragments de peau sont fixés à l'issu du protocole précédent, dans le liquide de Bouin et inclus en paraffine pour une étude histologique après coloration de Fontana-Masson. Une évaluation quantitative du nombre de cellules renfermant des grains de mélanine est réalisée au microscope sur 300 à 400 cellules de la couche basale. Trois catégories de cellules sont dénombrées : - score 1 : cellules non pigmentées ou présentant quelques grains, cellules d'aspect vacuolaire ; - score 2 : cellules présentant une charge modérée de mélanine (grains de mélanines épars, non homogène) ; - score 3 : cellules présentant une charge importante de mélanine (dépôt homgène noir recouvrant plus de la moitié du cytoplasme des cellules).
Révélation histologique des mélanocytes par la Dopa-réaction Le nombre de mélanocytes actifs est évalué à partir d'épiderme frais décollé par une solution d'EDTA, 2Na à 0,5 M pH 7,5 (90 secondes à 60 C). Les mélanocytes sont révélés par une solution de Dopa à 0,1 % (incubation une nuit à 37 C). Le nombre de cellules Dopa-positives est évalué par unité de champs au 20 microscope optique (10-12 champs au grossissement 40). Le nombre moyen de mélanocytes actifs présent par champ est calculé pour chaque condition.
Analyses statistiques Une moyenne est réalisée pour chaque paramètre à partir des résultats obtenus 25 sur les 6 peaux. L'analyse statistique est effectuée par le test de Student dit de l'écart réduit ou test des échantillons appariés, avec un risque a de 5 %.
Résultats Révélation histologique par la coloration de Fontana-Masson 30 Le Tableau 1 expose le pourcentage de cellules épithéliales pour chaque score de pigmentation.
Traitement Score 1 Score 2 Score 3 Témoin 39,8 +11,2 40,5 + 6,9 19,7 + 7 Peau + CGRP 24,9 18,38* 45 7,5 30,3 12,4 Peau + CGRP + Extrait de menthe 2 % 50,1 16,6 ** 32,6 8,3 ** 17,3 10 ** Tableau 1 : Analyse histologique après coloration de Fontana-Masson. Les résultats sont exprimés en pourcentage de cellules par rapport au nombre total analysé (n = 6 peaux différentes). * : Différence statistiquement significative par rapport à la peau témoin (test de Student apparié, p < 0,05). ** : Différence statistiquement significative par rapport à la peau + CGRP (test de Student apparié, p < 0,05) Dans le modèle de peau humaine maintenue en survie stimulée par le CGRP, on note une augmentation du transfert des grains de mélanine des mélanocytes aux kératinocytes adjacents. En effet, le pourcentage de cellules très pigmentées (score 3) augmente significativement après stimulation par le CGRP à 10-7 M : 30,3 % des cellules Fontana positives contre 19,7 % au niveau des peaux témoins. Dans le même temps, le pourcentage de cellules peu ou pas pigmentées (score 1) diminue de manière significative après application du CGRP par rapport aux peaux témoins (24,9 % vs 39,8 %, p = 0,03). Le pourcentage de cellules de score 2 n'est pas modifié après application de CGRP. En conséquence, l'extrait de menthe testé à 2 % inhibe de manière significative la pigmentation induite par le CGRP (50,1 % de cellules score 1 contre 24,9 % avec le CGRP, p = 0,004). Parallèlement, le nombre de cellules très pigmentées (score 3) diminue significativement (17,3 % contre 30,3 % avec le CGRP). On retrouve également une diminution statistiquement significative du pourcentage de cellules de score 2 (32,6 % vs 45 % avec le CGRP seul).25 Révélation histologique des mélanocytes par la Dopa-réaction Traitement Nombre de mélanocytes Dopa-positifs Témoin 31 22 Peau+CGRP 56 33* Peau + CGRP + Extrait de menthe 2 % 38 34 ** Tableau 2 : Nombre de mélanocytes (après Dopa-réaction) sur feuillet épidermique (n = 8). * : Différence statistiquement significative par rapport à la peau témoin (test de Student apparié, p < 0,05). * * : Différence statistiquement significative par rapport à la peau + CGRP (test de Student apparié, p < 0,05).
Le nombre de mélanocytes mis en évidence par la Dopa-réaction révèle la mélanogenèse induite de manière significative par le CGRP : 56 cellules Dopa-positives contre 31 pour les peaux témoins (p = 0,01). L'extrait de menthe testé à 2 % inhibe de manière significative cette mélanogenèse CGRP-induite (respectivement 38 cellules positives).
EXEMPLE 2 Evaluation de la modulation par un extrait de menthe de la pigmentation cutanée et de la mélanogenèse CGRP (Calcitonine-Gene-Related-Peptide)-induite au cours d'une situation de stress émotionnel sur un modèle multicellulaire de kératinocytes/mélanocytes/cellules nerveuses in vitro. L'extrait utilisé est un produit distribué par la société SILAB sous la dénomination commerciale CALMISKIN . Il s'agit d'une solution d'extrait de feuilles de menthe (mentha piperita) à 100 % (v/v) dans l'eau. Il est mis en oeuvre à raison de 0,03 % en poids.
Modèle multicellulaire kératinocytes/mélanocytes/cellules nerveuses Une première culture a été préparée à partir de cellules nerveuses (N) cultivés en inserts de culture pour plaque 24 puits à raison de 20 000 cellules par dépôt (ThinCertTM, Greiner bio-one ref. 662 610) dans un milieu de culture DMEM-HAM F12 (Invitrogen 21331-020) complémentés avec de la L-glutamine 2mM (Invitrogen 25030024), de la pénicilline 50 UI/ml ù Streptomycine 50 g/ml (Invitrogen 15070063), un supplément N2 (17502-048), un facteur de croissance nerveux (Nerf Growth Factor, NGF, Invitrogen 13290.010) et de la neurotrophine 3 (NT-3, Tebu 450-03-b), et maintenue dans une étuve à 37 C et 5 % CO2 saturée en humidité pendant 5 jours. Une seconde culture a été préparée avec des kératinocytes (K) (kératinocytes humains normaux (NHEK) isolés à partir de chirurgie plastique et utilisés au 3eme passage (R3 K015)) ensemencés à raison de 100 000 cellules/puits, en plaque 24 puits en milieu (Médium 254 (Tebu 058M-254-500) complémenté avec HMGS-2 sans PMA (Tebu 058S-016-5) et un mélange de pénicilline 50 UI/ml et de streptomycine 50 g/ml (Invitrogen 15070063), et des mélanocytes (M) (mélanocytes épidermiques humains normaux (NHEM-2) utilisés au 6ème passage) ensemencés à raison de 50 000 cellules/puits dans les cultures de kératinocytes.
Après 4 jours de culture, les inserts contenant les cellules nerveuses ont été déposées dans les puits contenant la co-culture kératinocytes/mélanocytes (après 1 jour de culture de co-culture), pour obtenir le modèle multicellulaire cellules nerveuseskératinocytes-mélanocytes (N/K/M), en présence de milieu de culture N/K/M. Le milieu de culture N/K/M comprend 50 % DMEM-HAM F12 (Invitrogen 21331-020) complémenté avec de la L-glutamine 2mM (Invitrogen 25030024), de la pénicilline 50 UI/ml, de la streptomycine 50 g/ml (Invitrogen 15070063), un supplément N2 (17502-048), le facteur de croissance nerveuse (NGF, Invitrogen), et de la neurotrophine 3 (NT-3), 33 % de milieu M 154 (Tebu M 154 CF/PRF) complémenté avec du CaCl2 0,2 mM (Tebu S-013-154) et un facteur de croissance pour kératinocytes (Complement Human Keratinocytes Growth supplement HKGS Tebu S-001-5), et 17 % de milieu M 154 (Tebu M 154 CF/PRF). Le modèle multicellulaire ainsi obtenu a été maintenu en culture pendant au moins 10 jours. Le milieu de culture du puits et de la nacelle a été renouvelé chaque jour par 30 moitié. Un schéma illustrant le modèle multicellulaire ainsi obtenu est représenté Figure 1.
Effets d'un stress émotionnel de type noradrénergique sur la mélanogenèse Des cellules d'un modèle multicellulaire tel qu'obtenu précédemment ont été maintenues pendant 10 jours en présence ou non de noradrénaline 10-5M, additionnée ou non de CALMISKIN 0,03 % ou de CGRP8_37 10-6M selon un protocole similaire à celui décrit précédemment. Le CGRP8_37 est un antagoniste de référence des récepteurs au CGRP. A l'issue de l'incubation, la mélanine été extraite des co-cultures de kératinocytes/mélanocytes par une solution de NaOH 0,5 N, puis dosée par mesure de la densité optique (405 nm) et comparée à une gamme étalon de mélanine exogène (0,39- 100 g/ml de mélanine Sigma M8631). Les données expérimentales ont été analysées au moyen du logiciel PRISM (Graph Pad Software). Les comparaisons intergroupes ont été réalisées par analyse de variance (ANOVA) à l'aide du test de comparaison multiple de Dunnet.
Les comparaisons entre deux échantillons ont été réalisées par analyse à l'aide du T test. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau ci-dessous. Ils représentent la moyenne de 4 expériences indépendantes. Ils sont exprimés en g de mélanine/ml. sans Noradrénaline avec Noradrénaline Témoin 22,4 1,12 25,77 0,72# CGRP8_37 10 6M 19,33 0,48 21,35 0,91# CALMISKIN 0,03 % 22,57 1,30 23,89 1,32* La présence de Noradrénaline 10-5M stimule de façon significative (#; p<0,01) la quantité de mélanine synthétisé dans les cocultures (+ 15 %). Le produit CALMISKIN à la concentration de 0,03 %, ainsi que l'antagoniste des récepteurs de la CGRP, le CGRP8_37 diminuent de façon significative (*; p<0,05 et # ; 25 p<0,01) la quantité de mélanine (- 7,3 % et -17,2 % respectivement), en présence de noradrénaline.
Mesure de la libération de CGRP A l'issue de l'expérience précédente, les surnageants des puits et des inserts ont été recueillis séparément et congelés immédiatement à -80 C afin d'analyser le contenu en CGRP.
Le contenu en CGRP a été mesuré dans les surnageants de culture par un test ELISA (Rat CGRP enzyme Immuno Assay Kit, Spi Bio A05482) selon le protocole préconisé par le fournisseur. Les résultats sont exprimés en pg de CGRP/ml de milieu. L'analyse des résultats a été effectuée comme décrit précédemment. 10 Puits de culture Insert sans Noradrénaline 159,31 21, 24 417,12 37,33 avec Noradrénaline 10-s M 170,48 19,47 493,86 11,57 Noradrénaline 10-s M + 134,11 14,66* 474,19 12,46 CALMISKIN 0,03 % *p<0,05
En présence de noradrénaline, la quantité de CGRP libérée dans l'insert de la culture témoin est très importante. Le produit CALMISKIN a modulé légèrement la 15 libération de CGRP. La quantité de CGRP dosée dans le milieu de culture des puits (au contact de la coculture de kératinocytes/mélanocytes) montre que le CGRP a diffusé ou a été libéré par les terminaisons nerveuses ayant traversées l'insert poreux. A ce niveau, le produit CALMISKIN a diminué significativement la libération de CGRP (- 21 % du témoin ; 20 p<0,05).
Conclusion L'addition de noradrénaline à un modèle multicellulaire selon l'invention induit une augmentation de la quantité de CGRP libérée dans le milieu de culture par les 25 cellules nerveuses. Cette quantité est plus importante au niveau des cellules nerveuses mais est également mesurable à proximité de la coculture kératinocytes/mélanocytes.
La noradrénaline apparaît, ainsi, augmenter la mélanogénèse de façon mesurable (+ 15 %), au niveau de la coculture kératinocytes/mélanocytes par le biais de la libération de CGRP. Cette stimulation a été diminuée par application du produit CALMISKIN à la concentration de 0,03 %.
EXEMPLE 3 Exemple de formulation d'un sérum blanchissant pour toutes peaux. Il s'agit d'une émulsion huile dans eau, préparée de façon classique pour 10 l'homme du métier et ayant la composition suivante : Agents kératolytiques 1,1 % Agents anti oxydants 0,2 % Agents anti NO 0, 01 % Agents blanchissants 2,5 % 15 Extrait de Menthe* 0,05 % Huiles 7 % Epaississants 1 % Emulsionnants 2,6 % Gélifiants 1,6 % 20 Sequestrant 0, 05 % Neutralisant 0,8 % Conservateurs 1 % Parfum 0,1 % Glycols 3,5 % 25 Poudres 0,5 % Tampon 0,35 % Eau qs 100% * sous forme du produit CALMISKIN
Claims (24)
1. Procédé de traitement non thérapeutique pour prévenir et/ou diminuer la synthèse et/ou la libération de mélanine, dans lequel on utilise une composition cosmétique comprenant à titre d'actif, au moins un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes.
2. Procédé de traitement non thérapeutique pour prévenir et/ou traiter un excès de pigmentation cutanée, dans lequel on utilise une composition comprenant à titre d'actif, au moins un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes.
3. Procédé de traitement non thérapeutique pour prévenir et/ou traiter des désordres cutanés associés à une mélanogénèse excessive, dans lequel on utilise une composition comprenant à titre d'actif au moins un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes.
4. Procédé selon la revendication 2 ou 3, dans lequel l'excès de pigmentation cutanée ou les désordres cutanés se présentent sous l'aspect de lentigos (de type simple ou de type solaire, ou sénile), de PUVA lentigines, de lentigines de lampe à bronzer, de lentigos réticulaires, d'éphélides et/ou de mélasmae (ou chloasmae).
5. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'extrait est issu de cellules provenant d'une menthe d'un genre choisi parmi mentha aquatica, mentha arvensis, mentha longifolia, mentha piperita, mentha pulegium et mentha spicata.
6. Procédé selon la revendication précédente, dans lequel l'extrait est issu de cellules provenant d'une menthe du genre mentha piperita.
7. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'extrait est issu de cellules provenant de matériel végétal mentha issu de culture in 25 vitro.
8. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'extrait est mis en oeuvre en une quantité en matière sèche allant de 0,001 à 0,4% en poids, notamment allant de 0,002 à 0,35% en poids, et en particulier allant de 0,003 à 0,1% en poids par rapport au poids total de la composition. 30
9. Composition cosmétique, comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthesà raison de moins de 0,4 % en poids de matière sèche, par rapport au poids total de la composition.
10. Composition cosmétique, comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes associé à au moins un agent kératolytique, desquamant, anti-NO, anti-UV, de blanchiment, chélatant et/ou anti-oxydant.
11. Composition selon la revendication 9 ou 10, dans laquelle l'extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes est tel que défini dans l'une quelconque des revendications 5 à 7.
12. Composition selon la revendication 10 ou 1l, dans laquelle ledit extrait est mis en oeuvre en une quantité en matière sèche allant de 0,001 à 0,4% en poids, notamment allant de 0,002 à 0,35% en poids, et en particulier allant de 0,003 à 0,1% en poids par rapport au poids total de la composition.
13. Composition selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, dans 15 laquelle l'agent kératolytique est un dérivé de phénols, et en particulier l'acide salicylique ou un de ses dérivés ou un extrait de bourgeons de hêtre.
14. Composition selon la revendication précédente, dans laquelle l'agent kératolytique est choisi parmi le paracétamol, l'acide salicylique et les dérivés de l'acide salicylique, et notamment les acides n-octanoyl-5-salicylique, n-décanoyl-5-salicylique, et 20 n-dodécanoyl-5-salicylique, ou un de leurs sels.
15. Composition selon l'une quelconque des revendications 9 à 14, comprenant au moins un composé choisi parmi l'acide salicylique et/ou un extrait de bourgeons de hêtre.
16. Composition selon l'une quelconque des revendications 9 à 15, 25 comprenant au moins un extrait de ginkgo biloba.
17. Composition selon l'une quelconque des revendications 9 à 16, comprenant au moins un agent anti-UV choisi parmi l'acide paminobenzoïque (PABA), le p-aminobenzoate de glycéryle, le p-aminobenzoate d'éthyl-dihydroxypropylique, le lecynamate d'octylméthoxy, le p-méthoxycynamate de 2-éthoxyéthyl, le 2,4- 30 dihydroxybenzophénone, le 2-hydroxy-4-méthoxybenzophénone, le 2-hydroxy-4-méthoxy-4-méthylbenzinebenzophénone, le 2-hydroxy-4-méthoxy-4-méthylebenzophénone-5-sulfonate, l'urocanate d'éthyle, le 2-phényl-5-méthylebenzoxazole, le 4-méthoxy-4-t-butyldibenzoyleméthane, le p-méthoxycynamate d'éthylhexyle et analogues.
18. Composition selon l'une quelconque des revendications 9 à 17, comprenant au moins de l'hédétate de tétrasodium et/ou de l'acide citrique. 9 à 18,
19. Composition selon l'une quelconque des revendications comprenant au moins de la vitamine CG et/ou un extrait de réglisse. 9 à 19,
20. Composition selon l'une quelconque des revendications comprenant au moins un extrait de mentha piperita, un extrait de ginkgo biloba, de la vitamine CG, un extrait de réglisse, de l'acide salicylique, et un extrait de bourgeons de 10 hêtre.
21. Utilisation d'un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes à titre d'agent dépigmentant.
22. Utilisation d'un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes à titre d'agent inhibiteur de la mélanogénèse. 15
23. Utilisation d'un extrait de cellules d'au moins un végétal de la famille des menthes à titre d'agent de blanchiment cutané.
24. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 21 à 23, caractérisée en ce que l'extrait est tel que défini dans l'une quelconque des revendications 5 à 7.
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