KR102471057B1 - 전이성 결장직장암의 항-혈관신생 치료요법에 관한 예측 및 예후 바이오마커 - Google Patents

Abstract

본 발명은, 항-VEGF 치료요법에 유리하게 반응할 것인 대상체를 확인함을 포함하는 전이성 결장직장암의 치료 방법을 제공한다. 본 발명의 소정 양상에 따르면, 대상체는 이들의 VEGF-A의 발현 수준에 기초하여 확인된다. 항-VEGF 치료요법에 유리한 반응은 상승된 VEGF-A의 발현 수준에 의해 나타난다. 또한, 항-VEGF 치료요법에 보다 우수한 상대 생존 결과를 가질 것으로 예상되는 전이성 결장직장암을 지닌 대상체를 확인하기 위한 마커로서의 VEGF-A의 용도가 본원에 개시된다.

Description

전이성 결장직장암의 항-혈관신생 치료요법에 관한 예측 및 예후 바이오마커{PREDICTIVE AND PROGNOSTIC BIOMARKERS RELATED TO ANTI-ANGIOGENIC THERAPY OF METASTATIC COLORECTAL CANCER}

본 발명은 환자에서의 전이성 암의 확인 및 치료시의 예측 및 예후 바이오마커의 용도에 관한 것이다.

혈관 내피 성장 인자(VEGF)는 혈관신생에 관여하는 사이토카인이다. 리간드 VEGF-A는 VEGF 수용체-1(VEGFR1) 및 VEGFR2와 상호작용하여 정상 및 종양 혈관구조에서 혈관신생 신호전달 경로를 개시한다. VEGF의 길항제는 과도하거나 원하지 않거나 부적절한 혈관신생에 연루된 암, 눈 질환 및 기타 병태를 포함하는 각종 질환 및 장애의 치료에 유용한 것으로 공지되어 있다. VEGF 길항제의 한 예는 애플리버셉트(aflibercept)(VEGF 트랩(Trap); 또는 ZALTRAP®(Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY)으로서 시판되는 ziv-애플리버셉트(ziv-aflibercept)로서도 공지되어 있음)이다. 애플리버셉트는, VEGFR2 유래의 도메인 3에 융합된 VEGFR1 유래의 도메인 2를 포함하는 VEGF 수용체-기반 키메라 분자이고, 이는 결국 힌지 영역을 통해 사람 IgG1의 Fc(a) 도메인에 부착된다. Ziv-애플리버셉트는 전이성 결장직장암의 치료용으로 승인되어 있고, 또한 다른 암성 병태의 치료용으로 개발중이다. VEGF 트랩은 예를 들면, US 특허 제7,070,959호에 기술되어 있고; 또한, 문헌[Holash et al., Proc . Natl . Acad . Sci . USA 99:11393-11398 (2002)]을 참조한다.

현재까지, VEGF 억제에 대한 내성 또는 민감성의 예측 바이오마커는 입증되어 있지 않다. VEGF 길항제는 암의 치료에 매우 유망한 것으로 밝혀져 있지만, 항-VEGF 치료요법에 유리하게 반응하는 환자 서브-집단의 효과적인 확인 및 선택을 위해서는 항-VEGF 치료요법의 효능을 예측하는 입증된 바이오마커들이 필요하다. 따라서, 항-VEGF 치료요법이 투여된 전이성 암을 갖는 환자에서의 예측 및 예후 바이오마커를 확인하고 입증하기 위한 충족되지 않은 요구가 당해 분야에 존재한다.

본 발명의 간단한 요약

본 발명의 한 양상에 따르면, 대상체에서의 암의 치료 방법이 제공된다. 예를 들면, 본 발명의 이러한 양상에 따른 방법은 상기 대상체에게 VEGF 길항제를 투여함을 포함하고, 여기서, 상기 대상체는 전이성 암으로 진단되었고 VEGF-A와 같은 예측 바이오마커의 상승된 발현을 나타내는 것에 기초한 VEGF 길항제로의 치료를 위해 선택되었다. 소정 실시형태에서, 예측 바이오마커의 상승된 발현은 암을 지닌 대상체에서의 보다 낮은 수준의 바이오마커 발현과의 비교에 기초하여 측정된다. 한 실시형태에서, 상기 전이성 암은 전이성 결장직장암(mCRC)이다.

본 발명의 다른 양상에 따르면, 대상체에서의 진행성 난소암을 치료하기 위한 방법이 제공된다. 본 발명의 이러한 양상에 따른 방법은 상기 대상체에게 VEGF 길항제를 투여함을 포함하고, 여기서, 상기 대상체는 진행성 난소암으로 진단되었고 인터류킨-6(IL-6)의 변이성(즉, 증가되거나 감소된) 발현을 나타내는 것에 기초한 VEGF 길항제로의 치료를 위해 선택되었다. 소정 실시형태에서, 상기 대상체에서의 IL-6의 변이성 발현은 암을 지니지 않은 대상체에서의 IL-6 발현 수준과의 비교에 기초하여 측정된다. 암 환자가 IL-6의 증가된 발현을 나타내는 것으로 확인된 상황 하에, 상기 환자는 VEGF 길항제 및 IL-6 또는 IL-6 수용체 길항제의 조합의 투여에 의해 본 발명에 따라 효과적으로 치료될 수 있다.

본 발명의 다른 양상에 따르면, 항-VEGF 치료요법에 유리하게 반응하는 경향이 있는 전이성 결장직장암을 갖는 대상체를 확인하는 방법이 제공된다. 본 발명의 이러한 양상에 따른 방법은 상기 환자로부터 샘플을 수득하고 상기 샘플 중의 VEGF-A와 같은 예측 바이오마커(또는 본원에 기술된 다른 예측 바이오마커(들))의 수준을 측정함을 포함하고, 여기서, mCRC를 갖는 환자에서의 보다 낮은 수준의 바이오마커 발현과 비교시 예측 바이오마커의 상승된 발현(본원의 다른 곳에 개시되어 있는 바와 같이 "고(high)" 수준으로서 확인됨)은 환자를 항-VEGF 치료요법에 유리하게 반응하는 경향이 있는 환자로서 확인시켜 준다.

몇몇의 실시형태에서, 항-VEGF 치료요법은 치료를 필요로 하는 대상체에게의 VEGF 길항제의 투여를 포함한다. 본 발명의 방법으로 사용되는 VEGF 길항제는 항-VEGF 항체, 항-VEGF 수용체 항체 또는 VEGF 수용체-기반 키메라 분자(VEGF 트랩)일 수 있다. 소정 실시형태에서, VEGF 길항제는 ziv-애플리버셉트이다.

몇몇의 실시형태에서, 항-VEGF 치료요법은 화학치료학적 제제 및/또는 용법과 병용하여 투여할 수 있다. 예시의 화학치료학적 제제/용법으로는 폴린산, 5-플루오로우라실 및 옥살리플라틴(즉, FOLFOX 치료), 및 폴린산, 5-플루오로우라실 및 이리노테칸(즉, FOLFIRI 치료)이 포함된다.

소정 실시형태에서, 환자로부터 수득된 샘플은 혈액, 혈청 및 혈장으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

본 발명의 다른 실시형태는 이어지는 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용의 검토로부터 명백해질 것이다.

도 1은 "고" 바이오마커 그룹(들)의 위험 비(hazard ratio)(HR) 변화의 그래프이다. "고" 바이오마커 그룹은, FOLFIRI와 병용하여 애플리버셉트로 치료된 전이성 결장직장암(mCRC) 환자의 3기 연구에서 mCRC을 갖는 환자의 서브세트에서의 혈장 VEGF 바이오마커 농도가 88 내지 1140pg/mL의 범위인 컷오프(cutoff) 값에 의해 정의되었다.
도 2는 "고" 바이오마커 그룹(들)의 HR 변화의 그래프이다. "고" 바이오마커 그룹은, FOLFIRI와 병용하여 애플리버셉트로 치료된 mCRC 환자의 3기 연구에서 mCRC을 갖는 환자의 서브세트에서의 혈장 IL-8 바이오마커 농도(pg/mL)가 5.1 내지 111pg/mL의 범위인 컷오프 값에 의해 정의되었다.
도 3은 애플리버셉트 단일 치료요법으로 치료된 진행성 난소암 환자의 2기 연구에서의 난소암을 갖는 환자의 전체 생존 분획과 고 또는 저 인터류킨-6(IL-6) 수준의 상관관계를 나타낸다.

본 발명을 기술하기 전에, 본 발명은 특정 방법 및 기술된 실험 조건에 한정되지 않고 이는 이러한 방법 및 조건이 변할 수 있기 때문임이 이해되어야만 한다. 또한, 본 발명의 범위는 첨부된 청구범위에 의해서만 한정될 것이므로, 본원에서 사용된 용어는 단지 특정 실시형태들을 기술하기 위한 목적을 위한 것이고, 한정되는 것으로 의도되지 않음이 이해되어야 한다.

달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 당해 분야 숙련가들 중 하나에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "약"은 특정 인용된 수적 값과 관련하여 사용된 경우에 당해 값은 상기 인용된 값으로부터 1% 이하만큼 변할 수 있음을 의미한다. 예를 들면, 본원에서 사용되는 바와 같은 표현 "약 100"은 99 및 101, 그리고 이들 사이의 모든 값들(예를 들면, 99.1, 99.2, 99.3, 99.4 등)을 포함한다.

본원에 기술된 방법 및 재료와 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 재료가 본 발명의 실행시에 사용될 수 있지만, 바람직한 방법 및 재료는 하기에 기술된다. 본원에 언급된 모든 출판물들은 본원에 인용에 의해 포함되어 이들의 전문이 기술된다.

예측 및 예후 바이오마커

본 발명은 부분적으로 암 환자에서의 (발현 수준 중앙값보다 높거나 낮은) 바이오마커 단백질의 발현 수준이 항-혈관신생제로의 치료 후 향상된 전체 생존(OS)과 상관관계가 있는 것으로 밝혀진 소정 바이오마커 단백질의 확인에 기초한다. 특히, 전이성 결장직장암(mCRC)을 갖는 환자에서 고수준 또는 저수준으로 발현되는 경우 VEGF 길항제 ziv-애플리버셉트로의 치료 후 이러한 환자의 향상된 전체 생존과 상관관계가 있는 소정 단백질 바이오마커가 확인되었다. ziv-애플리버셉트 치료에 유리하게 반응하는 경향이 있는 환자를 확인하기 위해 본 발명의 맥락에서 사용될 수 있는 예시의 바이오마커는 VEGF-A이다. 소정 실시형태에서, mCRC를 갖는 환자에서의 VEGF-A 발현의 수준과 비교하여 보다 높은 수준의 VEGF-A를 갖고 VEGF 길항제로 치료되지 않은 환자는 항-VEGF 치료요법으로 치료되는 경우 개선된 생존 결과를 갖는 것으로 밝혀졌다. 소정 실시형태에서, 하나 이상의 바이오마커들의 증가되거나 감소된 발현은 ziv-애플리버셉트에 유리하게 반응하는 경향이 있는 환자를 확인하기 위한 특징적인 구성성분으로서 사용될 수 있다. 예를 들면, 상기 특징은 VEGF 경로 단백질(예를 들면, VEGF-R2 및 VEGF-R3) 또는 염증-관련 마커, 예를 들면, 대식세포 유주 억제 인자(MIF: macrophage migration inhibitory factor) 및 계면활성제 단백질 D(SPD)을 포함할 수 있다.

관련 양상에서, 본 발명은, 진행성 난소암을 갖는 환자에서의 중앙값 수준보다 더 높거나 낮은 경우 VEGF 길항제 ziv-애플리버셉트로의 치료 후 이러한 환자의 향상된 전체 생존과 상관관계가 있는 소정 단백질 바이오마커의 확인에 관한 것이다. ziv-애플리버셉트 치료에 유리하게 반응하는 경향이 있는 환자를 확인하기 위해 본 발명의 맥락에서 사용될 수 있는 예시의 바이오마커는 사이토카인 인터류킨-6(IL-6)이다. 소정 실시형태에서, 진행성 난소암을 갖고 VEGF 길항제로 치료되지 않은 환자에서의 IL-6 발현 수준 중앙값과 비교하여 보다 낮은 수준의 IL-6을 갖는 환자는 항-VEGF 치료요법으로 치료하는 경우 개선된 생존 결과를 갖는 것으로 밝혀졌다.

본원에서 사용되는 바와 같은 "예측" 바이오마커는 환자에서의 치료학적 개재(therapeutic intervention)의 효과에 대한 정보를 제공하는 바이오마커를 말한다. 또한, 예측 바이오마커는 치료요법에 대한 표적일 수 있다. 예측 바이오마커는 환자 선별을 위해, 구체적으로는 특정 치료요법에 유리하게 반응할 것인 환자를 확인하기 위해 사용될 수 있다. 본 발명의 맥락에서, 예측 바이오마커로는 항-VEGF 치료요법으로 치료되지 않은 유사한 상황의 환자와 비교하여 암(예를 들면, 전이성 결장직장암 또는 난소암)을 갖고 항-VEGF 치료요법으로 치료된 환자의 개선된 생존 결과와 상관관계가 있는 상승되거나 감소된 발현을 갖는 단백질 바이오마커가 포함된다. 본원에 예시된 연구에서 발견된 예측 바이오마커의 한 예는 VEGF-A이다. VEGF-A의 발현이 상승되었고 ziv-애플리버셉트로 치료된 mCRC 환자는 mCRC를 갖고 ziv-애플리버셉트로 치료되지 않은 환자와 비교하여 보다 높은 전체 생존 확률(probability)을 가졌다. 예측 마커의 다른 예는 IL-6이다. IL-6의 발현이 상승되었고 ziv-애플리버셉트로 치료된 난소암을 갖는 환자는 난소암을 갖고 ziv-애플리버셉트로 치료되지 않은 환자와 비교하여 보다 낮은 전체 생존 확률을 가졌다. 예측 바이오마커의 추가의 예로는 VEGF-R2, VEGF-R3, SPD 및 MIF가 포함된다. 소정 바이오마커는 예측 및 예후 둘 다로서 분류될 수 있다. VEGF 길항제로의 암 치료의 맥락에서 예측 및 예후 둘 다로서 분류될 수 있는 바이오마커의 한 예는 IL-8이다.

본 발명은 또한 mCRC 전체 생존과 상관관계가 있는 소정 예후 바이오마커의 확인에 관한 것이다. 예후 바이오마커로는 전이성 결장직장암(mCRC)을 갖는 환자에서 정상 수준보다 더 높거나 낮게 발현되는 경우 치료와 관계없이 환자의 향상된 전체 생존과 상호관련되어 있는 단백질이 포함된다. 잠재적으로 향상된 mCRC 전체 생존을 갖는 환자를 확인하기 위해 본 발명의 맥락에서 사용될 수 있는 예시의 예후 바이오마커로는 안지오포이에틴(angiopoietin)-2(Ang-2), C-반응성 단백질(CRP) 및 NRP1이 포함된다.

본원에서 사용되는 "예후" 바이오마커는 치료에 관계없이 환자의 전체 암 결과에 대한 정보를 제공하는 바이오마커를 말한다. 예후 바이오마커는 치유적 치료(curative treatment)를 받는 환자에서의 재발에 대한 정보를 제공할 수 있다. 몇몇의 실시형태에서, 예후 바이오마커의 변경된 발현은 전이성 질환을 갖는 환자에서 무진행(progression-free) 생존과 상관관계가 있다. 본 발명의 맥락에서, 용어 "예후" 바이오마커는 환자에서의 전이성 암의 좋지 못한 예후와 상관관계가 있는 단백질 바이오마커의 변경된 발현을 말한다. 예를 들면, 고 혈장 Ang-2 또는 CRP 수준을 갖는 mCRC 환자는 상기 환자가 항-VEGF 치료요법으로 치료되었는지 치료되지 않았는지에 관계없이 저 Ang-2 또는 CRP 수준을 갖는 환자와 비교하여 mCRC의 좋지 못한 예후(예를 들면, 감소된 생존 확률)를 가졌음이 본원에서 밝혀진다.

예측 및 예후 바이오마커의 수준은 조직 샘플, 종양 샘플(예를 들면, 생검), 또는 환자로부터 수득된 체액 샘플 중의 바이오마커의 절대량 또는 상대량을 직접적으로 또는 간접적으로 측정함으로써 환자에서 측정할 수 있다. 체액 샘플은 혈액, 혈장 및 혈청으로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다. 샘플 중의 바이오마커의 양은 효소 링크된 면역흡착 검정(ELISA)과 같은 기술 또는 다른 단백질 검출 및 분석 방법을 이용하여, 또한 단백질 바이오마커를 암호화하는 핵산(예를 들면, mRNA)의 양을 측정함으로써 측정될 수 있다. 샘플 중의 특정 단백질 바이오마커를 직접적으로 측정하거나 검출하는 것을 포함하는 검정은 예를 들면, 바이오마커에 대해 특이적인 항체 또는 다른 항원-결합 단백질을 이용하여 달성될 수 있다. 이러한 항체 또는 항원-결합 단백질은 형광단 또는 방사성 화합물과 같은 검출가능한 화합물로 표지될 수 있다. 따라서, 본 발명은 또한 본원에 기술된 예측 또는 예후 바이오마커 중 임의의 것에 특이적으로 결합하는 항체 및 항원-결합 단백질, 그리고 이러한 항체를 포함하는 키트 및 진단학적 방법 및 이의 용도를 포함한다.

특정 바이오마커의 발현의 기준(reference) 수준은 예를 들면, 건강한 대상체들의 집단에서 또는 치료요법을 필요로 하는 대상체들의 집단에서 측정된 바이오마커의 발현 수준에 기초하여 측정되는 단일 값 또는 값들의 범위로서 측정될 수 있다. 본 발명의 소정 실시형태에 따르면, 바이오마커의 발현의 기준 수준은 ziv-애플리버셉트 치료요법을 필요로 하는 대상체들의 집단에서 측정된 바이오마커의 발현 수준에 기초하여 측정된다. 분석된 집단은 특정 바이오마커의 측정된 발현 수준에 기초하여 백분위수로 나뉠 수 있다. 몇몇의 예에서 기준 수준은, ziv-애플리버셉트로의 치료가 더 적거나 차선적으로 효과적인 암을 앓고 있는 환자와 비교하여 ziv-애플리버셉트로의 치료가 실질적으로 효과적인 암을 앓고 있는 환자들 사이에 최고의 분리를 제공하는 백분위수로서 정의될 수 있다. 특정 바이오마커의 발현의 기준 수준은 (i) 연구된 집단의 크기에 따라 그리고 (ii) 바이오마커의 발현을 측정하기 위해 사용된 방법에 따라 변할 수 있다.

VEGF 길항제

본원에서 사용되는 바와 같은 표현 "VEGF 길항제"는 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 또는 VEGF 수용체의 정상 생물학적 활성을 차단하거나 감소시키거나 간섭하는 임의의 분자를 의미한다. VEGF 길항제로는 VEGF와 천연 VEGF 수용체 사이의 상호작용을 간섭하는 분자, 예를 들면, VEGF 또는 VEGF 수용체에 결합하여 VEGF와 VEGF 수용체 사이의 상호작용을 방지하거나 그렇지 않으면 저해하는 분자가 포함된다. 구체적 예시의 VEGF 길항제로는 항-VEGF 항체(예를 들면, 베바시주맙[AVASTIN®]), 항-VEGF 수용체 항체(예를 들면, 항-VEGFR1 항체, 항-VEGFR2 항체 등), 및 VEGF 수용체-기반 키메라 분자(본원에서 "VEGF-트랩"으로서도 나타냄)가 포함된다.

VEGF 수용체-기반 키메라 분자로는, VEGFR1(Flt1로서도 나타냄) 및/또는 VEGFR2(Flk1 또는 KDR로서도 나타냄)과 같은 VEGF 수용체의 2개 이상의 면역글로불린(Ig)-유사 도메인을 포함하고, 다량체화 도메인(예를 들면, 2개 이상의 키메라 폴리펩타이드의 다량체화[예를 들면, 이량체화]를 가능하게 하는 Fc 도메인)도 함유할 수 있는 키메라 폴리펩타이드가 포함된다. 예시의 VEGF 수용체-기반 키메라 분자는 서열번호 1의 핵산 서열에 의해 암호화되는 VEGFR1R2-FcΔC1(a)로서 나타낸 분자(애플리버셉트 또는 ziv-애플리버셉트로서도 공지되어 있고, 제품명 ZALTRAP® 하에 시판됨)이다. VEGFR1R2-FcΔC1(a)는 3개의 구성성분들: (1) 서열번호 2의 아미노산 27 내지 129를 포함하는 VEGFR1 구성성분; (2) 서열번호 2의 아미노산 130 내지 231을 포함하는 VEGFR2 구성성분; 및 (3) 서열번호 2의 아미노산 232 내지 457을 포함하는 다량체화 구성성분("FcΔC1(a)")을 포함한다(서열번호 2의 C-말단 아미노산[즉, K458]은 본 발명의 방법에서 사용되는 VEGF 길항제에 포함될 수 있거나 포함되지 않을 수 있고; 예를 들면, US 특허 7,396,664를 참조한다). 서열번호 2의 아미노산 1 내지 26은 신호 서열이다.

바이오마커 및 전이성 암의 치료 방법

본 발명은 대상체에서의 암, 예를 들면, 진행성 암, 전이성 암 등의 치료 방법을 포함한다. 본 발명의 이러한 양상에 따른 방법은 대상체에게 VEGF 길항제를 투여함을 포함하고, 여기서, 상기 대상체는 암(예를 들면, 전이성 결장직장암, 진행성 난소암)으로 진단되었고 바이오마커의 상승된 발현을 나타내는 것에 기초한 VEGF 길항제로의 치료를 위해 선택되었고, 여기서, 바이오마커의 상승된 발현은 전이성 암을 갖는 대상체에서의 각각의 바이오마커의 보다 낮은 수준(즉, 기준 수준)의 발현과의 비교에 기초하여 측정된다. VEGF 길항제는 VEGF 수용체-기반 키메라 분자(VEGF 트랩)를 포함할 수 있다. VEGF 트랩은 ziv-애플리버셉트이다. 소정 실시형태에서, 상기 환자에게 류코보린(폴린산으로서도 공지되어 있음), 5 플루오로우라실 및 이리노테칸("FOLFIRI"로서 언급되는 조합)을 포함하는 화학치료학적 용법과 병용하여 VEGF 길항제를 투여할 수 있다.

용어 "대상체" 및 "환자"는 본원에서 상호교환적으로 사용되고 암, 바람직하게는 전이성 암의 치료를 필요로 하는 사람 대상체를 말한다.

또한, 본 발명은 항-VEGF 치료요법에 유리하게 반응하는 경향이 있는 전이성 결장직장암(mCRC)을 갖는 환자를 확인하는 방법을 포함한다. 상기 방법은 환자로부터 샘플을 수득하고 샘플 중의 VEGF-A, VEGF-R2, VEGF-R3, MIF 및/또는 IL-8과 같은 바이오마커의 수준을 측정함을 포함하고, 여기서, mCRC를 갖는 대상체에서의 바이오마커의 발현의 보다 낮은 수준(즉, 기준 수준)과 비교하여 바이오마커의 상승된 발현은 상기 환자를 항-VEGF 치료요법이 유리하게 반응하는 경향이 있는 환자로서 확인시켜 준다. 대안의 실시형태에서, 상기 방법은 상기 환자로부터 샘플을 수득하고 상기 샘플 중의 SPD와 같은 바이오마커의 수준을 측정함을 포함하고, 여기서, mCRC를 갖는 대상체에서의 바이오마커의 발현의 보다 높은 수준(즉, 기준 수준)과 비교하여 바이오마커의 보다 낮은 발현은 상기 환자를 항-VEGF 치료요법이 유리하게 반응하는 경향이 있는 환자로서 확인시켜 준다.

또한, 본 발명은 항-VEGF 치료요법에 유리하게 반응하는 경향이 있는 진행성 난소암을 갖는 환자를 확인하기 위한 방법을 포함한다. 상기 방법은 상기 환자로부터 샘플을 수득하고 상기 샘플 중의 IL-6과 같은 바이오마커의 수준을 측정함을 포함하고, 여기서, 난소암을 갖는 대상체에서 바이오마커의 발현 수준 중앙값(즉, 기준 수준)과 비교하여 바이오마커의 변이성 발현은 상기 환자를 항-VEGF 치료요법에 유리하게 반응하는 경향이 있는 환자로서 확인시켜 준다.

본원에서 사용되는 바와 같은 항-VEGF 치료요법에 "유리하게 반응하는 경향이 있는" 환자는, 상기 항-VEGF 치료요법의 투여시, 암을 갖고 항-VEGF 치료요법을 받지 않은 환자와 비교하여 증가되거나 개선된 전체 생존, 증가된 무진행 생존, 종양 퇴행, 및 감소된 종양 재발 확률로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 효과를 보여주는 것으로 기대되는 암(예를 들면, mCRC, 난소암)을 갖는 환자를 말한다. 개선된 생존 시간은 약 1주, 2주, 4주, 2개월, 4개월, 6개월, 8개월, 10개월, 12개월, 14개월, 16개월, 18개월, 20개월, 22개월, 24개월, 26개월, 28개월, 30개월, 36개월, 40개월 또는 항-VEGF 치료요법을 받지 않은 암을 갖는 유사한 상황의 대상체와 비교하여 보다 긴 생존을 의미한다.

또한, 본 발명은 대상체에서의 mCRC의 예후를 측정 방법을 포함한다. 본 발명의 이러한 양상에 따른 방법은 대상체로부터 샘플을 수득하고 상기 샘플 중의 바이오마커의 수준을 측정함을 포함하고, 여기서, mCRC를 갖는 대상체에서 각각의 바이오마커의 발현 수준 중앙값과 비교하여 바이오마커의 변이성 발현(상승되거나 감소된 발현)은 상기 환자를 좋지 못한 예후를 갖는 환자로서 확인시켜 준다. 소정 실시형태에서, 바이오마커는 안지오포이에틴-2(Ang-2) 및 C-반응성 단백질(CRP)로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 소정 실시형태에서, 양호한 예후로는 증가된 전체 생존, 무진행 생존, 감소된 종양 성장, 종양 퇴행, 및 환자에서의 종양 재발의 억제로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 효과가 포함된다. 예를 들면, 본 발명의 연구에서, 본 발명자들은 Ang-2 또는 CRP의 저 혈장 수준이 mCRC를 갖는 환자의 보다 높은 전체 생존 확률과 상관관계가 있음을 발견하였다.

실시예

하기 실시예는 당해 분야 숙련가들에게 본 발명의 방법 및 조성물을 제조하고 사용하는 방법의 완전한 개시 및 상세한 설명을 제공하기 위해 제시되고, 본 발명자들이 이들의 발명으로서 간주하는 것의 범위를 한정하도록 의도되지 않는다. 사용된 수(예를 들면, 양, 온도 등)에 관한 정확성을 확보하기 위한 노력이 이루어졌지만, 소정의 실험적 오차 및 편차는 고려되어야만 한다. 달리 나타내지 않는 한, 부는 중량부이고, 분자량은 평균 분자량이고, 온도는 ℃이고, 압력은 대기압이거나 대기압 부근이다.

실시예 1: 전이성 결장직장암을 갖는 환자에서의 VEGF 트랩의 3기 임상 시험으로부터의 기저선 혈장 샘플 중의 잠재적 예측 및 예후 바이오마커의 확인

도입

VEGFR1 및 VEGFR2의 리간드(예를 들면, VEGF-A, PLGF, 및 VEGF-B)에 결합하여 이를 중화시키는 VEGF-R1-R2-Fc 키메라 단백질인 ZALTRAP®(ziv-애플리버셉트, VEGF 트랩으로서도 공지됨)은, (구체적으로는 옥살리플라틴을 포함하는 기존 치료요법 후 진행된 환자에서 FOLFIRI[이리노테칸, 5-플루오로우라실, 및 류코보린을 포함하는 화학치료학적 용법]와의 조합으로) 전이성 결장직장암(mCRC)의 치료를 위해 승인되었다.

예후 및 예측 인자 둘 다를 확인하기 위한 노력으로, FOLFIRI +/- ziv-애플리버셉트(VELOUR, ClinicalTrials.gov Identifier; NCT00561470)의 1226-환자 중심의 무작위 분류되고 위약 제어된 제한 시험으로부터 혈장 및 종양 샘플을 분석하였다. 이러한 실시예는 ziv-애플리버셉트 반응의 가능한 바이오마커를 확인하기 위한 목표로 기저선 혈장 샘플의 분석을 제시한다.

결과

553 기저선 혈장 샘플로부터의 단백질 바이오마커의 회고 분석(retrospective analysis)을 수행하였다. 수집된 샘플들로부터 나타내어지는 집단은 전체 VELOUR 집단과 유사하였다. 다중 면역검정 및 ELISA를 이용하여 98개 분석물의 수준에 대해 샘플들을 분석하였다. 바이오마커 값들은 중앙값에 기초하여 바이오마커 "고" 및 "저" 그룹으로 양분하였고, 이어서, 치료시 환자의 전체 생존(OS)에 대해 분석하였다.

OS에 관해서, 전체 VELOUR 집단에서의 HR = 0.817에 비하여 혈장 바이오마커 집단에서의 위험 비(HR)는 0.809였다. 무진행 생존(PFS)에 관해서, VELOUR에서의 HR = 0.758에 비하여 혈장 바이오마커 집단에서의 HR = 0.752이다. ECOG 상태를 포함하는 환자 인구통계(demographics)는 그룹들 사이에 유사하였다. 몇몇의 바이오마커들은 HR < 0.7(0.05의 거짓 발견율 및 상호작용 p < 0.10)로, OS를 잠재적 예측하거나 예후하는 것으로 확인되었다. ziv-애플리버셉트 치료로 OS를 악화시키는데 부합한 바이오마커 서브세트는 존재하지 않았다.

8개의 바이오마커들은 OS를 잠재적으로 예측하는 것으로서 확인되었고(위험 비(HR) < 0.7; p < 0.01, 심지어 다중 시험을 처리한 후에도 유의하였음), 한편 23개의 바이오마커들은 OS를 잠재적으로 예후하는 것으로서 확인되었다(p < 0.01). 고수준의 VEGF-A(중앙값 = 142pg/mL)는 ziv-애플리버셉트 치료요법에 대해 반응하는 잠재적 예측 바이오마커들 중 하나로서 알려졌다. 표 1은 고 또는 저 혈장 VEGF-A 수준을 갖는 대조군 및 ziv-애플리버셉트-치료된 환자의 전체 생존 중앙값의 초기 분석을 보여준다.

표 1에 나타낸 바와 같이, ziv-애플리버셉트로 치료된 고 혈장 VEGF-A 수준을 갖는 환자는 대조군 그룹보다 더 높은 전체 생존을 나타냈다. HR은 0.644(상호작용 p-값: 0.056)인 것으로 계산되었고, 이는 VEGF-A가 잠재적 예측 마커임을 나타냈다. PFS에 관해서 비슷한 결과가 나타났다(HR = 0.599, 95% CI: 0.453 내지 0.792, p=0.001). 유사하게, 전체 반응률(ORR)은 고 VEGF-A 수준을 갖는 환자들에 있어서 대조군 그룹에서의 6.2%로부터 애플리버셉트-치료된 그룹에서의 22.7%로 증가하였다.

88 내지 1140pg/mL의 범위 내의 VEGF 값("고" 수준으로서 분류됨)을 사용하여 5% 스텝-업 증분(step-up increments)에서의 컷오프 값을 측정하였다. OS에 대한 HR은 222pg/mL 미만의 VEGF 컷오프 수준으로 안정하였다(도 1). 보다 높은 VEGF 수준(> 355pg/mL)에서, ziv-애플리버셉트 효과는 현저한 것은 아니었다(최고 환자들의 20%).

VEGF 경로 단백질 VEGF-R2 및 VEGF-R3은 잠재적 예측 바이오마커로서 확인되었다. ziv-애플리버셉트로 치료된 고 혈장 sVEGF-R2(중앙값: 4.2pg/mL)를 갖는 환자들은 잠재적으로 대조군 그룹보다 더 우수한 OS를 갖는 것으로 밝혀졌다(HR=0.686, 95% CI: 0.49 내지 0.85, p=0.008). PFS로 비슷한 결과가 밝혀졌다(HR=0.679, 95% CI: 0.516 내지 0.893, p=0.005). ziv-애플리버셉트로 치료된 고 혈장 sVEGF-R3(중앙값: 35pg/mL)을 갖는 환자들은 잠재적으로 대조군 그룹보다 더 우수한 OS를 갖는 것으로 밝혀졌다(HR=0.686, p=0.006). PFS에 대해 비슷한 결과가 수득되었다(HR=0.711, 95% CI: 0.545 내지 0.927, p=0.01).

계면활성제 단백질 D(SPD)는 잠재적 예측 마커로서 확인되었다. ziv-애플리버셉트로 치료된 저 혈장 SPD 수준을 갖는 환자들은 대조군 그룹보다 더 높은 전체 생존을 나타냈다(9.7개월과 비교하여 13.9개월; HR=0.598, 95% CI: 0.453 내지 0.791, p 값 < 0.001). PFS에 대해 비슷한 결과가 나타났다(HR=0.581, 95% CI: 0.437 내지 0.773, p < 0.001). 전체 반응률은 저 SPD 수준을 갖는 환자에 있어서 대조군 그룹에서의 8.1%로부터 애플리버셉트-치료된 그룹에서의 25.6%로 증가하였다.

대식세포 유주 억제 인자(MIF)는 잠재적 예측 마커로서 확인되었다. ziv-애플리버셉트로 치료된 고 혈장 MIF를 갖는 환자들은 대조군 그룹보다 더 높은 전체 생존을 나타냈다(9.5개월에 비하여 12.7개월; HR=0.67, 95% CI: 0.512 내지 0.875, p 값: 0.003). PFS로 유사한 결과가 밝혀졌다(HR=0.607, 95% CI: 0.463 내지 0.797, p 값 < 0.001). 전체 반응률은 고 혈장 MIF 수준을 갖는 환자에 있어서 대조군 그룹에서의 10.5%로부터 애플리버셉트-치료된 그룹에서의 20.9%로 증가하였다.

에오탁신-1(CCL11)은 잠재적 예측 마커로서 확인되었다. ziv-애플리버셉트로 치료된 고 혈장 에오탁신-1을 갖는 환자들은 보다 높은 생존 확률을 나타냈다(HR: 0.661, 95% CI: 0.497 내지 0.879; p-값 0.004). PFS로 유사한 결과가 나타났다(HR=0.701, 95% CI: 0.528 내지 0.929, p 값 0.012). 전체 반응률은 고 혈장 에오탁신-1 수준을 갖는 환자에 있어서 대조군 그룹에서의 8.7%로부터 애플리버셉트-치료된 그룹에서의 23.3%로 증가하였다. 다변량(multivariate) 분석에서, 에오탁신-1은 ziv-애플리버셉트에 대한 반응을 예측하였다.

헵신은 잠재적 예측 마커로서 확인되었다. ziv-애플리버셉트로 치료된 고 혈장 헵신을 갖는 환자들은 보다 높은 생존 확률을 나타냈다(HR: 0.671, 95% CI: 0.511 내지 0.881; p-값 0.004). PFS로 유사한 결과가 밝혀졌다(HR: 0.661, 95% CI: 0.501 내지 0.871; p 값 0.003). 전체 반응률은 고 혈장 헵신 수준을 갖는 환자에 있어서 대조군 그룹에서의 10%로부터 애플리버셉트-치료된 그룹에서의 22.5%로 증가하였다. 다변량 분석에서, 헵신은 ziv-애플리버셉트에 대한 반응을 예측하였다.

몇몇의 바이오마커들은 잠재적으로 예측성 및 예후성 둘 다인 것으로 확인되었다. 인터류킨-8(L-8)은 예측뿐만 아니라 예후 마커일 수 있다. ziv-애플리버셉트로 치료된 저 혈장 IL-8 수준을 갖는 환자들은 대조군-치료된 환자들보다 더 높은 전체 생존을 나타냈다(8.0개월에 비하여 9.4개월; HR=0.632, 95% CI: 0.489 내지 0.817, p 값: 0.0006). PFS에 대해 비슷한 결과가 수득되었다(3.9개월에 비하여 4.9개월; HR=0.694, 95% CI: 0.534 내지 0.902, p 값: 0.005). 또한, IL-8은 잠재적 예후 마커로서 확인되었다. 저 혈장 IL-8 수준을 갖는 환자들은 보다 우수한 OS를 갖는 것으로 밝혀졌다(애플리버셉트-치료된 환자들에 대한 9.4개월에 비하여 18.8개월, HR=2.319, p=0; 및 대조군에 대한 8.0개월에 비하여 19.8개월, HR=4.48, p=0).

5.1 내지 111pg/mL의 범위 내의 IL-8 값("고" 수준으로서 분류됨)을 이용하여 5% 스텝-업 증분에서의 컷오프 값을 측정하였다. OS에 대한 HR은 49pg/mL 미만의 IL-8 컷오프 수준으로 안정하였다(도 2). 20 내지 31pg/mL 수준에서 최고의 HR이 나타났다. 보다 높은 IL-8 수준(> 63pg/mL)에서, ziv-애플리버셉트 효과는 현저한 것은 아니었다(최고 환자들의 20%).

뉴로필린-1(NRP1)은 예후 마커일 수 있다. 저 혈장 NRP1을 갖는 환자들은 애플리버셉트-치료된 환자들(10.0개월에 비하여 18.7개월, HR=2.104, p<0.001)에 대해 그리고 대조군(9.0개월에 비하여 14.2개월, HR=2.032, p<0.001)에 대해 보다 우수한 OS를 갖는 것으로 밝혀졌다.

안지오포이에틴 2(Ang-2) 및 C-반응성 단백질은 잠재적 예후 마커들로서 알려졌다.

표 2는 고 또는 저수준의 Ang-2를 갖는 대조군 및 치료된 환자들의 전체 생존 중앙값의 초기 분석을 보여준다.

표 2에 나타낸 바와 같이, 저 혈장 Ang-2 수준(< 3.9ng/mL)을 갖는 환자들은 치료에 관계없이 고 Ang-2 수준을 갖는 환자들보다 더 우수한 생존 결과를 나타냈다. 고수준의 Ang-2는 대조군 및 치료된 환자 서브세트 둘 다에서 좋지 못한 예후 효과와 상관관계가 있다(치료된 환자에서의 HR=1.83; 대조군에서의 HR=1.54)(상호작용 p-값: 0.366). Ang-2 발현과 관련된 통계학적으로 유의한 예측 효과는 밝혀지지 않았다.

표 3은 고 또는 저수준의 CRP를 갖는 대조군 및 치료된 환자들의 전체 생존 중앙값의 초기 분석을 보여준다.

표 3에 나타낸 바와 같이, 저 혈장 CRP 수준(< 9.4㎍/mL)을 갖는 환자들은 치료에 관계없이 고 CRP 수준을 갖는 환자들보다 더 우수한 생존 결과를 나타냈다. 고수준의 CRP는 대조군 및 치료된 환자 서브세트 둘 다에서 좋지 못한 예후 효과와 상관관계가 있다(치료된 환자에서의 HR=2.553, p<0.001; 및 대조군에서의 HR=2.773, p<0.001). CRP 발현과 관련된 예측 효과는 밝혀지지 않았다.

ziv-애플리버셉트 치료로 OS를 악화시키는데 부합한 바이오마커 서브세트는 존재하지 않았다.

표 4는 애플리버셉트 치료에 대한 최고 잠재적 예측 마커 결과를 요약한다.

결론

본 연구에서, 예를 들면, VEGF-A를 포함하는, ziv-애플리버셉트에 대해 반응하는 다중 예측 바이오마커들이 확인되었다. 높은 VEGF-A 그룹(즉, 142pg/mL 초과의 혈장 수준)의 환자들은 애플리버셉트 치료에 가장 이로운 것으로 보였다. VEGF-R2 및 VEGF-R3으로 유사한 결과가 관찰되었다. VEGF-R2 및 VEGF-R3은 특징적 구성성분으로서 추가의 연구를 위해 흥미로운 것일 수 있다. 그러나, 최고 VEGF 수준에서, 이점은 감소하는 것으로 밝혀졌다. 또한, 몇몇의 예후 바이오마커들은 본 분석의 과정에서 확인되기도 하였다. 대안의 혈관신생 인자(예를 들면, Ang-2)의 상승된 발현 또는 증가된 염증성 마커(예를 들면, CRP)를 갖는 환자 서브세트는 좋지 못한 결과와 상관관계가 있다. 저 NRP-1은 생존에 대한 예후 마커일 수 있다. 고 VEGF 경로 마커를 함유하는 샘플은 또한 ziv-애플리버셉트 치료의 부재시 좋지 못한 결과와 상관관계가 있다. 환자에서의 관련 경로의 확인은 병용 치료요법의 효능을 최적화하는데 중요할 것이다.

실시예 2: 난소암을 갖는 환자에서의 VEGF 트랩의 2기 임상 시험으로부터의 혈청 샘플 중의 잠재적 바이오마커의 확인

진행성 난소암의 국제 이중-맹검 2기 연구에서(ClinicalTrials.gov Identifier: NCT00327171), 애플리버셉트를 단일 치료요법으로서 사용하였다. 환자들은 2주마다 2mg/kg 또는 4mg/kg 용량의 애플리버셉트를 투여받았고 전체 반응에 대해 모니터링되었다. 잠재적 예측 및 예후 마커를 확인하기 위해 혈청 샘플을 분석하였다. 본 실시예에서, 인터류킨-6(IL-6)의 혈청 수준은 96명의 환자들의 서브세트에서 측정되었다.

본 연구는 양쪽 아암(arm)에서 5%의 중간 정도의 반응률을 나타냈다. 저(< 중앙값) 및 고(> 중앙값) IL-6 혈청 수준에 기초하여 데이터를 계층화한 경우, 저 IL-6 수준(< 중앙값)을 갖는 환자들에 비하여 고 IL-6 수준(> 중앙값)을 갖는 환자들이 좋지 못한 반응(즉, 유의하게 더 좋지 못한 생존)을 나타냄이 명백해진다(도 3). 결과는 고수준의 IL-6과 항-VEGF 치료요법에 대한 더 좋지 못한 반응 사이의 상관관계를 시사한다. 상승된 IL-6 수준은 몇몇 환자들에서 관찰된 항-VEGF 치료요법에 대한 내성의 직접적 또는 간접적 원인일 수 있다. 따라서, 본 실시예의 결과는 상승된 수준의 IL-6에 대해 암 환자들을 스크리닝하는 것은 항-IL-6 또는 항-IL-6R 치료요법과 항-VEGF 치료요법을 병용하여 이들 환자에서의 항-VEGF 치료요법에 대한 내성의 발달에 대응하거나 이를 지연시킴으로써 치료학적 결과가 향상될 수 있는 몇몇 환자들을 확인시켜 줄 수 있음을 시사한다.

본 발명은 본원에 기술된 특정 실시형태에 의해 그 범위가 한정되는 것은 아니다. 실제로, 본 발명의 각종 변형은 본원에 기술된 것에 추가하여 상기 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 및 수반되는 도면으로부터 당해 분야 숙련가들에게 명백해질 것이다. 이러한 변형은 첨부된 청구범위의 범위 내인 것으로 의도된다.

SEQUENCE LISTING <110> REGENERON PHARMACEUTICALS, INC. <120> PREDICTIVE AND PROGNOSTIC BIOMARKERS RELATED TO ANTI-ANGIOGENIC THERAPY OF METASTATIC COLORECTAL CANCER <130> 10101WO01 <150> US 62/051,091 <151> 2014-09-16 <150> US 62/099,630 <151> 2015-01-05 <160> 2 <170> KopatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1377 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VEGF Trap <400> 1 atggtcagct actgggacac cggggtcctg ctgtgcgcgc tgctcagctg tctgcttctc 60 acaggatcta gttccggaag tgataccggt agacctttcg tagagatgta cagtgaaatc 120 cccgaaatta tacacatgac tgaaggaagg gagctcgtca ttccctgccg ggttacgtca 180 cctaacatca ctgttacttt aaaaaagttt ccacttgaca ctttgatccc tgatggaaaa 240 cgcataatct gggacagtag aaagggcttc atcatatcaa atgcaacgta caaagaaata 300 gggcttctga cctgtgaagc aacagtcaat gggcatttgt ataagacaaa ctatctcaca 360 catcgacaaa ccaatacaat catagatgtg gttctgagtc cgtctcatgg aattgaacta 420 tctgttggag aaaagcttgt cttaaattgt acagcaagaa ctgaactaaa tgtggggatt 480 gacttcaact gggaataccc ttcttcgaag catcagcata agaaacttgt aaaccgagac 540 ctaaaaaccc agtctgggag tgagatgaag aaatttttga gcaccttaac tatagatggt 600 gtaacccgga gtgaccaagg attgtacacc tgtgcagcat ccagtgggct gatgaccaag 660 aagaacagca catttgtcag ggtccatgaa aaggacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc 720 ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac 780 accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 840 gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 900 aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 960 caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 1020 gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 1080 accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 1140 aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 1200 aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 1260 ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 1320 gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 1377 <210> 2 <211> 458 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VEGF Trap <400> 2 Met Val Ser Tyr Trp Asp Thr Gly Val Leu Leu Cys Ala Leu Leu Ser 1 5 10 15 Cys Leu Leu Leu Thr Gly Ser Ser Ser Gly Ser Asp Thr Gly Arg Pro 20 25 30 Phe Val Glu Met Tyr Ser Glu Ile Pro Glu Ile Ile His Met Thr Glu 35 40 45 Gly Arg Glu Leu Val Ile Pro Cys Arg Val Thr Ser Pro Asn Ile Thr 50 55 60 Val Thr Leu Lys Lys Phe Pro Leu Asp Thr Leu Ile Pro Asp Gly Lys 65 70 75 80 Arg Ile Ile Trp Asp Ser Arg Lys Gly Phe Ile Ile Ser Asn Ala Thr 85 90 95 Tyr Lys Glu Ile Gly Leu Leu Thr Cys Glu Ala Thr Val Asn Gly His 100 105 110 Leu Tyr Lys Thr Asn Tyr Leu Thr His Arg Gln Thr Asn Thr Ile Ile 115 120 125 Asp Val Val Leu Ser Pro Ser His Gly Ile Glu Leu Ser Val Gly Glu 130 135 140 Lys Leu Val Leu Asn Cys Thr Ala Arg Thr Glu Leu Asn Val Gly Ile 145 150 155 160 Asp Phe Asn Trp Glu Tyr Pro Ser Ser Lys His Gln His Lys Lys Leu 165 170 175 Val Asn Arg Asp Leu Lys Thr Gln Ser Gly Ser Glu Met Lys Lys Phe 180 185 190 Leu Ser Thr Leu Thr Ile Asp Gly Val Thr Arg Ser Asp Gln Gly Leu 195 200 205 Tyr Thr Cys Ala Ala Ser Ser Gly Leu Met Thr Lys Lys Asn Ser Thr 210 215 220 Phe Val Arg Val His Glu Lys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 225 230 235 240 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 245 250 255 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 260 265 270 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 275 280 285 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 290 295 300 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 305 310 315 320 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 325 330 335 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 340 345 350 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 355 360 365 Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 370 375 380 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 385 390 395 400 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 405 410 415 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 420 425 430 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 435 440 445 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455

Claims (14)

1. VEGFR1의 Ig-유사(Ig-like) 도메인 2, VEGFR2의 Ig-유사 도메인 3, 및 다량체화 도메인을 포함하는 VEGF 트랩(VEGF trap)을 포함하는, 전이성 결장직장암(metastatic colorectal cancer; mCRC)의 치료 방법에 사용하기 위한 약제학적 조성물로서, 상기 방법은 환자에게 상기 VEGF 트랩을 투여함을 포함하고, 여기서, 상기 환자는 mCRC로 진단되었고 88 pg/mL 이상의 VEGF-A 수준을 나타내는 것을 기초로 하여 VEGF 트랩을 사용한 치료를 위해 선택된, 약제학적 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 VEGF 트랩이 ziv-애플리버셉트(ziv-aflibercept)인, 약제학적 조성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 환자에게 이리노테칸, 5-플루오로우라실, 및 류코보린(FOLFIRI)을 포함하는 화학치료학적 요법을 투여함을 추가로 포함하는, 약제학적 조성물.
4. VEGFR1의 Ig-유사 도메인 2, VEGFR2의 Ig-유사 도메인 3, 및 다량체화 도메인을 포함하는 VEGF 트랩을 사용한 치료요법에 유리하게 반응할 가능성이 있는 전이성 결장직장암(mCRC)을 갖는 환자를 확인하는 방법으로서, 상기 방법은 상기 환자로부터 샘플을 수득하고 상기 샘플 중의 VEGF-A의 수준을 측정함을 포함하고; 여기서, 상기 샘플 중의 88 pg/mL 이상의 VEGF-A 수준은 상기 환자를 상기 VEGF 트랩을 사용한 치료요법에 유리하게 반응할 가능성이 있는 환자로서 확인시켜주는, VEGF 트랩을 사용한 치료요법에 유리하게 반응할 가능성이 있는 전이성 결장직장암(mCRC)을 갖는 환자를 확인하는 방법.
5. 제4항에 있어서, 상기 VEGF 트랩이 ziv-애플리버셉트인, 방법.
6. 제4항 또는 제5항에 있어서, 상기 VEGF-A의 발현 수준이 ELISA를 이용하여 측정되는, 방법.
7. 삭제
8. 삭제
9. 삭제
10. 삭제
11. 삭제
12. 삭제
13. 삭제
14. 삭제

Images