KR102488851B1 - 동백나무 하이드로알코올 추출물 및 이를 포함하는 화장품 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 동백꽃의 분말을 하이드로알코올성 용매로 추출하여 얻은 동백 추출물 및 특히 피부 진정 효과가 있는 이러한 추출물을 포함하는 화장품 조성물에 관한 것이다.

Description

동백나무 하이드로알코올 추출물 및 이를 포함하는 화장품 조성물{HYDROALCOHOLIC EXTRACT OF CAMELLIA JAPONICA AND COSMETIC COMPOSITIONS COMPRISING IT}

본 발명의 목적은 인간 피부의 염증을 진정 및/또는 감소시키기 위해 오일 기반 추출로 전처리한 동백꽃의 하이드로알코올성 용매로 추출하여 얻을 수 있는 것을 특징으로 하는 동백꽃 추출물뿐만 아니라 화장품에서 상기 추출물의 용도이다.

피부는 환경에 대한 신체의 첫 번째 보호 장벽이다. 따라서 불편한 피부 반응 또는 매우 강렬하거나 더 심각한 반응의 경우 피부의 자극 및/또는 염증 현상을 일으킬 수 있는 수많은 외부 공격을 겪는다.

불편한 피부 반응 또는 대안적으로 피부의 자극 및/또는 염증 반응은 특히 클렌저와 같은 화학 제품과의 접촉에 의해 유발되거나 면도, 각질 제거, 필링, 제모와 같은 기계적 작용으로 인해 발생할 수 있다. 이들은 온도, 기후, 자외선 또는 대기 오염의 결과일 수도 있다.

화장품 분야에서는 항상 새로운 진정제가 필요하다. 또한 피부과 분야에서 피부 자극 및/또는 염증 반응을 치료 및/또는 감소시킬 수 있는 신규 제제에 대한 요구가 존재한다.

따라서, 본 발명의 목적은 특정 방법에 의해 수득되고 진정 및 항염증 미용 특성을 갖는 신규한 동백 추출물을 제안하는 것이다.

본 출원인은 국제 출원 WO2011/083110에서 피부 건조를 효과적으로 방지하기 위해 동백나무의 하이드로알코올 추출물의 구현을 이미 제안하였다. 실제로, 이 출원에서, 얻어진 동백나무의 하이드로알코올 추출물은 HSP32 mRNA의 발현을 자극하고, HSP27 단백질의 발현을 자극하고, 처리된 각질형성세포(keratinocyte)에서 PPAR-β/δ 단백질의 발현을 자극함으로써 작용한다.

그러나, 이러한 추출물은 정상적인 인간 각질형성세포의 염증-관련 경로에 관여하는 유전자에 작용하지 않아, 피부 염증을 감소시키거나 진정제 역할을 하지 않는다.

따라서 현재 시장에 나와 있는 동백꽃 추출물에 대해 알려지지 않은 피부 진정 특성을 가지고 있으며 정상적인 인간 각질형성세포에서 염증-관련 경로에 관여하는 유전자의 발현을 억제함으로써 피부에 대한 항염증 효과가 있는 새로운 동백꽃 하이드로알코올 추출물을 제조하기 위한 특정 방법을 개발한 것은 출원인의 영예이다.

따라서, 본 발명의 목적은 제 1 양태에 따라 다음 단계를 포함하여 동백꽃의 하이드로알코올 추출물을 제조하는 특정 방법이다:

i. 동백꽃 분말에 지방성 물질 또는 지방성 물질의 혼합물, 바람직하게는 오일을 상기 지방성 물질의 융점보다 높은 온도에서 및 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기하에서 함침시킨 다음, 분리하여 동백꽃의 유성 추출물과 이렇게 추출한 꽃의 잔류 분말을 얻는 단계,

ii. 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기하에서 알코올과 물의 혼합물에 기초한 추출 용매에 의해 단계 i.에서 얻은 꽃의 잔류 분말을 함침시키는 단계,

iii. 초음파, 특히 저주파에 의해, 그리고 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기하에서 꽃의 상기 잔류 분말을 추출하는 단계,

iv. 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기하에서 추출 용매에 고체 잔류물을 침용하는 단계,

v. 동백꽃의 하이드로알코올 추출물을, 예를 들어 미세여과에 의해, 정화하는 단계.

본 발명의 다른 목적은 제 2 양태에 따라 바람직하게는 상기 방법에 의해 수득되는 당, 동백나무 A 및 동백나무 B의 혼합물을 주로 포함하는 동백꽃의 하이드로알코올 추출물이다.

본 발명의 다른 목적은 제 3 양태에 따라 생리학적으로 허용 가능한 매질에 적어도 하나의 이러한 동백꽃 추출물을 포함하는 화장품 조성물이다.

본 발명의 최종 목적은 제 4 양태에 따라 진정 및/또는 항염증 활성 성분으로서 상기 동백꽃 추출물의 비치료적 화장품 용도이다.

동백나무(Camellia japonica)

동백은 히말라야 산맥에서 일본까지 및 인도네시아에 이르는 동부 및 남부 아시아가 원산지인 동백나무과(Theaceae)에 속하는 개화 식물의 속이다. 무엇보다도, 동백꽃은 항균, 항산화, 항염증, 수렴 및 강장제로 잘 알려져 있다. 속에 포함되는 종의 수는 식물학자에 따라 다르며 100 내지 250종으로 다양하다. 특히 백색 꽃, 특히 알바 플레나(Alba plena) 품종, 초콜렛 레드 내지 블랙 레드 유형의 색상이 매우 짙은 붉은색인 동백꽃, 특히 품종 블랙 매직(Black magic), 쿠로 츠바키(Kuro tsubaki), 블랙 도미노(Black domino), 코론코쿠(Koronkoku), 콘 와비스케(Kon wabisuke), 쿠로 와비스케(Kuro wabisuke), 무라사키-노-우에(Murasaki-no-ue), 및 빅터 데이비스 경(Sir Victor Davis) 및 품종명이 나이트 라이더(Night rider) 또는 블랙 오팔(Black opal)인 쿠로 츠바키(Kuro tsubaki)의 잡종 동백꽃이 언급될 수 있다. 블랙 매직과 나이트 라이더 품종은 프랑스에서 가장 흔한 동백나무 품종이다. 동백꽃의 색상은 pH와 토양 또는 기질에 존재하는 금속 및 준금속에 따라 달라질 수 있다. 동백은 일반적으로 2월 중순에서 4월에 개화한다. 그러나, 호르몬 처리를 통해 빠르면 10월에 개화하는 것이 가능하다.

본 발명에 따른 추출물은 동백꽃, 바람직하게는 흰색 꽃, 특히 알바 플레나(Alba plena) 품종에서 얻어진다. 바람직하게는, 본 발명에 사용되는 동백꽃은 프랑스에서 재배된다.

동백꽃은 바람직하게는 분산성 분말 형태이다. 분산성이라 함은 동백꽃 분말이 미세하게 분산될 수 있는 해리된 형태를 의미하는 것으로 이해되며, 예를 들어 원료는 입자상, 바람직하게는 분말상이다. 예를 들어, 신선한 동백꽃은 먼저 줄기에서 분리된 다음 개봉하여 건조대에 평평하게 놓인다. 그런 다음 빛을 피한 실온 또는 35℃ 미만 온도의 통풍 건조기에서 온화한 조건하에서 탈수된다. 꽃은 바람직하게는 80% 초과, 바람직하게는 85% 초과의 고체 함량이 얻어질 때까지 건조된다.

그런 다음, 꽃은 당업자에게 통상적으로 공지된 임의의 밀링 공정에 의해, 예를 들어 절단 밀의 실온에서 또는 바람직한 실시태양에 따라 저온 밀링에 의해 분산성 분말로 분쇄된다. 저온 밀링의 경우, 꽃은 바람직하게는 밀폐된 자동 온도 조절 장치에서 -80℃로 냉각되고 -20℃ 내지 -80℃ 사이의 온도에서 프로펠러 믹서에서 즉시 밀링되어 미세하고 규칙적인 분말을 얻는다. 냉동보존은 유리하게는 효과적인 밀링을 보장하고, 균질한 분말을 얻고, 분말의 착색을 제한하고, 꽃에 포함된 분자의 진정 특성을 더 잘 보존하는 것을 가능하게 한다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 추출물을 제조하는 데 사용되는 동백꽃의 분산성 분말은 500㎛ 미만, 바람직하게는 300㎛ 미만의 평균 입자 크기를 갖는다. 동백꽃 가루는 은은한 꽃향이 나며 크림색 흰색에서 적갈색까지 다양한 색을 가진다.

동백꽃의 하이드로알코올 추출물의 제조 방법

본 발명의 본질적인 특징에 따르면, 동백 추출물을 제조하는 방법의 단계 i., ii., iii., 및 iv.는 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기에서 수행된다. 이것은 불활성 가스 또는 대기 또는 진공 또는 부분 진공하에서 작업하는 것을 의미한다. 잔류 산소 함량은 열 처리 온도에 민감한 산화 반응을 일으키지 않도록 충분히 낮아야 한다. 따라서, 이들 단계는 불활성 분위기하에서, 예를 들어 질소하에서, 바람직하게는 일정한 질소 스위핑으로 수행되어, 존재하거나 형성할 수 있는 산소의 추출을 가능하게 할 수 있다. 질소 스트림을 통한 연속 산소 추출을 갖는 폐쇄 반응기가 사용될 수 있다. 질소 살포는 또한 적어도 열처리 시작 시에 질소 스트림과 관련하여 수행될 수 있다. 이러한 단계는 진공하에서 수행될 수도 있다. 이러한 방식으로 진행하면 혼합물에 대한 부분적인 탈취 효과와 함께 휘발성 재료의 동반이라는 추가 이점을 제공한다.

바람직한 실시태양에 따르면, 단계 i., ii., iii., 및/또는 iv.는 빛이 없거나 UV와 같은 산화 방사선이 없는 폐쇄 반응기에서 수행된다.

단계 i. 지방성 물질에 의한 동백꽃의 함침

본 발명의 목적은 지방성 물질의 융점보다 높은 온도에서, 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기에서, 지방성 물질 또는 지방성 물질의 혼합물로, 바람직하게 오일로, 동백꽃의 분말을 함침시킨 다음 분리하여 동백꽃의 오일 추출물과 이렇게 추출된 꽃의 고체 잔류물을 얻는 제 1 단계 i.를 포함하여 동백꽃의 하이드로알코올 추출물을 제조하는 방법이다.

동백꽃의 잔류 분말(부산물)을 얻는 동백 오일 추출물의 제조를 가능하게 하는 방법은 예를 들어 출원 WO 2016/016515에 상세히 기술되어 있다.

특히, 추출 용매로 사용되는 지방성 물질은 우선적으로 식물 유래이며, 상온(20-25℃)에서 액체인 식물 오일, 융점이 25 내지 40℃인 식물 버터, 또는 융점이 40℃ 초과인 식물 왁스일 수 있다. 바람직한 실시태양에 따르면, 추출 용매로서 사용되는 지방성 물질은 실온 미만의 온도에서 액체, 특히 대략 20℃의 온도에서 액체인 식물 오일이다.

본 발명에 따른 추출물을 얻기 위해 사용될 수 있는 오일의 예로서, 동백 오일, 유채씨 오일, 해바라기 오일, 올리브 오일, 참깨 오일, 살구씨 오일, 포도씨 오일, 스위트 아몬드 오일, 홍화 오일, 헤이즐넛 오일, 아르간 오일, 무스카트 장미 오일, 달맞이꽃 오일, 보라지 오일, 액상 호호바 왁스, 및 이들의 혼합물이 언급될 수 있다. 바람직하게는, 막 유동성과 피부 수화에 긍정적인 역할을 할 수 있는 오메가-6 다중불포화 지방산의 공급원인 오일이 선택될 것이다.

단계 i.은 사용된 지방성 물질 또는 지방성 물질의 혼합물의 융점 이상의 온도에서 수행된다. 특히, 온도는 이 용융 온도 내지 용융 온도 + 20℃, 바람직하게는 + 10℃인 것이 유리하다. 실온(20-25℃)은 이 온도에서 액체인 오일과 같은 지방성 물질에 완벽하게 적합하다. 단계 i.의 기간은 1시간 내지 48시간, 바람직하게는 5시간 내지 40시간, 보다 바람직하게는 12시간 내지 36시간, 더욱 더 바람직하게는 20시간 내지 30시간일 수 있고, 특히 바람직한 실시태양에 따르면 함침 단계 i.의 기간은 대략 24시간이다.

단계 i.은 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기하에서, 바람직하게는 질소로 포화된 분위기하에서 수행된다.

지방성 물질에 의한 동백꽃 분말의 함침을 가능하게 하는 방법은 또한 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기에서 상기 물질의 용융 온도보다 높은 온도에서 지방성 물질에 동백꽃 분말의 미세 분산의 단계 i.2.를 포함할 수 있다.

이 단계 i.2.는 초음파 공동화에 의해 혼합물을 처리함으로써 수행될 수 있다. 초음파하에서 공동화 및 분산은 바람직하게는 공동화를 위한 저주파 초음파 발생기가 장착된 폐쇄 반응기, 특히 100kHz 미만, 바람직하게는 대략 20 내지 30kHz에서 수행된다.

단계 i.2.의 초음파 처리 기간은 특히 2 내지 30분, 바람직하게는 10 내지 20분이다.

단계 i.2.는 유리하게는 실온 또는 사용된 지방성 물질 또는 지방성 물질의 융점보다 높은 온도에서 수행된다. 온도는 유리하게 이 용융 온도 내지 용융 온도 + 20℃, 바람직하게는 + 10℃이다. 실온(20-25℃)은 이 온도에서 액체인 오일에 이상적이다.

본 발명에 따른 동백꽃 추출물을 얻는 방법은 또한 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기하에서, 1 내지 10분 동안 80 내지 180℃의 온도에서 상기 지방성 물질 또는 물질들과 상기 동백꽃 분말의 단계 i. 또는 i.2.에서 얻은 혼합물을 가열하는 단계 i.3을 포함할 수 있다.

한 바람직한 실시태양에서, 단계 i.3.의 온도는 80 내지 150℃, 바람직하게는 90 내지 130℃이다.

가열 단계 i.3.은 1 내지 10분, 바람직하게는 1 내지 5분, 더욱 바람직하게는 1 내지 3분 범위의 매우 짧은 기간 동안 수행되며, 이 기간은 일단 이 온도에 도달하면 처리 온도가 유지되는 시간에 해당한다. 온도 상승 시간은 또한 매우 짧고, 특히 5분 이하, 바람직하게는 1 내지 5분, 더욱 바람직하게는 1 내지 3분이다.

급속 열 가열을 위한 임의의 시스템이 사용될 수 있고, 바람직한 실시태양에서, 열 처리는 마이크로파를 통해 수행된다. 폐쇄 반응기 내에서 마이크로파 소스를 사용하면 매우 짧은 시간에 원하는 온도에 도달할 수 있다. 또한 고온 가열은 사용된 지방성 물질의 가용화 능력을 증가시킬 수 있고 동백꽃 분말과 상기 지방성 물질의 접촉을 촉진하여 추출 수율을 높인다. 바람직한 실시태양에 따르면, 단계 i.3.에서 가열에 사용되는 마이크로파 발생기는 혼합물의 킬로그램당 500 내지 10000와트, 바람직하게는 혼합물의 킬로그램당 대략 700 내지 1500와트, 더욱 바람직하게는 혼합물의 킬로그램당 대략 1000와트 범위의 전력 출력을 갖는다.

한 특정 실시태양에 따르면, 산소 제거제 또는 환원제 화합물이 단계 i.3. 동안 또는 직전에 첨가된다. 따라서 순수한 아스코르브산, 아스코르브산 나트륨 또는 아스코르빌 팔미테이트와 같은 염, 유리 형태 또는 에스터의 시트르산 또는 락트산, 또는 레시틴, 또는 이들 화합물의 조합의 형태로 비타민 C를 첨가하는 것이 가능하다. 0.01 내지 1중량%, 바람직하게는 0.1 내지 0.5중량%의 개별적인 양이 혼합물에 첨가될 것이다.

단계 i., i.2. 및/또는 i.3.은 광-산화 및 감광성 분자의 분해 위험을 제한하기 위해 광 또는 UV와 같은 산화 방사선의 부재하에 유리하게 수행된다.

단계 i., i.2. 및/또는 i.3.은 혼합물을 교반하거나 교반하지 않고, 바람직하게는 교반하면서 폐쇄 반응기에서 수행될 수 있다.

한 실시태양에 따르면, 상기 방법은 단계 i., i.2. 및/또는 i.3.의 조합된 순서로 이루어지며, 단계 i.2 및 i.3의 순서는 중요하지 않으며, 각 단계는 적어도 각각 한 번씩 수행된다.

단계 i.을 완료하려면, 동백꽃의 유분추출물과 잔류분말의 분리의 하나 이상의 단계(들) i.4.가 수행된다. 이러한 분리 방법은 예를 들어 여과, 경사분리, 원심분리, 스핀-건조 또는 이들 기술의 조합 중에서 선택될 수 있다. 바람직하게는, 분리는 원심분리 또는 여과에 의해 수행된다. 이 분리 단계는 10㎛ 미만 및 바람직하게는 5㎛ 이하의 다공성을 갖는 여과포가 장착된 원심 분리기에서 40 내지 60℃의 온도 및 500 내지 2500rpm 및 바람직하게는 1000 내지 1500rpm의 속도로 수행될 수 있다.

분리 단계 또는 단계들은 동백꽃의 잔류 분말에서 유성 추출물을 분리하는 동시에 눈에 투명하고 현탁액에 미립자가 없는 유성 추출물을 얻을 수 있게 해준다.

단계 i., i.2., i.3. 및/또는 i.4.의 종료시에, 동백꽃의 유성 추출물과 이전에 유성 추출을 거친 동백꽃의 잔류 분말을 얻는다.

본 발명에 따른 방법에 사용되는 이 꽃의 잔류 분말은 지방 식물 기반 케이크 또는 갈색이고 균질한 외관을 가지며 액체에 쉽게 분산되는 필터 케이크의 형태이다.

단계 ii. 동백꽃의 잔류 분말의 함침

단계 i.의 종료시에, 본 발명에 따른 방법은 산소가 없거나 본질적으로 없는 분위기에서 알코올과 물의 혼합물을 기본으로 하는 추출 용매를 사용하여 단계 i.에서 얻은 꽃의 잔류 분말(케이크)의 함침의 단계 ii.를 실행한다.

동백꽃 잔류 분말의 함침은 물과 혼합된 에탄올, 메탄올 또는 아이소프로판올과 같은 적어도 하나의 모노알코올 및/또는 프로필렌 글리콜(프로판디올) 또는 다이프로필렌 글리콜과 같은 적어도 하나의 글리콜을 사용하는 알코올 추출에 의해 수행될 수 있다.

추출은 물과 알코올 이외의 용매가 없는 상태에서 수행된다.

단계 ii.에서 사용된 용매는 바람직하게는 폴리올과 물의 혼합물, 보다 바람직하게는 프로판다이올과 물의 혼합물이다.

바람직한 실시태양에 따르면, 단계 ii.에서 사용된 추출 용매의 알코올:물의 부피의 비율은 95%/5% 내지 50%/50%, 바람직하게는 90%/10% 내지 70%/30%, 보다 바람직하게는 85%/15% 내지 75%/25%이다.

함침은 일반적으로 실온, 즉 20 내지 25℃에서 대략 15분 내지 2시간 및 바람직하게는 30분 내지 1시간의 기간 동안 상기 언급된 용매 중 하나 이상에 동백꽃의 잔류 분말을 분산시키거나 부드럽게 교반함으로써 수행된다.

용매/재료의 비율(부피/중량 기준)은 예를 들어 1:1 내지 20:1 및 바람직하게는 5:1 내지 10:1일 수 있다.

이 분산 및 혼합 단계는 식물 추출물 분야에서 일반적이며, 당업자는 일반 지식을 기반으로 매개변수를 조정하고 교반 및 분산 도구를 선택할 수 있다.

단계 iii. 꽃의 잔류 분말의 초음파 보조 추출

그런 다음 본 발명에 따른 방법은 초음파 공동화에 의해 그리고 산소가 없거나 본질적으로 없는 대기하에서 꽃의 잔류 분말을 추출하는 단계를 실행한다.

이 단계 iii.은 추출 용매에서 동백꽃의 잔류 분말을 균질하게 미세 분산시킬 뿐만 아니라 이러한 세포에 함유된 분자를 방출하는 상기 꽃의 식물 세포를 파열시킬 수 있다. 초음파하에서 공동화 및 분산은 바람직하게는 공동화, 특히 100kHz 미만, 바람직하게는 대략 20 내지 30kHz를 위한 저주파 초음파 발생기가 장착된 폐쇄 반응기에서 수행된다.

초음파 처리의 지속 시간은 특히 15분 내지 60분, 바람직하게는 30분 내지 40분이다.

단계 iii.은 유리하게는 실온(20 내지 25℃)에서 및 산소가 없거나 본질적으로 없는 대기하에서 수행된다.

단계 iv. 동백꽃 잔류 분말의 침용

초음파 보조 추출이 수행되면, 본 발명에 따른 방법은 추출된 분자가 하이드로알코올성 용매로 확산되도록 허용하는, 추출 용매에서 꽃의 잔류 분말의 침용의 단계 iv.를 수행한다.

이 단계는 꽃 분말과 추출 용매의 혼합물을 30분 내지 3시간 및 바람직하게는 1시간 내지 2시간 동안 방치하는 것으로 이루어진다.

단계 iv.는 유리하게는 실온(20 내지 25℃) 및 산소가 없거나 본질적으로 없는 대기하에서 수행된다.

단계 v. 하이드로알코올 추출물의 정화

마무리로, 본 발명에 따른 방법은 하이드로알코올 추출물의 정화의 하나 이상의 단계(들)를 포함한다.

정화는 당업자에게 알려진 모든 기계적 분리를 의미하는 것으로 이해된다.

이들은 예를 들어 여과, 경사분리, 원심분리, 스핀-건조 또는 이들 기술의 조합 중에서 선택될 수 있다.

바람직하게는, 분리는 여과에 의해, 더욱 바람직하게는 2 단계의 미세여과에 의해 수행된다:

- 5 마이크론 미만, 바람직하게는 1 마이크론 이하의 다공성을 갖는 여과포 상에서 스피닝이라고 하는 제 1 원심 미세여과,

- 1 마이크론 미만, 바람직하게는 0.2 마이크론 이하의 다공성을 갖는 여과 플레이트 상의 제 2 정화 미세여과.

원심 미세여과는 원심분리와 여과의 동시 사용을 의미하는 것으로 이해된다. 혼합물은 액체상이 통과하고 고체상이 바구니 내부에 남아 있는 동안 정화되는 여과포가 장착된 스테인리스 스틸 보울에 넣는다. 이 작업은 5㎛ 미만 및 바람직하게는 1㎛ 이하의 다공성을 갖는 여과포가 장착된 원심 분리기에서 20 내지 25℃의 온도 및 500 내지 2500rpm 및 바람직하게는 1000 내지 1500rpm의 속도로 수행될 수 있다.

정화 미세여과는 액체의 현탁액에 존재하는 매우 미세한 입자의 분리를 보장하기 위해 1 마이크론 이하의 다공성을 갖는 불활성 재료로 만들어진 플레이트의 사용을 의미하는 것으로 이해된다. 플레이트의 다공성이 0.2 마이크론 이하이면, 여과는 액체에 존재하는 미생물도 제거하며 여과는 살균이라고 한다. 이 작업은 0.2㎛의 다공성을 갖는 여과 플레이트가 장착된 플레이트 필터 상에서 20 내지 25℃의 온도에서 수행될 수 있다. 액체는 펌프나 질소를 통한 양압 생성에 의해 진행된다.

정화 단계는 눈에 실질적으로 투명하고 현탁된 미세 입자가 없는 하이드로알코올 추출물을 얻을 수 있게 한다.

동백꽃의 하이드로알코올 추출물

본 출원의 목적인 발명은 또한 주로 당, 카멜리오사이드 A 및 카멜리오사이드 B의 혼합물을 포함하는 동백꽃의 하이드로알코올 추출물을 포함한다:

카멜리오사이드 A 카멜리오사이드 B

추출물에 존재하는 당은 포도당, 과당 및 이들의 혼합물 중에서 선택되는 것이 바람직하고, 포도당과 과당의 혼합물인 것이 바람직하다.

본 발명의 목적인 동백꽃의 하이드로알코올 추출물은 추출물에 당과 카멜리오사이드를 대략 2:1의 질량비로 포함한다.

본 발명의 목적인 동백꽃의 하이드로알코올 추출물은 특히 상기 방법에 의해 수득될 수 있다.

동백꽃 추출물은 피부에 대한 진정 및/또는 항염증 효과를 위해 비치료적 미용 목적으로 본 발명에 따라 사용된다.

본 발명에 따른 추출물의 진정 및/또는 항염증 효과는 특히 당업자에게 주지된 통상적인 기술에 따라 정상 인간 각질형성세포에서 염증 관련 경로에 관여하는 유전자의 발현 감소에 의해 관찰될 수 있다.

정상 인간 각질형성세포의 염증 관련 경로에 관여하는 유전자는 B2M(베타-2-마이크로글로불린), HLA-B(주요 조직 적합성 복합체, 클래스 I, B), IL1A(인터루킨 1 알파), SERPINE1(세르핀 패밀리 E 멤버 1)), ACVR1B(액티빈 A 수용체 유형 1B), CEBPB(CCAAT 인핸서 결합 단백질 베타), TNF(종양 괴사 인자) 및 HLA-DQB1(주요 조직 적합성 복합체, 클래스 II, DQ 베타 1)을 포함한다.

화장품 조성물

본 발명의 또 다른 목적은 생리학적으로 허용 가능한 매질에 적어도 하나의 동백꽃 추출물을 포함하는 화장품 조성물이다.

바람직하게는, 동백꽃 추출물을 함유하는 본 발명에 따른 조성물은 자극받은 피부, 바람직하게는 비-병리적 피부에 도포된다. 이것은 유리하게는 얼굴, 목, 손의 피부, 및 가능하게는 상부 가슴, 또는 대안적으로 신체의 임의의 부분에 도포될 수 있다. 이 추출물을 함유하는 조성물은 아침 및/또는 저녁에 얼굴 전체, 목, 손 및 가능하게는 상부 가슴, 또는 심지어 신체에 도포될 수 있다.

본 발명에 따라 사용되는 조성물은 일반적으로 전술한 추출물에 더하여 생리학적으로 허용 가능하고 바람직하게는 미용학적으로 허용 가능한 매질을 포함하며, 이는 독성, 부적합성, 불안정성 또는 알레르기 반응의 위험 없이, 특히 불쾌감(발적, 압박감, 따끔거림)을 일으키지 않고 인간 피부와 접촉하여 사용하는 데 적합하다는 것을 의미한다.

유리하게는, 상기 화장품 또는 피부과 조성물은 분말, 에멀젼, 마이크로에멀젼, 나노에멀젼, 현탁액, 용액, 로션, 크림, 수성 또는 하이드로알코올 겔, 거품, 세럼, 에어로졸용 용액 또는 분산액, 또는 지질 소포 분산액의 형태일 수 있다.

에멀젼의 경우, 유중수 또는 수중유 에멀젼일 수 있다.

본 발명에 따른 화장품 또는 피부과 조성물은 또한 다양한 성분 및 투여 형태에 따라 선택된 용매를 포함할 수 있다.

예는 물(바람직하게는 탈염수 또는 꽃수) 또는 에탄올과 같은 알코올을 포함한다.

상기 화장료 조성물은 또한 본 발명에 따른 추출물 이외에 다음을 포함할 수 있다:

- 예를 들어 연화제 또는 습윤제, 겔화제 및/또는 증점제, 계면활성제, 오일, 활성제, 착색제, 방부제, 항산화제, 활성제, 유기 또는 무기 분말, 자외선 차단제 및 향료 중에서 선택된 적어도 하나의 화합물과 같은 업계에 일반적인 적어도 하나의 첨가제.

- 폴리올(글리세린, 다이글리세린, 프로페인다이올, 카프릴릴 글리콜, 펜틸렌 글리콜, 헥세인다이올)과 같은 하나 이상의 습윤제, 당, 히알루론산 및 이의 염 및 에스터와 같은 글리코사미노글리칸, 및 Lipidure-PMB와 같은 폴리쿼터늄과 같은 하나 이상의 습윤제(들). 상기 습윤제는 조성물의 총 중량을 기준으로 대략 0 내지 30%, 바람직하게는 0.005 내지 10%의 함량으로 조성물에 존재할 것이다.

- 예를 들어 호호바 에스터, 지방산 및 지방 알코올의 에스터(옥틸도데실 미리스테이트, 트라이에틸헥사노인, 다이카프릴릴 카보네이트, 아이소스테아릴 아이소스테아레이트, 카프릴산/카프르산 트라이글리세라이드)와 같은 에스터, 시어 버터(부티로스퍼넘 파키 버터 추출물, 명칭 LIPEX SHEASOFT, LIPEX SHEA-U, LIPEX SHEA, LIPEX SHEALIGHT, LIPEX SHEA TRIS로 시판되는 시어 버터 에틸 에스터 또는 모링가 버터(모링가 오일/수소화된 모링가 오일 에스터)와 같은 버터, 왁스(아카시아 데큐렌스 꽃 왁스 & 헬리안투스 안누스 종자 세라 종자 왁스, C10-18 트라이글리세라이드), 식물 오일, 파이토스쿠알란, 알케인(운데케인, 트라이데케인) 중에서 선택될 수 있는 하나 이상의 연화제. 상기 연화제는 조성물의 총 중량을 기준으로 대략 0.1 내지 30%, 바람직하게는 0.5 내지 10%의 함량으로 조성물에 존재할 것이다.

- 예를 들어 셀룰로오스 유도체, 식물 기원 검(구아, 캐롭, 알기네이트, 카라기난, 펙틴), 미생물 기원(잔탄), 점토(라포나이트), 아크릴로일-메틸프로판 설폰산(AMPS) 및/또는 아크릴아미드 및/또는 아크릴산 및/또는 아크릴산의 염 또는 에스터의 가교 또는 비가교 친수성 또는 양친매성 호모- 및 코폴리머(명칭 ARISTOFLEX AVC, Aristoflex AVS, Aristoflex HMB, SIMULGEL NS, Simulgel EG, Simulgel 600, Simulgel 800, Pemulen, carbopol, Sepiplus 400, Seppimax zen, Sepiplus S, COSMEDIA SP로 시판됨) 중에서 선택된 수상을 위한 하나 이상의 겔화제 및/또는 증점제(들). 상기 겔화제 및/또는 증점제는 조성물의 총 중량을 기준으로 대략 0.1 내지 10%의 함량으로 조성물에 존재할 것이다.

- 레시틴, 폴리글리세롤 유도체, 당 유도체(MONTANOV 68, MONTANOV 202, Montanov 82, MONTANOV L, EASYNOV라는 명칭으로 시판되는 글루코사이드 또는 자일로사이드의 유도체), 포스페이트(SENSANOV WR이라는 명칭으로 판매되는 C20-22 알킬 포스페이트)와 같은 하나 이상의 계면활성제(들). 상기 계면활성제는 조성물의 총 중량에 대해 대략 0.1 내지 8 중량%, 바람직하게는 0.5 내지 3 중량%의 함량으로 존재할 것이다.

- 예를 들어 비타민 C 및 이의 유도체(아스코르빌 글루코사이드, 3-O-에틸아스코르빈산, 아스코르빌테트라이소팔미테이트), 비타민 A 및 이의 유도체, 비타민 E 및 이의 유도체, 비타민 B3 또는 나이아신아미드, 판테놀, 미량원소, 알란토인, 아데노신, 펩타이드(NP RIGIN, MATRIXYL 3000, IDEALIFT, EYESERYL이라는 명칭으로 판매되는 팔미토일테트라펩타이드-7, 팔미토일트라이펩타이드-1, 팔미토일펜타펩타이드-4, 아세틸 다이펩타이드-1 세틸 에스터, 아세틸 테트라펩타이드-5), 식물 추출물(글리시리자 글라브라 추출물, 병풀 잎 추출물, 꽃송이 씨 추출물), 효모 추출물, 글리콜산 또는 락트산과 같은 알파 하이드록시산, 트라넥삼산 및 세틸 트라넥삼산 에스터와 같은 이의 유도체 중에서 선택된 생물학적 활성을 갖고 생물학적 부위를 통해 피부에 효과가 있는 천연, 생명공학 또는 합성 기원의 하나 이상의 활성제(들). 상기 활성제는 조성물의 총 중량에 대해 대략 0.1 내지 10%의 함량으로 조성물에 존재할 것이다.

화장품에 일반적으로 사용되는 기타 첨가제, 특히 기술 분야에 잘 알려진 방부제, 항산화제 또는 방향제가 또한 본 발명에 따른 조성물에 존재할 수 있다.

당업자는 이러한 모든 가능한 첨가제 중에서 조성물이 이의 모든 특성을 유지하도록 조성물에 첨가될 첨가제의 유형 및 양 모두를 선택할 수 있다.

본 발명의 다른 목적은 인간 피부의 염증을 진정 및/또는 감소시키기 위한 상기 동백꽃 추출물 또는 상기 화장품 조성물의 화장품 용도이다.

이 실시태양에서, 추출물 또는 조성물은 비-병리학적 자극 피부에 도포된다.

본 발명은 이제 다음의 비제한적인 실시예에 의해 설명될 것이다.

본 발명의 내용 중에 포함되어 있다.

실시예 1: 본 발명에 따른 동백꽃(Camellia japonica alba plena)의 하이드로알코올 추출물의 제조

단계 i.

본 발명자는 먼저 출원 WO2010112760의 실시예 1에 기술된 조건하에서 동백꽃의 오일 기반 추출을 수행하였다.

단계 ii.

단계 i.의 종료시에 얻은 꽃의 잔류 분말을 80% 프로페인다이올과 20% 분석용 순수로 이루어진 혼합물에 1:8의 질량 비율로 혼합한다. 혼합을 프로펠러 교반기가 장착된 스테인리스강 반응기에서 수행한다. 분말을 질소 기류하에서 교반하면서 폐쇄 반응기에서 실온에서 45분 동안 추출 혼합물에 분산시켰다.

단계 iii.

그런 다음 혼합물을 질소 기류하에서 폐쇄 반응기에서 30분 동안 25kHz에서 초음파 공동화시켰다.

단계 iv.

그런 다음 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하지 않고 질소 기류하에서 폐쇄 반응기에 방치한다.

단계 v.

침용 단계 iv. 후, 혼합물을 다공성이 1 마이크론인 여과포에서 회전시킨다. 그런 다음 하이드로알코올 추출물을 0.2 마이크론의 다공성을 갖는 플레이트가 장착된 플레이트 필터를 통해 여과한다. 회전 및 플레이트 미세여과를 실온에서 수행한다.

최종 하이드로알코올 추출물은 투명하고 유동적이며 균질하며 주황색을 띤 노란색이며 꽃향이 난다. 사용할 때까지 차갑게 보관해야 한다.

실시예 2: 실시예 1에서 얻은 동백 추출물로 처리한 정상 인간 각질세포의 염증 관련 경로의 억제

프로토콜: 3명의 다른 기증자의 정상 인간 표피 각질형성세포를 24웰 플레이트에 씨드하고 37℃ 및 5% CO₂에서 48시간 동안 각질형성세포-SFM(k-SFM) 보충 배지에서 배양하였다. 그런 다음, 세포를 48시간 동안 실시예 1에서 제조된 동백 추출물 0.1%와 함께 또는 없이(미처리 조건) 배양하였다. 각 조건은 이중으로 수행하였다. 총 RNA는 공급자가 권장하는 프로토콜에 따라 TriPure Isolation Reagent®를 사용하여 추출하였다. 상보적 DNA를 합성하고 Affymetrix GeneChip Human Transcriptome Array 2.0 칩에서 전사체를 제조하였다. 발현이 적어도 2배만큼 조절되는 유전자의 생물정보학 분석은 Ingenuity Pathway Analysis 소프트웨어(IPA®, QIAGEN)를 사용하여 수행하였다. 이 소프트웨어는 Ingenuity Knowledge 데이터베이스에서 분자 간 상호 작용, 생물학적 네트워크 및 표준 경로에 대한 정보를 수집한다.

결과: 본 발명에 따른 하이드로알코올 동백 추출물에 의해 유의하게 억제된 세포 기능은 주로 염증성 면역 반응에 관여하는 경로이다. 이러한 다양한 경로에 관여하는 유전자 및 처리되지 않은 대조군에 대한 본 발명에 따른 하이드로알코올 동백 추출물에 의한 억제 수준(발현 수준 > 2)은 표 1에 보고되어 있다.

본 발명에 따른 하이드로알코올 동백 추출물에 의해 발현이 감소된 염증 관련 경로에 관여하는 유전자 목록.

부호	유전자 명칭	발현 수준( vs 미처리된 대조군)
B2M	베타-2-마이크로글로불린	-10,500
HLA-B	주요 조직적합성 복합체, 클래스 I, B	-10,150
IL1A	인터루킨 1 알파	-2,580
SERPINE1	세르핀 패밀리 E 멤버 1	-2,800
ACVR1B	액티빈 A 수용체 1B형	-2,690
CEBPB	CCAAT 인핸서 결합 단백질 베타	-2,380
TNF	종양 괴사 인자	-2,120
HLA-DQB1	주요 조직적합성 복합체, 클래스 II, DQ 베타 1	-2,190

분석은 컷오프가 2인 IPA에서 수행하였다: 발현 수준이 <-2 또는 >2인 모든 표적이 분석에서 고려되고 효과적으로 크게 조절된 것으로 간주된다.

HLA-B는 주요 조직적합성 복합체의 일부이며 B2M은 조절에 기여하는 이 복합체와 연관되는 것으로 알려져 있다.

각질형성세포는 TNF-α 및 IL-1α와 같은 전염증성 사이토카인의 분비를 통해 염증 반응을 개시하는 데 기여한다. 이들은 또한 피부 면역에 중요한 역할을 한다. 실제로, 이들은 효과기 면역 세포에 항원을 제시하는 것과 관련된 주요 조직적합성 분자(B2M, HLA-B, HLA-DQB1 등)를 발현한다. 다른 한편으로, 나이와 피부가 받는 다양한 스트레스에 따라, 일부 세포는 염증성 피부 환경을 생성하는 스트레스 전달자(예를 들어, 전염증성 인터루킨 IL-1α, 유전자 SERPINE1, CEPBβ...에 의해 암호화된 플라스미노겐 활성 억제제-1(PAI-1))를 분비할 수 있게 된다.

피부 염증과 관련된 다양한 유전자의 발현을 억제하는 능력에 의해, 본 발명에 따른 백색 동백의 하이드로알코올 추출물은 진정성 화장품 능력을 갖는다.

실시예 3: 화장품 조성물

하기 조성물은 당업자를 위한 통상적인 방식으로 제조될 수 있다. 아래에 표시된 양은 중량 백분율로 표시된다. 성분은 INCI 명칭으로 식별된다.

A - 오일/물 젤 에멀젼

B - 오일/물 크림 에멀젼

이들 조성물은 매일, 아침 및/또는 저녁에 피부에 도포될 수 있다.

Claims (17)

1. 다음 단계를 포함하여 동백꽃의 하이드로알코올 추출물을 제조하는 방법:
   i. 동백꽃 분말을 지방성 물질 또는 지방성 물질의 혼합물로, 상기 지방성 물질의 융점보다 높은 온도에서, 및 산소가 없는 분위기하에서, 함침시킨 다음 분리하여 동백꽃의 유성 추출물과 이렇게 추출한 꽃의 잔류 분말을 얻는 단계,
   ii. 산소가 없는 분위기하에서, 알코올과 물의 혼합물인 추출 용매에 의해 단계 i.에서 얻은 꽃의 잔류 분말을 함침시키는 단계,
   iii. 산소가 없는 분위기하에서, 초음파에 의해, 꽃의 상기 잔류 분말을 추출하는 단계,
   iv. 산소가 없는 분위기하에서, 추출 용매에 상기 분말을 침용하는 단계,
   v. 동백꽃의 하이드로알코올 추출물을 정화하는 단계.
2. 제 1 항에 있어서,
   단계 i., ii., iii., 및 iv.는 질소 분위기에서 수행되는 것인 방법.
3. 제 1 항에 있어서,
   동백꽃의 분말은 -20 내지 -80℃의 온도에서 밀링하여 수득된 분산성 생성물의 형태인 방법.
4. 제 1 항에 있어서,
   단계 i.은 지방성 물질 또는 지방성 물질의 혼합물로 상기 지방성 물질 또는 상기 혼합물의 융점보다 높은 온도와 산소가 없는 분위기하에서 수행되는 것인 방법.
5. 제 1 항에 있어서,
   동백꽃의 분말은 동백꽃(Camellia japonica alba plena) 품종에서 유래하는 것인 방법.
6. 제 1 항에 있어서,
   단계 i.에 사용된 지방성 물질 또는 물질들은 실온에서 액체인 식물 오일, 25 내지 40℃의 융점을 갖는 식물성 버터, 또는 40℃ 초과의 융점을 갖는 식물 왁스인 방법.
7. 제 1 항에 있어서,
   단계 ii.에서 사용된 추출 용매는 폴리올과 물의 혼합물인 방법.
8. 제 1 항에 있어서,
   단계 ii.에서 사용된 추출 용매의 알코올:물의 부피 비율은 95/5 내지 50/50인 방법.
9. 제 1 항에 있어서,
   초음파 보조 추출의 단계 iii.은 100kHz 미만의 공동화 주파수에서 15분 내지 60분 동안 수행되는 것인 방법.
10. 제 1 항에 있어서,
    정화 단계 v.는 2단계로 여과에 의해 수행되는 것인 방법:
    - 5 마이크론 미만의 다공성을 갖는 여과포 상의 제 1 원심 미세여과,
    이어서
    - 1 마이크론 미만의 다공성을 갖는 여과 플레이트 상의 제 2 정화 미세여과.
11. 제 1 항에 있어서,
    단계 i., ii., iii., iv. 또는 이들의 조합은 빛이 없거나 UV와 같은 산화 방사선이 없는 상태에서 수행되는 것인 방법.
12. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 따른 방법에 의해 수득되는, 당, 카멜리오사이드 A 및 카멜리오사이드 B를 포함하는 동백꽃의 하이드로알코올 추출물.
13. 제 12 항에 있어서,
    당 및 카멜리오사이드가 2:1의 질량 비율로 추출물에 존재하는 것인 하이드로알코올 추출물.
14. 제 12 항에 있어서,
    동백꽃은 동백꽃(Camellia japonica alba plena) 품종에서 유래하는 것인 하이드로알코올 추출물.
15. 생리학적으로 허용 가능한 매질에 동백꽃의 제 12 항에 따른 하이드로알코올 추출물을 포함하는 화장품 조성물.
16. 진정 활성 성분으로서 동백꽃의 제 12 항에 따른 하이드로알코올 추출물을 포함하는 비치료적 화장품 조성물.
17. 삭제