KR20010083876A

KR20010083876A - 피부 외용제

Info

Publication number: KR20010083876A
Application number: KR1020017003865A
Authority: KR
Inventors: 이치오카미노루; 소네토시로; 하나미즈토모코; 오화키마코토; 치바카츠요시; 미야자키코지; 히라키요시오; 요시카와사토시
Original assignee: 구와하라 쥰; 가부시키가이샤 야쿠루트 혼샤
Priority date: 1998-10-09
Filing date: 1999-10-05
Publication date: 2001-09-03
Also published as: ATE334725T1; DE69932621D1; WO2000021501A1; BR9914476A; BR9914476B1; EP1120108A1; KR100577914B1; JP3618296B2; US6461627B1; EP1120108B1; EP1120108A4

Abstract

비피도박테리움 속 세균에서 선택한 1종 또는 2종 이상의 미생물을 대두 추출액에 작용시켜 얻어진 발효생성물을 유기 용매로 추출하여 제조된 발효대두추출물을 함유하는 피부 외용제 및 화장료. 이 피부 외용제 및 화장료는 주름개선효과 및 거친 피부개선효과가 우수하다.

Description

피부 외용제{SKIN PREPARATIONS FOR EXTERNAL USE}

종래, 대두 추출액 또는 그의 일종인 두유를 화장료에 이용한 예는 이미 보고되어 있으며, 미백효과가 있는 것으로 확인되어 있다. 또한, 이들 중에서 두유의 발효생성물(이하, 「발효 두유」라 한다.)를 화장료에 이용한 것으로는 리조푸스(Rhizopus)속의 미생물을 작용시킨 것(일본국 특개평 1-102011호 공보) 및 유산균을 작용시킨 것(일본국 특개평 3-127715호)을 들 수 있다.

그러나, 이들 발효 두유가 연령 또는 자외선에 의한 피부노화에 의해 발생하는 주름이나 피부 거침을 개선한다는 보고는 없다.

따라서, 본 발명의 목적은 이러한 주름이나 피부 거침을 개선할 수 있는 피부 외용제를 제공하는 것이다.

본 발명은 피부거침 개선효과 및 피부노화 방지효과 등에 우수한 피부 외용제 및 화장료에 관한 것이다.

도 1은 발효두유추출물의 주름 형성에 미치는 효과를 나타내는 도이다[*: 발효두유에 비교하여 유의(p<0.05, n=5)].

도 2는 발효두유추출물의 피부의 골-융기 수의 감소에 미치는 효과를 나타내는 도이다[*: 발효두유에 비교하여 유의(p<0.05, n=5)].

도 3은 발효두유추출물의 피부중의 히알루론산 함량에 미치는 효과를 나타내는 도이다[수치는 Mean±SD (n=3 또는 6), *(p<0.05) 및 **(p<0.01)는 콘트롤(50% 에탄올)에 대하여 유의].

[발명을 실시하기 위한 최량의 형태]

본 발명의 피부 외용제에 사용되는 발효대두추출물은 비피도박테리움속 세균을 대두추출액에 작용시켜 얻어지는 발효생성물을 유기 용매로 추출한 것이며, 여기에 사용되는 대두 추출액으로서는 대두의 물 추출액인 두유가 특히 바람직하다.

따라서, 두유로부터 본 발명의 피부 외용제를 제조하는 공정의 일례를 하기에 든다.

(1) 두유의 제조 (공정 1)

본 발명에서 사용되는 두유는 어떠한 방법으로도 제조될 수 있다. 예를 들면, 원료인 대두를 물에 불린 후, 열수 또는 0.5∼1.0중량%의 탄산나트륨을 함유하는 열수를 첨가한 후, 마쇄한 후, 비지를 제거하고, 가열 살균함으로서 제조할 수 있다. 통상 고형분 10%정도의 것을 사용한다.

여기서, 본 발명에서 사용되는 두유의 원료인 대두는 특별한 제한이 없으나 유지를 함유하는 둥근 대두, 탈피 대두, 또한 플레이크 대두 등을 원료로 사용하는 것이 바람직하며, 특히 탈피대두를 원료로 하는 것이 더욱 바람직하다.

또한, 이들 두유에는 필요에 따라, 제조후, 다음 공정인 미생물처리를 위하여 자당, 포도당, 과당, 전화당 등의 식품에 사용되는 당이나, 고기 엑기스, 효모 엑기스, 펩톤, 펩티드 등의 미생물 증식에 필요한 영양소를 첨가해도 좋다. 미생물 증식에 최적인 두유의 pH로 조절하기 위해, 시트르산, 말산, 아스코르브산, 락트산, 아세트산 등의 식품에 사용하는 산을 두유에 첨가하여도 좋다.

(2) 대두의 발효(공정 2)

상기 공정 1에서 제조한 두유에 미생물을 작용시키는 방법은 특히 한정되지 않으며, 예를 들면, 배양된 미생물 균액을 상기 두유에 접종한 후, 그 미생물에 적당한 온도(비피도박테리움속 세균인 경우, 통상 20∼39℃이다.), 시간, 조건을 적당히 결정하여 발효를 행하면 좋고, 교반배양 또는 정치배양의 어는 것이어도 좋다. 또, 발효는 여러 종의 균주를 조합한 혼합발효이어도 좋고, 여러 종의 균주를 조합한 연속발효이어도 좋다.

대두 추출액에 작용시키는 비피도박테리움속 세균에 속하는 미생물로서는 특히 한정되지 않으며, 예를 들면, 비피도박테리움 브레이브, 비피도박테리움 비피덤, 비피도박테리움 론검, 비피도박테리움 아도레스센티스, 또는 비피도 박테리아 인판티스 등을 들 수 있으며, 이들은 1종이어도 또는 2종 이상을 혼합하여 사용하여도 좋다. 또한, 이들 미생물과 함께 락토바실루스 속, 스트렙토코쿠스 속, 락토코쿠스 속 및 엔테로코쿠스 속 등의 유산균에서 발효시키고, 이 발효생성물을 이용하여도 좋다.

(3) 발효생성물의 추출 (공정 3)

공정 2에서 얻어진 발효생성물을 추출하는 유기 용매는 특히 한정되지 않으나, 탄소수 1∼13의 1가 또는 다가 알코올, 헥산, 벤젠, 아세톤, 에틸 아세테이트, 디메틸술폭시드, 에테르 등을 들 수 있다. 구체적으로는, 메탄올, 에탄올 등의 저급 알코올(1가 알코올), 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 이소프렌글리콜, 글리세롤 등의 다가 알코올을 들 수 있다. 발효생성물을 유기용매로 추출하면 주름 형성 및 피부 거침을 개선하고 피부의 히알루론산 함량을 높이는 성분이 얻어진다.

그러나, 발효생성물을 추출하는 용매의 종류에 따라, 피부 거침 방지의 유효성분 및 냄새의 원인성분(휘발성분)의 추출량이 달라진다. 즉, 분자량이 작거나, 히드록실기가 1개이거나 히드록시기를 갖지 않은 용매를 사용하면 불쾌한 향의 휘발 성분을 보다 많이 추출하게 되고, 화장품 등의 소재로서 사용할 때 가치가 저하된다. 반대로, 분자량이 큰 용매를 사용할 경우, 유효성분의 추출량은 다소 감소하고, 또한 화장품 등에 배합할 때 끈적거림이 생긴다.

따라서, 추출용매로서는 탄소수 3∼13의 다가 알코올이 바람직하고, 이러한용매를 사용하면 불쾌한 악취를 최소화하고, 사용감이 우수한 추출물을 얻을 수 있다. 이러한 다가 알코올로서, 구체적으로는 1,3-부틸렌알코올, 글리세롤, 프로필렌글리세롤, 이소프렌글리콜 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 또는 배합하여 사용될 수 있다. 여기서 다가 알코올이란 동일 분자 내에 수산기가 2개 또는 그 이상인 알코올이며, 어떠한 방법으로 제조된 것이어도 사용할 수 있다.

이들 유기용매를 사용하여 추출할 때, 발효생성물 1중량부에 대하여 0.01∼100 중량부의 유기용매를 첨가한 후, 여과 또는 원심분리하여 고극성 물질을 제거한다. 추출온도는 4℃에서 각각의 단독 또는 2종 이상의 혼합용매의 비등점 사이의 어떠한 온도라도 좋고, 추출 시간은 15분∼48시간 정도의 범위 내가 좋다.

이렇게 해서 얻어진 발효생성물 추출물을 피부 외용제로 사용하는 경우에는 그대로 용액으로서 사용하여도 좋으나, 다시 원심분리, 여과 등의 수단으로 불용물을 제거한 용액으로서 감압건조, 가열건조, 풍건 등의 수단으로 농축한 용액 또는 고형물로서, 또는 물, 알코올 등으로 희석한 용액으로도 사용가능하다. 이들의 사용량은 추출물의 고형분 농도로 0.005∼50중량%, 특히 0.01∼10중량%가 바람직하다. 0.005중량% 미만의 양으로는 충분한 거친피부 개선효과를 얻지 못하는 경우가 있고, 반면에 50중량%를 초과하면 다소 두유 유래의 악취가 난다.

본 발명의 피부 외용제로는 치료용 외용제 또는 화장료가 있고, 이중에서 화장료가 더욱 바람직하다. 특히, 피부노화방지용 화장료 또는 거친 피부개선용 화장료가 바람직하다.

본 발명의 화장료는, 히알루론산 등의 무코다당류; 글리세롤; 두유에 유산균을 접종하여 얻은 배양액; 우유성분의 유산균배양액 등; 피롤리돈 카르복실산, α-히드록시산, 트리메틸글리신 등의 보습성분을 배합하면 보습효과를 증진시킬 수 있다. 이들 보습성분 중 히알루론산이 특히 바람직하다.

또한, 본 발명의 화장료에는, 본 발명의 효과를 방해하지 않는 범위에서 공지된 화장료 성분, 예를 들면 물, 알코올류, 오일성분, 계면활성제, 수용성 고분자, 비타민류, 방부제, 향료, 색소 등을 배합할 수 있다.

본 발명의 화장료는 통상의 방법으로 제조할 수 있으며, 화장수, 유액, 보습 크림, 클렌징 크림, 마사지 크림, 세안 크림, 팩, 미용액 등 각종 형태로 할 수 있다.

이러한 실정을 감안한 본 발명자는 광범위한 연구를 한 결과, 의외로 비피도박테리움(Bifidobacterium)속 세균을 대두추출액에 작용시켜 얻어지는 발효생성물을 유기 용매로 추출하면, 피부 거침 및 주름 발생을 개선할 수 있는 발효대두추출물을 얻을 수 있다는 것을 발견하고 본 발명을 완성하였다.

즉, 본 발명은 비피도박테리움속 세균에서 선택한 1종 또는 2종 이상의 미생물을 대두 추출액에 작용시켜 얻어지는 발효생성물을 유기용매로 추출한 발효 대두 추출물을 함유하는 피부 외용제를 제공하는 것이다.

이하, 본 발명은 실시예를 들어 더 구체적으로 설명하나, 이들 실시예에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.

실시예 1

대두를 수세하고, 하루 밤 동안 물에 침지하여 충분히 물을 흡수시키고, 4배량의 물을 가하고, 믹서로 분쇄하여 페스트상을 얻었다. 이 페스트상을 100℃에서 30분간 가열한 후, 냉각하고, 여과하여 두유를 얻었다. 이 두유를 100℃에서 90분간 증기 멸균하여 발효용 두유 원액을 제조하였다. 전배양한 공지의 균주인 비피도박테리움 브레브 FERM P-15488주(일본국 특허공개평10-130160호, 공개일 1998년 5월 19일)의 균액을 발효용 두유 원액에 접종한 후, 접종 두유를 37 ℃에서 24시간 동안 정치 배양하여 발효두유를 얻었다.

이렇게 하여 얻어진 발효두유(100 ㎖)에 에탄올 또는 1,3-부틸렌글리콜 (300 ㎖)을 첨가하고 이 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반한 후, 9000 rpm에서 30분 동안 원심분리하여 생성된 침전을 제거하였다. 에탄올로 추출하여 얻어진 발효 두유 에탄올 추출액을 감압 건조한 후, 얻어진 추출물(2.3 g)을 50% 에탄올(100 ㎖)에 용해하여 도포 샘플로 하였다.

실시예 2

대두를 수세하고, 하루 밤 동안 물에 침지하여 대두가 물을 충분히 흡수하도록 하였다. 물에 담긴 대두에 대두 4배량의 물을 가하고, 믹서로 분쇄하여 페스트상을 얻었다. 이 페스트상을 100℃에서 30분간 가열하고, 냉각 후, 여과하여 두유를 얻었다.

다시 얻어진 두유를 100℃에서 90분간 증기 멸균하여 발효용 두유 원액을 조제하였다. 전배양한 비피도박테리움 브레브 FERM P-15488 주의 균액을 발효용 두유원액에 접종한 후, 37℃에서 24시간 동안 정치배양하여 발효두유를 얻었다.

이렇게 하여 얻어진 발효두유(100 ㎖) 및 발효두유(100 ㎖)에 에탄올(100 ㎖)을 각각 첨가하고, 실시예 1과 같이, 교반, 원심분리하여 두유 및 발효두유 추출액을 얻었다. 이렇게 얻은 두유 및 발효두유를 피부 도포용 샘플로 하였다.

시험예 1

실시예 1에서 제조한 발효두유 에탄올추출액 및 발효두유(미추출액)을 샘플로 사용하여 피부표면형태 개선효과를 검토하였다. 키스(Kiss et. al., Photochem. Photobiol. 53, 109. 1991)의 방법에 따라, 제모한 마우스의 피부에 자외선을 조사하고, 각각의 샘플을 4주 동안 10㎕/㎠/일 사용량으로 마우스의 피부에 도포하였다. 4주간후에 주름를 화상해석을 이용하여 정량하고, 측정한 전체의 피부면적에서 차지한 주름부분 면적의 증가율을 구하였다. 그 결과를 도 1에 나타낸다.

도 1로부터 본 발명의 발효 두유의 추출물은 콘트롤(샘플 무도포) 또는 미추출물을 도포한 마우스 군과 비교하여 우수한 주름 개선효과를 나타내었다. 따라서, 발효 두유 추출물은 피부노화방지제로 유용하다는 것이 증명되었다.

에탄올 대신 1,3-부틸렌글리콜을 사용한 것 외에는 상기와 동일하게 시험을 하였지만, 에탄올로 추출한 경우와 거의 동일한 결과를 얻었다.

냄새, 사용감에 대한 관능평가기준표
냄새에 대한 관능 평가(휘발성분의 냄새)	사용감에 대한 관능 평가(끈적거림 등)	평가점
매우 강한 냄새가 난다	사용감이 매우 나쁘다	4점
강한 냄새가 난다	사용감이 다소 나쁘다	3점
냄새가 난다	사용감이 보통이다	2점
약간 냄새가 난다	사용감이 다소 좋다	1점
냄새가 없다	사용감이 대단히 좋다	0점

시험예 2

시험예 1과 동일한 샘플을 동일한 마우스에 도포하여 화상해석을 통하여 피부주름(주름골·융기)의 수를 정량하고, 자외선 조사로 감소한 주름골·융기 수를 나타냈다. 그 결과를 도 2에 나타낸다.

도 2로부터 발효두유 에탄올추출물은 콘트롤군(샘플 무도포) 또는 미추출물을 도포한 마우스군과 비교하여 우수한 피부감촉 개선효과를 나타낸다. 따라서, 발효두유 에탄올추출물은 거친 피부 개선 화장료로 유용하다는 것이 증명되었다.

에탄올 대신 1,3-부틸렌글리콜을 사용하는 것 이외에는 상기와 동일한 시험을 하였지만, 에탄올로 추출한 경우와 거의 동일한 결과를 얻었다.

시험예 3

각종 유기용매가 발효두유액의 추출물 성분의 냄새 및 유효성분의 사용감에 미치는 영향을 검토하였다.

발효두유액에 표 2에 나타낸 각종 용매를 동량(1:1 부피비) 혼합하고, 이 혼합물을 하루 밤 동안 방치한 후, 여과하고, 혼합물의 냄새를 관능평가하고 유효성분의 분석을 행하였다. 냄새의 관능 평가는 10명의 평가원에게 각각 샘플을 렌덤으로 블라인드 테스트하고, 표 1의 평가기준에 따라 절대평가하여 평균치를 산출하였다. 사용감의 관능평가도 10명의 평가원게 각각의 샘플을 샘플을 렌덤으로 블라인드 테스트하고, 표 1의 평가기준에 따라 절대평가하여 평균치를 산출하였다. 또, 발효두유를 비교품으로 사용하였다.

각종 유기용매에 의한 발효두유 추출성분의 냄새 및 사용감에 미치는 영향
추출용매	탄소수	CS	IS2	IS3	IS4	IS5	IS6	IS7	IS8	IS9
메탄올	1		50%
에탄올	2			50%
폴리글리세롤	6				50%
PEG 600	14					50%
PEG 1540	37						50%
프로필렌글리콜	3							50%
1,3-부틸렌글리콜	4								50%
글리세롤	3									50%
발효두유		100%	50%	50%	50%	50%	50%	50%	50%	50%
냄새의관능평가점		3.8	3.0	2.9	1.9	2.2	2.2	1.8	1.6	1.7
사용감의관능평가점		3.5	1.1	1.0	2.5	3.3	3.6	0.5	0.4	0.5
총합점		7.3	4.1	3.9	4.4	5.5	5.8	2.3	2.0	2.2
총합평가		×	△	△	△	×	×	○	○	○

CS: 비교품

IS: 본 발명품

PEG: 폴리에틸렌글리콜

표 2의 결과로부터 발효두유는 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 또는 글리세롤을 사용하여 추출하였을 때, 냄새 및 사용감의 모든 평가에서 우수한 점수를 얻었다.

시험예 4

실시예 2에서 제조한 발효두유의 에탄올추출물 또는 두유의 에탄올 추출물(모두 고형물농도 1.7중량%)을 제모한 마우스의 피부에 2주 동안 100 ㎕/5 ㎤/마우스에 도포하고, 제모한 마우스 피부의 히알루론산 함량에 미치는 영향을 검토하였다.

콘트롤을 50% 에탄올 용액으로 하고, 샘플로서 50중량%(희석은 50% 에탄올로 행하였다), 100중량%의 발효두유 추출물 및 100중량%의 두유 추출물을 사용하였다. 최종 도포 24시간 후에 피부를 채취하고 하시즈메의 방법(日本油化學會誌 46, 985-989, 1997)에 따라, 피부에서 히알루론산 획분을 조제하고, 비오틴 표지 히알루론산 결합성 단백질(Seikagaku Corporation)을 사용한 ELISA법(Fosang, A. J, et al., Matrix, 10, 306-313, 1990)으로 히알우론산 함량을 정량하였다.

그 결과, 발효두유 추출물을 도포한 경우, 유의하게 히알루론산 함량이 증가한다는 것이 나타났다(도 3). 히알루론산 함량의 증가는 피부의 부드러움과 탄력성이 향상하는 것으로 고려된다.

실시예 1에서 제조된 1,3-부틸렌글리콜 추출 생성물을 사용하여 상기와 동일한 시험을 하였다. 에탄올 추출물 사용한 경우에도 거의 동일한 결과를 얻었다.

실시예 3

하기 조성의 화장수를 통상의 방법으로 제조하였다.

발효두유 에탄올 추출물 (실시예 1에서 제조) 1.0 중량%

에탄올 10.0 중량%

1,3-부틸렌글리콜 2.0 중량%

폴리옥시에틸렌 경화 캐스터유(50E.O.) 0.05 중량%

파라히드록시벤조산 메틸 0.1 중량%

향료 0.1 중량.%

정제수 잔부

얻어진 화장수는 거친 피부 개선작용이 우수하고, 산뜻한 사용감이 있다. 또한 보존안정성도 양호하였다.

실시예 4

하기 조성의 유액을 통상의 방법으로 제조하였다.

발효두유 에탄올 추출물 (실시예 1에서 제조) 1.0 중량%

스테아르산 2.0 중량%

유동 파라핀 6.0 중량%

스쿠알란 2.0 중량%

소르비탄 모노스테아레이트 1.5 중량%

폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노스테아레이트(20E.O.) 2.0 중량%

파라히드록시벤조산 메틸 0.05 중량%

1,3-부틸렌 글리콜 1.0 중량%

향료 0.15 중량%

정제수 잔부

얻어진 유액은 주름 개선작용이 우수하고, 촉촉한 사용감이 있었다. 또한 보존안정성도 양호하였다.

실시예 5

하기 조성의 크림을 통상의 방법으로 제조하였다.

발효두유 에탄올 추출물 (실시예 1에서 제조) 1.0 중량%

유동 피라핀 23.0 중량%

바세린 7.0 중량%

베헤닐 알코올 1.0 중량%

스테아르산 2.0 중량%

밀랍 2.0 중량%

소르비탄 모노스테아레이트 1.5 중량%

폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노스테아레이트(20E.0.) 2.5 중량%

파라옥시벤조산 부틸 0.05 중량%

1,3-부틸렌글리콜 3.0 중량%

파라히드록시벤조산 메틸 0.1 중량%

향료 0.15 중량%

정제수 잔부

얻어진 크림은 주름 개선작용이 우수하고, 사용감도 양호하였다. 또한 보존안정성도 우수하였다.

실시예 6

하기 조성의 연고를 통상의 방법으로 제조하였다.

발효두유 에탄올 추출물 (실시예 1에서 제조) 1.0 중량%

일본약국방 친수연고 95.0 중량%

주름 부위에 본 연고를 하루에 2 회(2 mg/㎠) 도포하면 우수한 주름 개선 작용이 나타난다. 또한 보존안정성도 양호하였다.

본 발명의 피부 외용제 및 화장료는 주름 개선효과 및 거친 피부 개선효과가 우수하다. 따라서 피부 외용제 및 화장료는 피부 노화방지제 또는 거친 피부 개선제로 유용하다. 또한, 특정의 다가 알코올로 추출하여 얻은 발효대두추출물은 그 냄새와 사용감에 있어서 우수한 성질을 갖는 피부 외용제로 가능하다.

Claims

비피도박테리움 속 세균에서 선택한 1종 또는 2종 이상의 미생물을 대두 추출액에 작용시켜 얻어지는 발효생성물을 유기 용매로 추출한 발효대두추출물을 함유하는 피부 외용제.
제 1항에 있어서, 유기 용매가 탄소수 1∼13의 1가 또는 다가 알코올임을 특징으로 하는 피부 외용제.
제 1항에 있어서, 화장료임을 특징으로 하는 피부 외용제.
제 1항에 있어서, 피부 노화방지용 화장료 또는 거친 피부 개선용 화장료임을 특징으로 하는 피부 외용제.