KR102555994B1

KR102555994B1 - 천연원료를 함유한 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물 및 그의 제조방법

Info

Publication number: KR102555994B1
Application number: KR1020200139053A
Authority: KR
Inventors: 황기철
Original assignee: 황기철
Priority date: 2020-10-26
Filing date: 2020-10-26
Publication date: 2023-07-13
Also published as: KR20220055006A

Abstract

면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물이 개시되어 있다.
이 개시된 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물은 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액, 감발효액 및 인진쑥 숙성발효 여과물 중 적어도 어느 하나를 포함한다.

Description

천연원료를 함유한 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물 및 그의 제조방법{Pet food composition for pets capable of enhancing immunity containing natural ingredients, and the method for manufacturing the same}

본 발명은 천연원료를 함유한 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것으로서, 상세하게는 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액, 감발효액 및 인진쑥 숙성발효 여과물 중 적어도 어느 하나를 포함하는 천연원료를 함유한 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

전 세계적으로 반려동물 관련 시장이 급격히 성장하고 있다. 반려동물에 대한 애정과 관심을 보이는 소비자가 늘어남에 따라 반려동물을 의미하는 '펫(Pet)'과 경제를 의미하는 '이코노미(Economy)의 합성어인 '펫코노미 (Petconomy)' 등 다양한 신조어가 생성되고 있다. 국내 반려동물 보유 가구는 2017년 기준 28%를 넘어서며 전체 가구의 1/3 수준에 달한다. 저출산, 고령화, 1인 가구 확대로 아이 대신 반려동물을 키우며 시간과 비용을 투자하는 소비자가 늘어나고 있다. 특히 한국의 펫푸드 시장은 매우 빠르게 성장하고 있으며 특히 인터넷 거래를 중심으로 급성장하는 추세이다. 2015년 기준 펫푸드 판매량은 약 ＄255,900,000의 규모이며 2021년까지 연평균 6.1%의 성장세를 가지고 성장할 전망이다. 펫푸드는 가족의 구성원이 된 반려동물을 위하는 소비자의 니즈에 의해 세분화, 맞춤형 및 고급화 등 이루어지고 있고 전 원료를 사람이 먹을 수 있는 식재료로 만들며 제조공정에서부터 관리까지 모두 실제 식품수준으로 제조되는 제품이 개발되고 있다.

특허문헌 1을 참조하면, 도담쌀을 포함하는 간 건강 개선용 사료조성물, 이를 이용한 반려동물의 간 건강 개선 방법, 및 간 건강 개선용 사료조성물의 제조방법에 관한 것이 개시되어 있다. 또한, 특허문헌 2를 참조하면, 애완에게 일반 사료가 제조 공정 시 열에 파괴되고 부족한 영양 성분을 균형 있게 공급하고 기름이 첨가되어 있는 사료에 1차, 2차의 코팅과정을 통하여 사료가 공기에 노출되었을 때 사료의 산화를 방지하여 오랜 시간 보존이 가능한 애견용 사료 및 그 제조방법이 개시되어 있다.

한편, 2018년 농촌진흥청의 보도자료에 의하면 동물병원 진료 기록 기반 반려견 내원 이유 분석 결과에 따르면 예방 접종 외에 진단 결과를 보면 피부염·습진(6.4%)으로 찾는 경우가 가장 많았고, 외이염(6.3%), 설사(5.2%), 구토(5%) 등이 뒤를 이었다. 따라서, 항알러지 및 항염증 활성 등의 면역력 증강이 가능한 애완동물용 사료 조성물 및 그의 제조방법이 필요한 실정이다.

등록특허공보 제10-2010841호(2019.08.08.) 공개특허공보 제10-2013-0079026호(2013.07.10.)

본 발명은 상기한 점들을 감안하여 창안된 것으로서, 천연원료로 제조되어 안전성이 보장되고, 강아지 및 고양이 등과 같은 애완동물의 항알러지 및 항염증 활성 등의 면역력을 증강할 수 있는 애완동물용 사료 조성물 및 그의 제조방법을 제공하는 데 그 목적이 있다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액, 감발효액 및 인진쑥 숙성발효 여과물 중 적어도 어느 하나를 포함할 수 있다.

조성물 총 중량부에 대하여 식이유황, 프로폴리스 및 땅콩새싹 추출액 각각이 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 포함될 수 있다.

조성물 총 중량부에 대하여 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액 각각이 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 포함될 수 있다.

삭제

상기 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물은 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액을 포함하고,

하기 (a) 내지 (d)를 만족할 수 있다.

(a) 면역증진에 영향을 주는 사이토카인 중 TNF-α가 15 ng/mL 이상

(b) IL-6 증진활성 농도가 0.95 ng/mL 이상

(c) IL-12 증진활성 농도가 100 ng/mL 이상

(d) NO 생성량이 25 μM 이상

면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법에 있어서, 식이유황, 프로폴리스 및 땅콩새싹 중 적어도 어느 하나를 포함하는 원료를 준비하는 제1단계와; 상기 원료의 불량을 검사하는 제2단계와; 상기 원료를 세척하는 제3단계와; 상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 추출 장비를 이용하여 추출하는 땅콩새싹 추출액을 준비하는 제4단계와; 조성물 총 중량부에 대하여 식이유황, 프로폴리스 및 땅콩새싹 추출액 각각을 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 계량하는 제5단계와; 계량된 원료를 혼합하여 송액하는 제6단계와; 송액 후 불량 여부를 검사하는 제7단계; 및 송액된 혼합 원료를 성형하여 완제품을 제조하는 제8단계를 포함할 수 있다.

식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 및 감발효액 중 적어도 어느 하나를 포함하는 원료를 준비하는 제1단계와; 상기 원료의 불량을 검사하는 제2단계와; 상기 원료를 세척하는 제3단계와; 상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 추출 장비를 이용하여 추출하는 땅콩새싹 추출액을 준비하는 제4단계와; 조성물 총 중량부에 대하여 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액 각각을 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 계량하는 제5단계와; 계량된 원료를 혼합하여 송액하는 제6단계와; 송액 후 불량 여부를 검사하는 제7단계; 및 송액된 혼합 원료를 성형하여 완제품을 제조하는 제8단계를 포함할 수 있다.

상기 제1단계는 상기 감발효액 준비에 있어서, 감을 항아리에 넣고 1년간 발효시키고 자연적으로 알코올 발효가 일어나면 감 발효 부산물이 분리되어 내용물이 45%로 줄어들 때까지 기다리고, 1년간 더 발효를 시켜 나노크기로 분해되도록 자연발효할 수 있다.

상기 제4단계는 진공상태의 온도 100 ~ 120℃에서 1 ~ 5 시간 동안 상기 땅콩새싹을 추출하며, 상기 땅콩새싹의 추출 효율은 90% 이상일 수 있다.

본 발명에 따른 애완동물용 사료 조성물 및 그의 제조방법은 천연원료로 제조되어 독성 없이 안전하고, 소화기 질환의 예방할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 애완동물용 사료 조성물 및 그의 제조방법은 DPPH radical 및 ABTS radical을 저해하고 세포의 면역증진의 요소인 사이토카인을 증가시킴으로써 항산화 효과가 있다. 따라서, 애완동물의 피부염·습진, 외이염 발생 등 피부 질환 및 심장질환, 심부전, 유선종양, 부신피질기능항진증 등 진행성·퇴행성 질환에 있어서 항알러지 및 항염증 활성이 높아 면역력 증강에 효과가 있다.

도 1은 본 발명의 실시예에 따른 항산화 평가 중 ABTS 라디칼 소거활성 결과를 나타낸 그래프.
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 항산화 평가 중 DPPH 라디칼 소거활성 결과를 나타낸 그래프.
도 3은 본 발명의 실시예에 따른 RAW 264.7 세포주를 이용하여 시료 독성 평가 결과를 나타낸 그래프.
도 4는 본 발명의 실시예에 따른 면역증진 활성 평가 중 TNF-α 생성 증진 활성 결과를 나타낸 그래프.
도 5는 본 발명의 실시예에 따른 면역증진 활성 평가 중 IL-6 생성 증진 활성 결과를 나타낸 그래프.
도 6은 본 발명의 실시예에 따른 면역증진 활성 평가 중 IL-12 생성 증진 활성 결과를 나타낸 그래프.
도 7은 본 발명의 실시예에 따른 산화질소(nitric oxide, NO)의 생성량을 평가 결과를 나타낸 그래프.
도 8은 본 발명의 실시예에 따른 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법을 나타낸 흐름도.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예에 따른 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 구성을 상세히 설명하기로 한다.

본 발명에서 말하는 애완 동물은 개에만 한정하는 것이 아니며, 고양이, 토끼, 돼지 등의 사람과 교감하며 함께 지내는 반려동물을 의미할 수 있다.

본 발명에 따른 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물은 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액, 감발효액 및 인진쑥 숙성발효 여과물 중 적어도 어느 하나를 포함할 수 있다.

식이유황(MSM, methyl sulfonyl methane)은 녹용이 함유된 한약재 추출 가공 부산물과 함께 항균 활성이 강한 효능이 있다. 또한, 식이유황은 관절 기능 개선, 관절 퇴행과 관련된 증상 완화 등에 효과가 있다.

프로폴리스(propolis)는 한국 식약청 건강기능식품 공전에 항균 기능과 항산화 기능성 식품으로 등재된 물질로서, 대표적인 효과로는 항균, 항염증, 항산화 작용 등이 있으며, 그 외에도 항암, 항바이러스, 면역력 상승, 진통 및 마취 작용 등 여러 부분에서 뛰어난 효과를 가지는 것으로 입증된 바 있다. 또한, 프로폴리스는 염증을 일으키는 성분인 프로스타그란딘을 만들어내는 효소를 절반까지 줄임으로써 탁월한 함염증 효과를 가지기 때문에 방사선 장애, 궤양성 염증, 화상, 알러지, 아토피성 피부염, 피부종양, 사마귀, 교통상해 피부, 여드름, 습진 및 무좀 치료 등에 널리 이용되고 있다. 이 외에도, 프로폴리스는 대식 세포(macrophage)를 활성화하는 효과가 있어 체내의 면역 기능을 강화시키며, 프로폴리스의 주활성 성분인 플라보노이드(Flavonoid)는 활성 산소를 억제하는 항산화 작용 및 과산화물 생성억제작용이 뛰어나 노화 및 암 발생을 억제하는 데 효과적이다.

땅콩새싹은 유효성분인 레스베라트롤(resveratrol)을 적포도주에 비해 9배 이상 더 함유하고 있다. 레스베라트롤의 효과인 항암, 항산화, 심장병 예방, 혈액응고 방지, 수명연장 등의 효능이 있다. 특히, 치매, 당뇨, 비만, 아토피, 관절염을 효과적으로 예방 및 개선하는 효과가 있다. 특히, 땅콩새싹은 40 ~ 80 메쉬를 가지는 분말 또는 추출액을 포함할 수 있다. 땅콩새싹 메쉬는 특정 입자의 크기를 분류할 수 있는 망을 말하며, 입자의 크기가 작으면 작을 수록 더욱더 세밀한 메쉬망을 필요로 하게 될 수 있다. 즉, 만약 0.425 mm 입자 크기를 초과할 경우는 다른 원료와의 혼합이 어려울 수 있고, 만약 0.18 mm 입자 크기를 미만일 경우는 유효성분의 효과가 떨어질 수 있기 때문에 0.18 ~ 0.425 mm 입자(40 ~ 80 메쉬)일 때 원료 간의 혼합이 좋고 유효성분의 효과가 우수할 수 있다. 또한, 땅콩새싹 추출액은 추출장비를 이용하여 일정 압력, 시간 및 온도 조건에서 추출하여 제조될 수 있다.

감발효액은 아스코르브산(비타민 C)이 풍부해 면역력을 강화시키고 독소를 해독하는 작용을 하며 탄닌은 조직을 수렴하는 작용을 한다. 또한 감발효 추출물은 사료의 pH 농도를 낮춰 사료 내 함유된 병원성 미생물의 성장을 억제시켜 사료의 보존력을 높이고 가축의 소장 내에서 유해균인 대장균과 살모넬라균 등을 억제하며, 신맛을 통해 소화액의 분비를 자극시켜 사료섭취를 돋우며, 가축의 에너지 대사에 관여하여 피로를 빠르게 회복시켜준다. 또한 탄닌은 수렴작용을 통해 애완동물의 설사를 예방할 수 있다.

본 발명에서 바람직하게 사용되는 감발효액은 아무것도 넣지 않은 감을 항아리에 넣고 1년간 발효시키고 자연적으로 알코올 발효가 일어나면 감 발효 부산물이 분리되어 내용물이 45%로 줄어든다. 이 후 1년간 더 발효를 시켜 펩틴, 각종 유기산, 탄닌, 비타민 C, 비타민 E 등의 유효성분이 흡수되기 쉬운 나노크기로 분해된 감발효액이 만들어진다.

인진쑥 숙성발효액은 간 기능 개선에 도움이 되며 체내 독성노폐물을 몸 밖으로 내보내어 간을 깨끗이 하고, 간의 해독기능을 도와 지방 대사를 원활히 시켜 피로회복, 체력개선에 효과적이다.

따라서 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액, 감발효액 및 인진쑥 숙성발효 여과물 중 적어도 어느 하나를 포함하는 애완동물용 사료를 사용할 경우 일반 항균제 및 항산화제에 비해 체내 잔류성 및 내성 등의 독성 문제가 적을 수 있다. 또한, 애완동물에 질병을 야기하는 발병균의 종류에 따라 다르게 적용할 필요가 없이 거의 모든 종류의 박테리아, 바이러스, 곰팡이 등을 효과적으로 예방 및 치료할 수 있기 때문에 할 수 있다.

이하, 본 발명을 하기의 실시예 및 비교예에 의거하여 좀 더 상세하게 설명한다.

<실시예 1>

조성물 총 중량부에 대하여 감발효액 100 중량부를 계량하여 원료를 준비하였다. 송액하고 원료를 성형하여 완제품을 제조하여 시편을 준비하였다.

<실시예 2>

조성물 총 중량부에 대하여 감발효물 50 중량부 및 인진쑥 숙성발효여과물 50 중량부를 계량하였다. 상기 실시예 1과 같이 완제품을 제조하여 시편을 준비하였다.

<실시예 3>

식이유황, 프로폴리스 및 땅콩새싹 원료를 준비하였다. 상기 원료 각각의 불량을 검사하고 세척하였다. 상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 내부 조건이 4 시간 동안 평균 온도 107℃, 1기압 이하의 진공상태에서 추출 장비를 이용하여 추출하여 땅콩새싹 추출액을 준비하였다. 조성물 총 중량부에 대하여 식이유황, 프로폴리스 및 땅콩새싹 추출액 각각을 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 계량하였다. 상기 식이유황 및 상기 프로폴리스와 상기 땅콩새싹 추출액을 혼합하여 송액하였다. 상기 송액 후 원료에 대해 불량 여부를 검사하였다. 송액된 혼합 원료를 성형하여 완제품을 제조하여 시편을 준비하였다.

<실시예 4>

식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 및 감발효액 원료를 준비하였다. 상기 원료 각각의 불량을 검사하고 세척하였다. 상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 내부 조건이 4 시간 동안 평균 온도 115℃, 1기압 이하의 진공상태에서 추출 장비를 이용하여 추출하여 땅콩새싹 추출액을 준비하였다. 조성물 총 중량부에 대하여 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액 각각을 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 계량하였다. 상기 실시예 3과 같이 혼합 및 송액한 후 완제품을 제조하여 시편을 준비하였다.

<비교예 1>

조성물 총 중량부에 대하여 건조감추출물 100 중량부를 포함하여 원료를 준비하였다. 송액하고 원료를 성형하여 완제품을 제조하여 시편을 준비하였다.

<비교예 2>

식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 및 감발효액 원료를 준비하였다. 상기 원료 각각의 불량을 검사하고 세척하였다. 상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 내부 조건이 4 시간 동안 평균 온도 107℃, 0.4 기압 조건에서 추출 장비를 이용하여 추출하여 땅콩새싹 추출액을 준비하였다. 상기 실시예 4과 같은 중량비로 계량하여 혼합 및 송액한 후 완제품을 제조하여 시편을 준비하였다.

<비교예 3>

식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 및 감발효액 원료를 준비하였다. 상기 원료 각각의 불량을 검사하고 세척하였다. 상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 내부 조건이 4 시간 동안 평균 온도 80℃, 0.4 기압 조건에서 추출 장비를 이용하여 추출하여 땅콩새싹 추출액을 준비하였다. 상기 실시예 4과 같은 중량비로 계량하여 혼합 및 송액한 후 완제품을 제조하여 시편을 준비하였다.

도 1은 본 발명의 실시예에 따른 항산화 평가 중 ABTS 라디칼 소거활성 결과를 나타낸 그래프이고, 도 2는 본 발명의 실시예에 따른 항산화 평가 중 DPPH 라디칼 소거활성 결과를 나타낸 그래프이다.

도 1을 참조하면, 본 발명의 실시예에 따른 면역력을 증강할 수 있는 애완동물용 사료 조성물은 ABTS 라디칼 소거활성에서는 ascorbic acid (0.001107%) > 실시예 2 (2.5%) > 비교예 1 (4.2%) > 실시예 1 (4.6%) > 실시예 4 (18.0%) > 실시예 3(74.6%)순으로 확인되었다. 여기서 농도(%)는 추출의 ABTS 성분의 활성을 50 %로 저해하는 농도(C₅₀)를 의미할 수 있다.

도 2를 참조하면, 본 발명의 실시예에 따른 면역력을 증강할 수 있는 애완동물용 사료 조성물은 DPPH 라디칼 소거활성 결과도 ABTS와 마찬가지로 ascorbic acid (0.001245%) > 실시예 2 (2.8%) > 비교예 1 (6.9%) > 실시예 1 (7.4%) > 실시예 4(19.3%) > 실시예 3(69.0%)순으로 확인되었다. 여기서 농도(%)는 면역력이 증강할 수 있는 효능이 50%에 도달할 때의 농도(IC₅₀)를 의미할 수 있다.

도 3은 본 발명의 실시예에 따른 마우스 대식세포(RAW 264.7)의 세포주를 이용하여 시료 독성 평가 결과를 나타낸 그래프이다.

도 3을 참조하면, 음성대조군(negative control, NC) 대비 80% 이상의 세포생존율을 나타내는 시료에 대해서는 독성이 없는 것으로 판단하였다. 0.1~1%의 농도범위에서 시료독성을 평가한 결과, 음성대조군(negative control, NC)과 비교하여 비교예 1은 91.1~97.6%, 실시예 1은 93.8~99.3%, 실시예 2는 88.4~95.2%, 실시예 3은 93.2~104.7%, 실시예 4는 97.6~104.3%의 세포생존율을 나타내어 모든 시료에서 독성이 없는 것으로 평가되었다.

< 성분 함유에 따른 면역 효능 결과 >

구 분	성분 함유 유무						면역증진 활성 농도
구 분	식이 유황	프로 폴리스	땅콩 새싹 추출액	감 발효액	인진쑥 숙성발효액	건조감 추출액	TNF-α (ng/mL)	IL-6 (ng/mL)	IL-12 (ng/mL)	NO 생성량 (μM)
실시예1	-	-	-	○	-	-	22.2	0.9	64.5	31.5
실시예2	-	-	-	○	○	-	25.8	1.9	75.4	31.9
실시예3	○	○	○	-	-	-	18.2	1.2	119.0	34.0
실시예4	○	○	○	○	-	-	18.3	1.1	178.1	28.7
비교예1	-	-	-	-	-	○	0.4	0.1	2.8	3

도 4는 본 발명의 실시예에 따른 면역증진 활성 평가 중 TNF-α 생성 증진 활성 결과를 나타낸 그래프이고, 도 5는 본 발명의 실시예에 따른 면역증진 활성 평가 중 IL-6 생성 증진 활성 결과를 나타낸 그래프이며, 도 6은 본 발명의 실시예에 따른 면역증진 활성 평가 중 IL-12 생성 증진 활성 결과를 나타낸 그래프이다.

TNF는 대식세포 등에서 주로 생성되는 사이토카인이지만 염증반응에서 큰 역할을 담당하는 호중구를 비롯하여 림프구, NK세포, 섬유모세포, 비만세포, 각질세포 등에서도 생성된다. TNF의 기능으로서는 항종양활성, 항미생물활성, 분화 증식의 조절, 염증 등이 있다.

Interleukin-6 (IL-6)는 선천면역과 적응면역 모두에서 기능을 하는 사이토카인이다. IL-6는 다기능성 사이토카인으로 림프성 혹은 비림프성 세포 즉, 단구, B세포, T세포, 혈관내피세포, 섬유모세포, 피부각질세포 등에서 생성되고 있으며 면역반응, 급성기 염증반응 등에 관여한다.

도 4를 참조하면, 세포 독성이 없는 농도범위(0.1~1%)에서 시료처리에 의해 RAW 264.7 세포의 면역증진 사이토카인인 tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6) 및 interleukin-12 (IL-12) 생성 증진활성을 평가하였다. 먼저, TNF-α 생성 증진 활성 결과에서 PC 대조군은 27.6 ng/mL의 생성량으로 NC 대조군(0.3 ng/mL) 대비 102.1배 증가된 활성을 보여주었다. 0.1~1% 농도범위를 가지는 감추출물을 포함하는 비교예 1에서 0.3~0.4 pg/mL(0.9~1.3배)의 TNF-α 생성량을 보여 활성이 미약한 것으로 나타났지만, 실시예 1에서는 18.2~26.1 pg/mL(67.1~96.6배 증가)로 TNF-α 생성 증진활성이 유의하게 증가된 것을 확인할 수 있었다. 실시예 2의 경우 동일 농도범위에서 24.3~27.2 ng/mL의 생성량으로 NC 대조군 대비 89.9~100.7배의 유의적인 TNF-α 증진활성을 보였다. 실시예 3과 실시예 4의 경우 0.1~1% 농도범위에서 각각 11.1~25.3 ng/mL(41.0~93.6배 증가)와 12.3~24.2 ng/mL(45.3~89.4배 증가)의 유의적인 TNF-α 증진활성을 보였으며, 두 시료의 활성은 유사한 수준으로 확인되었다.

도 5를 참조하면, RAW-264.7 세포에서 IL-6 증진활성을 평가 결과, PC 대조군은 14.5 ng/mL로 NC 대조군(0.1 ng/mL)에 비해 207.6배 증가된 IL-6 생성 증진활성을 나타내었다. 비교예 1은 0.1~1% 농도범위에서 NC 대조군과 비교하여 유의적인 IL-6 생성 증진 활성을 보이지 않았다. 그러나, 실시예 1에서는 0.5~1% 농도범위에서 0.7~1.1 ng/mL(9.4~15.5배 증가)의 IL-6 생성량을 보였고, 이는 NC 대조군 대비 통계학적으로 유의한 활성으로 확인되었다. 실시예 2는 0.1~1%의 농도범위에서 0.4~3.3 ng/mL(5.1~47.4배)의 IL-6 증진활성이 나타났으며, 모든 농도범위에서 NC 대조군 대비 통계학적으로 유의한 차이로 확인되었다.

한편, 실시예 2의 경우 0.5%의 농도에서 0.1% 및 1%에 비해 우수한 활성을 보여주었다. 실시예 3와 실시예 4의 IL-6 증진활성은 유사한 수준으로 확인되었는데, 두 시편 모두 0.5~1% 농도범위에서 0.6~1.7 ng/mL(7.9~24.9배 증가) 및 0.7~1.5 ng/mL(9.6~21.2배 증가)의 유의적인 IL-6 증진활성을 나타내었다.

도 6을 참조하면, IL-12 활성 평가 결과, PC 대조군은 42.2 μg/mL로 NC 대조군(2.7 μg/mL) 대비 15.9배의 유의적인 증진활성이 확인되었다. 비교예 1은 0.1~1% 농도범위에서 NC 대조군과 비교하여 통계학적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 반면 실시예 1의 경우 0.5~1% 농도범위에서 11.8~117.2 μg/mL의 IL-12 생성량을 보였으며, 이는 NC 대조군 대비 유의한 차이(4.4~44.05배 증가)로 확인되었다. 실시예 2는 0.1~1%의 농도범위에서 48.8~102.0 μg/mL (18.3 ~ 38.3배)의 IL-12 생성 증진활성을 보였으며, 이는 NC 대조군 대비 유의한 차이로 확인되었다. 한편, 실시예 2를 0.1% 및 1% 처리한 경우보다 0.5% 처리했을 때 가장 우수한 IL-12 생성 증진활성을 보여주었다. 실시예 3의 경우 10.2~227.7 μg/mL로 NC 대조군 대비 3.8~85.5배의 유의한 IL-12 증진활성으로 나타났으며, 실시예 4는 11.8 ~ 344.4 μg/mL로 모든 시료들 중에서 가장 우수한 IL-12 증진활성(4.4~129.3배 증가)로 확인되었다.

도 7은 본 발명의 실시예에 따른 산화질소(nitric oxide, NO)의 생성량을 평가 결과를 나타낸 그래프이다.

도 7을 참조하면, 마우스 대식세포(RAW 264.7)로부터 산화질소(nitric oxide, NO)의 생성량을 평가한 결과, PC 대조군은 49.2 μM로 NC 대조군(2.4 μM) 대비 20.8배의 유의적인 증진활성으로 확인되었다. 감추출물은 0.1% 농도에서 NC 대조군 대비 통계학적으로 유의한 차이를 보이지 않았으나, 0.5~1% 농도범위에서는 2.9~3.1 μM로 NC 대조군 대비 1.2~1.3배의 유의한 NO 증진활성을 보였다. 감 발효물은 0.1~1% 농도범위에서 24.1~38.8 μM의 유의한 NO 증진활성(NC 대조군 대비 10.2~16.4배 증가)을 보였으며, 실시예 2도 동일 농도범위에서 28.0~35.7 μM로 NC 대조군 대비 1.9~13.0배의 유의한 증가로 확인되었다. 한편, 실시예 2의 경우 0.5%의 농도에서 0.1% 및 1%에 비해 우수한 활성을 보여주었다. 실시예 3의 경우 26.1~41.8 μM로 NC 대조군 대비 11.0~17.7배의 유의한 NO 증진활성으로 확인되었으며, 실시예 4도 마찬가지로 23.0~34.3 μM로 유의한 NO 증진활성(9.8~14.5배 증가)을 보여주었다.

따라서, 실시예 3 및 실시예 4 각각은 면역증진 활성 평가 중 IL-6 생성, IL-12 생성, 산화질소(nitric oxide, NO)의 생성량이 다른 시편과 대비하였을 때 가장 우수함을 알 수 있었다. 그러므로, 본 발명의 일 실시예에 따른 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물은 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액을 포함하고, 하기 (a) 내지 (d)를 만족할 수 있다.

(a) 면역증진에 영향을 주는 사이토카인 중 TNF-α가 15 ng/mL 이상, (b) IL-6 증진활성 농도가 0.95 ng/mL 이상, (c) IL-12 증진활성 농도가 100 ng/mL 이상 및 (d) NO 생성량이 25 μM 이상을 가지는 효과를 가져올 수 있다.

특히, IL-6 증진활성 농도가 0.95 ng/mL 미만이고, IL-12 증진활성 농도가 100 ng/mL 미만일 경우 애완 동물은 생애주기 동안 피부질환, 진행성·퇴행성 질환을 가질 수 있고 자가면역이 약해질 수 있으며 급성기 염증반응을 일으킬 수 있다. 따라서, 상기 (a) 내지 (d)를 만족하는 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물은 생애주기 중 발생될 수 있는 질병을 미리 예방하고 관리할 수 있다. 상세하게, 개의 경우 4살 이상일 때 잦은 질병인 피부염·습진, 외이염 발생 등 피부 질환, 및 7살 이상일 때 잦은 질병인 심장질환, 심부전, 유선종양, 부신피질기능항진증 등 진행성·퇴행성 질환에 있어서 항알러지 및 항염증 활성이 높아 면역력 증강에 효과가 있다.

도 8은 본 발명의 실시예에 따른 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법을 나타낸 흐름도이다.

도 8을 참조하면, 본 발명의 일 실시예에 따른 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법은 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹, 감발효액 및 인진쑥 숙성발효 여과물 중 적어도 어느 하나를 포함하는 원료를 준비하는 제1단계(S10)를 포함할 수 있다. 상기 원료의 불량을 검사하는 제2단계(S20)를 포함할 수 있다. 상기 원료를 세척하는 제3단계(S30)를 포함할 수 있다. 이때 감발효액은 2년 이상 자연발효시킨 것을 포함하면 유효성분이 발효에 의해서 나노화가 이루어지기 때문에 보다 효율적으로 흡수가 될 수 있어 2년 이상 자연발효한 감발효액을 사용하고 있습니다.

상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 추출 장비를 이용하여 추출하여 땅콩새싹 추출액을 준비하는 제4단계(S40)를 포함할 수 있다. 상기 제4단계는 진공상태의 온도 100 ~ 120℃에서 1 ~ 5 시간 동안 상기 땅콩새싹을 추출하며, 추출 효율은 1kg 땅콩새싹을 추출하면 추출물이 90g 이상이 나옴에 따라 90% 이상일 수 있다. 땅콩새싹의 유효 성분인 Resveratrol가 90% 이상 나오는 것을 하기 [표 2]의 시험 결과로 알 수 있었다. 여기서 진공상태(무압력)는 예를 들어 720 mmHg 이하를 의미할 수 있다.

그 다음 상기 원료는 조성물 총 중량부에 대하여 식이유황, 프로폴리스 및 땅콩새싹 추출액 각각을 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 계량하는 제5단계(S50)를 포함할 수 있다. 상기 원료를 송액하는 제6단계(S60)를 포함할 수 있다. 상기 원료가 송액된 후 불량인지를 검사하는 제7단계(S70)를 포함할 수 있다. 상기 원료를 성형하여 완제품을 제조하는 제8단계(S80)를 포함할 수 있다.

본 발명의 다른 실시예에 따른 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법은 혼합 원료를 계량하는 제3단계(S35)를 제외하고 상기 일 실시예에 따른 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법이 동일 부호 및 동일한 기능을 할 수 있다. 따라서, 중복설명된 부분은 생략하기로 한다.

제3단계(S35)은 조성물 총 중량부에 대하여 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액 각각을 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 계량하는 단계를 포함할 수 있다.

상기 추출 장비는 원액, 농축액, 젤타입 및 고체형식으로 제형을 변화시킬 수 있다. 또한, 압력, 순환식무압력, 저온추출, 농축, 증류추출 가능할 수 있다. 또한, 추출 장비는 99시간 예약가능 및 자체과열을 방지할 수 있는 다기능 컨트롤러를 구비하고 있다. 추출 장비는 순환식 무압력원리를 이용하여 재래식 탕기의 장점을 그대로 살렸으며 약재의 확산작용을 유도하고 용출과 대류현상을 통하여 약재의 원액을 그대로 추출할 수 있다. 또한, 추출 장비는 진공저온추출방식인 진공속에서 끓는점이 낮아 저온 40~90℃에서도 물이 끓게 되어 탕전 시간이 단축되며 열 영향을 받기 쉬운 물질을 약효 손상없이 추출 가능하기 때문에 향성분을 유지하고 고온에 약한 성분이 보존될 수 있다. 또한, 추출 장비는 시간당 2500cc 증류를 진공증류 또는 감압증류 방식으로 추출할 수 있다. 추출 장비를 이용하여 상기 기재된 성분 외에 증류수 및 화장품원료 예를 들면, 액체화장품의 기본인 증류수와 화장품에 첨가되는 모든 추출물을 추출할 수 있다. 또한, 아로마 및 엑기스 예를 들면, 허브, 선인장 버섯, 곤충 등을 가공하여 엑기스를 만들 수 있다.

여기서 추출 장비는 한약성분 추출 효율이 90% 이상을 가짐에 따라 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 및 감발효액 중 적어도 어느 하나를 혼합하여 추출할 때 원료 자체가 가진 유효물질에 영향을 미쳐 면역효능이 최대화될 수 있는 효과가 있다.

하기의 [표 1]은 GC/MSD 시험기기를 사용하고 시험 조건에 따라 원료 유효물질 성분 추출 효율을 분석하였다. 상기 추출 장비를 이용하여 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 및 감발효액을 추출한 혼합 원료인 실시예 3, 실시예 4, 비교예 3 및 비교예 4 각각을 가스크로마토그래피 질량분석기로 분석하여 땅콩새싹의 유효물질인 Resveratrol 추출 효율을 실험하였다.

< 압력과 온도 조건에 따른 땅콩새싹 원료의 유효물질 추출효율 분석 결과 >

구 분	추출 조건			추출효율(%)
구 분	압력(기압)	온도 (℃)	시간 (hr)	Resveratrol
실시예 3	-	107	4	95
실시예 4	-	115	4	91
비교예 2	0.4	107	4	85
비교예 3	0.4	80	4	70

상기 [표 2]에 있어서 압력과 온도 조건에 따른 땅콩새싹 원료의 유효물질 추출효율 분석 결과를 통하여 추출 효율을 알 수 있었다.

비교예 2 및 비교예 3 각각은 일정 압력과 온도를 가지는 추출 방식으로 실시예 3 및 실시예 4 보다 추출 효율이 크게 떨어짐을 알 수 있었다. 반면, 실시예 3은 진공상태(무압력) 조건에 온도가 107℃를 가질 때 다른 시편들과 비교할 때 추출 효율이 우수했음을 알 수 있었다.

상기한 실시예들은 예시적인 것에 불과한 것으로, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 사람이라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 타 실시예가 가능하다. 따라서 본 발명의 진정한 기술적 보호범위는 청구범위에 기재된 발명의 기술적 사상에 의해 정해져야만 할 것이다.

Claims

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면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물에 있어서,
상기 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물은 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액을 포함하고,
상기 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액은 조성물 총 중량부에 대하여 각각이 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 포함되며,
하기 (a) 내지 (d)를 만족하는 것을 특징으로 하는 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물.
(a) 면역증진에 영향을 주는 사이토카인 중 TNF-α가 15 ng/mL 이상
(b) IL-6 증진활성 농도가 0.95 ng/mL 이상
(c) IL-12 증진활성 농도가 100 ng/mL 이상
(d) NO 생성량이 25 μM 이상
면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조방법에 있어서,
식이유황, 프로폴리스 및 땅콩새싹을 포함하는 원료를 준비하는 제1단계와;
상기 원료의 불량을 검사하는 제2단계와;
상기 원료를 세척하는 제3단계와;
상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 추출 장비를 이용하여 추출하는 땅콩새싹 추출액을 준비하는 제4단계와;
조성물 총 중량부에 대하여 상기 식이유황, 프로폴리스 및 땅콩새싹 추출액 각각을 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 계량하는 제5단계와;
계량된 원료를 혼합하여 송액하는 제6단계와;
송액 후 불량 여부를 검사하는 제7단계; 및
송액된 혼합 원료를 성형하여 완제품을 제조하는 제8단계를 포함하는 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법.
면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조방법에 있어서,
식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 및 감발효액을 포함하는 원료를 준비하는 제1단계와;
상기 원료의 불량을 검사하는 제2단계와;
상기 원료를 세척하는 제3단계와;
상기 땅콩새싹에 정제수를 투입하여 추출 장비를 이용하여 추출하는 땅콩새싹 추출액을 준비하는 제4단계와;
조성물 총 중량부에 대하여 상기 식이유황, 프로폴리스, 땅콩새싹 추출액 및 감발효액 각각을 1 ~ 3 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2 : 0.5 ~ 2의 중량비로 계량하는 제5단계와;
계량된 원료를 혼합하여 송액하는 제6단계와;
송액 후 불량 여부를 검사하는 제7단계; 및
송액된 혼합 원료를 성형하여 완제품을 제조하는 제8단계를 포함하는 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법.
제7항에 있어서,
상기 제1단계는,
상기 감발효액 준비에 있어서, 감을 항아리에 넣고 1년간 발효시키고 자연적으로 알코올 발효가 일어나면 감 발효 부산물이 분리되어 내용물이 45%로 줄어들 때까지 기다리고, 1년간 더 발효를 시켜 나노크기로 분해되도록 자연발효하는 것을 특징으로 하는 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법.
제6항 또는 제7항에 있어서,
상기 제4단계는,
진공상태의 온도 100 ~ 120℃에서 1 ~ 5 시간 동안 상기 땅콩새싹을 추출하며,
상기 땅콩새싹의 추출 효율은 90% 이상인 것을 특징으로 하는 면역력 증강용 애완동물용 사료 조성물의 제조 방법.