KR102045847B1 - 관능성 및 항당뇨 활성이 증대된 옥미수·호박 가미 경옥고 - Google Patents
관능성 및 항당뇨 활성이 증대된 옥미수·호박 가미 경옥고 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 옥미수(Silk of Zea mays Linne) 및 호박(Cucurbita moschata)을 가미하여 제조되는 관능성 및 항당뇨 활성이 증대된 경옥고 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 기존 생지황, 백복령, 인삼 및 벌꿀을 주성분으로 하는 경옥고에 옥미수와 호박을 가미하여 관능성이 개선되고, 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해 활성이 강력한 옥미수 및 호박 가미 경옥고와 이를 포함하는 당뇨병의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것이다. 본 발명의 관능성이 증대되면서 항당뇨 활성이 우수한 옥미수와 호박이 가미된 경옥고 조성물은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 옥미수 및 호박이 가미되어 관능성이 우수할 뿐만 아니라, 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해에 의한 강력한 항당뇨 활성을 나타냄과 동시에, 인간 적혈구에 대한 용혈 활성을 전혀 나타내지 않고, 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성 조건 및 혈장 내에서도 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해활성의 손실이 나타나지 않으므로, 액상, 크림, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 손쉽게 가공될 수 있어 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 옥미수(Silk of Zea mays Linne) 및 호박(Cucurbita moschata)을 가미하여 제조되는 관능성 및 항당뇨 활성이 증대된 경옥고 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 기존 생지황, 백복령, 인삼 및 벌꿀을 주성분으로 하는 경옥고에 옥미수와 호박을 가미하여 관능성이 개선되고, 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해 활성이 강력한 옥미수 및 호박 가미 경옥고와 이를 포함하는 당뇨병의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것이다.
현대인에게 가장 흔한 질병 중 하나인 당뇨병은 인슐린의 분비량이 부족하거나 정상적인 기능이 이루어지지 않는 등의 원인으로 발생하는 대사질환의 일종으로서 혈중 포도당 농도가 높은 것이 특징이며, 고혈당으로 인하여 여러 증상 및 징후를 일으킨다. 당뇨병은 제 1형과 제 2형으로 구분되는데, 제 1형 당뇨병은 유전적 영향에 의해 인슐린을 전혀 생산하지 못하는 것이 원인이 되어 발생하며, 제 2형 당뇨병은 인슐린 기능이 떨어지는 인슐린 저항성(insulin resistance)이 원인으로 알려져 있다. 특히, 제 2형 당뇨병은 식생활의 서구화에 따른 고열량, 고지방, 고단백의 식단, 운동부족, 스트레스 등 환경적인 요인이 크게 작용하는 것으로 알려져 있다.
당뇨병의 치료를 위해서는 제 1형 당뇨병의 경우에는 인슐린 주사가 필수적이며, 제 2형 당뇨병의 경우에는 생활습관 교정 및 약물치료가 필요하며, 대표적으로 인슐린 분비 촉진제(예, 레파글리나이드, 미티글이나이드) 및 소장에서의 탄수화물 흡수 지연제[글루코바이: 성분명-아카보즈(acarbose), 베이슨: 성분명-보글리보스(voglibose)] 등이 이용되고 있다.
경옥고는 인삼, 복령, 생지황, 꿀 등을 구성생약으로 하는 고형제제로 동의보감과 방약합편에 처방과 제법이 수제된 보혈강장제로, 민간에서도 허약체질 개선보약으로 널리 사용하여 왔다. 경옥고는 백삼과 백복령 분말에 생지황즙과 꿀을 넣어 장시간 가열하여 만든 고형제품으로 동의보감에 의하면 '정과 수를 채워주고 진기를 고르게 하며, 원기를 보하며 늙은이를 젊어지게 하고 모든 허손증을 보하며 온갖 병을 낫게 한다. 또 정신이 좋아지고 오장이 충실해지며, 흰머리가 다시 검어지고 빠진 이가 다시 나오면 걸음걸이가 뛰는 말과 같이 빨라지고, 하루에 두세 번 먹으면 종일토록 배고프거나 목이 마르는 일이 없다'로 기재되어 있다. 그러나, 경옥고는 원료를 혼합한 후 중탕 가열하여 고형제품으로 만드는 것으로, 제조방법이 복잡하면서 장시간의 노력이 필요한 문제점을 가지고 있으며, 쓴맛과 이취로 기호성이 낮은 문제가 있다.
현재까지 경옥고와 관련된 연구는 경옥고 자체의 유용 활성 평가 및 천연물을 가미한 가미경옥고의 효능, 발효시킨 경옥고의 효능 등에 대해 집중되어 있으며, 유용 생리활성으로 면역 증강활성(이가순 외, 2013, 한국식품영양과학회지 42: 335-341), 항 피로효과(김준호, 2011, 원광대학교 박사논문; 김용안 외, 2016, 생약학회지 47: 258-263), 고혈당, 고혈압 및 염증, 위궤양 등에 대한 경옥고의 생리활성(황완균 외, 1994, 생약학회지 25: 51-58), 항치매 효과(신범영, 2011. 경희대학교 박사논문) 등에 대한 보고가 있으며, 다양한 경옥고의 항산화 효과 비교(이소연 외, 2008, The Korea journal of herbology 23: 123-136)도 이루어져 있으며, 하수오 가미 경옥고의 양모 효과(도은주 외, 2011. The Korea journal of herbology 26: 9-14)도 알려져 있다. 최근에는 경옥고를 이용한 음료(권세욱 외, 2013, 동의생리병리학회지 27: 233-238) 및 경옥고 식초 제조(박성민 외, 2009, Herbal formula science 17: 121-128)도 보고된 바 있다.
한편, 경옥고와 관련된 특허로는, 인삼, 복령, 생지황, 꿀을 주재료로 하는 원방 경옥고의 효율적인 제조 및 흡수 증대에 관한 특허, 원방 경옥고에 다양한 천연물, 한방재료를 가미하여 기능성과 기호성을 강화시킨 경옥고 제조에 관한 특허 및 다양한 경옥고를 섭취하기 쉽도록 음료, 플레이크, 양갱, 초콜릿 등으로 제조하는 기호성과 접근성을 증대시킨 특허로 대별할 수 있다. 먼저, 경옥고 제조 및 흡수 증대와 관련하여, 대한민국 등록특허 제10-1725187호에 경옥고 흡수를 용이하게 하기 위한 작은 입자를 가진 [경옥고의 제조방법 및 이에 따라 제조된 경옥고], 대한민국 등록특허 제10-1441744호에 미생물 발효를 통해 아미노산 함량을 증가시키는 [미생물을 이용한 발효경옥고 제조방법]이 개시되어 있으며, 다음으로, 기능성과 기호성을 증대시킨 가미경옥고와 관련하여, 대한민국 등록특허 제10-1781432호에 원방 경옥고에 단삼, 황기, 산사, 맥아 추출물을 포함하는 [약용 작물로 이루어진 고지혈증 개선용 건강식품 및 이에 의해 제조된 경옥고], 대한민국 등록특허 제10-1682637호에 기억력 개선효과가 우수한 청피를 포함하는 [청피경옥고를 유효성분으로 포함하는 신경세포보호 및 기억력개선효과를 갖는 약학 조성물 및 청피경옥고를 함유하는 기능성식품], 대한민국 등록특허 제10-1514041호에 산양삼을 첨가하여 기호도와 저장성이 우수한 [산양삼 경옥고 및 이의 제조방법], 대한민국 등록특허 제10-1198211호에 [해삼을 이용한 경옥고의 제조방법], 대한민국 등록특허 제10-1060309호에 대추를 첨가하여 관능성을 증대시킨 [대추 경옥고], 대한민국 등록특허 제10-1016195호에 천마를 첨가하여 식감과 기호성을 증대시킨 [천마경옥고 및 그 제조방법]이 개시되어 있다. 마지막으로, 경옥고를 접근성이 우수한 다양한 제품으로 제조하는 특허와 관련하여, 대한민국 등록특허 제10-1716005호에 구성 성분의 분말화로 경옥고 효능을 증대시키는 산제의 [활성성분을 다량 함유한 경옥고 산제의 제조방법], 대한민국 등록특허 제10-1454729호에 쉽게 섭취가 가능한 [활성성분을 다량 함유한 경옥고 플레이크 스낵의 제조방법], 대한민국 등록특허 제10-1404520호에 [천마경옥고를 이용한 초콜릿의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 초콜릿], 대한민국 등록특허 제10-0286390호에 [양갱형 경옥고 제조방법 및 그 경옥고], 대한민국 등록특허 제10-0354962호에 쉽게 섭취가 가능한 [경옥고 즉석차 및 그 제조방법], 대한민국 등록특허 제10-1153426호에 [경옥고를 이용한 음료 조성물의 제조방법 및 이를 이용한 음료 조성물]이 개시되어 있다.
황완균 외, 1994, 생약학회지 25: 51-58
본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 기존 원방 경옥고에 옥미수 및 호박을 가미하여, 관능성 및 항당뇨 활성을 증대시킨 옥미수와 호박이 가미된 신규한 경옥고 조성물을 제공하고자 하는 것이다. 또한, 본 발명은 상기 본 발명의 경옥고 조성물을 포함하는 당뇨병의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품을 제공하고자 하는 것이다.
상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 인삼 100중량부에 대하여, 백복령 80~120중량부, 생지황 350~450중량부, 벌꿀 350~450중량부, 옥미수 1,500~1,800중량부 및 호박 600~800중량부를 혼합, 가열 추출, 여과 및 농축하여 제조되는 옥미수·호박 가미 경옥고를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고를 유효 성분으로 포함하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 유효 성분은 옥미수·호박 가미 경옥고를 헥센 및 에틸에세테이트로 순차 분획하여 수득되는 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 물 잔류물 또는 이들의 혼합물인 것이 바람직하다.
또한, 본 발명은 상기 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고를 포함하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.
상기 유효 성분은 옥미수·호박 가미 경옥고를 헥센 및 에틸에세테이트로 순차 분획하여 수득되는 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 물 잔류물 또는 이들의 혼합물인 것이 바람직하다.
본 발명의 관능성이 증대되면서 항당뇨 활성이 우수한 옥미수와 호박이 가미된 경옥고 조성물은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 옥미수 및 호박이 가미되어 관능성이 우수할 뿐만 아니라, 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해에 의한 강력한 항당뇨 활성을 나타냄과 동시에, 인간 적혈구에 대한 용혈 활성을 전혀 나타내지 않고, 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성 조건 및 혈장 내에서도 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해활성의 손실이 나타나지 않으므로, 액상, 크림, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 손쉽게 가공될 수 있어 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용하게 이용될 수 있다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 발명자들은 관능성을 증대시켜 쉽게 섭취 가능하면서도, 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해활성을 증대시켜 항당뇨 활성을 나태내어 건강상 도움을 받을 수 있는 경옥고를 제조하기 위하여, 다양한 천연물을 첨가한 가미 경옥고를 제조하던 중, 옥미수와 호박을 가미하여 제조되는 경옥고가 관능성 증대 및 항당뇨 활성이 매우 우수함을 확인하였다. 본 발명의 발명자들은, 다양한 비율의 옥미수와 호박을 기존 경옥고에 가미하여 관능성이 우수한 첨가 비율을 결정하였으며, 이후, 기존 경옥고와 비교하여 이화학적 특성, 유용성분 함량 분석 및 항당뇨 활성을 평가하였다. 상기 옥미수와 호박이 가미된 경옥고는 인간 적혈구에 대해 용혈 활성은 전혀 나타내지 않으면서도, 열 안정성과 산 안정성이 우수한 특징을 가짐을 확인함으로써 "옥미수·호박 가미 경옥고"를 당뇨병의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품으로 활용하고자 하였다.
따라서, 본 발명은 인삼 100중량부에 대하여, 백복령 80~120중량부, 생지황 350~450중량부, 벌꿀 350~450중량부, 옥미수 1,500~1,800중량부 및 호박 600~800중량부를 혼합, 가열 추출, 여과 및 농축하여 제조되는 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물을 제공한다.
상기 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물은 95℃에서 24~48시간 가열 추출하는 것이 바람직하며, 기호성을 증대시키기 위해 최종 당도를 25~30브릭스(brix)로 농축하는 것이 바람직하다.
바람직한 구체예로서, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물의 제조는 인삼 분말 3중량%, 백복령 분말 3중량%, 생지황 분말 12중량%, 벌꿀 12중량%, 옥미수 49중량% 및 호박 21중량%를 포함하는 혼합물을 제조하고, 상기 혼합물을 95℃에서 24~48시간 가열 추출하고, 이를 여과한 후, 26브릭스로 농축하여 제조될 수 있다. 농축액은 기존 경옥고보다 관능성이 매우 우수하였으며, 쓴맛과 시큼한 맛은 거의 느껴지지 않았다. 또한, 위와 같이 제조된 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물을 대상으로 항당뇨 활성을 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해활성으로 평가하였으며, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물은 기존 경옥고보다 매우 강력한 항당뇨 활성을 나타냄을 확인하였다.
본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물은 농축액 상태에서 추가적인 유기 용매 분획에 의한 활성 분획물로도 제조될 수 있다. 바람직한 구체예로서, 본 발명의 상기 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물은 헥센 및 에틸아세테이트의 순차적 유기 용매 분획을 수행하여 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물 및 유기 용매 분획 후의 물 잔류물로서 분획될 수 있다.
상기 바람직한 구체예로부터 제조된 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물은 기존 경옥고와 유사한 당도를 나타내지만, 산도는 0.15%로, 기존 경옥고의 0.97~1.0%보다 낮아 관능성이 우수하였다. 또한, 기존 경옥고는 최종 농도 1.3mg/ml에서 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제를 각각 0.2% 및 -1.5% 저해하여 무시할 만한 항당뇨 활성을 나타냄에 비해, 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물의 경우, 최종 농도 1.3mg/ml에서 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제를 각각 4.1% 및 8.2% 저해하여 우수한 항당뇨 활성을 나타냄을 확인하였다. 특히, 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물의 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물 및 물 잔류물은 각각 0.5mg/ml 농도에서 알파-아밀라제를 2.4%, 1.7% 및 4.6% 저해하였으며, 알파-글루코시다제에 대해서는 16.3%, 18.6% 및 20.7%를 저해하였다. 이는 옥미수 열수 추출물이 0.5mg/ml에서 0.1% 미만의 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제 저해활성을 나타냄을 고려할 때, 본 발명의 항당뇨 활성 성분이 옥미수에 의존한 것은 아닌 것으로 판단되었다. 또한, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물은 인간 적혈구 용혈활성을 나타내지 않으며, 산 처리, 열 처리, 혈장 처리시에도 안정성을 나타냄을 확인하였다.
따라서, 본 발명은 본 발명의 상기 옥미수·호박 가미 경옥고 조성물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품을 제공한다.
상기 유효 성분은 옥미수·호박 가미 경옥고를 헥센 및 에틸에세테이트로 순차 분획하여 수득되는 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 물 잔류물 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
본 발명의 조성물에 포함되는 옥미수·호박 가미 경옥고 및 이의 활성 분획물은 감압건조 및 동결건조, 또는 분무건조 등과 같은 통상적인 분말화 과정을 거쳐 분말로 제조될 수 있다. 옥미수·호박 가미 경옥고 및 이의 활성 분획물의 항당뇨 활성 성분은 혈장 내의 다양한 분해 효소에 의하여 분해되지 않으며, 100℃의 열처리와 pH 2의 인체 위 내의 pH에서도 활성을 유지한다.
본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 및 이의 활성 분획물은 강력한 알파-아밀라제 및 알파-글루코시다제에 대한 전분분해효소 저해활성을 나타내어, 제 1형 당뇨병, 제 2형 당뇨병 또는 당뇨병성 망막증과 당뇨병성 신증 등과 같은 당뇨 합병증의 예방 및 치료/개선과 관련되는 약학적 조성물 및 건강 기능 식품의 소재로 사용될 수 있다.
바람직한 구체예로서, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 및 이의 활성 분획물은 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물의 용도로서 적용될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 각각의 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 경구 투여하거나 정맥 내, 복강 내, 피하, 직장, 국소 투여 등을 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 이러한 약학적 조성물에는 추가적으로 담체, 부형제 또는 희석제 등이 더 포함될 수 있으며, 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리쓰리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 비정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 더 포함할 수도 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에서 항당뇨 활성을 갖는 성분의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 당 1 내지 5,000mg, 바람직하게는 100 내지 3,000mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 다양한 경로를 통하여 대상에 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내(intra-cerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명에서 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 일반적인 모든 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 유효성분을 표적 세포로 전달할 수 있는 임의의 장치를 이용해 투여될 수도 있다.
본 발명에서 "대상"은, 특별히 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어, 인간, 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함하고, 바람직하게는 포유류, 보다 바람직하게는 인간을 의미한다.
바람직한 구체예로서, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 및 이의 활성 분획물은 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품의 용도로서 적용될 수 있다.
본 발명의 항당뇨 활성이 우수한 유효성분을 포함하는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.
본 발명의 활성 성분은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 15중량%로 가할 수 있으며, 건강음료 조성물은 100 ml를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 기능 식품은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 것 외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제, 예컨대, 천연 탄수화물 및 다양한 향미제 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예로는 포도당, 과당 등의 단당류, 말토오스, 수크로오스 등의 이당류 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등의 당알코올이 있다. 상기 향미제로는 타우마틴, 레바우디오시드 A, 글리시르히진, 사카린, 아스파르탐 등을 사용할 수 있다. 상기 향미제의 비율은 본 발명의 건강 기능 식품 100ml당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g을 사용한다. 상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물, 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수도 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 상기 활성 분획물 100 중량부 당 0.01 내지 약 20중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하에서는 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 바람직한 일 구체예일 뿐이며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예의 범위로 한정되는 것은 아니다.
[
실시예
]
실시예
1:
옥미수
·호박 가미
경옥고의
조제와 이의 이화학적 특성 및 유용 성분 성분 분석
인삼 분말 3중량%, 백복령 분말 3중량%, 생지황 분말 12중량%, 옥미수 49중량%, 호박 21중량% 및 벌꿀 12%를 혼합하고, 이를 95℃에서 48시간 동안 가열 추출하고, 이를 여과한 후 26브릭스로 농축하여 제조한 옥미수·호박 가미 경옥고의 이화학적 특성, 유용성분 분석 및 관능성 평가 결과는 각각 표 1, 표 2 및 표 3에 나타내었다. 이때 대조군으로는 시판 경옥고를 이용하였다.
그 결과, 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고는 시판 경옥고와 비해 1/6 정도의 산도를 나타내었으며, 낮은 명도와 황색도, 높은 적색도를 나타내었다. 그러나, 전체적인 색차는 시판 경옥고와 유사하였다. 이때, 색차 분석은 Hunter Color Difference meter(Super color SP-80 Colormeter, Tokyo Denshoku Co., Japan)를 이용하여 측정하였으며, 명도(백색 100 ~ 0 검정색), 적색도(적색 100 ~ -80 녹색), 황색도(황색 70 ~ -80 검정색)를 측정하였다. 이때, 표준백판의 색도는 L 값이 92.44, a 값이 -0.06, b 값이 1.35로 기준을 정하였으며, 시료당 3회 측정하여 평균값을 구하여 나타내었고 색차(△E)는 다음의 식을 이용하여 계산하였다.
시판 경옥고 및 옥미수·호박 가미 경옥고의 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총 당 및 환원당 함량을 측정하였다. 총 폴리페놀 함량은 추출 검액 400μl에 50μl의 Folin-ciocalteau, 100μl의 Na2CO3 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총 플라보노이드 함량은 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고, 여과한 추출 검액 400μl에 90% diethylene glycol 4ml를 첨가하고 다시 1N NaOH 40μl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 환원당은 DNS법으로, 총 당은 phenol-sulfuric acid법을 이용하여 정량하였다.
그 결과, 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고는 시판 경옥고와 비해 총 폴리페놀 함량은 1.3배 높았으나, 총 플라보노이드 함량은 5.7배 높게 나타났다. 또한, 보다 낮은 환원당 함량을 나타내었다.
한편, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고와 시판 경옥고의 관능성을 맛, 향, 목넘김 및 전체적 선호도로 평가한 결과, 시판 경옥고 대비 아주 우수한 관능성을 확인하였으며, 한약에 대해 거부감을 나타내는 청소년 및 20대 여성들도 부담감 없이 마실 수 있음을 확인하였다(표 3).
실시예
2:
옥미수
·호박 가미
경옥고
및 이의
유기용매
분획물의
항당뇨
활성 평가
실시예 1에서 제조된 옥미수·호박 가미 경옥고의 항당뇨 활성을 in-vitro α-amylase 저해활성 및 α-glucosidase 저해 활성으로 평가하여 나타내었다. 먼저, α-amylase 저해활성은 Lim 등이 보고한 방법(Li, CS 등, 2005. J. Kor. Soc. Appl. Biol. Chem. 48: 103-108)을 수정하여 사용하였다. 시료 2.5μl와 50mM phosphate buffer(pH 6.8)로 희석한 α-amylase(0.25U/mL) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation한 후, 0.5% soluble starch(Samchun Chemicals Co., Korea) 25μl를 가하여 37℃에서 10분간 반응하였다. 이후, 2N acetic acid를 25μl를 가하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 0.75% KI/I2 용액 10μl를 가하여 발색하였다. 발색액은 540nm에서 흡광도를 측정하였으며, 각각의 실험은 3반복한 후 평균값을 구하여 다음의 식으로 저해율을 계산하였다.
저해율 (
%
) = 시료
첨가구
효소활성/
대조구
첨가구
효소활성 x 100
한편, α-glucosidase 저해활성은 pNPG(p-nitrophenol glucoside; Sigma Co., USA)를 이용하여 평가하였으며, 생강 추출물 시료 2.5μl와 50mM Sodium acetate buffer(pH 5.6)로 희석한 α-glucosidase(0.25U/ml) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation 하고, 1mM pNPG 용액 25μl를 가하여 60℃에서 10분간 반응하였다. 이후, 1M NaOH 25μl를 가하여 반응을 정지시키고, 405nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다.
저해율 (
%
) = [1-(시료
첨가구
효소활성/
대조구
첨가구
효소활성)] x 100
그 결과, 표 4에 나타난 바와 같이, 임상에서 당뇨병 치료제로 사용하고 있는 acarbose는 농도 의존적으로 강력한 α-amylase 저해활성 및 α-glucosidase 저해활성을 나타내었다. 시판 경옥고는 α-amylase 및 α-glucosidase 저해활성이 없었으며, 옥미수·호박 가미 경옥고는 우수한 α-amylase 및 α-glucosidase 저해활성을 나타내었다. 따라서, 옥미수·호박 가미 경옥고를 대상으로 헥센과 에틸아세테이트를 이용하여 순차적 유기용매 분획하여, 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물 및 물 잔류물을 조제하였으며, 분획물의 항당뇨 활성 평가 결과는 표 5에 나타내었다.
그 결과, 옥미수·호박 가미 경옥고의 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물 및 물 잔류물 모두에서 강력한 α-glucosidase 저해활성을 확인하였다. 이러한 분획물의 저해활성은 고농도 처리시에 보다 강력하게 나타났으며, 농도의존적인 저해 활성을 나타내었다. 따라서, 옥미수·호박 가미 경옥고 및 이의 활성 분획물은 제 2형 당뇨병의 예방 및 치료에 이용 가능함을 확인하였다.
실시예
3:
옥미수
·호박 가미
경옥고
및 이의 활성
분획물의
혈장, 산 및 열 안정성 평가
상기 실시예 1 및 실시예 2에서 얻은 옥미수·호박 가미 경옥고 및 이의 활성 분획물 및 물 잔류물을 대상으로 α-glucosidase 저해활성에 대한 열 안정성 및 산 안정성을 확인하였다. 이들은 100℃에서 1시간 열 처리, pH 2(0.01M HCl)에서의 1시간 처리시 α-glucosidase 저해활성의 심각한 감소가 나타나지 않았다. 따라서, 본 발명의 옥미수·호박 가미 경옥고 및 이의 활성 분획물들은 일반적인 식품 가공 공정 및 소화 흡수 단계에서도 항당뇨 활성을 유지할 것으로 판단된다.
실시예
4:
옥미수
·호박 가미
경옥고의
인간 적혈구 용혈 활성 평가
옥미수와 호박은 오래전부터 식품 음료 및 한방재료로 사용하고 있으며, 별도의 부작용이 알려져 있지 않다. 따라서, 옥미수·호박 가미 경옥고는 별도의 특이 독성은 없을 것으로 판단된다. 옥미수·호박 가미 경옥고의 잠재적 급성 독성을 평가하기 위해 인간 적혈구 용혈 활성을 평가하였으며, 그 결과는 표 6에 나타내었다. 이때 용혈 활성은 기존의 보고(손호용, 2014년, Korean J. Microbiol. Biotechnol. 42: 285~292)에 준해 평가하였으며, 간단하게는 PBS로 3회 수세한 인간 적혈구 100μl를 96-well microplate에 가하고 다양한 농도의 시료용액 100μl를 가한 다음 37℃에서 30분간 반응시켰으며, 이후, 반응액을 10분간 원심분리(1,500rpm)하여 상등액 100μl를 새로운 microtiter plate로 옮긴 후 용혈에 따른 헤모글로빈 유출 정도를 414nm에서 측정하였다. 시료의 용매 대조구로는 DMSO(2%)를 사용하였으며, 적혈구 용혈을 위한 실험 대조구로는 Triton X-100(1mg/ml)를 사용하였다. 용혈 활성은 다음의 수식을 이용하여 계산하였다.
(
%
)
Hemolysis
= [(
Abs
.S-
Abs
.C)/(
Abs
.T-
Abs
.C)]×100
Abs. S : 시료 첨가구의 흡광도,
Abs. C : DMSO 처가구의 흡광도,
Abs
. T : Triton X-100
첨가구의
흡광도.
먼저, 대조구로 사용된 DMSO와 증류수는 적혈구 용혈 활성이 없었으며, Triton X-100은 1mg/ml 농도에서 적혈구를 100% 용혈시킴을 확인하였다. 급성독성이 보고되어 있는 항암제 엠포테라신 B는 0.0125 mg/ml 농도에서도 95% 이상의 적혈구 용혈활성을 나타내었다. 한편, 옥미수·호박 가미 경옥고는 기존 시판 경옥고와 마찬가지로 130mg/ml 농도에서도 용혈활성은 나타나지 않았으며, 이의 분획물들도 용혈 활성은 인정되지 않았다.
Claims (4)
- 인삼 100중량부에 대하여, 백복령 80~120중량부, 생지황 350~450중량부, 벌꿀 350~450중량부, 옥미수 1,500~1,800중량부 및 호박 600~800중량부를 혼합, 95℃에서 24~48시간 동안 가열 추출, 여과 및 최종 당도 25~30브릭스로 농축하여 제조되는 옥미수·호박 가미 경옥고.
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-
2018
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Patent Citations (1)
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| KR100194375B1 (ko) * | 1997-04-01 | 1999-06-15 | 김도명 | 호박 추출물을 유효성분으로 하는 생약함유 건강보조식품의 제조방법 |
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