KR20010049156A

KR20010049156A - 솔잎 추출물 및 이것의 용도

Info

Publication number: KR20010049156A
Application number: KR1019997006766A
Authority: KR
Inventors: 링 지
Original assignee: 링 지
Priority date: 1997-01-27
Filing date: 1997-01-27
Publication date: 2001-06-15
Also published as: DE69734163D1; DE69734163T2; CA2279261A1; AU1588497A; EP1013278A4; WO1998032455A1; KR100529793B1; AU734851B2; HK1025246A1; US6329000B1; EP1013278A1; JP2001508777A; EP1013278B1

Abstract

본 발명은 솔잎 추출물에 관한 것이다. 상기 추출물은 하기 질환을 치료하는데 사용될 수 있다: 고혈압, 관상동맥심질환, 협심증, 부정맥, 당뇨, 고지혈증, 높은 혈액점도, 높은 혈액응집, 동맥경화증, 뇌경색, 뇌동맥경화증, 노인성 치매, 돌발성 난청 등.

Description

솔잎 추출물 및 이것의 용도 {THE EXTRACT OF PINE NEEDLE AND THE USE THEREOF}

솔잎은 또한 소나무 잎으로 불려진다. 이것의 라틴 명은 폴리엄 피니(Folium Pini)이다. 한가지 중요한 점은 솔잎이 피나세아(Pinaceae) 및 피누스(Pinus) 식물의 잎이라는 점이다. 이는 피누스 타불래포르미스 카르(Pinus tabuleaformis carr), 피누스 마소니안 램스(Pinus massonian Lams), 피누스 우아나넨시스 프란츠(Pinus Yuananensis Franch) 등으로부터 유래된 것이다. 중국에는 20종의 피나세아 식물 및 10종의 변종이 있으며, 16종의 피나세아 식물 및 2종의 변종이 재배되고 있다.

중국에는 솔잎이 수년 동안 일부 약제의 보충 재료로서 사용될 수 있다는 견해가 있다. 예를 들어, 중국 약초 대사전(the Great Dictionary of Chines Herbs)에 수집된 일부 요법으로 상처, 부종, 습진, 만성 기관지염 및 불면증을 치료하거나, 인플루엔자(influzeza), 유행성 뇌염을 예방할 수 있다. 솔잎은 이러한 요법에서 한 성분으로 사용된다.

솔잎이 오랜 기간 동안 약제의 보충 재료로서 사용되어 왔지만, 솔잎이 고혈압, 관상동맥심질환, 협심증, 부정맥, 뇌경색, 고지혈증, 높은 혈액점도, 높은 혈액응집, 동맥 경화증, 노인성 치매 및 돌발성 난청을 치료하는 효과를 가진다는 것은 보고되지 않았다.

수년의 연구 후, 본 발명자는 솔잎 추출물이 고혈압, 협심증, 심근염, 부정맥, 뇌경색, 고지혈증, 당뇨, 높은 혈액점도, 높은 혈액응집, 동맥 경화증, 노인성 치매 및 돌발성 난청을 치료하는데 사용될 수 있다는 것을 발견하였다. 효과는 만족스러웠다. 솔잎의 믿을 만한 신규한 용도가 발견되었다.

발명의 간단한 설명

따라서, 본 발명의 목적은 관상동맥심질환(CHD), 협심증, 심근염, 부정맥, 고혈압, 고지혈증, 높은 혈액점도, 높은 혈액응집, 당뇨병, 뇌경색, 동맥 경화증, 노인성 치매 및 돌발성 난청 등과 같은 많은 질환을 치료하기 위한 솔잎 추출물을 제공하는데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 질환을 치료하기 위한 약제학적 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 다양한 질환을 치료하는 방법을 제공하는데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 질환 치료에 있어서의 솔잎의 용도와 관련되어 있다.

본 발명의 다른 목적은 본 발명의 설명에 기재될 것이다.

본 발명에 있어서, 솔잎 추출물은 고체 상태에서 밝은 갈색 내지 어두운 갈색을 띠며, 자외선 가시광선 스펙트럼(ultraviolet-visible light spectrum)에서 242nm에 근접한 최대 흡수 피크를 나타낸다.

솔잎 추출물은 심근염, CHD, 협심증, 부정맥, 고혈압, 고지혈증, 고 혈액농도, 높은 혈액응집, 뇌경색, 당뇨병, 뇌동맥경화증, 동맥 경화증 및 돌발성 난청을 치료하는데 사용된다.

도면의 간단한 설명

도 1에는 본 발명의 솔잎 추출물의 얇은 막 크로마토그래피 결과가 도시되어 있다.

도 2에는 본 발명의 솔잎의 자외선 가시광선 흡수 그래프가 도시되어 있다.

도 3a에는 내피가 존재할 경우, 추출물의 용량/농도와 혈관확장력 사이의 종속 관계가 도시되어 있다.

도 3b에는 내피가 존재할 경우, 대조군으로서 카포텐(Capoten)의 용량/농도와 혈관확장력 사이의 관계가 도시되어 있다.

도 3c에는 내피가 제거되었을 경우, 솔잎 추출물의 용량/농도와 혈관확장력 사이의 관계가 도시되어 있다.

도 3d에는 내피가 제거되었을 경우, 대조군으로서 카포텐의 용량/농도와 혈관확장력 사이의 관계가 도시되어 있다.

도 4에는 내피가 존재할 경우, 라딕스 푸어라리애(Radix Puerariae) 추출물과 솔잎 추출물의 공동 효과(synergetic effect)가 도시되어 있다.

본 발명은 솔잎 추출물 및 의학에서의 이들의 용도, 특히, 고혈압 및 관상동맥심질환을 치료하는데 있어서의 이들의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 솔잎 추출물을 포함하는 약제학적 조성물 및 이들의 약제학적 용도에 관한 것이다.

본 발명에 있어서, 솔잎 추출물은 고체 상태에서 밝은 갈색에서 어두운 갈색을 띠며, 수용성이며, 자외선 가시광선 스펙트럼에서 약 242±1nm에서 최대 흡수 피크를 나타낸다.

본 발명자는 솔잎 추출물이 심근염, CHD, 협심증, 부정맥, 고지혈증, 높은 혈액점도, 높은 혈액응집, 뇌경색, 당뇨, 뇌동맥경화증, 노인성 치매, 동맥 경화증 및 돌발성 난청 등을 포함한 다양한 질환을 치료하는데 치료학적 효과를 갖는다는 것을 발견하였다. 솔잎 추출물은 특히, 고혈압, 고지혈증, 높은 혈액점도 및 높은 혈액응집에 치료학적 효과를 갖는다.

본 발명에 있어서, 추출물은 통상적인 방법으로 솔잎으로부터 추출될 수 있다. 이러한 방법으로는 예를 들어, 물 추출 방법, 물-알코올 방법, 알코올 추출 방법 등이 있다. 바람직한 방법은 물 추출 방법이다. 솔잎은 다후리안 라르츠. 피누스 타불래포르미스 카르(Dahurian Larch. Pinus tabulaeformis carr), 피누스 마소니아나 램(Pinus massoniana Lamb), 세드루스 데오다라(록스브.) 로우드(Cedrus deodara (Roxb.) Loud), 피누스 푸밀라(풀) 레겔(Pinus pumila(pull) Regel), 피누스 코라엔시스 시에브. 에트 주크(Pinus koraiensis Sieb. et Zucc.), 피누스 운나넨시스 프란츠(Pinus Yunnanensis Franch), 제페니스 블랙 파인(Japanese black pine) 등과 같은 다양한 소나무의 침엽일 수 있다. 바람직한 솔잎은 피누스 타불래포르미스 카르, 피누스 마소니아나 램 및 피누스 운나넨시스 프란츠로부터 선택된 것이다.

솔잎 추출물은 고체 상태에서 밟은 갈색 내지 어두운 갈색을 띤다. 색깔이 밟고 어두운 것은 건조에 이용되는 방법에 의존적이다. 추출물은 물 및 알코올과 같은 극성 용매에 가용성이며, 자외선 가시광선 스펙트럼에서 이들의 최대 흡수 피크는 대략 242nm이다. R_f값은 얇은 막 크로마토 그래피 분석을 이용하여 확인할 경우, 각각 0.93 및 0.78이다.

약제학적 조성물은 치료 유효량의 솔잎 추출물 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함한다.

약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제는 일반적으로 사용되는 담체/부형제이다.

질환의 치료 방법은 환자에 치료 유효량의 본 발명의 솔잎 추출물을 환자에 투여하는 것을 포함한다. 상기 질환은 고혈압, 당뇨, CHD, 협심증, 부정맥, 심근염, 고지혈증, 높은 혈액점도, 높은 혈액응집, 뇌경색, 노인성 치매, 동맥 경화증 및 돌발성 난청을 포함한다.

본 발명의 솔잎 추출물은 상기 질환 또는 다른 질환을 치료하는데 있어서 다른 약제와 양립가능하다. 예를 들어, 저혈압, 혈액-리피드, 혈당, 혈점도 및 혈소판의 응집률 뿐만 아니라, 칼슘 보충물과 함께 사용될 경우, 칼슘 신진 대사를 조절할 수 있다.

솔잎 추출물은 또한, 상기 질환을 치료하는데 있어서, 라딕스 푸어라리애(Radix Puerariae), 라물루스 운카리애 컴 운시스(Ramulus Uncariae Cum Uncis), 펄 스트루툼 분말(pearl strutum powder), 진주 분말, 오스 드라코니스(Os Draconis), 콘차 오스트래(Concha Ostreae), 징코 빌로바 엘.(Ginkgo biloba L.)의 잎, 라딕스 살비애 밀리오르히재(Radix Salviae Milliorrhizae), 플로스 카르타미(Flos Carthami), 리조마 쿠안종(Rhizoma Chuanxiong), 푸륵투스 트리쵸산키스(Furctus Trichosanhis), 사이프러스 잎 등과 같은 다른 성분과 혼합될 수 있다.

본 발명에 있어서, 제형은 상기 질환을 치료하기 위해 솔잎 및 라딕스 푸어라리애를 포함한다. 솔잎 대 라딕스 푸어라리애의 비는 3:1 내지 5:2, 바람직하게는, 3:1 내지 4:1이다. 본 발명에 있어서, 제형은 추가로 분말을 포한한다. 솔잎 대 펄 스트루툼 분말의 비는 20:1 내지 2:1이다. 솔잎, 라딕스 푸어라리애 및 펄 스트루툼 분말의 비는 18:6:9이다. 칼슘 신진대사의 조절 효과는 펄 스트루툼 분말을 제형에 첨가할 경우, 증가될 수 있다.

라딕스 푸어라리애는 푸어라리애 로바타(와일드) 오이(Pueraria Lobata(Wild) Ohwi)의 뿌리이며, 펄 스트루툼 분말은 크리스타비아 플리카타(리치)(Cristavia plicata(Leach)) 또는 아돈타 우디아나(리.)(Aaadonta woodiana(lea.))의 껍질의 내부로부터 제조된다. 라딕스 푸아라리애 및 펄 스트루툼 분말은 시중에서 구입가능한 광범위한 공급원이다.

본 발명에 있어서, 약제학적 조성물은 유효량의 솔잎과 라딕스 푸어라리애의 추출물 및 약제학적으로 허용되는 담체/부형제를 포함한다.

치료학적 방법은 치료 유효량의 상기 질환을 치료하기 위한 제형의 추출물을 투여하는 것을 포함한다.

솔잎 추출물 및 라딕스 푸어라리애는 이러한 두 약초의 혼합물로부터 추출될 수 있으며, 솔잎 추출물과 라딕스 푸어라리애 추출물을 혼합시킴으로써 수득할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 경구 투여 또는 국소 적용에 의해 수송될 수 있다. 이들은 예를 들어, 정제, 경구투여용 용액, 분말, 펠렛, 캡슐, 주입물(정맥내 주입을 포함), 외부 도포를 위한 로션, 가오(Gao), 팅크, 분쇄물 및 주입액 등과 같은 다양한 종류의 투여 형태로 제조될 수 있다.

경구 투여에 있어서, 솔잎 추출물의 투여량은 성인의 경우, 하루에 세번 시간당 1-3g, 바람직하게는, 시간당 1-2g , 5-14세인(5세 보다는 많고 14세 보다는 어린) 아이인 경우, 하루에 세번 시간당 0.5-1g이다.

실례로서, 본 발명자는 물 추출 방법을 이용하여 솔잎 추출물을 제조하는 방법을 상세히 설명할 것이다.

가공하지 않은 솔잎을 취하였다. 솔잎 전체를 가공하거나, 가공 전에 조각으로 자르거나 분말로 분쇄할 수 있다. 처리 전에 솔잎을 조각으로 자르는 것이 바람직하다. 솔잎에 과량의 물을 첨가하였다. 첨가된 물은 솔잎의 4배(중량을 기준으로), 바람직하게는 8-9배 이상이다. 추출을 위해 혼합물을 끓을 때까지 가열하였다. 끓이는 시간은 1-2시간 , 바람직하게는 1.5시간이다. 추출 후, 혼합물을 여과시키고, 농축시켜 어두운 갈색의 농축 용액을 수득하였다.

여과로부터의 잔류물은 물을 첨가하고 끓임으로써 두번 추출될 수 있다. 첨가된 물은 잔류물의 중량을 기준으로 하여 3배 이상, 바람직하게는 6-7배이다. 끓이는 시간은 0.5-1.5시간, 바람직하게는, 1시간이다. 두 번째 여과 후, 두 번째 여과액을 첫 번째 여과액과 혼합한 후, 이들을 같이 농축시켜 농축 용액을 수득하였다.

필요에 따라, 농축 용액을 건조하여, 밟은 갈색 내지 어두운 갈색의 분말을 수득할 수 있다. 분무 건조 방법, 진공 건조 방법 및 냉동 건조 방법 등과 같은 많은 방법이 건조에 이용될 수 있다. 건조 공정 동안 온도가 더 높을 수록, 분말의 색깔이 더 어두워진다.

솔잎 추출물의 확인 시험

1. 얇은 막 크로마토그래피(TLC)에 의한 확인 시험

5g의 솔잎의 건조 분말 추출물의 무게를 달고, 30ml의 에틸 에테르를 각 회마다 1 시간 동안 2회 첨가하여 상기 추출물을 적셨다(진탕시키면서). 여과 후, 이러한 2회 여과액을 함께 모았다. 에틸 에테르를 회수하여, 건식 물질을 수득하였다. 소량의 에틸 에테르를 첨가하여, 건식 물질을 용해시키고, 용액을 1ml의 메스 플라스크에 옮겼다. 에틸 에테르를 첨가하여 1ml의 용액이 되게하고, 고르게 진탕시켰다. 상기 용액을 시험할 샘플로서 취하였다. 용액을 중국 약전(1995년 판, 부록 VIB)에 기재된 방법에 따라 TLC로 시험하였다: 10-20㎕의 상기 용액을 시험하였다. 접착제로서 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스를 함유하는 실리카 G의 얇은 막 플레이트에 상기 용액을 도팅(dot)하였다. 현상제로서 석유 에테르와 에틸 아세테이트(4:1)를 사용하였다. 스폿(spot)을 12cm로 현상시켰다. 이를 추출하여 공기중에 건조시켰다. 여기에 20%의 알코올중의 황산 용액을 분무시키고, 스폿의 색깔이 나타날 때까지 105℃에서 가열하였다. 시험한 용액에서 크로마토그래피중에 자주색(violet red)의 두개의 동일한 주요 스폿이 나타났다. R_f값은 각각 0.93 및 0.78이었다(첨부된 도 1 참조).

2. 자외선 스펙트럼을 이용한 확인 시험

솔잎 분말 추출물을 60 메스의 체로 체질하였다. 이를 50℃-55℃에서 3시간 동안 건조시켰다. 그 후, 저장 및 사용을 위해 솔리카 건조기(solica dryer)로 옮겼다.

2g의 선처리된 솔잎 추출물의 무게를 달았다(주의: 0.01g까지의 정확도가 요구됨). 이를 마개가 있는 50ml 삼각 플라스크에 담았다. 14ml의 석유 에테르를 각 회마다 30분 동안 3회 첨가하여, 초음파 분해로 추출하였다. 그 후, 여과를 위해 혼합물을 취하였다. 용매를 휘발시켜, 잔류하는 잔재를 수득하였다. 초음파 분해 추출을 위해 잔재에 15ml의 클로로포름을 각 회마다 30 분 동안 3회 첨가하였다. 그 후, 여과를 위해 이를 취하였다. 여과액을 모았다. 클로로포름을 회수하여, 건식 물질을 수득하였다. 소량의 클로로포름을 첨가하여 건식 물질을 용해시켰다. 용액을 10ml의 메스 플라스크에 옮겼다. 이를 고르게 흔들어서, 시험할 샘플로서 사용하였다.

사용된 자외선 스펙트로포토미터(모델 VV-260, 시마쥬, 일본(Shimadzu, Japan)):

갭의 폭: 1nm;

파장의 증대: 2nm;

파장의 범위: 200-500nm;

흡수 범위: 0-1.

시험할 용액을 적당하게 희석시켜, 이것의 최대 흡수 파장이 0.6-0.8이 되게 하였다. 중국 약전(1995년 판, 부록 VA)에 기재된 스펙트로포토미터 방법에 따라, 200nm 내지 500nm의 파장 범위에서 탐지된 자왼선 가시 스펙트럼(첨부된 도 2 참조)은 최대 흡수 피크가 파장 242±1nm에서 나타났음을 보여준다.

1. 솔잎 추출물의 저혈압 효과

솔잎 추출물(달이고, 농축 또는 물 추출-알코올 침착 후, 분무 건조 분말)은 원발성 고혈압 또는 신성 고혈압을 앓고 있는 환자, 및 두개의 신동맥중 하나가 죄어진 신성 고혈압 또는 자연발증고혈압(SHRsp)을 앓고 있는 쥐에서 혈압을 현저하게 감소시키는 효과를 나타낸다. 이러한 효과는 용량 의존적이다.

1.1. 솔잎 추출물의 급성 혈압 감소 효과 시험

1.1.1. 재료 및 방법:

실험 동물: 30마리의 건강한 위스타르(Wistar) 숫쥐, 이중 20마리는 골드블라트 방법(Goldblatt method)에 따라 하나의 신동맥을 죔으로써 신성 고혈압이 발생하도록 처리하였다; 자연발증고혈압을 앓고 있는 30마리의 숫쥐(SP).

약제: 솔잎 분말 추출물, 화합물 폴리움 아포시니 베네티 정제(Folium Apocyni Veneti tablet).

표준 대조군: 솔잎 추출 분말 투여, 1.6g/kg/회.

블랭크 대조군: 희석된 물 투여(SP), 2ml/100g(체중)/회.

양성 대조군: 화합물 폴리움 아포시니 베네티 정제 투여, 1.08g/kg(체중)/회.

저용량 군: 솔잎 추출 분말 투여, 0.83g/kg(체중)/회.

고용량 군: 솔잎 추출 분말 투여, 3.3g/kg(체중)/회.

동물을 마취시킨 후, 오른쪽 총경동맥을 분리시켰다. 오른쪽 총경동맥의 말단을 결찰시켜고, 근위 말단에 헤파린첨가 도뇨관을 삽입하였다. 도뇨관을 5-유도 생리 장치(5-lead physiological instrument)에 연결하고, 혈압 및 심박수를 모니터링하였다. 복강을 개방하였다. 십이지장을 통해 약제를 투여하였다. 약제 투여전, 투여 30분 후, 1시간 후, 2시간 후 및 3시간 후의 혈압 및 심박수의 변화를 관찰하였다.

1.1.2. 결과:(표 1 참조)

표 1. 고혈압을 앓고 있는 쥐의 혈압을 저하시키기 위해 솔잎 추출물의 급성 효과

(1) 표준 대조군의 혈압은 투여 30분 후에 약간 감소하였으나, 투여 한 시간 후에는 원래 수준으로 되돌아 갔다(P〉0.05). (2) 블랭크 대조군에서의 혈압은 전혀 변하지 않았다(P〉0.05). (3) 양성 대조군에서의 혈압은 투여 30분 후, 감소하기 시작하여, 투여 2시간 후, 저혈 피크를 나타내었으며, 감소율은 8.1±1.22% 이하이며, 투여전의 혈압과 비교하여 통계적으로 중요한 의미를 갖는다(P〈0.05). (4) 투여 30분 후, 저용량 군의 혈압이 감소하기 시작하였다. 투여 2시간 후, 저혈 피크를 나타냈다. 감소율은 각각 14.3±2.32%(신성 고혈압 군) 이하 및 15.6±2.17%(SP 군) 이하 이었으며, 투여전의 혈압과 비교하여 매우 현저한 차이를 나타냈다(P〈0.01). (5) 고용량 군의 혈압은 투여 2시간 후에 가장 현저하게 감소하였다. 감소율은 각각 18.6±2.07%(신성 고혈압 군) 이하 및 17.6±1.98%(SP의 군) 이하 이었다. 또한, 처리 전의 혈압(P〈0.001) 및 다른 군으로 처리한 후 2시간(P〈0.001)에서의 혈압과 비교하여 매우 분명한 차이를 나타냈다.

요약:

솔잎 추출물의 급성 혈압 감소 시험은 솔잎 추출물이 보통 쥐의 혈압에는 분명한 효과를 나타내지 않았지만, SP 및 신성 고혈압을 앓고 있는 쥐의 동맥 압은 현저하게 감소시킬 수 있음을 나타내었다. 투여 30분 후에 효과가 나타났다. 투여 2시간 후 저혈 피크를 나타냈다. 효과는 3시간 이상 동안 지속될 수 있으며, 용량에 의존적이다. 추출물의 혈압 감소 효과는 화합물 폴리움 아포시니 베네티 정제의 효과보다 강하다.

1.2. 솔잎 추출물의 장기간 혈압 감소 시험

1.2.1. 재료 및 방법:

10마리의 건강한 위스타르 숫쥐, 50마리의 자연발증고혈압을 앓고 있는 50마리의 숫쥐. 약제: 급성 혈압 감소 시험의 약제와 동일.

방법: 위스타르 쥐 10마리의 SP 쥐를 한 군으로 하였다. (1) 표준 대조군: 솔잎 추출 분말 투여, 1.6g/kg(체중)/d.; (2) 블랭크 대조군: 희석된 물 투여 2ml/100g(체중)/d. (3) 화합물 폴리움 아포시니 베네티 정제 군: 1.08g/kg(체중)/d. (4) 저용량 군: 0.83g의 솔잎 추출 분말/kg(체중)/d. (5) 중간용량 군: 1.6g의 솔잎 추출 분말/kg(체중)/d. (6) 고용량 군: 3.3g의 솔잎 추출 분말/kg(체중)/d. 하루에 1회 위관 영양법. 위관 영양의 용량은 매회 2ml/kg이었다. 3주의 처리 코스로 구성하였다. 제공된 약제의 투여 전 및 투여 후의 쥐의 일반적인 상태 및 혈압을 조사하였다. 생체외에서의 혈압 및 경동맥 혈압을 측정하고, 1차 관계-회귀 분석(Linear Relation-Regression analysis)으로 데이타를 분석하였다. 결과를 평균±표준 편차(K±SD)의 형태로 나타내었다. 그 후, 매 두 군 간에 존재하는 차이를 분석하였다.

1.2.2. 결과(도 2 참조)

표 2. SP 쥐에서 솔잎 추출물의 장기간 혈압 저하 효과

소나무 추출 분말로 처리한 후, 쥐의 일반적인 상태는 정상적이었다. 블랭크 대조군 쥐의 체중은 평균에서 2g 증가하였으며, 고용량, 중간용량 및 저용량 투여군 쥐의 체중은 평균에서 6.7g 증가하였다. 솔잎 추출물은 표준 대조군의 혈압에는 효과를 나타내지 않았다. 저용량 투여군, 중간용량 투여군 및 고용량 투여군의 혈압 감소율은 각각 30.7±0.93%, 38.82±3.68% 및 48.22±1.16% 이었다. 이 세군에서는 처리 전의 혈압과 비교하여 매우 현저한 차이를 나타내었으며(P〈0.001), 블랭크 대조군 및 폴리움 아포시니 베네티군과 비교하여 현저한 차리를 나타내었다(P〈0.001). 처리 후 MAP는 생체외 혈압과 현저하고 명확한 관계를 나타냈다(r=0.903, t=8.899 P〈0.001).

결론: 솔잎 추출물은 쥐(SP)에서 혈압 감소에 만족할만한 효과를 갖는다. 효과는 용량에 의존적이다. 추출물은 정상적인 혈압에는 영향을 끼치지 않는다. 혈압 감소에 대한 이들의 효과는 화합물 폴리움 아포시니 베네티 정제의 효과보다 강하다(P〈0.001). 추출물의 처리 후, SP 쥐의 활성 및 식욕은 정상적이었으며, 체중은 현저하게 증가하였다.

1.3. 솔잎 추출물의 혈압 감소 효과의 임상 실험

1.3.1. 방법:

시험을 위해 106명의 환자 및 38명의 비환자를 선택하였다. 집중적으로 병력을 조사하고, 신체검사 및 실습을 한 후, 38명의 원발성 EH, 71명의 이차성 EH, 15명의 삼차성 EH 및 20명의 신성 고혈압을 포함한 124명의 환자를 WHO 전문 협회에 의해 제공된 고혈압의 진단 기준에 따라 본태성 고혈압(EH)로서 진단하였다. 환자를 시험에 참여시키기 전에, 1주일 넘게 강압제, 이뇨제 및 혈관확장제의 투여를 중단시켰다. 이들을 두 군 즉, 처리군과 대조군으로 나누었다.

처리군의 환자에 한달/처리 코스로 하루에 3번씩 각 15ml의 솔잎 추출물(경구투여용 용액 형태)을 경구적으로 투여하고, 대조군에는 한달/처리 코스로 하루에 3번씩 각 2개 정제의 화합물 폴리움 아포시니 베네티 정제를 투여하였다. 각각 투여 전 및 투여 후 3일 아침에 모든 환자의 혈압을 측정하였다. 이러한 삼일은 약제를 투여한 날을 제외한 날이어야 한다. 각각 투여 전 및 투여 후의 혈압의 평균을 측정하였다(주의: 15ml의 경구투여용 용액에 1.6g의 솔잎 추출물이 함유됨).

혈압 감소 효과의 감정 기준:

(1) 현저한 효과: 하기 두 요건 중 하나를 만족시킴: 〈1〉 10mmHg 보다 높게 혈압을 감소시켜 정상적인 확장기압 유도. 〈2〉 확장기압이 정상적으로 되지 않았다 하더라도, 20mmHg 이상으로 감소된 확장기압 유도.

(1) 효과: 하기 세 요건중 하나를 만족시킴: 〈1〉 10mmHg 미만으로 혈압을 감소시켜 정상적인 확장기압 유도. 〈2〉 확장기압이 정상적으로 되지 않았다 하더라도, 확장기압이 처리 전보다 10-19mmHg 더 낮아짐. 〈3〉 수축기압이 처리 전보다 30mmHg 이상 더 낮아짐.

(3) 비효과: 상기 기준중 어떤 것도 만족시키지 못함.

1.3.2. 결과(표 3 참조)

표 3. 고혈압 환자에서 솔잎 추출물의 치료학적 효과

처리 전에 이들 두 군의 연령 및 혈압에 있어서의 현저한 차이는 없었다(P〉0.05). 처리 전 및 처리 후의 혈압과 비교할 경우, 처리군의 혈압은 가장 현저하게 감소된 반면(P〈0.001), 대조군의 혈압은 약간 감소되었다(P〈0.05). 처리군과 대조군의 차이는 명백하였다. 처리군의 효율과 현저한 효율 둘 모두는 대조군의 효율보다 상당하였다(P〈0.001 또는 P〈0.05).

시험 동안, 처리군에서 현기증, 두통, 흉통, 두근거림, 불면증, 흉부 손-발의 불쾌감과 같은 증상이 현저하게 완화되거나 나타나지 않았다. 처리군의 현저한 효율은 52.41-75.22% 이하이며, 이는 대조군의 효율보다 맹백이 더 높다(P〈0.001). 부작용이 관찰되지 않았다. 혈액 루틴, 소변 루틴, 대변 루틴, 간 기능 및 신장 기능에서 이상이 관찰되지 않았다. 신성 고혈압을 앓고 있는 20명의 환자중에 신장 기능이 더 많이 또는 적게 향상되었다. 요소 질소 및 혈액중의 크레아티닌이 감소하였으며, 동위원소 리노그램은 신장 배설 작용이 처리 전보다 향상되었음을 보여준다.

결론: 솔잎 추출물은 본태성 고혈압 및 신성 고혈압에 현저한 치료학적 효과를 갖는다. 혈압 감소, 병상 증상 완화 및 신장 기능에 있어서의 이들의 효과는 대조군(화합물 폴리움 아포시니 베네티)의 효과보다 현저하다.

2. 솔잎 추출물의 저지질(hypolipidemic) 시험

2.1. 재료 및 방법:

실험 동물: 체중이 1.5-2kg인 큰 귀를 갖는 60마리의 베이징 흰색 숫 토끼.

약제 및 시제: 콜레스테롤(베이징 케미컬 리에이젼트 컴패니(Beijing Chemical Reagent Company)로부터 생산). 프로필 티오옥시우라실 정제(이후부터는 PTV로 기재, 독일에서 생산, 각 정제 50mg). 라드(자체 제조). 본 발명의 솔잎 추출 분말(이후부터는 솔잎 분말로 기재). 이노스티톨 헥사니코티네이트 정제(Inostitol hexanicotinate tablet)(베이징의 더 세컨드 파마슈티컬 팩토리(the second Pharmaceutical Factory)에서 생산, 각 정제 0.2). 총 콜레스테롤, 트리글리세리드, 고밀도 리포프로테인 및 저밀도 리포프로테인의 키트(베이징 종셍 바이오케미컬 컴패니(Beijing Zhongsheng Biotechnical Company)에서 생산).

방법: 표준 음식물로 10일 동안 큰 귀를 갖는 흰색 토끼를 양육한 후, 각 군에 10마리씩 무작위로 5 군으로 나누었다. 아침에 단식시킨 토끼의 나선 정맥으로부터 혈액을 채취한 후, 고지방 음식물을 섭취시켰다. 혈액 샘플의 혈액-리피드를 측정하였다. 고지방 음식물은 콜레스테롤 2g/kg(체중)/d, 라드 0.5g/kg/d, PTV 12.5mg/kg/d를 포함한다. 네 군에서, (예방군)의 토끼에 고지방 음식물과 함께 솔잎 분물 0.75g/kg/d을 제공하였다. 고지방 음식물 식이요법 15일 후 이들의 체중을 측정하고, 단식시킨 토끼로부터 혈액을 채취하였다. 그 후, 고지방 식이요법을 중단하고, 정상적인 식이요법으로 바꾸었다: (1) 블랭크 대조군: 위관 영양법으로 날마다 10ml의 증류수를 제공; (2) 양성 대조군: 이노스티톨 헥사니코티네이트 정제를 제공, 0.3g/kg/d; (3) 저용량 군: 솔잎 분말을 제공, 0.25g/kg/d; (4) 예방군: 솔잎 분말을 계속 30일 동안 제공함 0.75g/kg/d; (5) 고용량 군: 솔잎 분말을 제공, 1.5g/kg/d. 상기 분말을 10ml의 증류수에 용해시키고, 하루에 한번 위관 영양법으로 제공하였다. 투여 15일 후, 단식한 토끼로부터 혈액을 채취하여, 혈액-리피드의 수준을 측정하였다. 총 콜레스테롤, 트리글리세리드, 고밀도 리포프로테인 및 저밀도 리포프로테인의 수준을 CHOO-PAP 방법, GPO-PAP 방법, PTA-Mg²⁺침착 방법 및 PVS 일단계 침착 방법으로 각각 측정하였다. 사용된 장치는 히타치(Hitachi), 모델 750 자동 생화학 분석기이다.

2.2. 결과:(표 4 참조)

표 4. 고지혈증 동물의 혈액-리피드에 대한 솔잎 추출물의 효과(X±SD)

〈1〉 군 4와 군 1, 2, 3 및 5 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈2〉 군 4와 나머니 다른 군 및 군 1과 나머지 다른 군 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈3〉 군 4와 군 1, 2 및 3, 군 5와 군 1 및 2, 및 군 1과 군 2 및 3 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈4〉 군 4와 나머지 다른 군 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈5〉 군 1과 군 3, 4 및 5, 및 군 2와 군 3, 4 및 5 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈6〉 군 5와 나머지 다른 군, 및 군 3과 군 1, 2 및 4 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈7〉 군 5와 나머지 다른 군, 및 군 3과 군 1, 2 및 4 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈8〉 군 5와 군 1 및 2, 및 군 4와 군 1 및 2 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈9〉 군 5와 군 1 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈10〉 군 4와 나머지 다른 군 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈11〉 군 1과 나머지 다른 군, 및 군 2와 군 4 및 5 사이에 존재하는 현저한 차이. 〈12〉 군 1과 나머지 다른 군, 군 5와 군 2 및 4, 및 군 3과 군 4 사이에 존재하는 현저한 차이.

표 4로부터, 본 발명자는 고지방 식이요법을 수행하기 전에 모든 군의 혈액-리피드의 인덱스 사이에 통계적인 차이점이 없다는 것을 알 수 있다(P〉0.05). 그러나, 고지방 식이요법 후, 군 4(예방군)에서 총 콜레스테롤, 트리글리세리드 및 저밀도 리포프로테인의 수준이 다른 네 군보다 명백히 낮았으며, 그 차이가 현저하게 통계학적으로 의미 있음을 보여준다(P〈0.001). 총 콜레스테롤, 트리글리세리드 및 저밀도 리포프로테인의 수준은 처리 후, 모든 군에서 감소하였다. 처리 후, 군 1의 수준과 다른 네 군의 수준을 비교할 경우, 현저한 통계학적 의미가 존재하였다. 처리 후, 이들의 수준은 군 4에서 가장 명백하게 낮았다(P〈0.001). 군 1의 감소율은 다른 네 군의 감소율보다 현저하게 상이하였다. 군 3, 4 및 5의 감소율은 군 2의 감소율과 비교하여 높았다. 군 2에서 트리글리세리드의 감소율은 군 1의 감소율과 비교할 경우, 현저한 차이를 나타내지 않았지만, 군 3, 4 및 5의 감소율과 비교할 경우 현저한 차이를 나타냈으며, 여기에서 가장 현저한 차이는 군 5에서 나타났다(P〈0.001). 군 3, 4 및 5의 저밀도 리포프로테인의 감소율이 가장 현저했다(P〈0.001). 처리 후, 군 1 및 2에서 고밀도 리포프로테인의 수준이 감소된 반면, 군 3, 4 및 5에서는 증가하였으며, 군 4 및 5에서의 증가가 가장 현저하였으며, 이중 군 5에서 가장 현저하였다(P〈0.001).

결론: 고지방 식이요법으로 인한 고지혈증을 앓고 있는 동물에 있어서, 솔잎 추출물은 혈청 총 콜레스테롤, 혈청 글리세리드, 혈청 저밀도 리포프로테인의 수준을 저하시킬 수 있지만, 혈정 고밀도 리포프로테인의 수준은 증가시켰다. 치료학적 효과는 예방군에서 가장 만족스러웠으며, 그 후 고용량 군이었다. 이러한 모든 것들은 솔잎 추출물이 고지혈증에 대한 치료 및 예방 효과를 갖는다는 것을 입증해준다.

3. 부갑상선 기능을 조절하기 위한 솔잎 추출물의 시험

3.1. 재료 및 방법:

실험 동물: 체중이 320-360g인 5마리의 건강한 위스타르 쥐; 체중이 170-270kg인 10마리의 SP 쥐.

실험 시제: 솔잎 추출 분말, 일본의 론기안 컴패니(Rongyan Company)에서 생산된 파라톤몬(parathonmone)(PTH) 및 칼시토닌(CT)의 방사선 면역 키트.

방법: 동물을 ① 표준 대조군; ② SP 블랭크 대조군; ③ SP 처리군으로 5마리를 한 군으로 나누었다. 위스타르 쥐는 (1) 표준 대조군; 솔잎 분말 투여, 1.5g/kg(체중)/d이다. SP 쥐는 5마리씩 5군으로 나누었다; (2) 블랭크 대조군: 위관 영양법으로 증류수 투여, 2ml/100g(체중)/d; (3) 화합물 폴리움 아포시니 베네티 정제: 1.08g/kg(체중)/d; (4) 저용량 군: 솔잎 분말 투여, 0.8g/kg/d; (5) 중간용량 군: 솔잎 분말 투여, 1.5g/kg/d; (6) 솔잎 분말 투여, 3.0g/kg/d, 하루에 한번씩 위관 영양법으로 투여, 위관 영양 유체의 용량은 2ml/100g(체중)이다. 3주/처리 코스. 쥐를 마취시키고, 처리 전 및 후에 안구 정맥으로부터 혈액을 채취하였다. 혈액을 냉동시키고 원심분리하여 혈청을 분리하였다(-4℃). 방사 면역 방법을 이용하여 혈청 PTH 및 혈청 CT를 측정하였다.

3.2. 결과: (표 5 참조)

표 5. PTH 및 CT 쥐에서 솔잎 추출물의 효과

표 5로부터, 본 발명자는 처리 전에, 군 1(표준 대조군) 및 군 2 및 3에서 PTH와 CT 값 사이의 현저한 차이가 존재한다는 것을 알 수 있다. 군 3에서 처리 후, PTH의 수준은 현저하게 감소된 반면, CT 값은 현저하게 증가하였다. 그러나, PTH 및 CT의 수준에 있어서, 군 1 및 군 2 및 3사이의 차이가 여전히 존재하였다(P〈0.05). 처리 후, 군 3 및 군 1 및 2에서 PTH 값의 감소와 CT 값의 증가 사이의 현저한 차이가 존재하였다(P〈0.05 및 P〈0.001).

결론:

솔잎 추출물은 SP 쥐의 부갑상선 기능에 어느 정도 효과를 갖는다. 처리 3주 후, SP 쥐의 PTH 수준은 감소한 반면, CT 수준은 현저하게 증가하였다. 처리 후, 표준 대조군에서의 차이가 있지만, 표준 대조군의 PTH의 감소율과 CT의 증가율과 비교할 경우, 통계학적으로 현저가 차이가 있다. 이러한 모든 것은 상기 추출물이 SP 쥐의 부갑상선 기능을 어느 정도 조절할 수 있다는 것을 입증해준다.

4. 출혈에 대한 솔잎 추출물의 효과

4.1. 혈소판 응집을 억제하기 위한 추출물의 시험

실험 동물: 체중이 1.5-2kg인 큰 귀를 갖는 25마리의 베이징 흰색 숫 토끼.

시제 및 기구: 솔잎 추출물, 단센(Danshen)(라딕스 살비애 밀티오르히재 주입 용액(Radix Salviae Miltiorrhizae injection solution), 각 ml 당 2g의 천연 약제 함유), ADP(20ug/200㎕), 인산염 완충액(0.2몰/l, 300mg/ml), 나트륨 시트레이트 용액(3.8%), 2% 실리콘-석유 에테르 용액, 모델 MG-576 혈소판 응집 기구, 데스크 모델 밸런싱 자동 기록기, 둥근 칼러미터 컵(Round colorimeric cup)(모델: CHRONO-LOG312^#), 규화된 원심분리 튜브, 마이크로샘플러.

방법: 10-14시간 동안 공복인 위를 갖는 토끼의 나선 정맥으로부터 3ml의 혈액을 채취하였다. 혈액을 규화된 원심분리 튜브에 넣었다. 혈액 및 나트륨 시트레이트 용액의 비는 9:1이었다. 이들을 혼합하고, 혼합물을 원심분리하였다(800rpm). 4분 후, 혈소판 풍부 플라즈마(PRP)인 상층 유체를 채취하였다. 잔여 혈액을 10분 동안 원심분리하였다(3000rpm). 플라즈마 빈약 혈소판(PPP)인 상청액을 버렸다. 37℃의 일정 온도에서 BORN 탁도계로 혈소판 응집력을 시험하였다. 칼러미터 컵의 플라즈마 용량은 250ml이었다. 시험 시간은 5분이었다. 샘플을 여러 군으로 나누었다: ① ADP + 인산염 완충액, ADP 2μmol/L, 인산염 완충액 0.2ml/L; ② ADP + 동일 용량의 라딕스 살비애 밀티오르히재 주입 용액; ③ ADP + 동일 용량의 라딕스 푸어라리애 추출 용액; ④ ADP + 동일 용량의 솔잎 추출 용액; ⑤ ADP + 동일 용량의 조성물 용액.

2. 결과(표 6 참조)

표 6. 생체외에서 혈소판 응집을 억제하는 시험

표 6으로부터, 군 2, 3, 4 및 5의 혈소판 응집율이 명백히 감소하였으며, 특히 군 4 및 5의 감소율은 군 1과 비교하여 매우 현저한 차이가 남을 알 수 있다. 1' 응집 억제율은 74.56-80.06% 이하이다. 또한, 군 4 및 5에서 5' 최대 응집 억제율은 군 2 및 3과 비교하여 현저한 차리를 나타낸다.

3. 결론:

생체외 혈소판 응집 억제 시험은 조성물, 솔잎 추출물, 및 라딕스 푸어라리애 추출물이 명백히 혈소판 응집을 억제할 수 있으며, 이는 동일한 용량의 단센 용액보다 더욱 현저하다는 것을 보여준다. 이들의 혈소판 응집 억제 효과는 1'에서 가장 강하다. 혈소판 응집 억제 효과의 강도는 차례로 다음과 같다: 조성물 군〉 솔잎 추출물 군〉 라딕스 푸어라리애 추출물 군〉 단센 군. 시험은 솔잎 및 라딕스 푸어라리애로 구성된 조성물 또는 솔잎 추출물이 혈소판 응집을 예방하고, 울혈을 치료하는데 중요한 영향을 미친다는 것을 보여준다.

4.2. 혈류(hemorheology)를 개선시키기 위한 솔잎 추출물의 임상 실험

1. 재료 및 방법:

52명의 남성 환자 및 35명의 여성 환자를 포함한 37-75세의 87명 환자를 시험에 가담하였으며, 이중 36명의 환자는 관상동맥질질환, 37명은 고혈압, 9명은 뇌경색, 45명은 지혈증, 12명은 당뇨를 앓고 있다(일부 환자는 2가지 이상의 질환을 앓고 있음). 대조군은 18명은 CHD, 21명은 고혈압, 3명은 뇌경색, 32명은 지혈증을 앓고 있는 44명의 환자를 포함한다(일부 환자는 2가지 이상의 질환을 앓고 있음). 환자는 디프그리다모크(dipgrdamok), 단센, 아스피린, Ca²⁺-차단제와 같은 혈류에 효과 있는 약제를 실험 1주일 전부터 투여하지 않았다.

처리군에 15ml의 솔잎 추출물의 경구투여용 용액(1.6g의 솔잎 추출물 함유)을 3회/하루로 한달/처리 코스로 투여하였다. 대조군에 화합물 다센 정제를 각 회마다 3개 3회/하루로 한달/처리 코스로 투여하였다. 처리 전 및 후의 혈류의 인덱스를 측정하였다. 통계학적으로 중요한 결과의 평균을 시험하였다. 매 두 군의 통계학적으로 중요한 평균을 T-시험으로 측정하였다.

4.2.2. 결과:

처리 후, 적혈구 침강 속도(ESR)가 느려졌으며, 헤마토크리트(haematocrit)가 감소하였다. 플라즈마의 특정 점도 및 전혈의 특정 점도(고 쉐어(shear), 저 쉐어)가 현저하게 개선되었다. 혈소판 응집율은 현저하게 저하되었다(표 7 및 표 8 참조)

표 7. 고점도를 갖는 환자의 혈류에 대한 솔잎 추출물의 효과

표 8. 고응집을 갖는 환자의 혈소판 응집률에 대한 솔잎 추출물의 효과 (X±SD)

결론:

솔잎 추출물은 환자 및 동물의 고점도 또는 고응집에 명백한 치료학적 효과를 가진다. 이는 ESR, 헤마토크리트, 플라즈마 및 전혈의 특정 점도 및 혈소판 응집율을 감소시킬 수 있다. 이는 혈액을 자극하고 울혈을 변형시키고, 혈소판 질환을 예방하거나 치료하고, 미세순환을 개선시키는데 매우 중요하다. 따라서, 이는 심근경색증(myocardiac inforction), 관상동맥심질환, 협심증, 뇌경색, 고혈압, 동맥 및 정맥의 혈소판 질환, 돌발성 난청 및 울혈을 치료하기 위한 약제를 위해 이론적 근거로서 제공된다.

5. 관상동맥를 확대하고, 협심증, 부정맥에 대한 솔잎 추출물의 임상 실험

42명의 관산동맥심질환을 앓고 있는 환자를 이 실험에 투입시키고, 하루에 세번씩 15ml의 솔잎 추출물(1.6g의 솔잎 추출물을 함유)을 이들 각각에 투여하였다. 투여 전 및 후에 EKG, 혈액-리피드, TXB₂, PGI₂를 검사하였다. 하루에 세번씩 10ml의 이소소르비드 디니트레이트를 경구적으로 한달 처리 코스로 처리하였다.

결과: (표 9, 10 및 11 참조)

표 9. CHD 환자의 심박수, TXB₂, PGI₂에 대한 솔잎 추출물의 효과

표 10. CHD 환자의 혈액-리피드에 대한 솔잎 추출물의 효과

표 11. CHD 환자의 ECG에 대한 솔잎 추출물의 효과

처리군에서 CHD를 앓고 있는 42명의 환자중, 7명은 빈번한 심실기외수축을 앓고 있으며, 추출물의 처리 후, 이들중 6명은 기외 수축이 현저하게 감소되었으며, 1명은 아무 효과도 없었다; 빈번한 심방조기박동을 앓고 있는 7명의 환자; 명백한 효과가 한 명에 나타남; 만성 관상부전증을 앓고 있는 24명의 환자; 16명의 경우에 ECG의 St-T 단편이 개선됨; 심근경색증과 만성 관상부전증을 앓고 있는 4명의 환자; ECG가 거의 정상적이기 때문에, 한 경우에만 명백한 치료 효과가 나타남, ECG의 개선된 ST-T 단편이 2경우에 나타남, 나머지 한 경우에는 아무 효과도 나타나지 않음; 당뇨를 앓고 있는 15명의 환자의 혈당 및 뇨당이 현저하게 감소되었으며, 사지 저림, 갈증, 이뇨와 같은 증상이 현저하게 개선되었다.

협심증을 제어하기 위해: 처리군의 42명의 환자중 협심증의 총 발병률은 처리 전의 주당 395회에서 처리 후 주당 128회로 감소하였다(P〈0.001). 이들중 어떤 환자도 악화된 증상을 나타내지 않았다. 처리군의 총 효율은 92.8% 이하이다. 대조군의 협심증의 총 발병률은 처리 전 주당 215회에서 처리 후 108회로 감소하였다(P〈0.05). 대조군의 총 효율은 86.6% 이하이다.

결론: 솔잎 추출물은 현저하게 협심증의 발병률을 감소시키고, ECG의 허혈성 변화를 개선시키고, 부정맥(심실기외수축)의 발병을 제어하고, 총 혈청 콜레스테롤 수준을 현저하게 저하시키고, 혈청 트리글리세리드의 수준을 약간 저하시키고, 혈청 고밀도 리포프로테인의 수준을 증가시키고, TXB₂의 수준을 감소시키고, PGI₂의 수준을 증가시킬 수 있다. 따라서, 상기 추출물은 대뇌동맥의 혈류 용량을 증가시키고, 심근(mgocardial) 산소 소모량을 감소시키고, 심근 포스트-로드(post-load)를 감소시켜, 국소 심근층(ischemic mgocardium)을 감소시킬 수 있다.

6. 노화 억제 및 대뇌 혈류를 증가시키는데 있어서 솔잎 추출물의 효과

뇌경색 또는 노인성 치매를 앓고 있는 25명의 환자에 솔잎 경구투여용 용액을 처리하였다. 처리 전 및 후에 REG(유동학 뇌수엑스레이사진, REG), 혈청 리피드 퍼옥사이드 및 혈청 구리-아연 퍼옥사이드 디스무타아제(dismutase)(이후부터는 SOD₁로 기재)를 검사하였다. 투여 방법은 하기와 같다: 하루에 세번씩 15ml(1.6g의 솔잎 추출물 함유)를 세달 처리 코스로 투여하였다. 처리 후, REG는 현저하게 개선되었으며, SOD₁의 수준은 감소하였으며, 리피드 퍼옥사이드의 수준은 현저하게 감소되었다(표 12 참조).

표 12. 혈청 SOD₁및 노인의 혈정 리피드 과산화물에 대한 솔잎 추출물의 효과

처리 전의 REG는 증가된 혈관 저항성, 감소된 혈류량, 감속된 혈류 속도 및 감소된 도관 탄성을 나타내었다. 그러나, 솔잎을 처리한 25명의 환자중 20명의 환자는 감소된 혈관 저항성, 기준에 인정된 혈액 흐름, 증가된 혈류량 및 개선된 파동 형태를 포함하여, REG의 현저한 개선을 나타냈다. 이들 모두는 솔잎 추출물이 대뇌 혈류량을 증가시킬 수 있다는 입증하는 것이다.

7. 솔잎 추출물의 혈관 팽창 효과

혈관 고리를 팽창하는 분리된 관류 시험은 솔잎 추출물이 동맥을 확장시킬 수 있다는 것을 입증해준다. 상기 효과는 내피 의존적이며, 용량 의존적이다. 내피가 존재할 경우, 추출물의 투여량이 많을수록, 혈관 팽창의 효과가 커진다. 최대 팽창률은 86.88±12.03% 이하이다. 내피가 없을 경우, 추출물은 최고 농도에서 단지 약간만 혈관을 팽창시킬 수 있다(14.23±2.06%). 이는 솔잎 추출물이 내피의 혈관 활성 물질을 조절함으로써 혈관을 팽창시킨다는 것을 입증해준다(도 3a-3b 참조).

실시예 1

솔잎 경구투여용 용액의 제조:

10kg의 솔잎을 채취하고, 여기에 80kg의 물을 첨가하였다. 1.5시간 동안 혼합물을 달였다. 달인 액을 분리시켰다. 다려진 잔재에 60kg의 물을 첨가하였다. 1시간 동안 혼합물을 달였다. 두번째 달여진 액을 분리시켰다. 상기 두 액을 함께 섞었다. 액을 여과시켰다. 여과액에 알코올을 첨가하였다. 이 혼합물을 24시간 동안 방치한 후, 침전물을 버리고, 알코올을 회수하였다. 이 액체를 10kg의 용액으로 농축시켰다. 증류수를 첨가하여 액체를 희석시켜, 20kg의 용액이 되게 하였다. 소량의 스테비오시드(stevioside) 및 방부성 니파긴(nipagin)을 액에 첨가하였다. 용액을 병에 담았다. 각각의 병에 10ml의 용액이 담겨지게 하였다.

실시예 2:

솔잎 캡슐의 제조:

10kg의 솔잎 및 3.5kg의 라딕스 푸어라리애를 취하였다. 5배 용량의 물을 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 달이고, 혼합물을 여과시켰다. 달인 잔재를 분리하고, 4배 용량의 물을 첨가하였다. 1.5시간 동안 혼합물을 달였다. 이를 여과시켜, 액을 수득하였다. 상기 두 액을 함께 섞었다. 혼합된 액에 알코올을 첨가하였다. 혼합물을 24시간 동안 방치한 후, 침전물을 버렸다. 알코올을 회수하였다. 그 후, 액을 추출물로서 농축시켰다. 추출물을 건조시켜 건식 추출물을 수득하였다. 이를 나중에 사용하기 위해 분말로 분쇄하였다. 그 후, 5kg의 펄 스트라툼 분말을 분쇄하였다. 이를 체로 쳐서 미세한 분말이 되게 하였다. 이를 상기 분말 추출물과 함께 혼합하였다. 자동 캡슐 충전기를 사용하여 캡슐에 분말을 채웠다. 각각의 캡슐은 0.5g의 약제 분말을 함유한다. 이를 플라스틱-알루미늄 호일로 포장하였다.

실시예 3:

제조 방법:

1800g 솔잎과 600g의 라딕스 푸어라리애를 취하였다. 이들 혼합물을 물을 첨가하였다. 혼합물을 2회 달였다: 첫번째는 8배 용량의 물을 첨가하고, 혼합물을 1.5시간 동안 달였다; 두번째는 6배 용량의 물을 첨가하고, 혼합물을 1.5시간 동안 달였다. 혼합물을 여과시켰다. 이러한 두 액의 여과액을 혼합하였다. 혼합된 여과액을 건조시켜 분말로 만들었다.

지금부터 본 발명자는 본 발명의 솔잎 추출물 및 라딕스 푸어라리애 추출물로 구성된 조성물의 동물 실험 및 임상 실험을 설명할 것이다(이후부터는 "조성물"로 기재).

8. 혈관 확장을 위한 조성물의 효과

혈관 써클의 분리된 관류 시험은 상기 조성물이 동맥 확장에 효과가 있음을 입증해준다. 이러한 효과는 내피 의존적이며, 용량 의존적이다. 내피가 존재할 경우, 조성물의 투여량이 많을 수록, 혈관 팽창 효과가 더 높다. 최대 팽창률은 96% 이하이다(도 4 참조).

9. 혈압을 저하하기 위한 조성물의 임상 실험

9.1. 재료 및 방법:

관찰된 피실험자: 본태성 고혈압을 앓고 있는 44명의 환자. 이들 모두는 60세 미만의 성인이며, 이들 평균 연령은 53±12.7이다. 이들 모두는 WHO의 진단 기준에 따라 고혈압으로 진단되었다. 대조군으로서 불규칙하게 본태성 고혈압을 앓고 있는 또 다른 44명의 환자를 선택하였다. 대조군의 환자에 캡토프릴을 처리하였다. 대조군의 환자는 59세 미만의 성인이며, 이들의 평균 연령은 47±7.8이다. 이 두 군의 성별 및 질환 경과는 표 13에 기재되어 있다. 이 실험에 투입되기 1주일 부터 환자에게 강압제를 투여하지 않았다. 처리 방법: 하루에 세번씩 5일 동안 1.5g의 조성물을 처리군의 환자에 투여하였다. 혈압이 정상적인 범위로 감소하지 않을 경우, 투여량(0.5g)을 매 5일 마다 증가시켰다. 매 5일 마다 증가시키고, 최고 1회 투여량이 3g을 초과하지 않게 하고, 하루에 3번 투여하였다. 처리의 전 과정을 20일로 하였다. 25mg의 캡토프릴을 대조군의 환자에 하루에 세번씩 투여하였다. 혈압이 정상적인 범위로 감소하지 않을 경우, 투여량(12.5mg)을 매 5일 마다 증가시켰다. 매 5일 마다 증가시키고, 최고 1회 투여량이 75mg을 초과하지 않게 하고, 하루에 세번 투여하였다. 처리의 전 과정을 20일로 하였다.

처리 전 혈압: 처리 1주일 전 부터 모든 환자에 강압제를 투여하지 않았다. 그 후, 연속해서 5일 동안 하루에 한번 혈압을 측정하였다. 처리 전 혈압으로서 5개의 값(동일하지 않은 날)의 평균을 얻었다.

처리 후 혈압: 처리 후 하루에 한번 혈압을 측정하였다. 처리 후 혈압으로서, 처리 16일, 17일, 18일, 19일 및 20일 후에 측정된 5개 값의 평균을 얻었다. 처리 전 및 후에 매일 혈액 루틴, 뇨 루틴, 간 기능, 신장 기능, 혈청 전해질(K⁺, Na⁺, Cl^-), 혈액-리피드, 혈당 및 ECG를 검사하였다.

치료학적 효과의 기준:

현저한 효과: 처리 후, 심장확장압을 1.33kpa 보다 높게 감소시켜, 정상적이 되게 하거나, 2.67kpa 보다 높게 감소시킴.

효과: 정상적인 것은 아니지만 심장확장압을 1.33kpa 미만을 감소시키거나, 1.33-2.53kpa 감소시킴. 수축기성 고혈압에 있어서, 수축기압을 4kpa 보다 많이 감소시킴.

비효과: 처리 후, 혈압의 감소가 상기 기준을 달성하지 못함.

2. 결과:

치료학적 효과 분석: 처리 전 및 후의 혈압 및 감소를 비교하고, 표 14에 기재하였다. 군 모두는 T 시험에 의해 대존군과 매우 현저한 차이를 나타냈다(P〈0.01). 그러나, 두 군 사이에는 현저한 차이가 나타나지 않았다(P〉0.05). 또한, 처리 후, 두 군의 혈압 감소 효과 사이의 현저한 차이를 나타내지 않았다(표 14 참조).

처리 전 및 후의 혈액 생화학 및 ECG의 변화: 처리 전, 10명의 심실기외수축, 8명의 심방조기박동, 4명의 절대적 왼쪽 각차단, 7명의 절대적 오른쪽 각차단, 10명의 좌심실비대, 16명의 납 Ⅱ, Ⅲ, avF, V₄-V₆의 ST-T 단편에 대한 허혈성 변화. 두 군의 총 환자수는 88명이다. 처리 후, 납 V-V의 개선된 ST-T 단편은 12명의 ECG, 8명의 심방조기박동 및 7명의 심실기외수축이 사라졌으며, 혈액 전해질(K⁺, Na⁺, Cl^_) 및 혈당에서는 명백한 차이가 나타나지 않음을 보여준다.

3. 결론:

조성물은 본태성 고혈압 및 신성 고협압을 저하시킬 수 있다. 혈압 저하 효과는 처리 30분 후에 나타나며, 처리 2시간 후에 피크에 도달한다. 효과는 3시간이 넘게 지속되며, 용량에 의존적이다. 혈압은 약제 투여하지 않은 후 20시간 동안 정상적으로 유지된다. 이는 동시에 혈액-리피드의 수준을 감소시킨다. 따라서, 상기 조성물은 고지혈증을 수반하는 고혈압을 앓는 환자에 특히 적합하다. 상기 조성물을 시험한 44명의 환자중에 부작용은 관찰되지 않았다. 총 효율은 77%이다(표 15 참조).

표 13. 두 군 사이의 환자의 일반적 상태 비교

표 14. 처리 전 및 처리 후의 혈압(Kpa)의 감소 비교(X±SD)

표 15. 처리 전 및 처리 후의 두 군 사이의 혈압 저하 효과 비교

본 발명의 솔잎 추출물, 라딕스 푸어라리애 추출물 및 펄 스트라툼 분말로 구성된 제형(이후부터는 "제형"으로 기재)의 임상 실험은 하기에 설명될 것이다:

10. 심근염을 치료하기 위한 제형의 치료학적 효과의 관찰

재료 및 방법:

1. 처리 군: 심근염의 진단 기준에 따른 바이러스 심근염을 앓는 11명 및 류마티스성 심근염을 앓는 5명의 환자를 처리군(모두 16명)으로서 선택하였으며, 이중 9명은 남성 7명은 여성이며, 6-17세이며, 평균 연령은 11.6±2.8이며, ECG에 있어서, 10명은 심근허혈을 나타내며, 9명은 부정맥을 나타냈다(여기에서, 6명은 빅맥을 나타내며, 4명은 빈번한 기외수축 및 2명은 서맥을 나타냄).

2. 대조군: 8명의 바이러스성 심근염, 4명의 류마티스 심근염을 포함하는 12명의 환자를 대조군으로서 선택하였다. 5명이 남성이고, 7명이 여성이며, 연령은 4 내지 17세이며, 평균 연령은 9.1±2.6세이다. ECG의 경우, 9명은 심근허혈, 7명은 부정맥을 나타낸다(여기에서, 5명은 빈번한 기외수축을 수반하는 빅맥을 나타내며, 2명은 서맥을 나타냄).

3. 처리후 단식 환자로부터 혈액 채취: ESR, GOT, CPK, CPK-MB, ECG 및 RF(류마티즘 인자)를 검사하였다.

4. 1.5g의 제형을 하루에 세번씩 3일 동안 처리군의 환자에 투여하였다. 대조군에서, 통상적인 방법을 사용하였다: 10% 글루코오스 용액 500ml + 비타민 C 3.0g + ATP 40mg + 보조효소 100u을 하루에 한번 정맥내로 한 방울씩 투여하고, 보조효소 Q₁₀는 하루에 한번씩 30일 처리 코스로 근내 주입하였다. 두 군의 류마티스성 심근염을 앓는 환자에는 통상적인 항류마티스 처리를 하였다.

치료 효과 및 통계학적 처리 기준

현저한 효과: ESR, GOT, CPK, CPK-MB, ECG, RF 등을 포함한 모든 인덱스가 정상으로 회복됨.

효과: 정상적으로 회복되지 않았지만, 처리 후 상기 인덱스가 명백히 개선됨(ECG는 여전히 비정상적인 심박수, 빈번한 기외 수축 또는 ST-T 단편의 경미한 변화를 나타냄).

비효과: 상기 인덱스가 어느 정도 개선됐지만, 여전히 명백히 비정상적임.

중요한 T-시험을 하였다.

결과: 두 군간의 치료학적 효과의 비교를 하기에 나타내었다(표 16 참조):

표 16.

11. 고지혈증을 치료하기 위한 제형의 치료학적 효과 분석:

당뇨병 및 간질환 또는 신장질환은 없지만, 고지혈증을 앓는 환자를 관찰 대상으로 선택하였다. 관찰 동안, 모든 환자에 리피드 신진대사에 효과적인 약제 투여를 중단하고, 평소의 식이요법을 유지시켰다.

11.1. 임상 데이타: 110명을 70명의 처리군 및 40명의 대조군으로 나누었다. 처리군은 50명은 남성이고, 20명은 여성이며, 연령은 40 내지 67세이며, 평균 연령은 55세이다. 41명이 고콜레스테롤혈증(TC)이며, 55명이 고트리글리세리드혈증(TG)이다. 대조군에서, 28명이 남성이며, 12명이 여성(총 40명)이며, 연령은 40-66세이며, 이들의 평균 연령은 54세이다: 30명은 고콜레스테롤혈증이며, 30명은 고트리글리코리드혈증이다. 성별, 연령 및 증상에 대해 두 군을 비교하였다.

11.2. 군 및 치료학적 방법

11.2.1. 처리 군: 1.5g의 제형을 하루에 세번씩 한달 코스로 처리함.

11.2.2. 대조군: 에리트리누스 이브닝프리모스 뿌리 오일(erythrinus eveningprimrose root oil)의 연질 캡슐을 하루에 세번씩 2알씩 한 달 코스로 투여(주의: 각 캡슐을 0.5g이며, 약제는 더 식스스 파마슈티컬스 팩토리 오브 욱시(the sixth pharmaceutical factory of Wuxi)에서 생산됨).

11.2.3. 관찰 방법: 모든 환자의 혈액 루틴, 뇨 루틴, 간기능, 신장기능, 특히 혈액 리피드 및 ECG를 처리 전 및 후에 검사하였다.

11.3. 결과:

11.3.1. 고콜레스테롤혈증(TC)의 치료 효과:

처리 군의 41명중에서:

현저한 효과: 20명

효과: 16명

비효과: 5명

총 효율: 87.8%

대조군의 30명 중에서:

현저한 효과: 4명

효과: 8명

비효과: 18명

총 효율: 40%

두 군 사이의 현저한 차이가 있다(X²= 18.16 P〈0.01). 처리 전 및 후의 차이는 각각 처리군에서 2.46±0.69mmol/L이며, 대조군에서 0.84±0.33mmol/L이었다. 처리군에서의 TC 저하 효과는 대조군에서의 효과보다 훨씬 높았다(t = 11.86 P〈0.001). 처리군에서, 처리 전 TC를 처리 후 TC와 비교할 경우, t = 22.829 P〈0.001이며, 이는 처리군에서의 TC 저하 효과가 신뢰성이 있다는 것을 보여준다.

11.3.2. 고지혈증(TG)의 치료 효과:

처리군에서 55명중:

현저한 효과: 24명

효과: 25명

비효과: 6명

총 효율: 89.1%

대조군에서 30명중:

현저한 효과: 9명

효과: 5명

비효과: 16명

총 효율: 46.7%

두 군 사이에는 현저한 차이가 있다(X²= 18.04 P〈0.01). 처리 전 및 후의 차이는 각각 처리군에서 1.57±0.52mmol/L이며, 대조군에서 1.01±0.31mmol/L이다. 처리군에서의 TG 저하 효과는 대조군에서의 효과보다 훨씬 높다(t = 5.385 P〈0.001). 처리군에서, 처리 전 TC를 처리 후 TC와 비교할 경우, t = 22.391 P〈0.001이며, 이는 처리군에서의 TC 저하 효과가 신뢰성이 있다는 것을 보여준다.

제형의 처리 동안 부작용은 발견되지 않았다. 게다가, 처리 전 및 처리 후의 혈액 루틴, 뇨 루틴, 간기능, 신장기능 및 ECG의 명백한 차이가 나타나지 않았다.

11.3.3. 결론:

고콜레스테롤혈증 및 고트리글리세리드혈증을 치료하기 위한 제형의 총 효율은 각각 87.8% 및 89.1%이었으며, 이는 대조군과 비교하여 현저한 차이가 있다. 이는 고지혈증을 처리하기 위한 제형의 효과가 대조군 약제의 효과 보다 훨씬 높으며, TC 및 TG의 믿을 만한 저하 효과를 갖는다는 것을 입증해준다. 통계학적 처리로, 대조군 약제의 효과와 제형의 효과를 비교할 경우, P〈0.001이다. 이는 혈액 리피드를 감소시키는 제형의 효과가 대조군 약제보다 크다는 것을 보여준다.

12. 카를리오바스큘러 질환(carliovascular disease)을 치료하기 위한 제형의 임상 실험

12.1. 대상 및 재료:

12.1.1. 대상: WHO의 진단 기준에 따라서, 본태성 고혈압, CHD로 인한 협심증, 높은 혈액점도를 수반하는 고지혈증을 앓는 환자를 관찰 대상으로 선택하고, 세 군으로 나누었다.

12.1.1.1. 고혈압 군: 총 62명, 남성:37명, 여성: 25명. 연령은 27-74세이다. 평균 연령은 52.3±26.5이다. 이들의 임상 병력은 평균 2.9±3.12년 동안 지속된 것이다. 원발성 고혈압: 18명(29%), 이차 고혈압: 40명(64.5%), 삼차 고혈압: 4명(6.5%).

12.1.1.2. 협심증 군: 총 40명, 남성:21명, 여성:19명. 연령은 45-79세이다. 평균 연령은 59.8±15.2이다. 안정적인 진통의 협심증(stable labor angina): 26명(65%), 불안정적인 협심증(unstable angina): 14명(35%).

12.1.1.3. 고지혈증 및 고점도성 군: 총 65명, 남성:42명, 여성:18명. 평균 연령은 55.3±5.0이다.

12.1.2. 방법:

12.1.2.1. 치료 방법: 강압제, 항협심증제 및 항지질제의 투여를 중단하고, 1-1.5g의 제형을 하루에 세번씩 4-6주 코스로 처리하였다. 죄심실비대를 앓는 환자에 에날라프릴 말레이트(Enalapril maleate)를 투여하고, 협심증을 앓는 환자에 니트레이트 또는 숙시아지우싱완(Suxiaojiuxingwan)을 투여하고, 그 외 통상적인 처리는 변화시키지 않고 계속 유지하였다.

12.2. 결과

12.2.1. 고혈압 군: 처리 전 및 후의 수축기혈압(SBP) 및 확장기혈압(DBP)의 변화에 대해 표 17 및 18를 참조하라.

표 17. 저혈압에 대한 제형의 치료학적 효과

표 18. 상이한 기간동안 고혈압에 대한 제형의 치료학적 효과

12.2.2. 협심증 군: 증상, ECG 및 다양한 협심증에 대한 치료학적 효과에 대해 표 19 및 20을 참조하라.

12.2.3. 고점도성을 수반한 고지혈증 군: 처리 전 및 후의 혈액-리피드 및 혈류의 변화에 대해 표 21을 참조하라.

표 19. 협심증 환자의 증상 및 ECG에 대한 제형의 치료학적 효과(n=40)

표 20. 다양한 협심증에 대한 제형의 치료학적 효과(n=40)

표 21. 혈액-리피드 및 혈류에 대한 제형의 효과(n=65)

12.3. 논의:

고혈압, CHD, 협심증 및 높은 혈액점도를 수반하는 고지혈증에 대한 제형의 임상적 치료 효과는 만족할만 하다. SBP 및 DBP는 23.4% 및 20.5%까지 각각 감소하였다. 총 효율은 96.8%이다. 협심증을 앓는 환자의 증산 및 ECG의 개선에 대한 효율은 각각 95% 및 65%이다. 안정적인 진통 협심증 및 불안정한 협십증의 효율은 각각 100% 및 85.7%이다. CH, TG, LDL-C의 수준은 각각 18.0%, 27.2%, 39.2%까지 감소한 반면, HDL-C의 수준은 58.8%까지 증가하였다. 헤마토크리트, 전혈 특정 점도 및 플라즈마 특정 점도는 각각 27.1%, 16.6% 및 24.6%까지 감소하였다. 처리 전과 처리 후의 모든 종류의 상기 인덱스에서 현저하거나 매우 현저한 차이를 나타냈다. 이는 제형이 혈압, 콜레스테롤, 트리글리세리드, LDL-C, 헤마크리트, 전혈 특정 점도 및 플라즈마 특정 점도의 수준을 감소시키며, HDL-C의 수준을 증가시켜, 심장을 보호하고, 협심증 등을 완화시킬 수 있다는 것을 보여준다.

Claims

고체 상태에서 밝은 갈색 내지 어두운 갈색을 띠며, 수용성이며, 자외선 가시광선 스펙트럼에서의 최대 흡수 피크가 약 242nm인 솔잎 추출물.
제 1 항에 있어서, 고혈압, 관상동맥심질환(CHD), 협심증, 부정맥, 심근염, 당뇨, 고지혈증, 높은 혈액점도, 고 혈액응집, 동맥경화증, 뇌경색, 뇌동맥경화증, 노인성 치매 및 돌발성 난청을 포함한 질환을 치료함을 특징으로 하는 솔잎 추출물.
제 2 항에 있어서, 질환이 고혈압, 고지혈증, 높은 혈액점도, 높은 혈액응집, 동맥경화증, 뇌경색, 뇌동맥경화증, 노인성 치매 및 돌발성 난청임을 특징으로 하는 솔잎 추출물.
제 3 항에 있어서, 질환이 CHD, 협심증, 부정맥, 심근염 및 당뇨임을 특징으로 하는 솔잎 추출물.
고혈압, CHD, 협심증, 부정맥, 심근염, 당뇨, 고지혈증, 높은 혈액점도, 높은 혈액응집, 동맥경화증, 뇌경색, 뇌동맥경화증, 노인성 치매 및 돌발성 난청을 포함하는 질환을 치료하기 위한 제 1 항에 따르는 솔잎 추출물의 용도.
치료 유효량의 솔잎 추출물을 함유하는 약제학적 조성물을 투여함을 포함하여, 질환을 치료하는 방법.
유효량의 솔잎 추출물 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물.
제 7 항에 있어서, 라딕스 푸어라리애(Radix Puerariae) 추출물을 추가로 포함하며, 솔잎 대 라딕스 푸어라리애의 비가 3:1 내지 5:2임을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 7 항 또는 제 8 항에 있어서, 펄 스트루툼 분말(pearl strutum powder)을 추가로 포함하며, 솔잎 대 펄 스트루툼 분말의 비가 20:1 내지 2:1임을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 6 항에 따르는 치료 유효량의 약제학적 조성물을 투여함을 포함하여, 질환을 치료하는 방법.