KR20060018430A - 죽력을 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환 예방 또는치료용 조성물 - Google Patents

죽력을 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환 예방 또는치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 죽력을 유효 성분으로 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환 예방 또는 치료용 조성물을 개시한다.
죽력, 피부 손상, 피부 질환

Description

죽력을 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환 예방 또는 치료용 조성물{Composition for Preventing or Treating Skin Damage or Disease Comprising Bambuase Caulis in Liquamen}
도 1은 무모 마우스에 자외선B 조사 후 발생된 일광화상 세포의 현미경 사진이다. (A)는 정상 피부 사진, (B)는 자외선B 조사에 의해 일광화상 세포(화살표)가 발생된 피부 사진.
도 2는 자외선B 조사에 의한 피부 일광화상 세포 유발에 대한 죽력(BC)의 효과를 표로서 나타낸 것이다.
도 3은 정상 피부(A), 자외선B 조사 피부(B), 죽력을 투여하고 자외선B를 조사한 피부의 멜라닌 세포(C)의 현미경 사진이다.
도 4는 자외선B 조사에 의한 피부 멜라닌 세포 증가에 대한 죽력(BC)의 효과를 표로서 나타낸 것이다.
도 5는 정상 피부(A), 자외선B 조사 피부(B), 죽력을 투여하고 자외선B를 조사한 피부 수지상세포(랑게르한스 세포)(C)의 현미경 사진이다.
도 6은 자외선B 조사에 의한 피부 수지상세포(랑게르한스 세포) 감소에 대한 죽력(BC)의 효과를 표로서 나타낸 것이다.
도 7은 자외선B 조사에 의한 피부 멜라닌 세포 형성 후 죽력(BC) 투여에 의 한 미백효과를 표로서 나타낸 것이다.
본 발명은 죽력을 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
자외선이나 화학 물질 등이 피부발적(erythema), 광과민, 일광화상, 피부부종, 피부세포 이상과다증식, 일광염증, 기미, 주근깨, 국소(피부) 및 전신 면역저하, 피부 광노화, 피부건조, 흑점증, 피부주름, 일광탄력섬유증(진피탄력섬유의 변성), 피부 모세혈관 확장증, 흑색종, 기저세포암, 편평세포암, 백내장, 접촉성피부염, 접촉성피부과민증 등 다양한 피부 손상이나 피부 질환을 일으킨다는 것은 이미 알려진 사실이다.
이러한 피부 손상이나 피부 질환 중 피부 발적이나 일광 화상은 피부 세포의 일종인 일광화상 세포(sunburn cell)의 형성과 밀접하게 관련되어 있다. 일광화상 세포는 자외선 등 외부의 자극에 의해서 피부 각질 세포가 괴사하면서 형성된 세포인데, 호산성 세포질을 지니고 있으며, 세포 DNA가 손상을 받아 위축된 세포핵을 지니고 있다. 이러한 일광화상 세포의 증가는 피부 발적이나 일광 화상 이외에도 광과민, 피부부종, 피부세포 이상과다증식, 일광염증 등의 피부 손상 또는 피부 질환과도 관련되어 있다고 보고 되고 있다(이은희 등, 한국식품위생안전성학회지, 2001, 16: 117-124; Elmets et al, J Am Acad Dermatol, 2001, 44: 425-432; Matsumura와 Ananthaswamy, Toxicol Appl Pharmacol., 2004, 195: 298-308).
한편, 기미나 주근깨 등의 과색소침착증에는 멜라닌 세포가 관여한다. 멜라닌 세포는 멜라닌이라는 검은 멜라닌 색소와 단백질의 복합체인 페놀계 고분자 물질을 분비한다. 멜라닌은 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부 기관을 보호해주는 동시에 피부 생체 내에 생겨난 자유 라디칼 등에 의한 피부내 단백질과 유전자들의 손상을 보호해주는 유용한 역할을 하지만, 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미나 주근깨 등과 같은 과색소침착증을 유발하여 미용상으로 좋지 않은 결과를 가져오게 된다.
피부 손상이나 피부 질환에 대한 면역 반응에는 수지상 세포로 분류되는 랑게르한스 세포가 중요한 역할을 담당한다. 기저 세포(basal cell) 층 위에 존재하는 랑게르한스 세포는 다른 면역 세포와 마찬가지로 골수에서 유래하는 피부 면역 세포로서 T-세포와 마크로파지의 특성을 보유하면서 접촉성 피부염 등과 같은 피부 질환에 대한 면역 반응에 관여하고 있다. 랑게르한스 세포가 증식하지 못하거나 감소하게 되면 국소(피부) 및 전신 면역저하 등에 의한 피부 손상이나 피부암 등이 유발된다고 알려져 있다(이은희 등, 한국식품위생안전성학회지, 2001, 16: 117-124; Elmets et al, J Am Acad Dermatol, 2001, 44: 425-432; Matsumura와 Ananthaswamy, Toxicol Appl Pharmacol., 2004, 195: 298-308).
한편, 죽력이란 직·간접적으로 열이 가해진 대나무 또는 대나무 줄기로부터 진액의 형태로 흘러내린 액체를 말한다. 이러한 죽력은 일반적으로 용기에 세절된 대나무를 넣은 다음 그 용기에 열을 가해서 흘러내리는 액체를 회수하는 방식으로 제조된다.
죽력은 청황색 또는 황갈색의 액즙으로 투명하고 탄내가 나는데, 전통적으로 중풍 반신불수나 간질 등에 사용되어 왔다. 현재에도 죽력은 계속하여 연구되어 오고 있는데, 근래에 살균 효과나 항진 효과, 항암 효과 등을 가진다고 보고된 바 있으며, 계속하여 그 새로운 용도가 연구 중에 있다.
본 발명자(들)은 죽력이 상기의 용도 이외에도 여러 다른 용도들을 지니고 있을 것이라 기대하고, 죽력의 여러 다른 용도들을 실험하던 중, 죽력이 실험 동물에 투여되었을 때 피부 손상이나 피부 질환을 예방 또는 치료하는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
그러므로 본 발명은 죽력을 유효 성분으로 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명은 죽력을 유효 성분으로 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명의 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 유효 성분으로 포함되는 죽력이란 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 지니면서, 대나무 또는 대나무 줄기로부터 추출되어진 모든 형태의 추출물로서 정의된다.
일 측면에 있어서 상기 죽력은 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 지니면서, 직·간접적으로 열이 가해진 대나무 또는 대나무 줄기로부터 진액 형태로 흘러내린 액체를 포함하는 의미로서 이해되어져야 한다.
상기에서 직접적으로 열이 가해진다는 것은 열을 전달하는 매개체가 없이 열이 대나무 또는 대나무 줄기에 가해진다는 것이며, 반면 간접적으로 열이 가해진다는 것은 열을 전달하는 매개체 예컨대 전통적인 죽력의 제조 방법에 쓰여지고 있는 옹기나 기타 강판이나 스테인레스스틸 재료로 이루어진 용기를 통하여 열이 대나무 또는 대나무 줄기에 가해진다는 것을 의미한다.
제조되는 방식에 따라 죽력이 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과에 있어서 차이를 나타낼지라도, 당업자는 본 발명이 개시하는 바에 기초하는 한 그 죽력이 어떠한 방식으로 제조되든지 간에 모든 죽력은 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 나타낼 개연성을 가지고 있다고 예측할 것이다. 또한 당업자라면 본 발명의 하기 실시예 및 그 결과(도 1 내지 도 7 참조)에 기초하는 한 그의 통상의 능력 범위안에서 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 갖는 죽력을 확인·선별할 수 있을 것이다.
그러므로 그 제조 방식을 불문하고 열이 가해진 대나무 또는 대나무 줄기로부터 흘러내린 진액 형태의 액체는 그것이 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 가지는 한 모두 상기 죽력에 해당하는 것으로 간주되어진다.
다른 측면에 있어서 상기 죽력은 노닐페놀 독성 예방 또는 치료 효과를 지니면서, 대나무나 대나무 줄기를 열수 추출하거나 알콜, 핵산, 에틸 아세테이트, 아세톤, 클로로포름, 메틸렌 클로라이드 또는 이들의 혼합 용매를 첨가하여 추출된 대나무나 대나무 줄기의 추출물을 포함하는 의미로서 이해되어져야 한다.
본 발명의 하기 실시예가 전통적인 방식으로 제조된 죽력, 즉 옹기의 내부에 세절된 대나무를 넣고 황토로 그 옹기를 감싸고 그 황토 주위에 왕겨에 쌓아 거기에 불을 지펴서 그 열로 세절된 대나무로부터 흘러내린 진액 형태의 액체를 가지고 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 확인하였다고 하더라도(도 1 내지 도 7 참조), 당업자라면 그 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과에 있어서 차이가 있을지라도 상기 어떠한 방식으로 용매 추출되든지 그 대나무나 대나무 줄기 추출물도 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 가질 것임을 용이하게 예측할 수 있으며, 본 발명의 하기 실시예 및 그 결과(도 1 내지 도 7 참조)에 기초하는 한 그의 통상의 능력 범위안에서 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 가지는 대나무나 대나무 줄기의 추출물을 확인·선별할 수 있을 것이다.
그러므로 상기 죽력은 위 대나무 또는 대나무 줄기로부터 용매 추출되어진 대나무 또는 대나무 추출물이 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 지니는 한 그러한 것도 포함하는 의미로서 간주된다.
또한 상기에서 대나무는 그 종류를 불문하는 것으로 이해되어져야 한다. 따라서 왕대속(Phyllostachys)에 속하는 대나무든지, 해장죽속(Arundinaria)에 속하는 대나무든지, 조릿대속(Sasa)에 속하는 대나무든지 또는 이대속(Pseudosasa)에 속하는 대나무든지 그것으로부터 추출되어진 것이라면 모두 상기 죽력에 해당하는 것으로 간주되어야 할 것이다.
그럼에도 상기 죽력은 직·간접적으로 열이 가해진 대나무 또는 대나무 줄기로부터 진액 형태로 흘러내린 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 지니는 액체인 것이 바람직하며, 간접적으로 열이 가해진 대나무 또는 대나무 줄기로부터 진액 형태로 흘러내린 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 지니는 액체인 것이 더 바람직하다.
한편, 본 발명자(들)은 죽력을 실험 동물인 마우스에 투여하였을 때 자외선에 의하여 유발되는 일광화상 세포의 증가, 수지상 세포로 분류되는 랑게르한스 세포의 감소, 멜라닌 세포의 증가를 회복시켜주는 현상을 확인할 수 있었다(하기 실시예 및 도 1 내지 도 7 참조).
상기 일광화상 세포의 증가는 피부발적(erythema), 광과민, 일광화상, 피부부종, 일광염증, 피부 광노화, 피부주름, 피부 모세혈관 확장증 등의 피부 손상 또는 피부 질환과 직·간접적으로 관련되어 있으며, 랑게르한스 세포의 감소는 국소(피부) 및 전신 면역저하, 흑색종, 기저세포암, 편평세포암 등의 피부 손상 또는 피부 질환과 직·간접적으로 관련되어 있고, 멜라닌 세포의 증가는 전술한 바의 기미, 주근깨 등의 피부 손상 또는 피부 질환과 직·간접적으로 관련되어 있다고 보고 되고 있다(이은희 등, 한국식품위생안전성학회지, 2001, 16: 117-124; Elmets et al, J Am Acad Dermatol, 2001, 44: 425-432; Matsumura와 Ananthaswamy, Toxicol Appl Pharmacol., 2004, 195: 298-308).
그러므로 본 발명의 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 있어서, 피부 손상 또는 피부 질환이란 일광화상세포의 증가와 직·간접적으로 관 련된 피부 질환, 랑게르한스 세포의 감소와 직·간접적으로 관련된 피부 질환, 멜라닌 세포의 증가와 직·간접적으로 관련된 피부 질환을 포함하는 의미로서 이해된다.
여기서 "직접적으로 관련된 피부 손상 또는 피부 질환"의 의미는 일광화상 세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 또는 멜라닌 세포의 증가에서 곧바로 비롯되는 피부 손상 또는 피부 질환으로서, 일광화상 세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 또는 멜라닌 세포의 증가를 억제함으로써 그것만으로도 치유 또는 완화될 수 있는 피부 손상 또는 피부 질환으로 정의되는데, 예컨대, 피부발적(erythema), 광과민, 일광화상, 피부부종, 피부세포 이상과다증식, 일광염증, 기미, 주근깨, 국소(피부) 면역저하, 피부 광노화, 피부건조, 일광탄력섬유증(진피탄력섬유의 변성) 등이 이러한 피부 손상 또는 피부 질환에 속한다(이은희 등, 한국식품위생안전성학회지, 2001, 16: 117-124; Elmets et al, J Am Acad Dermatol, 2001, 44: 425-432; Matsumura와 Ananthaswamy, Toxicol Appl Pharmacol., 2004, 195: 298-308).
달리 정의하자면 본 발명의 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 조성물만으로도 예방, 치유 또는 완화가 가능한 피부 손상 또는 피부 질환으로서 정의될 수 있다.
또한 "간접적으로 관련된 피부 손상 또는 피부 질환"의 의미는 그러한 질환을 예방, 치유 또는 완화시키기 위하여 일광화상 세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 또는 멜라닌 세포의 증가의 억제가 선택적으로 필요한 피부 손상 또는 피부 질환으로서 정의되며, 예컨대, 흑점증, 피부주름, 전신 면역저하, 피부 모세혈관 확장증, 흑색종, 기저세포암, 편평세포암, 백내장 등이 이러한 피부 질환에 속한다(이은희 등, 한국식품위생안전성학회지, 2001, 16: 117-124; Elmets et al, J Am Acad Dermatol, 2001, 44: 425-432; Matsumura와 Ananthaswamy, Toxicol Appl Pharmacol., 2004, 195: 298-308).
마찬가지로 달리 정의하자면 본 발명의 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 조성물이 필요에 따라 다른 약물 등과 함께 투여됨으로써 예방, 치유 또는 완화가 가능한 피부 손상 또는 피부 질환으로서 정의될 수 있다.
한편, 상기 일광화상 세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 또는 멜라닌 세포의 증가와 직·간접적으로 관련된 피부 손상 또는 피부 질환은 그것의 원인을 불문하는 것으로 이해되어야 한다.
따라서 본 발명의 실시예가 실험 동물에 자외선을 조사하여 일광화상 세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 또는 멜라닌 세포의 증가를 유도하고 죽력이 이러한 현상들을 회복시키거나 완화시키는가를 확인한 것이지만, 자외선이 아니고 예컨대 화학 물질(예컨대, 합성세제, 소독약, 염색약, 화학비료, 살충제, 강산, 강알칼리 등: Al-Bagdadi et al, Anat Histol Embryol, 1988, 17: 349; Bilbrey et al, J Am Anim Hosp Assoc, 1989, 25: 31; Mulcahy와 Rand, Aust Vet Pract, 1996, 26: 194)에 의하여 일광화상 세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 또는 멜라닌 세포의 증가되고, 또 그것들에 의하여 어떠한 피부 손상 또는 피부 질환이 발생하더라도 본 발명의 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 그러한 피부 손상 또는 피부 질환에도 자외선에 의한 피부 손상 또는 피부 질환의 경우와 마찬 가지로 여전히 유효할 것임이 분명하다.
그러므로 본 발명의 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 있어서 피부 손상 또는 피부 질환은 일광화상 세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 또는 멜라닌 세포의 증가가 매개되는 피부 손상 또는 피부 질환인 한, 그러한 피부 손상 또는 피부 질환이 유발되는 원인을 불문하는 것으로 이해되어야 한다. 그럼에도 바람직하게는 상기 피부 손상 또는 피부 질환은 자외선에 의한 피부 손상 또는 피부 질환이다.
한편 본 발명은 구체적인 양태에 있어서 죽력을 유효 성분으로 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 임상 투여 시에 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해 투여될 수 있다. 또 본 발명의 약제학적 조성물은 여러 가지 제형으로 제제화할 수 있는데, 제제화할 경우에는 통상적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제제화할 수 있다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 죽력에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등을 들 수 있는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 1일 투여량은 통상 0.1 ~ 20 ml/kg 체중 범위이고, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 본 발명의 약제학적 조성물의 실제 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별 및 체중, 및 환자의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어지는 것이므로 상기 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 아니된다.
본 발명은 다른 구체적인 양태에 있어, 죽력을 유효성분으로 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 식품 조성물은 껌류, 비타민 복합제, 건강 보조식품, 특수 영양 보충용 식품, 기능성 음료 등으로 제조될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 유효 성분으로서 죽력이 포함되는 것이 이외에, 포도당, 과당과 같은 단당류, 말토스, 슈크로스와 같은 이당류, 또는 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 다당류가 첨가될 수 있으며, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알콜이 또한 첨가될 수 있으며, 타우린, 스테비아 추출물과 같은 감미제 등이 또한 첨가될 수 있으며, 여타의 식품 첨가물이 첨가되어도 무방하다.
한편, 하기 <실험예>에서 확인되는 바와 같이 생쥐를 이용한 죽력의 급성 독 성 실험에서 본 발명의 조성물에서 유효 성분으로 포함되는 죽력은 최소 치사량(LD10)이 19.05ml/kg이상이고 반수 치사량(LD50)이 21.96ml/kg 이상인 안전한 물질로 나타났다.
이하 본 발명을 참고예 및 실시예를 참조하여 설명한다. 그러나 이러한 참고예나 실시예가 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.
<참고예> 전통적인 방식에 의한 죽력의 제조
우선 대나무를 세절한 후, 이를 옹기에 촘촘히 넣고, 옹기 입구를 천으로 막았다. 또 다른 옹기를 그 옹기의 입구가 땅 속에 들어갈 정도의 깊이로 땅에 묻었다. 세절된 대나무를 넣은 옹기를 뒤짚어서 양 쪽 옹기의 입구가 맞닿도록 땅속에 파 묻은 다른 옹기와 입구를 맞춘 후, 황토를 물에 개어서 땅 위로 나온 옹기를 완전히 봉하였다. 마지막으로 옹기를 감싼 황토 주위에 왕겨를 다량 쌓아서 이 왕겨에 불을 지피고 약 하루 반나절 정도 타도록 하였다. 다음 열을 받은 대나무로부터 흘러내린 액체가 땅에 파묻은 옹기로 유입되게 되는데 이것이 죽력이며, 하기 실시예에서는 이렇게 얻어진 죽력을 사용하였다.
<실시예> 죽력이 가지는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과
Ⅰ. 실험 방법
죽력이 가지는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 확인하기 위하여 다음과 같은 방법으로 실험을 수행하였다.
1. 표피 일광화상 세포 발생에 대한 효과 검색 실험
(1) 실험동물
7-8주령의 체중 25~30 g의 성숙된 무모 마우스 (SKH1-hr)를 사용하였고, 각 실험에서 6마리를 하나의 실험군으로 사용하였다.
(2) 자외선조사
자외선 B의 광원으로 Sankyo denki UV-B lamp GL20SE를 이용하여 제작한 UV-B 조사기를 사용하였다. 대조군을 제외한 실험군 마우스 양쪽 귀 등쪽면에 자외선 B를 0.5 mW/sec의 용량으로 200 mJ/cm2을 1회 조사하였다.
(3) 시료제조 및 투여
예비검사 결과를 근거로 하여 죽력을 대략적인 최대허용용량의 50% 및 10%에 해당되는 용량 (체중 kg 당 1.2 mg 및 0.24 mg)을 1회 주사 용량으로 설정하였다. 시료의 투여는 자외선조사 전 36시간, 12시간 및 자외선조사 후 30분에 3회 복강내 주사하였다.
(4) 부검 및 현미경적 검사
자외선 조사 후 24시간에 부검을 실시하고 등쪽 피부를 제거하고 현미경 표본제작 시 정확한 횡단면을 얻기 위하여 조직을 두터운 종이에 부착하고 10% 중성포르말린액에 고정하였다. 고정된 조직은 근육과 지방을 제거하고 적당한 두께로 자른 후 마리당 3-4개씩 원통모양으로 감아 통상적인 방법에 따라 파라핀 포매, 절편을 제작하여 헤마톡실린(hematoxilin) 및 에오신(eosin) 염색을 실시하였다. 현미경 400배 배율로 20 시야에서 나타나는 일광화상세포의 수를 측정하고 cm2당 수로 환산하였다.
2. 표피 멜라닌 세포 변화에 대한 효과 검색 실험
(1) 실험동물
8-9주령의 체중 25~30 g의 성숙된 C57BL/6 웅성 마우스를 사용하였고, 각 실험에서 6마리를 하나의 실험군으로 사용하였다.
(2) 자외선조사
자외선 B의 광원으로 Sankyo denki UV-B lamp GL20SE를 이용하여 제작한 UV-B 조사기를 사용하였다. 대조군을 제외한 실험군 마우스 양쪽 귀 등쪽 면에 매일 오전 자외선 B를 80 mJ/cm2 (0.5 mW/sec)씩 7일 동안 조사하였다.
(3) 시료제조 및 투여
예비검사 결과를 근거로 하여 죽력을 대략적인 최대허용용량의 50% 및 10%에 해당되는 용량 (체중 kg 당 1.2 mg 및 0.24 mg)을 1회 주사 용량으로 설정하였다. 시료의 투여는 자외선조사 전 36시간, 12시간 및 자외선조사 후 30분 및 24시간에 4회 복강내 주사하였다.
(4) 부검 및 현미경적 검사
자외선 조사 24시간 후에 마우스의 양쪽 귀를 생검하여 배부와 등부로 귀 피부를 분리한 후 배부의 진피쪽이 테잎의 접착면을 향하도록 투명 테잎에 표피를 부착시켰다. 37℃ EDTA 완충 용액에서 2시간 동안 담궜다가 꺼내어 포셉으로 진피부분을 조심스럽게 제거하여 표피를 분리했다. 조직을 생리식염수로 세척한 다음 4℃ 카코딜레이트 완충 포름알데히드 용액(cacodylate buffered formaldehyde solution)에 20분 동안 고정시켰다. 0.1% L-DOPA (levodihydroxyphenylalanine) 용액에 37℃에서 1시간 그리고 용액을 바꾸어 2시간을 배양한 후 glycerol로 봉입하여 광학현미경으로 검경하였다. 현미경 100배 시야에서 눈금이 있는 렌즈로 2 시야를 측정하고 mm2 당 세포수로 환산하였다.
3. 수지상 세포(랑게르한스 세포) 변화에 대한 효과 검색 실험
(1) 실험동물
7-8주령의 체중 25~30 g의 성숙된 무모 마우스를 사용하였고, 각 실험에서 6마리를 하나의 실험군으로 사용하였다.
(2) 자외선조사
자외선 B의 광원으로 Sankyo denki UV-B lamp GL20SE를 이용하여 제작한 UV-B 조사기를 사용하였다. 대조군을 제외한 실험군 마우스 양쪽 귀 등쪽면에 자외선 B를 200 mJ/cm2 조사하였다.
(3) 시료제조 및 투여
예비검사 결과를 근거로 하여 죽력을 대략적인 최대허용용량의 50% 및 10%에 해당되는 용량 (체중 kg 당 1.2 mg 및 0.24 mg)을 1회 주사 용량으로 설정하였다. 시료의 투여는 자외선조사 전 36시간, 12시간 및 자외선조사 후 30분 및 24시간에 4회 복강내 주사하였다.
(4) 부검 및 현미경적 검사
자외선 조사 24시간 후에 마우스의 양쪽 귀를 생검하여 배부와 등부로 귀 피부를 분리한 후 배부의 진피쪽이 테잎의 접착면을 향하도록 투명 테잎에 표피를 부착시켰다. 37℃ EDTA 완충 용액에서 2시간 동안 담궜다가 꺼내어 포셉으로 진피부분을 조심스럽게 제거하여 표피를 분리했다. 조직을 생리식염수로 헹군 다음 4℃ 카코딜레이트 포름 완충 용액(cacodylate buffered formaldehyde solution)에 20분동안 고정시켰다. 고정 후 세척한 표피층을 5% 마그네슘 설페이트(magnesium sulfate) 및 2% 질산 납(lead nitrate)가 포함된 ATPase 용액에 37 ℃ water bath에서 2시간 반응하고 5% 암모늄 설파이드(amomnium sulfide) 용액에 실온에서 3분간 발색시켜 글리세롤에 봉입하여 현미경으로 검경하였다. 현미경 400배 시야에서 눈금이 있는 렌즈로 10시야를 측정하고 mm2 당 세포수로 환산하였다.
4. 표피 멜라닌세포를 지표로 한 미백효과 검색 실험
(1) 실험동물
8-9주령의 체중 25~30 g의 성숙된 C57BL/6 웅성 마우스를 사용하였고, 각 실험에서 6마리를 하나의 실험군으로 사용하였다.
(2) 자외선조사
자외선 B의 광원으로 Sankyo denki UV-B lamp GL20SE를 이용하여 제작한 UV-B 조사기를 사용하였다. 대조군을 제외한 실험군 마우스 양쪽 귀 등쪽면에 매일 오전 자외선 B를 80 mJ/cm2(0.5 mW/sec)씩 7일 동안 조사하였다.
(3) 시료제조 및 투여
예비검사 결과를 근거로 하여 죽력을 대략적인 최대허용용량의 50% 및 10%에 해당되는 용량 (체중 kg 당 1.2 mg 및 0.24 mg)을 1회 주사 용량으로 설정하였다. 시료의 투여는 자외선조사 완료 후 30분, 24시간 및 48시간에 3회 복강내 주사하였다.
(4) 부검 및 현미경적 검사
시료투여 후 3주에 마우스의 양쪽 귀를 생검하여 배부와 등부로 귀 피부를 분리한 후 배부의 진피쪽이 테잎의 접착면을 향하도록 투명 테잎에 표피를 부착시켰다. 37℃ EDTA 완충 용액에서 2시간 동안 담궜다가 꺼내어 포셉으로 진피부분을 조심스럽게 제거하여 표피를 분리해냈다. 조직을 생리식염수로 세척한 다음 4℃ 카코딜레이트 포름알데히드 완충 용액(cacodylate buffered formaldehyde solution)에 20분 동안 고정시켰다. 0.1% L-DOPA(levodihydroxyphenylalanine)용액에 37℃에서 1시간 그리고 용액을 바꾸어 2시간을 배양한 후 글리세롤로 봉입하여 광학현미경으로 검경하였다. 현미경 100배 시야에서 눈금이 있는 렌즈로 2시야를 측정하고 mm2 당 세포수로 환산하였다.
Ⅱ. 실험 결과
1. 표피 일광화상 세포 발생에 대한 효과 검색 결과(도 1 및 도 2 참조)
자외선 조사에 따라 일광화상세포가 급격히 증가되었다(도 1 참조). 자외선 조사 전 및 조사 후 연속 주사군(P<0.05)에서 유의성있는 감소효과가 있었으며, 적용 용량에 따른 차이는 자외선 단독조사군에 비하여 최대허용용량의 50% 투여군에 서 39.45%, 10% 투여군에서 23.77%의 효과 차이를 나타냈다(도 2 참조).
2. 표피 멜라닌 세포 변화에 대한 효과 검색 결과(도 3 및 도 4 참조)
자외선 조사에 따라 많은 가지돌기를 가진 멜라닌세포가 증가하였다(도 3 참조). 자외선 조사 전 및 조사 후 연속 복강내 주사군(P<0.05)에서 유의성 있는 감소 효과가 있었으나 적용 용량에 따른 차이는 없었다(도 4 참조). 죽력 투여군에서는 세포의 가지돌기 형성도 미약하였다.
3. 표피 수지상 세포(랑게르한스 세포) 변화에 대한 효과 검색 결과 (도 5 및 도 6 참조)
자외선 조사에 따라 수지상세포의 수는 감소되었고, 가지 돌기 및 과립의 소실도 관찰되었으며 죽력 투여군에서는 가지돌기 및 과립이 상당부분 유지되었다(도 5 참조). 자외선 조사 전 및 조사 후 연속 복강내 주사군(P<0.01)에서 유의성있는 세포 감소 억제효과가 있었으나 투여용량에 따른 차이는 인정되지 않았다(도 6 참조).
4. 표피 멜라닌 세포를 지표로 한 미백효과 검색 결과(도 7 참조)
7일 동안의 자외선 조사 후 3주에 표피 멜라닌 세포는 mm2당 211개로 증가하였으며, 죽력투여에 따라 평균치기준으로 최대허용용량의 50% 투여군에서 약 8%, 최대허용용량의 10% 투여군에서 약 2%의 감소효과를 나타내었다.
<실험예> 급성 독성 실험
Ⅰ. 실험 방법
4주령의 특정병원체 부재 Sprague-Dawley 랫드(평균체중±20% 이내)를 암수 5 마리씩으로 구성된 4개의 군으로 나누어 그 중 3개의 실험군의 랫드들에게 상기 <참고예>에서 얻어진 죽력을 각각 5, 10, 20ml/kg의 용량으로 멸륜 증류수에 희석시켜 1회 경구투여용 존데와 주사기를 경구투여하고, 대조군의 랫드들에는 동일양의 멸균 증류수를 실험군과 동일한 방법으로 경구투여하였다. 투여 후 14일 동안 생쥐의 일반 증상, 체중 변화를 관찰함과 함께 부검에 의한 장기 검사를 실시하였다.
Ⅱ. 실험 결과
죽력정제수를 1회 경구투여한 후 14일간 사망동물을 관찰한 결과, 부형제 대조군과 5 및 10 ml/kg 투여군의 암수동물에서는 사망동물이 관찰되지 않았다. 반면, 20 ml/kg 투여군의 암수동물에서는 투여 후 1일째에 암수 각각 1마리가 사망하였다. 이러한 결과로부터 사망률을 산출하였는데(probit법), 최소 치사량(LD10)은 19.05ml/kg이고 반수 치사량은(LD50)은 추출물 21.96ml/kg으로 산출되었다.
한편, 일반증상을 관찰한 결과, 대조군과 5 ml/kg 투여군의 암수동물에서는 시험물질의 투여에 기인된 어떠한 일반증상도 관찰되지 않았다. 반면, 10 및 20 ml/kg 투여군의 암수동물에서는 투여 후 1시간째부터 투여 후 1일째까지 운동성감소와 운동실조, 유루, 호흡곤란, 복와위, 기면상태, 피부창백, 입모, 적색유루 및 웅크림 소견이 관찰되었으며, 이들 소견의 발생빈도 및 정도는 용량의존적으로 증가하였다.
시험기간 중 체중 측정 결과, 20 ml/kg 투여군의 암수동물에서 투여 후 1일째의 체중이 투여 전 체중에 비해 감소하였으며, 특히 수컷의 체중은 대조군의 체중에 비해 통계학적으로 유의성있게 감소하였다. 그러나 투여 후 3일째부터는 암수동물 모두 각 시험군간에 체중의 차이는 인정되지 않았다.
시험기간 중 사망동물과 시험물질 투여 후 14일째의 생존 동물을 부검하여 육안적 부검 소견을 관찰한 결과, 10 ml/kg 투여군의 암컷 1례에서 폐의 점상출혈(petechia)과 장의 가스충만이 관찰되었으며, 그 외의 모든 암수동물에서는 어떠한 이상소견도 관찰되지 않았다.
<제제예> 약제학적 조성물과 식품 조성물의 제제예
<제제예 1> 캡슐제의 제조
죽력 20ml, 옥수수 전분 100㎎, 유당 100㎎, 스테아린산 마그네슘2㎎를 완전히 혼합한 후 통상의 캡슐제의 제조 방법에 따라서 경질 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<제제예 2> 주사제의 제조
죽력 20ml 적량의 주사용 증류수와 적량의 pH 조절제를 사용하여 통상의 주사제의 제조 방법에 따라 죽력을 주사용 증류수에 용해하고 pH를 약 7.5로 조절한 다음 전체를 주사용 증류수로 2㎖ 용량의 앰플에 충진하고 멸균시켜서 주사제를 제조하였다.
<제제예 3> 건강 음료의 제조
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재 료와 죽력 20ml을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.
전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면, 죽력을 유효 성분으로 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물이 제공된다.
본 발명의 조성물에 유효 성분으로 포함되는 죽력은 일광화상세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 멜라닌 세포의 증가를 증가시키는 효과를 지닌다.
이것은 본 발명의 조성물이 일광화상세포의 증가, 랑게르한스 세포의 감소, 멜라닌 세포의 증가와 관련된 피부 손상 또는 피부 질환에 유용하게 사용될 수 있음을 보여주는 것이라 할 수 있다.
본 발명의 조성물은 약제학적 조성물이나 식품 조성물로 응용되어 사용되어 질 수 있다.

Claims (12)

  1. 죽력을 유효 성분으로 포함하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 피부 손상 또는 피부 질환은 일광화상 세포의 증가와 직·간접적으로 관련되어 있는 피부 손상 또는 피부 질환인 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 피부 손상 또는 피부 질환은 일광화상 세포의 증가와 직·간접적으로 관련되어 있는 피부 손상 또는 피부 질환이고, 그 피부 손상 또는 피부 질환은 피부발적(erythema), 광과민, 일광화상, 피부부종, 일광염증, 피부 광노화, 피부주름, 및 피부 모세혈관 확장증으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 피부 손상 또는 피부 질환은 랑게르한스 세포의 감소와 직·간접적으로 관련되어 있는 피부 손상 또는 피부 질환인 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피 부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 피부 손상 또는 피부 질환은 랑게르한스 세포의 감소와 직·간접적으로 관련되어 있는 피부 손상 또는 피부 질환이고, 그 피부 손상 또는 피부 질환은 국소(피부) 및 전신 면역저하, 흑색종, 기저세포암, 및 편평세포암으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 피부 손상 또는 피부 질환은 멜라닌 세포의 증가와 직·간접적으로 관련되어 있는 피부 손상 또는 피부 질환인 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 피부 손상 또는 피부 질환은 멜라닌 세포의 증가와 직·간접적으로 관련되어 있는 피부 손상 또는 피부 질환이고, 그 피부 손상 또는 피부 질환은 과색소침착증인 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 피부 손상 또는 피부 질환은 화학물질 또는 자외선에 의한 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 피부 손상 또는 피부 질환은 자외선에 의한 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  12. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물이고, 그 식품 조성물은 기능성 음료인 것을 특징으로 하는 피부 손상 또는 피부 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
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