KR102481204B1 - 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명의 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 인체에 무해한 천연 물질인 카누카꿀을 유효성분으로 포함하여 우수한 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 우수한 피부 안티폴루션 효과를 나타낼 수 있다.

Description

카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising Kanuka honey as an active ingredient}
본 발명은 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과가 우수한 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 신체 부위로서, 우리 몸의 중요한 기관들을 보호하는 보호막 역할을 할 뿐만 아니라, 수분 증발을 조절하고 외부 감염으로부터 몸을 보호하는 역할을 한다.
하지만, 아무리 외부로부터의 바이러스 침투를 막아내는 피부일지라도 과도한 자외선, 오염된 환경 등 외부로부터 받는 스트레스는 피부 자극을 유발하게 되고, 결국에는 피부 노화로 이어지게 된다. 현대사회로 접어들면서, 환경오염이 심해지고 생활반경 주위의 공해 물질 농도가 높아지면서 공해 물질로부터의 피부 보호 문제가 사회적 문제로 대두되고 있다. 이에 다양한 기능성 화장품이 개발되고 있으며, 특히 안티폴루션(anti-pollution) 기능이 담긴 피부 보호 화장품에 대한 투자 및 연구가 활발히 진행되고 있다.
구체적으로, 포름알데히드, 질소산화물, 벤조피렌 등의 공해물질들이 체내로 들어와 누적되는 경우 각종 질병을 일으키는 문제가 있으며, 상기 공해물질이 피부에 고농도로 접촉 시, 직접적인 염증 또는 괴사의 원인이 되기도 한다. 또한, 대기 중의 잔량으로 존재할지라도 이에 지속적으로 접촉하면 피부에 지속적인 스트레스를 주므로 피부 노화의 원인으로 작용한다.
한편, 최근 미세먼지 등의 문제가 대두되면서 이에 상기 오염물질들이 피부에 미치는 영향에 대한 관심이 증가하고 있으며, 이에 대한 연장선 상에서 환경 오염원이 피부 표면에 부착되거나 피부를 통해 신체 내부로 침투되는 것을 방지하는 안티폴루션(Anti-pollution) 화장료 조성물, 세정제, 외용제에 대한 개발이 활발히 진행되고 있다.
그러나, 현재 개발되어 있는 대다수의 제품은 단순히 피부에 부착 내지 침투된 오염원을 제거하는 정도의 역할을 할 뿐이며, 환경 오염원으로부터 피부를 근본적으로 보호하지 못할 뿐 아니라 오염원으로부터 피부를 보호하는 능력이 미미한 문제가 있었다.
특히, 화학물질을 주성분으로 포함하기 때문에 오히려 피부 트러블 및 피부병의 원인으로 작용되는 문제가 있었다. 이에 따라, 천연물질을 이용하여 피부에 저자극이면서도 안티폴루션 효과가 우수한 조성물의 개발이 필요한 실정이다.
보다 구체적으로, 천연물질을 이용한 것으로서, 대한민국 등록특허 제10-1571323호에서는 페퍼민트, 카모마일, 로즈마리, 레몬그라스, 들국화, 티트리 및 라벤더가 각각 동일한 중량비로 혼합되어 추출된 허브 복합추출물을 이용함으로써, 안티폴루션 효과를 갖는 피부 개선용 화장료 조성물에 대해 개시하고 있으며, 대한민국 공개특허 제10-2017-0053388호에서는 울금, 사과, 포도 추출물을 함유함에 따라, 안티폴루션 효과를 갖는 화장료 조성물에 대해 개시하고 있으나, 상기 특허들의 경우 안티폴루션 효과가 미미한 문제가 있다.
한편, 앞서 살핀 바와 같이 피부는 연령의 증가, 자외선의 영향, 외부 오염 물질 및 스트레스에 의해 점점 손상되어 세포 보호 및 증식 능력이 떨어지며, 이에 의해 피부 노화현상이 촉진된다. 구체적으로 이러한 피부 노화 현상은 주로 히알루론산(hyaluronic acid)의 절단 및 저분자화, 섬유아세포의 콜라겐(collagen) 생성 부진 등으로 인하여 피부 각질층 및 진피층의 수분 보유 능력이 감소하고, 엘라스틴(elastine) 섬유 조직의 약화에 의해 피부 탄력이 감소함으로써 나타난다.
일반적으로 피부의 수분량은 진피층에서는 70% 정도이나 표피층으로 갈수록 감소하여 각질 세포층에서는 약 10 내지 30%가 된다. 진피층에서 공급된 물은 주로 수동적 확산에 의해 각질층 상부로 이동하며 최종적으로는 외부로 배출된다. 이를 경피수분 손실(Trans Epedermal Water Loss: TEWL)이라 하는데, 이러한 경피수분 손실은 각질 세포층의 지질막 성분인 피지 성분과 표피지질에 의해 적절한 수준으로 유지되는 것으로 알려져 있다.
또한, 각질 세포층에는 천연보습 인자(Natural Moisturizing Factor: NMF)라고 하는 친수성의 수분 보유능을 가진 물질이 존재하여, 피부의 보습에 중요한 역할을 담당하는 것으로 알려져 있다. 각질 세포층의 수분이 10 내지 30% 정도로 유지되면 피부는 매끄럽고 부드러우며, 신체 보호기능을 정상적으로 발휘하게 된다. 그러나, 각질 세포층의 수분함량이 10% 이하가 되면 피부는 거칠어지고 신체의 보호기능을 잃게 되어 노화현상이 일어난다.
예를 들어, 건성피부의 경우에는 각질 세포의 결집력이 약화되어 피부 표면으로부터 비늘조각과 같이 각질 세포가 허옇게 벗겨져 나오는 스케일(Scale) 현상이 나타나는데, 이와 같이 피부가 건성화 되는 것은 각질 세포층의 수분함량이 정상피부에 비해 적기 때문이다. 이 밖에, 건강한 피부라 할지라도 혹독한 외부환경 즉, 바람, 추운 날씨, 햇빛, 세안 및 면도 등에 의해 수분 부족현상이 일어나 피부상태가 나빠지기도 한다. 따라서, 피부의 각질 세포층의 수분함량을 적절히 유지하는 것이 피부노화를 방지하는 데에 무엇보다도 중요하다.
이를 위하여 화장품에는 피지와 유사한 성분이나 NMF 성분, 또는 폴리올과 같은 보습제 등이 첨가되어 사용되어왔다.
예를 들어, 수용성 폴리올로서 수산화 기(-OH 기)가 3개 이상인 글리세린 및 솔비톨 등이 첨가되었는데, 이들은 뛰어난 보습력을 나타내는 장점이 있는 반면, 끈적임이 심하여 사용할 때 불쾌감을 느끼게 하고 상대 습도에 따라 피부 내 수분을 빼앗아 가는 문제점이 있다. 또한, 수산화 기(-OH 기)가 2개인 프로필렌글리콜 및 1,3-부틸렌글리콜 등은 첨가 시, 피부의 부작용이 발생하기도 한다. 다른 천연보습인자인 피롤리돈 카르복실산 나트륨(PCA-Na) 및 젖산나트륨(Sodium lactate) 등의 첨가물은 전해성이 강해 화장료의 유화안정성을 해치는 문제점이 있으며, 아미노산, 콜라겐, 엘라스틴 등도 보습 능력이 있다고 알려져 있으나, 그 보습능력에 한계가 있는 실정이다.
이에 본 출원인은 상기의 문제점들을 해소하고, 피부 보습 및 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과가 뛰어난 조성물로서 천연 물질인 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 개발하기에 이르렀다.
KR 10-2017-0053388 A
본 발명의 목적은 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것으로, 피부 자극성 없는 천연 물질인 카누카꿀을 유효성분으로 포함하여 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 피부 안티폴루션용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
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상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 것이다.
상기 조성물은 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과가 우수한 것을 특징으로 하는 것이다.
상기 조성물은 첨가제를 추가로 포함하며, 상기 첨가제는 부형제, 붕해제 및 활택제인 것을 특징으로 하는 것이다.
상기 조성물은 유해 인자로 인해 유도된 산화질소(nitric oxide, NO), 프로스타글란딘 E2(prostaglandin E2, PGE2) 및 염증성 사이토카인의 생성 억제 효과가 우수한 것을 특징으로 하는 것이다.
상기 유해 인자는 미세먼지, 다환 방향족 탄화수소, 알데하이드류, 질소산화물류 및 이들의 혼합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 것이다.
상기 조성물의 제형은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 또는 스프레이의 형태로 제공되는 것을 특징으로 하는 것이다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 피부 안티폴루션용 식품 조성물은 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 것이다.
상기 식품 조성물의 제형은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽 또는 음료의 형태로 제공되는 것을 특징으로 하는 것이다.
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이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 '추출물'은 당업계에서 조추출물 (crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 식물 추출물은 상술한 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예컨대, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한 외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다.
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본 발명에서 이용되는 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
본 발명의 명세서에서 용어 "유효성분으로 포함"은 질병 또는 장애의 징후 또는 증상의 예방, 감소, 경감 또는 제거를 포함하나, 제한되지 않는 유익한 결과와 같은, 바람직한 생물학적 효과에 영향을 미치기에 충분한 양을 포함하는 것을 의미하고, 이 양을 “유효량”이라 한다. 따라서, 조성물 또는 방법의 각 활성 성분의 총량은 유의미한 개체의 이익을 나타내기에 충분하다. 따라서, 유효량은 투여되는 상황에 따라 달라질 것이다. 유효량은 1 이상의 예방적 또는 치료적 투여 시 투여될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 것이다.
상기 조성물은 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과가 우수한 것을 특징으로 하는 것이다.
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안티폴루션(Anti-pollution)은 '미세먼지 등 각종 환경 유해인자로부터 신체를 보호하고 오염을 방지한다'는 뜻으로 미세먼지 및 자외선 차단제, KF94 인증 마스크, 공기청정기, 물걸레 청소기 등이 대표적인 안티폴루션 제품이다.
한편, 최근 빠른 도시화에 의한 역효과로 환경 오염의 문제가 대두되고 있으며, 다양한 오염원과 미세먼지 등에 포함되어 있는 화학물질들이 피부에 작용하여, 각종 피부질환을 일으키고 있는 실정이다. 구체적으로 각종 화학물질들이 피부에 작용하는 경우, 피부 세포의 사멸을 야기할 뿐만 아니라, 피부 세포의 증식을 저해함으로써 염증을 유발하는 등 각종 피부 질환으로 발전하게 된다.
본 발명 조성물에 의하면, 인체에 무해한 천연 물질인 카누카꿀을 유효성분으로 포함하여 우수한 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과를 나타낼 수 있을 뿐만 아니라, 유해 인자로 인해 야기되는 염증성 사이토카인 등의 생성을 억제함으로써 피부 안티폴루션 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 명세서 전체에 있어서, "안티폴루션(Anti-pollution)"은 화학물질 등 유해 인자에 의한 피부 오염, 피부 세포 사멸 또는 피부 세포 증식 저해를 개선하거나 방지하는 것을 의미한다.
한편, 카누카(Kunzea ericoides)는 뉴질랜드 해안 저지대 또는 숲과 산림 가장자리에서 주로 생장하는 관목으로 높이가 약 18m까지 성장하는 특징이 있다. 상기 카누카의 잎은 선형, 좁은 타원형, 또는 창 모양으로 다양하며, 길이는 6.5 내지 25mm, 너비는 1 내지 5mm이고, 잎자루가 최대 1 mm까지 성장한다. 한편, 꽃은 흰색 또는 연한 분홍색으로 옆가지 등에 모여 피는 특성이 있으며, 10월에서 2월 사이에 피는 특징이 있다.
본 발명 조성물의 유효성분으로 포함되는 카누카꿀은 상기 카누카(Kunzea ericoides)로부터 유래한 꿀로, 상기 카누카(Kunzea ericoides) 과즙을 채취하는 꿀벌에 의해 생성되는 꿀을 의미한다. 상기 카누카꿀은 유해 미생물에 대한 항균 활성을 갖는 것으로 알려져 있으며, 특히 황색 포도상구균(Staphylococcus aureus)에 대해 우수한 항균활성을 갖는 것으로 보고되어 있다.
본 발명 조성물은 화학물질이 아닌, 천연 물질에 해당하는 카누카꿀을 유효성분으로 포함함으로써, 인체에 대한 부작용의 문제를 최소화할 수 있을 뿐만 아니라, 상기 카누카꿀에 포함된 유효성분이 나타내는 안티폴루션 효과를 확인하고 이를 화장료 또는 기능성 식품을 통해 인체에 제공할 수 있는 장점이 있다.
상기 조성물은 유해 인자로 인해 유도된 산화질소(nitric oxide, NO), 프로스타글란딘 E2(prostaglandin E2, PGE2) 및 염증성 사이토카인의 생성 억제 효과가 우수한 것이다.
염증(inflammation)은 외부 자극에 대한 생체조직의 방어반응 중 하나로서, 염증반응이 일어나면 여러 가지 염증 인자들(pro-inflammatory mediators)이 만들어지는데 이로 인하여 임상적으로는 발적, 발열, 종창, 동통, 기능장애 등의 증상이 나타난다.
특히, LPS(lipopolysaccharide), 염증유발인자 및 방사선조사 등의 유해한 자극은 인체 면역체계를 과도하게 항진시켜 대식세포와 같은 면역세포에서 TNF-α(tumor necrosis factor-α), IL-1(interleukin-1), IL-6, IL-β, 프로스타글란딘(prostagladin), 루코트리엔(luecotriene) 및 산화질소(nitric oxide,NO)와 같은 염증유발물질(염증성 매개체)을 과도하게 유도하여 염증질환과 조직이식거부반응, 자가면역질환, 당뇨병 등의 면역질환 및 신경세포의 사멸을 유발하는 것으로 알려져 있다.
염증성 매개체 중 하나인 산화질소(NO)는 정상상태에서는 내피세포나 대식세포에서 생산되며 세포살상과 살균작용 이외에도 다양한 생리활성을 나타내는데, 특히, 혈관 내피세포의 이완작용에 있어서 혈압의 항상성(homeostasis)을 유지하는 역할을 하는 것으로 알려져 있다. LPS, 염증유발인자 및 방사선조사 등의 자극은 특히, 유도형 산화질소 합성효소인 iNOS(inducible nitric oxide synthetase)의 생성을 유도하여 많은 양의 산화질소(NO)를 4 내지 6시간 동안 계속적으로 생성시키는데 이와 같이 생성된 과도한 양의 산화질소(NO)는 상기와 같은 질환들을 유발한다.
다른 염증성 매개체인 PGE2, PGF2a 및 PGI2와 같은 프로스타글란딘(prostaglandin)은 아라키돈산(arachidonic acid)에서 유래한 호르몬으로 다양한 생리활성에 관여하며 사이클로옥시게나아제(cyclooxygenase, COX)에 의해 생성이 조절된다. 이에 COX의 활성을 저해하여 프로스타글란딘의 합성을 저해하는 아스피린 인도메타신 같은 비스테로이드성소 염진통제는 관절염에 우수한 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다.
이 외에도 TNF-α는 BCG, LPS 및 염증유발인자에 의해 활성화된 대식세포와 섬유아세포 등에서 생산되어 세포사멸작용, 프로스타글란딘 및 IL-1, IL-6와 같은 사이토카인(cytokine)의 생산을 유도한다. 종양괴사인자로 발견된 TNF-α는 류마티스 관절염, 장기이식거부반응 등의 자가면역질환, 천식, 아토피성피부염 등의 알러지성 염증 질환 및 패혈증, 급성간질환 등의 급성면역질환 등에 대한 관련성이 보고되면서 TNF-α의 합성을 억제하는 화합물에 대한 개발 연구가 활발하게 진행되고 있다. 또한, 최근의 보고에 의하면, TNF-α 수용체의 유전자가 손상된 쥐는 LPS에 의한 치사독성에 저항성이 있으며 TNF-α의 항체를 투여한 쥐는 관절염이나 LPS의 독성을 예방하는 효과가 있다는 사실이 알려진 바 있다(Beutler B., Science, 229:869, 1985; Pfeffer K et al., Cell,73;457, 1993).
구체적으로, 본 출원인은 상기 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 조성물이 산화질소(nitric oxide, NO), 프로스타글란딘 E2(prostaglandin E2, PGE2) 및 염증성 사이토카인인 IL-6 및 IL-1β의 생성을 효과적으로 억제함으로써 피부 안티폴루션 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였으며, 상기 조성물을 화장료 또는 식품으로 이용하여 피부 안티폴루션 효과를 달성할 수 있도록 하고자 한다.
상기 유해 인자는 미세먼지, 다환 방향족 탄화수소, 알데하이드류, 질소산화물류 및 이들의 혼합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이다.
상기 미세먼지는 먼지의 일종으로, 대기중에 떠다니거나 흩날려 내려오는 입자상 물질을 말하며, 석탄석유 등의 화석연료를 태울 때나 공장자동차 등의 배출가스에서 많이 발생한다. 상기 미세먼지를 이루는 성분은 미세먼지가 발생한 지역이나 계절, 기상조건 등에 달라질 수 있으며, 일반적으로는 대기오염물질이 공기 중에서 반응하여 형성된 황산염, 질산염 등과 석탄, 석유 등 화석연료를 태우는 과정에서 발생하는 검댕, 지표면 흙먼지 등에서 생기는 광물 등으로 구성된다.
먼지는 입자 크기에 따라 50μm 이하인 총먼지(TSP, Total Suspended Particles)와 입자크기가 매우 작은 미세먼지(PM, Particulate Matter)로 구분한다. 상기 미세먼지는 다시 지름이 10μm보다 작은 미세먼지(PM10)와 지름이 2.5μm보다 작은 미세먼지(PM2.5)로 나뉜다. PM10이 사람의 머리카락 지름(50~70μm)보다 약 1/5 내지 1/7 정도로 작은 크기라면, PM2.5는 머리카락의 약 1/20 내지 1/30에 불과할 정도로 매우 작다. 이에, 눈에 보이지 않을 만큼 매우 작은 미세먼지는 대기 중에 머물러 있다 호흡기를 거쳐 폐 등에 침투하거나 혈관을 따라 체내로 이동해 들어와 건강에 악영향을 끼칠 수 있다.
상기 미세먼지에 급성 노출 시, 기도 자극으로 인한 기침 및 호흡곤란, 천식 악화, 부정맥 등이 발생하며, 미세먼지 만성 노출 시, 폐기능 감소, 만성 기관지염이 증가하며, 사망률이 증가될 수 있으며 피부 노화, 알레르기 질환의 악화 등 다양한 질환의 원인이 될 수 있다.
구체적으로 상기 다환 방향족 탄화수소는 벤조피렌을 포함할 수 있고, 상기 알데하이드류는 포름알데하이드를 포함할 수 있다.
상기 벤조피렌은 자동차 배기가스 또는 담배 연기 등 불완전 연소로 인해 생성되며, 에폭사이드로의 대사전환과 DNA와의 반응을 통해 세포 손상을 일으키는 유독 물질이다. 최근, 아토피성 피부염을 유발한다는 소식이 전해지면서, 피부에 대한 악영향이 드러나고 있으며, 세포 변이, 세포 손상 등의 문제로 피부 악화를 일으킬 수 있는 위험한 물질 중 하나이다.
상기 포름알데히드는 실온에서 자극성이 강한 냄새를 띤 무색의 기체로 메탄알(methanal)이라고도 한다. 상기 포름알데히드는 탄소가 포함된 물질이 불완전 연소할 때에 쉽게 만들어지며, 공기 중에서는 메테인과 같은 탄화수소에 햇빛과 산소가 가해지면서 합성된다. 상기 포름알데히드는 피부 알러지원 중 하나이며, 피부에 접촉 시 피부 발진, 피부 괴사, 피부염 등의 문제를 일으킬 수 있다.
상기 질소산화물은 질소와 산소로 이루어진 화합물로 일산화질소, 이산화질소, 일산화이질소, 삼산화이질소, 사산화이질소, 오산화이질소 등과 이들의 이온화물이 있다. 일반적으로 질소 가스는 안정하여 그 구성을 이루는 원자가 둘로 쪼개지기 어려우나, 매우 높은 온도가 가해지면 그 결합이 깨질 수 있다. 흔히, 자동차의 엔진 내부는 고온이 형성되어 자동차의 배기가스는 다량의 질소산화물을 포함하게 된다.
상기 질소산화물은 암모늄 또는 그 염을 포함할 수 있다. 질소산화물의 다른 형태인 질산기는 물과 반응하여 질산을 형성하고 산성비의 원인이 되기도 한다. 상기 질산은 대기 중의 알칼리성 물질인 암모늄과 결합하여 질산 암모늄을 생성하는데, 상기 질산암모늄은 대기중 입자상 물질로서 2차적 미세먼지이며 인체에 악영향을 미치게 된다. 상기 질산암모늄이 인체에 닿으면, 눈, 코 점막 그리고 피부에 염증을 일으키게 된다.
구체적으로, 상기 유해 인자는 피부에 작용하여 피부 세포의 사멸을 촉진시킬 수 있으며, 이는 피부 노화의 원인이 된다.
상기 조성물은 피부 보습 및 피부 재생 효과가 우수한 것이다.
근본적으로 피부의 보습은 세포간 지질로 인하여, 각질세포가 잘 배열된 구조를 유지할 수 있도록 하고 생리학적으로 필요한 물질들이 흡수되는 통로 역할을 하여 피부를 촉촉하고 건강하게 유지할 수 있도록 한다. 즉, 세포간 지질이 형성하는 라멜라 액정 구조는 외부로의 수분 손실을 막고 체내 수분을 잘 보유할 수 있어 피부 장벽으로서의 기능을 수행한다. 이때 세포질 지질의 피부 장벽으로서의 기능이 손상되면 수분 손실이 높고, 수분 함유량이 부족하여 직접적인 수분 공급이 필요하게 된다.
또한, 건강한 사람의 각질세포는 고농도의 자연보습인자(Natural Mosituring Factors, NMF)가 존재하여 피부 수분보유를 돕는다. 그러나, 피부의 이러한 기능에도 불구하고, 피부는 혹독한 외부환경 즉, 바람, 추운 날씨, 햇빛 등과 세안, 면도, 겨울철 실내난방 등과 더불어 오염된 대기에 노출되고, 나이가 들어갈수록 노화라는 인자가 더해져서 피부는 쉽게 수분을 잃게 되어 건조해지기 쉬우므로, 이를 막기 위해 피부 보습제의 필요가 증가하고 있다. 이러한 필요에 따라 각질층에서의 수분 보유를 증가시켜 피부 보습의 효과를 나타내기 위한 다양한 연구가 진행되고 있다. 한편 최근 들어, 단순히 각질층에서의 수분을 증가시키는 것뿐만 아니라, 기저층의 각질 형성 세포가 각질층의 각질세포로 발달되는 분화과정이 정상적으로 행해져야 피부 수분 보유 장벽으로서의 역할을 할 수 있다는 사실이 새롭게 밝혀짐에 따라 각질 형성 세포의 분화를 촉진시켜 궁극적으로 피부의 보습력을 향상시키기 위한 연구 또한 진행되고 있다.
한편, 피부노화의 이론 중 가장 주목받고 있는 이론은 활성산소에 의한 노화이다. 인체가 섭취한 산소의 약 95%이상은 세포의 대사과정에서 생성되는 전자와 결합하여 물로 환원되지만 2 내지 3%의 일부 산소가 불완전 환원으로 전자를 흡수하려는 Free radical 과정에서 세포의 파괴 작용을 초래하는데 이를 활성산소(Active oxygen)라고 한다. 활성산소는 흡연, 스트레스, 과도한 운동, 피부병, 바이러스감염 및 자외선 등 우리의 건강을 위협하는 여러인자들 뿐만 아니라, 생명을 유지하는 데 필수적인 호흡과 소화의 과정 중에서도 발생한다. 그러므로 인간은 지속적으로 활성산소의 위협에 노출되어 있는 것이고, 따라서 우리 몸에는 활성산소로 인한 상해에 대한 반응으로 다양한 항산화성 기전이 있어 다양한 방법으로 세포를 보호한다.
특히 활성산소는 피부 세포의 손상을 유발한다. 활성산소가 지나치게 많아지면 체내의 항산화 방어계를 무너뜨리고 그 결과 단백질, 지질, DNA와 같은 세포 성분이 손상 받게 되어 세포 기능이 변질되어 궁극적으로 피부 노화가 촉진된다. 또한, 활성산소는 결합조직을 손상시킨다. 활성산소는 교원 질 대사에 작용하여 직접적으로 교원 질을 파괴시킬 뿐 아니라, 콜라겐의 결핍을 초래하게 함으로써 피부 세포의 노화를 야기한다.
본 발명의 상기 화장료 조성물에 포함되는 유효성분인 카누카꿀은 인체에 무해한 천연물질로서, 피부 표면에 자극을 주지 않으면서도 피부에 존재하는 유해물질을 흡착하여 각질 및 기타 노폐물을 제거하여 피부 노화를 방지할 수 있다.
보다 구체적으로, 카누카꿀에 포함된 유효성분의 작용으로 섬유아세포의 활성이 촉진되고, 이에 따라 피부 재생효과를 우수하게 할 뿐만 아니라, 피부의 장벽 강화 및 수분 함유량을 증가시켜 피부 보습력을 향상시킬 수 있다.
한편, 상기 피부 재생은 피부의 재생뿐만 아니라, 주름개선, 피부탄력 개선, 피부 노화 방지, 피부 보습 개선, 검버섯 제거, 여드름 제거, 여드름 피부 개선, 상처제거 효과를 나타내는 것이며, 보다 바람직하게는 피부재생, 주름개선, 피부탄력 개선, 피부노화 방지 및 여드름 제거 효과를 의미한다.
바람직하게는, 상기 조성물은 갯쇠돌피 추출물, 도랭이사초 추출물, 털중나리 추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 천연 추출물을 더 포함할 수 있다.
상기 갯쇠돌피(Polypogon monspeliensis)는 포아풀아과 쇠돌피속에 속하는 잡초로 주로 바닷가의 양지쪽 습지에서 자란다. 높이는 30 내지 40cm이며 뭉쳐나는 특징이 있다. 잎 길이는 10 내지 15cm, 나비는 4 내지 8mm로 분록색(粉綠色)이고 편평하다. 잎혀는 길이 3 내지 8mm로 흰색이고 삼각형이다. 꽃은 5 내지 6월에 원추꽃차례로 피고 연한 녹색이며 털이 많다. 꽃이삭은 길이 3 내지 8cm, 지름 7 내지 12mm이며 가지는 돌려난다. 작은 이삭은 연한 녹색이고 꽃이 1개 들어 있다. 포영(苞穎)은 1맥이 있고 뒤쪽이 둥글며 털이 있고 갈라진 틈에서 포영의 2 내지 4배 길이의 까락이 돋는다. 호영(護穎)과 내영(內穎)은 포영보다 짧고 까락과 5맥이 있다. 한국의 남부지방을 비롯하여 아시아, 유럽, 북아프리카 등지에 분포하는 특징이 있다.
상기 도랭이사초(Carex nubigena var. albata)는 산과 들에서 자라는 외떡잎식물 벼목 사초과의 여러해살이풀로 뿌리줄기는 짧고, 줄기는 가늘고 길며 세모지고 뭉쳐나며 곧게 선다. 한편, 높이는 30cm 정도까지 자라난다. 잎은 뭉쳐나고 줄 모양이며 끝이 뾰족하다. 잎은 줄기보다 짧거나 길며 나비 3mm 정도이다. 꽃은 4 내지 6월에 피며, 꽃 이삭은 줄기 끝에 곧게 서고 원기둥 모양이며 길이 25 내지 40mm 정도이다. 밑동에 짧은 줄 모양의 포가 있고 작은 이삭은 양성으로 길이가 약 5mm 정도이다. 암 꽃영은 달걀 모양으로 끝이 뾰족하고 다갈색이다. 과낭은 달걀 모양 바소꼴로 길이 4 내지 5mm이고 영보다 길며, 암술대는 2개이다. 전라북도, 경기도, 평안남도, 평안북도, 함경남도, 함경북도 등지에 분포하는 특징이 있다.
상기 털중나리(Lilium amabile)는 외떡잎식물 백합목 백합과의 여러해살이풀로 우리나라 산지에서 흔히 자란다. 높이가 50 내지 100cm까지 자라며, 줄기는 곧추서고 윗부분이 약간 갈라지며 전체에 잿빛의 잔털이 난다. 비늘줄기는 길이 2 내지 4cm, 지름 15 내지 25mm로 달걀 모양 타원형이다. 잎은 어긋나고 줄 모양이거나 바소꼴이며 길이 3 내지 7cm, 나비 3 내지 8mm이다. 둔한 녹색이고 끝이 뭉뚝하거나 뾰족하며 양면에 잔털이 빽빽이 난다. 가장자리는 밋밋하고 잎자루가 없으며 위쪽으로 갈수록 크기가 작아지는 특징을 나타낸다. 한편, 꽃은 6 내지 8월에 피는데, 가지 끝과 원줄기 끝에 1 내지 5개씩 밑을 향하여 달린다. 화피갈래조각은 바소꼴이고 6개이며 길이 4 내지 7cm, 나비 10 내지 15mm이다. 뒤쪽으로 젖혀지고, 안쪽에는 검은빛 또는 자줏빛 반점이 있다. 6개의 수술과 1개의 암술은 모두 꽃 밖으로 길게 나온다. 꽃밥은 노란빛을 띤 빨간색이며, 길이는 약 10 내지 13mm이다. 열매는 삭과로서 달걀 모양의 넓은 타원형이고 9 내지 10월에 익는다. 관상용으로 심으며, 이른봄 비늘줄기를 식용하고 참나리와 함께 약재로도 쓰이는 특징을 갖는다.
본 발명 조성물에 상기 천연 추출물이 더 포함되는 경우, 카누카꿀 및 각 천연 추출물에 포함된 유효성분의 혼합에 따른 상승 작용으로 산화질소(nitric oxide, NO), 프로스타글란딘 E2(prostaglandin E2, PGE2) 및 염증성 사이토카인인 IL-6 및 IL-1β의 생성 억제 효과를 극대화시킴으로써, 피부 안티폴루션 효과를 향상시킬 수 있다. 더 나아가, 섬유아세포의 활성을 촉진하여 피부 재생효과를 우수하게 할 뿐만 아니라, 피부의 장벽 강화 및 수분 함유량을 증가시켜 피부 보습력을 향상시킬 수 있고, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과 또한 향상시킬 수 있다.
보다 바람직하게, 상기 조성물은 카누카꿀 100 중량부에 대하여 갯쇠돌피 추출물 5 내지 10 중량부, 도랭이사초 추출물 5 내지 10 중량부 및 털중나리 추출물 5 내지 10 중량부를 포함할 수 있다.
상기 중량부 범위에 의하는 경우, 상기 안티폴루션 효과를 보다 극대화시킬 수 있을 뿐만 아니라, 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과 또한 극대화시킬 수 있다.
상기 갯쇠돌피 추출물은 물, C1 내지 C6의 저급 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출 용매를 이용하여 추출되는 것이다.
구체적으로, 갯쇠돌피 추출물을 제조하기 위해서는 갯쇠돌피 잎을 세척하는 단계; 세척 후 건조시키는 단계; 건조 후 갯쇠돌피 잎을 분쇄하는 단계; 유기 용매를 사용하여 상기 분쇄물을 침출시키는 단계; 시료를 침출 후 건조시키는 단계; 물을 이용하여 침출시키는 단계; 및 침출하는 단계를 포함하여, 갯쇠돌피 추출물을 획득할 수 있다.
상기 유기 용매를 사용하여 추출한 추출물은 유기 용매를 사용하여 분획을 실시하는 단계를 더 포함할 수 있으며, 상기 추출물을 제조하는 방법은 초음파 추출법, 침출법 및 환류 추출법 등 당업계의 통상적인 추출 방법일 수 있다.
구체적으로 세척 및 건조로 이물질이 제거된 갯쇠돌피 추출물을 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물일 수 있으며, 상기 용매들을 순차적으로 시료에 적용하여 추출한 추출물일 수 있다.
상기 환류 추출법은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 100 mL기준으로, 천연물의 분쇄물 10 내지 30g, 환류 시간 1 내지 3시간 및 50 내지 100%의 탄소수 1 내지 6의 알코올 또는 물에 의한다. 보다 구체적으로, 탄소수 1 내지 6의 알코올 100 mL 또는 물 100 mL 기준으로, 천연물의 분쇄물 10 내지 20g, 환류 시간 1 내지 2시간 및 70 내지 90%의 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 물에 의한 것이다.
상기 침출법은 15 내지 30℃, 24 내지 72시간 동안 진행하며, 추출 용매로 물 또는 50 내지 100%의 탄소수 1 내지 6의 알코올을 이용한다. 보다 구체적으로는 20 내지 25℃, 30 내지 54시간 동안 진행하며, 추출 용매는 물 또는 70 내지 80%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다.
상기 초음파 추출법은 30 내지 50℃, 0.5 내지 2.5시간 동안 반응을 진행하며, 추출용매는 물 또는 50 내지 100%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다. 구체적으로는 40 내지 50℃, 1 내지 2.5시간 동안 추출하며, 추출용매로 물 또는 70 내지 80%의 탄소수 1 내지 6의 알코올에 의한 것이다.
상기 추출 용매는 시료의 중량 기준으로 2 내지 50배를 사용할 수 있으며, 보다 구체적으로는 2 내지 20배이다. 추출을 위해 시료는 추출 용매에서 추출을 위해 1 내지 72시간 동안 방치될 수 있으며, 보다 구체적으로 24 내지 48시간 동안 방치될 수 있다.
추출 후, 추출물은 새로운 분획 용매를 순차적으로 적용하여 분획할 수 있다. 분획 시 사용하는 분획 용매는 상기 용매는 물, 헥산, 부탄올, 에틸아세트산, 에틸 아세테이트, 메틸렌클로라이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상이며, 바람직하게는 에틸아세테이트 또는 메틸렌클로라이드이다. 추출물 또는 분획물을 얻은 후에는 농축 또는 동결건조 등의 방법을 추가적으로 사용할 수 있다.
상기 조성물은 기타 첨가제를 추가로 포함하며, 상기 기타 첨가제는 부형제, 붕해제 및 활택제일 수 있다.
상기 부형제는 프로솔브, 전분, 미결정 셀룰로오스, 만니톨, 유당, 저치환하이드록시프로필셀룰로오스, 슈크랄로스 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되며, 구체적으로 프로솔브(프로솔브 SMCC90), 전분(Starch 1500), 미결정 셀룰로오스(미결정 셀룰로오스 PH102) 및 만니톨(만니톨 160C)를 포함할 수 있으나, 상기 예시에 국한되지 않는다.
상기 붕해제는 크로스포비돈, 전분글로콘산 나트륨, 크로스카멜로오스나트륨, 폴리소르베이트, 라이릴황산나트륨 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되며, 보다 구체적으로 크로스포비돈(크로스포비돈CL-SF)이며, 상기 예시에 국한되지 않는다.
상기 활택제는 스테아르산 마그네슘, 경질무수규산, 탈크, 글리세릴베헤네이트 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되며, 보다 구체적으로 스타아르산마그네슘이며, 상기 예시에 국한되지 않는다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 화장료 조성물은 상기 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 피부 안티폴루션용 조성물을 포함하는 것이다.
본 발명의 상기 화장료 조성물은 일반 피부 화장품에 배합되는 성분들인 물, 유분, 계면활성제, 보습제, 점증제, 저급 알콜, 색소, 방부제, 향료와 같은 성분을 추가로 포함할 수 있다.
또한 상기 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프 레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 화장료의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀를로오스 유도체, 폴리 에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아 미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루 오로히드로카본, 프로판 /부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예를 들어 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코을, 벤질 벤조에이트,프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄을 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비를 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제 미소결정성 셀를로오스 알루미늄 메타히드록시드 밴토나이트 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트,지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에 스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세 리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세를 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 펩타이드와 담체 성분 이외에, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 피부 안티폴루션용 식품 조성물은 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 것이다.
본 발명에 따른 식품 조성물은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽 또는 음료의 형태로 제공될 수 있으며, 이외에 다른 식품 또는 식품 첨가물과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합 양은 그의 사용 목적 예를 들어 예방, 건강 또는 치료적 처치에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
구체적인 예로, 상기 식품 조성물을 이용하여 유해 인자에 대한 안티폴루션 활성을 증강시킬 수 있는 가공식품을 제조할 수 있다. 이런 가공식품에는 예를 들어, 과자, 음료, 주류, 발효식품, 통조림, 우유가공식품, 육류가공식품, 국수 등을 포함한다. 과자는 비스킷, 파이, 케익, 빵, 캔디, 젤리, 껌, 시리얼 등을 포함한다. 음료는 음용수, 탄산음료, 기능성 이온음료, 기능성 이온음료, 주스(예를 들어, 사과, 배, 포도, 알로에, 감귤, 복숭아, 당근, 토마토 주스 등), 식혜 등을 포함한다. 주류는 청주, 위스키, 소주, 맥주, 양주, 과실주 등을 포함한다. 발효식품은 간장, 된장, 고추장 등을 포함한다. 통조림은 수산물 통조림(예들 들어, 참치, 고등어, 꽁치, 소라 통조림 등), 축산물 통조림(쇠고기, 돼지고기, 닭고기, 칠면조 통조림 등), 농산물 통조림(옥수수, 복숭아, 파일애플 통조림 등)을 포함한다. 우유가공식품은 치즈, 버터, 요구르트 등을 포함한다. 육류가공식품은 돈까스, 비프까스, 치킨까스, 소세지. 탕수육, 너겟류, 너비아니 등을 포함한다. 밀봉포장생면 등의 국수를 포함한다. 이 외에도 상기 조성물은 레토르트식품, 스프류 등에 사용될 수 있다.
본 발명의 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 의하면, 인체에 무해한 천연 물질인 카누카꿀을 유효성분으로 포함하여 우수한 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 우수한 피부 안티폴루션 효과를 나타낼 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 독성 평가 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 독성 평가 결과이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 의한 PGE2 생성 억제 실험결과이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 의한 NO 생성 억제 실험 결과이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 의한 염증성 사이토카인 생성 억제 실험 결과이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 의한 염증성 사이토카인 생성 억제 실험 결과이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
제조예
1. 천연 추출물의 제조
갯쇠돌피 잎을 믹서기로 분쇄한 다음 분말로 제조하였다. 분말 시료를 추출 용매인 50% 에탄올을 1;10(w;v)의 비율로 가한 다음 완전히 침지 시킨 후, 80℃에서 환류시키면서 3시간씩 3회 반복 추출하였다. 추출액은 Whatman No. 2 여과지로 여과하였다. 여과액은 60℃에서 감압 농축하여 갯쇠돌피 추출물(PE)을 제조하였다.
상기 갯쇠돌피 추출물(PE)의 제조 방법과 동일한 방법으로 도랭이사초 추출물(AE) 및 털중나리 추출물(CE)을 제조하였다.
2. 혼합 조성물의 제조
상기 천연 추출물과 부형제로 사용되는 프로솔브 SMCC90, 전분 Starch1500, 미결정 셀룰로오스 PH102, 만니톨 160C 및 붕해제로 사용되는 크로스포비돈 CL-SF을 30 메쉬 체에 넣고 사과하여 혼합물을 제조하였으며, 상기 혼합물에 카누카꿀(KH)을 넣은 후, 활택제인 스테아린산마그네슘을 넣고 혼합 및 타정하여, 혼합 조성물을 제조하였다.
상기 혼합 조성물에 포함된 카누카꿀(KH) 및 천연 추출물의 함량은 하기 표 1과 같다.
T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9
KH 100 100 100 100 100 100 100 100 100
PE - 7.5 - - 3 5 7.5 10 12
AE - - 7.5 - 3 5 7.5 10 12
CE - - - 7.5 3 5 7.5 10 12
(단위 : 중량부)
실험예 1
세포 독성 평가
RAW 264.7 세포는 한국 세포 은행(Korea Cell Line Bank, 한국)에서 구입하여 10%(v/v) 태아 소 혈청(FBS), 100 U/ml 페니실린, 100 U/ml 스트렙토마이신이 포함된 둘베코모디파이드 이글 미디엄(in Dulbecco's modified Eagle's medium)을 이용하여 37℃ 및 5% CO2(v/v)의 조건에서 배양하였다.
상기 RAW 264.7 세포에 대한 카누카꿀의 세포 독성을 MTT 환원 분석을 통해 측정하였다.
세포를 다양한 농도의 카누카꿀로 처리하였다. 이후, 배지를 제거하고 MTT용액(Sigma-Aldrich Chemical Co.) 0.5mg/ml을 각 well에 분배하고 37℃에서 반응하였다. 3시간 동안 배양한 후, 상등액을 제거하고 DMS를 첨가하여 청색 포르마잔 결정을 10분 동안 용해시켰다. well 당 흡광도는 효소 결합 면역 흡착분석(ELISA) 플레이트 판독기((Dynatech Laboratories, Chantilly, VA, USA)를 사용하여 540nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 독성 평가 결과이다.
한편, 도 2 또한 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 독성 평가 결과이다.
세포 독성은 cell viability(%)로 평가하였으며, 도 1을 참조하면, 카누카꿀의 500μg/ml 이하 농도에서 RAW 264.7 세포에 세포독성이 없음을 확인하였다. 또한, 도 2를 참조할 때, 50 μg/ml의 표준 디젤 미립자 물질(SRM 1650b, 이하 PM2.5이라 함)로 처리된 RAW 264.7 세포에 500μg/ml 미만의 카누카꿀을 RAW 264.7 세포에 투여해도 세포 생존에 유의미한 악영향을 미치지 않음을 확인하였다.
이하 카누카꿀의 500μg/ml 농도에 대한 안티폴루션 효과에 대해 확인하였으며, 혼합 조성물(T2 내지 T9)로 제조 시에도 500μg/ml를 기준으로 하였다.
실험예 2
NO, PGE 2, IL-6 및 IL-1β의 생성 억제 실험
RAW 264.7 세포는 1시간 동안 200 μg/ml 및 500 μg/ml 카누카꿀로 처리한 후, 24시간 동안 50 μg/ml PM2.5로 자극하였다. 배지 내의 NO 수준은 Griess 시약(Sigma-Aldrich Chemical Co.)을 사용하여 측정된 아질산염의 양에 의해 평가되었다. 세포 조절 배지의 100μL은 10분 동안 동일한 양의 Griess 시약으로 혼합하였다. 흡광도는 ELISA 판독기를 사용하여 540 nm로 측정하고, 아질산 나트륨(NaNO2) 표준 곡선과 비교하여 계산하였다.
또한, PGE2의 수준을 조사하기 위해, ELISA 키트(R & D Systems Inc., Minneapolis, MN, USA)를 사용하여 배양 상등액을 수집 및 평가하였다. 흡광도는 ELISA 판독기를 사용하여 450nm의 파장에서 측정하였다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 의한 PGE2 생성 억제 실험 결과이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 의한 NO 생성 억제 실험 결과이다.
상기 실험에 의한 결과는 도 3 및 도 4와 같이, PM2.5가 처리되지 않은 대조군에 비해 PM2.5 처리는 NO 및 PGE2의 방출을 크게 증가시켰으나, 이 증가는 카누카꿀의 처리 농도가 증가함에 따라 크게 감소하였다.
한편, 도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 의한 염증성 사이토카인 생성 억제 실험 결과이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 의한 염증성 사이토카인 생성 억제 실험 결과이다.
구체적으로, PM2.5 처리에 의해 증가된 염증성 사이토카인의 생성 및 발현에 대한 카누카꿀의 효과는 도 5 및 6과 같다. 구체적으로 PM2.5에 의한 자극 후, 배양 상층액으로 방출되는 IL-6 및 IL-1β를 포함하는 전염증성 사이토카인의 양이 현저하게 증가함을 확인하였다. 그러나, PM2.5에 의한 전염증성 사이토카인의 생성은 카누카꿀의 전처리에 의해 현저히 억제함을 확인하였다.
혼합 조성물에 대한 NO, PGE 2, IL-6 및 IL-1β의 생성 억제 실험
상기 카누카꿀에 의한 NO, PGE2, IL-6 및 IL-1β의 생성 억제 효과를 확인한 실험과 동일한 방식의 실험을 진행하였다.
세포 독성 결과에서, 동일한 농도(500μg/ml)로 PE, AE 및 CE를 처리하여도 RAW 264.7 세포에 세포독성이 없음을 확인하였으며, 혼합된 복합물로 처리 시에도 동일하게 세포 독성이 없음을 확인하였다.
이후, NO, PGE2, IL-6 및 IL-1β의 생성 억제 효과에 대해서도 실험을 진행하였다.
T1을 500μg/ml 농도로 처리한 경우를 지수 5로 설정하고, T2 내지 T9를 500μg/ml 농도로 처리한 경우를 지수로 평가하였다.
상기 지수는 1 내지 10으로 평가하였으며, 숫자가 높을수록 NO, PGE2, IL-6 및 IL-1β의 생성 억제 효과가 우수한 것이다.
결과는 하기 표 2와 같다.
T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9
NO 및 PGE2 생성 억제 5 6 6 5 5 8 9 7 4
염증성 사이토카인(IL-6, IL-1β) 생성 억제 5 6 6 6 5 8 9 8 5
(단위: 지수)
상기 실험 결과에 의하면, T1 과 비교하여 혼합 조성물로 이용한 T2 내지 T9에서 동등 이상의 우수한 NO 및 PGE2 생성 억제 효과를 나타내며, 염증성 사이토카인 생성 억제 효과도 우수함을 확인하였다.
보다 구체적으로, T6 내지 T8의 범위에서 상기 효과가 극대화됨을 확인할 수 있다.
실험예 3
피부보습 효과 실험
본 발명의 조성물에 따른 피부보습 효과를 실험하기 위하여, 실험 결과에 영향을 줄 만한 피부질환이 없는 22 내지 33세의 남녀 100명(남자 50명, 여자 50명)을 대상으로 실험하였으며, 각 대상들은 각 조성물의 적용 전에 실험부위를 물로 세정한 후 30분 동안 외적환경에 적응하게 하였다.
실험 환경조건은 실내온도 22 내지 24℃, 실내습도 45 내지 50%로 유지시킨 동일한 장소에서 시행하였다. 상기 T1 내지 T9의 조성물을 각각 20μL씩 볼에 2Х2cm2 로 도포하고 30분 간격으로(0분, 30분, 60분) 각 도포부위의 피부표면 전도도를 베포미터(Vapometer, delfin 사)로 측정하여 하기의 표 3에 나타냈다.
보습 효과의 비교를 위해, 보습에 우수한 효과가 있다고 알려진 히알루론산 1% 수용액(비교예)을 사용하였다.
0분 30분 60분
대조군(무처리) 7.0 2.8 1.3
비교예 7.0 3.1 2.8
T1 6.9 3.9 3.5
T2 7.1 4.0 3.9
T3 7.0 3.9 3.8
T4 6.9 3.8 3.6
T5 7.0 3.4 3.0
T6 6.8 5.5 4.9
T7 6.9 5.6 5.3
T8 7.1 5.4 4.8
T9 7.2 3.5 3.0
(단위 : g/m2hr)
상기 실험결과에 의하면, T1 내지 T9 조성물을 처리하는 경우, 비교예에 비해 동등 내지 그 이상의 보습 효과를 나타냄을 확인할 수 있다.
한편, T6 내지 T8의 범위에서 상기 효과가 극대화됨을 확인할 수 있는 바, 해당 중량 범위에 의할 때, 피부 장벽 강화 및 수분 함유량을 증가시켜 피부 보습력을 극대화시키는 것을 확인할 수 있다.
실험예 4
피부재생 효과 실험
상기 T1 내지 T9 조성물의 피부재생 촉진 효과를 확인하기 위해 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetra-zolium bromide) 시약을 이용하여 세포활성을 측정하였다.
인간 유래의 섬유아세포를 배양하여 1 X 105 cells/well의 농도로 96-웰 평판 배양기에 접종한 후, 상기 T1 내지 T9 조성물을 약 24시간 적용한 다음, MTT 시험을 수행하여 세포활성 촉진효과를 통한 피부 재생 효과를 확인하였다.
시료를 희석한 vehicle (FBS serum 1% 함유 DMEM)과 비교하여 세포 활성능을 평가하였다. 비교예의 배지는 FBS serum 1% 함유 DMEM을 사용하였다. 세포활성의 결과는 하기 수학식 1에 의하여 산출하였으며, 3회 반복 시험하였다. 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다.
[수학식 1]
세포활성(%)=(처리군의 반응 흡광도 - 대조군의 반응흡광도/대조군의 반응 흡광도) X 100
세포활성(%)
대조군(무처리) 0
T1 15
T2 22
T3 20
T4 21
T5 17
T6 35
T7 39
T8 34
T9 18
상기 표 4를 바탕으로 살펴보면, 상기 카누카꿀만을 유효성분으로 포함하는 조성물(T1)의 경우, 섬유아세포의 세포 활성을 촉진시킴으로써, 피부를 재생시키는 효과가 있음을 확인하였다.
한편, 혼합 조성물 T2 내지 T9의 경우, 상기 T1 조성물을 처리한 경우와 비교하여 동등 또는 그 이상의 효과가 있음을 확인할 수 있으며, 특히, T6 내지 T8 조성물을 처리하는 경우, 섬유아세포의 세포 활성이 극대화됨을 알 수 있는 바, 상기 중량 범위에 의할 때, 피부 재생 효과가 가장 우수함을 알 수 있다.
실험예 5
여드름 피부 개선효과 실험
상기 T1 내지 T9 조성물의 여드름 피부 개선 효과를 확인하기 위해, 여드름 원인 균주인 프로피오니박테리움 아크네에 대한 상기 T1 내지 T9 조성물의 항균력을 하기와 같이 실험하였다.
먼저, 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네를 BHI broth 배지에 접종하여 혐기 배양함으로써 시험 균액을 제조하였다. 상기 제조된 시험 균액 0.15 ml에 LB broth 배지 15 ml와 혼합하여 희석하였다. 그 다음으로, 96-well 플레이트에 상기 T1 내지 T9의 조성물을 각각 분주하고 상기 제조된 희석 용액을 총량으로 200 μm씩 넣어 섞어주었다. 섞은 혼합액은 이중 희석을 통해 희석하여 상기 96-well 플레이트에 다시 분주하였다.
분주 후 35℃에서 1일 내지 2일 배양한 후, 용액의 현탁된 정도로 여드름균의 증식 유무를 판단하여 균의 증식이 없는 최소농도를 MIC(Minimum Inhibitory Concentration) 값으로 결정하였다. 만약 용액이 불투명하여 균의 증식 유무를 판단하기 어려울 경우, 현미경 관찰을 통해 확인하였다.
한편, 대조군으로는 여드름 치료제로 시중에서 사용되고 있는 제품의 유효성분인 벤조일 퍼옥사이드(benzoyl peroxide)를 상기 T1 내지 T9에 대체하여 사용하였다.
결과 값은 하기 표 5에 나타내었으며, MIC는 각 조성물에 함유된 유효성분의 농도로 환산하여 표기하였다.
pH MIC(ppm)
대조군 5.6 >100 ppm
T1 5.6 >70 ppm
T2 5.6 >64 ppm
T3 5.6 >60 ppm
T4 5.6 >64 ppm
T5 5.6 >69 ppm
T6 5.6 >43 ppm
T7 5.6 >39 ppm
T8 5.6 >45 ppm
T9 5.6 >65 ppm
상기 표 5를 바탕으로 살펴보면, 상기 카누카꿀만을 유효성분으로 포함하는 조성물(T1)의 경우, 대조군과 비교하여 더욱 낮은 ppm 농도를 나타낸 것을 확인할 수 있다.
상기 ppm 농도가 낮을수록 여드름균에 대한 항균력이 우수한 것으로, 상기 카누카꿀에 포함되어 있는 유효성분이 여드름 피부에 대한 우수한 개선 효과를 갖는다는 것을 확인할 수 있다.
한편, 혼합 조성물 T2 내지 T9의 경우, 상기 T1 조성물을 처리한 경우와 비교하여 동등 또는 그 이상의 효과가 있음을 확인할 수 있으며, 특히, T6 내지 T8 조성물을 처리하는 경우, 여드름균에 대한 항균 효과가 극대화됨을 알 수 있는 바, 상기 중량 범위에 의할 때, 여드름 피부에 대한 개선 효과가 가장 우수함을 알 수 있다.
실험예 6
관능성 평가
하기와 같이 실시예 조성물을 이용하여 통상적인 방법으로 보습 크림을 제조하였다. 이후 남녀 20명을 대상으로 향 및 발림성에 대한 평가를 요청하였다.
실시예(T1 내지 T9) 조성물 3.0 중량%
글리세린 8.0 중량%
부틸렌글라이콜 5.0 중량%
글리세릴스테아레이트/피이지-100스테아레이트 1.0 중량%
폴리솔베이트60 0.5 중량%
소르비탄 스테아레이트 0.5 중량%
피토스쿠알란 5.0 중량%
호호바 오일 3.0 중량%
카프릴/카프릭 트리글리세라이드 15.0 중량%
알로에 버터 2.0 중량%
밀납 1.0 중량%
스테아릴 알코올 0.5 중량%
베헤릴 알코올 0.5 중량%
스테아린산 0.5 중량%
카르복실비닐폴리머 0.2 중량%
잔탄검 0.1 중량%
아르기닌 0.5 중량%
디메치콘 0.5 중량%
베타글루칸 0.2 중량%
방부제 0.5 중량%
정제수 잔량
각 항목에 대한 평가는 10점 만점을 기준으로 평가를 요청하였으며, 평가 결과는 평균 값으로 도출하여 하기 표 6에 나타내었다.
T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9
5 6 6 6 5 8 9 8 4
발림성 5 6 6 6 4 8 9 9 5
상기 실험 결과에 의하면, 혼합 조성물 T2 내지 T9의 경우, 카누카꿀만을 유효성분으로 포함하는 T1 조성물과 비교하여, 향 및 발림성 평가에서 동등 또는 그 이상의 평가를 받은 것을 확인할 수 있으며, 특히, T6 내지 T8 조성물을 처리하는 경우, 그 효과가 극대화됨을 확인하였다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims (8)

  1. 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는
    화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 피부 보습, 피부 재생, 주름 개선, 탄력 개선 및 피부 노화 방지 효과가 우수한 것을 특징으로 하는
    화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 첨가제를 추가로 포함하며,
    상기 첨가제는 부형제, 붕해제 및 활택제인 것을 특징으로 하는
    화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 유해 인자로 인해 유도된 산화질소(nitric oxide, NO), 프로스타글란딘 E2(prostaglandin E2, PGE2) 및 염증성 사이토카인의 생성 억제 효과가 우수한 것을 특징으로 하는
    화장료 조성물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 유해 인자는 미세먼지, 다환 방향족 탄화수소, 알데하이드류, 질소산화물류 및 이들의 혼합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는
    화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 조성물의 제형은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 또는 스프레이의 형태로 제공되는 것을 특징으로 하는
    화장료 조성물.
  7. 카누카꿀을 유효성분으로 포함하는
    피부 안티폴루션용 식품 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 조성물의 제형은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽 또는 음료의 형태로 제공되는 것을 특징으로 하는
    피부 안티폴루션용 식품 조성물.
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