KR102568763B1 - 천연발효 효소복합액을 이용한 녹각 또는 녹용 발효물과 이를 이용한 키 성장촉진 또는 관절건강증진용 조성물 - Google Patents

천연발효 효소복합액을 이용한 녹각 또는 녹용 발효물과 이를 이용한 키 성장촉진 또는 관절건강증진용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연발효 효소복합액을 이용한 녹각 또는 녹용 발효물과 이를 이용한 키 성장촉진 또는 관절 건강증진용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 매실발효액과 식물혼합추출액을 혼합한 천연혼합발효액에, 유산균, 막걸리효모액과 버섯 균사체, 그리고 효소 및 멀티비타민 등을 첨가하여 배양한 제1 천연발효효소복합액으로 녹각 또는 녹용을 고상발효한 후 다시 콜라겐을 함유하는 액상발효용의 제2 천연발효효소복합액으로 액상발효함으로써, 활성성분을 증대시키고 체내 흡수율을 향상시켜서 현저하게 우수한 기능성을 가지도록 제조된 녹각 또는 녹용 발효물과 이를 이용한 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진용으로 사용하는 건강식품이나 의약의 조성물로서의 용도에 관한 것이다.

Description

천연발효 효소복합액을 이용한 녹각 또는 녹용 발효물과 이를 이용한 키 성장촉진 또는 관절건강증진용 조성물{Fermented antler using a natural fermented enzyme complex and a composition for promoting height growth or promoting joint health using the same}
본 발명은 천연발효 효소복합액을 이용한 녹각 또는 녹용 발효물과 이를 이용한 키 성장촉진 또는 관절건강증진용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 매실발효액과 식물혼합추출액을 혼합한 천연혼합발효액에, 유산균, 막걸리효모액과 버섯균사체, 그리고 효소 등을 첨가하여 배양한 제1 천연발효효소복합액으로 녹각을 고상발효한 후 다시 콜라겐 등이 함유된 액상발효용의 제2 천연발효효소복합액으로 액상발효함으로써, 활성성분을 증대시키고 체내 흡수율을 향상시켜서 현저하게 우수한 기능성을 가지도록 제조된 녹각 또는 녹용 발효물과 이를 이용한 키 성장촉진 또는 관절 건강증진용으로 사용하는 조성물의 용도에 관한 것이다.
발효란 유기물이 미생물이나 효소에 의해 분해 및 변화되는 과정을 말한다. 부패 역시 본질적으로는 발효와 같은 과정을 거친다. 따라서 발효와 부패의 경계는 모호하다. 단지 미생물의 분해결과가 사람에게 이로운가 해로운가에 따라 부패와 발효를 구별하는 것뿐이다. 사람에게 유익하면 발효라고 하지만 유익한 것이 꼭 건강에 좋다는 것은 아니다.
이러한 발효과정은 일반적인 식품 등에서 다양하게 이루어지는데, 많은 경우 발효는 탄수화물이 분해될 때 일어나고 부패는 단백질이 분해될 때에 일어난다. 단백질은 분해될 때 그에 포함된 질소나 황에 의해 생기는 암모니아 등 질소화합물이나 황화수소 등 황 화합물이 유독하고 악취가 나기 때문이다. 이를 역이용하는 식품도 있는데, 그 대표적인 사례는 우리나라에서 전통식품으로 이용되고 있는 홍어를 예로 들 수 있다.
농산물을 주식으로 해온 우리나라는 발효를 이용한 전통식품이 특히 많고 다양한 방법으로 응용, 발전되어 왔다. 예를 들어 우리나라 전통식품으로 세계적인 관심을 받기 시작한 김치를 비롯하여, 된장, 고추장, 술, 빵 등 우리의 주된 먹거리는 상당수가 발효식품이라고 할 수 있다. 실제로, 발효식품은 면역력 증강, 항암, 항산화, 중성지방 감소, 항바이러스 작용 등 다양한 생리활성물질이 강화되는 것이 알려져 있다.
반면에, 이러한 식품들은 발효라는 특성 때문에 아플라톡신, 에틸카바메이트 등 인체에 해로운 물질들도 생성되는 것으로 알려져 있어서 세심한 주위와 발효조건의 정교한 제어가 필요하다.
그럼에도 불구하고, 최근 웰빙 등 소비 트랜드의 급격한 변화로 건강에 대한 관심이 높아지면서, 자연에서 구한 건강한 재료로 만든 친환경 소재에 대한 소비자의 요구가 증가되고 있으며, 발효공법 또한 식품의 거의 모든 분야에서 적용되고 있다.
이러한 발효공정이 적용된 식품, 건강식품, 첨가제, 의약품 원료 등이 가히 폭발적으로 다양하게 개발되고 있지만, 대체로 유산균이나 널리 알려진 발효균에 의존하여 발효 처리하여 식품이나 의약품 원료를 개발하거나 자연발효공법으로 발효식품을 제조하는 것이 대부분이고, 발효를 효과적이고 고부가가치화하기 위한 바이오 소재는 별로 제안된 바가 없다.
한편, 녹각이나 녹용은 오랜기간 중요한 한약재로 널리 사용되어 왔다. 일반적으로 녹각(鹿角)은 이미 골질화된 나이가 많은 사슴의 뿔을 잘라 말린 것을 말하는 것으로 녹용이 성장되어 더 이상의 성장이 정지되고 살이 붙지 않은 뼈로 녹용보다 크고 단단하다. 이러한 녹각은 뼈가 부러진 것을 치료하며, 뼈마디를 튼튼하게 하고, 어혈을 해치며, 출산에 도움을 주는 것으로 알려져 있다.
또한, 녹용(鹿茸)은 숫사슴의 아직 골질화되지 않은 어린 뿔을 잘라 말린 것으로서, 어리고 성장 중인 뼈로 추위를 이기며 뿔갈이를 하며 계속 자라나는 특성이 있다. 녹용은 모든 양이 모이는 머리에서 솟아난 뼈로, 보양 작용에 탁월하여 추위를 이기며 정액과 소변, 냉이 새는 것을 틀어막고 정혈(精血)을 북돋아 피부의 영양부족으로 인한 부스럼 독을 몰아내는데 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 그 외에도, 여성의 불임, 발기부전, 비정상 자궁출혈, 냉 치료, 추위를 잘 타는 것, 어지럼증, 이명 등을 치료하고, 근골을 강하게 해서 요통, 배통, 위축된 근골 등에 효험이 있는 것으로 알려져 있다.
이러한 녹각이나 녹용은 상기한 여려 효능 효과 이외에도 자양강장, 피로회복 등에 효과 있는 것으로 알려져서 한약재로 널리 활용되고 있다. 그러나 이러한 녹각이나 녹용은 쉽게 구하기 어렵고 과도하게 섭취하는 경우 부작용이 염려되어 그 사용에 제한적인 문제가 있다.
이러한 기존의 문제에도 불구하고 녹각이나 녹용은 여전히 매우 귀중한 한약재로 이용되고 있다.
기존에 녹각이나 녹용을 효과적으로 활용하기 위한 방법으로 다양한 가공방법에 제안되어 있는바, 그 예로서 한국특허공개 제10-2014-0039966호 등에서는 녹각을 절단하여 물에 끓여서 농축하여 만든 녹각교를 이용하여 다단계 추출 공정을 거쳐 녹각교 농축분말을 제조하는 방법을 제안하고 있으며, 한국특허등록 제10-1829526호에서는 유산균으로 녹용을 발효하고 알코올로 추출하는 녹용의 가공에 관하여 제안하고 있다. 그 외에도 녹용이나 녹각을 다양한 천연물과 함께 추출하거나, 발효처리하는 등의 가공방법이 제안되어 있다.
그러나 이러한 기존의 녹각이나 녹용 가공방법은 기존의 한약재를 추출 농축하는 수준에서 크게 벗어나지 않아서 아직도 그 가공방법이 전문적으로 연구되어 있지 않으며, 활용도가 부족한 실정이다.
또한, 천연성분의 발효처리와 관련하여 종래기술에서 다양한 발효기술이 제안되어 있는바, 한국특허공개 제10-2014-0056972호에서는 천연효소발효액으로서 배, 도라지, 대추, 생강을 제철에 구비하여 설탕과 혼합하여 숙성하여 농축한 천연효소발효액이 제안되어 있으며, 한국특허등록 제10-1823089호에서는 강황, 치자, 비트, 아로니아, 자색고구마, 홍국, 오미자, 녹차, 클로렐라, 뽕잎, 어성초, 파프리카 중 1종 이상의 착즙 또는 동결건조 분말을 원료로 하고 누룩과 유산균을 이용하여 발효액을 제조하고, 이를 이용하여 연근을 발효하는 방법이 제안되어 있다.
또한, 한국특허공개 제10-2008-0084763호에서는 탈지대두의 혼합원료에 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus oryzae) 또는 아스퍼질러스 소재(Aspergillus sojae)를 접종시켜 단백질 코지를 제조하고, 여기에 사입수를 첨가하여 모로미액을 제조하고 가수분해하여 천연 아미노산 발효액을 제조하는 방법을 제안하고, 이러한 발효액을 기존의 글루타민산 나트륨(MSG) 및 식물성 가수분해 단백질(HVP)을 대체할 천연소재로 이용될 수 있는 것으로 제시하고 있다.
그러나 이러한 기존의 천연발효액은 일부 대상물을 발효하는데 이용하거나 발효액 자체를 음료나 식품 첨가물로 이용하는 정도에 그치고 있으므로 그 활용성이 크지 못하고, 발효 효과도 충분하다고 볼 수 없다.
또한, 천연물 및 채소류의 발효물을 제조하는 종래의 방법에서는 초기단계에서 원물을 파쇄하거나 고온으로 처리함으로써, 고유의 유효성분이 유실되거니 파괴되고 필요성분에 합당한 효소들이 충분히 갖춰지지 않아 유효성분의 생성이나 증가가 제한되고 발효 효율이 떨어지는 문제점이 있었다.
따라서 녹각이나 녹용과 같은 고기능성 한약재에 대한 가공기술을 개발하여 귀한 한약재의 기능성을 향상시키고 효율적인 활용이 가능하게 하는 기술 개발이 절실하다.
한국특허공개 제10-2014-0056972호 한국특허등록 제10-1829526호 한국특허공개 제10-2014-0056972호 한국특허등록 제10-1823089호 한국특허공개 제10-2008-0084763호
상기와 같은 종래기술의 문제들을 해결하기 위하여, 본 발명은 다양한 기존에 한약재로 널리 사용되고 있는 녹각이나 녹용의 기능성을 향상시키고 활용성을 높일 수 있는 새로운 가공기술의 제공을 해결과제로 한다.
따라서 본 발명의 목적은 녹각이나 녹용을 특정 조건의 발효액으로 발효처리한 고기능성 발효물로 얻어진 녹각 또는 녹용 발효물을 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 특정 발효액을 이용한 녹각 또는 녹용 발효물을 유효성분으로 하는 키 성장촉진 또는 관절 건강증진용 조성물을 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은 상기 발효된 녹각 또는 녹용 발효물의 제조방법을 제공하는데 있다.
위와 같은 본 발명의 과제해결을 위하여, 본 발명은 매실천연효소액, 버섯함유 식물혼합추출액, 유산균, 막걸리 효모액, 버섯 균사체와 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소가 함유된 제1 천연발효효소복합액으로 녹각 또는 녹용을 고상발효하고, 그 고상발효 추출액을 매실천연효소액, 유산균, 막걸리효모액과 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소, 그리고 콜라겐을 첨가하여 발효한 제2 천연발효효소복합액으로 2차 액상발효한 녹각 또는 녹용 발효물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 막걸리 효모액은 생막걸리를 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)로 배양한 것이 바람직하게 이용될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 유산균은 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 바실러스 아밀로리퀴피엔스(Bacillus amyloliquefaciens) 중에 하나 이상을 사용할 수 있다. 더 바람직하게는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 루테니(Lactobacillus reuteni), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 중의 1종 이상과 바실러스 아밀로리퀴피엔스(Bacillus amyloliquefaciens)의 혼합 균을 사용할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 버섯균사체는 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중에서 하나이상의 버섯 균사체를 사용할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소는 수미자임(Sumizyme), 얼티메이즈(Ultimase MFC), 파이르플로(Pyr-flo), 탄네이즈(Tannase) 중에서 선택된 하나 이상을 사용할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 버섯함유 식물혼합추출액은 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 하나 이상의 버섯과, 마늘, 멀꿀 및 황기를 추가로 함유할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액의 매실천현효소액에는 식물혼합추출액으로서 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단 중 하나 이상과, 마늘, 멀꿀 황기를 추가로 함유할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제1 천연발효효소복합액의 최종 발효 전 혼합물에 비타민 에이(vitamin A), 비타민 비 복합체(vitamin B complex) 및 비타민 씨(vitamin C) 중에서 2 이상의 복합비타민을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액의 최종 발효 전 혼합물에 아미노산, 식이유황(MSM) 중 하나 이상을 추가로 함유할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제1 천연발효효소복합액은 매실천연효소액 30~70중량부와 동충하초, 차가버섯, 영지버섯 , 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 2종 이상의 버섯, 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 버섯함유 식물혼합추출액 30~70중량부가 혼합된 제1 천연혼합발효액 85~95중량%에, 유산균 0.1~5중량%와 막걸리효모액 0.5~10중량%, 동충하초 균사체 1~5중량%, 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소 0.01~3중량%, 멀티비타민 0.01~3중량%를 첨가하여 발효한 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액은 매실천연효소액 30~70중량부와 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단 중 하나 이상과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액 30~70중량부가 혼합된 천연혼합발효액 85~95중량%에, 유산균 0.1~5중량%와 막걸리효모액 0.5~10중량%, 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소 0.01~3중량%, 콜라겐 0.1~3중량%, 아미노산 0.1~3 중량%, 식이유황 0.01~3중량%를 첨가하여 발효한 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 1차 고상발효 후 2차 액상발효한 녹각 또는 녹용 발효물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진용 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절건강증진용 조성물은 건강식품조성물 또는 약학조성물로 적용될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절건강증진용 조성물을 함유하는 펫용 건강식품, 사료첨가제 또는 사료가 제공될 수 있다.
또한, 본 발명은 매실천연효소액 30~70중량부와 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 2이상의 버섯과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 버섯함유 식물혼합추출액 30~70중량부를 혼합한 제1 천연혼합발효액을 제조하는 단계;
상기 제1 천연혼합발효액에 유산균과 막걸리효모액, 그리고 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 하나이상의 버섯균사체를 접종하고 30~45℃에서 12~72시간 발효하는 단계;
상기 버섯균사체 적용 발효물에 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소 와 멀티비타민을 첨가하여 30~45℃에서 1~6시간 발효하는 단계를 포함하는 제1 천연발효효소복합액을 제조하는 단계;
상기 제1 천연발효효소복합액을 이용하여 녹각 또는 녹용을 고상발효하는 단계;
상기 고상발효물을 추출하여 고상발효 추출액을 제조하는 단계;
매실천연효소액 30~70중량부와 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단 중 하나이상과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액 30~70중량부를 혼합한 제2 천연혼합발효액을 제조하는 단계;
상기 제2 천연혼합발효액에 유산균과 막걸리효모액를 접종하고 30~45℃에서 12~72시간 발효하는 단계;
상기 발효물에 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소와 콜라겐, 아미노산, 식이유황 및 복합비타민을 첨가하여 30~45℃에서 1~6시간 발효하는 단계를 포함하는 제2 천연발효효소복합액을 제조하는 단계;
상기 제2 천연발효효소복합액을 이용하여 상기 제조된 고상발효 추출물을 액상발효하는 단계;
상기 액상발효물을 농축하는 단계
를 포함하는 녹각 또는 녹용 발효물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 고상발효는 녹각 또는 녹용을 절각 또는 분쇄하여 상기 제1 천연복합발효액에 20~25℃에서 40-80분 동안 1차 침지한 후 꺼내어 45~55℃에서 2~4일 동안 1차 발효하는 단계;와 상기 1차 발효한 녹각 또는 녹용을 다시 상기 천연 복합발효액에 20~25℃에서 10~20분 동안 2차 침지한 후 꺼내어 45~55℃에서 1~3일 동안 2차 발효할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액은 상기 고상발효 농축물에 0.1~50부피%로 첨가하여 발효된 것일 수 있다.
본 발명에 따라 제조된 녹각 또는 녹용 발효물은 기존에 알려지지 않은 새로운 제1 천연발효효소복합액으로 1차 고상발효 후 제2 천연발효효소액으로 2차 액상 발효하여 얻음으로써, 종래의 일반적인 발효물에 비해 맛과 풍미가 현저하게 증가할 뿐만 아니라, 우수한 영양성분을 크게 증대시켜서 우수한 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진 효과를 발휘할 수 있는 효과가 있다.
또한, 본 발명에 의한 발효물은 제1 및 제2 천연발효효소복합액을 이용한 이중 발효로 발효 효율을 크게 개선시키고, 특히 녹각 또는 녹용의 유효성분 이외에 버섯균사체, 효소 등의 상호작용으로 인하여 세포벽을 분해하고 영양성분과 유효성분의 추출율을 높여서 기능성 성분의 체내 흡수율을 현저하게 향상시킬 수 있는 새로운 효과를 발휘할 수 있다.
따라서 본 발명에 의해 제조된 녹각 또는 녹용 발효물은 음용시에 거부감 없이 골다공증 개선, 면역력 증진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진을 위한 제제로 효율적으로 제제화할 수 있어서 건강식품, 의약품 등으로 널리 활용될 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명에 따른 제1 천연발효효소복합액의 제조공정에 대한 예시도이다.
이하, 본 발명을 하나의 실시예에 의거 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 한약재로 오랫동안 각광을 받고있는 녹각 또는 녹용을 발효처리 가공함에 있어서, 이를 보다 효율적으로 개선하고 기능성 성분의 증대와 체내 흡수율 개선 등을 위하여 새로운 원료를 이용하여 새롭게 개발한 천연발효효소복합액을 이용한 녹각 또는 녹용 발효물에 관한 것이다.
또한, 이러한 천연발효효소복합액을 발효용 바이오 소재로 활용하여, 녹각 또는 녹용, 더 바람직하게는 녹각교를 발효함으로써 세포벽의 분해를 통한 활성성분의 현저한 향상과 인체 흡수율이 개선되게 한 새로운 형태의 발효물을 제공하기 위한 기술에 관한 것이다.
본 발명에서 녹각 또는 녹용은 이를 모두 포섭하는 용어로 녹각으로 표현할 수 있다. 본 발명에서 ‘녹각’이라 함은 실질적으로는 녹용을 포함하는 것으로 이해될 수 있다. 녹각은 광범위하게는 사슴의 뿔을 의미하므로 녹각과 녹용을 모두 포함할 수 있다. 협의의 의미로 녹각은 녹용보다는 오래된 뿔로서 탈각이 이루어진 것이다. 본 발명에서는 바람직하게 녹각교를 사용할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 녹각 또는 녹용, 일반적으로는 녹각교는 녹각을 고아서 교질상태로 얻으며, 녹각교가 얻어지고 남은 찌꺼기는 녹각상이라고 한다. 이러한 녹각은 보통 신양부족으로 인한 정력 감퇴와 비위가 허한하여 음식을 적게 먹고, 소변이 잦으며 유뇨(遺尿), 유정(遺精)에 활용된다. 또, 여성의 자궁출혈, 대하 등을 치료하는 약재로 이용된다. 녹각교는 사슴뿔을 구해서 톱으로 자르고 물속에 넣어 약3일간 담근 뒤 수세하고 물에 담가서 불에 달여 3일이 되면 뿔이 흐물흐물 하여 연한 죽이 된다. 이때 바로 불을 끄고 뿔을 꺼내어 볕에 말리면 녹각상(鹿角霜)이 된다. 또한, 이때 그 끓인 물은 녹각교라고 한다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 녹각 또는 녹용의 발효에 사용된 여러 효소, 효모, 균주 등을 매우 유익한 조건과 선택적 조합으로 구성함으로써, 본 발명의 특별한 효과와 기능 향상을 가능하게 한다는 점에서 녹각 또는 녹용 발효물에 대한 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절건강증진에 대한 현저한 효과를 얻을 수 있다.
일반적으로 천연물의 발효는 발효대상이 되는 원물이 함유하고 있는 기능성 유효성분과 이에 합당한 미생물의 선택에 의해서 그 유용성이 결정된다. 그러나 미생물이라고 하지만 결국은 미생물 내에 존재하는 특정 효소의 존재와 활성도가 더욱 중요하다. 모든 효소는 고유의 기질특이성을 가지고 있기 때문에 한 효소는 한 반응만 촉매하고 온도, pH, 염의 농도 등 특이한 조건을 요구한다.
본 발명의 바람직한 구성은 이러한 개념에 기초로 하고, 녹각 또는 녹용이 함유하고 있는 유효성분들과 특정 미생물에 존재하는 효소들과의 상관관계가 발효물의 효율과 특성을 부여하는 점을 고려하여, 특정 성분의 조성과 발효조건으로 특정 조성의 제1 및 제2 천연발효효소복합액을 제조하고, 이를 이용하여 1차 고상발효 및 2차 액상발효시켜서 우수한 물성의 발효물을 얻을 수 있다.
또한, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 발효하기 전에 식물세포가 함유한 다양한 성분들을 손실함이 없이 최대한 노출될 수 있도록 효모 및 세포막 분해효소를 처리하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명에서 사용되는 다양한 성분들은 발효 미생물 고유의 효소 외에 탄네이즈 등 발효대상물에 존재하는 성분들을 변환시킬 수 있는 효소들을 첨가하여 어떤 천연물에서도 다양하고 많은 생리활성물질이 생성될 수 있는 다기능(multi-functional) 효소복합물로 제조하고, 이를 이용하여 녹각 또는 녹용을 발효함으로써 생체이용율도 현저하게 개선시킬 수 있다.
본 발명은 제1 천연발효효소복합액으로 녹각을 고상발효하고, 제1 천연발효효소액으로 다시 액상발효하여 얻은 녹각 또는 녹용 발효물을 그 특징으로 한다.
본 발명에서 녹각의 고상발효에 사용되는 발효액은 매실천연효소액과 버섯함유 식물혼합물을 혼합한 혼합액에 유산균, 막걸리효모액과 버섯균사체로 발효하고 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소와 멀티비타민을 첨가하여 발효한 제1 천연발효효소복합액을 바람직하게 사용할 수 있다.
이러한 본 발명에 따른 제1 천연발효효소복합액은 그 자체로서 녹각 또는 녹용의 고상발효에 사용될 수 있지만, 보다 바람직한 발효 특성을 구현하기 위해 상기 혼합 효소액에 추가로 특정 조성의 버섯함유 식물혼합추출액을 혼합하여 사용할 수 있다. 여기서 사용되는 버섯함유 식물혼합추출액으로서는 예컨대, 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 2이상의 버섯과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합물을 극성용매로 추출한 추출액이 바람직하게 사용될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 고상발효는 녹각 또는 녹용을 천연 복합발효액에 침지한 후 꺼내어 발효하는 과정으로 수행될 수 있다. 더 바람직하게는 이러한 침지 및 발효는 2차례 반복하여 실시할 수 있다.
본 발명에서 제조된 녹각 또는 녹용의 1차 고상발효된 발효물은 일반적으로는 액상의 발효물로 얻어질 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 고상발효된 고상발효 추출물은 제2 천연발효효소복합액으로 매실천연효소액과 식물혼합추출액, 유산균, 막걸리효모액, 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소, 그리고 콜라겐, 아미노산, 식이유황 등을 첨가하여 발효한 제2 천연발효효소복합액으로 2차 액상발효한 녹각 또는 녹용 발효물을 얻을 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액에 사용된 매실천연효소액에 식물혼합추출액을 혼합 사용할 수 있는데, 여기서는 상기 제1 천연발효효소복합액에서 사용된 것과는 달리 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단 중 하나 이상과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액을 추가로 사용할 수 있다.
한편, 본 발명에 따르면 상기 제1 및 제2 천연발효효소복합액에서 사용되는 막걸리 효모액과 매실천연효소액은 30~70 : 70~30의 중량비율, 더 좋기로는 2~3:3~2의 중량비율, 통상적으로는 서로 동일량이나 비슷한 중량으로 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 매실천연효소액은 바람직하게는 30~70brix, 더 좋기로는 40~60brix로 농축된 것이 사용될 수 있고, 상기 식물혼합추출액은 바람직하게는 40~80brix인 것이 바람직하게 사용될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 매실천연효소액과 식물혼합추출액은 30~70 : 70~30 중량부의 비율로 사용하는 것이 바람직한데, 만일 이 범위를 벗어나면 다양한 식물에 대한 발효과정에서 발효의 균형을 이루지 못하고 특히 효과적인 발효를 기대하기 어렵다,
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 사용되는 유산균은 효율적인 발효를 위해 사용되는데, 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum 중에 하나 이상을 사용할 수 있다. 더 바람직하게는 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 루테니(Lactobacillus reuteni), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) 중의 1종 이상과 추가로 바실러스 아밀로리퀴피엔스(Bacillus amyloliquefaciens), Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Streptococcus thermophilus 중 하나이상이 혼합된 혼합 균을 사용할 수 있다. 여기서 유산균에 바실러스 아밀로리퀴피엔스(Bacillus amyloliquefaciens)를 혼합하는 것은 된장, 고추장 등 우리나라의 대표적인 발효식품에 존재하는 발효균으로서 질소대사를 촉진하기 위함이다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 이러한 유산균은 상기 제1 또는 제2 천연발효효소복합액 모두에서 각각 0.1~5중량%, 더 바람직하게는 0.5~3 중량%로 사용하는 것이 바람직하다. 만일 그 사용량이 너무 적으면 발효 효과가 저하되고, 너무 과다하면 과발효로 인하여 원하지 않는 물질 발생 등의 염려가 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제1 또는 제2 천연발효효소복합액에서 상기 유산균과 더불어서 막걸리 효모액을 사용하는 바, 이러한 막걸리 효모액은 바람직하게는 생막걸리를 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)로 배양한 것이 바람직하게 이용될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 이러한 막걸리 효모액은 상기 제1 또는 제2 천연발효효소복합액 모두에서 각각 0.5~10중량%로 사용하는 것이 좋은데, 더 바람직하게는 1~5중량%로 사용할 수 있다. 만일 그 사용량이 너무 적으면, 발효 성능이 저하되고, 그 사용량이 너무 과다하면 과발효 문제가 발생하여 좋지 않고 유효성분의 향상 효과가 낮아질 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소는 식물 세포막을 분해하여 세포내 성분을 유출하고 고분자 물질을 저분자 물질로 또는 생리활성이 우수한 물질로 변환시켜서 흡수율을 향상시키는데 기여하는 바, 예컨대 수미자임(Sumizyme), 얼티메이즈(Ultimase MFC), 파이르플로(Pyr-flo), 탄네이즈(Tannase) 중에서 하나 이상을 바람직하게 사용할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소는 상기 제1 또는 제2 천연발효효소복합액 모두에서 각각 0.01~3 중량%. 더 바람직하게는 0.05~1중량%로 사용하는 것이 바람직한데, 만일 그 사용량이 너무 적으면 흡수율 등이 저하되며, 과다하면 원하는 유효성분의 효능이 저하될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제1 또는 제2 천연발효효소복합액 모두에서 최종 발효 전에 추가로 복합비타민을 0.01~1중량%로 첨가할 수 있다. 이러한 복합비타민으로서는 예컨대, 비타민 에이(vitamin A), 비타민 비 복합체(vitamin B complex) 및 비타민 씨(vitamin C) 중에서 2 이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액의 최종 발효 전 혼합물에 콜라겐을 혼합하고, 아미노산, 식이유황 중 하나 이상을 추가로 함유할 수 있다. 특히, 아미노산, 식이유황, 복합비타민을 추가로 함유하면 더욱 바람직하다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제1 천연발효효소복합액은 매실천연효소액 30~70중량부와 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 2종 이상의 버섯, 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 버섯함유 식물혼합추출액 30~70중량부를 혼합한 제1 천연혼합발효액 85~95중량%에, 유산균 0.1~5중량%와 막걸리효모액 0.5~10중량%, 동충하초 균사체 1~5중량%, 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소 0.01~3중량%, 멀티비타민 0.01~3중량%를 첨가하여 발효한 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액은 매실천연효소액 30~70중량부와 마늘, 멀꿀, 황기, 우슬, 홍화씨, 오가핑, 두충, 계지, 목과, 속단을 함유하는 식물혼합추출액 30~70중량부를 혼합한 제2 천연혼합발효액 85~95중량%에, 유산균 0.1~5중량%와 막걸리효모액 0.5~10중량%, 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소 0.01~3중량%, 콜라겐 0.1~3중량%, 아미노산 0.1~3 중량%, 식이유황 0.01~3중량%를 첨가하여 발효한 것일 수 있다.
이러한 본 발명의 녹각 또는 녹용 발효물은 녹각이나 녹용의 일반적인 발효와는 그 발효 후의 기능성이 현저하게 개선되는 효과를 기대할 수 있다. 더욱이 본 발명에서는 일반 발효가 아닌 본 발명에서 특별히 제조된 특정 조건의 제1 천연복합발효액을 이용하여 고상발효 과정을 거치고 나서, 이를 제2 천연발효효소복합액으로 액상발효한 결과물로 얻어진 것이 바람직하게 사용된다. 따라서 발효 전의 녹각이나 녹용을 기존의 일반적인 유산균 등을 이용하여 발효한 발효물에 비해 월등하게 우수한 효과를 얻을 수 있으며, 또 기호성과 활용성 측면에서도 우수한 효과를 나타낼 수 있는 것이다.
상기와 같은 본 발명의 제1 및 제2 천연발효효소복합액을 제조하기 위한 방법과 이를 이용하여 녹각 또는 녹용의 제조공정을 각 단계별로 하나의 실시예로 설명하면 다음과 같다.
(1) 사용원료의 제조
<매실천연효소액의 제조>
본 발명은 매실천연효소액 30~70중량부와 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액 30~70중량부를 혼합한 천연혼합발효액을 제조하는 단계를 거친다.
여기서 사용되는 매실천연효소액은 매실에 설탕 또는 흑설탕을 1:0.8∼1.5의 중량비로 혼합하여 상온에서 3∼6개월 동안 발효시킨 것이 바람직하게 사용될 수 있다. 이러한 매실천연효소액은 상기 농도로 농축하여 사용하면 좋다.
이러한 매실천연효소액은 구체적으로는 예컨대, 청매실을 중량비율로 동량의 설탕으로 침지하여 음지 상온에서 3개월 이상 자연발효한 것으로 최종 농도가 5~20brix인 것을 바람직하게 사용할 수 있다. 여기서 사용된 청매실 대신 홍매실을 사용할 수 있고, 설탕은 흑설탕을 바람직하게 사용할 수 있다. 매실천연효소액의 당도는 상기 범위가 바람직한데, 그 이유는 첨가한 매실청이 이후 첨가할 유산균의 성장을 위한 탄소원을 제공할 수 있기 때문에 바람직한 환경으로 조성하는 것이다. 만일, 매실천연효소액의 당도가 너무 높으면 미생물의 성장과 효소의 활성도를 저해할 수 있다.
<식물혼합추출액의 제조>
본 발명에서 사용된 상기 식물혼합추출액은 상기 열거된 종류의 천연물을 이용하여 예컨대, 10배 내지 20배 용량의 정제수를 가하고 80∼98℃에서 5~15시간. 좋기로는 8시간 침지한 후 여과하여 5~20brix로 만들어 사용할 수 있다. 추출은 천연물의 종류에 따라서 1, 2회 더 수행할 수 있고 이들을 합하여 제조할 수 있다. 추출 용매는 극성용매, 바람직하게는 30∼90% 주정을 사용할 수 있다.
<막걸리효모액의 제조>
본 발명에서 사용되는 막걸리효모액은 예컨대, 생막걸리에 막걸리 대비 설탕 2~10%(w/v)와 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 3~7%를 첨가한 후 25~40℃, 더 좋기로는 28~32℃에서 2~10일, 더 좋기로는 3~5일 동안 배양하여 제조할 수 있다. 더욱 바람직하게는 생막걸리에 설탕 3.5%(w/v)와 사카로마이세스 세레비지애를 첨가한 후 30℃에서 4일 동안 배양하여, 이후 단계인 발효과정에서 효모의 활성이 최적화된 막걸리효모액으로 제조할 수 있다.
(2) 제1 천연발효효소복합액의 제조
본 발명에서 고상발효를 위해 사용되는 제1 천연발효효소복합액은 상기 매실천연효소액에 유산균과 상기 막걸리효모액, 그리고 버섯균사체, 바람직하게는 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 하나이상의 버섯 균사체를 접종하고 30~45℃에서 12~72시간 발효하는 단계;와 상기 버섯균사체 적용 발효물에 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소를 첨가하여 30~45℃에서 1~6시간 발효하는 단계를 포함하는 제1 천연발효효소복합액을 제조하는 단계를 거쳐서 제조할 수 있다.
여기서, 상기 버섯균사체로는 동충하초 균사체가 바람직하게 사용될 수 있고, 동충하초 균사체는 코디셉스속 동충하초(Cordyceps spp.) 균사체를 바람직하게 사용할 수 있고, 예컨대 코디셉스 시넨시스(Cordyceps sinensis), 코디셉스 밀라타리스(Cordyceps militaris), 코디셉스 스카라베콜라(Cordyceps scarabaecola), 코디셉스 누탄스(Cordyceps nutans), 코디셉스 스페코세팔라(Cordyceps sphecocephala), 코디셉스 트리센트리(Cordyceps tricentri), 패실로마이세스테누이페스(Paecilomyceps tenuipes) 및 패실로마이세스 자포니카(Paecilomyces japonica)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 사용할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 더 좋기로는 매실천연효소액에 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액을 추가로 혼합하여 사용할 수 있다. 이 경우 바람직하게는 매실천연효소액 30~70중량부와 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 2이상의 버섯과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액 30~70중량부를 혼합한 제1 천연혼합발효액을 제조하여 사용할 수 있다.
이와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 매실천연효소액 단독 또는 상기 제1 천연혼합발효액을 사용하되, 여기에 유산균과 막걸리효모액, 그리고 버섯 균사체를 접종하여 발효하고, 이 버섯균사체 적용 발효물에 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소를 첨가하여 2차 발효하여 제1 천연발효효소복합액을 제조할 수 있다. 이때 2차 발효 이전에 복합비타민을 추가로 첨가하면 더욱 바람직하다.
본 발명에 의하면, 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소를 첨가함으로써 세포벽을 유효성분 소실없이 분해하고 발효 효율을 더욱 개선하므로, 기능성 성분의 함량을 현저하게 상승시키고 고분자량 유효물질은 저분자량으로 전환시켜 생체 흡수율을 크게 향상시킬 수 있다.
이러한 본 발명에 따른 천연발효효소복합액의 바람직한 일 예의 제조공정은 도 1에 도시한 바와 같이 수행될 수 있다.
이렇게 제조된 제1 천연발효효소복합액은 녹각 또는 녹용의 고상발효에 바람직하게 이용된다.
(3) 고상발효
본 발명에 따르면, 녹각을 상기 제조한 제1 천연발효효소복합액에 침지한 후 꺼내어 발효하는 단계를 거칠 수 있다.
여기서 녹각 또는 녹용은 한약재 등에서 널리 사용되는 통상의 녹각 또는 녹용을 절각 또는 분쇄하거나, 녹각교 분쇄물 또는 녹각상 등을 사용할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 녹각 또는 녹용을 상기 제1 천연발효효소복합액에 20~25℃에서 40-80분, 더 좋기로는 50~70분 동안 1차 침지한 후 꺼내어 45~55℃에서 2~4일 동안 1차 발효하고, 상기 1차 발효한 녹각을 다시 상기 제1 천연발효효소복합액에 20~25℃에서 10~20분 동안 2차 침지한 후 꺼내어 45~55℃에서 1~3일 동안 2차 발효할 수 있다.
이렇게 하면 고상발효한 녹각 또는 녹용의 1차 고상발효물을 추출액 형태로 얻을 수 있다.
(4) 제2 천연발효효소복합액의 제조
상기 방법으로 제조되는 매실천연효소액 30~70중량부와 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단 중 하나 이상과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액 30~70중량부를 발효한 제2 천연혼합발효액을 제조할 수 있다.
본 발명에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액을 제조하기 위해서는 상기 매실천연효소액이나 제2 천연혼합발효액에, 유산균과 막걸리효모액를 접종하고 30~45℃에서 12~72시간 발효한다. 여기서 사용되는 매실천연효소액, 식물혼합추출액과 및 막걸리효모액은 상기와 같은 방법으로 제조될 수 있다.
그 다음으로는, 상기 발효물에 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소와 콜라겐을 첨가하여 30~45℃에서 1~6시간 발효하는 단계 거쳐서 제2 천연발효효소복합액을 제조할 수 있다. 여기서 더 바람직하게는 아미노산, 식이유황 중 하나 이상을 추가로 혼합할 수 있다. 그 외에도 더욱 바람직하게는 복합비타민을 추가로 사용할 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 이러한 콜라겐과 더불어서 아미노산, 식이유황 등을 추가로 사용하는 경우 이를 사용하지 않는 경우에 비하여 추후 이를 이용하여 녹각 또는 녹용을 액상발효하였을 때, 그 2차 발효물에서 면역력 증진, 골다공증 개선, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관전 건강증진 효과가 현저하게 더 우수한 효과를 보일 수 있다.
이렇게 제조된 제2 천연발효효소복합액은 상기 고상발효된 녹각 또는 녹용의 1차 발효 추출물에 대하여 액상발효를 수행하는 2차 발효에 바람직하게 사용될 수 있다.
(5) 액상발효
본 발명의 바람직한 실시에에 의하면, 상기 고상발효 과정을 거쳐 얻어진 고상발효물은 바람직하게는 추출액으로 제조하여, 이를 상기 제조된 제2 천연발효효소복합액을 이용하여 액상발효시킨다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 제2 천연발효효소복합액은 상기 발효원료인 고상발효물 추출액에 0.1~50부피%로 첨가하여 액상발효시킬 수 있다. 만일 그 사용량이 적으면 발효가 제대로 일어나지 않게 되고, 그 사용량이 과다하면 과발효로 인해 부작용이나 부생성물이 나타날 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 액상발효에서는 상기 발효원료에 상기 천연발효효소복합액을 0.5∼50부피%, 더 좋기로는 1~10부피%로 첨가 또는 분사하고 15℃∼45℃, 더 바람직하게는 17~37℃에서 1시간 내지 30일 동안 발효하는 단계를 거쳐서 액상발효로 얻어지는 2차 발효물인 녹각 또는 녹용발효물이 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기 액상발효 과정에서 활성화된 유산균과 막걸리 효모, 아미노산 및 추가로 첨가되는 물질 등을 포함한 최종농도가 약 0.01∼1.0% 수준으로 유지되는 것이 바람직하다.
상기와 같이 녹각 또는 녹용을 상기 제1 및 제2 천연발효효소복합액으로 각각 고상발효 후 액상발효한 녹각 또는 녹용 발효물은 기존의 녹각이나 녹용 발효물에 비해 그 기능성분의 효과가 매우 우수한 결과로 나타난다. 이것은 녹각이나 녹용을 단순하게 유산균이나 효소 등으로 발효하는 것과는 달리 본 발명에 의해 제조된 제1 천연효소발효액이나 제2 천연효소발효액을 이용하여 고상발효와 액상발효를 수행함으로써 발현되는 우수한 효과의 결과로 보인다. 또한, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 매실천연효소액, 막걸리효모액의 사용, 특정 유산균과 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소의 사용 등에 의한 효과에 기인한 것으로 평가된다.
특히, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 상기와 같이 제조한 제1 또는 제2 천연발효효소복합액은 일종의 Lactobacillus와 일종의 대표적인 토종 발효균인 Bacillus amyloliquefaciens 및 효모를 포함하여 제조할 수 있으며, 이를 사용하는 경우 이 균들은 자체가 가지고 있는 고유의 효소반응 외에 산화질소 대사를 촉매하는 nitrate reductase 효소도 함유되어 있다. 또한, 천연발효효소의 주요 성분인 매실천연효소액은 다량의 설탕을 함유하고 있어 식물혼합추출액 성분들과 함께 본 발효시 미생물 성장에 필요한 탄소원 등 영양분을 제공할 수 있다. 그러므로 발효 효과가 현저하게 개선될 수 있다.
또한, 본 발명에서 사용되는 세포막 분해 및 생체성분 변환 효소인 Sumizyme, Pyr-flo, Ultimase 등은 cellulase, Hemi-cellulase, β-glucosidase, arabinosidase, 및 pectinase 등을 함유할 수 있어서 세포막, 세포벽을 분해하고 유출된 활성성분을 가수분해하여 다양한 성분으로 변환할 수 있다. 그리고 추가로 첨가하는 복합비타민은 유산균의 성장이나 효소의 촉매반응을 활성화할 수 있다.
상기와 같이 제조된 본 발명의 녹각 또는 녹용 발효물은 천연물의 영양성분 추출율을 높여 체내 흡수율을 상승시키며, 인체에 유익한 항산화 물질, 산화질소 전구체 등 다양한 생리활성 성분이 크게 증가된 발효물로 얻을 수 있어서, 종래의 가공식품 녹각이나 가공 녹용과는 현저하게 차별화되어 경쟁력이 높은 제품의 생산 가능하다.
본 발명에 따르면 이렇게 제조된 녹각 또는 녹용 발효물은 면역증 증진은 물론 골다공증 개선, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진 등에 현저하게 우수한 효과를 나타내는 것으로 확인되었다. 이러한 효과는 기존과 다른 성분에 의한 발효의 결과로 인해 더욱 우수한 효과를 보이는 것으로 판단된다.
더욱이, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 녹각 또는 녹용의 2차 발효인 액상발효에 이용되는 제2 천연발효효소복합액 제조과정에서 사용되는 아미노산 등은 녹각 또는 녹용의 발효과정에 첨가되어 다른 성분들과의 상승 작용으로 골다공증 개선, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진 효과를 크게 향상시키는데 기여한다.
본 발명에 의하면, 이러한 콜라겐과 아미노산, 식이유황 등은 키 성장이나 관절 개선에도 기여하는 성분이다. 그러므로 이러한 녹용 또는 녹각 발효물에 아미노산 등을 추가 사용하면 효과가 더욱 개선될 수 있다.
그러나 본 발명에서는 이러한 아미노산 등을 단순 혼합하여 사용하지 아니하고 제2 천연발효효소복합액의 제조과정에 사용하고, 이를 이용하여 녹각의 고상발효 추출액을 액상발효하는데 사용하기 때문에 그 자체로서 더욱 바람직한 효과를 발휘하고, 발효과정에서 다른 천연성분들과의 상승효과 및 녹각과의 상승효과가 더욱 향상됨으로 인하여 매우 우수하고 예측할 수 없는 우수한 골다공증 개선, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진 효과를 발휘하는 것이다.
또한, 본 발명에 따르면, 서로 다른 구성의 제1 또는 제2 천연발효효소복합액을 이용하여 1차 고상발효 및 2차 액상발효를 시행하고, 저온에서도 안정적이고 효율적인 조건으로 발효함으로써, 녹각 또는 녹용이 함유하고 있는 고분자 물질을 저분자화하고, 세포벽을 분해하여 영양성분 추출율을 높임으로써 영양성분의 체내 흡수율을 현저하게 상승시킬 수 있다. 또, 녹각 또는 녹용의 발효, 분해 및 변환을 통해 인체에 유익한 항산화 물질, 산화질소 전구체, 녹각 또는 녹용 특유의 기능성분 등 다양한 생리활성 성분이 크게 증가된 형태로 녹각 또는 녹용 발효물을 얻을 수 있는 것이다.
따라서 본 발명의 녹각 또는 녹용의 발효물은 여러 기능 성분이 매우 복합적이고 바람직한 형태로 존재하여 관절이나 뼈 성장을 위한 바람직한 원료로 제조될 수 있다. 그러므로 이러한 녹각 또는 녹용 발효물은 키 성장촉진 또는 관절 건강증진용의 건강식품 또는 의약품 등에 매우 유용한 원료로 널리 활용될 수 있을 것이다. 이 경우 다양한 통상의 첨가제가 사용될 수 있다.
또한, 이러한 기능은 반려동물에도 적용 가능할 것이므로, 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면, 관절개선이나 뼈성장 등의 기능 을가지는 펫용 건강식품, 사료첨가제 또는 사료 조성물로 적용될 수 있다.
이하 본 발명을 구체적인 실시예에 의거 상세하게 설명하겠는바, 본 발명이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1 : 녹각 발효물의 제조
(1) 생막걸리에 생막걸리 대비 흑설탕 3.5%(w/v)와 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae) 5%(w/v)를 접종한 후 30℃에서 4일 동안 배양하여 막걸리 효모액을 제조하였다.
(2) 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯, 마늘, 멀꿀 및 황기 식물을 각 10중량%씩 혼합한 식물 혼합물에 식물 혼합물 대비 정제수 8배(v/w)를 첨가한 후 90℃에서 8시간 동안 추출하여 버섯함유 식물혼합추출액을 제조하였다.
(3) 매실과 설탕을 1:1 중량비율로 혼합한 후 25~30℃에서 동안 숙성시킨 후 여과하여 매실천연효소액을 제조하였다.
(4) 상기 (2)단계에서 제조한 버섯함유 식물혼합추출액과 상기 (3)단계에서 제조한 매천연효소액을 7:3의 중량비율로 혼합하여 식물혼합 효소액을 제조하였다.
(5) 상기 (4)단계의 제조한 식물혼합 효소액 대비 상기 (1)단계에서 제조한 막걸리 효모액 1중량%와, 8종 알파 혼합 유산균-엘(L)2(Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus 및 Lactobacillus fermentum) 1중량%와, 동충하초 균사체 3중량%를 혼합한 후, 이를 37℃에서 24시간 배양하여 제1 천연혼합발효액을 제조하였다.
(6) 여기에 Sumizyme, Ultimase MFC, Pyr-filo 및 Tannase의 효소 각각 0.5중량%와 복합비타민(비타민A, 비타민B 복합체 및 비타민C)을 가하고, 37℃에서 24시간 배양하여 제1 천연발효효소복합액을 제조하였다.
(7) 녹각은 캐나다산 녹각을 5~50 mesh 크기로 분쇄하여 상기 (5)단계에서 제조한 제1 천연발효효소복합액에 서 5℃에서 80분 동안 침지하였다(1차 침지).
(8) 상기 (6)단계에서 침지한 녹각을 꺼내어 50℃ 온도 및 습도 35%에 서 5일 동안 발효하였다(1차 발효). 상기 발효한 녹각을 다시 상기 제1 천연발효효소복합액에 20~25℃에서 20분 동안 침지하고(2차 침지), 꺼내어 50℃ 온도 및 습도 35%에서 3일 동안 발효하였다(2차 발효). 이렇게 하여 고상발효된 녹각의 1차 발효물 추출액을 얻었다.
(9) 액상발효를 위한 제2 천연발효효소복합액을 제조하기 위하여, 마늘, 멀꿀, 황기, 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단을 각각 10중량%씩 함유하는 식물혼합물로부터 10브릭스의 식물혼합추출액을 얻고, 여기에 10브릭스의 매실천연효소액을 동량 혼합하고, 여기에 이들 혼합액 대비 lactobacillus brevis (1x108cfu/ml)와 Bacillus amyloliquefaciens(1x108cfu/ml)를 각각 0.5중량%, 그리고 막걸리효모액을 1중량% 첨가하고 37℃에서 24시간 회전 보온기에서 배양하여 제2 천연혼합발효액을 제조하였다.
(10) 상기 제2 천연혼합발효액에 수미자임(Sumizyme), 얼티메이즈(Ultimase MFC), 파이르플로(Pyr-flo), 탄네이즈(Tannase)를 각각 0.5 중량%와, 콜라겐 1중량%, 아미노산 1중량%, 식이유황 0.5중량% 및 복합비타민(비타민A, 비타민B 복합체 및 비타민C)를 첨가하고 37℃에서 2시간 더 배양하여 제2 천연발효효소복합액을 제조하였다.
(11) 상기 (8)단계에서 제조된 녹각 1차 발효물 추출액에 상기 제조된 제2 천연발효효소복합액을 10부피% 되게 첨가하였다. 이를 37℃에서 24시간 동안 발효시켜서 액상발효된 녹각 발효물을 얻었다.
(12) 상기 제조된 녹각 발효물은 농축하여 농축분말상으로 제조하였다.
실시예 2
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각발효물을 제조하되, 제1 천연발효혼합물 제조시에 버섯함유 식물혼합추출액으로 동충하초, 마늘, 멀꿀, 황기를 각각 10중량%씩 혼합 사용한 것을 제외하고는 동일하게 실시하여 녹각 발효물을 제조하였다.
실시예 3
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각 발효물을 제조하되, 제2 천연발효혼합물 제조시에 식물혼합추출액을 사용하지 않은 것을 제외하고는 동일하게 실시하여 녹각 또는 녹용발효물을 제조하였다.
실시예 4
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각 발효물을 제조하되, 제2 천연발효효소혼합액 제조시에 아미노산을 사용하지 않은 것을 제외하고는 동일하게 실시하여 녹각 발효물을 제조하였다.
실시예 5
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각 발효물을 제조하되, 제2 천연발효혼합물 제조시에 식이유황을 사용하지 않은 것을 제외하고는 동일하게 실시하여 녹각 발효물을 제조하였다.
비교예 1
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각 발효물을 제조하되, 제1 천연발효혼합물을 이용한 고상발효만을 진행하고, 제2 천연발효효소복합액을 이용한 액상발효는 진행하지 아니하고 녹각 발효물을 제조하였다.
비교예 2
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각 발효물을 제조하되, 제1 및 제2 천연발효혼합물 제조시에 매실천연효소액과 식물혼합추출액을 사용하지 않은 것을 제외하고는 동일하게 실시하여 녹각 발효물을 제조하였다.
비교예 3
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각 발효물을 제조하되, 제1 및 제2 천연발효혼합물 제조시에 막걸리효모액을 사용하지 않은 것을 제외하고는 동일하게 실시하여 녹각 발효물을 제조하였다.
비교예 4
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각 발효물을 제조하되, 제1 및 제2 천연발효혼합물 제조시에 수미자임(Sumizyme), 얼티메이즈(Ultimase MFC), 파이르플로(Pyr-flo) 및 탄네이즈(Tannase)를 사용하지 않은 것을 제외하고는 동일하게 실시하여 녹각 발효물을 제조하였다.
비교예 5
상기 실시예 1과 동일한 방법으로 녹각 발효물을 제조하되, 제2 천연발효혼합물을 이용한 액상발효 대신에 유산균만을 사용한 것을 제외하고는 동일하게 실시하여 녹각 발효물을 제조하였다.
실험예 1 : 녹각 발효물의 유효성분 분석
상기 실시예와 비교예에서 제조된 녹각 발효물에 대하여 지표 유효성분으로 강글리오사이드(S-GAG) 및 시알산(Sialic Acid) 함량을 분석하고 그 결과를 다음 표 1에 나타내었다.
시료구분 S-GAG(㎍/ml) Sialic Acid(㎍/ml)
실시예 1 113.2±0.18 44.1±0.02
실시예 2 98.1±0.20 41.1±0.04
실시예 3 93.9±0.13 38.7±0.04
실시예 4 113.1±0.16 41.6±0.03
실시예 5 110.6±0.11 42.1±0.02
비교예 1 78.1±0.15 23.9±0.06
비교예 2 82.9±0.09 29.2±0.03
비교예 3 83.6±0.19 27.7±0.02
비교예 4 87.2±0.15 29.1±0.04
비교예 5 84.1±0.21 25.8±0.08
상기 표 1에서 보면 실시예의 경우 비교예에 비하여 유효성분이 월등하게 증가된 현상을 확인할 수 있다.
실험예 2 : 코디세핀 함량 분석 비교
상기 실시예와 비교예에서 제조된 녹각 발효물에 함유된 유효성분 중에서 코디세핀(Cordycepin)의 함량을 측정하여 분석하였다.(동충하초 균사체 7일 발효)
녹각 추출물 중에 함유된 코디세핀을 추출하기 위하여 녹각 발효물 1ml를 탈이온수 20ml에 현탁시키고, 초음파처리기(Cole-Parmer, 미국)를 이용하여 42kHz, 70W, 60℃에서 1시간 동안 초음파처리하여 용액을 얻었다.
이렇게 얻은 용액을 10분동안 9,000rpm에서 원심분리하여 상등액을 얻은 다음, 이 상등액 1ml를 0.45㎛ 필터막을 이용하여 여과하고 HPLC 분석에 적용하였다. 여기서 사용된 컬럼은 역상 Aglient C18 (4.6×150mm, 입자크기 5㎛)을 이용하였다.
상기에서 얻은 추출물로부터 코디세핀을 분리하기 위해, 탈이온수 및 HPLC 등급의 메탄올로 구성된 이동상을 이용하여 컬럼온도 25℃에서 85:15의 상대 부피비율로 분리를 수행하였다. 이때 유속은 분당 1ml로 하여 260nm에서 UV-visible 검출이 수행되었다.
이러한 과정으로 분석된 결과는 하기 표에 비교하여 나타내었다.
시료구분 Cordycepin(ppm)
실시예 1 6.2±0.03
실시예 2 5.2±0.16
실시예 3 5.3±0.07
실시예 4 6.1±0.08
실시예 5 6.1±0.11
비교예 1 2.2±0.04
비교예 2 3.2±0.06
비교예 3 3.1±0.12
비교예 4 3.2±0.11
비교예 5 2.6±0.10
실험예 3 : 자유라디칼 소거능(DPPH)
상기 실시예와 비교예의 시료에 대한 자유라디칼 소거능 측정은 DPPH법을 사용하였다. 즉, DPPH를 0.2 mM농도로 에탄올에 용해한 후, 20 ㎕의 시료와 180 ㎕의 DPPH 용액을 96 웰플레이트에 첨가하고 암소에서 강하게 진탕하면서 30분간 반응시킨 후 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 측정 결과는 하기 표와 같다.
시료 저해율 (%)
5㎍/ml 10㎍/ml 50㎍/ml 100㎍/ml
실시예 1 26 49 74 88
비교예 1 10 24 38 47
대조약물(카제인산) 42 51 80 -
실험예 4 : NK세포 활성측정
20g 내외의 4주령 수컷C57BL/6M 마우스를 명암은 12시간(light/dark cycle), 온도는 23±2℃, 상대습도는 50±5%인 조건에서 1주 동안 적응기를 거쳐 실험에 이용하였다. 적응기간 동안 AIN-93G 식이와 음용수는 자유롭게 섭취하도록 하였으며 체중을 측정하여 평균체중에 가까운 개체를 무작위 법으로 8마리씩 7군으로 분리하였다.
적응기간이 끝나고 시료의 섭취는 2주간 경구투여로 진행하였으며, 희생 4일전 첫 강제 수영운동을 실시하였고, 3일간의 휴식기를 거쳐 희생 하루전 2차 강제수영운동을 실시하였으며, 희생당일 3차 강제 수영운동을 실시하였다. 강제수영운동은 한계수영을 기준으로 진행되었다.
실험동물은 12시간 절식시킨 후 마취시켜 개복하여 복대동맥을 통해 채혈하였다. 전혈을 sample로 사용해야 하는 경우, 채혈 전 주사기와 tube에 10% EDTA solution을 충분히 적셔 혈액응고를 방지하였고, 장기무게를 측정한 후 실험에 필요한 spleen은 splenocytes로 분리하였다.
분리한 splenocyte를 96well plate에 각 well당 5X105cells/well씩 분주한다. 표적세포는 Yac-1 cell로 1X104cells/well씩 분주한다. Sample을 농도별로 처리하여 37℃, 5% CO2에서 4시간 동안 배양하였다. 배양 후 상등액 50ul을 새로운 plate에 분주하고 Cytotox 96 Non-radioactive Cytotoxicity assay kit (Promega Corporation, Madison, WI, USA)를 이용하여 ELISA reader (Bio-Rad)를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정하여 NK cell의 활성도를 측정하였다.
자연살해세포는 과거에 항원을 인식한 적이 없는 상태에서도 활성화되어 반응하기 때문에 선천면역에서 virus에 감염된 세포, 종양세포, 또는 비정상적인 세포를 인지하여 사멸시키는 역할을 하며 IL-2, IL-12, IL-15 등의 대식세포에서 분비되는 cytokines에 의해 자극되어 활성화되며 IFN-γ등의 분비를 증가시킨다.
또한, 자연살해세포는 MHC class I 발현의 변화를 인식하여 감염되지 않는 정상 세포에 공격을 막음으로 감염된 세포와 결합하여 선택적으로 세포사멸을 유도시킨다. 자연살해세포가 제거할 수 있는 대상은 다양하게 알려져 있지만 자연살해세포의 활성능에 이용되고 있는 세포는 mouse의 경우 Moloney virus-induced lymphoma 세포주인 YAC-1 세포가 가장 널리 알려져 있다. 따라서 여기서는 YAC-1 세포를 target cell로 설정하고 자연살해세포를 effector cell로 설정하여 co-culture하여 천연소재들의 처리가 자연살해세포 활성에 미치는 영향을 관찰하였다.
그 결과, 정상대조군(NC) 대비 강제수영운동대조군(C)에서 유의적으로 감소하였고, 양성대조군(PC)의 경우, 강제수영운동대조군(C) 대비 유의적으로 증가하였으며, 실시예 시료에서 유의적으로 증가하였다. 특히, 실시예 1의 녹각 발효물 (200 μg/mL)에서 가장 많은 활성이 나타났다.
NK activity (% of normal control)
실시예 1 92
실시예 2 91
실시예 3 88
실시예 4 86
실시예 5 89
비교예 1 48
비교예 2 51
비교예 5 44
NC 100
C 43
PC 111
실험예 5 : 혈중 NO 생성능 측정 실험
Nitric oxide 생성능을 측정하기 위하여 Ll venes 등의 방법을 참고하였고, Nitric Oxide Assay Kit (abcam, cambridge, MA, USA)를 사용하였다. Assay 용 96well plate에 standard와 분리한 혈액 serum을 sample로 사용하여 85 μL 씩 분주하였고, Nitrate reductase와 Enzyme cofactor을 5 μL씩 분주하였으며, plate sealer를 씌워 실온에서 1시간 방치하였다. 각 well에 Enhancer 5 μL씩 분주하여 실온에 10분 더 반응시킨 후, Griess Reagent R1과 R2를 각각 50 μL 씩 분주하여 반응시키며 ELISA reader (Bio-Rad) 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
탐식작용을 하는 동안 대식세포에서는 탐식된 병원균을 죽이기 위하여 다양한 독성 물질들을 생산, 중요한 독성물질 젓 하나가 NO이며, 선천 면역과 적응 면역 간 경계에서 중요한 역할을 하여 세균, 바이러스, 미생물 등의 병원균을 사명시키는 매개체로 작용한다. 본 실험에서의 결과는 다음 표에 나타내었다.
시료 총 NO 량(μmol/ml)
실시예 1 119
실시예 2 121
실시예 3 122
실시예 4 124
실시예 5 120
비교예 1 184
비교예 2 172
비교예 3 171
비교예 4 169
비교예 5 159
NC 100
C 196
PC 122
혈중 NO의 생성량을 측정한 결과, 정상대조군(NC)대비 강제수영운동대조군(C)에서 현저하게 증가하였고, 양성대조군(PC)의 경우, 강제수영운동대조군(C) 대비 유의적으로 감소하였으며, 실시예의 시료에서는 양성대조군(PC)에 수준으로 현저하게 감소하였다.
실험예 6 : 면역활성 증진 확인 실험
비장 세포활성 측정은 체내에서 간과 함께 세포 분열이 가장 활발한 기관으로서 면역증가 효과 또는 세포 재생 능력 평가에서 주로 사용되는 장기이다. 본 실험에서는 SD rat의 비장을 1차 세포배양을 통해 각 군별 비장 세포를 배양 하고 항원 콘카나발린 A를 처리하여 그에 따른 세포 증식능을 평가 하였다. 실험동물은 6주령 SD rat을 이용하였으며 녹용 및 녹각 추출물을 3주간 경구투여 한 후 개복하여 동물의 비장을 분리하였다. 분리한 비장은 다음과 같은 단계를 거쳐 MTT assay를 하였다.
각 그룹별 SD rat은 10마리였고, 온도 25±1℃, 습도 50±5%에서 사육하였다. 비장세포는 온도 25±0.1℃, CO2 농도 5±0.2%에서 배양하였다.
그 결과, 다음 표와 같이 3주간 녹용 및 녹각 추출물을 경구 투여한 SD rat의 비장을 취하여 1차 세포배양을 통하여 비장세포의 증식을 확인한 결과 녹용 추출물과 녹각 추출물을 경구 투여한 동물의 시료에서 면역세포가 증식되는 것을 확인할 수 있었다.
시료 세포증식(%)
control 100
실시예 1 185
실시예 2 179
실시예 3 177
실시예 4 178
실시예 5 181
비교예 1 159
비교예 2 166
비교예 3 168
비교예 4 162
비교예 5 160
상기 표의 결과에서, 실시예의 시료를 경구 투여(200mg/kg)한 동물의 경우 control 그룹보다 비장세포가 178-185% 더 활성화되dj 현저한 면역 활성의 증진 효과를 보였다.
실험예 7 : 경골 길이 및 성장판 증식 확인 실험
실험 동물은 3주령의 웅성 Sprague-Dawley(SD) 계열 흰쥐(60± 10 g)를 이용하였다. 실험 동물은 사육케이지(42 × 28 cm)을 이용해 실험실 온도 22-24℃, 습도 60±5%가 유지되며 밤낮 주기(12시간 light/ 12시간 dark)가 자동 조절 장치에 의해 조절되는 경희대학교 동물실에서 1주간 예비 사육 후 2주 동안 사육되었다.
실험동물에 대하여 무작위 추출법에 의해 군당 6마리씩 5개군으로 분류하였다. 시료 처치군은 실시예 1 시료 투여군(A)과 비교예 5 시료투여군(B)으로 분류하였다. A, B 투여군 모두 100mg/kg으로 투여하였고, B 투여군은 시료는 매일 일정한 시간에 존대를 이용해 경구로 투여하였으며 전 실험기간 동안 물과 AIN-93 기본식이는 자유롭게 섭취하도록 하였다.
양성대조군은 Foremilk 300mg/kg BW (F-300), 효모 가수분해물 300 mg/kg BW (E-300)을 사용하였다.
식이 섭취량은 주 2회, 체중은 주 1회 측정하였으며 식이효율(feed efficiency ratio, FER)은 측정된 식이 섭취량에 대한 체중 증가량으로 계산하였다.
상기 실험군인 A, B 투여군과 양성대조군인 F-300, E-300 실험군들에 대하여 각 시료를 경구투여한 후 경골 성장판의 길이와 경골의 길이를 측정하였다.
실험 전과 실험 종료 직후의 경골 및 경골 성장판의 길이는 ethyl ether로 마취시켜 X-ray mammography system(GE Senographe 500t, GE Medical Systems, France)로 증감지(minR-2, Kodak, USA)와 필름(CM-H for mammography, Konica, Japan)을 이용하여 촬영하였다. 촬영시 관전압은 32 kVp, 관전류는 32 mAs으로 하였으며, plateform과의 거리는 25cm였고 15초간 노출하여 촬영하였다. 촬영된 필름은 현상기(QX-130Ⅱ, Konica)로 현상액 31°C, 정착액 29°C에서 현상하고 필름을 Vidar VXR-12 film digitizer(Vidar Systems Co., USA; Resolution 570 dpi, Depth 12)로 스캔하였다. 스캔된 영상은 Image J 프로그램(National Institute of Health, MD, USA)을 이용하여 경골과 경골 성장판의 중앙, 좌, 우 등 세 부위의 profile curve를 구하고 반치폭의 픽셀수로부터 길이를 계산하였다.
그 결과는 다음 표와 같다.
시험군 경골 증가 길이(mm) 성장판 증가 길이(mm)
대조군 6.82±0.17 0.51±0.12
A(실시예1)군 9.17±0.19 0.87±0.15
B(비교예5)군 7.21±0.31 0.63±0.08
F-300 6.91±0.52 0.58±0.05
E-300 7.44±0.45 0.65±0.11
실험예 8 : 골밀도 영향 실험
6주령 SD rat 암컷을 이용하여 난소를 적출하였으며 1주일간 안정기를 보낸 후 16주간 실시예 1, 비교예 5의 시료를 투여하였다. 사용한 SD rat은 총 50마리였으며 각 그룹당 5마리씩 총 10개의 그룹으로 분류하였다. 온도는 25±1℃, 습도는 50±5%에서 사육하였다. 난소적출을 하지 않은 normal 그룹, 난소적출은 하지 않았으나 복부를 개복하였다가 닫은 sham 그룹, 난소 적출 후 단백질원으로 카세인을 경구 투여한 control 그룹, 동물의 중량(kg) 당 150mg의 실시예, 비교예 시료를 투여한 그룹 등을 positive 및 negative control로 분류하고, 동물의 중량(kg) 당 50, 100, 150, 200, 300mg의 실시예 1의 시료를 농도별로 투여한 5개의 그룹으로 분류하여 총 10개의 그룹으로 분류하여 실험을 진행하였다.
각 그룹의 동물은 기본적으로 자유식이를 하였으며 각각의 시료에 대하여 경구 투여하였다. 골밀도 측정은 micro CT(Inveon™, Siemens Preclinical Solution, USA) 기기를 이용하여 측정하였으며, 측정조건은 엑스레이 전압 80kV, 전류 500uA, 노출시간 250ms 및 filed of view(FOV) 56.97 × 71.21의 조건으로 촬영하였다.
얻어진 이미지는 Shepp-Logan 필터 방식으로 영상을 재구성하였다. 영상 분석은 Inveon Research Workplace(Siemens Preclinical Solution, USA) 프로그램을 이용하였으며, 대퇴골체 부분에 관심영역을 지정하여 평균값을 구하여 BMD를 산출하였다. 측정 부위는 대퇴부 경부 부분에서 대퇴골 슬개면까지 측정하여 평균값을 구하였다.
실험결과를 보면, 하기 표와 같이 일반 SD rat과 개복 후 닫은 sham 그룹은 사육 8주까지 골밀도가 증가하다가 16주까지 더 이상 증가하지 않고 유지되는 것을 관찰하였다. 난소적출 후 카세인을 투여한 동물의 그룹에서는 8주 이후 골밀도가 저하되는 것을 관찰할 수 있었으며, 동물의 중량(kg) 당 150mg의 실시예 1의 시료는 8주 이후로도 골밀도가 유의적으로 상승되는 것을 관찰할 수 있었다. 이 실험에서 CA는 카세인 150mg/kg 투여군이다.
실험기간 BMD 증가율(%)
4주 8주 12주 16주
정상군 118 133 134 135
Sharm 117 132 134 133
CA 112 122 120 115
실시예 1 128 136 138 139
비교예 5 119 132 131 130
실험예 9 : 키 성장 촉진 효능 평가 실험
만 10세 이상의 소아청소년을 대상으로 상기 실시예 1의 조성물이 포함된 제품의 사용 전후에 있어서의 키 성장 상태를 평가하였다. 구체적으로, 실시예 1의 조성물 10mL을 500mL의 생수에 혼합하여 아침 식전 100mL, 아침식사 후에서 저녁 식사 전 300mL, 저녁 취침 직전 100mL 로 나누어 하루에 500mL를 모두 소비하는 방식으로 기간은 자유롭게 하여 평가하였다.
그 결과를 하기 표에 나타내었다.
성별 나이 복용기간
(일)		 복용전(cm) 복용후(cm) 복용전후차이 (cm)
남 12 60 136 140 4
남 15 60 142 146 4
여 10 60 130 135 5
남 15 60 133 136 6
여 14 60 132 134 2
여 15 60 141 145 4
여 12 60 137 141 4
남 16 60 139 144 5
여 11 60 132 137 5
남 14 60 152 155 3
남 12 50 142 146 4
남 15 50 147 149 2
남 15 50 131 135 4
여 14 50 145 147 2
남 13 50 134 137 3
남 14 40 144 146 2
남 12 40 148 150 2
여 15 40 151 153 2
남 11 40 145 148 3
대조군(남) 12 60
(복용없음)		 139 140 1
대조군 (여) 12 60
(복용없음)		 138 139 1
상기 실험결과, 60일 복용 후 평균 4~5cm의 성장을 보였으며, 이는 대조군의 평균 성장 예측치인 1cm의 4~5배의 현저한 키성장 효과를 보인다.

Claims (16)

  1. 매실천연효소액, 버섯함유 식물혼합추출액, 유산균, 막걸리 효모액, 버섯균사체의 혼합물과, 셀룰라아제(cellulase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 베타글루코시다제(β-glucosidase), 아라비노시다제(arabinosidase), 펙티나아제(pectinase) 및 탄네이즈(tannase)를 포함하는 효소가 함유된 제1 천연발효효소복합액으로 녹각 또는 녹용을 고상발효하고, 그 고상발효 추출액을 매실천연효소액과 유산균 및 막걸리효모액과, 셀룰라아제(cellulase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 베타글루코시다제(β-glucosidase), 아라비노시다제(arabinosidase), 펙티나아제(pectinase) 및 탄네이즈(tannase)를 포함하는 효소, 그리고 콜라겐을 첨가하여 발효한 제2 천연발효효소복합액으로 2차 액상발효한 녹각 또는 녹용 발효물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 막걸리 효모액은 생막걸리를 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae)로 배양한 녹각 또는 녹용 발효물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 바실러스 아밀로리퀴피엔스(Bacillus amyloliquefaciens) 중에 하나 이상을 사용한 녹각 또는 녹용 발효물.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 버섯균사체는 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중에서 하나이상의 버섯 균사체를 사용한 녹각 또는 녹용 발효물.
  5. 삭제
  6. 청구항 1에 있어서, 상기 버섯함유 식물혼합추출액은 동충하초, 차가버섯, 영지버섯 , 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 하나 이상의 버섯과, 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 것인 녹각 또는 녹용 발효물.
  7. 청구항 1에 있어서, 상기 제2 천연발효효소복합액의 발효 전 혼합물에는 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단 중 하나 이상과, 마늘, 멀꿀, 황기를 추가로 함유하는 녹각 또는 녹용 발효물.
  8. 청구항 1에 있어서, 상기 제1 천연발효효소복합액의 최종 발효 전 혼합물에 비타민 에이(vitamin A), 비타민 비 복합체(vitamin B complex) 및 비타민 씨(vitamin C) 중에서 2 이상의 복합비타민을 포함하는 녹각 또는 녹용 발효물.
  9. 청구항 1에 있어서, 상기 제2 천연발효효소복합액의 최종 발효 전 혼합물에 아미노산, 식이유황, 복합비타민 중 하나이상 추가로 함유하는 녹각 또는 녹용발효물.
  10. 청구항 1에 있어서, 상기 제1 천연발효효소복합액은 매실천연효소액 30~70중량부와 동충하초, 차가버섯, 영지버섯 , 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 2종 이상의 버섯, 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 버섯함유 식물혼합추출액 30~70중량부가 혼합된 제1 천연혼합발효액 85~95중량%에, 유산균 0.1~5중량%와 막걸리효모액 0.5~10중량%, 동충하초 균사체 1~5중량%, 셀룰라아제(cellulase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 베타글루코시다제(β-glucosidase), 아라비노시다제(arabinosidase), 펙티나아제(pectinase) 및 탄네이즈(tannase)를 포함하는 효소 0.01~3중량%, 복합비타민 0.01~3중량%를 첨가하여 발효한 것이고,
    상기 제2 천연발효효소복합액은 매실천연효소액 30~70중량부와 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단 중 하나 이상과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액 30~70중량부가 혼합된 제2 천연혼합발효액 85~95중량%에, 유산균 0.1~5중량%와 막걸리효모액 0.5~10중량%, 셀룰라아제(cellulase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 베타글루코시다제(β-glucosidase), 아라비노시다제(arabinosidase), 펙티나아제(pectinase) 및 탄네이즈(tannase)를 포함하는 효소 0.01~3중량%, 콜라겐 0.1~3중량%, 아미노산 0.1~3 중량%, 식이유황 0.1~3중량%를 첨가하여 발효한 것임을 특징으로 하는 녹각 또는 녹용 발효물.
  11. 청구항 1 내지 청구항 4, 청구항 6 내지 청구항 10 중 어느 하나의 항에 따른 녹각 또는 녹용 발효물을 유효성분으로 함유하는 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진용 조성물.
  12. 청구항 11에 있어서, 건강식품조성물 또는 약학조성물에 적용되는 것을 특징으로 하는 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절 건강증진용 조성물.
  13. 청구항 12에 있어서, 펫용 건강식품, 사료첨가제 또는 사료에 적용되는 것을 특징으로하는 상기 골다공증 개선, 면역력 증진, 뼈 성장촉진, 키 성장촉진 또는 관절건강증진용 조성물.
  14. 매실천연효소액 30~70중량부와 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 2이상의 버섯과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 버섯함유 식물혼합추출액 30~70중량부를 혼합한 제1 천연혼합발효액을 제조하는 단계;
    상기 제1 천연혼합발효액에 유산균과 막걸리효모액, 그리고 동충하초, 차가버섯, 영지버섯, 능이버섯, 상황버섯, 운지버섯, 노루궁뎅이버섯 중 하나이상의 버섯균사체를 접종하고 30~45℃에서 12~72시간 발효하는 단계;
    상기 버섯균사체 적용 발효물에 셀룰라아제(cellulase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 베타글루코시다제(β-glucosidase), 아라비노시다제(arabinosidase), 펙티나아제(pectinase) 및 탄네이즈(tannase)를 포함하는 효소를 첨가하여 30~45℃에서 1~6시간 발효하는 단계를 포함하는 제1 천연발효효소복합액을 제조하는 단계;
    상기 제1 천연발효효소복합액을 이용하여 녹각 또는 녹용을 고상발효하는 단계;
    상기 고상발효물을 추출하여 고상발효 추출액을 제조하는 단계;
    매실천연효소액 30~70중량부와 우슬, 홍화씨, 오가피, 두충, 계지, 목과, 속단 중 하나이상과 마늘, 멀꿀 및 황기를 함유하는 식물혼합추출액 30~70중량부를 혼합한 제2 천연혼합발효액을 제조하는 단계;
    상기 제2 천연혼합발효액에 유산균과 막걸리효모액를 접종하고 30~45℃에서 12~72시간 발효하는 단계;
    상기 발효물에 셀룰라아제(cellulase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 베타글루코시다제(β-glucosidase), 아라비노시다제(arabinosidase), 펙티나아제(pectinase) 및 탄네이즈(tannase)를 포함하는 효소와 콜라겐, 아미노산 및 식이유황을 첨가하여 30~45℃에서 1~6시간 발효하는 단계를 포함하는 제2 천연발효효소복합액을 제조하는 단계;
    상기 제2 천연발효효소복합액을 이용하여 상기 제조된 고상발효 추출액을 액상발효하는 단계;
    상기 액상발효물을 농축하는 단계
    를 포함하는 녹각 또는 녹용 발효물의 제조방법.
  15. 청구항 14에 있어서, 상기 고상발효는 녹각 또는 녹용을 분쇄하여 상기 제1 천연발효효소복합액에 20~25℃에서 40-80분 동안 1차 침지한 후 꺼내어 45~55℃에서 2~4일 동안 1차 발효하는 단계;와 상기 1차 발효한 녹각 또는 녹용을 다시 상기 제1 천연발효효소복합액에 20~25℃에서 10~20분 동안 2차 침지한 후 꺼내어 45~55℃에서 1~3일 동안 2차 발효하는 단계를 포함하는 녹각 또는 녹용 발효물의 제조방법.
  16. 청구항 14에 있어서, 상기 제2 천연발효효소복합액은 상기 고상발효 추출액에 0.1~50부피%로 첨가하여 발효하는 녹각 또는 녹용 발효물의 제조방법.
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20080084763A (ko) 2007-03-16 2008-09-19 대상 주식회사 천연 아미노산 발효액의 제조방법
KR20140056972A (ko) 2012-11-02 2014-05-12 박은실 배,도라지,생강,대추를 넣어 발효시킨 천연효소발효액
KR101679388B1 (ko) * 2016-09-02 2016-11-24 대동고려삼 주식회사 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 발효물을 함유하는 관절 및 연골 건강제품
KR101823089B1 (ko) 2017-10-25 2018-01-31 (주)신성농산 천연 발효액을 이용한 기능성 착색 발효 연근의 제조방법 및 그 착색 발효 연근
KR101829526B1 (ko) 2016-03-03 2018-02-19 주식회사 한국인삼공사 발효 녹용 추출물 또는 그의 분획물을 함유하는 면역 강화용 조성물

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20080084763A (ko) 2007-03-16 2008-09-19 대상 주식회사 천연 아미노산 발효액의 제조방법
KR20140056972A (ko) 2012-11-02 2014-05-12 박은실 배,도라지,생강,대추를 넣어 발효시킨 천연효소발효액
KR101829526B1 (ko) 2016-03-03 2018-02-19 주식회사 한국인삼공사 발효 녹용 추출물 또는 그의 분획물을 함유하는 면역 강화용 조성물
KR101679388B1 (ko) * 2016-09-02 2016-11-24 대동고려삼 주식회사 강글리오사이드 및 시알산 함량이 증진된 녹용 또는 녹각 발효물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 발효물을 함유하는 관절 및 연골 건강제품
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