KR102466958B1

KR102466958B1 - 단백질 키나제 활성을 억제하는 화합물의 결정 형태 및 이의 응용

Info

Publication number: KR102466958B1
Application number: KR1020187038142A
Authority: KR
Inventors: 콩신 리앙; 용빈 마; 웨이 헤
Original assignee: 타이로제넥스, 인코포레이티드
Priority date: 2016-06-01
Filing date: 2017-06-01
Publication date: 2022-11-14
Also published as: TW201742865A; PH12018502529A1; IL263356B; RU2744264C2; IL263356A; US10899744B2; WO2017206924A1; AU2017274110B2; CA3026142A1; KR20190012231A; MY188379A; SG11201810800VA; JP2019518026A; TWI646094B; RU2018145183A; EP3470410A4; US20190135792A1; EP3470410B1; EP3470410A1; AU2017274110A1

Abstract

화학식 I의 화합물({5-[(1R)-1-(2,6-디클로로-3-플루오로페닐)에톡시]-6-아미노피리다진-3-일}-N-{4-[((3S,5R)-3,5-디메틸피페라지닐)카보닐]페닐}카복스아미드 하이드로클로라이드) 및 상기 화합물의 수화물 또는 용매화물의 신규 결정 형태가 제공된다. 상기 화합물 및 결정 형태의 제조 방법, 관련된 중간체, 상기 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 질환, 증상 또는 장애를 치료하기 위한 약제학적 생성물을 제조하기 위해 상기 화합물 또는 결정 형태를 사용하는 용도, 및 질환, 증상 또는 장애를 치료하기 위한 치료 방법이 추가로 제공된다.
화학식 I

Description

단백질 키나제 활성을 억제하는 화합물의 결정 형태 및 이의 응용

본 발명은 신규한 화합물 {5-[(1R)-1-(2,6-디클로로-3-플루오로페닐)에톡시]-6-아미노피리다진-3-일}-N-{4-[((3S,5R)-3,5-디메틸피페라지닐)카보닐]페닐}카복스아미드 하이드로클로라이드 및 이의 수화물 또는 용매화물의 신규한 결정에 관한 것이다; 본 발명은 추가로 상기 화합물 및 결정 형태의 제조 방법 및 관련된 중간체, 기재된 화합물을 포함하는 약제학적 조성물 및 단백질 키나제(PK)의 활성을 억제하는데 있어서의 이들의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 단백질 키나제의 조절과 관련된 질환, 장애 또는 상태를 치료하기 위한 상기-설명된 화합물 또는 결정 형태 및 약제학적 조성물 중 적어도 하나를 사용하는 방법에 관한 것이기도 하다.

단백질 키나제는 단백질의 인산화를 촉매하는 효소이고, 대부분의 경우, 인산화는 단백질의 세린(ser), 트레오닌(thr) 및 티로신(tyr) 잔기에서 발생한다. 세포 수명의 다양한 국면(예: 세포 성장, 분화, 증식, 세포 주기 및 생존)은 단백질 키나제의 활성에 의존한다. 또한, 단백질 키나제의 비정상적인 활성은 암 및 염증과 같은 많은 장애와 관련되어 있다.

지금까지 500종 이상의 단백질 키나제가 발견되었다. 그들은 기질 단백질이 인산화되는 아미노산 잔기의 유형에 따라 5가지 범주로 나눌 수 있다: ① 세린/트레오닌(Ser/Thr) 단백질 키나제: 단백질의 하이드록실이 인산화된다; ② 티로신(Tyr) 단백질 키나제: 단백질의 페놀성 하이드록실이 인 수용체로서 작용한다; ③ 히스티딘 단백질 키나제: 단백질의 히스티딘, 아르기닌 또는 리신의 염기성 그룹이 인산화된다; ④ 트립토판 단백질 키나제: 단백질 트립토판 잔기가 인 수용체로서 작용한다; ⑤ 아스파틸/글루타밀 단백질 키나제: 단백질의 아실 그룹이 인 수용체로서 작용한다.

현재 100개 이상의 계열 구성원이 발견된 단백질 티로신 키나제(PTK)는 세포 분화, 성장 및 활성화의 조절에 중요한 역할을 한다. PTK는 그들의 구조에 따라 수용체 유형 및 비수용체 유형의 두 범주로 나누어질 수 있고, 전자는 막관통 PTK로서 공지되어 있고, 후자는 세포내 PTK로서 공지되어 있다.

인간 종양의 발생 및 발달은 일련의 종양 유전자의 활성화 및 종양 억제 유전자의 불활성화에 의존한다. 상피 종양의 연구에서, 수용체 티로신 키나제(RTK)의 막관통 단백질이 세포 성장, 분화 및 생존의 조절에 기본적인 역할을 하고, 종양의 발생 및 발달에 중요한 역할을 한다는 것이 밝혀졌다.

RTK의 MET 원생-종양 유전자 하위계열은 2개의 구성원, MET 및 RON(receptor d'origine nantais)을 갖는다.

C-Met 원생-종양 유전자는 Met 수용체 티로신 키나제를 코딩한다. 190KDa 글리코실화 이량체 복합체인 Met 수용체는 145의 β쇄에 이황화물 결합된 50KDa의 α쇄로 구성된다. α 쇄는 세포외로 발견되는 반면, β 쇄는 막관통 및 세포질 도메인을 포함한다. Met는 종양형성 및 전이에서 역할을 하고, Met는 그것의 리간드 간세포 성장 인자(HGF)의 발현으로 형질전환, 종양 형성 및 전이된다(참조: Jefferson, M. et al, Oncogene 1996, 13, 853-856; Michieli, P. et al, Oncogene 1999, 18, 5221-5231). C-Met는 상당한 비율의 인간 암에서 과발현되고, 원발성 종양과 전이 사이의 전이 동안 증폭된다. 많은 연구가 C-Met 및/또는 HGF/SF의 발현을 상이한 유형의 암 진행에 관련시켰다. 또한, C-Met 또는 HGF의 과발현은 다양한 주요 인간 암(폐암, 간암, 위암 및 유방암 포함)에서 불량한 예후 및 질환의 예후와 상관 관계가 있는 것으로 나타났다. C-Met는 또한 췌장암, 신경교종 및 간세포 암종과 같은 성공적으로 치료되지 않은 암에 직접 관여한다.

RON의 동족체는 Stk(마우스) 및 Sea(닭)를 포함한다. 이의 리간드는 HGF에 상동성인 혈청 단백질인 대식세포 자극 단백질(MSP)이다. RON 유전자는 20개의 엑손 및 19개의 인트론을 포함하는 인간 염색체 3p21에 위치한다. 성숙한 RON 단백질은 약 185KDa의 분자량을 갖는 α 및 β 하위단위로 구성된 이종이량체이다. RON 유전자 생성물은 다양한 정상 인간 조직에서 검출될 수 있다. RON은 인간 상피 세포, 과립구, 단핵구 대식세포, 거핵세포, 파골 세포, 편도선 종자층, 소장, 결장, 신장, 폐 및 골수 세포에서 발현된다. 최근 연구에서, 소화계, 비뇨계, 폐 및 유방을 포함하는 많은 인간 원발성 종양 및 종양 세포주에서, RON의 발현은 품질 및 양을 상당히 변화시키는 것으로 나타났다. RON의 발암 활성은 키나제의 활성과 상관 관계가 있고, RON 키나제 활성은 과발현, 돌연변이 및 절단 기전에 의해 상당히 상향조절되어 세포의 악성 형질 전환, 성장 및 이동을 유도할 수 있다. RON은 또한 단독으로 또는 종양 침입 및 전이를 유발하는 다른 인자와 협력하여 작용할 수 있다(참조: International Journal of Pathology and Clinical Medic, 2005, 25(5):441-443).

C-fms로도 공지된 CSF1R(콜로니 자극 인자 1 수용체)은 단일 쇄 막관통 수용체 티로신 키나제이고, 면역글로불린(Ig) 모티프를 함유하는 RTK 계열의 구성원이다. CSF1R은 여성 생식 기관 및 태반의 세포뿐만 아니라 단핵구 세포주에서 주로 발현된다. 또한, CSF1R은 피부의 랑게르한스 세포, 평활근 세포의 하위그룹, B 세포 및 미세아교세포에서 발현된다는 것이 밝혀졌다. CSF1R 신호 전달의 주요 생물학적 효과는 단핵구 라인에서 전구체 대식세포 및 파골 세포의 분화, 증식, 이동 및 생존에서 유래된다.

Axl은 또한 Tyro 3 및 Mer을 포함하는 수용체 티로신 키나제의 하위계열에 에 속한다. Axl의 과발현은 많은 인간 암에서 보고되어 있고, 폐암, 전립선암, 유방암, 위암, 신장 세포 암종 및 아교모세포종의 감염 및 전이와 관련되어 있다. 최근 연구는 "티로신 키나제 스위치"를 통한 Axl의 과발현이 위장관 간질 종양에서 이마티닙 내성을 유발한다는 것을 나타냈다. Axl의 발현은 화학요법 약물에 의해 유도되고, Axl의 과발현은 급성 골수성 백혈병에서의 내성을 유도하여 Axl이 종양 형성의 다양한 국면의 조절에 관여할 수 있음을 시사한다(참조: Oncogene, 2009, 28:3442).

EphA2는 수용체 티로신 키나제의 가장 큰 하위그룹 EPH RTK에 속하고, 연구는 종양을 포함하는 병리학적 상태의 일련의 조절과 관련이 있다는 것을 나타냈다(참조: Pasquale EB. Eph receptors and ephrins in cancer: bidirectional signaling and beyond. Nat Rev Cancer 2010;10:165-80). 최근 연구는 EphA2 블록이 폐암에서 EGFR 키나제 억제제의 획득된 내성을 극복할 수 있음을 나타냈다(참조: Amato et al. Cancer Res 2016; 76(2); 305-18).

ROS1은 인슐린 수용체 계열의 구성원이다. 최근에, ROS1 재배열이 소수의 폐암 환자에서 발견되었다. 그리고, ROS1의 억제제로서 카졸리닙은 이들 환자를 치료하는데 매우 효과적이다(참조: Bergethon et al., J. Clin. Oncol., 2012; 30 (8), 863).

종양원성 및 약물 감수성을 갖는 NTRK1 재배열은 또한 폐암에서도 발견된다(참조: Vaishnavi1 et al. Nature Medicine 2013; 19 (11), 1469). NTRK1 유전자는 고친화성 신경 성장 인자 수용체(TRKA) 단백질을 코딩한다.

역형성 림프종 키나제(ALK)는 RTK 슈퍼패밀리에 속한다. 이소성 t2 염색체로 인해, 종양형성 구성적 활성 ALK 융합 단백질은 역형성 거대 세포 림프종(ALCL) 및 염증성 근섬유모세포 종양(IMT)에서 발현된다. ALK는 최근 작은 비율의 비-소세포 폐암(non-small cell) 및 신경세포종에서 원생 종양 유전자로서 간주되어 왔다(참조: Choi et al, Cancer Res 2008;68:(13); Webb et al, Expert Rev. Anticancer Ther. 2009; 9(3),331-356).

최근에, ALK의 새로운 이소타입이 흑색종 및 산발성 다른 인간 암 유형의 11%에서 발현되는 것으로 밝혀졌지만, 정상 조직에서는 그렇지 않았다(참조: Wiesner et al., Nature 2015; 526, 453). 새로운 ALK 전사물은 ALK^ATI로 공지된 ALK 19에서 인트론의 대안적인 전사 개시(ATI)를 개시한다.

ALK는 또한 신경계 질환에도 관여한다. ALK는 성인 뇌에서 전두엽 피질 및 해마의 기능을 조절하고, ALK는 정신병적 증상(예: 정신분열증, 우울증 및 물질(코카인) 중독)의 새로운 표적으로 동정된다.

크리조티닙은 HGF 수용체 티로신 키나제(C-Met) 및 ALK의 효과적인 억제제로서 보고되었다(WO2004076412; WO2006021881; WO2006021886).

크리조티닙

크리조티닙의 단계 I 임상 시험에서, 64%는 객관적 반응률(ORR)을, 90%는 질환 통제를 달성했다(참조: J Clin Oncology 2010; 28: 7S, Suppl, abstr3). 불행히도, 크리조티닙에 대한 폭력적인 반응은 단지 일시적이다. 대부분의 환자들은 6 내지 18개월의 치료 후에 내성 및 질환 진행을 유발한다. 특히, 상당한 비율의 환자는 크리조티닙에 의해 치료되지 않은 뇌 전이를 갖는다.

이전 특허 공보(WO2009/154769A1, WO2012/048259A2, CN103298806B)는 단백질 키나제 억제제로서 치환된 피리다진 카복시아미드 화합물을 기재하고, 이의 대부분은 IC₅₀ <100nM로 c-Met 및 ALK를 효과적으로 억제한다. 키나제 매개된 질환에 대한 치료의 선택에 있어 아직 충족되지 않은 요구가 있기 때문에, 본 발명자들은 환자의 의학적 필요를 충족시키기 위해 치환된 피리다진 카복스아미드 화합물의 다형성 형태를 추가로 선별한다.

본 발명은 화학식 I의 {5-[(1R)-1-(2,6-디클로로-3-플루오로페닐)에톡시]-6-아미노피리다진-3-일}-N-{4-[((3S,5R)-3,5-디메틸피페라지닐)카보닐]페닐}카복스아미드 하이드로클로라이드를 제공하는 것을 목적으로 한다:

[화학식 I]

본 발명은 또한 화학식 I의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 다양한 대략적으로 순수한 결정 형태에 관한 것이다.

본 발명에서, 화학식 I의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 결정 형태는 하나 이상의 결정 형태로 존재한다.

본 발명은 먼저 화학식 I의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 결정 형태를 제공하고, 이의 X-선 분말 회절 패턴은 4.9±0.2°, 10.0±0.2° 및 19.3±0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크(characteristic peak)를 갖는다. 편의상, 본 발명은 결정 형태 A로 간주된다.

둘째로, 본 발명은 추가로 상기 결정 형태 A의 바람직한 구현예를 제공한다:

바람직하게는, 상기 결정 형태 A의 X-선 분말 회절 패턴은 4.9 ± 0.2 °, 10.0 ± 0.2 °, 14.7 ± 0.2 °, 16.9 ± 0.2 °, 19.3 ± 0.2 ° 및 20.3 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 A의 X-선 분말 회절 패턴은 4.9 ± 0.2 °, 10.0 ± 0.2 °, 14.7 ± 0.2 °, 16.9 ± 0.2 °, 19.3 ± 0.2 °, 20.3 ± 0.2°, 25.5 ± 0.2 ° 및 30.7 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 A는 대략적으로 도 1에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 갖는다.

본 발명은 표 1에 나타낸 바와 같이 결정 형태 A에 대한 X-선 분말 회절 패턴을 요약한다.

2θ (°)	강도 (I%)
4.9 ± 0.2	13.7
10.0 ± 0.2	100
14.7 ± 0.2	17.7
16.9 ± 0.2	20.3
19.3 ± 0.2	63
20.3 ± 0.2	22.4
25.5 ± 0.2	10.8
30.7 ± 0.2	14.9

바람직하게는, 결정 형태 A는 85% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 A는 95% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 A는 99% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 A는 99.5% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 A는 2수화물이다.

본 발명은 추가로 화학식 I의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 또 다른 결정 형태를 제공하고, 이의 X-선 분말 회절 패턴은 10.5 ± 0.2 °, 17.4 ± 0.2 ° 및 21.1 ± 0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다. 편의상, 본 발명은 결정 형태 B로 간주된다.

본 발명은 추가로 상기 결정 형태 B의 바람직한 구현예를 제공한다:

바람직하게는, 상기 결정 형태 B의 X-선 분말 회절 패턴은 10.5 ± 0.2 °, 17.4 ± 0.2 °, 19.7 ± 0.2 °, 21.1 ± 0.2 °, 23.9 ± 0.2 ° 및 25.5 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 B의 X-선 분말 회절 패턴은 10.5 ± 0.2 °, 17.4 ± 0.2 °, 19.7 ± 0.2 °, 21.1 ± 0.2 °, 21.5 ± 0.2 °, 23.9 ± 0.2 °, 25.2 ± 0.2 ° 및 25.5 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 B는 대략적으로 도 2에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 갖는다.

본 발명은 표 2에 나타낸 바와 같이 결정 형태 B에 대한 X-선 분말 회절 패턴을 요약한다.

2θ (°)	강도 (I%)
10.5 ± 0.2 °	100
17.4 ± 0.2 °	56.1
19.7 ± 0.2 °	26.4
21.1 ± 0.2 °	33.4
21.5 ± 0.2 °	23.6
23.9 ± 0.2 °	26.6
25.2 ± 0.2 °	25.8
25.5 ± 0.2 °	28.8

바람직하게는, 결정 형태 B는 85% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 B는 95% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 B는 99% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 B는 99.5% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 B는 3수화물이다.

본 발명은 추가로 화학식 I의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 또 다른 결정 형태를 제공하고, 이의 X-선 분말 회절 패턴은 10.2 ± 0.2 °, 20.6 ± 0.2 ° 및 21.8 ± 0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다. 편의상, 본 발명은 결정 형태 C로 간주된다.

두번째로, 본 발명은 추가로 상기 결정 형태 C의 바람직한 구현예를 제공한다:

바람직하게는, 상기 결정 형태 C의 X-선 분말 회절 패턴은 10.2 ± 0.2 °, 14.7 ± 0.2 °, 19.4 ± 0.2 °, 20.6 ± 0.2 °, 21.8 ± 0.2 ° 및 24.5 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 C의 X-선 분말 회절 패턴은 8.7 ± 0.2 °, 10.2 ± 0.2 °, 14.7 ± 0.2 °, 19.4 ± 0.2 °, 20.6 ± 0.2 °, 21.8 ± 0.2 °, 24.5 ± 0.2 ° 및 25.9 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 C는 대략적으로 도 3에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 갖는다.

본 발명은 표 3에 나타낸 바와 같이 결정 형태 C에 대한 X-선 분말 회절 패턴을 요약한다.

2θ (°)	강도 (I%)
8.7 ± 0.2	23.1
10.2 ± 0.2	100
14.7 ± 0.2	26.1
19.4 ± 0.2	29.4
20.6 ± 0.2	46.9
21.8 ± 0.2	33.9
24.5 ± 0.2	23.4
25.9 ± 0.2	23.2

바람직하게는, 결정 형태 C는 85% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 C는 95% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 C는 99% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 C는 99.5% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 C는 메탄올 용매 화합물이다.

본 발명은 추가로 화학식 I의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 또 다른 결정 형태를 제공하고, 이의 X-선 분말 회절 패턴은 9.2 ± 0.2 °, 18.0 ± 0.2 ° 및 18.5 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다. 편의상, 본 발명은 결정 형태 D로 간주된다.

두번째로, 본 발명은 추가로 상기 결정 형태 D의 바람직한 구현예를 제공한다:

바람직하게는, 상기 결정 형태 D의 X-선 분말 회절 패턴은 4.5 ± 0.2 °, 9.2 ± 0.2 °, 18.0 ± 0.2 °, 18.5 ± 0.2 °, 19.5 ± 0.2 ° 및 20.1 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 D의 X-선 분말 회절 패턴은 4.5 ± 0.2 °, 9.2 ± 0.2 °, 18.0 ± 0.2 °, 18.5 ± 0.2 °, 19.5 ± 0.2 °, 20.1 ± 0.2 °, 22.3 ± 0.2 ° 및 23.1 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 D는 대략적으로 도 4에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 갖는다.

본 발명은 표 4에 나타낸 바와 같이 결정 형태 D에 대한 X-선 분말 회절 패턴을 요약한다.

2θ (°)	강도 (I%)
4.5 ± 0.2	21.9
9.2 ± 0.2	100
18.0 ± 0.2	54.5
18.5 ± 0.2	23.4
19.5 ± 0.2	13.2
20.1 ± 0.2	13.1
22.3 ± 0.2	11.8
23.1 ± 0.2	11.9

바람직하게는, 결정 형태 D는 85% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 D는 95% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 D는 99% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 D는 99.5% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 D는 디메틸 설폭사이드 용매 화합물이다.

본 발명은 추가로 화학식 I의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 또 다른 결정 형태를 제공하고, 이의 X-선 분말 회절 패턴은 4.8 ± 0.2 °, 9.6 ± 0.2 ° 및 25.8 ± 0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다. 편의상, 본 발명은 결정 형태 E로 간주된다.

두번째로, 본 발명은 추가로 상기 결정 형태 E의 바람직한 구현예를 제공한다:

바람직하게는, 상기 결정 형태 E의 X-선 분말 회절 패턴은 4.8 ± 0.2 °, 9.6 ± 0.2 °, 16.3 ± 0.2 °, 18.1 ± 0.2 °, 20.8 ± 0.2 ° 및 25.8 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 E의 X-선 분말 회절 패턴은 4.8 ± 0.2 °, 9.6 ± 0.2 °, 16.3 ± 0.2 °, 18.1 ± 0.2 °, 19.3 ± 0.2 °, 20.8 ± 0.2 °, 25.8 ± 0.2 ° 및 26.7 ± 0.2 °의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.

바람직하게는, 상기 결정 형태 E는 대략적으로 도 5에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 갖는다.

본 발명은 표 5에 나타낸 바와 같이 결정 형태 E에 대한 X-선 분말 회절 패턴을 요약한다.

2θ (°)	강도 (I%)
4.8 ± 0.2	47.1
9.6 ± 0.2	100
16.3 ± 0.2	34.1
18.1 ± 0.2	28.3
19.3 ± 0.2	24.9
20.8 ± 0.2	26.8
25.8 ± 0.2	41.6
26.7 ± 0.2	20.9

바람직하게는, 결정 형태 E는 85% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 E는 95% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 E는 99% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 E는 99.5% 이상의 순도를 갖는다.

바람직하게는, 결정 형태 E는 2수화물이다.

본 발명은 추가로 대략적으로 도 6에 도시된 바와 같은 X-선 분말 회절 패턴을 갖는 화학식 6의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 무정형 형태를 제공한다.

본 발명은 추가로 상기 결정 형태 A 및/또는 결정 형태 B의 치료적 유효량을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 상기 약제학적 조성물의 바람직한 구현예를 제공한다:

바람직하게는, 약제학적 조성물은 본원에서 제공되는 치료적 유효량의 결정 형태 A 또는 결정 형태 B, 및 약제학적으로 허용되는 부형제, 보조제 또는 담체를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 본원에서 제공되는 치료적 유효량의 결정 형태 A 및 결정 형태 B, 및 약제학적으로 허용되는 부형제, 보조제 또는 담체를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 적어도 하나의 다른 유효 성분과 조합한, 치료적 유효량의 본 발명의 결정 형태 A 또는 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 적어도 하나의 다른 유효 성분과 조합한, 치료적 유효량의 본 발명의 결정 형태 A 및 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 경구 제제의 형태이다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 정제 또는 캡슐의 형태이다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 20mg 내지 150mg의 결정 형태 A 및/또는 결정 형태 B를 포함하고, 하나 이상의 부형제, 보조제 및/또는 담체와 함께 총량 약 50mg 내지 500mg으로 제형화된다.

바람직하게는, 약제학적 조성물 중의 부형제, 보조제 및/또는 담체는 미세결정성 셀룰로스, 만니톨, 크로스포비돈, 크로스카멜로스 나트륨, 나트륨 카복시메틸 전분, 포비돈, 하이드록시프로필 셀룰로스 및/또는 스테아르산이다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 0.01중량% 내지 99중량%의 결정 형태 A 또는 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 0.01중량% 내지 99중량%의 결정 형태 A 및 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 0.1중량% 내지 70중량%의 결정 형태 A 또는 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 0.1중량% 내지 70중량%의 결정 형태 A 및 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 1중량% 내지 70중량%의 결정 형태 A 또는 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 1중량% 내지 70중량%의 결정 형태 A 및 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 1중량% 내지 50중량%의 결정 형태 A 또는 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 1중량% 내지 50중량%의 결정 형태 A 및 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 1중량% 내지 30중량%의 결정 형태 A 또는 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 1중량% 내지 30중량%의 결정 형태 A 및 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 10중량% 내지 30중량%의 결정 형태 A 또는 결정 형태 B를 포함한다.

바람직하게는, 약제학적 조성물은 10중량% 내지 30중량%의 결정 형태 A 및 결정 형태 B를 포함한다.

본 발명은 또한 환자의 질환, 장애 또는 상태를 치료하기 위한 의약을 제조하는데 있어서 결정 형태 A 및/또는 결정 형태 B의 용도로서, 상기 질환, 장애 또는 상태가 c-Met, RON, Axl, CSF1R, EphA2, ROS1 또는 ROS1 융합 단백질, TRKA 또는 TRKA 융합 단백질, TRKB, TRKC, ALK, ALK^ATI 또는 ALK 융합 단백질에 의해 매개되는, 용도를 제공한다.

본 발명은 또한 결정 형태 A 및/또는 결정 형태 B의 상기 용도의 바람직한 구현예를 제공한다:

바람직하게는, ALK 융합 단백질은 EML4-ALK 또는 NPM-ALK 키나제이다.

바람직하게는, 상기 질환, 장애 또는 상태는 암 및/또는 증식성 질환이다.

바람직하게는, 상기 질환, 장애 또는 상태는 폐암, 흑색종, 결장암, 유방암, 간암, 췌장암, 뇌암, 신장암, 난소암, 위암, 피부암, 골암, 신경교종, 림프종, 신경모세포종, 간세포 암종, 유두형 신장 세포 암종 및/또는 두경부 편평 세포 암종이다.

바람직하게는, 상기 질환, 장애 또는 상태는 크리조티닙 요법(crizotinib therapy)에 내성인 비-소세포 폐암(NSCLC)이다.

바람직하게는, 상기 질환, 장애 또는 상태는 흑색종이다.

바람직하게는, 상기 질환, 장애 또는 상태는 신경 질환, 정신 질환, 비만, 당뇨병 및/또는 심혈관 질환이다.

바람직하게는, 상기 정신 질환은 정신 분열증, 우울증 및/또는 물질 중독 또는 물질 남용이다.

바람직하게는, 상기 물질의 중독 또는 남용은 코카인, 담배 또는 알콜의 중독 또는 남용이다.

본 발명은 또한 본원에서 제공된 결정 형태 A 및/또는 결정 형태 B를 환자에게 투여함으로써 질환, 장애 또는 상태를 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명은 추가로 결정 형태 A 및/또는 결정 형태 B를 이용하여 환자의 질환, 장애 또는 상태를 치료하는 상기-설명된 방법의 바람직한 구현예를 제공한다:

바람직하게는, 상기 질환, 장애 또는 상태는 c-Met, RON, Axl, CSF1R, EphA2, ROS1 또는 ROS1 융합 단백질, TRKA 또는 TRKA 융합 단백질, TRKB, TRKC, ALK, ALK^ATI 또는 ALK 융합 단백질에 의해 매개된다.

바람직하게는, 상기 ALK 융합 단백질은 EML4-ALK 또는 NPM-ALK 키나제이다.

바람직하게는, 상기 질환, 장애 또는 상태는 크리조티닙 요법에 내성인 비-소세포 폐암(NSCLC)이다.

바람직하게는, 상기 질환, 장애 또는 상태는 흑색종이다.

바람직하게는, 상기 정신 질환은 정신 분열증, 우울증 및/또는 물질의 중독 또는 남용이다.

본 발명은 다음과 같은 화학식 I의 화합물의 제조 방법을 추가로 제공한다:

방법 1:

방법 2:

방법 3:

본 발명은 다음과 같이 화학식 I의 화합물의 제조에서 중간체를 추가로 제공한다:

.

본 발명은 화학식 I의 화합물, 이의 수화물 및/또는 용매화물의 결정 형태 A 및 결정 형태 B의 제조 방법을 추가로 제공한다.

여기서, 결정 형태 A는 다음과 같이 제조된다:

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 원심분리 튜브에 위치시키고, 실온에서 6 내지 10일 동안 기밀(airtight) 에탄올 또는 아세토니트릴 대기 중에서 저장하여 결정 형태 A를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 에탄올에 첨가하고, 4℃ 내지 25℃에서 교반하고, 여과시켜 결정 형태 A를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 4℃ 내지 25℃에서 에탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 다량의 결정이 관찰될 때까지 교반하에 여액에 n-헵탄을 첨가한 다음, 여과시켜 결정 형태 A를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 55℃ 내지 70℃에서 메틸 3급-부틸 에테르/에탄올 또는 n-헵탄/에탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 고체가 관찰될 때까지 여액을 -20℃에서 저장하고, 여과시켜 결정 형태 A를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 2급 부틸 알콜에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과한 다음, 35℃ 내지 50℃에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정 형태 A를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 메탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 여액에 카복시메틸 셀룰로스를 첨가하고, 실온에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정 형태 A를 수득한다.

여기서, 결정 형태 B의 제조 방법은 다음과 같다:

결정 형태 A를 메탄올, 에탄올 또는 물에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과시킨 다음, 실온(20℃) 내지 40℃에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 메탄올/물, 메탄올/아세톤, 메탄올/에틸 아세테이트, 메탄올/메틸 3급-부틸 에테르, 메탄올/테트라하이드로푸란, 메탄올/디클로로메탄, 에탄올/물, 에탄올/부탄온, 에탄올/이소프로필 아세테이트, 에탄올/n-헵탄, 트리플루오로에탄올/물, 트리플루오로에탄올/에틸 아세테이트, 트리플루오로에탄올/테트라하이드로푸란, 물/메탄올, 물/에탄올, 물/트리플루오로에탄올, 물/이소프로판올, 물/아세톤, 물/테트라하이드로푸란 또는 물/아세토니트릴에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득한 다음, 용액을 여과시키고, 실온(20℃) 내지 40℃에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 저급 알콜, 물, 니트로메탄, 부탄온, 에틸 에테르, 에틸 아세테이트, 테트라하이드로푸란, 톨루엔 또는 n-헵탄에 첨가하여 현탁액을 형성한 다음, 현탁액을 실온 내지 40℃에서 4 내지 5일 동안 교반하고, 원심분리시켜 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 물-포화된 에틸 아세테이트 층, 에틸 아세테이트의 포화된 수성 층, 에탄올/디에틸 에테르, 톨루엔/아세토니트릴, 부탄온/에탄올 또는 톨루엔/이소프로필 에테르에 첨가하여 현탁액을 형성한 다음, 현탁액을 4℃ 내지 40℃에서 4 내지 5일 동안 교반하고, 원심분리시켜 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 실온에서 메탄올, 아세톤/물(3:1 v/v) 또는 아세토니트릴/물(3:2 v/v)에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득한 다음, 용액에 하이드록시프로필셀룰로스, 에틸셀룰로스, 포비돈 K30, 폴리알릴아민 하이드로클로라이드, 카복시메틸셀룰로스 또는 폴리비닐 알콜을 첨가하고, 실온에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 60℃ 내지 70℃에서 저급 알콜 또는 물에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 결정이 관찰될 때까지 4℃에서 교반시켜 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 55℃ 내지 70℃에서 아세톤/트리플루오로에탄올, 아세톤/물, 디옥산/물, 아세토니트릴/물 또는 메틸 3급-부틸 에테르/n-프로판올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 여액을 결정이 관찰될 때까지 -20℃에서 교반시킨 다음, 여과시켜 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 60℃ 내지 70℃에서 니트로메탄/메탄올, 아세토니트릴/메탄올, 부탄온/에탄올, 에틸 아세테이트/에탄올, 1,4-디옥산/에탄올 또는 테트라하이드로푸란/물에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과시키고 실온에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 실온에서 메탄올, 에탄올, 물, 트리플루오로에탄올, n-프로판올 또는 디메틸 설폭사이드에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시키고, 여액에 다량의 결정이 관찰될 때까지 아세톤, 에틸 아세테이트, 메틸 3급-부틸 에테르, 이소프로필 에테르, 이소프로필 아세테이트, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세토니트릴, n-헵탄, 디클로로메탄 또는 클로로포름을 적가하여 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 실온에서 메탄올 또는 에탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 이어서 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 여액에 디클로로메탄 또는 테트라하이드로푸란을 교반하에 첨가하고, 실온에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정 형태 B를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 원심분리 튜브에 위치시킨 다음, 원심분리 튜브를 n-부탄올, 물, 니트로메탄, 에틸 아세테이트, 메틸 3급-부틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 메틸렌 클로라이드(methylene chloride), 클로로포름(chloroform) 또는 톨루엔(toluene)의 대기에 위치시켜 확산시킴으로써 결정 형태 B를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 n-프로판올, 물, 부탄온, 에틸 아세테이트, 테트라하이드로푸란, 디클로로메탄, 에탄올, 이소프로판올, n-부탄올, 아세톤, 에틸 에테르, 이소프로필 아세테이트, 1,4-디옥산, 아세토니트릴, 클로로포름, 2급-부탄올, 니트로메탄 또는 톨루엔에 첨가하고, 4℃ 내지 40℃에서 30분 동안 교반한 다음 여과시켜 결정 형태 B를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 이소프로필 에테르/메탄올, 에틸 아세테이트/메탄올, 1,4-디옥산/메탄올, 부탄온/에탄올, 아세토니트릴/에탄올, n-헵탄/에탄올, 니트로메탄/트리플루오로에탄올, 에테르/트리플루오로에탄올, 테트라하이드로푸란/트리플루오로에탄올, 아세톤/물, 테트라하이드로푸란/물, 아세토니트릴/물, 메틸 3급-부틸 에테르/이소프로판올, 이소프로필 아세테이트/n-프로판올, 메틸사이클로헥산/n-부탄올, 아세톤/디메틸 설폭사이드, 에틸 아세테이트/디메틸 설폭사이드, 아세토니트릴/디메틸 설폭사이트, 메틸 3급-부틸 에테르/클로로포름 또는 톨루엔/에틸 아세테이트에 첨가하여 현탁액을 형성하고, 4℃ 내지 40℃에서 교반한 다음, 여과시켜 결정 형태 B를 수득하고; 또는

화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 실온에서 85% RH의 습도에 10일 동안 위치시켜 결정 형태 B를 수득하고; 또는

결정 형태 A를 물 또는 메탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 여액을 40℃ 내지 60℃에서 회전 증발 건조시켜 결정 형태 B를 수득한다.

본 발명의 결정 형태는 대략적으로 순수하다.

본원에 사용된 용어 "대략적으로 순수한"은 화학식 I의 화합물의 적어도 85중량%, 바람직하게는 적어도 95중량%, 보다 바람직하게는 적어도 99중량%, 가장 바람직하게는 적어도 99.5중량%가 본 발명의 결정 형태로, 특히 결정 형태 A 및/또는 결정 형태 B로 존재한다는 것을 의미한다.

상기 결정 형태는 주요 피크만을 요약한다. 주요 피크는 재현 가능하고, 오차 한계(± 0.2) 이내이다.

본 발명에서, "X-선 분말 회절 패턴은 대략적으로 도 1에서와 같이 나타난다" 또는 "X-선 분말 회절 패턴은 대략적으로 도 2에서와 같이 나타난다"는 도 1 또는 도 2에서와 같은 주요 피크를 나타내는 X-선 분말 회절 패턴을 의미하고, 여기서 주요 피크는 도 1 또는 도 2에서 가장 높은 피크(이의 상대 강도는 100%인 것으로 지정됨)에 비해 10% 초과, 바람직하게는 30% 초과의 상대 강도를 갖는 것들을 의미한다.

결정 형태 A 또는 결정 형태 B의 제조 방법에 포함되는 "메탄올/아세톤에 첨가된"은 상기 방법에서 메탄올이 먼저 첨가된 다음, 아세톤이 첨가되는 것을 의미한다. 유사하게, "에탄올/물"은 에탄올이 먼저 첨가된 후, 물이 첨가됨을 의미하고, "트리플루오로에탄올/에틸 아세테이트"는 트리플루오로에탄올이 먼저 첨가된 다음, 에틸 아세테이트가 첨가됨을 의미한다. 유사한 방식으로, 예를 들어, "용매 1/용매 2"는 용매 1이 먼저 첨가된 다음, 용매 2가 첨가됨을 의미하고, "용매 2/용매 1"은 용매 2가 먼저 첨가된 다음, 용매 1이 첨가됨을 의미한다.

본 발명에서, 용어 "치료적 유효량"은 질환, 또는 질환 또는 장애의 임상적 증상 중 적어도 하나를 치료하기 위해 대상체에게 투여시, 질환, 장애 또는 증상에 대한 이러한 치료에 영향을 미치기에 충분한 화합물의 양을 의미한다. "치료적 유효량"은 화합물, 질환, 장애 및/또는 질환 또는 장애의 증상, 질환, 장애 및/또는 질환 또는 장애의 증상의 중증도, 치료될 대상체의 연령, 및/또는 치료될 대상체의 체중에 따라 변할 수 있다. 임의의 소정의 경우에 적절한 양은 당업자에게 명백할 수 있거나 통상적인 실험에 의해 결정될 수 있다. 병용 요법의 경우, "치료적 유효량"은 질환, 장애 또는 상태의 효과적인 치료를 위한 병용물의 총량을 의미한다.

본 발명의 약제학적 조성물의 모든 제형은 제약 분야에서 통상적인 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 활성 성분을 하나 이상의 부형제와 혼합한 다음, 목적하는 제형을 제조할 수 있다.

"약제학적으로 허용되는 담체"는 목적하는 약제학적 제형에 적합한 통상적인 약제학적 담체, 예를 들어, 희석제, 부형제, 예를 들어, 물, 다양한 유기 용매 등; 충전제, 예를 들어, 전분, 수크로스 등; 결합제, 예를 들어, 셀룰로스 유도체, 알기네이트, 젤라틴 및 폴리비닐피롤리돈(PVP); 습윤제, 예를 들어, 글리세롤; 붕해제, 예를 들어, 한천, 탄산칼슘 및 중탄산나트륨; 흡수 증강제, 예를 들어, 4급 암모늄 화합물; 계면활성제, 예를 들어, 헥사데칸올; 흡수 담체, 예를 들어, 카올린 및 비누 점토; 윤활제, 예를 들어, 활석, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜 등을 의미한다. 또한, 약제학적 조성물은 다른 약제학적으로 허용되는 부형제, 예를 들어, 분산제, 안정화제, 증점제, 착화제, 완충제, 침투 증강제, 중합체, 방향족물, 감미제 및 염료를 추가로 포함한다. 바람직하게는, 부형제는 목적하는 제형 및 투여 유형에 적합하다.

용어 "질환" 또는 "장애" 또는 "상태"는 임의의 질환, 불편함, 질병, 증상 또는 징후를 의미한다.

도 1: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A의 X-선 분말 회절 패턴.
도 2: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 B의 X-선 분말 회절 패턴.
도 3: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 C의 X-선 분말 회절 패턴.
도 4: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 D의 X-선 분말 회절 패턴.
도 5: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 E의 X-선 분말 회절 패턴.
도 6: 화학식 I의 화합물의 무정형 샘플의 X-선 분말 회절 패턴.
도 7: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A의 동적 수분 흡착 패턴.
도 8: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 B의 동적 수분 흡착 패턴.
도 9: 화학식 I의 화합물의 무정형 샘플의 동적 수분 흡착 패턴.
도 10: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A의 시차 열 분석.
도 11: 화학식 I의 화합물의 결정 형태 B의 시차 열 분석.
도 12: 화학식 I의 화합물의 무정형 샘플의 시차 열 분석.

표 6은 도 1 내지 도 6에 도시된 X-선 분말 회절 패턴의 검출 장비 및 방법을 요약한다.

표 7은 도 7 내지 9에 도시된 동적 수분 흡착 패턴의 검출 장비 및 방법을 요약한다.

표 8은 도 10 내지 12에 도시된 스캐닝 패턴의 시차 열 분석의 검출 장비 및 방법을 요약한다.

장치 이름		X-선 분말 회절계 (XRD) & 핫 스테이지 XRD
장비		브루커(Bruker) D8 어드밴스(Advance) 회절계
기술적 사양		Kα 방사선(40Kv, 40Ma) 구리 표적 파장: 1.54nm, θ-2θ각도계, Mo 단색화 장치, Lynxeye 검출기
보정된 물질		Al₂O₃
수집 소프트웨어		Diffrac Plus XRD Commander
분석 소프트웨어		MDI Jade 6
방법 매개 변수	비반사 샘플 플레이트 사양		직경 24.6 mm x 두께 1.0 mm
	가변 온도 핫 스테이지 샘플 플레이트		구리 플레이트
	검출 각		3-40°2θ/3-30°2θ(핫 스테이지 XRD)
	단계 길이		0.02°2θ
	속도		0.2초.단계-1
	검출된 샘플 중량		> 2 mg

장치 이름		동적 증기 흡착 (DVS)
기기		TA Instruments Q5000TGA
제어 소프트웨어		Thermal Adventage
분석 소프트웨어		Universal Analysis
샘플 플레이트		백금 도가니
검출된 샘플 중량		1-10 mg
보호 가스		질소
가스 유속		10mL/분
검출 방법		20℃에서 평형화; 습도 0%; 180분 동안 등온; 중량(%) <0.0100인 경우 15,00분 동안 다음 iso 값을 중단; 120분 마다 습도 10%씩 80.00%로 단계화; 중량(%) <0.0100인 경우 15,00분 동안 다음 iso 값을 중단; 120분 마다 습도 10%씩 0.00%로 단계화
판정 기준	비흡습성	0.2% 이하
	약한 흡습성	0.2% 이상 2.0% 이하
	흡습성	2% 이상 15% 이하
	매우 흡습성	15% 이상

장치 이름	시차 열 분석 스캐너(DSC)
기기	TA Instruments Q200 DSC
제어 소프트웨어	Thermal Adventage
분석 소프트웨어	Universal Analysis
샘플 플레이트	알루미늄 도가니(밀폐되고 천공됨)
검출된 샘플 중량	0.5-5 mg
보호 가스	질소
가스 유속	40mL/분
일반적인 검출 방법	20℃에서 평형화; 250/300℃까지 10℃/분의 경사

실시예

본 발명은 본 발명을 설명하는 다음 실시예에 의해 추가로 예시되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예에서, 기술 또는 방법은, 명백하게 다르게 기술되지 않는 한, 당해 분야에서의 통상적인 기술 또는 방법이다.

약어:

Boc: 부톡시카보닐;

DCC: 디사이클로헥실카보디이미드;

DCM: 디클로로메탄;

DIPEA: 디이소프로필에틸아민;

DMAP: 4-디메틸아미노피리딘;

DMF: N,N-디메틸포름아미드;

EDCI: 1-에틸-(3-디메틸아미노프로필) 카보디이미드 하이드로클로라이드;

HATU: 2-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트;

HOBT: 1-하이드록시벤조트리아졸;

IPA: 이소프로필 알콜;

MeOH: 메탄올;

MTBE: 메틸 3급-부틸 에테르;

NMM: N-메틸모르폴린;

N: mol/L;

TFA: 트리플루오로아세테이트;

THF: 테트라하이드로푸란.

실시예 1: 화학식 I의 화합물의 합성:

화합물 M1의 합성:

8.57g(0.024mol, 1.00eq)의 화합물 SM1을 85.7mL의 무수 메탄올에 용해시키고, 5% 탄소상 팔라듐(0.86g)을 질소하에 첨가하였다. 혼합물을 수소로 3회 대체하고, 수소 대기 중에서 3시간 동안 반응시켰다. 원료의 반응이 완료되면, 여액을 여과에 의해 수집한 다음, 고체로 농축시키고 진공하에 건조시켜 백색 고체, 즉 100%의 수율 및 97.32%의 순도를 갖는 화합물 M1을 수득하였다.

LC-MS[M+H⁺]: 334.

화합물 M2의 합성:

화합물 SM2 9.60g(0.017mol, 1.00eq)을 THF 53mL에 용해시키고, 반응 혼합물을 -5 내지 5℃로 냉각시켰다. 1N KOH 수용액(KOH 1.40g 및 물 25mL)을 적가하고, 혼합물을 1 내지 10℃에서 배양하고, 4시간 동안 교반하였다. 1N 묽은 염산을 가하여 pH 값을 약 5로 조정했다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL × 2)로 2회 추출하였다. 유기층을 합하고, 포화된 염 수용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 1시간 동안 건조한 후, 여과하고, 진공하에 농축시켜 점성 오일을 수득하고, 디클로로메탄 23mL를 첨가하여 상기 점성 오일을 용해시킨 후, 진공하에 농축시켜 농축 오일을 다시 수득했다. 69mL의 디클로로메탄을 첨가하여 농축 오일을 다시 용해시키고 진공하에 농축시켜 9.10g의 중간체 M2를 황색 고체로서 99.7%의 수율로 수득하였다.

LC-MS[M+H⁺]: 546.

화합물 M2의 합성:

화합물 SM2 9.60g(0.017mol, 1.00eq)을 THF 53mL에 용해시키고, 반응 혼합물을 0-10℃로 냉각시켰다. 1N의 LiOH 수용액(LiOH 1.05g + 물 25mL)을 적가하였다. 30분의 첨가 후, 온도를 실온으로 서서히 상승시키고, 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응을 완료시키고 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔사를 물 100mL에 용해시키고, 메틸 3급-부틸 에테르 50mL를 첨가하고, 교반하고 분리하였다. 1N의 묽은 염산을 수상에 적가하여 pH 값을 약 5로 조정하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL × 2)로 2회 추출하였다. 유기층을 합하고, 포화된 염 수용액으로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 1시간 동안 건조시켰다. 혼합물을 여과하고 진공하에 증발시킴으로써 중간체 M2 8.58g을 황색 고체로서 수득하였다. 수율은 94%였다.

LC-MS[M+H⁺]: 546.

화합물 M3의 합성:

화합물 M2 8.23g(0.015mol, 1.15eq)을 디클로로메탄 66mL에 용해시키고, 10 내지 20℃로 냉각시켰다. 화합물 M1 4.30g(0.013mol, 1.00eq), 하이드록시벤조트리아졸(HOBT) 3.00g(0.022mol, 1.69eq), 1-에틸-(3-디메틸아미노프로필) 카보디이 미드 하이드로클로라이드(EDCI) 4.58g(0.024mol, 1.85eq) 및 6.90g(0.068mol, 5.23eq)의 N-메틸모르폴린(NMM)을 차례로 첨가하였다. 혼합물을 배양하고, 20 내지 30℃에서 16시간 동안 교반하고, 반응 혼합물에 물 16mL를 첨가하고, 10 내지 15분 동안 교반하고, 액체가 분리되면 1N 묽은 염산 16mL를 유기 층에 첨가하고, 5분 동안 교반하고, 액체가 분리되면, 유기 층을 1N 묽은 염산 16mL, 1N KOH 수용액 5mL 및 포화된 염수 30mL로 각각 세척하고, 정지액을 분리하였다. 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 여과하고 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔사를 메틸 3급-부틸 에테르(20mL + 20mL + 6mL)로 3회 세척하고, 여과시켜 고체를 수집하고, 고체를 건조시켜 화합물 M3으로서 황색 고체 7.95g을 71.6%의 수율로 수득하였다.

LC-MS[M+H⁺]: 861.

화합물 M3의 합성:

7.96g(0.015mol, 1.15eq)의 화합물 M2를 40mL의 DMF에 용해시키고, 여기에 HATU 5.23g(0.014mol, 1.08eq), 화합물 M1 4.17g(0.013mol, 1.00eq) 및 2.17mL의 디이소 프로필에틸 아민을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 50mL의 포화된 탄산나트륨 수용액을 반응계에 첨가한 후, 교반하고 여과시켰다. 생성된 고체를 60mL의 물로 두둘겨 변형시킨 후, 여과시켰다. 고체를 디클로로메탄 30mL에 용해시키고, 물로 2회 세척하고, 유기상을 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시키고, 건조시켜 10.03g의 화합물 M3을 갈색 고체로서 93.2%의 수율로 수득하였다.

LC-MS[M+H⁺]: 861.

화합물 M3의 합성:

화합물 M2 9.77g(0.018mol, 1.20eq)을 디클로로메탄 75mL에 용해시키고, 여기에 디사이클로헥실카보디이미드 6.21g(0.030mol, 2.00eq), DMAP 0.96g(0.0079mol, 0.53eq) 및 5.00g(0.015mol, 1.00eq)의 화합물 M1을 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 20mL의 물을 반응계에 첨가하고, 교반하고, 액체가 분리되면, 20mL의 1N 묽은 염산을 유기상에 첨가하고, 5분 동안 교반하고, 액체를 분리시켰다. 유기층을 묽은 염산 20mL, 1N KOH 수용액 6mL 및 포화된 염수 35mL로 각각 세척하고, 정지액을 분리시켰다. 유기상을 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공하에 농축시켰다. 생성된 잔사를 메틸 3급-부틸 에테르(25mL + 25mL + 8mL)를 첨가하여 3회 세척하였다. 여과시켜 고체를 수집하고, 고체를 건조시켜 화합물 M3으로서 갈색 고체 10.62g을 82.3%의 수율로 수득하였다.

LC-MS[M+H⁺]: 861.

화학식 I의 화합물의 합성:

화합물 M3 7.95g(0.092mol)을 디클로로메탄 30mL에 용해시키고, 반응액을 -5℃ 내지 5℃로 냉각시키고, 여기에 트리플루오로아세테이트 15mL를 실온에서 2시간 동안 교반하면서 적가했다. 혼합물을 10 내지 20℃로 냉각시킨 후, 반응 혼합물에 60mL의 포화된 탄산칼륨 수용액을 서서히 첨가하고, 교반하고 정적 층화시켰다. 유기층을 포화 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 후, 여과 및 농축시켰다. 생성된 잔사를 41.2g의 이소프로판올에 용해시키고, 혼합물을 10 내지 20℃로 냉각시킨 후, 반응 혼합물에 실온에서 교반하면서 진한 염산 5mL를 첨가하였다. 여과시켜 고체를 수집하고, 고체를 이소프로판올로 세척하고 진공하에 건조하여 5.75g의 화학식 I의 화합물을 수득했다.

LC-MS[M+H⁺]: 561.

1H-NMR (300MHz, CDCl₃): δ = 1.25-1.43 (m, 6H), 1.91 (d, 3H), 3.15-3.48 (m, 4H), 3.66-3.89 (m, 0.5H), 4.55-4.78 (m, 2H), 5.49 (s, 2H), 6.26 (q, 1H), 7.10 (t, 1H), 7.33-7.44 (m, 4H), 7.78 (d, 2H), 9.93 (s, 1H).

실시예 2: 결정 형태 A의 제조 방법

결정 형태 A의 제조 방법 1

약 5 내지 10mg의 화학식 I의 무정형 화합물을 2급-부탄올에 용해시켜 투명한 용액을 수득한 후, 여과하고, 용액을 40℃로 노출시켜 결정 형태 A를 수득했다.

결정 형태 A의 제조 방법 2

약 10mg의 화학식 I의 무정형 화합물을 메탄올에 용해시켜 투명한 용액을 수득한 후 여과하고, 여기에 카복시메틸 셀룰로스 1mg을 첨가하였다. 혼합물을 실온에 노출시켜 결정 형태 A를 수득했다.

결정 형태 A의 제조 방법 3 및 4

상응하는 온도에서, 약 10mg의 화학식 I의 무정형 화합물을 용매 2에 첨가 한 다음, 용매 1에 첨가하여 투명한 용액을 수득한 후 여과하고 -20℃하에 교반하여 고체를 침전시켰다. 침전물을 여과로 수집하여 결정 형태 A를 수득하였다.

결정 형태 A의 제조 방법 5

실온에서 약 10mg의 화학식 I의 무정형 화합물을 에탄올에 용해시켜 투명한 용액을 수득한 후 여과시켰다. n-헵탄을 다량의 고체가 관찰될 때까지 교반하에 용액에 적가하고, 여과하고 결정 형태 A를 회수하였다.

결정 형태 A의 제조 방법 6 및 7

약 10mg의 화학식 I의 무정형 화합물을 2.0mL 원심분리 튜브에 위치시키고, 상응하는 폐쇄된 용매 대기 중에서 6일 동안 실온에서 노출시켰다. 결정 형태 A가 수득되었다.

결정 형태 A의 제조 방법 8

약 15mg의 화학식 I의 무정형 화합물을 4℃에서 0.2mL의 에탄올에 첨가하고, 혼합물을 상응하는 온도에서 30분 동안 교반하고 여과시켜 결정 형태 A를 수득하였다.

실시예 3: 결정 형태 B의 제조 방법

제1 실험 방법

약 5 내지 10mg의 결정 형태 A를 적합한 용매에 용해시켜 투명한 용액을 수득한 다음, 여과시켰다. 혼합물을 휘발시키기 위해 상응하는 온도로 노출시켜 결정 형태 B를 수득하였다.

제2 실험 방법

약 10mg의 결정 형태 A를 용매 1에 첨가한 후, 용매 2에 첨가하여 투명한 용액을 수득하고 여과한 다음, 휘발시키기 위해 상응하는 온도로 노출시켜 결정 형태 B를 수득하였다.

제3 실험 방법

약 15 내지 30mg의 결정 형태 A를 상응하는 용매에 첨가하여 현탁액을 형성하고, 실온에서 5일 동안 교반하고, 여과시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제4 실험 방법

약 15 내지 20mg의 결정 형태 A를 상응하는 용매에 첨가하여 현탁액을 형성하고, 40℃에서 5일 동안 교반하고 여과시켜 결정 형태 B를 수득하였다.

제5 실험 방법

약 15 내지 40mg의 결정 형태 A를 먼저 용매 2에 첨가한 다음, 용매 1에 첨가하여 현탁액을 형성하고, 상응하는 온도에서 4일 동안 교반하고, 여과시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제6 실험 방법

약 10mg의 결정 형태 A를 상응하는 용매에 첨가하여(여기서, 아세톤:물 = 3:1(용적비), 아세토니트릴:물 = 3:2(용적비)) 초음파로 투명한 용액을 수득하고, 여과하고, 여기에 1mg의 중합체를 첨가했다. 혼합물을 휘발시키기 위해 실온에 노출시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제7 실험 방법

약 15 내지 50mg의 결정 형태 A를 상응하는 온도에서 상응하는 용매에 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과시키고, 여액을 고체가 관찰될 때까지 교반하면서 4℃에 위치시키고, 여과시켜 결정 형태 B를 수득하였다. 그들 중에서, 결정 형태는 교반하면서 4℃에서 이소프로판올에서 관찰되지 않았고, 이어서 휘발시키기 위해 실온에 노출시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제8 실험 방법

약 10 내지 15mg의 결정 형태 A를 먼저 용매 2에 첨가한 다음, 용매 1에 첨가하여 상응하는 온도에서 투명한 용액을 수득하고, 여과시킨 다음, 여액을 고체가 관찰될 때까지 -20℃에서 교반시켜 결정 형태 B를 회수했다. 그들 중에서, 결정 형태 B의 제조 방법 69 내지 74를 사용하여 교반하면서 결정 형태가 관찰되지 않았고, 여액을 휘발시키기 위해 실온에 노출시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제9 실험 방법

약 10 내지 15mg의 결정 형태 A를 용매 1에 첨가하여 실온에서 초음파에 의해 투명한 용액을 수득한 다음, 여과하고, 다량의 고체가 관찰될 때까지 교반하면서 용매 2에 적가하고, 여과시켜 결정 형태 B를 수득했다. 그들 중에서, 결정 형태 B의 제조 방법 89 및 90을 사용하여 어떤 고체도 관찰되지 않았고, 이어서 혼합물을 휘발시키기 위해 실온에 노출시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제10 실험 방법

약 10mg의 화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 2.0mL의 원심분리 튜브에 위치시켰다. 이어서, 원심분리 튜브를 실온에서 6일 동안 상응하는 용매 대기에 위치시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제11 실험 방법

약 15 내지 30mg의 화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 상응하는 온도에서 상응하는 용매에 첨가하고, 30분 동안 교반한 다음, 여과시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제12 실험 방법

약 15 내지 30mg의 화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 먼저 용매 2에 첨가한 다음, 용매 1에 첨가하여 현탁액을 수득하고, 상응하는 온도에서 30분 동안 교반하고, 여과시켜 결정 형태 B를 수득했다.

제13 실험 방법: 결정 형태 B의 제조 방법 142

약 10mg의 화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 실온에서 10일 동안 85% RH 습도의 대기에 위치시켜 결정 형태 B를 수득했다

제14 실험 방법

적절한 양의 샘플을 상응하는 용매에 첨가하여 초음파에 의해 투명한 용액을 수득하고, 여과한 다음, 여액을 상응하는 수욕 온도에서 신속하게 스핀 건조시켜 결정 형태 B를 수득했다.

실시예 4: 결정 형태 C의 제조 방법

결정 형태 C의 제조 방법 1:

100mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 2.8mL의 이소프로필 에테르에 첨가한 다음, 2.8mL의 메탄올에 첨가하여 현탁액을 형성했다. 혼합물을 실온에서 4일 동안 교반하고, 진공하에 여과시켜 73mg의 결정 형태 C를 수득했다.

결정 형태 C의 제조 방법 2:

100mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 1.0mL의 이소프로필 에테르에 첨가한 다음, 3.0mL의 메탄올에 첨가하여 현탁액을 형성했다. 혼합물을 실온에서 5일 동안 교반하고, 진공하에 여과시켜 63mg의 결정 형태 C를 수득했다.

결정 형태 C의 제조 방법 3 및 4:

약 15mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 용매 2에 용해시킨 다음, 용매 1에 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과하고 고체가 관찰될 때까지 -20℃에서 교반하여 결정 형태 C를 회수했다.

결정 형태 C의 제조 방법 5:

약 10mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 2.0mL의 원심분리 튜브에 위치시키고, 실온에서 6일 동안 4mL의 메탄올 밀폐된 용매 대기에 노출시켜 결정 형태 C를 수득했다.

실시예 5: 결정 형태 D의 제조 방법

결정 형태 D의 제조 방법 1:

100mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 2.0mL의 에틸 아세테이트에 첨가한 다음, 1.0mL의 디메틸 설폭사이드에 첨가하여 현탁액을 형성했다. 현탁액을 실온에서 1일 동안 교반시켜 결정 형태 D를 수득했다.

결정 형태 D의 제조 방법 2:

약 5mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 0.1mL의 디메틸설폭사이드에 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과시키고 휘발시키기 위해 40℃에 노출시켜 결정 형태를 수득했다.

결정 형태 D의 제조 방법 3:

약 20mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 용매 2에 첨가한 다음, 용매 1에 첨가하여 현탁액을 형성했다. 혼합물을 상응하는 온도에서 4일 동안 교반시켜 결정 형태 D를 수득했다.

결정 형태 D의 제조 방법 4 및 5:

약 15mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 용매 1에 첨가하여 실온에서 초음파에 의해 투명한 용액을 수득하고, 여과시킨 다음, 용매 2를 다량의 고체가 관찰될 때까지 교반하면서 용액에 적가하여 결정 형태 D를 회수했다.

실시예 6: 결정 형태 E의 제조 방법

약 20mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 실온에서 26일 동안 85% RH 습도 장치에 위치시켜 결정 형태 E를 수득했다.

실시예 7: 아모피스(amorphis)의 제조 방법

아모피스의 제조 방법 1:

200mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 0.6mL의 트리플루오로에탄올에 첨가하여 초음파에 의해 투명한 용액을 수득하고, 여과한 다음, 여액을 40℃에서 진공하에 신속하게 스핀 건조시켜 아모피스를 수득했다.

아모피스의 제조 방법 2:

200mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 7.0mL의 메탄올에 첨가하여 초음파에 의해 투명한 용액을 수득하고, 여과하고 40℃에서 진공하에 신속하게 스핀 건조시켜 아모피스를 수득했다.

아모피스의 제조 방법 3 내지 5:

5 내지 10mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 상응하는 용매에 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과하고 휘발시키기 위해 상응하는 온도에 노출시켜 아모피스를 수득했다.

아모피스의 제조 방법 6 내지 9:

약 10mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 상응하는 용매에 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과하고 휘발시키기 위해 상응하는 온도에 노출시켜 아모피스를 수득했다.

아모피스의 제조 방법 10:

약 15mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 2.0mL의 헵탄에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5일 동안 교반하여 아모피스를 수득했다.

아모피스의 제조 방법 11 및 12:

약 10 내지 15mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 상응하는 용매에 용해시켜 상응하는 온도에서 투명한 용액을 수득하고, 여과하고, 고체가 관찰될 때까지 -20℃에서 교반하여 아모피스를 회수했다.

아모피스의 제조 방법 13:

약 15mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 0.2mL의 트리플루오로에탄올에 용해시켜 실온에서 초음파에 의해 투명한 용액을 수득하고, 여과하고, 1.0mL의 이소프로필 에테르를 다량의 고체가 관찰될 때까지 교반하면서 용액에 적가하여 아모피스를 회수했다.

아모피스의 제조 방법 14 내지 17:

약 10 내지 15mg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A를 상응하는 용매에 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과하고, 여액을 상응하는 온도에서 신속하게 스핀 건조시켜 아모피스를 수득했다.

실시예 8: 결정 형태의 안정성

결정 형태 A 및 B의 샘플을 각각 24시간 동안 80℃에, 25℃-60% RH에 10일 동안, 40℃-75% RH에 10일 동안 위치시켰고, 결정 형태는 변하지 않았다.

결정 형태 C는 진공하에 실온에서 밤새 건조되는 조건하에 거의 완전히 결정 형태 A로 전환되었다.

대부분의 결정 형태 D는 실온에서 건조되거나 실온에서 진공하에 건조되는 조건하에 결정 형태 B로 변형되었고, 이는 안정하게 존재할 수 없다.

대부분의 결정 형태 E는 2일 동안 데시케이터에 위치되는 조건하에 결정 형태 A로 변형되었고, 이는 불안정하다.

실시예 9: 동적 증기 흡착(DVS) 검정

결정 형태 A: 0% 내지 80% RH의 범위에서 약 2.3%의 중량 변화가 있었다. 결정 형태 A의 수화물은 0%RH 건조 단계에서 약 1.5%의 수분을 제거하고, 0%RH-80%RH 범위에서 약 2.3%의 수분을 흡수했다. 탈착 단계에서, 1.5%의 수분이 30%RH의 조건하에 제거될 수 있었고, 중량의 변화는 30-80%RH의 범위에서 2% 미만이었다.

결정 형태 B: 0% 내지 80% RH의 범위에서 약 2.3%의 중량 변화가 있었다. 결정 형태 B의 수화물은 10%RH하에 약 4%의 수분을 제거할 수 있었고, 흡착 단계에서 10% RH의 조건하에 약 4%의 수분을 흡수했고, 중량의 변화는 10-80% RH의 범위에서 2% 미만이었다.

아모피스: 극도로 흡습성인 0 내지 80% RH의 범위에서 약 15.7%의 중량 변화가 있었다.

실시예 10: 용해도 결정

화학식 I의 화합물의 결정 형태 A의 물에서의 용해도는 실온에서 20 내지 100mg/mL이고, 화학식 I의 화합물의 유리 염기 아모피스의 물에서의 용해도는 1mg/mL 미만이다.

실시예 11: 캡슐 제형

경구용 약물의 명백한 구현예로서, 실시예 1 및/또는 실시예 2에 기재된 약 20 내지 150mg의 다형체를 미분된 미세결정성 셀룰로스 및/또는 스테아르산으로 제형화하여 0 타입 캡슐을 충전시키기 위해 총량 약 50mg 내지 500mg을 수득한다.

실시예 12: 정제 또는 캡슐 제형

경구용 약물의 명백한 구현예로서, 실시예 1 및/또는 실시예 2에 기재된 약 20 내지 150mg의 다형체를 다음 부형제, 미분된 미세결정성 셀룰로스, 만니톨, 크로스포비돈, 크로스카멜로스 나트륨, 나트륨 전분 글리콜레이트, 포비돈, 하이드록시프로필셀룰로스 및/또는 스테아르산 중 둘 이상으로 제형화하여 총량 약 50 내지 500mg의 정제 또는 캡슐을 할당한다.

실시예 13: 약동학적 데이터

6마리 암컷 SD 래트를 각 그룹에 3마리씩 2그룹으로 나누었다. 50mg/kg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A 및 화학식 I의 화합물의 유리 염기 아모피스를 각각 각각의 암컷 SD 래트에게 단일 투여량으로 위내 위관 영양법으로 투여하고; 혈액 샘플을 특정 시간에 경정맥을 통해 수집하고, 이들 샘플로부터의 혈장을 분리하여 -80℃의 냉장고에 저장했다.

이들 샘플의 상기 혈장에 대해, 단백질을 아세토니트릴을 사용하여 침전시키고, 상등액을 물로 3배 희석한 다음, LC-MS/MS 시험용 용액 5μL를 취하고, 데이터를 표 9에 나타내었다:

화합물	투여 방법	투여량 (mg/kg)	T_max (h)	C_max (ng/mL)	AUC_last (h^*ng/mL)
화학식 I의 화합물의 유리 염기 아모피스	PO	50	4.67	890	8165
화학식 I의 화합물의 결정 형태 A	PO	50	2.67	1440	11551

50mg/kg의 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A 및 화학식 I의 화합물의 유리 염기 아모피스를 랫트에게 경구 투여하였고, T_max는 각각 2.67 및 4.67시간이었고, C_max는 각각 1440 및 890ng/mL였고, AUC_last는 각각 11551 및 8165h^*ng/mL였다.

상기 결과로부터, 화학식 I의 화합물의 결정 형태 A가 화학식 I의 화합물의 유리 염기 아모피스보다 생체내에서 더 높은 흡수를 나타냈다는 것이 시사된다.

실시예 14: 화학식 I의 화합물의 생화학적 키나제 활성

화학식 I의 화합물의 생화학적 키나제 활성은 미국 펜실베니아주 맬버른 소재의 리액션 바이올로지 코포레이션(Reaction Biology Corp)에 의해 시험되었다. 시험 규칙은 문헌(참조: Nat Biotechnol. 2011; 29(11):1039-45 by Anastassiadis et al.)에 기재되어 있다. 화학식 I의 화합물이 다음과 같은 키나제를 잠재적으로 억제할 수 있음이 밝혀졌다:

본 발명은 첨부된 도면을 참조하여 이의 바람직한 구현예와 관련하여 충분히 기재되었지만, 당업자에게는 다양한 변경 및 변형이 명백하다는 점에 유의해야 한다. 이러한 변경 및 변형은 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.

Claims

화학식 I의 화합물의 결정형, 이의 수화물 및/또는 용매화물:
화학식 I

,
상기 결정형의 X-선 분말 회절 패턴이 4.9 ± 0.2°, 10.0 ± 0.2° 및 19.3 ± 0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크(characteristic peak)를 갖는다.
제1항에 있어서, 상기 결정형의 X-선 분말 회절 패턴이 4.9±0.2°, 10.0±0.2°, 14.7±0.2°, 16.9±0.2°, 19.3±0.2° 및 20.3±0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는, 화학식 I의 화합물의 결정형.
제2항에 있어서, 상기 결정형의 X-선 분말 회절 패턴이 4.9±0.2°, 10.0±0.2°, 14.7±0.2°, 16.9±0.2°, 19.3±0.2°, 20.3±0.2°, 25.5±0.2° 및 30.7±0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는, 화학식 I의 화합물의 결정형.
제3항에 있어서, 상기 결정형이 2수화물인, 화학식 I의 화합물의 결정형.
화학식 I의 화합물의 결정형, 이의 수화물 및/또는 용매화물:
화학식 I

,
상기 결정형의 X-선 분말 회절 패턴이 10.5±0.2°, 17.4±0.2° 및 21.1±0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는다.
제5항에 있어서, 상기 결정형의 X-선 분말 회절 패턴이 10.5±0.2°, 17.4±0.2°, 19.7±0.2°, 21.1±0.2°, 23.9±0.2° 및 25.5±0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는, 화학식 I의 화합물의 결정형.
제6항에 있어서, 상기 결정형의 X-선 분말 회절 패턴이 10.5±0.2°, 17.4±0.2°, 19.7±0.2°, 21.1±0.2°, 21.5±0.2°, 23.9±0.2°, 25.2±0.2° 및 25.5±0.2°의 회절각 2θ에서 특징적인 피크를 갖는, 화학식 I의 화합물의 결정형.
제7항에 있어서, 상기 결정형이 3수화물인, 화학식 I의 화합물의 결정형.
제3항 또는 제7항에 있어서, 상기 결정형이 85% 이상의 순도를 갖는, 화학식 I의 화합물의 결정형.
제9항에 있어서, 상기 결정형이 95% 이상의 순도를 갖는, 화학식 I의 화합물의 결정형.
제10항에 있어서, 상기 결정형이 99% 이상의 순도를 갖는, 화학식 I의 화합물의 결정형.
제1항 또는 제5항에 따르는 결정형의 치료적 유효량, 및 약제학적으로 허용되는 부형제, 보조제 및/또는 담체를 포함하는, 환자의 질환, 장애 또는 증상의 치료를 위한 약제학적 조성물로서,
상기 질환, 장애 또는 증상이 폐암, 흑색종, 결장암, 유방암, 간암, 췌장암, 뇌암, 신장암, 난소암, 위암, 피부암, 골암, 신경교종, 림프종, 신경모세포종, 간세포 암종, 유두형 신장 세포 암종 및/또는 두경부 편평 세포 암종인, 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 따르는 결정형의 치료적 유효량을 적어도 하나의 다른 활성 성분과 조합하여 포함하는, 환자의 질환, 장애 또는 증상의 치료를 위한 약제학적 조성물로서,
상기 질환, 장애 또는 증상이 폐암, 흑색종, 결장암, 유방암, 간암, 췌장암, 뇌암, 신장암, 난소암, 위암, 피부암, 골암, 신경교종, 림프종, 신경모세포종, 간세포 암종, 유두형 신장 세포 암종 및/또는 두경부 편평 세포 암종인, 약제학적 조성물.
제12항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 경구 제제의 형태인, 약제학적 조성물.
제14항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 정제 또는 캡슐의 형태인, 약제학적 조성물.
제12항에 있어서, 상기 결정형 20 mg 내지 150 mg이 적어도 하나의 부형제, 보조제 및/또는 담체와 50 mg 내지 500 mg의 총량으로 제형화되는, 약제학적 조성물.
제16항에 있어서, 상기 부형제, 보조제 및/또는 담체가 미세결정성 셀룰로스, 만니톨, 크로스포비돈, 크로스카멜로스 나트륨 셀룰로스, 나트륨 전분 글리콜레이트, 포비돈, 하이드록시프로필 셀룰로스 및/또는 스테아르산인, 약제학적 조성물.
제17항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 상기 결정형을 0.01중량% 내지 99중량% 포함하는, 약제학적 조성물.
제18항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 상기 결정형을 0.1중량% 내지 70중량% 포함하는, 약제학적 조성물.
제19항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 상기 결정형을 1중량% 내지 70중량% 포함하는, 약제학적 조성물.
제20항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 상기 결정형을 1중량% 내지 50중량% 포함하는, 약제학적 조성물.
제21항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 상기 결정형을 1중량% 내지 30중량% 포함하는, 약제학적 조성물.
제22항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 상기 결정형을 10중량% 내지 30중량% 포함하는, 약제학적 조성물.
제12항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 증상이 크리조티닙 요법(crizotinib therapy)에 내성인 비-소세포 폐암인, 약제학적 조성물.
제12항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 증상이 흑색종인, 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 있어서, 결정형이 환자의 질환, 장애 또는 증상을 치료하기 위한 것이고, 상기 질환, 장애 또는 증상이 폐암, 흑색종, 결장암, 유방암, 간암, 췌장암, 뇌암, 신장암, 난소암, 위암, 피부암, 골암, 신경교종, 림프종, 신경모세포종, 간세포 암종, 유두형 신장 세포 암종 및/또는 두경부 편평 세포 암종인, 결정형.
제26항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 증상이 크리조티닙 요법에 내성인 비-소세포 폐암인, 결정형.
제26항에 있어서, 상기 질환, 장애 또는 증상이 흑색종인, 결정형.
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 제조하는 방법으로서,
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 원심분리 튜브에 위치시키고, 실온에서 6 내지 10일 동안 기밀(airtight) 에탄올 또는 아세토니트릴 대기 중에서 저장하여 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 에탄올에 첨가하고, 4℃ 내지 25℃에서 교반하고, 여과시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 4℃ 내지 25℃에서 에탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 다량의 결정이 관찰될 때까지 교반하에 여액에 n-헵탄을 첨가한 다음, 여과시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 55℃ 내지 70℃에서 메틸 3급-부틸 에테르/에탄올 또는 n-헵탄/에탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 고체가 관찰될 때까지 여액을 -20℃에서 교반하고, 여과시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 메탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과한 다음, 35℃ 내지 50℃에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 메탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 여액에 카복시메틸 셀룰로스를 첨가하고, 실온에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정형을 수득하는 단계를 포함하는, 방법.
제5항 또는 제6항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 제조하는 방법으로서,
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 메탄올, 에탄올 또는 물에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과시킨 다음, 실온(20℃) 내지 40℃에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 메탄올/물, 메탄올/아세톤, 메탄올/에틸 아세테이트, 메탄올/메틸 3급-부틸 에테르, 메탄올/테트라하이드로푸란, 메탄올/디클로로메탄, 에탄올/물, 에탄올/부탄온, 에탄올/이소프로필 아세테이트, 에탄올/n-헵탄, 트리플루오로에탄올/물, 트리플루오로에탄올/에틸 아세테이트, 트리플루오로에탄올/테트라하이드로푸란, 물/메탄올, 물/에탄올, 물/트리플루오로에탄올, 물/이소프로판올, 물/아세톤, 물/테트라하이드로푸란 또는 물/아세토니트릴에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득한 다음, 용액을 여과시키고, 실온(20℃) 내지 40℃에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 저급 알콜, 물, 니트로메탄, 부탄온, 디에틸 에테르, 에틸 아세테이트, 테트라하이드로푸란, 톨루엔 또는 n-헵탄에 첨가하여 현탁액을 형성한 다음, 현탁액을 실온 내지 40℃에서 4 내지 5일 동안 교반하고, 원심분리시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 물-포화된 에틸 아세테이트 층, 에틸 아세테이트 포화된 수성 층, 에탄올/디에틸 에테르, 톨루엔/아세토니트릴, 부탄온/에탄올 또는 톨루엔/이소프로필 에테르에 첨가하여 현탁액을 형성한 다음, 현탁액을 4℃ 내지 40℃에서 4 내지 5일 동안 교반하고, 원심분리시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 실온에서 메탄올, 아세톤/물(3:1 v/v) 또는 아세토니트릴/물(3:2 v/v)에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득한 다음, 용액에 하이드록시프로필셀룰로스, 에틸셀룰로스, 포비돈 K30, 폴리알릴아민 하이드로클로라이드, 카복시메틸 셀룰로스, 또는 폴리비닐 알콜을 첨가하고, 실온에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 60℃ 내지 70℃에서 저급 알콜 또는 물에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 결정이 관찰될 때까지 4℃에서 교반시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 55℃ 내지 70℃에서 아세톤/트리플루오로에탄올, 아세톤/물, 디옥산/물, 아세토니트릴/물 또는 메틸 3급-부틸 에테르/n-프로판올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 결정이 관찰될 때까지 여액을 -20℃에서 교반시킨 다음, 여과시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 60℃ 내지 70℃에서 니트로메탄/메탄올, 아세토니트릴/메탄올, 부탄온/에탄올, 에틸 아세테이트/에탄올, 1,4-디옥산/에탄올 또는 테트라하이드로푸란/물에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 여과시키고, 실온에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 실온에서 메탄올, 에탄올, 물, 트리플루오로에탄올, n-프로판올 또는 디메틸 설폭사이드에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시키고, 다량의 결정이 관찰될 때까지 여액에 아세톤, 에틸 아세테이트, 메틸 3급-부틸 에테르, 이소프로필 에테르, 이소프로필 아세테이트, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산, 아세토니트릴, n-헵탄, 메틸렌 클로라이드 또는 클로로포름을 적가하여 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 실온에서 메탄올 또는 에탄올에 첨가하고, 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 이어서 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 여액에 디클로로메탄 또는 테트라하이드로푸란을 첨가하고, 실온에 노출시켜 용매를 증발시킴으로써 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 원심분리 튜브에 위치시킨 다음, 원심분리 튜브를 n-부탄올, 물, 니트로메탄, 에틸 아세테이트, 메틸 3급-부틸 에테르, 테트라하이드로푸란, 디클로로메탄, 클로로포름 및 톨루엔의 대기에 위치시켜 확산시킴으로써 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 n-프로판올, 물, 부탄온, 에틸 아세테이트, 테트라하이드로푸란, 디클로로메탄, 에탄올, 이소프로판올, n-부탄올, 아세톤, 에스테르, 이소프로필 아세테이트, 1,4-디옥산, 아세토니트릴, 클로로포름, 2급-부탄올, 니트로메탄 또는 톨루엔에 첨가하고, -4℃ 내지 -40℃에서 30분 동안 교반한 다음 여과시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 이소프로필 에테르/메탄올, 에틸 아세테이트/메탄올, 1,4-디옥산/메탄올, 부탄온/에탄올, 아세토니트릴/에탄올, n-헵탄/트리플루오로에탄올, 니트로메탄/트리플루오로에탄올, 에테르/트리플루오로에탄올, 테트라하이드로푸란/트리플루오로에탄올, 아세톤/물, 테트라하이드로푸란/물, 아세토니트릴/물, 메틸 3급-부틸 에테르/이소프로판올, 이소프로필 아세테이트/n-프로판올, 메틸사이클로헥산/n-부탄올, 아세톤/디메틸설폭사이드, 에틸 아세테이트/디메틸 설폭사이드, 아세토니트릴/디메틸 설폭사이트, 메틸 3급-부틸 에테르/클로로포름, 또는 톨루엔/에틸 아세테이트에 첨가하여 현탁액을 형성하고, 4℃ 내지 40℃에서 교반한 다음, 여과시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
화학식 I의 화합물의 무정형 샘플을 실온에서 85% RH의 습도에 위치시켜 결정형을 수득하는 단계; 또는
제1항 또는 제2항에 따르는 화학식 I의 화합물의 결정형을 물 또는 메탄올에 용해시켜 투명한 용액을 수득하고, 용액을 여과시켜 여액을 수득한 다음, 여액을 회전 증발 건조시켜 결정형을 수득하는 단계를 포함하는, 방법.
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