KR20030096401A

KR20030096401A - 바소펩티다제 억제제로서 ｎ-말단 2-티오아실기를 갖는디펩티드 유도체

Info

Publication number: KR20030096401A
Application number: KR10-2003-7014849A
Authority: KR
Inventors: 신시아 앤 핑크
Original assignee: 노파르티스 아게
Priority date: 2001-05-15
Filing date: 2002-05-14
Publication date: 2003-12-24
Also published as: BR0209652A; US6777443B2; AU2002314067B2; SK14032003A3; JP4390458B2; KR100908152B1; HUP0304084A3; WO2002092622A3; EP1392720A2; WO2002092622A8; US20040235754A1; EP2239268A1; MXPA03010403A; MY127495A; CZ20033077A3; JP2005504011A; TWI295996B; PE20030042A1; PL366786A1; US20020183260A1

Abstract

본 발명은 안지오텐신 전환 효소 및 중성 엔도펩티다제의 이중 억제제로서 유용하며 엔도텔린 전환 효소의 억제제인 하기 화학식 I의 화합물에 관한 것이다.

<화학식 I>

상기 식에서, R, R₁, COOR₂, R₃-R₇, alk, 및 X는 상기 정의한 의미를 갖는다. 바람직한 실시태양에서, R 및 R₅는 수소를 나타내고; R₁은 벤질을 나타내고; R₃는 수소, 아세틸 또는 메톡시아세틸을 나타내고, R₄는 이소프로필 또는 tert-부틸을 나타내고; R₆및 R₇은 메틸을 나타내고; X는 -O-를 나타내고; alk는 메틸렌을 나타내고; COOR₂는 카르복실 또는 에톡시카르보닐을 나타낸다.

Description

바소펩티다제 억제제로서 Ｎ-말단 2-티오아실기를 갖는 디펩티드 유도체{DIPEPTIDE DERIVATIVES HAVING A N-TERMINAL 2-THIOACYL GROUP AS VASOPEPTIDASE INHIBITORS}

발명의 요약

본 발명은 안지오텐신 전환 효소 (ACE) 및 중성 엔도펩티다제 (NEP, EC 3.4.24.11) 모두의 이중 억제제로서 유용한 하기 신규 바소펩티다제 억제제에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 ACE 및 NEP 억제에 반응하는 질환, 특히 심혈관계 장애, 예를 들면 고혈압, 고립성 수축기 고혈압, 신부전 (부종 및 염 저류 포함), 폐 부종, 좌 심실 비대, 심부전 (울혈성 심부전 포함) 및 죽상경화증의 치료 및(또는) 예방에 특히 유용하다. 본 발명의 화합물은 또한 포유루에서 상승된 콜레스테롤 혈장 수준을 저하시키는데 유용하다. 또한, 본 발명의 화합물은 엔도텔린 전환 효소 (ECE)를 억제하고 ECE 억제에 반응하는 질환의 치료 및(또는) 예방에 유용하다.

중성 엔도펩티다제의 억제로 인해, 본 발명의 화합물은 또한 통증, 우울증, 특정 정신 장애, 및 인지 장애의 치료에 유용할 수 있다. 다른 가능한 적응증은 협심증, 생리전 증후군, 메니어씨병, 고알도스테론혈증, 고칼슘뇨증, 복수, 녹내장, 천식 및 위장관계 장애, 예를 들면 설사, 과민성 대장 증후군 및 위산과다증의 치료를 포함한다.

ECE의 억제로 인해, 본 발명의 화합물은 또한 엔도텔린 의존성 질환 및 질병, 예를 들면 대뇌 허혈 (졸중), 지주막하출혈, 외상성 뇌 손상, 대뇌 혈관경련, 동맥 비후, 재협착, 레이노병, 심근 경색, 비만; 또한 전립선 비대증, 편두통, 당뇨병 (당뇨병성 신병증), 자간전증, 녹내장, 및 대동맥 또는 실질 장기 이식에서와 같은 이식 거부; 또한 발기 부전증의 치료 및(또는) 예방에 유용할 수 있다.

본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 R₃가 수소인 이 화합물로부터 유도된 디설파이드 유도체, 및 이들의 제약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다.

상기 식에서,

R은 수소, 저급 알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴-저급 알킬 또는 시클로알킬-저급 알킬을 나타내고;

R₁은 저급 알킬, 시클로알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴, 또는 바이아릴을 나타내거나; 또는 R₁은 (시클로알킬, 카르보시클릭 아릴, 헤테로시클릭 아릴 또는 바이아릴)-저급 알킬을 나타내고;

alk는 저급 알킬렌을 나타내고;

R₃는 수소 또는 아실을 나타내고;

R₄는 수소, 임의 치환된 저급 알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴,(카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬-저급 알킬, 바이아릴, 바이아릴-저급 알킬, 옥사시클로알킬, 티아시클로알킬, 아자시클로알킬, 또는 (옥사시클로알킬, 티아시클로알킬 또는 아자시클로알킬)-저급 알킬을 나타내고;

R₅는 수소 또는 저급 알킬을 나타내거나; 또는

R₄및 R₅는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬리덴, 벤조-융합된 시클로알킬리덴; 또는 각각 저급 알킬 또는 아릴-저급 알킬에 의해 임의로 치환되는 5- 또는 6-원 (옥사시클로알킬리덴, 티아시클로알킬리덴 또는 아자시클로알킬리덴)을 나타내고;

R₆은 저급 알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴,(카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬-저급 알킬, 바이아릴 또는 바이아릴-저급 알킬을 나타내고;

R₇은 저급 알킬, (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬, 시클로알킬-저급 알킬 또는 바이아릴-저급 알킬을 나타내거나; 또는

R₆및 R₇은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 저급 알킬 또는 아릴-저급 알킬에 의해 치환될 수 있거나 포화 또는 불포화 카르보시클릭 5- 내지 7-원환에 융합될 수 있는 3- 내지 10-원 시클로알킬리덴; 또는 각각 저급 알킬 또는 아릴-저급 알킬에 의해 임의로 치환되는 5- 또는 6-원 (옥사시클로알킬리덴, 티아시클로알킬리덴 또는 아자시클로알킬리덴); 또는 2,2-노르보닐리덴을 나타내고;

X는 -O-, -S(O)_n-, -NHSO₂-, 또는 -NHCO-를 나타내고;

n은 0, 1 또는 2이고;

COOR₂는 카르복실 또는 제약학적으로 허용가능한 에스테르의 형태로 유도체화된 카르복실을 나타낸다.

본 발명은 또한 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물; 상기 화합물의 제조 방법; 중간체; 및 상기 화합물을 ACE 및 NEP 억제에 반응하는 장애의 치료가 필요한 포유류에게 상기 화합물을 투여함으로써 포유류에서 ACE 및 NEP 억제에 반응하는 장애를 치료하는 방법에 관한 것이다.

본 발명에 포함되는 것은 또한 유리 카르복실, 설프히드릴 또는 히드록실기를 갖는 본 발명의 화합물의 모든 프로드럭 유도체이고, 상기 프로드럭 유도체는 가용매분해에 의해 또는 생리학적 조건 하에서 유리 카르복실, 설프히드릴 및(또는) 히드록시 화합물로 전환될 수 있다. 프로드럭 유도체는 예를 들면 유리 카르복실산의 에스테르 및 티올, 알콜 또는 페놀의 S-아실 및 O-아실 유도체이다 (여기서 아실은 본원에 정의된 의미를 갖는다).

제약학적으로 허용가능한 에스테르는 바람직하게는 가용매분해에 의해 또는 생리학적 조건 하에서 화학식 I의 유리 카르복실산으로 전환될 수 있는 프로드럭에스테르 유도체이다.

제약학적으로 허용가능한 프로드럭 에스테르는 바람직하게는, 예를 들면 저급 알킬 에스테르, 아릴-저급 알킬 에스테르, 피발로일옥시메틸 에스테르와 같은 α-(저급 알카노일옥시)-저급 알킬 에스테르, 및 α-(저급 알콕시카르보닐, 모르폴리노카르보닐, 피페리디노카르보닐, 피롤리디노카르보닐 또는 디-저급 알킬아미노카르보닐)-저급 알킬 에스테르이다.

제약학적으로 허용가능한 염은 본 발명의 모든 산성 화합물, 예를 들면 COOR₂가 카르복실을 나타내는 화합물에 대해 제약학적으로 허용가능한 염기로부터 유도된 염이다. 예를 들면, 알칼리 금속 염 (예를 들면, 나트륨, 칼륨 염), 알칼리토 금속 염 (예를 들면, 마그네슘, 칼슘 염), 아민 염 (예를 들면, 트로메타민 염)이다.

화학식 I의 화합물은 치환체의 성질에 따라 2 개 이상의 비대칭 탄소 원자를 갖는다. 생성된 부분입체이성질체 및 광학적 대칭체는 본 발명의 범위에 포함된다. 바람직한 배위는 하기 화학식 Ia에 나타낸다.

상기 식에서, 치환체 -alk-X-R₁및 R₄를 갖는 비대칭 탄소는 통상적으로 S-배위를 갖는다.

바람직한 것은 R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 저급 알킬, C₅- 또는 C₆-시클로알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴, 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; alk가 저급 알킬렌을 나타내고; X가 -O- 또는 -S(O)_n(여기서 n은 0 또는 2를 나타냄)을 나타내고; R₃가 수소 또는 아실을 나타내고; R₄가 임의로 치환된 저급 알킬, 옥사시클로알킬, 옥사시클로알킬-저급 알킬, 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; R₅가 수소를 나타내거나; 또는 R₄및 R₅가 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 C₅또는 C₆-시클로알킬리덴을 나타내고; R₆및 R₇이 저급 알킬을 나타내거나; 또는 R₆및 R₇이 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 5- 또는 6-원 시클로알킬리덴을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 제약학적으로 허용가능한 에스테르의 형태로 유도체화된 카르복실을 나타내는 화학식 I 및 Ia의 화합물; R₃가 수소인 상기 화합물로부터 유도된 디설파이드 유도체 및 이들의 제약학적으로 허용가능한 염이다.

더욱 바람직한 것은 R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; R₃이 수소 또는 임의로 치환된 저급 알카노일을 나타내고; R₄가 저급 알킬, 시클로알킬, 테트라히드로피라닐 또는 C₁-C₄-저급 알콕시-저급 알킬을 나타내고; R₆및R₇이 모두 C₁-C₄-알킬을 나타내고 서로 동일하며; X는 -O- 또는 -S-를 나타내고; alk는 메틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실, 저급 알콕시카르보닐, (디-저급 알킬아미노카르보닐)-저급 알콕시카르보닐 또는 (모르폴리노카르보닐, 피페리디노카르보닐 또는 피롤리디노카르보닐)-저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화학식 I 및 Ia의 상기 화합물; 및 이들의 제약학적으로 허용가능한 염이다.

특히 바람직한 것은 R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 카르보시클릭 아릴 또는 카르보시클릭 아릴-저급 알킬을 나타내고 (여기서, 카르보시클릭 아릴은 페닐 또는 1 또는 2개의 히드록실, 저급 알카노일옥시, 저급 알킬, 저급 알콕시, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시 또는 할로에 의해 치환된 페닐을 나타냄); R₃가 수소, 저급 알카노일 또는 저급 알콕시에 의해 치환된 저급 알카노일을 나타내고; R₄가 저급 알킬, 4-테트라히드로피라닐 또는 C₁-C₄-저급 알콕시-C₁-C₄-저급 알킬을 나타내고; R₆및 R₇은 메틸을 나타내고; X는 -O-를 나타내고; alk는 메틸렌 또는 에틸렌을 나타내고; COOR₂는 카르복실 또는 저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화학식 I 또는 Ia의 상기 화합물; 및 그의 제약학적으로 허용가능한 염이다. 그의 실시태양은 R₃가 수소 또는 저급 알카노일을 나타내는 화합물에 관계된다.

더욱 바람직한 것은 R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 페닐, 플루오로페닐, 벤질 또는 플루오로벤질을 나타내고; R₃이 수소, 저급 알카노일 또는 저급 알콕시에의해 치환된 저급 알카노일을 나타내고; R₄가 이소프로필, tert-부틸, 1-메톡시에틸 또는 4-테트라히드로피라닐을 나타내고; R₆및 R₇이 메틸을 나타내고; X가 -O-를 나타내고; alk가 메틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화학식 I 또는 화학식 Ia의 상기 화합물; 및 그의 제약학적으로 허용가능한 염이다. 그의 실시태양은 R₃가 수소 또는 저급 알카노일을 나타내는 화합물에 관계된다.

바람직한 특정 실시태양은 R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 벤질을 나타내고; R₃이 수소, 아세틸 또는 메톡시아세틸을 나타내고; R₄가 이소프로필 또는 tert-부틸을 나타내고; R₆및 R₇이 메틸을 나타내고; X가 -O-를 나타내고; alk가 메틸렌을 나타내고; COOR₂이 카르복실 또는 에톡시카르보닐을 나타내는 화학식 I 또는 Ia의 화합물과 관계된다.

본원에 사용된 정의 자체 또는 그의 조합은 달리 언급하지 않는 한 본 발명의 범위 내에서 하기의 의미를 갖는다.

아릴은 모노시클릭 또는 바이시클릭의 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴을 나타낸다.

모노시클릭 카르보시클릭 아릴은 임의로 치환된 페닐을 나타내고, 바람직하게는 페닐 또는 1 내지 3 개의 치환체에 의해 치환된 페닐 (상기 치환체는 유리하게는 저급 알킬, 히드록시, 저급 알콕시, 아실옥시, 할로겐, 시아노, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 아미노, 저급 알카노일아미노, 저급 알킬-(티오, 설피닐 또는 설포닐), 저급 알콕시카르보닐, 모노- 또는 디-저급 알킬카르바모일, 또는 모노- 또는 디-저급 알킬아미노임); 또는 저급 알킬렌디옥시에 의해 치환된 페닐을 나타낸다.

바이시클릭 카르보시클릭 아릴은 1- 또는 2-나프틸 또는 바람직하게는 저급 알킬, 저급 알콕시 또는 할로겐에 의해 치환된 1- 또는 2-나프틸을 나타낸다.

모노시클릭 헤테로시클릭 아릴은 바람직하게는 임의로 치환된 티아졸릴, 피리미딜, 트리아졸릴, 티에닐, 푸라닐 또는 피리딜을 나타낸다.

임의로 치환된 푸라닐은 2- 또는 3-푸라닐 또는 바람직하게는 저급 알킬로 치환된 2- 또는 3-푸라닐을 나타낸다.

임의로 치환된 피리딜은 2-, 3- 또는 4-피리딜 또는 바람직하게는 저급 알킬, 할로겐 또는 시아노에 의해 치환된 2-, 3- 또는 4-피리딜을 나타낸다.

임의로 치환된 티에닐은 2- 또는 3-티에닐 또는 바람직하게는 저급 알킬로 치환된 2- 또는 3-티에닐을 나타낸다.

임의로 치환된 피리미딜은 예를 들면, 2-피리미딜 또는 저급 알킬로 치환된 2-피리미딜을 나타낸다.

임의로 치환된 티아졸릴은 예를 들면, 2-티아졸릴 또는 저급 알킬로 치환된 2-티아졸릴을 나타낸다.

임의로 치환된 트리아졸릴은 예를 들면, 1,2,4-트리아졸릴 또는 바람직하게는 저급 알킬로 치환된 1,2,4-트리아졸릴을 나타낸다.

바이시클릭 헤테로시클릭 아릴은 바람직하게는 히드록시, 저급 알킬, 저급 알콕시 또는 할로겐으로 임의로 치환된 인돌릴, 벤조티아졸릴, 퀴놀리닐 또는 이소퀴놀리닐을 나타내고, 유리하게는 3-인돌릴, 2-벤조티아졸릴 또는 2- 또는 4-퀴놀리닐이다.

아릴-저급 알킬에서 아릴은 페닐 또는 바람직하게는 1 또는 2 개의 저급 알킬, 저급 알콕시, 히드록시, 저급 알카노일옥시, 할로겐, 트리플루오로메틸, 시아노, 저급 알카노일아미노 또는 저급 알콕시카르보닐에 의해 치환된 페닐; 또한 임의로 치환된 나프틸이다.

아릴-저급 알킬은 유리하게는 벤질 또는 페닐 상에 1 또는 2 개의 저급 알킬, 저급 알콕시, 히드록시, 저급 알카노일옥시, 할로겐 또는 트리플루오로메틸로 임의로 치환된 1- 또는 2-페네틸이다.

"저급"이라는 용어는 본원에서 유기 라디칼 또는 화합물과 관련하여 각각 7 개 이하, 바람직하게는 4 개 이하, 유리하게는 1 또는 2 개의 탄소 원자로 정의한다.

임의로 치환된 저급 알킬은 저급 알킬 또는 예를 들면 할로, 히드록시, 저급 알콕시, 아미노, (모노- 또는 디-저급 알킬)아미노, 아실아미노, 1-저급 알킬-피페라지노, 모르폴리노, 피페리디노, 피롤리디노 등에 의해 치환된 저급 알킬을 의미한다.

저급 알킬렌은 바람직하게는 1 내지 4 개의 탄소 원자를 갖고 예를 들면 저급 알콕시, 예를 들면 -CH₂-, -CH(CH₃)-, -CH₂CH₂- 등에 의해 치환될 수 있는 직쇄 또는 분지쇄 탄소 사슬을 의미한다.

저급 알킬기는 바람직하게는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있는 1-4 개의 탄소 원자를 갖고, 예를 들면 에틸, 프로필, 부틸 또는 유리하게는 메틸을 나타낸다.

저급 알콕시기는 바람직하게는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있는 1-4 개의 탄소 원자를 갖고, 예를 들면 메톡시, 프로폭시, 이소프로폭시 또는 유리하게는 에톡시를 나타낸다.

시클로알킬은 바람직하게는 5- 내지 7-고리 탄소를 갖는 포화 시클릭 탄화수소 라디칼, 바람직하게는 시클로펜틸 또는 시클로헥실을 나타낸다.

옥사시클로알킬은 바람직하게는 5- 내지 7-원 옥사시클로알킬, 예를 들면 4-테트라히드로피라닐과 같은 테트라히드로피라닐을 나타낸다.

티아시클로알킬은 바람직하게는 5- 내지 7-원 티아시클로알킬, 예를 들면, 4-테트라히드로티오피라닐과 같은 테트라히드로티오피라닐을 나타낸다.

아자시클로알킬은 바람직하게는 5- 내지 7-원 아자시클로알킬, 예를 들면, 질소가 저급 알킬 또는 아릴-저급 알킬로 치환될 수 있는 피롤리디닐 또는 피페리디닐을 나타낸다.

시클로알킬-저급 알킬이라는 용어는 바람직하게는 (시클로펜틸 또는 시클로헥실)-메틸, 1- 또는 2-(시클로펜틸 또는 시클로헥실)에틸, 1-, 2- 또는 3-(시클로펜틸 또는 시클로헥실)프로필, 또는 1-, 2-, 3- 또는 4-(시클로펜틸 또는 시클로헥실)-부틸을 나타낸다. (옥사시클릴, 티아시클로알킬 또는 아자시클로알킬)-저급 알킬도 유사하다

저급 알콕시카르보닐기는 바람직하게는 알콕시 부분에 1 내지 4 개의 탄소 원자를 갖고, 예를 들면 메톡시카르보닐, 프로폭시카르보닐, 이소프로폭시카르보닐 또는 유리하게는 에톡시카르보닐을 나타낸다.

시클로알킬리덴은 3- 내지 10-원, 바람직하게는 5- 또는 6-원이고, 두 개의 부착된 기가 시클로알칸 고리의 동일한 탄소에 부착된 시클로알칸 연결기를 나타낸다.

5- 또는 6-원 옥사시클로알킬리덴은 테트라히드로푸란 또는 테트라히드로피란 연결기, 즉, 두 개의 부착된 기가 각 고리의 동일한 탄소 원자에, 예를 들면 3- 또는 4-위치에 부착된 테트라히드로푸라닐리덴 또는 테트라히드로피라닐리덴을 나타낸다.

5- 또는 6-원 티아시클로알킬리덴은 두 개의 부착된 기가 각 고리의 동일한 탄소 원자에, 예를 들면 3 또는 4-위치에 부착된 테트라히드로티오펜 또는 테트라히드로티오피란 연결기를 나타낸다.

5- 또는 6-원 아자시클로알킬리덴은 두 개의 부착된 기가 각 고리의 동일한 탄소 원자에, 예를 들면 3- 또는 4- 위치에 부착되고, 질소가 저급 알킬, 예를 들면, 메틸에 의해, 또는 아릴-저급 알킬, 예를 들면, 벤질에 의해 치환될 수 있는 피롤리딘 또는 피페리딘 연결기를 나타낸다.

벤조-융합된 시클로알킬리덴은 예를 들면, 1,1- 또는 2,2-테트라리닐리덴 또는 1,1- 또는 2,2-인다닐리덴을 나타낸다.

할로겐 (할로)은 바람직하게는 플루오로 또는 클로로를 나타내지만, 브로모 또는 요오도일 수도 있다.

아실은 카르복실산으로부터 유도되고, 바람직하게는 임의로 치환된 저급 알카노일, 카르보시클릭 아릴-저급 알카노일, 아로일, 저급 알콕시카르보닐 또는 아릴-저급 알콕시카르보닐, 유리하게는 임의로 치환된 저급 알카노일 또는 아로일을 나타낸다.

저급 알카노일은 바람직하게는 아세틸, 프로피오닐, 부티릴 또는 피발로일이다.

임의로 치환된 저급 알카노일은, 예를 들면, 저급 알카노일 또는 예를 들면 저급 알콕시카르보닐, 저급 알카노일옥시, 저급 알카노일티오, 저급 알콕시, 저급 알킬티오, 히드록시, 디-저급 알킬아미노, 저급 알카노일아미노, 모르폴리노, 피페리디노, 피롤리디노, 1-저급 알킬피페라지노, 아릴 또는 헤테로아릴로 치환된 저급 알카노일을 나타낸다.

아로일은 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아로일, 바람직하게는 모노시클릭 카르보시클릭 또는 모노시클릭 헤테로시클릭 아로일이다.

모노시클릭 카르보시클릭 아로일은 바람직하게는 벤조일 또는 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로겐 또는 트리플루오로메틸로 치환된 벤조일이다.

모노시클릭 헤테로시클릭 아로일은 바람직하게는 피리딜카르보닐 또는 티에닐카르보닐이다.

아실옥시는 바람직하게는 임의로 치환된 저급 알카노일옥시, 저급 알콕시카르보닐옥시, 모노시클릭 카르보시클릭 아로일옥시 또는 모노시클릭 헤테로시클릭 아로일옥시이다.

아릴-저급 알콕시카르보닐은 바람직하게는 모노시클릭 카르보시클릭-저급 알콕시카르보닐, 유리하게는 벤질옥시카르보닐이다.

바이아릴은 모노시클릭 카르보시클릭 또는 모노시클릭 헤테로시클릭 아릴로 치환된 모노카르보시클릭 아릴을 나타내고, 바람직하게는 바이페닐릴, 유리하게는 하나 또는 양쪽 모두의 벤젠 고리에 저급 알킬, 저급 알콕시, 할로겐 또는 트리플루오로메틸로 임의로 치환된 4-바이페닐릴을 나타낸다.

바이아릴-저급 알킬은 바람직하게는 4-바이페닐릴-저급 알킬, 유리하게는 4-바이페닐릴-메틸이다.

본 발명의 신규 화합물은 안지오텐신 I이 혈압상승 물질인 안지오텐신 II로 전환되는 것을 억제하는 ACE 억제제이고, 따라서 포유류에서 혈압을 하강시킨다. 또한, 본 발명의 화합물은 NEP의 억제 효과를 나타내므로 심방나트륨이뇨 인자 (ANF)의 심혈관 (예를 들면 이뇨 및 나트륨이뇨) 효과를 강화시킨다. 결합된 효과는 포유류의 심혈관계 장애, 특히 고혈압, 울혈성 심부전과 같은 심장 질환, 및 신부전의 치료에 유용하다. 상기 심혈관계 장애의 치료에 있어서 본 발명의 화합물의 추가적 유용한 효과는 ECE의 억제이다.

상기 성질은 유리하게는 포유류, 예를 들면, 마우스, 랫트, 개, 원숭이, 또는 분리된 장기, 조직 및 그의 제조물을 사용하여 시험관내 및 생체내 시험으로 증명할 수 있다. 상기 화합물은 용액, 예를 들면 바람직하게는 수용액의 형태로 시험관내로 투여될 수 있고, 소화기로, 비경구로, 유리하게는 경구 (p.o.) 또는 정맥내 (i.v.)로 예를 들면 현탁액 또는 수용액으로서 생체내로 투여될 수 있다. 시험관내 용량은 약 10^-6몰농도 및 10^-9몰농도 사이의 범위일 수 있다. 생체내 용량은 투여의 경로에 따라 약 0.01 내지 50 mg/kg, 유리하게는 약 0.1 내지 25 mg/kg의 범위일 수 있다.

시험관내 시험은 본 발명의 유리 카르복실산에 가장 적합하다. 시험 화합물을 디메틸 설폭시드, 에탄올 또는 0.25 M 중탄산나트륨 용액에 용해시키고, 용액을 원하는 농도로 완충액을 사용하여 희석시켰다.

본 발명의 화합물에 의한 ACE의 시험관내 억제는 문헌 [Biochem. Pharmacol., Vol. 20, p. 1637 (1971)]에 기재된 것과 유사한 방법에 의해 입증할 수 있다. ACE 분석을 위한 완충액은 300 mM NaCl, 100 mM KH₂PO₄(pH 8.3)이다. 100 ㎕의 히푸릴-히스티딜-류신 (2 mg/mL)을 효소 및 약물을 150 ㎕ 부피로 함유하는 시험관에 첨가함으로써 반응을 개시시키고, 시험관을 30 분 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 0.75 mL의 0.6 N NaOH를 첨가함으로써 반응을 종결시켰다. 100 μL의 새로 제조한 O-프탈데히드 용액 (메탄올 중의 2 mg/mL)을 시험관에 첨가하고, 내용물을 혼합하고 실온에서 정치시켰다. 10 분 후, 100 μL의 6 N HCl을 첨가했다. 시험관을 원심분리하고, 상청액의 광학 밀도를 360 nM에서 측정하였다. 결과를 약물 농도에 대해 플롯하여 IC₅₀, 즉 약물을 함유하지 않은 대조 시료의 활성의 반을 나타내는 약물의 농도를 결정하였다.

통상적으로, 본 발명의 화합물은 ACE 억제에 대해 약 0.1-50 nM의 범위의 IC₅₀을 나타냈다.

본 발명의 예로서, 실시예 6(a)의 화합물은 시험관내 ACE 분석에서 약 20 nM의 IC₅₀을 나타냈다.

ACE의 억제는 정상 혈압의 랫트에서 안지오텐신 I으로 유도된 혈압 상승 반응의 억제를 측정함으로써 p.o. 또는 i.v. 투여로 생체내에서 입증할 수 있다.

i.v. 투여된 화합물에 대한 생체내 시험은 의식이 있는 수컷 정상혈압 랫트를 사용하여 수행하였다. 안지오텐신 I의 i.v. 투여 및 본 발명의 화합물의 i.v. 또는 p.o. 투여시 직접 혈압 측정을 위하여 대퇴 동맥 및 대퇴 정맥에 각각 삽관하였다. 기본 혈압이 안정된 후, 300 ng/kg의 안지오텐신 I을 i.v.로 15 분 간격으로 3 또는 4번 부하하는데 대한 혈압 상승 반응을 얻었다. 이러한 혈압 반응은 시험할 화합물의 i.v. 또는 p.o. 투여 후 15, 30, 60 및 90 분에, 그 후 6 시간 까지 매 시간마다 보통 다시 나타났다. 상기 혈압 상승 반응의 감소가 관찰되면 ACE가 억제되었음을 나타내는 것이다.

본 발명의 예로서, 실시예 6(a)의 화합물은 10 mg/kg i.v.의 용량에서 3 시간 동안 안지오텐신 I으로 유도된 혈압 상승 반응을 억제했다. 유사하게, 실시예 1(a)의 화합물은 11.8 mg/kg p.o.의 용량에서 6 시간 동안 안지오텐신 I으로 유도된 혈압 상승 반응을 억제했다.

NEP (EC 3.4.24.11)의 시험관내 억제는 다음과 같이 입증할 수 있다:

NEP 3.4.24.11 활성은 문헌[Orlowski and Wilk (1981)]의 변형된 방법을 사용하여 기질 글루타릴-Ala-Ala-Phe-2-나프틸아미드 (GAAP)의 가수분해에 의해 측정하였다. 인큐베이션 혼합물 (총 부피 125 μL)은 4.2 μL의 단백질 (문헌 [Maeda et al., 1983]의 방법에 의해 제조한 랫트 신장 피질 막), 25℃에서 pH 7.4인 50 mM 트리스 완충액, , 500 μM 기질 (최종 농도), 및 류신 아미노펩티다제 M (2.5 ㎍)를 함유했다. 혼합물을 25℃에서 10 분 동안 인큐베이션하고, 100 μL의 패스트 가르넷 (fast garnet) (250 ㎍ 패스트 가르넷/1 mL의 1 M 아세트산 나트륨 pH 4.2 중의 10% 트윈 20)을 첨가했다. 효소 활성을 540 nm에서 분광광도법으로 측정했다. NEP 24.11 활성의 1 단위는 25℃, pH 7.4에서 분당 방출된 1 nmol의 2-나프틸아민으로 정의한다. IC₅₀값, 즉 2-나프틸아민의 방출을 50% 억제하는데 필요한 시험 화합물의 농도를 결정했다.

NEP 활성은 ANF를 기질로서 사용하여 측정할 수도 있다. ANF 분해 활성은 3-분 역상-HPLC 분리를 사용하여 랫트-ANF (r-ANF)의 소실을 측정함으로써 결정했다. pH 7.4의 50 mM 트리스 HCl 완충액 중의 효소의 분취량을 37℃에서 2 분 동안 미리 인큐베이션하고 총 부피 50 μL로 4 nmol의 r-ANF을 첨가함으로써 반응을 개시시켰다. 30 μL의 0.27% 트리플루오로아세트산 (TFA)을 첨가함으로써 4 분 후 반응을 종결시켰다. 활성의 1 단위는 37℃, pH 7.4에서 1 nmol의 r-ANF의 분당 가수분해로 정의했다. IC₅₀값, 즉 ANF의 가수분해를 50% 억제하는데 요구되는 시험화합물의 농도를 결정했다.

통상적으로, 본 발명의 화합물은 NEP 억제에 대해 약 0.1-50 nM의 범위의 IC₅₀을 나타냈다.

본 발명의 예로서, 실시예 6(a)의 화합물은 GAAP 시험관내 분석에서 약 5 nM의 IC₅₀을 나타냈다.

랫트 혈장 ANF 농도에 미치는 본 발명의 화합물의 효과는 다음과 같이 측정할 수 있다:

수컷 스프라그-돌리 (Sprague-Dawley) 랫트 (275-390 g)를 케타민 (150 mg/kg)/아세프로마진 (10%)으로 마취시키고 대퇴 동맥 및 정맥에 카테터를 장치하여 각각 혈액 시료를 얻고 ANF를 주입하였다. 랫트를 스위블(swivel) 시스템으로 매어 두고, 24 시간 동안 회복되게 한 후 의식 있고, 속박되지 않은 상태에서 연구했다.

분석에서, NEP 억제의 존재 및 부재 하에서 혈장 ANF 수준을 결정하였다. 시험한 날, 실험의 전체 5 시간 동안 모든 랫트에게 450 ng/kg/분, i.v.로 연속적으로 ANF를 주입하였다. 주입을 시작한 지 60 분 후, 기준선 ANF 측정을 위한 혈액 시료를 채취하고 (시간 0) 랫트를 무작위로 시험 화합물 또는 비히클 처리 군으로 나누었다. 시험 화합물의 투여 후 혈액 시료를 30, 60, 120, 180 및 240 분에 추가로 채취하였다.

혈장 ANF 농도를 특이적 방사성면역분석법에 의해 결정하였다. 혈장을 50mM 트리스 (pH 6.8), 154 mM NaCl, 0.3% 소 혈청 알부민, 0.01% EDTA를 함유하는 완충액으로 희석 (×12.5, ×25 및 ×50)하였다. 100 ㎕의 표준시료 [rANF (99-126)] 또는 시료를 100 μL의 토끼 항-rANF 혈청에 첨가하고 4℃에서 16 시간 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 10,000 cpm의 [¹²⁵I]rANF를 반응 혼합물에 첨가하고 4℃에서 16 시간 동안 인큐베이션하였다. 그 후 10,000 cpm의 [¹²⁵I]rANF를 반응 혼합물에 첨가하고 4℃에서 24 시간 동안 더 인큐베이션하였다. 상자성 입자와 커플링시킨 염소 항-토끼 IgG 혈청을 반응 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 유인 마그네틱 랙(attracting magnetic rack)에 노출시켜서 결합된 [¹²⁵I]rANF를 펠렛화하였다. 상청액을 따라내고, 펠렛을 감마 계수기에서 계수하였다. 모든 측정은 이중으로 수행하였다. 혈장 ANF 수준을 ANF만을 투여한 (450 ng/kg/분. i.v.) 비히클 처리된 동물에서 측정된 수준의 퍼센트로서 표시하였다.

본 발명의 예로서, 실시예 1(a)의 화합물은 11.8 mg/kg p.o.의 용량에서 혈장 ANF 수준을 약 70% 증가시켰다.

항-고혈압 활성은 예를 들면, 자연발증 고혈압 랫트 (SHR) 및 DOCA-염 고혈압 랫트에서 예를 들면 각각 문헌 [Bazil et al., J. Cardiovasc. Pharmacol., Vol. 22, pp. 897-905 (1993)] 및 [Trapani etal., J. Cardiovasc. Pharmacol., Vol. 14, pp. 419-424 (1989)]에 따라 결정할 수 있다.

본 발명의 예로서, 실시예 1(a)의 화합물은 11.8 mg/kg p.o.으로 하루 한번 투여시 의식 있는 SHR에서 평균 동맥 혈압을 감소시켰다.

항-고혈압 효과는 데스옥시-코르티코스테론 아세테이트 (DOCA)-염 고혈압 랫트에서 다음과 같이 측정될 수 있다:

DOCA-염 고혈압 랫트 (280-380 g)를 표준 방법에 의해 제조하였다. 랫트에 편측 신장절제술을 수행하고 1 주일 후 100 mg/kg의 DOCA를 함유한 실라스틱 펠렛을 이식하였다. 랫트는 지속적 고혈압이 확립될 때까지 3 내지 5 주 동안 1%의 NaCl/0.2% KCl 음용수로 유지하였다. 이 때 항-고혈압 활성을 평가하였다.

실험 2 일 전, 랫트를 메톡시플루란으로 마취하고, 대퇴 동맥에 카테터를 장치하여 동맥 혈압을 측정하였다. 48 시간 후, 1 시간 동안 기준선 동맥 혈압 및 심박수를 기록하였다. 그 후, 시험 화합물 또는 비히클을 투여하고, 추가적으로 5 시간 동안 동일한 심혈관계 파라미터를 모니터링하였다.

이뇨 (염분배설) 활성은 예를 들면 문헌 ["New Anti-hypertensive Drugs", Spectrum Publications, pp. 307-321 (1976)]에 기재된 바와 같은 표준 이뇨제 스크리닝으로, 또는 랫트에서 ANF-유도 나트륨이뇨 및 이뇨의 증강을 측정함으로써 결정할 수 있다.

ANF의 나트륨이뇨 효과의 증강은 하기와 같이 결정할 수 있다:

수컷 스프라그-돌리 랫트 (280-360 g)을 이낵틴 (100 mg/kg i.p.)으로 마취하고, 대퇴 동맥, 대퇴 정맥 및 방광에 카테터를 장치하여 각각 동맥 혈압을 측정하고, ANF를 투여하고 채뇨하였다. 실험 전체 동안 생리식염수 (33 μL/분)의 연속 주입을 유지하여 이뇨 및 나트륨 배설을 촉진시켰다. 실험 프로토콜은 초기 15 분의 수집 기간 (예비-대조군으로 표시) 후, 세번의 추가 수집 기간으로 이루어졌다. 예비-대조 기간이 끝난 직후, 시험 화합물 또는 비히클을 투여하고, 그 후 45 분 동안 아무것도 하지 않았다. 그 후, 제2 수집 기간 (대조군, 15분으로 표시)에 혈압 및 신장 측정을 행하였다. 이 기간이 끝나면, 모든 동물에게 ANF를 투여하고 (1 ㎍/kg, i.v. 일시주사), 2 번의 연속적인 15-분 수집 기간 동안 동맥 혈압 및 신장 파라미터를 측정하였다. 평균 동맥 혈압, 요류 및 요 나트륨 배설을 모든 수집 기간 동안 측정하였다. 혈압은 굴드 (Gould) p50 압력 변환기로 측정하고, 요류는 중량으로 측정하고, 나트륨 농도는 화염 광도계로 측정하고, 요 나트륨 배설은 요류 및 요 나트륨 농도의 곱으로 계산하였다.

ECE의 시험관내 억제는 다음과 같이 측정할 수 있다:

ECE는 DE52 음이온 교환 컬럼 크로마토그래피에 의해 돼지 1차 대동맥 내피 세포로부터 부분적으로 정제하고, 그 활성은 문헌 [Anal. Biochem., Vol., 212, pp. 434-436 (1993)]에 기재된 대로 방사성면역분석법 (RIA)에 의해 정량하였다. 별법으로, 예를 들면 문헌 [Cell, Vol. 78, pp. 473-485 (1994)]에 기재된 바와 같이 천연 효소를 ECE의 재조합 형태로 대체할 수 있다. 인간 ECE-1은 몇몇 그룹에 의해 기재되었다 (Schmidt et al., FEBS Letters, Vol. 356, pp. 238-243 (1994); Kaw et al., 4th Int. Conf. on Endothelin; April 23-25, London (UK) (1995) C6; Valdenaire et al., J. Biol. Chem., Vol. 270, pp. 29794-29798 (1995); Shimada et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., Vol. 207, pp. 807-812 (1995)). ECE 억제는 문헌[Biochem. Mol. Biol. Int., Vol. 31, No. 5, pp. 861-867 (1993)]에 기재된 대로 RIA에 의해 측정하여 거대 ET-1으로부터 형성된 ET-1을 측정할 수 있다.

별법으로, 재조합 인간 ECE-1 (rhECE-1)을 다음과 같이 사용할 수 있다:

rhECE-1을 발현하는 차이니스 햄스터 난소 세포 (Kaw et al., 4th Int. Conf. on Endothelin; April 23-25, London (UK), (1995) C6)를 10% 소 태아 혈청 및 1x 항생제-항진균제를 함유하는 DMEM/F12 배지에서 배양하였다. 세포를 긁어서 수거하고, 원심분리에 의해 펠렛으로 만들고, 4℃에서 5 mM MgCl₂, 1 μM 펩스타틴 A, 100 μM 류펩틴, 1 mM PMSF, 및 pH7.0의 20 mM 트리스를 함유하는 완충액 중에 2 mL의 완충액/1 mL의 세포의 비율로 균질화시켰다. 세포 파편을 잠시 원심분리하여 제거하고, 상청액을 다시 100,000 x g에서 30 분 동안 원심분리하였다. 생성된 펠렛을 200 mM NaCl 및 pH 7.0의 50 mM Tes를 함유하는 완충액에 약 15 mg/mL의 단백질 농도로 재현탁시키고, 분취하여 -80℃에서 저장하였다.

ECE-1 활성에 미치는 억제제의 효과를 평가하기 위하여, 10 ㎍의 단백질을 20 분 동안 실온에서 10 μL의 부피로 pH 7.0의 50 mM TES, 및 0.005% 트리톤 X-100 중에서 원하는 농도의 화합물과 함께 미리 인큐베이션하였다. 그 후 인간 거대 ET-1 (5 μL)을 0.2 μM의 최종 농도로 첨가하고, 반응 혼합물을 37℃에서 2 시간 동안 더 인큐베이션하였다. 인산염으로 완충된 식염수 중에 0.1% 트리톤 X-100, 0.2% 소 혈청 알부민, 및 0.02% NaN₃을 함유하는 500 μL의 RIA 완충액을 첨가하여 반응을 중단시켰다.

상기 효소 분석에서 얻은 희석된 시료 (200 μL)를 각각 25 μL의 [¹²⁵I]ET-1(10,000 cpm/시험관) 및 ET-1의 카르복실 말단의 트립토판을 특이적으로 인식하는 1:20,000-배로 희석된 토끼 항체와 함께 4℃에서 밤새 인큐베이션하였다. 그 후, 마그네틱 비드 (70 ㎍)에 커플링된 염소 항-토끼 항체를 각 시험관에 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 30 분 동안 더 인큐베이션하였다. 마그네틱 랙을 사용하여 비드를 펠렛화하였다. 상청액을 따라내고, 펠렛의 방사능을 감마 계수기로 계수하였다. 총 결합 및 비특이적 결합을 각각 비-방사성 ET-1 및 항-ET 항체의 부재 하에 측정하였다. 이 조건 하에서, ET-1 및 거대 ET-1은 각각 21±2 및 260,000±66,000 fmol (평균±SEM, n = 3-5)의 IC₅₀값으로 항체에 결합하는 [¹²⁵I]ET-1 대신 치환되었다.

억제제의 IC₅₀값을 결정하기 위하여, 각 억제제의 농도-반응 곡선을 결정하였다. ALLFIT 프로그램의 IBM-호환성 버전을 사용하여 데이타를 1-사이트 모델로 피팅하였다.

하기와 같이 마취되거나 의식이 있는 랫트에서 거대 ET-1으로 유도된 혈압 상승 반응의 억제를 측정함으로써 ECE 억제를 생체 내에서 측정할 수 있다. 거대 ET-1 부하로 인한 혈압 상승 반응에 미치는 억제제의 효과는 문헌 [Biochem. Mol. Biol. Int., Vol.31, No. 5, pp. 861-867 (1993)]에 기재된 대로 스프라그-돌리 랫트에서 측정하였다. 결과는 비히클에 비한 거대 ET-1 유도 혈압 상승 반응의 퍼센트 억제로서 표시하였다.

수컷 스프라그-돌리 랫트를 이낵틴 (100 mg/kg i.p.)으로 마취시키고 대퇴동맥 및 정맥에 카테터를 장치하여 각각 평균 동맥 혈압 (MAP)을 기록하고 화합물을 투여하였다. 기관절개술을 수행하고 캐뉼라를 기관에 삽입하여 기도 개방을 확보하였다. 동물의 체온을 가열 담요로 37±1℃로 유지시켰다. 수술 후, MAP를 안정화 시킨 후 클로리손다민 (3 mg/kg i.v.)으로 자율 신경 전달을 차단시켰다. 그 후, 랫트를 10 mg/kg i.v.의 시험 화합물 또는 비히클로 처리하고 15 및 90 분 후 거대 ET-1 (1 nmol/kg i.v.)을 부하하였다. 일반적으로, 데이타는 시험 화합물 또는 비히클로 처리된 동물에서 거대 ET-1에 의해 생성된 MAP의 최대 증가로 보고되었다.

수컷 스프라그-돌리 랫트를 메토헥시탈 소듐 (75 mg/kg i.p.)으로 마취시키고, 대퇴 동맥 및 정맥에 카테터를 장치하여 각각 MAP를 측정하고 약물을 투여하였다. 카테터를 스위블 시스템을 통하여 연결하여 랫트가 의식을 되찾은 후 자유롭게 움직일 수 있도록 했다. 이 과정으로부터 랫트가 24 시간 동안 회복되게 한 후 연구를 개시했다. 다음 날, 대퇴 동맥 카테터를 통하여 MAP를 기록하고 시험 화합물 또는 비히클을 대퇴 정맥을 통해 투여하였다. 투약 후 여러 시간 대에 거대 ET-1을 1 nmol/kg i.v.로 동물에 부하하였다. 용량 및 용법에 따라서 적절한 세척 기간 후, 동물을 또다른 용량의 시험 화합물 또는 비히클로 다시 시험할 수 있다. 일반적으로, 데이타는 비히클에 비하여 시험 화합물로 처리한 동물에서 2 분 간격으로 거대 ET-1에 의해 생성된 MAP의 변화로 기록하였다.

ECE 억제는 예를 들면 문헌[Biochem. Biophys. Res. Commun., Vol. 204, pp. 407-412 (1994)]에 기재된 바와 같이 의식이 있는 SHR에서 거대 ET-1 유도 혈압 상승 반응의 억제를 측정함으로써 생체내에서 결정할 수 있다.

수컷 SHR (16-18 주령)에 시험 화합물 또는 비히클 (1 M NaHCO₃)을 피하에 이식된 삼투 미니펌프를 통해 투여하였다. 제5일에, 대퇴 동맥 및 정맥 카테터를 마취된 랫트에 위치시켜 각각 MAP를 측정하고, 시험 화합물을 투여하였다. 48 시간의 회복 기간 후, 압력 변환기에 연결된 동맥 카테터를 통하여 MAP를 기록하였다 (제7일). 혈압 및 심박수를 30 분 동안 안정시킨 후, 클로리손다민 (10 mg/kg i.v.)을 사용하여 신경절 차단을 수행하였다. 약 15 분 후, 일시 용량의 거대 ET-1 (0.25 nmol/kg i.v.)을 비히클 및 시험 화합물로 처리된 랫트에 투여하였다. 거대 ET-1에 반응하는 혈압의 변화를 두 그룹의 랫트 간에 비교하였다.

대뇌 혈관 경축의 억제는 토끼에서 실험적으로 유도된 대뇌저동맥의 수축의 억제를 측정함으로써 입증하였다 [Caner et al., J. Neurosurg., Vol.85, pp. 917-922 (1996)].

본 발명의 화합물의 바람직하지 않은 면역자극 가능성의 정도 또는 그러한 가능성이 없다는 것은 문헌[Toxicology Letters, Vols. 112/113, pp. 453-459 (2000)]에 기재된 쥐의 슬와 림프절 분석법으로 결정할 수 있다.

본 발명의 화합물은 예를 들면

a) 화학식 II의 화합물 화학식 III의 카르복실산 또는 그의 반응성 기능적 유도체와 축합시키거나; 또는

b) 화학식 IV의 화합물 또는 그의 반응성 기능적 유도체를 화학식 V의 아미노산 에스테르와 축합시키거나; 또는

c) 염기성 조건 하에서 화학식 VI의 화합물을 화학식 VII의 화합물 또는 그의 염과 축합시키고;

그 결과의 생성물을 R₃가 수소인 화학식 I의 화합물로 전환시키고;

상기 방법에서, 어떠한 간섭하는 반응성 기를 일시적으로 보호한다면, 상기 보호기를 제거한 후, 생성된 본 발명의 화합물을 단리하고; 필요하다면 생성된 본 발명의 어떤 화합물을 본 발명의 다른 화합물로 전환시키고(전환시키거나); 필요하다면, 유리 카르복실기를 제약학적으로 허용가능한 에스테르 유도체로 전환시키거나, 생성된 에스테르를 유리 산 또는 다른 에스테르 유도체로 전환시키고(시키거나); 필요하다면, 생성된 유리 화합물을 염으로 전환시키거나 생성된 염을 유리 화합물 또는 다른 염으로 전환시키고(시키거나), 필요하다면, 이성질체 또는 라세미체의 혼합물을 분리하고(하거나), 필요하다면 얻어진 라세미체를 광학적 대칭체로 분해함으로써 제조할 수 있다.

(상기 식에서, 기호 alk, X, R, R₁, R₆및 R₇은 상기 정의한 의미를 갖고, COOR₂는 에스테르화된 카르복실을 나타냄)

(상기 식에서, R₄및 R₅는 상기 정의한 의미를 갖고, R₃'는 수소 또는 불안정한 S-보호기, 예를 들면, 아실, t-부틸 또는 임의로 치환된 벤질을 나타냄)

(상기 식에서, 기호 R₃', R₄-R₅및 R₆-R₇은 상기 정의된 의미를 가짐)

(상기 식에서, alk, X, R 및 R₁은 상기 정의한 의미를 갖고, COOR₂는 에스테르화된 카르복실을 나타냄)

(상기 식에서, R, R₁, COOR₂, R₄-R₇, alk 및 X는 상기 정의한 의미를 갖고, Y는 이탈기로서 반응성 에스테르화된 히드록실기 (예를 들면, 클로로 또는 브로모)를 나타냄)

(상기 식에서 R₃'는 불안정한 S-보호기, 예를 들면, 아실, t-부틸 또는 임의로 치환된 벤질을 나타냄)

본원에 기재한 방법으로 본 발명의 화합물로 제조되는 출발 화합물 및 중간체에서, 티올, 카르복실, 아미노 및 히드록실기와 같은 존재하는 작용기는 유기 제조 화학에서 흔히 사용되는 통상의 보호기에 의해 임의로 보호된다. 보호된 티올, 카르복실, 아미노 및 히드록실기는 온화한 조건에서 바람직하지 않은 부반응이 일어나지 않고 유리 티올, 카르복실, 아미노 및 히드록실기로 전환될 수 있는 것이다.

보호기를 도입하는 목적은 원하는 화학적 변형을 수행하기 위해 사용되는 조건 하에서 반응 성분과의 원하지 않는 반응으로부터 작용기를 보호하기 위한 것이다. 특정 반응에 대한 보호기의 필요성 및 선택은 당업자에게 공지되어 있고 보호되는 작용기 (티올, 카르복실, 아미노기 등)의 성질, 치환체가 부분을 이루는 분자의 구조 및 안정성, 및 반응 조건에 의존한다.

이러한 조건을 만족하는 공지의 보호기 및 이들의 도입 및 제거는 예를 들면, 문헌 [J. F. W. McOmie,"Protective Groups in Organic Chemistry", PlenumPress, London, N. Y. (1973)], [T. W. Greene and P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, N. Y. 3rd Ed.(1999)], 및 ["The Peptides", Vol.I, Schroeder and Luebke, Academic Press, London, N. Y. (1965)]에 기재되어 있다.

화학식 II의 아민과 화학식 III의 산 또는 그의 기능적 반응성 유도체의 축합을 포함하는 방법 (a)에 따르는 본 발명의 화합물의 제조는 펩티드 합성에서 공지의 방법에 의해 수행할 수 있다.

방법 (a)에 따르는 화학식 II의 아미노 에스테르와 화학식 III의 유리 카르복실산과의 축합은 유리하게는 축합제, 예를 들면, 디시클로헥실카르보디이미드 또는 N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드 및 히드록시벤조트리아졸, 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸, 클로로디메톡시트리아진, 벤조트리아졸-1-일옥시트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (BOP 시약), 또는 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸유로늄 헥사플루오로포스페이트 (HATU), 및 트리에틸아민 또는 N-메틸포르폴린의 존재 하에서, 불활성 극성 용매, 예를 들면 디메틸포름아미드 또는 메틸렌 클로라이드 중에서, 바람직하게는 실온에서 수행한다.

화학식 II의 아미노 에스테르와 산 할로겐화물, 유리하게는 산 염화물, 또는 혼성 산무수물의 형태인 화학식 III의 산의 반응성 기능적 유도체와의 축합은 불활성 용매, 예를 들면 톨루엔 또는 메틸렌 클로라이드 중에서, 유리하게는 염기, 예를 들면 탄산칼륨과 같은 무기 염기 또는 트리에틸아민, N-메틸모르폴린 또는 피리딘과 같은 유기 염기의 존재 하에서, 바람직하게는 실온에서 수행한다.

화학식 III의 카르복실산의 반응성 기능적 유도체는 바람직하게는 산 할라이드 (예를 들면, 산 염화물) 및 혼성 산무수물, 예를 들면 피발로일 또는 이소부틸옥시카르보닐 무수물, 또는 활성화된 에스테르, 예를 들면 벤조트리아졸, 7-아자벤조트리아졸 또는 헥사플루오로페닐 에스테르이다.

화학식 II의 출발 물질은 본원에 기재되고 실시예에 예시된 방법에 따라 제조될 수 있다.

화학식 II의 출발 물질의 제조는 화학식 IX의 적절히 N-보호된 아미노산 (또는 반응성 기능적 유도체)로 화학식 VIII의 에스테르를 아실화하는 것을 포함하여 상응하는 화학식 II의 N-보호된 화합물을 얻는다.

상기 식에서, alk, X, R 및 R₁은 상기 정의한 의미를 갖고, COOR₂는 에스테르화된 카르복실 (예를 들면, 여기서 R₂는 저급 알킬 또는 벤질임)을 나타낸다.

상기 식에서, R₆및 R₇은 상기에 정의된 의미를 갖고, R₈은 불안정한 아미노보호기, 예를 들면 t-부톡시카르보닐을 나타낸다.

화학식 IX의 화합물과 화학식 VIII의 화합물의 축합은, 예를 들면 화학식 III의 화합물과 화학식 II의 화합물의 축합에 대해 상기한 바와 같이 펩티드 합성에서 공지된 방법에 의해 수행한다. N-보호기는 해당 기술 분야에서 공지된 방법에 따라 제거하고, 예를 들면, t-부톡시카르보닐은 트리플루오로아세트산 또는 HCl과 같은 무수산으로 제거한다.

화학식 VIII 및 IX의 화합물의 출발 아미노 에스테르 및 산은 각각 해당 기술분야에서 공지되었거나, 또는 신규의 것이라면, 해당 기술 분야에서 공지된 방법, 또는 예를 들면 본원에 예시된 방법에 따라 제조할 수 있다. 화학식 VIII의 아미노산 에스테르는 바람직하게는 S-거울상이성질체이다.

화학식 III의 출발 물질은 공지되어 있거나, 또는 신규하다면 통상의 방법에 따라 제조할 수 있다. 출발 물질은 예를 들면, 상응하는 라세미 또는 광학 활성 α-아미노산으로부터 이를 α-브로모 유도체로 전환한 후 염기성 조건 하에서, 예를 들면 1993년 1월 27일에 공개된 유럽 특허 출원 제524,553호에 예시된 바와 같이 화학식 VII의 적절한 티올 유도체를 사용하여 배위의 반전과 함께 이를 치환하여 제조한다. 생성된 최종 생성물의 S-탈벤질화는 예를 들면, 에탄올 중의 라니 니켈을 사용하는 환원적 절단에 의해 수행한다. S-탈아실화는 예를 들면 묽은 수성 수산화나트륨을 사용하는 염기 촉매된 가수분해에 의해 수행한다. 화학식 III의 시클릭 출발 물질은 시클릭 카르복실산 (예를 들면, 시클로펜탄카르복실산)을 리튬 디에틸아미드와 같은 강염기의 존재 하에서 황으로 처리함으로써 제조할 수있다.

화학식 IV의 산과 화학식 V의 아미노산 에스테르와의 축합을 포함하는 방법 (b)에 따른 본 발명의 화합물의 제조는 방법 (a)와 유사한 방식으로 수행한다. 유사하게, 화학식 IV의 출발 물질은 상기한 것과 유사한 조건 하에서 화학식 IX의 gem-이치환된 아미노산 (여기서, R₈은 수소임)에 상응하는 에스테르와 화학식 III의 산의 축합에 이어 카르복실 보호기를 제거함으로써 제조한다.

티올 유도체 R₃'-SH (그의 염으로서)와 화학식 VI의 화합물에서 이탈기 Y의 치환을 포함하는 방법 (c)에 따른 본 발명의 화합물의 제조는 해당 기술분야에서 공지된 방법에 따라 수행한다.

Y로 표시되는 반응성 에스테르화된 히드록실기는 무기 또는 유기 강산에 의해 에스테르화된 히드록실기이다. 상응하는 Y기는 특히 할로, 예를 들면 클로로, 브로모 또는 요오도, 또한 설포닐옥시기, 예를 들면 저급 알킬- 또는 아릴설포닐옥시기, 예를 들면 (메탄-, 에탄-, 벤젠- 또는 톨루엔-) 설포닐옥시기, 또한 트리플루오로메틸설포닐옥시기이다.

치환은 디메틸포름아미드 또는 메틸렌 클로라이드와 같은 불활성 용매에서 탄산칼륨, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린 등과 같은 염기의 존재 하에서, 실온 또는 승온에서 수행된다.

R₃'SH의 염 (예를 들면, 포타슘 티오아세테이트)을 사용하여, 염기의 부재 하에서 테트라히드로푸란 또는 디메틸포름아미드와 같은 불활성 용매에서 반응을수행한다.

유사하게, 화학식 VI의 출발 물질은 방법 (a)에 대해 기재한 조건 하에서 화학식 II의 디펩티드 유도체를 화학식 X의 산과 반응시킴으로써 제조할 수 있다.

상기 식에서, R₄및 R₅및 Y는 상기 정의한 의미를 갖는다.

α-브로모카르복실산과 같은 화학식 X의 화합물 (여기서 Y는 할로임)은 공지되어 있고, 예를 들면 1999년 11월 4일에 공개된 국제 출원 WO 99/55726호에 기재된 바와 같이 제조된다.

측쇄 alk-X-R₁을 갖는 본 발명의 화합물 및 중간체, 예를 들면 화학식 II, V 및 VI의 화합물은 alk-X' 측쇄 (여기서 X'는 아미노, 히드록시, 티올 또는 적절한 이탈기를 나타냄)를 갖는 상응하는 화합물로부터 당해 기술분야에서 공지되고 본원에 예시된 방법에 따라 제조한다. 예를 들면, 화학식 V의 산 및 에스테르는 바람직하게는 광학 활성 형태인 세린, 호모세린, 트레오닌, 시스테인 등에서 출발하여 얻을 수 있다.

본 발명의 특정 화합물 및 중간체는 해당 기술분야에서 공지된 일반적 반응에 따라 서로 전환될 수 있다.

유리 머캅탄은 바람직하게는 트리에틸아민과 같은 염기의 존재 하에서 아세토니트릴 또는 메틸렌 클로라이드와 같은 불활성 용매 중에서 산무수물 또는 산 염화물과 같은 카르복실산의 반응성 유도체 (화학식 I에서 R₃가 아실인 것에 해당)와 반응시킴으로써 S-아실 유도체로 전환될 수 있다.

유리 알콜 및 페놀은 예를 들면 트리에틸아민과 같은 염기의 존재 하에서 상응하는 산 염화물과 반응시킴으로써 상응하는 아실 유도체로 전환될 수 있다.

유리 머캅탄 (R₃는 수소를 나타냄)은 예를 들면 공기 산화에 의해, 또는 알콜성 용액 중의 아이오딘과 같은 온화한 산화제의 사용에 의해 상응하는 디설파이드로 산화될 수 있다. 역으로, 디설파이드는 예를 들면 소듐 보로히드리드, 아연 및 아세트산 또는 트리부틸포스핀과 같은 환원제를 사용하여 상응하는 머캅탄으로 환원될 수 있다.

카르복실산 에스테르는 당해 기술 분야에서 공지된 방법에 따라 염기의 존재 하에서, 또는 산 촉매의 존재 하에서 과량의 알콜을 사용하여, 예를 들면 R₂-OH에 상응하는 할라이드와의 축합에 의해 카르복실산으로부터 제조될 수 있다.

카르복실산 에스테르 및 S-아실 유도체는 예를 들면 알칼리 금속 카르보네이트 또는 수산화물과 같은 수성 알칼리를 사용하여 가수분해될 수 있다. S-아실 및 에스테르기는 본원에 예시된 바와 같이 선택적으로 제거될 수 있다.

바람직하게는, 또한 가능한 경우에는, 화학식 Ia의 본 발명의 바람직한 이성질체는 순수한 거울상이성질체로부터 제조된다.

입체이성질체 (예를 들면 부분입체이성질체)의 혼합물이 얻어지는 경우, 이는 분별 결정화 및 크로마토그래피 (예를 들면, 박층, 컬럼, 플래시 크로마토그래피)와 같은 공지의 방법에 의해 분리할 수 있다. 라세미 유리 산은 d- 또는 l-(α-메틸벤질아민, 신코니딘, 신코닌, 퀴닌, 퀴니딘, 데히드로아비에틸아민, 브루신 또는 스트리크닌) 염의 분별 결정화 등에 의해 광학 대칭체로 분해될 수 있다. 라세미 생성물은 부분입체이성질체가 아니라면, 광학 활성 시약 (예를 들면 에스테르를 형성하기 위한 광학 활성 알콜)을 사용하여 먼저 부분입체이성질체로 전환시킬 수 있고, 그 후 상기한 바와 같이 이를 분리하고, 예를 들면 개별 거울상이성질체로 가수분해할 수 있다. 라세미 생성물은 또한 키랄 크로마토그래피, 예를 들면 키랄 흡착제를 사용하는 고압 액체 크로마토그래피에 의해, 또한 예를 들면 알칼라제를 사용한 에스테르의 효소적 분해에 의해 분해할 수 있다.

상기 반응은 표준 방법에 따라, 바람직하게는 시약에 불활성이고 그의 용매인 것과 같은 희석제, 알칼리 또는 산성 축합 촉매, 또는 상기 다른 시약 각각의 존재 또는 부재 하에서, 및(또는) 불활성 대기에서, 저온, 실온 또는 승온에서, 바람직하게는 사용된 용매의 끓는점 근처에서, 대기압 또는 초대기압에서 수행할 수 있다.

본 발명은 또한 상기 방법의 모든 변형 방법을 포함하고, 변형 방법에서는 방법의 모든 단계에서 얻을 수 있는 중간체 생성물을 출발 물질로서 사용하고 모든 남은 단계를 수행하거나, 임의의 단계에서 방법을 중단하거나, 또는 출발 물질을 반응 조건 하에서 형성하거나, 또는 반응 성분을 그의 염 또는 광학적으로 순수한 대칭체의 형태로 사용한다. 주로 바람직한 것으로 상기에 기재한 화합물의 형성으로 유도하는 출발 물질이 상기 반응에서 사용되어야 한다.

본 발명은 추가적으로 ACE 및 NEP를 모두 억제하기 위한, 또한 예를 들면 고혈압, 부종, 요 저류 및 울혈성 심부전과 같은 심혈관계 장애의 예방 또는 치료를 위한 의약으로서, 상기 장애의 치료에 유용한 1 이상의 다른 약제와 복합하여 또는 단독으로 사용하는 본 발명의 화합물 및 그의 제약학적으로 허용가능한 비-독성 산 부가염 또는 그의 제약 조성물의 포유류에서의 용도에 관한 것이다. 다른 약제는 항-고혈압제, 항-죽상경화제, 심장 약제, 이뇨제, 항당뇨병제, 콜레스테롤-저하제 등일 수 있다. 다른 치료제와 복합하여 사용할 때, 이러한 약제는 별도로 또는 고정된 복합제로 투여될 수 있다.

복합하여 사용될 수 있는 치료제의 예는 안지오텐신 II 수용체 길항제, 예를 들면, 발사르탄, 로사르탄, 칸데사르탄, 에프로사르탄, 이르베사르탄 및 텔미사르탄; β-차단제, 예를 들면 비소프롤롤, 프로파놀롤, 아테놀롤, 소탈롤 및 메토프롤롤; 레닌 억제제; 칼슘 채널 차단제, 예를 들면 암로디핀, 베라파밀, 딜티아젬, 베프리딜, 펠로디핀, 이스라디핀, 니카르디핀, 이페디핀, 니모디핀 및 니솔디핀; 알도스테론 합성효소 억제제/알도스테론 길항제, 예를 들면 에플레레논, (+)-파드로졸 (WO 01/76574), 스피로노락톤 및 칸레논; 이뇨제, 예를 들면 푸로세마이드, 히드로클로로티아지드, 인다파미드, 메타졸론, 아밀로리드 및 트리암테렌; 바소프레신 수용체 길항제, 예를 들면 OPC 21268, SR 49059, SR 121463A, SR49059, VPA985, OPC31260 및 YM087; 강심제, 예를 들면 에녹시몬 및 레보시멘단; 엔도텔린 길항제 및 ECE 억제제, 예를 들면 보센탄, BMS193884, TBC3711 및 WO 99/55726호에 개시된 화합물; 항-죽상경화제, 특히 콜레스테롤 저하제, 예를 들면 담즙산 결합제 (예를들면, 콜레스티라민 및 콜레스티폴); 콜레스테롤 흡수 억제제, 예를 들면 에제티미브; 피브레이트, 예를 들면 페노피브레이트 및 겜피브로질; 스타틴 HMG CoA 환원효소 억제제, 예를 들면 아토르바스타틴, 플루바스타틴, 로바스타틴, 프라바스타틴, 심바스타틴 및 피타바스타틴; 및 니코틴산 유도체; 갑상선 유사작용제 (thyromimetic agent), 예를 들면 미국 특허 제5,569,674호 및 WO 00/58279호에 기재된 것과 같은 것; 또한 항당뇨병제, 예를 들면 레파글리니드, 나테글리니드, 메트폴민, 로시글리타존, 피오글리타존, 글리부리드, 글리피지드, 글리메피리드, DPP728, LAF237, NH622 및 DRF4158이다.

본 발명은 또한 제약 조성물, 특히 ACE 및 NEP 억제 활성, 및 예를 들면 항-고혈압 활성을 갖는 제약 조성물의 제조를 위한 본 발명의 화합물의 용도에 관한 것이다.

본 발명에 따른 제약 조성물은 유효량의 본 발명의 약물학적 활성 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염을 포함하며, 고혈압과 같은 심혈관계 장애의 치료를 위해, 단독으로 또는 1 이상의 제약학적으로 허용가능한 담체와 함께, 또한 상기 언급한 심혈관계 장애의 치료에 유용한 다른 치료제와 복합하여, 사람을 포함하는 포유류에게 소화기로, 예를 들면 경구 또는 직장으로, 경피 및 비경구로 투여하기에 적합한 것이다.

본 발명의 약물학적 활성 화합물은 소화기 또는 비경구 투여에 적합한 부형제 또는 담체와 함께 또는 이들과 혼합한 유효량의 활성 화합물을 포함하는 제약 조성물의 제조에 유용하다. 바람직한 것은 a) 희석제, 예를 들면 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및(또는) 글리신; b) 활택제, 예를 들면, 실리카, 탈쿰, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염 및(또는) 폴리에틸렌글리콜; 정제에 대해서는 또한 c) 결합제, 예를 들면 마그네슘 알루미늄 실리카, 전분, 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로스, 소듐 카르복시메틸셀룰로스 및(또는) 폴리비닐피롤리돈; 필요하다면 d) 붕해제, 예를 들면 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염, 또는 비등 혼합물; 및 필요하다면, 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제와 함께 활성 성분을 포함하는 정제 및 젤라틴 캡슐이다. 주사가능한 조성물은 바람직하게는 수용성 등장성 용액 또는 현탁액이고, 좌약은 유리하게는 지방 유액 또는 현탁액으로부터 제조된다. 상기 조성물은 멸균되고(되거나) 보존, 안정화, 습윤 또는 유화제, 용액 촉진제, 삼투압을 조절하기 위한 염및(또는) 완충액과 같은 보강제를 함유할 수 있다. 또한, 본 조성물은 다른 치료학적으로 유용한 물질을 함유할 수 있다. 상기 조성물은 통상의 혼합, 과립화, 또는 코팅 방법에 따라 각각 제조되고, 약 0.1-75%, 바람직하게는 약 1-50%의 활성 성분을 함유한다.

경피 투여를 위한 적절한 제제는 유효량의 본 발명의 화합물과 담체를 포함한다. 유리한 담체는 숙주의 피부 통과를 돕기 위한 흡수가능한 약물학적으로 허용가능한 용매를 포함한다. 특징적으로, 경피 기구는 배면 부재, 화합물을 함유하는 저장소, 임의로 담체, 임의로 장시간에 걸쳐 조절되고 예정된 속도로 숙주의 피부에 화합물을 전달하기 위한 속도 조절 장벽, 및 기구를 피부에 고정하기 위한 수단을 포함하는 붕대의 형태이다.

약 50-70 kg의 포유류에 대한 단위 용량은 약 10 내지 200 mg의 활성 성분을 함유할 수 있다. 활성 화합물의 용량은 온혈 동물 (포유류)의 종, 체중, 연령 및 개별 상태 및 투여의 형태에 의존한다.

하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것이고 그에 대해 제한을 가하고자 하는 것이 아니다. 온도는 섭씨로 표시한다. 달리 언급이 없다면, 모든 증발은 감압 하에서, 바람직하게는 약 15 내지 100 mmHg에서 수행된 것이다. 광학 회전 (도로 표시)은 실온에서 589 nM (나트륨의 D 선)에서 또는 실시예에 명시된 다른 파장에서 측정한 것이다. 화합물의 구조는 표준 분석 방법, 예를 들면 질량 스펙트럼, 원소 분석, NMR, IR 분광법 등에 의해 확인한 것이다.

접두사 R 및 S는 각 비대칭 중심에서 절대 배위를 나타내기 위하여 사용된다.

실시예 1

(a) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르

N-[2-[-[(R)-3-브로모-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르 (4.96 g, 10.5 mmol)를 테트라히드로푸란 (100 mL)에 용해시키고 포타슘 티오아세테이트 (6.00 g, 52.5 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 (500 mL)로 희석하고 물 (100 mL), 중탄산나트륨 용액 (2 x 100 mL), 물 (2 x 100 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 용액을 황산나트륨 상에서 건조하고 진공 하에서 농축하였다. 조 생성물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 3:2 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여 표제 화합물을 얻었다; m.p. 55-57℃; [α]²⁰ _D-63.5° (c = 0.99, CH₃0H); MS(M+H): 467.

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다:

에탄올 (200 mL) 중의 O-벤질-L-세린 (9.75 g, 50 mmol)의 용액을 HCl 기체로 8 분 동안 포화시켰다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후 진공 하에서 농축하였다. 고체를 디에틸 에테르로 세척하고 여과에 의해 수거하여 O-벤질-L-세린 에틸 에스테르 염산염을 백색 고체로 얻었다.

메틸렌 클로라이드 (150 mL) 중의 BOC-α-메틸알라닌 (3.05 g, 15 mmol), O-벤질-L-세린 에틸 에스테르 염산염 (3.89 g, 15 mmol), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 (EDCI, 2.88 g, 15 mmol) 및 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (HOAT, 2.04, 15 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (1.52 g, 15 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반한 후 진공 하에서 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트에 재용해시키고 물, 1 N HCl, 물, 및 염수로 세척하였다. 용액을 황산나트륨 상에서 건조하고 농축하여 하기 화학식의 N-[2-(BOC-아미노)-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르를 얻었다.

상기 카르바메이트 (6.12 g, 15 mmol)를 메틸렌 클로라이드 (200 mL)에 용해시키고 얼음 배스에서 냉각시켰다. 용액을 HCl 기체로 10 분 동안 포화시킨 후, 실온에서 밤새 교반하였다. 잔류물을 농축했다. 메틸렌 클로라이드를 첨가하고 잔류물을 다시 농축하여 N-(2-아미노-2-메틸프로피오닐)-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르 염산염을 포말로서 얻었다; MS(M+H): 309.

메틸렌 클로라이드 (150 mL) 중의 상기 아민 염산염 (4.90 g, 14 mmol)의 용액에 (R)-2-브로모-3-메틸부탄산 디이소프로필 아민 염 (4.03 g, 14 mmol), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 염산염 (EDCI, 2.70 g, 14 mmol) 및 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (HOAT, 1.90 g, 14 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후 진공 하에서 농축하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시키고 물, 묽은 중탄산나트륨, 물, 1 N HCl, 및 염수로 세척하였다. 용액을 황산나트륨 상에서 건조하고 농축하여 고체를 얻었다. 고체를 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 2:1 헥산/에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 하기 화학식의 N-[2-(R)-2-브로모-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸에스테르를 얻었다.

유사하게 하기 화합물을 제조하였다:

(b) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3,3-디메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르

(c) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-트레오닌 에틸 에스테르; m.p. 121-122℃.

(d) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메톡시부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; [α]_D ²⁰+14.9°(c = 1.04, DMSO)

(e) N-[2-[(S)]-2-아세틸티오-3-메틸펜타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; [α]_D ²⁰-6.93° (c = 1.09, CH₃0H)

(f) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-(3-트리플루오로메틸벤질)-L-세린 에틸 에스테르

출발 물질인 O-(3-트리플루오로메틸벤질)-L-세린 에틸 에스테르 염산염은 다음과 같이 제조하였다:

N,N-디메틸포름아미드 (60 mL) 중의 소듐 히드리드 (오일 중의 60%, 3.04 g, 76 mmol)의 현탁액에 0℃에서 BOC-L-세린 (7.80 g, 38 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 교반한 후, m-트리플루오로메틸벤질 클로라이드 (7.39 g, 38 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 혼합물에 물을 가하여 반응을 중단시켰다. 에틸 아세테이트를 첨가하고 혼합물을 염수로 세척하고 MgS0₄상에서 건조하고 농축하여 황색 오일을 얻었고, 이를 플래시 크로마토그래피 (SiO₂; 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여 투명 오일을 얻었다. 잔류물을 에탄올 (120 mL)에 용해시키고, 용액을 0℃로 냉각시키고, HCl 기체로 5 분 동안 포화시켰다. 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하여 O-(4-트리플루오로메틸벤질)-L-세린 에틸 에스테르 염산염을 얻었다.

(g) 오일 상의 N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-(4-플루오로벤질)-L-세린 에틸 에스테르

(h) 오일 상의 N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-(4-플루오로페닐)-L-호모세린 에틸 에스테르

출발물질인 O-(4-플루오로페닐)-L-호모세린 에틸 에스테르 염산염은 다음과 같이 제조하였다:

테트라히드로푸란 중의 BOC-L-호모세린 t-부틸 에스테르 (3.2 g, 11.6 mmol)의 용액에 트리페닐포스핀 (7.59 g, 29 mmol), p-플루오로페놀 (2.08 g, 18.6 mmol) 및 1,1'-아조비스(N,N-디메틸포름아미드) (3.2 g, 18.6 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반하고, 염수로 세척하고, MgSO₄상에서 건조하고, 용매를 제거하여 오렌지색 오일을 얻었다. 오일을 플래시 크로마토그래피 (Si0₂, 85% 헥산/15%에틸 아세테이트)로 정제하여 투명 오일을 얻었고, 이를 에탄올 (100 mL)에 용해시키고, 그 용액을 HCl 기체로 포화시킨 후 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하여 O-(4-플루오로페닐)-L-호모세린 에틸 에스테르 염산염을 백색 고체로서 얻었다.

(i) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸-부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O- (3-플루오로페닐)-L-호모세린 에틸 에스테르

(j) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 모르폴리노카르보닐메틸 에스테르는 헥산, 에틸 아세테이트, 메탄올 (20:70:10)으로 실리카겔 상에서 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 얻었다.

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다:

O-벤질-L-세린 (10.0 g, 51.3 mmol), 디-tert-부틸-디카르보네이트 (11.2 g, 51.4 mmol) 및 1 N 수산화나트륨 (103 mL, 103 mmol)을 함께 100 mL의 디옥산 중에서 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공 하에서 농축하고, 물로 취하고 6 N HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 물에 이어 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 혼합물을 여과하고 진공 하에서 농축하여 BOC-O-벤질-L-세린을 오일로서 얻었다. 4-(2-클로로아세틸)모르폴린 (1.22 g, 7.48 mmol)을 5 mL 의 N,N-디메틸포름아미드 중의 BOC-O-벤질-L-세린 (2.20 g, 7.46 mmol), 트리에틸아민 (0.75 g, 7.43 mmol) 및 요오드화나트륨 (0.11 g, 0.73 mmol)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물에 이어 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 혼합물을 여과하고 진공 하에서 농축하여 황색 오일을 얻었다. 오일을 실리카겔 상에서 헥산:에틸 아세테이트:메탄올 (35:60:5)로 크로마토그래피하여 BOC-O-벤질-L-세린 모르폴리노카르보닐메틸 에스테르를 무색 오일로 얻었다. 메틸렌 클로라이드 (50 mL) 중의 카르바메이트 에스테르 (1.72 g, 4.08 mmol)의 용액을 통하여 HCl 기체를 5 분 동안 버블링시키고 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 생성된 혼합물을 진공 하에서 농축하여 O-벤질-L-세린 모르폴리노카르보닐메틸 에스테르를 포말로서 얻었다.

(k) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 디메틸아미노카르보닐메틸 에스테르는 실시예 1(j)의 화합물에 대해 기재한 바와 같이 제조하고 정제하였다.

(l) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 디에틸아미노카르보닐메틸 에스테르는 실시예 1(j)의 화합물에 대해 기재한 바와 같이 제조하고, 실리카겔 상에서 헥산, 에틸 아세테이트, 메탄올 (35:60:5)로 크로마토그래피하여 정제하였다.

(m) N-[2-[(S)-2-[(메톡시아세틸)티오]-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; [α]_D-55.27°; (c = 1.084, CH₃0H)

(n) N-[2-[(S)-2-[(모르폴리노아세틸)티오]-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; [α]_D-48.61°(c = 1.098, CH₃0H)

(o) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-2-(4-테트라히드로피라닐)아세틸아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; [α]_D ²⁰-55.4°(c = 0.83, DMSO)

출발물질인 (D)-α-브로모-α-(4-테트라히드로피라닐)-아세트산은 다음과 같이 제조할 수 있다:

35 mL의 물 중의 아질산나트륨 (4.71 g, 68.3 mmol)의 용액을 35 mL의 물 중의 (D)-α-브로모-α-(4-테트라히드로피라닐)-글리신 [J. Am. Chem. Soc., Vol. 117, pp. 9375-9376 (1995)] (7.05 g, 44.3 mmol) 및 48% HBr (aq) (70 mL)의 냉각된 (0℃) 용액에 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 혼합물을 실온으로 가온하고 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기 층을 물, 5% 수성 티오황산나트륨, 및 염수로 차례로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 혼합물을 여과하고 진공 하에서 농축하여 (D)-α-브로모-α-(4-테트라히드로피라닐)-아세트산을 고체로 얻었다.

(p) N-[2-[(S)-2-[(1-(1,2,4)-트리아졸릴)아세틸티오]-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; m.p. 106-107°; [α]_D-61.46°(c= 1.09, CH₃0H)

(q) N-[2-[(S)-2-[(4-메틸피페라지노)아세틸티오]-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; m.p.95-96°; [α]_D-48.5°(c = 0.935, CH₃0H)

(r) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-에틸부타노일]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; [α]_D-83.6°(c = 1.07, CH₃0H).

(s) N-[2-[(S)-2-(모르폴리노아세틸티오)-3,3-디메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; [α]_D-55.5°(c = 1.008, DMSO)

(t) N-[2-[(S)-2-[(메톡시아세틸)티오]-3,3-디메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르; [α]_D-61.67°(c = 1.024, DMSO)

(u) N-[2-[(S)-2-(아세틸티오)펜타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르

(v) N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-(4-바이페닐릴메틸)-L-세린 에틸 에스테르

실시예 2

N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-S-벤질-L-시스테인 에틸 에스테르

표제 화합물은 실시예 1과 유사하게 제조하고 메틸 t-부틸 에테르/헥산으로부터 재결정하였다, m.p.69-71℃.

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다:

에탄올 (200 mL) 중의 BOC-S-벤질-L-시스테인 (9.33 g, 30 mmol)의 용액에 HCl(g)을 15 분 동안 버블링시켰다. 용기에 마개를 하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 진공 하에서 용매를 증발시키고 잔류물을 디에틸 에테르 (150 mL) 중에서 1.5시간 동안 교반하여 S-벤질-L-시스테인 에틸 에스테르 염산염을 고체로서 얻었다.

메틸렌 클로라이드 (200 mL) 중의 S-벤질-L-시스테인 에틸 에스테르 염산염 (7.98 g, 29 mmol), BOC-α-메틸알라닌 (5.89 g, 29 mmol), 트리에틸아민 (2.93 g, 29 mmol), 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBT, 3.92 g, 29 mmol) 및 EDCI (5.57 g, 29 mmol)의 혼합물을 아르곤 대기 하, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시켜 건조하고 잔류물을 에틸 아세테이트 (200 mL)에 용해시켰다. 용액을 물 (50 mL), 1 N HCl (50 mL), 물 (50 mL), 5% 중탄산나트륨 (50 mL), 물 (50 mL) 및 마지막으로 염수 (25 mL)로 세척하였다. 그 후 용액을 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고 증발시켜서 건조하여 N-[2-(BOC-아미노)-2-메틸프로피오닐]-S-벤질-L-시스테인 에틸 에스테르를 얻었다.

실시예 3

N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-(S)-2-아미노-3-(벤질설포닐)-프로피온산 에틸 에스테르

상기 화합물을 실시예 1과 유사하게 제조하였다.

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다:

메틸렌 클로라이드 (250 mL) 중의 N-[2-(BOC-아미노)-2-메틸프로피오닐]-S-벤질-L-시스테인 에틸 에스테르 (7.21 g, 17 mmol)의 용액에 아르곤 대기 하에서 m-클로로-과벤조산 (8.77 g, 51 mmol)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 증발시켜 건조하고, 잔류물을 에틸 아세테이트 (300 mL)에 용해시켰다. 용액을 5% 중탄산나트륨 (3 x 50 mL), 물 (50 mL) 및 염수 (25 mL)로 세척하였다. 용액을 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 진공 하에서 증발시켜서 N-[2-(BOC-아미노)-2-메틸프로피오닐]-(S)-2-아미노-3-(벤질설포닐)-프로피온산 에틸 에스테르를 얻었다.

실시예 4

(a) N²-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-(S)-2-아미노-3-(벤조일아미노)-프로피온산 메틸 에스테르

메틸렌 클로라이드 (10 mL) 중의 벤조일 클로라이드 (0.085 mL, 0.73 mmol), N²-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-(S)-2,3-디아미노프로피온산 메틸 에스테르 염산염 (0.29 g, 0.73 mmol) 및 트리에틸아민 (0.15 mL, 1.49 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 증발시켜 건조하고, 잔류물을 에틸 아세테이트에 용해시키고, 용액을 물에 이어 포화 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조하고, 증발시켜 건조하여 오일을 얻었다. 이 오일을 헥산, 에틸 아세테이트 (50:50)을 사용하여 실리카겔 상에서 크로마토그래피하여 표제 화합물을 백색 포말로 얻었다; m.p.48-54℃.

(b) 유사하게 N²-[2[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-(S)-2-아미노-3-(벤젠설폰아미도)프로피온산 메틸 에스테르를 제조하였다; m.p. 47-51℃; [α]_D ²⁰-41.72 (c = 1.03, CH₃0H).

출발 물질은 다음과 같이 제조하였다:

메틸렌 클로라이드 (50 mL) 중의 (S)-2-아미노-3-(BOC-아미노)-프로피온산 메틸 에스테르 염산염 (4.6 g, 2.1 mmol), N-CBZ-α-메틸알라닌 (5.0 g, 2.1 mmol), HOAT (2.87 g, 2.1 mmol), EDCI (4.02 g, 2.1 mmol) 및 트리에틸아민 (2.93 g, 2.1 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조하고 진공 하에서 농축하였다. 생성된 오일을 헥산 및 에틸아세테이트 (1:1)로 실리카겔 상에서 크로마토그래피하여 N²-[2-(CBZ-아미노)-2-메틸프로피오닐]-(S)-2-아미노-3-(BOC-아미노)-프로피온산 메틸 에스테르를 백색 포말로서 얻었다; m.p. 100-101℃.

에탄올 (50 mL) 중의 상기 생성물 (2.14 g, 4.90 mmol) 및 차콜상의 10% 팔라듐 (0.27 g)의 혼합물을 파르 병 (Parr bottle)에서 45 psi의 압력 하에서 4 시간 동안 수소화시켰다. 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과시키고 진공 하에서 농축하여 N²-[2-아미노-2-메틸프로피오닐]-(S)-2-아미노-3-(BOC-아미노)-프로피온산 메틸 에스테르 염산염을 오일로서 얻었다.

메틸렌 클로라이드 (75 mL) 중의 상기 생성물 (2.28 g, 8.09 mmol), (R)-2-브로모-3-메틸부탄산 디이소프로필 아민 염 (2.16 g, 7.13 mmol), EDCI (1.43 g, 7.49 mmol) 및 HOAT (1.15 g, 8.52 mmol)의 용액을 실온에서 16 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 증발시켜 건조하고, 잔류물을 에틸 아세테이트로 취했다. 에틸 아세테이트 용액을 물, 포화 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고 무수 황산마그네슘 상에서 건조하고, 진공 하에서 농축하였다. 생성된 오일을 헥산 및 에틸 아세테이트 (40:60)로 실리카겔 상에서 크로마토그래피하여 N²-[2-[(R)-2-브로모-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-(S)-2-아미노-3-(BOC-아미노)-프로피온산 메틸 에스테르를 백색 포말로서 얻었다.

테트라히드로푸란 (50 mL) 중의 상기 생성물 (1.31 g, 2.82 mmol) 및 포타슘 티오아세테이트 (1.28 g, 11.2 mmol)의 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하고 에틸 아세테이트로 희석하였다. 혼합물을 물, 포화 중탄산나트륨 용액, 염수로 세척하고, 황산 마그네슘 상에서 건조하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축하여 건조하고, 생성된 오일을 헥산 및 에틸 아세테이트 (40:60)로 실리카겔 상에서 크로마토그래피하여 N-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-(S)-2-아미노-3-(BOC-아미노)-프로피온산 메틸 에스테르를 얻었다.

염화수소 기체를 50 mL의 메틸렌 클로라이드 중의 상기 화합물 (1.01 g, 2.19 mmol)의 용액을 통하여 약 5 분 동안 버블링시키고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반한 후, 진공 하에서 농축하여 N²-[2-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-(S)-2,3-디아미노프로피온산 메틸 에스테르 염산염을 얻었다.

실시예 5

메틸렌 클로라이드 중의 1-[(R)-2-브로모-3-메틸부타노일아미노]시클로펜탄카르복실산 (1 g, 3.42 mmol), O-벤질-L-세린 에틸 에스테르 염산염 (0.89 g, 3.42 mmol), 디시클로헥실카르보디이미드 (0.7 g, 3.42 mmol) 및 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸 (0.47 g, 3.42 mmol)의 용액에 트리에틸아민 (0.48 mL, 3.42 mmol)을 첨가했다. 혼합물을 24 시간 동안 교반한 후 염수로 세척하고 진공 하에서 농축하여 담황색 오일을 얻었다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여 하기 화학식의 N-[1-(R)-2-브로모-3-메틸부타노일아미노]-시클로펜탄카르보닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르를 얻었다.

브로모 화합물 (0.7 g, 1.41 mmol)을 테트라히드로푸란 (50 mL)에 용해시키고 포타슘 티오아세테이트 (0.19 g, 1.69 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 실온에서 18 시간 동안 교반한 후 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고 진공하에서 농축하여 황색 오일을 얻었다. 조 생성물을 플래시 크로마토그래피 (실리카겔, 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여 반-고체를 얻었고, 이를 헥산으로 연마하여 하기 화학식의 N-[1-[(S)-2-아세틸티오-3-메틸부타노일아미노]-시클로펜탄카르보닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르를 얻었다.

1-[(R)-2-브로모-3-메틸부타노일아미노]시클로펜탄카르복실산 출발 물질은 본질적으로 WO 99/55726호에 기재된 방법으로 (R)-2-브로모-3-메틸부탄산 디이소프로필아민 염 (L-발린으로부터 제조됨)과 시클로류신 메틸 에스테르 염산염과의 축합에 의해 제조하였다.

실시예 6

(a) N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린

메탄올 (10 mL) 중의 실시예 1의 S-아세틸 에틸 에스테르 (0.47 g, 1 mmol)의 용액에 1 N 수산화나트륨 (5.0 mL, 5 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하고 1 N HCl을 사용하여 pH 1로 산성화한 후 진공 하에서 농축하였다. 잔류물에 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 혼합물을 1 N NaOH로 세척하였다. 합한 수상을 산성화하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조한 후 진공 하에서 농축하였다. 헥산으로 연마하여 백색 포말을 얻었다; m.p.57-70℃; [α]_D ²⁰-16.8°(c = 1.032, DMSO); MS (M+H): 397.

유사하게 하기 화합물을 제조하였다:

(b) N-[1-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-시클로펜탄카르보닐]-O-벤질-L-세린;m.p. 132-136℃ (헥산/t-부틸메틸 에테르로부터 결정화)

(c) N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-S-벤질-L-시스테인; m.p. 81-87℃; [α]_D ²⁰-37.87 (c = 0.545, DMSO)

(d) N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-트레오닌; m.p. 61-64℃

(e) N-[2-[(S)-2-머캅토-3,3-디메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린; m.p. 128-130℃; [α]_D-2.46 (c = 1.06, DMSO)

(f) N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-(4-플루오로벤질)-L-세린; m.p. 50-54℃

(g) N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-(4-플루오로페닐)-L-호모세린; m.p. 127-128℃

(h) N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-(3-플루오로페닐)-L-호모세린; m.p. 50-56℃

(i) N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메톡시부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린; [α]_D ²⁰+18.85 (c = 0.997, DMSO)

j) N-[2-[(S)-2-머캅토-2-(4-테트라히드로피라닐)아세틸아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린; m.p. 184-189℃; [α]_D ²⁰-24.94 (c = 1.013, DMSO)

실시예 7

(a) N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-S-벤질-L-시스테인 에틸 에스테르

아르곤 대기 하에서, 실시예 2의 티오아세틸 화합물 (0.48 g, 1.0 mmol)을 무수 EtOH (5 mL)에 용해시키고 1 N NaOH (1.0 mL, 1.0 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반한 후 1 N HCl로 pH 3이 될 때까지 처리하였다. 혼합물을 증발시켜서 대부분의 EtOH를 제거하고 수성 잔류물을 EtOAc (2 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 추출물을 H₂O (5 mL)에 이어 염수 용액 (5 mL)으로 세척하였다. 용액을 Na₂SO₄상에서 건조하고, 여과하고 진공 하에서 농축하였다. 생성물을tert-부틸 메틸 에테르/헥산으로 고체화하여 생성물을 얻었다; m.p. 87-91℃.

(b) 유사하게 N-[2-[(S)-2-머캅토-2-(4-테트라히드로피라닐)아세틸아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르를 제조하였다; m.p. 85-93℃; [α]_D-37.21° (c = 1.012, DMSO)

(c) 유사하게 N-[2-[(S)-2-머캅토-3,3-디메틸부타노일아미노]-2-메틸프로피오닐]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르를 제조하였다; 오일; [α]_D-20.9°(c = 1.025, DMSO)

(d) 유사하게 N-[2-[(S)-2-머캅토-3-메틸부타노일아미노]-2-에틸부타노일]-O-벤질-L-세린 에틸 에스테르를 제조하였다; [α]_D-31.48°(c = 0.955, CH₃0H)

Claims

하기 화학식 I의 화합물 또는 R₃가 수소인 화학식 I의 화합물로부터 유도된 디설파이드 유도체, 또는 이들의 제약학적으로 허용가능한 염.

<화학식 I>

상기 식에서,

R은 수소, 저급 알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴-저급 알킬 또는 시클로알킬-저급 알킬을 나타내고;

R₁은 저급 알킬, 시클로알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴, 또는 바이아릴을 나타내거나; 또는 R₁은 (시클로알킬, 카르보시클릭 아릴, 헤테로시클릭 아릴 또는 바이아릴)-저급 알킬을 나타내고;

alk는 저급 알킬렌을 나타내고;

R₃는 수소 또는 아실을 나타내고;

R₄는 수소, 임의 치환된 저급 알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴,(카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬-저급 알킬, 바이아릴, 바이아릴-저급 알킬, 옥사시클로알킬, 티아시클로알킬, 아자시클로알킬, 또는 (옥사시클로알킬, 티아시클로알킬 또는 아자시클로알킬)-저급 알킬을 나타내고;

R₅는 수소 또는 저급 알킬을 나타내거나; 또는

R₄및 R₅는 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 시클로알킬리덴, 벤조-융합된 시클로알킬리덴; 또는 각각 저급 알킬 또는 아릴-저급 알킬에 의해 임의로 치환되는 5- 또는 6-원 (옥사시클로알킬리덴, 티아시클로알킬리덴 또는 아자시클로알킬리덴)을 나타내고;

R₆은 저급 알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴,(카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬, 시클로알킬, 시클로알킬-저급 알킬, 바이아릴 또는 바이아릴-저급 알킬을 나타내고;

R₇은 저급 알킬, (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬, 시클로알킬-저급 알킬 또는 바이아릴-저급 알킬을 나타내거나; 또는

R₆및 R₇은 이들이 부착되어 있는 탄소 원자와 함께 저급 알킬 또는 아릴-저급 알킬에 의해 치환될 수 있거나 포화 또는 불포화 카르보시클릭 5- 내지 7-원환에 융합될 수 있는 3- 내지 10-원 시클로알킬리덴; 또는 각각 저급 알킬 또는 아릴-저급 알킬에 의해 임의로 치환되는 5- 또는 6-원 (옥사시클로알킬리덴, 티아시클로알킬리덴 또는 아자시클로알킬리덴); 또는 2,2-노르보닐리덴을 나타내고;

X는 -O-, -S(O)_n-, -NHSO₂-, 또는 -NHCO-를 나타내고;

n은 0, 1 또는 2이고;

COOR₂는 카르복실 또는 제약학적으로 허용가능한 에스테르의 형태로 유도체화된 카르복실을 나타낸다.
제1항에 있어서, 하기 화학식 Ia의 화합물 또는 R₃가 수소인 화학식 Ia의 화합물로부터 유도된 디설파이드 유도체, 또는 이들의 제약학적으로 허용가능한 염.

<화학식 Ia>
제1항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 저급 알킬, C₅- 또는 C₆-시클로알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴, 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; alk가 저급 알킬렌을 나타내고; X가 -O- 또는 -S(O)_n을 나타내고 (여기서, n은 0 또는 2임); R₃이 수소 또는 아실을 나타내고; R₄가 수소, 임의로 치환된 저급 알킬, 옥사시클로알킬, 옥사시클로알킬-저급 알킬 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; R₅가 수소를 나타내거나; 또는 R₄및 R₅가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C₅또는 C₆-시클로알킬리덴을 나타내고; R₆및 R₇이 저급 알킬을 나타내거나; 또는 R₆및 R₇이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 5- 또는 6-원 시클로알킬리덴을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 제약학적으로 허용가능한 에스테르의 형태로 유도체화된 카르복실을 나타내는 화합물, 또는 R₃가 수소인 상기 화합물로부터 유도된 디설파이드 유도체, 또는 이들의 제약학적으로 허용가능한 염.
제2항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 저급 알킬, C₅- 또는 C₆-시클로알킬, 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴, 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; alk가 저급 알킬렌을 나타내고; X가 -O- 또는 -S(O)_n을 나타내고 (여기서, n은 0 또는 2임); R₃이 수소 또는 아실을 나타내고; R₄가 수소, 임의로 치환된 저급 알킬, 옥사시클로알킬, 옥사시클로알킬-저급 알킬 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; R₅가 수소를 나타내거나; 또는 R₄및 R₅가 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 C₅또는 C₆-시클로알킬리덴을 나타내고; R₆및 R₇이 저급 알킬을 나타내거나; 또는 R₆및 R₇이 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 5- 또는 6-원 시클로알킬리덴을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 제약학적으로 허용가능한 에스테르의 형태로 유도체화된 카르복실을 나타내는 화합물, 또는 R₃가 수소인 상기 화합물로부터 유도된 디설파이드 유도체, 또는 이들의 제약학적으로 허용가능한 염.
제1항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; R₃가 수소 또는 임의로 치환된 저급 알카노일을 나타내고; R₄가 저급 알킬, 시클로알킬, 테트라히드로피라닐 또는 C₁-C₄-저급 알콕시-저급 알킬을 나타내고; R₆및 R₇이 모두 C₁-C₄-알킬을 나타내고 서로 동일하며; X가 -O- 또는 -S-를 나타내고; alk가 메틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실, 저급 알콕시-카르보닐, (디-저급 알킬아미노카르보닐)-저급 알콕시카르보닐 또는 (모르폴리노카르보닐, 피페리디노카르보닐 또는 피롤리디노카르보닐)-저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
제2항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴 또는 (카르보시클릭 또는 헤테로시클릭 아릴)-저급 알킬을 나타내고; R₃가 수소 또는 임의로 치환된 저급 알카노일을 나타내고; R₄가 저급 알킬, 시클로알킬, 테트라히드로피라닐 또는 C₁-C₄-저급 알콕시-저급 알킬을 나타내고; R₆및 R₇이 모두 C₁-C₄-알킬을 나타내고 서로 동일하며; X가 -O- 또는 -S-를 나타내고; alk가 메틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실, 저급 알콕시-카르보닐, (디-저급 알킬아미노카르보닐)-저급 알콕시카르보닐 또는 (모르폴리노카르보닐, 피페리디노카르보닐 또는 피롤리디노카르보닐)-저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
제1항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 카르보시클릭 아릴 또는 카르보시클릭 아릴-저급 알킬을 나타내고 (여기서, 카르보시클릭 아릴은 페닐 또는 1 또는 2 개의 히드록시, 저급 알카노일옥시, 저급 알킬, 저급 알콕시, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시 또는 할로로 치환된 페닐을 나타냄); R₃가 수소 또는 저급 알카노일을 나타내고; R₄가 저급 알킬, 4-테트라히드로피라닐 또는 C₁-C₄-저급 알콕시-C₁-C₄-저급 알킬을 나타내고; R₆및 R₇이 메틸을 나타내고; X가 -O-를 나타내고; alk가 메틸렌 또는 에틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
제2항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 카르보시클릭 아릴 또는 카르보시클릭 아릴-저급 알킬을 나타내고 (여기서, 카르보시클릭 아릴은 페닐 또는 1 또는 2 개의 히드록시, 저급 알카노일옥시, 저급 알킬, 저급 알콕시, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시 또는 할로로 치환된 페닐을 나타냄); R₃가 수소 또는저급 알카노일을 나타내고; R₄가 저급 알킬, 4-테트라히드로피라닐 또는 C₁-C₄-저급 알콕시-C₁-C₄-저급 알킬을 나타내고; R₆및 R₇이 메틸을 나타내고; X가 -O-를 나타내고; alk가 메틸렌 또는 에틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
제1항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 페닐, 플루오로페닐, 벤질 또는 플루오로벤질을 나타내고; R₃가 수소, 저급 알카노일 또는 저급 알콕시로 치환된 저급 알카노일을 나타내고; R₄가 이소프로필, tert-부틸, 1-메톡시에틸 또는 4-테트라히드로피라닐을 나타내고; R₆및 R₇이 메틸을 나타내고; X가 -O-를 나타내고; alk가 메틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
제2항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 페닐, 플루오로페닐, 벤질 또는 플루오로벤질을 나타내고; R₃가 수소, 저급 알카노일 또는 저급 알콕시로 치환된 저급 알카노일을 나타내고; R₄가 이소프로필, tert-부틸, 1-메톡시에틸 또는 4-테트라히드로피라닐을 나타내고; R₆및 R₇이 메틸을 나타내고; X가 -O-를 나타내고;alk가 메틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 저급 알콕시카르보닐을 나타내는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
제10항에 있어서, R 및 R₅가 수소를 나타내고; R₁이 벤질을 나타내고; R₃가 수소, 아세틸 또는 메톡시아세틸을 나타내고; R₄가 이소프로필 또는 tert-부틸을 나타내고; R₆및 R₇이 메틸을 나타내고; X가 -O-를 나타내고; alk가 메틸렌을 나타내고; COOR₂가 카르복실 또는 에톡시카르보닐을 나타내는 화합물 또는 그의 제약학적으로 허용가능한 염.
안지오텐신 전환 효소 및 중성 엔도펩티다제를 모두 억제할 필요가 있는 포유류에게 유효량의 제1항에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 포유류에서 안지오텐신 전환 효소 및 중성 엔도펩티다제를 모두 억제하는 방법.
심혈관계 질환을 예방 또는 치료할 필요가 있는 포유류에게 유효량의 제1항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 포유류의 심혈관계 질환의 예방 또는 치료 방법.
제12항에 있어서, 고혈압, 부종, 염 저류 또는 울혈성 심부전을 치료하기 위한 방법.
1 이상의 제약학적으로 허용가능한 담체와 함께 유효량의 제1항의 화합물을 포함하는 제약 조성물.