KR102435400B1 - 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물 및 이의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 6-진저롤(6-gingerol) 함량이 증가된 증숙 생강 추출물의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 항염증용 약학적 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 제공하는 증숙 생강 추출물의 제조방법에 따라 제조된 증숙 생강 추출물은 6-진저롤 함량이 현저하게 증가되면서도 항염 활성을 가지므로, 다양한 염증성 질환의 예방 또는 치료에 널리 활용될 수 있을 것이다.
본 발명에서 제공하는 증숙 생강 추출물의 제조방법에 따라 제조된 증숙 생강 추출물은 6-진저롤 함량이 현저하게 증가되면서도 항염 활성을 가지므로, 다양한 염증성 질환의 예방 또는 치료에 널리 활용될 수 있을 것이다.
Description
본 발명은 6-진저롤(6-gingerol) 함량이 증가된 증숙 생강 추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
구체적으로, 생강을 추출하는 단계; 상기 생강 추출물을 증숙하는 단계; 상기 증숙 생강 추출물을 1차 효소 분해하는 단계; 및 상기 1차 효소 분해된 증숙 생강 추출물을 2차 효소 분해하는 단계를 포함하는, 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물 제조방법, 상기 제조방법으로 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염용 약학적 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.
생강은 아열대 및 열대성 다년생 식물로서 근경을 주로 식용하며, 그 특유한 향기와 매운맛으로 인하여 오랫동안 향신료로서 사용되고 있다. 생강의 활성에 관한 연구로는 항산화 작용 (Jitoe et al., Tetrahedron Lett., 35, pp981-984, 1994), 살충 작용 (Nugroho et al., Phytochemistry, 41, pp129-132, 1996) 등이 보고되었고, 생강의 주요 성분으로 진지베롤(zingiberol), 진지브론(zingibrone), 진지베렌(zingiberene), 진저롤(gingerol)과 쇼가올(shogaol)이 알려져 있으며, 6-진저롤의 cyclooxigenase-2 억제 효과 및 해열 진통 효과 등이 다양하게 연구되어 있다. 생강은 한방에서 생강(生薑), 건강(乾薑), 포강(砲腔), 생강즙(生薑汁), 생강피(生薑皮), 외강(畏薑)의 형태로 사용된다. 약성이 맵고 따뜻하여 폐, 비, 위경에 작용하고, 진통제, 구풍제, 건위제로 사용되며 소화기계의 복통이나 소화불량 등에 사용된다.
생강과 같은 천연물은 추출 및 제조방법에 따라 포함된 생리활성물질의 종류, 함량 등이 천차만별이기 때문에, 산업적으로 가치 있는 소재로 개발하기 위해서는 이러한 특성을 고려하여 연구가 진행될 필요가 있다.
한편, 염증은 유해한 외인성 및 내인성 신호 또는 병원균을 제거하고 치유 과정을 시작하기 위한 면역 체계의 복잡한 생물학적 반응이다. 반복되는 조직의 손상이나 재생에 의해 염증반응이 지속되면, 염증 관련 세포에서 활성산소종 (reactive oxygen species, ROS), 또는 NO (nitric oxide)와 같은 염증 인자가 과다 생성되고, 그 결과 영구적인 유전자의 변형이 야기되어 병태가 유발된다 (Korean J. Oriental Physiology & Pathology 23(6):1320∼1331, 2009).
이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 생강의 기능성 성분인 6-진저롤의 함량을 증가시켜 이용성 증진을 도모하고자 최적화된 조건의 증숙 생강 추출물 제조방법을 개발하였고, 이를 통해 제조된 증숙 생강 추출물의 항염 활성이 우수함을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 생강을 추출하는 단계; 상기 생강 추출물을 증숙하는 단계; 상기 증숙 생강 추출물을 1차 효소 분해하는 단계; 및 상기 1차 효소 분해된 증숙 생강 추출물을 2차 효소 분해하는 단계를 포함하는, 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 상기 제조방법으로 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 상기 제조방법으로 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 상기 제조방법으로 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 상기 제조방법으로 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
또한, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 통상의 실험만을 사용하여 본 발명에 기재된 본 발명의 특정 양태에 대한 다수의 등가물을 인지하거나 확인할 수 있다. 또한, 이러한 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 하나의 양태는 생강을 추출하는 단계; 상기 생강 추출물을 증숙하는 단계; 상기 증숙 생강 추출물을 1차 효소 분해하는 단계; 및 상기 1차 효소 분해된 증숙 생강 추출물을 2차 효소 분해하는 단계를 포함하는, 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물 제조방법을 제공한다.
본 발명의 "생강"은 생강과(Zingiberaceae)의 생강속(Zingiber)으로 분류되는 다년생 식물로서, 뿌리줄기를 한약재로 사용하며, 맵고 쓴 맛이 난다. 본 발명의 생강은 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 생강을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 추출에 사용되는 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있고, 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상 혼합하여 사용될 수 있으며, 구체적으로 물이 사용될 수 있다. 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 구체적으로 탄소수 1 내지 4의 알코올을 사용할 수 있다.
본 발명의 용어 "추출물"이란, 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온 또는 가온 상태에서 일정 시간 동안 추출하여 수득한 액상 성분, 상기 액상 성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다. 이에 따라, 본 발명에서 제공하는 증숙 생강 추출물은 생강 추출물을 증숙 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액을 효소 분해하여 얻어지는 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함하는 것으로 해석될 수 있다.
본 발명의 생강 추출물을 증숙하는 단계는, 상기 생강 추출물에 온도를 가하여 증기에 의해 찌는 것(steaming)을 말한다. 증숙 단계에 사용되는 장치로는 일정한 온도 및 압력에 의하여 증숙을 수행할 수 있는 것이면 제한되지 않는다.
본 발명에서 상기 증숙 단계는 40 내지 180℃, 구체적으로 60 내지 150℃, 보다 구체적으로 90 내지 120℃에서 수행될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 상기 증숙 단계는 20 내지 120분, 구체적으로 30 내지 110분, 보다 구체적으로 40 내지 100분일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 증숙 생강 추출물을 효소 분해하는 단계는, 효소를 처리하여 증숙 생강 추출물의 구성성분을 분해하는 것을 말하며, 1차 효소 분해와 2차 효소 분해 단계를 순차적으로 수행할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명에서 사용 가능한 효소로는 아밀라아제(amylase), 말타아제(maltase), 락타아제(lactase), 수크라아제(sucrase), 글루카나아제(glucanase), 셀룰라아제(cellulase), 헤미셀룰라아제(hemicellulase), 자일라나아제(xylanase) 등이 있으나, 이에 제한되지 않는다. 구체적인 예로, 1차 효소 분해 단계는 α-아밀라아제를 효소로 사용할 수 있으며, 2차 효소 분해 단계는 셀룰라아제를 효소로 사용할 수 있다. 이와 같이 1차 및 2차 효소 처리 단계를 포함함에 따라, 추출물 내의 수불용성 입자의 저분자화에 따른 침전량이 감소할 수 있으며, 단일 단계의 효소 처리보다 효소의 혼합 사용시 침전물 개선 효과가 클 수 있다.
본 발명의 용어 "6-진저롤(6-gingerol)"이란, 생강으로부터 분리된 C17H26O4의 화학식과 하기 일반식 1의 구조를 갖는 알칼로이드 화합물의 일종을 의미한다. 상기 6-진저롤은 항염 활성이 우수하여 이를 다량으로 포함하는 본 발명에 따른 증숙 생강 추출물은 본 발명의 방법으로 제조되지 않은 생강 추출물에 비해 우수한 항염 효과를 나타낸다.
[일반식 1]
본 발명의 구체적인 일 실시예에서는, 다양한 온도 및 시간으로 생강 추출물을 증숙하여 증숙 생강 추출물의 6-진저롤 함량을 측정한 결과, 일반 생강 추출물에 비하여 생강 추출물을 증숙 하였을 경우에 6-진저롤 함량이 증가함을 확인할 수 있었다 (도 1). 특히, 100℃에서 60분간 증숙하는 조건에서 6-진저롤 함량이 일반 생강 추출물에 비하여 약 1.93배 증가한 것을 확인할 수 있었다. 상기 결과를 통해, 종래 추출방법으로 얻어진 생강 추출물에 비하여, 다양한 생리활성이 공지된 6-진저롤의 함량을 현저히 증가시킬 수 있는 최적의 증숙 조건을 확인하였다.
본 발명의 제조방법을 통해 제조된 증숙 생강 추출물은 6-진저롤 함량이 일반 생강 추출물에 비하여 증가된 것이며, 상기 6-진저롤 함량은 증숙 생강 추출물의 중량 대비 0.1% 이상, 구체적으로 0.15% 이상, 가장 구체적으로 0.2% 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 제조방법을 통해 제조된 증숙 생강 추출물은 항염증 활성을 가지는 것일 수 있다.
본 발명의 "항염증 활성"은 염증을 억제하는 모든 작용을 포함하는 것을 의미하며, 일반적으로 염증의 예방, 치료 또는 개선을 의미한다. 염증 반응은 생체 내 복구 체계의 증강 및 손상을 감소시키기 위하여 야기되는데, 그 정도가 심하거나 오랜 기간 지속되면 세포의 손상이 야기되어 다양한 염증성 질환이 발병될 수 있다. 구체적으로 염증 관련 매개물질 또는 활성산소(ROS)의 생성을 억제하는 것일 수 있고, 상기 염증 관련 매개물질은 NO(nitric oxide)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 염증성 질환의 예로는, 염증성 장질환, 크론병, 궤양성 대장염, 염증성 피부 질환, 다발성 경화증, 췌장염, 천식, 비염, 낭포성 섬유증, 기관지염, 골관절염, 통풍, 척추관절병증, 강직성 척추염, 라이터 증후군, 건선성 관절병증, 루게릭병, 결절성 다발동맥염, 과민성 혈관염, 류마티스성 다발성근육통, 관절세포동맥염, 척추측만증, 혈색소증, 고지단백혈증, 저감마글로불린혈증, 배체트병, 전신성 홍반성 루푸스, 패혈증, 다발성 장기부전, 류마티스성 관절염, 접촉성 피부염, 아토피 피부염, 건선, 부비동염, 결핵, 과민대장 증후군, 만성피로 증후군, 파키슨병, 갑상선염으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 질환일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 구체적인 일 실시예에서는, LPS에 의해 NO의 생성이 유도된 제브라피시에 본 발명의 증숙 생강 추출물을 처리한 결과, NO의 생성이 억제되었으며, 그 억제 수준이 일반 생강 추출물보다 우수한 것을 확인하였다 (도 2).
본 발명의 구체적인 일 실시예에서는, LPS에 의해 ROS 생성이 유도된 제브라피시에 본 발명의 증숙 생강 추출물을 처리한 결과, ROS의 생성이 억제되었으며, 그 억제 수준이 일반 생강 추출물보다 우수한 것을 확인하였다 (도 3).
따라서, 본 발명의 제조방법으로 제조된 증숙 생강 추출물은 일반 생강 추출물보다 항염증 활성이 증진된 효과를 가짐을 확인할 수 있었다.
본 발명의 다른 하나의 양태는 상기 증숙 생강 추출물 제조방법을 통해 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 "증숙 생강 추출물"은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "예방"이란, 상기 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 이용하여 염증의 발생을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 말한다.
본 발명의 용어 "치료"란, 상기 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 이용하여 염증의 증상을 다스리거나 낫게 하는 모든 행위를 말한다.
본 발명의 "약학적 조성물"은 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 이러한 약학적으로 허용되는 담체, 부형제, 또는 희석제는 비자연적으로 발생된 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 액제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명에서, 상기 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 상기 증숙 생강 추출물 제조방법을 통해 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
상기 "증숙 생강 추출물" 및 "예방"은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "개선"은 상기 조성물을 이용하여 질환 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 용어 "식품"은 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합체, 건강기능식품 등의 통상적인 의미의 식품을 모두 포함하며, 본 발명의 증숙 생강 추출물을 포함할 수 있는 한, 이에 제한되지 않는다. 또한 본 발명에 따른 증숙 생강 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 액제 등의 형태를 포함할 수 있다.
상기 식품 조성물의 제조 시에는 당업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들어, 통상의 식품과 같이 여러 생약 추출물, 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 포함할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있으며, 본 발명의 조성물은 천연물로부터 유래한 추출물을 유효성분으로 하므로, 안정성 면에서 문제가 없기 때문에 혼합량에 큰 제한은 없다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 상기 증숙 생강 추출물 제조방법을 통해 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 "증숙 생강 추출물", "예방" 및 "개선"은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "건강기능식품"은 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)과 동일한 용어로, 건강보조의 목적으로 특정 성분을 원료로 하거나 식품 원료에 들어있는 특정 성분을 추출, 농축, 정제, 혼합 등의 방법으로 제조, 가공한 식품을 말한다. 상기 성분에 의해 생체방어, 생체리듬의 조절, 질병의 방지와 회복 등 생체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발휘할 수 있도록 설계되고 가공된 식품을 말하는 것으로서, 상기 건강기능식품용 조성물은 질병의 예방 및 질병의 회복 등과 관련된 기능을 수행할 수 있다. 본 발명의 건강기능식품은 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용 가능하다.
본 발명의 또 다른 하나의 양태는 상기 증숙 생강 추출물 제조방법을 통해 제조된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 "증숙 생강 추출물", "예방" 및 "개선"은 전술한 바와 같다.
본 발명의 "화장료 조성물"은 기본적으로 피부에 도포되는 것이므로, 당업계의 화장료 조성물을 참조하여 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어, 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유액, 메이크업베이스, 파운데이션, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선크림, 선오일, 현탁액, 젤, 로션, 파우더, 계면활성제-함유 클렌징, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 화장료 조성물은 본 발명의 증숙 생강 추출물 외에 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 향료 등과 같은 통상적인 보조제 및 담체가 더 포함될 수 있다. 예를 들어, 상기 화장료 조성물에는 글리세린, 부틸렌 글라이콜, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 토코페릴 아세테이트, 시트릭산, 판테놀, 스쿠알란, 소듐 시트레이트, 알란토인 등의 보조성분이 추가로 더 포함될 수 있다.
본 발명의 증숙 생강 추출물의 제조방법을 통해 제조된 증숙 생강 추출물은 6-진저롤 함량이 증가되고, NO 생성 억제 및 ROS 생성을 억제함을 통해 우수한 항염 효과를 확인하였으므로, 상기 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물은 항염용 약학적 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품 조성물 또는 화장료 조성물에 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 생강 추출물을 증숙하는 온도 및 시간의 조건을 달리하여 제조된 증숙 생강 추출물에 포함된 6-진저롤의 함량 및 일반 생강 추출물에 비하여 증가된 6-진저롤의 비율을 나타낸 도이다.
도 2는 일반 생강 추출물과 증숙 생강 추출물의 NO 생성 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 일반 생강 추출물과 증숙 생강 추출물의 ROS 생성 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 일반 생강 추출물과 증숙 생강 추출물의 NO 생성 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 일반 생강 추출물과 증숙 생강 추출물의 ROS 생성 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 도이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물의 제조
생생강을 세척하고, 세척된 생강을 5mm 두께로 절단한 다음, 절단된 생강을 45℃에서 40시간 동안 건조하였다. 이어, 건조 생강의 15배 중량의 70% 에탄올을 가하고, 70℃에서 5시간 동안 추출 및 여과하고, 65 내지 68℃의 온도 조건 및 400 내지 500torr의 압력 조건에서 60 brix로 농축하여 생강 추출물(GE)을 수득하였다.
생강 추출물 10g을 밀폐용기에 넣고 증숙기를 이용해 60℃, 80℃, 100℃에서 각각 30, 60, 120분 동안 증숙 하였다. 1차 효소 분해 (α-amylase 90℃ / 90 min) 진행 후에, 2차 효소 분해 (cellulose 50℃ / 60 min)를 진행하였다. 90℃로 온도 상승 후 냉각 처리하였다. 데칸타 (30 mesh) 후 원심 분리하였다. 규조토 여과 (필터 프레스)후에 농축(Brix 20이상, TS 18.5 이상)하였다. 1% 감미 식초를 80℃에서 60분간 배합하고 85℃에서 15분간 살균하고, 이물 검사를 완료하여 증숙 생강 추출물(SGE)을 수득하였다.
HPLC를 통해 6-진저롤의 함량을 확인한 결과, 6-진저롤을 증가시키는 최적의 온도와 시간으로 100℃, 60분 증숙 조건을 확인하였으며 (도 1), 상기 조건에서 6-진저롤의 함량은 생강 추출물에 비하여 약 1.93배 증가하였다.
실시예 2. 증숙 생강 추출물의 NO 생성 억제 효과
수정 후 9시간 된(9 hour post fertilization) 제브라피시 엠브리오(zebrafish embryo)를 24 well에 위치시켜 0.1 μg/mL의 증숙 생강 추출물 및 생강 추출물에 1시간 노출시켰으며, 대조군으로서 0.03% 해수염 용액(sea salt solution)을 처리하였다. 이후, LPS 10 μg/mL로 교체하여 24시간 동안 노출시켰다. 72 hpf가 될 때까지 0.03% 해수염 용액에 두었으며, NO 생산량 분석을 위해 형광현미경(Olympus 1x70, Olympus, Japan)을 사용하였고, 0.5 μM DAF-FM-DA로 1시간 동안 염색하였다. 제브라피시 치어를 0.02% 트리카인으로 마취시키고, 형광현미경으로 관찰하였다. 형광현미경을 통해 NO 생산량을 분석한 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타난 바와 같이, 증숙 생강 추출물은 LPS로 유도된 NO 생성을 억제하였으며, 생강 추출물에 비하여 그 억제 효과가 우수한 것을 확인하였다.
실시예 3. 증숙 생강 추출물의 ROS 생성 억제 효과
수정 후 9시간 된 제브라피시 엠브리오를 24 well에 위치시켜 0.1 μg/mL의 증숙 생강 추출물 및 생강 추출물에 1시간 노출시켰으며, 대조군으로서 0.03% 해수염 용액(sea salt solution)을 처리하였다. 이후, LPS 10 μg/mL로 교체하여 24시간 동안 노출시켰다. 72 hpf가 될 때까지 0.03% 해수염 용액에 두었으며, ROS 생산량 분석을 위해 형광 현미경(Olympus 1x70, Olympus, Japan)을 사용하였으며, 20 μg/mL DCF-DA로 1시간 동안 염색하였다. 제브라피시 치어를 0.02% 트리카인으로 마취시키고, 형광현미경으로 관찰하였다. 형광현미경을 통해 획득한 ROS 생산량을 분석하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타난 바와 같이, 증숙 생강 추출물은 LPS로 유도된 ROS 생성을 억제하였으며, 생강 추출물에 비하여 그 억제 효과가 우수한 것을 확인하였다.
이를 통해, 실시예 1에 따라 제조된 증숙 생강 추출물이 생강 추출물에 비하여 항염증 활성이 뛰어난 것을 확인하였다.
제제예 1. 정제의 제조
증숙 생강 추출물 200 ㎎
유당 100 ㎎
전분 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 적량
통상의 정제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 타정하여 정제를 제조하였다.
제제예 2. 액제의 제조
증숙 생강 추출물 1000 ㎎
CMC-Na 20 g
이성화당 20 g
레몬향 적량
정제수를 가하여 전체 1000 ㎖로 맞추었다. 통상의 액제의 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 갈색병에 충전하고 멸균시켜 액제를 제조하였다.
제제예 3. 캡슐제의 제조
증숙 생강 추출물 300 ㎎
결정성 셀룰로오스 3 ㎎
락토오스 14.8 ㎎
마그네슘 스테아레이트 0.2 ㎎
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
제제예 4. 주사제의 제조
증숙 생강 추출물 300 ㎎
만니톨 180 ㎎
주사용 멸균 증류수 2974 ㎎
Na2HPO412H2O 26 ㎎
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당 (2 ㎖) 상기의 성분 함량으로 제조하였다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (11)
- (a) 생강을 추출하는 단계;
(b) 상기 생강 추출물을 90 내지 120℃에서 40 내지 100분 동안 증숙하는 단계;
(c) 상기 증숙 생강 추출물을 α-아밀라아제로 1차 효소 분해하는 단계; 및
(d) 상기 1차 효소 분해된 증숙 생강 추출물을 셀룰라아제로 2차 효소 분해하는 단계를 포함하는, 6-진저롤(6-gingerol) 함량이 증가된 증숙 생강 추출물 제조방법.
- 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 (a) 추출 단계는 물 또는 에탄올을 용매로 사용하는 것인, 증숙 생강 추출물 제조방법.
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서, 상기 증숙 생강 추출물은 항염증 활성을 가지는 것인, 증숙 생강 추출물 제조방법.
- 제1항에 있어서, 상기 증숙 생강 추출물은 6-진저롤 함량이 증숙 생강 추출물의 중량 대비 0.2% 이상인 것인, 증숙 생강 추출물 제조방법.
- 제1항, 제3항, 제6항 및 제7항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항, 제3항, 제6항 및 제7항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
- 제1항, 제3항, 제6항 및 제7항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제1항, 제3항, 제6항 및 제7항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 6-진저롤 함량이 증가된 증숙 생강 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
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