KR102387073B1 - 키나제 저해제 - Google Patents

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Abstract

(예를 들어 p38 미토겐-활성화 단백질 키나제 효소 패밀리; Syk 키나제; 및 티로신 키나제의 Src 패밀리의 하나 이상의 멤버들의 저해를 통해) 항염증성 활성을 갖고, 약학적 조합물에서의 사용을 포함하여 요법, 특히 폐, 눈 및 장의 염증성 질환을 비롯한 염증성 질환의 치료에 사용되는 화학식 I의 화합물이 제공된다:
Figure 112018100721576-pct00124

상기 식에서, T, A, Q, Z, G, R4, R5a, R5b 및 n은 명세서에 주어진 의미를 갖는다.

Description

키나제 저해제
본 발명은 특히 (예를 들어 p38 미토겐-활성화 단백질 키나제 효소 패밀리(본원에서 p38 MAP 키나제 저해제라 칭함), 예컨대 그의 알파 키나제 아형; Syk 키나제; 및 티로신 키나제의 Src 패밀리의 하나 이상의 멤버들의 저해를 통한) 항염증제인 화합물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 단일 및 복합 요법을 포함한 요법, 특히 폐의 염증성 질환 (예를 들어, 천식 및 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD)), 안 질환 (예를 들어, 포도막염 또는 건성 각결막염 (건성안 질환, 안구건조증이라고도 함)) 및 위장관 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염)의 치료에 있어서 상기 화합물의 용도에 관한 것이다.
명백히 본원 명세서에 앞서 공개된 문헌의 목록 또는 논의가 당 기술수준의 일부이거나, 또는 보편적인 일반 지식으로서 반드시 인정된다는 의미로 받아들여져서는 안된다.
각각 상이한 조직 발현 패턴을 나타내는 4개의 p38 MAPK 이소폼(isoform)(각각 알파, 베타, 감마 및 델타)이 동정되었다. p38 MAPK 알파와 베타 이소폼은 신체 도처에서 발견되며 수많은 상이한 세포 타입에 존재하고, 이전에 기술된 다수의 저분자량 화합물에 의해 저해된다. 초기의 저해제 부류들은 화합물들의 다수의 표적 이탈(off-target) 효과를 유발하는 이러한 이소폼의 광범위한 조직 분포로 인하여 매우 독성적이었다. 보다 최근에 확인된 일부 저해제는 p38 MAPK 알파 및 베타 이소폼에 대한 선택성이 개선되었으며, 더 넓은 안전 마진을 가진다.
p38 MAP 키나제는 예를 들어 중증 천식, COPD 및 염증성 장 질환 (IBD) 등의 인간 질환에서 만성적인 지속성 염증의 개시 및 유지에 연루되는 수많은 시그널링 경로에서 중추적 역할을 하는 것으로 생각된다. p38 MAP 키나제가 일정 범위의 염증유발(pro-inflammatory) 사이토킨에 의해 활성화되고 그의 활성화로 인하여 추가 염증유발 사이토킨의 보충 및 분비가 발생한다는 것을 입증하는 많은 문헌들이 있다. 실제로, 일부 임상 연구의 데이터는 p38 MAP 키나제 저해제로 치료하는 동안 환자의 질환 활동에서 유익한 변화를 입증하고 있다. 예를 들어, 스미스(Smith)는 인간 PBMC로부터 (IL-8이 아니라) TNFα 분비에 대한 p38 MAP 키나제 저해제의 저해 효과를 기술하고 있다 (Smith, S. J., Br. J. Pharmacol., 2006, 149:393-404).
COPD 및 IBD의 치료에 p38 MAP 키나제의 저해제를 사용하는 것도 제안되었다. p38 MAPKα/β를 표적으로 하는 소분자 저해제는 다음에서 염증의 다양한 매개변수를 감소시키는데 효과적인 것으로 입증되었다:
- 일반적으로 코르티코스테로이드에 불감성인 COPD 환자에서 얻어진 세포와 조직(Smith, S. J., Br. J. Pharmacol., 2006, 149:393-404);
- IBD 환자에서 얻어진 생검(Docena, G. et al., J. of Trans. Immunol., 2010, 162:108-115); 및
- 생체내 동물 모델(Underwood, D. C. et al., Am. J. Physiol., 2000, 279:L895-902; Nath, P. et al., Eur. J. Pharmacol., 2006, 544:160-167).
이루센(Irusen)과 그의 동료들은 또한 핵에서 글루코코르티코이드 수용체(GR)의 결합 친화성 감소에 의해 코르티코스테로이드 불감성에 대한 p38 MAPKα/β의 연관 가능성을 제안하였다(Irusen, E. et al., J. Allergy Clin. Immunol., 2002, 109:649-657). 일정 범위의 p38 MAP 키나제 저해제, 예를 들어 AMG548, BIRB 796, VX702, SCIO469 및 SCIO323을 사용한 염증성 질환에서의 임상 실험이 기술되어 있다 (Lee, M.R. and Dominguez, C., Current Med. Chem., 2005, 12:2979-2994). 그러나, 인간의 만성 염증성 질환을 치료하는데 p38 MAP 키나제 저해제의 사용을 가로막는 주된 장애는 환자에서 관찰되는 독성이다. 이는 상기 특정적으로 언급된 모든 것을 비롯해 진행중인 많은 화합물의 임상 개발을 중단시키기에 충분히 심각하다.
COPD는 기저 염증이 흡입용 코르티코스테로이드의 항염증 효과에 실질적으로 내성이 있는 것으로 보고된 증상이다. 따라서, COPD를 치료하기 위한 고도의 전략은 흡입용 코르티코스테로이드에 대한 COPD 환자의 폐 조직의 민감성과 고유의 항염증 효과 모두를 증가시킬 수 있는 능력을 갖는 중재안을 개발하는 것일 수 있다. 머카도(Mercado) 등의 최근 간행물 (2007; American Thoracic Society Abstract A56) 에서는 p38 MAPKγ의 침묵(silencing)이 코르티코스테로이드에 대한 민감성을 회복하기 위한 잠재성이 있음을 입증하였다. 그러므로 COPD의 치료를 위해 p38 MAP 키나제 저해제를 사용하는 것은 환자에게 이중적 혜택이 있을 수 있다.
천식이나 COPD로 진단된 많은 환자들은 제어되지 않는 증상과 입원을 초래할 수 있는 이들의 의료 상태의 악화로 고통받고 있다. 이것은 흡입 코르티코스테로이드와 장시간 작용하는 β-작용제의 조합물을 포함하는, 가장 최신의 현재 시판중인 치료 요법제 사용에도 불구하고 일어난다. 지난 10년 동안 축적된 데이터는 폐 질환의 기저 염증 성분을 효과적으로 관리하지 못하는 것이 악화가 일어나는 가장 그럴듯한 이유임을 나타내고 있다. 천식 치료에서 항염증제로서의 코르티코스테로이드, 특히 흡입 코르티코스테로이드의 확립된 효능을 고려하여, 이러한 사실로 심도있는 연구가 촉발되었다. 연구에서는 일부 환경적 손상(insults)이 환자의 폐에서 코르티코스테로이드 무감성 염증 변화를 일으키는 것이 확인되었다. 일 예가 바이러스 매개 상기도관 감염(URTI)에서 발생하는 반응으로, 이것은 천식 및 COPD와 연관된 이병률 증가에서 특히 중요하다.
c-Src 및 Syk 키나제 둘다의 활성을 저해하는 화합물이 리노바이러스 복제에 대한 유효 약물이고(Charron, C.E. et al., WO 2011/158042), p59-HCK를 저해하는 화합물이 인플루엔자 바이러스 복제에 대해 유효하다(Charron, C.E. et al., WO 2011/070369)는 것은 이전에 기술되었다. p38 MAPK의 저해를 고려하여 만성 호흡기 질환이 있는 환자를 치료하기 위해 설계된 화합물이 특히 효과적일 것으로 기대된다.
특정 p38 MAPK 저해제는 또한 호흡기 세포융합 바이러스 복제의 저해제로서 기술되었다(Cass, L. et al., WO 2011/ 158039).
IBD의 정확한 병인은 분명치 않으나, 상호작용하여 관강내 미생물상의 성분에 대항해 과다 및 잘 제어되지 않는 점막의 염증성 반응을 촉진하는 유전 및 환경적 인자에 의해 통제되는 것으로 여겨진다. 이러한 반응은 말초 유래 염증성 호중구, 수지상 세포 및 T-세포의 침윤을 통해 매개된다. 염증성 세포내 p38의 도처 발현으로 의해, p38은 IBD 모델에서의 연구를 위한 명백한 표적이 되고 있다. IBD의 동물 모델 및 IBD 환자 유래 인간 생검에서 p38 저해제의 효능을 조사한 연구에 따라서, p38이 IBD 치료를 위한 표적일 수 있음이 제시되었다(Hove, T. ten et al., Gut, 2002, 50:507-512, Docena, G. et al., J. of Trans. Immunol,. 2010, 162:108-115). 그러나, 이러한 발견은 p38 저해제로 효과를 보이지 않은 것으로 보고된 다른 그룹과 완전히 모순되는 것이다(Malamut G. et al., Dig. Dis. Sci, 2006, 51:1443-1453). p38 알파 저해제 BIRB796을 사용한 크론병 환자에서의 임상적 연구는 C-반응성 단백질 수준의 개선으로 임상적 혜택의 가능성을 입증하였다. 그러나 이러한 개선은 일시적인 것으로 8주차에 기준선으로 돌아왔다(Schreiber, S. et al., Clin. Gastro. Hepatology, 2006, 4:325-334). 중증의 크론병을 가진 환자에서 CNI-1493, p38 및 Jnk 저해제의 효능을 조사한 소규모 임상 연구는 8주 이상 임상 점수에 상당한 개선을 나타내었다(Hommes, D. et al. Gastroenterology. 2002 122:7-14).
T 세포는 위장관의 염증 매개에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 포우리(Powrie) 및 동료들에 의한 선구자적 연구로 나이브(naive) CD4+ 세포의 중도 장애 면역결핍(SCID) 동물로의 전달이 공생 박테리아의 존재에 따라 대장염으로 발달되는 것으로 판명되었다(Powrie F. et al. Int Immunol. 1993 5:1461-71). 또한, IBD 환자로부터의 점막을 조사하여 환자가 크론병인지 궤양성 대장염을 가졌는지에 따라 Th1 (IFNγ/IL-2) 또는 Th2 (IL5/TGFβ)가 바이어스되는 CD4+ 세포의 상향조절이 나타났다(Fuss IJ. et al. J Immunol. 1996 157:1261-70.). 유사하게, 베체트 환자의 혈청내 T 세포 관련 사이토킨(IL-17 및 IL-23)의 수준 증가를 보고한 다수의 연구로 T 세포는 염증성 안 장애에서 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다(Chi W. et al. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008 49:3058-64). 이러한 발견에 지지하여, 디레스케넬리(Direskeneli) 및 동료들은 베체트 환자가 그의 말초 혈액내에 Th17 세포가 증가하였고 Treg 세포가 감소하였음을 증명하였다(Direskeneli H. et al. J Allergy Clin Immunol. 2011 128:665-6).
T 세포 활성을 저해하기 위한 한가지 접근은 T 세포 수용체 시그널링 복합체의 활성화에 관여하는 키나제를 표적으로 하는 것이다. Syk 및 Src 패밀리 키나제는 이 경로에서 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌으며, 여기서는 Src 패밀리 키나제, Fyn 및 Lck가 T 세포 수용체의 활성화 하류가 되는 제1 시그널링 분자이다(Barber EK. et al. PNAS 1989 86:3277-81). 이들은 Syk 패밀리 키나제, ZAP-70의 동원으로 이어지는 T 세포 수용체의 티로신 포스포릴화를 개시한다. 동물 연구는 ZAP-70 녹아웃이 SCID 표현형으로 이어짐을 보여주었다(Chan AC. et al. Science. 1994 10;264(5165):1599-601).
Syk 저해제 포스타마티닙에 의한 류마티스 관절염 환자의 임상 시험은 환자가 개선된 임상 결과 및 감소된 IL-6 및 MMP-3의 혈청 수준을 나타냄으로써, 항-염증성 표적으로서의 Syk 잠재성을 보여주었다(Weinblatt ME. et al. Arthritis Rheum. 2008 58:3309-18). Syk 키나제는 조혈계 세포, 가장 특히는 B 세포 및 성숙 T 세포에서 널리 발현된다. 이는 면역수용체 티로신계 활성 모티프(ITAM)와의 상호작용을 통해 염증 세포에서 면역-수용체 시그널링의 매개뿐만 아니라 T 세포 및 B 세포의 발현을 조절하는데 중요한 역할을 한다. Syk 활성화는 IL-6 및 MMP - IBD 및 류마티스 관절염을 포함한 염증성 장애에서 보통 발견되는 상향조절된 염증 매개체의 분비로 이어진다(Wang YD. et al World J Gastroenterol 2007; 13: 5926-5932, Litinsky I et al. Cytokine. 2006 Jan 33:106-10).
염증유발 경로의 활성을 조절하는 세포 시그널링 이벤트에서 중추적인 역할을 하는 것 외에, 키나제 효소는 또한 현재 DNA 통합성의 유지(Shilo, Y. Nature Reviews Cancer, 2003, 3:155-168) 및 세포 분열의 복잡한 과정의 조정(coordination)을 비롯해 일정 범위의 세포 기능의 활성을 조절하는 것으로도 알려졌다. 실제로, 특정 키나제 저해제 (소위 "올라하스키 키나제(Olaharsky kinase)")는 시험관내에서 소핵 형성의 빈도를 변경하는 것으로 밝혀졌다(Olaharski, A. J. et al., PLoS Comput. Biol., 2009, 5(7), e1000446; doi: 10.1371/journal.pcbi. 1000446). 소핵 형성은 유사분열 과정의 붕괴에 연루되거나 연계되어 있고, 따라서 바람직하지 않다. 글리코겐 신타제 키나제 3α(GSK3α)의 저해는 소핵 형성을 촉진하는 키나제 저해제의 가능성을 증가시키는 특히 중요한 인자인 것으로 확인되었다. 최근에, RNAi로의 키나제 GSK3β의 저해가 또한 소핵 형성을 촉진하는 것으로 보고되었다(Tighe, A. et al., BMC Cell Biology, 2007, 8:34).
분자의 용량 최적화 및/또는 투여 경로의 변경에 의해 GSK3α 같은 올라하스키 키나제의 부작용을 약화시키는 것이 가능할 수 있지만, GSK3α 같은 올라하스키 키나제를 낮은 수준으로 억제하거나 미미한 수준으로 억제하고/하거나, 유사분열 과정의 붕괴를 낮은 수준으로 유도하거나 미미한 수준으로 유도하는 치료적으로 유용한 분자를 동정하는 것이 훨씬 유리할 수 있다.
우레아 유도체를 비롯하여 다양한 화합물들이 하나 이상의 키나제를 저해한다고 기재되었다. 이러한 화합물의 예는 WO 99/23091, WO 00/041698, WO 00/043384, WO 00/055139, WO 01/36403, WO 01/4115, WO 02/083628, WO 02/083642, WO 02/092576, WO 02/096876, WO 2003/005999, WO 2003/068223, WO 2003/068228, WO 2003/072569, WO 2004/014870, WO 2004/113352, WO 2005/005396, WO 2005/018624, WO 2005/023761, WO 2005/044825, WO 2006/015775, WO 2006/043090, WO 2007/004749, WO 2007/053394, WO 2013/050756 , WO 2013/050757 , WO 2014/027209 , WO 2014/033446 , WO 2014/033447 , WO 2014/033448 , WO 2014/033449 , WO 2014/076484, WO 2014/140582 WO 2014/162121 , WO 2014/162122, WO 2014/162126, WO 2015/092423, WO 2015/121444, WO 2015/121660 WO 2016/051187 및 WO 2016/051188에서 찾을 수 있다. 추가 예는 공개된 다음 문헌들에서 확인할 수 있다:
- Curr. Opin. Drug Devel. (2004, 7(5), 600-616);
- J. Med. Chem. (2007, 50, 4016-4026; 2009, 52, 3881-3891; 2010, 53, 5639-5655; 및 2016, 59, 1727-1746 );
- Bioorg. Med. Chem. Lett. (2007, 17, 354-357; 2008, 18, 3251-3255; 2009, 19, 2386-2391; 및 2010, 20, 4819-4824);
- Curr. Top. Med. Chem. (2008, 8, 1452-1467);
- Bioorg. Med. Chem. (2010, 18, 5738-5748);
- Eur. J. Pharmacol. (2010, 632, 93-102);
- J. Chem. Inf. Model. (2011, 51, 115-129);
- Br. J. Pharmacol. (2015, 172, 3805-3816 ); 및
- Inflamm. Bowel Dis. (2016, 22, 1306-1315 ).
그럼에도 불구하고 염증 치료에 적합한 새로운 키나제 저해제, 특히 대체 p38 MAP 키나제 저해제를 확인하고 개발할 필요가 있다. 특히 현재 이용 가능한 치료법보다 개선된 치료 잠재성을 갖거나, 특히, 우수한 치료 지표 (예를 들어, 적어도 동등한 효능을 갖고, 하나 이상의 측면에서 기존 약제보다 관련 치료 용량에서 덜 독성인 저해제)를 나타내는 상기의 저해제도 또한 필요하다.
놀랍게도, 본 발명자들은 특정의 아닐린-치환된 디아릴우레아가 하나 이상의 p38 MAP 키나제, Syk 및 Src 패밀리 키나제를 저해하고 따라서 우수한 항염증 특성을 보유한다는 것을 발견했다.
따라서, 본 발명의 제1 측면에 따라, 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체 (이 화합물은 이후 "본 발명의 화합물"로서 칭해질 수 있다)이 제공된다:
Figure 112018100721576-pct00001
상기 식에서,
T는
Figure 112018100721576-pct00002
또는
Figure 112018100721576-pct00003
를 나타내고;
W는 O, S 또는 NCH3을 나타내고;
V는 N 또는 CR1을 나타내고;
R1은 각각 할로, 하이드록시 및 C1-2 알콕시로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알콕시, C1-3 알킬, C2-3 알케닐, C2-3 알키닐을 나타내거나, 또는 R1은 H를 나타내고;
R2는 -NRA1S(O)2RB1, -S(O)1- 2RB2, -P(O)RB3RB4, -C(O)NRA2RA3 또는 -CH2NRA4C(O)RA5를 나타내고;
RA1 내지 RA5는 독립적으로 H, 또는 할로, 하이드록시, NRCRD 및 C1-2 알콕시로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된 C1 -3 알킬을 나타내거나, 또는 RA2 및 RA3은 함께 -O-, -S(O)q- 또는 -N(RE)-에 의해 C2와 C3 사이가 차단된 C4-5 n-알킬렌 또는 C3-6 n-알킬렌을 나타내고;
RB1 내지 RB4는 독립적으로 각각 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알킬 또는 C3-6 사이클로알킬을 나타내고;
RC 및 RD는 독립적으로 H, 또는 하이드록실 또는 C1-2 알콕시에 의해 임의로 치환된 C1-3 알킬을 나타내거나, 또는 RC 및 RD는 함께 결합하여 임의로 -O-, -S(O)q- 또는 -N(RE)-에 의해 C2와 C3 사이가 차단된 C4-6 알킬렌을 형성하고;
RE는 H 또는 메틸을 나타내고;
q는 0, 1 또는 2를 나타내고;
R3은 각각 하이드록실, C1-2 알콕시 또는 할로에 의해 임의로 치환된 C2-7 알킬, C2-7 알케닐, C2-7 알키닐 또는 C3-7 사이클로알킬을 나타내거나, 또는 R3은 모르폴리닐 또는 트리메틸실릴을 나타내고;
A는 CH 또는 N을 나타내고;
R4는 각각 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알콕시, C3-5 사이클로알콕시, 또는 C1-3 알킬을 나타내거나, 또는 R4는 에티닐, 시아노, S(O)2CH3, 할로 또는 H를 나타내고;
Q는 O, S(O)p, SO2N(R6) 또는 C(O)N(R6)을 나타내고;
n은 1, 2 또는 3을 나타내고;
p는 0, 1 또는 2를 나타내고;
R5a 및 R5b는 독립적으로 H, 메틸 또는 할로를 나타내거나, 또는 R5a 및 R5b는 함께 C2-6 n-알킬렌을 나타내고;
n이 1을 나타내면 Z는 O, S 또는 NR7을 나타내거나, 또는
n이 2 또는 3을 나타내면 Z는 다음 중 하나를 나타내고:
각 경우 O-원자, 또는
하나의 경우 S-원자 또는 NR7 및 각각의 다른 경우에 대해 O-원자;
R6 및 R7은 독립적으로 H 또는 메틸을 나타내고;
G는 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H 또는 카복실산 등가물을 나타내고;
r은 0을 나타내거나, 또는 Het1이 환 헤테로원자를 통해 (CH2)r에 부착된 경우, r은 대안적으로 1을 나타낼 수 있고;
Het1은
N, O 및 S로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 가지는 완전 방향족인 5- 또는 6-원 헤테로사이클릭 그룹 또는
완전 포화 또는 부분 불포화되고 모노사이클릭이거나, 융합 또는 브릿지 바이사이클릭인 N, O 및 S로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 가지는 4- 내지 7-원 헤테로사이클릭 그룹을 나타내고,
여기서 Het1은 C1-3 알킬, C1-3 알콕시, 할로, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된다.
언급할 수 있는 약학적으로 허용가능한 염은 산 부가염과 염기 부가염을 포함한다. 이러한 염은 통상적인 방법, 예를 들어 화학식 I 화합물의 자유산 또는 자유 염기 형태를 적절한 산 또는 염기의 하나 이상의 등가물과, 임의로 용매 또는 염이 녹지않는 매질 중에서 반응시킨 후, 용매 또는 매질을 표준 방법(예를 들어, 진공, 동결건조 또는 여과)으로 제거하여 형성할 수 있다. 염은 또한, 예를 들어 적합한 이온교환수지를 사용하여 염 형태의 화학식 I 화합물의 짝이온을 다른 짝이온으로 교환하여 제조할 수 있다.
약학적으로 허용가능한 염의 예는 무기산과 유기산에서 유도된 산 부가염과, 금속에서 유도된 염을 포함한다.
의심의 여지를 피하기 위해, 화학식 I의 화합물은 이들의 자연 또는 비자연 동위원소 형태로 특정된 원자를 함유할 수 있다. 이 측면에서, 언급할 수 있는 본 발명의 구체예는 다음과 같은 것들을 포함한다:
(a) 화합물의 임의의 원자에 대해 동위원소적으로 풍부하지 않거나 표지되지 않은 화학식 I의 화합물; 및
(b) 화합물의 하나 이상의 원자에 대해 동위원소적으로 풍부하거나 표지된 화학식 I의 화합물.
본원에서 "동위원소 유도체"란 상기 2개 구체예 중 두 번째에 관한 것이다. 본 발명의 특정 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 하나 이상의 안정한 동위원소로 (화합물의 하나 이상의 원자에 대해) 동위원소적으로 풍부하거나 표지된다. 따라서, 언급할 수 있는 본 발명의 화합물은, 예를 들어 중수소 등과 같은 하나 이상의 원자로 동위원소적으로 풍부하거나 표지된 화학식 I의 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물은 호변이성체화 현상(tautomerism)을 나타낼 수 있다. 모든 호변이성체 형태와 그의 혼합물은 본 발명의 범위 내에 포함된다.
달리 특정되지 않는 한, 본원에서 정의된 알킬 그룹과 알콕시 그룹은 직쇄형이거나, 충분한 수(즉, 최소 3)의 탄소원자가 있으면 분지형일 수 있다. 언급할 수 있는 특정한 알킬 그룹은, 예를 들어 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, 부틸, n-부틸 및 tert-부틸을 포함한다. 언급할 수 있는 특정한 알콕시 그룹은, 예를 들어 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 부톡시를 포함한다.
달리 특정되지 않는 한, 본원에서 정의된 사이클로알킬 그룹은 충분한 수 (즉, 최소 4개)의 탄소 원자가 있는 경우 부분 사이클릭/비사이클릭일 수 있다.
달리 특정되지 않는 한, 본원에서 정의된 알킬렌 그룹은 직쇄형이거나, 충분한 수(즉, 최소 2)의 탄소원자가 있으면 분지형일 수 있다. 본 발명의 특정 구체예에서, 알킬렌은 직쇄형 알킬렌을 지칭한다.
의심의 여지를 피하기 위해, Het1로 나타내는 헤테로사이클릭 그룹 상에 존재할 수 있는 옥소 치환체는 원자가가 허용되는 경우 환 내의 C-, N- 및/또는 S-원자 (이에 의해 케토, N-옥사이드, S(O) 및/또는 S(O)2 그룹을 형성함)를 비롯해 헤테로사이클릭 환의 임의의 적당한 원자에 부착될 수 있다.
언급될 수 있는 Het1 그룹은 다음을 포함하며, 여기서 지정된 부착 위치는 화학식 I의 화합물: 푸라닐 (예: 2 및 4 또는, 특히 2 및 5 위치에 부착된 푸라닐), 옥사디아졸릴 (예: 3 및 5 위치에 부착된 1,2,4-옥사디아졸릴과 같은 옥사디아졸릴), 피라졸릴 (예: 1 및 4 위치에 부착된 피라졸릴 또는 3-메틸피라졸릴과 같은 피라졸릴), 피리다지닐 (예: 3 및 6 위치에 부착된 피리다지닐), 피롤릴 (예컨대, 2 및 5 위치에 부착된 1-메틸피롤릴과 같은 피롤릴), 테트라하이드로푸라닐 (예: 2 및 4 또는, 특히 2 및 5 위치에 부착된 테트라하이드로푸라닐) 및 티에닐 (예: 2 및 4 또는 2 및 5 위치에 부착된 티에닐)의 C(R5a)(R5b) 및 -CO2H 그룹에 대한 것이다.
달리 특정되지 않는 한, "할로"란 용어는 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도, 구체적으로 플로오로, 클로로 또는 브로모, 특히 플루오로 또는 클로로를 지칭한다.
그룹 G와 관련하여 본원에서 사용된 용어 "카복실산 등가물"은 문헌 [Lassalas et al., J. Med. Chem. (2016), 59, 3183-3203, Ballatore et al., Chem. Med. Chem. (2013), 8(3), 385-395 및 Boyd et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. (2015), 25, 1990-1994]에 개시되어 있는 것과 같은 당업자들에세 공지된 카복실산 등가물에 대한 것을 포함하며, 상기 문헌의 개시 내용은 본 명세서에 참고로 인용되어 있다.
따라서, G가 나타낼 수 있는 카복실산 등가물은 다음을 포함한다:
(a) 포스폰 또는 포스핀산 부분, 또는 그의 염, 예컨대 -P(O)(OH)2 또는
-P(O)(H)(OH);
(b) 설폰 또는 설핀산 부분, 또는 그의 염, 예컨대 -S(O)2(OH) 또는 -S(O)(OH);
(c) 하이드록삼산, 또는 그의 염, 예컨대 -C(O)N(H)OH 또는 -N(C(O)CH3)OH;
(d) 하이드록삼산 에스테르, 예컨대 -C(O)N(H)OCH3 또는 -O-N(H)-C(O)CH3;
(e) 설폰아미드, 예컨대 -S(O)2NH2 또는 -N(H)-S(O)2CH3;
(f) 아실설폰아미드, 예컨대 -C(O)N(H)-S(O)2CH3, 또는 아실설파미드, 예컨대
-C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2 또는 -C(O)N(H)-S(O)2NH2;
(g) 아실우레아, 예컨대 -N(H)C(O)N(H)-C(O)CH3;
(h) 설포닐우레아, 예컨대 -N(H)C(O)N(H)-S(O)2CH3;
(i) 전자-부족 페놀 부분, 예컨대 2,6-디플루오로페놀 (예를 들어, 페닐 환상에서 3- 또는 4-위치를 통해 분자의 나머지 부분에 결합);
(j) -S(O)0-2-페놀 (예를 들어, 이 경우 페놀 부분은 페닐 환의 2-위치를 통해 S-원자에 결합);
(k) -C(H)(OH)CF3 또는 -C(O)CF3 (또는 그의 수화물 형태, -C(OH)2CF3);
(l) 3- 또는 4-하이드록시퀴놀린-2-온;
(m) 테트라졸;
(n) 완전 방향족, 부분 불포화 또는 완전 포화된, N, O 및 S로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 가지는 하이드록시-, 티오- 또는 옥소-치환된, 4- 또는 5-원 헤테로사이클, 예를 들어 티아졸리딘디온, 옥사졸리딘디온, 티아졸리디논, 옥사졸리디논, 티아디아졸리논, 옥사디아졸-5(4H)-티온, 옥사티아디아졸-2-옥사이드, 또는 하이드록시-치환된 이속사졸, 이소티아졸 또는 옥사디아졸로부터 선택되는 하이드록시- 또는 옥소-치환된 헤테로사이클릭 그룹; 또는
(o) 카보사이클릭 산, 예컨대 테트론산, 테트람산, 사이클로펜탄-1,3-디온, 사이클로펜탄-1,2-디온, 및 스쿠아릭산 (후자의 그룹은 -N(H)- 부분을 통해 분자의 나머지 부분에 부착됨).
예를 들어, 카복실산 등가물은 상기 (a) 내지 (l)에서 언급된 부분 또는 다음으로부터 선택되는 사이클릭 부분 또는 이들의 호변이성체 중 임의의 것일 수 있다:
Figure 112018100721576-pct00004
상기 식에서, X1은 O 또는 S를 나타내고, X2는 O 또는 NH를 나타낸다.
언급될 수 있는 특정 카복실산 등가물로는 테트라졸릴, 아실설폰아미드, 예컨대 -C(O)N(H)-S(O)2CH3, 아실설파미드, 예컨대 -C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2, 하이드록시-치환된 이속사졸, 예컨대:
Figure 112018100721576-pct00005
또는
Figure 112018100721576-pct00006
또는
그의 호변이성체, 예컨대:
Figure 112018100721576-pct00007
또는
Figure 112018100721576-pct00008
또는 5-하이드록시-치환된 1,2,4-옥사디아졸, 예컨대:
Figure 112018100721576-pct00009
또는 그의 호변이성체, 예컨대
Figure 112018100721576-pct00010
또는
Figure 112018100721576-pct00011
이 포함된다.
언급될 수 있는 본 발명의 구체예는
(a) T가
Figure 112018100721576-pct00012
를 나타내고;
(b) R4는 각각 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알콕시 또는 C1-3 알킬을 나타내거나, 또는 R4는 에티닐, 시아노, S(O)2CH3, 할로 또는 H를 나타내고;
(c) R5a 및 R5b는 독립적으로 H, 메틸 또는 할로를 나타내고;
(d) Z는 각 경우 O-원자를 나타내고;
(e) G는 -C(O)2H를 나타내는 것을 포함한다.
이들 구체예에서, 화학식 I의 화합물은 화학식 Ix의 화합물로서 나타내어질 수 있다:
Figure 112018100721576-pct00013
상기 식에서,
R1 내지 R3, A 및 Q는 상기 정의된 바와 같고;
R4는 각각 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알콕시 또는 C1-3 알킬을 나타내거나, 또는 R4는 에티닐, 시아노, S(O)2CH3, 할로 또는 H를 나타내고;
R5a 및 R5b는 독립적으로 H, 메틸 또는 할로를 나타낸다.
언급될 수 있는 본 발명의 다른 구체예는 하나 이상의 하기 정의들이 화학식 I의 화합물에 적용되는 것을 포함한다:
(a1) T가
Figure 112018100721576-pct00014
를 나타내고;
(b1) R4는 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C3-5 사이클로알콕시를 나타내고;
(c1) R5a 및 R5b는 함께 C2-6 n-알킬렌을 나타내고;
(d1) n이 2 또는 3을 나타내면 Z는 하나의 경우 S-원자 또는 NR7 및 각각의 다른 경우에 대해 O-원자를 나타내고;
(e1) G는 -[(CH2)r-Het1]-C(O)2H 또는 카복실산 등가물을 나타낸다.
특히, 언급될 수 있는 본 발명의 구체예는 상기 (a1) 내지 (e1) 중 어느 1개 또는 어느 2개, 어느 3개, 어느 4개 또는 전부가 적용되는 것을 포함한다.
언급될 수 있는 본 발명의 구체예는 하나 이상의 하기 정의들이 화학식 I 또는 Ix의 화합물에 적용되는 것을 포함한다:
(a) W는 O를 나타내고;
(b) V는 N을 나타내고;
(c) R1은 중수소화 C1-2 알콕시 (예를 들어 OCD3) 또는, 특히, C1-2 알콕시 또는 H를 나타내고;
(d) R2는 -P(O)RB3RB4, -S(O)2RB2 또는, 특히, -NRA1S(O)2RB1 (예를 들어 -NHS(O)2RB1), -S(O)RB2 또는 -C(O)NHRA2를 나타내고;
(e) RA1 내지 RA5는 독립적으로 H 또는 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 메틸을 나타내고;
(f) RB1 내지 RB4는 독립적으로 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-2 알킬을 나타내고;
(g) R3은 C3-5 알킬, C3-6 알키닐 또는 트리메틸실릴을 나타내고;
(h) A는 N 또는, 특히, CH를 나타내고;
(i) R4는 C3-4 사이클로알콕시 또는, 특히, 에티닐, 시아노, 할로, 각각 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-2 알콕시 또는 C1-2 알킬을 나타내고;
(j) Q는 S, SO2N(R6) 또는, 특히, C(O)NH, S(O), S(O)2 또는 O를 나타내고;
(k) n은 1 또는, 특히, 2 또는 3을 나타내고;
(l) p는 0 또는, 특히, 1 또는 2를 나타내고;
(m) R5a 및 R5b는 함께 -(CH2)2-4-를 나타내거나, 또는, 특히 R5a 및 R5b는 독립적으로 H 또는 메틸을 나타내고;
(n) Z는 O 원자 (각 경우)를 나타내거나, 또는, n이 2 또는 3을 나타내는 경우, Z는 대안적으로 하나의 경우 S-원자 및 각각의 다른 경우에 대해 O-원자 (예를 들어 각 경우, Z는 O 원자)를 나타낼 수 있고;
(o) G는 카복실산 등가물 (예를 들어 상기 정의된 바와 같음), -(CH2)-Het1-C(O)2H, -Het1-C(O)2H 또는, 특히, -C(O)2H를 나타내고;
(p) Het1은
N, O 및 S로부터 선택되는 1 내지 3개의 헤테로원자를 가지는 완전 방향족인 5- 또는 6-원 헤테로사이클릭 그룹 (예를 들어 푸라닐, 옥사디아졸릴 (예컨대1,2,4-옥사디아졸릴), 피라졸릴, 피리다지닐, 피롤릴 또는 티에닐) 또는
완전 포화 또는 부분 불포화이고 모노사이클릭이거나, 융합 또는 브릿지된 바이사이클릭이며 N, O 및 S로부터 선택되는 1 또는 2개의 헤테로원자를 가지는 5- 또는 6-원 헤테로사이클릭 그룹 (예를 들어 테트라하이드로푸라닐)을 나타내고,
여기서 Het1은 C1-2 알킬, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된다 (예를 들어 Het1은 하나 이상의 메틸 그룹에 의해 임의로 치환된다).
언급될 수 있는 본 발명의 구체예는 화학식 I 또는 Ix의 화합물이 화학식 Ia의 화합물인 것을 포함한다:
Figure 112018100721576-pct00015
상기 식에서, R1 내지 R4, A, Q 및 n은 상기 정의된 바와 같다.
언급될 수 있는 본 발명의 구체예는 하나 이상의 하기 정의들이 화학식 I, Ix 및 Ia의 화합물에 적용되는 것을 포함한다:
(a) R1은 중수소화 메톡시 (예를 들어 OCD3) 또는, 특히, 메톡시를 나타내고;
(b) R2는 -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -S(O)1- 2CH3, -S(O)1- 2CH2CH3, -P(O)(CH3)2, -N(CH3)S(O)2CH3, -NHS(O)2CH2CH3 또는 -NHS(O)2CH3 (예를 들어 -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -S(O)CH3 또는, 특히, -NHS(O)2CH3)을 나타내고;
(c) R3은 트리메틸실릴 또는, 특히, -C(CH3)2-R을 나타내고, 여기서, R은 에티닐 또는, 특히, 메틸을 나타내고 (예를 들어 R3은 tert-부틸을 나타냄);
(d) A는 N 또는, 특히, CH를 나타내고;
(e) R4는 사이클로프로폭시, 또는 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 메톡시 (예를 들어 하나 이상 (예를 들어 2 또는 3개)의 플루오로 치환체에 의해 임의로 치환된 메톡시)를 나타내거나, 또는, 특히, R4는 메톡시를 나타내고;
(f) Q는 S 또는, 특히, C(O)NH, S(O), S(O)2 또는 O를 나타내고;
(g) n은 3 또는, 특히, 2를 나타내고;
(h) R5a 및 R5b는 함께 -(CH2)2-를 나타내거나 또는, 특히, R5a 및 R5b는 독립적으로 H 또는 메틸을 나타내고 (예를 들어 R5a는 H를 나타내고 R5b는 메틸을 나타내거나, R5a 및 R5b는 둘 다 메틸을 나타내거나 또는, 특히, R5a 및 R5b는 둘 다 H를 나타냄);
(i) G는 -CO2H 또는 -Het1-CO2H를 나타내고, 여기서 -Het1-CO2H 부분은 다음에서 선택되는 구조 단편이거나:
Figure 112018100721576-pct00016
Figure 112018100721576-pct00017
및
Figure 112018100721576-pct00018
또는 G는 테트라졸릴, -C(O)N(H)-S(O)2CH3, -C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2,
Figure 112018100721576-pct00019
및
Figure 112018100721576-pct00020
, 또는 마지막 세 구조의 호변이성체로부터 선택되는 카복실산 등가물을 나타낸다.
추가로 언급될 수 있는 본 발명의 구체예는 화학식 I, Ix 또는 Ia의 화합물이 화학식 Ib의 화합물인 것을 포함한다:
Figure 112018100721576-pct00021
상기 식에서, R2, A, Q 및 n은 상기 정의된 바와 같다.
언급될 수 있는 본 발명의 구체예는 하나 이상의 하기 정의들이 화학식 I, Ix, Ia 및 Ib의 화합물에 적용되는 것을 포함한다:
(a) R2는 -NHS(O)2CH3을 나타내고;
(d) A는 CH를 나타내고;
(e) Q는 C(O)NH, S(O), S(O)2 또는, 특히, O를 나타내고;
(g) n은 2를 나타낸다.
이와 관련하여 언급될 수 있는 본 발명의 특정 구체예는 화학식 I의 화합물이 화학식 Iy의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체인 것을 포함한다:
Figure 112018100721576-pct00022
언급할 수 있는 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 다른 화합물은 후술하는 실시예들의 화합물을 포함한다. 따라서, 언급할 수 있는 본 발명의 구체예는 화학식 I, Ia 또는 Ib의 화합물이 다음 목록으로부터 선택되는 화합물들을 포함한다:
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤즈아미도)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설포닐)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설피닐)에톡시)에톡시)아세트산;
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2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설피닐)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설포닐)에톡시)에톡시)아세트산;
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6-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)피리다진-3-카복실산;
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-1,2,4-옥사디아졸-3-카복실산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-사이클로프로폭시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)사이클로프로판-1-카복실산;
4-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-2-카복실산;
1-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-3-메틸-1H-피라졸-4-카복실산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-에틸페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
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2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-N-(메틸설포닐)아세트아미드;
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2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설포닐)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(디메틸포스포릴)-2-메톡시페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(N-메틸메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)푸란-3-카복실산;
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)테트라하이드로푸란-3-카복실산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(에틸설포닐)-2-메톡시페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(에틸설폰아미도)-2-메톡시페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)이속사졸-3-일)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
N-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(3-(4-((2-((3-메톡시-5-(2-(2-((5-옥소-2,5-디하이드로이속사졸-3-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)-메탄설폰아미드;
2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)티오)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산, (R)-이성체;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산, (S)-이성체;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-2-메틸프로판산;
1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)-1H-피라졸-4-카복실산;
N-(3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-((1H-테트라졸-5-일)메톡시)에톡시)에톡시)-5-메톡시페닐)아미노)-피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-5-(tert-부틸)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드;
2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-N-(N,N-디메틸설파모일)아세트아미드;
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-2-카복실산;
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-3-카복실산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(디플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-에티닐페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
N-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(3-(4-((2-((3-메톡시-5-(2-(2-((5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)메탄설폰아미드;
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(트리플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
N-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(3-(4-((2-((3-메톡시-5-(2-(2-((3-옥소-2,3-디하이드로이속사졸-5-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)-메탄설폰아미드; 및
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-1-메틸-1H-피롤-2-카복실산,
이들의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체.
언급될 수 있는 본 발명의 구체예는 화학식 I, Ix, Ia 또는 Ib의 화합물이 상기 정의된 바와 같고,
(a)는 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산 , 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체이거나, 또는
(b)는 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산 , 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체가 아닌 것을 포함한다.
화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물의 염의 예는 모든 약학적으로 허용가능한 염, 예컨대 비제한적으로 강한 무기산의 산 부가염, 예컨대 HCl, H2SO4 및 HBr 염 (예컨대 HCl 또는 HBr 염), 및 강한 유기산, 예컨대 메탄설폰산의 부가염을 포함한다.
언급할 수 있는 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물로는 염산염, 마그네슘염, 칼륨염 및 나트륨염을 들 수 있다.
본원에서 본 발명의 화합물(화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물)이란 내용상 특정하게 달리 지시되지 않는 한, 화합물과 상기 화합물의 약학적으로 허용가능한 모든 염, 용매화물 및/또는 호변이성체를 포함한다. 이 측면에서, 언급할 수 있는 용매화물은 수화물을 포함한다.
본 발명의 화합물(화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물)은 p38 MAP 키나제 저해제(특히 알파 아형)이고, 따라서 특히 염증성 질환의 치료를 위한 의약(medicine)으로 유용하다. 그러므로, 언급할 수 있는 본 발명의 다른 측면은 다음을 포함한다:
(a) 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하여 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체를 포함하는 약학 제제.
(b) (A) 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 및
(B) 다른 치료제를 포함하고,
여기서 성분 (A)와 (B) 각각은 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하여 제제화된 조합물.
이러한 본 발명의 측면에서 조합물은 단일(조합) 약학 제제 또는 요소들의 키트일 수 있다.
따라서, 이러한 본 발명의 측면은 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 및 다른 치료제를 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하여 포함하는 약학 제제를 포함한다(이 제제는 이하에서 "조합 제제"라 칭한다).
또한, 이것은 다음 성분들을 포함하는 요소들의 키트를 포함한다:
(i) 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하여, 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체를 포함하는 약학 제제; 및
(ii) 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하여 다른 치료제를 포함하는 약학 제제
(여기서 성분 (i)과 (ii)는 각각 다른 성분들과 함께 투여하는데 적합한 형태로 제공된다).
따라서, 요소들의 키트 중 성분 (i)은 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 상기한 성분 (A)이다. 마찬가지로, 성분 (ii)는 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합된 상기한 성분 (B)이다.
(c) 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체를 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하는 단계를 포함하는, 상기한 측면 (a)의 약학 제제의 제조방법.
언급할 수 있는 본 발명의 이러한 측면의 구체예는 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체가 국소적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체인 것들을 포함한다(및/또는 여기서 방법은 국소적 약학 제제, 즉 국소 투여에 적합한 약학 제제를 제조하는 것이다).
(d) 의약(또는 약제(medicament) 또는 약품(pharmaceutical))으로 사용하기 위한 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체.
(e) 염증성 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한, 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는 본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 약학 제제 또는 조합물.
(f) 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는
본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 약학 제제 또는 조합물의 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약제를 제조하기 위한 용도.
(g) 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는
본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 약학 제제 또는 조합물의 유효량을 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 염증성 질환을 치료 또는 예방하는 방법.
(h) 앞서 정의한 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는
본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 약학 제제 또는 조합물의 유효량을 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 코르티코스테로이드의 항염증 효과에 대상을 민감화시키는 방법.
언급할 수 있는 본 발명의 이러한 측면의 구체예는 대상이 코르티코스테로이드의 항염증 효과에 불응성이된 것을 포함한다.
본원에서 "염증성 질환의 예방"에 대한 언급은 이전에 그러한 질환으로 고통받은 대상 (예를 들어, 이전에 그 질환에 대한 치료, 예를 들어 상기 (g)에 기재된 방법에 따른 치료를 받은 대상)에서 염증성 질환의 재발을 방지 (또는 그 가능성을 감소)하는 것에 대한 언급을 포함한다.
따라서 언급될 수 있는 본 발명의 또 다른 측면은 다음을 포함한다.
(i) 이전에 염증성 질환에 대한 치료 (예를 들어, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는 본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 바와 같은 약학 제제 또는 조합물로의 치료)를 받은 대상에서 염증성 질환의 재발 가능성을 감소시키는 데에 사용하기 위한, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는 본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 바와 같은 약학 제제 또는 조합물.
(j) 이전에 염증성 질환에 대한 치료 (예를 들어, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는 본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 바와 같은 약학 제제 또는 조합물로의 치료)를 받은 대상에서 염증성 질환의 재발 가능성 감소용 약제를 제조하기 위한, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는 본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 바와 같은 약학 제제 또는 조합물의 용도.
(k) 상기 정의된 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는 본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 바와 같은 약학 제제 또는 조합물의 치료적 유효량을 이전에 염증성 질환에 대한 치료 (예를 들어, 상기 정의된 바와 같은 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 또는 본 발명의 측면 (a) 또는 (b)와 관련하여 정의된 바와 같은 약학 제제 또는 조합물로의 치료)를 받은 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상에서 염증성 질환의 재발 가능성을 감소시키는 방법.
제제
상기한 측면 (a) 및 (b)와 관련하여, 언급할 수 있는 희석제 및 담체는 비경구, 경구, 국소, 점막 및 직장 투여에 적합한 것들을 포함한다.
상기한 측면 (a) 및 (b)의 약학 제제 및 조합물은 예를 들어 비경구, 피하, 근육내, 정맥내, 관절내, 초자체내(intravitreous), 눈주위, 교후부(retrobulbar), 결막하, 서브테논(sub-Tenon), 국소 안내 또는 관절주위 투여를 위한, 특히 액체 용액, 에멀젼 또는 현탁액의 형태; 경구 투여를 위한, 특히 정제 또는 캡슐 형태, 및 특별히 결장 표적 약물 방출의 제공을 목표로 하는 관련 기술(Patel, M. M. Expert Opin. Drug Deliv. 2011, 8 (10), 1247-1258); 국소, 예를 들어 폐 또는 비내 투여를 위한, 특히 분말, 점비액 또는 에어로졸 및 경피 투여의 형태; 국소 안내 투여를 위한, 특히 용액, 에멀젼, 현탁액, 연고, 임플란트/삽입물, 겔, 젤리 또는 리포좀 미립자 제제의 형태(Ghate, D.; Edelhauser, H. F. Expert Opin. Drug Deliv. 2006, 3 (2), 275-287); 안내 투여를 위한, 특히 생분해성 및 비생분해성 임플란트, 리포좀 및 나노입자의 형태(Thrimawithana, T. R. et al. Drug Discov. Today 2011, 16 (5/6), 270-277); 예를 들어, 볼, 설하 또는 질 점막으로의 점막 투여, 및 직장 투여를 위한 좌약제 또는 관장제의 형태로 제조할 수 있다.
상기한 측면 (a) 및 (b)의 약학 제제 및 조합물은 단위 복용량 형태로 편리하게 투여될 수 있으며, 예를 들어, Remington's Pharmaceutical Sciences 17판, Mack Publishing Company, Easton, PA., (1985)에 기술된 바와 같이, 제약 분야에서 잘 알려진 임의 방법으로 제조될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제는 멸균수 또는 염수(saline), 프로필렌 글리콜과 같은 알킬렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리알킬렌 글리콜, 식물성 기원 오일, 수소화된 나프탈렌 등을 부형제로서 함유할 수 있다. 비강내 투여용 제제는 고체일 수 있으며, 부형제, 예를 들어 락토스 또는 덱스트란을 함유할 수 있거나, 점비제 또는 계량 스프레이(metered spray) 형태로 사용하기 위한 수성 또는 유성 용액일 수 있다. 볼 투여의 경우, 전형적인 부형제는 당, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 전호화 녹말(pregelatinated starch) 등을 포함한다.
경구 투여에 적합한 약학 제제 및 조합물은 하나 이상의 생리적으로 적합한 담체 및/또는 부형제를 포함할 수 있으며 고체 또는 액체 형태일 수 있다. 정제 및 캡슐은, 결합제, 예를 들어 시럽, 아카시아, 젤라틴, 솔비톨, 트라가칸트, 또는 폴리-비닐피롤리돈; 락토스, 슈크로스, 옥수수 전분, 칼슘 포스페이트, 솔비톨, 또는 글리신 같은 충전제; 마그네슘 스테아레이트, 탈크, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 실리카 같은 윤활제; 및 소듐 라우릴 설페이트 같은 계면활성제와 함께 제조될 수 있다. 액체 조성물은 일반적인 첨가제, 예컨대 현탁화제, 예를 들어 솔비톨 시럽, 메틸 셀룰로스, 당 시럽, 젤라틴, 카복시메틸-셀룰로스, 또는 식용 지방; 유화제, 예컨대 레시틴, 또는 아카시아; 식물성 오일, 예컨대 아몬드 오일, 코코넛 오일, 대구 간유, 또는 땅콩유; 보존제, 예컨대 부틸레이트화 하이드록시아니솔(BHA) 및 부틸레이트화 하이드록시톨루엔(BHT)을 함유할 수 있다. 액체 조성물은, 예를 들어 젤라틴으로 캡슐화되어 단위 복용량 형태를 제공할 수 있다.
고체 경구 투여 형태는 정제, 투-피스 경질 캡슐(two-piece hard shell capsule) 및 연질 탄성 젤라틴(soft elastic gelatin; SEG) 캡슐을 포함한다. 투-피스 경질 캡슐은, 예를 들어 젤라틴 또는 하이드록실프로필 메틸셀룰로스(HPMC)로 제조할 수 있다.
전형적으로, 건조 쉘 제제는 약 40% 내지 60% w/w 농도의 젤라틴, 약 20% 내지 30% 농도의 가소제(예컨대 글리세린, 솔비톨 또는 프로필렌 글리콜) 및 약 30% 내지 40% 농도의 물을 포함한다. 또한, 보존제, 염료, 유백제(opacifier) 및 향미제 같은 기타 물질도 존재할 수 있다. 액체 충전 물질은 (밀납, 수소화된 피마자유 또는 폴리에틸렌 글리콜 4000과 같은 현탁화제와 함께) 용해, 가용화 또는 분산된 고체 약물, 또는 비히클 또는 미네랄 오일, 식물성 오일, 트리글리세리드, 글리콜, 폴리올 같은 비히클 및 표면활성제 조합 중의 액체 약물을 포함한다.
본 발명의 화합물은 (예를 들어, 폐, 눈 또는 장에) 국소적으로 투여할 수 있다. 따라서, 언급할 수 있는 상기한 측면 (a) 및 (b)의 구체예는 국소 투여에 적합화된 약학 제제 및 조합물을 포함한다. 이러한 제제는 부형제(예를 들어, 보조제, 희석제 및/또는 담체)가 국소적으로 허용가능한 것들을 포함한다.
폐로의 국소 투여는 에어로졸 제제를 사용함으로써 가능해질 수 있다. 전형적으로, 에어로졸 제제는 클로로플루오로카본(CFC) 또는 하이드로플루오로카본(HFC)과 같은 적합한 에어로졸 분사제(propellant)에 현탁 또는 용해된 활성 성분을 포함한다. 적합한 CFC 분사제는 트리클로로모노플루오로메탄(분사제 11), 디클로로테트라플루오로메탄(분사제 114), 및 디클로로디플루오로메탄(분사제 12)을 포함한다. 적합한 HFC 분사제는 테트라플루오로에탄(HFC-134a) 및 헵타플루오로프로판(HFC-227)을 포함한다. 전형적으로, 분사제는 전체 흡입 조성물의 40 내지 99.5 중량%, 예를 들어 40 내지 90 중량%로 포함된다. 제제는 공용매(예를 들어, 에탄올) 및 계면활성제(예를 들어, 레시틴, 소르비탄 트리올리에이트 등)를 포함하는 부형제를 포함할 수 있다. 기타 가능한 부형제는 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 글리세린 등을 포함한다. 에어로졸 제제는 용기에 포장되거나 적정 투여량이 계량 밸브에 의해 전달된다(예를 들어, Bespack, Valois 또는 3M, 또는 경우에 따라 Aptar, Coster 또는 Vari에 의해 공급).
또한, 폐로의 국소 투여는 수용액 또는 현탁제와 같이 무압 제제를 사용하여 이루어질 수 있다. 이는, 예를 들어 손에 쥘 수 있고 휴대가능하거나 가정용 또는 병원용(즉, 고정형)의 네뷸라이저(nebuliser)에 의해 투여될 수 있다. 제제는 부형제, 예컨대 물, 완충제, 삼투압 조절제, pH 조절제, 계면활성제 및 공용매를 포함할 수 있다. 현탁액과 에어로졸 제제(가압 또는 무압과 무관)는 전형적으로 본 발명의 화합물을, 예를 들어 0.5-10 μm, 예를 들어 약 1-5 μm의 D50을 갖는 미분 형태로 함유한다. 입자크기 분포는 D10, D50 및 D90값을 사용하여 나타낼 수 있다. 입자크기 분포의 D50 중간값은 분포를 절반으로 나눈 입자크기(마이크론)로 정의된다. 레이저 회절로부터 유도된 측정은 부피 분포로서 보다 정확하게 기술되며, 결론적으로 이 방법을 사용하여 얻어진 D50값은 더욱 의미있는 Dv50값(부피 분포의 중간값)으로 지칭된다. 본원에서 사용된 Dv값은 레이저 회절을 사용하여 측정된 입자크기 분포를 나타낸다. 유사하게, 레이저 회절과 관련하여 사용된 D10 및 D90값들이 Dv10과 Dv90값들을 의미하기 위해 취해지며, 각각 10%의 분포가 D10값 아래에 있고 90%의 분포가 D90값 아래에 있는 분자크기를 나타낸다.
폐로의 국소 투여는 또한 건조 분말 제제를 사용하여 이루어질 수 있다. 건조 분말 제제는 미분화된 형태, 전형적으로 1-10 μm의 질량 평균 공기역학적 직경 (MMAD) 또는 0.5-10 μm, 예를 들어 약 1-5 μm의 D50을 갖는 본 발명의 화합물을 함유할 것이다. 미분화된 형태의 본 발명의 화합물의 분말은 마이크로화 방법 또는 유사 크기 분쇄 방법에 의해 제조할 수 있다. 마이크로화는 제트밀, 예컨대 Hosokawa Alpine 제품을 사용하여 수행할 수 있다. 생성된 입자크기 분포는 레이저 회절을 사용하여 측정할 수 있다(예를 들어, Malvern Mastersizer 2000S 장치 사용). 전형적으로, 제제는 통상 대형 입자크기, 예를 들어 MMAD가 50 μm 이상, 예를 들어 100 μm 이상이거나 D50이 40-150 μm인 국소적으로 허용가능한 희석제, 예컨대 락토스, 글루코스 또는 만니톨(바람직하게 락토스)를 함유할 것이다. 본원에서 사용된 "락토스"라는 용어는 락토스를 함유하는 성분, 예를 들어 α-락토스 1수화물, β-락토스 1수화물, α-락토스 무수물, β-락토스 무수물 및 무정형 락토스를 지칭한다. 락토스 성분을 마이크로화, 체질, 밀링, 압축, 응집 또는 분무건조로 가공할 수 있다. 상업적으로 입수가능한 다양한 형태의 락토스도 포함되며, 예를 들어 Lactohale® (흡입 등급 락토스; DFE Pharma), InhaLac®70 (건조 분말 흡입제용 체질 락토스; Meggle), Pharmatose® (DFE Pharma) 및 Respitose® (체질된 흡입 등급 락토스; DFE Pharma) 제품이 있다. 일 구체예에서, 락토스 성분은 α-락토스 1수화물, α-락토스 무수물 및 무정형 락토스로 구성되는 군에서 선택된다. 바람직하게, 락토스는 α-락토스 1수화물이다.
건조 분말 제제는 또한 다른 부형제, 예컨대 소듐 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트 또는 마그네슘 스테아레이트를 함유할 수도 있다.
건조 분말 제제는 전형적으로 건조 분말 흡입제(DPI) 장치를 사용하여 전달된다. 건조 분말 전달 시스템의 예는 SPINHALER, DISKHALER, TURBOHALER, DISKUS 및 CLICKHALER를 포함한다. 건조 분말 전달 시스템의 다른 예는 ECLIPSE, NEXT, ROTAHALER, HANDIHALER, AEROLISER, CYCLOHALER, BREEZHALER/NEOHALER, MONODOSE, FLOWCAPS, TWINCAPS, X-CAPS, TURBOSPIN, ELPENHALER, MIATHALER, TWISTHALER, NOVOLIZER, PRESSAIR, ELLIPTA, ORIEL 건조 분말 흡입기, MICRODOSE, PULVINAL, EASYHALER, ULTRAHALER, TAIFUN, PULMOJET, OMNIHALER, GYROHALER, TAPER, CONIX, XCELOVAIR 및 PROHALER를 포함한다.
일 구체예에서, 본 발명의 화합물은, 예를 들어 AEROLISER 같은 단일 투약 장치 또는 DISKUS 같은 다회 투약 장치에 충전된, 임의로 마그네슘 스테아레이트와 함께 적합한 등급의 락토스를 추가로 포함하는 미분화 건조 분말 제제로 제공된다.
본 발명의 화합물은 또한 예를 들어 수성 또는 유성 용액뿐 아니라 현탁액 및 에멀젼을 포함하는 좌약 또는 관장제의 형태로 직장에 투여될 수 있다. 이러한 조성물은 당업자들에게 공지된 표준 방법에 따라 제조된다. 예를 들어, 좌약은 활성 성분을 통상적인 좌약 베이스, 예컨대 코코아 버터 또는 기타 글리세리드, 예를 들어 Suppocire와 혼합하여 제조할 수 있다. 이 경우, 약물은 실온에서 고체이나 직장 온도에서는 액체여서 직장 내에서 녹아 약물을 방출하는 적합한 비자극성 부형제와 혼합된다. 이러한 물질은 코코아 버터 및 폴리에틸렌 글리콜이다.
일반적으로, 점안제 또는 안연고 형태로 눈에 국소 투여되도록 의도된 조성물의 경우, 저해제의 총량은 약 0.0001 내지 4.0% (w/w) 미만일 것이다.
바람직하게, 국소 안내 투여를 위해, 본 발명에 따라 투여되는 조성물은 용액, 현탁액, 에멀젼 및 다른 투약 형태로 제형화될 것이다. 제형화가 용이할 뿐만 아니라 환자가 감염된 눈에 용액 1 내지 2 방울의 용액을 주입함으로써 이러한 조성물을 용이하게 투여할 수 있다는 점에서 수성 용액이 일반적으로 바람직하다. 그러나, 조성물은 또한 현탁액, 점성 또는 반점성 겔, 또는 다른 형태의 고체 또는 반고체 조성물일 수도 있다. 수난용성 화합물에 대해 현탁액이 바람직할 수 있다.
본 발명에 따라 투여되는 조성물은 또한 등장화제, 완충제, 계면활성제, 안정화 폴리머, 보존제, 공-용매 및 점도 구축제를 포함하나 이들에 제한되지 않는 다양한 기타 성분들을 포함할 수 있다. 본 발명의 바람직한 약학 조성물은 등장화제 및 완충제와 함께 저해제를 포함한다. 본 발명의 약학 조성물은 임의로 계면활성제 및/또는 완화제 및/또는 안정화 폴리머를 더 포함할 수 있다.
조성물의 장성을, 바람직하게 안과 조성물에 대해 자연 눈물의 것으로 조절하기 위해 다양한 등장화제가 사용될 수 있다. 예를 들어, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화마그네슘, 염화칼슘, 단당, 예컨대 덱스트로스, 프럭토스, 갈락토스, 및/또는 단순 폴리올, 예컨대 당 알콜 만니톨, 소르비톨, 자일리톨, 락티톨, 이소말티톨, 말티톨, 및 수소화 전분 가수분해물이 대략 생리적 장성까지 조성물에 첨가될 수 있다. 이러한 등장화제의 양은 첨가되는 특정 제제에 따라 달라질 것이다. 그러나, 조성물은 일반적으로, 등장화제를 최종 조성물이 안과적으로 허용가능한 오스몰농도(일반적으로 약 150-450 mOsm, 바람직하게 250-350 mOsm 및 가장 바람직하게 약 290 mOsm)를 가지게 하기에 충분한 양으로 함유할 것이다. 일반적으로, 본 발명의 등장화제는 2 내지 5% w/w (예를 들어 2 내지 4% w/w)의 범위로 존재할 것이다. 본 발명의 바람직한 등장화제는 단당 또는 당 알콜, 예컨대 D-만니톨을 포함한다.
저장 조건하에서 pH가 변하는 것을 방지하기 위해 적절한 완충제 시스템(예를 들어, 인산나트륨, 아세트산나트륨, 시트르산나트륨, 붕산나트륨 또는 붕산)이 조성물에 첨가될 수 있다. 특정 농도는 사용되는 제제에 따라 달라질 수 있다. 그러나, 완충제는 바람직하게는 표적 pH가 pH 5 내지 8, 및 더욱 바람직하게는 pH 5 내지 7의 표적 pH 범위 또는 pH 6.5 내지 7.6의 표적 pH 범위내에서 유지되도록 선택될 것이다.
고농도의 저해제를 전달하기 위해 계면활성제가 임의로 사용될 수 있다. 계면활성제는 저해제를 용해시키고 콜로이드 분산물, 예컨대 미셸 용액, 마이크로에멀젼, 에멀젼 및 현탁액을 안정화시키는 기능을 한다. 임의로 사용될 수 있는 계면활성제의 예로서는 폴리소르베이트, 폴록사머, 폴리옥실 40 스테아레이트, 폴리옥실 피마자유, 티록사폴, 트리톤, 및 소르비탄 모노라우레이트를 들 수 있다. 본 발명에서 사용되는 바람직한 계면활성제는 친수/친유/균형 "HLB"가 12.4 내지 13.2의 범위이며, 트리톤X114 및 티록사폴과 같이 안과 용도로 허용가능하다.
본 발명의 안과 조성물에 첨가될 수 있는 추가 제제는 안정화 폴리머로서 기능하는 완화제이다. 안정화 폴리머는 우선적으로 국소 안과 용도의 이온성/전하성 예, 더욱 특히, 수중 분산물(즉, 수용성)을 만들 수 있고 물리적 안정성을 위해 그의 표면에 (-)10-50 mV의 제타-전위를 나타낼 수 있는 음전하를 가지는 폴리머여야 한다. 본 발명의 바람직한 안정화 폴리머는 0.1-0.5% w/w의 가교화 폴리아크릴레이트류, 예컨대 카보머, 폴리카보필(polycarbophil) 및 페뮬렌(R), 특히 카보머 974p (폴리아크릴산)로부터 선택되는 폴리전해질, 또는 복수의 경우 폴리전해질들일 수 있다.
담체의 점도를 증가시키기 위해 본 발명의 안과 조성물에 또한 다른 화합물이 첨가될 수 있다. 점도 증진제의 예로는 폴리사카라이드, 예컨대 히알루론산 및 그의 염, 콘드로이틴 설페이트 및 그의 염, 덱스트란, 셀룰로스계의 다양한 폴리머; 비닐 폴리머; 및 아크릴산 폴리머를 들 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
국소 안과 생성물은 전형적으로 다회 투여 형태로 포장된다. 따라서 사용중에 미생물의 오염을 방지하기 위해 보존제가 필요하다. 적합한 보존제는 벤잘코늄 클로라이드, 클로로부탄올, 벤조도데시늄 브로마이드, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 페닐에틸 알콜, 에덴테이트 디소듐, 소르브산, 폴리쿼터늄-1, 또는 당업자들에게 공지된 다른 제제를 포함한다. 이러한 보존제는 전형적으로 0.001 내지 1.0% w/v의 수준으로 사용된다. 본 발명의 단위 용량 조성물은 멸균될 것이지만, 전형적으로 보존처리되지 않는다. 따라서 조성물은 일반적으로 보존제를 함유하지 않을 것이다.
임상의 또는 다른 숙련자들은 본 발명의 화합물에 적합한 용량, 및 그에 따라 임의의 특정 약학 제형(단위 투여량 형태이거나, 그외의 형태에 상관없이)에 포함되어야 하는 본 발명의 화합물의 양을 결정할 수 있을 것이다.
상기한 (b)에서 기술된 조합물과 관련하여 언급할 수 있는 본 발명의 구체예는 다른 치료제가 염증성 질환(예를 들어, 하기한 특정 질환들)을 치료하는데 적합한 당업자들에게 공지된 하나 이상의 치료제인 것들을 포함한다.
예를 들어, 호흡기 장애(예컨대 COPD 또는 천식) 치료를 위한 다른 치료제는 다음을 포함하는 목록에서 선택된 하나 이상의 약물이다:
- 스테로이드(예를 들어, 부데소니드, 베클로메타손 디프로피오네이트, 플루티카손 프로피오네이트, 모메타손 푸로에이트, 플루티카손 푸로에이트; 추가 예는 시클레소니드(ciclesonide)이다);
- 베타 작용제, 특히 베타2 작용제(예를 들어, 터부탈린, 살부타몰, 살메테롤, 포모테롤; 추가 예는 빌란테롤, 올로다테롤, 레프로테롤 및 페노테롤이다); 및
- 잔틴(예를 들어, 테오필린).
예를 들어, 호흡기 장애(예컨대 COPD 또는 천식) 치료를 위한 다른 치료제는 다음을 포함하는 목록에서 선택된 하나 이상의 약물이다:
- 무스카린성 길항제(예를 들어, 티오트로퓸, 우메클리디늄, 글리코피로늄, 아클리디늄 및 다라트로퓸, 예를 들어, 이들 중 어느 하나의 브롬화염); 및
- 포스포디에스테라제 저해제.
추가로, 위장관 장애(예컨대, 크론병 또는 궤양성 대장염)의 치료를 위한 다른 치료제는, 예를 들어 다음을 포함하는 목록에서 선택된 하나 이상의 약물이다:
- 5-아미노살리실산, 또는 그의 프로드럭(예컨대 설파살라진, 올살라진 또는 발살라지드);
- 코르티코스테로이드(예를 들어, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 또는 부데소니드);
- 면역억제제(예를 들어, 사이클로스포린, 타클로리무스, 메토트렉세이트, 아자티오프린 또는 6-머캅토퓨린);
- 항-TNFα 항체(예를 들어, 인플릭시맵, 아달리무맵, 세르톨리주맵 페골 또는 골리무맵);
- 항-IL12/IL23 항체(예를 들어, 우스테키누맵) 또는 소분자 IL12/IL23 저해제 (예를 들어, 아필리모드);
- 항-α4β7 항체(예를 들어, 베돌리주맵);
- 톨-유사 수용체 (TLR) 차단제 (예를 들어, BL-7040; Avecia (Cambridge, UK));
- MAdCAM-1 차단제(예를 들어, PF-00547659);
- 세포 부착 분자 α4-인테그린에 대한 항체(예를 들어, 나탈리주맵);
- IL2 수용체 α 서브유닛에 대한 항체(예를 들어, 다클리주맵 또는 바실릭시맵);
항-Smad7 항체 (예를 들어, 몬거센 (GED0301; all-P-앰보-2'-데옥시-P-티오구아닐릴-(3'→5')-P-티오티미딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-5-메틸-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오구아닐릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-P-티오티미딜릴-(3'→5')-P-티오티미딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-P-티오티미딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-5-메틸-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오구아닐릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오사이티딜릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오아데닐릴-(3'→5')-2'-데옥시-P-티오구아닐릴-(3'→5')-2'-데옥시사이티딘));
- 스핑고신 1-포스페이트 수용체 1 (S1P1) 조절제 (예를 들어, 오자니모드 ((S)-5-(3-(1-((2-하이드록시에틸)아미노)-2,3-디하이드로-1H-인덴-4-일)-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-2-이소프로폭시벤조니트릴), 아미셀리모드 (MT1303; 2-아미노-2-{2-[4-(헵틸옥시)-3-(트리플루오로메틸)페닐]에틸}프로판-1,3-디올) 또는 APD334 (2-[7-[4-사이클로펜틸-3-(트리플루오로메틸)벤질옥시]-1,2,3,4-테트라하이드로사이클로펜타[b]인돌-3(R)-일]아세트산));
- JAK 저해제 (예를 들어, 토파시티닙, 바리시티닙 (1-(에틸설포닐)-3-[4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]-3-아제티딘아세토니트릴), 필고티닙 (N-[5-[4-[(1,1-디옥소-1,4-티아지난-4-일)메틸]페닐]-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-2-일]사이클로프로판카복사미드), 페피시티닙 (4-(((1R,2r,3S,5s,7s)-5-하이드록시아다만탄-2-일)아미노)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복사미드), 우파닥시티닙 ((3S,4R)-3-에틸-4-(3H-이미다조[1,2-a]피롤로 [2,3-e]피라진-8-일)-N-(2,2,2-트리플루오로에틸)피롤리딘-1-카복사미드), TD-1473 또는 R348 (예를 들어 US 2014/0206708 참조));
- STAT3 저해제 (예를 들어, TAK-114; (3E)-1-메틸-3-(2-옥소-1H-인돌-3-일리덴)인돌-2-온);
- 수용체-상호작용 단백질-1 (RIP1) 키나제 저해제 (예를 들어, GSK2982772);
- Syk 저해제 및 그의 프로드럭(예를 들어, 포스타마티닙 및 R-406);
- 포스포디에스테라제-4 저해제(예를 들어, 테토밀라스트);
- HMPL-004;
- 항생균(probiotics);
- 마이크로비이옴 조절제(예컨대 SGM1019);
- 데르살라진;
- 세마피모드/CPSI-2364; 및
- 단백질 키나제 C 저해제(예를 들어, AEB-071).
(예를 들어, 위장 장애 (예컨대 크론병 또는 궤양성 대장염)의 치료를 위해), 다른 치료제는 예를 들어, 다음을 포함하는 목록으로부터 선택된 하나 이상의 약제일 수 있다:
- 5-아미노살리실산 또는 그의 프로드럭 (예를 들어, 설파살라진, 올살라진 또는 발살라지드);
- 코르티코스테로이드 (예를 들어, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론 또는 부데소니드);
- 면역억제제 (예를 들어, 사이클로스포린, 타크롤리무스, 메토트렉세이트, 아자티오프린 또는 6-머캅토퓨린);
- 항-TNFα 항체 (예, 인플릭시맵, 아달리무맵, 세톨리즈맵 페골 또는 골리무맵);
- 항-IL12/IL23 항체 (예를 들어, 유스테키누맵) 또는 소분자 IL12/IL23 저해제 (예를 들어, 아필리모드);
- 항-α4β7 항체 (예를 들어, 베돌리주맵);
- MAdCAM-1 차단제 (예를 들어, PF-00547659);
- 세포 부착 분자 α4-인테그린에 대한 항체 (예를 들어, 나탈리주맵);
- IL2 수용체 α 소단위에 대한 항체 (예를 들어, 다클리주맵 또는 바실릭시맵);
- JAK3 억제제 (예를 들어, 토파시티닙 또는 R348);
- Syk 억제제 및 그의 프로드럭 (예를 들어, 포스타마티닙 및 R-406);
- 포스포디에스테라제-4 저해제 (예를 들어, 테토밀라스트);
- HMPL-004;
- 항생균;
- 데르살라진;
- 세마피모드/CPSI-2364; 및
- 단백질 키나제 C 저해제 (예를 들어, AEB-071)).
안 장애(예컨대 포도막염 또는 건성 각결막염(안구건조증)) 치료를 위한 다른 치료제는, 예를 들어 다음을 포함하는 목록에서 선택된 하나 이상의 약물이다:
- 코르티코스테로이드(예를 들어, 덱사메타손, 프레드니솔론, 트리암시놀론 아세토니드, 디플루프레드네이트 또는 플루오시놀론 아세토니드);
- 글루코코르티코이드 작용제(예를 들어, 마프라코라트);
- 면역억제제(예를 들어, 사이클로스포린, 보클로스포린, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 마이코페놀레이트 모페틸 또는 타크롤리무스);
- 항-TNFα 항체(예를 들어, 인플릭시맵, 아달리무맵, 세르톨리주맵 페골, ESBA-105 또는 골리무맵);
- 항-IL-17A 항체(예를 들어, 세쿠키누맵);
- mTOR 저해제(예를 들어, 시롤리무스);
- VGX-1027;
- 아데노신 A3 수용체 작용제(예를 들어, CF-101);
- 리피테그라스트(lifitegrast);
- IL1 차단제 (예를 들어, EBI-005; Hou 등, PNAS 2013, 110 (10), 3913-3918);
- RGN-259 (티모신 β4);
- SI-614;
- OTX-101;
- JNK 억제제 (예를 들어, XG-104);
- MAP 키나제 시그널링 억제제 (예를 들어, DA-6034; {[2-(3,4-디메톡시페닐)-5-메톡시-4-옥소크로멘-7-일]옥시}아세트산);
- 뮤신 자극제 (예를 들어, 레바미피드, 2-[(4-클로로벤조일)아미노]-3-(2-옥소-1H-퀴놀린-4-일)프로판산);
- MIM-D3 (타빌러미드; 예를 들어, US 2013/0345395 참조);
- JAK 저해제 (예를 들어, 토파시티닙, 바리시티닙 (1-(에틸설포닐)-3-[4-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-1H-피라졸-1-일]-3-아제티딘아세토니트릴, 필고티닙 (N-[5-[4-[(1,1-디옥소-1,4-티아지난-4-일)메틸]페닐]-[1,2,4]트리아졸로[1,5-a]피리딘-2-일]사이클로프로판카복사미드), 페피시티닙 (4-(((1R,2r,3S,5s,7s)-5-하이드록시아다만탄-2-일)아미노)-1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-카복사미드, 우파닥시티닙 ((3S,4R)-3-에틸-4-(3H-이미다조[1,2-a]피롤로 [2,3-e]피라진-8-일)-N-(2,2,2-트리플루오로에틸)피롤리딘-1-카복사미드), TD-1473 또는 R348 (예를 들어, US 2014/0206708 참조)); 및
- 단백질 키나제 C 저해제 (예를 들어, AEB-071).
(예를 들어 안 장애(예컨대 포도막염 또는 건성 각결막염(안구건조증)) 치료를 위해) 다른 치료제는, 예를 들어 다음을 포함하는 목록에서 선택된 하나 이상의 약제일 수 있다:
- 코르티코스테로이드(예를 들어, 덱사메타손, 프레드니솔론, 트리암시놀론 아세토니드, 디플루프레드네이트 또는 플루오시놀론 아세토니드);
- 글루코코르티코이드 작용제(예를 들어, 마프라코라트);
- 면역억제제(예를 들어, 사이클로스포린, 보클로스포린, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 마이코페놀레이트 모페틸 또는 타크롤리무스);
- 항-TNFα 항체(예를 들어, 인플릭시맵, 아달리무맵, 세르톨리주맵 페골, ESBA-105 또는 골리무맵);
- 항-IL-17A 항체(예를 들어, 세쿠키누맵);
- mTOR 저해제(예를 들어, 시롤리무스);
- VGX-1027;
- 아데노신 A3 수용체 작용제(예를 들어, CF-101);
- 리피테그라스트(lifitegrast);
- JAK3 저해제(예를 들어, 토파시티닙 또는 R348); 및
- 단백질 키나제 C 저해제(예를 들어, AEB-071).
특정 구체예에서, 안 장애(예컨대 포도막염 또는 건성 각결막염(안구건조증)) 치료를 위한 다른 치료제는, 예를 들어 다음을 포함하는 목록에서 선택된 하나 이상의 약제일 수 있다:
- 코르티코스테로이드(예를 들어, 덱사메타손, 프레드니솔론, 트리암시놀론 아세토니드, 디플루프레드네이트 또는 플루오시놀론 아세토니드);
- 면역억제제(예를 들어, 사이클로스포린, 보클로스포린, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 마이코페놀레이트 모페틸 또는 타크롤리무스);
- 항-TNFα 항체(예를 들어, 인플릭시맵, 아달리무맵, 세르톨리주맵 페골, ESBA-105 또는 골리무맵);
- 항-IL-17A 항체(예를 들어, 세쿠키누맵);
- mTOR 저해제(예를 들어, 시롤리무스);
- VGX-1027;
- JAK3 저해제(예를 들어, 토파시티닙, 바리시티닙, 필고티닙, 페피시티닙, 우파닥시티닙 또는 R348) (예를 들어, JAK3 저해제, 예컨대 토파시티닙 또는 R348); 및
- 단백질 키나제 C 저해제(예를 들어, AEB-071).
의학적 용도
본 발명의 화합물은 염증성 질환의 단일요법, 또는 이러한 질환의 조합 요법에서 사용할 수 있다.
따라서, 언급할 수 있는 상기한 측면 (e) 내지 (g)의 구체예는 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물 (또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체)이 치료에 사용된 단독 약물학적 활성성분인 것들을 포함한다.
그러나, 상기한 측면 (e) 내지 (g)의 다른 구체예에서, 화학식 I, Ix, Iy, Ia 또는 Ib의 화합물 (또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체)은 하나 이상의 다른 치료제도 투여된 대상에게 투여된다(예를 들어, 여기에서 하나 이상의 다른 치료제는 조합물과 관련하여 위에서 정의한 바와 같다).
본원에서 사용된 "염증성 질환"이란 용어는 구체적으로 다음 중 어느 하나 이상을 포함한다:
(i) 염증 성분이 있는 폐 질환 또는 장애, 예컨대 낭포성 섬유증, 폐 고혈압, 폐 유육종증, 특발성 폐 섬유증 또는, 특히 COPD(만성 기관지염과 폐기종을 포함), 천식 또는 소아 천식;
(ii) 염증 성분이 있는 피부 질환 또는 장애, 예컨대 아토피성 피부염, 알러지성 피부염, 접촉성 피부염 또는 건선;
(iii) 염증 성분이 있는 코 질환 또는 장애, 예컨대 알러지성 비염, 비염 또는 부비동염;
(iv) 염증 성분이 있는 안 질환 또는 장애, 예컨대 결막염, 알러지성 결막염, 녹내장, 당뇨병성 망막증, 황반부종(당뇨병성 황반부종 포함), 망막 중심 정맥 폐쇄(CRVO), 건조 및/또는 함습 연령 관련 황반변성(AMD), 수술 후 백내장 염증, 또는, 특히, 건성 각결막염(건조안 또는 안구건조증으로도 알려짐), 포도막염(후방, 전방 및 팬(pan) 포도막염 포함), 각막 이식과 각막 윤부 세포 이식 거부증; 및
(v) 염증 성분이 있는 위장관 질환 또는 장애, 예컨대 글루텐 민감성 장질환 (셀리악병), 호산구성 식도염, 장 이식편 대 숙주질환 또는, 특히 크론병 또는 궤양성 대장염.
본원에서 염증 성분을 갖는 질환이란 다른 (비염증성) 증상 또는 질환의 결과가 있는지의 여부와 상관없이 염증과 관련한 질환을 포함한다.
본 발명의 추가의 측면에 따라, 하기 화학식 I의 화합물을 제조하는 방법이 제공된다:
(a) G가 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H를 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 화학식 I(P)의 에스테르를 예를 들어 당업자에게 공지된 조건하에서, 예컨대 수성 용매계 (예를 들어, NaOH의 수용액, 예컨대 2M 내지 6M 용액과 메탄올과 같은 알콜 및 THF와 같은 극성 비양성자성 용매의 혼합물)의 존재하에 실온에서 알칼리 금속 수산화물을 사용하여 염기성 가수분해함으로써 가수분해 또는 수소화분해하거나:
Figure 112018100721576-pct00023
(상기 식에서, Rx는 C1-6 알킬 (예를 들어 메틸, 에틸 또는 tert-부틸) 또는 벤질을 각각 나타내고, T, R4, R5a, R5b, A, Q, Z, n, r 및 Het1은 상기 정의된 바와 같다);
(b) 화학식 II의 화합물과 화학식 III의 화합물을, 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건, 예를 들어 주위 온도(예를 들어, 15 내지 30 ℃) 내지 약 110 ℃에서, 적합한 유기 용매(예를 들어, 극성 비양자성 용매, 예컨대 DMF, THF, 1,4-디옥산 또는, 그의 혼합물) 존재하에 반응시키거나;
Figure 112018100721576-pct00024
(상기 식에서, Z1 및 Z2 중 하나는 화학식 IVa 또는 IVb의 구조 단편이고, Z1 및 Z2의 다른 하나는 화학식 V의 구조 단편이고:
Figure 112018100721576-pct00025
Figure 112018100721576-pct00026
여기서, W, V, R1 내지 R4, R5a, R5b, A, Q, Z, G 및 n은 상기 정의된 바와 같다);
(c) 화학식 IIa의 화합물과 적합한 아지드 형성제(즉, 이탈기와 활성화 아지드 이온의 적합한 공급원, 예컨대 디페닐 포스포아지데이트; 예를 들어, Tetrahedron 1974, 30, 2151-2157 참조)를 당업자들에게 공지된 조건하, 예컨대 주위 온도 이하 내지 주위 온도(예를 들어, 약 -5 내지 5℃의 초기 온도 내지 반응 후 주위 온도)에서 아민 염기(예를 들어, 트리에틸아민 또는 입체장애 염기, 예컨대 N,N-디이소프로필에틸아민) 및 적합한 유기 용매(예를 들어, 극성 비양자성 용매, 예컨대 DMF, THF, 1,4-디옥산 또는, 그의 혼합물)의 존재하에서 반응시킨 다음, 분리하지 않고, 예를 들어 주위 온도(예컨대 15 내지 30 ℃)에서 (화학식 Z1-C(O)-N3의) 중간체 아실 아지드의 열적 재배열(예를 들어, 가열하)에 의해 반응시켜 동소에서 화학식 II의 화합물을 제공하고, 이후 이 화합물을 위에서 정의된 화학식 III의 화합물과 반응시켜서 화학식 I의 화합물을 제공하거나:
Figure 112018100721576-pct00027
(상기 식에서, Z1은 상기 정의된 바와 같다);
(d) 화학식 IIb의 화합물과 위에서 정의된 화학식 III의 화합물을, 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건, 예컨대 주위 온도(예를 들어, 주위 온도 내지 80 ℃)에서, 임의로 아민 염기(예를 들어, 트리에틸아민 또는 입체장애 염기, 예컨대 N,N-디이소프로필에틸아민) 및 적합한 유기 용매(예를 들어, 비양자성 용매, 예컨대 디클로로메탄 아세토니트릴, 테트라하이드로푸란 또는 에스테르, 예컨대 이소프로필 아세테이트)의 존재하에서 반응시키고:
Figure 112018100721576-pct00028
(상기 식에서, LG1은 적합한 이탈기(예를 들어, 이미다졸릴, 클로로, 또는 아릴옥시, 예컨대 페녹시)를 나타내고, Z1은 상기 정의된 바와 같다);
(e) 화학식 VI의 화합물과 화학식 VII의 화합물을, 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건(예를 들어, J. Am. Chem. Soc. 2011, 133, 15686-15696에 기술) 하에서, 예컨대
A가 N을 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 고온(예를 들어, 50 내지 110 ℃)에서, 적합한 유기 용매(예를 들어, 극성 비양자성 용매, 예컨대 DMF, THF, 1,4-디옥산 또는, 그의 혼합물) 및 임의로 산성 촉매(예를 들어, 설폰산, 예컨대 파라-톨루엔설폰산)의 존재하에서 반응시키거나,
A가 CH를 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 고온(예를 들어, 60 내지 100 ℃)에서, 적합한 유기 용매(예를 들어, 극성 비양자성 용매, 예컨대 DMF 또는 tert-부탄올), 염기(예를 들어, 탄산칼륨과 같은 무기 염기) 및 적합한 촉매(예를 들어, BrettPhos G3 예비 촉매 ([(2-디사이클로헥실포스피노-3,6-디메톡시-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-바이페닐)-2-(2'-아미노-1,1'-바이페닐)]팔라듐(II)메탄설포네이트)와 같은 팔라듐 (II) 촉매의 존재하에서 반응시키거나:
Figure 112018100721576-pct00029
Figure 112018100721576-pct00030
(상기 식에서, LG2는 적합한 이탈기(예를 들어, 클로로 또는 브로모와 같은 할로 그룹)를 나타내고, T, A, R4, R5a, R5b, Q, Z, G 및 n은 상기 정의된 바와 같다);
(f) Q가 S(O)1- 2R4를 나타내는 화학식 I의 화합물인 경우, Q가 S를 나타내는 상응하는 화학식 I의 화합물을 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건하에 (예컨대 0 내지 25 ℃에서 적합한 용매 (예컨대 디클로로메탄, 메탄올 또는 이들의 혼합물) 및 과산, 예컨대 메타-클로로퍼벤조산의 존재하에) 산화시키거나;
(g) Q가 C(O)NH를 나타내는 화학식 I의 화합물인 경우, 화학식 VIII의 화합물을 화학식 IX의 화합물과 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건하에,
예컨대 LG3가 ORx를 나타내는 경우, 주위 온도에서 적합한 루이스 산성 촉매 (예컨대 트리알킬알루미늄 시약, 예컨대 트리메틸알루미늄) 및 비양성자성 유기 용매 (예컨대 THF)의 존재하에 반응시키거나,
LG3가 OH를 나타내는 경우, 삼차 아민 염기 (예를 들어, 4-디메틸아미노피리딘, 트리에틸아민 또는 디이소프로필에틸아민과 같은 트리알킬아민 또는 N-메틸피롤리딘 또는 N-메틸모르폴린과 같은 사이클릭 아민), 아미드 (펩티드) 커플링 시약 (예컨대 T3P, HATU, CDI, BOP, PyBOP, HOAt, HOBt 또는 카보디이미드, 예컨대 DCC 또는 디이소프로필카보디이미드) 및 비양성자성 유기 용매 (예컨대 DCM과 같은 염소화 용매, 에틸 아세테이트와 같은 에스테르, DMF와 같은 디메틸아민의 아미드, 또는 이들 임의의 용매의 혼합물)의 존재하에 반응시키거나, 또는
LG3가 할로와 같은 이탈기를 나타내는 경우, 염기 (예를 들어 전술한 바와 같은 3급 아민) 및 비양성자성 유기 용매 (예를 들어 전술한 바와 같은 염소화, 에스테르 또는 아미드 용매)의 존재하에 반응시키거나:
Figure 112018100721576-pct00031
Figure 112018100721576-pct00032
(상기 식에서, LG3는 OH, ORx 또는 적합한 이탈기 (예컨대 할로)를 나타내고, T, A, R4, Rx, R5a, R5b, Z, G 및 n은 상기 정의된 바와 같다);
(h) G가 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H를 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 다음 화학식 Xa의 알콜:
Figure 112018100721576-pct00033
(상기 식에서, T, R4, R5a, R5b, A, Q, Z, n, r 및 Het1은 상기 정의된 바와 같다);
을, 후술하는 산화제를 사용한 반응을 포함해, 당업자에게 공지된 조건 (예를 들어, http://www.organic-chemistry.org/synthesis/C2O/carboxylic acids/oxidationsalcohols.shtm 및 Tojo, G.; Fernandez, M. I. Oxidation of Primary Alcohols to Carboxylic acids: A Guide to Current Common Practice, Springer-Verlag, New York, 2007) 하에서 산화시키고:
H5IO6 (예를 들어 1 내지 2 mol%의 촉매, 예컨대 CrO3 또는 피리디늄 클로로크로메이트, 및 아세토니트릴, 또는 아세트니트릴과 물의 혼합물과 같은 용매의 존재하),
퍼옥사이드, 예컨대 t-BuOOH (예를 들어 산화비스무스(III)와 같은 촉매의 존재하), 또는
산소 분자 또는 공기 (예를 들어 (i) 팔라듐(0) 촉매 (예를 들어 Pd/C), 보로하이드라이드 (예를 들어 NaBH4), 무기 염기 (예를 들어 K2CO3 또는 KOH) 및 수성 알콜 (예를 들어 에탄올 또는 메탄올)의 혼합물; (ii) 실버 N-헤테로사이클릭 카벤 촉매 (예를 들어 비스(이미다졸-2-일리덴) 촉매, 예컨대 1,3-비스[(6-브로모피리딘-2-일)메틸]이미다졸-2-일리덴 촉매) 및 하이드록사이드 염기, 예컨대 KOH 또는 4급 수산화암모늄 (예를 들어 벤질트리메틸수산화암모늄); (iii) 유기촉매, 예컨대 2-클로로안트라퀴논 및 가시광선 조사; 또는 (iv) 하나 이상의 촉매 (예를 들어 VO(acac)2, Cu(II) 2-에틸헥사노에이트, 또는 그의 혼합물), 강 염기 (예를 들어 DABCO) 및 이온성 액체, 예컨대 1-부틸-3-메틸이미다졸륨 트리플루오로메탄설포네이트 기반 액체)의 존재하),
대안적으로, [Tojo, G.; Fernandez, M. I. In Oxidation of Primary Alcohols to Carboxylic Acids: A Guide to Current Common Practice, Springer-Verlag, New York, 2007, Chapter 7, pp105-110]에 요약된 접근법 중 하나를 사용하여 일차 알콜의 카복실산으로의 산화가 단계적 방식으로, 즉 중간체 알데하이드를 거쳐 수행될 수 있음; 또는
(i) G가 -C(O)N(H)OH, -C(O)N(H)OCH3, -C(O)N(H)-S(O)2CH3 또는 -C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2를 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, G가 -CO2H를 나타내는 상응하는 화학식 I의 화합물을 당업자들에게 공지된 조건하에 각각 하이드록실아민, 메톡시아민, 메탄설폰아미드 또는 디메틸설파미드와 커플링 (예를 들어 메탄설폰아미드와의 커플링의 경우, 3급 아민 염기, 아미드 (펩티드) 커플링 시약 및 비양성자성 유기 용매, 예를 들어 상기 (g)에 기술된 바와 같은 것의 존재하에 반응)시키거나;
(k) G가 하기 구조를 가지는 하이드록시-치환된 이속사졸:
Figure 112018100721576-pct00034
을 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 Xb의 화합물:
Figure 112018100721576-pct00035
(상기 식에서, T, A, R4, R5a, R5b, Q, Z, n 및 Rx는 상기 정의된 바와 같다)
을 하이드록실아민과 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건하에서 반응 (예를 들어 승온, 예컨대 환류에서 양성자성 유기 용매, 예컨대 에탄올의 존재하 및 임의로 적합한 염기, 예컨대 중탄산나트륨의 존재하에 반응)시키거나;
(l) G가 테트라졸-5-일을 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 하기 화학식 Xc의 화합물:
Figure 112018100721576-pct00036
(상기 식에서, T, A, R4, R5a, R5b, Q, Z, 및 n은 상기 정의된 바와 같다)
을 적절한 아지드 공급원 (예를 들어, 아지도트리메틸실란)과 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건하에서 반응 (예를 들어 승온에서 비양성자성 유기 용매, 예컨대 톨루엔의 존재하 및 임의로 촉매, 예컨대 디부틸틴 옥사이드의 존재하에 반응)시키거나;
(m) G가 5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일을 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 상기 정의된 바와 같은 화학식 Xc의 화합물을 하이드록실아민과 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건하에서 반응 (예를 들어 승온에서 양성자성 용매 (예: EtOH 또는 물, 또는 이 둘의 혼합물의 존재하에 반응)시킨 후, 생성된 N-하이드록시아미딘 (아미독심) 화합물을 적합한 -C(O)- 부분 공급원 (예를 들어 클로로포르메이트, 예컨대 이소부틸 클로로포르메이트, 또는 포스겐)과 예를 들어 당업자들에게 공지된 조건하에서, 예컨대 비양성자성 유기 용매, (예를 들어 DMF) 및 염기 (예를 들어 피리딘)의 존재하에 주위 이하 온도에서 반응시키거나;
(n) 화학식 I의 화합물의 보호된 유도체를 당업자들에게 공지된 조건하에 탈보호 (여기서 보호된 유도체는 화학식 I의 화합물의 O- 또는 N-원자 상에 보호기를 갖고 (의심의 소지를 피하기 위해, 한 화학식 I의 화합물의 보호된 유도체는 다른 화학식 I의 화합물을 나타낼 수도 나타내지 않을 수도 있다)한다.
화학식 I의 화합물의 보호된 유도체에 대한 예는 다음의 것을 포함한다:
- O-원자가 벤질 그룹으로 보호되고, 벤질 그룹은, 예를 들어 팔라듐 촉매 (예컨대 Pd/C)의 존재하에 수소화에 의해 제거될 수 있다;
- 산 (예컨대 카복실산, 설폰산, 포스폰산 또는 포스핀산)의 O-원자는 알킬 그룹 (예컨대 메틸, 에틸 또는 tert-부틸)으로 보호되고, 알킬 그룹은 염기성 가수분해 (예컨대 메틸 또는 에틸 그룹에 대해, 알칼리 금속 수산화물, 예컨대 수산화나트륨을 사용한 가수분해 반응에 의해) 또는 산 가수분해 (예컨대 tert-부틸 그룹에 대해, 산, 예컨대 트리플루오로아세트산을 사용한 가수분해 반응에 의해)에 의해 제거될 수 있다;
- 아민의 N-원자는 카바메이트 그룹, 예컨대 벤질 또는 tert-부틸 카바메이트로 보호되고, 이 그룹은 O-원자로부터 벤질 또는 tert-부틸 그룹을 제거하기 위해 사용되는 것과 유사한 조건하에 제거될 수 있다.
화학식 I의 화합물의 보호된 유도체는 화학식 I(IP)의 화합물을 포함한다.
상기 (b) 내지 (g)에 기술된 방법에서는, 하기 화합물에 있는 C(O)2H 그룹을 보호하는 것이 바람직할 수 있다:
Z1이 화학식 V의 구조 단편인 화학식 II, IIa 또는 IIb의 화합물;
Z2가 화학식 V의 구조 단편인 화학식 III의 화합물; 또는
G가 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H를 나타내는 화학식 VII 또는 IX의 화합물.
이들 화합물에서 C(O)2H 그룹이 보호되는 경우, 보호기는 예를 들어 에스테르 (예를 들면 C(O)2H는 C(O)ORx와 같은 에스테르로서 보호되고, Rx는 상기 정의된 바와 같음)일 수 있고, 이 에스테르기는 당업자에게 공지된 절차에 따라 (상기 (a)에 기술된 것과 같은 조건하에서) 제거될 수 있다.
화학식 I, IIa, IIb, VI 및 VIII의 화합물은 당업자에게 공지된 방법, 예를 들어 WO 2014/162126 및 WO 2015/092423에 요약된 절차에 따라 또는 이와 유사하게 제조될 수 있다.
Q가 O 또는 S를 나타내는 화학식 VII 또는 Xc의 화합물은 화학식 X의 화합물을 화학식 XI의 화합물 (화학식 VII의 화합물을 제조하는 경우) 또는 화학식 XIa의 화합물 (화학식 Xc의 화합물을 제조하는 경우)과 당업자들에게 공지된 조건하에서 반응시킨 후:
Figure 112018100721576-pct00037
Figure 112018100721576-pct00038
(상기 식에서, Q'는 O 또는 S를 나타내고, FG는 실제 또는 잠재적 NH2 그룹 (즉, NH2 그룹으로 용이하게 전환되는 그룹, 예컨대 니트로 또는 보호된 변형체 NH-PG, (여기서 PG는 전형적인 보호기, 예컨대 카바메이트 에스테르 또는 카복사미드임; 예를 들어: Greene, T. W.; Wuts, P. G. M. Protective Groups in Organic Synthesis; Wiley, 4th revised edition, 2006; ISBN-10: 0471697540 참조)이고, R4는 본원에서 상기 정의된 바와 같으며, LG4는 적합한 이탈기 (예컨대 메탄설포네이트 또는 할로)를 나타내고, G'는 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2Ry 또는 카복실산 등가물 (또는 그의 보호된 변형체)을 나타내고, Ry는 H 또는 Rx를 나타내고, R5a, R5b, Z, Rx 및 n은 상기 정의된 바와 같다),
(i) FG가 NH-PG를 나타내는 경우, PG 보호기를 제거하거나,
FG가 NO2를 나타내는 경우, NO2를 NH2로 환원시키거나, 또는
FG가 C(O)O-(C1-6 알킬)을 나타내는 경우, 비누화하여 상응하는 카복실산을 제공한 후 적합한 아지드-형성 시약과 반응시키고 생성된 아실 아지드를 열적으로 재배열하고/하거나;
(ii) Ry가 Rx를 나타내는 경우, Rx 그룹을, 예를 들어 가수분해에 의해 (예를 들어 상기 방법 (a)와 관련하여 기술된 바와 같이) 제거하여 제조할 수 있다.
화학식 IX의 화합물, 또는 그의 보호된 유도체는, 당업자에게 공지된 방법, 예를 들어 WO 2011/037610에 요약된 절차에 따라 또는 이와 유사하게 제조될 수 있다.
화학식 Xb의 화합물은 G가 -CO2H를 나타내는 상응하는 화학식 I의 화합물을 2,2-디메틸-1,3-디옥산-4,6-디온 (멜드럼 산 (Meldrum's acid))과 당업자들에게 공지된 (펩티드) 커플링 조건하에서 반응 (예를 들어 3급 아민 염기, 아미드 ((펩티드) 커플링 시약 및 비양성자성 유기 용매, 예를 들어 상기 (g)에 기술된 것들의 존재하에 반응)시킨 후, 생성물 (멜드럼 산의 아실화된 형태)을 열적 분해하여 (아세톤 1 당량 및 CO2 1 당량을 없앰으로써) 제조할 수 있다.
화학식 XI의 화합물은 화학식 XII의 화합물을 화학식 XIIIa의 화합물과, 또는, R5a가 H를 나타내고, G'는 카복실산 등가물 (또는 그의 보호된 변형체) 또는 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2Rx를 나타내는 화학식 XI의 화합물을 위해, 화학식 XIIIb의 화합물과 당업자들에게 공지된 바와 같은 조건하에서 반응시킨 후, Ry1O- 그룹을 LG4 그룹으로 전환시키고, 예를 들면, Ry1이 보호기를 나타내는 경우, 그 보호기를 제거한 다음 (예를 들어 당업자들에게 공지된 바와 같은 조건하에서), 당업자들에게 공지된 시약 (예를 들어 LG4가 메탄설포네이트를 나타내는 화학식 XII의 화합물의 경우, 메탄설포닐 클로라이드와 같은 시약) 및 조건을 사용하여 제조할 수 있다:
Figure 112018100721576-pct00039
Figure 112018100721576-pct00040
Figure 112018100721576-pct00041
상기 식에서,
Ry1은 H 또는 보호기 (예를 들어 벤질)를 나타내고,
n, R5a, R5b, G' 및 Rx는 상기 정의된 바와 같고,
LG5는 적합한 이탈기 그룹 (예컨대 메탄설포네이트 또는 할로)를 나타내고,
G"는 카복실산 등가물 (또는 그의 보호된 변형체) 또는 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2Rx를 나타낸다.
당업자들이라면 화학식 II, IIx 및 IIb로 표시되는 화합물이 일반적으로 반응 중간체임을 알 수 있을 것이다. 이러한 중간체는 동소에서 형성되어 단리하지 않고 화학식 III의 화합물과 직접 반응하여 화학식 I의 화합물을 제공할 수 있다. 또한, 당업자들이라면 화학적으로 민감한 작용기, 예를 들어 하이드록실 그룹 또는 아미노 작용기를 가지는 임의의 그룹 Z1 및 Z2에 대해 위에 기술된 과정 동안 적절한 보호기의 사용이 필요할 수 있음을 이해할 것이다.
반응식에 예시된 화합물 (예를 들어 화학식 IX, XIa, XII, XIIIa 및 XIIIb의 화합물 같은 중간체)은 상업적으로 입수할 수 있거나 인용된 방법을 사용하여 얻을 수 있거나, 통상적인 방법에 의해 당업자들이 용이하게 제조할 수 있다. 예를 들어, Regan, J. et al.; J. Med. Chem. 2003, 46, 4676-4686, WO 2000/043384, WO 2007/053346, WO 2007/087448, WO 2007/089512, WO 2009/117080, WO 2013/050756 , WO 2014/027209 , WO 2014/033446 , WO 2014/033447 , WO 2014/033449 , WO 2014/076484, WO 2014/140582 WO 2014/162121 , WO 2014/162126, WO 2015/092423 , WO 2016/051187 , WO 2016/051188 , Lassalas et al., J. Med. Chem. (2016), 59, 3183-3203, Ballatore et al., Chem. Med. Chem. (2013), 8(3), 385-395 및 Boyd et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. (2015), 25, 1990-1994 참조.
화학식 Ia, Ix, Iy, Ib 및 Ic의 화합물은 상술된 방법과 유사한 방법, 예컨대 전술한 중간체가 필요에 따라 적절하게 변형된 치환체 정의를 갖는 화합물로 대체된 방법으로 제조될 수 있다. 예를 들어, 화학식 화학식 Ix 또는 Iy의 화합물의 합성을 위해, 다음 중간체가 사용될 수 있다 (여기에서, R1 내지 R4, R5a, R5b, Rx, A, Q, n, LG2 및 LG3은 상기 정의된 바와 같다).
Figure 112018100721576-pct00042
Figure 112018100721576-pct00043
Figure 112018100721576-pct00044
본원에 기술된 신규 중간체는 본 발명의 한 측면을 이룬다. 이러한 측면에서, 본 발명의 추가 측면은 다음에 관한 것이다:
(i) 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 I(P), Ix(P) 또는 Iy(P)의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체;
(ii) Z1이 화학식 V, Vx 또는 Vy의 구조 단편을 나타내는, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 II, IIa 또는 IIb의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체;
(iii) Z2가 화학식 V, Vx 또는 Vy의 구조 단편을 나타내는, 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 III의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체; 및
(iii) 본원에서 상기 정의된 바와 같은 화학식 VII, VIIx 또는 VIIy의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체.
이와 같은 본 발명의 측면에서, 언급할 수 있는 화학식 I(P), Ix(P), II, IIa, IIb, III, VII 및 VIIx의 화합물의 구체예로는 다음의 하나 이상 (예컨대 모두)이 적용되는 것이 포함된다:
(a) R4가 하나 이상의 (예를 들어 2 또는 3개의) 할로 (예를 들어 플루오로) 치환체에 의해 임의로 치환된 메톡시를 나타내거나 또는, 특히, R4는 메톡시를 나타내고;
(b) R5a 및 R5b는 둘 다 H를 나타내고;
(c) Q는 C(O)NH, S, S(O), S(O)2 또는, 특히, O를 나타내고;
(d) Z는 O를 나타내고;
(e) n은 1, 2 또는 3 (예를 들어 3 또는, 특히, 2)을 나타내고;
(f) 화학식 I(P), II, IIa, IIb 및 III의 화합물에 대해, A는 N 또는, 특히, CH를 나타낸다.
언급할 수 있는 화학식 I(P) 또는 Ix(P)의 화합물의 추가 구체예로는 다음의 하나 이상 (예컨대 모두)이 적용되는 것이 포함된다:
(a) R1은 메톡시를 나타내고;
(b) R2는 -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -S(O)1- 2CH3, -P(O)(CH3)2, -N(CH3)S(O)2CH3, 또는 -NHS(O)2CH3을 나타내고;
(c) R3은 트리메틸실릴 또는 tert-부틸을 나타내고;
(d) A는 CH 또는 N을 나타내고;
(e) R4는 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 메톡시를 나타내고;
(f) R5a 및 R5b는 둘 다 H를 나타내고;
(g) Q는 C(O)NH, S, S(O), S(O)2 또는 O를 나타내고;
(h) Z는 O를 나타내고;
(i) n은 1, 2 또는 3을 나타낸다.
그러한 임의의 구체예에서, 화학식 I(P)의 화합물의 구체예와 관련하여, Rx는 C1-6 알킬 또는 벤질을 나타낼 수 있다.
언급할 수 있는 화학식 I(P) 또는 Ix(P)의 화합물의 또 다른 구체예로는 다음의 하나 이상 (예컨대 모두)이 적용되는 것이 포함된다:
(a) R1은 메톡시를 나타내고;
(b) R2는 -NHS(O)2CH3을 나타내고;
(c) R3은 tert-부틸을 나타내고;
(d) A는 CH를 나타내고;
(e) R4는 메톡시를 나타내고;
(f) R5a 및 R5b는 둘 다 H를 나타내고;
(g) Q는 O를 나타내고;
(h) Z는 O를 나타내고;
(i) n은 2를 나타낸다.
그러한 임의의 구체예에서, 화학식 I(P)의 화합물의 구체예와 관련하여, Rx는 에틸을 나타낼 수 있다.
화학식 II, IIa, IIb 및 III의 화합물의 특정 구체예는
A가 CH를 나타내고;
R4는 메톡시를 나타내고;
R5a 및 R5b는 둘 다 H를 나타내고;
Q는 O를 나타내고;
Z는 O를 나타내고;
n은 2를 나타내는 것을 포함한다.
화학식 III, VII, VIIx 및 VIIy의 화합물의 보호된 유도체는 필수 NH2 그룹이 보호된 것들을 포함한다. 이와 관련하여, 상기 보호된 유도체는 이들 화합물의 아미드 또는 특히 카바메이트를 포함한다. 예를 들어, 이들 보호된 유도체는 NH2 그룹이 FG로 대체되거나 (상기 정의된 바와 같되, 단 NH2를 나타내지 않음 (예를 들어 FG는 니트로를 나타냄)), 또는, 특히 NH2 그룹의 H 원자가 다음으로 대체된 화합물을 포함한다:
R'-C(O)- (여기서, R'는 하나 이상의 플루오로 그룹에 의해 치환된 C1-8 알킬이거나, 또는 R'는 H, C1-8 알킬, 페닐 또는 벤질이고, 후자의 두 그룹은 할로, 하이드록시, 메틸 및 메톡시로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 임의로 치환된다); 또는
R"O-C(O)- (여기서, R"는 tert-부틸, 페닐, 벤질 또는 플루오레닐이고, 후자의 세 그룹은 할로, 하이드록시, 메틸 및 메톡시로 구성된 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 그룹으로 임의로 치환된다).
G가 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H을 나타내는 화학식 II, IIa, IIb, III, VII의 화합물 및 화학식 VIIx 및 VIIy의 화합물에 대한 보호된 유도체는 추가로 (또는 대안적으로) 카복실 부분이 보호된 것들을 포함한다. 이와 관련하여, 이러한 보호된 유도체는 또한 이러한 화합물의 에스테르 (예를 들어, 여기서 C(O)2H는 C(O)ORx와 같이 에스테르로서 보호되고, 여기서 Rx는 상기 본원에서 정의된 바와 같다)를 포함한다.
언급할 수 있는 화학식 화학식 I(P) 또는 Ix(P)의 화합물의 구체예로는 다음의 하나 이상 (예컨대 모두)이 적용되는 것이 포함된다:
메틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤즈아미도)에톡시)에톡시)아세테이트;
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트; 및
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트,
또는 이들의 염.
본원에 기술된 발명의 측면(예를 들어, 상기한 화합물, 조합물, 방법 및 용도)은, 본원에 기술된 상태의 치료에서 상기한 상태 또는 다른 것들의 치료에 사용하기 위해 선행기술에서 공지된 유사 화합물, 조합물, 방법(치료) 또는 용도에 비해 임상의 및/또는 환자에게 보다 편리하거나, 보다 효과적이거나, 독성이 덜하거나, 선택성이 더 뛰어나거나, 활성 범위가 더 광범하거나, 더 강력하거나, 부작용의 발생이 더 적거나, 약물동태 및/또는 약력학적 프로파일이 더 우수하거나, 고체 상태 형태학상 더 적합하거나, 장기적 안정성이 더 우수하거나, 기타 유용한 약리학적 특성을 가질 수 있는 이점을 제공할 수 있다.
본 발명의 화합물은 추가적으로(또는 선택적으로):
- (예를 들어, 이전에 기술된 다른 p38 MAP 키나제 저해제, 예컨대, 예를 들어, BIRB796과 비교하여) 장기간의 작용 및/또는 작용의 지속성을 나타내고;
- Syk의 강력한 저해를 나타내고 (예를 들어, 이들은 500 nM 이하, 예컨대 350 nM 이하의 Syk에 대한 IC50을 가질 수 있다);
- GSK 3α를 강력하게 저해하지 않으며(예를 들어, GSK 3α에 대한 화합물의 IC50은 1,000 nM 이상; 예컨대 1,500, 2,000, 3,000, 4,000, 5,000, 6,000, 7,000, 8,000, 9,000 또는 10,000 nM 이상일 수 있다);
- 키놈(kinome)의 작은 부분을 타겟으로 하고, 즉 저하된 KinomeScan 선택성 스코어로 예시된 바와 같이 선택성이 향상되었으며;
- 투약 간 상대적으로 높은 국소 약물 농도(예를 들어, 이전에 기술된 다른 p38 MAP 키나제 저해제, 예컨대, 예를 들어, BIRB796과 비교하여 높은 국소 농도)를 유지하고;
- 국소/국부 투여에 특히 적합한 특성을 나타내고(예를 들어, 국소/국부 투여후, 화학식 I 화합물의 높은 표적 조직 농도를 발생하지만, 예를 들어 높은 신장 또는 간 배출로 인해 화학식 I 화합물의 혈장 농도는 낮고/낮거나 혈장으로부터 신속하게 제거된다);
- 세포 내에서 거의 없거나 없는 β-카테닌 유도 및/또는 유사분열 저해를 나타내고;
- 인간 림프구 시험관내 소핵 시험에서 소핵을 함유하는 이핵 세포 (binucleated cell)의 증가를 나타내지 않고;
- 사이토크롬 P450 상위군의 멤버에 대한 시간의존성 저해가 거의 없거나 없고;
- 물 존재하에서의 화학적 안정성(예를 들어, 고온에서 수성 혼합물 중 가수분해에 대한 안정성)이 이전에 기술된 p38 MAP 키나제 저해제, 예컨대, BIRB796보다 향상되었고;
- 환자에게 투여한 후, 안전성(예를 들어, 독성) 문제가 거의 없거나 없는 관련 대사산물을 발생하고;
- 국소 투여 후 전임상 종 및 인간 모두에서 안구 자극성 또는 독성 감소를 나타내고;
- 예를 들어 기준 화합물 A, (3-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-프로판산 , 및/또는 기준 화합물 B, 3-((4-((4-(3-(3-(tert-부틸)-1-(p-톨릴)-1H-피라졸-5-일)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-에티닐-N-(2-(2-(2-메톡시에톡시)에톡시)에틸)벤즈아미드에 비해 우수한 용해도 및/또는 세포 투과성 (예를 들어 우수한 수성 용해도 및 세포에서 특정 사이토킨, 예컨대 IL-8 및/또는 IFNγ 방출의 강력한 억제)을 나타내고;
- 예를 들어 기준 화합물 A 및/또는 기준 화합물 B에 비해 장액 또는 결장액에서 더 신속한 용해율을 일으키고;
- 적은 양의 가용해화 부형제로 pH 범위 7-8의 수용액에서 보다 쉽게 제형화할 수 있고,
- 결정화도가 높고; 및/또는
- 고체 상태에서 흡습성이 없거나 거의 없다.
도 1은 하기 실시예 31의 방법 1 (하기 표 A에 기재된 피크를 가진 상부 추적물) 또는 방법 2 (하기 표 B에 기재된 피크를 가진 하부 추적물)에 의해 제조된 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산, 나트륨 염의 두 샘플의 비교 XRPD 프로파일을 나타낸다.
표 A: 실시예 31, 방법 1의 생성물의 XRPD 프로파일에 대한 피크 목록
Figure 112018100721576-pct00045

표 B: 실시예 31, 방법 2의 생성물의 XRPD 프로파일에 대한 피크 목록
Figure 112018100721576-pct00046

도 2는 하기 실시예 31의 방법 1 (위 라인) 또는 방법 2 (아래 라인)에 의해 제조된 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산, 나트륨 염의 두 샘플의 DSC 분석으로 얻어진 열유량 추이를 나타낸다.
실험 방법
일반적 절차
모든 출발물질과 용매는 상업적 공급처로부터 입수하거나 인용문헌에 따라 제조하였다. 달리 언급되지 않는 한, 모든 반응물은 교반되었다. 유기 용액은 무수 황산마그네슘에서 통상적으로 건조하였다. 수소화는 Thales H-큐브 유동 반응기에서 기재된 조건 또는 수소 풍선하에 수행하였다. 마이크로파 반응은 CEM Discover 및 Smithcreator 마이크로파 반응기에서 가변성 파워 마이크로파 조사를 사용하여 일정 온도까지 가열하여 수행하였다.
순상(normal phase) 칼럼 크로마토그래피는 미리 충진된 실리카(230-400 메쉬, 40-63 μm) 카트리지를 사용하는 자동화 플래쉬 크로마토그래피 시스템, 예컨대 CombiFlash Companion 또는 CombiFlash RF 시스템으로 통상적으로 수행하였다. SCX는 Supelco로부터 구입하여 사용 전에 1M 염산으로 처리하였다. 다른 언급이 없는 한, 정제될 반응 혼합물은 먼저 MeOH로 희석하고 수 적의 AcOH로 산성화하였다. 이 용액을 직접 SCX에 로딩하고 MeOH로 세척하였다. 이후, 원하는 물질을 1% NH3의 MeOH 용액으로 세척하여 용출하였다.
분석 방법
분석 HPLC를 Waters Xselect CSH C18, 2.5 μm, 4.6×30 mm 칼럼을 사용하여 0.1% 포름산/MeCN/0.1% 수성 포름산의 구배로 용출하거나, Waters Xbridge BEH C18, 2.5 μm, 4.6×30 mm 칼럼을 사용하여 MeCN/수성 10 mM 중탄산암모늄의 구배로 용출하여 수행하였다. 용출 피크의 UV 스펙트럼은 Agilent 1100 시스템에서 다이오드 어레이 또는 가변파장 검출기를 사용하여 측정하였다.
분석 LCMS를 Waters Xselect CSH C18, 2.5 μm, 4.6×30 mm 칼럼을 사용하여 0.1% 포름산/MeCN/0.1% 수성 포름산의 구배로 용출하거나, Waters Xbridge BEH C18, 2.5 μm, 4.6×30 mm 칼럼을 사용하여 MeCN/수성 10 mM 중탄산암모늄의 구배로 용출하여 수행하였다. 용출 피크의 UV 및 질량 스펙트럼은 포지티브 및 네가티브 이온 전자스프레이를 갖는 6120 단일 사극자 질량 분광계가 구비된 Agilent Infinity 1260 LCMS 또는 Agilent 1200에서 가변파장 검출기를 사용하여 측정하였다.
분취용 HPLC는 Waters Xselect CSH C18, 5 μm, 19×50 mm 칼럼을 0.1% 포름산/MeCN/0.1% 수성 포름산의 구배를 사용하거나 또는 MeCN/수성 10 mM 중탄산암모늄의 구배를 사용하거나, Waters Xbridge BEH C18, 5 μm, 19×50 mm 칼럼을 MeCN/수성 10 mM 중탄산암모늄의 구배를 사용하여 수행하였다. 분획들은 Gilson 215 분취용 HPLC 또는 Varian PrepStar 분취용 HPLC에서 가변파장 검출기로 측정된 단일 파장의 UV, 또는 포지티브 및 네가티브 이온 전자스프레이가 구비된 ZQ 단일 사극자 질량 분광계와 Waters FractionLynx LCMS의 듀얼 파장 검출기로 측정된 단일 파장의 UV 및 질량에 의해 검출한 후 수집하였다.
1 H NMR 분광학: Bruker Avance III 분광광도계로 400 MHz에서 1H NMR 스펙트럼을 얻었다. 클로로포름-d, 디메틸설폭시드-d 6 의 중심 피크 또는 테트라메틸실란의 내부 표준을 기준으로 사용하였다.
본 발명의 화합물의 제조
실시예 1
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤즈아미도)에톡시)에톡시)아세트산, 하이드로클로라이드 염
Figure 112018100721576-pct00047
(i) 메틸 3-아미노-5- 메톡시벤조에이트
0 ℃에서 MeOH (1 L) 중 3-아미노-5-메톡시벤조산 (47 g, 281 mmol)의 교반 현탁액에 티오닐 클로라이드 (123 mL, 1687 mmol)를 적가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 72시간 동안 교반하였다. 생성된 고체를 여과 분리하고, 디이소프로필 에테르로 세척하여 생성물을 HCl 염으로서 수득하였다. 여액을 증발시키고, 잔류물을 MeOH/에테르로 연마하고, 여과한 뒤, 에테르로 세척하였다. 합쳐진 고체를 DCM (500 mL)에 현탁시키고, sat. aq. NaHCO3 용액 (300 mL)으로 격렬히 교반하면서 염기화하였다. 유기상을 분리하고, 염수 (200 mL)로 세척한 후, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 다음, 감압하에 증발시켜 고체를 얻었다. 고체를 에테르/이소헥산으로 연마하여 부제 화합물 (46 g)을 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.83 (dd, 1H), 6.63 (dd, 1H), 6.37 (t, 1H), 5.42 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.70 (s, 3H).
LCMS m/z 182 (M+H)+ (ES+)
(ii) 메틸 3-((4-((4-(( tert - 부톡시카보닐 )아미노)나프탈렌-1-일) 옥시 )피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤조에이트
tBuOH (400 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 생성물 (10.8 g, 59.6 mmol), tert-부틸 (4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)카바메이트 (예를 들어 WO 2014/162126 참조; 20 g, 53.9 mmol), 미세하게 분쇄된 탄산칼륨 (15.2 g, 110 mmol) 및 BrettPhos G3 예비촉매 (800 mg, 0.883 mmol)의 혼합물을 N2로 충분히 탈기시켰다. 반응물을 질소하에 90 ℃ (블록 온도)에서 2시간 가열하였다. 반응 혼합물을 DCM (500 mL)으로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과한 후, 진공에서 농축시켜 갈색 포말을 수득하였다. 포말을 Et2O (500 mL)로 연마하였다. 생성된 고체를 여과하고, 추가의 Et2O (100 mL)로 세척하고, 진공에서 건조시켜 부제 화합물 (25.6 g)을 회백색/엷은 회색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.37 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.13 - 8.14 (m, 2H), 7.84 (d, 1H), 7.77 (bs, 1H), 7.69 (t, 1H), 7.55 - 7.65 (m, 3H), 7.36 (d, 1H), 6.96 (bs, 1H), 6.62 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 1.53 (s, 9H).
LCMS m/z 516 (M+H)+ (ES+)
(iii) 메틸 3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일) 옥시 )피리딘-2-일)아미노)-5- 메톡시벤조에이트
HCl (iPrOH 중 5 N) (79 mL, 395 mmol)을 DCM (250 mL) 중 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (20 g, 38.8 mmol)의 용액에 첨가하고 반응물을 밤새 교반시켰다. Et2O (300 mL)를 첨가하고, 생성된 침전을 여과 분리한 다음, 추가의 Et2O로 세척하였다. 고체를 DCM (400 mL)과 sat. aq. NaHCO3 용액 (600 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 소수성 프릿을 통해 건조시키고, 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (15.5 g)을 베이지색 포말로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.09 (s, 1H), 8.15 - 8.18 (m, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.75 (t, 1H), 7.69 (t, 1H), 7.63 - 7.65 (m, 1H), 7.43 - 7.47 (m, 2H), 7.11 (d, 1H), 6.95 (t, 1H), 6.72 (d, 1H), 6.56 (dd, 1H), 6.04 (d, 1H), 5.83 (bs, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.75 (s, 3H).
LCMS m/z 416 (M+H)+ (ES+)
(iv) 메틸 3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤조에이트
트리에틸아민 (28 μL, 0.201 mmol)을 iPrOAc (15 mL) 중 페닐 (5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)카바메이트 (예를 들어, WO 2014/162126 참조; 480 mg, 1.223 mmol) 및 상기 단계 (iii)로부터의 생성물 (412 mg, 0.992 mmol)의 용액에 60 ℃ (블록 온도)에서 첨가하고, 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 용액을 실온으로 냉각하고, 진공에서 농축시켜 적색 오일을 얻었다. 조 생성물을 Companion에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, DCM 중 1-5% MeOH) 부제 화합물 (580 mg)을 연한 핑크색 포말로서 수득하였다.
LCMS m/z 714 (M+H)+ (ES+)
(v) 3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤조산, 하이드로클로라이드 염
THF (20 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (580 mg, 0.813 mmol)의 교반 용액에 NaOH (6M aq.) (2 mL, 12.00 mmol)를 첨가하였다. MeOH (5 mL)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 반응물을 진공에서 농축시켜 황색 고체를 얻었다. 고체를 1M HCl (20 mL)에 현탁시키고, 생성된 겔-유사 고체를 여과한 후, 물로 세척하였다. 생성된 고체를 프릿상에서 1시간 동안 건조시키고 40 ℃에서 진공하에 추가 건조시켜 부제 화합물 (526 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다.
LCMS m/z 699.77 (M+H)+ (ES+)
(vi) 메틸 2-(2-(2- 아미노에톡시 ) 에톡시 )아세테이트, 트리플루오로아세트산 염
DCM (2 mL) 중 메틸 2,2-디메틸-4-옥소-3,8,11-트리옥사-5-아자트리데칸-13-오에이트 (예를 들어, WO 2011/037610 참조; 195 mg, 0.703 mmol)의 교반 용액에 TFA (500 μL, 6.49 mmol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 진공에서 농축시킨 후, 톨루엔에서 재농축하여 부제 화합물 (230 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
LCMS m/z 178 (M+H)+ (ES+)
(vii) 메틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤즈아미도)에톡시)에톡시)아세테이트
HATU (120 mg, 0.316 mmol)를 NMP (2 mL) 중 상기 단계 (v)로부터의 생성물 (150 mg, 0.204 mmol), 상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (100 mg, 0.343 mmol) 및 휘니그 염기 (250 μL, 1.431 mmol)의 교반 용액에 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (15 mL)과 EtOAc (10 mL) 사이에 분배시켰다. 수성상을 EtOAc (5 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기물을 물 및 염수로 세척한 후, 소수성 프릿을 통해 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 Companion에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, DCM 중 1-5% MeOH) 부제 화합물 (173 mg)을 무색 검으로서 수득하였다.
LCMS m/z 859 (M+H)+ (ES+)
(viii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤즈아미도)에톡시)에톡시)아세트산, 하이드로클로라이드 염
THF (3 mL) 중 상기 단계 (vii)로부터의 생성물 (173 mg, 0.201 mmol)의 교반 용액에 NaOH (6 M aq.) (0.30 mL, 1.800 mmol)를 첨가하였다. MeOH (1 mL)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 진공에서 농축시켜 황색 고체를 얻었다. 고체를 1M HCl (10 mL)에 현탁시키고, 혼합물을 초음파처리하였다. 생성된 현탁액을 여과한 뒤, 회수한 고체를 물로 세척한 다음, 진공 중 40 ℃에서 밤새 건조시켜 표제 화합물 (140 mg)을 무색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.61 (bs, 1H), 9.53 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.46 (t, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.71 - 7.74 (m, 1H), 7.62 - 7.66 (m, 1H), 7.43 - 7.45 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.73 (bs, 1H), 6.22 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.51 - 3.60 (m, 6H), 3.40 (q, 2H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
LCMS m/z 845 (M+H)+ (ES+)
실시예 2
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00048
(i) 에틸 2-(2-(2- 하이드록시에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
DCM (20 mL) 중 에틸 디아조아세테이트 (1.9 mL, 18.32 mmol)의 용액을 DCM (300 mL) 중 디에틸렌 글리콜 (5.0 mL, 52.7 mmol) 및 로듐(II) 아세테이트 다이머 (160 mg, 0.362 mmol)의 용액에 1시간에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (220 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (2.38 g)을 암청색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.23 (q, 2H), 4.19 (s, 2H), 3.60 - 4.05 (m, 8H), 1.28 (t, 3H).
(ii) 에틸 2-(2-(2-(( 메틸설포닐 ) 옥시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
메탄설포닐 클로라이드 (0.6 mL, 7.70 mmol)를 DCM (20 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 생성물 (1.20 g, 6.24 mmol) 및 Et3N (1.7 mL, 12.20 mmol)의 용액에 0-5 ℃에서 적가하고, 실온으로 가온하여 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM (50 mL)과 물 (30 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 sat. aq. NaHCO3 (30 mL)으로 세척한 다음, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-70% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (1.494 g)을 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz; CDCl3) δ 4.42 - 4.39 (m, 2H), 4.24 (q, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.82 - 3.79 (m, 2H), 3.77 - 3.72 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 1.31 (t, 3H).
(iii) 에틸 2-(2-(2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
DMF (60 mL) 중 3-메톡시-5-니트로페놀 (1.973 g, 11.67 mmol), 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (2.92 g, 10.80 mmol) 및 K2CO3 (4.48 g, 32.4 mmol)의 혼합물을 60 ℃에서 20시간 동안 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시킨 다음, 에테르 (200 mL)와 물 (200 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 sat. aq. NaHCO3 용액 (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척한 다음, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (80 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (3.35 g)을 황색 오일로서 수득하였다.
LCMS m/z 344 (M+H)+ (ES+)
(iv) 에틸 2-(2-(2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
EtOH (20 mL) 및 EtOAc (5 mL) 중 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (3.35 g, 9.76 mmol)의 용액에 Pd/C (5 wt%) (0.5 g, 0.235 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 5 bar (0.5 MPa) H2 분위기하에 8시간 동안 교반하였다. 반응물을 N2로 퍼징한 후, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (3.0 g)을 담황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.75 (d, 2H), 5.68 (t, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.13 (s, 2H), 4.12 (q, 2H), 3.93 - 3.96 (m, 2H), 3.68 - 3.70 (m, 2H), 3.58 - 3.64 (m, 4H), 3.62 (s, 3H), 1.20 (s, 3H).
LCMS m/z 314 (M+H)+ (ES+)
(v) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
THF (5 mL) 중 N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리미딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (예를 들어, WO 2014/162126 참조; 300 mg, 0.526 mmol), 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (247 mg, 0.789 mmol) 및 pTSA 수화물 (30 mg, 0.158 mmol)의 혼합물을 65 ℃에서 40시간 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, EtOAc (100 mL)와 sat. aq. NaHCO3 (50 mL) 사이에 분배시킨 후, 유기층을 1M HCl (50 mL), 물 (50 mL)로 세척하여 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (378 mg)을 포말로서 수득하였다.
LCMS m/z 847 (M+H)+ (ES+)
(vi) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (5 mL) 및 MeOH (2 mL) 중 상기 단계 (v)로부터의 생성물 (376 mg, 0.444 mmol) 및 2 M aq. NaOH (700 μL, 1.400 mmol)의 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하고, 잔류물을 물 (5 mL)에 용해시킨 다음, AcOH로 산성화시켰다. 혼합물을 증발시키고, 잔류물을 Companion에서 크로마토그래피로 정제하여 (RP Flash C18) (40 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 표제 화합물 (72 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz; DMSO-d6) δ 12.57 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.42 (d, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.70 - 7.65 (m, 1H), 7.61 - 7.56 (m, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.80 (brs, 2H), 6.54 (d, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.89 - 3.83 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.69 - 3.64 (m, 2H), 3.60 - 3.54 (m, 4H), 3.51 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
LCMS m/z 819 (M+H)+ (ES+)
실시예 3
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00049
방법 1
(i) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(( tert - 부톡시카보닐 )아미노)나프탈렌-1-일) 옥시 )피리딘-2-일)-아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
DMF (6 mL) 중 tert-부틸 (4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)카바메이트 (예를 들어, WO 2014/162126 참조; 497 mg, 1.340 mmol), 에틸 2-(2-(2-(3-아미노-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 2(iv) 참조; 420 mg, 1.340 mmol) 및 K2CO3 (556 mg, 4.02 mmol)의 혼합물을 N2로 3회 백충전하여 진공하에 탈기시켰다. BrettPhos G3 예비촉매 (37 mg, 0.041 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 80 ℃로 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, EtOAc (70 mL)와 물 (50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 물 (50 mL) 및 염수 (30 mL)로 세척한 다음, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (870 mg)을 무색 포말로서 수득하였다.
LCMS m/z 648 (M+H)+ (ES+)
(ii) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일) 옥시 )피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시-페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
DCM (5 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 생성물 (690 mg, 1.065 mmol) 및 TFA (1 mL, 12.98 mmol)의 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반한 후 증발시켰다. 잔류물을 EtOAc (60 mL)와 sat. aq. NaHCO3 용액 (40 mL) 사이에 분배시킨 다음, 유기층을 분리하고, 물 (40 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 감압하에 증발시켜 부제 화합물 (572 mg)을 갈색 검으로서 수득하였다.
LCMS m/z 548 (M+H)+ (ES+)
(iii) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
THF (10 mL) 중 페닐 (5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)카바메이트 (예를 들어, WO 2014/162126 참조; 490 mg, 1.249 mmol), 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (570 mg, 1.041 mmol) 및 Et3N (50 μL, 0.359 mmol)의 혼합물을 환류하에 24시간 동안 가열하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (736 mg)을 포말로서 수득하였다.
LCMS m/z 844 (M+H)+ (ES+)
(iv) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (8 mL) 및 MeOH (3 mL) 중 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (803 mg, 0.892 mmol) 및 aq. 2 M NaOH (1.3 mL, 2.60 mmol)의 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (3 mL)로 산성화시킨 후 진공에서 농축시켜 옅은색 고체를 얻었다. 잔류물을 Companion에서 크로마토그래피로 정제하여 (RP Flash C18) (40 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 표제 화합물 (653 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.55 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.67 - 7.71 (m, 1H), 7.58 - 7.62 (m, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.59 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 3.93 - 3.96 (m, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.69 - 3.71 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.55 - 3.61 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
LCMS m/z 818 (M+H)+ (ES+)
방법 2
(I) 에틸 2-[2-(2- 벤질옥시에톡시 ) 에톡시 ]아세테이트
5 L 플라스크에 60% NaH (73.5 g, 1.8375 mol) 및 THF (2.3 L)를 질소하에 첨가하였다. 생성된 슬러리를 0-5 ℃로 냉각시켰다. THF (700 mL)에 용해시킨 2-(2-벤질옥시에톡시)에탄올 (300 g, 1.5287 mol)을 1시간에 걸쳐 적가하였다. 적가하는 동안 반응이 진행함에 따라 발열 및 가스 방출이 관찰되었다. 반응물을 40분 동안 교반하였다. 이어 에틸 브로모아세테이트 (207 mL, 1.8375 mol)를 1시간에 걸쳐 온도를 <5 ℃로 유지하면서 적가하였다. 반응이 진행함에 따라 혼합물이 황색으로 변하였다. 반응물을 2시간 동안 교반하고, 실온으로 가온하였다. LC는 생성물이 68%이고 출발물질이 1.6%임을 나타내었다. 반응물에 TBME (1 L) 및 물 (1 L)을 첨가하였다. 유기물을 분리하고, 수성상을 TBME (2　L 및 1 L)로 재추출하였다. 합쳐진 유기물을 건조시키고, 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 잔류물 (462 g)을 실리카 (3 kg) 상에서 10% EtOAc:헵탄 (20 L), 20% EtOAc:헵탄 (10 L), 25% EtOAc:헵탄 (20 L) 및 30% EtOAc:헵탄 (10 L)로 용출시키면서 정제하였다. 생성물-함유 분획을 진공에서 농축시켜 322.6 g (74% 수율)의 부제 화합물을 얻었으며, 1H NMR 분석으로 순도는 >95%인 것으로 나타났다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25-7.37 (m, 5H), 4.58 (s, 2H), 4.22 (q, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.63-3.76 (m, 8H), 1.28 (t, 3H).
(II) 에틸 2-[2-(2- 하이드록시에톡시 ) 에톡시 ]아세테이트
5L 플라스크에 10% Pd/C (32 g)를 질소하에 채우고, 이어 EtOH (3.2 L)에 용해시킨 상기 단계 (I)의 생성물 (320 g, 1.133 mol)을 가하였다. 반응물을 수소로 4시간 퍼징한 후, 수소 분위기하에 밤새 교반하였다. 1H NMR은 2.5%의 출발물질이 남아 있음을 나타내었으며, 이에 따라 반응물을 수소로 2시간 동안 퍼징하였다. 이후 1H NMR은 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과한 후, 에탄올 (1 L)로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 부제 화합물을 얻었다. 이어 잔류물을 톨루엔 (300 mL) 및 DCM (2 × 300 mL)로부터 진공 중에 농축시켜 다음 단계에서 반응할 수도 있는 남아 있는 미량의 에탄올을 제거하였다. 용매를 감안해 총 217.8 g의 부제 화합물 (100% 수율)을 수득하였다.
대안적으로, 부제 화합물을 다음 방법으로 제조하였다:
20 L 베슬에 10% Pd/C (100 g)를 질소하에 채우고, 이어 DCM (10.3 L)에 용해시킨 상기 단계 (I)의 생성물 (1003 g)을 가하였다. 반응물을 수소 분위기하에 밤새 교반하고 NMR 분석에 따라 반응이 완결되었음을 확인하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과한 후, DCM (3 × 1 L)으로 세척하였다. 이 생성물을 추가 정제없이 직접 다음 단계 (메실화 반응)에 사용하였다 (단계 (II) 및 (III)에 걸친 수율 86%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.23 (q, 2H), 4.13 (s, 2H), 3.68-3.77 (m, 6H), 3.59-3.63 (m, 2H), 2.51-2.57 (br m, 1H), 1.28 (t, 3H).
(III) 에틸 2-[2-(2- 메틸설포닐옥시에톡시 ) 에톡시 ]아세테이트
10 L 플라스크에 상기 단계 (II)의 생성물 (219 g, 1.139 mol), DCM (4.4 L) 및 트리에틸아민 (326 mL, 2.349mol)을 질소하에 첨가하였다. 트리에틸아민 첨가로 용액이 황색으로 변하였다. 용액을 0-5 ℃로 냉각시키고, 메탄설포닐 클로라이드 (108.5 mL, 1.4 mol)를 적가하였다. 반응물을 8 ℃로 가온하였고, 이때 반응 혼합물의 TLC은 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (4.4 L)와 물 (2 L) 사이에 분배시켰다. 유기물을 분리하고, sat. 수성 NaHCO3 (2 L) 및 염수 (2 L)로 세척하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (1 L)로 역추출하였다. 합쳐진 유기물을 건조시키고, 여과한 뒤, 진공에서 농축시켜 부제 화합물을 적색 오일로서 수득하였다 (297 g, 97%).
(IV) 에틸 2-(2-(2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
5 L 플랜지 플라스크에 3-메톡시-5-니트로페놀 (126.8 g, 0.749　mol), 탄산칼륨 (288 g, 2.086 mol), DMF (2536 mL) 및 상기 단계 (III)의 생성물 (198.4 g 활성제, 0.7348 mol)을 질소하에 첨가하였다. 반응물을 60 ℃로 밤새 가열하였다. LC는 생성물이 95.8%이고 출발물질 (3-메톡시-5-니트로페놀)이 1.45%임을 나타내었다. 반응물을 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 20 L 플라스크로 옮겼다. 혼합물에 TBME (10 L) 및 물 (6 L)을 첨가하였다. 유기물을 분리하고, 건조전에 sat. 수성 NaHCO3 (6 L) 및 sat. 염수 (6 L)로 세척한 뒤, 여과하고 진공에서 농축하여 용매를 감안해 총 243 g의 부제 화합물을 수득하였다 (95% 수율). LC는 순도가 97.7% (254 nm)임을 나타내었다.
(V) 에틸 2-(2-(2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
5 L 수소화 베슬에 5% Pd/C (48.6 g), 상기 단계 (IV)의 생성물 (243 g, 0.708 mol) 및 에탄올 (2.5 L)을 채웠다. 베슬을 질소로 3회 퍼징한 후 수소 분위기하에 5 bar (0.5 MPa)에서 6시간 동안 교반하였다 (수소로 3회 퍼징). LC는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 혼합물을 여과한 뒤, 에탄올 (1200 mL)로 세척하였다. 이어 유기물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 헵탄에서 농축시켰다 (2 × 500 mL). 212 g (96% 수율)의 부제 화합물을 수득하였으며, LC는 순도가 98.1% (254 nm)임을 나타내었다. 1H NMR은 순도가 >95%임을 나타내었다.
(VI) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(( tert - 부톡시카보닐 )아미노)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)-아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
5L 플랜지 플라스크에 상기 단계 (V)의 생성물 (190 g, 0.6065 mol), tert-부틸 (4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)카바메이트 (예를 들어, WO 2014/162126 참조; 246.9 g, 0.6658 mol), DMF (3.4 L) 및 탄산칼륨 (272 g, 1.97 mol)을 질소하에 첨가하였다. 반응물을 3회 진공 탈기시키고, 매회 질소를 방출시켰다. 생성된 슬러리를 40 ℃로 가열한 후, Brettphos G3 Pd (13.66 g, 0.015 mol)를 첨가하였다. 혼합물을 70 ℃로 가열하고, 30분 동안 교반하였다. LC는 상기 단계 (V)의 생성물이 1% 미만으로 남아 있음을 나타내었다. 이는 NMR에 의해 확인되었다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과한 뒤, 고체를 DMF (700 mL)로 세척하였다. 이어 여액을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (6 L)에 용해시킨 다음, sat. 염수 (2 × 4 L)로 세척하였다. 유기물을 건조시키고, 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 393 g (100% 수율, 용매 감안)의 부제 화합물을 얻었고 NMR은 순도가 ~95%임을 나타내었고, LC는 순도가 94.5%임을 나타내었다 (254 nm).
대안적으로, 부제 화합물을 다음 방법으로 제조하였다:
50L 베슬에 상기 단계 (V)의 생성물 (967 g) 및 THF (17425 mL)를 질소하에 채웠다. 이에 이어 tert-부틸 (4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)카바메이트 (예를 들어, WO 2014/162126 참조 ; 1254 g) 및 탄산칼륨 (1387 g)을 채웠다. 베슬을 진공 탈기시키고 (×3), 질소로 방출시켰다 (×3). 이어 반응물에 Pd-173 (39.2 g)을 채웠다. 반응물을 밤새 가열 환류시키고, LC 분석으로 출발물질이 미량임을 확인하였다. 반응물을 60 ℃로 냉각시키고, Pd-173 (6.13 g)를 추가하였다. 반응물을 1시간 동안 가열 환류시키고 LC 분석으로 반응이 완결되었음을 확인하였다. 반응 혼합물을 여과한 뒤, 잔류물을 THF (9.2 L)로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 및 헵탄으로 농축하여 잔류 THF를 제거하였다. 이어 물질을 크로마토그래피 (12 kg 실리카)를 통해 50% 에틸 아세테이트:헵탄 (60 L), 70% 에틸 아세테이트:헵탄 (60 L) 및 85% 에틸 아세테이트:헵탄 (20 L)으로 용출시키면서 정제하였다. 1896 g (95% 수율, 용매 (EtOAc) 감안)의 부제 화합물을 얻었고 NMR은 용매를 제외한 순도가 >95%임을 나타내었으며, LC는 순도가 97.4%임을 나타내었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (d, 1H), 7.96 (d, 2H), 7.80-7.88 (br d, 1H), 7.48-7.60 (m, 2H), 7.20 (d, 1H), 6.98 (br s, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.38-6.41 (m, 4H), 6.13 (m, 1H), 4.10-4.24 (m, 4H), 3.90-3.94 (m, 2H), 3.77-3.83 (m, 6H), 3.68 (s, 3H), 1.57 (s, 9H), 1.24-1.30 (m, 3H).
(VII) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일) 옥시 )피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시-페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
5L 플랜지 플라스크에 상기 단계 (VI)의 생성물 (393 g, 0.6067 mol), DCM (1.742 L) 및 TFA (350 mL, 4.57 mol)를 질소하에 첨가하였다. 반응물을 밤새 30 ℃로 가열하고, LC 분석으로 18% 출발물질이 남아 있음을 확인하였다. TFA (100 mL)를 반응물에 첨가하고, 2시간 동안 가열 환류시켰다. LC는 1.2% 출발물질이 남아 있음을 나타내었다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 톨루엔 (1 L)과 공비시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (3 L)로 희석하고 sat 수성 NaHCO3 (4 L)으로 주의하여 처리하였으며, 이때 가스 방출이 관찰되었다. 유기물을 분리하고, 더 많은 sat. 수성 NaHCO3 (2 L)로 세척하였다. 필요에 따라 합쳐진 수성상을 염기화하였다. 수성상을 에틸 아세테이트 (1 L)로 추출하였다. 합쳐진 유기물을 건조시키고, 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 DCM - 5% MeOH:DCM으로 용출시키면서 크로마토그래피 (4.5 kg 실리카)하였다. 생성물-함유 분획을 합치고 진공에서 농축시켰다. 총 292 g의 부제 화합물 (DCM 감안)을 얻었으며 (80% 수율), 1H NMR 분석은 >95% 순도를 나타내었고 LC는 순도가 98.5% (254 nm)임을 나타내었다.
(VIII) 에틸 2-(2-(2-(3- 메톡시 -5-((4-((4-(( 페녹시카보닐 )아미노)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
50 L 베슬에 상기 단계 (VII)의 생성물 (~10% THF를 함유한 1478 g의 생성물) 및 THF (20.825 L)를 채웠다. 이어서 NaHCO3 (339.7 g)을 가하였다. 혼합물을 -10 ℃로 냉각시키고, 페닐 클로로포르메이트 (338.5　mL)를 채웠다. 반응물을 1시간 동안 교반하였고, LC는 생성물이 97.5%이고 출발물질이 0.9%임을 나타내었다. 이어 반응물을 실온으로 가온하였고, LC는 생성물이 98%이고 출발물질이 0.32%임을 나타내었다. 반응 혼합물을 여과한 뒤, THF (2.5 L)로 세척하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트:THF (2.9L:262 mL)에 용해시키기 전 2.6 kg으로 농축한 다음, 진공 전달로 헵탄 (26.715 L)을 함유한 50 L 베슬에 첨가하였다. 생성물이 침전되었다. 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 여과하였다. 이어 고체를 진공하에 40 ℃에서 밤새 건조시켰다. 총 1843 g (102% 수율, 용매 감안)의 부제 화합물을 수득하였으며, NMR은 용매를 제외한 순도가 >95%임을 나타내었고, LC는 순도가 95.9%임을 나타내었다.
1H NMR (400 MHz, (CD3)2SO) δ 10.00-10.40 (br, 2H), 8.28 (d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60-7.71 (m, 2H), 7.39-7.50 (m, 3H), 7.22-7.28 (m, 3H), 6.78 (dd, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.24-6.29 (m, 2H), 4.02-4.09 (4H), 3.96-3.99 (m, 2H), 3.62-3.69 (m, 5H), 3.50-3.58 (m, 4H), 1.14 (t, 3H).
(IX) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
10 L 플라스크에 iPrOAc (3.15 L)에 용해시킨 상기 단계 (VII)의 생성물 (262.8 g, 0.4799 mol)을 질소하에 첨가하였다. 혼합물을 40 ℃로 가열하고, 페닐 N-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-((메틸설포닐)아미노)페닐)카바메이트 (예를 들어 WO 2014/162126 참조; 197.1 g, 0.5022 mol)를 첨가하였다. 혼합물을 50 ℃로 가열하여 용액을 얻고 이를 트리에틸아민 (13.14 mL, 0.094 mmol)으로 처리한 뒤 반응물을 밤새 68 ℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물의 일부 (38 g)를 크로마토그래피를 통해 25% EtOAc:DCM - EtOAc로 용출시키면서 정제하였다. 생성물 함유 분획을 진공에서 농축시켰고, LC 분석 (254 nm에서)은 나머지에 대한 순도가 98.6%임을 나타내었다. 이 물질을 벌크와 합쳐 실리카 (10 kg) 상에서 25% EtOAc:DCM (80 L), DCM (20 L), 1% MeOH:DCM (20 L), 3% MeOH:DCM (20 L) 및 5% MeOH:DCM (50 L)로 용출시키면서 정제하였다. 생성물 함유 분획을 합치고 진공에서 농축시켰다. 이로써 LC 순도 95.4% 및 NMR 순도 ~90%로 375　g의 물질을 얻었다. 이 물질을 크로마토그래피를 통해 추가 정제하였다 (10 kg 실리카). 칼럼을 1% MeOH:DCM (60　L), 1.5% MeOH:DCM (20 L), 2% MeOH:DCM (20 L), 2.5% MeOH:DCM (20 L), 3% MeOH:DCM (40 L) 이어 5% MeOH:DCM (40 L)로 용출시켰다. 가장 순수한 분획들을 합치고 진공에서 농축시켜 324 g의 부제 화합물을 얻었고, LC 분석 (254 nm에서)은 순도가 98.9%임을 나타내었고, NMR은 순도가 ~95%임을 나타내었다.
대안적으로, 부제 화합물을 다음 방법으로 제조하였다:
상기 단계 (VIII)의 생성물 (1902 g) 및 THF (19.02 L)를 반응 베슬에 채웠다. 이어 반응물에 N-(3-아미노-5-(tert-부틸)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (예를 들어, Cirillo, P. F. et al., WO 2002/083628, 24 October 2002 참조; 815 g) 및 트리에틸아민 (380.4 mL)을 채웠다. 반응물을 밤새 가열 환류시켰고, LC 분석은 반응이 완결되었음을 나타내었다 (86% 생성물 및 0.4% 출발물질). 반응물을 실온으로 냉각하고, 여과하여 트리에틸아민 하이드로클로라이드를 제거하였다. 고체를 THF (3.8 L)로 세척하였다. 여액을 3 등분하고, 농축시켰다. 이어 이 부분들을 40% 에틸 아세테이트:헵탄 (3 L)으로 농축하여 THF 대부분을 제거하고, 칼럼 크로마토그래피에 적용하였다. 3 등분 각각을 크로마토그래피를 통해 75% 에틸 아세테이트:헵탄 (20 L), 80% 에틸 아세테이트:헵탄 (120 L) 및 이어 85% 에틸 아세테이트:헵탄 (40 L)으로 용출시키면서 정제하였다 (부분당 10 kg 실리카, 조 물질을 2 L DCM과 칼럼에 로딩). LC에 의한 98.0% 순도 및 NMR 분석에 의한 용매를 제외한 순도 >95%의 물질을 수득하였다. 부제 화합물을 83% 수율로 분리하였다 (687 g).
1H NMR (400 MHz, (CD3)2SO) δ 9.38 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.09-8.13 (m, 2H), 7.86 (d, 1H), 7.70 (t, 1H), 7.60 (t, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.02-6.08 (m, 2H), 4.09-4.13 (m, 4H), 3.96-3.99 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.69-3.72 (m, 2H), 3.58-3.65 (m, 7H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H), 1.18 (t, 3H).
(X) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
10 L 플라스크에 상기 단계 (IX)의 생성물 (317 g, 0.374 mol), THF (2.54 L) 및 메탄올 (950 mL)을 질소하에 첨가하였다. 이어 2 M NaOH (633　mL, 1.266 mol)를 첨가하고 약간의 발열을 관찰하였다. 반응물을 1시간 동안 교반하였다. LC 분석은 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응물에 아세트산 (633 mL)을 첨가하고, 또 다시 약간의 발열을 관찰하였다. 이어 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 점성 오일을 얻었다. 물 (3.2 L)을 첨가하고, 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 먼저 오일상 고체가 플라스크 면에 들러붙어 스파툴라로 베슬 면을 긁어 냈으며, 고체는 유동 응집 고체가 되었다. 고체를 여과한 뒤, 물 (500 mL) 및 헵탄 (1.5 L)으로 세척하였다. 이어 고체를 10% 메탄올:DCM에 용해시키기 전에 50 ℃에서 밤새 진공하에 건조시킨 다음, 10% 메탄올:DCM (60 L), 20% 메탄올:DCM (60　L)에 이어 메탄올로 용출시키면서 크로마토그래피 (6 kg 실리카)하였다. 가장 깨끗한 분획들을 합치고 진공에서 농축시켜 점성 오일을 얻었다. 잔류물을 THF (2 × 2L)로 농축하여 포말상 고체를 얻었다. 고체 (297 g)는 8.55% THF 및 2.29% AcOH를 함유하였다. 물질을 물 (900 mL)에서 밤새 2회 슬러리화한 후, 여과하여 LC 분석에 의한 순도 98.2% 및 NMR에 의한 순도 >95%의 표제 화합물 (262 g, 용매 감안, 85% 수율) 268 g을 수득하였다. 물질은 2.11% THF 및 0.26% AcOH를 함유하였다.
실시예 4
다음 화합물들을 위에서 설명한 것과 유사한 방법으로 제조하였다.
(a) 2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설포닐)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00050
b) 2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설피닐)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00051
(c) 2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설포닐)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설포닐)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00052
(d) 2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설피닐)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설포닐)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00053
(e) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(트리플루오로메틸)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00054
(f) 6-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)피리다진-3-카복실산
Figure 112018100721576-pct00055
(g) 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-1,2,4-옥사디아졸-3-카복실산
Figure 112018100721576-pct00056
(h) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-사이클로프로폭시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00057
(i) 1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)사이클로프로판-1-카복실산
Figure 112018100721576-pct00058
(j) 4-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-2-카복실산
Figure 112018100721576-pct00059
(k) 1-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-3-메틸-1H-피라졸-4-카복실산
Figure 112018100721576-pct00060
(l) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-에틸페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00061
실시예 5
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2-( 메톡시 -d3)-3-( 메틸설폰아미도 )페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00062
(i) 5-( tert -부틸)-2-( 메톡시 -d3)-1,3- 디니트로벤젠
DMF (50 mL) 중 4-(tert-부틸)-2,6-디니트로페놀 (5 g, 20.81 mmol), 탄산세슘 (13.56 g, 41.6 mmol) 및 요오도메탄-d3 (1.6 mL, 25.7 mmol)의 혼합물을 실온에서 4일 동안 교반한 후 에테르 (300 mL)와 물 (300 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 물 (200 mL)로 세척한 다음, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 감압하에 증발시켜 부제 화합물 (4.3 g)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 2H), 1.40 (s, 9H).
(ii) 5-( tert -부틸)-2-( 메톡시 -d3)-3- 니트로아닐린
EtOH (70 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 생성물 (4.25 g, 16.52 mmol) 및 사이클로헥산 (2.5 mL, 24.68 mmol)의 용액에 10% Pd/C (500 mg, Type 39, 물과의 50%w/w 페이스트)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 70 ℃에서 1시간 동안 가열한 후, 추가 분량의 사이클로헥산 (5 mL)을 첨가하였다. 1시간 동안 가열한 후, 3번째 분량의 사이클로헥산 (5 mL)을 첨가하고, 2시간 동안 가열한 다음, 반응 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 감압하에 증발시키고, 잔류물을 EtOAc/에테르 (300 mL, 1/1)에 용해시킨 다음, 0.2M aq HCl (2×150 mL), 염수 (200 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 감압하에 증발시켜 부제 화합물 (3.43 g)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.27 (d, 1H), 7.05 (d, 1H), 1.31 (s, 9H).
m/z 228 (M+H)+ (ES+)
(iii) N-(5-( tert -부틸)-2-( 메톡시 -d3)-3- 니트로페닐 ) 메탄설폰아미드
0-5 ℃에서 DCM (25 mL) 중 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (3.42 g, 15.05 mmol)의 교반 용액에 피리딘 (7 mL, 87 mmol)에 이어 MsCl (1.9 mL, 24.38 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고, 3일 동안 교반하였다. 혼합물을 1M HCl (200 mL)에 부어 DCM (200 mL)으로 추출하였다. 유기상을 1M HCl (100 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척한 다음, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (120 g 칼럼, 0-40% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (3.9 g)을 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.88 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 3.09 (s, 3H), 1.36 (s, 9H).
(iv) N-(3-아미노-5-( tert -부틸)-2-( 메톡시 -d3)페닐) 메탄설폰아미드
EtOH (40 mL) 중 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (3.85 g, 12.61 mmol) 및 10% Pd-C (500 mg)의 혼합물을 5 bar에서 4시간 동안 수소화시켰다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여액을 감압하에 증발시켜 고체를 얻고 에테르/이소헥산으로 연마하였다. 고체를 여과한 뒤, 건조시켜 부제 화합물 (2.92 g)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.70 (s, 1H), 6.58 (s, 2H), 4.91 (s, 2H), 3.00 (s, 3H), 1.20 (s, 9H).
m/z 276 (M+H)+ (ES+)
(v) 페닐 (5-( tert -부틸)-2-( 메톡시 -d3)-3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 카바메이트
DCM (20 mL) 및 THF (10 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (1 g, 3.63 mmol) 및 NaHCO3 (0.610 g, 7.26 mmol)의 혼합물에 페닐 클로로포르메이트 (470 μL, 3.75 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 20시간 동안 교반한 후, THF (10 mL)에 이어 페닐 클로로포르메이트 (150 μL)를 첨가하였다. 혼합물을 5시간 동안 교반한 뒤, DCM (100 mL)과 물 (50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 감압하에 증발시켰다. 잔류물을 에테르/이소헥산으로 연마하고, 여과한 뒤, 건조시켜 부제 화합물 (1.415 g, 3.54 mmol, 98% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.01 (bs, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.35 (bs, 1H), 7.32-7.27 (m, 2H), 7.25-7.21 (m, 2H), 6.78 (s, 1H), 3.11 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
m/z 396 (M+H)+ (ES+)
(vi) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-(메톡시-d3)-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 200 mg, 0.365 mmol) 및 상기 단계 (v)로부터의 생성물 (152 mg, 0.383 mmol)을 iPrOAc (3 mL, 25.6 mmol)에 용해시킨 다음, NEt3 (10.1 μL, 0.073 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을75 ℃에서 16시간 동안 교반하고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물의 LCMS는 부제 화합물이 주 성분임을 나타내었다.
m/z 849.3 (M+H)+ (ES+)
조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 백색 고체 (213 mg)를 얻고 하기 단계 (ii)에 직접 사용하였다.
(vii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-(메톡시-d3)-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (10 mL) 및 EtOH (4 mL) 중 상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (213 mg, 0.251 mmol)의 교반 용액을 NaOH (2M aq.) 용액 (0.452 mL, 0.903 mmol)으로 처리하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 AcOH (0.5 mL, 8.73 mmol)로 처리하고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 물 (10 mL)로 연마하고 여과하였다. 여액을 포름산 (0.2 mL)으로 처리하고, 48시간 동안 방치하여 침전을 얻은 뒤 여과하였다. 합쳐진 고체를 정제에 적용하였다.
총 208 mg의 조 생성물을 크로마토그래피 (RP Flash C18, 26 g 칼럼, 15-50% MeCN/10 mM 중탄산암모늄)로 정제하여 표제 화합물 (128 mg)을 옅은 핑크색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.88 (s, 1H) 8.30 (d, 1H), 8.19 (d,, 1H), 8.11 (dd, 2H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.05 - 3.95 (m, 4H), 3.71 (dd, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.60 (s, 4H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 821.3 (M+H)+ (ES+)
실시예 6
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-N-(메틸설포닐)아세트아미드
Figure 112018100721576-pct00063
실온에서 건조 DMF (2 mL) 중 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산 (상기 실시예 3 참조; 111 mg, 0.136 mmol) 및 메탄설폰아미드 (19.36 mg, 0.204 mmol)의 용액에 DIPEA (71.1 μL, 0.407 mmol)에 이어 HATU (77 mg, 0.204 mmol)를 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 추가 분량의 메탄설폰아미드 (19.36 mg, 0.204 mmol), DIPEA (71.1 μL, 0.407 mmol) 및 HATU (77 mg, 0.204 mmol)를 반응물에 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 이어 반응물을 EtOAc (10 mL)와 물 (10 mL) 사이에 분배하였다. 수성층을 EtOAc (2 × 10 mL)로 추출하였다. 유기층을 합쳐 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18,12 g 칼럼, 15-50% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고, 포름산으로 pH를 4로 조정한 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 생성된 고체를 40 ℃에서 진공하에 밤새 건조시켜 표제 화합물 (11 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.40 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.19 (d, 2H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (dd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.90 - 6.75 (m, 2H), 6.57 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.05 (t, 1H), 3.96 (dd, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.71 - 3.66 (m, 7H), 3.56 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 895.5 (M+H)+ (ES+)
실시예 7
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸카바모일 )페닐) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00064
(i) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸카바모일)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 125 mg, 0.228 mmol)를 50 ℃에서 iPrOAc (3 mL)에 용해시킨 다음, 페닐 (5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸카바모일)페닐)카바메이트 (WO 2014/162126 참조; 85 mg, 0.240 mmol)를 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 혼합물이 용액으로 될 때까지 (약 5분) 교반하고, NEt3 (6.36 μL, 0.046 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 75 ℃ (블록 온도)로 가열하고, 16시간 동안 교반시켰다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (161 mg)을 무색 유리질로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (s, 1H), 8.88 (d, 2H), 8.44 (d, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.17 (q, 1H), 8.14 - 7.99 (m, 2H), 7.87 (d, 1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.57 (dd,, 1H), 6.09 (d,, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.16 - 4.04 (m, 4H), 4.03 - 3.94 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.76 - 3.68 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.64 - 3.47 (m, 4H), 2.82 (d, 3H), 1.28 (s, 9H), 1.18 (t, 3H).
m/z 810.6 (M+H)+ (ES+)
(ii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸카바모일)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 단계 (i)로부터의 화합물 (161 mg, 0.199 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq.) (350 μL, 0.700 mmol)를 첨가하고, 생성된 황색 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (82 μL, 1.427 mmol)로 산성화시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 24 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고 포름산으로 pH를 pH 6으로 조정하였다. 휘발성 용매를 진공에서 제거하였다. 형성된 침전을 여과 수집하여 표제 화합물 (70 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.57 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.88 (d, 2H), 8.44 (d, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.17 (q, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.03 (s, 2H), 3.98 (dd, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.75 - 3.68 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.63 - 3.52 (m, 4H), 2.82 (d, 3H), 1.28 (s, 9H).
m/z 782.0 (M+H)+ (ES+)
실시예 8
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설피닐 )페닐) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00065
(i) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설피닐)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 125 mg, 0.228 mmol)를 50 ℃에서 iPrOAc (2 mL)에 용해시킨 다음, 페닐 (5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설피닐)페닐)카바메이트 (WO 2015/092423 참조; 87 mg, 0.240 mmol)를 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 혼합물이 용액으로 될 때까지 (약 2분) 교반하고, NEt3 (6.36 μL, 0.046 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 75 ℃ (블록 온도)로 가열하고, 16시간 동안 교반시켰다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (172 mg)을 무색 유리질로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.41 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.50 (d, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.18 - 8.05 (m, 2H), 7.89 - 7.83 (m, 1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.46 - 7.31 (m, 2H), 6.91 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.18 - 4.06 (m, 4H), 4.03 - 3.93 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.76 - 3.67 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.63 - 3.55 (m, 4H), 2.79 (s, 3H), 1.32 (s, 9H), 1.18 (t, 3H).
m/z 815.5 (M+H)+ (ES+)
(ii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설피닐 )페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 화합물 (172 mg, 0.211 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq.) (350 μL, 0.700 mmol)를 첨가하고, 생성된 황색 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (82 μL, 1.427 mmol)로 산성화시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-50% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고 포름산으로 pH를 pH 5로 조정하였다. 용매를 제거하여 표제 화합물 (130 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.51 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.50 (d, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.14 - 8.03 (m, 2H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.65 - 7.54 (m, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.36 (d, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.77 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.10 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.94 (t, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.70 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.62 - 3.55 (m, 4H), 2.79 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
m/z 787.0 (M+H)+ (ES+)
실시예 9
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설포닐 )페닐) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00066
(i) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설포닐)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 125 mg, 0.228 mmol)를 50 ℃에서 iPrOAc (2 mL)에 용해시킨 다음, 페닐 (5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설포닐)페닐)-카바메이트 (WO 2015/092423 참조 ; 90 mg, 0.240 mmol)를 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 약 5분 동안 교반한 다음, THF (1 mL)를 첨가하였다. 반응물이 용액으로 된 후 NEt3 (6.36 μL, 0.046 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 75 ℃ (블록 온도)로 가열하고, 16시간 동안 교반시켰다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (151 mg)을 무색 유리질로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.46 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.68 (d, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.12(s, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.88 (dt, 1H), 7.72 (ddd, 1H), 7.62 (ddd, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.19 - 4.06 (m, 4H), 4.04 - 3.97 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.78 - 3.69 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.64 - 3.55 (m, 4H), 3.35 (s, 3H), 1.32 (s, 9H), 1.18 (t, 3H).
LCMS m/z 831.5 (M+H)+ (ES+)
(ii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설포닐)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 단계 (i)로부터의 화합물 (151 mg, 0.182 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq.) (350 μL, 0.700 mmol)를 첨가하고, 생성된 황색 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (82 μL, 1.427 mmol)로 산성화시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-50% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고 포름산으로 pH를 pH 5로 조정하였다. 용매를 제거하여 표제 화합물 (114 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.62 (s, 1H), 9.49 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.68 (d, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.14 - 8.05 (m, 2H), 7.95 - 7.80 (m, 1H), 7.72 (ddd, 1H), 7.62 (ddd, J = 8.1, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 6.89 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.10 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.02 (s, 2H), 4.00 - 3.92 (m, 5H), 3.76 - 3.68 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.63 - 3.56 (m, 4H), 3.34 (s, 3H), 1.32 (s, 9H).
m/z 803.0 (M+H)+ (ES+)
실시예 10
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-3-( 디메틸포스포릴 )-2- 메톡시페닐 ) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00067
(i) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(디메틸포스포릴)-2-메톡시페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 125 mg, 0.228 mmol)를 50 ℃에서 iPrOAc (2 mL)에 용해시킨 다음, 페닐 (5-(tert-부틸)-3-(디메틸포스포릴)-2-메톡시페닐)-카바메이트 (WO 2015/092423 참조 ; 90 mg, 0.240 mmol)를 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 약 5분 동안 교반하고, THF (1 mL)를 첨가하였다. NEt3 (6.36 μL, 0.046 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 75 ℃ (블록 온도)로 가열한 후, 생성된 용액을 75 ℃에서 16시간 동안 교반시켰다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-10% MeOH/DCM) 부제 화합물 (169 mg)을 연핑크색 유리질로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.22 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.08 - 8.03 (m, 2H), 7.87 (d, 1H), 7.71 (t, 1H), 7.65 - 7.57 (m, 1H), 7.43 - 7.34 (m, 2H), 6.90 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.19 - 4.05 (m, 4H), 4.03 - 3.94 (m, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.64 - 3.53 (m, 4H), 2.58 (s, 3H), 1.78 (s, 3H), 1.75 (s, 3H), 1.30 (s, 9H), 1.18 (t, 3H).
m/z 829.5 (M+H)+ (ES+)
(ii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(디메틸포스포릴)-2-메톡시페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 화합물 (169 mg, 0.204 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq.) (350 μL, 0.700 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (82 μL, 1.427 mmol)로 산성화시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-50% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고 포름산으로 pH를 pH 5로 조정하였다. 용매를 제거하여 표제 화합물 (131 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.42 (d, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.16 - 8.06 (m, 2H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.41 - 7.31 (m, 2H), 6.85 (t, 1H), 6.77 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 3.99 - 3.92 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.74 - 3.67 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.62 - 3.53 (m, 4H), 1.76 (s, 3H), 1.73 (s, 3H), 1.31 (s, 9H).
m/z 801.0 (M+H)+ (ES+)
실시예 11
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-(N- 메틸메틸설폰아미도 )페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00068
(i) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(N-메틸메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 125 mg, 0.228 mmol)를 50 ℃에서 iPrOAc (2 mL)에 용해시킨 다음, 페닐 (5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(N-메틸메틸설폰아미도)-페닐)카바메이트 (WO 2016/051187 참조 ; 97 mg, 0.240 mmol)를 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 약 5분 동안 교반하였고, 이때 반응물이 용해되었다. NEt3 (6.36 μL, 0.046 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 75 ℃ (블록 온도)로 가열한 다음, 용액을 75 ℃에서 4시간 동안 교반시켰다. 용매를 제거하고, 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (83 mg)을 연핑크색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.19 - 4.03 (m, 4H), 3.98 (dd, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.71 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.64 - 3.56 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 1.29 (s, 9H), 1.18 (t, 3H).
m/z 860.5 (M+H)+ (ES+)
(ii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(N-메틸메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 화합물 (83 mg, 0.097 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq.) (175 μL, 0.350 mmol)를 첨가하고, 생성된 황색 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (82 μL, 1.427 mmol)로 산성화시키고 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-50% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고 포름산으로 pH를 pH 5로 조정하였다. 용매를 제거하여 표제 화합물 (57 mg)을 연핑크색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.73 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.15 - 8.04 (m, 2H), 7.90 - 7.82 (m, 1H), 7.67 (ddd, 1H), 7.59 (ddd, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.74 (d, 2H), 6.60 (dd,1H), 6.12 (d, 1H), 6.02 (t, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 5H), 3.78 (s, 2H), 3.72 - 3.66 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.59 - 3.51 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 3.14 (s, 3H), 1.29 (s, 9H).
m/z 832.0 (M+H)+ (ES+)
실시예 12
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)푸란-3-카복실산
Figure 112018100721576-pct00069
(i) 메틸 5-((2- 하이드록시에톡시 ) 메틸 )푸란-3- 카복실레이트
0 ℃에서 DMSO (3 mL) 중 건조 에탄-1,2-디올 (0.259 mL, 4.58 mmol)의 교반 용액에 tBuOK (141 mg, 1.260 mmol)를 10분에 걸쳐 천천히 나누어 첨가하였다. 생성된 용액을 동일 온도에서 30분 더 교반하고 TBAI (42.3 mg, 0.115 mmol)를 첨가하였다. DMSO (1 mL) 중 메틸 5-(클로로메틸)푸란-3-카복실레이트 (200 mg, 1.146 mmol)의 균질 용액을 상기 반응 혼합물에 적가하고 실온에서 밤새 교반하였다. 3 mL MeOH를 첨가하고, 반응물을 다시 밤새 교반하였다. 물 (15 mL)을 첨가하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (2 × 15 mL)로 추출한 뒤, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 에틸 아세테이트를 감압하에 증발시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (110 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (d, 1H), 6.75 (d, 1H), 4.63 (t, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.54 - 3.46 (m, 2H), 3.46 - 3.40 (m, 2H).
m/z 218.0 (M+NH4)+ (ES+)
(ii) 메틸 5-((2-(( 메틸설포닐 ) 옥시 ) 에톡시 ) 메틸 )푸란-2- 카복실레이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (105 mg, 0.525 mmol)을 1 mL DCM에 용해시킨 다음, NEt3 (88 μL, 0.629 mmol) 및 MsCl (45.0 μL, 0.577 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였고 이때 LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내었다. 반응물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 물 (10 mL)로 세척한 후, 상 분리기에 통과시킨 다음, 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (130 mg)을 서서히 황색 고체로 굳는 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (d, 1H), 6.79 (d, 1H), 4.56 - 4.46 (m, 2H), 4.35 - 4.28 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.71 - 3.63 (m, 2H), 3.17 (s, 3H).
(iii) 메틸 5-((2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 메틸 )푸란-3- 카복실레이트
3-메톡시-5-니트로페놀 (75 mg, 0.445 mmol), 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (130 mg, 0.467 mmol) 및 탄산칼륨 (184 mg, 1.335 mmol)을 DMF (0.5 mL)에 현탁시키고, 밤새 85 ℃ (블록 온도)로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 물 (15 mL)로 희석한 후 TBME로 추출하였다 (3 × 15 mL). 합쳐진 유기층을 물 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하여 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (24 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (124mg)을 서서히 연황색 고체로 변하는 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (d, 1H), 7.34 (d, 2H), 6.98 (t, 1H), 6.78 (d, 1H), 4.53 (d, 2H), 4.28 - 4.20 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.82 - 3.71 (m, 5H).
m/z 369.0 (M+NH4)+ (ES+)
(iv) 메틸 5-((2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 메틸 )푸란-3- 카복실레이트
EtOH (20 mL) 중 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (120 mg, 0.342 mmol)의 용액을 H-큐브에서 수소화시켰다 (10% Pd/C, 30x4 mm, Full 수소, 실온, 1 mL/분). 막힘으로 인해 용액이 45 분 동안 과압에 노출되었다. 반응 혼합물을 진공에서 농축시켜 오일을 얻고 단계 (v)에 직접 사용하였다. LCMS는 부제 화합물 (m/z 322.0 (M+H)+ (ES+)) 및 메틸 5-((2-(3-아미노-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)테트라하이드로푸란-3-카복실레이트의 2:3 혼합물을 나타내었다 (m/z 326.0 (M+H)+ (ES+) (107 mg).
(v) 메틸 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)테트라하이드로푸란-3-카복실레이트 (생성물 A)
및
메틸 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)푸란-3-카복실레이트 (생성물 B)
DMF (3 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 혼합물 (95 mg, 0.296 mmol), N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)-메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 168 mg, 0.296 mmol), 갓 분쇄한 탄산칼륨 (123 mg, 0.887 mmol), 및 BrettPhosG3 예비촉매 (13.40 mg, 0.015 mmol)의 현탁액을 배기시키고 질소로 3회 백충전하였다. 이어 반응물을 질소하에 85 ℃ (블록 온도)에서 16시간 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, EtOAc (15 mL)로 희석하고, 염수로 세척한 후, 실리카겔 상에서 농축시켰다. 실리카겔 상에서 크로마토그래피하여 (12 g 칼럼, 0-5% (0.7 M 암모니아/MeOH)/DCM) 소량 분리하고, 물 (3 mL)로 연마한 후 순수하지 않은 생성물의 혼합물을 얻었다. 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 추가 정제하여 (27 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 생성물 A (30 mg)를 회백색 고체로서 수득하고 추가 정제없이 실시예 13에 사용하였다.
m/z 858.1 (254 nm에서 약 75% 순도)
RP 칼럼의 추가 용출로 생성물 B (20 mg)를 회백색 고체로서 수득하고 추가 정제없이 다음 단계에 사용하였다.
m/z 854.1 (254 nm에서 약 55% 순도)
(vi) 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)푸란-3-카복실산
상기 단계 (v)의 생성물 B (20 mg, 0.023 mmol)을 THF (2 mL) MeOH (0.5 mL)에 용해시켰다. NaOH (2M aq.) (129 μL, 0.258 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 AcOH (0.25 mL)로 산성화시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 (Waters, 산성 (0.1% 포름산), 산성, Waters X-Select Prep-C18, 5 ㎛, 19×50 mm 칼럼, 물 중 35-65% MeCN) 표제 화합물 (2.4 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.13 - 8.05 (m, 3H), 7.85 (dd, 1H), 7.69 (ddd, 1H), 7.62 - 7.56 (m, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.86 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.05 (d, 1H), 6.01 (t, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.01 - 3.91 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.72 - 3.66 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.09 (s, 3H), 1.26 (s, 9H).
m/z 840.2 (M+H)+ (ES+)
실시예 13
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)테트라하이드로푸란-3-카복실산
Figure 112018100721576-pct00070
상기 실시예 12(v)의 생성물 A (30 mg, 0.035 mmol)를 0.4 mL THF 및 0.1 mL MeOH에 용해시켰다. NaOH (2M aq.) (192 μL, 0.385 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (0.25 mL)로 산성화시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 (Waters, Basic (0.1% 중탄산암모늄), Basic, Waters X-Bridge Prep-C18, 5 ㎛, 19×50 mm 칼럼, 물 중 35-65% MeCN) 표제 화합물 (7 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.55 (d, 1H), 8.99 (d, 1H), 8.84 (d, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.25 (dd, 1H), 8.09 (t, 1H), 8.06 - 8.00 (m, 2H), 7.78 (dd, 1H), 7.64 - 7.58 (m, 1H), 7.53 (ddd, 1H), 7.31 (dd,, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.78 (dt, 1H), 6.72 (q, 1H), 6.51 (ddd, 1H), 5.97 (dt, 2H), 3.90 - 3.83 (m, 3H), 3.77 - 3.69 (m, 4H), 3.66 - 3.60 (m, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.40 - 3.34 (m, 2H), 3.01 (s, 3H), 2.90 - 2.82 (m, 1H), 2.07 - 1.99 (m, 1H), 1.66 (ddd, 1H), 1.19 (s, 9H).
m/z 844.1 (M+H)+
실시예 14
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산
Figure 112018100721576-pct00071
(i) 에틸 2-(2-(2-( 벤질옥시 ) 에톡시 ) 에톡시 ) 프로파노에이트
2-(2-(벤질옥시)에톡시)에탄올 (5 g, 25.5 mmol)을 DCM (50 mL)에 용해시킨 다음, 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켰다. 질소하에서 건조 THF (50 mL, 25.5 mmol)에 재용해시킨 다음, 빙조에서 냉각시켰다. NaH (광유 중 60%, 1.070 g, 26.8 mmol)를 10분에 걸쳐 나누어 첨가하고 생성된 현탁액을 30분 동안 교반하였다. 에틸 2-브로모프로파노에이트 (3.73 mL, 28.0 mmol)를 15분에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 밤새 교반하고, sat. NH4Cl (5 mL)로 켄칭한 후, 생성된 혼합물을 실리카겔 상에서 직접 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (80 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (1.51 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.51 - 7.09 (m, 5H), 4.50 (s, 2H), 4.11 (qd, 2H), 4.05 (q, 1H), 3.70 - 3.41 (m, 8H), 1.27 (d, 3H), 1.20 (t, 3H).
(ii) 에틸 2-(2-(2- 하이드록시에톡시 ) 에톡시 ) 프로파노에이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (1.5 g, 5.06 mmol)을 EtOH (60 mL, 5.06 mmol)에 용해시킨 다음, 실온에서 16시간 동안 Pd-C (0.539 g, 0.506 mmol) 상에서 1 bar H2로 수소화하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, 고체를 EtOH (20 mL)로 세척한 후, 혼합물을 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (931 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.56 (t, 1H), 4.12 (qd, 2H), 4.04 (q, 1H), 3.67 - 3.56 (m, 1H), 3.56 - 3.45 (m, 5H), 3.42 (dd, 2H), 1.27 (d, 3H), 1.21 (t, 3H).
(iii) 에틸 2-(2-(2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 ) 프로파노에이트
상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (932 mg, 4.52 mmol)을 DCM (5 mL)에 용해시킨 다음, 빙조에서 냉각시켰다. NEt3 (756 μL, 5.42 mmol) 및 MsCl (387 μL, 4.97 mmol)을 차례로 적가하고, 반응물을 빙조에서 1시간 동안 교반하였다. DCM (50 mL)를 첨가하고, 유기층을 염수 (2 × 50 mL)로 세척한후, 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 1.13 g의 황색 오일을 얻었다. 이 황색 오일 282 mg, 3-메톡시-5-니트로페놀 (160 mg, 0.946 mmol), 및 탄산칼륨 (392 mg, 2.84 mmol)을 DMF (3 mL)에 현탁시키고, 밤새 80 ℃로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고 TBME (20 mL)와 염수 (20 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 TBME (20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수 (40 mL)로 세척한 후, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 다음, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (200 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.34 (dt, 2H), 7.00 (t, 1H), 4.29 - 4.18 (m, 2H), 4.12 (ddq, 2H), 4.05 (q, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.81 - 3.74 (m, 2H), 3.66 - 3.57 (m, 3H), 3.56 - 3.46 (m, 1H), 1.26 (d,, 3H), 1.19 (t, 3H).
(iv) 에틸 2-(2-(2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 ) 프로파노에이트
EtOH (30 mL) 및 EtOAc (7 mL) 중 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (200 mg, 0.560 mmol)의 용액에 Pd/C (5 wt%, type 87L) (61.3 mg, 0.029 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 3 bar H2 하에 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과한 후, 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (130 mg)을 적색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.75 (d, 2H), 5.69 (t, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.12 (qd, 2H), 4.06 (q, 1H), 4.00 - 3.91 (m, 2H), 3.73 - 3.66 (m, 2H), 3.66 - 3.55 (m, 6H), 3.55 - 3.49 (m, 1H), 1.28 (d, 3H), 1.20 (t, 3H).
(v) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로파노에이트
DMF (3 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (130 mg, 0.397 mmol), N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 226 mg, 0.397 mmol), 탄산칼륨 (165 mg, 1.191 mmol), 및 BrettPhosG3 예비촉매 (18.00 mg, 0.020 mmol)의 용액을 질소로 10분간 탈기시켰다. 반응물을 질소하에 85 ℃ (블록 온도)에서 2시간 가열하였다. 반응물을 냉각시키고 EtOAc (10 mL)와 물 (10 mL) 사이에 분배시켰다. 수성상을 EtOAc (5 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수 (5 mL)로 세척하여 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켜 암갈색 고체를 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12g 칼럼, DCM 중 1-6% MeOH) 부제 화합물 (125 mg)을 연베이지색 포말로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.15 - 8.07 (m, 2H), 7.87 (dt, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.11 (qd, 2H), 4.07 - 4.02 (m, 1H), 3.98 (dd, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.75 - 3.69 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.62 - 3.55 (m, 3H), 3.55 - 3.47 (m, 1H), 3.10 (s, 3H), 1.31 - 1.23 (m, 12H), 1.19 (t, 3H).
m/z 860.1 (M+H)+ (ES+)
(vi) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산
상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (120 mg, 0.140 mmol)을 THF (2 mL) 및 MeOH (0.5 mL)에 용해시켰다. NaOH (2M aq.) (767 μL, 1.535 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (0.25 mL)로 산성화시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하였다 (24 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물 함유 분획을 합치고, 포름산을 사용해 pH 약 4로 산성화한 후, 진공에서 농축시키고, 생성된 침전을 여과해 낸 후 물 (5 mL)로 세척하여 표제 화합물 (64 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.48 (s, 1H), 9.36 - 9.30 (m, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.04 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.79 (dd, 1H), 7.63 (ddd, 1H), 7.53 (ddd, 1H), 7.31 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.82 (t, 1H), 6.71 (t, 1H), 6.50 (dd, 1H), 6.01 (d, 1H), 5.96 (t, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.67 - 3.61 (m, 2H), 3.59 - 3.53 (m, 4H), 3.50 (dd, 2H), 3.44 - 3.37 (m, 1H), 3.02 (s, 3H), 1.19 (s, 9H), 1.18 (d, 3H).
m/z 832.1 (M+H)+ (ES+)
실시예 15
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-3-( 에틸설포닐 )-2- 메톡시페닐 ) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00072
(i) (5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3- 니트로페닐 )(에틸)설판
tert-부틸 니트라이트 (3.18 mL, 26.8 mmol)를 실온에서 MeCN (50 mL) 중 1,2-디에틸디설판(3.29 mL, 26.8 mmol) 및 5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-니트로아닐린 (2 g, 8.92 mmol)의 교반 암갈색 용액에 적가하였다. 이어 반응물을 가열 환류시키고 (블록 온도 80 ℃), 암갈색 용액을 환류하에 2시간 동안 교반하였다. 이어 반응물을 실온으로 냉각하고, 용매를 증발시켰다. 암적색 잔류물을 톨루엔과 공비시켰다 (3 × 25 mL). 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (80 g 칼럼, 0-20% MTBE:이소헥산) 부제 화합물 (1.007 g)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.64 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.09 (q, 2H), 1.31 (s, 9H), 1.28 (t, 3H).
(ii) 5-( tert -부틸)-1-( 에틸설포닐 )-2- 메톡시 -3-니트로벤젠
DCM (40 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 화합물 (1 g, 3.71 mmol)의 용액에 m-CPBA (1.747 g, 7.80 mmol)를 질소하에 0 ℃에서 첨가하고, 생성된 오렌지색 슬러리를 0 ℃에서 30분 동안 교반한 후 실온으로 가온하고, 실온에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (10 mL)에 용해시킨 티오황산나트륨 (2.348 g, 14.85 mmol)의 용액으로 켄칭하고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 층을 DCM (50 mL)으로 희석하고 분리하였다. 유기층을 sat. aq. NaHCO3로 세척하고 (3 × 20 mL) 건조시켰다 (MgSO4). 용매를 제거하여 암적색 오일을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 20-100% DCM: 헵탄) 부제 화합물 (935 mg)을 농후한 오렌지색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.49 (q, 2H), 1.34 (s, 9H), 1.15 (t, 3H).
m/z 302.2 (M+H)+ (ES+)
(iii) 5-( tert -부틸)-3-( 에틸설포닐 )-2- 메톡시아닐린
NH4Cl (66.4 mg, 1.241 mmol)를 EtOH (20 mL), 물 (5 mL) 및 THF (2 mL) 중 상기 단계 (ii)로부터의 화합물 (935 mg, 3.10 mmol) 및 철 (1733 mg, 31.0 mmol)의 슬러리에 첨가하였다. 생성된 검은색 슬러리를 1시간 동안 가열 환류시켰다. 용액을 실온으로 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과한 후, EtOAc로 세척하였다 (2 × 20 mL). 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-40% EtOAc:이소헥산) 부제 화합물 (820 mg)을 농후한 황색 오일로서 수득하였다.
m/z 272.3 (M+H)+ (ES+)
(iv) 페닐 (5-( tert -부틸)-3-( 에틸설포닐 )-2- 메톡시페닐 ) 카바메이트
페닐 클로로포르메이트 (417 μL, 3.32 mmol)를 DCM (8 mL) 및 THF (2 mL) 중 단계 (iii)으로부터의 화합물 (820 mg, 3.02 mmol) 및 NaHCO3 (762 mg, 9.06 mmol)의 슬러리에 첨가하였다. 생성된 슬러리를 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 물 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기층을 진공에서 농축시켜 옅은 오렌지색 고체를 얻었다. 이것을 사이클로헥산 (10 mL)으로 연마한 뒤, 생성된 고체를 여과 수집하고, 사이클로헥산 (2 × 2 mL)으로 세척하여 부제 화합물 (940 mg)을 베이지색 고체로서 수득하였다.
m/z 392.3 (M+H)+ (ES+)
(v) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(에틸설포닐)-2-메톡시페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 100 mg, 0.183 mmol)를 50 ℃에서 iPrOAc (2 mL)에 용해시킨 다음, 상기 단계 (iv)로부터의 화합물 (75 mg, 0.192 mmol)을 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 카바메이트가 용해될 때까지 (약 5분) 교반한 후, NEt3 (5.09 μL, 0.037 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 75 ℃에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하였다 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM). 생성물을 크로마토그래피로 재정제하여 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (86 mg)을 옅은 핑크색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.70 (d, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.14 - 8.04 (m, 2H), 7.88 (d, 1H), 7.71 (t, 1H), 7.62 (t, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.40 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.19 - 4.06 (m, 4H), 3.98 (t, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.75 - 3.68 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.64 - 3.55 (m, 4H), 3.44 (q, 2H), 1.31 (s, 9H), 1.22 - 1.12 (m, 6H).
m/z 845.5 (M+H)+ (ES+)
(vi) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(에틸설포닐)-2-메톡시페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 상기 단계 (v)로부터의 화합물 (86 mg, 0.102 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq.) (175 μL, 0.350 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (24.14 μL, 0.422 mmol)로 켄칭하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 포름산으로 중화하고 농축시켜 표제 화합물 (67 mg)을 옅은 베이지색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.68 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.69 (d, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.14 - 8.07 (m, 2H), 7.87 (d, 1H), 7.76 - 7.66 (m, 1H), 7.66 - 7.56 (m, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.75 (t, 1H), 6.59 (dd, 1H), 6.11 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 3.99 - 3.86 (m, 7H), 3.69 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.58 (q, 4H), 3.44 (q, 2H), 1.31 (s, 9H), 1.15 (q, 3H).
m/z 817.5 (M+H)+ (ES+)
실시예 16
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-3-( 에틸설폰아미도 )-2- 메톡시페닐 ) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00073
(i) N-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3- 니트로페닐 ) 에탄설폰아미드
에탄설포닐 클로라이드 (475 μL, 5.02 mmol)를 DCM (10 mL) 중 5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-니트로아닐린 (750 mg, 3.34 mmol) 및 피리딘 (1082 μL, 13.38 mmol)의 용액에 0 ℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0 ℃에서 5분 동안 교반한 후실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 2 M HCl (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-20% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물을 방치하면 고화되는 황색 오일로서 915 mg 수득하였다. 고체를 에테르:이소헥산 (1:1 비율, 10 mL)으로 연마하여 부제 화합물 (686 mg)을 연황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.57 (s, 1H), 7.68 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.22 (q, 2H), 1.40 - 1.18 (m, 12H).
m/z 315 (M-H)- (ES-)
(ii) N-(3-아미노-5-( tert -부틸)-2- 메톡시페닐 ) 에탄설폰아미드
EtOH (5 mL) 및 EtOAc (2 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 화합물 (686 mg, 2.168 mmol)의 용액에 10% Pd/C, 물 중 50% 페이스트, Type 39 (46.2 mg, 0.434 mmol)를 첨가하고, 생성된 슬러리를 5 bar 압력의 H2 하에 밤새 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc (50 mL)로 세척하였다. 용매를 진공에서 제거하여 부제 화합물 (600 mg)을 옅은 핑크색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (s, 1H), 6.61 - 6.52 (m, 2H), 4.88 (s, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.09 (q, 2H), 1.25 (t, 3H), 1.20 (s, 9H).
m/z 287.3 (M+H)+ (ES+)
(iii) 페닐 (5-( tert -부틸)-3-( 에틸설폰아미도 )-2- 메톡시페닐 ) 카바메이트
페닐 클로로포르메이트 (289 μL, 2.305 mmol)를 DCM (8 mL) 및 THF (2 mL) 중 상기 단계 (ii)로부터의 화합물 (600 mg, 2.095 mmol) 및 NaHCO3 (528 mg, 6.29 mmol)의 슬러리에 첨가하였다. 생성된 슬러리를 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 물 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기층을 진공에서 농축시켜 방치하면 고화되는 오렌지색 오일을 얻었다. 이것을 사이클로헥산 (10 mL)으로 연마하여 생성된 고체를 여과 수집하고, 사이클로헥산 (2 × 2 mL)으로 세척한 뒤, 부제 화합물 (788 mg, 1.842 mmol, 88% 수율)을 옅은 베이지색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.47 - 7.36 (m, 2H), 7.30 - 7.19 (m, 3H), 7.17 (d, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.15 (q, 2H), 1.28 (t, 3H), 1.24 (s, 9H).
m/z 429.4 (M+Na)+ (ES+)
(iv) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(에틸설폰아미도)-2-메톡시페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 100 mg, 0.183 mmol)를 50 ℃에서 iPrOAc (2 mL)에 용해시킨 다음, 단계 (iii)으로부터의 화합물 (97 mg, 0.240 mmol)을 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50 ℃에서 카바메이트가 용해될 때까지 (약 5분) 교반하였다. NEt3 (5.09 μL, 0.037 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 75 ℃에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 실리카겔 상에서 크로마토그래피 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM)하였으나 충분한 순도를 얻지 못했다. 조 생성물을 크로마토그래피로 재정제하여 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (70 mg)을 옅은 핑크색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.37 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.91 - 7.83 (m, 1H), 7.74 - 7.65 (m, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 4H), 4.02 - 3.94 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.71 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.64 - 3.56 (m, 4H), 3.21 - 3.12 (m, 2H), 1.31 (t, 3H), 1.26 (s, 9H), 1.18 (t, 3H).
m/z 860.5 (M+H)+ (ES+).
(v) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(에틸설폰아미도)-2-메톡시페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 화합물 (70 mg, 0.081 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq.) (40.7 μL, 0.081 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (24.1 μL, 0.422 mmol)로 켄칭하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 포름산으로 중화하고 농축시켜 표제 화합물 (68 mg)을 옅은 베이지색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.31 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.69 (ddd, 1H), 7.60 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.86 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 4.01 - 3.90 (m, 4H), 3.81 (s, 3H), 3.73 - 3.68 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.63 - 3.55 (m, 4H), 3.20 - 3.13 (m, 2H), 1.31 (t, 3H), 1.26 (s, 9H).
m/z 832.5 (M+H)+ (ES+)
실시예 17
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸) 이속사졸 -3-일) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00074
(i) 페닐 (5-( tert -부틸) 이속사졸 -3-일) 카바메이트
DCM (8 mL) 및 THF (2 mL) 중 페닐 클로로포르메이트 (0.492 mL, 3.92 mmol, 5-(tert-부틸)이속사졸-3-아민 (0.5 g, 3.57 mmol) 및 NaHCO3 (0.899 g, 10.70 mmol)의 슬러리를 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 물 (10 mL), 염수 (10 mL)로 세척한 후, 용매를 증발시켜 무색 오일을 얻고 사이클로헥산 (10 mL)에서 10분 동안 교반하였다. 형성된 백색 고체를 여과 수집하여 부제 화합물 (674 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.16 (s, 1H), 7.47 - 7.41 (m, 2H), 7.28 (ddt, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 6.44 (s, 1H), 1.30 (s, 9H).
m/z 261.3 (M+H)+ (ES+)
(ii) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸) 이속사졸 -3-일) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(ii) 참조; 100 mg, 0.183 mmol)를 50 ℃에서 iPrOAc (2 mL)에 용해시킨 다음, 상기 (i)로부터의 생성물 (62.4 mg, 0.240 mmol)을 용액에 첨가하고, 50 ℃에서 카바메이트가 용해될 때까지 (약 5분) 교반하였다. NEt3 (5.1 μL, 0.037 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 75 ℃에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 실리카겔 상에서 크로마토그래피 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM)하였으나 충분한 순도를 얻지 못해 조 생성물을 크로마토그래피로 추가 정제하여 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (86 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.93 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.87 (d1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.62 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.16 - 4.05 (m, 4H), 4.02 - 3.95 (m, 2H), 3.71 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.64 - 3.57 (m, 4H), 1.32 (s, 9H), 1.19 (t, 3H).
m/z 714.2 (M+H)+ (ES+)
(iii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸) 이속사졸 -3-일) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 화합물 (86 mg, 0.120 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq.) (175 μL, 0.350 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (24.1 μL, 0.422 mmol)로 켄칭하고 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 포름산으로 중화하고 농축시켜 표제 화합물 (59 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.23 (s, 1H), 9.45 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.21 (t, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.69 (ddd, 1H), 7.65 - 7.55 (m, 1H), 7.37 (d, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.73 (t, 1H), 6.60 (dd, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.89 (d, 2H), 3.69 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.62 - 3.54 (m, 4H), 1.32 (s, 9H)m/z 686.5 (M+H)+ (ES+).
실시예 18
N-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-(3-(4-((2-((3- 메톡시 -5-(2-(2-((5-옥소-2,5-디하이드로이속사졸-3-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)-메탄설폰아미드
Figure 112018100721576-pct00075
(i) 1-[5-tert-부틸-3-(메탄설폰아미도)-2-메톡시-페닐]-3-[4-[[2-[3-[2-[2-[2-(2,2-디메틸-4,6-디옥소-1,3-디옥산-5-일)-2-옥소-에톡시]에톡시]에톡시]-5-메톡시-아닐리노]-4-피리딜]옥시]-1-나프틸]우레아
DCM (3 mL) 및 THF (3 mL) 중 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산 (상기 실시예 3 참조; 500 mg, 0.611 mmol)의 용액에 DMAP (74.7 mg, 0.611 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 0 ℃로 냉각시키고, DCC (139 mg, 0.672 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 0 ℃에서 10분 동안 교반한 후, 2,2-디메틸-1,3-디옥산-4,6-디온 (26.4 mg, 0.183 mmol)을 첨가하였다. 생성된 현탁액을 0 ℃에서 10분 동안 교반하고, 이어 실온에서 밤새 교반하였다. 추가 분량의 DCC (37.8 mg, 0.183 mmol) 및 2,2-디메틸-1,3-디옥산-4,6-디온 (26.4 mg, 0.183 mmol)을 황색 현탁액에 첨가하고, 4시간 동안 교반을 계속하였다. 용매를 제거하여 오렌지색 고체를 얻어 냉 DCM (3 mL)에 현탁시키고, 여과한 후 (소결 펀넬, 1 등급 와트만지), 냉 DCM (3 × 2 mL)으로 세척하였다. 여액을 식히고, 탈지면 플러그를 통해 재여과한 뒤, 용매를 제거하여 옅은 황색 고체를 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산, 이어 4% MeOH:DCM) 부제 화합물 (771 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
m/z 944.6 (M+H)+ (ES+)
(ii) 에틸 4-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-3-옥소부타노에이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (403 mg, 0.324 mmol)을 EtOH (50 mL)에서 슬러리화하고, 24시간 동안 가열 환류시켰다. 용매를 진공에서 제거하여 검을 얻고 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-10% MeOH/DCM,) 부제 화합물 (200 mg, 0.205 mmol, 63.2% 수율)을 무색 검으로서 수득하였다.
m/z 886.5 (M+H)+ (ES+)
(iii) N-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(3-(4-((2-((3-메톡시-5-(2-(2-((5-옥소-2,5-디하이드로이속사졸-3-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)-메탄설폰아미드
EtOH (2.5 mL) 중 상기 (ii)로부터의 생성물 (100 mg, 0.113 mmol), 하이드록실아민 하이드로클로라이드 (31.3 mg, 0.450 mmol) 및 sat. aq. 중탄산나트륨 (512 μL, 0.563 mmol)의 현탁액을 1시간 동안 가열 환류시키고 균질 용액을 얻었다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고, 포름산으로 pH를 7로 조정한 다음, 샘플을 광으로부터 보호하면서 유기 용매를 N2 흐름하에 증발시켰다. 이어 수성 용매를 회전 증발기에서 30 ℃에서 제거하여 표제 화합물 (20 mg)을 옅은 핑크색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.58 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.69 (ddd, 1H), 7.60 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.88 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.07 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.95 (dd, 2H), 3.91 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.68 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.59 - 3.52 (m, 2H), 3.52 - 3.44 (m, 2H), 3.09 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 857.5 (M+H)+ (ES+)
실시예 19
2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)티오)아세트산
Figure 112018100721576-pct00076
(i) 메틸 2,2,3,3- 테트라메틸 -4,7- 디옥사 -10- 티아 -3- 실라도데칸 -12- 오에이트
2,2'-옥시디에탄올 (7.05 mL, 80.5 mmol), NEt3 (8.36 mL, 60 mmol) 및 DMAP (0.020 g, 0.164 mmol)를 DCM (100 mL)에 용해시킨 다음, 빙조에서 냉각시켰다. DCM (20 mL) 중 TBSCl (7.28 g, 48.3 mmol)의 용액을 15분에 걸쳐 적가하고, 혼합물을 밤새 실온으로 가온시켰다. 유기층을 포화 NaHCO3 (100 mL), 포화 NH4Cl (100 mL), 및 이어 포화 NaCl (100 mL)로 차례로 세척하여 상 분리기에 통과시킨 후 진공에서 농축시켜 무색 오일 (8.95 g)을 얻었다. DCM (20 mL) 중 이 오일 (2.0 g) 및 NEt3 (1.82 mL, 13.07 mmol)의 용액에 MsCl (0.611 mL, 7.84 mmol)를 0-5 ℃에서 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반한 다음, DCM (30 mL)으로 희석하고, 유기층을 물 (50 mL), 염수 (50 mL)로 세척한 뒤, 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 2.45 g의 옅은 황색 오일을 얻었다. NaH (광유 중 60%, 0.731 g, 18.27 mmol)를 DMF (10 mL, 129 mmol)에 현탁시키고, 빙조에서 냉각시킨 후, 메틸 2-머캅토아세테이트 (1.515 mL, 16.60 mmol)를 질소하에 적가하였다. 실온에서 30분 후, 혼합물을 빙조에서 냉각시키고, 상기에서 얻은 옅은 황색 오일 (2.36 g)을 DMF (5 mL) 중의 용액으로서 첨가한 다음 2시간 동안 교반하였다. 포화 NH4Cl(aq) (50 mL)를 첨가하고, 수성층을 EtOAc (2 × 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 건조시키고 (Na2SO4), 여과한 뒤, 진공에서 실리카겔 상에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (80 g 칼럼, 0-20% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (1.22 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3.71 - 3.65 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.59 (t, 2H), 3.47 - 3.42 (m, 2H), 3.42 - 3.37 (m, 2H), 2.74 (t, 2H), 0.86 (s, 9H), 0.04 (s, 6H)
(ii) 메틸 2-((2-(2- 하이드록시에톡시 )에틸) 티오 )아세테이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (546 mg, 1.770 mmol)을 AcOH:물 (3 mL; 2:1 비율)에 용해시킨 다음, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어 용매를 진공에서 제거하여 부제 화합물 (347 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.57 (t, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.53 (t, 2H), 3.48 - 3.40 (m, 2H), 3.40 - 3.33 (m, 4H), 2.70 (t, 2H).
(iii) 메틸 2-((2-(2-(( 메틸설포닐 ) 옥시 ) 에톡시 )에틸) 티오 )아세테이트
상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (344 mg, 1.771 mmol)을 DCM (5 mL)에 용해시킨 다음, 빙조에서 냉각시켰다. NEt3 (370 μL, 2.66 mmol)에 이어 MsCl (166 μL, 2.125 mmol)을 적가하고, 혼합물을 밤새 실온으로 가온시켰다. 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 유기층을 0.1M HCl (10 mL)로 세척하였다. 혼합물을 상 분리기에 통과시키고, 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (396 mg)을 옅은 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.32 - 4.20 (m, 2H), 3.64 - 3.61 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.58 (t, 2H), 3.37 (s, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.73 (t, 2H).
(iv) 메틸 2-((2-(2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 )에틸) 티오 )아세테이트
3-메톡시-5-니트로페놀 (118 mg, 0.699 mmol), 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (200 mg, 0.734 mmol) 및 탄산칼륨 (290 mg, 2.098 mmol)을 DMF (3 mL)에 현탁/용해시킨 다음, 밤새 80 ℃로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고 TBME (20 mL)와 염수 (20 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 TBME (20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수 (40 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (170 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.35 (dt, 2H), 7.00 (t, 1H), 4.29 - 4.15 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.79 - 3.73 (m, 2H), 3.66 (t, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.42 (s, 2H), 2.77 (t, 2H).
m/z 346.0 (M+H)+ (ES+)
(v) 메틸 2-((2-(2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 )에틸) 티오 )아세테이트
상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (170 mg, 0.492 mmol)을 EtOH (4 mL, 68.5 mmol) 및 H2O (0.5 mL)에 용해시켰다. 철 (165 mg, 2.95 mmol) 및 NH4Cl (211 mg, 3.94 mmol)을 첨가하고, 플라스크를 배기시키고, 질소로 3회 백충전하였다. 반응 혼합물을 격렬히 교반하면서 2시간 동안 80 ℃로 가열하였다. LCMS는 부제 화합물로 완전히 전환된 것으로 나타났다. 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과한 후, 고체를 EtOH (10 mL)로 세척하였다. 용액을 진공에서 농축시켜 부제 화합물을 옅은 황색 오일로서 수득하였다 (120 mg).
m/z 316.0 (M+H)+ (ES+)
(vi) 메틸 2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)티오)아세테이트
DMF (3 mL) 중 상기 단계 (v)로부터의 생성물 (120 mg, 0.380 mmol), N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 217 mg, 0.380 mmol), Pd-175 (7.43 mg, 9.51 ㎛ol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (158 mg, 1.141 mmol)의 현탁액을 3 사이클의 배기 및 질소 백충전으로 탈기하였다. 반응물을 2시간 동안 70 ℃ (블록 온도)로 가열한 후, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (26 g 칼럼, 25-100% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (152 mg)을 무색의 유리질 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.40 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.34 - 8.26 (m, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.07 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 4.02 - 3.94 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.74 - 3.68 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 3.41 (s, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.77 (t, 2H), 1.27 (s, 9H).
m/z 848.0 (M+H)+ (ES+)
(vii) 2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)티오)아세트산
상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (150 mg, 0.177 mmol)을 THF (4 mL)에 용해시켰다. NaOH (2M aq.) (973 μL, 1.946 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (0.25 mL)로 산성화시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하였다 (24 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물 함유 분획을 합치고, 포름산으로 pH 약 4로 산성화한 다음, 진공에서 농축시키고 생성된 침전을 여과해낸 다음, 물 (5 mL)로 세척하고, 진공에서 50 ℃에서 24시간 동안 건조시켜 표제 화합물 (78 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.54 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.07 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 4.03 - 3.93 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.74 - 3.67 (m, 2H), 3.67 - 3.58 (m, 5H), 3.29 (s, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.76 (t, 2H), 1.27 (s, 9H).
m/z 833.9 (M+H)+ (ES+)
실시예 20
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산 ( 거울상이성체 1 및 2)
Figure 112018100721576-pct00077
실시예 14의 표제 화합물 (40 mg, 0.048 mmol)을 분취용 키랄 HPLC 정제 (Gilson, Daicel Chirapak IC 칼럼, 4:1 헥산:DCM (0.2% 디에틸 아민) 중 30% EtOH)에 적용하여 2개의 거울상이성체: 거울상이성체 1 (9.2 mg) 및 거울상이성체 2 (5.2 mg)를 수득하였다. 두 거울상 이성체의 절대 입체화학은 알지 못한다.
(a) 거울상이성체 1
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.59 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.13 - 8.07 (m, 2H), 7.86 (dd, 1H), 7.68 (ddd, 1H), 7.59 (ddd, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.02 (d,, 1H), 6.80 - 6.71 (m, 2H), 6.58 (dd, 1H), 6.10 (d, 1H), 6.02 (t, 1H), 3.93 - 3.85 (m, 2H), 3.80 (s, 4H), 3.68 (dd, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.55 (t, 2H), 3.46 - 3.42 (m, 1H), 3.08 (s, 3H), 1.26 (s, 9H), 1.21 (d, 3H).
m/z 832.1 (M+H)+
키랄 HPLC (Daicel Chiralpak IC, 5 um, 4.6×250 mm, 45분 방법, 1.0 mL/min, DCM/헥산 중 30% EtOH (1:4) (0.2% DEA) RT = 8.9 min, 84% ee @ 254 nm.
(b) 거울상이성체 2
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.55 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.88 - 7.84 (m, 1H), 7.69 (ddd, 1H), 7.60 (ddd, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.81 (t, 1H), 6.76 (t, 1H), 6.59 (dd, 1H), 6.10 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 3.92 (t, 2H), 3.84 (d, 4H), 3.74 - 3.67 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.56 (t, 2H), 3.45 - 3.42 (m, 1H), 3.09 (s, 3H), 1.27 (s, 9H), 1.23 (d, 3H).
m/z 832.1 (M+H)+ (ES+)
키랄 HPLC (Daicel Chiralpak IC, 5 um, 4.6×250 mm, 45분 방법, 1.0 mL/min, DCM/헥산 중 30% EtOH (1:4) (0.2% DEA) RT = 11.2 min, 98% ee @ 254 nm.
실시예 21
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-2-메틸프로판산
Figure 112018100721576-pct00078
(i) 에틸 2-(2-(2-( 벤질옥시 ) 에톡시 ) 에톡시 )-2- 메틸프로파노에이트
에틸 2-(2-(2-(벤질옥시)에톡시)에톡시)프로파노에이트 (1.1 g, 3.71 mmol)를 THF (35 mL)에 용해시킨 다음, -78 ℃로 냉각시켰다. LiHMDS (THF 중 1 M, 4.08 mL, 4.08 mmol)를 첨가하고, 반응물을 1시간 동안 교반하였다. MeI (TBME 중 2M) (2.04 mL, 4.08 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온한 후, 밤새 교반하였다. 반응물을 NH4Cl (2 mL)로 켄칭하고, 실리카 상에서 직접 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (80 g 칼럼, 0-40% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (328 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.31 - 7.17 (m, 5H), 4.50 (s, 2H), 4.11 (q, 2H), 3.65 - 3.53 (m, 6H), 3.53-3.48 (m, 2H), 1.36 (s, 6H), 1.21 (t, 3H).
(ii) 에틸 2- 메틸 -2-(2-(2-(( 메틸설포닐 ) 옥시 ) 에톡시 ) 에톡시 ) 프로파노에이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (390 mg, 1.25 mmol)을 EtOH (30 mL, 1.257 mmol)에 용해시킨 다음, 5 wt% Pd-C (type 87L, 134 mg, 0.063 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4 bar H2 하에 16시간 동안 교반하였다. HPLC로 출발물질의 소비를 확인하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 고체를 EtOH (50 mL)로 세척한 후, 진공에서 농축시켜 무색 오일을 얻었다. 오일을 건조 DCM (10 mL)에 용해시킨 다음, 빙수조에서 냉각시켰다. NEt3 (192 μL, 1.378 mmol) 및 MsCl (98 μL, 1.263 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 밤새 교반하면서 실온으로 가온시켰다. 반응물을 DCM (30 mL)으로 희석하고, 0.1M HCl (20 mL)로 세척한 후, 수성층을 DCM (10 mL)으로 추가 추출하였다. 합쳐진 유기층을 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (313 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.34 - 4.27 (m, 2H), 4.10 (q, 2H), 3.71 - 3.63 (m, 2H), 3.59 - 3.50 (m, 2H), 3.48 - 3.40 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 1.32 (s, 6H), 1.19 (t, 3H).
(iii) 에틸 2-(2-(2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )-2- 메틸프로파노에이트
3-메톡시-5-니트로페놀 (188 mg, 1.112 mmol), 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (316 mg, 1.059 mmol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (439 mg, 3.18 mmol)을 DMF (3 mL)에 현탁시키고, 밤새 80 ℃로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고 TBME (20 mL)와 염수 (20 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 TBME (20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수 (40 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (80 g 칼럼, 0-40% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (346 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.35 (dt, 2H), 7.00 (t, 1H), 4.26 - 4.19 (m, 2H), 4.11 (q, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.80 - 3.75 (m, 2H), 3.58 (dd, 2H), 3.47 (dd, 2H), 1.33 (s, 6H), 1.19 (t, 3H).
(iv) 에틸 2-(2-(2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )-2- 메틸프로파노에이트
상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (335 mg, 0.902 mmol)을 EtOH (5 mL)에 용해시킨 다음, Pd/C (5 wt% type 87L, 28.8 mg, 0.014 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 1 bar H2 하에 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOH (50 mL)로 세척한 후, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% (0.7 M 암모니아/MeOH)/DCM) 부제 화합물 (226 mg)을 적색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.78 - 5.72 (m, 2H), 5.68 (t, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.11 (q, 2H), 3.99 - 3.87 (m, 2H), 3.75 - 3.65 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.58 - 3.53 (m, 2H), 3.48 - 3.43 (m, 2H), 1.33 (s, 6H), 1.19 (d, 3H).
m/z 342.1 (M+H)+ (ES+)
(v) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-2-메틸프로파노에이트
DMF (3 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (210 mg, 0.615 mmol), N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 350 mg, 0.615 mmol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (255 mg, 1.845 mmol)의 현탁액을 3 사이클의 배기 및 질소 백충전으로 탈기하였다. 혼합물을 5분간 40 ℃로 가열하고, BrettPhosG3 예비촉매 (13.94 mg, 0.015 mmol)를 DMF (1 mL) 중의 용액으로서 첨가하였다. 플라스크를 배기시키고 질소로 백충전한 후 4시간 동안 75 ℃ (블록 온도)로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 추가 분량의 갓 분쇄한 탄산칼륨 (255 mg, 1.845 mmol) 및 Pd-173 (14 mg)을 첨가하였다. 반응물을 3회 배기 및 질소 백충전으로 탈기시키고, 12시간 동안 75 ℃ (블록 온도)로 가열한 뒤, DCM (50 mL)으로 희석하고, 염수 (50 mL)로 세척한 다음, 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 25-100% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (77 mg)을 갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 8.90 (d, 2H), 8.31 - 8.28 (m, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.14 - 8.07 (m, 2H), 7.87 (dd, 1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.07 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 4.10 (q, 2H), 4.01 - 3.95 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.74 - 3.69 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.55 (dd, 2H), 3.46 (dd, 2H), 3.10 (s, 3H), 1.32 (s, 6H), 1.27 (s, 9H), 1.19 (t, 3H).
m/z 848.0 (M+H)+ (ES+)
(vi) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-2-메틸프로판산
상기 단계 (v)로부터의 생성물 (77 mg, 0.088 mmol)을 THF (2 mL) 및 MeOH (0.5 mL)에 용해시켰다. NaOH (2M aq.) (485 μL, 0.969 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (0.25 mL)로 산성화시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하였다 (24 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물 함유 분획을 합치고, 포름산으로 pH 약 4로 산성화한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 고체를 최소량의 EtOH (약 1 mL)에 재용해시킨 다음, 물 (0.5 mL)을 적가하여 백색 고체를 부수었다. 그 후 바이얼을 2000 rpm에서 2분간 원심분리하고 상등액을 따라내어 표제 화합물 (40 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.50 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.14 - 8.07 (m, 2H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 3.97 (dd, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.71 (dd, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.56 (dd, 2H), 3.48 (dd, 2H), 3.10 (s, 3H), 1.31 (s, 6H), 1.27 (s, 9H).
m/z 846.1 (M+H)+ (ES+)
실시예 22
1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)-1H-피라졸-4-카복실산
Figure 112018100721576-pct00079
(i) 메틸 1-(2-(2-( 벤질옥시 ) 에톡시 )에틸)-1H- 피라졸 -4- 카복실레이트
DMF (15 mL) 중 2-(2-(벤질옥시)에톡시)에틸 메탄설포네이트 (598 mg, 2.181 mmol) 및 메틸 1H-피라졸-4-카복실레이트 (250 mg, 1.982 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (822 mg, 5.95 mmol)을 첨가하고, 2일 동안 60 ℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, EtOAc (50 mL)로 희석시킨 뒤, 물 (30 mL), sat. aq. NaHCO3 (30 mL) 및 20% v/v 염수 (30 mL)로 연달아 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (472 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.33 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.38 - 7.30 (m, 2H), 7.30 - 7.24 (m, 3H), 4.44 (s, 2H), 4.32 (t, 2H), 3.80 (t, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.58 - 3.53 (m, 2H), 3.53 - 3.48 (m, 2H).
m/z 305.1 (M+H)+ (ES+)
(ii) 메틸 1-(2-(2- 하이드록시에톡시 )에틸)-1H- 피라졸 -4- 카복실레이트
물 중 50% 페이스트의 Pd/C 10% (Type 39) (33.0 mg, 0.310 mmol)를 EtOH (4 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 생성물 (472 mg, 1.551 mmol)의 용액에 첨가하고, 생성된 슬러리를 1 bar 압력의 H2 하에 밤새 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc (2 × 20 mL)로 세척한 후, 용매를 제거하여 부제 화합물 (326 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.33 (d, 1H), 7.87 (d, 1H), 4.59 (t, 1H), 4.31 (t, 2H), 3.78 (t, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.48 - 3.42 (m, 2H), 3.42 - 3.37 (m, 2H).
(iii) 메틸 1-(2-(2-(( 메틸설포닐 ) 옥시 ) 에톡시 )에틸)-1H- 피라졸 -4- 카복실레이트
MsCl (142 μL, 1.826 mmol)를 0 ℃에서 DCM (10 mL) 및 TEA (424 μL, 3.04 mmol) 중 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (326 mg, 1.522 mmol)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 이차 분취량의 NEt3 (424 μL, 3.04 mmol) 및 MsCl (142 μL, 1.826 mmol)를 실온에서 첨가하고, 반응물을 실온에서 3시간 더 교반하였다. 반응물을 DCM (50 mL)으로 희석하고, 20% v/v 염수 (50 mL)로 세척하였다. 용매를 제거하여 오렌지색 오일을 얻었다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-10% MeOH/DCM) 부제 화합물 (431 mg)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.33 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 4.33 (t, 2H), 4.27 (m, 2H), 3.83 (t, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.65 (dt, 2H), 3.12 (s, 3H).
m/z 293.3 (M+H)+ (ES+)
(iv) 메틸 1-(2-(2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 )에틸)-1H- 피라졸 -4- 카복실레이트
탄산칼륨 (611 mg, 4.42 mmol)을 DMF (15 mL) 중 3-메톡시-5-니트로페놀 (274 mg, 1.622 mmol) 및 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (431 mg, 1.474 mmol)의 용액에 첨가하고, 2일간 60 ℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, EtOAc (50 mL)로 희석한 후, 물 (30 mL), sat. aq. NaHCO3 (30 mL) 및 20% v/v 염수 (30 mL)로 연달아 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (387 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (d, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.31 (dt, 2H), 6.94 (t, 1H), 4.33 (t, 2H), 4.22 - 4.11 (m, 2H), 3.90 - 3.82 (m, 5H), 3.78 - 3.72 (m, 2H), 3.71 (s, 3H).
m/z 366.4 (M+H)+ (ES+)
(v) 메틸 1-(2-(2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 )에틸)-1H- 피라졸 -4- 카복실레이트
EtOH (20 mL), 물 (2 mL) 및 THF (3 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (378 mg, 1.035 mmol), NH4Cl (22.14 mg, 0.414 mmol) 및 철 (578 mg, 10.35 mmol)의 슬러리를 1시간 동안 가열 환류시켰다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc (2 × 20 mL)로 세척하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-10% MeOH/DCM) 부제 화합물 (300 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.34 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 5.75 (t, 1H), 5.73 (t, 1H), 5.66 (t,, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.33 (t, 2H), 3.94 - 3.87 (m, 2H), 3.84 (t, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.70 - 3.64 (m, 2H), 3.62 (s, 3H).
m/z 336.3 (M+H)+ (ES+)
(vi) 메틸 1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)-1H-피라졸-4-카복실레이트
바이알에서 DMF (2 mL) 중 N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 239 mg, 0.420 mmol), 상기 단계 (v)로부터의 생성물 (141 mg, 0.420 mmol), 갓 분쇄한 탄산칼륨 (174 mg, 1.261 mmol)의 현탁액을 3회 배기 및 질소로 백충전하였다. 혼합물을 40 ℃로 가열하고, Pd 175 (9.52 mg, 10.51 ㎛ol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어 반응물을 냉각시키고 여과하였다. 여액을 EtOAc (50 mL)와 20% v/v 염수 (50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-10% MeOH/DCM) 부제 화합물 (240 mg)을 옅은 갈색 고체로서 수득하였다.
m/z 868.1 (M+H)+ (ES+)
(vii) 메틸 1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)-1H-피라졸-4-카복실레이트
NaOH (2M aq.) (415 μL, 0.830 mmol)를 THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (240 mg, 0.277 mmol)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. NaOH (2M aq.) (415 μL, 0.830 mmol)를 추가하고, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 AcOH (24.14 μL, 0.422 mmol)로 켄칭하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하여 (RP Flash C18 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 표제 화합물 (130 mg, 0.149 mmol, 54.0% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.40 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.09 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.87 (t, 1H), 6.80 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.02 (t, 1H), 4.32 (t, 2H), 4.00 - 3.89 (m, 2H), 3.84 (t, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.73 - 3.67 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 854.5 (M+H)+ (ES+)
실시예 23
N-(3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-((1H- 테트라졸 -5-일) 메톡시 ) 에톡시 ) 에톡시 )-5- 메톡시페닐 )아미노)-피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-5-( tert -부틸)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드
Figure 112018100721576-pct00080
(i) 2,2,3,3- 테트라메틸 -4,7,10-트리옥사-3- 실라도데칸 -12-니트릴
THF (10 mL) 중 2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에탄올 (2 g, 6.35 mmol)의 용액을 건조 THF (40 mL) 중 NaH (오일 중 60%, 0.356 g, 8.89 mmol)의 슬러리에 0 ℃에서 질소하에 적가하였다. 생성된 슬러리를 0 ℃에서 20분 동안 교반한 후, 건조 THF (10 mL) 중 브로모아세토니트릴 (0.44 mL, 6.35 mmol)의 용액을 반응 혼합물에 첨가하였다. 생성된 어두운 색 용액을 실온으로 가온하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 MeOH (0.5 mL)로 켄칭하고, 20% v/v 염수 (20 mL) 및 EtOAc (50 mL)로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성층을 EtOAc로 추출하였다 (3 × 20 mL). 합쳐진 유기 추출물을 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (24 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (840 mg)을 농후한 갈색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.44 (s, 2H), 3.65 (dd, 2H), 3.62 - 3.56 (m, 2H), 3.56 - 3.49 (m, 2H), 3.41 (dd, 2H), 0.82 (s, 9H), 0.00 (s, 6H).
m/z 282 (M+Na)+ (ES+)
(ii) 2-(2-(2- 하이드록시에톡시 ) 에톡시 ) 아세토니트릴
상기 단계 (i)로부터의 화합물 (728 mg, 2.81 mmol)을 AcOH (5 mL) 및 물 (2.5 mL)에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 톨루엔 (3 × 5 mL)과 공비시켜 부제 화합물 (409 mg)을 농후한 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.53 (bs, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.65 - 3.57 (m, 2H), 3.57 - 3.49 (m, 2H), 3.49 - 3.41 (m, 2H), 3.41 - 3.35 (m, 2H).
(iii) 2-(2-( 시아노메톡시 ) 에톡시 )에틸 메탄설포네이트
MsCl (322 μL, 4.14 mmol)을 DCM (15 mL) 중 상기 단계 (ii)로부터의 화합물 (429 mg, 2.96 mmol) 및 NEt3 (824 μL, 5.91 mmol)의 용액에 0 ℃에서 첨가한 후, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 DCM (50 mL)으로 희석하고 20% v/v 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기층을 소수성 프릿에 통과시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (640 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.50 (s, 2H), 4.39 - 4.25 (m, 2H), 3.72 - 3.64 (m, 4H), 3.64 - 3.59 (m, 2H), 3.19 (s, 3H).
(iv) 2-(2-(2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 ) 아세토니트릴
갓 분쇄한 탄산칼륨 (1189 mg, 8.60 mmol)을 DMF (15 mL) 중 3-메톡시-5-니트로페놀 (533 mg, 3.15 mmol) 및 상기 단계 (iii)으로부터의 화합물 (640 mg, 2.87 mmol)의 용액에 첨가하고, 밤새 60 ℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, EtOAc (100 mL)로 희석한 뒤, 20% v/v 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (743 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.35 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.00 (t, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.26 - 4.18 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.81 - 3.72 (m, 2H), 3.71 - 3.59 (m, 4H).
m/z 319.2 (M+Na)+ (ES+)
(v) 2-(2-(2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 ) 아세토니트릴
EtOH (13 mL), THF (5 mL) 및 물 (2 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 화합물 (400 mg, 1.35 mmol)의 용액에 철 (754 mg, 13.5 mmol)에 이어 염화암모늄 (28.9 mg, 0.54 mmol)을 첨가하고, 생성된 슬러리를 2시간 동안 가열 환류시켰다. 반응물을 냉각시키고 셀라이트를 통해 여과한 후, EtOAc로 세척하였다 (2 × 20 mL). 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (24 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (263 mg, 0.938 mmol, 69.5% 수율)을 농후한 옅은 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.75 (d, 2H), 5.69 (t, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.49 (s, 2H), 4.00 - 3.91 (m, 2H), 3.71 - 3.63 (m, 6H), 3.63 (s, 3H).
m/z 267.3 (M+H)+ (ES+)
(vi) N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-(시아노메톡시)에톡시)에톡시)-5-메톡시페닐)-아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드
DMF (3 mL) 중 N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 310 mg, 0.54 mmol), 상기 단계 (v)로부터의 화합물 (145 mg, 0.54 mmol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (226 mg, 1.63 mmol)의 현탁액을 3회 질소로 백충전하여 배기시켰다. 혼합물을 질소하에 40 ℃로 가열하고, Pd-175 (10.6 mg, 0.014 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 2시간 동안 가열한 다음, 냉각시키고 여과하였다. 여액을 EtOAc (50 mL)와 20% v/v 염수 (50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-10% MeOH/DCM) 농후한 갈색 오일을 얻었다. 물질을 DCM (5 mL)에 용해시킨 다음, 20% v/v 염수 (10 mL)로 세척하였다. 용매를 제거하여 부제 화합물 (362 mg)을 베이지색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.48 (s, 2H), 4.04 - 3.92 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.72 (dt, 2H), 3.69 - 3.58 (m, 7H), 3.10 (s, 3H),1.27 (s, 9H).
m/z 799.4 (M+H)+ (ES+)
(vii) N-(3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-((1H-테트라졸-5-일)메톡시)에톡시)에톡시)-5-메톡시페닐)-아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-5-( tert -부틸)-2-메톡시페닐)-메탄설폰아미드
TMSN3 (49.8 μL, 0.37 mmol)를 톨루엔 (2 mL) 중 상기 단계 (vi)로부터의 화합물 (100 mg, 0.12 mmol) 및 디부틸틴 옥사이드 (31 mg, 0.12 mmol)의 슬러리에 첨가하고, 생성된 슬러리를 1시간 동안 100 ℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, MeOH (2 mL)로 켄칭하였다. 용매를 제거하고, 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18, 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고 포름산으로 pH를 7로 조정하였다. 용매를 제거하여 회백색 고체를 얻었다. 이것을 EtOH (1 mL)에 용해시킨 다음, 물 (4 mL)에서 침전시켰다. 생성된 침전을 여과 수집하고 표제 화합물 (31 mg)을 회백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.03 - 3.93 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.74 - 3.68 (m, 2H), 3.68 - 3.58 (m, 7H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 842.1 (M+H)+ (ES+)
실시예 24
2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00081
(i) 에틸 2-(2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 )아세테이트
탄산칼륨 (1.226 g, 8.87 mmol)을 DMF (20 mL) 중 3-메톡시-5-니트로페놀 (0.5 g, 2.96 mmol), 에틸 2-(2-클로로에톡시)아세테이트 (0.440 mL, 2.96 mmol) 및 요오드화나트륨 (0.222 g, 1.478 mmol)의 슬러리에 첨가하고, 70 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 가열하여 90 ℃까지 올리고, 반응물을 24시간 동안 교반시켰다. 반응물을 실온으로 냉각하고, EtOAc (100 mL)와 20% v/v 염수 (100 mL) 사이에 분배시킨 다음, 유기층을 20% v/v 염수 (50 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하였다 (24 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산). 얻은 물질을 EtOAc (50 mL)에 용해시킨 다음, NaOH (2 M aq, 2 × 50 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (300 mg)을 옅은 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.40 - 7.30 (m, 2H), 7.00 (t, 1H), 4.30 - 4.21 (m, 2H), 4.20 (s, 2H), 4.12 (q, 2H), 3.90 - 3.79 (m, 5H), 1.20 (t, 3H).
m/z 322.2 (M+Na)+ (ES+)
(ii) 에틸 2-(2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 )아세테이트
철 (560 mg, 10.0 mmol)에 이어 염화암모늄 (21.4 mg, 0.40 mmol)을 EtOH (13 mL), THF (5 mL) 및 물 (2 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 화합물 (300 mg, 1.00 mmol)의 용액에 첨가하고, 생성된 슬러리를 1시간 동안 가열 환류시킨 후 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척한 후 (2 × 10 mL), 여액을 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (24 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (233 mg)을 농후한 갈색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.75 (p, 2H), 5.68 (t, 1H), 5.05 (br s, 2H), 4.17 (s, 2H), 4.12 (q, 2H), 4.00 - 3.94 (m, 2H), 3.83 - 3.71 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 1.21 (t, 3H).
m/z 270.3 (M+H)+ (ES+)
(iii) 에틸 2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)아세테이트
DMF (3 mL) 중 N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 211 mg, 0.37 mmol), 상기 단계 (ii)로부터의 화합물 (100 mg, 0.37 mmol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (154 mg, 1.11 mmol)의 현탁액을 질소로 3회 백충전하여 배기시켰다. 혼합물을 질소하에 40 ℃로 가열하고, Pd-175 (7.2 mg, 9.28 ㎛ol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어 반응물을 냉각시키고 여과하였다. 여액을 EtOAc (50 mL)와 20% v/v 염수 (50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-10% MeOH/DCM) 커플링 생성물을 농후한 갈색 오일로서 얻었다. 물질을 DCM (5 mL)에 용해시킨 다음, 20% v/v 염수 (10 mL)로 세척하였다. 용매를 제거하여 부제 화합물 (233 mg)을 베이지색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.11 (dd, 2H), 7.87 (dt, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 4.18 (s, 2H), 4.11 (q, 2H), 4.06 - 3.96 (m, 2H), 3.85 - 3.74 (m, 5H), 3.66 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H), 1.19 (t, 3H).
m/z 802.1 (M+H)+ (ES+)
(iv) 2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)아세트산
NaOH (2M aq, 462 μL, 0.92 mmol)를 THF (1.6 mL) 및 MeOH (0.6 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 화합물 (247 mg)의 용액에 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (106 μL, 1.848 mmol)로 켄칭하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하고 (RP Flash C18, 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄), 생성물이 풍부한 분획을 합쳐 포름산으로 pH를 약 7로 조정하였다. 이어 용매를 제거하여 백색 고체를 얻었다. 이것을 뜨거운 EtOH (2 mL)에서 슬러리화하고, 물 (2 mL)로 연마하였다. 생성된 고체를 여과 수집하고, 물 (2 × 1 mL)로 세척하여 표제 화합물 (145 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.63 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.78 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.07 (s, 2H), 4.03 - 3.91 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.80 - 3.72 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 774.4 (M+H)+ (ES+)
실시예 25
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-N-(N,N-디메틸설파모일)아세트아미드
Figure 112018100721576-pct00082
CDI (26.2 mg, 0.16 mmol)를 건조 DMF (2 mL) 중 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산 (상기 실시예 3 참조; 120 mg, 0.14 mmol)의 용액에 실온에서 첨가하고 생성된 용액을 50 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 디메틸설파미드 (36.4 mg, 0.293 mmol) 및 DBU (44.2 μL, 0.293 mmol)를 용액에 첨가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 추가 분량의 디메틸설파미드 (36.4 mg, 0.293 mmol) 및 DBU (44.2 μL, 0.293 mmol)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 2시간 더 교반하였다. 반응물을 물 (0.1 mL)로 켄칭하고, 조 반응 용액을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18, 12 g 칼럼, 15-50% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고 휘발성 용매를 진공에서 제거하였다. 이어 포름산으로 pH를 7로 조정한 다음, 생성된 고체를 여과 수집하고, 물 (2 × 1 mL)로 세척하여 표제 화합물 (48 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.26 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.06 (s, 2H), 4.02 - 3.94 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.75 - 3.69 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.61 (s, 4H), 3.10 (s, 3H), 2.80 (s, 6H), 1.27 (s, 9H).
m/z 924.5 (M+H)+ (ES+)
실시예 26
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-2-카복실산
Figure 112018100721576-pct00083
(i) 메틸 5-( 하이드록시메틸 )티오펜-2- 카복실레이트
메틸 5-포르밀티오펜-2-카복실레이트 (311 mg, 1.82 mmol)를 MeOH (4 mL)에 용해시킨 다음, 빙조에서 냉각시키고, NaBH4 (68 mg, 1.82 mmol)를 10분에 걸쳐 나누어 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 교반한 후, sat. aq. 염화암모늄 (10 mL)을 첨가하였다. 수성상을 DCM으로 추출하고 (2 × 15 mL), 상 분리기에 통과시킨 다음 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (303 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.61 (d, 1H), 6.92 (dt, 1H), 4.86 - 4.69 (m, 2H), 3.81 (s, 3H).
(ii) 메틸 5-( 클로로메틸 )티오펜-2- 카복실레이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (287 mg, 1.66 mmol)을 건조 CHCl3 (3 mL)에 용해시킨 다음, 0 ℃로 냉각시켰다. DMF (0.05 mL, 3.60 mmol) 및 티오닐 클로라이드 (3 eq, 0.36 mL)를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 0 ℃에서 MeOH (0.5 mL)로 켄칭하고, DCM (15 mL)으로 희석한 뒤, 염수 (15 mL)로 세척하고, 상 분리기에 통과시킨 다음, 진공에서 농축시켰다. 부제 화합물 (303 mg)을 무색 오일로서 분리하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58 (d, 1H), 7.00 (dt, 1H), 4.69 (d, 2H), 3.82 (s, 3H).
(iii) 메틸 5-((2- 하이드록시에톡시 ) 메틸 )티오펜-2- 카복실레이트
0 ℃에서 DMSO (1.5 mL) 중 건조 에탄-1,2-디올 (0.35 mL, 6.29 mmol)의 교반 용액에 포타슘 tert-부톡사이드 (194 mg, 1.73 mmol)를 10분에 걸쳐 나누어 첨가하였다. 생성된 용액을 동일 온도에서 30분 동안 교반한 다음, TBAI (58.1 mg, 0.15 mmol)를 첨가하였다. DMSO (0.5 mL) 중 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (300 mg, 1.57 mmol)의 균질 용액을 상기 반응 혼합물에 적가하고 실온에서 밤새 교반하였다. MeOH (3 mL)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 냉수 (25 mL)를 첨가하고, 수성층을 에틸 아세테이트로 추출한 후 (2 × 25 mL), 합쳐진 유기층을 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (115 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (d, 1H), 7.14 (dt, 1H), 4.78 - 4.63 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.58 - 3.44 (m, 4H).
(iv) 메틸 5-((2-(( 메틸설포닐 ) 옥시 ) 에톡시 ) 메틸 )티오펜-2- 카복실레이트
상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (115 mg, 0.53 mmol)을 DCM (5 mL)에 용해시킨 다음, 빙조에서 냉각시켰다. NEt3 (111 μL, 0.79 mmol)에 이어 MsCl (49.7 μL, 0.63 mmol)을 적가하고, 혼합물을 밤새 실온으로 가온하였다. 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 유기층을 0.1M HCl (10 mL)로 세척하였다. 혼합물을 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (125 mg)을 옅은 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.71 (d, 1H), 7.19 - 7.14 (m, 1H), 4.77 (d, 2H), 4.41 - 4.30 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.77 - 3.69 (m, 2H), 3.19 (s, 3H).
(v) 메틸 5-((2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 메틸 )티오펜-2- 카복실레이트
3-메톡시-5-니트로페놀 (65.0 mg, 0.384 mmol), 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (125 mg, 0.40 mmol) 및 탄산칼륨 (159 mg, 1.15 mmol)을 DMF (3 mL)에 현탁/용해시킨 다음, 밤새 80 ℃로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고 TBME (20 mL)와 염수 (20 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 TBME (20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수 (40 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (105 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (d, 1H), 7.35 (dt, 2H), 7.15 (dt, 1H), 6.99 (t, 1H), 4.79 (d, 2H), 4.36 - 4.19 (m, 2H), 3.89 - 3.78 (m, 9H).
(vi) 메틸 5-((2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 메틸 )티오펜-2- 카복실레이트
상기 단계 (v)로부터의 생성물 (105 mg, 0.286 mmol)을 EtOH (4 mL, 68.5 mmol)에 용해시켰다. Pd-C (type 87L) (30.4 mg, 0.014 mmol)를 첨가하고, 반응물을 수소 (1 bar) 분위기하에 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과한 후, 고체를 에탄올 (10 mL)로 세척하였다. 용액을 실리카 상에서 직접 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하였으나 (12 g 칼럼, 0-5% (0.7 M 암모니아/MeOH)/DCM) 충분한 순도의 생성물을 제공하지는 못했다. 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 재정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% (0.7 M 암모니아/MeOH)/DCM) 부제 화합물 (57 mg)을 암적색 오일로서 수득하였다.
m/z 338.1 (M+H)+ (ES+)
(vii) 메틸 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-2-카복실레이트
DMF (2 mL) 중의 N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)-메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 96 mg, 0.169 mmol), 상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (57mg, 0.169 mmol), Pd-175 (6.60 mg, 8.45 ㎛ol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (70.0 mg, 0.507 mmol)을 3회 배기 및 질소 백충전으로 탈기시켰다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 70 ℃로 가열하고, 추가 분량의 Pd-175 (13.2 mg, 8.45 ㎛ol)를 DMF (2 mL) 중의 용액으로서 2시간에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하여 (RP Flash C18) (12 g 칼럼, 25-100% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (23mg)을 암적색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.32 - 8.27 (m, 1H), 8.20 - 8.14 (m, 1H), 8.13 - 8.06 (m, 2H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.74 - 7.66 (m, 2H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.17 - 7.11 (m, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.80 (t, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.77 (d, 2H), 4.03 (dd, 2H), 3.84 - 3.74 (m, 7H), 3.65 (s, 3H), 3.08 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
(viii) 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-2-카복실산
상기 단계 (vii)로부터의 생성물 (22 mg, 0.025 mmol)을 THF (0.75 mL) 및 MeOH (0.25 mL)에 용해시켰다. NaOH (2M aq.) (139 μL, 0.27 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (0.25 mL)로 산성화시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하였다 (12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물-함유 분획을 합치고, 포름산으로 pH 약 4로 산성화시킨 다음, 진공에서 농축시켜 표제 화합물 (7.8 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.44 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.14 - 8.07 (m, 2H), 7.89 - 7.84 (m, 1H), 7.69 (ddd, 1H), 7.60 (ddd, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.04 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.89 (t, 1H), 6.81 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.02 (dd, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.79 - 3.73 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 856.2 (M+H)+ (ES+)
실시예 27
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-3-카복실산
Figure 112018100721576-pct00084
(i) 메틸 5-( 하이드록시메틸 )티오펜-3- 카복실레이트
메틸 5-포르밀티오펜-2-카복실레이트 (311 mg, 1.82 mmol)를 MeOH (4 mL)에 용해시킨 다음, 0 ℃로 냉각시키고, NaBH4 (114 mg, 2.11 mmol)를 10분에 걸쳐 나누어 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 교반하고, sat. aq. 염화암모늄 (10 mL)를 첨가하였다. 수성상을 DCM으로 추출하고 (2 × 15 mL), 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (209 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (d, 1H), 7.40 (dt, 1H), 4.82 (dd, 2H), 3.85 (s, 3H), 1.97 (t, 1H).
(ii) 메틸 5-( 클로로메틸 )티오펜-3- 카복실레이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (209 mg, 1.21 mmol)을 건조 CHCl3 (3 mL)에 용해시킨 다음, 0 ℃로 냉각시켰다. DMF (0.05 mL, 3.60 mmol) 및 티오닐 클로라이드 (0.26 mL, 3.6 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 0 ℃에서 MeOH (0.5 mL)로 켄칭하였다. 반응물을 DCM (15 mL)으로 희석하고, 염수 (15 mL)로 세척한 후, 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (190 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.48 (dt, J = 1.4, 0.8 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 0.7 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H).
(iii) 메틸 5-((2- 하이드록시에톡시 ) 메틸 )티오펜-3- 카복실레이트
0 ℃에서 DMSO (1.5 mL) 중 건조 에탄-1,2-디올 (0.22 mL, 3.99 mmol)의 교반 용액에 포타슘 tert-부톡사이드 (123 mg, 1.09 mmol)를 10분에 걸쳐 나누어 첨가하였다. 생성된 용액을 동일 온도에서 30분 더 교반하고 TBAI (36.8 mg, 0.10 mmol)를 첨가하였다. DMSO (0.5 mL) 중 상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (190 mg, 0.99 mmol)의 균질 용액을 적가하고, 실온에서 밤새 교반하였다. MeOH (3 mL)를 첨가하고, 반응물을 밤새 교반하였다. 냉수 (15 mL)를 첨가하고, 수성층을 에틸 아세테이트로 추출한 후 (2 × 25 mL), 합쳐진 유기층을 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% MeOH/DCM) 부제 화합물 (106 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (d, 1H), 7.40 (dt, 1H), 4.72 - 4.62 (m, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.55 - 3.49 (m, 2H), 3.49 - 3.42 (m, 2H).
(iv) 메틸 5-((2-(( 메틸설포닐 ) 옥시 ) 에톡시 ) 메틸 )티오펜-3- 카복실레이트
상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (105 mg, 0.486 mmol)을 DCM (5 mL)에 용해시킨 다음, 0 ℃로 냉각시켰다. NEt3 (102 μL, 0.728 mmol)에 이어 MsCl (45.4 μL, 0.583 mmol)을 적가하고, 혼합물을 밤새 실온으로 가온하였다. 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 유기층을 0.1M HCl (10 mL)로 세척하였다. 수성층을 DCM (5 mL)으로 추가 추출하고, 합쳐진 유기층을 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (115 mg)을 옅은 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.33 (d, 1H), 7.45 - 7.41 (m, 1H), 4.72 (d, 2H), 4.47 - 4.26 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.75 - 3.61 (m, 2H), 3.22 - 3.09 (m, 3H).
(v) 메틸 5-((2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 메틸 )티오펜-3- 카복실레이트
3-메톡시-5-니트로페놀 (59.0 mg, 0.349 mmol), 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (110 mg, 0.366 mmol) 및 탄산칼륨 (145 mg, 1.046 mmol)을 DMF (3 mL)에 현탁/용해시킨 다음, 밤새 80 ℃로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고 TBME (20 mL)와 염수 (20 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 TBME (20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수 (40 mL)로 세척한 다음, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (92 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (d, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 1H), 7.34 (dt, 2H), 6.99 (t, 1H), 4.75 (d, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.83 - 3.80 (m, 2H), 3.79 (s, 3H).
(vi) 메틸 5-((2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 메틸 )티오펜-3- 카복실레이트
상기 단계 (v)로부터의 생성물 (92 mg, 0.25 mmol)을 물 (0.5 mL)과 EtOH (4 mL, 68.5 mmol)에 용해시켰다. 철 (84 mg, 1.50 mmol) 및 염화암모늄 (107 mg, 2.00 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 격렬히 교반하면서 2시간 동안 70 ℃로 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과한 후, 고체를 에탄올 (10 mL)로 세척하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% (0.7 M 암모니아/MeOH)/DCM) 부제 화합물 (42 mg)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (d, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 1H), 5.79 - 5.73 (m, 2H), 5.69 (t, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.73 (d, 2H), 4.06 - 3.90 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.76 - 3.71 (m, 2H), 3.62 (s, 3H).
(vii) 메틸 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-3-카복실레이트
DMF (3 mL) 중 상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (37 mg, 0.11 mmol), N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 62.4 mg, 0.110 mmol), Pd-175 (4.28 mg, 5.48 ㎛ol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (45.5 mg, 0.32 mmol)의 현탁액을 3 사이클의 배기 및 질소 백충전으로 탈기하였다. 반응물을 2시간 동안 70 ℃로 가열하였다. 추가 분량의 Pd-175 (8.48 mg, 10.9 ㎛ol)를 2시간에 걸쳐 DMF (2 mL)에서 적가하였다. 반응물을 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 25-100% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (36 mg)을 베이지색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.36 - 8.25 (m, 2H), 8.18 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.89 - 7.84 (m, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.44 - 7.40 (m, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.73 (d, 2H), 4.06 - 3.99 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.77 - 3.72 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
(viii) 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-3-카복실산
상기 단계 (vii)로부터의 생성물 (33 mg, 0.038 mmol)을 THF (2 mL) 및 MeOH (0.5 mL)에 용해시켰다. NaOH (2M aq., 209 μL, 0.417 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (0.25 mL)로 산성화시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하였다 (24 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물-함유 분획을 합치고, 포름산으로 pH 약 4로 산성화한 후, 진공에서 농축시켰다. 생성된 고체를 최소량의 에탄올 (약 0.3 mL)에 제용해시킨 다음, 물 (0.2 mL)을 적가하여 백색 고체를 부수었다. 바이알을 2000 rpm에서 5분 동안 원심븐리하고, 상등액을 따라내었다. 생성된 고체를 진공 중 55 ℃에서 48시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.68 (bs, 1H), 9.38 (s, 1H), 9.12 (bs, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.14 - 8.07 (m, 2H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.42 - 7.33 (m, 2H), 7.03 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.80 (t, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.72 (d, 2H), 4.06 - 3.98 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.78 - 3.71 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 856.2 (M+H)+ (ES+)
실시예 28
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(디플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00085
(i) 1- 브로모 -3-( 디플루오로메톡시 )-5-니트로벤젠
DMF (8 mL) 중 3-브로모-5-니트로페놀 (460 mg, 2.11 mmol), 소듐 2-클로로-2,2-디플루오로아세테이트 (804 mg, 5.28 mmol) 및 Cs2CO3 (1375 mg, 4.22 mmol)의 혼합물을 100 ℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 TBME (50 mL)와 물 (50 mL) 사이에 분배시키고, 수성층을 TBME (30 mL)로 추출한 후, 합쳐진 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기층을 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (400 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.25 (t, 1H), 7.96 (t, 1H), 7.69 - 7.62 (m, 1H), 6.60 (t, 1H).
(ii) 3-( 디플루오로메톡시 )-5-니트로페놀
물 (1.5 mL) 및 디옥산 (1.5 mL) 중 KOH (197 mg, 2.98 mmol) 및 상기 단계 (i)로부터의 생성물 (200 mg, 0.746 mmol)의 혼합물을 5분 동안 탈기시킨 다음, 디-tert-부틸(2',4',6'-트리이소프로필-[1,1'-바이페닐]-2-일)포스핀 (17.4 mg, 0.041 mmol) 및 Pd2(dba)3 (17.0 mg, 0.019 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2분 더 탈기시킨 뒤, 질소 분위기하에 100 ℃에서 3시간 가열하였다. 반응물을 냉각시키고 1M HCl (20 mL)과 EtOAc (20 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 물 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (176 mg)을 암갈색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (d, 2H), 6.96 (t, 1H), 6.57 (t, 1H).
(iii) 에틸 2-(2-(2-(3-( 디플루오로메톡시 )-5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (174 mg, 0.71 mmol), 에틸 2-(2-(2-((메틸설포닐)옥시)-에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 2(ii) 참조; 202 mg, 0.74 mmol) 및 탄산칼륨 (295 mg, 2.13 mmol)을 DMF (4 mL)에 현탁/용해시킨 다음, 16시간 동안 60 ℃로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, TBME (20 mL)와 염수 (20 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 TBME (20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수 (40 mL)로 세척한 다음, 실리카겔 상에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (147 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.68 - 7.61 (m, 1H), 7.61 (t, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.29 (t, 1H), 4.33 - 4.24 (m, 2H), 4.17 - 4.06 (m, 4H), 3.83 - 3.73 (m, 2H), 3.62 (s, 4H), 1.19 (t, 3H).
m/z 397.1 (M+NH4)+ (ES+)
(iv) 에틸 2-(2-(2-(3-아미노-5-( 디플루오로메톡시 ) 페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
EtOH (20 mL) 중 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (147 mg, 0.36 mmol) 및 Pd/C (Type 87L, 5 wt%) (39.2 mg, 0.02 mmol)의 용액을 2 bar H2 하에 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOH (10 mL)로 세척한 후 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-5% (0.7 M 암모니아/MeOH)/DCM) 부제 화합물 (89 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.09 (t, 1H), 5.99 (t, 1H), 5.94 (t, 1H), 5.88 (t, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.16 - 4.08 (m, 4H), 4.00 - 3.95 (m, 2H), 3.74 - 3.67 (m, 2H), 3.66 - 3.57 (m, 4H), 1.20 (t, 3H).
m/z 350.1 (M+H)+ (ES+)
(v) 에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(디플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트
N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)-메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 128 mg, 0.22 mmol), 상기 단계 (iv)로부터의 생성물, Pd-175 (8.7 mg, 0.01 mmol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (93 mg, 0.67 mmol)을 DMF (1 mL)에 용해시킨 다음, 3회 배기 및 질소 백충전으로 탈기시켰다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 70 ℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 역상 칼럼에 직접 로딩하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하여 (RP Flash C18, 12 g 칼럼, 25-100% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (116 mg)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.16 - 8.09 (m, 2H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.17 (t, 1H), 7.14 (t, 1H), 7.08 (t, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.63 (dd, 1H), 6.26 (t, 1H), 6.08 (d, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 4H), 4.06 - 3.99 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.76 - 3.70 (m, 2H), 3.64 - 3.57 (m, 4H), 3.09 (s, 3H), 1.27 (s, 9H), 1.18 (t, 3H).
m/z 882.3 (M+H)+ (ES+)
(vi) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(디플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
상기 단계 (v)로부터의 생성물 (116 mg, 0.13 mmol)을 THF (3 mL) 및 MeOH (1 mL)에 용해시켰다. NaOH (2M aq., 723 μL, 1.447 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 AcOH (0.25 mL)로 산성화시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 RP Flash C18 상에서 크로마토그래피로 정제하였다 (24 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물 함유 분획을 합치고, 포름산으로 pH 약 4로 산성화한 다음, 진공에서 농축시켜 생성된 침전을 여과해 내고 물 (5 mL)로 세척하였다. 이어 고체를 최소량의 에탄올 (약 1 mL)에 재용해시킨 다음, 물 (0.5 mL)을 적가하여 백색 고체를 부수었다. 바이알을 2000 rpm에서 5분 동안 원심분리한 후, 상등액을 때라 내었다. 생성된 고체를 진공 중에 55 ℃에서 48시간 동안 건조시켜 표제 화합물 (58 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.42 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.15 (t, 1H), 7.14 (t, 1H), 7.08 (t, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.63 (dd, 1H), 6.27 (t, 1H), 6.09 (d, 1H), 4.08 - 3.94 (m, 4H), 3.81 (s, 3H), 3.76 - 3.69 (m, 2H), 3.60 (s, 4H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 854.2 (M+H)+ (ES+)
실시예 29
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-에티닐페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00086
(i) tert -부틸 2-(2-(2-( 벤질옥시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
수소화나트륨 (4.08 g, 102 mmol)을 THF (200 mL) 중 2-(2-(벤질옥시)에톡시)에탄올 (9.14 mL, 51.0 mmol)의 빙조-냉각 용액에 15분간 나누어 첨가하였다. 반응물을 1시간 동안 교반한 후, THF (50 mL) 중 tert-부틸 2-브로모아세테이트 (8.97 mL, 61.1 mmol)를 1시간에 걸쳐 적가하였다. 반응물을 빙조 온도에서 3시간 동안 교반하고, 염화암모늄 (50 mL)으로 켄칭하였다. TBME (250 mL)를 첨가하고, 유기층을 염수로 세척하였다 (2 × 200 mL). 유기층을 실리카 상에서 농축시키고, 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (220 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (1.95 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.43 - 7.20 (m, 5H), 4.50 (s, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.66 - 3.47 (m, 8H), 1.42 (s, 9H).
(ii) tert -부틸 2-(2-(2- 하이드록시에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (1.83 g, 5.90 mmol)을 메탄올 (30 mL)에 용해시킨 다음, Pd-C (type 87L, 5 wt.%, 0.627 g, 0.29 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4 bar의 수소하에 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 고체를 EtOH (50 mL)로 세척한 후, 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (1.23 g)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.57 (t, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.60 - 3.51 (m, 4H), 3.51 - 3.40 (m, 4H), 1.43 (s, 9H).
(iii) tert -부틸 2-(2-(2-(( 메틸설포닐 ) 옥시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (1.23g, 5.58 mmol)을 DCM (30 mL)에 용해시킨 다음, 빙조에서 냉각시켰다. EtN3 (1.16 mL, 8.38 mmol)에 이어 MsCl (0.52 mL, 6.70 mmol)을 적가하고, 혼합물을 밤새 실온으로 가온시켰다. 혼합물을 DCM (10 mL)으로 희석하고, 유기층을 0.1M HCl (10 mL)로 세척하였다. 혼합물을 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (1.83 g)을 옅은 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.35 - 4.28 (m, 2H), 4.00 (s, 2H), 3.73 - 3.65 (m, 2H), 3.64 - 3.54 (m, 4H), 3.18 (s, 3H), 1.43 (s, 9H).
(iv) tert -부틸 2-(2-(2-(3- 브로모 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
3-브로모-5-니트로페놀 (0.626 g, 2.87 mmol), 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (1 g, 3.02 mmol) 및 탄산칼륨 (1.191 g, 8.62 mmol)을 3 mL DMF에 현탁/용해시킨 다음, 밤새 80 ℃로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, TBME (20 mL)와 염수 (20 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 TBME (20 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수 (40 mL)로 세척한 다음, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 뒤, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (965 mg)을 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.04 - 7.89 (m, 1H), 7.79 - 7.72 (m, 1H), 7.70 (dd, 1H), 4.32 - 4.22 (m, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.82 - 3.72 (m, 2H), 3.66 - 3.54 (m, 4H), 1.42 (s, 9H).
m/z 439.1 (M+NH4)+ (ES+)
(v) tert -부틸 2-(2-(2-(3-니트로-5-(( 트리이소프로필실릴 ) 에티닐 ) 페녹시 ) 에톡시 )에톡시)아세테이트
Pd(PPh)4 (86 mg, 0.075 mmol)를 트리에틸아민 (1 mL) 및 DMF (3 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (314mg, 0.747 mmol), CuI (7.11 mg, 0.037 mmol), 및 에티닐트리이소프로필실란 (0.268 mL, 1.195 mmol)의 탈기 현탁액에 첨가하였다. 혼합물을 85 ℃ (블록 온도)에서 1시간 동안 가열한 후 냉각시키고, 실리카겔 상에서 직접 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (24 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (255 mg)을 옅은 황색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.82 - 7.71 (m, 2H), 7.47 - 7.45 (m, 1H), 4.34 - 4.23 (m, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.81 - 3.73 (m, 2H), 3.66 - 3.54 (m, 4H), 1.41 (s, 9H), 1.19 - 1.03 (m, 21H).
(vi) tert -부틸 2-(2-(2-(3-아미노-5-(( 트리이소프로필실릴 ) 에티닐 ) 페녹시 )에톡시)에톡시)아세테이트
상기 단계 (v)로부터의 생성물 (255 mg, 0.489 mmol)을 EtOH (6 mL) 및 H2O (0.75 mL)에 용해시켰다. 철 (164 mg, 2.93 mmol) 및 염화암모늄 (209 mg, 3.91 mmol)을 첨가하고, 플라스크를 배기시키고, 질소로 3회 백충전하였다. 반응 혼합물을 격렬히 교반하면서 2시간 동안 80 ℃로 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과한 후, 고체를 에탄올 (10 mL)로 세척하였다. 생성된 조 생성물을 DCM (20 mL)에 용해시켜 물 (20 mL)로 세척하고, 상 분리기에 통과시키고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (203 mg)을 오렌지색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.30 (dd, 1H), 6.17 (t, 1H), 6.14 (dd, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.03 - 3.96 (m, 4H), 3.72 - 3.67 (m, 2H), 3.60 (s, 4H), 1.42 (s, 9H), 1.09 (s, 21H).
m/z 492.3 (M+H)+ (ES+)
(vii) tert -부틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-((트리이소프로필실릴)에티닐)페녹시)에톡시)-에톡시)아세테이트
N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)-메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 231 mg, 0.407 mmol), 상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (200 mg, 0.407 mmol), Pd-175 (15.8 mg, 0.02 mmol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (169 mg, 1.220 mmol)을 DMF (3 mL)에 용해/현탁시키고, 3회 배기 및 질소 백충전으로 탈기시켰다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 70 ℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, TBME (30 mL)와 물 (30 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 물 (20 mL)로 세척하고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (152 mg)을 갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.15 - 8.07 (m, 2H), 7.89 - 7.83 (m, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 1H), 7.63 - 7.58 (m, 1H), 7.56 (t, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.17 (t, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.61 (dd, 1H), 6.48 (dd, 1H), 6.07 (d, 1H), 4.10 - 4.01 (m, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.76 - 3.68 (m, 2H), 3.60 (s, 4H), 3.09 (s, 3H), 1.40 (s, 9H), 1.27 (s, 9H), 1.16 - 1.02 (m, 21H).
m/z 1024.3 (M+H)+ (ES+)
(viii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-에티닐페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
상기 단계 (vii)로부터의 생성물 (152 mg, 0.14 mmol)을 THF (4 mL)에 용해시킨 다음, TBAF (THF 중 1M) (156 μL, 0.15 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 60시간 동안 교반한 후, DCM (40 mL)과 물 (40 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하여 상 분리기에 통과시킨 후, 진공에서 농축시켰다. 조 물질 (100 mg)을 DCM (1 mL)에 용해시킨 다음, TFA (178 μL, 2.30 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 16시간 동안 교반하고 추가 분량의 TFA (178 μL, 2.30 mmol)를 첨가하였다. 휘발물을 진공에서 제거하고, 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18, 12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물을 분취용 HPLC로 추가 정제하여 (Basic, Waters X-Bridge Prep-C18, 5 ㎛, 19×50 mm 칼럼, 물 중 35-65% MeCN) 표제 화합물 (6 mg)을 옅은 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.61 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.17 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.69 (ddd, 1H), 7.60 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.63 (dd, 1H), 6.51 (dd, 1H), 6.11 (d, 1H), 4.06 (s, 1H), 3.96 (d, 2H), 3.84 - 3.78 (m, 4H), 3.70 (dd, 2H), 3.57 (s, 4H), 3.09 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 812.2 (M+H)+ (ES+)
실시예 30
N-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-(3-(4-((2-((3- 메톡시 -5-(2-(2-((5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)메탄설폰아미드
Figure 112018100721576-pct00087
하이드록실아민 (물 중 50%) (6.0 μL, 0.198 mmol) 및 EtOH (2 mL) 중 N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-(시아노메톡시)에톡시)에톡시)-5-메톡시페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄-설폰아미드 (상기 실시예 23(vi) 참조; 79 mg, 0.01 mmol)의 현탁액을 75 ℃로 가열하고, 밤새 교반시켰다. 용매를 제거하고, 잔류물을 톨루엔 (2 × 1 mL)과 공비시켜 맑은 오일을 얻었다 (m/z 832.1 (M+H)+ (ES+)). 조 생성물을 DMF (2.5 mL)에 용해시킨 다음, 0 ℃로 냉각시켰다. 피리딘 (8.8 μL, 0.109 mmol)에 이어 이소부틸 클로로포르메이트 (0.013 mL, 0.099 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 0 ℃에서 30분 동안 교반한 후, 실온에서 20분 동안 교반하였다. 반응물을 물 (10 mL)로 켄칭하고 EtOAc로 추출하였다 (3 × 5 mL). 합쳐진 유기 추출물을 염수 (5 mL)로 세척하여 소수성 프릿에 통과시킨 다음, 진공에서 농축시켜 갈색 오일을 얻었다 (m/z 932.5 (M+H)+ (ES+)). 조 물질을 EtOH (2.5 mL) 및 sat. aq. NaHCO3 (0.5 mL)의 혼합물에 용해시킨 다음, 65 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 여과한 뒤, DMF (1 mL)로 희석하였다. EtOH를 공기 흐름하에 제거한 후, 조 반응 혼합물을 Companion (RP Flash C18)에서 크로마토그래피로 정제하였다 (12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고 포름산으로 pH를 약 7로 조정하였다. 용매를 진공에서 제거하여 암갈색 검을 얻었다. 이것을 분취용 HPLC로 재정제하고 (Waters, Basic (0.1% 중탄산암모늄), Basic, Waters X-Bridge Prep-C18, 5 ㎛, 19×50 mm 칼럼, 물 중 30-60% MeCN), 생성물이 풍부한 분획들을 동결-건조시켜 표제 화합물을 무색 검으로서 수득하였다 (5 mg).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.89 (t, 1H), 6.80 (t, 1H), 6.58 (d, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.34 (s, 2H), 4.03 - 3.91 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.74 - 3.68 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.63 - 3.54 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 857.7 (M+H)+ (ES+)
실시예 31
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산, 나트륨 염
Figure 112018100721576-pct00088
방법 1
질소하에서 5 L 플라스크에 IPA/물 (90:10; 2.56 L, 12 부피)를 첨가하고, 용매를 55 ℃로 가열한 후, 이 온도에서 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산 (상기 실시예 3 참조; 213.9 g, 0.261 mol)을 15분에 걸쳐 서서히 채웠다. 추가로 7분간 교반한 후 공식 용액을 얻었다. 용액 (핑크색)에 탄산수소나트륨 (1.05 equiv.; 0.274 mol, 274 mL)을 온도를 53 ℃에서 유지하면서 첨가하였다. 용액을 20분에 걸쳐 50 ℃로 냉각시키고, 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산의 나트륨 염 (1.0 g)으로 시딩하였다; 시드를 유지시키고 냉각을 25 ℃까지 10 ℃/시간으로 계속한 후, 8 부피의 IPA (1.71 L)를 2시간에 걸쳐 채웠다. 배치를 이 온도에서 18시간 동안 교반한 다음 0 ℃로 냉각시키고, 여과를 통해 분리 전에 1.5시간 숙성시켰다. 케이크 및 용기 세정을 배치 액체를 사용하여 수행하고, 케이크를 건조시키고 고체를 진공하에 50 ℃에서 18시간 동안 건조시켰다. 표제 화합물을 81%의 수율 (177.9 g)로 희미한 적색 고체로서 수득하였다; HPLC에 의한 순도는 99.24 면적%로 보고되었고 양성자 NMR은 0.58 중량%의 IPA 및 0.55 중량%의 물 (각각 HRGC 및 KF에 의해 결정된 용매)을 갖는 구조와 일치하는 배치를 나타내었다. 배치를 50 ℃에서 진공하에 건조하여 IPA 수준을 2,238 ppm (0.22%)까지 낮추었다. 나트륨 함량은 이온 크로마토그래피에 의해 2.5%이었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.95 (s, 1H), 9.24 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.08-8.12 (m, 3H), 7.83 (d, 1H), 7.55-7.67 (m, 2H), 7.35 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.65-6.72 (m, 2H), 6.60 (dd, 1H), 6.11 (d, 1H), 6.00 (t, 1H), 3.77-3.84 (m, 5H), 3.63-3.68 (m, 7H), 3.53 (s, 4H), 3.05 (s, 3H), 1.25 (s, 9H).
방법 2
에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 3(iii) 참조; 총 413 g (3.14% 에틸 아세테이트 함유, 400 g 활성제, 472.8 mmol, 1 당량에 상응함)을 아세톤/물 (800 mL 및 800 mL, 2 vol 및 2 vol) 및 NaOH (37.8 g, 945.7 mmol, 2 eq.)와 혼합하고, 22 ℃에서 밤새 교반하였다. AcOH (26.6 mL, 465 mmol, 0.9836 당량)를 사용하여 반응물을 pH 7.07 (pH 6.9 내지 7.3의 pH 범위가 허용가능)로 산성화시킨 후, IPA (4000 mL, 10 vol)를 첨가하였다 (12 부피의 IPA가 유사한 수율과 순도를 나타냄). 생성된 혼합물을 1시간에 걸쳐 10 ℃로 냉각시키고 1시간 동안 교반한 후 (더 큰 스케일의 제제인 경우, 혼합물은 이 대신 7 ℃에서 밤새 교반될 수 있다), 여과하여 조 생성물 (329 g)을 83% 수율로 얻었다 (단, LC로 측정한 순도는 98.9%, 출발물질 <0.1%; XRD 및 DSC 분석은 상기 방법 1에 의해 제조된 형태를 나타냈고, NMR 분석은 1.3% NaOAc 및 0.4% IPA를 나타냈다). 조 생성물 (329 g, 392 mmol, 1 당량)을 8 vol의 15% 물:IPA (물 395 mL:IPA 2237 mL)에서 22 ℃에서 2시간 동안 슬러리화하였다. 이어서, 생성된 혼합물을 2시간 동안 45 ℃로 가열한 다음, 30 ℃로 냉각시키고, 여과하였다. 이로써 조 생성물로부터 94%의 회수율로 표제 화합물 (315 g)을 얻었으며, NaOAc 함량은 0.39%이고 IPA는 0.36%이었다. 반응의 전체 수율은 79%였다.
실시예 32
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(트리플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
Figure 112018100721576-pct00089
(i) 3- 하이드록시 -5-( 트리플루오로메톡시 )벤조산
물 (30 mL) 및 디옥산 (30 mL) 중 3-브로모-5-(트리플루오로메톡시)벤조산 (3200 mg, 11.23 mmol) 및 NaOH (2520 mg, 44.9 mmol)의 용액을 5분 동안 탈기시키고, Pd2(dba)3 (206 mg, 0.225 mmol) 및 디-tert-부틸(2',4',6'-트리이소프로필-[1,1'-바이페닐]-2-일)포스핀 (215 mg, 0.505 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2분간 탈기시킨 후, 질소 분위기하에 100 ℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 혼합물을 물 (150 mL)로 희석하고, 디에틸 에테르로 세척하였다 (3 × 75 mL). 이어 수성층을 HCl (1 M, 33 mL)로 ~pH 3으로 산성화하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다 (3 × 75 mL). 합쳐진 유기층을 포화 염수 (50 mL)로 세척하고, 건조시키고 (MgSO4), 여과한 후, 감압하에 농축시켜 황색 오일을 얻었다. 오일을 디에틸 에테르 (10 mL)에 재용해시킨 다음, 이소헥산 (30 mL)으로 희석하였다. 생성된 침전을 여과 수집하고, 이소헥산 (10 mL)으로 세척하여 부제 화합물 (1.71 g)을 황갈색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.34 (bs, 1H), 10.57 (bs, 1H), 7.36 (dd, 1H), 7.28 - 7.20 (m, 1H), 6.99 - 6.90 (m, 1H).
(ii) 벤질 3-(2-(2-(2-( tert - 부톡시 )-2- 옥소에톡시 ) 에톡시 ) 에톡시 )-5-( 트리플루오로메톡시 )벤조에이트
상기 단계 (i)로부터의 생성물 (210 mg, 0.945 mmol) 및 탄산칼륨 (392 mg, 2.84 mmol)을 DMF (1.25 mL)에 용해/현탁시키고, 벤질 브로마이드 (0.112 mL, 0.945 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 탄산칼륨 (392 mg, 2.84 mmol), DMF (4 mL) 및 tert-부틸 2-(2-(2-((메틸설포닐)옥시)에톡시)에톡시)아세테이트 (상기 실시예 29(iii) 참조; 310 mg, 1.040 mmol)를 첨가하고, 반응물을 16시간 동안 70 ℃로 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, TBME (50 mL)와 물 (50 mL) 사이에 분배시켰다. 수성층을 DCM (50 mL)으로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수 (50 mL)로 세척한 후, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (12 g 칼럼, 0-50% EtOAc/iso-헥산) 부제 화합물 (278 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.52 (dd, 1H), 7.50 - 7.45 (m, 2H), 7.45 - 7.34 (m, 4H), 7.34 - 7.29 (m, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.28 - 4.17 (m, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.82 - 3.72 (m, 2H), 3.65 - 3.55 (m, 4H), 1.40 (s, 9H).
m/z 532.2 (M+NH4)+ (ES+)
(iii) 3-(2-(2-(2-( tert - 부톡시 )-2- 옥소에톡시 ) 에톡시 ) 에톡시 )-5-( 트리플루오로메톡시 )벤조산
상기 단계 (ii)로부터의 생성물 (278 mg, 0.540 mmol) 및 Pd-C (57.5 mg, 0.027 mmol)을 EtOH (10 mL)에 용해/현탁시키고, H2 (2 bar) 분위기하에 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과한 뒤, 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (214 mg)을 유리질 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.51 (s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.42 - 7.34 (m, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 1H), 4.26 - 4.18 (m, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.82 - 3.71 (m, 2H), 3.66 - 3.54 (m, 4H), 1.41 (s, 9H).
(iv) tert -부틸 2-(2-(2-(3-((( 벤질옥시 ) 카보닐 )아미노)-5-( 트리플루오로메톡시 )페녹시)에톡시)-에톡시)아세테이트
톨루엔 (2 mL, 0.342 mmol) 중 벤질 알콜 (0.355 mL, 3.42 mmol), 상기 단계 (iii)으로부터의 생성물 (145 mg, 0.342 mmol) 및 디페닐 포스포릴아지드 (0.081 mL, 0.376 mmol)의 교반 용액에 NEt3 (0.071 ml, 0.513 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 80 ℃로 가열하고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (4 g 칼럼, 0-50% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (53 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
m/z 547.2 (M+NH4)+ (ES+)
(v) tert -부틸 2-(2-(2-(3-아미노-5-( 트리플루오로메톡시 ) 페녹시 ) 에톡시 ) 에톡시 )아세테이트
상기 단계 (iv)로부터의 생성물 (50 mg, 0.094 mmol) 및 Pd-C (20.1 mg, 9.44 ㎛ol)을 EtOH (10 mL)에 용해/현탁시키고, H2 (2 bar) 분위기하에 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과한 후, EtOH (10 mL)로 세척하고 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (38 mg)을 적색 오일로서 수득하였다.
m/z 396.1 (M+H)+ (ES+)
(vi) tert -부틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(트리플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)-아세테이트
N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)-메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 54.7 mg, 0.096 mmol), 상기 단계 (v)로부터의 생성물 (38 mg, 0.096 mmol), Pd-175 (7.51 mg, 9.61 ㎛ol) 및 갓 분쇄한 탄산칼륨 (39.8 mg, 0.288 mmol)을 3회 배기 및 질소 백충전으로 탈기시켰다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 70 ℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 RP 칼럼상에 직접 주입하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하여 (RP Flash C18, 12 g 칼럼, 25-100% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (52 mg)을 옅은 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.39 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 9.14 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.71 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.28 (t, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.66 (dd, 1H), 6.40 (t, 1H), 6.07 (d, 1H), 4.07 - 4.02 (m, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.76 - 3.71 (m, 2H), 3.59 (s, 4H), 3.10 (s, 3H), 1.40 (s, 9H), 1.27 (s, 9H).
(vii) 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(트리플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산
상기 단계 (vi)로부터의 생성물 (50 mg, 0.054 mmol)을 THF (1 mL)에 용해시킨 다음, NaOH (2 M aq, 269 μL, 0.539 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밤새 교반한 다음, AcOH (0.25 mL)로 pH 4로 산성화하고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하고 (RP Flash C18, 4 g 칼럼, 35-65% MeCN/10 mM 중탄산암모늄), 생성물 함유 분획을 포름산 (0.6 mL)으로 pH 4로 산성화한 다음, 진공에서 농축시켜 표제 화합물 (20 mg)을 옅은 베이지색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 9.59 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.69 (ddd, J = 8.4, 1H), 7.60 (ddd, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.24 (t, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.65 (dd, 1H), 6.42 - 6.39 (m, 1H), 6.10 (d, 1H), 4.03 (dd, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.75 - 3.68 (m, 2H), 3.58 (s, 4H), 3.09 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 872.2 (M+H)+ (ES+)
실시예 33
N-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-(3-(4-((2-((3- 메톡시 -5-(2-(2-((3-옥소-2,3-디하이드로이속사졸-5-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)메탄설폰아미드
Figure 112018100721576-pct00090
MeOH (3.5 mL) 및 물 (0.5 mL) 중 에틸 4-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)-우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-3-옥소부타노에이트 (상기 실시예 18(ii) 참조; 359 mg, 0.404 mmol)의 슬러리를 0 ℃로 냉각시키고, NaOH (2 M aq) (404 μL, 0.809 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 0 ℃에서 10분 동안 교반하였다. MeOH (200 μL) 중 하이드록실아민 하이드로클로라이드 (84 mg, 1.213 mmol)의 용액을 준비하여 0 ℃로 냉각시켰다. NaOH (2 M aq) (606 μL, 1.213 mmol)를 하이드록실아민 용액에 첨가하고, 0 ℃에서 10분 동안 교반하였다. 이어 하이드록실아민 용액을 에놀레이트 용액에 첨가하고, 0 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음에 용액을 진한 HCl (100 μL, 3.29 mmol)에 75 ℃에서 적가하고, 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 가열을 제거하고, NaOH (2 M aq.)로 pH를 약 7로 조정한 다음, 물 (20 mL)로 희석하였다. 수성층을 EtOAc로 추출하고 (3 × 10 mL), 합쳐진 유기 추출물을 20% v/v 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기층을 소수성 프릿에 통과시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 분취용 HPLC로 정제하고 (Waters, Basic (0.1% 중탄산암모늄), Basic, Waters X-Bridge Prep-C18, 5 ㎛, 19×50 mm 칼럼, 물 중 35-65% MeCN), 생성물이 풍부한 분획을 냉동건조시켜 표제 화합물 (38 mg)을 옅은 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.13 - 8.05 (m, 2H), 7.84 (d, 1H), 7.67 (ddd, 1H), 7.63 - 7.54 (m, 2H), 7.36 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.91 - 6.84 (m, 2H), 6.56 (dd, 1H), 6.09 (d, 1H), 6.04 (t, 1H), 4.05 (s, 1H), 4.00 - 3.94 (m, 2H), 3.84 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.73 - 3.67 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.59 - 3.54 (m, 2H), 3.52 - 3.47 (m, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.22 (s, 9H).
m/z 857.2 (M+H)+ (ES+)
실시예 34
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-( tert -부틸)-2- 메톡시 -3-( 메틸설폰아미도 )페닐) 우레이도 )나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-1-메틸-1H-피롤-2-카복실산
Figure 112018100721576-pct00091
(i) 메틸 5-( 하이드록시메틸 )-1- 메틸 -1H-피롤-2- 카복실레이트
0 ℃에서 MeOH (50 mL) 및 THF (15 mL)의 혼합물 중 메틸 5-포르밀-1-메틸-1H-피롤-2-카복실레이트 (1.1 g, 6.58 mmol)의 용액에 소듐 보로하이드라이드 (0.249 g, 6.58 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 0 ℃에서 2동안 교반하였다. 반응물을 sat. aq. 염화암모늄 (50 mL)으로 서서히 켄칭하고, 백색 고체를 부수었다. 용액을 여과하고, 여액을 DCM (2 × 50 mL)으로 추출하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 조 물질을 DCM (2 mL)에 용해시키고, 실리카 플러그에 통과시킨 후, DCM (200 mL) 중 5% MeOH로 세척하였다. 용매를 진공에서 제거하여 부제 화합물을 갈색 오일 (1.12 g)로서 수득하였다.
m/z 170.6 (M+H)+ (ES+)
(ii) 메틸 5-((2-( 벤질옥시 ) 에톡시 ) 메틸 )-1- 메틸 -1H-피롤-2- 카복실레이트
NaH (오일 중 60%, 213 mg, 5.32 mmol)를 질소하에 0 ℃에서 건조 DMF (50 mL) 중 상기 단계 (i)로부터의 화합물 (600 mg, 3.55 mmol), ((2-브로모에톡시)메틸)벤젠 (0.6 mL, 3.79 mmol) 및 요오드화나트륨 (532 mg, 3.55 mmol)의 용액에 5분에 걸쳐 두 부분으로 나누어 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 MeOH (3 mL)로 켄칭한 후, 20% v/v 염수 (100 mL)로 희석하였다. 수성층을 EtOAc로 추출하고 (3 × 100 mL), 합쳐진 유기 추출물 20% v/v 염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (213 mg)을 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.39 - 7.24 (m, 5H), 6.80 (d, 1H), 6.15 (d, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.65 - 3.49 (m, 4H).
m/z 304.1 (M+H)+ (ES+)
(iii) 메틸 5-((2- 하이드록시에톡시 ) 메틸 )-1- 메틸 -1H-피롤-2- 카복실레이트
물 중 50% 페이스트로의 Pd/C 10% (Type 39) (14.94 mg, 0.140 mmol)를 EtOH (4 mL) 중 상기 단계 (ii)로부터의 화합물 (213 mg, 0.702 mmol)의 용액에 첨가하고, 생성된 슬러리를 1 bar 압력의 수소하에 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc (20 mL)로 세척한 후, 용매를 제거하여 부제 화합물 (137 mg)을 묽은 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.80 (d, 1H), 6.16 (d, 1H), 4.63 (t, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.54 - 3.47 (m, 2H), 3.47 - 3.41 (m, 2H).
m/z 236.1 (M+Na)+ (ES+)
(iv) 메틸 5-((2-(3- 메톡시 -5- 니트로페녹시 ) 에톡시 ) 메틸 )-1- 메틸 -1H-피롤-2-카복실레이트
건조 THF (15 mL) 중 상기 단계 (iii)로부터의 화합물 (310 mg, 1.454 mmol), 3-메톡시-5-니트로페놀 (295 mg, 1.745 mmol) 및 트리페닐포스핀 (458 mg, 1.745 mmol)의 용액에 DIAD (339 μL, 1.745 mmol)를 0 ℃에서 첨가하고, 생성된 적색 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 황색 용액을 EtOAc (30 mL)로 희석하고, 물 (20 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4),진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 Companion에서 크로마토그래피로 정제하여 (40 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 목적하는 미츠노부 (Mitsunobu) 생성물을 황색 고체로서 얻었다. 생성물을 EtOAc (50 mL)에 용해시킨 다음, NaOH (2 M aq., 2 × 50 mL), 물 (50 mL) 및 20% v/v 염수 (50 mL)로 연달아 세척하였다. 유기층을 건조시키고 (MgSO4), 진공에서 농축시켜 부제 화합물 (638 mg)을 옅은 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.33 (m, 2H), 6.96 (t, 1H), 6.79 (d, 1H), 6.18 (d, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.30 - 4.17 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.79 - 3.74 (m, 2H), 3.73 (s, 3H).
m/z 387.1 (M+Na)+ (ES+)
(v) 메틸 5-((2-(3-아미노-5- 메톡시페녹시 ) 에톡시 ) 메틸 )-1- 메틸 -1H-피롤-2-카복실레이트
EtOH (13 mL), THF (5 mL) 및 물 (2 mL) 중 상기 단계 (iv)로부터의 화합물 (638 mg, 0.841 mmol)의 용액에 철 분말 (978 mg, 17.51 mmol)에 이어 염화암모늄 (37.5 mg, 0.700 mmol)을 첨가하고, 생성된 슬러리를 2시간 동안 가열 환류시켰다. 반응물을 냉각시켜 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc (2 × 20 mL)로 세척하였다. 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피로 정제하여 (24 g 칼럼, 0-100% EtOAc/이소헥산) 부제 화합물 (238 mg)을 농후한 무색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.80 (d, 1H), 6.18 (d, 1H), 5.75 (m, 2H), 5.67 (t, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 3.99 - 3.93 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.71 - 3.65 (m, 2H), 3.62 (s, 3H).
m/z 335.0 (M+H)+ (ES+)
(vi) 메틸 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-1-메틸-1H-피롤-2-카복실레이트
DMF (3 mL) 중 N-(5-(tert-부틸)-3-(3-(4-((2-클로로피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드 (WO 2014/162126 참조 ; 405 mg, 0.712 mmol), 상기 단계 (v)로부터의 화합물 (238 mg, 0.712 mmol), 갓 분쇄한 탄산칼륨 (295 mg, 2.135 mmol)의 현탁액을 질소로 3회 백충전하여 배기시켰다. 혼합물을 질소하에 40 ℃로 가열하고, Pd-175 (13.90 mg, 0.018 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어 반응물을 냉각시키고 여과하였다. 여액을 EtOAc (50 mL)와 20% v/v 염수 (50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 소수성 프릿에 통과시킨 후, 농축시켰다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하여 (RP Flash C18) (24 g 칼럼, 15-80% MeCN/10 mM 중탄산암모늄) 부제 화합물 (350 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.87 (dt, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.89 (t, 1H), 6.86 - 6.77 (m, 2H), 6.58 (dd, 1H), 6.17 (d, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.02 (t, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.07 - 3.95 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.72 - 3.69 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 867.3 (M+H)+ (ES+)
(vii) 5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-1-메틸-1H-피롤-2-카복실산
THF (3 mL) 및 MeOH (1.2 mL) 중 상기 단계 (vi)로부터의 화합물 (350 mg, 0.404 mmol)의 용액에 NaOH (2M aq) (606 μL, 1.211 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 추가 분량의 NaOH (2M aq) (606 μL, 1.211 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 AcOH (139 μL, 2.422 mmol)로 켄칭하고, 용매를 진공에서 제거하였다. 조 생성물을 크로마토그래피로 정제하였다 (RP Flash C18) (12 g 칼럼, 15-75% MeCN/10 mM 중탄산암모늄). 생성물이 풍부한 분획들을 합치고, 포름산으로 pH를 7로 조정하였다. 휘발성 용매를 진공에서 제거하고 고체를 부수었다. 이것을 여과 수집하고, 물 (2 × 2 mL)로 세척한 후, 고체를 진공중에 40 ℃에서 밤새 건조시켜 표제 화합물 (165 mg)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.19 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.70 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 6.79 (t, 1H), 6.74 (d, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.13 (d, 1H), 6.08 (d, 1H), 6.03 (t, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.06 - 3.93 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.75 - 3.68 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
m/z 853.0 (M+H)+ (ES+)
생물학적 시험: 실험 방법
효소 결합 분석 ( 키노메스칸 )
본원에 기술된 화합물의 키나제 효소 결합 활성을 고정화 리간드에 대한 활성 부위-지정 경쟁 결합을 측정하는 고유 어세이를 사용하여 측정할 수 있다(Fabian, M.A. et al., Nature Biotechnol., 2005, 23:329-336). 이 어세이는 DiscoverX(이전 명칭 Ambit; San Diego, CA)에 의해 수행될 수 있다. 시험 화합물과의 인큐베이션으로 생성된 저해 백분율이 비-저해 대조군에 대해 계산될 수 있다.
효소 저해 어세이
본원에 기술된 화합물의 효소 저해 활성은 공여체와 수용체 형광단(fluorophore)(Z-LYTE, Invitrogen Ltd., Paisley, UK) 둘 다로 표지된 합성 펩티드를 사용하여 FRET에 의해 측정된다.
p38 MAPKα 효소 저해
하기 두 어세이 변법을 사용하여 p38 MAPKα 저해를 측정하였다.
방법 1
p38 MAPKα 이소폼(MAPK14: Invitrogen)에 대한 시험 화합물의 저해 활성을 하류 분자, MAPKAP-K2의 활성화/인산화 수준을 측정하여 간접적으로 평가하였다. p38 MAPKα 단백질(80 ng/mL, 2.5 μL)을 시험 화합물(4 μg/mL, 0.4 μg/mL, 0.04 μg/mL 또는 0.004 μg/mL 농도, 2.5 μL)과 2시간 동안 RT에서 혼합하였다. p38α 불활성 표적 MAPKAP-K2(Invitrogen, 600 ng/mL)와 FRET 펩티드(8 μM; MAPKAP-K2의 인산화 표적)의 혼합 용액(2.5 μL)을 첨가하고, ATP(40 μM, 2.5 μL)를 첨가하여 키나제 반응을 개시하였다. 혼합물을 1시간 동안 RT에서 인큐베이션하였다. 형광 마이크로플레이트 판독기(Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific)에서 검출하기 전에 전개 시약(프로테아제, 5 μL)을 1시간 동안 첨가하였다.
방법 2
이 방법은 시험 화합물(1 μg/mL, 0.1 μg/mL, 0.01 μg/mL 또는 0.001 μg/mL로 시험)과의 혼합을 위해 더 높은 농도의 p38 MAPKα 단백질(80 ng/mL 단백질 2.5 μL 대신 200 ng/mL 단백질 2.5 μL)을 사용하는 것만을 제외하고 상기 방법 1과 동일한 단계를 따랐다.
p38 MAPKγ 효소 저해
p38MAPKγ(MAPK12: Invitrogen)에 대한 본 발명 화합물의 저해 활성을 상기한 것과 유사한 방법으로 평가하였다. 효소(800 ng/mL, 2.5 μL)를 시험 화합물(4 μg/mL, 0.4 μg/mL, 0.04 μg/mL 또는 0.004 μg/mL 농도, 2.5 μL)과 2시간 동안 RT에서 인큐베이션하였다. FRET 펩티드(8 μM, 2.5 μL), 및 적절한 ATP 용액(2.5 μL, 400 μM)을 효소/화합물 혼합물에 첨가하고 1시간 동안 인큐베이션하였다. 형광 마이크로플레이트 판독기(Varioskan® Flash, Thermo Scientific)에서 검출하기 전에 전개 시약(프로테아제, 5 μL)을 1시간 동안 첨가하였다.
c-Src 및 Syk 효소 저해
c-Src 및 Syk 효소(Invitrogen)에 대한 본 발명 화합물의 저해 활성을 상기한 것과 유사한 방법으로 평가하였다. 관련 효소(각각 3000 ng/mL 또는 2000 ng/mL 농도, 2.5 μL)를 시험 화합물(1 μg/mL, 0.1 μg/mL, 0.01 μg/mL, 또는 0.001 μg/mL, 각각 2.5 μL)과 2시간 동안 RT에서 인큐베이션하였다. FRET 펩티드(8 μM, 2.5 μL), 및 적절한 ATP 용액(2.5 μL, c-Src에 대해 800 μM, 및 Syk에 대해 60 μM ATP)을 효소/화합물 혼합물에 첨가하고 1시간 동안 인큐베이션하였다. 형광 마이크로플레이트 판독기(Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific)에서 검출하기 전에 전개 시약(프로테아제, 5 μL)을 1시간 동안 첨가하였다.
GSK 3α 효소 저해
하기 두 어세이 변법을 사용하여 GSK 3α 저해를 결정할 수 있다.
방법 1
GSK 3α 효소 이소폼(Invitrogen)에 대한 시험 화합물의 저해 활성을, 표적 펩티드의 활성화/인산화 수준을 측정하여 평가하였다. GSK3-α 단백질(500 ng/mL, 2.5 μL)을 시험 화합물(4 μg/mL, 0.4 μg/mL, 0.04 μg/mL, 또는 0.004 μg/mL 농도, 2.5 μL)과 2시간 동안 RT에서 혼합하였다. GSK3α의 인산화 표적인 FRET 펩티드(8 μM, 2.5 μL)와 ATP(40 μM, 2.5 μL)를 효소/화합물 혼합물에 첨가하고 얻은 혼합물을 1시간 동안 인큐베이션하였다. 형광 마이크로플레이트 판독기(Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific)에서 검출하기 전에 전개 시약(프로테아제, 5 μL)을 1시간 동안 첨가하였다.
모든 경우에, 부위-특이적 프로테아제가 인산화되지 않은 펩티드만을 절단하여 FRET 시그널을 제거하였다. 각 반응의 인산화 수준을 플루오레신 방출(수용체)에 대한 쿠마린 방출(공여체)의 비율로 계산하였으며, 여기서 높은 비율은 높은 인산화 수준을 나타내고, 낮은 비율은 낮은 인산화 수준을 나타낸다. 각 반응의 저해 백분율을 비저해 대조군에 대해 계산하고, 이어서 50% 저해 농도(IC50 값)를 농도-반응 곡선으로부터 계산하였다.
방법 2
이 방법은 시험 화합물과 GSK3-α 단백질의 혼합 시간을 단축(2 시간 대신 105 분)시킨 것을 제외하고 상기 방법 1과 동일한 단계를 따랐다. 또한, 사용된 시험 화합물의 농도는 10 μg/mL, 1 μg/mL, 0.1 μg/mL 또는 0.01 μg/mL였다.
세포 어세이
본 발명의 화합물을 다음 어세이들 중 하나 이상을 사용하여 연구하였다.
(a) 주르카트 (Jurkat) 세포에서 p38 MAPKα와 Lck의 저해
주르카트 T 세포를 스타브(starve) 배지(RPMI 1640 + 5% FBS)에서 실험 전에 24시간 동안 배양하였다. 세포를 수확하여 스타브 배지에 10×106 세포/mL로 재현탁한 다음, 둥근바닥 96 웰 플레이트에 웰 당 1×106 세포로 플레이팅하였다. 시험 화합물의 연속 희석물을 자극 전에 2시간 동안 첨가하였다(1% 최종 DMSO 농도). 화합물과 사전 인큐베이션한 후, 세포를 H2O2(최종 0.05%)로 5분 동안 자극하였다. 반응을 2000 rpm (3 min, 4 ℃)으로 원심분리하여 중지시킨 다음, 상등액을 제거하고 100 μL의 냉 fix/perm 용액(BD Fix/Perm kit #554714)을 첨가하였다. 플레이트를 20분 동안 4 ℃에서 인큐베이션한 후, 원심분리하고 공급된 1× 세척 배지(BD Fix/Perm 키트 #554714)로 세척하였다. 세포를 Cell Signalling Technology (9211s)에 의해 제공된 포스포-p38α (T180/182), 또는 R&D (MAB7500)에 의해 제공된 포스포-Lck (Y394)로 염색하였다. 항체를 세척 배지에서 5 μg/mL (R&D) 또는 1:200 (Cell Signalling Technology)으로 희석하여 4 ℃에서 1시간 동안 암실에서 인큐베이션하였다. 빙냉한 세척 완충액으로 3회 반복 세척한 후, 2차 항체(항-래빗-FITC #F1362 또는 항-마우스-FITC #F2883, 둘다 시그마 제품)를 1:1000의 희석비로 첨가하고 1시간 동안 4 ℃, 암실에서 인큐베이션하였다. 세포를 차가운 세척 완충액으로 3회 세척하고, 냉 PBS로 최종 세척한 후, 150 μL 냉 PBS에 재현탁하였다. 세포를 BD Accuri C6를 사용한 유세포분석법으로 분석하였다.
(aa) d-U937 세포에서 LPS로 유도된 TNFα /IL-8의 분비
인간 단핵구 세포주인 U937 세포를 포볼 미리스테이트 아세테이트(PMA;100 ng/mL)와 48 내지 72시간 동안 인큐베이션하여 대식세포 종류 세포로 분화시켰다. 세포를 최종 농도의 시험 화합물과 2시간 동안 사전 인큐베이션한 다음, LPS(0.1 μg/mL; E. Coli에서 유래: O111:B4, Sigma)로 4시간 동안 자극하였다. 상등액을 샌드위치 ELISA(Duo-set, R&D systems)로 TNFα 및 IL-8 농도 측정을 위해 수집하였다. TNFα 생산의 저해를 각 농도의 시험 화합물에서 10 μg/mL의 BIRB796에 의해 비히클 대조군에 대한 비교로 얻어진 것의 백분율로서 계산하였다. 상대적 50% 유효 농도(REC50)를 얻어진 농도-반응 곡선으로부터 결정하였다. IL-8 생산의 저해를 각 농도의 시험 화합물에서 비히클 대조군과 비교하여 계산하였다. 50% 저해 농도(IC50)를 얻어진 농도-반응 곡선으로부터 결정하였다.
(b) PBMC 세포에서 LPS로 유도된 TNFα /IL-8의 분비
건강한 대상으로부터의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 밀도 구배(Lymphoprep, Axis-Shield Healthcare)를 이용해 전혈에서 분리하였다. PBMC를 96 웰 플레이트에 시딩하고 목적 농도의 화합물로 2시간 처리한 후, 1 ng/ml LPS (Escherichi Coli 0111:B4, Sigma Aldrich 제품)를 정상 조직 배양 조건(37 ℃, 5% CO2) 하에서 24시간 동안 첨가하였다. 상등액을 샌드위치 ELISA(Duo-set, R&D systems)로 IL-8과 TNFα 농도 측정을 위해 수집하고, 형광 마이크로플레이트 판독기(Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific)에서 판독하였다. IL-8 및 TNFα 생산의 50% 저해 농도(IC50)를 용량 반응 곡선으로부터 계산하였다.
(c) CD3/CD28 자극 PBMC 세포에서 IL-2 및 IFN 감마 분비
건강한 대상으로부터의 PBMC를 밀도 구배(Lymphoprep, Axis-Shield Healthcare)를 이용해 전혈에서 분리하였다. 세포를 CD3/CD38 모노클로날 항체(각각 0.3 ㎍/ml eBioscience 및 3 ㎍/ml BD Pharmingen)의 혼합물로 사전 코팅한 96 웰 플레이트에 첨가하였다. 이어 목적 농도의 화합물을 웰에 첨가하고, 플레이트를 3일 동안 정상 조직 배양 조건하에 두었다. 상등액을 수집하고, IL-2 및 IFN 감마 분비를 샌드위치 ELISA(Duo-set, R&D System)로 측정하였다. IC50을 용량 반응 곡선으로부터 결정하였다.
(d) HT29 세포에서 IL- 1β로 유도된 IL-8의 분비
HT29 세포, 인간 결장 선암 세포주를 96 웰 플레이트에 플레이팅하고(24시간), 목적 농도의 화합물로 2시간 동안 사전 처리한 뒤, 5 ng/ml의 IL-1β(Abcam)를 24시간에 걸쳐 첨가하였다. 상등액을 수집하고, IL-8을 샌드위치 ELISA(Duo-set, R&D System)로 정량하였다. IC50을 용량 반응 곡선으로부터 결정하였다.
(e) 일차 대식세포에서 LPS로 유도된 IL-8 및 TNFα의 분비
건강한 대상으로부터의 PBMC를 밀도 구배(Lymphoprep, Axis-Shield Healthcare)를 이용해 전혈에서 분리하였다. 세포를 2시간 동안 인큐베이션하고, 세척에 의해 비부착 세포를 제거하였다. 세포를 대식세포와 구별하기 위해, 세포를 5 ng/ml의 GM-CSF(Peprotech)와 7일 동안 정상 조직 배양 조건하에 인큐베이션하였다. 그 후, 10 ng/ml LPS로 24시간 동안 자극하기 이전에, 2시간의 전처리 동안 화합물을 목적 농도로 세포에 첨가하였다. 상등액을 모으고, IL-8 및 TNFα의 분비를 샌드위치(Sandwich) ELISA(Duo-set, R&D System)로 결정하였다. IC50을 용량 반응 곡선으로부터 결정하였다.
(f) BEAS2B 세포에서 폴리 I:C로 유도된 ICAM-1의 발현
폴리 I:C가 본 연구에서 간단한 RNA 바이러스 모방체(mimic)로 사용되었다. 폴리 I:C-올리고펙타민 혼합물 (각각, 1 ㎍/mL 폴리 I:C, ±2% 올리고펙타민, 25 μL; Invivogen Ltd., San Diego, CA, 및 Invitrogen, Carlsbad, CA)을 BEAS2B 세포 (인간 기관지 상피세포, ATCC)로 형질감염시켰다. 세포를 최종 농도의 시험 화합물로 2시간 동안 사전 인큐베이션(pre-incubate)하고, 세포 표면에서의 ICAM1의 발현 수준을 세포-기반 ELISA를 통해 측정하였다. 폴리 I:C 형질감염 후 18시간이 된 시점에, 세포를 PBS 내의 4% 포름알데히드로 고정한 후, 0.1% 소듐 아지드 및 1% 과산화수소를 포함하는 세척 완충액(100 μL, PBS 내 0.05% Tween: PBS-Tween)을 첨가하여 내인성 퍼옥시다제(endogenous peroxidase)를 켄칭하였다. 세포를 세척 완충액(3 × 200 μL)으로 세척하고, PBS-Tween(100 μL) 내의 5% 밀크로 1시간 동안 웰(well)을 블록킹한 후, 세포를 1% BSA PBS 내의 항-인간 ICAM-1 항체(50 μL; Cell Signalling Technology, Danvers, MA)와 밤새 4 ℃에서 인큐베이션하였다.
세포를 PBS-Tween(3 x 200 μL)으로 세척한 후, 2차 항체(100 μL; HRP가 콘쥬게이션된 항-토끼 IgG, Dako Ltd., Glostrup, Denmark)와 인큐베이션하였다. 그 후, 세포를 기질(50 μL)과 2-20분 동안 인큐베이션하고, 뒤이어 정지액(50 μL, 1N H2SO4)을 첨가하였다. 분광광도계를 사용하여 기준 파장 655 nm에 대한 450 nm에서 흡광도를 확인하여 ICAM-1 시그널을 측정하였다. 세포를 PBS-Tween(3 x 200 μL)으로 세척하고, 크리스탈 바이올렛 염색(PBS 내의 2% 용액 50 μL) 및 증류수 내의 1% SDS 용액(100 μL)으로 용리(elution)시킨 후 595 nm에서의 흡광도를 확인하여 각 웰 내의 총 세포 수를 측정하였다. 측정된 OD 450-655 값을 각 웰 내의 OD595 값으로 나누어 세포 수에 대해 보정하였다. 비히클 대조군(vehicle control)과 비교하여 시험 화합물의 각각의 농도에서의 ICAM-1 발현 저해를 계산하였다. 50% 저해 농도(IC50)를 생성된 농도-반응 곡선으로부터 결정하였다.
(g) 세포 유사분열 어세이
건강한 대상으로부터의 말초혈액 단핵 세포(PBMC)를 밀도 구배(Histopaque®-1077, Sigma-Aldrich, Poole, UK)를 이용해 전혈(Quintiles, London, UK)에서 분리하였다. 이어서, PBMC(샘플당 3백만개의 세포)를 2% PHA(파이토해마클루티닌, Sigma-Aldrich, Poole, UK)로 48시간 동안 처리한 후, 뒤이어 시험 화합물의 농도를 변화시켜 20시간 동안 노출시켰다. 수집하기 2시간 전에, PBMC를 데메콜친(0.1 ㎍/mL; Invitrogen, Paisley, UK)으로 처리하여 중기(metaphase)에서 세포를 저지하였다. 유사분열 세포를 관찰하기 위해, 이전에 기술된 바와 같이(Muehlbauer P.A. and Schuler M.J., Mutation Research, 2003, 537:117-130), 인트라프렙(Intraprep)(50 μL; Beckman Coulter, France)을 첨가하여 PBMC를 투과 및 고정시키고, 항-포스포-히스톤 3(0.26 ng/L; #9701; Cell Signalling, Danvers, MA) 및 프로피듐 요오드화물(1 mg/mL; Sigma-Aldrich, Poole, UK)로 염색하였다. 림프구에 대한 통로인, ATTUNE 유세포 분석기(Invitrogen, Paisley, UK)를 사용하여 형광을 관찰하였다. 각 처리에 대한 유사분열의 저해 백분율을 비히클(0.5% DMSO) 처리에 대해 계산하였다.
(h) 리노바이러스로 유도된 IL-8 분비 및 ICAM-1 발현
인간 리노바이러스 RV16는 American Type Culture Collection (Manassas, VA)로부터 입수하였다. 바이러스 스톡은 80%의 세포가 세포병변이 될 때까지 HeLa 세포를 HRV로 감염시켜 생성하였다.
BEAS2B 세포를 HRV에 의해 MOI 5로 감염시키고 2시간 동안 33℃에서 흡수를 촉진하기 위해 서서히 진탕하면서 인큐베이션하였다. 이후, 세포를 PBS로 세척하고 새로운 배지를 첨가하여 세포를 다시 72시간 동안 인큐베이션하였다. Duoset ELISA 전개 키트(R&D systems, Minneapolis, MN)를 사용하여 IL-8 농도를 분석하기 위해 상등액을 수집하였다.
ICAM-1 발현 세포 표면의 수준을 세포 기반 ELISA에 의해 측정하였다. 72시간의 감염 후, 세포를 PBS 중의 4% 포름알데히드로 고정하였다. 0.1% 소듐 아지드와 1% 과산화수소를 첨가하여 내인성 퍼옥시다제를 켄칭한 후, 웰을 세척 완충액(0.05% Tween/PBS: PBS-Tween)으로 세척하였다. 웰을 PBS-Tween 중의 5% 밀크로 1시간 동안 블록킹한 후에, 세포를 항-인간 ICAM-1 항체의 5% BSA PBS-Tween (1:500)과 밤새 인큐베이션하였다. 웰을 PBS-Tween으로 세척한 후, 2차 항체(HRP가 콘쥬게이션된 항-래빗 IgG, Dako Ltd.)와 인큐베이션하였다. 기질을 첨가하고 분광광도계를 사용하여 655 nm의 기준 파장으로 450 nm에서 판독하여 ICAM-1 시그널을 검출하였다. 웰을 PBS-Tween으로 세척하고, 크리스탈 바이올렛 염색 및 1% SDS 용액으로 용출한 후 595 nm에서의 흡광도를 판독하여 각 웰 내의 총 세포 수를 측정하였다. 측정된 OD450-655 판독값을 각 웰 내의 OD595 판독값으로 나누어 세포 수에 대해 보정하였다. 화합물을 HRV 감염 2시간 전과 비감염 HRV가 세척된 경우 감염 2시간 후에 첨가하였다.
(i) MRC5 세포에서 HRV16으로 유도된 세포병변 효과(CPE)의 평가
MRC5 세포를 HRV16에 의해 MOI 1으로 5% FCS와 1.5 mM MgCl2를 함유하는 DMEM에서 감염시킨 후, 흡수를 촉진하기 위해 1시간 동안 33 ℃에서 인큐베이션하였다. 상등액을 흡입한 다음, 새로운 배지를 첨가하고 4일 동안 인큐베이션하였다. 필요에 따라, 세포를 화합물 또는 DMSO와 2시간 동안 사전 인큐베이션하고, 화합물과 DMSO를 바이러스 세척 후에 다시 첨가하였다.
상등액을 흡입시키고, 메틸렌 블루 용액(100 μL, 2% 포름알데히드, 10% 메탄올 및 0.175% 메틸렌 블루)과 실온에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. 세척 후, 증류수(100 μL) 내의 1% SDS를 각 웰에 첨가하고, 660 nm에서의 흡광도를 확인하기에 앞서 플레이트를 1-2시간 동안 가볍게 흔들었다. 각 웰에 대한 저해 백분율을 계산하였다. 시험 화합물의 연속 희석(serial dilution)에 의해 생성된 농도-반응 곡선으로부터 IC50 값을 계산하였다.
(j) 일차 기관지 상피세포에서 시험관내 RSV 바이러스 부하
96 웰 플레이트에서 증식된 정상 인간 기관지 상피세포(NHBEC)를 15 mM 염화마그네슘을 포함하는 LHC8 배지:RPMI-1640 (50:50) 중에 0.001 MOI로 RSV A2(Strain A2, HPA, Salisbury, UK)에 감염시키고, 흡착을 위해 37 ℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 세포를 PBS(3 × 200 μL)로 세척하고, 새로운 배지(200 μL)를 첨가한 후, 4 일동안 계속 인큐베이션하였다. 필요에 따라, 세포를 화합물 또는 DMSO와 2시간 동안 사전 인큐베이션하고, 바이러스 세척 후 다시 첨가하였다.
세포를 PBS 용액(50 μL) 내 4% 포름알데히드로 20분 동안 고정시키고, WB(3 × 200 μL) (세척 완충액, 0.5% BSA 및 0.05% Tween-20을 포함하는 PBS)로 세척한 후, 블록킹 용액(PBS 내의 5% 연유)과 1시간 동안 인큐베이션하였다. 세포를 WB(3 × 200 μL)로 세척하고, PBS-tween 중의 5% BSA 내 항-RSV(2F7) F-융합 단백질 항체(40 μL; 마우스 모노클로날, lot 798760, Cat. No.ab43812, Abcam)와 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 세척 후에, 세포를 PBS-Tween(lot 00053170, Cat.No. P0447, Dako) 내의 5% BSA에서 HRP가 콘쥬게이션된 2차 항체 용액(50 μL)과 인큐베이션한 후, TMB 기질을 첨가하였다(50 μL; 기질 시약 팩, lot 269472, Cat. No. DY999, R&D Systems, Inc.). 2N H2SO4 (50 μL)를 첨가하여 반응을 중지시키고, 생성된 신호를 비색법을 사용하여(OD: 655 nm의 기준 파장에서 450 nm) 마이크로플레이트 판독기(Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific)에서 측정하였다.
세포를 세척하고, 2.5% 크리스탈 바이올렛 용액(50 μL; lot 8656, Cat. No. PL7000, Pro-Lab Diagnostics)을 30분 동안 적용하였다. WB로 세척한 후, 증류수(100 μL) 내의 1% SDS를 각 웰에 첨가하고, 595 nm에서의 흡광도를 확인하기에 앞서 플레이트를 1시간 동안 진탕기에서 가볍게 흔들었다. OD450-655 판독값을 OD595 판독값으로 나누어 측정된 OD450-655 판독값을 세포 수에 대해 보정하였다. 각 웰에 대한 저해 백분율을 계산하고, 화합물의 연속 희석으로부터 생성된 농도-반응 곡선으로부터 IC50 값을 계산하였다.
(k) 세포 생존력 어세이 : MTT 어세이
분화된 U937 세포를 각각의 시험 화합물(아래에 표시된 200 μL 배지 내의 최종 농도 1 ㎍/mL 또는 10 ㎍/mL)과 두 프로토콜하에서 사전 인큐베이션하였다: 첫번째는 5% FCS RPMI1640 배지에서 4시간 동안이고, 두번째는 10% FCS RPMI1640 배지에서 24시간 동안이다. 상등액을 새로운 배지(200 μL)로 교체하고, MTT 스톡 용액(10 μL, 5 mg/mL)을 각 웰에 첨가하였다. 1시간 동안 인큐베이션한 후 배지를 제거하고, DMSO(200 μL)을 각 웰에 첨가한 후, 550 nm에서의 흡광도를 확인하기에 앞서 플레이트를 1시간 동안 가볍게 흔들었다. 비히클(0.5% DMSO) 처리와 비교하여 각 웰에 대한 세포 생존도의 손실 백분율을 계산하였다. 그 결과, 비히클에 대하여 약물 처리를 한 세포 생존도의 명백한 증가가 음수의 백분율로서 도표화되었다.
(l) 인간 생검 어세이
장점막 생검을 IBD 환자 결장의 염증이 생긴 부위로부터 획득하였다. 생검 물질을 작은 조각(2-3 mm)으로 절단하고, 5% CO2/95% O2 분위기의 무혈청 배지에서 37 ℃의 기관 배양 챔버의 강철 격자 상에 두었다. DMSO 대조군 또는 목적 농도에서의 시험 화합물을 조직에 첨가하고, 기관 배양 챔버에서 24시간 동안 인큐베이션하였다. R&D ELISA에 의한 IL-6, IL-8, IL-1β 및 TNFα의 수준 측정을 위해 상등액을 수확하였다. 시험 화합물에 의한 사이토킨 분비의 저해 백분율을 DMSO 대조군(100%)에 대해 측정한 사이토킨 분비에 대해 계산하였다.
(m) d-U937 세포내 β 카테닌의 축적
U937 세포, 인간 단핵구성 세포주를 PMA (100 ng/mL)와 48 내지 72시간 동안 인큐베이션하여 대식세포-종류 세포로 분화시켰다. 그 후 세포를 최종 농도의 시험 화합물 또는 비히클 중 어느 하나와 18시간 동안 인큐베이션하였다. 배지를 4% 포름알데히드 용액으로 교체함으로써 시험 화합물에 의한 β-카테닌의 유도를 중단시켰다. 켄칭 완충액 (100 μL, 0.1% 소듐 아지드, 0.05% Tween-20를 포함하는 PBS 내의 1% H2O2)과 20분 동안 인큐베이션하여 내인성 과산화물의 활성을 상쇄시켰다. 세포를 세척 완충액(200 μL; 0.05% Tween-20을 포함하는 PBS)으로 세척하고, 블록킹 용액(200 μL; PBS 내의 5% 밀크)과 1시간 동안 인큐베이션한 후, 세척 완충액(200 μL)으로 재세척하고, 그 후 1% BSA/PBS(BD, Oxford, UK) 내의 항-β-카테닌 항체 용액(50 μL)과 밤새 인큐베이션하였다.
세척 완충액(3 × 200 μL; 0.05% Tween-20을 포함하는 PBS)으로 세척한 후, 세포를 1% BSA/PBS(Dako, Cambridge, UK) 내의 HRP가 콘쥬게이션된 제2 항체 용액(100 μL)과 인큐베이션하고, 생성된 신호를 비색법으로 (OD: 655 nm의 기준 파장에서 450 nm) TMB 기질(50 μL; R&D Systems, Abingdon, UK)을 이용하여 측정하였다. 1N H2SO4 용액 (50 μL)을 첨가하여 반응을 중단시켰다. 그 후 세포를 세척 완충액으로 세척하고, 2% 크리스탈 바이올렛 용액(50 μL)을 30분 동안 적용하였다. 세척 완충액(3 × 200 μL)으로 세척한 후, 1% SDS(100 μL)을 각 웰에 첨가하고, 595 nm에서의 흡광도를 측정하기 전에(Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific) 플레이트를 1시간 동안 가볍게 흔들었다.
OD450-655 판독값을 OD595 판독값으로 나누어 측정된 OD450-655 판독값을 세포 수에 대해 보정하였다. 각 웰에 대한 백분율 유도를 비히클에 대하여 계산하였고, 유도 비율을 단일체(unity)로 정의되는 기준 화합물 (N-(4-(4-(3-(3-tert-부틸-1-p-톨릴-1H-피라졸-5-일)우레이도)나프탈렌-1-일옥시)피리딘-2-일)-2-메톡시아세트아미드)(1 ㎍/mL)을 포함하는 표준 대조군에 의해 생성된 유도와 비교하여 정규화하였다.
(n) T 세포 증식
건강한 대상으로부터의 PBMC를 밀도 구배(Lymphoprep, Axis-Shield Healthcare)를 이용하여 전혈에서 분리하였다. 제조자의 지시(Miltenyi Biotec 130-091-155)에 따라 음성 자기 세포 분류(negative magnetic cell sorting)에 의하여 림프구 분획을 먼저 CD4+ T 세포에 대해 농축하였다. 그 후, 제조자의 지시 (130-045-901)에 따라 마이크로비드를 이용한 CD45RA+ 세포의 양성 자기 선택(positive magnetic selection)을 이용하여 나이브(naive) CD4+ T 세포를 분리하였다. 96 웰 평평한 바닥 플레이트(Corning Costar) 상의 100 μL RPMI/10%FBS에 각 웰 당 2×105 개의 세포를 플레이팅하였다. 25 μL의 시험 화합물을 정상 배지에서 적절한 농도(8× 최종 농도)로 희석하고, 플레이트 상의 듀플리케이트 웰(duplicate well)에 첨가하여 0.03 ng/mL-250 ng/mL 범위의 용량 반응을 달성하였다. DMSO를 음성 대조군으로서 첨가하였다. 플레이트를 1 ㎍/mL의 항-CD3(OKT3; eBioscience)로 자극하기 전에 2시간 동안 사전 인큐베이션하였다. 72시간 후, 각 웰 내의 배지를 10 μM BrdU (Roche)를 포함하는 새로운 배지 150 μL로 교체하였다. 16시간 후, 상등액을 제거하고, 플레이트를 건조시킨 후, 제조자의 지시(Roche)에 따라 각 웰에 100 μL의 고정/변성 용액을 20분 동안 첨가하여 세포를 고정시켰다. 항-BrdU 검출 항체의 첨가 및 실온에서 90분 동안 인큐베이션하기 전에 플레이트를 PBS로 한번 세척하였다. 그 후, 100 μL 기질 용액의 첨가에 의해 공급 및 전개된 세척 완충액으로 플레이트를 부드럽게 3번 세척하였다. 50 μL의 1M H2SO4를 첨가하여 반응을 중지시키고, 플레이트 판독기(Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific) 상의 450 nm에서의 흡광도를 확인하였다. IC50을 용량 반응 곡선으로부터 결정하였다.
(o) IBD 환자로부터 유래된 CD3/CD28 자극 LPMC 세포에서 IL-2 및 IFNγ의 분비
다음과 같이 수술 적출물의 염증이 생긴 IBD 점막 또는 수술 적출물의 정상 점막으로부터 프로프리아층 단핵 세포(LPMC)를 분리한 후 정제하였다:
수술용 메스를 이용하여 수술 적출물의 심층으로부터 점막을 제거하고, 그 점막을 3-4 mm 크기의 단편으로 절단하였다. 자석 교반기를 사용한 교반과 함께 조직의 단편을 HBSS(Sigma-Aldrich) 내의 1 mM EDTA(Sigma-Aldrich, Poole, UK)로 3번 세척하고, 각각의 세척 후 상등액을 버려서 상피를 제거하였다. 뒤이어 샘플을 타입 1A 콜라게나제(1 mg/mL; Sigma-Aldrich)로 37 ℃에서 1시간 동안 교반하면서 처리하였다. 이후 얻어진 세포 현탁액을 100 ㎛ 세포 스트레이너를 이용하여 여과하고, 2번 세척하고, 10% 소태아 혈청, 100 U/mL 페니실린 및 100 ㎍/mL 스트렙토마이신을 포함하는 RPMI-1640 배지(Sigma-Aldrich)에 재현탁시킨 후, 이를 세포 배양을 위해 사용하였다.
DMSO 대조군 또는 적절한 농도의 화합물 중 어느 하나의 존재하에, 새롭게 분리된 LPMC(2×105 세포/웰)를 1 ㎍/mL α-CD3/α-CD28로 48시간 동안 자극하였다. 48시간 후, 상등액을 제거하고, R&D ELISA로 TNFα 및 IFNγ의 존재를 분석하였다. DMSO 대조군(100%)에 대해 측정된 사이토킨 분비와 비교하여 시험 화합물에 의한 사이토킨 분비의 저해 백분율을 계산하였다.
(p) IBD 환자에서 분리된 근섬유모세포로부터 사이토킨 분비의 저해
염증이 생긴 IBD 점막에서 유래된 근섬유모세포를 다음과 같이 분리하였다:
점막을 절개하여 불필요한 부분을 폐기하고, 37 ℃의 가습 CO2 인큐베이터에서 1 mm 사이즈의 점막 샘플을 20% FBS, 1% 비필수 아미노산(Invitrogen, Paisley, UK), 100 U/mL 페니실린, 100 ㎍/mL 스트렙토마이신, 50 ㎍/mL 겐타마이신 및 1 ㎍/mL 암포테리신(Sigma-Aldrich)이 보충된 둘베코(Dulbecco) 변형 이글 배지(DMEM, Sigma-Aldrich)에서 배양하였다. 생성된 근섬유모세포의 콜로니들을 25-cm2 배양 플라스크에 넣고, 자극 실험에 사용되기에 충분한 양을 제공하기 위해 20% FBS 및 적어도 4계대에 대한 항생제로 보충된 DMEM에서 배양하였다.
근섬유모세포의 부융합성(Subconfluent) 단일막을 12-웰 플레이트에 웰 당 3×105 세포씩 넣고, DMSO 대조군 또는 적절한 농도의 화합물 중 어느 하나의 존재하에서 24시간 동안 배양되기 전에, 무혈청 배지에서 37 ℃로 24시간 동안 5% CO2 분위기에서 영양분을 공급하지 않았다. 24시간 경과 후 상등액을 제거하고 R&D ELISA로 IL-8 및 IL-6의 존재를 분석하였다. DMSO 대조군(100%)에 대해 측정된 사이토킨의 분비와 비교하여 시험 화합물에 의한 사이토킨 분비의 저해 백분율을 계산하였다.
(q) 인간 호중구 탈과립
인간 말초 혈액으로부터 호중구를 다음과 같이 분리하였다:
정맥 천자(venepuncture)로 혈액을 수집하고, 1:1 EDTA: 살균한 인산염 완충식염수(PBS, 무 Ca+/Mg+)를 첨가하여 항응고 처리하였다. 덱스트란(3% w/v)을 첨가하고(혈액 4부에 대해 덱스트란 용액 1부), 혈액을 실온에서 약 20분간 방치하였다. 상등액을 밀도 경사(Lymphoprep, Axis-Shield Healthcare) 상에 조심스럽게 층상화하고 원심분리(15분, 2000 rpm, 브레이크 없음)하였다. 상등액을 흡인하고, (오염시키고 있는 적혈구를 용해시키기 위해) 세포 펠렛을 식염수(0.2%)에 60 초 이내로 재현탁시켰다. 그 후, 10배 부피의 PBS를 첨가하고 세포를 원심분리하였다(5 분, 1200 rpm). 세포를 HBSS+(시토칼라신 B (5 ㎍/mL) 및 1 mM CaCl2를 포함하는 Hanks 완충 염 용액(페놀 레드 없음)에 재현탁시켜 5×106 세포/mL를 얻었다.
5×104 세포를 V-바닥 96 웰 플레이트의 각 웰에 첨가하고, 적절한 농도의 시험 화합물(0.3-1000 ng/mL) 또는 비히클(DMSO, 0.5% 최종 농도)과 인큐베이션하였다(30분, 37 ℃). fMLP (최종 농도 1 μM)을 첨가하여 탈과립을 자극하였다. 추가적인 인큐베이션(30분, 37 ℃) 후에 원심분리하여 세포를 제거하고(5분, 1500 rpm), 상등액을 평평한 바닥의 96 웰 플레이트로 옮겼다. 동일한 부피의 테트라메틸벤지딘(TMB)을 첨가하고, 10분 후 동일 부피의 황산(0.5 M)을 첨가하여 반응을 중단시키고, 450 nm에서 흡광도를 확인하였다(655 nm에서의 백그라운드를 제함). 생성된 농도-반응 곡선으로부터 50% 저해 농도(IC50)를 측정하였다.
(r) 세포의 세포독성 분석
1×105 주르카트 세포(불멸화 인간 T 림프구)를 100 μL의 배지(10% 소태아 혈청으로 보충된 RPMI)가 있는 96 웰 플레이트의 적절한 수의 웰에 첨가하였다. 1 μL의 DMSO 대조군(최종 농도 1.0% v/v) 또는 시험 화합물(최종 농도 20, 5 또는 1 ㎍/mL 중 어느 하나)을 웰에 첨가하고, 37 ℃, 5% CO2 하에서 인큐베이션하였다. 24시간 경과 후, 플레이트를 1200 rpm으로 3분 동안 원심분리하고, 상등액을 버렸다. 세포를 PBS 내의 150 μL(최종 농도 7.5 ㎍/mL) 프로피듐 요오드화물(PI)에 재현탁시키고, 37 ℃, 5% CO2 하에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 15분 후, FL3 윈도우를 사용하여 유세포 분석기(BD accuri)로 세포를 분석하였다. DMSO 대조군에 대해 정규화된 시험 웰에서 PI 음성인 세포의 %로서 생존율(%)을 계산하였다.
생체내 스크리닝(In Vivo Screening): 약력학 및 항-염증 활성
(i) 마우스에서 LPS로 유도된 호중구의 축적
LPS 챌린지 적용에 의한 염증성 반응의 자극 이전에, 단식시키지 않은 Balb/c 마우스에 기관내 경로를 통해 비히클 또는 시험 물질을 지시된 시간에(2-8시간 범위 내에서) 투여하였다. T=0일 때, 마우스를 노출 챔버에 두고 30분 동안 LPS(7.0 mL, PBS 내 0.5 mg/mL 용액)에 노출시켰다. 추가적인 8시간 이후 동물들을 마취시키고, 기도에 캐뉼러를 꽂고, 주입에 의해 기관지 폐포 세척액(BALF)을 추출하고, 그 후 기관 카테터를 경유하여 폐로부터 1.0 mL의 PBS를 빼내었다. Neubaur 혈구계를 이용하여 BALF 샘플내의 총 백혈구 수 및 분화된 백혈구 수를 측정하였다. 200 rpm으로 5분간 실온에서 원심분리하여 BALF 샘플의 사이토스핀 스미어(Cytospin smear)를 제조하고, DiffQuik 스테인 시스템(stain system)(Dade Behring)을 이용하여 염색하였다. 유침 현미경(oil immersion microscopy)을 이용하여 세포의 수를 세었다. BAL 내의 호중구 수에 대한 데이터를 평균±S.E.M. (평균 표준오차)로 나타내었다. 비히클 처리와 비교하여 각 처리에 대한 호중구 축적의 저해 백분율을 계산하였다.
(ii) 흡연 모델
작은 동물에 대한 담배 연기 흡입 실험 시스템(Tobacco Smoke Inhalation Experiment System) (Model SIS-CS; Sibata Scientific Technology, Tokyo, Japan)을 이용하여 11일간 30분/일 동안 A/J 마우스(수컷, 생후 5주)를 담배 연기(4% 담배 연기, 공기로 희석)에 노출시켰다. 담배 연기에 마지막으로 노출한 후, 하루 1번 3일간 테스트 물질(50% DMSO/PBS 중 35 μL의 용액)을 콧속으로 투여하였다. 최종 투여 12시간 후, 각 동물들을 마취시키고, 기관에 캐뉼라를 삽입하여 기관지 폐포 세척액(BALF)을 수집하였다. 항-마우스 MOMA2 항체 (대식세포) 또는 항-마우스 7/4 항체 (호중구)를 사용하여 허파꽈리 대식세포 및 호중구의 수를 FACS 분석(EPICS® ALTRAⅡ, Beckman Coulter, Inc., Fullerton, CA, USA)에 의해 측정하였다.
(iii) 마우스에서 DSS로 유도된 대장염
덱스트란 소듐 설페이트(DSS)로 처리함에 따른 염증성 반응의 자극 하루 전에(-1 일), 단식시키지 않은 10-12주령의 수컷 BDF1 마우스에 비히클, 기준 물질 (5-ASA) 또는 시험 화합물을 하루에 두 번씩 경구 위관 영양을 통해 투여하였다. 연구 0일째(0 일)에 DSS(5% w/v)를 음용수와 함께 투여하고, 이어서 비히클(5 mL/kg), 기준 화합물 (100 mg/kg) 또는 시험 화합물 (5 mg/kg)의 1일 2회 투여를 7 일동안 수행하였다. DSS와 함께 음용수를 3일마다 보충하였다. 연구 동안에 매일 동물의 체중을 재었고 대변 관찰을 하였고, 대변의 일관성에 기반을 두어 점수를 기록하였다. 6 일째(+6 일)에 수술로 대장을 적출하고 길이와 무게를 기록하였다. 결장의 부위들을 호중구 침윤을 측정하기 위한 MPO 분석을 위해 또는 질환 중증도 측정을 위한 조직병리학 기록을 위해 취하였다.
(iv) 마우스에서 TNBS로 유도된 대장염
2,4,6-트리니트로벤젠설폰산(TNBS) (50% 에탄올중 15 mg/mL/ 50% 식염수)으로 처리함에 따른 염증성 반응의 자극 하루 전에(-1 일), 단식시키지 않고, 10-12주령의 수컷 BDF1 마우스에 비히클(5 mL/kg), 기준 물질(부데소니드 2.5 mg/kg) 또는 시험 화합물(1, 5 또는 50 mg/kg)을 하루에 두 번씩 경구 위관 영양을 통해 투여하였다. 연구 0일째 (0 일)에 TNBS (200 μL)를 플라스틱 카테터를 경유하여 결장 내부로 투여하고, 뒤이어 비히클, 기준 또는 시험 화합물의 1일 2회 투여를 2일 또는 4일 동안 수행하였다. 연구 동안에 매일 동물의 체중을 재었고 대변 관찰을 하였고, 대변의 일관성에 기반을 두어 점수를 기록하였다. 2일째(또는 4일째)에 수술로 대장을 적출하고 길이와 무게를 기록하였다. 결장 부위들을 질환 중증도 측정을 위한 조직병리학 기록을 위해 취하였다.
(v) 마우스에서 입양 전달(Adoptive transfer )
연구 0일째에, 암컷 Balb/C 마우스를 희생시키고, CD45RBhigh 세포 단리(SCID IBD 세포 단리 프로토콜을 이용)를 위해 비장을 얻었다. 대략 4×105 세포/mL의 CD45RBhigh 세포를 암컷 SCID 동물에 복강내(100 μL/마우스)로 주입하였다. 연구 14일째에, 마우스의 무게를 재고, 몸무게에 따라 처리 그룹으로 무작위로 분류하였다. 14일째에, 화합물을, 20 mM pH 7.8 수성 인산염 완충액 중 5% 폴리옥시에틸렌 40 스테아레이트 중에서 경구 위관 영양을 통해, 5 mL/kg의 용량 부피로 1일 2회씩 투여하였다. 연구 49일째까지 처리를 계속하였고, 49일 시점에서 오전 투여 후 4시간에 동물을 부검하였다. 결장의 길이 및 무게를 기록하고, 이를 결장 부종의 척도로서 연구에서의 제2 종말점(endpoint)으로 사용하였다. 그 후 결장을 6 등분으로 나누고, 그 중 넷을 조직병리학 기록(제1 종점)으로 사용하고, 둘을 사이토킨 분석을 위해 균질화하였다. 제시된 데이터는 나이브 동물과 비히클 동물 간 유도 창(window)의 저해율(%)이며, 더 높은 저해는 질병에 걸리지 않고, 나이브 표현형에 대해 더 근접한 것을 암시한다.
(vi) 래트에서 내독소로 유도된 포도막염
수컷 Lewis 래트(6-8주령, Charles River UK Limited)를 3개 케이지에서 19-21℃로 12시간 명/암 주기(07:00/19:00)로 설치류 사료의 표준 식이와 임의량의 물을 공급하면서 사육하였다. 단식시키지 않은 래트의 무게를 재고, 개별적으로 꼬리에 영구 마커로 표시하여 32 게이지의 니들로 동물 당 100 ng의 LPS (PBS에서 제조된 Escherichia coli 0111:B4, Sigma Aldrich, UK)를 우측 유리액 내로 단일 유리체강내 투여하였다(5 μL 투여 부피). 미처리 래트에게는 PBS를 주사하였다. 시험 화합물 또는 비히클(4% 폴리옥실 40 스테아레이트, PBS (pH 7.4) 중 4% 만니톨)을 동물의 오른쪽 눈에 국소 경로에 의해 LPS 투여 1시간 전, LPS 투여 시, 그리고 LPS 투여 1, 2 및 4시간 후에 투여하였다(10 μL). 투여 전에, 투여될 용액을 초음파처리하여 맑은 용액을 만들었다. LPS를 투여한 지 6시간 후에 동물을 과량의 펜토바비톤(심장천자를 통해)으로 안락사시켰다. 안락사 직후에 수술 현미경하에서 32 게이지 바늘을 사용하여 전방의 천자에 의해 래트 오른쪽 눈에서 10 μL의 안방수를 수집하였다. 안방수를 20 μL의 PBS에서 희석하고 Countess 자동 세포 계수기 (Invitrogen)를 사용하여 총 세포수를 즉시 측정하였다. 안방수 수집 후에, 각 동물의 오른쪽 눈을 적출하여 렌즈 주위에서 전측부(전방)와 후측부(후방)로 절개하였다. 각 부위의 무게를 측정하고 500 μL의 멸균 인산염 완충 식염수에 균질화한 다음, 20분 동안 12000 rpm으로 4 ℃에서 원심분리하였다. 얻어진 상등액을 3개의 분액으로 나누어 -80 ℃에서 R&D DuoSet ELISA에 의한 후속 사이토킨 분석까지 저장하였다.
시험관내 및 생체내 스크리닝 결과의 요약
Figure 112018100721576-pct00092
Figure 112018100721576-pct00093
하기 표 3에 예시된 바와 같이, 본 발명의 실시예의 화합물은 기준 화합물 (N-(4-(4-(3-(3-tert-부틸-1-p-톨릴-1H-피라졸-5-일)우레이도)나프탈렌-1-일옥시)피리딘-2-일)-2-메톡시아세트아미드; WO　2010/112936) 보다 세포독성을 상당히 덜 나타내어; 상기 세포 세포독성 분석 (r)에서 향상된 생존력을 나타낸다 (표 3). 또한, 본 발명의 실시예의 화합물은 20 μg/mL에서 기준 화합물 A (3-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)-피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산 ; WO 2014162126) 보다 세포독성을 상당히 덜 나타낸다.
Figure 112018100721576-pct00094
하기 표 4에 예시된 바와 같이, 실시예 3의 화합물을 또한 기준 화합물 A, (3-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산 , 및 기준 화합물 B, 3-((4-((4-(3-(3-(tert-부틸)-1-(p-톨릴)-1H-피라졸-5-일)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-에티닐-N-(2-(2-(2-메톡시에톡시)에톡시)에틸)벤즈아미드 {Fyfe, M. C. T., WO 2014/140582}와 함께 상기 생체 내 (입양 전달) 분석 (v)에서 스크리닝하였다. 연구 종료 시에 나이브, 대조군 및 처리 동물에서 결장의 중량 대 길이의 상대 비율을 분석한 결과, 실시예 3의 화합물이 간단한 수성 염소 비히클을 사용한 결장 염증의 생체 내 모델에서 유도된 상기 T 세포에서 두 기준 화합물과 비교하여 우수한 활성을 제공하였다.
Figure 112018100721576-pct00095
[†] 내약성 (체중 감소)이 좋지 않아 27일째에 용량을 0.6 mg/kg으로 낮추었다.
추가 연구 요약
공복 상태 모의 대장액 (FaSSCoF)에서 용해도 결정
pH 6.5에서 FaSSCoF에서의 본 발명의 화합물의 용해도는 이전에 보고된 절차 (Vertzoni, M., et al., Pharm. Res. 2010, 27, 2187-2196)를 변형하여 결정되었다. 원래의 절차 (추출물이 더이상 이용가능하지 않음)에 사용된 담즙염 추출물 대신에, 변형된 절차는 소듐 타우로클로레이트 (0.15 g), 글리코콜산 (0.15 g), 우르소데옥시콜산 (0.05 g), 콜릭산 (0.05 g) 및 글리코데옥시콜산 (0.05 g)의 혼합물을 사용하였다. 이 5가지 담즙산을 막자사발과 막자를 사용하여 분쇄하여 백색의 미세 분말을 얻고 아래에 설명된 대로 FaSSCoF에 도입하였다.
FaSSCoF 매질: 트리스(하이드록시메틸)아미노메탄 (트리스(Tris); 0.275 g) 및 말레산 (0.44 g)을 물 (35 ml)에 용해시켜 용액으로 만들고 0.5M NaOH (약 12 mL)로 처리하여 pH를 6.5로 조절하였다. 이어 용액을 물로 50 mL로 만들었다. 상기 트리스/말레에이트 완충 용액 (약 25 mL)의 일부를 상기 담즙산 혼합물 0.00565 g으로 처리하기 전에 0.5 L 둥근 바닥 플라스크에 첨가하였다. DCM (0.15 mL) 중의 포스파티딜콜린 (0.0111 g) 및 DCM (0.15 mL) 중의 팔미트산 (0.0013 g)의 용액을 첨가한 다음, 유기 용매를 40 ℃에서 감압하에 DCM 냄새가 나지 않고 투명한 용액이 될 때까지 증발시켰다. 증발된 용액의 부피를 나머지 트리스/말레에이트 완충액을 첨가하여 50 mL로 조절한 후, BSA (0.115 g)를 첨가하고 완만하게 교반하여 용해시켰다.
용해도 측정: 시험 화합물을 pH 6.5 FaSSCoF 매질에 현탁시켜 2-10 mg/mL의 최대 최종 농도로 만들었다. 현탁액을 유리 섬유 C 필터를 통해 여과하기 전에 24시간 동안 25 ℃에서 평형화시켰다. 이어 여액을 필요에 따라 주사용으로 희석하고 HPLC로 표준에 대해 정량화하였다. 상이한 부피의 표준, 희석 및 비희석 샘플 용액을 주입하고 표준 주입에서의 주요 피크와 동일한 체류 시간에서 발견된 피크들을 적분하여 결정된 피크 면적을 사용하여 용해도를 계산하였다.
FaSSCoF 용해도는 하기 표 5에 나타내었는데, 이로부터 실시예 화합물 (또는 그의 염)은 pH 6.5에서 FaSSCoF 매질에서 0.03 mg/mL 초과의 용해도를 가졌으며; 일부는 1 mg/mL 초과의 용해도를 가지는 것으로 나타났다. 본 발명의 화합물에 대해 측정된 pH 6.5 FaSSCoF 용해도는 기준 화합물 A, (3-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)-에톡시)에톡시)프로판산 , 및 기준 화합물 B, 3-((4-((4-(3-(3-(tert-부틸)-1-(p-톨릴)-1H-피라졸-5-일)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-에티닐-N-(2-(2-(2-메톡시에톡시)에톡시)에틸)벤즈아미드 {Fyfe, M. C. T., WO 2014/140582} 양자의 것보다 우수하였다.
Figure 112018100721576-pct00096
추가의 연구에 따라, 0.5 중량%의 모의 장액을 함유한 pH 6.5 또는 pH 7.2의 인산염 완충 염수에서 실시예 31의 화합물 (즉, 실시예 3의 화합물의 나트륨)은 모두 기준 화합물 A (하이드로클로라이드 염) 및 B 둘 다보다 빠른 용해 속도를 가진 것으로 밝혀졌다.
미소원심분리기 용해 시험
미소원심분리기 용해 시험을 이용하여 실시예 3의 화합물의 시험관 내 비침강 용해 성능을 기준 화합물 A 및 B와 함께 평가하였으며, 여기서 샘플은 1) 장 완충액 (IB)에서 결장 완충액 (CB)으로 이동되거나, 또는 2) 모의 담즙-염 미셸 (IB-SIF)을 함유하는 장 매질에 직접 투여된다. 다양한 시점에서의 화합물의 용해 성능을 원심분리와 오프라인 역상 HPLC 분석에 의한 상등액 농도의 분석에 의해 결정하였다.
1) 장 완충액 (IB)에서 결장 완충액 (CB)으로의 이동 실험
시험 화합물 (0.45 mg ± 0.05 mg)을 미소원심분리기에 계량한 다음, IB 수용체 용액 - pH 6.5에서 37 ℃로 가온한 인산염 완충 염수 (PBS) 0.900 mL를 첨가하였다. 타이머를 작동시키고, 샘플 튜브를 1분 동안 최대 설정값에서 와동시켰다. 타이머가 3분, 13분 및 23분 (각각 25, 15 및 5분의 시점에 해당)에 도달하면, 샘플 튜브를 15,800 상대 원심력 (RCF)에서 1분간 원심분리하였다. 각 시점에 상등액의 일부 (50 μL)를 희석액 {250 μL의 75/25 THF/물 (v/v)}에 가하고, 화합물 농도를 오프라인 HPLC 분석으로 측정하였다 (표 6a). 추가 5분 후, 0.900 mL의 CB 수용체 용액 (pH 10.7 PBS 용액)을 첨가하여 pH를 7.2로 조정하고 타이머를 0분으로 재설정하였다. 타이머가 2, 8, 18, 38, 88 및 1,198분 (각각 4, 10, 20, 40, 90 및 1,200분의 시점에 해당)에 도달하면 샘플 튜브를 15,800 RCF에서 1분간 원심분리하였다. 각 시점에, 상등액의 일부 (50 μL)를 희석액 {250 μL의 75/25 THF/물 (v/v)}에 가하고 화합물 농도를 오프라인 HPLC 분석으로 측정하였다 (표 6a). 90분 및 1,200분 시점에 대한 HPLC 샘플을 초원심분리기 (UCF)에서 37 ℃에서 80,000 rpm으로 8분간 원심분리한 다음, 상등액 (50 μL)을 희석액 {250 μL의 75/25 THF/물 (v/v)}에 가하고, 화합물 농도를 오프라인 HPLC 분석 (표 6b)으로 측정하여 유리 약물 + 미셸 내 약물의 농도를 결정하였다.
Figure 112018100721576-pct00097
2) 모의 담즙-염 미셀 (IB-SIF)을 함유하는 장 매질에 직접 투여하는 실험
시험 화합물 (0.45 mg ± 0.05 mg)을 미소원심분리기에 계량한 다음, 0.250 g의 SIF 분말 (Biorelevant.com)을 37 ℃로 가온한 pH 6.5 PBS에 용해시켜 미리 제조한 IB-SIF 수용체 용액 1.800 mL를 첨가하였다. 타이머를 작동시키고, 샘플 튜브를 1분 동안 최대 설정값에서 와동시켰다. 타이머가 2, 8, 18, 38, 88 및 1,198분 (각각 4, 10, 20, 40, 90 및 1,200 분에 해당)에 도달하면, 샘플 튜브를 15,800 RCF에서 1분간 원심분리하였다. 그 후, 각 시점에 상등액 (50 μL)을 희석액 {250 μL의 75/25 THF/물 (v/v)}에 가하고, 화합물 농도를 오프라인 HPLC 분석으로 측정하였다 (표 7a). 유리 약물 + 미셸 내 약물의 농도를 결정하기 위해, 90분 및 1,200분 시점에 대한 HPLC 샘플을 초원심분리기 (UCF)에서 37 ℃에서 80,000 rpm으로 8분간 더 원심분리한 다음, 상등액 (50 μL)을 희석액 {250 μL의 75/25 THF/물 (v/v)}에 가하고, 화합물 농도를 오프라인 HPLC 분석 (표 7b)으로 측정하였다.
Figure 112018100721576-pct00098
약어
AcOH 빙초산
aq 수성
5-ASA 5-아미노살리실산
ATP 아데노신-5'-트리포스페이트
BALF 기관지 폐포 세척액(bronchoalveolar lavage fluid)
BID 1일 2회(bis in die)
BINAP 2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-바이나프틸
BOP (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포늄
헥사플루오로포스페이트
br 광폭(broad)
BrdU 5-브로모-2'-데옥시우리딘
BSA 소 혈청 알부민
CatCart® 촉매성 카트리지
CDI 1,1-카보닐-디이미다졸
COPD 만성 폐쇄성 폐 질환
d 이중선
dba 디벤질리덴아세톤
DBU 1,8-디아자바이사이클로[5.4.0]운데크-7-엔
DCC 디사이클로헥실카보디이미드
DCM 디클로로메탄
DIAD 디이소프로필 아조디카복실레이트
DIPEA 디이소프로필에틸아민
DMAP 4-디메틸아미노피리딘
DMEM 둘베코 변형 이글 배지
DMF N,N-디메틸포름아미드
DMSO 디메틸 설폭시드
DPPA 디페닐포스포릴 아지드
d-U937 세포 PMA 분화 U-937 세포
EDTA 에틸렌디아민테트라아세트산
ELISA 효소 결합 면역흡착 어세이
(ES-) 전기분무 이온화, 음성 모드
(ES+) 전기분무 이온화, 양성 모드
Et 에틸
Et3N 트리에틸아민
EtOAc 에틸 아세테이트
EtOH 에탄올
FACS 형광 활성화 세포 분류
FBS 소태아혈청
FCS 송아지태아혈청
fMLP 포르밀-메티오닐-루실-페닐알라닌
FRET 형광 공명 에너지 전달
GSK3α 글리코겐 신타제 키나제 3α
HBEC 일차 인간 기관지 상피 세포
HBSS 행크스(Hank's) 균형 염 용액
HPLC 고성능 액체 크로마토그래피
HPMC 하이드록시프로필메틸셀룰로스
h 또는 hr 시간
HATU 2-(1H-7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸
우로늄 헥사플루오로포스페이트
HOAt 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸
HOBt 하이드록시벤조트리아졸
HRP 호스래디쉬 퍼옥시다제
HRV 인간 리노바이러스
ICAM-1 세포간 부착 분자 1
IFNγ 인터페론-γ
IL 인터류킨
iPrOAc 이소프로필 아세테이트
JNK c-Jun N-말단 키나제
LC 액체 크로마토그래피
Lck 림프구 특이성 단백질 티로신 키나제
LiHMDS 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드
LPS 리포폴리사카라이드
m 다중선
(M+H)+ 프로톤화된 분자 이온
MAPK 미토겐 활성화 단백질 키나제
MAPKAP-K2 미토겐 활성화 단백질 키나제-활성화 단백질 키나제-2
mCPBA 메타-클로로퍼벤조산
Me 메틸
MeCN 아세토니트릴
MeOH 메탄올
MHz 메가헤르츠
min 또는 mins 분
MMAD 질량 중간 공기 역학적 직경
MOI 감염다중도
MPO 미엘로퍼옥시다제
MTT 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨
브로마이드
MS 질량 분광학
m/z 질량 대 전하 비
NMP N-메틸 피롤리디논
NMR 핵자기공명(분광학)
OD 광학밀도
PBMC 말초혈액 단핵세포
PBS 인산염 완충 염수
Ph 페닐
PHA 파이토헤마글루티닌(phytohaemagglutinin)
PMA 포볼(phorbol) 미리스테이트 아세테이트
pTSA 4-메틸벤젠설폰산(파라-톨루엔설폰산)
PyBOP (벤조트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄
헥사플루오로포스페이트
q 사중선(quartet)
rt 또는 RT 실온
RP HPLC 역상 고성능 액체 크로마토그래피
rpm 분 당 회전
RPMI Rosewell Park Memorial Institute
RSV 호흡기 세포융합 바이러스
s 단일선
sat 또는 satd 포화
SCID 중증 합병성 면역결핍
SCX 고체 지지 양이온 교환(수지)
SDS 소듐 도데실 설페이트
SNAr 친핵성 방향족 치환
Syk 비장 티로신 키나제
t 삼중선
T3P 1-프로판포스폰산 사이클릭 무수물
TBAI 테트라부틸암모늄 요오다이드
TBAF 테트라부틸암모늄 플루오라이드
TBDMS tert-부틸디메틸실릴
TBME tert-부틸 메틸 에테르
TBSCl tert-부틸디메틸실릴 클로라이드
tBuXPhos 2-디-tert-부틸포스피노-2',4',6'-트리이소프로필바이페 닐
TCID50 50% 조직 배양 감염 용량
TEA 트리에틸아민
THF 테트라하이드로푸란
TFA 트리플루오로아세트산
TGFβ 변형성 성장인자 베타
TIPS 트리이소프로필실릴
TMB 3,3',5,5'-테트라메틸벤지딘
TMS-Cl 트리메틸실릴 클로라이드
TNFα 종양괴사인자 알파
접두사 n-, s-, i-, t- 및 tert-는 그의 일반적 의미: 노멀, 2차, 이소 및 3차를 지칭한다.

Claims (28)

  1. 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 그의 용매화물, 또는 하나 이상의 중수소 원자로 동위원소적으로 풍부화되거나 표지된 것인 그의 동위원소 유도체:
    Figure 112021145955792-pct00127

    상기 식에서,
    T는
    Figure 112021145955792-pct00128
    또는
    Figure 112021145955792-pct00129
    를 나타내고;
    W는 O, S 또는 NCH3을 나타내고;
    V는 N 또는 CR1을 나타내고;
    R1은 각각 할로, 하이드록시 및 C1-2 알콕시로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알콕시, C1-3 알킬, C2-3 알케닐, C2-3 알키닐을 나타내거나, 또는 R1은 H를 나타내고;
    R2는 -NRA1S(O)2RB1, -S(O)1-2RB2, -P(O)RB3RB4, -C(O)NRA2RA3 또는 -CH2NRA4C(O)RA5를 나타내고;
    RA1 내지 RA5는 독립적으로 H, 또는 할로, 하이드록시, NRCRD 및 C1-2 알콕시로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알킬을 나타내거나, 또는 RA2 및 RA3은 함께 -O-, -S(O)q- 또는 -N(RE)-에 의해 C2와 C3 사이가 차단된 C4-5 n-알킬렌 또는 C3-6 n-알킬렌을 나타내고;
    RB1 내지 RB4는 독립적으로 각각 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알킬 또는 C3-6 사이클로알킬을 나타내고;
    RC 및 RD는 독립적으로 H, 또는 하이드록실 또는 C1-2 알콕시에 의해 임의로 치환된 C1-3 알킬을 나타내거나, 또는 RC 및 RD는 함께 결합하여 임의로 -O-, -S(O)q- 또는 -N(RE)-에 의해 C2와 C3 사이가 차단된 C4-6 알킬렌을 형성하고;
    RE는 H 또는 메틸을 나타내고;
    q는 0, 1 또는 2를 나타내고;
    R3은 각각 하이드록실, C1-2 알콕시 또는 할로에 의해 임의로 치환된 C2-7 알킬, C2-7 알케닐, C2-7 알키닐 또는 C3-7 사이클로알킬을 나타내거나, 또는 R3은 모르폴리닐 또는 트리메틸실릴을 나타내고;
    A는 CH 또는 N을 나타내고;
    R4는 각각 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 C1-3 알콕시, C3-5 사이클로알콕시, 또는 C1-3 알킬을 나타내거나, 또는 R4는 에티닐, 시아노, S(O)2CH3, 할로 또는 H를 나타내고;
    Q는 O, S(O)p, SO2N(R6) 또는 C(O)N(R6)을 나타내고;
    n은 1, 2 또는 3을 나타내고;
    p는 0, 1 또는 2를 나타내고;
    R5a 및 R5b는 독립적으로 H, 메틸 또는 할로를 나타내거나, 또는 R5a 및 R5b는 함께 C2-6 n-알킬렌을 나타내고;
    n이 1을 나타내면 Z는 O, S 또는 NR7을 나타내거나, 또는
    n이 2 또는 3을 나타내면 Z는 다음 중 하나를 나타내고:
    각 경우 O-원자, 또는
    하나의 경우 S-원자 또는 NR7 및 각각의 다른 경우에 대해 O-원자;
    R6 및 R7은 독립적으로 H 또는 메틸을 나타내고;
    G는 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H 또는 카복실산 등가물을 나타내고;
    r은 0을 나타내거나, 또는 Het1이 환 헤테로원자를 통해 (CH2)r에 부착된 경우, r은 대안적으로 1을 나타낼 수 있고;
    Het1은
    N, O 및 S로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 가지는 완전 방향족인 5- 또는 6-원 헤테로사이클릭 그룹 또는
    완전 포화 또는 부분 불포화되고 모노사이클릭이거나, 융합 또는 브릿지 바이사이클릭인 N, O 및 S로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 가지는 4- 내지 7-원 헤테로사이클릭 그룹을 나타내고,
    여기서 Het1은 C1-3 알킬, C1-3 알콕시, 할로, 하이드록실 및 옥소로부터 선택되는 하나 이상의 치환체에 의해 임의로 치환된다.
  2. 화학식 Iy의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 그의 용매화물, 또는 하나 이상의 중수소 원자로 동위원소적으로 풍부화되거나 표지된 것인 그의 동위원소 유도체:
    Figure 112021145955792-pct00130
  3. 제1항에 있어서, 화학식 Ix 또는 Ia의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체:
    Figure 112020034733556-pct00131

    상기 식에서, R1 내지 R4, R5a, R5b, A, Q 및 n은 제1항에 정의된 바와 같다.
  4. 제1항에 있어서, 화학식 Ib의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체:
    Figure 112021145955792-pct00132

    상기 식에서, R2, A, Q 및 n은 제1항에 정의된 바와 같다.
  5. 제1항에 있어서,
    (a) R1이 메톡시 또는 중수소화 메톡시를 나타내고;
    R3은 트리메틸실릴 또는 -C(CH3)2-R을 나타내고, 여기서, R은 에티닐 또는 메틸을 나타내고/내거나;
    R4는 사이클로프로폭시, 또는 하나 이상의 할로 치환체에 의해 임의로 치환된 메톡시를 나타내고;
    (b) R2는 -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -S(O)1-2CH3, -S(O)1-2CH2CH3, -P(O)(CH3)2, -N(CH3)S(O)2CH3, -NHS(O)2CH2CH3 또는 -NHS(O)2CH3을 나타내고;
    (c) A는 CH를 나타내고;
    (d) Q는 C(O)NH, S(O), S(O)2 또는 O를 나타내고;
    (e) n은 2를 나타내고;
    R5a 및 R5b는 독립적으로 H 또는 메틸을 나타내거나, 또는 R5a 및 R5b는 함께 -(CH2)2-를 나타내고/내거나;
    G는 -CO2H 또는 -Het1-CO2H를 나타내고, 여기서 -Het1-CO2H 부분은
    Figure 112021145955792-pct00133

    로부터 선택되는 구조 단편이거나, 또는
    G는 테트라졸릴, -C(O)N(H)-S(O)2CH3, -C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2,
    Figure 112021145955792-pct00134
    , 또는 후자 세 그룹중 어느 하나의 호변이성체로부터 선택되는 카복실산 등가물을 나타내고;
    (f) R2는 -NHS(O)2CH3을 나타내고;
    Q는 C(O)NH 또는 O를 나타내고;
    n은 2를 나타내는,
    화합물.
  6. 제1항에 있어서,
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시벤즈아미도)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리미딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설포닐)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설피닐)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설포닐)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설포닐)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설피닐)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페닐)설포닐)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(트리플루오로메틸)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    6-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)피리다진-3-카복실산;
    5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-1,2,4-옥사디아졸-3-카복실산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-사이클로프로폭시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)사이클로프로판-1-카복실산;
    4-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-2-카복실산;
    1-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-3-메틸-1H-피라졸-4-카복실산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-에틸페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-(메톡시-d3)-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-N-(메틸설포닐)아세트아미드;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸카바모일)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설피닐)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설포닐)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(디메틸포스포릴)-2-메톡시페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(N-메틸메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)푸란-3-카복실산;
    5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)테트라하이드로푸란-3-카복실산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(에틸설포닐)-2-메톡시페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-3-(에틸설폰아미도)-2-메톡시페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)이속사졸-3-일)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    N-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(3-(4-((2-((3-메톡시-5-(2-(2-((5-옥소-2,5-디하이드로이속사졸-3-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)-메탄설폰아미드;
    2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)티오)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산, (R)-이성체;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)프로판산, (S)-이성체;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-2-메틸프로판산;
    1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에틸)-1H-피라졸-4-카복실산;
    N-(3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-((1H-테트라졸-5-일)메톡시)에톡시)에톡시)-5-메톡시페닐)아미노)-피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)-5-(tert-부틸)-2-메톡시페닐)메탄설폰아미드;
    2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)-N-(N,N-디메틸설파모일)아세트아미드;
    5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-2-카복실산;
    5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)티오펜-3-카복실산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(디플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-에티닐페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    N-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(3-(4-((2-((3-메톡시-5-(2-(2-((5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)메탄설폰아미드;
    2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)-나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-(트리플루오로메톡시)페녹시)에톡시)에톡시)아세트산;
    N-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(3-(4-((2-((3-메톡시-5-(2-(2-((3-옥소-2,3-디하이드로이속사졸-5-일)메톡시)에톡시)에톡시)페닐)아미노)피리딘-4-일)옥시)나프탈렌-1-일)우레이도)페닐)-메탄설폰아미드; 및
    5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)메틸)-1-메틸-1H-피롤-2-카복실산,
    을 포함하는 그룹으로부터 선택되는 화합물, 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체.
  7. 약학적으로 허용가능한 애쥬번트, 희석제 또는 담체와 함께 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 정의된 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체를 포함하는, 염증성 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 약학 제형.
  8. (A) 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 정의된 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체, 및
    (B) 다른 치료제를 포함하고,
    각각의 성분 (A)와 (B)가 약학적으로 허용가능한 보조제, 희석제 또는 담체와 혼합하여 제형화된,
    염증성 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 조합 제품.
  9. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 염증성 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 것인 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체.
  10. 제9항에 있어서, 염증성 질환이
    (a) 낭포성 섬유증, 폐 고혈압, 폐 유육종증, 특발성 폐 섬유증, COPD(만성 기관지염과 폐기종을 포함), 천식, 소아 천식, 아토피성 피부염, 알러지성 피부염, 접촉성 피부염 또는 건선, 알러지성 비염, 비염, 부비동염, 결막염, 알러지성 결막염, 건성 각결막염(건조안 또는 안구건조증), 녹내장, 당뇨병성 망막증, 황반부종(당뇨병성 황반부종 포함), 망막 중심 정맥 폐쇄(CRVO), 건조 및/또는 함습 연령 관련 황반변성(AMD), 수술 후 백내장 염증, 포도막염(후방, 전방 및 팬(pan) 포도막염 포함), 각막 이식과 각막 윤부 세포 이식 거부증, 글루텐 민감성 장질환(셀리악병), 호산구성 식도염, 장 이식편 대 숙주질환, 크론병 및 궤양성 대장염을 포함하는 군에서 선택되거나; 또는
    (b) 포도막염, 건성 각결막염(건조안 또는 안구건조증), 크론병 또는 궤양성 대장염인,
    화합물.
  11. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 정의된 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 또는 동위원소 유도체를 포함하는, 염증성 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 약제.
  12. 제11항에 있어서, 염증성 질환이 낭포성 섬유증, 폐 고혈압, 폐 유육종증, 특발성 폐 섬유증, COPD(만성 기관지염과 폐기종을 포함), 천식, 소아 천식, 아토피성 피부염, 알러지성 피부염, 접촉성 피부염 또는 건선, 알러지성 비염, 비염, 부비동염, 결막염, 알러지성 결막염, 건성 각결막염(건조안 또는 안구건조증), 녹내장, 당뇨병성 망막증, 황반부종(당뇨병성 황반부종 포함), 망막 중심 정맥 폐쇄(CRVO), 건조 및/또는 함습 연령 관련 황반변성(AMD), 수술 후 백내장 염증, 포도막염(후방, 전방 및 팬(pan) 포도막염 포함), 각막 이식과 각막 윤부 세포 이식 거부증, 글루텐 민감성 장질환(셀리악병), 호산구성 식도염, 장 이식편 대 숙주질환, 크론병 및 궤양성 대장염을 포함하는 군에서 선택되는, 약제.
  13. 다음 단계들을 포함하는, 제1항에 정의된 화학식 I의 화합물의 제조 방법:
    (a) G가 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H를 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 화학식 I(P)의 에스테르를 가수분해 또는 수소화분해하는 단계:
    Figure 112021145955792-pct00135

    (상기 식에서, Rx는 C1-6 알킬 또는 벤질을 각각 나타내고, T, R4, R5a, R5b, A, Q, Z, n, r 및 Het1은 제1항에 정의된 바와 같다);
    (b) 화학식 II의 화합물을 화학식 III의 화합물과 반응시키는 단계;
    Figure 112021145955792-pct00136

    (상기 식에서, Z1 및 Z2 중 하나는 화학식 IVa 또는 IVb의 구조 단편이고, Z1 및 Z2의 다른 하나는 화학식 V의 구조 단편이고:
    Figure 112021145955792-pct00137

    Figure 112021145955792-pct00138

    여기서, W, V, R1 내지 R4, R5a, R5b, A, Q, Z, G 및 n은 제1항에 정의된 바와 같다);
    (c) 화학식 IIa의 화합물을 적합한 아지드 형성제와 반응시킨 다음, 분리하지 않고, (화학식 Z1-C(O)-N3의) 중간체 아실 아지드의 열적 재배열에 의해 반응시켜 동소에서 화학식 II의 화합물을 제공하고, 이후 이 화합물을 상기 정의된 화학식 III의 화합물과 반응시키는 단계:
    Figure 112021145955792-pct00139

    (상기 식에서, Z1은 상기 정의된 바와 같다);
    (d) 화학식 IIb의 화합물을 상기 정의된 화학식 III의 화합물과 반응시키는 단계:
    Figure 112021145955792-pct00140

    (상기 식에서, LG1은 적합한 이탈기를 나타내고, Z1은 상기 정의된 바와 같다);
    (e) 화학식 VI의 화합물을 화학식 VII의 화합물과 반응시키는 단계:
    Figure 112021145955792-pct00141

    Figure 112021145955792-pct00142

    (상기 식에서, LG2는 적합한 이탈기를 나타내고, R1 내지 R3, A, R4, R5a, R5b, Q, Z, G 및 n은 제1항에 정의된 바와 같다);
    (f) Q가 S(O)1-2를 나타내는 화학식 I의 화합물인 경우, Q가 S를 나타내는 상응하는 화학식 I의 화합물을 산화시키는 단계;
    (g) Q가 C(O)NH를 나타내는 화학식 I의 화합물인 경우, 화학식 VIII의 화합물을 화학식 IX의 화합물과 반응시키는 단계:
    Figure 112021145955792-pct00143

    Figure 112021145955792-pct00144

    (상기 식에서, LG3는 OH, ORx 또는 이탈기를 나타내고, Rx는 상기 정의된 바와 같으며, R1 내지 R3, A, R5a, R5b, Z, G 및 n은 제1항에 정의된 바와 같다);
    (h) G가 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H를 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 화학식 Xa의 알콜을 산화시키는 단계:
    Figure 112021145955792-pct00145

    (상기 식에서, T, R4, R5a, R5b, A, Q, Z, n, r 및 Het1은 제1항에 정의된 바와 같다);
    (i) G가 -C(O)N(H)OH, -C(O)N(H)OCH3, -C(O)N(H)-S(O)2CH3 또는 -C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2를 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, G가 -CO2H를 나타내는 상응하는 화학식 I의 화합물을 각각 하이드록실아민, 메톡시아민, 메탄설폰아미드 또는 디메틸설파미드와 커플링시키는 단계;
    (j) G가 하기 구조를 가지는 하이드록시-치환된 이속사졸:
    Figure 112021145955792-pct00146

    을 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 화학식 Xb의 화합물을 하이드록실아민과 반응시키는 단계:
    Figure 112021145955792-pct00147

    (상기 식에서, T, A, R4, R5a, R5b, Q, Z 및 n은 제1항에 정의된 바와 같고, Rx는 상기 정의된 바와 같다);
    (k) G가 테트라졸-5-일을 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 화학식 Xc의 화합물을 아지드 공급원과 반응시키는 단계:
    Figure 112021145955792-pct00148

    (상기 식에서, T, A, R4, R5a, R5b, Q, Z, 및 n은 제1항에 정의된 바와 같다);
    (l) G가 5-옥소-4,5-디하이드로-1,2,4-옥사디아졸-3-일을 나타내는 화학식 I의 화합물의 경우, 상기 정의된 화학식 Xc의 화합물을 하이드록실아민과 반응시킨 후, 생성된 N-하이드록시아미딘 (아미독심) 화합물을 -C(O)- 공급원과 반응시키는 단계; 또는
    (m) O- 또는 N-원자상에 보호기를 가지는 화학식 I의 화합물의 보호된 유도체를 탈보호하는 단계.
  14. 다음 화합물:
    (a) 제13항에 정의된 화학식 I(P)의 화합물, 또는 그의 염;
    (b) 제13항에 정의된 화학식 II 또는 IIb의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체
    - 여기서 Z1은 제13항에 정의된 화학식 V의 구조 단편이고,
    화학식 II 또는 IIb의 화합물의 보호된 유도체는 G가 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H를 나타내는 경우, C(O)2H 부분은 Rx가 제13항에 정의된 화학식 C(O)ORx의 에스테르로서 보호된 것인 화합물임; 또는
    (c) 제13항에 정의된 화학식 III의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체
    - 여기서 Z2는 제13항에 정의된 화학식 V의 구조 단편이고,
    화학식 III의 화합물의 보호된 유도체는
    (i) 화학식 III의 NH2 그룹이 니트로로 대체되거나, 또는 화학식 III의 NH2 그룹의 H-원자가
    R'-C(O)- (여기서, R'는 하나 이상의 플루오로 그룹에 의해 임의로 치환된 C1-8 알킬이거나, 또는 R'는 H, 각각 할로, 하이드록시, 메틸 및 메톡시로부터 선택되는 하나 이상의 그룹에 의해 임의로 치환된 페닐 또는 벤질임); 또는
    R"-O-C(O)- (여기서, R"는 tert-부틸, 또는 각각 할로, 하이드록시, 메틸 및 메톡시로부터 선택되는 하나 이상의 그룹에 의해 임의로 치환된 페닐, 벤질 또는 플루오레닐임)로 대체되고/되거나;
    (ii) G가 -[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H를 나타내는 경우, 화학식 III의 C(O)2H 부분은 Rx가 제13항에 정의된 바와 같은 화학식 C(O)ORx의 에스테르로서 보호된 것인 화합물임.
  15. 제14항에 있어서,
    (a) R1은 메톡시를 나타내고;
    R2는 -NHS(O)2CH3을 나타내고;
    R3은 tert-부틸을 나타내고;
    A는 CH를 나타내고;
    R4는 메톡시를 나타내고;
    R5a 및 R5b는 둘 다 H를 나타내고;
    Q는 O를 나타내고;
    Z는 O를 나타내고;
    n은 2를 나타내고/내거나;
    Rx는 에틸을 나타내는 화학식 I(P)의 화합물; 또는
    (b) A는 CH를 나타내고;
    R4는 메톡시를 나타내고;
    R5a 및 R5b는 둘 다 H를 나타내고;
    Q는 O를 나타내고;
    Z는 O를 나타내고/내거나;
    n은 2를 나타내는 화학식 II, IIb 또는 III의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체; 또는
    (c) LG1이 이미다졸릴, 클로로, 또는 아릴옥시를 나타내는 화학식 IIb의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체; 또는
    (d) LG1이 페녹시를 나타내고;
    G는 C(O)2H를 나타내는 화학식 IIb의 화합물, 또는 그의 염 또는 보호된 유도체,
    - 상기 화학식 IIb의 화합물의 보호된 유도체는 C(O)2H 부분이 Rx가 제13항에 정의된 바와 같은 화학식 C(O)ORx의 에스테르로서 보호된 화합물임.
  16. 제14항에 있어서,
    (a) 하기 (에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(tert-부틸)-2-메톡시-3-(메틸설폰아미도)페닐)우레이도)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트)인 화학식 I(P)의 화합물, 또는 그의 염:
    Figure 112021145955792-pct00149
    ; 또는
    (b) 하기 (에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-((tert-부톡시카보닐)아미노)나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트):
    Figure 112021145955792-pct00150

    또는 하기 (에틸 2-(2-(2-(3-((4-((4-아미노나프탈렌-1-일)옥시)피리딘-2-일)아미노)-5-메톡시페녹시)에톡시)에톡시)아세테이트):
    Figure 112021145955792-pct00151

    인 화학식 III의 화합물 또는 그의 염.
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112015024671A2 (pt) * 2013-04-02 2017-07-18 Respivert Ltd derivados de ureia úteis como inibidores de quinase
JP6995774B2 (ja) * 2016-04-06 2022-02-21 オクラー アクイジションズ リミテッド キナーゼ阻害剤
EP4129276A4 (en) * 2020-03-31 2023-10-18 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation PHARMACEUTICAL COMPOSITION

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014140582A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014162122A1 (en) 2013-04-02 2014-10-09 Respivert Limited Kinase inhibitor
WO2014162121A1 (en) 2013-04-02 2014-10-09 Topivert Pharma Limited Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles
WO2015092423A1 (en) 2013-12-20 2015-06-25 Respivert Limited Urea derivatives useful as kinase inhibitors

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6080763A (en) 1997-11-03 2000-06-27 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds and their use as anti-inflammatory agents
WO2000042012A1 (en) 1999-01-13 2000-07-20 Bayer Corporation φ-CARBOXYARYL SUBSTITUTED DIPHENYL UREAS AS RAF KINASE INHIBITORS
EP1158985B1 (en) 1999-01-13 2011-12-28 Bayer HealthCare LLC OMEGA-CARBOXY ARYL SUBSTITUTED DIPHENYL UREAS AS p38 KINASE INHIBITORS
UA73492C2 (en) 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
IL144897A0 (en) 1999-03-12 2002-06-30 Boehringer Ingelheim Pharma Compounds useful as anti-inflammatory agents
JP4162406B2 (ja) 1999-07-09 2008-10-08 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ヘテロアリール置換ウレア化合物の新規合成方法
DE60036726T2 (de) 1999-11-16 2008-02-07 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Harnstoff derivate als entzündungshemmende mittel
US6492529B1 (en) 2000-01-18 2002-12-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Bis pyrazole-1H-pyrazole intermediates and their synthesis
US6525046B1 (en) 2000-01-18 2003-02-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
WO2002083642A1 (en) 2001-04-13 2002-10-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
EP1381592A1 (en) 2001-04-13 2004-01-21 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. 1,4-disubstituted benzo-fused compounds
JP2004530690A (ja) 2001-05-16 2004-10-07 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗炎症性薬剤として有用なジアリールウレア誘導体
EP1395561A1 (en) 2001-05-25 2004-03-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Carbamate and oxamide compounds as inhibitors of cytokine production
ATE360417T1 (de) 2001-07-11 2007-05-15 Boehringer Ingelheim Pharma Methode zur behandlung von zytokinvermittelten erkrankungen
US20040023961A1 (en) 2002-02-11 2004-02-05 Bayer Corporation Aryl ureas with raf kinase and angiogenisis inhibiting activity
ES2425739T3 (es) 2002-02-11 2013-10-17 Bayer Healthcare Llc Sorafenib-tosilato para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por angiogénesis anormal
ATE386030T1 (de) 2002-02-25 2008-03-15 Boehringer Ingelheim Pharma 1,4-disubstituierte benzokondensierte cycloalkyl- harnstoffverbindungen zur behandlung von zytokinvermittelten erkrankungen
US6872726B2 (en) 2002-08-08 2005-03-29 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Fluorinated di-aryl urea compounds
WO2004113352A1 (en) 2003-06-19 2004-12-29 Amedis Pharmaceuticals Ltd. Silylated heterocyclylurea derivatives as cytokine-inhibitors
JP2007518680A (ja) 2003-06-30 2007-07-12 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ジ−アリール尿素化合物の製造方法
AU2004266719A1 (en) 2003-08-22 2005-03-03 Boehringer Ingelheim France S.A.S. Methods of treating COPD and pulmonary hypertension
BRPI0414313A (pt) 2003-09-11 2006-11-07 Kemia Inc inibidores de citocinas
WO2005044825A1 (en) 2003-10-21 2005-05-19 Amedis Pharmaceuticals Ltd. Silicon compounds and their use
US20060035893A1 (en) 2004-08-07 2006-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for treatment of respiratory and gastrointestinal disorders
GB0423554D0 (en) 2004-10-22 2004-11-24 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds
TW200740820A (en) 2005-07-05 2007-11-01 Takeda Pharmaceuticals Co Fused heterocyclic derivatives and use thereof
AR056582A1 (es) 2005-10-28 2007-10-10 Lilly Co Eli COMPUESTOS DE PIRAZOLIL UREA CON ACTIVIDAD INHIBITORIA DE CINASA P38 Y FORMULACIoN FARMACÉUTICA QUE LO COMPRENDE
US7790756B2 (en) 2006-10-11 2010-09-07 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Kinase inhibitors useful for the treatment of myleoproliferative diseases and other proliferative diseases
GB0818033D0 (en) 2008-10-02 2008-11-05 Respivert Ltd Novel compound
EA020641B1 (ru) 2008-10-02 2014-12-30 Респайверт Лимитед Производные n-(1-фенил-3-алкилпиразол-5-ил)-n'-арилмочевины
EP2370429B1 (en) 2008-12-11 2016-04-20 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
GB0905955D0 (en) 2009-04-06 2009-05-20 Respivert Ltd Novel compounds
GB0921731D0 (en) 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Theraputic uses
GB0921730D0 (en) 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Method of treatment
GB201005589D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Respivert Ltd Novel compounds
US9024041B2 (en) 2010-04-08 2015-05-05 Respivert Ltd. P38 MAP kinase inhibitors
EP2556067B1 (en) 2010-04-08 2016-02-24 Respivert Limited Pyrazolyl ureas as p38 map kinase inhibitors
EP2582700B1 (en) 2010-06-17 2016-11-02 Respivert Limited Respiratory formulations containing p38 mapk inhibitors
GB201010193D0 (en) 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Medicinal use
GB201010196D0 (en) 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Methods
EP2578582A1 (en) 2011-10-03 2013-04-10 Respivert Limited 1-Pyrazolyl-3-(4-((2-anilinopyrimidin-4-yl)oxy)napththalen-1-yl)ureas as p38 MAP kinase inhibitors
CA2846222C (en) 2011-10-03 2020-07-07 Respivert Limited 1-pyrazolyl-3-(4-((2-anilinopyrimidin-4-yl)oxy)napththalen-1- yl) ureas as p38 map kinase inhibitors
CA2858447C (en) 2011-12-09 2020-10-27 Monique Bodil Van Niel Tryazolopyridine derivatives as kinase inhibitors
GB201214750D0 (en) 2012-08-17 2012-10-03 Respivert Ltd Compounds
EP2890695A2 (en) 2012-08-29 2015-07-08 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014033446A1 (en) 2012-08-29 2014-03-06 Respivert Limited Kinase inhibitors
GB201215357D0 (en) 2012-08-29 2012-10-10 Respivert Ltd Compounds
WO2014033449A1 (en) 2012-08-29 2014-03-06 Respivert Limited Kinase inhibitors
EP2925742B1 (en) 2012-11-16 2016-10-26 Respivert Limited Kinase inhibitors
CN110522731B (zh) 2014-02-14 2022-08-02 瑞斯比维特有限公司 作为抗炎化合物的芳族杂环化合物
MA40774A (fr) 2014-10-01 2017-08-08 Respivert Ltd Dérivés de diaryle-urée en tant qu'inhibiteurs de kinase p38
WO2016051186A1 (en) 2014-10-01 2016-04-07 Respivert Limited N-phenyl-3-quinazolin-6-yl-benzamide derivatives as p38 kinase inhibitors
JP6995774B2 (ja) * 2016-04-06 2022-02-21 オクラー アクイジションズ リミテッド キナーゼ阻害剤

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014140582A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014162122A1 (en) 2013-04-02 2014-10-09 Respivert Limited Kinase inhibitor
WO2014162121A1 (en) 2013-04-02 2014-10-09 Topivert Pharma Limited Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles
WO2015092423A1 (en) 2013-12-20 2015-06-25 Respivert Limited Urea derivatives useful as kinase inhibitors

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