KR102430810B1 - 신규한 마이세나 무주 1004 균주 및 이를 이용한 천마 종자의 발아 방법 - Google Patents

신규한 마이세나 무주 1004 균주 및 이를 이용한 천마 종자의 발아 방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 신규한 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004) 균주 및 이를 이용한 천마 종자의 발아 방법에 관한 것으로, 신규한 마이세나 무주 1004 균주의 최적 성장 조건을 확립하였다. 또한, 신규한 마이세나 무주 1004 균주를 이용하여 천마 종자의 우수한 발아 방법을 확인함으로써, 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004 균주를 이용하여 천마의 무성증식에 비해 퇴화 되지 않고 우량한 품질의 종마를 대량 생산하여 천마 생산량을 증가시킴으로써 천마 재배 농가에 경제적 이익을 가져다줄 수 있을 것으로 기대된다.

Description

신규한 마이세나 무주 1004 균주 및 이를 이용한 천마 종자의 발아 방법 {Novel strain of Mycena MUJU 1004, and method for germination of Gastrodia elata seeds using thereof}
본 발명은 신규한 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004) 균주 및 이를 이용한 천마 종자의 발아 방법에 관한 것이다.
천마(Gastrodia elata)는 광합성 능력이 퇴화되어 독립적인 생육이 불가능한 난과(Orchidaceae)의 고등식물이다. 생장 단계에 따라 애주름버섯균(Mycena)과 뽕나무버섯균(Amillaria mellea)이 공생하는 기생식물이다. 천마는 꽃의 색깔에 따라 홍천마(Gastrodia elata for. elata), 청천마(Gastrodia elata for. glanca) 그리고 녹천마(Gastrodia elata for. viridis)로 구분한다. 꽃은 이삭화로서 약 5~7일에 걸쳐 꽃대 아래에서 위로 개화하며, 1개의 꽃대에서 약 30~100개의 꽃이 피어 6~7월경에 도란형의 꼬투리를 형성한다. 꼬투리 1개당 3~5만개의 종자가 들어 있으나, 종자에는 배유가 없고 배만 있어서 자연 상태에서 균류와의 공생 없이는 발아가 블가능하여 자연 발아율이 극히 낮다(Smith, S., et al., 1996). 천마의 구근은 성숙한 정도에 따라 성숙마(mature tuber), 백마(immature tuber), 미숙마(juvenile tuber)로 분류되며, 성숙마는 약재로 이용되고 백마와 미숙마는 종마로 이용된다.
천마는 가스트로딘(gastrodin), 바닐릴 알코올(vanillyl alcohol) 및 에르고티오닌(ergothionine) 등의 주요 기능성 성분들을 포함하고 있으며, 중풍, 고혈압, 현기증, 신경성 질환 등 각종 신경계통의 질환에 약효를 나타낸다고 알려져 생산량이 지속적으로 증가하고 있다(Lee, H.Y., et al., 2017).
천마의 인공재배는 농촌진흥청에서 개발한 뽕나무버섯균인 '천마 1호'와 국립산림과학원이 개발한 '홍릉천마균'이 보급되면서 무성증식법으로 이루어졌으나 자마에 의한 계속되는 무성증식으로 품질과 수량이 저하되는 천마 퇴화 현상, 천마 균주의 오용과 배양기술의 부족, 건조 등 환경 스트레스에 대한 천마 자체의 생리적 취약성 등으로 인해 급격한 생산성 감소 및 재배 농가의 경제적 손실로 이어지고 있다.
이를 해결하기 위해 천마의 종자로부터 무병(disease free)한 상태의 자마를 생산할 수 있는 유성증식법을 개발하였다. 유성증식법은 모마(어미 천마)에서 꽃이 피어 결실된 종자를 발아시켜서 증식하는 방법으로 무성증식법에 비해 우량한 유전형질을 보유하고 있어 퇴화 되지 않고 우량한 품질의 종마를 대량 생산할 수 있다는 장점이 있다. 지금까지 천마 종자를 발아시킬 수 있는 것으로 알려진 발아 균주는 주름버섯인 흰애주름버섯(Mycena osmuIndicola) 균주와 애주름버섯 KFRI 1212(Mycena sp. KFRI 1212)균주가 있다. 애주름버섯 KFRI 1212 균주를 이용하여 천마의 종자를 발아시킬 경우 원구경의 형성 효율은 좋으나 균사의 생장 속도가 느린 문제를 가지고 있다.
이에, 본 발명자는 천마 종자의 발아 효율을 증진시키는 방법을 연구 과정에서 천마 종자의 발아 효율이 우수한 신규한 애주름버섯속 균주인 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004)를 확보하였고, 이의 최적의 생장 조건을 확인하였다. 또한, 신규한 아미세나 무주 1004를 이용하여 우수한 천마 종자의 발아 방법을 확립함으로써 본 발명을 완성할 수 있었다.
종래 선행기술로서 제1106961호 및 제1698316호에는 흰애주름버섯을, 한국등록특허 제1200399호에는 애주름버섯 KFRI 1212(Mycena sp. KFRI 1212)를, 한국공개특허 제2013-0098946호에는 흰애주름버섯 또는 애주름버섯을, 한국공개특허 제2018-0065820호에는 신규한 애주름버섯 NIFOS101을 발아균주로 이용한 천마의 유성증식 방법이 기재되어 있어 본 발명의 구성과 유사하나, 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004) 균주 및 이를 이용한 천마 종자의 발아 방법은 그 구성이 차이가 있다. 또한 비특허문헌인 Linag, X.X., et al., (2018)에는 천마 종자의 발아 균주로 Mycena dendrobii이 기재되어 있어 본 발명의 구성과 유사하나, 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004) 균주와는 그 구성이 다르다.
한국등록특허 제1106961호, 공생균을 이용한 천마종자의 기내발아방법, 2012. 01. 11. 등록. 한국등록특허 제1698316호, 천마 종자의 기외 발아법을 이용한 유성번식 자마의 생산 방법, 2017. 1. 16. 등록. 한국등록특허 제1200399호, 신규 애주름버섯 균주 및 이를 이용한 천마종자의 기내발아방법, 2012. 11. 06. 등록. 한국공개특허 제2013-0098946호, 유성생식을 통한 우량자마 증식방법, 2013. 09. 05. 공개. 한국공개특허 제2018-0065820호, 탁월한 천마종자 발아활성을 갖는 신규한 애주름버섯 NIFOS101 균주 및 이의 이용, 2018. 06. 18. 공개.
Lee, H.Y., et al., Enhancement of the germination efficiency of Gastrodia elata seeds using a new Mycena species, J. Plant Biotechnol, 44, 56~60, 2017. Liang, X.X., et al., Secondary metabolites of Mycena dendrobii, a fungus stimulating the germination of Gastrodia elata, Chemistry of Natural Compounds, 54(2), 390~392, 2018. Smith, S., et al., Mycorrhizal Symbiosis (2nd Edition), Academic Press, San Diego, 1997.
본 발명이 목적은 신규한 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004) 균주 및 이의 최적의 생장 조건을 제공하는 데 있다.
또한, 상기 신규한 마이세나 무주 1004 균주를 이용하여 천마 종자의 발아 방법을 제공하는 데 있다.
본 발명은 신규한 마이세나 무주 1004 균주(Mycena MUJU 1004, 수탁번호 KCTC14139BP)에 관한 것이다.
상기 마이세나 무주 1004 균주는 천마 종자 발아 활성을 가질 수 있다.
상기 마이세나 무주 1004 균주는 온도가 15~30℃에서 균사 생장이 증진될 수 있다.
상기 마이세나 무주 1004 균주는 함수량이 60~70%에서 균사 생장이 증진될 수 있다.
상기 마이세나 무주 1004 균주는 pH가 5.0~5.5에서 균사 생장이 증진될 수 있다.
상기 마이세나 무주 1004 균주는 pH가 5.0~5.5에서 균사 생장이 증진될 수 있다.
또한, 본 발명은 신규한 마이세나 무주 1004 균주(Mycena MUJU 1004, 수탁번호 KCTC14139BP)를 이용한 천마 종자의 발아 방법에 관한 것이다.
상기 천마 종자의 발아 방법은 1) 마이세나 무주 1004 균주를 감자 한천 배지(Potato Dextrose agar) 배지에서 배양하는 1단계; 2) 상기 1단계의 배양된 마이세나 무주 1004 균주에 낙엽 혼합물을 접종하여 배양하는 2단계; 및 3) 상기 2단계의 발아균에 천마 종자를 뿌린 후 배양하여 발아시키는 3단계;를 포함할 수 있다.
이하 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 신규한 마이세나 무주 1004 균주(Mycena MUJU 1004, 수탁번호 KCTC14139BP)에 관한 것이다.
상기 신규한 마이세나 무주 1004 균주는 애주름버섯속 균주의 일종으로 전라북도 무주 덕유산 주변에서 생장 중인 균사로부터 수집, 분리하였다.
상기 신규한 마이세나 무주 1004 균주는 생장 온도가 15~30℃에서 균사 생장이 가장 우수하다. 바람직하게는 20~30℃이고, 더 바람직하게는 20~25℃이며, 가장 바람직하게는 25℃이다. 상기 생장 온도가 15℃ 미만일 경우에는 균사 생장 속도가 느려지며, 30℃ 초과일 경우에는 24시간 정도 배양하면 균사가 활력을 잃을 수 있어 바람직하지 못하다.
또한, 상기 신규한 마이세나 무주 1004 균주는 함수량이 60~70%에서 균사 생장이 우수하다. 상기 함수량이 60% 미만 또는 70% 초과일 경우에는 균사 생장 속도가 느려져 바람직하지 못하다.
상기 신규한 마이세나 무주 1004 균주는 pH가 8 이하에서 균사 생장이 우수하다. 바람직하게는 pH 4~7이고, 더 바람직하게는 pH 5.0~5.5이다. 상기 pH 염기성일 경우에는 균사가 생장하지 못하거나 생장 속도가 느려져 바람직하지 못하다.
상기 신규한 마이세나 무주 1004 균주는 낙엽 혼합물에서 배양할 수 있다.
상기 낙엽 혼합물은 낙엽, 밀기울, 곡물 분말 및 설탕이 혼합된 것일 수 있다. 상기 낙엽, 밀기울, 곡물 분말 및 설탕은 80~90 : 5~10 : 3~8 : 1~5 부피피로 혼합된 것일 수 있다. 바람직하게는 82~87 : 7~9 : 4~6 : 2~4 부피비로 혼합된 것이며, 가장 바람직하게는 85 : 7 : 5 : 3 부피비로 혼합된 것이다.
상기 낙엽 혼합물에 사용되는 낙엽은 상수리 낙엽, 신갈나무 낙엽 또는 이들을 혼합한 것을 사용할 수 있다.
상기 신규한 마이세나 무주 1004 균주는 셀룰로스(cellulose) 분해능이 우수하며, 천마 종자의 발아 활성을 가질 수 있다.
상기 신규한 마이세나 무주 1004 균주의 우수한 분해능은 마이세나 무주 1004 균주가 식물의 잔해를 분해시키는데 필요하며, 특히나 마이세나 무주 1004 균주가 생명력이 있는 천마 종자에 침투하여 종자와 공생하여 발아하는데 도움을 준다.
또한, 본 발명은 신규한 마이세나 무주 1004 균주(Mycena MUJU 1004, 수탁번호 KCTC14139BP)를 이용한 천마 종자의 발아 방법에 관한 것이다.
상기 천마 종자의 발아는 천마의 유성증식을 위한 것으로, 천마의 무성증식에 비해 퇴화되지 않고 우량한 품질의 종마를 대량 생산함으로써 천마 생산량을 증가시킬 수 있다.
상기 천마 종자의 발아 방법은 1) 마이세나 무주 1004 균주를 감자 한천 배지(Potato Dextrose agar) 배지에서 배양하는 1단계; 2) 상기 1단계의 배양된 마이세나 무주 1004 균주에 낙엽 혼합물을 접종하여 배양하는 2단계; 및 3) 상기 2단계의 발아균에 천마 종자를 뿌린 후 배양하여 발아시키는 3단계;를 포함할 수 있다.
상기 1단계 또는 2단계의 배양은 15~30℃에서 이루어질 수 있다. 바람직하게는 20~30℃이고, 더 바람직하게는 20~25℃이며, 가장 바람직하게는 25℃이다.
상기 2단계의 낙엽 혼합물은 낙엽, 밀기울, 곡물 분말 및 설탕이 혼합된 것일 수 있다. 상기 낙엽, 밀기울, 곡물 분말 및 설탕은 80~90 : 5~10 : 3~8 : 1~5 부피피로 혼합된 것일 수 있다. 바람직하게는 82~87 : 7~9 : 4~6 : 2~4 부피비로 혼합된 것이며, 가장 바람직하게는 85 : 7 : 5 : 3 부피비로 혼합된 것이다.
상기 낙엽 혼합물에 사용되는 낙엽은 상수리 낙엽, 신갈나무 낙엽 또는 이들을 혼합한 것을 사용할 수 있다.
상기 낙엽 혼합물은 121℃에서 80~100분간 멸균한 것을 사용할 수 있다.
상기 2단계에서 낙엽 혼합물 접종은 1단계의 마이세나 무주 1004 균주가 70~80% 성장한 것을 이용한다. 따라서 15~20일 배양한 후에 접종할 수 있다. 이는 이 시기에 균활력이 가장 왕성하기 때문이다.
상기 3단계의 발아는 발아균에 천마 종자를 뿌려서 15~30℃에서 배양하여 발아시킬 수 있다. 바람직하게는 20~30℃이고, 더 바람직하게는 24~27℃이며, 가장 바람직하게는 23~26℃이다.
본 발명은 또한, 신규한 마이세나 무주 1004 균주(Mycena MUJU 1004, 수탁번호 KCTC14139BP)를 이용해 발아시킨 천마 종자로부터 증식한 우량 자마를 제공할 수 있다.
본 발명은 신규한 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004) 균주 및 이를 이용한 천마 종자의 발아 방법에 관한 것으로, 신규한 마이세나 무주 1004 균주의 최적 성장 조건을 확립하였다. 또한 신규한 마이세나 무주 1004 균주를 이용하여 천마 종자의 우수한 발아 방법을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004 균주를 이용하여 천마의 무성증식에 비해 퇴화되지 않고 우량한 품질의 종마를 대량 생산하여 천마 생산량을 증가시킴으로써 천마 재배 농가에 경제적 이익을 가져다 줄 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004 균주의 균사체 배양 사진을 보여주고 있다.
도 2는 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004 균주와 기존에 알려져있는 흰애주름버섯(Mycena osmuIndicola) 및 애주름버섯 KFRI 1212(Mycena sp. KFRI 1212) 균주를 대차 배양하여 얻은 균총 모양을 비교한 사진을 보여주고 있는 것으로, (A)는 배양 접시의 앞면에서 (B)는 배양 접시의 뒷면에서 촬영한 균총 모양이다.
도 3은 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004 균주와 애주름버섯속 균주들의 분자진화학적 계통도를 보여주고 있다.
이하 본 발명의 이해를 돕기 위하여 구체적인 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 보다 상세히 설명하기로 한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 보다 명확하게 이해시키기 위하여 예시한 것일 뿐이며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1. 신규한 애주름버섯속 균주의 수집 및 분리>
전라북도 무주군 덕유산 주변에서 생장 중인 균사를 채칩한 후 감자 한천 배지(potato dextrose Agar, 이하 PDA라 함)에 배양하였다. 배양된 균사를 외과용 메스로 절개하여 새로운 PDA 배지에 다시 접종한 후 24℃에서 배양하였다(도 1). 이때 단일 균사만을 새로운 PDA 배지에 이식하여 단일 균주를 분리하여 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004)로 명명하였다.
<실시예 2. 신규한 애주름버섯속 균주의 동정>
실시예 2-1. 형태학적 특성
상기 실시예 1에서 분리한 마이세나 무주 1004 균주의 형태학적 분석을 위해, 기존에 잘 알려져있는 흰애주름버섯(Mycena osmuIndicola) 및 애주름버섯 KFRI 1212(Mycena sp. KFRI 1212) 균사체를 마이세나 무주 1004 균사체와 함께 PDA 배지에 올려놓은 후 24℃에서 3주 동안 대차 배양하여 균총 형성을 관찰하였으며, 그 결과 사진을 도 2에 나타내었다.
도 2의 배양 접시의 앞면(A)과 뒷면(B)에서 촬영한 사진에서 보여주듯이 기존에 알려져 있던 흰애주름버섯 및 애주름버섯 KFRI 1212 균총과 마이세나 무주 1004 균총 사이에 막이 형성되는 것을 관찰하였고, 마이세나 무주 1004 균총의 밀도가 흰애주름버섯 및 애주름버섯 KFRI 1212 균총에 비해 높은 것을 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 마이세나 무주 1004 균주는 기존에 알려진 흰애주름 버섯과 애주름버섯 KFRI 1212와는 다른 새로운 균주임을 알 수 있었다.
실시예 2-2. 분자유전학적 특성
상기 실시예 1에서 분리한 마이세나 무주 1004 균주의 리보좀 RNA 유전자 영역의 일부분인 ITS(Internal Transcribed Spacer) DNA 염기서열을 분석하였다.
PDA 배지에 배양된 마이세나 무주 1004 균사를 긁어내어 gDNA 정제 키트를 이용하여 DNA를 추출하였다. 추출한 DNA를 주형으로 하여 PCR(Polymerase chain reaction)을 수행하여 ITS를 증폭하였고, 증폭된 PCR 산물로 DNA 염기서열을 분석하였고, 서열번호 1의 DNA 서열로 이루어졌음을 확인하였다.
상기에서 확인한 서열번호 1의 신규한 마이세나 무주 1004 균주의 ITS 영역의 DNA 염기서열을 이용하여 미국 NCBI(National Center for Biotechnology Information)의 Blast 프로그램으로 분석한 결과 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004 균주가 애주름버섯속(Mycena sp.) 균주로 판명되었다.
또한, 상기에서 확인한 서열번호 1의 신규한 마이세나 무주 1004 균주의 DNA 염기서열과 NCBI에 등록된 애주름버섯속 균주들의 ITS 영역 DNA 염기서열을 MEGAX64 프로그램을 사용하여 분자진화학적 관계도를 확인하였고, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에서 보여주듯이, 신규한 마이세나 무주 1004 균주는 흰애주름버섯(Mycena osmundicola) 및 애주름버섯 KFRI1212 (Mycena KFRI 1212)와는 낮은 유연 관계를 나타내었고, 애주름버섯 NIFOS101(Mycena sp. strain NIFOS101 KY449288)과 유연관계가 가장 높은 것으로 나타났다.
상기 형태학적 및 분자유전학적 특성 등을 바탕으로 본 발명의 마이세나 무주 1004(Mycena MUJU 1004) 균주를 생물자원센터(Korean Collection for Type Cultures)에 2020년 2월 18일에 기탁하였다(수탁번호 KCTC14139BP).
<실시예 3. 마이세나 무주 1004의 성장 조건 분석>
상기 실시예 1에서 분리한 마이세나 무주 1004 균주의 성장 조건을 확인하기 위해 성장 온도, 함수량, pH, 산소량 조건 등을 확인하였다.
그 결과, 성장 온도 범위는 15~30℃이며, 특히나 25℃에서 성장이 가장 빠른 것을 확인하였다. 25℃ 초과에서는 균사체의 성장 속도가 눈에 띄게 느려졌고, 30℃ 초과에서 24시간 배양하면 균사체가 활력을 잃는 것을 관찰하였다.
또한, 함수량은 60~70%가 적정 범위이며, 과도하게 높은 함수량에서는 균주의 성장이 느려진다.
pH는 중성이나 산성의 조건에서 성장이 유리하고, pH 5.0~5.5에서 성장이 가장 우수함을 확인하였다.
산소량은 배양 과정 중에 배양료에 압박을 가하면 균주의 성장 속도가 늦어져 배양 시간이 늘어나는 것을 확인하였다.
<실시예 4. 마이세나 무주 1004 균주의 천마 종자 발아 활성 확인>
상기 실시예1에서 분리된 신규한 마이세나 무주 1004 균주를 PDA 배지에서 25℃에서 배양한 후, 멸균 처리된 낙엽 혼합물(상수리 낙엽 : 밀기울 : 곡물 분말 : 설탕 = 85 : 7 : 5 : 3 부피비로 혼합)을 접종하여 균주를 배양하였다. 여기에 천마 종자를 파종하고 25℃에서 8주간 배양하여 천마 종자를 발아시켰다. 8주 동안 배양하면서 종자의 발아 유무와 발아 특성(발아율, 원구경의 길이 신장)을 관찰하였고, 그 결과를 도 4 및 5에 나타내었다.
도 4의 본 발명의 마이세나 무주 1004 균주를 이용한 천마 종자의 발아 유무를 확인한 결과에서 보여주듯이, (A)의 파종 시간에 따른 천마 종자의 발아 정도를 살펴본 결과, 파종 시간에 지남에 따라 천마 종자의 발아체인 원구경이 발달하는 것을 확인할 수 있었고, (B)의 원구경을 확대한 사진에서 보듯이 발달된 원구경을 확인하였다.
또한, 도 5의 천마 종자의 발아 특성을 확인한 결과에서 보여주듯이, 대조군으로 이용한 흰애주름버섯 및 애주름버섯 균주에 비해 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004 균주에서 천마 종자의 발아율 및 원구경의 길이신장율이 현저히 우수하다는 것을 확인하였으며, 원구경의 측지 형성율도 우수함을 확인하였다.
나아가, 본 명세서에서는 보여주지 않았으나, 또 다른 천마 종자 발아균으로 알려진 애주름버섯 NIFOS101(Mycena sp. strain NIFOS101 KY449288) 균주에 비해서 본 발명의 마이세나 무주 1004 균주가 천마 종자의 발아율 및 원구경의 길이 신장율이 더 우수하다는 것을 추가로 확인하였다.
이를 통해, 본 발명의 신규한 마이세나 무주 1004 균주가 우수한 천마의 유성 증진 효과가 있음을 알 수 있었다.
<110> KWAK, Byung Kee <120> Novel strain of Mycena MUJU 1004, and method for germination of Gastrodia elata seeds using thereof <130> 2020-1 <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1040 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> Mycena MUJU 1004 <400> 1 gatcattatt gaatacgatt ggtactgatg ctggcccttc actgggcatg tgctcgtcca 60 tctatttatc ttctcttgtg cacatcttgt agtcttggat gaaccctttc gcactcgtgc 120 ggtctgggag ttgcgaaatt aaacctttgc ttctcctgct tgtccaaggc tatgttttca 180 tatacactat aaagttacag aatgtctatt aacgacttgt gcttgtcacg gtcattaaac 240 ctatacaact ttcagcaacg gatctcttgg ctctcctatc gatgaagaac gcagcgaaat 300 gcgataagta atgtgaattg cagaattcag tgaatcatcg aatctttgaa cgcaccttgc 360 gccctttggt attccgaagg gcatgcctgt ttgagtgtca ttaaattatc aaccttgctc 420 gcttttaccg gcttgagtta ggcttggatg tgagggtctt tgctggcttc cttcagtgga 480 tggtctgctc cctttaaatg cattagtggg atctcttgtg gaccgtcact tggtgtgata 540 attatctatg ccatcttgac tttgaagcaa actaatggga acctgctcat aaccgtcctt 600 ttcaaggaca actcttgaca ttttgacctc aaatcaggta ggactacccg ctgaacttaa 660 gcatatcaat aagcggagga aaagaaacta acaaggattc ccctagtaac tgcgagtgaa 720 gcgggaaaag ctcaaattta aaatctggcg gtccctgtgg ccgtccgagt tgtaatttag 780 agaagtgtta tccgtgctgg accgtgtaca agtctcctgg aatggagcgt catagagggt 840 gagaatcccg tctttgacac ggactgccag tgcattgtga tgcgctctca aagagtcgag 900 ttgtttggga atgcagctca aaatgggtgg taaattccat ctaaagctaa atattgagga 960 gagaccgata gcgaacaagt accgtgaggg aaagatgaaa agaactttgg aaagagagtt 1020 aaacagtacg tgaaattgct 1040

Claims (8)

  1. 신규한 마이세나 무주 1004 균주(Mycena MUJU 1004, 수탁번호 KCTC14139BP).
  2. 제1항에 있어서,
    상기 마이세나 무주 1004 균주는 천마 종자 발아 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 마이세나 무주 1004 균주.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 마이세나 무주 1004 균주는 온도가 15~30℃에서 균사 생장이 증진되는 것을 특징으로 하는 마이세나 무주 1004 균주.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 마이세나 무주 1004 균주는 함수량이 60~70%에서 균사 생장이 증진되는 것을 특징으로 하는 마이세나 무주 1004 균주.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 마이세나 무주 1004 균주는 pH가 5.0~5.5에서 균사 생장이 증진되는 것을 특징으로 하는 마이세나 무주 1004 균주.
  6. 삭제
  7. 제1항 또는 제2항의 마이세나 무주 1004 균주(Mycena MUJU 1004, 수탁번호 KCTC14139BP)를 이용한 천마 종자의 발아 방법.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 천마 종자의 발아 방법은,
    1) 마이세나 무주 1004 균주를 감자 한천 배지(Potato Dextrose agar) 배지에서 배양하는 1단계;
    2) 상기 1단계의 배양된 마이세나 무주 1004 균주에 낙엽 혼합물을 접종하여 배양하는 2단계; 및
    3) 상기 2단계의 발아균에 천마 종자를 뿌린 후 배양하여 발아시키는 3단계;
    를 포함하는 것을 특징으로 하는 천마 종자의 발아 방법.



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