KR20190066460A

KR20190066460A - 람부탄 씨앗 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품

Info

Publication number: KR20190066460A
Application number: KR1020170166186A
Authority: KR
Inventors: 손호용; 표수진; 성화정
Original assignee: 표수진; 성화정
Priority date: 2017-12-05
Filing date: 2017-12-05
Publication date: 2019-06-13

Abstract

본 발명은 람부탄(rambutan, Nephelium lappaceum) 과일의 씨앗 추출물을 포함하는 항당뇨 조성물로서, 보다 상세하게는, 람부탄 씨앗의 에탄올 추출물을 포함하는 전분 분해효소 저해활성이 우수한 항당뇨 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 람부탄 씨앗 추출물은 우수한 전분분해효소 저해 활성에 의한 항당뇨 활성을 나타내어, 제2형 당뇨병의 예방 또는 개선용 의약품 및 건강 기능 식품으로 사용할 수 있는 뛰어난 효과가 있다. 뿐만 아니라, 본 발명의 람부탄 씨앗 추출물은 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성조건 및 혈장 내에서도 전분분해효소 저해 활성의 손실이 나타나지 않아, 액상, 크림, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 손쉽게 가공될 수 있어 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용하게 이용될 수 있다.

Description

람부탄 씨앗 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품{PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING THE SEED EXTRACTS OF RAMBUTAN AS AN EFFECTIVE COMPONENT FOR PREVENTION OR TREATMENT OF DIABETES AND HEALTH FUNCTIONAL FOOD COMPRISING THE SAME}

본 발명은 람부탄(rambutan, Nephelium lappaceum) 과일의 씨앗 추출물을 포함하는 항당뇨 조성물로서, 보다 상세하게는, 람부탄 씨앗의 에탄올 추출물을 포함하는 전분 분해효소 저해활성이 우수한 항당뇨 조성물에 관한 것이다.

현대인에게 가장 흔한 질병중 하나인 당뇨병은 인슐린의 분비량이 부족하거나 정상적인 기능이 이루어지지 않는 등의 대사질환의 일종으로서 혈중 포도당 농도가 높은 것이 특징이며, 고혈당으로 인하여 여러 증상 및 징후를 일으킨다. 당뇨병은 제1형과 제2형으로 구분되는데, 제1형 당뇨병은 유전적 영향에 의해 인슐린을 전혀 생산하지 못하는 것이 원인이 되어 발생하며, 제2형 당뇨병은 인슐린 기능이 떨어져 인슐린 저항성(insulin resistance)이 원인으로 알려져 있다. 특히, 제2형 당뇨병은 식생활의 서구화에 따른 고열량, 고지방, 고단백의 식단, 운동부족, 스트레스 등 환경적인 요인이 크게 작용하는 것으로 알려져 있다. 당뇨병의 치료를 위해서는 제1형 당뇨병의 경우에는 인슐린 주사가 필수적이며, 제2형 당뇨병의 경우에는 생활습관 교정 및 약물치료가 필요하며, 대표적으로 인슐린 분비 촉진제(예, 레파글리나이드, 미티글이나이드) 및 소장에서의 탄수화물 흡수 지연제[글루코바이: 성분명-아카보즈(acarbose), 베이슨: 성분명-보글리보스 (voglibose)] 등이 이용되고 있다.

한편, 인구의 증가로 과일 소비는 급격히 증가되고 있으며, 이에 따라 대량의 과일 껍질과 씨앗이 폐기물로 발생하고 있다. 따라서, 폐기되고 있는 껍질 등의 효율적인 재이용 연구가 절실하다(Cheok CY 등, 2016, Critical Reviews in Food Science and Nutrition, http://dx.doi.org/10.1080/ 10408398.2016.1176009). 람부탄(Nephelium lappaceum)은 대표적으로 껍질이 많이 발생하는 다소비 열대 과일 중 하나이며, 무환자나무과(Sapindaceae)에 속하며, 나무 높이는 10~15m이며, 잎은 어긋나고 5~7쌍으로 된 우상복엽이며, 두껍고 윤기가 나며, 어릴 때는 뒷면에 털이 있다. 꽃은 4~6월에 피며, 열매는 10~12개씩 모여서 달리며, 작은 달걀만한 크기로서 7~8월에 홍색으로 익으며 육질 돌기가 있다. 람부탄의 어원은 "머리(rambut)"라는 말레이어에서 기원하였으며, "머리난 것"이라는 의미를 가진다. 실제 람부탄은 동남아시아의 열대 과실 중 가장 많이 알려진 과실 중 하나이고, 최대 생산국은 태국이다. 재배된 과실은 과피와 씨를 제거하고 보통 생식으로 이용되며 시럽용으로 통조림 형태 뿐만 아니라 잼이나 익힌 형태로 요리에도 이용된다.

또한, 람부탄은 칼로리가 낮은 과일로 수분함량은 80%, 탄수화물 17.5%, 지방 1.2%, 단백질 1%를 함유하여 79Kcal/100g를 나타내며, 다량의 vitamin C, 인, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘을 함유하는 것으로 알려져 있다. 씨에는 38%의 조지질이 포함되어 있으며, oleic acid(42.0%) 및 arachidic acid(34.3%)가 주요 성분으로 알려져 있다(ManaM 등, 2013. J. Oliec Sci. 62, 335-343). 람부탄의 과피에는 tannin과 saponin이 함유되어 있어 한약재로 사용되며, 최근 껍질의 주요성분은 geraniin으로 밝혀졌다(Elendran S 등, 2015, Pharm Biol. 53, 1719-1726). 상기 geraniin은 람부탄 껍질의 에탄올 추출물의 30%를 차지하며, 항암, 항당뇨 활성을 가지며 고혈압 예방에 유효한 것으로 알려져 있다(Elendran S 등, 2015, Pharm Biol. 53, 1719-1726). 또한, 껍질로부터 corilagin, ellagic acid가 보고되어 있다(Thitilertdecha N 등, 2010. Molecules. 15, 1453-1465). 그 외에도 람부탄의 뿌리는 감기 치료에, 잎은 찜질약으로, 나무껍질은 혀에 병이 생겼을 때 근육을 완화시키는 치료제로도 사용되고 있으나, 람부탄 씨앗 추출물의 전분분해효소 저해에 의한 강력한 항당뇨 활성은 알려진 바 없다.

현재까지 알려진 람부탄 및 람부탄 씨앗의 생리활성으로는 항산화 활성(Zhuang Y 등, 2017, Food Chem Toxicol. S0278-6915, 30030-30033), 지방산 합성저해 효과(Zhao YX 등, 2011, Carbohydr Res. 346, 1302-1306) 및 암세포 성장억제 활성(Fang EF 등, 2015, Appl Biochem Biotechnol. 175, 3828-3839) 등이 알려져 있으며, 람부탄 껍질 추출물의 항당뇨 활성이 최근 보고되어 있으며(Ma, Q 등, 2017, Nutreints 9, 801), 람부탄 씨앗 추출물의 트립신 저해 및 항암 활성이 보고된 바 있다(Feng, EF 등, 2015. Appl. Biochem. Biotechnol. 175, 3828-3839). 그러나, 현재까지 람부탄 씨앗 추출물의 항당뇨 활성은 알려진 바 없다.

또한, 현재까지 알려진 람부탄과 관련된 특허로는 대한민국 등록특허 제10-1393007호에 [람부탄 및 리치 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부노화 방지용 및 피부주름 개선용 화장료 조성물]이, 등록특허 제10-1411947호에 [람부탄을 이용한 과실주의 제조방법]이 개시되어 있으며, 대한민국 공개특허 제10-2006-0007083호에 [람부탄 추출물을 함유하는 미백화장료 조성물 및 람부탄 추출방법]이, 일본 공개특허 평4-244004호에 [람부탄의 과피 추출물을 함유하며 미백효과를 갖는 화장료 조성물]이 공개되어 있다. 그러나, 현재까지 람부탄 씨앗 추출물의 전분분해효소의 저해에 의한 항당뇨 활성은 전혀 알려진 바 없다.

KR

10-1393007

B

KR

10-1411947

B

KR

10-2006-0007083

A

JP

1992-244004

A

Ma, Q 등, 2017, Nutreints 9, 801

본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 람부탄 씨앗 추출물을 유효성분으로 하는 항당뇨 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 람부탄(Nephelium lappaceum)의 씨앗 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

상기 약학적 조성물의 유효성분으로서의 추출물은 에탄올 추출물인 것이 바람직하다.

또한, 본 발명은 람부탄(Nephelium lappaceum)의 씨앗 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.

상기 건강 기능 식품의 유효성분으로서의 추출물은 에탄올 추출물인 것이 바람직하다.

본 발명의 람부탄 씨앗 추출물은 우수한 전분분해효소 저해 활성에 의한 항당뇨 활성을 나타내어, 제2형 당뇨병의 예방 또는 개선용 의약품 및 건강 기능 식품으로 사용할 수 있는 뛰어난 효과가 있다. 뿐만 아니라, 본 발명의 람부탄 씨앗 추출물은 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성조건 및 혈장 내에서도 전분분해효소 저해 활성의 손실이 나타나지 않아, 액상, 크림, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 손쉽게 가공될 수 있어 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용하게 이용될 수 있다.

도 1은 람부탄 과일 전체를 나타내고,
도 2는 과육 부위를 나타내고,
도 3은 껍질 부위를 나타내며,
도 4는 씨앗 부위를 나타내는 사진도이다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명은 람부탄 씨앗 추출물을 함유하는 강력한 항당뇨 활성을 나타내는 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 발명자는 람부탄 씨앗의 에탄올 추출물을 조제하고, 이의 알파-아밀라제, 베타-아밀라제 및 알파-글루코시다제에 대한 전분분해효소 저해 활성을 확인하였다.

따라서, 본 발명은 람부탄(Nephelium lappaceum)의 씨앗 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

바람직한 구체예로서, 본 발명은 정선, 세척된 람부탄 과일로부터 씨앗, 과육, 씨를 분리하는 단계; 분리된 씨앗로부터 추출물을 조제하는 단계; 람부탄 씨앗추출물의 항당뇨 활성 평가 단계; 상기 활성 물질의 안정성 평가 단계를 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함되는 "람부탄 씨앗 추출물"은 수입 람부탄 과일로부터 씨앗을 회수하는 단계, 씨앗을 용매로 추출하는 단계 및 상기 추출액을 0.06mm 이하의 여과망을 사용하여 여과하고, 이를 감압농축하는 단계에 의해 수득될 수 있다.

본 발명에서 "람부탄 씨앗 추출물"은 다양한 추출 용매를 이용하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 물(냉수, 열수), 주정, 탄소수 1~4의 무수 또는 함수 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 주정, 프로판올, 부탄올 등), 상기 저급알코올과 물과의 혼합용매 등을 이용하며 제조할 수 있다. 바람직하게는 에탄올 또는 주정을 사용하여 추출하는 경우 최대의 활성물질의 수율을 나타낸다.

또한, 본 발명의 "람부탄 씨앗 추출물"은 상기 추출 용매를 사용한 추출 과정 이후, 추가적인 유기 용매 분획에 의한 활성 분획물로 존재할 수 있다. 바람직한 구체예로서, 본 발명의 람부탄 씨앗 에탄올 추출물을 헥센, 에틸아세테이트 및 부탄올의 순차적 유기 용매 분획을 수행하여 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 유기 용매 분획 후의 물 잔류물로서 얻을 수 있다.

본 발명의 람부탄 씨앗 추출물 및 이의 유기 용매 분획물은 감압증류 및 동결건조, 또는 분무건조 등과 같은 통상적인 분말화 과정을 거쳐 분말로 제조될 수 있다. 이들은 100℃의 열처리와 pH 2의 인체 위 내의 pH에서도 활성을 유지한다.

본 발명의 람부탄 씨앗 추출물은 강력한 알파-아밀라제, 베타-아밀라제 및 알파-글루코시다제에 대한 전분분해효소 저해 활성을 나타내어, 제1형 당뇨병, 제2형 당뇨병 또는 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 신증 등과 같은 당뇨 합병증의 예방 및 치료/개선과 관련되는 약학적 조성물 및 건강 기능 식품의 소재로 사용될 수 있다.

바람직한 구체예로서, 본 발명의 항당뇨 조성물은 약학적 조성물의 용도로서 적용될 수 있다.

상기 약학적 조성물은 각각의 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 경구 투여하거나 정맥 내, 복강 내, 피하, 직장, 국소 투여 등을 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 이러한 약학적 조성물에는 추가적으로 담체, 부형제 또는 희석제 등이 더 포함될 수 있으며, 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리쓰리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 비정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 더 포함할 수도 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물에서 항당뇨 활성을 갖는 성분의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 당 1 내지 5,000mg, 바람직하게는 100 내지 3,000mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 다양한 경로를 통하여 대상에 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내(intra-cerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명에서 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 일반적인 모든 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 유효성분을 표적 세포로 전달할 수 있는 임의의 장치를 이용해 투여될 수도 있다. 본 발명에서 "대상"은, 특별히 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어, 인간, 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함하고, 바람직하게는 포유류, 보다 바람직하게는 인간을 의미한다.

바람직한 구체예로서, 본 발명의 항당뇨 조성물은 건강 기능 식품의 용도로서 적용될 수 있다.

본 발명의 항당뇨 활성이 우수한 유효성분을 포함하는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다. 본 발명의 활성 성분은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 15중량%로 가할 수 있으며, 건강음료 조성물은 100 ml를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다. 본 발명의 건강 기능 식품은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 것 외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제, 예컨대, 천연 탄수화물 및 다양한 향미제 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예로는 포도당, 과당 등의 단당류, 말토오스, 수크로오스 등의 이당류 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등의 당알코올이 있다. 상기 향미제로는 타우마틴, 레바우디오시드 A, 글리시르히진, 사카린, 아스파르탐 등을 사용할 수 있다. 상기 향미제의 비율은 본 발명의 건강 기능 식품 100ml당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g을 사용한다. 상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물, 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수도 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 상기 활성 분획물 100 중량부 당 0.01 내지 약 20중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

이하에서는 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 바람직한 일 구체예일 뿐이며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예의 범위로 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1: 람부탄 부위별 추출물의 조제

태국산 람부탄 열매(수분함량 80%)를 구입한 후 이물질을 제거하고, 껍질, 과육, 씨로 각각 구분(도 1)하고, 이를 에탄올 추출물 제조에 사용하였다. 에탄올 추출물 조제시에는 각각의 시료에 대해 10배의 에탄올(95%, 덕산, 한국)을 가하고, 상온에서 1회 추출한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하였다. 조제된 추출물의 성분 분석으로 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총 당 및 환원당 함량을 측정하였다. 총 폴리페놀 함량은 추출 검액 400μl에 50μl의 Folin-ciocalteau, 100μl의 Na₂CO₃ 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총 플라보노이드 함량은 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고, 여과한 추출 검액 400μl에 90% diethylene glycol 4ml를 첨가하고 다시 1N NaOH 40μl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 환원당은 DNS법으로, 총 당은 phenol-sulfuric acid법을 이용하여 정량하였다.

[표 1] 람부탄 부위별 추출물의 수율과 성분

그 결과, 표 1에 나타낸 바와 같이, 람부탄 과일의 부위별 추출수율은 껍질 > 과육 > 씨앗의 순으로 나타났으며, 껍질에서는 7.33%의 높은 수율을 나타내었다. 총 폴리페놀 함량 분석 결과, 껍질 추출물에서 매우 높은 총 폴리페놀 함량(284.6 mg/g)을 나타내었으며, 상대적으로 적은 총 플라보노이드 함량을 나타내었다. 반면, 씨앗의 경우 총 당 및 환원당 함량은 낮게 나타났으나, 12.6mg/g의 총 폴리페놀과 4.6mg/g의 총 플라보노이드를 나타내었다.

실시예 2: 람부탄 부위별 추출물의 항당뇨 활성 평가

실시예 1에서 얻어진 람부탄의 다양한 부위별 에탄올 추출물의 항당뇨 활성을 in-vitro α-amylase 저해활성, β-amylase 저해 활성 및 α-glucosidase 저해 활성을 평가하여 나타내었다. 먼저, α-amylase 저해활성은 Lim 등이 보고한 방법(Li, CS 등, 2005. J. Kor. Soc. Appl. Biol. Chem. 48: 103-108)을 수정하여 사용하였다. 시료 2.5μL와 50mM phosphate buffer(pH 6.8)로 희석한 α-amylase(0.25U/mL) 25μL를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation한 후, 0.5% soluble starch(Samchun Chemicals Co., Korea) 25μL를 가하여 37℃에서 10분간 반응하였다. 이후, 2N acetic acid를 25μL를 가하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 0.75% KI/I₂용액 10μL를 가하여 발색하였다. 발색액은 540nm에서 흡광도를 측정하였으며, 각각의 실험은 3반복한 후 평균값을 구하여 다음의 식으로 저해율을 계산하였다.

저해율 ( % ) = 시료 첨가구 효소활성/ 대조구 첨가구 효소활성 x 100

또한, β-amylase(4-alpha-D-glucan maltohydrolase) 저해활성은 시료 2.5μL와 50mM phosphate buffer(pH 6.8)로 희석한 α-amylase(0.25U/mL) 25μL를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation한 후, 0.5% soluble starch(Samchun Chemicals Co., Korea) 25μL를 가하여 37℃에서 10분간 반응한 후 100℃에서 5분간 가열하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 150μL의 DNS(3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., st. Louis, USA) 용액을 가하여 100℃에서 5분간 가열하여 발색한 후 상온에서 방냉하였다. 발색액은 540nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다.

저해율 ( % ) = [1-(시료 첨가구 효소활성/ 대조구 첨가구 효소활성)] x 100

마지막으로, α-glucosidase 저해활성은 pNPG(p-nitrophenol glucoside; Sigma Co., USA)를 이용하여 평가하였으며, 생강 추출물 시료 2.5μl와 50mM Sodium acetate buffer(pH 5.6)로 희석한 α-glucosidase(0.25U/ml) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation 하고, 1mM pNPG 용액 25μl를 가하여 60℃에서 10분간 반응하였다. 이후, 1M NaOH 25μl를 가하여 반응을 정지시키고, 405nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다.

[표 2] 람부탄 부위별 추출물의 항당뇨 활성

그 결과, 표 2에 나타낸 바와 같이, 임상에서 당뇨병 치료제로 사용하고 있는 acarbose는 농도 의존적으로 강력한 α-amylase 저해활성, β-amylase 저해활성 및 α-glucosidase 저해활성을 나타내었다. 람부탄 껍질 및 과육 추출물은 매우 미약한 α-amylase 저해활성을 나타내었으며, 동일 농도의 acarbose에 비해 무시할 만한 저해활성을 나타내었다. 반면, 람부탄 씨앗 추출물은 acarbose 62.5μg/ml 농도의 저해활성과 유사한 α-amylase 저해활성, α-glucosidase 저해활성 및 β-amylase 저해활성을 나타내었다. 이러한 저해활성은 고농도 처리시에 보다 강력하게 나타났으며, 농도의존적인 저해 활성을 나타내었다. 따라서, 람부탄 씨앗 추출물은 제2형 당뇨병의 예방 및 치료에 이용 가능함을 확인하였다.

실시예 3: 람부탄 씨앗 추출물의 산 및 열 안정성 평가

실시예 1에서 얻은 람부탄 씨앗 에탄올 추출물을 대상으로 알파-아밀라제, 베타-아밀라제 및 알파-글루코시다제에 대한 전분분해효소 저해 활성에 대한 열 안정성 및 산 안정성을 확인하였다. 상기 시료들은 100℃에서 1시간 열 처리, pH 2(0.01M HCl)에서 1시간 처리시 전분분해 효소 저해 활성의 심각한 감소가 나타나지 않아 높은 열 및 산 안정성을 나타내었다. 따라서, 상기의 람부탄 씨앗 추출물은 다양한 식품 가공 공정하에서도 우수한 항당뇨 활성을 유지할 것으로 예상된다.

Claims

람부탄(Nephelium lappaceum)의 씨앗 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 추출물은 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
람부탄(Nephelium lappaceum)의 씨앗 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품.
제 3항에 있어서, 상기 추출물은 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 건강 기능 식품.