KR102536160B1 - 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 항노화 조성물 - Google Patents
황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 항노화 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102536160B1 KR102536160B1 KR1020220137370A KR20220137370A KR102536160B1 KR 102536160 B1 KR102536160 B1 KR 102536160B1 KR 1020220137370 A KR1020220137370 A KR 1020220137370A KR 20220137370 A KR20220137370 A KR 20220137370A KR 102536160 B1 KR102536160 B1 KR 102536160B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- enzyme
- extract
- reactant
- primrose
- preparation example
- Prior art date
Links
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 43
- 238000006912 hydrolase reaction Methods 0.000 title claims description 6
- 229940074543 primula veris extract Drugs 0.000 title abstract 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 78
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 title description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 title 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 claims abstract description 20
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 12
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 62
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 55
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 55
- 241000245063 Primula Species 0.000 claims description 42
- 235000016311 Primula vulgaris Nutrition 0.000 claims description 42
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims description 40
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 28
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 25
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 claims description 22
- IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N kaempferol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 18
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 16
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 claims description 14
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 12
- UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N Demethoxycapillarisin Natural products C1=CC(O)=CC=C1OC1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 235000008777 kaempferol Nutrition 0.000 claims description 11
- UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N morin Natural products OC1=CC(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 6
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 claims description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 4
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 claims description 3
- 108010075550 termamyl Proteins 0.000 claims description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 18
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 abstract description 12
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 abstract description 9
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 abstract 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 47
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 13
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 11
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 10
- 230000036541 health Effects 0.000 description 10
- -1 pack Substances 0.000 description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 8
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 8
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 6
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 6
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 5
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 4
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 3
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 3
- WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N (-)-Epigallocatechin-3-o-gallate Chemical compound O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 244000072254 Primula veris Species 0.000 description 2
- 241000208476 Primulaceae Species 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 2
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000001153 anti-wrinkle effect Effects 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 2
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 2
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010805 cDNA synthesis kit Methods 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 2
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 2
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 2
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 2
- 238000003762 quantitative reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 2
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- WNWHHMBRJJOGFJ-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecan-1-ol Chemical class CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCO WNWHHMBRJJOGFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 101710130006 Beta-glucanase Proteins 0.000 description 1
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008749 Caltha palustris Nutrition 0.000 description 1
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 102100033601 Collagen alpha-1(I) chain Human genes 0.000 description 1
- 241000608360 Dactylorhiza Species 0.000 description 1
- 101710121765 Endo-1,4-beta-xylanase Proteins 0.000 description 1
- 229940123457 Free radical scavenger Drugs 0.000 description 1
- WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N GCG Natural products C=1C(O)=C(O)C(O)=CC=1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2CC1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 244000062730 Melissa officinalis Species 0.000 description 1
- 235000010654 Melissa officinalis Nutrition 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 235000000497 Primula Nutrition 0.000 description 1
- 235000002343 Primula veris Nutrition 0.000 description 1
- 235000015924 Primula veris subsp veris Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N Sulfobutanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC(C(O)=O)S(O)(=O)=O ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010029483 alpha 1 Chain Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 230000006851 antioxidant defense Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 239000001273 butane Substances 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 1
- 229940112822 chewing gum Drugs 0.000 description 1
- 150000005827 chlorofluoro hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 229940096422 collagen type i Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000008406 cosmetic ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000686 essence Substances 0.000 description 1
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000002414 glycolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229940059442 hemicellulase Drugs 0.000 description 1
- 108010002430 hemicellulase Proteins 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- MTNDZQHUAFNZQY-UHFFFAOYSA-N imidazoline Chemical class C1CN=CN1 MTNDZQHUAFNZQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N isethionic acid Chemical compound OCCS(O)(=O)=O SUMDYPCJJOFFON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N monoethyl carbonate Chemical compound CCOC(O)=O CQDGTJPVBWZJAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N n-butane Chemical compound CCCC IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N n-pentane Natural products CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 1
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 1
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 1
- 229940071089 sarcosinate Drugs 0.000 description 1
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- 239000003352 sequestering agent Substances 0.000 description 1
- 230000021148 sequestering of metal ion Effects 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000516 sunscreening agent Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000013077 target material Substances 0.000 description 1
- 229940104261 taurate Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000037373 wrinkle formation Effects 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/06—Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
- A61K8/498—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom having 6-membered rings or their condensed derivatives, e.g. coumarin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/21—Plant extracts
- A23V2250/2132—Other phenolic compounds, polyphenols
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2300/00—Processes
- A23V2300/28—Hydrolysis, degree of hydrolysis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/52—Stabilizers
- A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/805—Corresponding aspects not provided for by any of codes A61K2800/81 - A61K2800/95
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Birds (AREA)
- Botany (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물에 관한 것으로, 일 양상에 따른 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물에 의하면, 폴리페놀을 포함한 유효성분의 함량이 증가되는 효과가 있고, 항산화, 주름 개선 또는 피부 손상 억제 효능이 증대되는 효과가 있다.
Description
본 발명은 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물에 관한 것이다.
최근 여성들의 활발한 사회참여와 화장품 산업의 발달로 인하여 여성뿐만 아니라 남성도 젊고 아름다운 피부에 관심을 갖게 되었으며, 아름다운 피부의 상징은 맑고 깨끗한 피부로 인식되고 있다. 그러나, 많은 양의 자외선에 노출되면 항산화제가 감소되고, 피부에 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)이 생성되며, 활성산소종인 하이드록실 라디칼(hydroxyl radical), 초과산화물 라디칼(superoxide radical) 및 지질 퍼옥사이드 라디칼(lipid peroxide radical) 등은 반응성이 매우 높아 피부의 주요구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산과 반응하여 세포에 손상을 주고 피부 노화를 발생시키는 원인이 된다. 또한, 피부에 효소적, 비효소적 항산화 방어체계의 균형을 무너뜨려 산화스트레스(oxidative stress) 상태를 초래하여 피부는 거칠고 윤기가 없어지며, 이러한 과정의 반복은 주름 유발을 발생시킨다. 따라서, 피부노화 방지를 위해서는 과잉의 활성 산소종 생성을 억제하고 또한 생성된 활성산소를 효율적으로 제거할 수 있어야 한다.
천연 항산화제(antioxidant)의 항산화 효과는 합성 항산화제와는 다르게 부작용이 거의 없어, 노화방지의 솔루션으로 부각되었으며, 각종 천연물로부터 얻은 추출물을 이용한 제품이 출시되면서, 기업들의 경쟁이 치열해지고 있다. 천연 항산화제는 식물에 많이 함유되어 있는 것으로 알려져 있고, 식물종에 따라 다양한 유효성분을 포함하고 있어, 유효성분의 종류와 함량에 따라 다양한 효능을 나타내는 것으로 알려져 있다. 이에 각종 식물종으로부터 유효성분이 다량 함유되어 있는 추출물을 얻기 위해 식품, 의약품, 화장품 등의 다양한 분야에서 유효성분을 얻기 위한 다양한 연구를 진행하고 있다.
이에, 본 발명자들은 황산앵초 추출물에 당 가수분해 효소를 첨가하여 반응시킴으로써, 유효성분의 함량이 증가하고 항산화, 주름 개선 및 피부 손상 억제 효능이 증가되는 것을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
일 양상은 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물을 제공하는 것이다.
다른 양상은 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
다른 양상은 황산앵초 건조물을 저온 추출 공정으로 추출하는 단계; 및
황산앵초 추출물에 당 가수분해 효소를 첨가하여 반응시키는 단계
를 포함하는 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물의 제조방법을 제공하는 것이다.
일 양상은 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물을 제공한다.
일 실시양태에 있어서, 상기 황산앵초는 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
황산앵초(Primula veris)는 쌍떡잎식물 앵초과의 여러해살이풀로 일반명은 Cowslip, Keyflower, Palsywort 및 Paigel 등으로 불리고 있고, 주요 구성성분은 사포닌, 플라보노이드 등이며 주로 꽃을 약용 또는 식용하고 때때로 뿌리를 사용하기도 한다.
일 구체예에 있어서, 상기 당 가수분해 효소는 비스코자임(Viscozyme), 셀루클라스트(Celluclast), 아밀로글루코시다제(Amyloglucosidase; AMG), 텀마밀(Termamyl) 및 울트라플로(Ultraflo) 중에서 선택된 단독 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 당 가수분해 효소는 비스코자임(Viscozyme)일 수 있다. 비스코자임은 Novozyme사의 복합효소제로서 아라바나아제(arabanase), 셀룰라아제(cellulase), β-글루카나아제(β-glucanase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase) 및 자일라나아제(xylanase)를 함유하는 효소를 의미한다.
일 구체예에 있어서, 상기 당 가수분해 효소는 효소 반응 시 반응액 총 중량을 기준으로 0.01 내지 5.0 중량%, 0.05 내지 4.0 중량% 또는 0.1 내지 2.0 중량%로 첨가될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
일 구체예에 있어서, 상기 효소 반응은 1 내지 100℃, 5 내지 75℃ 또는 10 내지 50℃에서 수행될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 효소 반응은 1시간 내지 96시간 동안 수행될 수 있고, 바람직하게는 3시간 내지 72시간 동안 수행될 수 있으며, 보다 바람직하게는 6시간 내지 48시간 동안 수행될 수 있고, 보다 더 바람직하게는 24시간 동안 수행될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
일 구체예에 있어서, 상기 효소 반응물은 황산앵초를 추출한 추출물에 효소를 반응시켜 수득되는 것일 수 있다.
본 발명에 있어서, 용어 "추출물"은 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물에 더하여, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다. 이에 따라, 본 발명에서 추출물은 이를 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함하는 것으로 해석될 수 있다.
본 발명에 있어서, 추출물의 추출 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 유기용매 추출법, 고주파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 추출물은 저온 추출 공정으로 수득된 것일 수 있다.
상기 저온 추출 공정은 1 내지 15℃, 3 내지 10℃ 또는 4℃에서 수행될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 저온 추출 공정은 12시간 내지 7일 동안 수행될 수 있고, 바람직하게는 1일 내지 5일 동안 수행될 수 있으며, 보다 바람직하게는 3일 동안 수행될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 있어서, 상기 추출에 사용되는 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있고, 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있으며, 구체적으로 물이 사용될 수 있다. 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 구체적으로 탄소수 1 내지 4의 알코올을 사용할 수 있다. 일 구체예에 있어서, 상기 복합추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올, 또는 이들의 혼합 용매로 추출된 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 효소 반응물은 효소 반응물 내에 폴리페놀을 90 내지 200, 100 내지 150 또는 110 내지 130 μg GAE/mg의 농도로 포함할 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 효소 반응물은 효소 반응물 내에 퀘르세틴(Quercetin)을 80 내지 2000, 100 내지 1500 또는 150 내지 1200 ppm의 농도로 포함할 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 효소 반응물은 효소 반응물 내에 캄페롤(Kaempferol)을 300 내지 5000, 500 내지 4500 또는 700 내지 4000 ppm의 농도로 포함할 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 효소 반응물은 효소 반응물 내에 폴리페놀을 100 내지 150 μg GAE/mg, 퀘르세틴(Quercetin)을 800 내지 1200 ppm 및 캄페롤(Kaempferol)을 2500 내지 4000 ppm의 농도로 포함할 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 효소 반응물은 항산화, 주름 개선 또는 피부 손상 억제용인 것일 수 있다.
일 양상은 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
일 구체예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 상기 효소 반응물을 조성물 전체 중량에 대하여 0.001 중량% 내지 10 중량%로 포함하는 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어, 유연화장수, 영양화장수, 유액, 로션, 크림, 페이스트, 젤, 용액, 현탁액, 오일, 왁스, 팩, 파우더, 파운데이션, 스프레이, 계면활성제-함유 클렌징 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 더욱 상세하게는, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 영양 크림, 마사지 크림, 밀크로션, 파우더, 에센스, 아이 크림, 선로션, 선크림, 메이크업 프라이머, 메이크업 베이스, 비비크림, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징 워터, 비누, 팩, 스틱상 제품, 밤(Balm) 타입 제품, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 화장품에 통상 사용되는 추가 성분, 예컨대, 점증제, 분산제, 향료, 충전제, 보존제, 방부제, 중성화제, 감미료, 비타민, 자유-라디칼 스케빈저, 금속 이온 봉쇄제, 기능성 성분 및 이들의 혼합물로부터 선택될 수 있는 임의의 통상적 미용 성분을 더 포함할 수 있다. 당업자는 본 명세서에 따른 조성물의 유리한 특성이 예상된 첨가에 의해 악영향을 받지 않거나 실질적으로 받지 않도록, 임의의 추가 성분 및/또는 이의 양을 선택할 수 있다.
상기 화장료 조성물이 계면활성제-함유 클렌징 제형인 경우 담체 성분으로 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등을 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물이 크림 또는 젤 제형인 경우에는 담체 성분으로 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등을 더 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물이 용액 또는 유탁액 제형인 경우에는 용매, 용매화제 또는 유탁화제로, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 프로필렌글리콜, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등을 더 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물이 현탁액 제형인 경우에는 담체 성분으로 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등을 더 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물이 파우더 또는 스프레이 제형인 경우에는 담체 성분으로 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더를 더 포함할 수 있고, 특히 스프레이 제형인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 더 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 단독 또는 중복으로 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.
일 구체예에 있어서 상기 화장료 조성물은 피부 상태 개선용인 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서 상기 피부 상태 개선은 항산화, 주름 개선 또는 피부 손상 억제인 것일 수 있다.
일 양상은 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.
상기 식품 조성물은 건강기능식품의 형태로 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한 본 발명의 식품 조성물은 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 통상의 기술자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 상기 건강기능식품이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 의미한다. 여기서 기능성이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 항산화, 주름 개선, 또는 피부 손상 억제를 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
본 발명의 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있고, 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용 가능하다. 아울러 본 발명의 건강기능식품은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 효소 반응물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 동물을위한 사료로 이용되는 식품도 포함한다.
일 양상은 황산앵초 건조물을 저온 추출 공정으로 추출하는 단계; 및
황산앵초 추출물에 당 가수분해 효소를 첨가하여 반응시키는 단계
를 포함하는 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물의 제조방법을 제공한다.
일 구체예에 있어서, 상기 당 가수분해 효소를 첨가하여 반응시키는 단계는 1 내지 100℃, 5 내지 75℃ 또는 10 내지 50℃에서 수행되는 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 당 가수분해 효소를 첨가하여 반응시키는 단계는 1 내지 96시간, 3 내지 72시간 또는 6 내지 48시간 동안 수행되는 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 저온 추출 공정은 1 내지 15℃, 3 내지 10℃ 또는 4℃에서 수행되는 것일 수 있다.
일 구체예에 있어서, 상기 저온 추출 공정은 12시간 내지 7일간, 1 내지 5일간 또는 3일간 수행되는 것일 수 있다.
일 양상에 따른 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물에 의하면, 폴리페놀을 포함한 유효성분의 함량이 증가되는 효과가 있고, 항산화, 주름 개선 또는 피부 손상 억제 효능이 증대되는 효과가 있다.
도 1은 일 양상에 따른 황산앵초 추출물 및 황산앵초 효소 반응물의 세포독성을 확인한 결과이다.
도 2는 일 양상에 따른 황산앵초 추출물 및 황산앵초 효소 반응물의 항산화 효능을 측정한 결과이다.
도 3은 일 양상에 따른 황산앵초 추출물 및 황산앵초 효소 반응물의 엘라스틴 생성 효과를 확인한 결과이다.
도 4는 일 양상에 따른 황산앵초 추출물 및 황산앵초 효소 반응물의 콜라겐 생성 효과를 확인한 결과이다.
도 2는 일 양상에 따른 황산앵초 추출물 및 황산앵초 효소 반응물의 항산화 효능을 측정한 결과이다.
도 3은 일 양상에 따른 황산앵초 추출물 및 황산앵초 효소 반응물의 엘라스틴 생성 효과를 확인한 결과이다.
도 4는 일 양상에 따른 황산앵초 추출물 및 황산앵초 효소 반응물의 콜라겐 생성 효과를 확인한 결과이다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 명세서 및 청구범위에 사용된 용어 또는 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정 해석되지 아니하며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
본 발명의 명세서 전체에 있어서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명의 명세서 전체에 있어서, "A 및/또는 B"는, A 또는 B, 또는 A 및 B를 의미한다.
일반 추출물은 효소 반응을 시키지 않은 추출물을 의미하고, 효소 반응물은 추출물에 효소를 첨가하여 효소 반응을 시킨 추출물을 의미한다.
실시예 1. 추출 공정
1.1. 저온추출
황산앵초 건조물 2g에 증류수 98g을 부가하고, 4℃에서 3일간 침지하여 추출하였다. 그 후, 380 mesh로 여과하여 추출물을 수득하였다.
1.2. 열수추출
황산앵초 건조물 2g에 증류수 98g을 부가하고, 60℃에서 3시간 침지하여 추출하였다. 그 후, 380 mesh로 여과하여 추출물을 수득하였다.
1.3. 에탄올추출
황산앵초 건조물 20g에 70% 에탄올 1200g을 부가하고, 3일씩 두번 추출하였다. 0.45μm로 여과하고 감압농축, 동결 건조하여 파우더(5.3g)를 수득하였다. 수득된 파우더 1g에 증류수를 99g 부가하고 용해시켜 추출물을 수득하였다.
실시예 2. 효소 반응 공정
실시예 1에서 수득한 추출물에 효소 Viscozyme L을 농도별로 첨가하고 150 rpm, 35℃에서 24시간 동안 반응시켰다. 반응 종료 후 90℃에서 10분간 가열하였다. 가열 후, 반응물을 원심분리(4000rpm, 10 min)하고 상층액을 0.45μm로 여과하였다. 여과 후, 농축하고, -80도에서 예비동결을 한 후, 동결건조를 3일동안 수행하여 최종 효소 반응물을 수득하였다.
제조예
상기 실시예 1 및 실시예 2를 통해 하기 표와 같이 제조예를 제조하였다.
| 효소처리 농도 (반응액 총 중량 대비 중량%) | ||||
| 0%(미처리) | 0.10% | 0.50% | 1% | |
| 저온추출 | 제조예 1 | 제조예 2 | 제조예 3 | 제조예 4 |
| 열수추출 | 제조예 5 | 제조예 6 | 제조예 7 | 제조예 8 |
| 에탄올추출 | 제조예 9 | 제조예 10 | 제조예 11 | 제조예 12 |
실험예 1. 폴리페놀 함량의 측정
효소처리에 의해 폴리페놀 함량에 차이가 있는 지 알아보기 위하여, 제조예 1 및 4에 존재하는 총 폴리페놀 함량(Total polyphenol content)을 측정하였다.
총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis법에 따라 측정하였으며, 제조예 1 및 4를 1000ppm으로 희석하고, Etube에 20μl씩 분주하고, 2N Folin-ciocalteau reagent(F9252, Sigma-Aldrich) 40μl를 첨가하고, 증류수를 400μl 첨가하고 상온에서 3분간 반응시켰다. 그 후 20% Na2CO3 400μl를 첨가하고 실온에서 1시간 반응시킨 후 spectrophotometer(Ultraspec 2100pro, Amersham Co., Sweden)를 이용하여 765 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 총 폴리페놀의 함량은 Gallic acid를 정량하여 작성한 표준곡선으로부터 계산하였고, gallic acid equivalent(μg GAE/mg)로 나타내었다.
그 결과를 표 2에 나타내었다. 표 2에 나타낸 바와 같이, 효소를 처리한 경우에 있어서 약 1.5배 더 높은 폴리페놀 함량을 가지는 것을 알 수 있었다.
| 제조예 (1000ppm) |
총 폴리페놀 함량 (μg GAE/mg) |
| 제조예 1 | 81.75 |
| 제조예 4 | 119.12 |
실험예 2. 유효성분 함량의 측정
2.1. 제조예별 유효성분 함량
제조예에 따른 주요 유효성분의 함량의 차이를 알아보기 위하여, 황산앵초의 유효성분으로 알려진 Quercetin 및 Kaempferol을 HPLC를 통해 측정하였다.
Quercetin 및 Kaempferol의 HPLC 분석조건은 하기와 같다.
-Standard: Rutin, Quercetin, Kaempferol 100, 1000ppm
-Sol A. 3DW / Sol B. 0.02% TFA in ACN
-PDA: 280nm
-Injection volume: 10μl
-Flow rate: 1mL/min
-Oven: 25℃
그 결과를 표 3 및 4에 나타내었다. 표 3 및 4에 나타낸 바와 같이, 다른 추출방법에 비해 3일간 저온추출한 경우에 유효성분 함량이 가장 증가되는 것을 알 수 있었다. 또한, 추출물에 효소를 처리함으로써 유효성분 함량이 증가하는 것을 알 수 있었고, 구체적으로 1 중량%로 효소를 처리한 제조예 4의 경우 효소를 처리하지 않은 제조예 1 대비 Quercetin은 약 13.37배, Kaemperol은 약 11.95배 증가하는 것으로 나타났다.
| Quercetin | Conc (ppm) | Conc (ppm) | Conc (ppm) | ||
| 제조예 1 | 79.44 | 제조예 5 | - | 제조예 9 | - |
| 제조예 2 | 183.45 | 제조예 6 | - | 제조예 10 | - |
| 제조예 3 | 734.32 | 제조예 7 | - | 제조예 11 | - |
| 제조예 4 | 1062.36 | 제조예 8 | - | 제조예 12 | 864.36 |
| Kaempferol | Conc (ppm) | Conc (ppm) | Conc (ppm) | ||
| 제조예 1 | 292.65 | 제조예 5 | - | 제조예 9 | - |
| 제조예 2 | 871.36 | 제조예 6 | - | 제조예 10 | - |
| 제조예 3 | 2479.63 | 제조예 7 | - | 제조예 11 | 667.87 |
| 제조예 4 | 3495.74 | 제조예 8 | - | 제조예 12 | 1666.26 |
상기의 결과로부터, 저온추출을 함으로써 유효성분의 함량을 증가시킬 수 있고, 추출물에 효소 처리를 함으로써 유효성분의 함량을 증가시킬 수 있음을 알 수 있었다.
2.2. 효소처리 농도별 유효성분 함량
효소처리 농도에 따른 유효성분 함량의 차이를 알아보기 위하여 실시예 1.1의 저온추출을 통해 수득한 추출물(일반 추출물)에 실시예 2와 같이 효소를 1 중량% 및 5 중량%의 농도로 처리하여 수득한 효소 반응물에서 황산앵초의 유효성분으로 알려진 Quercetin 및 Kaempferol을 HPLC를 통해 측정하였다.
Quercetin 및 Kaempferol의 HPLC 분석조건은 하기와 같다.
-Standard: Quercetin, Kaempferol 1, 10, 100ppm
-Sol A. 0.1%phosphoric acid in 3DW / Sol B. ACN
-PDA: 280nm
-Injection volume: 10μl
-Flow rate: 1mL/min
-Oven: 35℃
그 결과를 표 5에 나타내었다. 표 5에 나타낸 바와 같이, 1 중량% 효소로 처리한 경우 Quercetin 및 Kaemperol의 함량이 가장 크게 증가하는 것으로 나타났다.
| Quercetin Conc (ppm) |
Kaempferol Conc (ppm) |
|
| 일반 추출물(제조예 1) | 284.12 | 393.03 |
| 1% 효소반응물(제조예 4) | 1088.22 | 2422.27 |
| 5% 효소반응물 | 398.75 | 703.33 |
실험예 3. 세포 독성의 확인
제조예 1 및 제조예 4의 효소 반응물의 세포 독성을 확인하였다.
구체적으로, CCD-986sk 세포주를 96 well plate에 적정 농도로 200μL 분주하고 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 FBS가 함유되지 않은 기본 배양액으로 교체해준 후 16시간 배양된 세포에 기존 배양액을 버리고, 제조예 1 및 제조예 4를 농도 별로 처리하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터 조건 하에 22시간 배양하였다. 그 후 CCK-8 용액을 well 당 10μL 처리하여 동일 배양 조건 하에 2시간 반응시킨 후 Microplate reader(Thermo, UV/Vis)를 이용하여 450nm에서 흡광도 측정하였다. 세포 생존율은 (실험군 흡광도/대조군 흡광도) X 100으로 도출하였다. 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 제조예 1 및 제조예 4의 처리 농도에 따라 세포독성이 상이함을 확인하였다. 구체적으로 제조예 1 및 제조예 4를 50μg/ml 이하의 농도로 처리한 경우에는 세포독성이 나타나지 않는 것으로 확인되어, 안전한 것으로 나타났다. 반면, 50μg/ml 초과의 농도로 처리한 경우에는 세포독성이 나타나는 것을 확인하였다.
실험예 4. 항산화 효능의 측정
효소 처리 유무에 따라 추출물의 항산화 효능에 차이가 있는지 알아보았다.
구체적으로, CCD-986sk 세포주를 96 well plate에 적정 농도로 200μL 분주하고 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 FBS가 함유되지 않은 기본 배양액으로 교체해준 후 16시간 배양된 세포에 기존 배양액을 버리고, 제조예 1 및 제조예 4를 농도 별로 처리하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 배양하였다. 배양된 세포에 Hydrogen peroxide solution (H2O2)을 각 well 당 800 μM씩 처리하여 동일 배양 조건 하에 4시간 반응시켰다. 그 후 CCK-8 용액을 well 당 20μL 처리하여 동일 배양 조건 하에 2시간 반응시킨 후 Microplate reader(Thermo, UV/Vis)를 이용하여 450nm에서 흡광도 측정하였다. 외부 산화적 스트레스에 대한 세포 보호능은 (실험군 흡광도/대조군 흡광도) X 100으로 도출하였으며 H2O2 만을 처리한 음성 대조군인 Blank 대비 흡광도가 높게 측정될수록 외부 산화적 스트레스에 대한 항산화 효능이 높게 평가될 수 있다. 그 결과를 도 2 및 표 6에 나타내었다.
도 2 및 표 6에 나타낸 바와 같이, 제조예 1(일반 추출물) 및 제조예 4(효소 반응물) 모두 라디칼에 대한 세포 보호 효과가 있는 것으로 나타났고, 효소 처리한 제조예 4의 경우 효소 처리를 하지 않은 제조예 1보다 세포 보호 효과가 우수한 것으로 나타났다.
| 샘플 | 일반 추출물(제조예 1) | 효소 반응물(제조예 4) | ||
| 농도(μg/mL) | 10 | 50 | 10 | 50 |
| 효과(%) | 41 | 33 | 42 | 52 |
실험예 5. 주름 개선 효능의 측정
5.1. 엘라스틴 생성 효과
황산앵초 추출물(일반 추출물, 제조예 1) 및 황산앵초 효소 반응물(효소 반응물, 제조예 4)의 피부 주름 개선 효능을 확인하기 위하여 피부 기질 유전자인 엘라스틴(elastin)의 발현 촉진 효과를 RT-PCR을 통해 확인하였다.
구체적으로, CCD-986sk 세포주를 6 well plate에 적정 농도로 2mL 분주하고 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 FBS가 함유되지 않은 기본 배양액으로 교체해준 후 24시간 동안 동일 배양조건 하에 배양하였다. 제조예 1 및 제조예 4를 농도 별로 처리하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 배양하였다. 배양 완료 후 각 well에 Trizol (Invitrogen) 1mL 처리하여 RNA를 추출하고, 클로로포름, 2-프로판올, 75% EtOH 및 원심분리기를 사용하여 RNA 응축 및 워싱을 진행하였다. RNA 건조 후 Nuclease free water 적정량 넣고 Nano drop (ALLSHENG)을 이용하여 정량하였다. 각 RNA를 동일 농도가 되도록 제조한 후 cDNA Synthesis Kit (PhileKorea) 이용하여 Reverse transcription 하였다. 합성된 cDNA 및 Primer (Elastin Oligonucleotide), SYBR green, Nuclease free water를 적정 비율로 혼합한 후 Real time PCR 장비 (Applied Biosystem, Quantstudio 5)를 사용하여 RT-qPCR 수행하였다. PCR 결과 분석은 ΔΔCt 값을 산출하여 유전자의 발현을 비교하였다. 효능평가 시 사용한 인자는 엘라스틴 인자로 이에 대한 발현 정도가 무처리 군인 Controls 대비 샘플의 mRNA 발현이 높게 측정될수록 내인성 주름 형성 억제 효능이 높게 평가될 수 있다. 그 결과를 도 3 및 표 7에 나타내었다.
도 3 및 표 7에 나타낸 바와 같이, 제조예 1(일반 추출물)을 10 μg/mL 농도로 처리한 경우와, 제조예 4(효소 반응물)를 10 μg/mL 및 50 μg/mL 농도로 처리한 경우에 엘라스틴 유전자의 발현을 증가시키는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 효소처리한 제조예 4의 경우 효소처리를 하지 않은 제조예 1보다 엘라스틴 유전자의 발현 증가 효과가 우수한 것으로 나타났다.
| 샘플 | 일반 추출물(제조예 1) | 효소 반응물(제조예 4) | ||
| 농도(μg/mL) | 10 | 50 | 10 | 50 |
| 효과(%) | 20 | -5 | 57 | 34 |
5.2. 콜라겐 생성 효과
황산앵초 추출물(일반 추출물, 제조예 1) 및 황산앵초 효소 반응물(효소 반응물, 제조예 4)의 피부 주름 개선 효능을 확인하기 위하여 UV에 의해 감소된 콜라겐(collagen type I alpha 1, COL1A1)의 발현 촉진 효과를 RT-PCR을 통해 확인하였다.
구체적으로, CCD-986sk 세포주를 6 well plate에 적정 농도로 2mL 분주하고 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 HBSS를 넣은 후, UV irradiation system(VILBER LOURMAT, UV-irradiation BIO-SUN)을 이용하여 UVA 30 J/cm2를 조사하였다. 대조군은 동일시간, 25 ℃ 인큐베이션하였다. 반응 종료 후 Serum Free 배지로 교체하고, UVA 조사한 세포에 제조예 1 및 제조예 4를 농도 별로 처리 후 37℃, 5% CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 배양하였다.
배양 완료 후 각 well에 Trizol (Invitrogen) 1mL 처리하여 RNA를 추출하고, 클로로포름, 2-프로판올, 75% EtOH 및 원심분리기를 사용하여 RNA 응축 및 워싱을 진행하였다. RNA 건조 후 Nuclease free water 적정량 넣고 Nano drop (ALLSHENG)을 이용하여 정량하였다. 각 RNA를 동일 농도가 되도록 제조한 후 cDNA Synthesis Kit (PhileKorea) 이용하여 Reverse transcription 하였다. 합성된 cDNA 및 Primer (Elastin Oligonucleotide), SYBR green, Nuclease free water를 적정 비율로 혼합한 후 Real time PCR 장비 (Applied Biosystem, Quantstudio 5) 사용하여 RT-qPCR 수행하였다. PCR 결과 분석은 ΔΔCt 값을 산출하여 유전자의 발현을 비교하였다. 효능평가 시 사용한 인자는 콜라겐 인자이기 때문에 UV 조사시 이에 대한 발현 정도가 무처리 군인 Blank 대비 낮아지며 UVA 처리한 음성 대조군 대비 샘플의 mRNA 발현이 높게 측정될수록 광에 의한 주름 형성 억제 효능이 높게 평가될 수 있다. 그 결과를 도 4 및 표 8에 나타내었다.
도 4 및 표 8에 나타낸 바와 같이, 제조예 1(일반 추출물)을 10 μg/mL 농도로 처리한 경우와, 제조예 4(효소 반응물)를 10 μg/mL 농도로 처리한 경우에 UV에 의해 감소된 콜라겐 유전자의 발현을 증가시키는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 효소처리한 제조예 4의 경우 효소처리를 하지 않은 제조예 1보다 콜라겐 유전자의 발현 증가 효과가 우수한 것으로 나타났다.
| 샘플 | EGCG (uM) | 일반 추출물(제조예 1) | 효소 반응물(제조예 4) |
| 농도(μg/mL) | 10 | 10 | 10 |
| 효과(%) | 133 | 121 | 176 |
Claims (13)
- 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물로서,
상기 황산앵초 추출물은 1 내지 15 ℃에서 저온 추출 공정으로 추출되는 것인, 효소 반응물. - 제1항에 있어서,
상기 당 가수분해 효소는 비스코자임(Viscozyme), 셀루클라스트(Celluclast), 아밀로글루코시다제(Amyloglucosidase, AMG), 텀마밀(Termamyl) 및 울트라플로(Ultraflo) 중에서 선택된 단독 또는 이들의 혼합물인 것인 효소 반응물. - 제1항에 있어서,
상기 당 가수분해 효소는 비스코자임(Viscozyme)인 것인 효소 반응물. - 제1항에 있어서,
상기 당 가수분해 효소는 효소 반응 시 반응액 총 중량을 기준으로 0.01 내지 5.0 중량%로 첨가되는 것인 효소 반응물. - 제1항에 있어서,
상기 효소 반응물은 황산앵초를 추출한 추출물에 효소를 반응시켜 수득되는 것인 효소 반응물. - 제1항에 있어서,
효소 반응물 내에 폴리페놀을 100 내지 150 μg GAE/mg, 퀘르세틴(Quercetin)을 800 내지 1200 ppm 및 캄페롤(Kaempferol)을 2500 내지 4000 ppm의 농도로 포함하는 효소 반응물. - 제1항에 있어서,
상기 효소 반응물은 항산화, 주름 개선 또는 피부 손상 억제용인 것인 효소 반응물. - 제1항의 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물을 포함하는 화장료 조성물.
- 제1항의 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물을 포함하는 식품 조성물.
- 황산앵초 건조물을 1 내지 15 ℃에서 저온 추출 공정으로 추출하는 단계; 및
황산앵초 추출물에 당 가수분해 효소를 첨가하여 반응시키는 단계
를 포함하는 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물의 제조방법. - 제10항에 있어서,
상기 당 가수분해 효소를 첨가하여 반응시키는 단계는 10 내지 50℃에서 수행되는 것인 방법. - 제10항에 있어서,
상기 당 가수분해 효소를 첨가하여 반응시키는 단계는 6 내지 48시간 동안 수행되는 것인 방법. - 제10항에 있어서,
상기 저온 추출 공정은 1 내지 5일간 수행되는 것인 방법.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220137370A KR102536160B1 (ko) | 2022-10-24 | 2022-10-24 | 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 항노화 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220137370A KR102536160B1 (ko) | 2022-10-24 | 2022-10-24 | 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 항노화 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR102536160B1 true KR102536160B1 (ko) | 2023-05-30 |
Family
ID=86529717
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020220137370A KR102536160B1 (ko) | 2022-10-24 | 2022-10-24 | 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 항노화 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102536160B1 (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102643752B1 (ko) * | 2023-11-02 | 2024-03-06 | 한국콜마주식회사 | 황산앵초 발효물을 포함하는 피지 조절 또는 모공 개선용 화장료 조성물 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200083710A (ko) | 2018-12-28 | 2020-07-09 | 주식회사 이앤코리아 | 산초 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 이의 용도 |
| KR20220084810A (ko) * | 2020-12-14 | 2022-06-21 | 어업회사법인 월드푸드서비시즈 주식회사 | 콜라겐 함량이 높은 히비스커스 추출물의 제조 방법 |
-
2022
- 2022-10-24 KR KR1020220137370A patent/KR102536160B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200083710A (ko) | 2018-12-28 | 2020-07-09 | 주식회사 이앤코리아 | 산초 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 이의 용도 |
| KR20220084810A (ko) * | 2020-12-14 | 2022-06-21 | 어업회사법인 월드푸드서비시즈 주식회사 | 콜라겐 함량이 높은 히비스커스 추출물의 제조 방법 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 인터넷 기사, 황산앵초잎추출물, 다각적인 항노화 작용(21.02.22.) * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102643752B1 (ko) * | 2023-11-02 | 2024-03-06 | 한국콜마주식회사 | 황산앵초 발효물을 포함하는 피지 조절 또는 모공 개선용 화장료 조성물 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102032994B1 (ko) | 갈산 함량이 증대된 녹차 추출물의 제조방법 | |
| US20150196610A1 (en) | Ultrasound-assisted high throughput continuous extraction for complete fragmentation of cocoa beans into valuable fractions and their formulations thereof | |
| KR102536160B1 (ko) | 황산앵초 추출물의 당 가수분해 효소 반응물, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 항노화 조성물 | |
| KR102298042B1 (ko) | 고추씨 추출물을 함유하는 항산화 및 항염증용 조성물 | |
| KR102269270B1 (ko) | 항산화 활성이 증진된 고구마 추출물 제조방법 | |
| KR102154566B1 (ko) | 들깨박 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 피부 주름 개선용 조성물 | |
| JP2014005293A (ja) | バラ胎座組織培養物またはその抽出物を含有する皮膚外用剤組成物およびその製造方法、機能性食品、ならびに抗酸化用組成物 | |
| KR102476670B1 (ko) | 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물 | |
| KR20160024674A (ko) | 수국차잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 이의 제조방법 | |
| KR101914628B1 (ko) | 식물 유래의 오일을 유효성분으로 함유하는 피부 주름개선용 조성물 | |
| KR101583595B1 (ko) | 화장료 조성물 및 제조방법 | |
| KR102014312B1 (ko) | 참까막살 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물 | |
| KR20170000099A (ko) | 흑삼 발효물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물 | |
| KR102611916B1 (ko) | 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물 | |
| KR102337346B1 (ko) | 리기다 소나무 수피 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화 또는 항노화용 조성물 | |
| KR102015362B1 (ko) | 세모가사리 유래 다당류를 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 주름개선용 조성물 | |
| KR20160139632A (ko) | 생리활성을 가지는 달래추출물 | |
| KR20160091037A (ko) | 구스베리 추출물 또는 글루타티온을 포함하는 조성물 | |
| KR20080000813A (ko) | 대두 배아 추출물 및 이를 포함하는 피부 미백용 조성물 | |
| KR20180120120A (ko) | 마리안 플럼 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 항노화 및 보습용 조성물 | |
| KR102500081B1 (ko) | 붉가시나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물 | |
| KR102352453B1 (ko) | 항산화 활성이 우수한 곡물 발효추출물과 베리류 추출복합물을 함유하는 조성물 | |
| KR101933835B1 (ko) | 플럼바긴 및 생강 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물 | |
| KR102313083B1 (ko) | 등수국 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 조성물 | |
| KR20190062845A (ko) | 들깨박 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 조성물 및 그의 제조방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |