KR102527600B1 - 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법 - Google Patents

의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법에 관한 것으로서, 특히 미립구 제조 단계에서 교반 및 초음파 처리를 동시에 하여 미립구의 생산 속도를 개선하였으며, 은사로 제조된 메쉬를 이용하여 혼합액을 필터링 하는 과정 및 미립구의 세척 단계에서 동백 기름 및 선인장 꽃 추출물을 도포하는 과정을 추가하여 이를 통해 제조되는 필러용 미립구의 염증반응을 감소시키는 동시에 콜라겐 생성을 촉진시키는 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법에 관한 것이다.

Description

의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법{Manufacturing methods of microspheres for fillers using medical biodegradable polymers}
본 발명은 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법에 관한 것으로서, 특히 미립구 제조 단계에서 교반 및 초음파 처리를 동시에 하여 미립구의 생산 속도를 개선하였으며, 은사로 제조된 메쉬를 이용하여 혼합액을 필터링 하는 과정 및 미립구의 세척 단계에서 동백 기름 및 선인장 꽃 추출물을 도포하는 과정을 추가하여 이를 통해 제조되는 필러용 미립구의 염증반응을 감소시키는 동시에 콜라겐 생성을 촉진시키는 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법에 관한 것이다.
미용시술을 목적으로 판매되고 있는 미용시술용 의료기기 중 필러(filler)는 주름 및 함몰부위 피부조직에 주입하는 방식으로 사용된다.
대부분의 필러들은 피부조직에 주입되어 그 물질 자체의 부피를 통해 피부 조직의 부피를 증대시키는 방식으로 피부 주름 또는 함몰부위를 개선한다. 현재 가장 많이 사용되는 필러로는 히알루론산과 콜라겐 등의 겔 형태의 무형 물질이 있으나, 시간의 경과에 따라 피부 조직내로 흡수되어 그 미용 시술 효과가 장기간 유지되지 않는다는 문제가 있다.
한편, 생분해성 고분자들에 대한 미립구 제조기술은 성형수술, 피부미용 분야뿐만 아니라 약물 봉입을 통한 장기지속 서방형 약물전달 분야에서 매우 각광받고 있는 기술이다.
그러나, 최근 생분해성 고분자 미립구를 이용한 필러와 약물 봉입을 통한 데포(depot) 제제들이 많이 개발되고 있지만 입자 모양과 크기가 일정치 않거나 피부 내에서의 콜라겐 생성에 시간이 오래 걸리는 등의 문제점이 알려져 있다.
이와 관련하여, 한국등록특허공보 제10-2427305호는 일정한 크기를 가지면서 양산이 용이한 생분해성 고분자 미립구의 제조방법을 개시하고 있으며, 한국등록특허공보 제10-2381291호는 폴리디옥사논을 이용하여 미립구를 제조해 생체적합성이 우수하고 체내에서 분해가 빨라 콜라겐 생성에 적합한 필러용 미립구의 제조방법에 대해 개시하고 있다.
그러나 일정한 크기의 미립구를 생산하기 위해서는 제조과정에서 시간이 많이 걸리며 대부분은 부작용 없이 생분해성으로 체내에서 분해 흡수되지만 낮은 확률로 염증반응을 일으키는 부작용을 초래하는 문제점이 발견되어 추가적인 연구 개발이 필요한 상황이다.
한국등록특허공보 제10-2427305호 한국등록특허공보 제10-2381291호
상기와 같은 문제를 해결하기 위해, 본 발명은 미립구 제조 단계에서 교반 및 초음파 처리를 동시에 하여 미립구의 생산 속도를 개선하였으며, 은사로 제조된 메쉬를 이용하여 혼합액을 필터링 하는 과정 및 미립구의 세척 단계에서 동백 기름 및 선인장 꽃 추출물을 도포하는 과정을 추가하여 이를 통해 제조되는 필러용 미립구의 염증반응을 감소시키는 동시에 콜라겐 생성을 촉진시키는 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법을 제공한다.
상기 목적은 생분해성 고분자 펠렛 1~10중량%를 클로로포름 90~99중량%와 혼합 후 80~120℃에서 교반하는 생분해성 고분자 용액 제조 단계; 폴리비닐알콜 1~3중량%를 증류수 97~99중량%와 혼합 후 80~100℃에서 교반하는 폴리비닐알콜 수용액 제조 단계; 상기 생분해성 고분자 용액 1~20중량%와 폴리비닐알콜 수용액을 80~99중량%를 혼합하고 2~10시간 동안 초음파 처리 및 교반을 진행하여 혼합액 내에서 생분해성 고분자 미립구를 제조하는 단계; 상기 생분해성 고분자 미립구를 포함하는 혼합액을 동결건조하여 경화된 생분해성 고분자 미립구를 수득하는 단계; 상기 경화된 생분해성 고분자 미립구를 세척 및 건조하는 단계; 를 포함하는, 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법에 의해 달성될 수 있다.
구체적으로, 상기 생분해성 고분자 미립구 제조 단계는 생분해성 고분자 용액과 폴리비닐알콜 수용액을 혼합한 혼합액의 초음파 처리 및 교반 과정 전 은사로 구성된 #200 크기의 메쉬로 혼합액을 거르는 단계를 추가로 포함하는 것일 수 있다.
구체적으로, 상기 세척 및 건조 단계는 세척 후 동백 기름50~80중량% 및 선인장 꽃 추출물 20~50중량%를 혼합한 혼합액을 미립구에 도포한 다음 동결건조시키는 단계를 추가로 포함하는 것일 수 있다.
구체적으로, 상기 생분해성 고분자는 PCL, PGA, PGCL로 구성되는 생분해성 고분자 군에서 선택되는 하나 이상의 생분해성 고분자일 수 있다.
또한 상기 목적은 상기한 제조방법으로 제조된 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구에 의해 달성될 수 있다.
본 발명에 따른 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구는 미립구 제조 단계에서 교반 및 초음파 처리를 동시에 하여 미립구의 생산 속도를 개선하였으며, 은사로 제조된 메쉬를 이용하여 혼합액을 필터링 하는 과정 및 미립구의 세척 단계에서 동백 기름 및 선인장 꽃 추출물을 도포하는 과정을 추가하여 이를 통해 제조되는 필러용 미립구의 염증반응을 감소시키는 동시에 콜라겐 생성을 촉진시킬 수 있으므로 성형수술 또는 피부미용 분야에서 필러용 미립구로 사용이 가능하다.
도 1은 일실시예에 따른 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법을 설명하기 위한 흐름도이다.
이하에서, 첨부된 도면을 참조하여 실시예들을 상세하게 설명한다. 그러나, 실시예들에는 다양한 변경이 가해질 수 있어서 특허출원의 권리 범위가 이러한 실시예들에 의해 제한되거나 한정되는 것은 아니다. 실시예들에 대한 모든 변경, 균등물 내지 대체물이 권리 범위에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.
실시예들에 대한 특정한 구조적 또는 기능적 설명들은 단지 예시를 위한 목적으로 개시된 것으로서, 다양한 형태로 변경되어 실시될 수 있다. 따라서, 실시예들은 특정한 개시형태로 한정되는 것이 아니며, 본 명세서의 범위는 기술적 사상에 포함되는 변경, 균등물, 또는 대체물을 포함한다.
제1 또는 제2 등의 용어를 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 이런 용어들은 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 해석되어야 한다. 예를 들어, 제1 구성요소는 제2 구성요소로 명명될 수 있고, 유사하게 제2 구성요소는 제1 구성요소로도 명명될 수 있다.
어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "연결되어" 있다고 언급된 때에는, 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되어 있거나 또는 접속되어 있을 수도 있지만, 중간에 다른 구성요소가 존재할 수도 있다고 이해되어야 할 것이다.
실시예에서 사용한 용어는 단지 설명을 목적으로 사용된 것으로, 한정하려는 의도로 해석되어서는 안된다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
본 발명의 실시예들에서, 별도로 다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 발명의 실시예에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
본 발명의 실시예를 설명하기 위한 도면에 개시된 형상, 크기, 비율, 각도, 개수 등은 예시적인 것이므로 본 발명이 도시된 사항에 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명은 생략한다. 본 명세서 상에서 언급된 '포함한다', '갖는다', '이루어진다' 등이 사용되는 경우 '~만'이 사용되지 않는 이상 다른 부분이 추가될 수 있다. 구성 요소를 단수로 표현한 경우에 특별히 명시적인 기재 사항이 없는 한 복수를 포함하는 경우를 포함한다.
구성 요소를 해석함에 있어서, 별도의 명시적 기재가 없더라도 오차 범위를 포함하는 것으로 해석한다.
도면에서 나타난 각 구성의 크기 및 두께는 설명의 편의를 위해 도시된 것이며, 본 발명이 도시된 구성의 크기 및 두께에 반드시 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 여러 실시예들의 각각 특징들이 부분적으로 또는 전체적으로 서로 결합 또는 조합 가능하며, 당업자가 충분히 이해할 수 있듯이 기술적으로 다양한 연동 및 구동이 가능하며, 각 실시예들이 서로에 대하여 독립적으로 실시 가능할 수도 있고 연관 관계로 함께 실시 가능할 수도 있다.
본원의 일 측면은 생분해성 고분자 펠렛 1~10중량%를 클로로포름 90~99중량%와 혼합 후 80~120℃에서 교반하는 생분해성 고분자 용액 제조 단계; 폴리비닐알콜 1~3중량%를 증류수 97~99중량%와 혼합 후 80~100℃에서 교반하는 폴리비닐알콜 수용액 제조 단계; 상기 생분해성 고분자 용액 1~20중량%와 폴리비닐알콜 수용액을 80~99중량%를 혼합하고 2~10시간 동안 초음파 처리 및 교반을 진행하여 혼합액 내에서 생분해성 고분자 미립구를 제조하는 단계; 상기 생분해성 고분자 미립구를 포함하는 혼합액을 동결건조하여 경화된 생분해성 고분자 미립구를 수득하는 단계; 상기 경화된 생분해성 고분자 미립구를 세척 및 건조하는 단계; 를 포함하는, 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법을 제공한다.
이하 도 1을 통해 본 발명의 일 실시예에 따른 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법을 설명할 수 있다.
먼저, 생분해성 고분자 펠렛 1~10중량%를 클로로포름 90~99중량%와 혼합 후 80~120℃에서 교반하여 생분해성 고분자 용액을 제조한다.
상기 생분해성 고분자는 생분해성 고분자 화합물 또는 생분해성 플라스틱으로도 불리며 흙 속 또는 물 속에 존재하는 박테리아 또는 유기체에 의해 분해될 수 있는 고분자 화합물을 의미한다. 생분해성 고분자 화합물은 이용 후에 화학적 분해가 가능한 이산화 탄소, 질소, 물, 생물유기자원(biomass), 무기 염류 등의 천연 부산물을 내놓는다. 현재 생분해성 고분자는 천연 화합물을 원료로 한 ① 천연 고분자계, 미생물이 생산하는 ②생합성 고분자(biosynthetic polymer), 미생물이 생산하는 락트산(lactic acid)과 같은 바이오 물질을 합성 원료로 사용한 ③화학적 합성 고분자(chemosyntheic polymer)가 있다.
구체적으로, 상기 생분해성 고분자는 PCL, PGA, PGCL로 구성되는 생분해성 고분자 군에서 선택되는 하나 이상의 생분해성 고분자일 수 있다.
상기 클로로포름(chloroform)은 메테인에 들어 있는 3개의 수소를 염소로 치환한 화합물이다. 무색 투명한 액체이며 용매와 시약으로서 다양한 분야에서 사용되고 있다.
본 발명에서의 클로로포름은 생분해성 고분자를 녹이는 용매로 사용되는 것일 수 있다.
상기 생분해성 고분자 펠렛이 1중량% 미만으로 혼합될 경우 본 발명에 따른 미립구 제조방법으로 제조되는 미립구의 양이 적어 생산성 및 경제성이 떨어질 수 있으며, 10중량% 초과로 혼합될 경우 이를 통해 제조되는 미립구의 입자 크기가 커져 필러용으로 사용하기 어려울 수 있다.
교반 온도가 80℃미만일 경우 생분해성 고분자 펠렛이 충분히 녹지 않을 수 있으며, 120℃ 초과일 경우 이를 통해 제조되는 미립구의 입자 크기가 균일하지 않을 수 있다.
다음으로, 폴리비닐알콜 1~3중량%를 증류수 97~99중량%와 혼합 후 80~100℃에서 교반하여 폴리비닐알콜 수용액을 제조한다.
상기 폴리비닐알콜은 PVA라고도 하며 폴리초산비닐을 메틸알콜 용액으로 녹인 후 수산화나트륨을 가해, 30~50℃로 가수분해하면, 침전된 백색 고체 형태의 폴리비닐알콜을 수득할 수 있다. 물에 가용성으로 유기용매에는 불용성의 백색 분말로 존재한다. 폴리비닐 알콜은 폴리비닐알콜 합성섬유의 원료, 접착제, 호료(糊料), 필름 등에 사용되며 본 발명에서는 증류수와 혼합되어 계면활성제의 역할을 하는 것일 수 있다.
다음으로, 상기 생분해성 고분자 용액 1~20중량%와 폴리비닐알콜 수용액을 80~99중량%를 혼합하고 2~10시간 동안 초음파 처리 및 교반을 진행하여 혼합액 내에서 생분해성 고분자 미립구를 제조한다.
상기 생분해성 고분자 미립구는 생분해성 고분자로 구성되어 있으며 매우 작은 크기의 구체 입자 형태를 갖는 알갱이를 의미한다. 본 발명에서의 생분해성 고분자 미립구는 입자크기 10~60㎛의 미립구일 수 있다.
만약 상기 생분해성 고분자 용액이 1중량% 미만으로 혼합될 경우 이를 통해 생산되는 미립구의 양이 적어 생산성 및 경제성이 떨어질 수 있으며, 20중량% 초과로 혼합될 경우 이를 통해 제조되는 미립구의 입자 크기가 커져 필러용으로 사용하기 어려울 수 있다.
본 발명에서의 교반 과정은 혼합액을 섞어줌으로써 혼합액이 에멀젼 형태를 가지게 되고 에멀젼 구조에서 생분해성 고분자 미립구가 생성될 수 있도록 도움을 주는 것일 수 있다.
본 발명에서의 초음파 처리는 교반 과정과 동시에 진행되어 혼합액의 에멀젼화를 촉진시키고 혼합액 내의 고분자-클로로포름 입자가 더 미세해질 수 있도록 도움을 주어 입자크기 10~60㎛의 생분해성 고분자 미립구가 더욱 빠르게 생성되도록 하는 것일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 생분해성 고분자 미립구 제조 단계는 생분해성 고분자 용액과 폴리비닐알콜 수용액을 혼합한 혼합액의 초음파 처리 및 교반 과정 전 은사로 구성된 #200 크기의 메쉬로 혼합액을 거르는 단계를 추가로 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에서 초음파 처리 및 교반 과정 전 혼합액을 은사 메쉬로 거르는 과정은 메쉬의 미세한 기공이 혼합액의 에멀젼화를 돕는 동시에 입자크기 10~60㎛의 생분해성 고분자 미립구가 더욱 빠르게 생성되도록 하는 것일 수 있다. 또한, 은사 메쉬를 통과하는 과정에서 은 이온이 혼합되어 이를 통해 제조되는 생분해성 고분자 미립구를 필러용으로 사용할 경우 염증반응을 감소시키는 것일 수 있다.
다음으로, 상기 생분해성 고분자 미립구를 포함하는 혼합액을 동결건조하여 경화된 생분해성 고분자 미립구를 수득한다.
생분해성 고분자 중에서는 녹는점이 낮아 고온 건조를 하기 어려운 고분자도 존재하기 때문에 미립구의 형체를 유지하며 용매를 제거하기 위해서는 동결건조가 바람직하다.
마지막으로, 상기 경화된 생분해성 고분자 미립구를 세척 및 건조하여 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구를 제조한다.
일 실시예에 있어서, 상기 세척 및 건조 단계는 세척 후 동백 기름50~80중량% 및 선인장 꽃 추출물 20~50중량%를 혼합한 혼합액을 미립구에 도포한 다음 동결건조시키는 단계를 추가로 포함하는 것일 수 있다.
상기 동백 기름은 차나무과 동백나무속 활엽상록수인 동백나무의 씨앗을 압착하여 얻은 기름을 의미한다. 동백 기름은 방치해 두어도 증발하는 일이 거의 없고, 비중은 약 0.916으로 물과 비슷하다. 주성분은 올레산(酸)으로 약 90%를 차지하고 있으며, 황색의 맑은 기름으로 응고점은 최저 25℃로 낮고 주로 머리기름, 정밀기계유, 의약계의 올리브유 대용으로도 쓰이고 있다.
상기 선인장 꽃은 쌍떡잎식물 선인장목 선인장과에 속하는 식물인 선인장의 꽃을 의미하며, 화장료 조성물 분야에서 선인장 꽃 추출물을 선인장의 열매인 백년초의 추출물과 혼용하는 경우가 있으나, 본 발명에서의 선인장 꽃은 백년초와 구분하여 사용된다. 선인장 꽃의 추출물은 피부 보습 효과를 가져 주로 화장료 조성물에 사용된다.
본원의 다른 일 측면은 상기한 제조방법으로 제조된 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구를 제공한다.
이하, 구체적인 실시예와 비교예를 통하여 본 발명의 구성 및 그에 따른 효과를 보다 상세히 설명하고자 한다. 그러나, 본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1]
먼저, 생분해성 고분자 펠렛 5중량%를 클로로포름 95중량%와 혼합 후 90℃에서 일정한 속도로 교반하여 생분해성 고분자 용액을 제조하였다.
다음으로, 폴리비닐알콜 2중량%를 증류수 98중량%와 혼합 후 90℃에서 일정한 속도로 교반하여 폴리비닐알콜 수용액을 제조하였다.
다음으로, 상기 생분해성 고분자 용액 10중량%와 폴리비닐알콜 수용액을 90중량%를 혼합하고 6시간 동안 초음파 처리 및 교반을 동시에 진행하여 혼합액을 에멀젼화 하였으며 혼합액 내에 미세한 고분자-클로로포름 입자가 생성되도록 유도하여 생분해성 고분자 미립구를 제조하였다.
다음으로, 상기 생분해성 고분자 미립구를 포함하는 혼합액을 동결건조기에 넣고 동결건조하여 경화된 생분해성 고분자 미립구를 수득하였다.
상기 경화된 생분해성 고분자 미립구를 증류수로 세척한 후 동결건조하여 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구를 제조하였다. 제조된 생분해성 고분자 미립구를 실시예 1로 명명하였다.
[실시예 2]
실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 상기 생분해성 고분자 미립구 제조 단계에서 생분해성 고분자 용액과 폴리비닐알콜 수용액을 혼합한 혼합액의 초음파 처리 및 교반 과정 전 은사로 구성된 #200 크기의 메쉬로 혼합액을 거르는 단계를 추가로 포함하여 제조된 생분해성 고분자 미립구를 실시예 2로 명명하였다.
[실시예 3]
실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 상기 세척 및 건조 단계에서 세척 후 동백 기름60중량% 및 선인장 꽃 추출물 40중량%를 혼합한 혼합액을 경화된 생분해성 고분자 미립구에 도포한 다음 동결건조시키는 단계를 추가로 포함하여 제조된 생분해성 고분자 미립구를 실시예 3으로 명명하였다.
[비교예 1]
실시예 1과 동일한 방법으로 제조하되, 초음파 처리를 제외하고 제조된 생분해성 고분자 미립구를 비교예 1로 명명하였다.
[실험예 1: 미립구 생체적합성 비교]
실시예 1 내지 3 및 비교예 1의 생체적합성을 확인하기 위해 인간 진피 섬유아세포(human dermal fibroblast cell, HDF)를 배양한 배지에 액상 배양액 98중량%와 각 미립구 2중량%를 혼합한 혼합배양액을 첨가한 후 세포생존율을 확인하였다. 아무것도 넣지 않은 섬유아세포 배양 배지의 세포생존율을 100%로 하여 각 실시예 및 비교예를 투입한 배지의 24시간 후 세포생존율을 비교하여 표 1에 나타내었다.
미처리군 실시예 1 실시예 2 실시예 3 비교예 1
세포생존율(%) 100 93 92 96 90
표 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 모두 세포생존률 90% 이상인 것으로 확인되어 본 발명의 제조방법에 따른 미립구가 생체적합성이 우수한 것을 확인할 수 있었다. 특히 실시예 3은 세포생존율이 96%로 확인되어 동백 기름 및 선인장 꽃 추출물이 미립구의 생체적합성을 개선시키는데 도움을 준 것으로 판단된다.
[실험예 2: 미립구 콜라겐 생성 수준 비교]
실시예 1 내지 3 및 비교예 1이 실제 세포에서 콜라겐 생성에 영향을 주는지 확인하기 위해 인간 진피 섬유아세포를 배양한 배지에 액상 배양액 98중량%와 각 미립구 2중량%를 혼합한 혼합배양액을 첨가하고 48시간 후 중합효소연쇄반응기(qPCR)로 각 세포의 콜라겐생성유발인자 발현량을 확인하여 그 결과를 표 2에 나타내었다.
대조군 실시예 1 실시예 2 실시예 3 비교예 1
콜라겐생성유발인자 발현량(%) 100 110 108 120 96
표 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1내지 3은 모두 대조군보다 우수한 콜라겐생성유발인자 발현량을 보여 실제 미립구 주입 시 콜라겐 생성량이 증가할 수 있음을 나타내고 있다. 특히 실시예 3은 발현량이 120%로 나타나 동백 기름 및 선인장 꽃 추출물이 미립구의 콜라겐 생성량 개선에 영향을 주는 것으로 판단된다.

Claims (3)

  1. 생분해성 고분자 펠렛 1~10중량%를 클로로포름 90~99중량%와 혼합 후 80~120℃에서 교반하는 생분해성 고분자 용액 제조 단계;
    폴리비닐알콜 1~3중량%를 증류수 97~99중량%와 혼합 후 80~100℃에서 교반하는 폴리비닐알콜 수용액 제조 단계;
    상기 생분해성 고분자 용액 1~20중량%와 폴리비닐알콜 수용액을 80~99중량%를 혼합하고 상기 혼합액을 은사로 구성된 #200 크기의 메쉬로 걸러준 다음 2~10시간 동안 초음파 처리 및 교반을 진행하여 혼합액 내에서 생분해성 고분자 미립구를 제조하는 단계;
    상기 생분해성 고분자 미립구를 포함하는 혼합액을 동결건조하여 경화된 생분해성 고분자 미립구를 수득하는 단계;
    상기 경화된 생분해성 고분자 미립구를 세척 후 동백 기름50~80중량% 및 선인장 꽃 추출물 20~50중량%를 혼합한 혼합액을 미립구에 도포한 다음 동결건조하는 단계; 를 포함하는, 의료용 생분해성 고분자를 이용한 필러용 미립구의 제조방법.
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