JP2001508777A

JP2001508777A - 松葉抽出物及びその使用

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Publication number: JP2001508777A
Application number: JP53145598A
Authority: JP
Inventors: ジ、リン
Original assignee: ジ、リン
Priority date: 1997-01-27
Filing date: 1997-01-27
Publication date: 2001-07-03
Also published as: AU734851B2; US6329000B1; KR20010049156A; EP1013278A4; CA2279261A1; HK1025246A1; DE69734163T2; EP1013278A1; EP1013278B1; DE69734163D1; KR100529793B1; WO1998032455A1; AU1588497A

Abstract

(57)【要約】本発明はある種の松葉抽出物が、高血圧症、冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、糖尿病、高脂血症、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、脳梗塞、脳動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴等の治療に使用することができることを開示するものである。

Description

【発明の詳細な説明】松葉抽出物及びその使用技術分野本発明は松葉抽出物及び医学におけるその使用、特には高血圧症及び冠状動脈性心疾患の治療における使用に関するものである。本発明はまた松葉抽出物を包含する医薬組成物及びその医薬的使用にも関する。背景松葉は、松〔ラテン語名フォリウムピニ（Folium Pini）〕の葉である。特に、マツ科(Pinaceae)マツ属(Pinus)の植物の松葉である。それはピヌスアブレアフォルミスカル（Pinus abuleaformis carr）、ピヌスマッソニアナラムス（Pinus massoniana Lams）、ピヌスユアナネンシスフランチ（Pinus Y uananensis Franch）等に由来する。中国では、２０種及び１０変種のマツ科植物が知られており、そのうち１６種及び２変種が栽培されてきた。中国では、古くから松葉はある種の薬の補助剤として使えるかもしれないと考えられていた。例えば、中約大辞典（Great Dictionary of Chinese Herbs）には、損傷、浮腫、湿疹、慢性細気管支炎及びアソムニア（asomnia）の治療や、インフルエンザ、流行性脳炎を予防する処方が収録されているが、松葉はこれらの処方における成分の中の１種として用いられている。このように古くから松葉は薬の補助剤として用いられてきたが、松葉単独で高血圧症、冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、脳梗塞、高脂血症、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴の治療に効果があることは全く知られていなかったし、前記の疾病を治療するのに松葉あるいはその抽出物と他の物質との組み合わせを使用できることは全く知られていなかった。長年にわたる研究の結果、本発明者は松葉抽出物を高血圧症、狭心症、心筋炎、不整脈、脳梗塞、高脂血症、糖尿病、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴の治療に用いることができ、その作用が満足しうることを見出した。それに基づいて松葉の新規な用途の発明がなされた。発明の簡単な説明したがって、本発明の目的は、冠状動脈性心疾患、狭心症、心筋炎、不整脈、高血圧症、高脂血症、高粘血症、高凝血症、糖尿病、脳梗塞、脳動脈硬化症、動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴等のような多くの疾病を治療するための松葉抽出物を提供することである。本発明の目的の１つは、疾病治療用の医薬組成物を提供することである。本発明の目的の１つは、各種の疾病の治療方法を提供することである。本発明の目的の１つは、疾病治療において松葉抽出物を使用することである。本発明のその他の目的は発明の説明において示される。本発明における、松葉抽出物は固体状で淡かっ色ないし濃かっ色を呈し、紫外 ‐可視光スペクトルにおいて極大吸収ピークを２４２ｎｍ付近に示す。図面の簡単な説明図１は本発明松葉抽出物の薄層クロマトグラフィーの結果を示す。図２は本発明松葉抽出物の紫外‐可視光吸収のグラフを示す。図３ａは内皮存在時の本松葉抽出物の血管拡張作用と投与量／濃度との間の依存関係を示す。図３ｂは内皮存在時の対照群としてのカポテン（Capoten）の血管拡張作用と投与量／濃度との間の関係を示す。図３ｃは内皮除去時の本松葉抽出物の血管拡張作用と投与量／濃度との間の関係を示す。図３ｄは内皮除去時の対照群としてのカポテン（Capoten）の血管拡張作用と投与量／濃度との間の関係を示す。図４は内皮存在時の本松葉抽出物と葛根（Radix Puerariae）抽出物の血管拡張総合作用を示す。発明の詳細な説明本発明によれば、松葉抽出物は固体状態で淡かっ色ないし濃かっ色で、水溶性であり、紫外‐可視光スペクトルにおいて極大吸収ピークを２４２±１ｎｍ付近に有する。本発明者は心筋炎、冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、高脂血症、高粘血症、高凝血症、脳梗塞、糖尿病、脳動脈硬化症、老人性痴呆症、動脈硬化症及び突発性難聴等のような各種の疾病の治療に松葉抽出物が治療作用を有することを見出した。本松葉抽出物は特に高血圧症、高脂血症、高粘血症及び高凝血症に対して治療作用を有する。本発明において、本抽出物は常法を用いて松葉から抽出することができる。これらの方法には、例えば水抽出法、水‐アルコール法、アルコール抽出法などがある。好ましいのは水抽出法である。松葉はダフリアンラーチ（Dahurian Lar ch）、ピヌスタブラエフォルミスカル（Pinus tabulaeformis carr）、ピヌスマッソニアナラム（Pinus massoniana Lamb）、セドルスデオダラ（ロクス．）ロウド〔Cedrus deodara（Roxb.）Loud〕、ピヌスプミラ（プル）レゲル〔Pinus pumila（pull）Regel〕、ピヌスコライエンシスシエブ．エトズック．（Pinus koraiensis Sieb．et Zucc.）、ピヌスユンナネンシスフランチ（Pinus Yunnanensis Franch）、クロマツ等のような各種のマツの木の松葉であってよい。本松葉抽出物は固体状態で淡かっ色ないし濃かっ色である。その色が薄いか濃いかは乾燥に使用した方法による。本抽出物は水やアルコールのような極性溶媒に可溶性であり、紫外‐可視光スペクトルにおいて極大吸収ピークを２４２ｎｍ付近に現す。薄層クロマトグラフィー分析を用いて同定するとそのＲ_f値はそれぞれ０.９３及び０.７８である。医薬組成物は治療有効量の本松葉抽出物と薬理学的に許容可能な担体または賦形剤を包含する。その薬理学的に許容可能な担体または賦形剤は一般に用いられている担体または賦形剤である。疾病の治療方法は本発明の松葉抽出物を治療有効量服用させることを包含する。これらの疾病は高血圧症、糖尿病、冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、心筋炎、高脂血症、高粘血症、高凝血症、脳梗塞、老人性痴呆症、動脈硬化症及び突発性難聴を含む。本発明の松葉抽出物は上記またはその他の疾病の治療において他の薬品と適合性がある。例えば、血圧、血中脂質、血糖、血液粘度及び血小板凝集速度を低下させるだけでなく、カルシウム補給剤とともに用いるとカルシウム代謝を調節する。本松葉抽出物は上記の疾病の治療において葛根（Radix Puerariae）、ラムルスウンカリアエクムウンシス（Ramulus Uncariae Cum Uncis）、真珠層粉末、真珠の粉末、オスドラコニス（Os Draconis）、コンチャオストレアエ（Concha Ostreae）、ギンクゴビロバエル．（Ginkgo biloba L.）、ラジックスサルヴィアエミリオリザエ(Radix salviae Milliorrhizae)、フロスカルサミ（Fols Carthami）、リゾマチュアンション（Rhizoma Chuanxiong）、フルクツストリコサンキス（Fructus Trichosanchis）、イトスギの葉等のような他の成分と組み合わせることができる。本発明によれば、上記の疾病を治療するための処方は松葉と葛根（Radix Puer ariae）とを包含する。松葉と葛根との割合は３：１から５：２、好ましくは３：１から４：１である。本発明によれば、本処方はさらに真珠層粉末を含む。松葉と真珠層粉末との割合は２０：１から２：１である。松葉、葛根及び真珠層粉末との割合は好ましくは１８：６：９である。該処方に真珠層粉末を加えるとカルシウム代謝の調節効果は増大し得る。葛根はプエラリアロバタ（ウィルド．）オーウィ〔Pueraria Lobata（Willd .）Ohwi〕の地下部であり、真珠層粉末はクリスタリアプリカタ（リーチ）〔C ristaria plicata(Leach)〕またはアナドンタウッジアナ（リー．）〔Anadont a woodiana(Lea.)〕等の貝の内層部分を加工して粉末にしたものである。葛根及び真珠層粉末は広範囲な供給源を有し、市販されている。本発明の、医薬組成物は治療有効量の本松葉抽出物及び葛根並びに薬理学的に許容可能な担体または賦形剤を包含する。治療方法は上記の疾病の治療用処方の該抽出物を治療有効量服用させことを包含する。本松葉と、葛根の抽出物はこれら２種のハーブの混合物から抽出することができ、松葉の抽出物及び葛根の抽出物とを混合することにより得てもよい。本発明の医薬組成物は経口投与または局所投与によって投与することができる。それらは錠剤、経口液、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、注射剤（静脈注射剤を含む）、外用塗布用液剤、軟膏剤、チンキ剤、散剤及び注入剤等のような各種の投薬形状に製剤される。本松葉抽出物の経口投与における投与量は、成人には１日３回１回当り１から３ｇ、好ましくは１回当り１から２ｇ及び小児（５歳以上１４歳以下）には１日３回１回当り０.５から１ｇである。さて、一例として松葉抽出物を水抽出法を用いて調製する方法について詳細に説明する。原料として松葉を採取する。松葉はそのまま加工処理しても加工前に細片に切り分けるか粉末にすりつぶしてもよい。松葉を処理前に細片に切り分けるのが好ましい。松葉に過剰量の水を加える。加える水は該松葉の少なくとも４倍(重量) 、好ましくは８から９倍である。混合物を抽出のため加熱して煮沸する。煮沸時間は１から２時間、好ましくは１．５時間である。該混合物を抽出後ろ過し、それから濃縮して濃かっ色の濃縮溶液を得る。ろ過の残留物に水を加え煮沸することにより２度目の抽出を行う。加える水は少なくとも該残留物の重量の３倍であるが、６から７倍が好ましい。煮沸時間は０.５から１時間、好ましくは１時間である。２度目のろ過後、２度目のろ液は最初のろ液と混合することができ、それらを共に濃縮して濃縮溶液を得る。必要があれば、該濃縮溶液を乾燥して淡かっ色ないし濃かっ色の粉末を得ることができる。スプレー乾燥、真空乾燥及び凍結乾燥等のような多くの方法を乾燥に用いることができる。乾燥工程の間の温度が高ければ高いほど、粉末の色はより濃くなる。松葉抽出物の識別テスト１．薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を使用した識別テスト乾燥した松葉抽出粉末５ｇを秤量し、それにエチルエーテルを１回１時間かけて３０ｍｌずつ２回添加し（撹拌しながら）浸出した。ろ過後、これら２回のろ液を一緒に集め、エチルエーテルを回収して乾燥固体を得た。少量のエチルエーテルを添加して乾燥固体を溶解し、該溶液を容量１ｍｌのメスフラスコに移し、エチルエーテルを添加して１ｍｌの溶液とし均一になるように撹拌して、テスト用試料を調製した。該溶液１０〜２０μｌを、中国薬局方（１９９５年版、付録６Ｂ）で公表されている方法に従うＴＬＣのテストに供した。バインダーとしてカルボキシメチルセルロースのナトリウム塩を使用したシリカＧの薄層板上に該溶液を展着し、石油エーテル及び酢酸エチル（４：１の比率）を展開液として展開したところ、１２ｃｍにスポットが現れた。それを採取し、空気乾燥させた。その上に濃度２０％のアルコール含有硫酸水溶液を噴霧し、該スポットの色が現れるまで１０５℃で加熱した。テストされた溶液のクロマトグラフィーでは主に赤紫色の２つ同一のスポットが現れた。Ｒ_fの値はそれぞれ０.９３及び０.７８であった（添付された図１を参照）。２．紫外スペクトルを使用した識別テスト松葉抽出粉末を６０メッシュのふるい目を通し、５０℃−５５℃で３時間乾燥した。次いで、保存及び使用のため、シリカ乾燥器に移した。前処理された該松葉抽出物を２ｇ秤量し、（注意：精度としては０.０１ｇまでが要求される）それを５０ｍｌの栓付き三角フラスコに入れ、石油エーテル１５ｍｌずつを３回、１回毎に３０分かけて添加し、超音波で抽出した。次いでその混合物をろ過した。そのろ液は蒸発し、残留物をクロロホルム１５ｍｌずつ、１回に３０分かけて３回加え超音波処理したのち、ろ過した。各ろ液を集め、クロロホルムを留去することにより、乾燥固体を得た。この乾燥固体に少量のクロロホルムを添加して溶解し、この溶液を容量１０ｍｌのメスフラスコに移し、クロロホルムを標線まで添加し、均一になるまで撹拌してテスト用試料として供した。使用した紫外分光光度計（日本、島津、ＵＶ−２６０型）：スリット巾：１ｎｍ波長の増分：２ｎｍ波長の範囲：２００−５００ｎｍ吸光度：０−１極大吸収波長での吸光度が０.６−０.８になるように該テスト用溶液を適当に希釈した。中国薬局方（１９９５年版、付録６Ａ）で公表されている分光光度法に従って、紫外‐可視スペクトルを２００ｎｍないし５００ｎｍの波長範囲で測定した結果（添付された図２を参照）、波長２４２±１ｎｍに極大吸収ピークが現れた。１．松葉抽出物の血圧降下作用松葉抽出物（煎剤、濃縮後又は水抽出−アルコール析出後の乾燥粉末噴霧剤）は初期の高血圧症又は腎性高血圧症の患者及び自発性高血圧症（ＳＨＲｓｐ）又は２つの腎動脈のうちの一方の腎締による腎性高血圧症のラットに対して著しい血圧降下作用を示した。この作用は投与量に依存した。１松葉抽出物の急性血圧降下テスト（１）材料及び方法実験用動物：健常な３０匹の雄のウィスター（Wistar）ラットで、それらのうちの２０匹にゴールドブラット（Goldblatt）法によって手術を施し、２つの腎動脈のうちの一方の腎締による腎性高血圧症を形成させた。自発性高血圧症（ＳＰ）の３０匹の雄のラットを用いた。薬物：松葉抽出粉末、羅布麻（フォリウム・アポシニ・ヴェネッティ、Folium Apocyni veneti）化合物錠剤。正常対照群には、松葉抽出粉末１.６ｇ／ｋｇ／回を投与した。空試験対照群（ＳＰ）には、蒸留水２ｍｌ／１００ｇ（体重）／回を投与した。陽性対照群には、羅布麻(Folium Apocyni veneti)化合物錠剤１.０８ｇ／ｋｇ／回を投与した。低投与量群には、松葉抽出粉末０.８３ｇ／ｋｇ／回を投与した。高投与量群には、松葉抽出粉末３.３ｇ／ｋｇ／回を投与した。動物に麻酔を施し、右側の総頸動脈を切り離し、該右総頸動脈の遠心端を結紮し、ヘパリン化カテーテルを近心端に挿入した。該カテーテルと５導管生理学的器具を接続し、血圧及び心拍数を観測し、さらに腹腔を開腔し、十二指腸経由で薬物を投与して、薬物投与前、薬物投与後３０分、１時間、２時間及び３時間後の血圧及び心拍数の変化を観察した。（２）結果（表１参照）正常群の血圧は投与後３０分でわずかに降下したが、投与後１時間で元のレベル（Ｐ＞０.０５）に戻った。空試験対照群では血圧に明らかな変化はなかった。（Ｐ＞０.０５）。陽性対照群の血圧は投与後３０分で降下しはじめ、投与後２時間で降下は最大となり、このときの降下率は８．１±１．２２％に達し、投与前の血圧（Ｐ＜０.０５）と比較して統計学的有意であった。低投与量群の血圧は投与後３０分で降下しはじめた。降下のピークは投与後２時間で現れた。降下率はそれぞれ１４.３±２.３２％（腎性高血圧症群）及び１５.６± ２.１７％（ＳＰ群）に達し、投与前の血圧（Ｐ＜０.０１）と比較して非常に著しい差があった。高投与量群の血圧は投与後２時間で最も著しく降下した。その降下率はそれぞれ１８.６±２.０７％（腎性高血圧症群）及び１７.６±１.９８％（ＳＰ群）に達した。そのうえ、処理前の本群の血圧（Ｐ＜０.００１）及び処理後２時間での他群と比較して非常に明らかな差があった。要約：松葉抽出物の血圧急性降下テストで松葉抽出物は正常ラットの血圧に対して明らかな効果はなかったが、ＳＰ及び腎性高血圧症ラットの動脈圧を著しく降下させることを示した。効果は投与後３０分で現れた。その降下のピークは投与後２時間で現れた。効果は３時間以上持続し、投与量依存性であった。抽出物の血圧降下作用は羅布麻（Folium Apocyni veneti）化合物の作用より強かった。２松葉抽出物の長期血圧降下テスト１．材料及び方法：１０匹の健常な雄のウィスターラット及び５０匹の自発性高血圧症の雄のラット（ＳＰ）。薬物：血圧急性降下テストの薬物と同じ。方法：ウィスターラット正常対照群：ＳＰラット１０匹を１群とし、松葉抽出粉末１.６ｇ／ｋｇ／日を投与した。空試験対照群：蒸留水２ｍｌ／１００ｇ（体重）／日を投与した。羅布麻（フォリウム・アポシニ・ヴェネッティ、 Folium Apocyni veneti）化合物群：１.０８ｇ／ｋｇ／日、低投与量群：松葉粉末０.８３ｇ／ｋｇ／日、中投与量群：松葉粉末１.６ｇ／ｋｇ／日、高投与量群：松葉粉末３.３ｇ／ｋｇ／日として、１日に１回胃管栄養を実施した。栄養量は２ｍｌ／１００ｇ（体重）ずつだった。処理は３週間をもって１クールとした。薬物投与前と後のラットの血圧及び通常の状態を測定した。生体外での血圧及び頚動脈の血圧を測定し、線形関係一回帰分析でそのデータを検定した。ストした。その結果は平均値±標準偏差（Ｘ±ＳＤ）の形式で示された。それから、２群間に生じる差を検定した。２．結果：（表２参照）松葉抽出粉末処理後、ラットの通常の状態は正常であった。空試験対照群のラットの体重は平均２ｇ増加したが、高、中及び低投与量群は平均６.７ｇ増加した。松葉抽出物には正常対照群の血圧に対して効果はなかった（Ｐ＞０.０５）。低投与量群、中投与量群及び高投与量群の血圧降下率はそれぞれ３０.７±０. ９３％、３８.８２±３.６８％及び４８.２２±１.１６％であった。これら３群では、処理前の血圧（Ｐ＜０.００１）と比較して非常に著しい差があり、空試験対照群及び羅布麻（Folium Apocyni veneti）群（Ｐ＜０.００１）と比較して著しい差があった。処理後のＭＡＰは生体外の血圧と著しく明確な関係を示した。（ｒ＝０.９０３、ｔ＝８.８９９、Ｐ＜０.００１）。結論：松葉抽出物にはラット（ＳＰ）の血圧を降下させる十分な効果があった。その効果は投与量依存性であった。抽出物は正常な血圧には何ら影響はなかった。その血圧降下作用は羅布麻（Folium Apocyni veneti）化合物錠剤の作用（Ｐ＜０.００１）よりも強かった。抽出処理後のＳＰラットの活動及び食欲は正常で、体重が著しく増加した。３松葉抽出物の血圧降下作用の臨床試験１．方法：入院患者１０６例及び外来患者３８例を選び、試験を行った。徹底的に病歴を尋ねた後、身体検査及び実験室検査を行った結果、ＷＨＯ専門機関による高血圧症の診断基準に従って１２４例の患者が本態性高血圧症（ＥＨ）と診断され、そのうち患者３８例が第１期ＥＨ、患者７１例が第２期ＥＨ、患者１５例が第３期ＥＨ及び患者２０例が腎性高血圧症であった。本試験に入る一週間以上前に、該患者達は降圧薬、利尿薬及び血管拡張薬の服用を中止し、２群、すなわち、治療群と対照群に分けた。治療群の患者は松葉抽出物を経口的に１日３回、１回１５ｍｌずつ投与し、治療期間１か月間とした。対照群の患者は羅布麻（フォリウム・アポシニ・ヴェネッティ）化合物錠剤を１日に３回、１回２錠、１クール１か月間、投与した。投与前後それぞれ３日間の朝に患者全員の血圧を測定した。これら３日は薬物が投与される日とは異なる日でなければならない。治療前後の血圧の平均値を取った（注意：経口剤はその１５ｍｌ毎に松葉抽出物１.６ｇが含有されている）。血圧降下作用の判定基準：（１）顕著に有効な治験：以下の２つの要求のうちのどちらかを満たすこと。拡張期血圧の降下が１０ｍｍＨｇ以下で正常範囲であった。拡張期血圧がまだ正常に達していないが２０ｍｍＨｇ以上降下した。（２）有効な治験：以下の３つの要求のうち１つを満たすこと。拡張期血圧の降下が１０ｍｍＨｇ以下で正常範囲であった。拡張期血圧が治療前より１０ないし１９ｍｍＨｇ低いが、正常範囲には達しなかった。収縮期血圧が治療前より３０ｍｍＨｇ以上低かった。（３）非有効な治験：上記標準のどれも満たさなかった。２．結果：（表３参照）これら２群の年齢及び治療前の血圧に著しい差はなかった（Ｐ＞０.０５）。治療前後の血圧を比較すると、治療群の血圧は最も著しく降下した（Ｐ＜０.００１）のに対し、対照群の血圧はわずかに降下しただけであった（Ｐ＞０.０５）。治療群と対照群には明らかな差がある（Ｐ＜０.００１）。治療群の顕著に有効な治験の割合及び有効な治験の割合は対照群と比較して両方とも著しい（Ｐ＜０.００１又はＰ＜０.０５）。治療群においては、試験中にめまい、頭痛、胸部窮迫、動悸、不眠、胸部や手足の不快感のような症状が著しく軽減、もしくは消失することも観察された。治療群の顕著に有効な治験の割合は５２.４１ないし７５.２２％に達し、対照群の有効な治験の割合よりも明らかに高かった（Ｐ＜０.００１）。副作用はなんら認められなかった。血液、尿、便通、肝機能及び腎機能の検査でなんら異常は認められなかった。２０例の腎性高血圧症患者の中には、腎機能に多少の改善されたものがあった。すなわち尿素窒素及び血中のクレアチニンが低下し、同位体レノグラムは治療前より腎排泄機能が改善されたことを示した。結論：松葉抽出物は本態性高血圧症及び腎性高血圧症において著しい治療効果を示し、血液降下、臨床症状の軽減及び腎機能の改善効果は対照群（羅布麻化合物群）の効果より著しく高かった。２．松葉抽出物の低脂血試験１材料及び方法：実験用動物：体重１.５ないし２ｋｇの雄の北京産大耳白ウサギ（Beijing whi te rabbit）６０匹。薬物及び試薬：コレステロール［北京化学試薬社(Beijing Chemical Reagent Company)製］。プロピルチオオキシウラシル錠剤（毎回５０ｍｇ、ドイツ製、以下ＰＴＶとする）、ラード（自家製）。本発明の松葉抽出物（以下、松葉粉末とする）。ヘキサニコチン酸イノシトール錠剤［毎回０.２錠、北京第２製薬工場( the Second Pharmaceutical Factory of Beijing)製］。総コレステロール、トリグリセリド、高密度リポタンパク及び低密度リポタンパク一式［北京中生生物工程技術社（Beijing Zhongsheng Biotechnical Company）製］。方法：大耳白ウサギを通常の飼料で１０日間飼育した後、無作為に５群に分けた。１群１０匹。朝、空腹のウサギのらせん静脈から血液を採取した後、高脂肪質飼料を与え、血液試料の血中脂質を測定した。高脂肪質飼料の給餌量はコレステロール２ｇ／ｋｇ／日、ラード０.５ｇ／ｋｇ／日、ＰＴＶ１２.５ｍｇ／ｋｇ／日である。第４群では（予防群の）ウサギに高脂肪質飼料に加えて松葉抽出物０.７５ｇ／ｋｇ／日を与え、高脂肪質飼料を１５日間投与した後、空腹のウサギから再び血液を採取し体重を測定した。その後、高脂肪質飼料の給餌を停止し、通常の飼料に変更し、これに（１）空試験対照群には、胃管栄養法を用いて蒸留水を１日に１０ｍｌ投与した。（２）正対照群には、ヘキサニコチン酸イノシトール錠剤を０.３ｇ／ｋｇ／日、（３）低投与量群には、松葉粉末を０.２５ｇ／ｋｇ／日、（４）予防群には、３０日間松葉粉末を０.７５ｇ／ｋｇ／日、（５）高投与量群には、松葉粉末を１.５ｇ／ｋｇ／日、を与えた。該粉末は蒸留水１０ｍｌに溶解し、胃管栄養法を用いて１日１回投与した。投与後の１５日目に空腹のウサギから血液を採取して血中脂質のレベルを決定した。ＣＨＯＤ−ＰＡＰ法によって総コレステロール、ＧＰＯ−ＰＡＰ法によってトリグリセリド、ＰＴＡ−Ｍｇ²⁺付着法によって高密度リポタンパク及びＰＶＳ一段付着法によって低密度リポタンパクのレベルがそれぞれ調べられた。使用された器具は日立製７１５０型自動生化学分析器であった。２結果：（表４参照）表４より、高脂肪質飼料を与えられる前のすべての群において、血中脂質のあらゆる項目について統計的な差異は認められなかった（Ｐ＞０.０５）。しかし、高脂肪質飼料を与えられた後、（４）群（予防群）での総コレステロール、トリグリセリド及び低密度リポタンパクのレベルは他の群と比較して明らかに低下し、その差は明らかな統計上の有意性を示した（Ｐ＜０.００１）。総コレステロール、トリグリセリド、低密度リポタンパクのレベルは、すべての群で治療後に減少した。（１）群と他の４つの群を治療後に比較すると、明らかな統計上の有意性があった。治療後のレベルは（４）予防群で最も顕著に低下した（Ｐ＜０ .００１）。（１）空試験対照群での降下率は、他の４つの群とは著しく異なっていた。（３）、（４）、（５）群の降下率は（２）群よりも優れている。（２）群のトリグリセリドの降下率は（１）群と比較しても差は見られなかったが、（３）、（４）、（５）群と比較すると明白であり、特に（５）群では最も顕著な差が見られた（Ｐ＜０.００１）。（３）、（５）群での低密度リポタンパクの降下率は最も明らかであった（Ｐ＜０.００１）。治療後、高密度リポタンパクのレベルは（１）、（２）群では低下したが、（３）、（４）、（５）群では増加しており、（４）、（５）群での増加がより明白であるが（Ｐ＜０.０１）、特に（５）群が最も顕著であった（Ｐ＜０.０１）。結論：高脂肪質飼料による高脂血症の動物に対し、松葉抽出物は血清総コレステロール、トリグリセリド、低密度リポタンパクのレベルを低下させ、一方、高密度リポタンパクのレベルを増加させることができた。治療効果は予防群が最も満足なものであり、次に高投与量群が続いた。これらは、高血脂症において松葉抽出物は治療及び予防効果があることを示していた。３．副甲状腺ホルモン分泌機能に対する松葉抽出物の試験１材料及び方法実験動物：体重３２０〜３６０ｇの健常な雄ウイスターラット（Wistar rat）５匹、体重１７０〜２７０ｇの雄自発性高血圧症(ＳＰ)ラット１０匹を用いた。実験試薬：松葉抽出粉、パラトンモン（parathonmone）（ＰＴＨ）、カルシトニン（calcitonin）（ＣＴ）の放射免疫キット（日本のRongyan社製）方法：動物各々５匹ずつを(１)正常対照群；（２）ＳＰ空試験対照群；（３）ＳＰ治療群に分け、ウイスターラットの（１）正常対照群には、松葉抽出粉１. ５ｇ／ｋｇ（体重）／日を、ＳＰラットは１群５匹ずつの５群に分け、（２）空試験対照群には腸管栄養法により１日１回２ｍ１／１００ｇ（体重）の蒸留水を、（３）羅布麻(フォリウムアポシニヴェネティ、Folium Apocyni Veneti) 化合物群には、１.０８ｇ／ｋｇ（体重）／日を、（４）少投与量群には、松葉抽出粉０.８ｇ／ｋｇ／日を、（５）適量投与群には、松葉抽出粉１.５ｇ／ｋｇ／日を、（６）大投与量群には、松葉抽出粉３．０ｇ／ｋｇを１日１回の腸管栄養法とし、腸管栄養液を２ｍｌ／１００ｇ（体重）として投与した。治療期間は、１クール３週間とし、治療前後に、麻酔して眼球静脈から血液を採取し、血液を冷凍及び遠心分離（−４℃）することにより血清を採取し、血清ＰＴＨ及び血清ＣＴを放射免疫法により測定した。２結果表５より、治療前、（１）正常対照群と（２）、（３）群間におけるＰＨＴ、ＣＴの値には顕著な差があった。治療後、（３）群ではＰＨＴレベルが明らかに低下したがＣＴレベルが明らかに上がっていた。しかし、ＰＨＴ、ＣＴのレベルは依然として（１）群と（２）、（３）群間で差があった（Ｐ＜０．０５）。治療後、ＰＴＨ値の低下とＣＴ値の増加について、（３）群と（１）、（２）群間において明らかな差があった（Ｐ＜０.０５及びＰ＜０.００１）。結論：松葉抽出物には、自発性高血圧症（ＳＰ）ラットの副甲状腺ホルモン分泌機能に対してある程度の効果があった。３週間の治療期間後、明らかにＳＰラットのＰＨＴレベルは低下し、ＣＴレベルは増加した。治療後、正常対照群と比較しても差はみられるが、ＰＴＨの低下率及びＣＴの増加率を空試験対照群と比較した時に、統計的に明白な差が認められた。これらのことから、松葉抽出物はある程度までＳＰラットの副甲状腺ホルモン分泌機能を調節する作用があることが確認された。４．血液流動性対する松葉抽出物の改善効果（１）松葉抽出物の生体外血小板凝集抑制試験１材料及び方法実験動物：体重１.５〜２ｋｇの北京産大耳白ウサギ（Beijing white Rabbit ）の健常な雄２５匹を用いた。試薬及び機器：松葉抽出物、ダンシェン（Danshen）(Radix Salviae Miltior- rhizae)注射液（１ｍｌにつき２ｇの生薬を含む）、葛根（Radix Puerariae）の抽出物（１ｍｌにつき２ｇの生薬を含む）、ＡＤＰ（２０ｕｇ／２００ｕｌ）、０.２ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（３００ｍｇ／ｍｌ）、クエン酸ナトリウム水溶液（３.８％）、２％シリコーン−石油エーテル溶液、ＭＧ−１７６型血小板凝集装置、卓上平衡自動測定器、円形比色定量カップ（モデル：CHRONO-LOG３１２＃）、シリコーン処理遠心管、マイクロサンプラー。方法：１０〜１４時間給餌していないウサギのらせん静脈から血液を３ｍｌ採取し、シリコーン処理遠心管にいれた。血液とクエン酸ナトリウム水溶液との比は９：１として混合し、４分間遠心(８００ｒｐｍ)した。血小板の多く含まれる血しょう（ＰＲＰ）である上層液を採取した。残った血液を１０分間遠心(3000 ｒｐｍ)し、血小板のほとんど含まれない血しょうである上清（ＰＲＰ）を回収した。温度３７℃一定で、血小板凝集能をＢＯＲＮ比濁分析で試験した。比色定量カップの血しょうの量は、２５０ｍｌであり、試験時間は５分とした。サンプルを５つの群に分け、それぞれに（１）ＡＤＰ＋リン酸緩衝液、ＡＤＰ２ｕmol ／Ｌ、リン酸緩衝液０．２ｍｌ／Ｌ；（２）ＡＤＰ＋同量のダンシェン（Radix Salviae Miltiorrhizae）注射液；（３）ＡＤＰ＋同量の葛根(Radix Puerariae) の抽出物溶液；（４）ＡＤＰ＋同量の松葉抽出物溶液；（５）ＡＤＰ＋同量の組成物水溶液、を加えた。２結果：（表６参照）表６よりＡＤＰ＋リン酸緩衝液を基準とすると（２）、（３）、（４）及び（５）群の血小板凝集率は明らかに低下し、それら４群の低下率は、特に（４）、（５）群においては（１）群と比較したとき、明らかに差が認められた。１’血小板凝集抑制率は７４.５６〜８０.０６％と増加した。（４）、（５）群における５’最大凝集率は、（２）、（３）群と比較すると明らかな差がみられた。３結論生体外血小板凝集抑制試験では組成物、松葉抽出物、葛根(Radix Puerariae) 抽出物が明らかに血小板凝集率を抑制することが示され、特に等濃度のダンシェン水溶液よりはるかに強いものであった。ウサギの生体外血小板凝集抑制作用は１’で最も強かった。血小板凝集抑制作用の強さは順に、組成物群＞松葉群＞葛根群＞ダンシェン群であった。本試験では、松葉と葛根からなる組成物及び松葉抽出物のどちらも、血小板凝集の予防や鬱血（blood stasis）の治療に関して重要な影響力をもつことが示された。（２）血液流動性改善に対する松葉抽出物の臨床試験１材料及び方法男性患者５２名、女性患者３５名からなる、３７〜７５歳の８７名の患者が参加し、そのうち３６名は冠状動脈性心疾患、３７名が高血圧症、９名は脳梗塞、４５名が高脂血症、１２名が糖尿病であった（患者によっては２種あるいはそれ以上の疾患を併発していた）。対照群は患者４４名で、１８名が冠状動脈性心疾患、２１名が高血圧症、３名が脳梗塞、３２名が高脂血症であった（患者によっては２種あるいはそれ以上の疾患を併発していた）。これらの患者は試験に参加する１週間以上前からジプグリダモク(dipgridamok)、ダンシェン（Danshen）、アスピリン、Ca²⁺遮断剤のような血液の流動性に影響を与える薬物の服用を中止した。治療群では、１か月の治療期間で、１日３回、それぞれ１５ｍｌ（松葉抽出物１．６ｇを含む）の松葉抽出物の経口液を投与し、対照群では、１か月の治療期間で、１日３回、それぞれダンシェン組成物錠３錠を投与した。治療前後に血液流動性項目について検査した。この結果の平均の統計的な有用性について調査した。２つの群ごとに平均値の統計的な有意性を検討するためｔ検定を用いた。４．２．２結果：治療後、血沈率がゆるやかに低下し、ヘマトクリットが減少した。血しょう及び全血（高剪断、低剪断）の比粘度は顕著に改善され、血小板凝集率は顕著に低下した。表７及び表８参照結論：松葉抽出物は、高粘血あるいは高凝血症の患者及び動物に対し、顕著な治療作用を有していた。これは血沈、ヘマトクリット、血しょう及び全血の比粘度、並びに血小板凝集率を低下できた。このことは、血流促進及び鬱血の改善において、また、血栓症の予防・治療並びに微小循環（末梢血液循環）の改善において、非常に重要であった。よって、この薬剤が心筋梗塞、冠状動脈性心疾患、狭心症、脳梗塞、高血圧症、動脈、静脈の血栓症、突発性難聴及び鬱血症等を治療するとの理論的根拠を提供した。５冠状動脈の拡大、狭心症、不整脈の抑制における松葉抽出物の臨床試験冠状動脈性心疾患患者４２例に対し、１日３回、それぞれ松葉経口液１５ｍｌ（松葉抽出物１．６ｇを含む）を投与した。治療前後に心電図、血中脂質、ＴＸＢ₂、ＰＧＩ₂が検査された。対照群には１か月の治療期間で、１日３回、イソソルビドジナイトレート１０ｍｌを経口投与した。結果：（表９、１０及び１１参照）治療群の冠状動脈性心疾患患者４２名のうち、７名は心室性早期収縮で、松葉抽出物での治療後それらのうちの６名の早期収縮は明らかに改善したが、１名は松葉抽出物での治療後、改善は見られなかった。７名は心房性早期収縮であったが、１名に明らかな効果がみられた。２４名は慢性冠動脈不全で、心電図のＳＴ ‐Ｔ部分は１６例で改善された。４名はリモート心筋梗塞を併発した慢性冠動脈不全であったが、明らかな治療効果は１例で、心電図はいつも正常となり、改善された心電図のＳＴ‐Ｔ部分は２例で観察されだが、残りの１例では何も効果が見られなかった。１５名の糖尿病患者の血糖と尿糖は明らかに低下し、また四肢の麻痺、喉の渇き、頻尿などの症状は明らかに改善された。狭心症の制御：治療群の４２名の患者の狭心症の全体的な発症率は、治療前１週間に３９５回であったのが、治療後は１週間に１２８回に減少した（Ｐ＜０. ００１）。症状が悪化した者はいなかった。治療群の総合的な有効な治験の割合は９２.８％に上がった。対照群の狭心症の全体的な発症率は、治療前１週間に２１５回であったのが、治療後は１週間に１０８回に減少した（Ｐ＜０.０５）。対照群の総合的な有効な治験の割合は８６.６％に上がった。結論：松葉抽出物は冠状動脈性心疾患患者に対し狭心症の発症を明らかに抑制し、心電図の虚血性の変化を改善し、不整脈（心室性早期収縮）の発症を制御し、明らかに血清総コレステロールのレベルを下げ、わずかにトリグリセリドのレベルを下げ、高密度リポタンパクのレベルを上げ、ＴＸＢ₂のレベルを下げ、ＰＧＩ₂のレベルを上げる。したがって、抽出物は脳内動脈の血流量を増加させ、心筋の酸素消費量及び心筋の後負荷を低下させ、虚血性心筋を保護することができた。６．松葉抽出物の抗老化及び脳血流の増加作用脳梗塞または老人性痴呆症患者２５例が松葉経口液の治療を受けた。治療前後に流動性脳造影図、血清過酸化脂質及び血清銅−亜鉛活性酸素ジスムターゼ（ＳＯＤ₁と略称する）を検査した。３か月を治療期間とし、１日３回、１回１５ｍｌ（松葉抽出物１．６ｇ含有）ずつを投与した。治療後、流動性脳造影図に顕著な改善が見られ、ＳＯＤ₁は降下し、血清過酸化脂質も顕著に減少した。（表１２参照）治療前患者の流動性脳造影図には、血管抵抗の増加、血流量の減少、血液流入速度の低下及び血管弾性の減少が現れていた。しかしながら、松葉治療を受けた患者２５例中２０例の流動性脳造影図には、血管抵抗の低下、流入速度の増加、血流容積の増加、波形の改善等顕著な改善が現れた。松葉抽出物が脳血流増加作用を有することが証明された。７．松葉抽出物の血管拡張作用血管環の拡張隔離濯流試験は本松葉抽出物が動脈に対し拡張作用があることを証明した。その作用は内皮依存かつ投与量依存であった。内皮存在時では、抽出物の投与量が多くなればなるほど、血管拡張作用は強くなった。最大拡張率は８６.８８±１２.０３％にもなった。内皮なしでは本抽出物は最高濃度でさえもわずかに管を拡張しただけであった（１４.２３±２.０６％）。これらは松葉抽出物が内皮の血管活性物質を調節することによって血管を拡張することを証明した（添付の図３ａ−３ｄ参照）。実施例１松葉経口液の調製松葉１０ｋｇを採取し、水８０ｋｇを加えた。該混合物を１.５時間煎じ出した。煎じ出した汁を分取し、煎じ出した残渣に水６０ｋｇを再度加えた。該混合物を１時間煎じ出したのち、２度目の煎じ出した汁を分取し、該２回分の汁を合わせた。その汁をろ過し、ろ液にアルコールを加え、該混合物を２４時間静置後沈殿物を捨て、該アルコールを分け取り、これを１０ｋｇの溶液になるまで濃縮した。次に、蒸留水を加えてそれを薄め２０ｋｇの溶液とし、該汁にステヴィオサイド（stevioside）と保存料ニパギン（nipagin）を少量加え、各ビンに溶液１０ｍｌを分封してビン詰めとした。実施例２松葉カプセル剤の調製松葉１０ｋｇ及び葛根３.５ｋｇを採取した。５倍量の水を加え、該混合物を２時間煎じ出した。該混合物をろ過した。次に煎じ出した残渣を取り出し、残留物に再び４倍量の水を加えた。該混合物を１.５時間煎じ出した。ろ過して汁を得た。該２回分の汁を合わせた。その合わせた汁にアルコールを加え、該混合物を２４時間静置後沈殿物を捨て、アルコールを回収した。該汁を濃縮して油状抽出物としたのち、その抽出物を乾燥した。後で使用するためそれを粉末状に粉砕した。真珠層粉末５ｋｇをとり粉砕し、すりつぶして微粉末にした。それを上記の抽出物粉末と混合した。自動カプセル充填装置を使用して該粉末をカプセルに充填した。各カプセル剤は０.５ｇの薬剤粉末を収容した。カプセル剤をプラスチック−アルミニウムホイルで包装した。実施例３製法松葉１８００ｇと葛根６００ｇを採取した。それらの混合物に水を加えた。その混合物を２回煎じ出した。１回目は８倍容量の水で１.５時間煎じ出した。２回目は６倍容量の水で１.５時間煎じ出した。混合物をろ過し、これら２回のろ液を合わせた。合わせたろ液を乾燥して粉末を得た。これより本発明の松葉抽出物及び葛根（Radix Puerariae）からなる組成物の（以下、組成物と称する）動物実験及び臨床試験について説明する。８．血管拡張組成物の作用血管環の拡張隔離灌流試験は本組成物が動脈に対し拡張作用があることを証明した。この作用は内皮依存かつ投与用量依存であった。内皮存在時では、本組成物の投与量が多くなればなるほど、血管拡張作用は強くなった。最大拡張率は９６％にもなった（図４参照）。９．本組成物の血圧降下臨床試験１材料及び方法観察対象：本態性高血圧症患者４４人。全員６６歳以下の成人で、平均年齢は５３±１２.７歳であった。全員がＷＨＯの診断基準に従い高血圧症と診断された。別の本態性高血圧症患者４４人を対照群として無作為に選んだ。対照群の患者達にはカプトプリル（Captopril）を処方した。対照群患者達は５９歳以下の成人で平均年齢は４７±７.８歳であった。これら２群の性別及び病気の経過を表１３に列挙した。患者達は本試験に入る１週間前に降圧剤の服用を中止した。治療方法：治療群の患者達には５日間、１日３回、１回１.５ｇの本組成物を投与した。血圧が正常範囲まで下がらないときには、５日毎に投与量（０.５ｇ）を増加した。５日毎に増加したが、最大投与量は１日３回、１回３ｇを越えなかった。全治療期間は２０日間であった。対照群の患者達には１日３回、１回２５ｍｇのカプトプリルを与えた。血圧が正常範囲まで下がらないときには、５日毎に投与量（１２.５ｍｇ）を増加した。５日毎に増加したが、最大投与量は１日３回、１回７５ｍｇを越えなかった。全治療期間は同様に２０日間であった。治療前の血圧：患者達は全員本治療の１週間前に降圧剤の服用を中止した。それから、血圧を連続して５日間１日１回測定した。５個の値（非同日）の平均を治療前の血圧とした。治療後の血圧：治療後１日１回血圧を測定した。治療後第１６−２０日目に測定した５個の値の平均を治療後の血圧とした。本治療の前後にわたり毎日血液検査、尿検査、肝機能、腎機能、血清電解質（Ｋ⁺、Ｎａ⁺、Ｃｌ^-を含む）、血中脂質、血糖及び心電図等を検査した。治療効果の評価基準：顕著に有効な治験：治療後拡張期血圧は１.３３ｋｐａを越えて降下し正常になったか、または２.６７ｋｐａ以上降下した。有効な治験：治療後拡張期血圧は１.３３ｋｐａ未満しか降下しなかったが正常になったか、または１.３３−２.５３ｋｐａ以上降下した。収縮期高血圧に関しては、収縮期血圧は４ｋｐａを越えて降下した。非有効な治験：治療後の血圧降下が上記基準を達しなかった。２結果治療効果の分析：治療前後の血圧及び降下幅を比較し表１４に列挙した。２群とも同一群を対照としたｔ検定においては非常に顕著な差（Ｐ＜０.０１）を示したが、２群間では顕著な差はなかった（Ｐ＞０.０５）。さらに、治療後の２群の血圧降下作用の間には顕著な差はなかった、表１４参照。治療前後の心電図及び血液生化学の変化：２群８８例は治療前には心室性早期収縮が１０例、心房性早期収縮が８例、完全性左脚ブロックが４例、完全性右脚ブロックが７例、左心室性肥厚が１０例、ＩＩ、ＩＩＩ、ａｖＦ、Ｖ₄−Ｖ₆のＳＴ−Ｔ部分の虚血様変化が１６例であった。治療後Ｖ₄−Ｖ₆のＳＴ−Ｔ部分の虚血様変化が１２例好転し、心房性早期収縮が８例及び心室性早期収縮が７例消失した。血清電解質及び血糖については顕著な差はなかった。３結論本組成物は本態性高血圧及び腎性高血圧を顕著に降下させることができた。血圧降下作用は投与後３０分で現れ、投与後２時間でピークに達し、その作用は３時間を超過して持続した。血圧降下効果は投与量依存性であった。薬物の投与中止後２０時間血圧は正常範囲に維持された。同時に血中脂質レベルも低下させた。したがって、本組成物は高脂血症を伴う高血圧症患者に特に好適である。本組成物で治療した４４例には副作用は見られなかった。総合的な有効な治験の割合は７７％であった。表１５参照。本発明松葉抽出物、葛根（Radix Puerariae）抽出物及び真珠層粉末からなる処方（以下処方という）の臨床試験を以下に開示する。１０．心筋炎治療に対する処方の治療効果の観察対象及び方法１治療群：心筋炎診断基準に従ってウイルス性心筋炎１１例及びリウマチ性心筋炎５例が治療群（合計１６例）として選択された。この患者は、男性９例、女性７例、年齢６−１７歳（１１.６±２.８歳）で構成されていて、心電図は心筋虚血１０例、不整脈９例を示した（そのうち頻脈６例、頻発性早期収縮４例、徐脈２例）。２対照群：対照群としてウイルス性心筋炎８例及びリウマチ性心筋炎４例を含む１２例が選択された。この患者は、そのうち、男性５例、女性７例、年齢４ −１６歳（９.１±２.６歳）で構成されている。心電図は心筋虚血９例、不整脈７例を示した（そのうち頻脈及び頻発性早期収縮５例、徐脈２例）。３治療後空腹時に採血し、血沈、ＧＯＴ、ＣＰＫ、ＣＰＫ−ＭＢ、心電図、リウマチ因子を検査した。４治療群には１日３回、１回１.５ｇの試料を与えた。対照群には常法−３０日を治療期間としてビタミンＣ３ｇ、ＡＴＰ４０ｍｇ、補酵素１００ｕを加えた１０％ブドウ糖溶液５００ｍｌを１日１回点滴静注し、１日１回補酵素Ｑ１０１を筋肉注射すること−が用いられた。２つの群の中のリウマチ性心筋炎患者は通常の抗リウマチ治療を受けた。治療効果の評価及び統計学処理顕著に有効な治験：血沈、ＧＯＴ、ＣＰＫ、ＣＰＫ−ＭＢ、心電図、リウマチ因子等は正常範囲まで回復した。有効な治験：上記の指標は治療後明らかに回復したが、正常には至らなかった（心電図は心拍数の異常、頻発性早期収縮またはＳＴ−Ｔ部分のわずかな変化を示した）。非有効な治験：上記の指標はある程度回復したが、明らかに異常のままであった。有意性のためｔ検定が採用された。結果：２群間の治療効果の比較を下記に示した（表１６参照）。１１．高脂血症の治療に対する処方の治療効果高脂血症であるが糖尿病、肝疾患、あるいは腎疾患を併発していない患者が被験者として選択された。観察の間、すべての患者は、通常通り食生活を維持するが脂質代謝に作用する薬物の服用を中止した。１臨床データ：１１０例を、男性５０例、女性２０例、年齢は４０歳から６７歳までで、平均年齢５５歳であり、高コレステロール血症（ＴＣ）４１例と高血糖症（ＴＧ）５５例を含む７０例の治療群と、男性２８例、女性１２例、（合計４０例）で、年齢は４０歳から６６歳まで、平均年齢５４歳であり、高コレステロール血症３０例と（ＴＣ）と高血糖症（ＴＧ）３０例を含む４０例の対照群に分けた。これらの２群は、性別、年齢、症状に関してはほぼ同等であった。２群と治療方法２．１治療群には１か月の治療期間で１日３回、それぞれ１.５ｇの試料を投与した。２．２対照群には１か月の治療期間で１日３回、それぞれ月見草根油(eryth rinus eveningprimrose root oil)のソフトカプセル２錠（付記：各カプセル０. ５ｇ、ウーシー(Wuxi)の第６製薬工場で生産された）を投与した。２．３観察方法：すべての患者の、血液検査、尿検査、肝機能、腎機能、特に血中脂質と心電図が治療前後に調査された。３結果：３．１高コレステロール血症（ＴＣ）の治療効果：治療群の４１例の中で顕著に有効な治験の例数は２０例、有効な治験の例数は１６例、非有効な治験の例数は５例であり、合計すると有効な治験の割合は８７ .８％であった。対照群の３０例の中で顕著に有効な治験の例数は４例、有効な治験の例数は８例、非有効な治験の例数は１８例であり、合計すると有効な治験の割合は４０％であった。２つの群には明らかな違いがあった(Ｘ²＝１８.１６、Ｐ＜０.０１) 。治療前後のＴＣの違いは、それぞれ、治療群が２.４６±０.６９ｍｍｏｌ／Ｌ、対照群が０.８４±０.３３ｍｍｏｌ／Ｌであった。治療群でのＴＣの抑制効果は対照群よりも非常に強いものであった(ｔ＝１１.８６、Ｐ＜０.００１)。治療群では、治療前のＴＣを治療後と比較すると、ｔ＝２２.８２９、Ｐ＜０.００１で、これにより治療群におけるＴＣの抑制効果が信頼できるものであることが示されている。３．２高血糖症（ＴＧ）の治療効果：治療群の５５例の中で顕著に有効な治験の例数は２４例、有効な治験の例数は２５例、非有効な治験の例数は６例であり、合計すると有効な治験の割合は８９ .１％であった。対照群の３０例の中で顕著に有効な治験の割合は９例、有効な治験の割合は５例、非有効な治験の割合は１６例であり、総合的な有効な治験の割合は４６.７％であった。２つの群には明らかな違いがあった(Ｘ²＝１８.０４、Ｐ＜０.０１ )。治療前後のＴＧの違いは、それぞれ、治療群が１.５７±０.５２ｍｍｏｌ／Ｌ、対照群が１.０１±０.３１ｍｍｏｌ／Ｌであった。治療群でのＴＣの抑制効果は対照群よりも非常に強いものであった（ｔ＝５.３８５、Ｐ＜０.００１）。治療群では、治療前のＴＣを治療後と比較すると、ｔ＝２２.３９１、Ｐ＜０.００１で、これにより治療群におけるＴＣの抑制効果が信頼できるものであることが示されている。処方による治療の間に副作用は見られなかった。さらに治療の前後で、血液検査、尿検査、肝機能、腎機能、心電図について明らかな変化はみられなかった。４結論高コレステロール血症および高血糖症に対する処方の効果はそれぞれ、８７. ８％、８９.１％であり、対照群と比較すると明らかな差異があった。高脂血症の治療に対する処方の効果は対照薬よりも顕著であり、ＴＣ、ＴＧの抑制に対し信頼できる効果があった。統計的処理により対照薬と処方の効果を比較すると、Ｐ＜０.００１であった。これにより対照薬と比較すると、その血中脂質の抑制効果は抜きん出ていることが証明された。１２．心血管疾患の治療に対する処方の臨床試験１対象及び材料１．１対象：ＷＨＯの診断基準に従って、本態性高血圧症、冠状動脈性心疾患による狭心症、高粘血症を伴う高脂血症の患者が被験者として選ばれ、２つの群に分けられた。１．１．１高血圧症群：合計６２例、男性３７例、女性２５例、年齢は２７歳から７４歳。平均年齢は５２.５±２６.５歳。病歴は平均２.９±３.１２年。第１期、第２期、第３期はそれぞれ１８例（２９％）、４０例（６４.５％）。１．１．２狭心症群：合計４０例、男性２１例、女性１９例、年齢は４５歳から７９歳。平均年齢は５９.８±１５.２歳。安定労働型（stable labor）狭心症：２６例（６５％）、不安定労働型（unstable labor）狭心症：１４例（３５％）。１．１．３高脂血症と高粘血症の群：合計６５例、男性４２例、女性１８例平均年齢は５５.３±５.０歳。１．２方法：１．２．１治療方法：患者は血圧降下剤、抗アンギナ剤、抗脂血剤の服用を中止し、４〜６週間の治療期間中、１日３回それぞれ１〜１.５ｇの処方を服用した。左心室肥大の患者にはマレイン酸エナラプリル（Enalapril maleate）を併用し、狭心症の患者にはニトログリセリン、あるいは即効性救心丸（Suxiaoji uxingwan）等を投与し、他の慣例的な治療については変更しなかった。２結果２．１高血圧症群：治療前後の収縮期血圧（ＳＢＰ）、及び拡張期血圧（ＤＢＰ）の変化について表１７、１８に示す。２．２狭心症群：（臨床）症状、心電図，あらゆるアンギナ（angina）における治療効果について表１９、２０に示す。２．３高粘血症を伴う高脂血症群：治療前後の血中脂質と血液流動性の変化を表２１に示す。３考察高血圧症、冠状動脈性心疾患、狭心症、高粘血症を伴う高脂血症に対する処方の臨床的な治療効果は十分なものであった。ＳＢＰとＤＢＰはそれぞれ２３.４％及び２０.５％まで低下した。有効な治験の合計は９６.８％であった。アンギナ症患者の症状及び心電図の改善に対する有効な治験の割合はそれぞれ９５％、６５％であった。安定労働型アンギナ（stable labor angina）および不安定型アンギナ（unstable angina）に対する有効な治験の割合はそれぞれ１００％、８５.７％であった。ＣＨ、ＴＧ、ＬＤＬ−Ｃのレベルはそれぞれ１８.０％、２７.２％、３９.２％だけ低下したが、ＨＤＬ−Ｃのレベルは５８.８％に増加した。ヘマトクリット、全血比粘度、血しょう比粘度はそれぞれ、２７.１％、１６.６％、２４.６％だけ低下した。治療前後で、上記すべての項目について、明白な、あるいは顕著な差（Ｐ＜０.０５または０.０１）がみられた。これにより、この処方が、血圧、コレステロール、トリグリセリド、低密度リポタンパク− コレステロール、ヘマトクリット、全血比粘度、血しょう比粘度を低下させ、一方高密度リポタンパク−コレステロールについては増加させ、心臓を守りアンギナなどを軽減することが示唆された。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１０年８月２１日（１９９８．８．２１）【補正内容】請求の範囲１固体状態で淡かっ色ないし濃かっ色を呈し、水溶性で、紫外‐可視光スペクトルにおいて２４２ｎｍ付近に極大吸収を示す松葉抽出物。２高血圧症、冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、心筋炎、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、脳梗塞、脳動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴を含む疾病を治療するための請求項１の松葉抽出物。３疾病が高血圧症、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、脳梗塞、脳動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴である請求項２の松葉抽出物。４疾病が冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈及び心筋炎である請求項２の松葉抽出物。５高血圧症、冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、心筋炎、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、脳梗塞、脳動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴を含む疾病を治療することにおいて請求項１の松葉抽出物を使用すること。６松葉抽出物を含有する医薬組成物を治療有効量投与することを包含する疾病の治療方法。７治療有効量の松葉抽出物と薬理学的に許容可能な担体または賦形剤を包含する医薬組成物。８葛根（Radix Puerariae）抽出物を、松葉と葛根とが３：１から５：２の割合であるように含む請求項７の医薬組成物。９真珠層粉末を、松葉と真珠層粉末とが２０：１から２：１の割合であるように含む請求項７または８の医薬組成物。１０請求項６の医薬組成物を治療有効量服用させことを含む疾病の治療方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 9/00 Ａ６１Ｐ 9/00 9/10 9/10 9/12 9/12 43/00 １１１ 43/00 １１１ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１固体状態で淡かっ色ないし濃かっ色を呈し、水溶性で、紫外‐可視光スペクトルにおいて２４２ｎｍ付近に極大吸収を示す松葉抽出物。２高血圧症、冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、心筋炎、糖尿病、高脂血症、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、脳梗塞、脳動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴を含む疾病を治療するための請求項１の松葉抽出物。３疾病が高血圧症、高脂血症、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、脳梗塞、脳動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴である請求項２の松葉抽出物。４疾病が冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、心筋炎及び糖尿病である請求項２の松葉抽出物。５高血圧症、冠状動脈性心疾患、狭心症、不整脈、心筋炎、糖尿病、高脂血症、高粘血症、高凝血症、動脈硬化症、脳梗塞、脳動脈硬化症、老人性痴呆症及び突発性難聴を含む疾病を治療することにおいて請求項１の松葉抽出物を使用すること。６松葉抽出物を含有する医薬組成物を治療有効量投与することを包含する疾病の治療方法。７治療有効量の松葉抽出物と薬理学的に許容可能な担体または賦形剤を包含する医薬組成物。８葛根（Radix Puerariae）抽出物を、松葉と葛根とが３：１から５：２の割合であるように含む請求項７の医薬組成物。９真珠層粉末を、松葉と真珠層粉末とが２０：１から２：１の割合であるように含む請求項７または８の医薬組成物。１０請求項６の医薬組成物を治療有効量服用させことを含む疾病の治療方法。