KR102525901B1 - Skin external application composition for anti-aging containing Phlox subulata extract - Google Patents

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Abstract

본 발명은 피부의 콜라겐 당화를 억제하여 피부 내 콜라겐 분해 저해를 통한 주름 개선과 피부의 투명도 개선에 도움을 줄 수 있는 지면패랭이꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 항산화 효과가 우수하고, 당화반응(glycation)에 의한 콜라겐 당화를 억제하여 피부의 주름 생성을 예방하거나 개선할 수 있으며, 최종당화산물(advanced glycation end products, AGEs)의 생성을 억제하여 피부 단백질 당화에 의한 피부 투명도가 저하되는 것을 개선할 수 있다. 따라서 본 발명의 조성물은 피부노화 방지, 주름 개선, 피부 톤 개선 및 피부모공 축소 등을 위한 의약품, 화장품, 퍼스널 케어 제품 등으로 활용될 수 있다.The present invention provides a composition for preventing skin aging comprising, as an active ingredient, an extract of dianthus dianthus, which can help improve wrinkles and skin transparency by inhibiting collagen degradation in the skin by inhibiting collagen glycation in the skin. The composition has an excellent antioxidant effect, can prevent or improve the formation of wrinkles in the skin by inhibiting collagen glycation by glycation, and inhibits the generation of advanced glycation end products (AGEs) to improve skin Decreased skin transparency due to protein saccharification can be improved. Therefore, the composition of the present invention can be used as pharmaceuticals, cosmetics, personal care products, etc. for preventing skin aging, improving wrinkles, improving skin tone, and reducing skin pores.

Description

지면패랭이꽃 추출물을 포함하는 항노화용 피부외용제 조성물{Skin external application composition for anti-aging containing Phlox subulata extract}Skin external application composition for anti-aging containing Phlox subulata extract}

본 발명은 지면패랭이꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for external application for skin comprising an extract of Dianthus dianthus as an active ingredient.

피부의 노화는 나이가 들어가면서 자연적으로 발생하는 변화이며 그 밖에도 자외선, 담배, 식이습관 및 환경오염 등 많은 외부적 인자에 의해서 발생한다. 피부의 노화에는 겉보기 나이의 저하, 살결의 저하, 주름증가, 칙칙함의 증가, 피부기능의 저하 등이 있다. 피부는 나이 듦에 따라 붉은색이 감소, 노란색이 증가, 명도가 낮아지는 색조로 변화하여 피부가 칙칙한 상태로 된다. 칙칙함의 요인에는 피부의 색소침착, 단백질의 당화나 산화에 의한 착색 등이 관여한다. Aging of the skin is a change that occurs naturally with aging, and in addition, it is caused by many external factors such as ultraviolet rays, cigarettes, dietary habits, and environmental pollution. Aging of the skin includes a decrease in apparent age, a decrease in skin texture, an increase in wrinkles, an increase in dullness, and a decrease in skin function. As the skin ages, the red color decreases, the yellow color increases, and the color tone changes, resulting in a dull skin tone. The factors of dullness are related to pigmentation of the skin, discoloration due to glycosylation or oxidation of protein, and the like.

현재, 단백질 당화 억제제로 아미노구아니딘이 친핵성 히드라진(hydrazine)으로 아마도리 산물과 결합하여 단백질과의 교차결합을 방지함으로써 최종당화산물의 생성을 억제하여 가장 유망한 당화 억제제 의약품으로 제 3상 임상실험까지 진행되었으나, 장기간 투여 시 카탈라아제의 저해와 관련된 부작용이 우려되고 있어 안전하고 효능이 우수한 새로운 단백질 당화 억제 소재를 탐색하고자 하는 노력이 계속되어 왔다. 또한 체내 생성된 활성산소는 생체 단백질을 변성시키며, 변성된 생체 단백질은 당과의 반응성이 높아져 당화반응이 유도된다. 이러한 메커니즘에 따라 활성산소로 유도된 산화스트레스 억제능이 우수하고 페놀성 화합물이 풍부한 추출물의 항당화 연구가 최근까지도 활발히 진행되고 있지만 아직 실질적 효능을 구현하기에는 부족한 수준이다.Currently, aminoguanidine, as a protein glycosylation inhibitor, binds to Amadori products with nucleophilic hydrazine to prevent cross-linking with proteins, thereby inhibiting the production of advanced glycation end products, and is the most promising glycosylation inhibitor drug until phase 3 clinical trials. However, there are concerns about side effects related to inhibition of catalase during long-term administration, so efforts to search for new materials that inhibit protein glycosylation that are safe and have excellent efficacy have been continued. In addition, active oxygen generated in the body denatures biological proteins, and the denatured biological proteins have increased reactivity with sugar, thereby inducing a glycation reaction. According to this mechanism, active oxygen-induced oxidative stress inhibitory activity is excellent and phenolic compound-rich extracts have been actively studied until recently, but they are still insufficient to realize practical efficacy.

상기 문제점을 해결하기 위한 본 발명의 목적은 지면패랭이꽃 추출물을 이용하여 피부노화 방지, 피부주름 방지, 피부주름 개선, 피부 톤 개선 및 피부모공 축소 효과를 상승시키고 인체에 안전하며 장기간 사용하여도 부작용이 없는 항노화용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.The purpose of the present invention for solving the above problems is to use dianthus dianthus extract to increase the effect of preventing skin aging, preventing skin wrinkles, improving skin wrinkles, improving skin tone and reducing skin pores, and is safe for the human body and has no side effects even after long-term use It is to provide a composition for external application for skin for anti-aging.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 양상은 지면패랭이꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 항노화용 피부외용제 조성물을 제공하는 것이다.An aspect of the present invention for achieving the above object is to provide a composition for external application for skin for anti-aging comprising an extract of Dianthus dianthus as an active ingredient.

본 발명에 있어서, 상기 지면패랭이꽃 추출물은 우수한 항산화 효과를 나타내며, 콜라겐 당화반응(collagen glycation)과 최종당화산물(advanced glycation end products, AGEs)의 생성을 억제시켜, 피부노화 방지, 주름 개선, 피부 톤 개선 및 피부모공 축소에 효과적이다.In the present invention, the dianthus extract exhibits an excellent antioxidant effect, inhibits collagen glycation and the production of advanced glycation end products (AGEs), thereby preventing skin aging, improving wrinkles, and improving skin tone It is effective in improving and reducing skin pores.

또한, 피부 세포에 악영향을 미치지 않은 안전성을 가지면서 피부 세포 노화를 방지하므로 피부노화 방지, 주름 개선, 피부 톤 개선 및 피부모공 축소 등을 위한 의약품, 화장품, 퍼스널 케어 제품 등으로 활용될 수 있다.In addition, since it has safety without adverse effects on skin cells and prevents skin cell aging, it can be used as pharmaceuticals, cosmetics, personal care products, etc. for preventing skin aging, improving wrinkles, improving skin tone, and reducing skin pores.

도 1은 피부 섬유아세포에 대한 지면패랭이꽃 추출물의 농도 별 세포 생존율을 나타낸 그래프이다.
도 2는 지면패랭이꽃 추출물과 아미노구아니딘 염산염의 섬유아세포 내 카복시메칠라이신(carboxymethyl lysine, CML) 생성 억제 정도를 나타낸 그래프이다.
1 is a graph showing cell viability by concentration of dianthus extract for skin fibroblasts.
Figure 2 is a graph showing the degree of inhibition of carboxymethyl lysine (CML) production in fibroblasts by dianthus extract and aminoguanidine hydrochloride.

이하 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 다만, 본 발명의 설명을 위한 것으로, 본 발명의 범위는 청구범위에 기재된 사항을 기초로 한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail. However, it is for explanation of the present invention, and the scope of the present invention is based on the matters described in the claims.

본 발명은 지면패랭이꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 항노화용 피부외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for external application for skin for anti-aging comprising an extract of Dianthus dianthus as an active ingredient.

상기 지면패랭이꽃 추출물은 상기 지면패랭이꽃의 잎, 꽃, 열매, 줄기, 뿌리 및 종자로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추출물일 수 있으며, 전초를 사용할 수 있다.The ground dianthus extract may be at least one extract selected from the group consisting of leaves, flowers, fruits, stems, roots, and seeds of the ground dianthus, and an outpost may be used.

상기 지면패랭이꽃 추출물은 항산화력이 우수하고, 콜라겐 당화를 감소시켜 효과적으로 최종당화산물의 생성을 억제하여 피부노화 방지, 피부주름 방지, 피부주름 개선, 피부 톤 개선 및 피부모공 축소에 유용하게 사용될 수 있다.The dianthus dianthus extract has excellent antioxidant power, reduces collagen glycation and effectively inhibits the production of final glycation products, and can be usefully used for preventing skin aging, preventing skin wrinkles, improving skin wrinkles, improving skin tone, and reducing skin pores. .

본 발명에 있어서, 상기 ‘항노화’란 피부보호, 피부상태 개선, 피부미백, 피부노화 및 주름의 예방 또는 개선, 피부모공 축소, 피부보호, 피부의 염증 반응 완화, 면역질환 개선능, 피부 장벽기능 개선, 피부자극 완화, 피부세포 증진, 재생능, 항산화능, 콜라겐 합성 증진능 등을 모두 포함하는 개념이다.In the present invention, the 'anti-aging' means skin protection, skin condition improvement, skin whitening, prevention or improvement of skin aging and wrinkles, skin pore reduction, skin protection, relieving skin inflammatory response, immune disease improvement ability, skin barrier It is a concept that includes function improvement, skin irritation relief, skin cell promotion, regeneration, antioxidant, and collagen synthesis enhancement.

또한, 상기 ‘유효성분으로 포함’의 의미는 피부외용제 조성물로써 항노화에 따른 피부 개선 효과를 나타낼 수 있는, 예컨대 피부외용제 조성물로써 주름개선 효능과 관련된 콜라겐 합성, 멜라닌 형성(melanogenesis) 저해에 따른 피부미백 효능, 피부보습, 모공수축 또는 유도형 산화질소 합성 효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS) 억제 활성, 피지억제, 항균력 등을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미한다.In addition, the meaning of 'included as an active ingredient' means that the composition for external application for skin can exhibit a skin improvement effect according to anti-aging, for example, the composition for external application for skin, which is related to the wrinkle improvement effect, inhibits collagen synthesis and melanogenesis. It means that it contains an effective amount that can exhibit whitening effect, skin moisturizing, pore contraction or inducible nitric oxide synthase (iNOS) inhibitory activity, sebum inhibition, antibacterial activity, and the like.

본 발명에 있어서, 상기 항노화용 피부외용제 조성물의 유효성분인 지면패랭이꽃은 다음과 같은 특징을 가지고 있다.In the present invention, Dianthus dianthus, which is an active ingredient of the anti-aging composition for external application for skin, has the following characteristics.

상기 지면패랭이꽃(Phlox subulata)은 통화식물목 꽃고비과 풀협죽도속의 포복성 숙근성 다년초로 주로 관상용으로 재배되며, 멀리서 보기에 잔디같지만 꽃이 피기 때문에 꽃잔디라고도 하며, 꽃이 패랭이꽃과 비슷하고 지면으로 퍼지기 때문에 지면패랭이꽃이라고 한다. 미국 동부가 원산지이고, 건조한 모래땅에서 자라며, 꽃은 4~9월에 피지만 주로 4월에 핀다.The ground dianthus (Phlox subulata) is a creeping rooted perennial plant of the genus Phlox subulata and is mainly cultivated for ornamental purposes. It is also called phlox grass because it blooms although it looks like grass from a distance, and the flowers are similar to dianthus and to the ground It is called ground dianthus because it spreads. It is native to the eastern United States, grows in dry sandy land, and flowers bloom from April to September, but mainly blooms in April.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 지면패랭이꽃 추출물은 피부 콜라겐 당화반응(collagen glycation)과 최종당화산물(advanced glycation end products, AGEs)의 생성을 억제시킬 수 있다.In one embodiment of the present invention, the dianthus dianthus extract can inhibit skin collagen glycation and the production of advanced glycation end products (AGEs).

피부 노화의 주원인 중 하나인 당화반응(glycation)이란 단백질의 유리 아미노기인 리신(lysine)이나 아르기닌(arginine)과 환원당의 카보닐(carbonyl)기가 반응하여 초기 당화(glycation) 생성물인 시프 염기(schiff base)를 형성한다. 이 반응은 당류 농도에 의존적으로 진행되며, 수 시간 내 반응이 이루어진다. 생성된 시프 염기(schiff base)는 화학적 재배열(chemical rearrangement)을 통해 안정된 아마도리 산물(amadori product)을 생성하며, 수 일 내 반응이 이루어진다. 아마도리 산물이 체내 축적되어 일련의 산화, 탈수, 축합, 재전위, 분열, 고리화 등의 반응을 통해 단백질과 가교결합을 형성하는데 이 반응은 비가역적으로 이루어진다. 이러한 반응이 수 주에서 수 개월 정도 이루어지면 최종적으로 생성된 갈색 화합물의 당화산물인 최종당화산물(advanced glycation end products, AGEs)을 형성하는데 이 물질은 매우 안정하여 체내 축적될 경우 세포 내 외부에 이상을 초래한다.One of the main causes of skin aging, glycation, is the reaction between lysine or arginine, a free amino group of a protein, and the carbonyl group of a reducing sugar, resulting in Schiff base, an initial glycation product. ) to form This reaction proceeds depending on the saccharide concentration and takes place within a few hours. The resulting schiff base produces a stable amadori product through chemical rearrangement, and the reaction takes place within a few days. Amadori products accumulate in the body and form cross-links with proteins through a series of reactions such as oxidation, dehydration, condensation, retranslocation, cleavage, and cyclization, which are irreversible. When this reaction takes place for several weeks to several months, advanced glycation end products (AGEs), which are glycation products of the brown compounds finally produced, are formed. causes

또한, 피부 내 생성된 갈색화합물의 최종당화산물(AGEs)이 축적될 경우 피부의 황색증가 및 얼룩을 유발하고, 멜라닌 생성을 촉진시키는 등 겉보기 노화에 관여하기 때문에 피부 항노화 대책으로 당화스트레스의 억제(항당화)를 의식하는 것이 중요하다. 당화반응은 고혈당을 가지는 당뇨환자에서 정상인보다 급격히 일어나지만 정상 혈당의 경우에도 노화가 진행됨에 따라 체내에서 일어나며, 구체적인 당화 대책으로는 식후 고혈당을 억제하고 당화반응을 억제하며 생성한 AGEs를 분해 배설하는 것 등이 있다.In addition, when advanced glycation end products (AGEs) of brown compounds produced in the skin accumulate, they cause yellowing and discoloration of the skin and promote melanin production, which is involved in apparent aging, so suppression of glycation stress as a countermeasure against skin aging. It is important to be conscious of (antiglycation). Glycation reaction occurs more rapidly in diabetic patients with hyperglycemia than in normal people, but even in normal blood sugar, it occurs in the body as aging progresses. things, etc.

또한, 최종당화산물(AGEs) 안에 가장 풍부하게 있는 카복시메칠라이신(carboxymethyl lysine, CML)은 당화 초기생성물의 산화적 분해반응에 의해 발생한다. I 형 콜라겐은 진피 안에서 가장 많은 단백질로 당화의 아주 좋은 표적이 된다. 당화스트레스로 인한 피부 콜라겐의 당화 발생시 콜라겐 단백질 변성 및 진피 내 CML 축적, 그리고 이미 생성된 최종당화산물(AGEs)과 가교결합 등의 반응이 지속됨에 따라 MMP-1(matrix metalloproteinase) 단백질 발현을 높게 유지시켜 콜라겐 분해를 촉진하여 피부의 유연성 및 탄력성이 감소되어 주름이 생성된다.In addition, carboxymethyl lysine (CML), which is most abundant in advanced glycation end products (AGEs), is generated by oxidative degradation of glycation initial products. Type I collagen is the most abundant protein in the dermis and is a very good target for glycation. When glycation occurs in skin collagen due to glycation stress, collagen protein denaturation, CML accumulation in the dermis, and reactions such as advanced glycation end products (AGEs) and crosslinking continue, maintaining high MMP-1 (matrix metalloproteinase) protein expression It promotes collagen decomposition, which reduces the flexibility and elasticity of the skin, resulting in wrinkles.

따라서, 상기 지면패랭이꽃 추출물은 피부 콜라겐 당화반응(collagen glycation)과 최종당화산물(advanced glycation end products, AGEs)의 생성을 억제시켜 피부노화 방지, 피부주름 방지, 피부주름 개선, 피부 톤 개선 및 피부모공 축소의 효과가 뛰어나다.Therefore, the dianthus extract inhibits skin collagen glycation and the production of advanced glycation end products (AGEs), thereby preventing skin aging, preventing skin wrinkles, improving skin wrinkles, improving skin tone, and improving skin pores The reduction effect is excellent.

상기 지면패랭이꽃 추출물은 상기 피부외용제 조성물 전체 중량에 대하여 0.0001 내지 30중량%로 포함될 수 있으며, 바람직하게는 0.001 내지 10중량%이고, 보다 바람직하게는 0.1 내지 5중량%이다.The dianthus extract may be included in an amount of 0.0001 to 30% by weight, preferably 0.001 to 10% by weight, and more preferably 0.1 to 5% by weight, based on the total weight of the composition for external application for skin.

상기 지면패랭이꽃 추출물의 함량이 0.0001중량% 미만이면 유효한 효과를 나타낼 수 없으며, 30중량%를 초과하면 변색, 변취 등 제형 안정성에 문제가 발생될 수 있다.If the content of the dianthus extract is less than 0.0001% by weight, an effective effect cannot be exhibited, and if it exceeds 30% by weight, problems with formulation stability such as discoloration and odor may occur.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 지면패랭이꽃 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 사용하여 당업계에 잘 알려진 통상적인 추출 방법에 의하여 추출할 수 있으며, 유기용매를 사용하여 추출하는 것이 바람직하다.In one embodiment of the present invention, the dianthus extract can be extracted by a conventional extraction method well known in the art using water, an organic solvent, or a mixture thereof, preferably using an organic solvent do.

상기 유기용매는 탄소수 1 내지 10의 무수 또는 함유 메탄올, 에탄올, 프로필 알코올, 부틸알코올, 글리세린, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상일 수 있다.The organic solvent may be at least one selected from the group consisting of methanol, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, glycerin, propylene glycol, and butylene glycol having 1 to 10 carbon atoms.

상기 추출물의 제조방법은 냉침 추출법, 온침 추출법 또는 열 추출법 등이 사용될 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파 분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다.A cold needle extraction method, a warm needle extraction method, or a heat extraction method may be used as the preparation method of the extract, and a conventional extractor, ultrasonic crusher, or fractionator may be used.

상기 제조된 추출물은 여과하거나 농축 또는 건조하여 용매를 제거할 수 있다. 상기 여과는 여과지를 이용하거나, 감압 여과기를 이용할 수 있으며, 상기 농축은 감압 농축기, 일 예로 회전 증발기를 이용하여 감압 농축할 수 있고, 상기 건조는 일 예로 동결 건조법으로 수행할 수 있다.The prepared extract may be filtered, concentrated, or dried to remove the solvent. The filtration may be performed using a filter paper or a vacuum filter, the concentration may be concentrated under reduced pressure using a vacuum concentrator, for example, a rotary evaporator, and the drying may be performed, for example, by a freeze-drying method.

본 발명에 있어서, 상기 추출물은 농축 또는 희석하여 사용할 수 있고, 추출물의 증류액을 사용할 수도 있다. In the present invention, the extract may be used after being concentrated or diluted, and a distillate of the extract may be used.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 피부외용제 조성물은 피부주름 방지용, 피부주름 개선용, 피부톤 개선용 또는 피부모공 축소용 조성물일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the composition for external application for skin may be a composition for preventing skin wrinkles, improving skin wrinkles, improving skin tone, or reducing skin pores.

상기 피부주름 방지, 피부주름 개선은 주름과 관련된 능력을 유지 또는 강화시키는 것을 의미하는 것으로, 콜라겐 당화반응을 감소시켜 효과적으로 최종당화산물의 생성을 억제하여 피부주름 등과 같은 피부노화 현상을 방지할 수 있으며, 상기 피부 톤 개선은 피부에서의 혈액의 순환을 돕고 피부 콜라겐 당화반응을 억제하여 투명하고, 균일한 피부 톤을 만들어 주는 것이다.The prevention of skin wrinkles and improvement of skin wrinkles means maintaining or strengthening wrinkle-related abilities, and by reducing the collagen glycation reaction, effectively inhibiting the production of advanced glycation end products, thereby preventing skin aging phenomena such as skin wrinkles, , The skin tone improvement is to help blood circulation in the skin and suppress skin collagen glycation reaction to create a transparent and uniform skin tone.

또한, 피부 모공이 넓어지는 원인은 피부에 탄력을 주고 지지대 역할을 하는 콜라겐과 엘라스틴의 힘이 떨어지게 되거나, 피부가 늘어져 모공이 커 보이는 것으로 피부 콜라겐 당화반응 억제 활성을 통해 피부 모공을 축소할 수 있다.In addition, the cause of widened skin pores is the decrease in the strength of collagen and elastin, which give elasticity to the skin and serve as a support, or the sagging skin causes pores to look large. .

또한, 본 발명에 따른 상기 피부외용제 조성물은 특히 프로콜라겐(procollagen) 증가, 콜라겐(collagen) 생합성 증가능을 가지고 있고 피부노화 방지, 피부주름 개선/방지용으로 적용될 수 있으며, 이외에도 미백, 모공수축, 피지억제, 항균, iNOS 억제 활성을 통한 항염, 피부염증 예방, 완화, 경감, 치료용으로 적용될 수 있다.In addition, the composition for external application for skin according to the present invention has an ability to increase procollagen and collagen biosynthesis, and can be applied for preventing skin aging and improving/preventing skin wrinkles. It can be applied for anti-inflammation through inhibitory, antibacterial, and iNOS inhibitory activities, prevention of skin inflammation, alleviation, alleviation, and treatment.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 피부외용제 조성물은 상기 지면패랭이꽃 추출물 이외에 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 폴리옥시에틸렌 경화피마자유, 에탄올, 트리에탄올아민 등을 포함할 수 있으며, 방부제, 향료, 착색료, 정제수 등을 필요에 따라 미량 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the composition for external application for skin may include glycerin, butylene glycol, propylene glycol, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, ethanol, triethanolamine, etc. in addition to the dianthus extract, preservatives, fragrances, A trace amount of coloring agent, purified water, etc. may be included as needed.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은, 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 화장수, 에센스, 젤, 에멀젼, 로션, 크림(수중유적형, 유중수적형, 다중상), 용액, 현탁액(무수 및 수계), 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 젤, 마스크, 팩, 분말, 또는 젤라틴 등의 피막이 있는 캅셀 (소프트 캅셀, 하드 캅셀), 연고, 패취, 파운데이션, 메이크업베이스, 자외선차단제, 입욕제, 비누, 액체 세정료, 분무제 제형 등의 형태로 제조될 수 있다.The composition for external application for skin according to the present invention may be prepared in various forms, such as lotion, essence, gel, emulsion, lotion, cream (oil-in-water type, water-in-oil type, multi-phase), solution, suspension (anhydrous and aqueous). ), anhydrous products (oil and glycol based), gels, masks, packs, powders, or capsules with gelatin coatings (soft capsules, hard capsules), ointments, patches, foundations, makeup bases, sunscreens, bath additives, soaps, It can be prepared in the form of a liquid detergent, a spray formulation, and the like.

본 발명에 있어서 피부는 얼굴뿐만 아니라, 두피, 전신도 포함되는 개념으로, 이러한 두피에 적용될 수 있는 피부 외용제 조성물로써, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 발모제 등이 있고, 전신에 적용될 수 있는 바디클렌져 등의 용도로써 다양한 형태로 제조될 수 있다.In the present invention, the skin is a concept that includes not only the face, but also the scalp and the whole body, and as a composition for external application for skin that can be applied to such a scalp, there are shampoo, rinse, treatment, hair growth agent, etc., body cleanser that can be applied to the whole body, etc. It can be manufactured in various forms for use.

본 발명에 있어서, 따른 상기 지면패랭이꽃 추출물을 포함하는 함유 피부 외용제 조성물의 제조방법은 전술한 제조방법에 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 제조방법을 일부 변형시킨 방법으로도 본 발명에 따른 지면패랭이꽃 추출물을 함유 피부 외용제 조성물을 제조할 수 있다. 특히, 상기 피부 외용제 조성물은 본 발명에 특별히 개시된 제조방법 이외에도, 통상적으로 알려진 제조방법을 이용하여, 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조될 수 있다. 화장료 조성물로 제조될 경우, 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다. 또한, 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과 학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소적용 또는 전신 적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있다.In the present invention, the manufacturing method of the composition for external application for skin containing the dianthus extract according to the present invention is not limited to the above-mentioned manufacturing method, and those skilled in the art to which the present invention belongs may partially use the above manufacturing method A composition for external application for skin containing the dianthus extract according to the present invention can also be prepared by a modified method. In particular, the composition for external application for skin may be prepared in the form of a general emulsified formulation and a solubilized formulation using a conventionally known manufacturing method in addition to the manufacturing method specifically disclosed in the present invention. When prepared as a cosmetic composition, emulsified cosmetics include nutritional lotion, cream, essence, etc., and solubilized cosmetics include softening lotion. In addition, by containing a dermatologically acceptable medium or base, it can be prepared in the form of an adjuvant that can be applied topically or systemically, which is commonly used in the field of dermatology.

또한, 적합한 화장품의 제형으로는, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.In addition, suitable cosmetic formulations include, for example, solutions, gels, solid or pasty anhydrous products, emulsions obtained by dispersing an oil phase in an aqueous phase, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes), nonionic It may be provided in the form of a vesicular dispersion of the type, cream, toner, lotion, powder, ointment, spray or conceal stick. In addition, it can be prepared in the form of a foam (foam) or the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.

또한, 본 발명의 피부 외용제 조성물은 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고, 상기의 성분들은 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.In addition, the composition for external application for skin of the present invention may further include a fatty substance, an organic solvent, a solubilizing agent, a thickening agent and a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, and an ion. type or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or any commonly used in cosmetics It may contain adjuvants commonly used in cosmetology or dermatology, such as other ingredients. In addition, the above ingredients may be introduced in an amount generally used in the field of dermatology.

본 발명에 있어서, 상기 지면패랭이꽃 추출물을 포함하는 피부외용제 조성물은 화장료 조성물 또는 약제학적 조성물일 수 있다.In the present invention, the composition for external application for skin containing the dianthus extract may be a cosmetic composition or a pharmaceutical composition.

상기 화장료 조성물에 있어서는, 화장품 제제에 있어서 수용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 여기서, 화장품 제제에 있어서 수용 가능한 담체란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다.In the cosmetic composition, a carrier acceptable for cosmetic formulations may be included. Here, an acceptable carrier in a cosmetic preparation is a compound or composition that is already known and used, or a compound or composition to be developed in the future, which can be included in a cosmetic preparation, and does not have toxicity, instability, or irritation that the human body can adapt to when in contact with the skin. say

상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. 상기 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선산란제, 자외선흡수제, 발색제, 향료로 사용될 수 있는 화합물/조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질/조성물을 선택하여 사용할 수 있다.Alcohols, oils, surfactants, fatty acids, silicone oils, wetting agents, humectants, viscosity modifiers, emulsions, stabilizers, UV scattering agents, UV absorbers, coloring agents, perfumes, and the like may be exemplified as the carrier. Compounds/compositions that can be used as the alcohol, oil, surfactant, fatty acid, silicone oil, wetting agent, humectant, viscosity modifier, emulsion, stabilizer, UV scattering agent, UV absorber, coloring agent, fragrance, etc. are already known in the art. Since there is, those skilled in the art can select and use an appropriate corresponding material / composition.

상기 약제학적 조성물은 피부질환 치료, 상처치유 및 피부재생용 조성물로써, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투여형 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The pharmaceutical composition is a composition for skin disease treatment, wound healing and skin regeneration, and may be a transdermal dosage form such as lotion, ointment, gel, cream, patch or spray, but is not limited thereto.

이하, 하기 구체예들을 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하지만, 이는 본 발명의 예시일 뿐 본 발명의 권리범위가 이에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through the following specific examples, but this is only an example of the present invention and the scope of the present invention is not limited thereto.

[[ 제조예manufacturing example ] 지면패랭이꽃 추출물 제조] Production of ground dianthus extract

지면패랭이꽃 전초 100 g을 수거하여 70% 에탄올 수용액 5 L를 넣고 실온에서 48시간 동안 냉침한 후 여과 및 감압 농축하여 추출물 15 g을 얻었다. 세포 실험을 진행하기 위해 추출물을 DMSO (Dimethyl sulfoxide)에 녹여 시료를 제조하였다.100 g of ground dianthus spruce was collected, put in 5 L of 70% ethanol aqueous solution, cooled at room temperature for 48 hours, filtered, and concentrated under reduced pressure to obtain 15 g of an extract. To conduct cell experiments, samples were prepared by dissolving the extract in DMSO (Dimethyl sulfoxide).

[[ 시험예test example 1] 지면패랭이꽃 추출물의 항산화력 측정 1] Measurement of antioxidant activity of dianthus extract

[[ 시험예test example 1-1] 총 폴리페놀( 1-1] total polyphenols ( polyphenolpolyphenol )함량 측정) content measurement

폴리페놀은 몸에 있는 활성산소를 해가 없는 물질로 바꿔주는 항산화물질 중 하나이다. 본 발명의 지면패랭이꽃 추출물의 총 폴리페놀 함량을 측정하기 위하여 폴린-데니스(Folin-Denis)법을 일부 변형하여 폴린-시약(Folin-reagent)이 추출물의 페놀성 화합물에 의해 환원되면 몰리브덴(molybdenum)의 청색으로 발색되는 원리를 이용하여 정량하였다. 지면패랭이꽃 추출물(1 mg/ml) 100 ㎕에 폴린-시오칼토 시약(folin-ciocalteu reagent) 200 ㎕을 가한 후 700 mM Na2CO3용액 800 ㎕를 혼합하고 실온에서 40분 방치한 후 microplate reader를 이용하여 750 nm에서 흡광도를 측정하였다. 칼릭 산(Gallic acid, sigma)를 표준물질로 사용하여 0~500 μg/ml 농도로 제조한 후 시료와 동일한 방법으로 분석하여 얻은 표준검량 선으로부터 지면패랭이꽃 추출물의 폴리페놀 함량을 분석하고, 그 결과를 갈릭산 당량 (GAE, gallic acid equivalents)으로 하기 표 1에 나타내었다.Polyphenols are one of the antioxidants that convert free radicals in the body into harmless substances. In order to measure the total polyphenol content of the dianthus extract of the present invention, the Folin-Denis method was partially modified to obtain molybdenum when the Folin-reagent was reduced by the phenolic compound of the extract. It was quantified using the principle of developing blue color. After adding 200 μl of Folin-ciocalteu reagent to 100 μl of dianthus extract (1 mg/ml), 800 μl of 700 mM Na 2 CO 3 solution was mixed, left at room temperature for 40 minutes, and microplate reader was used. Absorbance was measured at 750 nm using Using gallic acid (sigma) as a standard material, it was prepared at a concentration of 0 to 500 μg/ml, and then analyzed in the same way as the sample, and the polyphenol content of the dianthus extract was analyzed from the standard calibration curve obtained, and the result It is shown in Table 1 below in terms of gallic acid equivalents (GAE).

시험물질test substance 총 폴리페놀 함량
(μg GAE/mg 지면패랭이꽃 추출물)
Total polyphenol content
(μg GAE/mg ground dianthus extract)
지면패랭이꽃 추출물ground dianthus extract 205.98205.98

표 1에서 나타나는 바와 같이, 1 mg의 지면패랭이꽃 추출물은 폴리페놀을 총 205.98 μg을 함유하고 있어 지면패랭이꽃의 총 폴리페놀 함량이 매우 높음을 알 수 있다.As shown in Table 1, 1 mg of the ground dianthus extract contained a total of 205.98 μg of polyphenols, indicating that the total polyphenol content of the ground dianthus was very high.

[[ 시험예test example 1-2] 1-2] DPPHDPPH 항산화 효과 측정 Antioxidant effect measurement

DPPH(1,1-diphenyl-2-picrydrazyl) 법에 의한 항산화 활성을 측정하였다. DPPH법은 DPPH라는 유리기를 사용하여 환원력에 의한 자유라디칼 소거활성을 측정하는 것이다.Antioxidant activity was measured by DPPH (1,1-diphenyl-2-picrydrazyl) method. The DPPH method measures free radical scavenging activity by reducing power using a free group called DPPH.

96-웰 플레이트(well-plate)에 연속희석법(serial dilution)으로 각 시료 50 ㎕를 넣은 후, 0.2 mM DPPH(Sigma, St. Louis, USA) 용액 100 ㎕를 첨가하여 30분간 반응을 시켰다. 시료에 의해 DPPH가 환원되어 흡광도가 감소하는 정도를 대조군의 흡광도와 비교하여 파장 517 nm에서 자유라디칼 소거율을 측정하였고, 그 결과를 표 1에 나타내었다.After putting 50 μl of each sample in a 96-well plate by serial dilution, 100 μl of 0.2 mM DPPH (Sigma, St. Louis, USA) solution was added and reacted for 30 minutes. The degree of decrease in absorbance due to the reduction of DPPH by the sample was compared with the absorbance of the control group to measure the free radical scavenging rate at a wavelength of 517 nm, and the results are shown in Table 1.

자유라디칼 소거활성(scavenging activity, %)은 다음의 수학식 1로 산출하였다.Free radical scavenging activity (scavenging activity, %) was calculated by Equation 1 below.

<수학식 1><Equation 1>

자유라디칼 소거활성 (%) = (A - B) / A X 100Free radical scavenging activity (%) = (A - B) / A X 100

A : 시료를 처리하지 않은 대조군의 흡광도A: Absorbance of the control group not treated with the sample

B : 시료를 처리한 시험군의 흡광도B: Absorbance of the test group treated with the sample

자유라디칼 소거활성이 50% 감소하는데 필요한 시료의 농도를 SC 50으로 나타냈다.The concentration of the sample required to reduce the free radical scavenging activity by 50% was expressed as SC 50.

시험물질test substance DPPH radical SC 50(ppm)DPPH radical SC 50 (ppm) 지면패랭이꽃 추출물ground dianthus extract 64.0264.02 비타민 Cvitamin C 13.7513.75

상기 표 2에서 볼 수 있는 바와 같이, 지면패랭이꽃 추출물은 항산화 실험에서 대조군으로 사용된 대표적인 항산화 물질인 비타민 C의 20% 수준의 우수한 항산화 효과를 나타내었다.As can be seen in Table 2, the dianthus extract exhibited an excellent antioxidant effect at a level of 20% of vitamin C, a representative antioxidant used as a control in the antioxidant experiment.

[[ 시험예test example 2] 단백질 2] protein 당화glycosylation (protein (protein glycationglycation ) 반응 저해 효과 측정) measure the reaction inhibition effect

우혈청 알부민(bovine serum albumin, BSA; Sigma, St. Louis, USA)을 반응 기질로 하여 당화 반응을 수행하고 형광 변화 정도를 측정함으로써 각 시료의 단백질 당화 반응 저해 효과를 측정하였다.A glycosylation reaction was performed using bovine serum albumin (BSA; Sigma, St. Louis, USA) as a reaction substrate, and the degree of fluorescence change was measured to measure the protein glycosylation inhibitory effect of each sample.

우선 글리옥살(glyoxal) 용액(100 mM) 0.4 ml과 PBS buffer (pH 7.4)에 희석한 500 ppm 농도의 각 시료 용액 0.4 ml을 첨가하여 37℃에서 2시간동안 반응시킨 후, 0.2 ml BSA 용액 (20 mg/ml)을 넣어 추가로 48시간동안 같은 온도에서 반응시켰다. 또한 0.02% 소디움 아자이드(sodium azide)를 넣어 반응기간 동안 미생물의 오염을 방지하였다. 각 시료에 의한 형광도의 간섭을 배제하기 위하여 BSA를 처리하지 않은 시료 처리군도 함께 제조하여 같은 기간 반응시켰다. 시료의 경우 당화반응이 일어나지 않은 각 시료의 형광도를 배제한 값을 사용하였다. 양성대조군으로는 아미노구아니딘 염산염(aminoguanidine-HCl)을 사용하였고, 반응 후 Victor X2 형광분광분석기(Perkin Elmer Inc.)를 이용하여 들뜸파장(Ex: Excitation wavelength) 355 nm, 방출파장(Em: Emission wavelength) 485 nm로 조정하여 형광도를 측정하였다.First, 0.4 ml of glyoxal solution (100 mM) and 0.4 ml of each sample solution at a concentration of 500 ppm diluted in PBS buffer (pH 7.4) were added and reacted at 37 ° C for 2 hours, followed by 0.2 ml BSA solution ( 20 mg/ml) and reacted at the same temperature for an additional 48 hours. In addition, 0.02% sodium azide was added to prevent microbial contamination during the reaction period. In order to exclude the interference of fluorescence by each sample, a sample treatment group not treated with BSA was also prepared and reacted for the same period. In the case of the sample, the value obtained by excluding the fluorescence of each sample in which no glycation reaction occurred was used. As a positive control, aminoguanidine hydrochloride (aminoguanidine-HCl) was used, and after the reaction, using a Victor X2 fluorescence spectrometer (Perkin Elmer Inc.), excitation wavelength (Ex: Excitation wavelength) 355 nm, emission wavelength (Em: Emission wavelength) ) at 485 nm to measure fluorescence.

최종당화산물 생성 저해율은 다음의 수학식 2로 산출하였다.The rate of inhibition of the formation of advanced glycation end products was calculated by Equation 2 below.

<수학식 2><Equation 2>

최종당화산물 생성 저해율 (%) = 100- {(샘플처리군-블랭크값)/(음성대조군-블랭크값)}X100Final glycation product production inhibition rate (%) = 100 - {(sample treatment group-blank value)/(negative control group-blank value)}X100

시료sample 농도(ppm)Concentration (ppm) 최종당화산물 생성 저해율(%)Inhibition rate of advanced glycation products (%) 무처리군untreated group -- 00 아미노구아니딘 염산염
(Aminoguanidine HCl)
(양성대조군)
aminoguanidine hydrochloride
(Aminoguanidine HCl)
(positive control group)
500 500 64.564.5
지면패랭이꽃 추출물ground dianthus extract 500500 73.7173.71

상기 표 3에서 알 수 있는 바와 같이, 500 ppm의 지면패랭이꽃 추출물에서 73.71%의 최종당화산물 생성 저해율이 확인되어 같은 농도의 아미노구아니딘 염산염을 처리하였을 때보다 훨씬 우수한 당화반응 억제효과를 나타내었다.As can be seen in Table 3, 500 ppm of Dianthus dianthus extract showed a 73.71% inhibition rate of advanced glycation end products, showing a much better saccharification inhibitory effect than when treated with the same concentration of aminoguanidine hydrochloride.

[[ 시험예test example 3] 지면패랭이꽃 추출물의 피부 섬유아세포 생존율 측정 3] Measurement of skin fibroblast survival rate of dianthus extract

본 발명의 지면패랭이꽃 추출물의 인간 정상 피부 섬유아세포(CCD-986sk)에 대한 세포독성을 측정하기 위해 세포를 1X104 cells/well 농도로 96-well plate에 분주한 후 37℃, 5% CO2 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양배지를 제거 후 무혈청배지에 희석한 25~200 ppm 농도의 지면패랭이꽃 추출물을 세포에 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 배양 후, 세포 생존율을 확인하기 위하여 배양배지를 제거 후 각 well 당 0.5 mg/ml 농도의 MTT용액 200 ㎕를 처리하여 3시간동안 반응시켰다. 생성된 포마잔(formazan)을 DMSO 100 ㎕로 용해시켜 micro-plate reader를 이용하여 540 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 정상 대조군으로는 추출물을 처리하지 않은 well의 세포 생존율을 100%으로 하여 지면패랭이꽃 추출물 처리군의 세포 생존율을 수학식 3에 따라 계산하여 산출한 결과를 도 1에 나타내었다.In order to measure the cytotoxicity of the dianthus extract of the present invention on human normal skin fibroblasts (CCD-986sk), the cells were dispensed into a 96-well plate at a concentration of 1X10 4 cells/well, and then 37°C, 5% CO 2 conditions incubated for 24 hours. After removing the culture medium, the cells were treated with dianthus extract at a concentration of 25 to 200 ppm diluted in serum-free medium and further cultured for 24 hours. After culturing, in order to check the cell viability, the culture medium was removed, and 200 μl of MTT solution at a concentration of 0.5 mg/ml per well was treated and allowed to react for 3 hours. The resulting formazan was dissolved in 100 μl of DMSO, and absorbance was measured at a wavelength of 540 nm using a micro-plate reader. As the normal control group, the cell viability of the wells not treated with the extract was set to 100%, and the cell viability of the dianthus extract-treated group was calculated according to Equation 3, and the results are shown in FIG. 1.

<수학식 3><Equation 3>

섬유아세포 생존율(%) = (A/B) X 100Fibroblast viability (%) = (A/B) X 100

A: 시료를 처리한 시험군의 흡광도A: Absorbance of the test group treated with the sample

B: 시료를 처리하지 않은 대조군의 흡광도B: Absorbance of the control group not treated with the sample

도 1에 나타낸 바와 같이, 지면패랭이꽃 추출물을 25~200 ppm 처리하였을 때 피부 섬유아세포의 독성은 보이지 않았으며, 추출물을 처리시 정상 대조군보다 더 높은 세포 생존률을 보이는 것으로 확인되었다. 따라서, 본 발명에 따른 지면패랭이꽃 추출물은 200 ppm 농도까지는 세포 독성이 없어 안전한 것으로 확인되었으며, 피부 섬유아세포의 증식 촉진제로서 우수한 활성을 나타냄을 확인하였다. As shown in FIG. 1, when the dianthus extract was treated at 25 to 200 ppm, toxicity of skin fibroblasts was not observed, and when the extract was treated, it was confirmed that the cell viability was higher than that of the normal control group. Therefore, it was confirmed that the dianthus extract according to the present invention was safe as it had no cytotoxicity up to a concentration of 200 ppm, and exhibited excellent activity as a proliferation promoter of skin fibroblasts.

[[ 시험예test example 4] 4] 당화스트레스에in glycation stress 의한 콜라겐 Collagen by 당화glycosylation 저해 효과 측정 Inhibition effect measurement

시험예 3과 같은 방법으로 세포 분주를 하여 24시간 배양을 한 뒤, 배양배지를 제거 후 무혈청배지에 희석한 10, 25, 50 ppm 농도의 지면패랭이꽃 추출물을 세포에 처리하여 24시간 동안 추가 배양하였다. 24시간 후, 무혈청배지에 희석한 0.5 mM의 글리옥살(glyoxal)을 48시간 처리하여 세포에 당화스트레스를 유발하였다. 48시간 반응이 끝난 후, 각 웰의 상층액을 모아 Human pro-collagen 1 alpha 1 분석 키트 (R&D system, DY6220-05)를 이용하여 상층액의 프로콜라겐 함량(pg/ml)을 측정하였다. 지면패랭이꽃 추출물을 처리시 콜라겐 당화 억제로 인한 콜라겐 회복률(%)을 구하기 위해 정상 대조군으로는 시료와 글리옥살을 처리하지 않은 well의 상층액 내 콜라겐 함량을 100%으로 하여 정상 대조군 대비 글리옥살만 처리군 (음성대조군)과 시료 및 글리옥살 처리군의 콜라겐 생성률(%)을 계산하여 결과를 표 4에 나타내었다.After dividing the cells in the same way as in Test Example 3 and incubating for 24 hours, the culture medium was removed, and then the cells were treated with dianthus extract at concentrations of 10, 25, and 50 ppm diluted in serum-free medium and further cultured for 24 hours did After 24 hours, glycation stress was induced in the cells by treatment with 0.5 mM glyoxal diluted in serum-free medium for 48 hours. After 48 hours of reaction, the supernatant of each well was collected and the procollagen content (pg/ml) of the supernatant was measured using a Human pro-collagen 1 alpha 1 assay kit (R&D system, DY6220-05). In order to obtain the collagen recovery rate (%) due to inhibition of collagen glycation when treated with Dianthus extract, only glyoxal was treated as a normal control group by setting the collagen content in the supernatant of the sample and the supernatant of the wells not treated with glyoxal to 100% as a normal control group. The results are shown in Table 4 by calculating the collagen production rate (%) of the group (negative control group), the sample and the glyoxal-treated group.

  시료sample 농도(ppm)Concentration (ppm) 정상대조군 대비
콜라겐 생성률(%)
Compared to the normal control group
Collagen production rate (%)
음성대조군 대비
콜라겐 생성 회복률(%)
Compared to the negative control group
Collagen production recovery rate (%)
정상대조군normal control group - - 100100 - - 글리옥살
(glyoxal)
0.5 mM
glyoxal
(glyoxal)
0.5 mM
음성대조군negative control group - - 68.4268.42 00
지면패랭이꽃
추출물
ground dianthus
extract
1010 70.8170.81 3.493.49
2525 76.3276.32 11.5511.55 5050 79.2579.25 15.8215.82

표 4에서 알 수 있는 바와 같이, 음성대조군에서 정상대조군 대비 68.42%의 콜라겐 생성률을 보여 세포에 당화스트레스를 유도시 콜라겐 생합성 저해 및 콜라겐 당화가 일어나는 것을 확인하였다. 한편 지면패랭이꽃 추출물을 10, 25, 50 ppm 농도로 선처리후 당화스트레스를 유도시 농도의존적으로 음성대조군 대비 콜라겐 생성률이 증가하였으며, 이에 따라 콜라겐 생성 회복률 또한 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다. 상기 결과에 따라, 지면패랭이꽃 추출물은 우수한 피부 콜라겐 당화 억제 활성을 나타냄을 확인하였다. As can be seen in Table 4, the negative control group showed a collagen production rate of 68.42% compared to the normal control group, and it was confirmed that collagen biosynthesis inhibition and collagen glycation occurred when glycation stress was induced in the cells. On the other hand, when glycation stress was induced after pretreatment with 10, 25, and 50 ppm concentrations of Dianthus dianthus extract, the collagen production rate was increased in a concentration-dependent manner compared to the negative control group, and accordingly, it was confirmed that the recovery rate of collagen production was also significantly increased. According to the above results, it was confirmed that the dianthus extract exhibited excellent skin collagen glycation inhibitory activity.

또한, 표 4에는 명시하지 않았지만 0.5 mM의 글리옥살(glyoxal)을 48시간 처리시 정상대조군 대비 90% 이상의 세포 생존율을 확인하여 세포 사멸에 크게 영향을 미치지 않은 글리옥살 농도 내에서 세포에 당화스트레스를 유발하였다.In addition, although not shown in Table 4, when 0.5 mM glyoxal was treated for 48 hours, cell viability was confirmed to be more than 90% compared to the normal control group. caused

[[ 시험예test example 5] 5] 당화스트레스에in glycation stress 의한 섬유아세포 내 in fibroblasts by carboxymethylcarboxymethyl lysine( lysine ( CMLCML ) 생성 저해효과 측정) Measurement of production inhibition effect

본 발명의 지면패랭이꽃 추출물의 피부 섬유아세포 내 최종당화산물인 CML의 생성 저해효과를 측정하기 위해 세포를 4x105 cells/well 농도로 100 mm dish에 분주한 후 37℃, 5% CO2 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양배지를 제거 후 무혈청배지에 희석한 50, 100 ppm 농도의 지면패랭이꽃 추출물과 10 ppm 농도의 아미노구아니딘 염산염을 세포에 처리하여 24시간 추가 배양하였다. 24시간 후, 무혈청배지에 희석한 0.5 mM의 글리옥살(glyoxal)을 72시간 처리하여 세포에 당화스트레스를 유발하였다. 72시간 반응이 끝난 세포는 PBS buffer로 2회 세척한 후 RIPA lysis buffer를 첨가하고 4℃에서 5분간 lysis 시킨 후 12,000 rpm에서 10분간 원심분리하였다. 상층액을 취하여 동일하게 단백질 정량한 후 CML competitive ELISA kit (Cell biolabs, STA-816)를 이용하여 상층액의 CML 함량(μg/ml)을 측정하였다. 지면패랭이꽃 추출물 처리시 피부 섬유아세포 당화 억제로 인한 세포 내 CML 생성 억제 정도를 확인하기 위해 글리옥살만 처리한 음성 대조군의 CML 함량을 100%으로 하여, 음성 대조군 대비 정상 대조군(시료와 글리옥살 무첨가)과 지면패랭이꽃 추출물 및 아미노구아니딘 염산염 처리군의 CML 생성률(%)을 계산하여 결과를 도 2에 나타내었다.In order to measure the effect of the dianthus extract of the present invention on the production of CML, the final glycation product in skin fibroblasts, the cells were dispensed into a 100 mm dish at a concentration of 4x10 5 cells/well, and then incubated at 37°C and 5% CO 2 for 24 hours. incubated for hours. After removing the culture medium, the cells were treated with 50 and 100 ppm dianthus extract diluted in serum-free medium and aminoguanidine hydrochloride at 10 ppm concentration, and further cultured for 24 hours. After 24 hours, glycation stress was induced in the cells by treatment with 0.5 mM glyoxal diluted in serum-free medium for 72 hours. Cells after 72 hours of reaction were washed twice with PBS buffer, RIPA lysis buffer was added, lysed at 4°C for 5 minutes, and then centrifuged at 12,000 rpm for 10 minutes. After taking the supernatant and quantifying the protein in the same way, the CML content (μg/ml) of the supernatant was measured using a CML competitive ELISA kit (Cell biolabs, STA-816). In order to confirm the degree of inhibition of intracellular CML production due to inhibition of glycation in skin fibroblasts when treated with ground dianthus extract, the CML content of the negative control group treated with only glyoxal was 100%, and the normal control group compared to the negative control group (no sample and glyoxal added) The CML production rate (%) of the dianthus extract and aminoguanidine hydrochloride treatment group was calculated and the results are shown in FIG. 2 .

도 2에 나타낸 바와 같이, 지면패랭이꽃 추출물을 50, 100 ppm 처리하였을 때 음성 대조군 대비 CML 생성률이 각각 12.38%, 38.26%씩 억제되는 것을 확인하였다. 아미노구아니딘 염산염은 농도 별로 24시간 처리하였을 때 10 ppm까지 세포 독성을 보이지 않아 해당 농도를 세포에 처리하였으며, CML 생성률이 23.03% 억제되는 것을 확인하였다. 같은 농도에서는 아미노구아니딘 염산염의 세포 내 CML 생성 억제 정도가 지면패랭이꽃 추출물보다 높다고 볼 수 있지만, 세포 독성이 나타나지 않은 농도 범위 한에서는 지면패랭이꽃 추출물이 100 ppm에서 최고 38.26%으로 아미노구아니딘 염산염보다 높은 CML 생성 억제 정도를 보임으로써 훨씬 안전하면서 피부 세포 당화 억제 효과가 우수한 것을 확인하였다.As shown in FIG. 2, it was confirmed that when the dianthus extract was treated with 50 and 100 ppm, the CML production rate was inhibited by 12.38% and 38.26%, respectively, compared to the negative control group. Aminoguanidine hydrochloride showed no cytotoxicity up to 10 ppm when treated for 24 hours at each concentration, so the cells were treated with the corresponding concentration, and it was confirmed that the CML production rate was inhibited by 23.03%. At the same concentration, the degree of inhibition of intracellular CML production by aminoguanidine hydrochloride is higher than that of dianthus extract, but within the concentration range where cytotoxicity is not observed, dianthus extract inhibits CML production higher than aminoguanidine hydrochloride by up to 38.26% at 100 ppm. By showing the degree, it was confirmed that it was much safer and had an excellent effect of inhibiting skin cell glycation.

상기 시험 결과에 따르면, 본 발명에 따른 지면패랭이꽃 추출물을 처리시 항산화 활성, 콜라겐 당화 억제, 그리고 최종당화산물 생성 억제하는 효과가 있음을 확인하였다. 특히 단백질 당화 억제제로 알려져 있는 아미노구아니딘 염산염보다 당화 억제효과가 현저하게 좋은 것을 확인하여 본 발명에 따른 조성물은 피부 내 당화스트레스로 유도된 피부노화, 주름 및 피부 투명감 저하를 효과적으로 개선시킬 수 있다.According to the above test results, it was confirmed that the treatment of the dianthus extract according to the present invention had effects of antioxidant activity, inhibition of collagen glycation, and inhibition of the production of advanced glycation products. In particular, it was confirmed that the glycation inhibitory effect was significantly better than that of aminoguanidine hydrochloride, which is known as a protein glycation inhibitor, so that the composition according to the present invention can effectively improve skin aging, wrinkles, and reduced skin clarity induced by glycation stress in the skin.

이하, 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여, 지면패랭이꽃 추출물 추출물을 이용한 여러 제형예를 조성하여 제시한다. 그러나 이들 제형예는 본 발명을 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 제형이 이들 제형예에만 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진자에게 있어서 자명한 것이다.Hereinafter, based on the results of the above experimental examples, various formulation examples using the extract of dianthus dianthus were formulated and presented. However, these formulation examples are for explaining the present invention, and it is obvious to those skilled in the art that the formulation of the present invention is not limited to these formulation examples.

<< 제형예formulation example 1> 유연 화장수(skin toner) 1> Soft skin toner 성분명ingredient name 함량 (중량%)Content (% by weight) 지면패랭이꽃 추출물ground dianthus extract 1.01.0 글리세린glycerin 5.05.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 에탄올ethanol 5.05.0 폴리옥시에틸렌노닐페닐에테르Polyoxyethylene nonylphenyl ether 0.50.5 향료Spices 적량Appropriate amount 방부제antiseptic 적량Appropriate amount 정제수Purified water 잔량balance

<< 제형예formulation example 2> 수렴 화장수(astringent) 2> Astringent 성분명ingredient name 함량 (중량%)Content (% by weight) 지면패랭이꽃 추출물ground dianthus extract 1.01.0 글리세린glycerin 3.03.0 구연산citric acid 0.10.1 에탄올ethanol 10.010.0 폴리옥시에틸렌올레일에테르Polyoxyethylene oleyl ether 1.01.0 소르비톨sorbitol 2.02.0 향료Spices 적량Appropriate amount 벙부제Bungbuje 적량Appropriate amount 정제수Purified water 잔량balance

<< 제형예formulation example 3> 로션(emulsion) 3> Emulsion 성분명ingredient name 함량 (중량%)Content (% by weight) 지면패랭이꽃 추출물ground dianthus extract 1.01.0 글리세린glycerin 5.05.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 8.08.0 스쿠알란squalane 10.010.0 모노올레인산폴리옥시에틸렌소르비탄Polyoxyethylene sorbitan monooleate 2.02.0 트리에탄올아민triethanolamine 1.51.5 글리세릴스테아레이트Glyceryl Stearate 0.50.5 스테아릴글리시레티네이트Stearyl Glycyrrhetinate 0.20.2 카르복시비닐폴리머carboxyvinyl polymer 0.10.1 아르기닌arginine 0.10.1 향료Spices 적량Appropriate amount 방부제antiseptic 적량Appropriate amount 정제수Purified water 잔량balance

<< 제형예formulation example 4> 크림(cream) 4> cream 성분명ingredient name 함량 (중량%)Content (% by weight) 지면패랭이꽃 추출물ground dianthus extract 1.01.0 글리세린glycerin 5.05.0 스테아린산stearic acid 8.08.0 스쿠알란squalane 5.05.0 자기유화형 모노스테아린산 글리세린Self-Emulsifying Glycerin Monostearate 2.52.5 모노스테아린산 폴리옥시에틸렌 소르비탄Polyoxyethylene Sorbitan Monostearate 1.51.5 프로필렌 글리콜propylene glycol 4.04.0 스테아릴글리시레티네이트Stearyl Glycyrrhetinate 0.20.2 바셀린vaseline 2.02.0 산화방지제antioxidant 적량Appropriate amount 향료Spices 적량Appropriate amount 방부제antiseptic 적량Appropriate amount 정제수Purified water 잔량balance

<< 제형예formulation example 5> 연고제(ointment) 5> ointment 성분명ingredient name 함량 (중량%)Content (% by weight) 지면패랭이꽃 추출물ground dianthus extract 1.01.0 세토스테아릴알코올Cetostearyl Alcohol 2.02.0 자기유화형 모노스테아린산Self-emulsifying monostearic acid 2.02.0 스테아린산stearic acid 1.01.0 밀랍wax 4.04.0 스쿠알란squalane 7.07.0 모노스테아린산 글리세린Glycerin Monostearate 3.03.0 모노스테아린산 소르비탄Sorbitan Monostearate 1.01.0 폴리솔베이트 80Polysorbate 80 3.03.0 글리세린glycerin 5.05.0 프로필렌글리콜propylene glycol 4.04.0 향료Spices 적량Appropriate amount 바셀린vaseline 잔량balance

Claims (10)

지면패랭이꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 항노화용 피부외용제 조성물이고,
상기 항노화용 피부외용제 조성물은 피부주름 방지용, 피부주름 개선용, 피부톤 개선용 또는 피부모공 축소용 조성물인 것을 특징으로 하는 항노화용 피부외용제 조성물.
A composition for external application for skin for anti-aging comprising an extract of Dianthus dianthus as an active ingredient,
The composition for external application for skin for anti-aging, characterized in that the composition for preventing skin wrinkles, improving skin wrinkles, improving skin tone or shrinking skin pores.
제1항에 있어서,
상기 지면패랭이꽃 추출물은 상기 지면패랭이꽃의 잎, 꽃, 열매, 줄기, 뿌리 및 종자로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추출물인 것을 특징으로 하는 항노화용 피부외용제 조성물.
According to claim 1,
The ground dianthus extract is an anti-aging composition for external application for skin, characterized in that at least one extract selected from the group consisting of leaves, flowers, fruits, stems, roots and seeds of the ground dianthus.
제1항에 있어서,
상기 지면패랭이꽃 추출물은 피부 콜라겐 당화반응(collagen glycation) 및 최종당화산물(advanced glycation end products, AGEs)의 생성을 억제시키는 것을 특징으로 하는 항노화용 피부외용제 조성물.
According to claim 1,
The dianthus extract is an anti-aging composition for external application for skin, characterized in that it inhibits the production of skin collagen glycation and advanced glycation end products (AGEs).
제1항에 있어서,
상기 지면패랭이꽃 추출물은 상기 피부외용제 전체 중량에 대하여 0.0001 내지 30중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 항노화용 피부외용제 조성물.
According to claim 1,
The dianthus extract is an anti-aging composition for external application for skin, characterized in that it is included in 0.0001 to 30% by weight based on the total weight of the external application for skin.
제1항에 있어서,
상기 지면패랭이꽃 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물로 추출되는 것을 특징으로 하는 항노화용 피부외용제 조성물.
According to claim 1,
The dianthus extract is an anti-aging composition for external application for skin, characterized in that extracted with water, an organic solvent or a mixture thereof.
제5항에 있어서,
상기 유기용매는 탄소수 1 내지 10의 무수 또는 함유 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 글리세린, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 항노화용 피부외용제 조성물.
According to claim 5,
The organic solvent is an anti-aging composition for external application for skin, characterized in that at least one selected from the group consisting of methanol, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, glycerin, propylene glycol and butylene glycol containing anhydrous or containing 1 to 10 carbon atoms.
삭제delete 제1항에 있어서,
상기 항노화용 피부외용제 조성물은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 연고, 패취, 파운데이션, 메이크업베이스, 자외선차단제, 입욕제, 비누, 액체 세정료 및 분무제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 제형인 것을 특징으로 하는 항노화용 피부 외용제 조성물.
According to claim 1,
The composition for external skin application for anti-aging is one or more formulations selected from the group consisting of lotion, essence, lotion, cream, pack, gel, ointment, patch, foundation, makeup base, sunscreen, bath agent, soap, liquid cleanser and spray A composition for external application for skin for anti-aging, characterized in that.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 지면패랭이꽃 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
A cosmetic composition comprising the dianthus extract of any one of claims 1 to 5.
삭제delete
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