KR102574896B1

KR102574896B1 - 진피 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독 의 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR102574896B1
Application number: KR1020200138710A
Authority: KR
Inventors: 이대영; 윤다혜; 이영섭; 반재숙; 서정욱; 장은영; 류인수; 김옥희; 김지선; 김태완; 임리나; 최창훈
Original assignee: 대한민국(농촌진흥청장); 한국화학연구원
Priority date: 2020-10-23
Filing date: 2020-10-23
Publication date: 2023-09-06
Also published as: KR20220054136A; KR20230129352A

Abstract

본 발명은 진피(Citrus unshiu Markovich) 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 진피 추출물은, 니코틴 중독으로 인한 보행성 활동량의 증가를 유의하게 억제하는 효과를 나타내므로, 상기 진피 추출물은 니코틴 중독의 예방 및 치료용 약학적 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용됨을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.

Description

진피 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독 의 예방 또는 치료용 조성물{Composition for preventing or treating nicotine addiction comprising extract of Citrus unshiu Markovich}

본 발명은 진피(Citrus unshiu Markovich) 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

보건복지부의 보고에 따르면 국내 전체 성인 인구의 22.6%(남성 39.3%, 여성 5.5%)가 만성 흡연을 하는 것으로 알려져 있다. 흡연으로 인한 유해물질에 대한 노출은 평균수명을 약 8~10년 단축시키며, 오늘날 흡연은 암을 발생시키는 가장 주요한 원인으로 지목받고 있다. 통계상으로 암으로 사망한 이들 3명 중 1명은 흡연자라는 연구 결과도 있으며, 특히 우리나라 남성 폐암의 90%는 흡연으로 인한 것이라고 알려져 있다. 그 외에도 흡연은 방광암, 췌장암, 인후두암, 자궁경부암, 식도암 등 각종 암의 발생에 직간접적으로 연관이 있는 것으로 알려져 있다.

흡연의 부정적인 영향이 알려져 있음에도 불구하고 계속해서 흡연을 하는 이유는 니코틴의 중독성 때문인 것으로 알려져 있다(Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci, 2008). 니코틴 중독은 내성, 갈망, 금단, 끊으려는 노력의 실패, 사회적 직업적 능력의 저해 등의 증상을 보이며, 니코틴 금단 시에는 우울한 기분, 불면, 불안, 두려움, 안절부절못함, 체중증가, 심박동수 감소 등의 증상이 생긴다.

흡연을 하게 되면 니코틴은 신체 어느 곳을 통해서나 즉시 흡수되어 약 7초만에 뇌에 도달해 빠르게 작용하고, 이러한 니코틴의 빠른 작용은 흡연 행동을 긍정적으로 강화시킨다. 뇌에 도달한 니코틴은 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nicotinic acetylcholine receptor)에 작용하여 콜린성 신경전달을 강화시킨다. 특히 중뇌 변연계 도파민 시스템의 니코틴성 아세틸콜린 수용체(nicotinic acetylcholine receptor)에 직접적으로 작용함으로써 복측피개영역(ventral tegmental area)으로부터 측좌핵(nucleus accumbens)으로의 도파민 분비를 촉진시키고 보상감을 유발한다. 여러 실험적 증거를 보면 니코틴은 다른 중독성 약물과 유사한 신경 화학적, 기능적 효과를 가지고 있으며, 특히 도파민계 신경전달의 증가는 니코틴 중독 증상을 유발하는 데에 중요한 역할을 한다. 또한, 니코틴은 중추신경계 작용물질로서 중뇌 번연계 도파민 시스템의 도파민성 신경전달을 변화시켜 행동민감화를 유발한다. 행동민감화는 니코틴에 반복적으로 노출된 후 나타나는 활동량의 증가, 즉 행동의 과민성을 말한다. 니코틴에 반복적으로 노출된 후 나타나는 활동량의 증가, 즉 행동의 과민성을 말한다. 니코틴에 의한 증가된 행동민감화를 감소시키는 것은 니코틴 중독 증상을 예방 및 치료하는 데에 중효한 역할을 할 수있다.

도파민(dopamine, 4-(2-aminoethyl)benzene-1,2-diol)은 카테콜아민 계열의 유기화합물로 중추 신경계에서 발견되는 신경전달물질이다. 도파민은 주로 신경 세포와 부신 수질(adrenal medullar) 세포에서 합성된다. 도파민을 분비하는 신경세포에서는 티로신(tyrosine)으로부터 tyrosine hydroxylase(TH)를 이용하여 L-DOPA를 합성하고, 이로부터 도파 디카르복실라아제(DOPA decarboxylase)를 이용하여 도파민이 생성된다. 신경세포에서 생성된 도파민은 시냅스 소포(synapse vesicle) 운반체에 의해 신경세포 말단으로 이동해 저장되고, 적절한 전기 자극에 의해 도파민이 방출되면 시냅스 후 신경세포에 존재하는 도파민 수용체(dopamine receptor)에 결합하여 신호전달이 이루어진다. 사용된 도파민은 dopamine transporter(DAT) 단백질에 의해 다시 시냅스 전 신경세포로 회수되는데, 니코틴과 같은 물질은 도파민을 합성하는 tyrosine hydroxylase(TH)를 증가시키고 dopamine transporter(DAT)의 작용을 억제하여 시냅스의 도파민 농도를 증가시킴으로서 각성효과를 나타낸다.

진피(Citrus unshiu Markovich)는 우리나라에서는 운향과의 귤(Citrus unshiu Markovich) 또는 동속 근연식물의 성숙한 과피를 말한다. 일본에서는 귤(Citrus unshiu Markovich)과 병감(Citrus reticulata Blanco:柑)을 진피로, 귤감(Citrus tachibana (Makino) Tanaka:橘柑)을 귤피(橘皮)로 사용하고 있으며 중국에서는 병감(Citrus reticulata Blanco:柑) 및 그 재배변종을 진피로 규정하고 있다. 진피는 오래될수록 좋다고 하였으며 색이 붉을수록 좋기 때문에 홍피(紅皮), 진피(陳皮)라는 이름이 생겼다. 그 열매를 귤(橘)이라 하고 잎을 귤엽(橘葉), 열매껍질의 속을 제거한 노란 부분을 귤홍(橘紅), 종자를 귤핵(橘核)이라 하고 덜 익은 열매껍질을 청피(靑皮)라고 한다. 이 약은 특이한 냄새가 있으며 약간 자극성이 있고 맛은 맵고 쓰며 성질은 따듯하다.

진피는 기가 뭉친 것을 풀어주고 비장의 기능을 강화하여 복부창만, 트림, 구토, 메스꺼움, 소화불량, 헛배가 부르고 나른한 증상, 대변이 묽은 증상을 치료한다. 해수, 가래를 없애주며 이뇨작용을 한다. 낭독, 마황, 진피, 오수유, 반하, 지실과 함께 오래될수록 약효가 증가하는 약이다. 약리작용은 정유 성분이 소화기자극, 소화촉진, 거담, 항궤양, 항위액분비, 강심, 혈압상승, 항알레르기, 담즙분비촉진, 자궁평활근억제, 항균작용 등을 하는 것으로 보고되었다. 생김새는 형태가 일정하지 않은 껍질로 바깥 면은 황적색이나 어두운 황갈색이고 유실에 의한 작은 오목한 자국이 많다. 안쪽은 흰색 또는 엷은 회갈색이며, 질은 가볍고 부스러지기 쉽다.

니코틴 중독 증상의 예방 및 치료에 관한 특허로는, 니코틴 중독 및 금단증상의 예방 및 치료를 위한 천조근 추출물을 함유하는 조성물(한국 등록특허 10-0676403), 니코틴 중독 및 금단증상의 예방 및 치료를 위한 산조인 추출물을 함유하는 조성물(한국 등록특허 10-0663181), 중국당귀, 한국산 당귀, 왜당귀로부터 추출 분리되는 알콜 용매 추출물을 포함하는 니코틴 중독 및 금단증상의 예방 및 치료용 약학 조성물(한국 등록특허 10-0571852, 10-0571853, 10-0571851) 및 녹차 추출물 및 흑차 추출물을 함유하는 니코틴 해독용 조성물 및 이의 제조방법(한국 등록특허 10-1900304)이 있다.

본 발명의 목적은 진피(Citrus unshiu Markovich) 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 진피(Citrus unshiu Markovich) 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 진피(Citrus unshiu Markovich) 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 진피(Citrus unshiu Markovich) 추출물을 유효성분으로 포함하는 니코틴 중독의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.

본 발명은 진피 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 진피 추출물은, 니코틴 중독으로 인한 보행성 활동량의 증가를 유의하게 억제하는 효과를 나타내므로, 상기 진피 추출물은 니코틴 중독의 예방 및 치료용 약학적 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 진피 추출물에 의한 니코틴 의존행동 제어 효능 실험을 모식화하여 나타낸 도이다.
도 2는 랫트에서 니코틴 또는 셀린을 투여하고 1일차의 운동 활성과 7일째 투여한 랫트에 운동활성도를 나타낸 도이다.
도 3a는 니코틴 중독 행동과 관련된 보행성 활동량(locomotor activity)을 측정하기 위하여, 랫트에 측정 1시간 전에 진피 추출물을 단회투여 후, 니코틴 중독 행동을 억제 여부를 8일째에 확인한 도이다.
대조군 1: 생리식염수(saline) 를 투여한 랫트
실험군 1-1: 200mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 생리식염수(saline)와 함께 투여한 랫트
실험군 1-2: 400mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 생리식염수(saline)와 함께 투여한 랫트
대조군 2 : 0.4mg/ml의 니코틴 1ml/kg을 투여한 랫트
실험군 2-1 : 200mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 0.4mg/ml의 니코틴과 함께 투여한 랫트
실험군 2-2 : 400mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 0.4mg/ml의 니코틴과 함께 투여한 랫트
도 3b는 니코틴 중독 행동과 관련된 보행성 활동량(locomotor activity)을 측정하기 위하여, 랫트에 측정 1시간 전에 진피 추출물을 반복투여 후, 니코틴 중독 행동을 억제 여부를 14일째에 확인한 도이다.
대조군 1: 생리식염수(saline) 를 투여한 랫트
실험군 1-2: 400mg/ml 의 진피 추출물 1ml/kg을 생리식염수(saline)와 함께 투여한 랫트
대조군 2 : 0.4mg/ml의 니코틴 1ml/kg을 투여한 랫트
실험군 2-1 : 200mg/ml 의 진피 추출물 1ml/kg을 0.4mg/ml 의 니코틴과 함께 투여한 랫트
실험군 2-2 : 400mg/ml 의 진피 추출물 1ml/kg을 0.4mg/ml 의 니코틴과 함께 투여한 랫트
도 4a는 니코틴 중독 행동과 관련된 보행성 활동량(locomotor activity)을 측정하기 위하여, 렛트에 측정 1시간 전에 진피 추출물을 단회투여 후, 니코틴 중독 행동을 억제 여부를 60분 동안 확인한 도이다.
대조군 1: 생리식염수(saline) 를 투여한 랫트
실험군 1-1: 200mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 생리식염수(saline)와 함께 투여한 랫트
실험군 1-2: 400mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 생리식염수(saline)와 함께 투여한 랫트
대조군 2 : 0.4mg/ml의 니코틴 1ml/kg을 투여한 랫트
실험군 2-1 : 200mg/ml의 진피 추출물 10ml/kg을 0.4mg/ml 의 니코틴과 함께 투여한 랫트
실험군 2-2 : 400mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 0.4mg/ml 의 니코틴과 함께 투여한 랫트
도 4b는 니코틴 중독 행동과 관련된 보행성 활동량(locomotor activity)을 측정하기 위하여, 렛트에 측정 1시간 전에 진피 추출물을 반복투여 후, 니코틴 중독 행동을 억제 여부를 60분 동안 확인한 도이다.
대조군 1: 생리식염수(saline) 를 투여한 랫트
실험군 1-1: 200mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 생리식염수(saline)와 함께 투여한 랫트
실험군 1-2: 400mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 생리식염수(saline)와 함께 투여한 랫트
대조군 2 : 0.4mg/ml의 니코틴 1ml/kg을 투여한 랫트
실험군 2-1 : 200mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 0.4mg/ml 의 니코틴과 함께 투여한 랫트
실험군 2-2 : 400mg/ml 의 진피 추출물 10ml/kg을 0.4mg/ml 의 니코틴과 함께 투여한 랫트

이하, 본 발명에서 사용되는 용어들을 정의한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "중독"은 유해물질에 의한 내성, 갈망, 금단의 증상이 발생하는 것을 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "내성"은 중독에서 종전과 같은 만족을 경험하려면 더 강한 강도나 더 긴 지속기간의 자극을 필요로 하는 것을 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "갈망"은 중독에서 특정 목표 행동이나 사고를 하도록 이끄는 동기화된 상태를 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "금단"은 중독에서 그것의 강박적 사용 행동을 중단했을 때 나타나는 견디기 어려운 고통스러운 증상을 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "예방"은 본 발명의 조성물의 투여로 니코틴 중독을 피하거나 최소화하도록 하는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "치료" 및 "개선"은 본 발명의 조성물 투여로 상기 중독의 증세가 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 진피(Citrus unshiu Markovich) 추출물을 유효성분으로 포함하는 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

상기 진피(Citrus unshiu Markovich) 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다:

1) 진피에 추출 용매를 가하여 추출하는 단계;

2) 단계 2)의 추출물을 여과하는 단계; 및

3) 단계 3)의 여과한 추출물을 감압 농축한 후 건조하여 진피 추출물을 제조하는 단계.

상기 제조방법에 있어서, 단계 1)의 진피는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.

상기 제조방법에 있어서, 단계 1)의 추출 용매는 물, 알코올, 또는 이들의 혼합 용매일 수 있다. 상기 알코올은 C1 내지 C2의 저급 알코올일 수 있고, 구체적으로 상기 알코올은 메탄올 또는 에탄올일 수 있다. 상기 에탄올은 합성 에탄올 또는 주정일 수 있다. 또한, 상기 주정은 20% 내지 70% 주정일 수 있으나 이에 한정되지 않는다.

상기 제조방법에 있어서, 단계 1)의 추출 방법은 진탕추출, Soxhlet 추출 또는 환류추출 일 수 있다. 이 때 추출 온도는 40 내지 95℃일 수 있고, 구체적으로 50 내지 90℃, 더 구체적으로 60 내지 85℃일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 추출 시간은 1 내지 20시간일 수 있고, 구체적으로 2 내지 10시간일 수 있으며, 더 구체적으로 4 내지 8시간일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 아울러, 추출 횟수는 1 내지 5회일 수 있고, 구체적으로 1 내지 3회일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 추출 온도, 추출 시간 또는 추출 횟수의 조건을 벗어난 범위에서는 추출이 충분히 이루어지지 않아 진피 추출물 내에 유효성분의 함량이 미미할 수 있다. 또는 더 이상 추출 수율이 증가하지 않아 추출 작업의 효율이 떨어질 수 있다.

상기 제조방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용할 수 있다. 또한, 상기 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 구체적인 실시예에 따르면 동결건조인 것이 바람직하다.

상기 중독은 내성, 갈망, 금단으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있으나 이에 한정되지 않는다.

상기 금단은 우울감, 불안, 불면, 체중증가로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있으나 이에 한정되지 않는다.

상기 추출물은 니코틴에 의한 보행성 활동량 증가를 억제하는 것 일 수있다.

니코틴을 반복적으로 투여하게 되면 보행성 활동의 증가로 나타나는 행동적 민감화 현상이 나타난다. 행동적 민감화 란 적은 양의 중독성 약물을 반복적, 간헐적을 처치하면 설치류의 보행성 활동(locomotor activity)과 상동적 행동(stereotypy activity)이 점진적으로 증가하는 현상으로, 이것은 활동량의 점진적인 증가가 유도되는 상태인 발달(development)과 일단 유도된 높은 활동량이 비교적 장기간 유지되는 상태인 발현(expression)으로 구성되어 있다. 행동적 민감화 현상은 약물중독의 발달과 약물로 유도된 정신신경증의 지표로 이용된다. 일반적으로 중독성 약물에 의한 행동적 민감화를 담당하는 신경적 근저(neural substrate)는 중추 도파민 신경세포와 그 표적 영역인 측핵(nucleus accumbens)과 선조체(striatum)인 것으로 알려져 있으며, 니코틴에 의한 행동적 민감화도 이 두 시스템, 특히 복측 피개야(ventral tegmental area, VTA)에서 기시하여 측핵과 후관(olfactory tuvercle)내의 목표물에 종지하는 중뇌변연도파민계(mesolimbic dopamine system)에 의해 주로 매개된다.

상기 본 발명의 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

상기 본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여시 피부 외용 또는 복강내주사, 직장내주사, 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사 주입방식을 선택하는 것이 바람직하며, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 본 발명의 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 혼합생약재에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 또는 비경구로 투여될 수 있다. 비경구 투여는 복강내, 직장내, 피하, 정맥, 근육 내 또는 흉부 내 주사 방식을 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 상기 조성물은 1일 0.0001 내지 1 g/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 200 mg/kg으로 투여하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수 회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 조성물은 단독 또는 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있다. 병용 투여시, 투여는 순차적 또는 동시일 수 있다.

또한, 본 발명의 진피 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.

본 명세서의 "건강기능식품"이란 일상 식사에서 결핍되기 쉬운 영양소나 인체에 유용한 기능을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조한 식품으로, 인체의 건강을 유지하는데 도움을 주는 식품을 의미하나 이에 한정되지 않으며 통상적인 의미의 건강식품을 모두 포함하는 의미로 사용한다.

건강기능식품의 형태 및 종류는 특별히 제한되지 않는다. 구체적으로, 상기 건강기능식품은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환의 형태일 수 있다. 상기 건강기능식품은 추가성분으로서 여러 가지 향미제, 감미제 또는 천연 탄수화물을 포함할 수 있다. 상기 감미제는 천연 또는 합성 감미제일 수 있고, 천연 감미제의 예로는 타우마틴, 스테비아 추출물 등이 있다. 한편, 합성 감미제의 예로는 사카린, 아스파르탐 등이 있다. 또한, 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드, 디사카라이드, 폴리사카라이드, 올리고당 및 당알코올 등일 수 있다.

본 발명의 건강기능식품은 상기 서술한 추가성분 외에, 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙스탄 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 등을 더 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합으로 사용될 수 있다. 상기 첨가제의 비율은 본 발명의 조성물의 100 중량부당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택될 수 있다.

본 발명의 진피 추출물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있다. 이때, 첨가되는 유효성분의 함량은 목적에 따라 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강기능식품 중의 함량은 전체 식품 중량의 0.01 내지 90 중량부일 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없다면 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 진피 주정 추출물의 제조

건조 중량 300g의 진피에 물 2.1 L를 용매로 가하고, 환류기로 4시간 동안 80℃에서 2회 추출하였다. 추출물을 필터를 이용하여 분리한 후 감압농축하고 동결 건조하여 진피 추출물 197g을 65%의 수율로 얻었다.

<실시예 2> 진피 주정 추출물의 제조

<2-1> 진피의 30% 주정 추출물의 제조

건조된 진피 300g에 30% 주정(v/v) 2.1 L를 가하고, 70℃에서 4시간 동안 환류기에서 2회 추출하였다. 환류 및 여과 후 상기 추출물을 감압 하에 동결 건조하여 진피 30% 주정 추출물 191g을 63%의 수율로 얻었다.

<2-2> 진피의 50% 주정 추출물의 제조

진피를 건조하고, 건조된 진피 300g에 50% 주정(v/v) 2.1L를 가하고, 60℃에서 4시간 동안 환류기에서 2회 추출하였다. 환류 및 여과 후 상기 추출물을 감압 하에 동결 건조하여 진피 50% 주정 추출물 171g을 57%의 수율로 얻었다.

<실시예 3> 보행성 활동량의 측정

<3-1> 실험 동물의 준비

체중 230 내지 260g의 스프래그-돌리(Sprague-Dawley) 수컷 랫트를 구입하였으며(오리엔트 바이오), 안전성평가연구소 약리동물동 동물실에서 항온(23±3℃), 항습(30-70%)을 유지하고, 12시간 간격으로 낮과 밤을 교대시키는 환경에서 사육하였다. 상기 랫트는 실험 시작 전까지 먹이와 물을 자유롭게 섭취할 수 있도록 충분한 먹이와 물을 제공하였다. 또한 측정 장비 상자 노출에 대한 스트레스 등의 환경적 요인에 대한 변인을 최소화하기 위하여 스프래그-돌리 수컷 랫트에 실험 시작 전 최소 3일 이상 보행 활동량 측정 장비 상자에 매일 30분 동안 순응작업(acclimation)을 하였다.

<3-2> 보행성 활동량의 측정

진피 추출물이 보행성 활동량(locomotor activity)증가라는 니코틴 중독 행동을 억제할 수 있는지 확인하였다.

실험동물의 보행성 활동량(locomotor activity)은 적외선 디지털 카메라(Med associates, USA)로 촬영 후, 행동 추적 소프트웨어(video tracking software)로 Ethovision XT14(Nodlus, Netherland)를 이용하여 보행성 활동량을 정량화하였다.

구체적으로, 보행성 활동량 측정 1시간 전에 0, 200, 400 mg/ml 의 진피 추출물을 kg당 10ml 경구 투여 하였으며, 경구 투여 30 분 뒤, 조도가 3 lx인 무광택 투명 아크릴 상자(43.38cm*43.38cm*30.28cm)에 상기 실시예 1의 스프래그-돌리 수컷 랫트를 넣고 30분간 안정화(habituation) 작업을 실시하였다. 안정화 작업 후, 0.4 mg/ml의 니코틴을 kg당 1ml씩 복강투여 한 후 60분간 실험동물의 움직임을 적외선 디지털 카메라로 녹화하였다. 녹화한 영상을 행동 추적 소프트웨어(Ethovision XT14(Nodlus, Netherland))로 검은 배경에 흰색 피사체의 대조의 원리를 이용하여 흰색 실험동물 상(image)의 중심점을 초당 수 번을 인식하는 방식으로 보행성 활동 궤적을 데이터화한 뒤 랫트의 움직인 거리(cm)를 정량화하였다(표 1).

그 결과, 진피 추출물이 반복투여된 랫트의 경우 니코틴에 의한 보행성 활동량의 증가가 유의하게 억제되었다. 구체적으로, 니코틴을 투여한 군은 시간당 보행성 활동량이 대략 7471cm를 보여 식염수만을 투여한 대조군의 보행성 활동량인 1101cm와 비교하여 보행성 활동량이 유의하게 증가되었다. 반면, 본 발명의 실시예 1에 따른 진피 추출물 200mg/kg 및 400mg/kg을 니코틴과 함께 반복투여한 군은 각각 1015cm 및 3664cm 정도 보행성 활동량이 감소되었다. 상기 결과는 진피 추출물이 니코틴 중독 행동을 완화시킬 수 있음을 제시한다(도 2, 도 3a~3b, 도 4a~4b).

	보행성 활동량(cm/hr)
대조군 1: 생리식염수	1101.19
실험군 1-1: 200 mg/ml 진피 추출물 + 생리식염수	577.66
실험군 1-2: 400 mg/ml 진피 추출물 + 생리식염수	1332.62
대조군 2 : 0.4 mg/ml 니코틴	7471.54
실험군 2-1 : 200 mg/ml 진피 추출물 + 0.4 mg/ml 니코틴	6456.64
실험군 2-2 : 400 mg/ml 진피 추출물 + 0.4 mg/ml 니코틴	3807.81

Claims

진피(Citrus unshiu Markovich) 50% 주정 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서,
상기 진피와 주정은 1:7 부피비율이며,
상기 니코틴 중독은 보행성 활동량이 증가된 중독인 것인, 조성물.
삭제
제 1항에 있어서, 상기 중독은 내성, 갈망, 금단으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 3항에 있어서, 상기 금단은 우울감, 불안, 불면, 체중증가로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
삭제
진피(Citrus unshiu Markovich) 50% 주정 추출물을 유효성분으로 함유하는 니코틴 중독의 예방 또는 개선용 건강기능식품으로서,
상기 니코틴 중독은 보행성 활동량이 증가된 중독인 것인, 건강기능식품.
1) 진피와 50% 주정을 1:7 부피비율로 추출하여,
진피 50% 주정 추출물을 수득하는 단계;
2) 상기 추출물을 인간을 제외한 개체에 처리하는 단계;를 포함하는, 인간을 제외한 개체의 보행성 활동량이 증가된 니코틴 중독을 억제하는 방법.
1) 진피와 50% 주정을 1:7 부피비율로 추출하여,
진피 50% 주정 추출물을 수득하는 단계;
2) 상기 추출물을 인간을 제외한 개체에 처리하는 단계;를 포함하는 보행성 활동량이 증가된 니코틴 중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물의 제조방법.
1) 진피와 50% 주정을 1:7 부피비율로 추출하여,
진피 50% 주정 추출물을 수득하는 단계;
2) 상기 추출물을 인간을 제외한 개체에 처리하는 단계;를 포함하는 보행성 활동량이 증가된 니코틴 중독의 예방 또는 개선용 건강기능식품 제조방법.