KR102568245B1 - 백그라운드 노이즈를 저감한 면역크로마토그래피 장치 및 그 저감 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 면역크로마토그래피(immunochromatography) 장치에 있어서 피검출물의 시그널을 명확하게 검지하기 위하여, 백그라운드 노이즈를 저감시켜 시인성(視認性)을 향상시키는 것을 목적으로 한다. 피검출 물질을 포착할 수 있는 포착 물질로서 항체 또는 항원이 고상화(固相化)된 검출 영역을 가지는 멤브레인(membrane)을 포함하고, 착색 입자인 표지 담체로 표지된 항원 또는 항체를 사용하고, 장치 상의 포착 물질을 고상화한 검출 영역에 포착 물질-피검출 물질-표지된 항원 혹은 항체의 복합체를 형성시켜, 표지 담체의 색에 의해 피검출 물질을 검출하는 면역크로마토그래피 장치에 있어서, 검체가 장치 위를 전개할 때, 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색의 색소가 장치 위를 함께 전개하고, 상기 색소를 장치의 구성 부재 중에 건조 상태로 포함시키는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 장치.

Description

백그라운드 노이즈를 저감한 면역크로마토그래피 장치 및 그 저감 방법{IMMUNOCHROMATOGRAPHY DEVICE HAVING REDUCED BACKGROUND NOISES, AND METHOD FOR REDUCING BACKGROUND NOISES IN IMMUNOCHROMATOGRAPHTY DEVICE}

본 발명은, 면역크로마토그래피 장치에 있어서 피검출물의 시그널을 명확하게 검지하기 위하여, 백그라운드 노이즈를 저감시켜 시인성(視認性)을 향상시키는 것에 관한 것이다.

면역크로마토그래피 장치에 있어서 검체와 함께 전개(展開)되는 표지 담체는 본 검출 방법에 있어서 필수적인 성분이지만, 피검출물의 유무를 유색의 판정상(判定像)으로 검지하는 원리 상, 담체 자신이 시인 가능한 색을 나타내고 있다. 이 때문에, 검출할 시그널이 동색의 백그라운드 노이즈 영향을 받아, 시인성이 손상되는 문제의 해결이 과제였다. 이 과제를 해결하기 위하여, 피검출물을 검체로부터 추출·분산시키는 용액(이하, 검체 추출액)에, 표지 담체와 보색의 관계에 있는 전개액을 사용하는 것이 제안되어 있다(특허문헌 1). 그러나 상기 방법에서는, 면봉 등으로 부정량에 채취된 검체를 검체 추출액과 섞었을 때 색소 성분도 부정량적으로 희석되는 것이 고려되어 있지 않아, 결과적으로 검출계에 미치는 효과에 크게 불균일을 주게 된다. 표지 담체와 검체 추출액의 보색 관계를 사용하여 시인성의 향상을 도모하기 위해서는, 색상뿐만 아니라, 명도와 채도(彩度)도 조정되어 있는 것이 바람직하지만, 상기 방법으로는 검체 채취 시의 부정량성에 대응하는 것은 극히 곤란하다.

또한, 1종류의 검체 추출액을 복수의 검출계에서 공용하는 검사 시약이 현재 보급되고 있다.(비특허문헌 1∼4: 퀵네비(상표)-Flu 첨부 문서/이뮤노에이스(등록상표) Flu 첨부 문서/프라임 체크(등록상표) Flu·RSV 첨부 문서/나노 트랩(등록상표) IIR 취급 설명서). 이들 기존 제품에 한정되지 않고, 사용되는 표지 담체에는 다색·다종류의 선택 사항이 있으며, 이들 모두에 대응하는 보색은 원리적으로 있을 수 없다. 따라서 검체 추출액에 특정 색을 부여하는 것은, 시약의 공통화라는 편리성과는 상반하게 되어, 선택 사항으로서는 합리적이지 않다.

일본공개특허 제2013-228350호 공보

퀵네비(상표)-Flu 첨부 문서(2014년 11월 개정(제13판)) 이뮤노에이스(등록상표) Flu 첨부 문서(2011년 10월 개정(제10판)) 프라임체크(등록상표) Flu·RSV 첨부 문서(2013년 1월 개정(제3판)) 나노트랩(등록상표) IIR 사용 설명서(2014년11월 제4판)

본 발명은, 면역크로마토그래피 장치에 있어서 피검출물의 시그널을 명확하게 검지하기 위하여, 표지 항체 또는 표지 항원의 표지 담체에 기인하는 백그라운드 노이즈를 저감시켜 시인성을 향상시키는 것을 과제로 한다.

본 발명자는, 표지 담체로 표지한 항체 또는 항원을 사용하고, 검출 영역에 항원 항체 복합체를 형성함으로써 표지 담체를 집적시키는 면역크로마토그래피 장치에 있어서, 표지 항체 또는 표지 항원의 표지 담체가 면역크로마토그래피 장치의 검출 영역을 가지는 멤브레인 상에 잔류하는 것에 기인하는 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법에 대하여 예의 검토를 행하였다.

본 발명자는, 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색의 색소를 검출 영역보다 상류에 위치하는 장치의 구성 부재 중에 배치하고, 검체 전개시킬 때, 검체나 표지 담체와 함께 색소가 전개하는 것에 의해, 멤브레인 상에 표지 담체와 색소가 함께 존재함으로써, 표지 담체의 색과 보색 관계에 있는 색의 색소에 의해, 멤브레인 상의 표지 담체의 색의 채도가 저하하고, 백그라운드 노이즈를 저감시킬 수 있는 것을 발견하고, 본 발명을 완성시키기에 이르렀다.

즉, 본 발명은 아래와 같다.

[1] 피검출 물질을 포착할 수 있는 포착 물질로서 항체 또는 항원이 고상화된 검출 영역을 가지는 멤브레인을 포함하고, 착색 입자인 표지 담체로 표지된 항원 또는 항체를 사용하고, 장치 상의 포착 물질을 고상화한 검출 영역에 포착 물질-피검출 물질-표지된 항원 혹은 항체의 복합체를 형성시켜, 표지 담체의 색에 의해 피검출 물질을 검출하는 면역크로마토그래피 장치에 있어서, 검체가 장치 위를 전개할 때, 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색의 색소가 장치 위를 함께 전개하고, 상기 색소를 장치의 구성 부재 중에 건조 상태로 포함시키는 것을 특징으로 하는 면역크로마토그래피 장치.

[2] 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재가 검출 영역으로부터 상류측에 배치되는 부재인 것을 특징으로 하는, [1]의 면역크로마토그래피 장치.

[3] 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재가 샘플 패드인 것을 특징으로 하는, [1] 또는 [2]의 면역크로마토그래피 장치.

[4] 색소가 염료 또는 안료인 것을 특징으로 하는, [1]∼[3] 중 어느 하나의 면역크로마토그래피 장치.

[5] 색소가 유색 입자인 것을 특징으로 하는, [1]∼[3] 중 어느 하나의 면역크로마토그래피 장치.

[6] 피검출 물질을 포착할 수 있는 포착 물질로서 항체 또는 항원이 고상화된 검출 영역을 가지는 멤브레인을 포함하고, 착색 입자인 표지 담체로 표지된 항원 또는 항체를 사용하고, 장치 상의 포착 물질을 고상화한 검출 영역에 포착 물질-피검출 물질-표지된 항원 혹은 항체의 복합체를 형성시켜, 표지 담체의 색에 의해 피검출 물질을 검출하는 면역크로마토그래피 장치에 있어서, 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색의 색소를 장치의 구성 부재 중에 건조 상태로 포함시켜 두고, 검체가 장치 위를 전개할 때, 상기 색소를 장치 위에 함께 전개시켜, 표지 담체에 의한 백그라운드 노이즈의 색의 채도를 저하시킴으로써 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.

[7] 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재가 검출 영역으로부터 상류측에 배치되는 부재인 것을 특징으로 하는, [6]의 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.

[8] 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재가 샘플 패드인 것을 특징으로 하는, [6]또 는 [7]의 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.

[9] 색소가 염료 또는 안료인 것을 특징으로 하는, [6]∼[8] 중 어느 하나의 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.

[10] 색소가 유색 입자인 것을 특징으로 하는, [6]∼[8] 중 어느 하나의 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.

본 발명의 면역크로마토그래피 장치 또는 본 발명의 방법에 의해, 면역크로마토그래피 장치에 있어서 백그라운드 노이즈를 저감하고, 검출 시그널의 시인성을 향상시킬 수 있고, 검체 중의 항원 또는 항체를 정확하게 검출할 수 있다.

본 명세서는 본원의 우선권의 기초가 되는 일본특허출원번호 2015-090798호의 개시 내용을 포함한다.

도 1은 본 발명의 면역크로마토그래피 장치의 구성을 나타낸 도면이다.
도 2는 실시예에서 사용한 인플루엔자 바이러스 검출용 면역크로마토그래피 장치의 구성을 나타낸 도면이다.
도 3은 색소의 유무에 의한 백그라운드 노이즈 저감의 검증 결과를 나타낸 도면이다.
도 4는 적단색계(赤單色系) 면역크로마토그래피 장치에서의 검증 결과를 나타낸 도면이다.
도 5는 공통의 검체 추출액을 사용한 경우의 백그라운드 노이즈 검증 결과를 나타낸 도면이다(적·청 혼색계 면역크로마토그래피 장치).
도 6은 공통의 검체 추출액을 사용한 경우의 백그라운드 노이즈 검증 결과를 나타낸 도면다(적단색계 면역크로마토그래피 장치).

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

도 1은, 본 발명의 면역크로마토그래피 장치의 바람직한 1형태의 예를 나타낸 도면이다. 도 1에 나타내는 면역크로마토그래피 장치는, 멤브레인(1), 표지체 영역(2), 검출 영역(3), 샘플 패드(4), 흡수대(5), 배킹(backing) 시트(6)의 구성 부재에 의해 구성되어 있다. 부재를 재료 또는 영역이라고 할 수도 있다.

도 1의 A가 상면도, 도 1의 B가 절단 단면도이다. 도면의 예에서는, 배킹 시트(6) 상에 2개의 검출 영역(3)이 형성된 멤브레인(1), 흡수대(5), 표지체 영역(2), 샘플 패드(4)가 각각 적층되어 있다. 그리고, 도시한 바와 같이, 흡수대(5)의 한쪽 단부(端部)와 멤브레인(1)의 한쪽 단부, 멤브레인(1)의 다른 쪽 단부와 표지체 영역(2)의 한쪽 단부, 표지체 영역(2)의 다른 쪽 단부와 샘플 패드(4)의 한쪽 단부가 각각 중첩되어 있고, 이로써, 연속된 래터럴 플로우의 유로(流路)가 형성되어 있다.

멤브레인(1)은, 피검출물을 포착하기 위한 포착 물질을 고상화하는 성능을 가지는 부재이며, 또한 액체가 수평 방향으로 통행하는 것을 방해하지 않는 성능을 가진다. 바람직하게는, 모세관 작용을 가지는 다공성 박막이며, 액체 및 거기에 분산된 성분을 흡수하고 전개시킴으로써 수송 가능한 재료이다. 멤브레인을 이루는 재질은 특별히 한정되지 않으며, 예를 들면, 셀룰로오스, 니트로셀룰로오스, 셀룰로오스아세테이트, 폴리비닐리덴디플루오라이드(PVDF), 유리 섬유, 나일론, 폴리 케톤 등이 있다. 이 중 니트로셀룰로오스를 사용하여 박막으로 한 것이 더욱 바람직하다.

표지체 영역(2)은, 피검출 물질에 대한 항체로서 표지 담체로 표지된 표지 항체를 포함하는 다공성 기재(基材)로 이루어지고, 기재의 재질은 일반적으로 사용되고 있는 유리 섬유나 부직포 등을 사용할 수 있다. 상기 기재는, 다량의 표지 항체를 함침시키기 위하여, 두께 0.3mm∼0.6mm 정도의 패드형인 것이 바람직하다.

표지 담체는 피검출물과 복합체를 형성한 후에 어떠한 수단에 의해 검출 가능한 것을 의미한다. 예를 들면, 알칼리포스파타아제나 서양 고추냉이 퍼옥시다제와 같은 효소, 금 콜로이드와 같은 금속 콜로이드, 실리카 입자, 셀룰로오스 입자, 및 착색 라텍스 입자 등을 사용할 수 있는 경우가 많다. 금속 클로이드 입자나 착색 라텍스 입자 등의 착색 입자를 사용할 경우에는, 이 표지 시약이 응집함으로써 착색이 생기므로, 이 착색을 측정한다. 효소를 사용할 경우에는, 측정 스텝 중에 기질을 첨가하는 조작 및 효소와 기질의 반응을 정지시키는 조작이 필요한 것에 비해, 금속 클로이드 입자나 착색 라텍스 입자를 사용할 경우에는 그러한 조작을 필요로 하지 않는다. 최근, 인플루엔자 등의 유행기에 대량의 검사수가 필요하게 되는 항목에서는 임상 현장에서의 신속 측정이 행해지고 있다. 이 목적으로 사용되는 간이 검사 시약은 현장의 의사, 간호사, 임상 검사 기사 등에 의해 취급되는 케이스가 많기 때문에, 측정 스텝을 한층 간략화하는 것이 요구되고 있으므로, 조작이 간편한 금속 클로이드 입자나 착색 라텍스 입자를 사용하는 경우가 많다. 이 착색 라텍스 입자로서는 폴리스티렌 입자 등을 사용한 것이 많이 사용된다. 특히 착색 라텍스 입자의 경우, 색이나 입자 직경이 다른 다양한 종류의 것이 제조 가능하며, 실제로, 많은 종류가 시판되고 있고, 각각의 목적에 따라 적합한 것을 선택할 수 있으므로, 최근 사용되는 케이스가 증가하고 있다. 또한 복수의 색조의 라텍스 입자를 사용하여, 복수의 피검출물을 검출하는 방법도 제안되어 있다. 본 발명에서 사용하는 면역크로마토그래피 장치는, 표지 담체로서 금속 클로이드 입자나 착색 라텍스 입자 등의 착색 입자를 사용하는 장치가 바람직하다. 본 발명에 있어서, 표지 담체의 색이라고 하는 경우, 표지 담체가 착색 입자의 경우 입자 자체의 색을 말하며, 표지 담체가 효소인 경우, 효소 반응에 의해 나타나는 색을 말한다.

검출 영역(3)은, 피검출물을 포착하는 포착 물질이 고상화된 멤브레인의 일부 영역(부재)을 지칭한다. 항원 검출용의 면역크로마토그래피 장치에 있어서는, 피검출물은 항원이며, 포착 물질은 항체를 지칭한다. 이 경우에, 검출 영역(3)은, 항원을 포착하기 위한 항체를 고상화한 영역을 적어도 1개 설치한다.

그리고, 검출 영역(3)의 수 및 표지체 영역(2)에 포함되는 표지 항체의 종류는 1개로 한정되지 않고, 복수의 피검출물에 대응하는 항체를 사용함으로써, 2개 이상의 항원을 동일한 면역크로마토그래피 장치에서 측정할 수 있다. 이와 같은 형태의 경우, 표지체 영역(2)에는 복수의 표지 항체가 혼합한 상태로 포함되고, 각각의 표지 항체가 개별로 가지는 색이나 농도, 혼합비가, 본 발명이 대상으로 하는 과제를 복잡화하므로 중요한 요소가 된다.

샘플 패드(4)는, 검체 또는 검체를 사용하여 조제된 시료를 적가(滴加)하기 위한 부재이며, 흡수성을 가지는 다공성 재료이다. 상기 재료에는 일반적으로 사용되는 셀룰로오스, 유리 섬유, 부직포 등을 사용할 수 있다. 다량의 검체를 면역 측정에 사용하기 위해, 두께 0.3mm∼1mm 정도의 패드형인 것이 바람직하다. 그리고, 샘플 패드와 전술한 표지체 영역(2)은 어디까지나 기능적인 구별이며, 반드시 별도의 재료일 필요는 없다. 즉, 샘플 패드로서 설치한 재료의 일부 영역이 표지체 영역의 기능을 가지는 것도 가능하다.

흡수대(5)는, 멤브레인(1)에 공급되고 검출 영역(3)에서 반응에 관여하지 않은 성분을 흡수하기 위한 부재이다. 상기 재료에는, 일반적인 천연 고분자 화합물, 합성 고분자 화합물 등으로 이루어지는 보수성(保水性)이 높은 여과지, 스폰지 등을 사용할 수 있지만, 검체의 전개 촉진을 위해서는 흡수성이 높은 것이 바람직하다.

배킹 시트(6)는, 전술한 모든 부재, 즉 멤브레인(1), 샘플 패드(4), 표지체 영역(2), 흡수대(5) 등이, 부분적인 중첩에 의해 부착·고정되기 위한 부재이다. 배킹 시트(6)는, 이 부재가 최적 간격으로 배치·고정되면, 반드시 필요하지 않지만, 제조 상 혹은 사용 상의 접근성을 고려하여, 일반적으로는 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명의 면역크로마토그래피 장치에는, 또한 대조 표시 영역(부재)이 존재하고 있어도 된다. 대조 표시 영역은 시험이 정확하게 실시된 것을 나타내는 부위이다. 예를 들면, 대조 표시 영역은, 검출 영역의 하류에 존재하고, 검체 시료가 검출 영역을 통과하고, 대조 표시 영역에 도달했을 때 착색 등에 의해 시그널을 발한다. 대조 표시 영역에는, 표지 담체를 결합시킨 항체에 결합하는 물질을 고상화해 두어도 되고, 검체 시료가 도달했을 때 색이 변화되는 pH 인디케이터 등의 시약을 고상화해 두어도 된다. 표지 담체를 결합시킨 항체가 마우스 단클론 항체인 경우, 항(抗)마우스 IgG 항체를 사용하면 된다.

도 1에서 설명한 형태의 면역크로마토그래피 장치에 있어서, 액체인 검체를 샘플 패드에 적하(適下)하면, 상기 검체는, 샘플 패드, 표지체 영역, 멤브레인, 검출 영역, 흡수대 등의 일련의 접속에 의해 형성된 다공성 유로를 통과한다. 따라서 본 형태에 있어서는, 이들 모두가 검체 이동 영역이 된다. 각 구성 부재의 재질이나 형태에 따라, 검체가 부재 내부를 침투하지 않고 계면을 통행하는 형태도 있을 수 있지만, 본 명세서에서 정의한 검체 이동 영역은 부재의 내부인지 계면인지 묻지 않기 때문에, 상기 형태의 면역크로마토그래피 장치도 본 명세서의 범위에 포함된다.

샘플 패드에 제공된 검체는 모세관 운동에 의해 표지체 영역, 멤브레인, 흡수대로 순차적으로, 수평 방향으로 전개된다. 표지체 영역에서는 검체 시료의 전개와 함께 표지 항체가 액중에 방출되고 멤브레인에 전개된다. 검체 시료 중에 항원이 존재하는 경우에 있어서, 멤브레인의 검출 영역에서는 포착 항체에 의해 항원이 특이적으로 포착되고, 또한 항원은 표지 항체와도 특이적 반응에 의해 복합체를 형성한다. 이로써, 검출 영역에서는 항원을 통한 항체의 샌드위치가 성립하고, 포착 물질-항원(피검출 물질)-표지 항체로 표시되는 복합체가 형성되고, 표지 항체-항원복합물을 표지 담체의 존재를 지표로 검출 영역에서 측정할 수 있다. 예를 들면, 표지 담체가 금속 클로이드 입자나 착색 라텍스 입자 등의 착색 입자인 경우, 항원이 존재할 경우에, 검출 영역에 착색 입자가 집적한 결과, 검출 영역이 색을 나타내므로, 이 색을 육안으로 또는 광 측정 장치에 의해 검출함으로써, 항원을 검출할 수 있다. 그리고, 본 발명에 있어서, 검체는 샘플 패드로부터 흡수대의 방향으로 흐르고, 흐르는 방향에 따라 샘플 패드에 보다 가까운 영역을 상류 영역이라 하고, 흡수대에 보다 가까운 영역을 하류 영역이라고 한다. 예를 들면, 도 1에 구성을 나타낸 장치에 있어서, 샘플 패드나 표지체 영역은 검출 영역보다 상류측에 배치되어 있다고 한다.

상기한 설명은, 표지 항체를 사용하여 검체 중의 항원을 검출하는 경우의 설명이지만, 포착 물질로서 항원을 사용하고, 표지 물질로서 표지 항원을 사용하여, 검체중의 상기 항원에 대한 항체를 검출할 수 있다. 이 경우에, 표지체 영역에는 피검출 물질인 항체가 결합하는 항원으로서 표지 담체로 표지된 표지 항원을 포함하고, 검출 영역에는 피검출 물질인 항체를 포착하는 항원이 포착 물질로서 고상화된다.

본 발명은, 면역크로마토그래피 장치에 있어서, 백그라운드 노이즈를 저감하고, 검출 시그널의 시인성을 향상시키는 방법이다. 백그라운드 노이즈란, 표지 항체 또는 표지 항원이 장치 위를 모세관 현상에 의해 전개했을 때, 멤브레인 상에 표지 항체 또는 표지 항원이 잔류하고, 이 잔류한 표지 항체 또는 표지 항원의 표지 담체의 색에 의한 노이즈를 일컬으며, 상기 노이즈에 의해 멤브레인 상의 검출 영역에 나타나는 표지 항체 또는 표지 항원이 잘 보이지 않는 상태가 된다. 크로마토그래피 장치에서의 피검출물의 유무의 판정은, 표지 담체가 착색 입자인 경우, 검출 영역에 포착되고 축적한 표지 항체 또는 표지 항원의 표지 담체의 색을 육안으로 확인하는 것에 의해 행하기 때문에, 백그라운드 노이즈가 높아지면 검출 영역의 표지 항체 또는 표지 항원을 식별하기 어려워져, 판정이 곤란하게 되는 경우가 있다. 특히, 피검출물이 미량일 경우에는 검출 영역의 표지 항체가 불선명하게 되는 경우가 있고, 정확하게 판독할 수 없어 오판정을 초래할 우려가 있다. 또한, 백그라운드 노이즈는 표지 항체 또는 표지 항원의 다과(多寡)에 의존하기 때문에, 표지체 영역으로 방출된 직후가 가장 높으며, 시간 경과와 함께 서서히 저하되어 가는 성질이 있다. 이 때문에, 임상 현장에서 신속한 판정을 행하기 위해서도, 전개 직후의 높은 백그라운드를 신속하게 저감시키는 것은 유익하다.

본 발명에 있어서는, 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 면역크로마토그래피 장치의 구성 부재에 건조 상태로 포함시킴으로써, 샘플 패드에 공급한 검체가 멤브레인에 전개하고, 그에 따라 표지체 영역으로 재용출한 표지 항체 또는 표지 항원이 멤브레인에 전개될 때 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소도 동시에 재용출하고 전개되어, 멤브레인 상에 표지 담체와 색소가 함께 존재한다. 그 결과, 표지 항체 또는 표지 항원에 의한 백그라운드 노이즈가 경감된다.

표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재는 검출 영역으로부터 상류측에 배치되는 부재가 바람직하다. 검출 영역으로부터 상류측에 배치되는 부재란, 검출 영역측의 상류측에 있는 모든 부재가 포함되고, 구체적으로는 검출 영역으로부터 상류측의 멤브레인, 표지체 영역, 샘플 패드를 예로 들 수 있지만, 이들과는 달리 색소를 포함시킨 부재를 검출 영역으로부터 상류측의 임의의 개소에 배치해도 된다. 상기 색소를 포함시키는 구성 부재로서, 더욱 바람직한 것은 샘플 패드이다.

색소를 구성 부재 중에 포함시키는 방법은, 검체 추출액에 의해 색소가 재용출되는 상태가 유지되고 있으면, 주액(注液), 침지(浸漬), 분무, 용사(溶射), 증착 등, 어떠한 공지의 기술을 사용해도 되지만, 정밀도와 간편성의 점에서, 분무에 의한 도포 후, 건조시키는 방법이 바람직하다. 또한, 본원에서의 「건조 상태」란 어디까지나 성능 상, 제조 상 문제가 없을 정도로 건조하고, 젖지 않고 있는 것을 지칭한다. 따라서 엄밀하게는 아몰퍼스(유리 상태) 등이라도 상관없다.

본 발명의 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소는 염료, 안료와 같은 공지의 것을 사용할 수 있다. 또한, 색을 나타내는 물질 그 자체뿐만 아니라, 색소를 부착, 결합, 함유시킴으로써 착색한 유색 입자 등을 사용할 수도 있다. 착색하는 입자로서는, 폴리스티렌 입자 등의 수지 입자나 라텍스 입자 등의 입자를 사용할 수 있다. 사용하는 색소는, 검출계에 사용하는 표지 항체 또는 표지 항원의 총체로서의 색에 대한 보색의 관계에 있는 색인 것이 바람직하다.

본 발명에서의 「보색의 관계에 있는 색」이란, 표지 항체 또는 표지 항원과 혼합되었을 때, 표지 항체 또는 표지 항원의 표지 담체가 가지는 색의 채도 저하를 일으켜 무채색에 근접시키는 색상을 의미한다. 따라서 색상환(色相環)에 있어서는, 표지 항체 또는 표지 항원의 표지 담체가 가지는 색으로부터 120∼180°의 각도차에 있는 색이 그 효과를 가지지만, 180°에 가까울수록 그 효과가 높기 때문에, 165∼180°에 있는 색이 더욱 바람직하다. 일반적으로는, 「보색」은 색상환에서 180°의 각도차에 있는 색, 곧 정반대에 위치하는 색을 말하지만, 본 발명에서의 「보색의 관계에 있는 색」은, 색상환에 있어서는 120∼180°의 각도차에 있는 색을 포함시킨다. 예를 들면, 색상환으로서, 24색상의 PCCS(일본색연배색체계)의 색상환, 먼셀 표색계(Munsell color system)에 의한 먼셀 색상환, 오스왈드 표색계(Ostwald color system)에 의한 오스왈드 색상환 등이 알려져 있지만, 본 발명에 있어서, 「보색의 관계에 있는 색」은 어떠한 색상환에 기초를 두는 것이라도 된다. 따라서, 본 발명에 있어서, 「보색의 관계에 있는 색」은 PCCS의 색상환, 먼셀 색상환, 오스왈드 색상환 등의 색상환 상의 정반대에 위치하는 보색과 그 보색에 대하여 색상차가 1∼3인 「인접 색상」이나 「유사 색상」을 포함한다. PCCS의 색상환 상의 보색은 심리 보색이며, 심리 보색이란 유채색을 응시했을 때에 보이는 보색 잔상의 색을 말한다. 또한, 먼셀 색상환, 오스왈드 색상환 상의 보색은 물리 보색이며, 물리 보색이란 혼합하면 무채색이 되는 색을 말한다. 따라서, 본 발명에 있어서, 「보색의 관계에 있는 색」의 「보색」은 심리 보색도 물리 보색도 포함한다.

예를 들면, 적색 폴리스티렌 라텍스 입자 등의 적색의 표지 담체를 사용하는 경우, 적색과 보색의 관계에 있는 색은 청색으로부터 녹색이며, 보색의 관계에 있는 색소로서, 청록색의 색소를 사용할 수 있다. 또한, 청색 폴리스티렌 라텍스 입자 등의 청색의 표지 담체를 사용할 경우, 청색과 보색의 관계에 있는 색은 주황색으로부터 적색이며, 보색의 관계에 있는 색소로서, 주황색의 색소를 사용할 수 있다. 또한, 상이한 색의 복수의 표지 담체를 사용해도 되고, 적색 입자와 청색 입자를 병용할 경우, 황록색의 색소를 사용할 수 있다. 색소는 혼합하여 원하는 색으로 조정하여 사용할 수도 있다.

표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색의 색소를 사용함으로써, 멤브레인 상에 잔류하고 있는 표지 담체의 색의 채도가 저하되고, 멤브레인이 백색으로 보이게 되고, 검출 영역에서의 표지 담체의 색과 멤브레인의 색의 콘트라스트가 커지고, 검출 영역에서의 표지 담체의 색이 선명하게 된다.

본 발명에 있어서, 적색의 표지 담체만을 사용하는 면역크로마토그래피, 청색의 표지 담체만을 사용하는 면역크로마토그래피 장치를, 각각, 적단색계 면역크로마토그래피 장치, 청단색계 면역크로마토그래피 장치라고 한다. 또한, 상이한 색의 복수의 표지 담체를 사용할 수도 있으며, 적색 입자와 청색 입자를 병용할 경우, 적·청 혼색계 면역크로마토그래피 장치라고 한다.

예를 들면, 적단색계 면역크로마토그래피 장치에 사용하는 색소로서, 청록색의 패스트 그린(Fast Green) FCF, 알리자린 시아닌 그린(Alizarin Cyanine Green) F, 청색의 브릴리언트 블루(Brilliant Blue) FCF, 인디고 카르민(Indigo Carmine), 크실렌 시아놀(Xylene Cyanol) FF, 브로모페놀 블루(Bromophenol Blue) 등을 예로 들 수 있다. 또한, 적·청 혼색계 면역크로마토그래피 장치에 사용하는 색소로서, 황록색의 라이트 그린 SF 옐로우, 알리자린 시아닌 그린 F와 타트라진(tartrazine)을 혼합한 황록색의 색소 등을 예로 들 수 있다. 또한, 청단색계 면역크로마토그래피 장치에 사용하는 색소로서 황색의 타트라진 등을 예로 들 수 있다.

종래에는 사전에 검체 추출액에 색소를 첨가해 두는 방법도 있었다(일본공개특허 제2013-228350호 공보). 그러나, 생체 시료로 이루어지는 검체는 스왑(swab) 등으로 정량하지 않고 채취하므로, 과잉으로 검체가 채취되는 경우가 있고, 그 결과, 검체 추출액이 양호하게 전개하지 않고 색소가 멤브레인 상에 잔류하여 백그라운드 노이즈가 높아지는 문제점이 있었다. 또한, 검체가 과잉으로 채취됨으로써, 검체 추출액이 희석되어, 색소가 연하게 되는 문제점이 있었다. 이들 변동의 요인은, 검체 채취량이 일정하지 않은 것에 대하여, 검사 시약(키트/디바이스라고도 함)으로의 검체 추출액의 적가량은 일정하게 규정되어 있는 것에 기인한다. 본 발명에서는, 사전에 면역크로마토그래피 장치 내부의 구성 부재에 색소를 배치하는 것에 의해, 채취되는 검체량이 영향을 받지 않는다. 즉, 종래 기술과는 대조적으로, 시약 중의 색소가 일정량이며, 일정량의 검체 추출액으로 전개되는 것에 의한다.

백그라운드 노이즈의 고저(高低)는 표지 담체의 양과 밀접하게 관여하고 있으므로, 검체 추출액 적가 시로부터 반응 종료 시에 걸쳐서 경시적(經時的)으로 변화한다. 검체 추출액에 색소를 첨가하는 종래법에서는, 백그라운드 노이즈가 높은 전개 초기와, 백그라운드 노이즈가 낮아지는 종기의 어느 시점에 있어서도 일정한 색조의 색소액이 전개되기 때문에, 이상적인 형태는 아니다. 한편 본 발명의 방법에서는 색소도 표지 담체와 마찬가지로 전개 초기에 진하고, 종기에는 연하게 전개되기 때문에, 백그라운드 노이즈의 경시적인 변화에 대응한 형태이다.

본 발명의 방법에 있어서, 측정 대상이 되는 생체 시료는, 생체의 점막 유래의 물질이 혼입되어 있는 검체가 바람직하며, 비인두 점막 유래 검체나 구강 점막 유래 검체가 있으며, 구체적으로는, 객담(喀痰), 타액(唾液), 인두(咽頭)를 닦은 액, 비강(鼻腔)을 닦은 액, 비강 흡인액, 각결막을 닦은 액, 대변 검체 등이 포함된다.

본 발명의 방법에 있어서, 측정 대상이 되는 피검출 물질은 면역검정(immunoassay), 즉 항원 항체 반응을 사용한 어세이로 측정할 수 있는 항원 또는 항체이다. 항원으로서는 항체를 제작할 수 있는 것이면 어떤 항원이라도 되며, 예를 들면, 단백질, 다당류, 지방질 등이 있다. 이들 물질을 포함하는 원생 동물, 진균, 세균, 마이코플라즈마(mycoplasma), 리케차(rickettsia), 클라미디아(chlamydia), 바이러스 등도 측정할 수 있다.

본 발명은, 상기한 색소를 가지는 면역크로마토그래피 장치를 포함하는 항원 또는 항체 검출 키트도 포함한다. 상기 키티는 면역크로마토그래피 장치 이외에 검체 채취용의 시약, 검체 채취용의 디바이스, 브로셔(brochure) 등을 포함한다.

이하, 본 발명을 실시예에 기초하여 보다 구체적으로 설명한다. 무엇보다도, 본 발명은 하기 실시예로 한정되는 것은 아니다.

[실시예 1] 적·청 혼색계 면역크로마토그래피 장치의 제작

1. 표지 항A형 인플루엔자 바이러스 항체(표지 항A형 항체)의 제작

항A형 인플루엔자 바이러스 단클론 항체를 완층액(pH6.0) 용액으로 투석 후, 적색 폴리스티렌 라텍스 입자와 혼합하여, 반응시켰다. 다음으로, EDAC(N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드염산염)을 최종 농도 0.1%로 되도록 첨가한 후, 2시간 반응시켰다. 세정 후, 5mM Tris, 0.04(W/V)% BSA(소혈청 알부민)에 부유하고, 초음파 분산 장치로 라텍스 입자를 분산시켰다.

2. 표지 항B형 인플루엔자 바이러스 항체(표지 항B형 항체)의 작성

항B형 인플루엔자 바이러스 NP 단클론 항체를 완층액(pH6.0) 용액으로 투석 후, 청색 폴리스티렌 라텍스 입자와 혼합하여, 반응시켰다. 다음으로, EDAC를 최종농도 0.1%로 되도록 첨가한 후, 2시간 반응시켰다. 세정 후, 5mM Tris, 0.04(W/V)% BSA(소혈청 알부민)에 부유하고, 초음파 분산 장치로 라텍스 입자를 분산시켰다.

3. 표지 항체 패드의 제작

1 및 2에서 제작한 표지 항A형 항체와 표지 항B형 항체를, 실온 하에서 150rpm으로 5분간 교반하여 등량(等量) 혼합했다. 혼합한 표지 항체를 양압(陽壓) 분무 장치를 사용하여 릴형으로 감은 폭 10mm의 셀룰로오스 부직포의 전체면에 분무했다. 분무 후, 50℃의 온풍을 10분간 분사하여 건조시켜, 표지 항체 패드를 제작했다.

4. 멤브레인 고상용 항A형 인플루엔자 바이러스 항체(고상용 항형 항체)의 조제

1과는 상이한 정제 항A형 인플루엔자 바이러스 NP 단클론 항체를, 고상액 (10mM Tris-HCl(pH7.5))에 투석하고, 투석 후에 0.22㎛ 여과를 행하고, 고상액으로 희석하여 고상용 항A형 항체를 조제했다.

5. 고상용 항B형 인플루엔자 바이러스 항체(고상용 항B형 항체)의 조제

2과는 상이한 정제 항B형 인플루엔자 바이러스 NP 단클론 항체를, 고상액(10mM Tris-HCl(pH7.5))에 투석하고, 투석 후에 0.22㎛ 여과를 행하고, 고상액으로 희석하여 고상용 항B형 항체를 조제했다.

6. 항체 고상화 멤브레인의 제작

멤브레인은, 폭 3cm × 길이 10cm의 니트로셀룰로오스 멤브레인 시트(백색)를 사용했다. 그 장축(長軸)측의 일단(이 단을 상류단, 반대측을 하류단으로 함)으로부터 8mm 떨어진 위치에 고상용 항A형 항체, 10mm 떨어진 위치에 고상용 항B형 항체, 12mm 떨어진 위치에 항마우스 IgG 항체를 양압 분무 장치를 사용하여 선형으로 도포하여 검출 영역으로 했다. 도포 후, 45℃의 온풍을 10분간 분사하여 건조했다.

7. 적·청 혼색계의 색소 함침 패드의 제작

황록색으로 되도록 조합한 색소액(0.001% 알리자린 시아닌 그린 F, 0.002% 타트라진)을 조제하고, 양압 분무 장치를 사용하여 릴형으로 감은 폭 20mm의 폴리에스테르 부직포 전체면에 분무했다. 분무 후, 50℃의 온풍을 10분간 분사하여 건조시켜, 색소 함침 패드를 제작했다.

8. 인플루엔자 바이러스 검출용 면역크로마토그래피 장치의 제작

인플루엔자 바이러스 검출용 면역크로마토그래피 장치는, 도 2에 나타낸 것과 동일한 구성의 것을 사용했다. 3에서 제작한 표지 항체 패드(2), 6에서 제작한 검출 영역(3)을 포함하는 항체 고상화 멤브레인(1), 7에서사 제작한 색소 함침 패드(4)와, 타 부재(배킹 시트(6), 흡수대(5))를 접합하여 장축방향을 따라, 5mm씩 절단하고, 도 2에 나타낸 면역크로마토그래피 장치를 제작했다.

[실시예2] 적단색계 면역 크로마토그래피 장치의 제작

1. 표지 항폐렴 마이코플라즈마 항체(표지 항Mp 항체)의 제작

항폐렴 마이코플라즈마 단클론 항체를 완층액(pH6.0) 용액으로 투석 후, 적색 폴리스티렌 라텍스 입자와 혼합하여, 반응시켰다. 다음으로, EDAC(N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드염산염)를 최종 농도 0.1%로 되도록 첨가한 후, 2시간 반응시켰다. 세정 후, 5mM Tris, 0.04(W/V)% BSA(소혈청 알부민)에 부유하고, 초음파 분산 장치로 라텍스 입자를 분산시켰다.

2. 표지 항체 패드의 제작

1에서 제작한 표지 항Mp 항체를 양압 분무 장치를 사용하여 릴형으로 감은 폭 10mm의 셀룰로오스 부직포 전체면에 분무했다. 분무 후, 50℃의 온풍을 10분간 분사하여 건조시켜, 표지 항체 패드를 제작했다.

3. 멤브레인 고상용 항폐렴 마이코플라즈마 항체(고상용 항Mp 항체)의 조제

1과는 상이한 정제 항폐렴 마이코플라즈마 단클론 항체를, 고상액(10mM Tris-HCl(pH7.5))에 투석하고, 투석 후에 0.22㎛ 여과를 행하고, 고상액으로 희석하여 고상용 항Mp 항체를 조제했다.

4. 항체 고상화 멤브레인의 제작

멤브레인은, 폭 3cm × 길이 10cm의 니트로셀룰로오스 멤브레인 시트(백색)를 사용했다. 그 장축측의 일단(이 단을 상류단, 반대측을 하류단으로 함)으로부터 9mm 떨어진 위치에 고상용 항Mp 항체, 12mm 떨어진 위치에 항마우스 IgG 항체를 양압 분무 장치를 사용하여 선형으로 도포하여 검출 영역으로 했다. 도포 후, 45℃의 온풍을 10분간 분사하여 건조했다.

5. 적단색계의 색소 함침 패드의 제작

청록색을 나타내는 색소액(0.001% 패스트 그린 FCF)을 조제하고, 양압 분무 장치를 사용하여 릴형으로 감은 폭 20mm의 폴리에스테르 부직포 전체면에 분무했다. 분무 후, 50℃의 온풍을 10분간 분사하여 건조시켜, 색소 함침 패드를 제작했다.

6. 폐렴 마이코플라즈마 검출용 면역크로마토그래피 장치의 제작

폐렴 마이코플라즈마 검출용 면역크로마토그래피 장치는, 검출 영역이 1개인 점을 제외하고 도 2에 나타낸 것과 동일한 구성의 것을 사용했다. 2에서 제작한 표지 항체 패드, 4에서 제작한 항체 고상화 멤브레인, 5에서 제작한 색소 함침 패드와, 타 부재(배킹 시트, 흡수대)를 접합하여 장축 방향을 따라, 5mm씩 절단하고, 도 2에 나타내는 면역크로마토그래피 장치를 제작했다.

[실시예3] 색소의 유무에 의한 백그라운드 노이즈 저감의 검증

1. 적·청 혼색계 면역크로마토그래피 장치(적·청 혼색 검출계)에서의 검증

실시예 1의 면역크로마토그래피 장치로 사전에 황록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드를 사용한 장치와, 아무것도 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 장치를 준비했다.

황록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드를 사용한 장치와, 아무것도 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 장치 각각에, 검체 추출액을 적하하고, 3분 후의 멤브레인의 백그라운드를 비교했다(도 3 참조).

도 3 및 표 1에 나타낸 바와 같이, 샘플 패드에 색소를 포함시킨 장치(도 3에서 하측)는 색소가 없는 장치와 비교하여 멤브레인이 백색으로 보이므로, 백그라운드 노이즈가 저감되어, 검출 영역의 색이 선명하게 되었다.

2. 적단색계 면역크로마토그래피 장치(적단색 검출계)에서의 검증

실시예 2의 면역크로마토그래피 장치로 사전에 청록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드를 사용한 장치와, 아무것도 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 장치를 준비했다.

청록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드를 사용한 장치와, 아무것도 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 장치 각각에, 검체 추출액(불활화한 엷은 폐렴 마이코플라즈마 항원을 포함함)을 적하하고, 3분 후의 멤브레인의 백그라운드를 비교했다(도 4 참조).

도 4 및 표 1에 나타낸 바와 같이, 샘플 패드에 색소를 포함시킨 장치(도 4에서 하측)는 색소가 없는 장치와 비교하여 멤브레인이 백색으로 보이므로, 백그라운드 노이즈가 저감되어, 검출 영역의 색이 선명하게 되었다.

[표 1]

[실시예 4] 공통의 검체 추출액을 사용한 경우의 백그라운드 노이즈 검증

실시예 1의 면역크로마토그래피 장치(적·청 혼색계 면역크로마토그래피 장치, 장치 No.1∼4)로 사전에 황록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드를 사용한 장치(장치 No.2)와, 아무것도 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 장치(장치 No.1, 3 및 4)를 준비했다. 실시예 2의 면역크로마토그래피 장치(적단색계 면역크로마토그래피 장치, 장치 No.5∼8)로 사전에 청록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드를 사용한 장치(장치 No.6)과, 아무것도 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 장치(장치 No.5, 7 및 8)를 준비했다.

황록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드를 사용한 장치(장치 No.2), 및 청록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드를 사용한 장치(장치 No.6)에는 무색의 검체 추출액을 적하했다. 아무것도 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 실시예 1의 장치(장치 No.1, 3 및 4)에는, 무색의 검체 추출액(장치 No.1(대조 1)), 황록색의 색소를 포함하는 검체 추출액(장치 No.3) 또는 청록색의 색소를 포함하는 검체 추출액(장치 No.4)을 적하했다. 아무것도 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 실시예 2의 장치(장치 No.5, 7 및 8)에는, 무색의 검체 추출액(장치No.5(대조 2)), 황록색의 색소를 포함하는 검체 추출액(장치 No.7) 또는 청록색의 색소를 포함하는 검체 추출액(장치 No.8)을 적하했다. 각각의 장치의 적하 3분 후의 멤브레인의 백그라운드 노이즈를 비교했다.

표 2에 나타낸 바와 같이, 검체 추출액에 청록색의 색소를 포함시킨 검체 추출액을 사용한 장치로는, 적단색계(적단색 검출계) 면역크로마토그래피 장치(장치 No.8)에 있어서 대조 2와 비교하여, 백그라운드 노이즈가 저감되었지만, 동일한 검체 추출액을 사용한 적·청 혼색계(적·청 혼색 검출계) 면역크로마토그래피 장치(장치 No.4)에서는 대조 1과 비교하여 백그라운드의 파란색이 증가하여, 노이즈는 보다 높아졌다. 도 5에 장치 No.4의 백그라운드의 양상을 나타낸다. 도 5에서 상측이 장치 No.1(대조 1)의 결과를 나타내고, 도 5에서 하측이 장치 No.4의 결과를 나타낸다. 도 5는 장치 No.4의 백그라운드의 파란색이 증가하고 있는 것을 나타내고 있다.

마찬가지로, 검체 추출액에 황록색의 색소를 포함시킨 검체 추출액을 사용한 장치로는, 적·청 혼색계(적·청 혼색 검출계) 면역크로마토그래피 장치(장치 No.3)에 있어서 대조 1과 비교하여 백그라운드 노이즈는 저감되었지만, 동일한 검체 추출액을 사용한 적단색계(적단색 검출계) 면역크로마토그래피 장치(장치 No.7)에서는 백그라운드 노이즈를 개선하는 효과는 얻을 수 없었다. 도 6에 장치 No.7의 백그라운드의 양상을 나타낸다. 도 6에서 상측이 장치 No.5(대조 2)의 결과를 나타내고, 도 6에서 하측이 장치 No.7의 결과를 나타낸다. 도 6은 장치 No.7의 백그라운드 짙은 정도가 장치 No.5(대조 2)의 백그라운드의 짙은 정도와 다르지 않은 것을 나타내고 있다.

즉, 어느 하나의 검출계에 맞추어서 조제한 색소 포함 검체 추출액에서는, 다른 검출계에서는 기대한 바와 같은 효과를 얻을 수 없을 뿐만 아니라, 본래의 성능보다 악화된 경우가 있고, 공통의 검체 추출액을 사용할 수 없는 것으로 나타났다.

본원 방법에서는 무색의 검체 추출액을 공통으로 사용하여, 어느 쪽의 검출계에 있어서도 기대했던 대로 백그라운드 노이즈 저감 효과를 얻을 수 있었다.

[표 2]

[실시예 5] 검체 채취량의 불균일이 백그라운드 노이즈에 미치는 영향의 검증

1. 종래법에서의 검체 채취량의 영향

실시예 2의 면역크로마토그래피 장치로 색소를 도포하고 있지 않은 샘플 패드를 사용한 장치를 준비하고, 최적인 색소량을 첨가한 검체 추출액(색소 설정량·상대량 1)을 대조로서 적하했다. 또한, 검체 채취량이 많은 경우를 상정(想定)하여, 무색의 유사 검체를 소정량 혼합한 상기한 색소 첨가 검체 추출액을 적하하여 시험했다. 각각의 장치로 3분후의 멤브레인의 백그라운드 노이즈를 비교했다.

2. 본 발명 방법에서의 검체 채취량의 영향

실시예 2의 면역크로마토그래피 장치로 사전에 청록색의 색소를 도포하여 건조시킨 샘플 패드(색소 설정량·상대량 1)를 준비하고, 무색의 검체 추출액을 적하하여 대조로 했다. 또한, 검체 채취량이 많을 경우를 상정하여, 무색의 유사 검체를 소정량 혼합한 검체 추출액을 적하하여 시험했다. 각각의 장치로 3분 후의 멤브레인의 백그라운드 노이즈를 비교했다.

표3에 나타낸 바와 같이로, 종래법에서는 채취 검체량이 많을수록 적하 시에 공급되는 색소량이 감소하고, 표지 항체에 의한 적색 백그라운드 노이즈를 개선하는 효과가 억제되는 것을 나타내고 있다. 한편 본 발명 방법에서는 검출계에 전개되는 색소량이 변하지 않고 항상 일정한 효과를 발휘하는 것을 나타내고 있다.

[표 3]

본명세서에서 인용한 모든 간행물, 특허 및 특허출원은 그대로 인용에 의해 본 명세서에 원용한다.

본 발명의 면역크로마토그래피 장치를 사용함으로써, 검체 중의 항원 및 항체를 정확하게 검출할 수 있다.

1: 멤브레인
2: 표지체 영역
3: 검출 영역
4: 샘플 패드
5: 흡수대
6: 배킹 시트

Claims (8)

1. 피검출 물질을 포착할 수 있는 포착 물질로서 항체 또는 항원이 고상화(固相化)된 검출 영역을 가지는 멤브레인(membrane)을 포함하고, 착색 입자인 표지 담체(擔體)로 표지된 항원 또는 항체를 사용하고, 장치 상의 포착 물질을 고상화한 검출 영역에 포착 물질-피검출 물질-표지된 항원 혹은 항체의 복합체를 형성시키고, 표지 담체의 색에 의해 피검출 물질을 검출하는 면역크로마토그래피(immunochromatography) 장치에 있어서,
   검체가 장치 위를 전개(展開)할 때, 상기 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색의 색소가 장치 위를 함께 전개하도록, 상기 색소를 장치의 구성 부재 중에 건조 상태로 포함시키는 것을 특징으로 하고,
   상기 색소가 염료 또는 안료인,
   면역크로마토그래피 장치.
2. 제1항에 있어서,
   상기 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재가 상기 검출 영역으로부터 상류측에 배치되는 부재인, 면역크로마토그래피 장치.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
   상기 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재가 샘플 패드인, 면역크로마토그래피 장치.
4. 피검출 물질을 포착할 수 있는 포착 물질로서 항체 또는 항원이 고상화된 검출 영역을 가지는 멤브레인을 포함하고, 착색 입자인 표지 담체로 표지된 항원 또는 항체를 사용하고, 장치 상의 포착 물질을 고상화한 검출 영역에 포착 물질-피검출 물질-표지된 항원 혹은 항체의 복합체를 형성시키고, 표지 담체의 색에 의해 피검출 물질을 검출하는 면역크로마토그래피 장치에 있어서의 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법으로서,
   상기 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색의 색소를 장치의 구성 부재 중에 건조 상태로 포함시켜 두고, 검체가 장치 위를 전개할 때, 상기 색소를 장치 위에 함께 전개시켜, 상기 멤브레인 상에 표지 담체와 색소가 함께 존재하도록, 상기 표지 담체에 의한 백그라운드 노이즈의 색의 채도를 저하시키는 것에 의해 백그라운드 노이즈를 저감시키는,
   백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.
5. 제4항에 있어서,
   상기 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재가 상기 검출 영역으로부터 상류측에 배치되는 부재인, 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.
6. 제4항 또는 제5항에 있어서,
   상기 표지 담체의 색과 보색의 관계에 있는 색소를 포함시키는 구성 부재가 샘플 패드인, 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.
7. 제4항 또는 제5항에 있어서,
   상기 색소가 염료 또는 안료인, 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.
8. 제4항 또는 제5항에 있어서,
   상기 색소가 유색 입자인, 백그라운드 노이즈를 저감시키는 방법.