CN109071505A - 激酶抑制剂 - Google Patents

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Abstract

提供式(I)的化合物，其中T、A、Q、Z、G、R4、R5a、R5b和n具有说明书中给出的含义，所述化合物具有抗炎活性(例如通过抑制以下家族的一个或多个成员：p38促分裂原活化蛋白激酶家族；Syk激酶；和酪氨酸激酶的Src家族的成员)和具有治疗用途，包括在药物组合中的用途，特别是在治疗炎性疾病(包括肺、眼和肠的炎性疾病)中的用途。

Description

激酶抑制剂
本发明特别涉及作为抗炎剂的化合物(例如，通过抑制以下家族的一个或多个成员：p38促分裂原活化蛋白激酶家族(在本文中称为p38 MAP激酶抑制剂)，例如其α激酶亚型；Syk激酶；和酪氨酸激酶的Src家族)。本发明还涉及所述化合物在疗法中的用途，包括在单一疗法和组合疗法中的用途，尤其是在治疗炎性疾病中的用途，所述炎性疾病包括肺炎性疾病(例如哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD))、眼炎性疾病(例如葡萄膜炎或干燥性角结膜炎(干眼疾病，亦称为干眼症(xerophthalmia)))和胃肠道炎性疾病(例如克罗恩病和溃疡性结肠炎)。
本说明书中明显在先公布的资料的列表或论述不应必然被认为承认所述资料是现有技术的一部分，或者是公知常识。
已鉴定了四种p38 MAPK同种型(分别为α、β、γ和δ)，各自显示不同的组织表达模式。发现p38 MAPKα和β同种型普遍存在于整个身体中，存在于许多不同的细胞类型，和受许多先前描述的小分子量化合物抑制。由于这些同种型的广泛的组织分布(其导致所述化合物的脱靶效应)所致，早期类型的抑制剂是高度毒性的。一些更近期鉴定的抑制剂显示对p38 MAPKα和β同种型改进的选择性和具有更宽的安全限度。
认为p38 MAP激酶在许多信号转导途径中起关键作用，所述信号转导途径参与引发和维持人类疾病的慢性、持续性炎症，所述疾病例如严重哮喘、COPD和炎性肠病(IBD)。目前有大量文献证实，p38 MAP激酶被许多促炎细胞因子活化，并且其活化导致更多促炎细胞因子的募集和释放。事实上，来自一些临床研究的数据证实在用p38 MAP激酶抑制剂治疗期间患者的疾病活动的有益改变。例如，Smith描述了p38 MAP激酶抑制剂对TNFα(而不是IL-8)从人PBMC释放的抑制作用(Smith,S.J.,Br.J.Pharmacol.,2006,149:393-404)。
还提出了p38 MAP激酶抑制剂在治疗COPD和IBD中的用途。靶向p38MAPKα/β的小分子抑制剂已证明在以下中有效减少炎症的各种参数：
-获自COPD患者的细胞和组织，所述患者通常是皮质类固醇不敏感的(Smith,S.J.,Br.J.Pharmacol.,2006,149:393-404)；
-来自IBD患者的活检(Docena,G.等,J.Trans.Immunol.,2010,162:108-115)；和
-体内动物模型(Underwood,D.C.等,Am.J.Physiol.,2000,279:L895-902；Nath,P.等,Eur.J.Pharmacol.,2006,544:160-167)。
Irusen和其同事还提示了p38 MAPKα/β通过降低细胞核中的糖皮质激素受体(GR)的结合亲和力而参与皮质类固醇不敏感性的可能性(Irusen,E.等,J.AllergyClin.Immunol.,2002,109:649-657)。已描述了用许多p38 MAP激酶抑制剂(包括AMG548、BIRB 796、VX702、SCIO469和SCIO323)对炎性疾病的临床研究(Lee,M.R.和Dominguez,C.,Current Med.Chem.,2005,12:2979-2994.)。然而，妨碍p38MAP激酶抑制剂在治疗人类慢性炎性疾病中的效用的主要障碍是在患者中观察到的毒性。其足够严重而导致已进行的许多化合物(包括上文具体提到的那些)从临床开发中撤出。
COPD是这样的病况，其中据报道，潜在炎症显著抵抗吸入的皮质类固醇的抗-炎性作用。因此，治疗COPD的较好的策略是开发同时具有内在抗-炎性作用和增加COPD患者的肺组织对吸入的皮质类固醇的敏感性的能力的干预。Mercado等的近期出版物(2007；American Thoracic Society Abstract A56)证实，沉默p38 MAPKγ具有恢复对皮质类固醇的敏感性的潜力。因此，在使用p38 MAP激酶抑制剂以治疗COPD时，可存在对患者的双重益处。
诊断患有哮喘或COPD的许多患者持续遭受不受控制的症状和其医学病况的恶化，可能导致住院。尽管使用最先进的目前可用的治疗方案(包括吸入皮质类固醇和长效β-激动剂的组合产品)，但这仍发生。在过去十年中积累的数据表明，未能有效管控肺中疾病的潜在炎性组分是发生恶化的最可能的原因。鉴于作为抗炎剂的皮质类固醇和特别是吸入皮质类固醇在治疗哮喘中的确立的功效，这些发现引起强烈的研究。得到的研究结果确定，一些环境刺激引起患者的肺中的皮质类固醇-不敏感的炎性改变。实例是自病毒介导的上呼吸道感染(URTI)产生的应答，其在增加与哮喘和COPD相关的发病率中具有特殊的意义。
先前已经公开了抑制c-Src和Syk激酶两者的活性的化合物是抗鼻病毒复制的有效试剂(Charron,C.E.等,WO 2011/158042)，和抑制p59-HCK的化合物有效对抗流感病毒复制(Charron,C.E.等,WO 2011/070369)。与p38 MAPK的抑制一起，这些是意欲治疗慢性呼吸疾病的患者的化合物所具有的特别有吸引力的性质。
某些p38 MAPK抑制剂还被描述为呼吸道合胞病毒的复制的抑制剂(Cass L.等,WO2011/158039)。
IBD的准确病因学是不确定的，但被认为受遗传和环境因素的支配，所述因素相互作用以促进针对腔内微生物群组分的过度但弱控制的粘膜炎性应答。该应答通过来自外周的炎性嗜中性粒细胞、树突细胞和T-细胞的浸润介导。因为其在炎性细胞中普遍存在的表达，p38已成为IBD模型的明显的研究靶标。在IBD的动物模型和来自IBD患者的人活检中研究p38抑制剂的功效的结果表明，p38可能是用于治疗IBD的靶标(Hove,T.ten等,Gut,2002,50:507-512,Docena,G.等,J.Trans.Immunol,.2010,162:108-115)。然而，这些发现与报告用p38抑制剂没有作用的其它组不完全一致(Malamut G.等,Dig.Dis.Sci,2006,51:1443-1453)。在克罗恩患者中使用p38α抑制剂BIRB796的临床研究证实具有C-反应蛋白水平改善的潜在临床益处。然而该改善是暂时的，第8周时返回基线(Schreiber,S.等,Clin.Gastro.Hepatology,2006,4:325-334)。在严重克罗恩病的患者中研究CNI-1493(一种p38和Jnk抑制剂)的功效的小型临床研究显示在8周期间临床评分的显著改善(Hommes,D.等Gastroenterology.2002 122:7-14)。
已知T细胞在介导胃肠道的炎症中起重要作用。Powrie和其同事的先驱工作证实，幼稚CD4+细胞转移至严重缺乏免疫力的免疫缺陷(SCID)动物中导致发生依赖于共生细菌的存在的结肠炎(Powrie F.等Int Immunol.1993 5:1461-71)。此外，来自IBD患者的粘膜的研究显示CD4+细胞的增量调节，所述细胞为Th1(IFNγ/IL-2)或Th2(IL5/TGFβ)偏好的，这取决于患者患有克罗恩病还是溃疡性结肠炎(Fuss IJ.等J Immunol.1996 157:1261-70.)。类似地，已知T细胞在眼的炎性病症中起重要作用，数个研究结果报告了在贝切特患者的血清中T细胞相关细胞因子(IL-17和IL-23)的水平增加(Chi W.等InvestOphthalmol Vis Sci.2008 49:3058-64)。支持这些观察结果，Direskeneli和其同事证实，贝切特患者在其外周血中Th17细胞增加和Treg细胞减少(Direskeneli H.等J AllergyClin Immunol.2011 128:665-6)。
一种抑制T细胞活化的方法是靶向参与T细胞受体信号转导复合物的活化的激酶。已知Syk和Src家族激酶在该途径中起关键作用，其中Src家族激酶Fyn和Lck是在T细胞受体下游待活化的第一个信号转导分子(Barber EK.等PNAS1989,86:3277-81)。它们启动T细胞受体的酪氨酸磷酸化，导致Syk家族激酶ZAP-70的募集。动物研究显示，ZAP-70敲除产生SCID表型(Chan AC.等Science.1994,10；264(5165):1599-601)。
用Syk抑制剂Fostamatinib的类风湿性关节炎患者的临床试验证实Syk作为抗炎靶标的潜力，其中患者显示临床结果改善和IL-6和MMP-3的血清水平降低(Weinblatt ME.等ArthritisRheum.2008 58:3309-18)。Syk激酶在造血系统的细胞中广泛表达，最显著是在B细胞和成熟T细胞中。通过与基于免疫受体酪氨酸的活化基序(ITAM)相互作用，它在调节T细胞和B细胞扩大以及在炎性细胞中介导免疫-受体信号转导中起重要作用。Syk活化导致IL-6和MMP释放–通常发现在炎性病症包括IBD和类风湿性关节炎中增量调节的炎性介质(Wang YD.等World J Gastroenterol 2007；13:5926-5932,Litinsky I等Cytokine.2006Jan 33:106-10)。
除了在控制促-炎性途径的活性的细胞信号转导事件中起关键作用之外，目前还认识到，激酶调节多种细胞功能的活性，包括DNA完整性的保持(Shilo,Y.Nature ReviewsCancer,2003,3:155-168)和细胞分裂的复杂过程的共协调。事实上，已发现某些激酶抑制剂(所谓的“Olaharski激酶”)改变体外微核形成的频率(Olaharski,A.J.等,PLoSComput.Biol.,2009,5(7),e1000446；doi:10.1371/journal.pcbi.1000446)。微核形成涉及有丝分裂过程的中断或与之相关，因此是不合需要的。发现糖原合酶激酶3α(GSK3α)的抑制是特别重要的因素，其增加激酶抑制剂促进微核形成的可能性。此外，已报道用RNAi抑制激酶GSK3β促进微核形成(Tighe,A.等,BMC Cell Biology,2007,8:34)。
尽管有可能通过将剂量最优化和/或通过改变分子的给药途径来减弱Olaharski激酶例如GSK3α的抑制的不良作用，但鉴定其它在治疗上有用的分子将是有利的，所述分子具有低的或可忽略的Olaharski激酶例如GSK 3α的抑制和/或具有低的或可忽略的有丝分裂过程的中断(例如，在有丝分裂测定法中所测量)。
公开了抑制一种或多种激酶的多种化合物，包括脲衍生物。这样的化合物的实例可见于WO 99/23091、WO 00/041698、WO 00/043384、WO 00/055139、WO 01/36403、WO 01/4115、WO 02/083628、WO 02/083642、WO 02/092576、WO 02/096876、WO 2003/005999、WO2003/068223、WO 2003/068228、WO 2003/072569、WO 2004/014870、WO 2004/113352、WO2005/005396、WO 2005/018624、WO 2005/023761、WO 2005/044825、WO 2006/015775、WO2006/043090、WO 2007/004749、WO 2007/053394、WO 2013/050756、WO 2013/050757、WO2014/027209、WO 2014/033446、WO 2014/033447、WO 2014/033448、WO 2014/033449、WO2014/076484、WO 2014/140582、WO 2014/162121、WO 2014/162122、WO 2014/162126、WO2015/092423、WO 2015/121444、WO 2015/121660、WO 2016/051187和WO 2016/051188。其它实例可见于在以下中公开的论文：
-Curr.Opin.Drug Devel.(2004,7(5),600-616)；
-J.Med.Chem.(2007,50,4016-4026；2009,52,3881-3891；2010,53,5639-5655；和2016,59,1727–1746)；
-Bioorg.Med.Chem.Lett.(2007,17,354–357；2008,18,3251-3255；2009,19,2386-2391；和2010,20,4819-4824)；
-Curr.Top.Med.Chem.(2008,8,1452-1467)；
-Bioorg.Med.Chem.(2010,18,5738-5748)；
-Eur.J.Pharmacol.(2010,632,93-102)；
-J.Chem.Inf.Model.(2011,51,115-129)；
-Br.J.Pharmacol.(2015,172,3805–3816)；和
-Inflamm.Bowel Dis.(2016,22,1306–1315)。
尽管如此，对鉴定和开发新的激酶抑制剂仍存在需要，特别是适合治疗炎症的替代的p38 MAP激酶抑制剂。尤其需要这样的抑制剂，其相对于目前可用的治疗具有改进的治疗潜力，或者具体而言，其显示优良的治疗指数(例如，至少同样有效的抑制剂，和在一个或多个方面，与之前的药剂相比在相关治疗剂量下具有更少毒性的抑制剂)。
出人意料的是，目前我们发现，某些苯胺取代的二芳基脲抑制p38 MAP激酶、Syk和Src家族激酶中的一种或多种，因此具有良好的抗-炎性质。
因此，根据本发明的第一方面，提供式I化合物，
其中：
T表示
W表示O、S或NCH3；
V表示N或CR1；
R1表示C1-3烷氧基、C1–3烷基、C2–3烯基、C2–3炔基，后四个基团任选地被一个或多个选自卤素、羟基和C1-2烷氧基的取代基取代，或R1表示H；
R2表示–NRA1S(O)2RB1、-S(O)1-2RB2、–P(O)RB3RB4、-C(O)NRA2RA3或–CH2NRA4C(O)RA5；
RA1至RA5独立地表示H或任选地被一个或多个选自卤素、羟基、NRCRD和C1-2烷氧基的取代基取代的C1–3烷基，或RA2和RA3一起表示在C2和C3之间被-O-、–S(O)q–或-N(RE)-中断的C3-6n-亚烷基或C4-5n-亚烷基；
RB1至RB4独立地表示C1–3烷基或C3-6环烷基，后两个基团任选地被一个或多个卤素取代基取代；
RC和RD独立地表示H或C1-3烷基，后一取代基任选地被羟基或C1–2烷氧基取代，或RC和RD一起组合形成任选地在C2和C3之间被-O-、-S(O)q-或-N(RE)-中断的C4-6亚烷基；
RE表示H或甲基；
q表示0、1或2；
R3表示C2–7烷基、C2–7烯基、C2–7炔基或C3-7环烷基，后四个基团任选地被羟基、C1–2烷氧基或卤素取代，或R3表示吗啉基或三甲基甲硅烷基；
A表示CH或N；
R4表示C1-3烷氧基、C3-5环烷氧基或C1-3烷基，后三个基团任选地被一个或多个卤素取代基取代，或R4表示乙炔基、氰基、S(O)2CH3、卤素或H；
Q表示O、S(O)p、SO2N(R6)或C(O)N(R6)；
n表示1、2或3；
p表示0、1或2；
R5a和R5b独立地表示H、甲基或卤素，或R5a和R5b一起表示C2-6n-亚烷基；
当n表示1时，Z表示O、S或NR7，或
当n表示2或3时，Z在每次出现时表示O-原子，或者在一次出现时表示S-原子或NR7且在每次其它出现时表示O-原子；
R6和R7独立地表示H或甲基；
G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H或羧酸电子等排体；
r表示0，或者当Het1通过环杂原子连接至(CH2)r时，r可选择地表示1；和
Het1表示
完全芳族的5或6元杂环基团，该基团含有一个或多个选自N、O和S的杂原子，或者
完全饱和的或部分不饱和的和单环或稠合或桥接双环的4至7元杂环基团，该基团含有一个或多个选自N、O和S的杂原子，
其中Het1任选地被一个或多个选自C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤素、羟基和氧代的取代基取代，
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，
所述化合物可在下文被称为"本发明的化合物"。
可提及的药学上可接受的盐包括酸加成盐和碱加成盐。这样的盐可通过常规方式形成，例如通过将式I化合物的游离酸或游离碱形式与一个或多个当量的合适的酸或碱任选地在溶剂中或在介质中(其中所述盐为不溶的)反应，接着使用标准技术(例如在真空中、通过冷冻干燥或通过过滤)除去所述溶剂或所述介质。盐还可通过将呈盐形式的式I化合物的反荷离子交换为另一反荷离子，例如使用合适的离子交换树脂制备。
药学上可接受的盐的实例包括源自无机酸和有机酸的酸加成盐，和源自金属的盐。
为避免疑惑，式I化合物可含有呈任一种其天然或非天然同位素形式的规定的原子。在该方面，可提及的本发明的实施方案包括这样的实施方案，其中：
(a)关于式I化合物的任何原子，所述化合物不是同位素富集或标记的；和
(b)关于式I化合物的一个或多个原子，所述化合物是同位素富集或标记的。
本文对"同位素衍生物"的提及，涉及这两个实施方案的第二个。在本发明的具体的实施方案中，式I化合物是用一种或多种稳定同位素进行同位素富集或标记的(关于化合物的一个或多个原子)。因此，可提及的本发明的化合物包括，例如用一个或多个原子例如氘等进行同位素富集或标记的式I化合物。
式I化合物可显示互变异构现象。所有互变异构形式和其混合物包括在本发明的范围内。
除非另外说明，否则本文定义的烷基和烷氧基可以是直链的，或者当存在足够数量(即，最少3个)的碳原子时，可以是支链的。可提及的具体的烷基包括例如，甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、正丁基和叔丁基。可提及的具体的烷氧基包括例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基。
除非另外说明，否则本文定义的环烷基，当具有足够数量(即，最少4个)的碳原子时，可以是部分环状/非环状的。
除非另外说明，否则本文定义的亚烷基可以是直链的，或者当存在足够数量(即，最少2个)的碳原子时，可以是支链的。在本发明的具体的实施方案中，亚烷基是指直链亚烷基。
为避免疑惑，可存在由Het1表示的杂环基上的氧代取代基可与杂环中的任何合适原子连接，包括，如果价键允许，连接至环内的C-、N-和/或S-原子(从而形成酮、N-氧化物、S(O)和/或S(O)2基团)。
可提及的Het1基团包括以下基团，其中指定的连接位置是针对式I的化合物的C(R5a)(R5b)和-CO2H基团：呋喃基(例如，在2和4位，或者特别是在2和5位连接的呋喃基)、噁二唑基(例如，在3和5位连接的噁二唑基，例如1,2,4-噁二唑基)、吡唑基(例如，在1和4位连接的吡唑基，例如吡唑基或3-甲基吡唑基)、哒嗪基(例如，在3和6位连接的哒嗪基)、吡咯基(例如，在2和5位连接的吡咯基，例如1-甲基吡咯基)、四氢呋喃基(例如，在2和4位，或者特别是在2和5位连接的四氢呋喃基)和噻吩基(例如，在2和4位或2和5位连接的噻吩基)。
除非另外说明，否则术语"卤素"包括提及氟、氯、溴或碘，特别是氟、氯或溴，尤其是氟或氯。
当在本文中结合基团G使用时，术语“羧酸电子等排体”包括涉及本领域技术人员已知的羧酸电子等排体，例如在Lassalas et al.,J.Med.Chem.(2016),59,3183-3203,Ballatore etal.,Chem.Med.Chem.(2013),8(3),385–395和Boyd et al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.(2015),25,1990-1994中公开的那些，这些文献的公开内容通过引用结合到本文中。
因此，G可表示的羧酸电子等排体包括：
(a)膦酸或次膦酸部分，或其盐，例如-P(O)(OH)2或-P(O)(H)(OH)；
(b)磺酸或亚磺酸部分，或其盐，例如-S(O)2(OH)或-S(O)(OH)；
(c)氧肟酸，或其盐，例如-C(O)N(H)OH或-N(C(O)CH3)OH；
(d)氧肟酸酯，例如-C(O)N(H)OCH3或–O-N(H)-C(O)CH3；
(e)磺酰胺，例如-S(O)2NH2或–N(H)-S(O)2CH3；
(f)酰基磺酰胺，例如–C(O)N(H)-S(O)2CH3或酰基硫酰胺，例如–C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2或–C(O)N(H)-S(O)2NH2；
(g)酰基脲，例如–N(H)C(O)N(H)-C(O)CH3；
(h)磺酰基脲，例如-N(H)C(O)N(H)-S(O)2CH3；
(i)缺电子苯酚部分，例如2,6-二氟苯酚(例如，通过苯环的3或4位连接至分子的余下部分)；
(j)-S(O)0-2-苯酚(例如，其中苯酚部分通过苯环的2位连接至S-原子)；
(k)-C(H)(OH)CF3或-C(O)CF3(或者其水合形式，-C(OH)2CF3)；
(l)3-或4-羟基喹啉-2-酮；
(m)四唑；
(n)完全芳族的、部分不饱和的或完全饱和的羟基、硫代(thio)或氧代取代的4或5元杂环，该基团含有一个或多个选自N、O和S的杂原子，例如羟基或氧代取代的杂环基团，选自噻唑烷二酮、噁唑烷二酮、噻唑烷酮、噁唑烷酮、噻二唑啉酮、噁二唑-5(4H)-硫酮、噁噻二唑-2-氧化物或羟基取代的异噁唑、异噻唑或噁二唑；或
(o)碳环酸，例如特窗酸、tetramic acid、环戊烷-1,3-二酮、环戊烷-1,2-二酮和方形酸，后一基团任选地通过–N(H)-部分连接至分子的余下部分。
例如，羧酸电子等排体可以是上文(a)至(l)提及的任何部分或选自以下的环部分：
或其互变异构体，其中X1表示O或S和X2表示O或NH。
可提及的具体的羧酸电子等排体包括四唑基、酰基磺酰胺例如–C(O)N(H)-S(O)2CH3、酰基硫酰胺例如-C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2、羟基取代的异噁唑，例如：
或其互变异构体，例如
或5-羟基取代的1,2,4-噁二唑，例如：
或其互变异构体，例如
可提及的本发明的实施方案包括以下那些：
(a)T表示
(b)R4表示C1-3烷氧基或C1-3烷基，后两个基团任选地被一个或多个卤素取代基取代，或R4表示乙炔基、氰基、S(O)2CH3、卤素或H；
(c)R5a和R5b独立地表示H、甲基或卤素；
(d)Z在每次出现时表示O-原子；和
(e)G表示–C(O)2H。
在这样的实施方案中，式I的化合物可表示为式Ix的化合物，
其中：
R1至R3、A和Q如上文所定义；
R4表示C1-3烷氧基或C1-3烷基，后两个基团任选地被一个或多个卤素取代基取代，或R4表示乙炔基、氰基、S(O)2CH3、卤素或H；和
R5a和R5b独立地表示H、甲基或卤素。
可提及的本发明的其它实施方案包括其中一个或多个以下定义适用于式I的化合物的那些：
(a1)T表示
(b1)R4表示任选地被一个或多个卤素取代基取代的C3-5环烷氧基；
(c1)R5a和R5b一起表示C2-6n-亚烷基；
(d1)当n表示2或3时，Z在一次出现时表示S-原子或NR7且在每次其它出现时表示O-原子；
(e1)G表示–[(CH2)r-Het1]-C(O)2H或羧酸电子等排体。
特别地，可提及的本发明的实施方案包括其中上文(a1)至(e1)的任何一个或任何两个、任何三个、任何四个或全部适用的那些。
可提及的本发明的实施方案包括其中一个或多个以下定义适用于式I或Ix的化合物的那些：
(a)W表示O；
(b)V表示N；
(c)R1表示氘化C1-2烷氧基(例如，OCD3)，或特别是C1-2烷氧基或H；
(d)R2表示–P(O)RB3RB4、-S(O)2RB2或特别是–NRA1S(O)2RB1(例如，-NHS(O)2RB1)、-S(O)RB2或-C(O)NHRA2；
(e)RA1至RA5独立地表示H或任选地被一个或多个卤素取代基取代的甲基；
(f)RB1至RB4独立地表示任选地被一个或多个卤素取代基取代的C1–2烷基；
(g)R3表示C3–5烷基、C3–6炔基或三甲基甲硅烷基；
(h)A表示N或特别是CH；
(i)R4表示C3-4环烷氧基或特别是乙炔基、氰基、卤素、C1-2烷氧基或C1-2烷基，后两个基团任选地被一个或多个卤素取代基取代；
(j)Q表示S、SO2N(R6)或特别是C(O)NH、S(O)、S(O)2或O；
(k)n表示1或特别是2或3；
(l)p表示0或特别是1或2；
(m)R5a和R5b一起表示-(CH2)2-4-或特别是R5a和R5b独立地表示H或甲基；
(n)Z表示O原子(在每次出现时)，或者当n表示2或3时，Z可选择地在一次出现时表示S-原子和在每次其它出现时表示O-原子(例如，在每次出现时Z表示O原子)；
(o)G表示羧酸电子等排体(例如，如上文定义)、–(CH2)-Het1-C(O)2H、-Het1-C(O)2H或特别是-C(O)2H；
(p)Het1表示
完全芳族的5或6元杂环基团，该基团含有1-3个选自N、O和S的杂原子(例如，Het1表示呋喃基、噁二唑基(例如1,2,4-噁二唑基)、吡唑基、哒嗪基、吡咯基或噻吩基)，或者
完全饱和的或部分不饱和的和单环或稠合或桥接双环的5或6元杂环基团，该基团含有1或2个选自N、O和S的杂原子(例如，Het1表示四氢呋喃基)，
其中Het1任选地被一个或多个选自C1-2烷基、羟基和氧代的取代基取代(例如，其中Het1任选地被一个或多个甲基取代)。
可提及的本发明的实施方案包括其中式I或Ix的化合物是式Ia的化合物的那些，
其中R1至R4、A、Q和n如前文所定义。
可提及的本发明的实施方案包括其中一个或多个以下定义适用于式I、Ix和Ia的化合物的那些：
(a)R1表示氘化甲氧基(例如，OCD3)或特别是甲氧基；
(b)R2表示-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-S(O)1–2CH3、-S(O)1–2CH2CH3、–P(O)(CH3)2、–N(CH3)S(O)2CH3、–NHS(O)2CH2CH3或–NHS(O)2CH3(例如，-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-S(O)CH3或特别是–NHS(O)2CH3)；
(c)R3表示三甲基甲硅烷基或特别是–C(CH3)2-R，其中R表示乙炔基或特别是甲基(例如，R3表示叔丁基)；
(d)A表示N或特别是CH；
(e)R4表示环丙氧基或甲氧基，后一基团任选地被一个或多个卤素取代基取代(例如，任选地被一个或多个(例如，两个或三个)氟取代基取代的甲氧基)，或特别是R4表示甲氧基；
(f)Q表示S或特别是C(O)NH、S(O)、S(O)2或O；
(g)n表示3或特别是2；
(h)R5a和R5b一起表示-(CH2)2-或特别是R5a和R5b独立地表示H或甲基(例如，R5a表示H和R5b表示甲基，R5a和R5b均表示甲基或特别是R5a和R5b均表示H)；
(i)G表示-CO2H或-Het1-CO2H，其中-Het1-CO2H部分是选自以下的结构片段
或G表示羧酸电子等排体，其选自四唑基、–C(O)N(H)-S(O)2CH3、–C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2,
或后三个基团的任一个的互变异构体。
可提及的本发明的其它实施方案包括其中式I、Ix或Ia的化合物是式Ib的化合物的那些，
其中R2、A、Q和n如前文所定义。
可提及的本发明的实施方案包括其中一个或多个以下定义适用于式I、Ix、Ia和Ib的化合物的那些：
(a)R2表示–NHS(O)2CH3；
(d)A表示CH；
(e)Q表示C(O)NH、S(O)、S(O)2或特别是O；
(g)n表示2。
在该方面，可提及的本发明的具体实施方案包括其中式I的化合物是式Iy的化合物的那些，
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
可提及的式I、Ix、Iy、Ia或Ib的其它化合物包括下文所述的实施例的化合物。因此，可提及的本发明的实施方案包括其中式I、Ia或Ib的化合物是选自以下的化合物的那些：
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)亚磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
6-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)哒嗪-3-甲酸；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-环丙氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)环丙烷-1-甲酸；
4-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸；
1-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-甲酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-乙基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-N-(甲基磺酰基)乙酰胺；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基氨甲酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(二甲基磷酰基)-2-甲氧基苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(N-甲基甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)呋喃-3-甲酸；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)四氢呋喃-3-甲酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰基)-2-甲氧基苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰氨基)-2-甲氧基苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)异噁唑-3-基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((5-氧代-2,5-二氢异噁唑-3-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)苯基)-甲烷磺酰胺；
2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)硫基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸,(R)-异构体；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸,(S)-异构体；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-2-甲基丙酸；
1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸；
N-(3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-((1H-四唑-5-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)-5-甲氧基苯基)氨基)-吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-5-(叔丁基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺；
2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-N-(N,N-二甲基氨磺酰基)乙酰胺；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(二氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-乙炔基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)苯基)甲烷磺酰胺；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((3-氧代-2,3-二氢异噁唑-5-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)苯基)-甲烷磺酰胺；和
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸,
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
可提及的本发明的实施方案包括其中式I、Ix、Ia或Ib的化合物如前文所定义的那些，所述化合物
(a)是，或者
(b)不是
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
式I、Ix、Iy、Ia或Ib的化合物的盐的实例包括所有药学上可接受的盐，例如但不限于，强无机酸的酸加成盐，例如HCl、H2SO4和HBr盐(例如，HCl或HBr盐)和强有机酸例如甲磺酸的加成盐。
可提及的式I、Ix、Iy、Ia或Ib的化合物的具体的盐包括盐酸盐、葡甲胺盐、钾盐和钠盐。
本文对本发明的化合物(式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物)的提及意欲包括提及所述化合物和所述化合物的所有药学上可接受的盐、溶剂合物和/或互变异构体，除非上下文明确另外说明。在该方面，可提及的溶剂合物包括水合物。
本发明的化合物(式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物)是p38 MAP激酶(尤其是α亚型)抑制剂，因此可用于药物，特别是用于治疗炎性疾病。因此，可提及的本发明的进一步的方面包括以下内容。
(a)药物制剂，包含与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合的前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
(b)组合产品，包含
(A)前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，和
(B)另一治疗剂，
其中组分(A)和(B)各自与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合配制。
在本发明的该方面，组合产品可以是单一(组合)药物制剂或分部药盒(kit ofparts)。
因此，本发明的该方面包括药物制剂，其包含与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合的前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物和另一治疗剂(所述制剂在下文称为“组合制剂”)。
还包括分部药盒，其包含以下组分：
(i)药物制剂，包含与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合的前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物；和
(ii)药物制剂，包含与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合的另一治疗剂，
所述组分(i)和(ii)各自以合适于彼此联合给予的形式提供。
因此，分部药盒的组分(i)是上文与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合的组分(A)。类似地，组分(ii)是上文与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合的组分(B)。
(c)用于制备上文方面(a)的药物制剂的方法，所述方法包括将前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合的步骤。
可提及的本发明该方面的实施方案包括这样的实施方案，其中药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体是局部可接受的辅剂、稀释剂或载体(和/或其中所述方法用于制备局部药物制剂，即适合于局部给予的药物制剂)。
(d)前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，其用于医学用途(或用作药物或药剂)。
(e)前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品，其用于治疗或预防炎性疾病。
(f)前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或
关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品，
在制备用于治疗或预防炎性疾病的药物中的用途。
(g)治疗或预防炎性疾病的方法，所述方法包括给予受试者有效量的
前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或者
关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品。
(h)敏化受试者对皮质类固醇的抗炎性作用的方法，所述方法包括给予所述受试者有效量的
前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或者
关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品。
可提及的本发明该方面的实施方案包括这样的实施方案，其中所述受试者是已变得对皮质类固醇的抗炎性作用耐受的受试者。
本文提及“预防炎性疾病”包括提及在之前患有炎性疾病的受试者(例如，之前已接受所述疾病的治疗，例如根据上文(g)中描述的方法的治疗的受试者)中预防这样的疾病的复发(或降低其可能性)。
因此，可提及的本发明的其它方面包括以下内容。
(i)前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品，其用于在之前已接受炎性疾病的治疗(例如，用前文定义的式I、Ia或Ib化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品治疗)的受试者中降低所述疾病的复发的可能性。
(j)前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或
关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品，
在制备药物中的用途，所述药物用于在之前已接受炎性疾病的治疗(例如，用前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品治疗)的受试者中降低所述疾病的复发的可能性。
(k)在之前已接受炎性疾病的治疗(例如，用前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品治疗)的受试者中降低所述疾病的复发的可能性的方法，所述方法包括给予所述受试者有效量的
前文定义的式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或
关于本发明的方面(a)或(b)定义的药物制剂或组合产品。
制剂
关于上文的方面(a)和(b)，可提及的稀释剂和载体包括合适于胃肠外、口服、局部、粘膜和直肠给药的那些。
上文的方面(a)和(b)的药物制剂和组合产品可经制备用于例如胃肠外、皮下、肌内、静脉内、关节内、玻璃体内、眼周、眼球后、结膜下、囊下(sub-Tenon)、局部眼或关节周围给药，特别是呈液体溶液剂、乳剂或混悬剂的形式；用于口服给药，特别是呈片剂或胶囊剂的形式，和尤其包括目的为提供结肠靶向的药物释放的技术(Patel,M.M.ExpertOpin.Drug Deliv.2011,8(10),1247–1258)；用于局部例如经肺或鼻内给药，特别是呈粉剂、鼻滴剂或气雾剂的形式，和经皮给药；用于局部眼给药，特别是呈溶液剂、乳剂、混悬剂、软膏剂、植入物/插入物、凝胶剂、胶冻剂或脂质体微粒制剂的形式(Ghate,D.；Edelhauser,H.F.Expert Opin.DrugDeliv.2006,3(2),275–287)；用于眼给药，特别是呈可生物降解的和不能生物降解的植入物、脂质体和纳米粒的形式(Thrimawithana,T.R.等DrugDiscov.Today2011,16(5/6),270–277)；用于粘膜给药至例如颊、舌下或阴道粘膜，和用于直肠给药，例如呈栓剂或灌肠剂的形式。
上文的方面(a)和(b)的药物制剂和组合产品可合适地以单位剂型给予，并且可通过制药领域众所周知的任何方法制备，例如描述于Remington's PharmaceuticalSciences,第17版,Mack Publishing Company,Easton,PA.,(1985)。用于胃肠外给予的制剂可包含作为赋形剂的无菌水或盐水、亚烷基二醇例如丙二醇、聚亚烷基二醇例如聚乙二醇、植物来源的油、氢化萘等。用于经鼻给予的制剂可以是固体，和可以包含赋形剂，例如乳糖或葡聚糖，或可以是以鼻滴剂或计量喷雾剂的形式使用的水性或油性溶液剂。对于经颊给药，典型的赋形剂包括糖、硬脂酸钙、硬脂酸镁、预胶化淀粉等。
合适于口服给予的药物制剂和组合产品可包含一种或多种生理学上相容的载体和/或赋形剂和可以呈固体或液体形式。片剂和胶囊剂可用以下制备：结合剂，例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、西黄蓍胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，例如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或甘氨酸；润滑剂，例如硬脂酸镁、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；和表面活性剂，例如月桂基硫酸钠。液体组合物可包含常规添加剂，例如助悬剂，例如山梨糖醇糖浆、甲基纤维素、糖浆、明胶、羧甲基-纤维素或食用脂；乳化剂，例如卵磷脂或阿拉伯胶；植物油，例如杏仁油、椰子油、鱼肝油或花生油；防腐剂，例如丁羟基茴香醚(BHA)和丁羟基甲苯(BHT)。液体组合物可包封在例如明胶中以提供单位剂型。
固体口服剂型包括片剂、双片硬壳胶囊剂和软弹性明胶(SEG)胶囊剂。这样的双片硬壳胶囊剂可自例如明胶或羟丙基甲基纤维素(HPMC)制备。
干壳制剂通常包含约40％-60％w/w浓度的明胶、约20％-30％浓度的增塑剂(例如甘油、山梨糖醇或丙二醇)和约30％-40％浓度的水。其它材料例如防腐剂、染料、遮光剂和矫味剂也可存在。液体填充材料包括已经溶解、增溶或分散的固体药物(用助悬剂例如蜂蜡、氢化蓖麻油或聚乙二醇4000)或在载体或载体的组合(例如矿物油、植物油、甘油三酯、二醇、多元醇和表面活性剂)中的液体药物。
本发明的化合物可局部给予(例如至肺、眼或肠)。因此，上文可提及的方面(a)和(b)的实施方案包括适合于局部给予的药物制剂和组合产品。这样的制剂包括其中赋形剂(包括任何辅剂、稀释剂和/或载体)为局部可接受的那些。
局部给予至肺可通过使用气雾剂制剂实现。气雾剂制剂通常包含悬浮或溶解于合适的气雾剂抛射剂(例如氟氯化碳(CFC)或氢氟化碳(HFC))中的活性成分。合适的CFC抛射剂包括三氯一氟甲烷(抛射剂11)、二氯四氟乙烷(抛射剂114)和二氯二氟甲烷(抛射剂12)。合适的HFC抛射剂包括四氟乙烷(HFC-134a)和七氟丙烷(HFC-227)。抛射剂通常包含总吸入组合物重量的40％-99.5％(例如40％-90％)。制剂可包含赋形剂，其包括共-溶剂(例如乙醇)和表面活性剂(例如卵磷脂、去水山梨糖醇三油酸酯等)。其它可能的赋形剂包括聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、甘油等。气雾剂制剂包装在罐中，合适的剂量通过剂量阀(例如由Bespak、Valois或3M提供或由Aptar、Coster或Vari提供)来递送。
局部给予至肺还可通过使用非增压制剂例如水性溶液剂或混悬剂实现。这可通过喷雾器给予，例如可手持和便携式的喷雾器，或家用或医院用的喷雾器(即非便携式)。制剂可包含赋形剂，例如水、缓冲液、张度调节剂、pH调节剂、表面活性剂和共-溶剂。混悬液体剂和气雾剂制剂(无论是增压还是非增压的)将通常包含呈细粉形式的本发明的化合物，例如D50为0.5-10μm，例如约1-5μm。粒径分布可使用D10、D50和D90值表示。粒径分布的D50中位值定义为以微米计的将分布分成两半的粒径。源自激光衍射的测量更准确地描述为体积分布，因此使用该程序获得的D50值更有意义地称为Dv50值(体积分布的中位值)。本文所用的Dv值称为使用激光衍射测量的粒径分布。类似地，在激光衍射的情况下使用的D10和D90值意指Dv10和Dv90值，指的是这样的粒径，其中分别地，10％的分布在D10值之下而90％的分布在D90值之下。
局部给予至肺还可通过使用干粉制剂实现。干粉制剂将含有呈细粉形式的本公开内容的化合物，通常具有1-10μm的总气体动力学中位数直径(MMAD)或0.5-10μm例如约1-5μm的D50。呈细粉形式的本发明的化合物的粉剂可通过微粉化过程或类似的尺寸减小过程制备。微粉化可使用气流粉碎机例如由Hosokawa Alpine制造的那些来进行。得到的粒径分布可使用激光衍射测量(例如用Malvern Mastersizer 2000S仪器)。制剂将通常含有局部可接受的稀释剂，例如乳糖、葡萄糖或甘露醇(优选乳糖)，通常具有大的粒径，例如50μm或更大、例如100μm或更大的MMAD，或40-150μm的D50。本文所用的术语“乳糖”是指含乳糖的组分，包括α-乳糖一水合物、β-乳糖一水合物、无水α-乳糖、无水β-乳糖和无定形乳糖。乳糖组分可通过微粉化、筛分、研磨、压制、团聚或喷雾干燥加工。还包括呈各种形式的市售可得形式的乳糖，例如(吸入级乳糖；DFE Pharma)、(用于干粉吸入器的筛分乳糖；Meggle)、(DFE Pharma)和(筛分吸入级乳糖；DFE Pharma)产品。在一个实施方案中，乳糖组分选自α-乳糖一水合物、无水α-乳糖和无定形乳糖。优选地，乳糖是α-乳糖一水合物。
干粉制剂还可包含其它赋形剂，例如硬脂酸钠、硬脂酸钙或硬脂酸镁。
干粉制剂通常使用干粉吸入器(DPI)装置来递送。干粉递送系统的实例包括旋转式吸入器(SPINHALER)、DISKHALER、TURBOHALER、DISKUS和CLICKHALER。干粉递送系统的其它实例包括ECLIPSE、NEXT、ROTAHALER、HANDIHALER、AEROLISER、CYCLOHALER、BREEZHALER/NEOHALER、MONODOSE、FLOWCAPS、TWINCAPS、X-CAPS、TURBOSPIN、ELPENHALER、MIATHALER、TWISTHALER、NOVOLIZER、PRESSAIR、ELLIPTA、ORIEL干粉吸入器、MICRODOSE、PULVINAL、EASYHALER、ULTRAHALER、TAIFUN、PULMOJET、OMNIHALER、GYROHALER、TAPER、CONIX、XCELOVAIR和PROHALER。
在一个实施方案中，本发明的化合物以微粉化的干粉制剂提供，例如进一步包含合适级别的乳糖，任选地连同硬脂酸镁一起，填充入单剂量装置例如AEROLISER或填充入多剂量装置例如DISKUS。
本发明的化合物还可经直肠给予，例如呈栓剂或灌肠剂的形式，其包括水性或油性溶液剂以及混悬剂和乳剂。这样的组合物按照本领域技术人员众所周知的标准程序制备。例如，栓剂可通过将活性成分与常规栓剂基质(例如可可脂或其它甘油酯，例如Suppocire)混合制备。在该情况下，将药物与合适的非刺激性赋形剂混合，所述赋形剂在常温下是固体，但在直肠温度下是液体，因此将在直肠中熔化以释放药物。这样的材料是可可脂和聚乙二醇。
一般而言，对于意欲局部给予至眼的呈眼滴剂或眼软膏剂形式的组合物，抑制剂的总量将为约0.0001至低于4.0％(w/w)。
优选地，对于局部眼给药，按照本发明给予的组合物将被配制为溶液剂、混悬剂、乳剂和其它剂型。根据配制的容易性以及患者通过将1-2滴溶液滴入受累的眼睛里容易地给予这样的组合物的能力，水性溶液剂通常是优选的。然而，组合物也可以是混悬剂、粘稠或半粘稠凝胶剂或其它类型的固体或半固体组合物。对于难溶于水的化合物，混悬剂可为优选的。
根据本发明给予的组合物还可包括各种其它成分，包括但不限于，张度剂、缓冲剂、表面活性剂、稳定聚合物、防腐剂、共-溶剂和粘度构造剂。本发明的优选的药物组合物包括具有张度剂和缓冲剂的抑制剂。本发明的药物组合物还可任选地包括表面活性剂和/或姑息剂和/或稳定聚合物。
可使用各种张度剂以调节组合物的张度，对于眼用组合物，优选地调节至天然眼泪的张度。例如，氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、单糖例如葡萄糖、果糖、半乳糖和/或简单多元醇例如糖醇甘露醇、山梨醇、木糖醇、拉克替醇、异麦芽糖醇、麦芽糖醇和氢化淀粉水解产物可加入至组合物中以接近生理张度。这样的张度剂的量将根据待加入的具体试剂而改变。然而，一般而言，组合物具有足以导致最终组合物具有眼用可接受的渗透压(通常约150-450mOsm，优选地250-350mOsm和最优选地大约290mOsm)的量的张度剂。一般而言，本发明的张度剂将以2-5％w/w(例如，2-4％w/w)的范围存在。本发明的优选的张度剂包括单糖或糖醇，例如D-甘露醇。
合适的缓冲剂系统(例如，磷酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠、硼酸钠或硼酸)可加入至组合物中以阻止在贮存条件下pH改变。具体的浓度将根据所用的试剂而改变。然而，优选地，选择缓冲剂以维持靶pH在pH 5-8的范围内，和更优选地靶pH为pH 5-7，或靶pH为pH 6.5-7.6。
表面活性剂可任选地用于递送更高浓度的抑制剂。表面活性剂起增溶抑制剂和稳定胶体分散液(例如胶束溶液、微乳液、乳液和混悬液)的作用。可任选使用的表面活性剂的实例包括聚山梨醇酯、泊洛沙姆、聚乙二醇40硬脂酸酯、聚乙二醇蓖麻油、泰洛沙泊、triton和脱水山梨醇单月桂酸酯。用于本发明的优选的表面活性剂具有范围为12.4-13.2的亲水/亲脂/平衡"HLB"和对于眼用是可接受的，例如TritonX114和泰洛沙泊。
可加入本发明的眼用组合物的其它试剂是缓和剂，其起稳定聚合物的作用。稳定聚合物应该是优先用于局部眼用的离子的/带电荷的实例，更特别地，在其表面上带负电荷的聚合物，其可显示(–)10–50mV的ζ-电势而提供物理稳定性并且能够在水中形成分散液(即水溶性的)。本发明的优选的稳定聚合物是0.1–0.5％w/w的一种或多种(如果超过一种)聚电解质，其来自交联聚丙烯酸酯家族，例如卡波姆、聚卡波非和Pemulen(R)，特别是卡波姆974p(聚丙烯酸)。
其它化合物也可加入至本发明的眼用组合物以增加载体的粘度。粘度增强剂的实例包括但不限于：多糖例如透明质酸和其盐、硫酸软骨素和其盐、葡聚糖、纤维素家族的各种聚合物、乙烯基聚合物和丙烯酸聚合物。
局部眼用产品通常以多剂量形式包装。因此需要防腐剂以防止在使用时的微生物污染。合适的防腐剂包括：苯扎氯铵、氯丁醇、苯扎溴铵、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯基乙基醇、乙二胺四乙酸二钠、山梨酸、聚季铵盐-1或本领域技术人员已知的其它防腐剂。这样的防腐剂通常以0.001-1.0％w/v的水平使用。本发明的单位剂量组合物是无菌的，但通常是不防腐的。因此，这样的组合物通常不含防腐剂。
医学从业者或其它技术人员将能够确定本发明的化合物的合适的剂量，因此能够确定应包括在任何特定药物制剂中的本发明的化合物的量(无论是呈单位剂型还是其它形式)。
结合上文(b)中所述的组合产品可提及的本发明的实施方案包括这样的实施方案，其中其它治疗剂是本领域技术人员已知的合适于治疗炎性疾病(例如下文提及的特定疾病)的一种或多种治疗剂。
例如，对于治疗呼吸病症(例如COPD或哮喘)，其它治疗剂是选自以下的一种或多种药剂：
-类固醇(例如布地奈德、二丙酸氯地米松、丙酸氟替卡松、糠酸莫米松、糠酸氟替卡松；另一实例是环索奈德)；
-β激动剂，特别是β2激动剂(例如特布他林、沙丁胺醇、沙美特罗、福莫特罗；另一实例是维兰特罗、奥达特罗、瑞普特罗和非诺特罗)；和
-黄嘌呤(例如茶碱)。
例如，对于治疗呼吸病症(例如COPD或哮喘)，其它治疗剂是选自以下的一种或多种药剂：
-毒蕈碱拮抗剂(例如tiotropium、umeclidinium、glycopyrronium、aclidinium和daratropium，这些的任何一种例如作为溴化物盐)；和
-磷酸二酯酶抑制剂。
此外，对于治疗胃肠病症(例如克罗恩病或溃疡性结肠炎)，其它治疗剂可以是例如选自以下的一种或多种药剂：
-5-氨基水杨酸或其前药(例如柳氮磺吡啶、奥沙拉嗪或巴柳氮)；
-皮质类固醇(例如泼尼松龙、甲基泼尼松龙或布地奈德)；
-免疫抑制剂(例如环孢菌素、他克莫司、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤或6-巯基嘌呤)；
-抗-TNFα抗体(例如，英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗或戈利木单抗)；
-抗-IL12/IL23抗体(例如，ustekinumab)或小分子IL12/IL23抑制剂(例如，apilimod)；
-抗-α4β7抗体(例如，vedolizumab)；
-toll-样受体(TLR)阻断剂(例如，BL-7040；Avecia(Cambridge,UK))；
-MAdCAM-1阻断剂(例如，PF-00547659)；
-针对细胞粘连分子α4-整联蛋白的抗体(例如，那他珠单抗)；
-针对IL2受体α亚基的抗体(例如，达珠单抗或巴利昔单抗)；
-抗-Smad7抗体(例如，mongersen(GED0301；全-P-周(ambo)-2'-脱氧-P-硫代鸟苷酰基-(3'→5')-P-硫代胸苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-5-甲基-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代鸟苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-P-硫代胸苷酰基-(3'→5')-P-硫代胸苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P硫代胞苷酰基-(3'→5')-P-硫代胸苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-5-甲基-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代鸟苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代胞苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代腺苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧-P-硫代鸟苷酰基-(3'→5')-2'-脱氧胞苷))；
-鞘胺醇1-磷酸受体1(S1P1)调节剂(例如，ozanimod((S)-5-(3-(1-((2-羟乙基)氨基)-2,3-二氢-1H-茚-4-基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-2-异丙氧基苄腈)、amiselimod(MT1303；2-氨基-2-{2-[4-(庚基氧基)-3-(三氟甲基)苯基]乙基}丙烷-1,3-二醇)或APD334(2-[7-[4-环戊基-3-(三氟甲基)苄氧基]-1,2,3,4-四氢环戊[b]吲哚-3(R)-基]乙酸))；
-JAK抑制剂(例如，托法替尼、baricitinib(1-(乙基磺酰基)-3-[4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]-3-氮杂环丁烷乙腈)、filgotinib(N-[5-[4-[(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)甲基]苯基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基]环丙烷甲酰胺)、peficitinib(4-(((1R,2r,3S,5s,7s)-5-羟基金刚烷-2-基)氨基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺)、upadacitinib((3S,4R)-3-乙基-4-(3H-咪唑并[1,2-a]吡咯并[2,3-e]吡嗪-8-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)吡咯烷-1-甲酰胺)、TD-1473或R348(见例如US 2014/0206708))；
-STAT3抑制剂(例如，TAK-114；(3E)-1-甲基-3-(2-氧代-1H-吲哚-3-亚基)吲哚-2-酮)；
-受体相互作用蛋白-1(RIP1)激酶抑制剂(例如GSK2982772)；
-Syk抑制剂和其前药(例如，fostamatinib和R-406)；
-磷酸二酯酶-4抑制剂(例如，替托司特)；
-HMPL-004；
-益生菌；
-微生物群(microbiome)调节剂(例如SGM1019)；
-德沙拉嗪(Dersalazine)；
-塞马莫德(semapimod)/CPSI-2364；和
-蛋白激酶C抑制剂(例如AEB-071)。
(例如，对于治疗胃肠病症(例如克罗恩病或溃疡性结肠炎)，其它治疗剂可以是例如，选自以下的一种或多种药剂：
-5-氨基水杨酸或其前药(例如柳氮磺吡啶、奥沙拉嗪或巴柳氮)；
-皮质类固醇(例如泼尼松龙、甲基泼尼松龙或布地奈德)；
-免疫抑制剂(例如环孢菌素、他克莫司、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤或6-巯基嘌呤)；
-抗-TNFα抗体(例如，英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗或戈利木单抗)；
-抗-IL12/IL23抗体(例如，ustekinumab)或小分子IL12/IL23抑制剂(例如，apilimod)；
-抗-α4β7抗体(例如，vedolizumab)；
-MAdCAM-1阻断剂(例如，PF-00547659)；
-针对细胞粘连分子α4-整联蛋白的抗体(例如，那他珠单抗)；
-针对IL2受体α亚基的抗体(例如，达珠单抗或巴利昔单抗)；
-JAK3抑制剂(例如托法替尼或R348)；
-Syk抑制剂和其前药(例如，fostamatinib和R-406)；
-磷酸二酯酶-4抑制剂(例如，替托司特)；
-HMPL-004；
-益生菌；
-德沙拉嗪(Dersalazine)；
-塞马莫德(semapimod)/CPSI-2364；和
-蛋白激酶C抑制剂(例如AEB-071)。
对于治疗眼病症(例如葡萄膜炎和干燥性角结膜炎(干眼))，其它治疗剂可以是例如选自以下的一种或多种药剂：
-皮质类固醇(例如地塞米松、泼尼松龙、曲安奈德、二氟泼尼酯或氟轻松)；
-糖皮质激素激动剂(例如，mapracorat)；
-免疫抑制剂(例如环孢菌素、voclosporin、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、麦考酚酸莫酯或他克莫司)；
-抗-TNFα抗体(例如，英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗、ESBA-105或戈利木单抗)；
-抗-IL-17A抗体(例如，secukinumab)；
-mTOR抑制剂(例如，西罗莫司)；
-VGX-1027；
-腺苷A3受体激动剂(例如，CF-101)；
-lifitegrast；
-IL1阻断剂(例如，EBI-005；Hou等PNAS2013,110(10),3913-3918)；
-RGN-259(胸腺肽β4)；
-SI-614；
-OTX-101；
-JNK抑制剂(例如，XG-104)；
-MAP激酶信号传导抑制剂(例如，DA-6034；{[2-(3,4-二甲氧基苯基)-5-甲氧基-4-氧代色烯-7-基]氧基}乙酸)；
-粘蛋白刺激物(例如，雷巴米特；2-[(4-氯苯甲酰基)氨基]-3-(2-氧代-1H-喹啉-4-基)丙酸)；
-MIM-D3(Tavilermide；参见例如US 2013/0345395)；
-JAK抑制剂(例如，托法替尼、baricitinib(1-(乙基磺酰基)-3-[4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基]-3-氮杂环丁烷乙腈)、filgotinib(N-[5-[4-[(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)甲基]苯基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基]环丙烷甲酰胺)、peficitinib(4-(((1R,2r,3S,5s,7s)-5-羟基金刚烷-2-基)氨基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺)、upadacitinib((3S,4R)-3-乙基-4-(3H-咪唑并[1,2-a]吡咯并[2,3-e]吡嗪-8-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)吡咯烷-1-甲酰胺)、TD-1473或R348(见例如US2014/0206708))；和
-蛋白激酶C抑制剂(例如AEB-071)。
(例如，对于治疗眼病症(例如葡萄膜炎和干燥性角结膜炎(干眼))，其它治疗剂可以是例如，选自以下的一种或多种药剂：
-皮质类固醇(例如地塞米松、泼尼松龙、曲安奈德、二氟泼尼酯或氟轻松)；
-糖皮质激素激动剂(例如，mapracorat)；
-免疫抑制剂(例如环孢菌素、voclosporin、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、麦考酚酸莫酯或他克莫司)；
-抗-TNFα抗体(例如，英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗、ESBA-105或戈利木单抗)；
-抗-IL-17A抗体(例如，secukinumab)；
-mTOR抑制剂(例如，西罗莫司)；
-VGX-1027；
-腺苷A3受体激动剂(例如，CF-101)；
-lifitegrast；
-JAK3抑制剂(例如托法替尼或R348)；和
-蛋白激酶C抑制剂(例如AEB-071))。
在具体的实施方案中，对于治疗眼病症(例如葡萄膜炎和干燥性角结膜炎(干眼))，其它治疗剂可以是例如选自以下的一种或多种药剂：
-皮质类固醇(例如地塞米松、泼尼松龙、曲安奈德、二氟泼尼酯或氟轻松)；
-免疫抑制剂(例如环孢菌素、voclosporin、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、麦考酚酸莫酯或他克莫司)；
-抗-TNFα抗体(例如，英夫利昔单抗、阿达木单抗、赛妥珠单抗、ESBA-105或戈利木单抗)；
-抗-IL-17A抗体(例如，secukinumab)；
-mTOR抑制剂(例如，西罗莫司)；
-VGX-1027；
-JAK抑制剂(例如，托法替尼、baricitinib、filgotinib、peficitinib、upadacitinib或R348)(例如JAK3抑制剂，例如托法替尼或R348)；和-蛋白激酶C抑制剂(例如AEB-071)。
医学用途
本发明的化合物可用作炎性疾病的单一疗法，或用于所述疾病的组合疗法。
因此，上文可提及的方面(e)-(g)的实施方案包括这样的实施方案，其中式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物(或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物)是治疗中使用的唯一的药理学活性成分。
然而，在上文方面(e)-(g)的其它实施方案中，将式I、Ix、Iy、Ia或Ib化合物(或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物)给予受试者，还给予所述受试者一种或多种其它治疗剂(例如，其中所述一种或多种其它治疗剂如上文关于组合产品所定义)。
当用于本文时，术语"炎性疾病"特别包括提及以下的任何一种或多种：
(i)具有炎性组分的肺疾病或病症，例如囊性纤维化、肺动脉高压、肺结节病、特发性肺纤维变性，或者特别地，COPD(包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘或儿科哮喘；
(ii)具有炎性组分的皮肤疾病或病症，例如特应性皮炎、变应性皮炎、接触性皮炎或银屑病；
(iii)具有炎性组分的鼻疾病或病症，例如变应性鼻炎、鼻炎或鼻窦炎；
(iv)具有炎性组分的眼疾病或病症，例如结膜炎、过敏性结膜炎、青光眼、糖尿病视网膜病、黄斑水肿(包括糖尿病黄斑水肿)、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、干性和/或湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)、术后白内障炎症，或者特别地，干燥性角结膜炎(干眼，亦称为干眼症)、葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和泛葡萄膜炎)、角膜移植和缘细胞移植排斥；和
(v)具有炎性组分的胃肠疾病或病症，例如谷蛋白敏感性肠病(腹部疾病)、嗜酸性食管炎、肠移植物对抗宿主病，或者特别地，克罗恩病或溃疡性结肠炎。
本文对具有炎性组分的疾病的提及包括对涉及炎症的疾病的提及，无论是否存在所述疾病的其它(非-炎性)症状或后果。
根据本发明的其它方面，提供了用于制备式I的化合物的方法，所述方法包括：
(a)对于其中G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H的式I的化合物，将式I(P)的酯，
其中Rx分别表示C1-6烷基(例如，甲基、乙基或叔丁基)或苄基，和T、R4、R5a、R5b、A、Q、Z、n、r和Het1如前文所定义，例如在本领域技术人员已知的条件下，例如在室温下在水性溶剂系统(例如，NaOH的水性溶液例如2M-6M溶液与醇例如甲醇和极性非质子溶剂例如THF的混合物)的存在下通过用碱金属氢氧化物碱水解进行水解或氢解；
(b)将式II的化合物，
与式III的化合物，
其中Z1和Z2之一是式IVa或IVb的结构片段，
和Z1和Z2的另一个是式V的结构片段，
其中W、V、R1至R4、R5a、R5b、A、Q、Z、G和n如前文所定义，例如在本领域技术人员已知的条件下，例如在从环境(例如，15-30℃)至约110℃的温度下在合适的有机溶剂(例如，极性非质子溶剂，例如DMF、THF、1,4-二噁烷或其混合物)的存在下反应；
(c)将式IIa的化合物，
其中Z1如上文所定义，与合适的叠氮化物形成剂(即离去基团和活化的叠氮化物离子的合适来源，例如叠氮磷酸二苯酯；参见例如，Tetrahedron 1974,30,2151–2157)在本领域技术人员已知的条件下，例如在亚环境温度至环境温度(例如自约-5至5℃的起始温度至反应后的环境温度)下在胺碱(例如三乙基胺或空间位阻碱例如N,N-二异丙基乙基胺)和合适的有机溶剂(例如极性非质子溶剂，例如DMF、THF、1,4-二噁烷或其混合物)的存在下反应，该反应之后无需分离，接着中间体酰叠氮化物(具有式Z1-C(O)-N3)的热重排(例如在加热下)，例如在环境温度(例如15-30℃)下，以原位提供式II的化合物，该化合物然后与上文定义的式III的化合物反应，提供式I化合物；
(d)将式IIb的化合物，
其中LG1表示合适的离去基团(例如咪唑基、氯或芳基氧基例如苯氧基)和Z1如上文所定义，与如上文定义的式III的化合物，例如在本领域技术人员已知的条件下，例如在环境温度(例如自环境温度至80℃)下，任选地在胺碱(例如三乙基胺或空间位阻碱例如N,N-二异丙基乙基胺)和合适的有机溶剂(例如非质子溶剂，例如二氯甲烷、乙腈、四氢呋喃或酯，例如乙酸异丙酯)的存在下反应；
(e)将式VI的化合物，
其中LG2表示合适的离去基团(例如，卤素基团例如氯或溴)和T和A如前文所定义，与式VII的化合物，
其中R4、R5a、R5b、Q、Z、G和n如前文所定义，例如在本领域技术人员已知的条件下(例如，描述于J.Am.Chem.Soc.2011,133,15686–15696)反应，例如
对于其中A表示N的式I的化合物，在升高的温度下(例如，50-110℃)在合适的有机溶剂(例如，极性非质子溶剂例如DMF、THF、1,4-二噁烷或其混合物)和任选地，酸性催化剂(例如，磺酸，例如对甲苯磺酸)的存在下，或者
对于其中A表示CH的式I的化合物，在升高的温度下(例如，60-100℃)在合适的有机溶剂(例如，极性溶剂例如DMF或叔丁醇)、碱(例如，无机碱例如碳酸钾)和合适的催化剂(例如，钯(II)催化剂例如BrettPhos G3前催化剂([(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-二苯基)-2-(2'-氨基-1,1'-二苯基)]甲磺酸钯(II))的存在下；
(f)对于其中Q表示S(O)1-2的式I的化合物，将其中Q表示S的相应的式I的化合物，例如在本领域技术人员已知的条件下(例如，在0-25℃下在合适的溶剂(例如二氯甲烷、甲醇或其混合物)和过酸例如间氯过苯甲酸的存在下)氧化；
(g)对于其中Q表示C(O)NH的式I的化合物，将式VIII的化合物，
其中LG3表示OH、ORx或合适的离去基团(例如卤素)和T、A、R4和Rx如前文所定义，与式IX的化合物，
其中R5a、R5b、Z、G和n如前文所定义，例如在本领域技术人员已知的条件下反应，例如
当LG3表示ORx时，在环境温度下在合适的Lewis酸性催化剂(例如，三烷基铝试剂，例如三甲基铝)和非质子有机溶剂(例如，THF)的存在下反应，
当LG3表示OH时，在叔胺碱(例如，4-二甲基氨基吡啶、三烷基胺例如三乙基胺或二异丙基乙基胺，或环状胺例如N-甲基吡咯烷或N-甲基吗啉)、酰胺(肽)偶联试剂(例如，T3P、HATU、CDI、BOP、PyBOP、HOAt、HOBt或碳二亚胺例如DCC或二异丙基碳二亚胺)和非质子有机溶剂(例如，含氯溶剂例如DCM，酯例如乙酸乙酯，二甲基胺的酰胺例如DMF，或任何这些溶剂的混合物)的存在下反应，或者
当LG3表示离去基团例如卤素时，在碱(例如，上述的叔胺碱)和非质子有机溶剂(例如，上述的含氯、酯或酰胺溶剂)的存在下反应；
(h)对于其中G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H的式I的化合物，将式Xa的醇，
其中T、R4、R5a、R5b、A、Q、Z、n、r和Het1如前文所定义，例如在本领域技术人员已知的条件下(参见例如，http://www.organic-chemistry.org/synthesis/C2O/carboxylicacids/oxidationsalcohols.s htm和Tojo,G.；Fernandez,M.I.Oxidation ofPrimary Alcohols to Carboxylic Acids:A Guide to Current Common Practice,Springer-Verlag,New York,2007)氧化，包括使用以下氧化剂的反应
H5IO6(例如，在1-2mol％的催化剂例如CrO3或氯铬酸吡啶鎓，和溶剂例如乙腈，或乙腈和水的混合物的存在下)，
过氧化物，例如t-BuOOH(例如，在催化剂例如氧化铋(III)的存在下)，或者
分子氧或空气(例如，在以下的存在下：(i)钯(0)催化剂(例如，Pd/C)、硼氢化物(例如，NaBH4)、无机碱(例如，K2CO3或KOH)和水性醇(例如，乙醇或甲醇)的混合物；(ii)银N-杂环碳烯催化剂(例如，双(咪唑-2-亚基)银催化剂，例如1,3-双[(6-溴吡啶-2-基)甲基]咪唑-2-亚基银催化剂)和氢氧化物碱例如KOH或氢氧化季铵(例如，苄基三甲基氢氧化铵)；(iii)有机催化剂，例如2-氯蒽醌和可见光辐射；或(iv)一种或多种催化剂(例如，VO(acac)2、2-乙基己酸铜(II)或其混合物)、强碱(例如，DABCO)和离子液体，例如基于三氟甲磺酸1-丁基-3-甲基咪唑鎓的液体)，
或者，伯醇氧化成羧酸可以逐步方式进行，即，通过中间体醛，使用在Tojo,G.；Fernandez,M.I.In Oxidation of Primary Alcohols to Carboxylic Acids:A Guide toCurrent Common Practice,Springer-Verlag,New York,2007,Chapter 7,pp105–110中概述的方法之一；或者
(i)对于其中G表示-C(O)N(H)OH、-C(O)N(H)OCH3、-C(O)N(H)-S(O)2CH3或-C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2的式I的化合物，将其中G表示–CO2H的相应的式I的化合物分别与羟基胺、甲氧基胺、甲烷磺酰胺或二甲基硫酰胺，在本领域技术人员已知的条件下偶联(例如，对于与甲烷磺酰胺偶联，在叔胺碱、酰胺(肽)偶联试剂和非质子有机溶剂的存在下，例如按上文(g)所述反应)；
(k)对于其中G表示具有以下结构的羟基取代的异噁唑的式I的化合物：
将式Xb的化合物，
其中T、A、R4、R5a、R5b、Q、Z、n和Rx如前文所定义，与羟基胺，例如在本领域技术人员已知的条件下反应(例如，在升高的温度下，例如在回流下，在质子有机溶剂例如乙醇的存在下和任选地在合适的碱例如碳酸氢钠的存在下反应)；
(l)对于其中G表示四唑-5-基的式I的化合物，将式Xc的化合物，
其中T、A、R4、R5a、R5b、Q、Z和n如前文所定义，与合适的叠氮化物源(例如，叠氮基三甲基甲硅烷)，例如在本领域技术人员已知的条件下反应(例如，在升高的温度下在非质子有机溶剂例如甲苯和任选地，催化剂例如二丁基氧化锡的存在下反应)；
(m)对于其中G表示5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基的式I的化合物，将上文定义的式Xc的化合物与羟基胺反应(例如，在本领域技术人员已知的条件下，例如在升高的温度下在质子溶剂(例如，EtOH或水，或二者的混合物)的存在下反应)，接着将得到的N-羟基脒(偕胺肟)化合物与合适的–C(O)-部分源(例如，氯甲酸酯，例如氯甲酸异丁酯或光气，例如在本领域技术人员已知的条件下，例如在亚-环境温度下在非质子有机溶剂(例如，DMF)和碱(例如，吡啶)的存在下)反应；
(n)将式I化合物的受保护衍生物在本领域技术人员已知的条件下脱保护，其中受保护的衍生物在式I化合物的O或N原子上带有保护基(并且为避免疑惑，一种式I化合物的受保护衍生物可以代表或不代表另一种式I化合物)。
式I化合物的受保护衍生物的实例包括以下情况的那些衍生物：
-O原子被苄基保护，其中苄基可通过氢化除去，例如在钯催化剂(例如Pd/C)的存在下；
-酸(例如羧酸，磺酸，膦酸或次膦酸)的O原子被烷基(例如甲基、乙基或叔丁基)保护，所述烷基可通过碱水解(例如对于甲基或乙基，通过使用碱金属氢氧化物例如氢氧化钠的水解反应)或酸水解(例如对于叔丁基，通过使用酸例如三氟乙酸的水解反应)除去；
-胺的N-原子被氨基甲酸酯基团例如氨基甲酸苄酯或叔丁基酯保护，所述基团可在与用于从O-原子除去苄基或叔丁基类似的条件下除去。
式I的化合物的受保护的衍生物包括式I(P)的化合物。
在上文(b)-(g)中所述的方法中，可能需要在以下化合物中保护C(O)2H基团：
式II、IIa或IIb的化合物，其中Z1是式V的结构片段；
式III的化合物，其中Z2是式V的结构片段；或
式VII或IX的化合物，
在所述化合物中G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H。
当在这些化合物中的C(O)2H基团受到保护时，保护基可以是例如，酯(例如，其中C(O)2H作为酯，例如C(O)ORx受到保护，其中Rx如前文所定义)，所述酯基团可根据本领域技术人员已知的程序除去(例如，在一定条件下，例如上文(a)中描述的那些条件)。
式II、IIa、IIb、VI和VIII的化合物可根据本领域技术人员已知的方法或通过类似于本领域技术人员已知的方法制备，例如在WO 2014/162126和WO 2015/092423中概述的程序。
其中Q表示O或S的式VII或Xc的化合物可通过以下方法制备：将式X的化合物
其中Q’表示O或S，FG表示真实或潜在的NH2基团(即，容易转化为NH2基团的基团，例如硝基或受保护的变体NH–PG，其中PG是典型的保护基，例如氨基甲酸酯类或羧酰胺；参见例如：Greene,T.W.；Wuts,P.G.M.Protective Groups in Organic Synthesis；Wiley,4threvised edition,2006；ISBN-10:0471697540)和R4如前文所定义，与式XI的化合物(对于制备式VII的化合物)或式XIa的化合物(对于制备式Xc的化合物)，
其中LG4表示合适的离去基团(例如甲磺酸酯或卤素)，G’表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2Ry或羧酸电子等排体(或其受保护的变体)，和Ry表示H或Rx，和R5a、R5b、Z、Rx和n如前文所定义，例如在本领域技术人员已知的条件下反应，接着：
(i)当FG表示NH–PG时，除去PG保护基，
当FG表示NO2时，将NO2还原为NH2，或者
当FG表示C(O)O-(C1-6烷基)时，皂化以提供相应的羧酸，然后与合适的叠氮化物形成剂反应和将得到的酰叠氮化物热重排；和/或
(ii)当Ry表示Rx时，除去Rx基团，例如通过水解(例如，按上文方法(a)所述进行)。
式IX的化合物或其受保护的衍生物可根据本领域技术人员已知的方法或通过类似于本领域技术人员已知的方法制备，例如在WO 2011/037610中概述的程序。
式Xb的化合物可通过以下方法制备：将其中G表示–CO2H的相应的式I化合物与2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(Meldrum酸)在本领域技术人员已知的(肽)偶联条件下反应(例如，在叔胺碱、酰胺(肽)偶联试剂和非质子有机溶剂的存在下，例如按上文(g)所述反应)，接着将得到的产物(Meldrum酸的酰化形式)热降解(导致失去1个当量的丙酮和1个当量的CO2)。
式XI的化合物可通过以下方法制备：将式XII的化合物
其中Ry1表示H或保护基(例如，苄基)和n如前文所定义，与式XIIIa的化合物，
其中LG5表示合适的离去基团(例如甲磺酸酯或卤素)和R5a、R5b和G’如前文所定义，或者对于其中R5a表示H和G’表示羧酸电子等排体(或其受保护的变体)或–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2Rx的式XI的化合物，与式XIIIb的化合物，
其中G”表示羧酸电子等排体(或其受保护的变体)或–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2Rx，R5b和Rx如前文所定义，在任一情况下在一定条件(例如本领域技术人员已知的那些条件)下反应，接着将Ry1O-基团转化为LG4基团，例如，当Ry1表示保护基时，通过除去所述保护基(例如，在本领域技术人员已知的条件下)，接着使用试剂(例如，对于其中LG4是甲磺酸酯的式XII的化合物，试剂例如甲磺酰氯)和本领域技术人员已知的条件进行。
本领域技术人员将理解，式II、IIx和IIb表示的化合物通常为反应中间体。这些中间体可原位形成并且无需分离与式III的化合物直接反应，以提供式I的化合物。此外，本领域技术人员将理解，对于具有化学敏感性官能团例如羟基或氨基官能团的任何基团Z1和Z2，在上文描述的过程期间使用合适的保护基团可能是需要的。
上述的化合物(例如，中间体例如式IX、Xia、XII、XIIIa和XIIIb的化合物)可市售获得，或可使用引用的程序获得，或可通过常规方法由本领域技术人员容易制备。参见例如，Regan,J.et al.；J.Med.Chem.2003,46,4676–4686,WO 2000/043384、WO 2007/053346、WO 2007/087448、WO 2007/089512、WO 2009/117080、WO 2013/050756、WO 2014/027209、WO2014/033446、WO 2014/033447、WO 2014/033449、WO 2014/076484、WO 2014/140582、WO2014/162121、WO 2014/162126、WO 2015/092423、WO 2016/051187、WO 2016/051188、Lassalas et al.,J.Med.Chem.(2016),59,3183-3203,Ballatore et al.,Chem.Med.Chem.(2013),8(3),385–395和Boyd et al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.(2015),25,1990-1994。
式Ia、Ix、Iy、Ib和Ic的化合物可通过类似于上文描述的那些方法制备，例如其中上述中间体在必要时被具有合适修改的取代基定义的化合物替换的方法。例如，对于合成式Ix或Iy的化合物，可使用以下中间体(其中R1至R4、R5a、R5b、Rx、A、Q、n、LG2和LG3如前文所定义)。
本文所述的新的中间体形成本发明的一个方面。在此方面，本发明的进一步的方面涉及：
(i)如前文定义的式I(P)、Ix(P)或Iy(P)的化合物，或其盐或受保护的衍生物；
(ii)如前文定义的式II、IIa或IIb的化合物，其中Z1表示式V、Vx或Vy的结构片段，或其盐或受保护的衍生物；
(iii)如前文定义的式III的化合物，其中Z2表示式V、Vx或Vy的结构片段，或其盐或受保护的衍生物；和
(iii)如前文定义的式VII、VIIx或VIIy的化合物，或其盐或受保护的衍生物。
在本发明的这些方面，可提及的式I(P)、Ix(P)、II、IIa、IIb、III、VII和VIIx的化合物的实施方案包括其中以下一项或多项(例如，全部)适用的那些：
(a)R4表示甲氧基，任选地被一个或多个(例如，两个或三个)卤素(例如，氟)取代基取代，或特别是R4表示甲氧基；
(b)R5a和R5b均表示H；
(c)Q表示C(O)NH、S、S(O)、S(O)2或特别是O；
(d)Z表示O；
(e)n表示1、2或3(例如，3或特别是2)；
(f)对于式I(P)、II、IIa、IIb和III的化合物，A表示N或特别是CH。
可提及的式I(P)或Ix(P)的化合物的其它实施方案包括其中以下一项或多项(例如，全部)适用的那些：
(a)R1表示甲氧基；
(b)R2表示-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-S(O)1–2CH3、–P(O)(CH3)2、–N(CH3)S(O)2CH3或–NHS(O)2CH3；
(c)R3表示三甲基甲硅烷基或叔丁基；
(d)A表示CH或N；
(e)R4表示甲氧基，任选地被一个或多个卤素取代基取代；
(f)R5a和R5b均表示H；
(g)Q表示C(O)NH、S、S(O)、S(O)2或O；
(h)Z表示O；
(i)n表示1、2或3。
在任何这样的实施方案中，以及关于式Iy(P)的化合物的实施方案，Rx可表示C1-6烷基或苄基。
可提及的式I(P)或Ix(P)的化合物的还其它实施方案包括其中以下一项或多项(例如，全部)适用的那些：
(a)R1表示甲氧基；
(b)R2表示–NHS(O)2CH3；
(c)R3表示叔丁基；
(d)A表示CH；
(e)R4表示甲氧基；
(f)R5a和R5b均表示H；
(g)Q表示O；
(h)Z表示O；
(i)n表示2。
在任何这样的实施方案中，以及关于式Iy(P)的化合物的实施方案，Rx可表示乙基。
式II、IIa、IIb和III的化合物的具体实施方案包括其中以下的那些：
A表示CH；
R4表示甲氧基；
R5a和R5b均表示H；
Q表示O；
Z表示O；和
n表示2。
式III、VII、VIIx和VIIy的化合物的受保护的衍生物包括其中必要的NH2基团受到保护的那些。在此方面，这样的受保护的衍生物包括所述化合物的酰胺或特别是氨基甲酸酯。例如，所述受保护的衍生物包括其中NH2基团被FG(如上文定义，除了其不表示NH2(例如，FG表示硝基))替换，或特别地，NH2基团的H-原子被以下替换的化合物：
R’-C(O)-，其中R’是被一个或多个氟基团取代的C1-8烷基，或R’是H、C1-8烷基、苯基或苄基，后两个基团任选地被一个或多个选自卤素、羟基、甲基和甲氧基的基团取代；或
R”-O-C(O)-，其中R”是叔丁基、苯基、苄基或芴基，后三个基团任选地被一个或多个选自卤素、羟基、甲基和甲氧基的基团取代。
对于其中G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H的式II、IIa、IIb、III、VII的化合物，和对于式VIIx和VIIy的化合物，所述化合物的受保护的衍生物另外(或可选地)包括其中羧基部分受到保护的那些。在此方面，这样的受保护的衍生物还包括所述化合物的酯(例如，其中C(O)2H作为酯例如C(O)ORx受到保护，其中Rx如前文定义的)。
可提及的式I(P)或Ix(P)的化合物的具体实施方案包括：
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺基)乙氧基)乙氧基)乙酸甲酯；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯；和
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯，
或其盐。
本文描述的本发明的各方面(例如上述化合物、组合、方法和用途)可在治疗本文所述病况中具有优势，与现有技术中已知用于治疗这些病况的类似的化合物、组合、方法(治疗)或用途或其它方面相比，它们可更适合于医师和/或患者，更有效，具有较少毒性，具有更好的选择性，具有更广范围的活性，更有效力，产生较少的副作用，具有更好的药代动力学和/或药效学特征，具有更合适的固态形态学，具有更好的长期稳定性或可具有其它有用的药理学性质。
另外地(或备选地)，本发明的化合物可：
-显示长的作用持续时间和/或作用持久性(例如，与其它之前公开的p38 MAP激酶抑制剂例如BIRB796相比)；
-显示Syk的有效抑制(例如，它们针对Syk的IC50可为500nM或更低，例如350nM或更低)；
-不强烈抑制GSK 3α(例如，它们针对GSK 3α的IC50可为1,000nM或更高；例如1,500、2,000、3,000、4,000、5,000、6,000、7,000、8,000、9,000或10,000nM或更高)；
-靶向激酶组(kinome)的较小部分，即具有改进的选择性，如通过降低的KinomeScan选择性评分所示；
-在给药之间保持相对高的局部药物浓度(例如，相对于其它之前公开的p38MAP激酶抑制剂例如BIRB796，高的局部浓度)；
-显示特别适合于局部(topical/local)给药的性质(例如在局部给药后，产生高的靶组织浓度但低的血浆浓度的式(I)的化合物，和/或从血浆快速清除式(I)的化合物，例如因为高的肾或肝提取)；
-在细胞中显示很少或没有β-联蛋白诱导和/或有丝分裂抑制；
-显示降低的细胞毒性；
-在人淋巴细胞体外微核试验中不产生含有微核的双核细胞的增加；
-对细胞色素P450超家族的成员显示很少或没有时间依赖性抑制；
-与之前公开的p38 MAP激酶抑制剂例如BIRB796相比，在水的存在下显示改进的化学稳定性(例如，在含水混合物中在升高的温度下对水解的稳定性)；
-在给予患者后，产生伴随很少或没有安全性(例如毒性)顾虑的代谢产物；
-在局部给予后在临床前物种和人两者中显示降低的眼睛刺激或毒性；
-显示良好的水溶性和/或细胞渗透性(例如显示良好的水溶性和强有效抑制细胞中某些细胞因子例如IL-8和/或IFNγ的释放)，例如相对于参考化合物A，(3-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)-脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-丙酸和/或参考化合物B，3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)苯甲酰胺；
-导致在肠液或结肠液中更快的溶解速率，例如相对于参考化合物A和/或参考化合物B；
-在pH范围7–8的水溶液中用较低量的增溶赋形剂较容易地配制；
-具有高度的结晶性；和/或
-在固态时显示很少或没有吸湿性。
附图简述
图1显示通过下文实施例31的方法1(上迹线，具有下表A所述的峰)或方法2(下迹线，具有下表B所述的峰)产生的2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸，钠盐的两种样品的比较性XRPD图谱。
表A：对于实施例31方法1的产物的XRPD图谱的峰列表
表B：对于实施例31方法2的产物的XRPD图谱的峰列表
图2显示通过下文实施例31的方法1(上线)或方法2(下线)产生的2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸，钠盐的两种样品的DSC分析获得的热流迹线。
实验方法
通用程序
所有原料和溶剂自市售来源获得，或根据引用的文献制备。除非另外说明，否则所有反应经搅拌。有机溶液经无水硫酸镁常规干燥。氢化在Thales H-cube流动反应器上在所述条件下或在氢气球下进行。微波反应在CEM Discover和Smithcreator微波反应器中进行，使用可变功率微波辐射加热至恒定温度。
正相柱色谱在自动化快速色谱系统例如CombiFlash Companion或CombiFlash RF系统上使用预填装的二氧化硅(230-400目，40-63μm)柱常规进行。SCX购自Supelco，在使用前用1M盐酸处理。除非另外说明，否则待纯化的反应混合物首先用MeOH稀释，和用几滴AcOH调成酸性。将该溶液直接负载到SCX上，用MeOH洗涤。然后通过用含1％NH3的MeOH洗涤，洗脱所需材料。
分析方法
分析型HPLC使用Waters Xselect CSH C18,2.5μm,4.6x30mm柱进行(用0.1％甲酸在MeCN中(0.1％水性甲酸)的梯度洗脱)，或使用Waters Xbridge BEH C18,2.5μm,4.6x30mm柱进行(用MeCN在10mM水性碳酸氢铵的梯度洗脱)。使用二极管阵列或Agilent1100系统上的可变波长检测器测量洗脱峰的UV谱。
分析型LCMS使用Waters Xselect CSH C18,2.5μm,4.6x30mm柱进行(用0.1％甲酸在MeCN中(0.1％水性甲酸)的梯度洗脱)，或使用Waters Xbridge BEH C18,2.5μm,4.6x30mm柱进行(用MeCN在水性10mM碳酸氢铵的梯度洗脱)。洗脱峰的UV和质谱使用Agilent 1200或Agilent Infinity 1260LCMS上的可变波长检测器与具有正离子和负离子电喷射的6120单个四极质谱仪测量。
制备型HPLC使用Waters Xselect CSH C18,5μm,19x50mm柱使用0.1％甲酸在MeCN中(0.1％水性甲酸)的梯度或MeCN在水性10mM碳酸氢铵的梯度进行，或使用WatersXbridge BEH C18,5μm,19x50mm柱使用MeCN在水性10mM碳酸氢铵的梯度进行。在Gilson215制备型HPLC或Varian PrepStar制备型HPLC上通过可变波长检测器测量的单波长UV而检测后，或通过具有正离子和负离子电喷射的ZQ单个四极质谱仪和在WatersFractionLynx LCMS上的双波长检测器测量的质量和单波长UV而检测后，收集流分。
1H NMR波谱：1H NMR波谱在Bruker Avance III波谱仪上以400MHz获得。氯仿-d,二甲基亚砜-d6或四甲基甲硅烷的内部标准的中央峰用作参考。
本发明的化合物的制备
实施例1
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺基)乙氧基)乙氧基)乙酸,盐酸盐
(i)3-氨基-5-甲氧基苯甲酸甲酯
在0℃向3-氨基-5-甲氧基苯甲酸(47g,281mmol)/MeOH(1L)的搅拌悬浮液中逐滴加入亚硫酰氯(123mL,1687mmol)。将反应升温至室温和搅拌72h。得到的固体通过过滤分离，用二异丙基醚洗涤，提供作为HCl盐的产物。将滤液蒸发，残余物用MeOH/乙醚研磨，过滤和用乙醚洗涤。将合并的固体悬浮于DCM(500mL)和用饱和水性NaHCO3溶液(300mL)碱化，同时剧烈搅拌。分离有机相，用盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发，得到固体。固体用乙醚/异己烷研磨，提供作为固体的子标题化合物(46g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:6.83(dd,1H),6.63(dd,1H),6.37(t,1H),5.42(s,2H),3.79(s,3H),3.70(s,3H).
LCMS m/z 182(M+H)+(ES+)
(ii)3-((4-((4-((叔丁氧基羰基)氨基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧 基苯甲酸甲酯
将来自上述步骤(i)的产物(10.8g,59.6mmol)、(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(参见例如，WO 2014/162126；20g,53.9mmol)、细磨的碳酸钾(15.2g,110mmol)和BrettPhos G3前催化剂(800mg,0.883mmol)在tBuOH(400mL)中的混合物用N2充分脱气。将反应在氮气下在90℃(模块温度(block temperature))加热2h。反应混合物用DCM(500mL)稀释，通过硅藻土过滤和真空浓缩，提供棕色泡沫。泡沫用Et2O(500mL)研磨。得到的固体经过滤，用另外的Et2O(100mL)洗涤和真空干燥，提供作为灰白色/浅灰色固体的子标题化合物(25.6g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.37(s,1H),9.19(s,1H),8.13-8.14(m,2H),7.84(d,1H),7.77(bs,1H),7.69(t,1H),7.55-7.65(m,3H),7.36(d,1H),6.96(bs,1H),6.62(dd,1H),6.09(d,1H),3.82(s,3H),3.75(s,3H),1.53(s,9H).
LCMS m/z 516(M+H)+(ES+)
(iii)3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯
将HCl(5N，在iPrOH中)(79mL,395mmol)加入至来自上述步骤(ii)的产物(20g,38.8mmol)在DCM(250mL)中的溶液和将反应放置搅拌过夜。加入Et2O(300mL)和通过过滤分离得到的沉淀，用另外的Et2O洗涤。固体在DCM(400mL)和饱和水性NaHCO3溶液(600mL)之间分配。有机层通过疏水玻璃料干燥和真空浓缩，提供作为米色泡沫的子标题化合物(15.5g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.09(s,1H),8.15-8.18(m,1H),8.08(d,1H),7.75(t,1H),7.69(t,1H),7.63-7.65(m,1H),7.43-7.47(m,2H),7.11(d,1H),6.95(t,1H),6.72(d,1H),6.56(dd,1H),6.04(d,1H),5.83(bs,2H),3.82(s,3H),3.75(s,3H).
LCMS m/z 416(M+H)+(ES+)
(iv)3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘- 1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯
在60℃(模块温度)将三乙基胺(28μL,0.201mmol)加入至(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)氨基甲酸苯酯(参见例如，WO 2014/162126；480mg,1.223mmol)和来自上述步骤(iii)的产物(412mg,0.992mmol)在iPrOAc(15mL)中的溶液和将混合物搅拌24h。将溶液冷却至室温和真空浓缩，提供红色油。粗产物通过Companion色谱纯化(40g柱,1-5％MeOH/DCM)，提供作为淡粉红色泡沫的子标题化合物(580mg)。
LCMS m/z 714(M+H)+(ES+)
(v)3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1- 基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酸,盐酸盐
向来自上述步骤(iv)的产物(580mg,0.813mmol)在THF(20mL)中的搅拌溶液加入NaOH(6M水性)(2mL,12.00mmol)。加入MeOH(5mL)和将反应搅拌过夜。真空浓缩反应物，提供黄色固体。将固体悬浮于1M HCl(20mL)和将得到的凝胶样固体过滤，用水洗涤。得到的固体在玻璃料上干燥1h，然后在40℃在真空下进一步干燥，提供作为灰白色固体的子标题化合物(526mg)。
LCMS m/z 699.77(M+H)+(ES+)
(vi)2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙酸甲酯,三氟乙酸盐
向2,2-二甲基-4-氧代-3,8,11-三氧杂-5-氮杂十三-13-酸甲酯(参见例如，WO2011/037610；195mg,0.703mmol)在DCM(2mL)中的搅拌溶液加入TFA(500μL,6.49mmol)和将混合物在室温下搅拌1h。将反应物真空浓缩，然后从甲苯再次浓缩，提供作为无色油的子标题化合物(230mg)。
LCMS m/z 178(M+H)+(ES+)
(vii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯 基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺基)乙氧基)乙氧基)乙酸甲 酯
在室温下将HATU(120mg,0.316mmol)加入至来自上述步骤(v)的产物(150mg,0.204mmol)、来自上述步骤(vi)的产物(100mg,0.343mmol)和Hünig碱(250μL,1.431mmol)在NMP(2mL)中的搅拌溶液。将混合物搅拌2h。将反应物在水(15mL)和EtOAc(10mL)之间分配。水相用EtOAc(5mL)萃取，和合并的有机物用水和盐水洗涤，然后通过疏水玻璃料干燥和真空浓缩。粗产物通过Companion色谱纯化(12g柱,1-5％MeOH/DCM)，提供作为无色树胶的子标题化合物(173mg)。
LCMS m/z 859(M+H)+(ES+)
(viii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯 基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺基)乙氧基)乙氧基)乙酸, 盐酸盐
向来自上述步骤(vii)的产物(173mg,0.201mmol)在THF(3mL)中的搅拌溶液加入NaOH(6M水性)(0.30mL,1.800mmol)。加入MeOH(1mL)和得到的溶液在室温下搅拌2h。将反应物真空浓缩，提供黄色固体。将固体悬浮于1M HCl(10mL)和将混合物超声处理。将得到的悬浮液过滤和回收的固体用水洗涤，然后在40℃真空干燥过夜，提供作为无色固体的标题化合物(140mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.61(bs,1H),9.53(s,1H),9.15(s,1H),8.99(s,1H),8.46(t,1H),8.35(d,1H),8.18(d,1H),8.15(d,1H),8.07(d,1H),7.87(d,1H),7.71-7.74(m,1H),7.62-7.66(m,1H),7.43-7.45(m,2H),7.35(s,1H),7.08(s,1H),7.03(d,1H),6.73(bs,1H),6.22(s,1H),4.01(s,2H),3.81(s,3H),3.77(s,3H),3.51-3.60(m,6H),3.40(q,2H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
LCMS m/z 845(M+H)+(ES+)
实施例2
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
经1h将重氮基乙酸乙酯(1.9mL,18.32mmol)在DCM(20mL)中的溶液逐滴加入二乙二醇(5.0mL,52.7mmol)和乙酸铑(II)二聚体(160mg,0.362mmol)在DCM(300mL)中的溶液。将反应物在室温下搅拌过夜。混合物在减压下蒸发和残余物通过硅胶色谱纯化(220g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供作为深蓝色油的子标题化合物(2.38g)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.23(q,2H),4.19(s,2H),3.60-4.05(m,8H),1.28(t,3H).
(ii)2-(2-(2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在0-5℃将甲烷磺酰氯(0.6mL,7.70mmol)逐滴加入来自上述步骤(i)的产物(1.20g,6.24mmol)和Et3N(1.7mL,12.20mmol)在DCM(20mL)中的溶液，升温至室温和搅拌2h。将混合物在DCM(50mL)和水(30mL)之间分配，有机层用饱和水性NaHCO3(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。粗产物通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-70％EtOAc/异己烷)，提供作为油的子标题化合物(1.494g)。
1H NMR(400MHz；CDCl3)δ4.42-4.39(m,2H),4.24(q,2H),4.15(s,2H),3.82-3.79(m,2H),3.77-3.72(m,4H),3.10(s,3H),1.31(t,3H).
(iii)2-(2-(2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将3-甲氧基-5-硝基苯酚(1.973g,11.67mmol)、来自上述步骤(ii)的产物(2.92g,10.80mmol)和K2CO3(4.48g,32.4mmol)在DMF(60mL)中的混合物在60℃加热20h。将反应物冷却至室温，然后在乙醚(200mL)和水(200mL)之间分配。有机层用饱和水性NaHCO3溶液(100mL)和盐水(100mL)洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。粗产物通过硅胶色谱纯化(80g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供作为黄色油的子标题化合物(3.35g)。
LCMS m/z 344(M+H)+(ES+)
(iv)2-(2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
向来自上述步骤(iii)的产物(3.35g,9.76mmol)在EtOH(20mL)和EtOAc(5mL)中的溶液加入Pd/C(5wt％)(0.5g,0.235mmol)。得到的悬浮液在5巴(0.5MPa)的H2气氛下搅拌8h。反应物用N2净化，然后通过硅藻土过滤。将滤液真空浓缩，提供作为浅黄色油的子标题化合物(3.0g)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:5.75(d,2H),5.68(t,1H),5.06(s,2H),4.13(s,2H),4.12(q,2H),3.93-3.96(m,2H),3.68-3.70(m,2H),3.58-3.64(m,4H),3.62(s,3H),1.20(s,3H).
LCMS m/z 314(M+H)+(ES+)
(v)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见例如，WO 2014/162126；300mg,0.526mmol)、来自上述步骤(iv)的产物(247mg,0.789mmol)和pTSA水合物(30mg,0.158mmol)在THF(5mL)中的混合物在65℃加热40h。将混合物冷却，在EtOAc(100mL)和饱和水性NaHCO3(50mL)之间分配，有机层用1M HCl(50mL)、水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。粗产物通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供作为泡沫的子标题化合物(378mg)。
LCMS m/z 847(M+H)+(ES+)
(vi)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将来自上述步骤(v)的产物(376mg,0.444mmol)和2M水性NaOH(700μL,1.400mmol)在THF(5mL)和MeOH(2mL)中的混合物在室温下搅拌20h。真空除去溶剂，将残余物溶于水(5mL)和用AcOH酸化。将混合物蒸发和残余物通过Companion色谱纯化(RP Flash C18)(40g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供作为白色固体的标题化合物(72mg)。
1H NMR(400MHz；DMSO-d6)δ12.57(s,1H),9.43(s,1H),9.37(s,1H),9.15(s,1H),8.94(s,1H),8.42(d,1H),8.28(d,1H),8.19(d,1H),8.11(d,1H),7.85(d,1H),7.70-7.65(m,1H),7.61-7.56(m,1H),7.42(d,1H),7.02(d,1H),6.80(brs,2H),6.54(d,1H),6.04(s,1H),4.00(s,2H),3.89-3.83(m,2H),3.81(s,3H),3.69-3.64(m,2H),3.60-3.54(m,4H),3.51(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
LCMS m/z 819(M+H)+(ES+)
实施例3
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
方法1
(i)2-(2-(2-(3-((4-((4-((叔丁氧基羰基)氨基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)-氨 基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(参见例如，WO 2014/162126；497mg,1.340mmol)、2-(2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(见上述实施例2(iv)；420mg,1.340mmol)和K2CO3(556mg,4.02mmol)在DMF(6mL)中的混合物在真空下脱气，用N2回充三次。加入BrettPhos G3前催化剂(37mg,0.041mmol)和将混合物加热至80℃，持续1h。将混合物冷却至室温和在EtOAc(70mL)和水(50mL)之间分配。有机层用水(50mL)和盐水(30mL)洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供作为无色泡沫的子标题化合物(870mg)。
LCMS m/z 648(M+H)+(ES+)
(ii)2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-苯氧 基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将来自上述步骤(i)的产物(690mg,1.065mmol)和TFA(1mL,12.98mmol)在DCM(5mL)中的混合物在室温下搅拌20h，然后蒸发。残余物在EtOAc(60mL)和饱和水性NaHCO3溶液(40mL)之间分配，分离有机层，用水洗涤(40mL)，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发，提供作为棕色胶的子标题化合物(572mg)。
LCMS m/z 548(M+H)+(ES+)
(iii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)氨基甲酸苯酯(参见例如，WO2014/162126；490mg,1.249mmol)、来自上述步骤(ii)的产物(570mg,1.041mmol)和Et3N(50μL,0.359mmol)在THF(10mL)中的混合物在回流下加热24h。除去溶剂和残余物通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供作为泡沫的子标题化合物(736mg)。
LCMS m/z 844(M+H)+(ES+)
(iv)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将来自上述步骤(iii)的产物(803mg,0.892mmol)和水性2M NaOH(1.3mL,2.60mmol)在THF(8mL)和MeOH(3mL)中的混合物在室温下搅拌20h。将反应物用AcOH(3mL)酸化，然后真空浓缩，提供灰色固体。残余物通过Companion色谱纯化(RP Flash C18)(40g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供作为灰白色固体的标题化合物(653mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.55(s,1H),9.02(s,1H),8.90(s,1H),8.32(d,1H),8.19(d,1H),8.12(s,1H),8.10(s,1H),7.86(d,1H),7.67-7.71(m,1H),7.58-7.62(m,1H),7.38(d,1H),7.03(d,1H),6.86(s,1H),6.78(s,1H),6.59(dd,1H),6.09(d,1H),6.03(t,1H),3.93-3.96(m,2H),3.93(s,2H),3.81(s,3H),3.69-3.71(m,2H),3.65(s,3H),3.55-3.61(m,4H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
LCMS m/z 818(M+H)+(ES+)
方法2
(I)2-[2-(2-苄基氧基乙氧基)乙氧基]乙酸乙酯
在氮气下向5L烧瓶中加入60％NaH(73.5g,1.8375mol)和THF(2.3L)。将得到的浆液冷却至0-5℃。然后经1h逐滴加入溶于THF(700mL)的2-(2-苄基氧基乙氧基)乙醇(300g,1.5287mol)。在整个加入期间和随反应进行观察到放热和气体放出。将反应物搅拌40分钟。然后经1h逐滴加入溴乙酸乙酯(207mL,1.8375mol)，维持温度<5℃。随反应进行，混合物变成黄色。将反应物搅拌2h和允许升温至室温。LC显示68％产物和1.6％原材料。向反应物加入TBME(1L)和水(1L)。分离有机物和水相用TBME(2L和1L)再次萃取。将合并的有机物干燥，过滤和真空浓缩。残余物(462g)在二氧化硅(3kg)上纯化，用10％EtOAc:庚烷(20L)、20％EtOAc:庚烷(10L)、25％EtOAc:庚烷(20L)和30％EtOAc:庚烷(10L)洗脱。将含产物的流分真空浓缩，得到322.6g(74％收率)的子标题化合物，对其的1H NMR分析表明>95％的纯度。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.25–7.37(m,5H),4.58(s,2H),4.22(q,2H),4.16(s,2H),3.63–3.76(m,8H),1.28(t,3H).
(II)2-[2-(2-羟基乙氧基)乙氧基]乙酸乙酯
在氮气下向5L烧瓶加入10％Pd/C(32g)，之后加入溶于EtOH(3.2L)的上述步骤(I)的产物(320g,1.133mol)。反应物用氢气净化4h，然后在氢气氛下搅拌过夜。1H NMR表明剩余2.5％原材料，因此反应物用氢气净化2h。1H NMR然后表明完全反应。反应混合物通过硅藻土过滤和用乙醇(1L)洗涤。将滤液真空浓缩，得到子标题化合物。残余物然后从甲苯(300mL)和DCM(2x 300mL)真空浓缩，以除去任何痕量的乙醇，该乙醇可在下一阶段反应。获得总共217.8g的子标题化合物(100％收率)，包括溶剂。
或者，子标题化合物通过以下方法制备：
在氮气下向20L容器加入10％Pd/C(100g)，之后加入溶于DCM(10.3L)的上述步骤(I)的产物(1003g)。将反应物在氢气氛下搅拌过夜，之后NMR分析表明完全反应。混合物通过硅藻土过滤和用DCM(3x 1L)洗涤。由此获得的该产物无需进一步纯化直接用于下一步骤(甲磺酰化反应)(经步骤(II)和(III)得到86％收率)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.23(q,2H),4.13(s,2H),3.68–3.77(m,6H),3.59–3.63(m,2H),2.51–2.57(br m,1H),1.28(t,3H).
(III)2-[2-(2-甲基磺酰基氧基乙氧基)乙氧基]乙酸乙酯
在氮气下向10L烧瓶加入上述步骤(II)的产物(219g,1.139mol)、DCM(4.4L)和三乙基胺(326mL,2.349mol)。在加入三乙基胺时溶液变成黄色。将溶液冷却至0-5℃和逐滴加入甲烷磺酰氯(108.5mL,1.4mol)。允许反应升温至8℃，此时反应混合物的TLC表明完全反应。将反应物真空浓缩。残余物在乙酸乙酯(4.4L)和水(2L)之间分配。分离有机物和用饱和水性NaHCO3(2L)和盐水(2L)洗涤。水相用乙酸乙酯(1L)反萃取。合并的有机物经干燥，过滤和真空浓缩，得到子标题化合物，为红色油(297g,97％)。
(IV)2-(2-(2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在氮气下向5L凸缘烧瓶加入3-甲氧基-5-硝基苯酚(126.8g,0.749mol)、碳酸钾(288g,2.086mol)、DMF(2536mL)和上述步骤(III)的产物(198.4g活性物,0.7348mol)。将反应物加热至60℃过夜。LC表明95.8％产物和1.45％原材料(3-甲氧基-5-硝基苯酚)。将反应物冷却至室温和将反应混合物转移至20L烧瓶。向混合物加入TBME(10L)和水(6L)。分离有机物和用饱和水性NaHCO3(6L)和饱和盐水(6L)洗涤，之后干燥，过滤和真空浓缩，得到总共243g的子标题化合物，包括溶剂(95％收率)。LC表明97.7％的纯度(254nm)。
(V)2-(2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
向5L氢化容器加入5％Pd/C(48.6g)、上述步骤(IV)的产物(243g,0.708mol)和乙醇(2.5L)。容器用氮气净化三次，然后在5巴(0.5MPa)的氢气氛下搅拌(用氢气净化三次)6h。LC表明完全反应。混合物经过滤和用乙醇(1200mL)洗涤。然后真空浓缩有机物。残余物然后从庚烷(2x 500mL)浓缩。这得到212g(96％收率)的子标题化合物，对其的LC表明98.1％的纯度(254nm)。1H NMR表明>95％的纯度。
(VI)2-(2-(2-(3-((4-((4-((叔丁氧基羰基)氨基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)-氨 基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在氮气下向5L凸缘烧瓶加入上述步骤(V)的产物(190g,0.6065mol)、(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(参见例如，WO 2014/162126；246.9g,0.6658mol)、DMF(3.4L)和碳酸钾(272g,1.97mol)。将反应物真空脱气三次和每次释放至氮气。将得到的浆液加热至40℃，然后加入Brettphos G3Pd(13.66g,0.015mol)。然后将混合物加热至70℃和搅拌30分钟。LC表明剩余<1％的上述步骤(V)的产物。这通过NMR确认。将反应物冷却至室温和过滤，然后固体用DMF(700mL)洗涤。然后将滤液真空浓缩。残余物溶于乙酸乙酯(6L)和用饱和盐水(2x4L)洗涤。有机物然后经干燥，过滤和真空浓缩。这得到393g(100％收率，包括溶剂)的子标题化合物，对其的NMR表明～95％的纯度和LC表明94.5％的纯度(254nm)。
或者，子标题化合物通过以下方法制备：
在氮气下向50L容器加入上述步骤(V)的产物(967g)和THF(17425mL)。之后加入(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(参见例如，WO 2014/162126；1254g)和碳酸钾(1387g)。将容器真空脱气(x3)和释放至氮气(x3)。然后向反应物加入Pd-173(39.2g)。将反应物加热至回流过夜，之后LC分析表明痕量原材料。将反应物冷却至60℃和加入另外的Pd-173(6.13g)。将反应物加热至回流1h，之后LC分析表明完全反应。反应混合物经过滤和残余物用THF(9.2L)洗涤。将滤液真空浓缩和残余物从乙酸乙酯和庚烷浓缩，以除去残余THF。然后将该材料通过色谱(12kg二氧化硅)纯化，用50％乙酸乙酯:庚烷(60L)、70％乙酸乙酯:庚烷(60L)和85％乙酸乙酯:庚烷(20L)洗脱。这得到1896g(95％收率，包括溶剂(EtOAc))的子标题化合物，对其的NMR表明>95％的纯度，不包括溶剂，和LC表明97.4％的纯度。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.06(d,1H),7.96(d,2H),7.80–7.88(br d,1H),7.48–7.60(m,2H),7.20(d,1H),6.98(br s,1H),6.61(s,1H),6.38–6.41(m,4H),6.13(m,1H),4.10–4.24(m,4H),3.90–3.94(m,2H),3.77–3.83(m,6H),3.68(s,3H),1.57(s,9H),1.24–1.30(m,3H).
(VII)2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-苯 氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在氮气下向5L凸缘烧瓶加入上述步骤(VI)的产物(393g,0.6067mol)、DCM(1.742L)和TFA(350mL,4.57mol)。将反应物加热至30℃过夜，之后LC分析表明剩余18％原材料。TFA(100mL)加入至反应物，其然后加热至回流2h。LC表明剩余1.2％原材料。将反应物冷却至室温和真空浓缩。残余物与甲苯(1L)共沸。残余物用乙酸乙酯(3L)稀释和用饱和水性NaHCO3(4L)小心处理，此时观察到放气。分离有机物和用更多的饱和水性NaHCO3(2L)洗涤。按需要，合并的水相是碱性的。水相用乙酸乙酯(1L)萃取。合并的有机物经干燥，过滤和真空浓缩。残余物经过色谱(4.5kg二氧化硅)，用DCM至5％MeOH:DCM洗脱。将含产物的流分合并和真空浓缩。获得总共292g的子标题化合物(包括DCM)(80％收率)，对其的1H NMR分析表明>95％纯度和LC表明98.5％的纯度(254nm)。
(VIII)2-(2-(2-(3-甲氧基-5-((4-((4-((苯氧基羰基)氨基)萘-1-基)氧基)吡 啶-2-基)氨基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
向50L容器加入上述步骤(VII)的产物(1478g的该产物包含～10％THF)和THF(20.825L)。之后加入NaHCO3(339.7g)。将混合物冷却至-10℃和加入氯甲酸苯酯(338.5mL)。将反应物搅拌1h，之后LC表明97.5％产物和0.9％原材料。然后将反应物升温至室温，此时LC表明98％产物和0.32％原材料。反应混合物经过滤和用THF(2.5L)洗涤。将残余物浓缩至2.6kg，之后溶于乙酸乙酯:THF(2.9L:262mL)，然后通过真空转移加入含庚烷(26.715L)的50L容器。这导致产物沉淀。将混合物搅拌2h和过滤。然后将固体在真空下在40℃干燥过夜。获得总共1843g(102％收率，包括溶剂)的子标题化合物，对其的NMR表明>95％的纯度，不包括溶剂，和LC表明95.9％的纯度。
1H NMR(400MHz,(CD3)2SO)δ:10.00–10.40(br,2H),8.28(d,1H),8.01(d,1H),7.83(d,1H),7.77(d,1H),7.60–7.71(m,2H),7.39–7.50(m,3H),7.22–7.28(m,3H),6.78(dd,1H),6.56(s,1H),6.49(s,1H),6.24–6.29(m,2H),4.02–4.09(4H),3.96–3.99(m,2H),3.62–3.69(m,5H),3.50–3.58(m,4H),1.14(t,3H).
(IX)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)- 脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在氮气下向10L烧瓶加入溶于iPrOAc(3.15L)的上述步骤(VII)的产物(262.8g,0.4799mol)。将混合物加热至40℃和加入N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-((甲基磺酰基)氨基)苯基)氨基甲酸苯酯(参见例如，WO 2014/162126；197.1g,0.5022mol)。将混合物进一步加热至50℃，得到溶液，其随后用三乙基胺(13.14mL,0.094mol)处理，和将反应物加热至68℃过夜。将反应物冷却至室温和真空浓缩。一部分残余物(38g)通过色谱纯化，用25％EtOAc:DCM至EtOAc洗脱。将含产物的流分真空浓缩，和对于剩余物的LC分析(254nm)表明98.6％的纯度。将该材料与主体合并，和在二氧化硅(10kg)上纯化，用25％EtOAc:DCM(80L),DCM(20L),1％MeOH:DCM(20L),3％MeOH:DCM(20L)和5％MeOH:DCM(50L)洗脱。将含产物的流分合并，和真空浓缩。这得到375g的材料，LC纯度为95.4％和NMR纯度为～90％。该材料进一步通过色谱(10kg二氧化硅)纯化。柱用1％MeOH:DCM(60L),1.5％MeOH:DCM(20L),2％MeOH:DCM(20L),2.5％MeOH:DCM(20L),3％MeOH:DCM(40L)，然后5％MeOH:DCM(40L)洗脱。将最纯的流分合并，和真空浓缩，得到324g的子标题化合物，对其的LC分析(254nm)表明98.9％的纯度和NMR表明～95％的纯度。
或者，子标题化合物通过以下方法制备：
将上述步骤(VIII)的产物(1902g)和THF(19.02L)加入反应容器。然后向反应物加入N-(3-氨基-5-(叔丁基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见例如，Cirillo,P.F.et al.,WO2002/083628,24October 2002；815g)和三乙基胺(380.4mL)。将反应物加热至回流过夜，之后LC分析表明完全反应(86％产物和0.4％原材料)。将反应物冷却至室温和过滤，以除去三乙基胺盐酸盐。固体用THF(3.8L)洗涤。将滤液分成3个相等部分，和浓缩。然后将各部分从40％乙酸乙酯:庚烷(3L)浓缩，以除去大部分THF，该THF将影响柱色谱。三个部分各自通过色谱纯化(10kg二氧化硅/部分，用2L的DCM将粗材料上样到柱上)，用75％乙酸乙酯:庚烷(20L),80％乙酸乙酯:庚烷(120L)，然后85％乙酸乙酯:庚烷(40L)洗脱。这得到材料，LC纯度为98.0％和NMR分析纯度为>95％，不包括溶剂。以83％收率(687g)分离子标题化合物。
1H NMR(400MHz,(CD3)2SO)δ:9.38(s,1H),9.15(s,1H),8.92(s,1H),8.88(s,1H),8.29(d,1H),8.19(d,1H),8.09–8.13(m,2H),7.86(d,1H),7.70(t,1H),7.60(t,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.90(s,1H),6.79(s,1H),6.57(dd,1H),6.02–6.08(m,2H),4.09–4.13(m,4H),3.96–3.99(m,2H),3.80(s,3H),3.69–3.72(m,2H),3.58–3.65(m,7H),3.10(s,3H),1.27(s,9H),1.18(t,3H).
(X)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
在氮气下向10L烧瓶加入上述步骤(IX)的产物(317g,0.374mol)、THF(2.54L)和甲醇(950mL)。之后加入2M NaOH(633mL,1.266mol)，此时注意到少量放热。将反应物搅拌1h。LC分析表明完全反应。向反应物加入乙酸(633mL)，其再次导致注意到少量放热。然后将反应混合物真空浓缩，得到粘性油。加入水(3.2L)和将混合物搅拌20分钟。开始时，油性固体粘在烧瓶侧面，用刮刀将其从容器侧面刮下，固体变成可流动的絮状固体。将固体过滤和用水(500mL)和庚烷(1.5L)洗涤。固体然后在真空下在50℃干燥过夜，之后溶于10％甲醇:DCM和进行色谱(6kg二氧化硅)，用10％甲醇:DCM(60L),20％甲醇:DCM(60L)，然后甲醇洗脱。将最纯净的流分合并，和真空浓缩，得到粘性油。残余物从THF(2x 2L)浓缩，得到泡沫状固体。固体(297g)包含8.55％THF和2.29％AcOH。该材料在水(900mL)中浆化过夜两次，和过滤得到268g的标题化合物(262g，包括溶剂，85％收率)，LC分析纯度为98.2％和NMR纯度为>95％。该材料包含2.11％THF和0.26％AcOH。
实施例4
以下化合物通过类似于上述那些的方法制备。
(a)2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(b)2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)亚磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(c)2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(d)2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(e)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(f)6-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)哒嗪-3-甲酸
(g)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸
(h)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-环丙氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)环丙烷-1-甲酸
(j)4-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸
(k)1-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-甲酸
(l)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-乙基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
实施例5
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-1,3-二硝基苯
将4-(叔丁基)-2,6-二硝基苯酚(5g,20.81mmol)、碳酸铯(13.56g,41.6mmol)和碘甲烷-d3(1.6mL,25.7mmol)在DMF(50mL)中的混合物在室温下搅拌4天，然后在乙醚(300mL)和水(300mL)之间分配。分离有机层，用水洗涤(200mL)，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发，提供子标题化合物(4.3g)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04(s,2H),1.40(s,9H).
(ii)5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-3-硝基苯胺
将10％Pd/C(500mg,类型39,含水的50％w/w糊状物)加入至来自上述步骤(i)的产物(4.25g,16.52mmol)和环己烯(2.5mL,24.68mmol)在EtOH(70mL)中的溶液。将反应混合物在70℃加热1h，然后加入另外一部分环己烯(5mL)。加热1h后，加入第三部分环己烯(5mL)，加热2h，然后将反应混合物冷却和通过硅藻土过滤。将滤液在减压下蒸发和将残余物溶于EtOAc/乙醚(300mL,1/1)，用0.2M aqHCl(2x150mL)、盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发，提供子标题化合物(3.43g)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.27(d,1H),7.05(d,1H),1.31(s,9H).
m/z 228(M+H)+(ES+)
(iii)N-(5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-3-硝基苯基)甲烷磺酰胺
在0-5℃向来自上述步骤(ii)的产物(3.42g,15.05mmol)在DCM(25mL)中的搅拌溶液加入吡啶(7mL,87mmol)，然后MsCl(1.9mL,24.38mmol)。将混合物升温至室温和搅拌3天。将混合物倾至1M HCl(200mL)和用DCM(200mL)萃取。有机相用1M HCl(100mL)和盐水(100mL)洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(120g柱,0-40％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(3.9g)，为固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(s,1H),7.66(s,1H),7.06(s,1H),3.09(s,3H),1.36(s,9H).
(iv)N-(3-氨基-5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)苯基)甲烷磺酰胺
将来自上述步骤(iii)的产物(3.85g,12.61mmol)和10％Pd-C(500mg)在EtOH(40mL)中的混合物以5巴氢化4h。混合物通过硅藻土过滤，用EtOAc洗涤。将滤液在减压下蒸发，得到固体，其用乙醚/异己烷研磨。固体过滤和干燥，提供子标题化合物(2.92g)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(s,1H),6.58(s,2H),4.91(s,2H),3.00(s,3H),1.20(s,9H).
m/z 276(M+H)+(ES+)
(v)(5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-3-(甲基磺酰氨基)苯基)氨基甲酸苯酯
将氯甲酸苯酯(470μL,3.75mmol)加入至来自上述步骤(iv)的产物(1g,3.63mmol)和NaHCO3(0.610g,7.26mmol)在DCM(20mL)和THF(10mL)中的混合物。将混合物搅拌20h，然后加入THF(10mL)，接着氯甲酸苯酯(150μL)。将混合物搅拌5h，然后在DCM(100mL)和水(50mL)之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。残余物用乙醚/异己烷研磨，过滤和干燥，提供子标题化合物(1.415g,3.54mmol,98％收率)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(bs,1H),7.46-7.42(m,2H),7.35(bs,1H),7.32-7.27(m,2H),7.25-7.21(m,2H),6.78(s,1H),3.11(s,3H),1.32(s,9H).
m/z 396(M+H)+(ES+)
(vi)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-3-(甲基磺酰氨基) 苯基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(ii)；200mg,0.365mmol)和来自上述步骤(v)的产物(152mg,0.383mmol)溶于iPrOAc(3mL,25.6mmol)和加入NEt3(10.1μL,0.073mmol)。混合物在75℃搅拌16h和真空浓缩。粗LCMS表明子标题化合物是主要组分。
m/z 849.3(M+H)+(ES+)
粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供白色固体(213mg)，其直接用于以下步骤(ii)。
(vii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-3-(甲基磺酰氨基) 苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
来自上述步骤(vi)的产物(213mg,0.251mmol)在THF(10mL)和EtOH(4mL)中的搅拌溶液用NaOH(2M水性)溶液(0.452mL,0.903mmol)处理和在室温下搅拌过夜。混合物用AcOH(0.5mL,8.73mmol)处理和真空浓缩。残余物用水(10mL)研磨和过滤。滤液用甲酸(0.2mL)处理，和放置沉淀48h，然后过滤。获得合并的固体以纯化。
总共208mg粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18,26g柱,15-50％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供标题化合物(128mg)，为浅粉色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(s,1H),9.14(s,1H),8.92(s,1H),8.88(s,1H)8.30(d,1H),8.19(d,,1H),8.11(dd,2H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.03(d,1H),6.91(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.05–3.95(m,4H),3.71(dd,2H),3.66(s,3H),3.60(s,4H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 821.3(M+H)+(ES+)
实施例6
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-N-(甲基磺酰基) 乙酰胺
在室温下将DIPEA(71.1μL,0.407mmol)加入至2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(参见上述实施例3；111mg,0.136mmol)和甲烷磺酰胺(19.36mg,0.204mmol)在无水DMF(2mL)中的溶液，接着加入HATU(77mg,0.204mmol)。得到的黄色溶液在室温下搅拌3h。将另外一部分甲烷磺酰胺(19.36mg,0.204mmol)、DIPEA(71.1μL,0.407mmol)和HATU(77mg,0.204mmol)加入反应物和得到的溶液在室温下搅拌1.5h。然后将反应物在EtOAc(10mL)和水(10mL)之间分配。水层用EtOAc(2x 10mL)萃取。将有机层合并，干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18,12g柱,15-50％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并，用甲酸将pH调节至4，和真空除去溶剂。得到的固体在40℃在真空下干燥过夜，提供标题化合物(11mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(s,1H),8.92(s,1H),8.87(s,1H),8.30(d,1H),8.19(d,2H),8.12(d,1H),8.10(d,1H),7.87(d,1H),7.70(ddd,1H),7.61(dd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.90-6.75(m,2H),6.57(dd,1H),6.09(d,1H),6.05(t,1H),3.96(dd,2H),3.81(s,3H),3.71-3.66(m,7H),3.56(s,3H),3.10(s,3H),2.74(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 895.5(M+H)+(ES+)
实施例7
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基氨甲酰基)苯基)脲基) 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基氨甲酰基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在50℃将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(ii)；125mg,0.228mmol)溶于iPrOAc(3mL)，和将(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基氨甲酰基)苯基)氨基甲酸苯酯(参见WO 2014/162126；85mg,0.240mmol)加入溶液。得到的混合物在50℃搅拌，直到混合物变成溶液(约5min)，然后加入NEt3(6.36μL,0.046mmol)。得到的溶液加热至75℃(模块温度)和放置搅拌16h。将反应物冷却至室温和真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM，提供子标题化合物(161mg)，为无色玻璃。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(s,1H),8.88(d,2H),8.44(d,1H),8.29(d,1H),8.17(q,1H),8.14-7.99(m,2H),7.87(d,1H),7.71(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.11(d,1H),6.91(t,1H),6.79(t,1H),6.57(dd,,1H),6.09(d,,1H),6.04(t,1H),4.16-4.04(m,4H),4.03-3.94(m,2H),3.80(s,3H),3.76-3.68(m,2H),3.65(s,3H),3.64-3.47(m,4H),2.82(d,3H),1.28(s,9H),1.18(t,3H).
m/z 810.6(M+H)+(ES+)
(ii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基氨甲酰基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M水性)(350μL,0.700mmol)加入至来自步骤(i)的化合物(161mg,0.199mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液，和得到的黄色溶液在室温下搅拌3h。反应物用AcOH(82μL,1.427mmol)酸化，和真空浓缩。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18 24g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至pH 6。真空除去挥发性溶剂。形成沉淀和通过过滤收集，提供标题化合物(70mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.57(s,1H),9.46(s,1H),8.88(d,2H),8.44(d,1H),8.29(d,1H),8.17(q,1H),8.11(d,1H),8.08(d,1H),7.87(dd,1H),7.71(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.11(d,1H),6.90(t,1H),6.79(t,1H),6.57(dd,1H),6.09(d,1H),6.04(t,1H),4.03(s,2H),3.98(dd,2H),3.80(s,3H),3.75-3.68(m,2H),3.65(s,3H),3.63-3.52(m,4H),2.82(d,3H),1.28(s,9H).
m/z 782.0(M+H)+(ES+)
实施例8
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基)脲基) 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在50C将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(ii)；125mg,0.228mmol)溶于iPrOAc(2mL)，和将(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基)氨基甲酸苯酯(参见WO 2015/092423；87mg,0.240mmol)加入溶液。得到的混合物在50℃搅拌，直到混合物变成溶液(约2min)，然后加入NEt3(6.36μL,0.046mmol)。得到的溶液加热至75℃(模块温度)和放置搅拌16h。将反应物冷却至室温和真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(172mg)，为无色玻璃。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(s,1H),8.96(s,1H),8.87(s,1H),8.50(d,1H),8.28(d,1H),8.18-8.05(m,2H),7.89-7.83(m,1H),7.71(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.46-7.31(m,2H),6.91(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.09(d,1H),6.04(t,1H),4.18-4.06(m,4H),4.03-3.93(m,2H),3.87(s,3H),3.76-3.67(m,2H),3.66(s,3H),3.63-3.55(m,4H),2.79(s,3H),1.32(s,9H),1.18(t,3H).
m/z 815.5(M+H)+(ES+)
(ii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基) 脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M水性)(350μL,0.700mmol)加入至来自上述步骤(i)的化合物(172mg,0.211mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液，和得到的黄色溶液在室温下搅拌3h。反应物用AcOH(82μL,1.427mmol)酸化和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C1812g柱,15-50％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至pH 5。除去溶剂，提供标题化合物(130mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.51(s,1H),9.03(s,1H),8.88(s,1H),8.50(d,1H),8.30(d,1H),8.14-8.03(m,2H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.65-7.54(m,1H),7.39(d,1H),7.36(d,1H),6.84(s,1H),6.77(t,1H),6.58(dd,1H),6.10(d,1H),6.03(t,1H),3.99(s,2H),3.94(t,2H),3.86(s,3H),3.70(dd,2H),3.65(s,3H),3.62-3.55(m,4H),2.79(s,3H),1.32(s,9H).
m/z 787.0(M+H)+(ES+)
实施例9
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)脲基) 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在50℃将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上文实施例3(ii)；125mg,0.228mmol)溶于iPrOAc(2mL)，和将(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)-氨基甲酸苯酯(参见WO 2015/092423；90mg,0.240mmol)加入溶液。得到的混合物在50℃搅拌约5min，然后加入THF(1mL)。反应物进入溶液，然后加入NEt3(6.36μL,0.046mmol)。得到的溶液加热至75℃(模块温度)和放置搅拌16h。将反应物冷却至室温和真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(151mg)，为无色玻璃。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(s,1H),9.08(s,1H),8.87(s,1H),8.68(d,1H),8.29(d,1H),8.12(s,1H),8.10(d,1H),7.88(dt,1H),7.72(ddd,1H),7.62(ddd,1H),7.45(d,1H),7.40(d,1H),6.91(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.09(d,1H),6.04(t,1H),4.19-4.06(m,4H),4.04-3.97(m,2H),3.95(s,3H),3.78-3.69(m,2H),3.66(s,3H),3.64-3.55(m,4H),3.35(s,3H),1.32(s,9H),1.18(t,3H).
LCMS m/z 831.5(M+H)+(ES+)
(ii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)脲 基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M水性)(350μL,0.700mmol)加入至来自步骤(i)的化合物(151mg,0.182mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液，和得到的黄色溶液在室温下搅拌3h。反应物用AcOH(82μL,1.427mmol)酸化和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C1812g柱,15-50％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸调节至pH 5。除去溶剂，提供标题化合物(114mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.62(s,1H),9.49(s,1H),9.10(s,1H),8.87(s,1H),8.68(d,1H),8.29(d,1H),8.14-8.05(m,2H),7.95-7.80(m,1H),7.72(ddd,1H),7.62(ddd,J＝8.1,1H),7.45(d,1H),7.40(d,1H),6.89(t,1H),6.78(t,1H),6.58(dd,1H),6.10(d,1H),6.04(t,1H),4.02(s,2H),4.00-3.92(m,5H),3.76-3.68(m,2H),3.65(s,3H),3.63-3.56(m,4H),3.34(s,3H),1.32(s,9H).
m/z 803.0(M+H)+(ES+)
实施例10
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(二甲基磷酰基)-2-甲氧基苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(二甲基磷酰基)-2-甲氧基苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在50℃将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(ii)；125mg,0.228mmol)溶于iPrOAc(2mL)，和将(5-(叔丁基)-3-(二甲基磷酰基)-2-甲氧基苯基)-氨基甲酸苯酯(参见WO2015/092423；90mg,0.240mmol)加入溶液。得到的混合物在50℃搅拌约5min和加入THF(1mL)。加入NEt3(6.36μL,0.046mmol)和得到的混合物加热至75℃(模块温度)和得到的溶液在75℃放置搅拌16h。将反应物冷却至室温和真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-10％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(169mg)，为淡粉红色玻璃。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.87(s,1H),8.45(s,1H),8.28(d,1H),8.11(d,1H),8.08-8.03(m,2H),7.87(d,1H),7.71(t,1H),7.65-7.57(m,1H),7.43-7.34(m,2H),6.90(t,1H),6.79(t,1H),6.57(dd,1H),6.09(d,1H),6.04(t,1H),4.19-4.05(m,4H),4.03-3.94(m,2H),3.71(s,2H),3.65(s,3H),3.64-3.53(m,4H),2.58(s,3H),1.78(s,3H),1.75(s,3H),1.30(s,9H),1.18(t,3H).
m/z 829.5(M+H)+(ES+)
(ii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(二甲基磷酰基)-2-甲氧基苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M水性)(350μL,0.700mmol)加入至来自上述步骤(i)的化合物(169mg,0.204mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液，和得到的溶液在室温下搅拌3h。反应物用AcOH(82μL,1.427mmol)酸化和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18 12g柱,15-50％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至pH 5。除去溶剂，提供标题化合物(131mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(s,1H),9.00(s,1H),8.87(s,1H),8.42(d,1H),8.31(d,1H),8.16-8.06(m,2H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.41-7.31(m,2H),6.85(t,1H),6.77(t,1H),6.58(dd,1H),6.09(d,1H),6.03(t,1H),3.99-3.92(m,4H),3.90(s,3H),3.74-3.67(m,2H),3.65(s,3H),3.62-3.53(m,4H),1.76(s,3H),1.73(s,3H),1.31(s,9H).
m/z 801.0(M+H)+(ES+)
实施例11
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(N-甲基甲基磺酰氨基)苯 基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(N-甲基甲基磺酰氨基) 苯基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在50℃将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(ii)；125mg,0.228mmol)溶于iPrOAc(2mL)，和将(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(N-甲基甲基磺酰氨基)-苯基)氨基甲酸苯酯(参见WO 2016/051187；97mg,0.240mmol)加入溶液。得到的混合物在50℃搅拌约5min，此时反应物溶解。加入NEt3(6.36μL,0.046mmol)和得到的溶液加热至75℃(模块温度)和溶液在75℃放置搅拌4h。除去溶剂和粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(83mg)，为淡粉红色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(s,1H),8.93(s,1H),8.87(s,1H),8.33(d,1H),8.29(d,1H),8.11(d,1H),8.10(d,1H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.03(d,1H),6.91(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.19-4.03(m,4H),3.98(dd,2H),3.89(s,3H),3.71(dd,2H),3.65(s,3H),3.64-3.56(m,4H),3.25(s,3H),3.15(s,3H),1.29(s,9H),1.18(t,3H).
m/z 860.5(M+H)+(ES+)
(ii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(N-甲基甲基磺酰氨基) 苯基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M水性)(175μL,0.350mmol)加入至来自上述步骤(i)的化合物(83mg,0.097mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液，和得到的黄色溶液在室温下搅拌3h。反应物用AcOH(82μL,1.427mmol)酸化和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C1812g柱,15-50％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至pH 5。除去溶剂，得到标题化合物(57mg)，为淡粉红色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.73(s,1H),9.13(s,1H),8.90(s,1H),8.36(d,1H),8.31(d,1H),8.15-8.04(m,2H),7.90-7.82(m,1H),7.67(ddd,1H),7.59(ddd,1H),7.37(d,1H),7.02(d,1H),6.74(d,2H),6.60(dd,1H),6.12(d,1H),6.02(t,1H),3.93–3.82(m,5H),3.78(s,2H),3.72-3.66(m,2H),3.65(s,3H),3.59-3.51(m,4H),3.25(s,3H),3.14(s,3H),1.29(s,9H).
m/z 832.0(M+H)+(ES+)
实施例12
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基) 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)呋喃-3-甲酸
(i)5-((2-羟基乙氧基)甲基)呋喃-3-甲酸甲酯
在0℃经10min缓慢分批向无水乙烷-1,2-二醇(0.259mL,4.58mmol)在DMSO(3mL)中的搅拌溶液加入tBuOK(141mg,1.260mmol)。得到的溶液在相同温度下进一步搅拌30min，然后加入TBAI(42.3mg,0.115mmol)。将5-(氯甲基)呋喃-3-甲酸甲酯(200mg,1.146mmol)在DMSO(1mL)中的均质溶液逐滴加入上述反应混合物和在室温下搅拌过夜。加入3mL MeOH和将反应物再次搅拌过夜。加入水(15mL)，水层用乙酸乙酯(2×15mL)萃取和经无水硫酸钠干燥。乙酸乙酯在减压下蒸发。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(110mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(d,1H),6.75(d,1H),4.63(t,1H),4.45(s,2H),3.77(s,3H),3.54-3.46(m,2H),3.46-3.40(m,2H).
m/z 218.0(M+NH4)+(ES+)
(ii)5-((2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)甲基)呋喃-2-甲酸甲酯
将来自上述步骤(i)的产物(105mg,0.525mmol)溶于1mL DCM和加入NEt3(88μL,0.629mmol)和MsCl(45.0μL,0.577mmol)。反应物在室温下搅拌2h，之后LCMS表明反应已进行完成。反应物用DCM(10mL)稀释，用水洗涤(10mL)，通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(130mg)，为黄色油，其逐渐硬化为黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(d,1H),6.79(d,1H),4.56-4.46(m,2H),4.35-4.28(m,2H),3.77(s,3H),3.71-3.63(m,2H),3.17(s,3H).
(iii)5-((2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)甲基)呋喃-3-甲酸甲酯
将3-甲氧基-5-硝基苯酚(75mg,0.445mmol)、来自步骤(ii)的产物(130mg,0.467mmol)和碳酸钾(184mg,1.335mmol)悬浮于DMF(0.5mL)和加热至85℃(模块温度)过夜。将反应物冷却，用水(15mL)稀释和用TBME(3x 15mL)萃取。合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(24g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(124mg)，为黄色油，其逐渐变成浅黄色蜡状固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(d,1H),7.34(d,2H),6.98(t,1H),6.78(d,1H),4.53(d,2H),4.28–4.20(m,2H),3.86(s,3H),3.82–3.71(m,5H).
m/z 369.0(M+NH4)+(ES+)
(iv)5-((2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)呋喃-3-甲酸甲酯
将来自上述步骤(iii)的产物(120mg,0.342mmol)在EtOH(20mL)中的溶液在H-Cube中氢化(10％Pd/C,30x4mm,全氢,室温,1mL/min)。堵塞导致溶液暴露于过压约45分钟。将反应混合物真空浓缩，得到油，其直接用于步骤(v)。LCMS揭示子标题化合物(m/z 322.0(M+H)+(ES+))和5-((2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)四氢呋喃-3-甲酸甲酯(m/z326.0(M+H)+(ES+)(107mg)的2:3混合物。
(v)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)四氢呋喃-3-甲酸甲 酯(产物A)
和
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)- 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)呋喃-3-甲酸甲酯(产物 B)
将来自上述步骤(iv)的产物混合物(95mg,0.296mmol)、N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)-甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；168mg,0.296mmol)、新研磨的碳酸钾(123mg,0.887mmol)和BrettPhosG3前催化剂(13.40mg,0.015mmol)在DMF(3mL)中的悬浮液抽真空和用氮气回充三次。然后将反应物在氮气下在85℃(模块温度)加热16h。将混合物冷却，用EtOAc(15mL)稀释，用盐水洗涤和在硅胶上浓缩。尝试性硅胶色谱(12g柱,0-5％(0.7M氨/MeOH)/DCM)提供很少分离，和在用水(3mL)研磨后获得不纯的产物混合物。产物通过色谱在RP Flash C18上进一步纯化(27g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)，得到产物A(30mg)，为灰白色固体，其无需进一步纯化用于实施例13。
m/z 858.1(在254nm大约75％纯度)
进一步洗脱RP柱，得到产物B(20mg)，为灰白色固体，其进行下一步骤无需进一步纯化。
m/z 854.1(在254nm大约55％纯度)
(vi)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)呋喃-3-甲酸
将上述步骤(v)的产物B(20mg,0.023mmol)溶于THF(2mL)和MeOH(0.5mL)。加入NaOH(2M水性)(129μL,0.258mmol)和将混合物在室温下搅拌1.5h。混合物用AcOH(0.25mL)酸化和真空浓缩。粗产物通过制备型HPLC纯化(Waters,酸性(0.1％甲酸),酸性,Waters X-SelectPrep-C18,5μm,19x50mm柱,35-65％MeCN/水)，提供标题化合物(2.4mg)，为灰白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,1H),8.99(s,1H),8.89(s,1H),8.30(d,1H),8.17(d,1H),8.13-8.05(m,3H),7.85(dd,1H),7.69(ddd,1H),7.62-7.56(m,1H),7.38(d,1H),7.01(d,1H),6.86(t,1H),6.78(t,1H),6.63(s,1H),6.58(dd,1H),6.05(d,1H),6.01(t,1H),4.46(s,2H),4.01-3.91(m,2H),3.79(s,3H),3.72-3.66(m,2H),3.64(s,3H),3.09(s,3H),1.26(s,9H).
m/z 840.2(M+H)+(ES+)
实施例13
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基) 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)四氢呋喃-3-甲酸
将上述实施例12(v)的产物A(30mg,0.035mmol)溶于0.4mL THF和0.1mL MeOH。加入NaOH(2M水性)(192μL,0.385mmol)和将混合物在室温下搅拌1.5h。反应物用AcOH(0.25mL)酸化和真空浓缩。粗产物通过制备型HPLC纯化(Waters,碱性(0.1％碳酸氢铵),碱性,Waters X-Bridge Prep-C18,5μm,19x50mm柱,35-65％MeCN/水)，提供标题化合物(7mg)，为灰白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(d,1H),8.99(d,1H),8.84(d,1H),8.37(s,1H),8.25(dd,1H),8.09(t,1H),8.06-8.00(m,2H),7.78(dd,1H),7.64-7.58(m,1H),7.53(ddd,1H),7.31(dd,,1H),6.95(d,1H),6.78(dt,1H),6.72(q,1H),6.51(ddd,1H),5.97(dt,2H),3.90–3.83(m,3H),3.77-3.69(m,4H),3.66–3.60(m,3H),3.57(s,3H),3.40–3.34(m,2H),3.01(s,3H),2.90-2.82(m,1H),2.07-1.99(m,1H),1.66(ddd,1H),1.19(s,9H).
m/z 844.1(M+H)+
实施例14
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸
(i)2-(2-(2-(苄基氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯
将2-(2-(苄基氧基)乙氧基)乙醇(5g,25.5mmol)溶于DCM(50mL)，通过相分离器和真空浓缩。然后在氮气下再溶于无水THF(50mL,25.5mmol)和在冰浴中冷却。经10min分批加入NaH(60％，在矿物油中,1.070g,26.8mmol)和得到的悬浮液搅拌30min。经15min逐滴加入2-溴丙酸乙酯(3.73mL,28.0mmol)。将反应物搅拌过夜，用饱和NH4Cl(5mL)淬灭和得到的混合物直接在硅胶上浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(80g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(1.51g)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.51-7.09(m,5H),4.50(s,2H),4.11(qd,2H),4.05(q,1H),3.70-3.41(m,8H),1.27(d,3H),1.20(t,3H).
(ii)2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯
将来自上述步骤(i)的产物(1.5g,5.06mmol)溶于EtOH(60mL,5.06mmol)和在室温下以1巴H2经Pd-C(0.539g,0.506mmol)氢化16h。反应物通过硅藻土过滤，固体用EtOH(20mL)洗涤和将混合物真空浓缩，得到子标题化合物(931mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.56(t,1H),4.12(qd,2H),4.04(q,1H),3.67-3.56(m,1H),3.56-3.45(m,5H),3.42(dd,2H),1.27(d,3H),1.21(t,3H).
(iii)2-(2-(2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯
将来自上述步骤(ii)的产物(932mg,4.52mmol)溶于DCM(5mL)和在冰浴中冷却。相继逐滴加入NEt3(756μL,5.42mmol)和MsCl(387μL,4.97mmol)和将反应物在冰浴中搅拌1h。加入DCM(50mL)和有机层用盐水(2x 50mL)洗涤，通过相分离器和真空浓缩，得到1.13g的黄色油。将282mg的该黄色油、3-甲氧基-5-硝基苯酚(160mg,0.946mmol)和碳酸钾(392mg,2.84mmol)悬浮于DMF(3mL)和加热至80℃过夜。将反应物冷却和在TBME(20mL)和盐水(20mL)之间分配。水层用TBME萃取(20mL)和合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(200mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.34(dt,2H),7.00(t,1H),4.29–4.18(m,2H),4.12(ddq,2H),4.05(q,1H),3.86(s,3H),3.81–3.74(m,2H),3.66–3.57(m,3H),3.56–3.46(m,1H),1.26(d,,3H),1.19(t,3H).
(iv)2-(2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯
向来自上述步骤(iii)的产物(200mg,0.560mmol)在EtOH(30mL)和EtOAc(7mL)中的溶液加入Pd/C(5wt％,类型87L)(61.3mg,0.029mmol)。得到的悬浮液在3巴H2下搅拌1h。反应混合物通过硅藻土过滤和真空浓缩，得到子标题化合物(130mg)，为红色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ5.75(d,2H),5.69(t,1H),5.05(s,2H),4.12(qd,2H),4.06(q,1H),4.00–3.91(m,2H),3.73–3.66(m,2H),3.66–3.55(m,6H),3.55–3.49(m,1H),1.28(d,3H),1.20(t,3H).
(v)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯
将来自上述步骤(iv)的产物(130mg,0.397mmol)、N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；226mg,0.397mmol)、碳酸钾(165mg,1.191mmol)和BrettPhosG3前催化剂(18.00mg,0.020mmol)在DMF(3mL)中的溶液用氮气脱气10分钟。将反应在氮气下在85℃(模块温度)加热2h。将反应物冷却和在EtOAc(10mL)和水(10mL)之间分配。水相用EtOAc(5mL)萃取。合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，提供深棕色固体。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,1-6％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(125mg)，为浅米色泡沫。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.19(d,1H),8.15-8.07(m,2H),7.87(dt,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.03(d,1H),6.91(t,1H),6.78(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.11(qd,2H),4.07-4.02(m,1H),3.98(dd,2H),3.81(s,3H),3.75-3.69(m,2H),3.65(s,3H),3.62-3.55(m,3H),3.55-3.47(m,1H),3.10(s,3H),1.31-1.23(m,12H),1.19(t,3H).
m/z 860.1(M+H)+(ES+)
(vi)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸
将来自上述步骤(vi)的产物(120mg,0.140mmol)溶于THF(2mL)和MeOH(0.5mL)。加入NaOH(2M水性)(767μL,1.535mmol)和将混合物在室温下搅拌16h。反应物用AcOH(0.25mL)酸化和真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(24g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将含产物的流分合并，用甲酸酸化至约pH 4，真空浓缩和得到的沉淀滤出，用水洗涤(5mL)，提供标题化合物(64mg)，为灰白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),9.36–9.30(m,1H),9.04(s,1H),8.85(s,1H),8.80(s,1H),8.22(d,1H),8.11(d,1H),8.04(s,1H),8.02(d,1H),7.79(dd,1H),7.63(ddd,1H),7.53(ddd,1H),7.31(d,1H),6.95(d,1H),6.82(t,1H),6.71(t,1H),6.50(dd,1H),6.01(d,1H),5.96(t,1H),3.93–3.82(m,3H),3.73(s,3H),3.67–3.61(m,2H),3.59–3.53(m,4H),3.50(dd,2H),3.44–3.37(m,1H),3.02(s,3H),1.19(s,9H),1.18(d,3H).
m/z 832.1(M+H)+(ES+)
实施例15
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰基)-2-甲氧基苯基)脲基) 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-硝基苯基)(乙基)硫烷
在室温下将亚硝酸叔丁酯(3.18mL,26.8mmol)逐滴加入1,2-二乙基二硫烷(3.29mL,26.8mmol)和5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-硝基苯胺(2g,8.92mmol)在MeCN(50mL)中的搅拌的深棕色溶液。然后将反应物加热至回流(模块温度80℃)和深棕色溶液在回流下搅拌2h。然后将反应物冷却至室温和蒸发溶剂。深红色残余物与甲苯(3x 25mL)共沸。粗产物通过硅胶色谱纯化(80g柱,0-20％MTBE:异己烷)，提供子标题化合物(1.007g)，为橙色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64(d,1H),7.53(d,1H),3.84(s,3H),3.09(q,2H),1.31(s,9H),1.28(t,3H).
(ii)5-(叔丁基)-1-(乙基磺酰基)-2-甲氧基-3-硝基苯
在氮气下在0℃将m-CPBA(1.747g,7.80mmol)加入至来自上述步骤(i)的化合物(1g,3.71mmol)在DCM(40mL)中的溶液，和得到的橙色浆液在0℃搅拌30min，然后升温至室温和在室温下搅拌2.5h。反应用溶于水(10mL)的硫代硫酸钠(2.348g,14.85mmol)溶液淬灭和在室温下搅拌30min。各层用DCM(50mL)稀释和分离。有机层用饱和水性NaHCO3(3x 20mL)洗涤和干燥(MgSO4)。除去溶剂，得到深红色油。粗产物通过硅胶色谱纯化(40g柱,20-100％DCM:庚烷)，提供子标题化合物(935mg)，为稠厚的橙色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(d,1H),8.06(d,1H),3.94(s,3H),3.49(q,2H),1.34(s,9H),1.15(t,3H).
m/z 302.2(M+H)+(ES+)
(iii)5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰基)-2-甲氧基苯胺
将NH4Cl(66.4mg,1.241mmol)加入至来自上述步骤(ii)的化合物(935mg,3.10mmol)和铁(1733mg,31.0mmol)在EtOH(20mL)、水(5mL)和THF(2mL)中的浆液。得到的黑色浆液加热至回流1h。将溶液冷却至室温和通过硅藻土过滤，用EtOAc(2x 20mL)洗涤。真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-40％EtOAc:异己烷)，提供子标题化合物(820mg)，为稠厚的黄色油。
m/z 272.3(M+H)+(ES+)
(iv)(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰基)-2-甲氧基苯基)氨基甲酸苯酯
将氯甲酸苯酯(417μL,3.32mmol)加入至来自步骤(iii)的化合物(820mg,3.02mmol)和NaHCO3(762mg,9.06mmol)在DCM(8mL)和THF(2mL)中的浆液。得到的浆液在室温下搅拌18h。反应物用DCM(10mL)稀释和用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤。将有机层真空浓缩，得到浅橙色固体。其用环己烷(10mL)研磨和得到的固体通过过滤收集，用环己烷(2x2mL)洗涤，提供子标题化合物(940mg)，为米色固体。
m/z 392.3(M+H)+(ES+)
(v)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰基)-2-甲氧基苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在50℃将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(ii)；100mg,0.183mmol)溶于iPrOAc(2mL)和将来自上述步骤(iv)的化合物(75mg,0.192mmol)加入溶液。得到的混合物在50℃搅拌，直到氨基甲酸酯溶解(约5min)，然后加入NEt3(5.09μL,0.037mmol)和得到的溶液在75℃搅拌4h。除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM)。产物通过色谱再次纯化(RP Flash C18 12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(86mg)，为浅粉色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,1H),9.07(s,1H),8.88(s,1H),8.70(d,1H),8.29(d,1H),8.14-8.04(m,2H),7.88(d,1H),7.71(t,1H),7.62(t,1H),7.42(d,1H),7.40(d,1H),6.90(t,1H),6.78(t,1H),6.58(dd,1H),6.09(d,1H),6.04(t,1H),4.19-4.06(m,4H),3.98(t,2H),3.94(s,3H),3.75-3.68(m,2H),3.65(s,3H),3.64-3.55(m,4H),3.44(q,2H),1.31(s,9H),1.22-1.12(m,6H).
m/z 845.5(M+H)+(ES+)
(vi)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰基)-2-甲氧基苯基)脲 基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M水性)(175μL,0.350mmol)加入至来自上述步骤(v)的化合物(86mg,0.102mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液，和得到的溶液在室温下搅拌过夜。反应用AcOH(24.14μL,0.422mmol)淬灭和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C1812g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分用甲酸中和和浓缩，提供标题化合物(67mg)，为浅米色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68(s,1H),9.21(s,1H),8.88(s,1H),8.69(d,1H),8.32(d,1H),8.14-8.07(m,2H),7.87(d,1H),7.76-7.66(m,1H),7.66-7.56(m,1H),7.42(d,1H),7.39(d,1H),6.79(s,1H),6.75(t,1H),6.59(dd,1H),6.11(d,1H),6.03(t,1H),3.99-3.86(m,7H),3.69(dd,2H),3.65(s,3H),3.58(q,4H),3.44(q,2H),1.31(s,9H),1.15(q,3H).
m/z 817.5(M+H)+(ES+)
实施例16
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰氨基)-2-甲氧基苯基)脲基) 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-硝基苯基)乙烷磺酰胺
在0℃将乙烷磺酰氯(475μL,5.02mmol)加入5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-硝基苯胺(750mg,3.34mmol)和吡啶(1082μL,13.38mmol)在DCM(10mL)中的溶液。得到的溶液在0℃搅拌5min，然后在室温下搅拌16h。反应物用2M HCl(10mL)和盐水(10mL)洗涤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-20％EtOAc/异己烷)，得到子标题化合物，915mg的黄色油，其在静置时固化。固体用乙醚:异己烷(1:1比率,10mL)研磨，提供子标题化合物(686mg)，为浅黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,1H),7.68(s,2H),3.82(s,3H),3.22(q,2H),1.40-1.18(m,12H).
m/z 315(M-H)-(ES-)
(ii)N-(3-氨基-5-(叔丁基)-2-甲氧基苯基)乙烷磺酰胺
将10％Pd/C,50％糊状物/水,类型39(46.2mg,0.434mmol)加入至来自上述步骤(i)的化合物(686mg,2.168mmol)在EtOH(5mL)和EtOAc(2mL)中的溶液，和得到的浆液在H2下以5巴压力搅拌过夜。反应物通过硅藻土过滤，用EtOAc(50mL)洗涤。真空除去溶剂，提供子标题化合物(600mg)，为浅粉色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67(s,1H),6.61-6.52(m,2H),4.88(s,2H),3.63(s,3H),3.09(q,2H),1.25(t,3H),1.20(s,9H).
m/z 287.3(M+H)+(ES+)
(iii)(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰氨基)-2-甲氧基苯基)氨基甲酸苯酯
将氯甲酸苯酯(289μL,2.305mmol)加入至来自上述步骤(ii)的化合物(600mg,2.095mmol)和NaHCO3(528mg,6.29mmol)在DCM(8mL)和THF(2mL)中的浆液。得到的浆液在室温下搅拌2h。反应物用DCM(10mL)稀释和用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤。有机层经真空浓缩，得到橙色油，其在静置时固化。其用环己烷(10mL)研磨和得到的固体通过过滤收集，用环己烷(2x 2mL)洗涤，提供子标题化合物(788mg,1.842mmol,88％收率)，为浅米色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,1H),9.12(s,1H),7.54(s,1H),7.47-7.36(m,2H),7.30-7.19(m,3H),7.17(d,1H),3.77(s,3H),3.15(q,2H),1.28(t,3H),1.24(s,9H).
m/z 429.4(M+Na)+(ES+)
(iv)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰氨基)-2-甲氧基苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在50℃将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(ii)；100mg,0.183mmol)溶于iPrOAc(2mL)和将来自步骤(iii)的化合物(97mg,0.240mmol)加入溶液。得到的混合物在50℃搅拌，直到氨基甲酸酯溶解(约5min)。加入NEt3(5.09μL,0.037mmol)和得到的溶液在75℃搅拌4h。真空除去溶剂。硅胶色谱(12g柱,0-5％MeOH/DCM)未提供足够的纯度。粗产物通过色谱再次纯化(RP Flash C18 12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(70mg)，为浅粉色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.37(s,1H),9.12(s,1H),8.90(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.16(d,1H),8.12(d,1H),8.10(s,1H),7.91-7.83(m,1H),7.74-7.65(m,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.90(t,1H),6.78(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.14-4.06(m,4H),4.02-3.94(m,2H),3.81(s,3H),3.71(dd,2H),3.65(s,3H),3.64-3.56(m,4H),3.21-3.12(m,2H),1.31(t,3H),1.26(s,9H),1.18(t,3H).
m/z 860.5(M+H)+(ES+).
(v)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰氨基)-2-甲氧基苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M水性)(40.7μL,0.081mmol)加入至来自上述步骤(iv)的化合物(70mg,0.081mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液，和得到的溶液在室温下搅拌过夜。反应用AcOH(24.1μL,0.422mmol)淬灭和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C1812g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分用甲酸中和和浓缩，提供标题化合物(68mg)，为浅米色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(s,1H),8.96(s,1H),8.88(s,1H),8.31(d,1H),8.17(d,1H),8.12(s,1H),8.10(d,1H),7.86(dd,1H),7.69(ddd,1H),7.60(ddd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.86(t,1H),6.78(t,1H),6.58(dd,1H),6.09(d,1H),6.03(t,1H),4.01-3.90(m,4H),3.81(s,3H),3.73-3.68(m,2H),3.65(s,3H),3.63-3.55(m,4H),3.20-3.13(m,2H),1.31(t,3H),1.26(s,9H).
m/z 832.5(M+H)+(ES+)
实施例17
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)异噁唑-3-基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶- 2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)(5-(叔丁基)异噁唑-3-基)氨基甲酸苯酯
将氯甲酸苯酯(0.492mL,3.92mmol)、5-(叔丁基)异噁唑-3-胺(0.5g,3.57mmol)和NaHCO3(0.899g,10.70mmol)在DCM(8mL)和THF(2mL)中的浆液在室温下搅拌4h。反应物用DCM(10mL)稀释，用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤和蒸发溶剂，提供无色油，其在环己烷(10mL)中搅拌10min。形成白色固体，其通过过滤收集，提供子标题化合物(674mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.16(s,1H),7.47-7.41(m,2H),7.28(ddt,1H),7.25-7.19(m,2H),6.44(s,1H),1.30(s,9H).
m/z 261.3(M+H)+(ES+)
(ii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)异噁唑-3-基)脲基)萘-1-基)氧基)吡 啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
在50℃将2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(ii)；100mg,0.183mmol)溶于iPrOAc(2mL)，和将来自(i)的产物(62.4mg,0.240mmol)加入溶液和在50℃搅拌，直到氨基甲酸酯溶解(约5min)。加入NEt3(5.1μL,0.037mmol)和得到的溶液在75℃搅拌4h。真空除去溶剂。硅胶色谱(12g柱,0-5％MeOH/DCM)未提供足够的纯度和粗产物通过色谱进一步纯化(RPFlash C18 12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(86mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.93(s,1H),9.12(s,1H),8.87(s,1H),8.18(d,1H),8.11(d,1H),8.06(d,1H),7.87(d1H),7.71(ddd,1H),7.62(ddd,1H),7.39(d,1H),6.90(t,1H),6.78(t,1H),6.57(dd,1H),6.52(s,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.16-4.05(m,4H),4.02-3.95(m,2H),3.71(dd,2H),3.65(s,3H),3.64-3.57(m,4H),1.32(s,9H),1.19(t,3H).
m/z 714.2(M+H)+(ES+)
(iii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)异噁唑-3-基)脲基)萘-1-基)氧基) 吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M水性)(175μL,0.350mmol)加入至来自上述步骤(i)的化合物(86mg,0.120mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液，和得到的溶液在室温下搅拌过夜。反应用AcOH(24.1μL,0.422mmol)淬灭和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C1812g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分用甲酸中和和浓缩，提供标题化合物(59mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.23(s,1H),9.45(s,1H),8.87(s,1H),8.21(t,1H),8.11(d,1H),8.03(d,1H),7.87(dd,1H),7.69(ddd,1H),7.65-7.55(m,1H),7.37(d,1H),6.77(s,1H),6.73(t,1H),6.60(dd,1H),6.52(s,1H),6.09(d,1H),6.03(t,1H),3.96(s,2H),3.89(d,2H),3.69(dd,2H),3.65(s,3H),3.62-3.54(m,4H),1.32(s,9H)m/z 686.5(M+H)+(ES+).
实施例18
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((5-氧代-2,5-二 氢异噁唑-3-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)苯 基)-甲烷磺酰胺
(i)1-[5-叔丁基-3-(甲烷磺酰氨基)-2-甲氧基-苯基]-3-[4-[[2-[3-[2-[2-[2- (2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二噁烷-5-基)-2-氧代-乙氧基]乙氧基]乙氧基]-5-甲氧 基-苯胺基]-4-吡啶基]氧基]-1-萘基]脲
向2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(参见上述实施例3；500mg,0.611mmol)在DCM(3mL)和THF(3mL)中的溶液加入DMAP(74.7mg,0.611mmol)。得到的悬浮液冷却至0℃和加入DCC(139mg,0.672mmol)。得到的悬浮液在0℃搅拌10min，然后加入2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(26.4mg,0.183mmol)。得到的悬浮液在0℃搅拌10min，然后在室温下过夜。另外部分的DCC(37.8mg,0.183mmol)和2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(26.4mg,0.183mmol)加入黄色悬浮液和继续搅拌4h。除去溶剂，得到橙色固体，其悬浮于冷的DCM(3mL)和过滤(烧结漏斗，1级Whatman纸)，用冷的DCM(3x 2mL)洗涤。将滤液冷却，和通过棉絮塞再次过滤和除去溶剂，提供浅黄色固体。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-100％EtOAc/异己烷，然后4％MeOH:DCM)，提供子标题化合物(771mg)，为白色固体。
m/z 944.6(M+H)+(ES+)
(ii)4-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-3-氧代丁酸乙 酯
来自上述步骤(i)的产物(403mg,0.324mmol)在EtOH(50mL)中浆化，和加热至回流24h。真空除去溶剂，提供作为产物的胶，其通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-10％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(200mg,0.205mmol,63.2％收率)，为无色胶。
m/z 886.5(M+H)+(ES+)
(iii)N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((5-氧代- 2,5-二氢异噁唑-3-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲 基)苯基)-甲烷磺酰胺
将来自(ii)的产物(100mg,0.113mmol)、羟基胺盐酸盐(31.3mg,0.450mmol)和饱和水性碳酸氢钠(512μL,0.563mmol)在EtOH(2.5mL)中的悬浮液加热至回流1h，之后获得均质溶液。将反应物冷却至室温和真空浓缩。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18 12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至7，有机溶剂在N2流下蒸发，保护样品避光。水性溶剂然后在旋转式蒸发器上在30℃除去，提供标题化合物(20mg)，为浅粉色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(s,1H),9.02(s,1H),8.94(s,1H),8.32(d,1H),8.18(d,1H),8.12(s,1H),8.10(d,1H),7.86(dd,1H),7.69(ddd,1H),7.60(ddd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.88(t,1H),6.78(t,1H),6.58(dd,1H),6.07(d,1H),6.03(t,1H),4.06(s,2H),3.95(dd,2H),3.91(s,1H),3.80(s,3H),3.68(dd,2H),3.65(s,3H),3.59-3.52(m,2H),3.52-3.44(m,2H),3.09(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 857.5(M+H)+(ES+)
实施例19
2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)硫基)乙酸
(i)2,2,3,3-四甲基-4,7-二氧杂-10-硫杂-3-硅杂十二烷-12-酸甲酯
将2,2'-氧基二乙醇(7.05mL,80.5mmol)、NEt3(8.36mL,60mmol)和DMAP(0.020g,0.164mmol)溶解在DCM(100mL)中和在冰浴中冷却。经15分钟将TBSCl(7.28g,48.3mmol)在DCM(20mL)中的溶液逐滴加入和允许混合物升温至室温过夜。有机层用饱和NaHCO3(100mL)、饱和NH4Cl(100mL)然后饱和NaCl(100mL)洗涤，通过相分离器和真空浓缩，得到无色油(8.95g)。在0-5℃向该油(2.0g)和NEt3(1.82mL,13.07mmol)在DCM(20mL)中的溶液逐滴加入MsCl(0.611mL,7.84mmol)。得到的混合物升温至室温和搅拌2h，用DCM(30mL)稀释和有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，通过相分离器和真空浓缩，得到2.45g的浅黄色油。将NaH(60％，在矿物油中,0.731g,18.27mmol)悬浮于DMF(10mL,129mmol)，在冰浴中冷却和在氮气下逐滴加入2-巯基乙酸甲酯(1.515mL,16.60mmol)。在室温下30min后，将混合物在冰浴中冷却和来自上文的浅黄色油(2.36g)作为DMF(5mL)中的溶液加入和搅拌2h。将饱和NH4Cl(水性)(50mL)加入和用EtOAc(2x 50mL)萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤和在硅胶上真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(80g柱,0-20％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(1.22g)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.71–3.65(m,2H),3.63(s,3H),3.59(t,2H),3.47–3.42(m,2H),3.42–3.37(m,2H),2.74(t,2H),0.86(s,9H),0.04(s,6H)
(ii)2-((2-(2-羟基乙氧基)乙基)硫基)乙酸甲酯
将来自上述步骤(i)的产物(546mg,1.770mmol)溶于AcOH:水(3mL；2:1比率)和在室温下搅拌1h。然后真空除去溶剂，得到子标题化合物(347mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.57(t,1H),3.60(s,3H),3.53(t,2H),3.48-3.40(m,2H),3.40–3.33(m,4H),2.70(t,2H).
(iii)2-((2-(2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)乙基)硫基)乙酸甲酯
将来自上述步骤(ii)的产物(344mg,1.771mmol)溶于DCM(5mL)和在冰浴中冷却。逐滴加入NEt3(370μL,2.66mmol)，接着MsCl(166μL,2.125mmol)，和将混合物放置升温至室温过夜。混合物用DCM(10mL)稀释和有机层用0.1M HCl(10mL)洗涤。混合物通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(396mg)，为浅黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.32-4.20(m,2H),3.64-3.61(m,2H),3.60(s,3H),3.58(t,2H),3.37(s,2H),3.15(s,3H),2.73(t,2H).
(iv)2-((2-(2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙基)硫基)乙酸甲酯
将3-甲氧基-5-硝基苯酚(118mg,0.699mmol)、来自上述步骤(iii)的产物(200mg,0.734mmol)和碳酸钾(290mg,2.098mmol)悬浮/溶解在DMF(3mL)中和加热至80℃过夜。将反应物冷却和在TBME(20mL)和盐水(20mL)之间分配。水层用TBME(20mL)萃取和合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(170mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.35(dt,2H),7.00(t,1H),4.29-4.15(m,2H),3.86(s,3H),3.79-3.73(m,2H),3.66(t,2H),3.63(s,3H),3.42(s,2H),2.77(t,2H).
m/z 346.0(M+H)+(ES+)
(v)2-((2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)硫基)乙酸甲酯
将来自上述步骤(iv)的产物(170mg,0.492mmol)溶于EtOH(4mL,68.5mmol)和H2O(0.5mL)。加入铁(165mg,2.95mmol)和NH4Cl(211mg,3.94mmol)和烧瓶抽真空和用氮气回充三次。将反应混合物加热至80℃，同时剧烈搅拌2h。LCMS显示完全转化为子标题化合物。将混合物冷却，通过硅藻土过滤和固体用EtOH(10mL)洗涤。溶液真空浓缩，得到子标题，为浅黄色油(120mg)。
m/z 316.0(M+H)+(ES+)
(vi)2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯 基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)硫基)乙酸甲 酯
将来自上述步骤(v)的产物(120mg,0.380mmol)、N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；217mg,0.380mmol)、Pd-175(7.43mg,9.51μmol)和新研磨的碳酸钾(158mg,1.141mmol)在DMF(3mL)中的悬浮液通过3个循环的抽真空和用氮气回充脱气。将反应物加热至70℃(模块温度)2h，然后真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(26g柱,25-100％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(152mg)，为无色的玻璃状固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(s,1H),9.16(s,1H),8.93(s,1H),8.89(s,1H),8.34–8.26(m,1H),8.19(d,1H),8.12(d,1H),8.10(d,1H),7.86(dd,1H),7.71(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.02(d,1H),6.90(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.07(d,1H),6.03(t,1H),4.02–3.94(m,2H),3.81(s,3H),3.74–3.68(m,2H),3.65(s,3H),3.62(s,3H),3.41(s,2H),3.10(s,3H),2.77(t,2H),1.27(s,9H).
m/z 848.0(M+H)+(ES+)
(vii)2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯 基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)硫基)乙酸
将来自步骤(vi)的产物(150mg,0.177mmol)溶于THF(4mL)。加入NaOH(2M水性)(973μL,1.946mmol)和将混合物在室温下搅拌过夜。反应物用AcOH(0.25mL)酸化和真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(24g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将含产物的流分合并，用甲酸酸化至约pH 4，真空浓缩和得到的沉淀滤出，用水(5mL)洗涤和在50℃真空干燥24h，提供标题化合物(78mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.54(s,1H),9.40(s,1H),9.17(s,1H),8.93(s,1H),8.89(s,1H),8.29(d,1H),8.19(d,1H),8.12(d,1H),8.10(d,1H),7.86(dd,1H),7.71(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.02(d,1H),6.90(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.07(d,1H),6.03(t,1H),4.03-3.93(m,2H),3.80(s,3H),3.74-3.67(m,2H),3.67-3.58(m,5H),3.29(s,2H),3.10(s,3H),2.76(t,2H),1.27(s,9H).
m/z 833.9(M+H)+(ES+)
实施例20
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸(对映体1和 2)
实施例14的标题化合物(40mg,0.048mmol)经过制备型手性HPLC纯化(Gilson,Daicel ChirapakIC柱,30％EtOH/4:1己烷:DCM(0.2％二乙基胺)，获得两种对映体：对映体1(9.2mg)和对映体2(5.2mg)。两种对映体的绝对立体化学是未知的。
(a)对映体1
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,1H),9.04(s,1H),8.89(s,1H),8.33(d,1H),8.15(d,1H),8.13-8.07(m,2H),7.86(dd,1H),7.68(ddd,1H),7.59(ddd,1H),7.36(d,1H),7.02(d,,1H),6.80-6.71(m,2H),6.58(dd,1H),6.10(d,1H),6.02(t,1H),3.93-3.85(m,2H),3.80(s,4H),3.68(dd,2H),3.64(s,3H),3.55(t,2H),3.46-3.42(m,1H),3.08(s,3H),1.26(s,9H),1.21(d,3H).
m/z 832.1(M+H)+
手性HPLC(Daicel ChiralpakIC,5um,4.6x250mm,45min方法,1.0mL/min,30％EtOH在DCM/己烷(1:4)(0.2％DEA)中RT＝8.9min,84％ee@254nm.
(b)对映体2
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),9.02(s,1H),8.89(s,1H),8.33(d,1H),8.16(d,1H),8.12(d,1H),8.10(d,1H),7.88-7.84(m,1H),7.69(ddd,1H),7.60(ddd,1H),7.37(d,1H),7.02(d,1H),6.81(t,1H),6.76(t,1H),6.59(dd,1H),6.10(d,1H),6.03(t,1H),3.92(t,2H),3.84(d,4H),3.74-3.67(m,2H),3.65(s,3H),3.56(t,2H),3.45-3.42(m,1H),3.09(s,3H),1.27(s,9H),1.23(d,3H).
m/z 832.1(M+H)+(ES+)
手性HPLC(Daicel ChiralpakIC,5um,4.6x250mm,45min方法,1.0mL/min,30％EtOH在DCM/己烷(1:4)(0.2％DEA)中RT＝11.2min,98％ee@254nm.
实施例21
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-2-甲基丙酸
(i)2-(2-(2-(苄基氧基)乙氧基)乙氧基)-2-甲基丙酸乙酯
将2-(2-(2-(苄基氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯(1.1g,3.71mmol)溶于THF(35mL)和冷却至-78℃。加入LiHMDS(1M在THF中,4.08mL,4.08mmol)和将反应物搅拌1h。加入MeI(2M在TBME中)(2.04mL,4.08mmol)和混合物升温至室温和搅拌过夜。反应用NH4Cl(2mL)淬灭，和在二氧化硅上直接浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(80g柱,0-40％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(328mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31-7.17(m,5H),4.50(s,2H),4.11(q,2H),3.65-3.53(m,6H),3.53-3.48(m,2H),1.36(s,6H),1.21(t,3H).
(ii)2-甲基-2-(2-(2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸乙酯
将来自上述步骤(i)的产物(390mg,1.25mmol)溶于EtOH(30mL,1.257mmol)和加入5wt％Pd-C(类型87L,134mg,0.063mmol)。混合物在室温下在4巴H2下搅拌16h。HPLC证实原材料的消耗。反应混合物通过硅藻土过滤，用EtOH(50mL)洗涤固体和真空浓缩，得到无色油。将该油溶于无水DCM(10mL)和在冰水浴中冷却。加入NEt3(192μL,1.378mmol)和MsCl(98μL,1.263mmol)和混合物允许升温至室温，同时搅拌过夜。反应物用DCM(30mL)稀释，用0.1MHCl(20mL)洗涤和水层用DCM(10mL)进一步萃取。合并的有机层通过相分离器和真空浓缩，提供子标题化合物(313mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.34-4.27(m,2H),4.10(q,2H),3.71-3.63(m,2H),3.59-3.50(m,2H),3.48-3.40(m,2H),3.18(s,3H),1.32(s,6H),1.19(t,3H).
(iii)2-(2-(2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-2-甲基丙酸乙酯
将3-甲氧基-5-硝基苯酚(188mg,1.112mmol)、来自上述步骤(ii)的产物(316mg,1.059mmol)和新研磨的碳酸钾(439mg,3.18mmol)悬浮于DMF(3mL)和加热至80℃过夜。将反应物冷却和在TBME(20mL)和盐水(20mL)之间分配。水层用TBME(20mL)萃取和合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(80g柱,0-40％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(346mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.35(dt,2H),7.00(t,1H),4.26-4.19(m,2H),4.11(q,2H),3.86(s,3H),3.80-3.75(m,2H),3.58(dd,2H),3.47(dd,2H),1.33(s,6H),1.19(t,3H).
(iv)2-(2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-2-甲基丙酸乙酯
来自上述步骤(iii)的产物(335mg,0.902mmol)溶于EtOH(5mL)和加入Pd/C(5wt％类型87L,28.8mg,0.014mmol)。将反应物在1巴H2下搅拌2h。反应物通过硅藻土过滤，用EtOH(50mL)洗涤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％(0.7M氨/MeOH)/DCM)，提供子标题化合物(226mg)，为红色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ5.78-5.72(m,2H),5.68(t,1H),5.07(s,2H),4.11(q,2H),3.99-3.87(m,2H),3.75-3.65(m,2H),3.62(s,3H),3.58-3.53(m,2H),3.48-3.43(m,2H),1.33(s,6H),1.19(d,3H).
m/z 342.1(M+H)+(ES+)
(v)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-2-甲基丙酸乙酯
将来自上述步骤(iv)的产物(210mg,0.615mmol)、N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；350mg,0.615mmol)和新研磨的碳酸钾(255mg,1.845mmol)在DMF(3mL)中的悬浮液通过3个循环的抽真空和用氮气回充脱气。将混合物加热至40℃5min和BrettPhosG3前催化剂(13.94mg,0.015mmol)作为DMF(1mL)中的溶液加入。将烧瓶抽真空和用氮气回充，然后加热至75℃(模块温度)4h。将反应物冷却至室温和加入另外一部分新研磨的碳酸钾(255mg,1.845mmol)和Pd-173(14mg)。反应物通过抽真空和用氮气回充3次脱气，和加热至75℃(模块温度)12h，用DCM(50mL)稀释，用盐水(50mL)洗涤，通过相分离器和真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(40g柱,25-100％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(77mg)，为棕色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(s,1H),8.90(d,2H),8.31–8.28(m,1H),8.19(d,1H),8.14–8.07(m,2H),7.87(dd,1H),7.71(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.02(d,1H),6.91(t,1H),6.78(t,1H),6.58(dd,1H),6.07(d,1H),6.03(t,1H),4.10(q,2H),4.01–3.95(m,2H),3.81(s,3H),3.74–3.69(m,2H),3.65(s,3H),3.55(dd,2H),3.46(dd,2H),3.10(s,3H),1.32(s,6H),1.27(s,9H),1.19(t,3H).
m/z 848.0(M+H)+(ES+)
(vi)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-2-甲基丙酸
将来自步骤(v)的产物(77mg,0.088mmol)溶于THF(2mL)和MeOH(0.5mL)。加入NaOH(2M水性)(485μL,0.969mmol)和将混合物在室温下搅拌过夜。反应物用AcOH(0.25mL)酸化和真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(24g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将含产物的流分合并，用甲酸酸化至约pH4和真空浓缩。固体然后再次溶解在最少量的EtOH(约1mL)中和逐滴加入水(0.5mL)以析出白色固体。然后以2000rpm将小管离心2min和倾析上清液，得到标题化合物(40mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.50(s,1H),9.38(s,1H),9.11(s,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.18(d,1H),8.14-8.07(m,2H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.90(t,1H),6.78(t,1H),6.57(dd,1H),6.08(d,1H),6.03(t,1H),3.97(dd,2H),3.81(s,3H),3.71(dd,2H),3.65(s,3H),3.56(dd,2H),3.48(dd,2H),3.10(s,3H),1.31(s,6H),1.27(s,9H).
m/z 846.1(M+H)+(ES+)
实施例22
1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸
(i)1-(2-(2-(苄基氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯
将碳酸钾(822mg,5.95mmol)加入至2-(2-(苄基氧基)乙氧基)乙基甲烷磺酸酯(598mg,2.181mmol)和1H-吡唑-4-甲酸甲酯(250mg,1.982mmol)在DMF(15mL)中的溶液和加热至60℃ 2天。将反应物冷却至室温，相继用EtOAc(50mL)稀释和用水(30mL)、饱和水性NaHCO3(30mL)和20％v/v盐水(30mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(472mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,1H),7.87(d,1H),7.38-7.30(m,2H),7.30-7.24(m,3H),4.44(s,2H),4.32(t,2H),3.80(t,2H),3.72(s,3H),3.58-3.53(m,2H),3.53-3.48(m,2H).
m/z 305.1(M+H)+(ES+)
(ii)1-(2-(2-羟基乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯
将在50％糊状物/水(类型39)中的Pd/C 10％(33.0mg,0.310mmol)加入至来自上述步骤(i)的产物(472mg,1.551mmol)在EtOH(4mL)中的溶液，和得到的浆液在H2下以1巴压力搅拌过夜。反应物通过硅藻土过滤，用EtOAc洗涤(2x 20mL)和除去溶剂，提供子标题化合物(326mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,1H),7.87(d,1H),4.59(t,1H),4.31(t,2H),3.78(t,2H),3.74(s,3H),3.48-3.42(m,2H),3.42-3.37(m,2H).
(iii)1-(2-(2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯
在0℃将MsCl(142μL,1.826mmol)加入至来自上述步骤(ii)的产物(326mg,1.522mmol)在DCM(10mL)和TEA(424μL,3.04mmol)中的溶液，和得到的溶液在室温下搅拌过夜。在室温下加入第二等份的NEt3(424μL,3.04mmol)和MsCl(142μL,1.826mmol)，和将反应物在室温下搅拌另外3h。反应物用DCM(50mL)稀释和用20％v/v盐水(50mL)洗涤。除去溶剂，得到橙色油。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-10％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(431mg)，为橙色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,1H),7.88(d,1H),4.33(t,2H),4.27(m,2H),3.83(t,2H),3.74(s,3H),3.65(dt,2H),3.12(s,3H).
m/z 293.3(M+H)+(ES+)
(iv)1-(2-(2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯
将碳酸钾(611mg,4.42mmol)加入至3-甲氧基-5-硝基苯酚(274mg,1.622mmol)和来自上述步骤(iii)的产物(431mg,1.474mmol)在DMF(15mL)中的溶液和加热至60℃ 2天。将反应物冷却至室温，相继用EtOAc(50mL)稀释和用水(30mL)、饱和水性NaHCO3(30mL)和20％v/v盐水(30mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(387mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,1H),7.83(d,1H),7.31(dt,2H),6.94(t,1H),4.33(t,2H),4.22–4.11(m,2H),3.90–3.82(m,5H),3.78–3.72(m,2H),3.71(s,3H).
m/z 366.4(M+H)+(ES+)
(v)1-(2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸甲酯
将来自上述步骤(iv)的产物(378mg,1.035mmol)、NH4Cl(22.14mg,0.414mmol)和铁(578mg,10.35mmol)在EtOH(20mL)、水(2mL)和THF(3mL)中的浆液加热至回流1h。将反应物冷却至室温和通过硅藻土过滤，用EtOAc(2x 20mL)洗涤。真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-10％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(300mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(d,1H),7.88(d,1H),5.75(t,1H),5.73(t,1H),5.66(t,,1H),5.06(s,2H),4.33(t,2H),3.94-3.87(m,2H),3.84(t,2H),3.73(s,3H),3.70-3.64(m,2H),3.62(s,3H).
m/z 336.3(M+H)+(ES+)
(vi)1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)- 脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸 甲酯
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；239mg,0.420mmol)、来自上述步骤(v)的产物(141mg,0.420mmol)、新研磨的碳酸钾(174mg,1.261mmol)在DMF(2mL)中的悬浮液在小瓶中抽真空和用氮气回充3次。将混合物加热至40℃和加入Pd 175(9.52mg,10.51μmol)。将反应混合物在75℃加热2h。然后将反应冷却，和过滤。滤液在EtOAc(50mL)和20％v/v盐水(50mL)之间分配。将有机层干燥(MgSO4)、过滤和浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-10％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(240mg)，为浅褐色固体。
m/z 868.1(M+H)+(ES+)
(vii)1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯 基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4- 甲酸甲酯
将NaOH(2M水性)(415μL,0.830mmol)加入至来自上述步骤(vi)的产物(240mg,0.277mmol)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液和得到的溶液在室温下搅拌过夜。加入另外的NaOH(2M水性)(415μL,0.830mmol)和反应在室温下搅拌2h。反应用AcOH(24.14μL,0.422mmol)淬灭和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18 12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供标题化合物(130mg,0.149mmol,54.0％收率)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(s,1H),8.92(s,1H),8.86(s,1H),8.29(d,1H),8.23(s,1H),8.18(d,1H),8.11(d,1H),8.09(d,1H),7.87(dd,1H),7.79(d,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.87(t,1H),6.80(t,1H),6.57(dd,1H),6.08(d,1H),6.02(t,1H),4.32(t,2H),4.00-3.89(m,2H),3.84(t,2H),3.81(s,3H),3.73-3.67(m,2H),3.65(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 854.5(M+H)+(ES+)
实施例23
N-(3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-((1H-四唑-5-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)-5-甲氧 基苯基)氨基)-吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-5-(叔丁基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺
(i)2,2,3,3-四甲基-4,7,10-三氧杂-3-硅杂十二烷-12-腈
在0℃在氮气下将2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙氧基)乙醇(2g,6.35mmol)在THF(10mL)中的溶液逐滴加入NaH(60％，在油中,0.356g,8.89mmol)在无水THF(40mL)中的浆液。得到的浆液在0℃搅拌20min，和将溴乙腈(0.44mL,6.35mmol)在无水THF(10mL)中的溶液加入反应混合物。得到的深色溶液允许升温至室温和在室温下搅拌过夜。反应用MeOH(0.5mL)淬灭和用20％v/v盐水(20mL)和EtOAc(50mL)稀释。分离各层，和水层用EtOAc(3x 20mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(24g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(840mg)，为稠厚的棕色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.44(s,2H),3.65(dd,2H),3.62-3.56(m,2H),3.56-3.49(m,2H),3.41(dd,2H),0.82(s,9H),0.00(s,6H).
m/z 282(M+Na)+(ES+)
(ii)2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙腈
来自上述步骤(i)的化合物(728mg,2.81mmol)在AcOH(5mL)和水(2.5mL)中搅拌1h。除去溶剂和使残余物与甲苯(3x 5mL)共沸，提供子标题化合物(409mg)，为稠厚的无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.53(bs,1H),4.44(s,2H),3.65-3.57(m,2H),3.57-3.49(m,2H),3.49-3.41(m,2H),3.41-3.35(m,2H).
(iii)2-(2-(氰基甲氧基)乙氧基)乙基甲烷磺酸酯
在0℃将MsCl(322μL,4.14mmol)加入至来自上述步骤(ii)的化合物(429mg,2.96mmol)和NEt3(824μL,5.91mmol)在DCM(15mL)中的溶液，然后将得到的溶液在室温下搅拌过夜。反应物用DCM(50mL)稀释和用20％v/v盐水(100mL)洗涤。有机层通过疏水玻璃料和浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(640mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.50(s,2H),4.39-4.25(m,2H),3.72-3.64(m,4H),3.64-3.59(m,2H),3.19(s,3H).
(iv)2-(2-(2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙腈
将新研磨的碳酸钾(1189mg,8.60mmol)加入至3-甲氧基-5-硝基苯酚(533mg,3.15mmol)和来自上述步骤(iii)的化合物(640mg,2.87mmol)在DMF(15mL)中的溶液和加热至60℃过夜。将反应物冷却至室温，用EtOAc(100mL)稀释和用20％v/v盐水(100mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(743mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.35(t,1H),7.33(t,1H),7.00(t,1H),4.49(s,2H),4.26-4.18(m,2H),3.86(s,3H),3.81-3.72(m,2H),3.71-3.59(m,4H).
m/z 319.2(M+Na)+(ES+)
(v)2-(2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙腈
将铁(754mg,13.5mmol)，接着氯化铵(28.9mg,0.54mmol)加入至来自上述步骤(iv)的化合物(400mg,1.35mmol)在EtOH(13mL)、THF(5mL)和水(2mL)中的溶液，和得到的浆液加热至回流2h。将反应物冷却和通过硅藻土过滤，用EtOAc(2x 20mL)洗涤。真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(24g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(263mg,0.938mmol,69.5％收率)，为稠厚的浅黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ5.75(d,2H),5.69(t,1H),5.05(s,2H),4.49(s,2H),4.00-3.91(m,2H),3.71-3.63(m,6H),3.63(s,3H).
m/z 267.3(M+H)+(ES+)
(vi)N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-(氰基甲氧基)乙氧基)乙氧基)-5- 甲氧基苯基)-氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；310mg,0.54mmol)、来自上述步骤(v)的化合物(145mg,0.54mmol)和新研磨的碳酸钾(226mg,1.63mmol)在DMF(3mL)中的悬浮液抽真空，用氮气回充3次。混合物在氮气下加热至40℃和加入Pd-175(10.6mg,0.014mmol)。将反应混合物在75℃加热2h，冷却和过滤。滤液在EtOAc(50mL)和20％v/v盐水(50mL)之间分配。将有机层干燥(MgSO4)，过滤和浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-10％MeOH/DCM)，提供稠厚的棕色油。将该材料溶于DCM(5mL)和用20％v/v盐水(10mL)洗涤。除去溶剂，提供子标题化合物(362mg)，为米色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.18(d,1H),8.12(d,1H),8.10(d,1H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.91(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.48(s,2H),4.04-3.92(m,2H),3.81(s,3H),3.72(dt,2H),3.69-3.58(m,7H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 799.4(M+H)+(ES+)
(vii)N-(3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-((1H-四唑-5-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)-5- 甲氧基苯基)-氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-5-(叔丁基)-2-甲氧基苯基)-甲烷磺 酰胺
将TMSN3(49.8μL,0.37mmol)加入至来自上述步骤(vi)的化合物(100mg,0.12mmol)和二丁基氧化锡(31mg,0.12mmol)在甲苯(2mL)中的浆液和得到的浆液加热至100℃ 1h。将反应物冷却至室温和用MeOH(2mL)淬灭。除去溶剂和粗产物通过色谱纯化(RPFlash C18,12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至7。除去溶剂，得到灰白色固体。其溶于EtOH(1mL)和用水(4mL)沉淀。得到的沉淀通过过滤收集，提供标题化合物(31mg)，为灰白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.19(d,1H),8.11(d,1H),8.10(d,1H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.90(t,1H),6.78(t,1H),6.57(dd,1H),6.08(d,1H),6.03(t,1H),4.84(s,2H),4.03-3.93(m,2H),3.81(s,3H),3.74-3.68(m,2H),3.68-3.58(m,7H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 842.1(M+H)+(ES+)
实施例24
2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)- 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙酸
(i)2-(2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将碳酸钾(1.226g,8.87mmol)加入至3-甲氧基-5-硝基苯酚(0.5g,2.96mmol)、2-(2-氯乙氧基)乙酸乙酯(0.440mL,2.96mmol)和碘化钠(0.222g,1.478mmol)在DMF(20mL)中的浆液和在70℃搅拌2h。加热增加至90℃和反应物放置搅拌24h。将反应物冷却至室温和在EtOAc(100mL)和20％v/v盐水(100mL)之间分配，有机层用20％v/v盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(24g柱,0-50％EtOAc/异己烷)。得到的材料溶于EtOAc(50mL)和用NaOH(2M aq,2x 50mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)和真空浓缩，提供子标题化合物(300mg)，为浅黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.40-7.30(m,2H),7.00(t,1H),4.30-4.21(m,2H),4.20(s,2H),4.12(q,2H),3.90-3.79(m,5H),1.20(t,3H).
m/z 322.2(M+Na)+(ES+)
(ii)2-(2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将铁(560mg,10.0mmol)，接着氯化铵(21.4mg,0.40mmol)加入至来自上述步骤(i)的化合物(300mg,1.00mmol)在EtOH(13mL)、THF(5mL)和水(2mL)中的溶液和得到的浆液加热至回流1h和在室温下搅拌过夜。反应物通过硅藻土过滤，用EtOAc(2x 10mL)洗涤和滤液真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(24g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(233mg)，为稠厚的棕色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ5.75(p,2H),5.68(t,1H),5.05(br s,2H),4.17(s,2H),4.12(q,2H),4.00-3.94(m,2H),3.83-3.71(m,2H),3.63(s,3H),1.21(t,3H).
m/z 270.3(M+H)+(ES+)
(iii)2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；211mg,0.37mmol)、来自上述步骤(ii)的化合物(100mg,0.37mmol)和新研磨的碳酸钾(154mg,1.11mmol)在DMF(3mL)中的悬浮液抽真空，用氮气回充3次。混合物在氮气下加热至40℃和加入Pd-175(7.2mg,9.28μmol)。将反应混合物在75℃加热2h。然后将反应物冷却和过滤。滤液在EtOAc(50mL)和20％v/v盐水(50mL)之间分配。将有机层干燥(MgSO4)，过滤和浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-10％MeOH/DCM)，提供偶联产物，为稠厚的棕色油。该材料溶于DCM(5mL)和用20％v/v盐水(10mL)洗涤。除去溶剂，提供子标题化合物(233mg)，为米色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.19(d,1H),8.11(dd,2H),7.87(dt,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.03(d,1H),6.91(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.03(t,1H),4.18(s,2H),4.11(q,2H),4.06-3.96(m,2H),3.85-3.74(m,5H),3.66(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H),1.19(t,3H).
m/z 802.1(M+H)+(ES+)
(iv)2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙酸
将NaOH(2M aq,462μL,0.92mmol)加入至来自上述步骤(iv)的化合物(247mg)在THF(1.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液和得到的溶液在室温下搅拌过夜。反应用AcOH(106μL,1.848mmol)淬灭和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18,12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)和将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至约7。然后除去溶剂，提供白色固体。将其在热EtOH(2mL)中浆化，然后用水(2mL)研磨。得到的固体通过过滤收集，用水(2x 1mL)洗涤，提供标题化合物(145mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.63(s,1H),9.42(s,1H),9.13(s,1H),8.92(s,1H),8.88(s,1H),8.30(d,1H),8.19(d,1H),8.12(d,1H),8.10(d,1H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.02(d,1H),6.89(s,1H),6.78(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.07(s,2H),4.03-3.91(m,2H),3.81(s,3H),3.80-3.72(m,2H),3.66(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 774.4(M+H)+(ES+)
实施例25
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-N-(N,N-二甲基 氨磺酰基)乙酰胺
在室温下将CDI(26.2mg,0.16mmol)加入至2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(参见上述实施例3；120mg,0.14mmol)在无水DMF(2mL)中的溶液和得到的溶液在50℃搅拌1h。将二甲基硫酰胺(36.4mg,0.293mmol)和DBU(44.2μL,0.293mmol)加入溶液和反应物在室温下搅拌过夜。加入另外一部分二甲基硫酰胺(36.4mg,0.293mmol)和DBU(44.2μL,0.293mmol)和反应物在室温下搅拌另外2h。反应用水(0.1mL)淬灭和粗反应溶液通过色谱纯化(RP Flash C18,12g柱,15-50％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和真空除去挥发性溶剂。然后用甲酸将pH调节至7和得到的固体通过过滤收集，用水(2x 1mL)洗涤，提供标题化合物(48mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.26(s,1H),9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.19(d,1H),8.12(d,1H),8.10(s,1H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.03(d,1H),6.91(t,1H),6.79(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.06(s,2H),4.02-3.94(m,2H),3.81(s,3H),3.75-3.69(m,2H),3.66(s,3H),3.61(s,4H),3.10(s,3H),2.80(s,6H),1.27(s,9H).
m/z 924.5(M+H)+(ES+)
实施例26
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)- 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸
(i)5-(羟基甲基)噻吩-2-甲酸甲酯
将5-甲酰基噻吩-2-甲酸甲酯(311mg,1.82mmol)溶于MeOH(4mL)，在冰浴中冷却和经10分钟分批加入NaBH4(68mg,1.82mmol)。将反应物搅拌2h，之后加入饱和水性氯化铵(10mL)。水相用DCM(2x 15mL)萃取，通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(303mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.61(d,1H),6.92(dt,1H),4.86-4.69(m,2H),3.81(s,3H).
(ii)5-(氯甲基)噻吩-2-甲酸甲酯
将来自步骤(i)的产物(287mg,1.66mmol)溶于无水CHCl3(3mL)和冷却至0℃。加入DMF(0.05mL,3.60mmol)和亚硫酰氯(3eq,0.36mL)和将混合物搅拌2h。反应在0℃用MeOH(0.5mL)淬灭，用DCM(15mL)稀释，用盐水(15mL)洗涤，通过相分离器和真空浓缩。子标题化合物(303mg)作为无色油分离。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.58(d,1H),7.00(dt,1H),4.69(d,2H),3.82(s,3H).
(iii)5-((2-羟基乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸甲酯
在0℃经10min分批向无水乙烷-1,2-二醇(0.35mL,6.29mmol)在DMSO(1.5mL)中的搅拌溶液加入叔丁醇钾(194mg,1.73mmol)。得到的溶液在相同温度下搅拌30min，然后加入TBAI(58.1mg,0.15mmol)。将来自上述步骤(ii)的产物(300mg,1.57mmol)在DMSO(0.5mL)中的均质溶液逐滴加入上述反应混合物和在室温下搅拌过夜。加入MeOH(3mL)和将反应搅拌过夜。加入冷水(25mL)和水层用乙酸乙酯(2x 25mL)萃取和将合并的有机层真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(115mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.70(d,1H),7.14(dt,1H),4.78-4.63(m,3H),3.81(s,3H),3.58-3.44(m,4H).
(iv)5-((2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸甲酯
将来自上述步骤(iii)的产物(115mg,0.53mmol)溶于DCM(5mL)和在冰浴中冷却。逐滴加入NEt3(111μL,0.79mmol)，接着MsCl(49.7μL,0.63mmol)和将混合物放置升温至室温过夜。混合物用DCM(10mL)稀释和有机层用0.1M HCl(10mL)洗涤。混合物通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(125mg)，为浅黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.71(d,1H),7.19–7.14(m,1H),4.77(d,2H),4.41–4.30(m,2H),3.82(s,3H),3.77–3.69(m,2H),3.19(s,3H).
(v)5-((2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸甲酯
将3-甲氧基-5-硝基苯酚(65.0mg,0.384mmol)、来自上述步骤(iv)的产物(125mg,0.40mmol)和碳酸钾(159mg,1.15mmol)悬浮/溶解在DMF(3mL)中和加热至80℃过夜。将反应物冷却和在TBME(20mL)和盐水(20mL)之间分配。水层用TBME(20mL)萃取和合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(105mg)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.70(d,1H),7.35(dt,2H),7.15(dt,1H),6.99(t,1H),4.79(d,2H),4.36-4.19(m,2H),3.89-3.78(m,9H).
(vi)5-((2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸甲酯
将来自上述步骤(v)的产物(105mg,0.286mmol)溶于EtOH(4mL,68.5mmol)。加入Pd-C(类型87L)(30.4mg,0.014mmol)和将反应物在氢气氛下(1巴)搅拌1h。混合物通过硅藻土过滤和固体用乙醇(10mL)洗涤。溶液在二氧化硅上直接浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％(0.7M氨/MeOH)/DCM)，但未得到足够纯度的产物。产物通过硅胶色谱(12g柱,0-5％(0.7M氨/MeOH)/DCM)再次纯化，提供子标题化合物(57mg)，为深红色油。
m/z 338.1(M+H)+(ES+)
(vii)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸甲酯
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)-甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；96mg,0.169mmol)、来自上述步骤(vi)的产物(57mg,0.169mmol)、Pd-175(6.60mg,8.45μmol)和新研磨的碳酸钾(70.0mg,0.507mmol)在DMF(2mL)中通过抽真空和用氮气回充三次脱气。得到的混合物加热至70℃ 2h，之后作为在DMF(2mL)中的溶液经2h逐滴加入另外一部分Pd-175(13.2mg,8.45μmol)。将反应物冷却和真空浓缩。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18)(12g柱,25-100％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(23mg)，为深红色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.90(s,1H),8.87(s,1H),8.32-8.27(m,1H),8.20-8.14(m,1H),8.13-8.06(m,2H),7.90-7.84(m,1H),7.74-7.66(m,2H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.17-7.11(m,1H),7.03(d,1H),6.90(t,1H),6.80(t,1H),6.58(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.77(d,2H),4.03(dd,2H),3.84-3.74(m,7H),3.65(s,3H),3.08(s,3H),1.27(s,9H).
(viii)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸
将来自上述步骤(vii)的产物(22mg,0.025mmol)溶于THF(0.75mL)和MeOH(0.25mL)。加入NaOH(2M水性)(139μL,0.27mmol)和将混合物在室温下搅拌过夜。反应物用AcOH(0.25mL)酸化和真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将含产物的流分合并，用甲酸酸化至约pH 4和真空浓缩，得到标题化合物(7.8mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),8.94(s,1H),8.88(s,1H),8.30(d,1H),8.18(d,1H),8.14-8.07(m,2H),7.89-7.84(m,1H),7.69(ddd,1H),7.60(ddd,1H),7.46(d,1H),7.38(d,1H),7.04(d,1H),7.03(d,1H),6.89(t,1H),6.81(t,1H),6.57(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.71(s,2H),4.02(dd,2H),3.81(s,3H),3.79-3.73(m,2H),3.65(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 856.2(M+H)+(ES+)
实施例27
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)- 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸
(i)5-(羟基甲基)噻吩-3-甲酸甲酯
将5-甲酰基噻吩-2-甲酸甲酯(311mg,1.82mmol)溶于MeOH(4mL)，冷却至0℃和经10分钟分批加入NaBH4(114mg,2.11mmol)。将反应物搅拌2h和加入饱和水性氯化铵(10mL)。水相用DCM(2x 15mL)萃取，通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(209mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04(d,1H),7.40(dt,1H),4.82(dd,2H),3.85(s,3H),1.97(t,1H).
(ii)5-(氯甲基)噻吩-3-甲酸甲酯
将来自上述步骤(i)的产物(209mg,1.21mmol)溶于无水CHCl3(3mL)和冷却至0℃。加入DMF(0.05mL,3.60mmol)和亚硫酰氯(0.26mL,3.6mmol)和将混合物搅拌2h。反应在0℃用MeOH(0.5mL)淬灭。反应物用DCM(15mL)稀释，用盐水(15mL)洗涤，通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(190mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(d,J＝1.4Hz,1H),7.48(dt,J＝1.4,0.8Hz,1H),4.76(d,J＝0.7Hz,2H),3.86(s,3H).
(iii)5-((2-羟基乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸甲酯
在0℃经10min分批向无水乙烷-1,2-二醇(0.22mL,3.99mmol)在DMSO(1.5mL)中的搅拌溶液加入叔丁醇钾(123mg,1.09mmol)。得到的溶液在相同温度下进一步搅拌30min，然后加入TBAI(36.8mg,0.10mmol)。逐滴加入来自上述步骤(ii)的产物(190mg,0.99mmol)在DMSO(0.5mL)中的均质溶液和在室温下搅拌过夜。加入MeOH(3mL)和将反应搅拌过夜。加入冷水(15mL)，水层用乙酸乙酯(2×25mL)萃取和合并的有机层真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％MeOH/DCM)，提供子标题化合物(106mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(d,1H),7.40(dt,1H),4.72-4.62(m,3H),3.79(s,3H),3.55-3.49(m,2H),3.49-3.42(m,2H).
(iv)5-((2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸甲酯
将来自上述步骤(iii)的产物(105mg,0.486mmol)溶于DCM(5mL)和冷却至0℃。逐滴加入NEt3(102μL,0.728mmol)接着MsCl(45.4μL,0.583mmol)，和将混合物放置升温至室温过夜。混合物用DCM(10mL)稀释和有机层用0.1M HCl(10mL)洗涤。水层进一步用DCM(5mL)萃取，合并的有机层通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(115mg)，为浅黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,1H),7.45-7.41(m,1H),4.72(d,2H),4.47-4.26(m,2H),3.79(s,3H),3.75-3.61(m,2H),3.22-3.09(m,3H).
(v)5-((2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸甲酯
将3-甲氧基-5-硝基苯酚(59.0mg,0.349mmol)、来自上述步骤(iv)的产物(110mg,0.366mmol)和碳酸钾(145mg,1.046mmol)悬浮/溶解在DMF(3mL)中和加热至80℃过夜。将反应物冷却和在TBME(20mL)和盐水(20mL)之间分配。水层用TBME(20mL)萃取和合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(92mg)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,1H),7.45–7.40(m,1H),7.34(dt,2H),6.99(t,1H),4.75(d,2H),4.31–4.20(m,2H),3.86(s,3H),3.83–3.80(m,2H),3.79(s,3H).
(vi)5-((2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸甲酯
将来自上述步骤(v)的产物(92mg,0.25mmol)溶于EtOH(4mL,68.5mmol)与水(0.5mL)。加入铁(84mg,1.50mmol)和氯化铵(107mg,2.00mmol)和反应混合物加热至70℃，同时剧烈搅拌2h。将混合物冷却，通过硅藻土过滤和固体用乙醇(10mL)洗涤。真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％(0.7M氨/MeOH)/DCM)，提供子标题化合物(42mg)，为橙色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(d,1H),7.47-7.40(m,1H),5.79-5.73(m,2H),5.69(t,1H),5.05(s,2H),4.73(d,2H),4.06-3.90(m,2H),3.79(s,3H),3.76-3.71(m,2H),3.62(s,3H).
(vii)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸甲酯
将来自上述步骤(vi)的产物(37mg,0.11mmol)、N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；62.4mg,0.110mmol)、Pd-175(4.28mg,5.48μmol)和新研磨的碳酸钾(45.5mg,0.32mmol)在DMF(3mL)中的悬浮液通过3个循环的抽真空和用氮气回充脱气。将反应物加热至70℃ 2h。经2h逐滴加入在DMF(2mL)中的另外一部分Pd-175(8.48mg,10.9μmol)。将反应物真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(12g柱,25-100％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(36mg)，为米色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.90(s,1H),8.87(s,1H),8.36-8.25(m,2H),8.18(d,1H),8.11(d,1H),8.10(s,1H),7.89-7.84(m,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.44-7.40(m,1H),7.38(d,1H),7.03(d,1H),6.90(t,1H),6.79(t,1H),6.57(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.73(d,2H),4.06-3.99(m,2H),3.81(s,3H),3.78(s,3H),3.77-3.72(m,2H),3.65(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
(viii)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸
将来自上述步骤(vii)的产物(33mg,0.038mmol)溶于THF(2mL)和MeOH(0.5mL)。加入NaOH(2M水性,209μL,0.417mmol)和将混合物在室温下搅拌过夜。反应物用AcOH(0.25mL)酸化和真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(24g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将含产物的流分合并，用甲酸酸化至约pH4，真空浓缩。得到的固体再次溶解在最少量的乙醇(约0.3mL)中和逐滴加入水(0.2mL)以析出白色固体。将小管以2000rpm离心5分钟和倾析上清液。得到的固体在55℃真空干燥48h，得到标题化合物，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.68(bs,1H),9.38(s,1H),9.12(bs,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.20(d,1H),8.19(d,1H),8.14–8.07(m,2H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.42-7.33(m,2H),7.03(d,1H),6.90(t,1H),6.80(t,1H),6.57(dd,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.72(d,2H),4.06-3.98(m,2H),3.81(s,3H),3.78-3.71(m,2H),3.65(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 856.2(M+H)+(ES+)
实施例28
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(二氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)1-溴-3-(二氟甲氧基)-5-硝基苯
将3-溴-5-硝基苯酚(460mg,2.11mmol)、2-氯-2,2-二氟乙酸钠(804mg,5.28mmol)和Cs2CO3(1375mg,4.22mmol)在DMF(8mL)中的混合物在100℃加热1h。将混合物在TBME(50mL)和水(50mL)之间分配，水层用TBME(30mL)萃取和合并的有机层用盐水(50mL)洗涤。有机层经真空浓缩，得到子标题化合物(400mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.25(t,1H),7.96(t,1H),7.69-7.62(m,1H),6.60(t,1H).
(ii)3-(二氟甲氧基)-5-硝基苯酚
将KOH(197mg,2.98mmol)和来自上述步骤(i)的产物(200mg,0.746mmol)在水(1.5mL)和二噁烷(1.5mL)中的混合物脱气5分钟，然后加入二-叔丁基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯基]-2-基)膦(17.4mg,0.041mmol)和Pd2(dba)3(17.0mg,0.019mmol)。得到的混合物脱气另外2分钟，然后在氮气氛下在100℃加热3h。将反应物冷却和在1M HCl(20mL)和EtOAc(20mL)之间分配。有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)和真空浓缩，得到子标题化合物(176mg)，为深棕色油。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,2H),6.96(t,1H),6.57(t,1H).
(iii)2-(2-(2-(3-(二氟甲氧基)-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将来自上述步骤(ii)的产物(174mg,0.71mmol)、2-(2-(2-((甲基磺酰基)氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例2(ii)；202mg,0.74mmol)和碳酸钾(295mg,2.13mmol)悬浮/溶解在DMF(4mL)中和加热至60℃ 16h。将反应物冷却和在TBME(20mL)和盐水(20mL)之间分配。水层用TBME(20mL)萃取和合并的有机层用盐水(40mL)洗涤和在硅胶上浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(147mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.68-7.61(m,1H),7.61(t,1H),7.45(t,1H),7.29(t,1H),4.33-4.24(m,2H),4.17-4.06(m,4H),3.83-3.73(m,2H),3.62(s,4H),1.19(t,3H).
m/z 397.1(M+NH4)+(ES+)
(iv)2-(2-(2-(3-氨基-5-(二氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将来自上述步骤(iii)的产物(147mg,0.36mmol)和Pd/C(类型87L,5wt％)(39.2mg,0.02mmol)在EtOH(20mL)中的溶液在2巴H2下搅拌2h。反应物通过硅藻土过滤，用EtOH(10mL)洗涤和混合物真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-5％(0.7M氨/MeOH)/DCM)，提供子标题化合物(89mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.09(t,1H),5.99(t,1H),5.94(t,1H),5.88(t,1H),5.37(s,2H),4.16-4.08(m,4H),4.00-3.95(m,2H),3.74-3.67(m,2H),3.66-3.57(m,4H),1.20(t,3H).
m/z 350.1(M+H)+(ES+)
(v)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(二氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)-甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；128mg,0.22mmol)、来自上述步骤(iv)的产物、Pd-175(8.7mg,0.01mmol)和新研磨的碳酸钾(93mg,0.67mmol)溶解在DMF(1mL)中和通过抽真空和用氮气回充三次脱气。得到的混合物加热至70℃ 2h。反应混合物冷却和直接加载至反相柱上。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18,12g柱,25-100％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(116mg)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(s,1H),9.13(s,1H),9.08(s,1H),8.90(s,1H),8.30(d,1H),8.17(d,1H),8.16-8.09(m,2H),7.90-7.84(m,1H),7.71(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.17(t,1H),7.14(t,1H),7.08(t,1H),7.03(d,1H),6.63(dd,1H),6.26(t,1H),6.08(d,1H),4.14-4.06(m,4H),4.06-3.99(m,2H),3.81(s,3H),3.76-3.70(m,2H),3.64-3.57(m,4H),3.09(s,3H),1.27(s,9H),1.18(t,3H).
m/z 882.3(M+H)+(ES+)
(vi)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(二氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将来自上述步骤(v)的产物(116mg,0.13mmol)溶于THF(3mL)和MeOH(1mL)。加入NaOH(2M水性,723μL,1.447mmol)和将混合物在室温下搅拌过夜。反应物用AcOH(0.25mL)酸化和真空浓缩。粗产物通过色谱在RP Flash C18上纯化(24g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将含产物的流分合并，用甲酸酸化至约pH 4，真空浓缩和得到的沉淀滤出，用水(5mL)洗涤。然后将固体再次溶解在最少量的乙醇(约1mL)中和逐滴加入水(0.5mL)以析出白色固体。然后将小瓶以2000rpm离心5分钟和倾析上清液。得到的固体在55℃真空干燥48h，得到标题化合物(58mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(s,1H),9.09(s,1H),8.93(s,1H),8.30(d,1H),8.18(d,1H),8.14(d,1H),8.11(d,1H),7.86(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.39(d,1H),7.15(t,1H),7.14(t,1H),7.08(t,1H),7.03(d,1H),6.63(dd,1H),6.27(t,1H),6.09(d,1H),4.08-3.94(m,4H),3.81(s,3H),3.76-3.69(m,2H),3.60(s,4H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 854.2(M+H)+(ES+)
实施例29
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-乙炔基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)2-(2-(2-(苄基氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸叔丁酯
经15分钟将氢化钠(4.08g,102mmol)分批加入2-(2-(苄基氧基)乙氧基)乙醇(9.14mL,51.0mmol)在THF(200mL)中的冰浴冷却的溶液。将反应物搅拌1h，之后经1h逐滴加入2-溴乙酸叔丁酯(8.97mL,61.1mmol)/THF(50mL)。将反应物在冰浴温度下搅拌3h和用氯化铵(50mL)淬灭。加入TBME(250mL)和有机层用盐水(2x 200mL)洗涤。有机层在二氧化硅上浓缩和粗产物通过硅胶色谱纯化(220g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(1.95g)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.43-7.20(m,5H),4.50(s,2H),3.99(s,2H),3.66-3.47(m,8H),1.42(s,9H).
(ii)2-(2-(2-羟基乙氧基)乙氧基)乙酸叔丁酯
将来自上述步骤(i)的产物(1.83g,5.90mmol)溶于甲醇(30mL)和加入Pd-C(类型87L,5wt.％,0.627g,0.29mmol)。混合物在室温下在4巴氢气下搅拌16h。反应混合物通过硅藻土过滤，用EtOH(50mL)洗涤固体和真空浓缩，得到子标题化合物(1.23g)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.57(t,1H),3.99(s,2H),3.60-3.51(m,4H),3.51-3.40(m,4H),1.43(s,9H).
(iii)2-(2-(2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸叔丁酯
将来自上述步骤(ii)的产物(1.23g,5.58mmol)溶于DCM(30mL)和在冰浴中冷却。逐滴加入EtN3(1.16mL,8.38mmol)，接着MsCl(0.52mL,6.70mmol)，和混合物放置升温至室温过夜。混合物用DCM(10mL)稀释和有机层用0.1M HCl(10mL)洗涤。混合物通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(1.83g)，为浅黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.35-4.28(m,2H),4.00(s,2H),3.73-3.65(m,2H),3.64-3.54(m,4H),3.18(s,3H),1.43(s,9H).
(iv)2-(2-(2-(3-溴-5-硝基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸叔丁酯
将3-溴-5-硝基苯酚(0.626g,2.87mmol)、来自上述步骤(iii)的产物(1g,3.02mmol)和碳酸钾(1.191g,8.62mmol)悬浮/溶解在3mL DMF中和加热至80℃过夜。将反应物冷却和在TBME(20mL)和盐水(20mL)之间分配。水层用TBME(20mL)萃取和合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(965mg)，为黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04-7.89(m,1H),7.79-7.72(m,1H),7.70(dd,1H),4.32-4.22(m,2H),3.99(s,2H),3.82-3.72(m,2H),3.66-3.54(m,4H),1.42(s,9H).
m/z 439.1(M+NH4)+(ES+)
(v)2-(2-(2-(3-硝基-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)苯氧基)乙氧基)乙氧基) 乙酸叔丁酯
将Pd(PPh)4(86mg,0.075mmol)加入至来自上述步骤(iv)的产物(314mg,0.747mmol)、CuI(7.11mg,0.037mmol)和乙炔基三异丙基硅烷(0.268mL,1.195mmol)在三乙基胺(1mL)和DMF(3mL)中的脱气悬浮液。混合物在85℃(模块温度)加热1h，然后冷却和在硅胶上直接浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(24g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(255mg)，为浅黄色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82-7.71(m,2H),7.47-7.45(m,1H),4.34-4.23(m,2H),3.98(s,2H),3.81-3.73(m,2H),3.66-3.54(m,4H),1.41(s,9H),1.19-1.03(m,21H).
(vi)2-(2-(2-(3-氨基-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)苯氧基)乙氧基)乙氧基) 乙酸叔丁酯
将来自上述步骤(v)的产物(255mg,0.489mmol)溶于EtOH(6mL)和H2O(0.75mL)。加入铁(164mg,2.93mmol)和氯化铵(209mg,3.91mmol)和烧瓶抽真空和用氮气回充三次。将反应混合物加热至80℃，同时剧烈搅拌2h。将混合物冷却，通过硅藻土过滤和固体用乙醇(10mL)洗涤。得到的粗产物溶于DCM(20mL)，用水洗涤(20mL)，通过相分离器和真空浓缩，得到子标题化合物(203mg)，为橙色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.30(dd,1H),6.17(t,1H),6.14(dd,1H),5.24(s,2H),4.03-3.96(m,4H),3.72-3.67(m,2H),3.60(s,4H),1.42(s,9H),1.09(s,21H).
m/z 492.3(M+H)+(ES+)
(vii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯 基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)苯氧基)乙氧 基)-乙氧基)乙酸叔丁酯
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)-甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；231mg,0.407mmol)、来自上述步骤(vi)的产物(200mg,0.407mmol)、Pd-175(15.8mg,0.02mmol)和新研磨的碳酸钾(169mg,1.220mmol)溶解/悬浮在DMF(3mL)中和通过抽真空和用氮气回充三次脱气。得到的混合物加热至70℃2h。反应混合物冷却和在TBME(30mL)和水(30mL)之间分配。有机层用水洗涤(20mL)和真空浓缩，得到子标题化合物(152mg)，为棕色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.13(s,1H),9.00(s,1H),8.91(s,1H),8.30(d,1H),8.18(d,1H),8.15-8.07(m,2H),7.89-7.83(m,1H),7.73-7.68(m,1H),7.63-7.58(m,1H),7.56(t,1H),7.39(d,1H),7.17(t,1H),7.03(d,1H),6.61(dd,1H),6.48(dd,1H),6.07(d,1H),4.10-4.01(m,2H),3.99(s,2H),3.81(s,3H),3.76-3.68(m,2H),3.60(s,4H),3.09(s,3H),1.40(s,9H),1.27(s,9H),1.16-1.02(m,21H).
m/z 1024.3(M+H)+(ES+)
(viii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯 基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-乙炔基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将来自上述步骤(vii)的产物(152mg,0.14mmol)溶于THF(4mL)和加入TBAF(1M，在THF中)(156μL,0.15mmol)。将反应物在室温下搅拌60h，然后在DCM(40mL)和水(40mL)之间分配。有机层用盐水(50mL)洗涤，通过相分离器和真空浓缩。将粗材料(100mg)溶于DCM(1mL)和加入TFA(178μL,2.30mmol)。将反应物搅拌16h和加入另一部分TFA(178μL,2.30mmol)。真空除去挥发物，和粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18,12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。产物通过制备型HPLC进一步纯化(碱性,Waters X-Bridge Prep-C18,5μm,19x50mm柱,35-65％MeCN/水)，得到标题化合物(6mg)，为浅黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,1H),9.08(s,1H),9.04(s,1H),8.33(d,1H),8.17(d,J＝2.3Hz,1H),8.15(d,1H),8.10(d,1H),7.86(dd,1H),7.69(ddd,1H),7.60(ddd,1H),7.38(d,1H),7.32(t,1H),7.26(s,1H),7.02(d,1H),6.63(dd,1H),6.51(dd,1H),6.11(d,1H),4.06(s,1H),3.96(d,2H),3.84–3.78(m,4H),3.70(dd,2H),3.57(s,4H),3.09(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 812.2(M+H)+(ES+)
实施例30
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((5-氧代-4,5-二 氢-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲 基)苯基)甲烷磺酰胺
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-(氰基甲氧基)乙氧基)乙氧基)-5-甲氧基苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷-磺酰胺(参见上述实施例23(vi)；79mg,0.01mmol)在EtOH(2mL)和羟基胺(50％，在水中)(6.0μL,0.198mmol)中的悬浮液加热至75℃和放置搅拌过夜。除去溶剂和使残余物与甲苯(2x 1mL)共沸，提供澄清油；m/z 832.1(M+H)+(ES+)。将粗产物溶于DMF(2.5mL)和冷却至0℃。加入吡啶(8.8μl,0.109mmol)，接着加入氯化甲酸异丁酯(0.013mL,0.099mmol)和得到的溶液在0℃搅拌30min，然后在室温下搅拌20min。反应用水(10mL)淬灭和用EtOAc(3x 5mL)萃取。合并的有机萃取物用盐水(5mL)洗涤，通过疏水玻璃料和真空浓缩，得到棕色油；m/z 932.5(M+H)+(ES+)。将该粗材料溶于EtOH(2.5mL)和饱和水性NaHCO3(0.5mL)的混合物和在65℃搅拌过夜。将反应物过滤和用DMF(1mL)稀释。在空气流下除去EtOH，然后粗反应混合物通过色谱在Companion上纯化(RP Flash C18)(12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至约7。真空除去溶剂，得到深棕色树胶。其通过制备型HPLC再次纯化(Waters,碱性(0.1％碳酸氢铵),碱性,Waters X-Bridge Prep-C18,5μm,19x50mm柱,30-60％MeCN/水)和将富产物流分冷冻干燥，提供标题化合物，为无色树胶(5mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(s,1H),9.13(s,1H),8.91(s,1H),8.88(s,1H),8.29(d,1H),8.19(d,1H),8.11(d,1H),8.10(d,1H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.03(d,1H),6.89(t,1H),6.80(t,1H),6.58(d,1H),6.53(s,1H),6.08(d,1H),6.04(t,1H),4.34(s,2H),4.03-3.91(m,2H),3.81(s,3H),3.74-3.68(m,2H),3.65(s,3H),3.63-3.54(m,4H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 857.7(M+H)+(ES+)
实施例31
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸,钠盐
方法1
在氮气下向5L烧瓶加入IPA/水(90:10；2.56L,12倍体积)，将溶剂加热至55℃，在此温度下经15分钟将2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸(参见上述实施例3；213.9g,0.261mol)逐渐加入。搅拌另外7分钟后获得均匀溶液。向该溶液(粉色)加入碳酸氢钠(1.05当量；0.274mol,274mL)，保持温度在53℃。经20分钟将溶液冷却至50℃和用2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸的钠盐(1.0g)接晶种；维持晶种和以10℃/小时继续冷却至25℃，之后经2小时加入8倍体积的IPA(1.71L)。在此温度下将该批次搅拌18小时，然后冷却至0℃和熟化1.5小时，然后通过过滤分离。使用批次液进行滤饼和容器漂洗，将滤饼放干，和固体在50℃真空干燥18小时。对于作为淡红色固体的标题化合物，获得81％的收率(177.9g)；HPLC纯度以99.24面积％报告和质子NMR表明批次符合0.58％wt IPA和0.55％wt水的结构(溶剂分别通过HRGC和KF确定)。将该批次在50℃在真空下干燥，将IPA水平降至2,238ppm(0.22％)。通过离子色谱，钠含量为2.5％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.95(s,1H),9.24(s,1H),8.93(s,1H),8.38(d,1H),8.08–8.12(m,3H),7.83(d,1H),7.55–7.67(m,2H),7.35(d,1H),7.01(d,1H),6.65–6.72(m,2H),6.60(dd,1H),6.11(d,1H),6.00(t,1H),3.77–3.84(m,5H),3.63–3.68(m,7H),3.53(s,4H),3.05(s,3H),1.25(s,9H).
方法2
将2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯(参见上述实施例3(iii)；毛重413g(含3.14％乙酸乙酯,相当于400g活性物,472.8mmol,1eq.)与丙酮/水(800mL和800mL,2vol和2vol)和NaOH(37.8g,945.7mmol,2eq.)混合和在22℃搅拌过夜。使用AcOH(26.6mL,465mmol,0.9836eq.)将反应酸化至pH 7.07(pH范围为6.9-7.3是可接受的)，之后加入IPA(4000mL,10vol)(尽管12倍体积的IPA显示得到类似的收率和纯度)。经1h将得到的混合物冷却至10℃和搅拌1h(对于更大规模制备，混合物可改为在7℃搅拌过夜)，然后过滤，提供粗产物(329g)，83％收率(对此：通过LC测定纯度为98.9％，含<0.1％原材料；XRD和DSC分析表明通过上述方法1产生的形式；和NMR分析表明1.3％NaOAc和0.4％IPA)。在22℃将粗产物(329g,392mmol,1eq.)在8vol的15％水:IPA(395mL水:2237mL IPA)中浆化2h。得到的混合物然后加热至45℃ 2h，之后冷却至30℃，然后过滤。这以从粗产物94％回收率得到标题化合物(315g)，对此NaOAc含量为0.39％和IPA为0.36％。反应的总体收率是79％。
实施例32
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
(i)3-羟基-5-(三氟甲氧基)苯甲酸
将3-溴-5-(三氟甲氧基)苯甲酸(3200mg,11.23mmol)和NaOH(2520mg,44.9mmol)在水(30mL)和二噁烷(30mL)中的溶液脱气5分钟，然后加入Pd2(dba)3(206mg,0.225mmol)和二-叔丁基(2',4',6'-三异丙基-[1,1'-联苯基]-2-基)膦(215mg,0.505mmol)。得到的混合物脱气另外2分钟，然后在氮气氛下在100℃加热2.5h。混合物用水稀释(150mL)和用乙醚(3x 75mL)洗涤。水层然后用HCl(1M,33mL)酸化至～pH 3和用乙酸乙酯(3x 75mL)萃取。合并的有机层用饱和盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤和在减压下浓缩，得到黄色油。将该油再次溶解在乙醚(10mL)中和用异己烷(30mL)稀释。得到的沉淀通过过滤收集和用异己烷(10mL)洗涤，得到子标题化合物(1.71g)，为褐色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.34(bs,1H),10.57(bs,1H),7.36(dd,1H),7.28-7.20(m,1H),6.99-6.90(m,1H).
(ii)3-(2-(2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(三氟甲氧基) 苯甲酸苄酯
将来自上述步骤(i)的产物(210mg,0.945mmol)和碳酸钾(392mg,2.84mmol)溶解/悬浮在DMF(1.25mL)中和加入苄基溴(0.112mL,0.945mmol)。混合物在室温下搅拌4h。加入碳酸钾(392mg,2.84mmol)、DMF(4mL)和2-(2-(2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸叔丁酯(参见上述实施例29(iii)；310mg,1.040mmol)，和反应加热至70℃ 16h。将反应物冷却和在TBME(50mL)和水(50mL)之间分配。水层用DCM(50mL)萃取，合并的有机层用盐水(50mL)洗涤和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(12g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(278mg)，为无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.52(dd,1H),7.50-7.45(m,2H),7.45-7.34(m,4H),7.34-7.29(m,1H),5.38(s,2H),4.28-4.17(m,2H),3.98(s,2H),3.82-3.72(m,2H),3.65-3.55(m,4H),1.40(s,9H).
m/z 532.2(M+NH4)+(ES+)
(iii)3-(2-(2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5-(三氟甲氧基) 苯甲酸
将来自上述步骤(ii)的产物(278mg,0.540mmol)和Pd-C(57.5mg,0.027mmol)溶解/悬浮在EtOH(10mL)中和在H2(2巴)气氛下搅拌16h。反应物过滤和真空浓缩，得到子标题化合物(214mg)，为玻璃状固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.51(s,1H),7.48(dd,1H),7.42-7.34(m,1H),7.26-7.20(m,1H),4.26-4.18(m,2H),3.99(s,2H),3.82-3.71(m,2H),3.66-3.54(m,4H),1.41(s,9H).
(iv)2-(2-(2-(3-(((苄基氧基)羰基)氨基)-5-(三氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)-乙 氧基)乙酸叔丁酯
将NEt3(0.071ml,0.513mmol)加入至苄醇(0.355mL,3.42mmol)、来自上述步骤(iii)的产物(145mg,0.342mmol)和二苯基磷酰基叠氮化物(0.081mL,0.376mmol)在甲苯(2mL,0.342mmol)中的搅拌溶液。将反应物加热至80℃ 2h和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(4g柱,0-50％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(53mg)，为无色油。
m/z 547.2(M+NH4)+(ES+)
(v)2-(2-(2-(3-氨基-5-(三氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸叔丁酯
将来自上述步骤(iv)的产物(50mg,0.094mmol)和Pd-C(20.1mg,9.44μmol)溶解/悬浮在EtOH(10mL)中和在H2(2巴)气氛下搅拌16h。将反应物冷却，通过硅藻土过滤，用EtOH(10mL)洗涤和真空浓缩，得到子标题化合物(38mg)，为红色油。
m/z 396.1(M+H)+(ES+)
(vi)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)- 脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)-乙酸叔 丁酯
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)-甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；54.7mg,0.096mmol)、来自上述步骤(v)的产物(38mg,0.096mmol)、Pd-175(7.51mg,9.61μmol)和新研磨的碳酸钾(39.8mg,0.288mmol)通过抽真空和用氮气回充三次脱气。得到的混合物加热至70℃ 2h。反应混合物冷却和直接注入到RP柱上。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18,12g柱,25-100％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(52mg)，为浅黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(s,1H),9.19(s,1H),9.14(s,1H),8.91(s,1H),8.30(d,1H),8.18(d,1H),8.16(d,1H),8.12(d,1H),7.86(dd,1H),7.71(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.40(d,1H),7.31(s,1H),7.28(t,1H),7.03(d,1H),6.66(dd,1H),6.40(t,1H),6.07(d,1H),4.07-4.02(m,2H),3.98(s,2H),3.81(s,3H),3.76-3.71(m,2H),3.59(s,4H),3.10(s,3H),1.40(s,9H),1.27(s,9H).
(vii)2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基) 脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸
将来自上述步骤(vi)的产物(50mg,0.054mmol)溶于THF(1mL)和加入NaOH(2M aq,269μL,0.539mmol)。混合物搅拌过夜，然后用AcOH(0.25mL)酸化至pH4和真空浓缩。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18,4g柱,35-65％MeCN/10mM碳酸氢铵)，用甲酸(0.6mL)将含产物的流分酸化至pH4和真空浓缩，提供标题化合物(20mg)，为浅米色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,1H),9.23(s,1H),9.02(s,1H),8.33(d,1H),8.17(d,1H),8.16(d,1H),8.11(d,1H),7.86(dd,1H),7.69(ddd,J＝8.4,1H),7.60(ddd,1H),7.39(d,1H),7.33(s,1H),7.24(t,1H),7.03(d,1H),6.65(dd,1H),6.42–6.39(m,1H),6.10(d,1H),4.03(dd,2H),3.84(s,2H),3.81(s,3H),3.75–3.68(m,2H),3.58(s,4H),3.09(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 872.2(M+H)+(ES+)
实施例33
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((3-氧代-2,3-二 氢异噁唑-5-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)苯 基)甲烷磺酰胺
将4-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)-脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-3-氧代丁酸乙酯(参见上述实施例18(ii)；359mg,0.404mmol)在MeOH(3.5mL)和水(0.5mL)中的浆液冷却至0℃和加入NaOH(2M aq)(404μL,0.809mmol)。得到的溶液在0℃搅拌10min。制备羟基胺盐酸盐(84mg,1.213mmol)在MeOH(200μL)中的溶液和冷却至0℃。将NaOH(2M aq)(606μL,1.213mmol)加入至羟基胺溶液，和在0℃搅拌10min。羟基胺溶液然后加入至烯醇化物的溶液和在0℃搅拌2h。该溶液然后在75℃逐滴加入至浓HCl(100μL,3.29mmol)，和在75℃搅拌1h。除去加热和用NaOH(2M水性)将pH调节至约7和用水稀释(20mL)。水层用EtOAc(3x 10mL)萃取和合并的有机萃取物用20％v/v盐水(10mL)洗涤。有机层通过疏水玻璃料和真空浓缩。粗产物通过制备型HPLC纯化(Waters,碱性(0.1％碳酸氢铵),碱性,Waters X-BridgePrep-C18,5μm,19x50mm柱,35-65％MeCN/水)和将富产物流分冷冻干燥，提供标题化合物(38mg)，为浅黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(s,1H),8.94(s,1H),8.70(s,1H),8.34(d,1H),8.13-8.05(m,2H),7.84(d,1H),7.67(ddd,1H),7.63-7.54(m,2H),7.36(d,1H),7.03(d,1H),6.91-6.84(m,2H),6.56(dd,1H),6.09(d,1H),6.04(t,1H),4.05(s,1H),4.00-3.94(m,2H),3.84(s,1H),3.78(s,3H),3.73-3.67(m,2H),3.66(s,3H),3.59-3.54(m,2H),3.52-3.47(m,2H),2.61(s,3H),1.22(s,9H).
m/z 857.2(M+H)+(ES+)
实施例34
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基) 萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲 酸
(i)5-(羟基甲基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯
在0℃将硼氢化钠(0.249g,6.58mmol)加入至5-甲酰基-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(1.1g,6.58mmol)在MeOH(50mL)和THF(15mL)的混合物中的溶液和得到的溶液在0℃搅拌2h。反应用饱和水性氯化铵(50mL)缓慢淬灭和白色固体析出。将溶液过滤，和滤液用DCM(2x 50mL)萃取。真空除去溶剂。粗材料溶于DCM(2mL)和通过二氧化硅塞，用5％MeOH/DCM(200mL)洗涤。真空除去溶剂，提供子标题化合物，为棕色油(1.12g)。
m/z 170.6(M+H)+(ES+)
(ii)5-((2-(苄基氧基)乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯
在氮气下在0℃经5min将NaH(60％，在油中,213mg,5.32mmol)分两批加入来自上述步骤(i)的化合物(600mg,3.55mmol)、((2-溴乙氧基)甲基)苯(0.6mL,3.79mmol)和碘化钠(532mg,3.55mmol)在无水DMF(50mL)中的溶液,和得到的溶液在室温下搅拌过夜。用MeOH(3mL)将反应淬灭，然后用20％v/v盐水(100mL)稀释。水层用EtOAc(3x 100mL)萃取，和合并的有机萃取物用20％v/v盐水(50mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(40g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(213mg)，为稀薄的无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.39-7.24(m,5H),6.80(d,1H),6.15(d,1H),4.51(s,2H),4.48(s,2H),3.83(s,3H),3.74(s,3H),3.65-3.49(m,4H).
m/z 304.1(M+H)+(ES+)
(iii)5-((2-羟基乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯
将在50％糊状物/水中的Pd/C 10％(类型39)(14.94mg,0.140mmol)加入至来自上述步骤(ii)的化合物(213mg,0.702mmol)在EtOH(4mL)中的溶液和得到的浆液在氢气下以1巴压力搅拌4h。反应物通过硅藻土过滤，用EtOAc洗涤(20mL)和除去溶剂，提供子标题化合物(137mg)，为稀薄的无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.80(d,1H),6.16(d,1H),4.63(t,1H),4.49(s,2H),3.84(s,3H),3.74(s,3H),3.54-3.47(m,2H),3.47-3.41(m,2H).
m/z 236.1(M+Na)+(ES+)
(iv)5-((2-(3-甲氧基-5-硝基苯氧基)乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲 酯
在0℃将DIAD(339μL,1.745mmol)加入至来自上述步骤(iii)的化合物(310mg,1.454mmol)、3-甲氧基-5-硝基苯酚(295mg,1.745mmol)和三苯基膦(458mg,1.745mmol)在无水THF(15mL)中的溶液，和得到的红色溶液在室温下搅拌过夜。黄色溶液用EtOAc(30mL)稀释和用水洗涤(20mL)。将有机层干燥(MgSO4)和真空浓缩。粗产物通过Companion色谱纯化(40g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，得到需要的Mitsunobu产物，为黄色固体。将产物溶于EtOAc(50mL)和相继用NaOH(2M水性,2x 50mL)、水(50mL)和20％v/v盐水(50mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)和真空浓缩，提供子标题化合物(638mg)，为浅黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.33(m,2H),6.96(t,1H),6.79(d,1H),6.18(d,1H),4.57(s,2H),4.30-4.17(m,2H),3.85(s,3H),3.83(s,3H),3.79-3.74(m,2H),3.73(s,3H).
m/z 387.1(M+Na)+(ES+)
(v)5-((2-(3-氨基-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲 酯
将铁粉(978mg,17.51mmol)，接着氯化铵(37.5mg,0.700mmol)加入至来自上述步骤(iv)的化合物(638mg,0.841mmol)在EtOH(13mL)、THF(5mL)和水(2mL)中的溶液和得到的浆液加热至回流2h。将反应物冷却和通过硅藻土过滤，用EtOAc洗涤(2x 20mL)。真空除去溶剂。粗产物通过硅胶色谱纯化(24g柱,0-100％EtOAc/异己烷)，提供子标题化合物(238mg)，为稠厚的无色油。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.80(d,1H),6.18(d,1H),5.75(m,2H),5.67(t,1H),5.05(s,2H),4.55(s,2H),3.99-3.93(m,2H),3.85(s,3H),3.74(s,3H),3.71-3.65(m,2H),3.62(s,3H).
m/z 335.0(M+H)+(ES+)
(vi)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯- 2-甲酸甲酯
将N-(5-(叔丁基)-3-(3-(4-((2-氯吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺(参见WO 2014/162126；405mg,0.712mmol)、来自上述步骤(v)的化合物(238mg,0.712mmol)、新研磨的碳酸钾(295mg,2.135mmol)在DMF(3mL)中的悬浮液抽真空，用氮气回充3次。混合物在氮气下加热至40℃和加入Pd-175(13.90mg,0.018mmol)。将反应混合物在75℃加热2h。然后将反应冷却和过滤。滤液在EtOAc(50mL)和20％v/v盐水(50mL)之间分配。有机层通过疏水玻璃料，然后浓缩。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18)(24g柱,15-80％MeCN/10mM碳酸氢铵)，提供子标题化合物(350mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.18(d,1H),8.11(d,1H),8.10(d,1H),7.87(dt,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.03(d,1H),6.89(t,1H),6.86-6.77(m,2H),6.58(dd,1H),6.17(d,1H),6.08(d,1H),6.02(t,1H),4.55(s,2H),4.07-3.95(m,2H),3.84(s,3H),3.81(s,3H),3.73(s,3H),3.72-3.69(m,2H),3.65(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 867.3(M+H)+(ES+)
(vii)5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲 基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯- 2-甲酸
将NaOH(2M aq)(606μl,1.211mmol)加入至来自上述步骤(vi)的化合物(350mg,0.404mmol)在THF(3mL)和MeOH(1.2mL)中的溶液和得到的溶液在室温下搅拌8h。加入另一部分NaOH(2M aq)(606μL,1.211mmol)和得到的溶液在室温下搅拌过夜。溶液用AcOH(139μL,2.422mmol)淬灭和真空除去溶剂。粗产物通过色谱纯化(RP Flash C18)(12g柱,15-75％MeCN/10mM碳酸氢铵)。将富产物流分合并和用甲酸将pH调节至7。真空除去挥发性溶剂，在此期间固体析出。其通过过滤收集，用水洗涤(2x 2mL)和固体在40℃真空干燥过夜，提供标题化合物(165mg)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.19(s,1H),9.38(s,1H),9.13(s,1H),8.91(s,1H),8.87(s,1H),8.29(d,1H),8.19(d,1H),8.12(d,1H),8.10(d,1H),7.87(dd,1H),7.70(ddd,1H),7.61(ddd,1H),7.38(d,1H),7.03(d,1H),6.90(t,1H),6.79(t,1H),6.74(d,1H),6.57(dd,1H),6.13(d,1H),6.08(d,1H),6.03(t,1H),4.53(s,2H),4.06-3.93(m,2H),3.84(s,3H),3.81(s,3H),3.75-3.68(m,2H),3.65(s,3H),3.10(s,3H),1.27(s,9H).
m/z 853.0(M+H)+(ES+)
生物试验：实验方法
酶结合测定法(Kinomescan)
本文公开的化合物的激酶结合活性可使用专有的测定法测定，其测量与固定化配体的活性位点定向的竞争结合(Fabian,M.A.等,Nature Biotechnol.,2005,23:329-336)。这些测定法可通过DiscoverX(以前的Ambit；San Diego,CA)进行。通过与试验化合物孵育产生的百分比抑制可相对于非-抑制对照计算。
酶抑制测定法
本文公开的化合物的酶抑制活性通过FRET使用用供体和受体荧光团(Z-LYTE,Invitrogen Ltd.,Paisley,UK)标记的合成肽测定。
p38 MAPKα酶抑制
以下两个测定法变型可用于测定p38 MAPKα抑制。
方法1
试验化合物针对p38 MAPKα同种型(MAPK14:Invitrogen)的抑制活性通过测定下游分子MAPKAP-K2的活化/磷酸化水平间接评价。将p38 MAPKα蛋白(80ng/mL,2.5μL)与试验化合物(2.5μL，4μg/mL、0.4μg/mL、0.04μg/mL或0.004μg/mL)在室温下混合2小时。然后加入p38α无活性靶MAPKAP-K2(Invitrogen,600ng/mL)和FRET肽(8μM；MAPKAP-K2的磷酸化靶)的混合溶液(2.5μL)，然后激酶反应通过加入ATP(40μM,2.5μL)而开始。将混合物在室温下孵育1小时。加入显色剂(蛋白酶,5μL)后1小时，在荧光微板阅读器(Flash,ThermoFisher Scientific)上检测。
方法2
该方法按照与上文方法1相同的步骤，但使用更高浓度的p38 MAPKα蛋白(2.5μL200ng/mL蛋白代替2.5μL 80ng/mL蛋白)，与试验化合物(以1μg/mL、0.1μg/mL、0.01μg/mL或0.001μg/mL试验)混合。
p38 MAPKγ酶抑制
本发明的化合物对p38MAPKγ(MAPK12:Invitrogen)的抑制活性以与上文描述的类似方式评价。将酶(800ng/mL,2.5μL)与试验化合物(2.5μL 4μg/mL、0.4μg/mL、0.04μg/mL,或0.004μg/mL)在室温下孵育2小时。然后加入FRET肽(8μM,2.5μL)和合适的ATP溶液(2.5μL,400μM)至酶/化合物混合物，将全部孵育1小时。加入显色剂(蛋白酶,5μL)后1小时，在荧光微板阅读器(Flash,Thermo Scientific)上检测。
c-Src和Syk酶抑制
本发明的化合物对c-Src和Syk酶(Invitrogen)的抑制活性以与上文描述的类似方式评价。将相关的酶(分别为3000ng/mL或2000ng/mL，2.5μL)与试验化合物(1μg/mL、0.1μg/mL、0.01μg/mL或0.001μg/mL，各自2.5μL)在室温下孵育2小时。然后加入FRET肽(8μM,2.5μL)和合适的ATP溶液(2.5μL,800μM对于c-Src，和60μM ATP对于Syk)至酶/化合物混合物，将混合物孵育1小时。加入显色剂(蛋白酶,5μL)后1小时，在荧光微板阅读器(Flash,ThermoFisher Scientific)上检测。
GSK3α酶抑制
以下两个测定法变型可用于测定GSK 3α抑制。
方法1
本发明的化合物对GSK 3α酶同种型(Invitrogen)的抑制活性通过测定靶肽的活化/磷酸化水平来评价。将GSK3-α蛋白(500ng/mL,2.5μL)与试验化合物(2.5μL4μg/mL、0.4μg/mL、0.04μg/mL或0.004μg/mL)在室温下混合2小时。然后加入FRET肽(8μM,2.5μL)(其为GSK3α的磷酸化靶)和ATP(40μM,2.5μL)至酶/化合物混合物，将得到的混合物孵育1小时。加入显色剂(蛋白酶,5μL)后1小时，在荧光微板阅读器(Flash,ThermoFisherScientific)中检测。
在所有情况下，位点特异性蛋白酶仅切割非磷酸化肽和消除FRET信号。各反应的磷酸化水平使用香豆素发射(供体)与荧光素发射(受体)的比率来计算，其中高比率表示高磷酸化而低比率表示低磷酸化水平。各反应的抑制百分比相对于非抑制对照计算，然后自浓度反应曲线计算50％抑制浓度(IC50值)。
方法2
该方法按照与上文方法1相同的步骤，但使用试验化合物(105分钟代替2小时)与GSK3-α蛋白的更短的混合时间。此外，使用的试验化合物的浓度为10μg/mL、1μg/mL、0.1μg/mL或0.01μg/mL。
细胞测定法
本发明的化合物使用以下测定法的一个或多个进行研究。
(a)Jurkat细胞的p38 MAPKα和Lck的抑制
将Jurkat T细胞在饥饿培养基(RPMI 1640+5％FBS)中培养24h，然后进行实验。收获细胞，以10x106个细胞/mL再悬浮于饥饿培养基，然后以1x106个细胞/孔置于圆底96孔板。刺激前2h，加入系列稀释的试验化合物(1％最终DMSO浓度)。与化合物预孵育后，细胞用H2O2(0.05％最终)刺激5分钟。通过在2000rpm离心(3分钟，4℃)终止反应，然后除去上清液，添加100μL的冷却的固定/透化溶液(BD Fix/Perm kit#554714)。将板在4℃孵育20分钟，然后离心和用提供的1x洗涤培养基(BD Fix/Perm kit#554714)洗涤。细胞针对CellSignalling Technology(9211s)提供的磷酸-p38α(T180/182)或R&D(MAB7500)提供的磷酸-Lck(Y394)染色。将抗体在洗涤培养基中稀释至5μg/mL(R&D)或以1:200(CellSignalling Technology)稀释，然后在4℃在暗处孵育1h。用冰冷的洗涤缓冲液3次重复洗涤后，以1:1000的稀释度加入第二抗体(抗-兔-FITC#F1362或抗-小鼠-FITC#F2883，两者都来自Sigma)和在4℃在暗处孵育1h。然后将细胞在冷的洗涤缓冲液中洗涤3次，接着最后在冷的PBS中洗涤，重悬于150μL冷的PBS。通过流式细胞术使用BD Accuri C6分析细胞。
(aa)在d-U937细胞中LPS-诱导的TNFα/IL-8释放
U937细胞(人单核细胞细胞系)通过与佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA；100ng/mL)孵育48-72小时而分化成巨噬细胞型细胞。将细胞与终浓度的试验化合物预孵育2小时，然后用0.1μg/mL的LPS(来自大肠杆菌:0111:B4,Sigma)刺激4小时。收集上清液用于通过夹心ELISA(Duo-set,R&D systems)测定TNFα和IL-8浓度。TNFα产生的抑制计算为在各浓度的试验化合物下通过10μg/mL的BIRB796实现的抑制与溶媒对照相比的百分比。相对50％有效浓度(REC50)从得到的浓度反应曲线测定。IL-8产生的抑制在各浓度的试验化合物下通过与溶媒对照比较而计算。50％抑制浓度(IC50)自得到的浓度反应曲线测定。
(b)在PBMC细胞中LPS-诱导的TNFα/IL-8释放
使用密度梯度(Lymphoprep,Axis-Shield Healthcare)从全血分离来自健康受试者的外周血单核细胞(PBMC)。将PBMC接种在96孔板中和用所需浓度的化合物处理2小时，然后在正常组织培养条件(37℃，5％CO2)下加入1ng/mL LPS(大肠杆菌0111:B4，来自SigmaAldrich)达24小时。收获上清液用于通过夹心ELISA(Duo-set,R&D systems)测定IL-8和TNFα浓度，在荧光微板阅读器(Flash,ThermoFisher Scientific)上读数。50％抑制IL-8和TNFα产生下的浓度(IC50)从剂量反应曲线计算。
(c)在CD3/CD28刺激的PBMC细胞中IL-2和IFNγ释放
来自健康受试者的PBMC自全血使用密度梯度(Lymphoprep,Axis-ShieldHealthcare)分离。将细胞加入用CD3/CD28单克隆抗体的混合物(分别为0.3μg/mLeBioscience和3μg/mL BD Pharmingen)预包被的96孔板。然后将所需浓度的化合物加入各孔和在正常组织培养条件下将板放置3天。收获上清液，通过夹心ELISA(Duo-set,R&DSystem)测定IL-2和IFNγ释放。IC50从剂量反应曲线测定。
(d)在HT29细胞中IL-1β-诱导的IL-8释放
将HT29细胞(人结肠腺癌细胞系)放置在96孔板中(24小时)和用所需浓度的化合物预处理2小时，然后加入5ng/mL的IL-1β(Abcam)达24小时。收获上清液用于通过夹心ELISA(Duo-set,R&D System)定量IL-8。IC50从剂量反应曲线测定。
(e)在原代巨噬细胞中LPS-诱导的IL-8和TNFα释放
来自健康受试者的PBMC从全血使用密度梯度(Lymphoprep,Axis-ShieldHealthcare)分离。将细胞孵育2小时，通过洗涤除去非粘附的细胞。为将细胞分化成巨噬细胞，将它们与5ng/mL的GM-CSF(Peprotech)一起在正常组织培养条件下孵育7天。然后将所需浓度的化合物加入细胞进行2小时预处理，然后用10ng/mL LPS刺激24小时。收获上清液，IL-8和TNFα释放通过夹心ELISA(Duo-set,R&D System)测定。IC50从剂量反应曲线测定。
(f)在BEAS2B细胞中聚I:C-诱导的ICAM-1表达
聚I:C作为简单的RNA病毒模拟物用于这些研究。将聚I:C-Oligofectamine混合物(1μg/mL聚I:C,±2％Oligofectamine,25μL；分别为Invivogen Ltd.,San Diego,CA和Invitrogen,Carlsbad,CA)转染至BEAS2B细胞(人支气管上皮细胞,ATCC)。细胞用终浓度的试验化合物预孵育2小时，在细胞表面上的ICAM1表达水平通过基于细胞的ELISA测定。在聚I:C转染后18小时的时间点，细胞用含4％甲醛的PBS固定，然后内源过氧化物酶通过加入含0.1％叠氮化钠和1％过氧化氢的洗涤缓冲液(100μL,含0.05％Tween的PBS:PBS-Tween)淬灭。细胞用洗涤缓冲液(3x 200μL)洗涤，在用含5％牛奶的PBS-Tween(100μL)封闭各孔1小时后，将细胞与含抗-人ICAM-1抗体(50μL；Cell Signalling Technology,Danvers,MA)的1％BSA PBS在4℃孵育过夜。
细胞用PBS-Tween(3x 200μL)洗涤并与第二抗体(100μL；HRP-缀合的抗-兔IgG,Dako Ltd.,Glostrup,Denmark)一起孵育。然后将细胞与底物(50μL)一起孵育2-20分钟，接着加入终止溶液(50μL,1N H2SO4)。使用分光光度计，通过读出相对于655nm的参比波长的450nm的吸光度，检测ICAM-1信号。然后细胞用PBS-Tween(3x 200μL)洗涤，在结晶紫染色(50μL含2％的PBS溶液)和通过含1％SDS的蒸馏水溶液(100μL)洗脱后，通过读出595nm的吸光度检测各孔中的总细胞数。测量的OD 450-655读数通过除以各孔中OD595读数而针对细胞数校正。在各浓度的试验化合物下通过与溶媒对照比较，计算ICAM-1表达的抑制。根据得到的浓度反应曲线，测定50％抑制浓度(IC50)。
(g)细胞有丝分裂测定法
来自健康受试者的外周血单核细胞(PBMC)使用密度梯度(Sigma-Aldrich,Poole,UK)从全血(Quintiles,London,UK)分离。PBMC(3百万个细胞/样品)随后用2％PHA(植物血细胞凝集素,Sigma-Aldrich,Poole,UK)处理48小时，接着暴露于各种浓度的试验化合物20小时。收集前2小时，PBMC用秋水仙胺(0.1μg/mL；Invitrogen,Paisley,UK)处理以使细胞停止在分裂中期。为观察有丝分裂的细胞，PBMC通过加入Intraprep(50μL；Beckman Coulter,France)透化和固定，和用抗-磷酸-组蛋白3(0.26ng/L；#9701；Cell Signalling,Danvers,MA)和碘化丙啶(1mg/mL；Sigma-Aldrich,Poole,UK)染色，如前所述(Muehlbauer P.A.和Schuler M.J.,Mutation Research,2003,537:117-130)。使用ATTUNE流式细胞仪(Invitrogen,Paisley,UK)，门控淋巴细胞，观察荧光。对各处理，相对于溶媒(0.5％DMSO)处理，计算有丝分裂的抑制百分比。
(h)鼻病毒-诱导的IL-8释放和ICAM-1表达
人鼻病毒RV16自美国典型培养物保藏中心(Manassas,VA)获得。通过用HRV感染HeLa细胞直到80％的细胞发生细胞病变，产生病毒贮液。
BEAS2B细胞用HRV以5的MOI感染并在33℃孵育2小时，同时轻轻摇动以促进吸收。然后细胞用PBS洗涤，加入新鲜的培养基和细胞孵育另外72小时。收集上清液用于使用Duoset ELISA显色试剂盒(R&D systems,Minneapolis,MN)测定IL-8浓度。
表达ICAM-1的细胞表面的水平通过基于细胞的ELISA测定。在感染后72小时，细胞用含4％甲醛的PBS固定。在通过加入0.1％叠氮化钠和1％过氧化氢淬灭内源过氧化物酶后，各孔用洗涤缓冲液(含0.05％Tween的PBS:PBS-Tween)洗涤。在用含5％牛奶的PBS-Tween封闭孔1小时后，细胞与含抗-人ICAM-1抗体的5％BSA PBS-Tween(1:500)孵育过夜。各孔用PBS-Tween洗涤，并与第二抗体(HRP-缀合的抗-兔IgG,Dako Ltd.)一起孵育。通过加入底物和使用分光光度计在450nm与参比波长655nm读出，检测ICAM-1信号。然后各孔用PBS-Tween洗涤，在结晶紫染色和用1％SDS溶液洗脱后通过读出595nm的吸光度，检测各孔中的总细胞数。测量的OD450-655读数通过除以各孔中的OD595读数对细胞数进行校正。HRV感染前2小时以及感染后2小时(此时将未感染的HRV洗出)加入化合物。
(i)MRC5细胞中HRV16诱导的细胞病变作用(CPE)的评估
MRC5细胞用HRV16以1的MOI在含5％FCS和1.5mM MgCl2的DMEM中感染，接着在33℃孵育1小时以促进吸附。吸出上清液，然后加入新鲜的培养基，接着孵育4天。合适时，细胞与化合物或DMSO一起预孵育2小时，在洗出病毒后再次加入化合物和DMSO。
在室温下，吸出上清液和与亚甲基蓝溶液(100μL,2％甲醛、10％甲醇和0.175％亚甲基蓝)一起孵育2小时。洗涤后，向各孔加入含1％SDS的蒸馏水(100μL)，和将板轻轻摇动1-2小时，然后读出660nm的吸光度。计算各孔的抑制百分比。IC50值从通过系列稀释试验化合物产生的浓度反应曲线计算。
(j)原代支气管上皮细胞中的体外RSV病毒负载
生长在96孔板中的正常人支气管上皮细胞(NHBEC)用RSV A2(毒株A2,HPA,Salisbury,UK)以0.001的MOI在含15mM氯化镁的LHC8培养基:RPMI-1640(50:50)中感染，和在37℃孵育1小时用于吸附。细胞用PBS(3x 200μL)洗涤，然后加入新鲜的培养基(200μL)和继续孵育4天。合适时，细胞与化合物或DMSO一起预孵育2小时，然后在病毒洗出后再次加入。
细胞用含4％甲醛的PBS溶液(50μL)一起孵育20分钟，用WB(3x 200μL)(洗涤缓冲液，含0.5％BSA和0.05％Tween-20的PBS)洗涤，和与封闭溶液(含5％炼乳的PBS)一起孵育1小时。然后细胞用WB(3x 200μL)洗涤和在室温下用含抗-RSV(2F7)F-融合蛋白抗体(40μL；小鼠单克隆,lot 798760,Cat.No.ab43812,Abcam)的5％BSA/PBS-tween孵育1小时。洗涤后，细胞与含HRP-缀合的第二抗体溶液(50μL)的5％BSA/PBS-Tween(lot 00053170,Cat.No.P0447,Dako)一起孵育，然后加入TMB底物(50μL；底物试剂包,lot 269472,Cat.No.DY999,R&D Systems,Inc.)。该反应通过加入2N H2SO4(50μL)终止，将得到的信号在微板阅读器(Flash,ThermoFisher Scientific)中比色测量(OD:450nm与参比波长655nm)。
然后洗涤细胞，加入2.5％结晶紫溶液(50μL；lot 8656,Cat.No.PL7000,Pro-LabDiagnostics)达30分钟。用WB洗涤后，向各孔中加入含1％SDS的蒸馏水(100μL)，在振荡器上将板轻轻摇动1小时，然后读出595nm的吸光度。测量的OD450-655读数通过将OD450-655除以OD595读数对细胞数进行校正。计算各孔的抑制百分比，IC50值根据自系列稀释的化合物产生的浓度反应曲线计算。
(k)细胞成活力测定法：MTT测定
将分化的U937细胞与各试验化合物(终浓度为1μg/mL或10μg/mL，在200μL下文显示的培养基中)一起以两个方案预孵育：第一个方案为在5％FCS RPMI1640培养基中4小时，第二个方案为在10％FCS RPMI1640培养基中24小时。上清液置换为新鲜的培养基(200μL)，向各孔加入MTT贮液(10μL,5mg/mL)。孵育1小时后，除去培养基，向各孔加入DMSO(200μL)，将板轻轻摇动1小时，然后读出550nm的吸光度。相对于溶媒(0.5％DMSO)处理，计算各孔的细胞成活力的损失百分比。因此，药物处理相对于溶媒的细胞成活力的明显增加作为负百分比列表显示。
(l)人活检测定法
肠粘膜活检自IBD患者的结肠的发炎区域获得。将活检材料切成小块(2–3mm)，在器官培养室中在37℃在5％CO2/95％O2气氛中在无血清培养基中置于钢网上。向组织加入DMSO对照或所需浓度的试验化合物，在器官培养室中孵育24小时。收获上清液用于通过R&DELISA测定IL-6、IL-8、IL-1β和TNFα水平。相对于对于DMSO对照(100％)测定的细胞因子释放，计算通过试验化合物的细胞因子释放的抑制百分比。
(m)β联蛋白在d-U937细胞中的累积
U937细胞(一种人单核细胞细胞系)通过与PMA(100ng/mL)一起孵育48-72小时分化成巨噬细胞型细胞。然后将细胞与终浓度的试验化合物或溶媒一起孵育18小时。通过试验化合物诱导β-联蛋白通过置换培养基为4％甲醛溶液来终止。内源过氧化物活性通过与淬灭缓冲液(100μL,含0.1％叠氮化钠、1％H2O2的PBS，含0.05％Tween-20)一起孵育20分钟中和。细胞用洗涤缓冲液(200μL；含0.05％Tween-20的PBS)洗涤，与封闭溶液(200μL；含5％牛奶的PBS)一起孵育1小时，用洗涤缓冲液(200μL)再洗涤，然后与在1％BSA/PBS中的抗-β-联蛋白抗体溶液(50μL)(BD,Oxford,UK)一起孵育过夜。
用洗涤缓冲液(3x 200μL；含0.05％Tween-20的PBS)洗涤后，将细胞与含HRP-缀合的第二抗体溶液(100μL)的1％BSA/PBS(Dako,Cambridge,UK)一起孵育，得到的信号使用TMB底物(50μL；R&D Systems,Abingdon,UK)比色测定(OD:450nm与参比波长655nm)。该反应通过加入1N H2SO4溶液(50μL)终止。然后用洗涤缓冲液洗涤细胞，加入2％结晶紫溶液(50μL)达30分钟。用洗涤缓冲液(3x 200μL)洗涤后，向各孔加入1％SDS(100μL)，将板轻轻摇动1小时，然后测量595nm的吸光度(Flash,Thermo-Fisher Scientific)。
测量的OD450-655读数通过将OD450-655除以OD595读数对细胞数进行校正。相对于溶媒计算各孔的诱导百分比，并且将诱导比率与通过包含作为整体定义的参比化合物N-(4-(4-(3-(3-叔丁基-1-对甲苯基-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基氧基)吡啶-2-基)-2-甲氧基乙酰胺(1μg/mL)的标准对照产生的诱导相比进行标准化。
(n)T细胞增殖
来自健康受试者的PBMC使用密度梯度(Lymphoprep,Axis-Shield Healthcare)从全血分离。按照制造商的说明书(Miltenyi Biotec 130-091-155)，淋巴细胞级分首先针对CD4+ T细胞通过负磁细胞分选进行富集。然后按照制造商的说明书(130-045-901)，幼稚CD4+ T细胞使用正磁筛选CD45RA+细胞，使用微珠进行分离。将细胞以2x105个细胞/孔在100μL RPMI/10％FBS中置于96孔平底板(Corning Costar)中。将25μL的试验化合物在正常培养基中稀释至合适的浓度(8x终浓度)和加入至板上的一式两份的孔中，得到0.03ng/mL–250ng/mL的剂量反应范围。加入DMSO作为阴性对照。将板预孵育2小时，然后用1μg/mL抗-CD3(OKT3；eBioscience)刺激。72小时后，各孔中的培养基用150μL含10μM BrdU(Roche)的新鲜的培养基置换。16小时后，除去上清液，将板干燥，并且按照制造商的说明书(Roche)，通过向各孔中加入100μL的固定/变性溶液达20分钟使细胞固定。用PBS将板洗涤一次，然后加入抗-BrdU检测抗体和在室温下孵育90分钟。然后用提供的洗涤缓冲液将板轻轻洗涤3次，通过加入100μL的底物溶液显色。反应通过加入50μL的1M H2SO4终止，和在读板仪(Flash,ThermoFisher Scientific)上读出450nm的吸光度。IC50从剂量反应曲线测定。
(o)在来自IBD患者的CD3/CD28刺激的LPMC细胞中IL-2和IFNγ释放
固有层单核细胞(LPMC)从手术样本的发炎的IBD粘膜或从手术样本的正常粘膜如下分离和纯化：
粘膜用解剖刀从手术样本的较深层移出，切成大小3-4mm的碎片。通过用含1mMEDTA(Sigma-Aldrich,Poole,UK)的HBSS(Sigma-Aldrich)洗涤组织碎片三次同时使用磁力搅拌器搅拌而除去上皮，每次洗涤后弃去上清液。接着在37℃用1A型胶原酶(1mg/mL；Sigma-Aldrich)处理样品1小时，同时搅拌。然后使用100μm细胞过滤器将得到的细胞混悬液过滤，洗涤两次，再悬浮于含10％胎牛血清、100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的RPMI-1640培养基(Sigma-Aldrich)，和用于细胞培养。
在DMSO对照或合适浓度的化合物的存在下，新分离的LPMC(2x105个细胞/孔)用1μg/mLα-CD3/α-CD28刺激48小时。48小时后，除去上清液和通过R&D ELISA测定TNFα和IFNγ的存在。相对于对DMSO对照(100％)测定的细胞因子释放，计算试验化合物对细胞因子释放的抑制百分比。
(p)自IBD患者分离的成肌纤维细胞的细胞因子释放的抑制
来自发炎的IBD粘膜的成肌纤维细胞如下分离：
将粘膜切下和弃去，将1mm大小的粘膜样品在37℃在潮湿的CO2孵育箱中在添加20％FBS、1％非必需氨基酸(Invitrogen,Paisley,UK)、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素、50μg/mL庆大霉素和1μg/mL两性霉素(Sigma-Aldrich)的Dulbecco’s改良的Eagle’s培养基(DMEM,Sigma-Aldrich)中培养。将建立的成肌纤维细胞集落接种在25-cm2培养烧瓶中，在添加20％FBS和抗生素的DMEM中培养至至少第4代，以提供足够数量用于刺激实验。
以3x105个细胞/孔接种在12孔板中的亚汇合的单层成肌纤维细胞在无血清培养基中在37℃,5％CO2中饥饿24h，然后在DMSO对照或合适浓度的化合物的存在下培养24h。24小时后，除去上清液和通过R&D ELISA测定IL-8和IL-6的存在。相对于对DMSO对照(100％)测定的细胞因子释放，计算试验化合物对细胞因子释放的抑制百分比。
(q)人嗜中性粒细胞脱粒
嗜中性粒细胞自人外周血如下分离：
通过静脉刺穿收集血液，并通过加入1:1EDTA:无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS,无Ca+/Mg+)而抗凝固。加入葡聚糖(3％w/v)(1份葡聚糖溶液对4份血液)，在室温下将血液放置约20分钟。上清液在密度梯度(Lymphoprep,Axis-Shield Healthcare)上小心分层和离心(15分钟，2000rpm,无制动)。吸出上清液，将细胞沉淀再悬浮于无菌盐水(0.2％)中不超过60秒(以裂解污染的红细胞)。然后加入10倍体积的PBS，将细胞离心(5分钟,1200rpm)。将细胞再悬浮于HBSS+(含细胞松弛素B(5μg/mL)和1mM CaCl2的Hanks缓冲盐溶液(无酚红))，获得5x106个细胞/mL。
向V-底96孔板的各孔中加入5x 104个细胞并与合适浓度的试验化合物(0.3–1000ng/mL)或溶媒(DMSO,0.5％终浓度)一起孵育(30分钟,37℃)。通过加入fMLP(终浓度1μM)刺激脱粒。进一步孵育(30分钟,37℃)后，通过离心(5分钟,1500rpm)除去细胞，将上清液转移至平底96孔板。加入等体积的四甲基联苯胺(TMB)，10分钟后，通过加入等体积的硫酸(0.5M)终止反应，读出450nm的吸光度(减去655nm的背景)。50％抑制浓度(IC50)从得到的浓度反应曲线测定。
(r)细胞毒性测定法
将1×105个Jurkat细胞(永生化的人T淋巴细胞)在100μL培养基(补充有10％胎牛血清的RPMI)中加入96孔板的合适数量的孔中。向孔中加入1μL的DMSO对照(终浓度1.0％v/v)或试验化合物(终浓度20、5或1μg/mL)，并在37℃,5％CO2孵育。24小时后，将板以1200rpm离心3分钟，弃去上清液。然后将细胞重悬浮于150μL(终浓度7.5μg/mL)的碘化丙啶(PI)/PBS，并在37℃,5％CO2孵育15分钟。15分钟后，通过流式细胞术(BD accuri)使用FL3窗分析细胞。％存活力计算为标准化至DMSO对照的在测试孔中PI阴性的细胞的％。
体内筛选：药效学和抗炎活性
(i)在小鼠中LPS诱导的嗜中性粒细胞积聚
向未禁食的Balb/c小鼠通过气管内途径以指定的次数(在2-8小时范围内)给予溶媒或试验物质，然后通过施用LPS攻击刺激炎性反应。在T＝0时，将小鼠置于暴露室中，暴露于LPS(7.0mL,0.5mg/mL溶液，在PBS中)30分钟。另外8小时后，将动物麻醉，将它们的气管插管，通过灌注提取BALF，然后从它们的肺中经过气管导管抽出1.0mL的PBS。在BALF样品中的总白细胞计数和白细胞分类计数使用Neubauer血球计测量。BALF样品的细胞离心涂片通过在室温下以200rpm离心5分钟制备，并使用DiffQuik染色系统(Dade Behring)染色。使用油浸显微镜将细胞计数。BAL中的嗜中性粒细胞数的数据表示为平均值±S.E.M.(平均值的标准误差)。相对于溶媒处理，计算各处理的嗜中性粒细胞积聚的抑制百分比。
(ii)香烟烟雾模型
使用用于小动物的Tobacco Smoke Inhalation Experiment System(Model SIS-CS；Sibata Scientific Technology,Tokyo,Japan)，将A/J小鼠(雄性,5周龄)暴露于香烟烟雾(4％香烟烟雾，用空气稀释)30分钟/天达11天。在最后的香烟烟雾暴露后，将试验物质经鼻内给予(35μL的溶液，在50％DMSO/PBS中)每天一次达3天。最后给药后12小时，将各动物麻醉，将气管插管，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。使用抗-小鼠MOMA2抗体(巨噬细胞)或抗-小鼠7/4抗体(嗜中性粒细胞)，肺泡巨噬细胞和嗜中性粒细胞的数量通过FACS分析(ALTRA II,Beckman Coulter,Inc.,Fullerton,CA,USA)测定。
(iii)小鼠中DSS诱导的结肠炎
通过用葡聚糖硫酸钠(DSS)处理刺激炎性反应前一天(第-1天)，通过口服强饲向未禁食的10-12周龄、雄性BDF1小鼠每日两次给予溶媒、参考物(5-ASA)或试验化合物。在研究的第0天，在饮用水中给予DSS(5％w/v)，接着BID给予溶媒(5mL/kg)、参考(100mg/kg)或试验化合物(5mg/kg)达7天。含DSS的饮用水每3天装满一次。在研究期间，每天对动物称重，进行粪便观察和基于粪便稠度记录作为评分。在第+6天处死时，移出大肠，记录长度和重量。将结肠切片用于MPO分析以测定嗜中性粒细胞浸润，或用于组织病理学评分以确定疾病严重性。
(iv)小鼠中TNBS诱导的结肠炎
通过用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)(15mg/mL，在50％乙醇/50％盐水中)处理刺激炎性反应前一天(第-1天)，通过口服强饲向未禁食的10-12周龄、雄性BDF1小鼠每日两次给予溶媒(5mL/kg)、参考物(布地奈德2.5mg/kg)或试验化合物(1或5mg/kg)。在研究的第0天，通过塑料导管结肠内给予TNBS(200μL)，BID给予溶媒、参考或试验化合物持续2或4天。在研究期间，每天对动物称重，进行粪便观察和基于粪便稠度记录作为评分。在第2天(或第4天)处死时，移出大肠，和记录长度和重量。将结肠切片用于组织病理学评分以确定疾病严重性。
(v)小鼠中的过继转移
在研究第0天，处死雌性Balb/C小鼠，获得脾用于CD45RB高细胞分离(使用SCID IBD细胞分离方案)。然后将大约4X105个细胞/mL CD45RB高细胞经腹膜内注射(100μL/小鼠)到雌性SCID动物。在研究第14天，对小鼠称重，和基于体重随机分成治疗组。在第14天，化合物以5mL/kg的剂量体积，在5％聚氧乙烯40硬脂酸酯/20mMpH 7.8水性磷酸盐缓冲液中，通过口服强饲BID给予。继续治疗直到研究第49天，在该点在早晨给予后4小时将动物尸检。记录结肠长度和重量，并用作研究的第二终点，作为结肠水肿的测量。然后将结肠分成六个横切片，其中四个用于组织病理学评分(第一终点)，两个经匀浆用于细胞因子分析。显示的数据是在首次用于实验的动物和溶媒动物之间的诱导窗的％抑制，其中越高的抑制意味着越接近于无疾病的首次用于实验的表型。
(vi)在大鼠中内毒素诱导的葡萄膜炎
将雄性Lewis大鼠(6-8周龄,Charles River UK Limited)在3个笼中在19-21℃以12小时光/暗周期(07:00/19:00)饲养，饲喂标准的啮齿动物饲料和随意饮用水。对未禁食的大鼠称重，分别在尾部用永久标记鉴别，并接受单次玻璃体内给予100ng/动物的LPS(大肠杆菌0111:B4，在PBS中制备,Sigma Aldrich,UK)至右玻璃体液(5μL剂量体积)，使用32-规针头。未治疗的大鼠用PBS注射。在LPS前1小时，在LPS给予时，以及LPS给予后1、2和4小时，将试验化合物或溶媒(4％聚乙二醇40硬脂酸酯、4％甘露醇/PBS(pH 7.4))通过局部途径给予到动物的右眼上(10μL)。给予前，将待给予的溶液超声处理以确保澄清溶液。在LPS给药后6小时，通过过量给予戊巴比妥(经过心脏穿刺)将动物安乐死。安乐死后立刻在手术显微镜下通过使用32规针头，穿刺前房从大鼠的右眼收集10μL的房水。房水在20μL的PBS中稀释，立即使用Countess自动化细胞计数器(Invitrogen)测量总细胞计数。在房水收集后，将各动物的右眼摘出，围绕晶状体切成前和后切片。将各切片称重和在500μL无菌磷酸盐缓冲盐水中匀浆，接着以12000rpm在4℃离心20分钟。将得到的上清液分成3个等份和贮藏在-80℃直到随后通过R&D DuoSet ELISA进行细胞因子分析。
体外和体内筛选结果概述
表1：体外p38 MAPKα(方法2)、c-Src和Syk抑制测定法的结果
表2：在受刺激的细胞中细胞因子释放的抑制(上文测定法(b)和(c))。
如下表3所示，本发明的实施例的化合物具有比参考化合物(N-(4-(4-(3-(3-叔丁基-1-对甲苯基-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基氧基)吡啶-2-基)-2-甲氧基乙酰胺；WO2010/112936)显著更少的细胞毒性，在上述的细胞毒性测定法(r)中显示成活力提高(表3)。此外，本发明的实施例的化合物在20μg/mL时具有比参考化合物A(3-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)-嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸；WO 2014162126)显著更少的细胞毒性。
表3：实施例的化合物对Jurkat细胞成活力的影响(上述的测定法(r)；NT＝未测试)。
如下表4所示，在上述的体内(过继转移)测定法(v)中实施例3的化合物也与参考化合物A,(3-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸和参考化合物B,3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)苯甲酰胺{Fyfe,M.C.T.,WO 2014/140582}一起进行筛选。在研究结束时在首次用于实验、对照和治疗的动物中结肠重量与长度的相对比率的分析显示，使用简单的基于水性的溶媒，在结肠炎症的这种T细胞驱动的体内模型中，与两种参考化合物相比实施例3的化合物提供更优活性。
表4：过继转移小鼠模型的结果简述。
在第27天因为差的耐受性(体重减轻)，剂量降低至0.6mg/kg。
其它研究简述
在禁食状态的模拟结肠液(FaSSCoF)中溶解度的测定
在pH 6.5的FaSSCoF中本发明的化合物的溶解度使用之前报道的程序(Vertzoni,M.,et al.Pharm.Res.2010,27,2187–2196)的改良程序测定。替换用于原始程序的胆汁盐提取物(所述提取物不再可用)，改良程序使用牛磺胆酸钠(0.15g)、甘胆酸(0.15g)、熊去氧胆酸(0.05g)、胆酸(0.05g)和甘去氧胆酸(0.05g)的混合物。这五种胆汁酸用研钵和研杵在一起研磨，产生白色细粉，其按下文所述掺入FaSSCoF。
FaSSCoF介质：将三(羟基甲基)氨基甲烷(Tris；0.275g)和马来酸(0.44g)溶于水(35mL)，得到溶液，通过用0.5M NaOH(约12mL)处理将pH调节至6.5。然后用水将溶液补足至50mL。将该Tris/马来酸盐缓冲溶液的一部分(约25mL)加入0.5L圆底烧瓶，然后用0.00565g的上述胆汁酸混合物处理。加入磷脂酰胆碱(0.0111g)/DCM(0.15mL)和棕榈酸(0.0013g)/DCM(0.15mL)溶液，然后在减压下在40℃蒸发有机溶剂，直到获得澄清溶液，没有可察觉的DCM气味。通过加入剩余的Tris/马来酸盐缓冲液将经蒸发的溶液的体积调节至50mL，然后加入BSA(0.115g)，之后通过轻轻搅动溶解。
溶解度测定：将试验化合物悬浮于pH 6.5FaSSCoF介质，得到2–10mg/mL的最大终浓度。将悬浮液在25℃平衡24h，然后通过玻璃纤维C滤器过滤。然后适当稀释滤出液，用于注入，和通过HPLC根据标准品进行量化。注入不同体积的标准品、稀释和未稀释的样品溶液，和使用通过将在与标准品注入中的主峰相同的保留时间处发现的峰积分测定的峰面积，计算溶解度。
FaSSCoF溶解度显示在下表5中，其表明实施例的化合物(或其盐)显示在pH6.5的FaSSCoF介质中超过0.03mg/mL的溶解度，而一些显示大于1mg/mL的溶解度。对于实施例的化合物测量的pH 6.5FaSSCoF溶解度优于参考化合物A,(3-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基-磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)丙酸和参考化合物B,3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙基)苯甲酰胺{Fyfe,M.C.T.,WO 2014/140582}二者的溶解度。
表5：在pH 6.5的FaSSCoF中对于本发明的实施例的某些化合物或其盐测量的溶解度。
进一步的研究还揭示，在pH 6.5(含0.5％重量的模拟肠液)或pH 7.2的磷酸盐缓冲盐水中，与参考化合物A(盐酸盐)和B二者相比，实施例31的化合物(即，实施例3的化合物的钠盐)均更易溶解和具有更快的溶解速率。
微量离心机溶解试验
使用其中样品1)从肠缓冲液(IB)转移至结肠缓冲液(CB)或2)直接给予至包含模拟胆汁盐胶束的肠介质(IB-SIF)的微量离心机溶解试验，与参考化合物A和B一起评价实施例3的化合物的体外无沉降溶解性能。化合物在各个时间点的溶解性能通过离心和通过离线反相HPLC分析，分析上清液浓度进行测定。
1)从肠缓冲液(IB)转移至结肠缓冲液(CB)实验
将试验化合物(0.45mg±0.05mg)称重至微量离心管，然后加入0.900mL的IB受体溶液—升温至37℃的pH 6.5磷酸盐缓冲盐水(PBS)。启动计时器，和样品管以最大设定涡旋1分钟。当定时器读到3、13和23分钟(分别对应于25、15和5分钟时间点)时，将样品管以15,800相对离心力(RCF)离心1分钟。在每个时间点，将一部分上清液(50μL)加入至稀释液{250μL的75/25THF/水(v/v)}和通过离线HPLC分析测量化合物浓度(表6a)。在另外5分钟后，加入0.900mL的CB受体溶液—pH 10.7PBS溶液，使得pH调节至7.2，和定时器重新设定为0min。当定时器读出2、8、18、38、88和1,198分钟(分别对应于4、10、20、40、90和1,200分钟时间点)时，将样品管以15,800RCF离心1分钟。在每个时间点，将一部分上清液(50μL)加入至稀释液{250μL的75/25THF/水(v/v)}和通过离线HPLC分析测量化合物浓度(表6a)。对于90和1,200分钟时间点的HPLC样品在超速离心机(UCF)中以80,000rpm在37℃额外离心8分钟，然后将上清液(50μL)加入至稀释液{250μL的75/25THF/水(v/v)}和通过离线HPLC分析测量化合物浓度(表6b)，以测定游离药物+胶束中的药物的浓度。
表6a：在溶解试验1)中测量的浓度(μg/mL)。
表6b：在溶解试验1)中测量的另外的浓度(μg/mL)。
2)直接给予至包含模拟胆汁盐胶束的肠介质(IB-SIF)的实验
将试验化合物(0.45mg±0.05mg)称重至微量离心管，然后加入1.800mL的IB-SIF受体溶液—之前通过溶解0.250g SIF粉末(Biorelevant.com)在50mL的升温至37℃的pH6.5PBS中制备。启动计时器和将样品管以最大设定涡旋1分钟。当计时器读出2、8、18、38、88和1,198分钟(分别对应于4、10、20、40、90和1,200分钟时间点)时，将样品管以15,800RCF离心1分钟。然后，在每个时间点，将上清液(50μL)加入至稀释液{250μL的75/25THF/水(v/v)}和通过离线HPLC分析测量化合物浓度(表7a)。为了测定游离药物+胶束中的药物的浓度，对于90和1,200分钟时间点的HPLC样品在超速离心机(UCF)中以80,000rpm在37℃额外离心8分钟，然后将上清液(50μL)加入至稀释液{250μL的75/25THF/水(v/v)}和通过离线HPLC分析测量化合物浓度(表7b)。
表7a：在溶解试验2)中测量的浓度(μg/mL)。
表7b：在溶解试验2)中测量的另外的浓度(μg/mL)。
缩写
前缀n-、s-、i-、t-和tert-具有其常用含义：正、仲、异和叔。

Claims (28)

1.式I的化合物，
其中：
T表示
W表示O、S或NCH3；
V表示N或CR1；
R1表示C1-3烷氧基、C1–3烷基、C2–3烯基、C2–3炔基，所述后四个基团任选地被一个或多个选自卤素、羟基和C1-2烷氧基的取代基取代，或R1表示H；
R2表示–NRA1S(O)2RB1、-S(O)1-2RB2、–P(O)RB3RB4、-C(O)NRA2RA3或–CH2NRA4C(O)RA5；
RA1至RA5独立地表示H或任选地被一个或多个选自卤素、羟基、NRCRD和C1-2烷氧基的取代基取代的C1–3烷基，或RA2和RA3一起表示在C2和C3之间被-O-、–S(O)q–或-N(RE)-中断的C3-6n-亚烷基或C4-5n-亚烷基；
RB1至RB4独立地表示C1–3烷基或C3-6环烷基，后两个基团任选地被一个或多个卤素取代基取代；
RC和RD独立地表示H或C1-3烷基，后一取代基任选地被羟基或C1–2烷氧基取代，或RC和RD一起组合形成任选地在C2和C3之间被-O-、-S(O)q-或-N(RE)-中断的C4-6亚烷基；
RE表示H或甲基；
q表示0、1或2；
R3表示C2–7烷基、C2–7烯基、C2–7炔基或C3-7环烷基，后四个基团任选地被羟基、C1–2烷氧基或卤素取代，或R3表示吗啉基或三甲基甲硅烷基；
A表示CH或N；
R4表示C1-3烷氧基、C3-5环烷氧基或C1-3烷基，后三个基团任选地被一个或多个卤素取代基取代，或R4表示乙炔基、氰基、S(O)2CH3、卤素或H；
Q表示O、S(O)p、SO2N(R6)或C(O)N(R6)；
n表示1、2或3；
p表示0、1或2；
R5a和R5b独立地表示H、甲基或卤素，或R5a和R5b一起表示C2-6n-亚烷基；
当n表示1时，Z表示O、S或NR7，或
当n表示2或3时，Z在每次出现时表示O-原子，或者在一次出现时表示S-原子或NR7且在每次其它出现时表示O-原子；
R6和R7独立地表示H或甲基；
G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H或羧酸电子等排体；
r表示0，或者当Het1通过环杂原子连接至(CH2)r时，r可选择地表示1；和
Het1表示
完全芳族的5或6元杂环基团，所述基团含有一个或多个选自N、O和S的杂原子，或者
完全饱和的或部分不饱和的和单环或稠合或桥接双环的4至7元杂环基团，所述基团含有一个或多个选自N、O和S的杂原子，
其中Het1任选地被一个或多个选自C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤素、羟基和氧代的取代基取代，
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
2.式Iy的化合物，
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
3.权利要求1的化合物，其为式Ix或Ia的化合物，
其中R1至R4、R5a、R5b、A、Q和n在权利要求1中定义，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
4.权利要求1或3的化合物，其为式Ib的化合物，
其中R2、A、Q和n在权利要求1中定义，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
5.权利要求1或3的化合物，其中：
R1表示甲氧基或氘化甲氧基；
R3表示三甲基甲硅烷基或–C(CH3)2-R，其中R表示乙炔基或甲基；和/或
R4表示环丙氧基或甲氧基，后一基团任选地被一个或多个卤素取代基取代。
6.权利要求1和3-5中任一项的化合物，其中R2表示-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-S(O)1-2CH3、-S(O)1–2CH2CH3、-P(O)(CH3)2、-N(CH3)S(O)2CH3、-NHS(O)2CH2CH3或–NHS(O)2CH3。
7.权利要求1和3-6中任一项的化合物，其中A表示CH。
8.权利要求1和3-7中任一项的化合物，其中Q表示C(O)NH、S(O)、S(O)2或O。
9.权利要求1和3-8中任一项的化合物，其中：
n表示2；
R5a和R5b独立地表示H或甲基，或R5a和R5b一起表示-(CH2)2-；和/或
G表示-CO2H或-Het1-CO2H，其中-Het1-CO2H部分是选自以下的结构片段：
或者G表示选自以下的羧酸电子等排体：四唑基、–C(O)N(H)-S(O)2CH3、–C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2、
或者后三个基团的任一个的互变异构体。
10.权利要求1和3-9中任一项的化合物，其中：
R2表示–NHS(O)2CH3；
Q表示C(O)NH或O；和
n表示2。
11.权利要求1和3-10中任一项的化合物，其是选自以下的化合物：
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)亚磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-((3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯基)磺酰基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
6-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)哒嗪-3-甲酸；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1,2,4-噁二唑-3-甲酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-环丙氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)环丙烷-1-甲酸；
4-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸；
1-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-3-甲基-1H-吡唑-4-甲酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-乙基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-(甲氧基-d3)-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-N-(甲基磺酰基)乙酰胺；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基氨甲酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基亚磺酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(二甲基磷酰基)-2-甲氧基苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(N-甲基甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)呋喃-3-甲酸；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)四氢呋喃-3-甲酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰基)-2-甲氧基苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-3-(乙基磺酰氨基)-2-甲氧基苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)异噁唑-3-基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((5-氧代-2,5-二氢异噁唑-3-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)苯基)-甲烷磺酰胺；
2-((2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)硫基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸，(R)-异构体；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)丙酸，(S)-异构体；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-2-甲基丙酸；
1-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酸；
N-(3-(3-(4-((2-((3-(2-(2-((1H-四唑-5-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)-5-甲氧基苯基)氨基)-吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)-5-(叔丁基)-2-甲氧基苯基)甲烷磺酰胺；
2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)-N-(N,N-二甲基氨磺酰基)乙酰胺；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-2-甲酸；
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)噻吩-3-甲酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(二氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-乙炔基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((5-氧代-4,5-二氢
-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)苯基)甲烷磺酰胺；
2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-(三氟甲氧基)苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸；
N-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(2-(2-((3-氧代-2,3-二氢异噁唑-5-基)甲氧基)乙氧基)乙氧基)苯基)氨基)吡啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲基)苯基)-甲烷磺酰胺；和
5-((2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)甲基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸，
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
12.药物制剂，包含与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合的权利要求1-11中任一项的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物。
13.组合产品，包含
(A)权利要求1-11中任一项的化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，和
(B)另一治疗剂，
其中组分(A)和(B)的每个与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合配制。
14.权利要求1-11中任一项的化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，其用于药物。
15.权利要求1-11中任一项的化合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或权利要求12的药物制剂或权利要求13的组合产品，其用于治疗或预防炎性疾病。
16.权利要求15的用途的化合物、制剂或组合产品，其中所述炎性疾病选自囊性纤维化、肺动脉高压、肺结节病、特发性肺纤维变性、COPD(包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、儿科哮喘、特应性皮炎、变应性皮炎、接触性皮炎或银屑病、变应性鼻炎、鼻炎、鼻窦炎、结膜炎、过敏性结膜炎、干燥性角结膜炎(干眼或干眼症)、青光眼、糖尿病视网膜病、黄斑水肿(包括糖尿病黄斑水肿)、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、干性和/或湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)、术后白内障炎症、葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和泛葡萄膜炎)、角膜移植和缘细胞移植排斥、谷蛋白敏感性肠病(腹部疾病)、嗜酸性食管炎、肠移植物对抗宿主病、克罗恩病和溃疡性结肠炎。
17.权利要求15或16的化合物、制剂或组合产品，其中所述炎性疾病是葡萄膜炎、干燥性角结膜炎(干眼或干眼症)、克罗恩病或溃疡性结肠炎。
18.权利要求1-11中任一项的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或权利要求12的药物制剂或权利要求13的组合产品，在制备用于治疗或预防权利要求15-17中任一项定义的炎性疾病的药物中的用途。
19.治疗或预防权利要求15-17中任一项定义的炎性疾病的方法，所述方法包括给予受试者有效量的权利要求1-11中任一项的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物或同位素衍生物，或权利要求12的药物制剂或权利要求13的组合产品。
20.一种制备式I的化合物的方法，所述方法包括：
(a)对于其中G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H的式I的化合物，将式I(P)的酯水解或氢解
其中Rx分别表示C1-6烷基或苄基，和T、R4、R5a、R5b、A、Q、Z、n、r和Het1如权利要求1-11中任一项所定义；
(b)使式II的化合物，
与式III的化合物反应，
其中Z1和Z2之一是式IVa或IVb的结构片段，
并且Z1和Z2中的另一个是式V的结构片段，
其中W、V、R1至R4、R5a、R5b、A、Q、Z、G和n如权利要求1-11中任一项所定义；
(c)使式IIa的化合物，
其中Z1如上定义，与合适的叠氮化物形成剂反应，
所述反应之后，无需分离，进行中间体酰叠氮化物(具有式Z1-C(O)-N3)的热重排，以原位提供式II的化合物，该化合物然后与如上定义的式III的化合物反应；
(d)使式IIb的化合物，
其中LG1表示离去基团和Z1如上所定义，与如上定义的式III的化合物反应；
(e)使式VI的化合物，
其中LG2表示离去基团和R1至R3和A如权利要求1-11中任一项所定义，与式VII的化合物反应，
其中R4、R5a、R5b、Q、Z、G和n如权利要求1-11中任一项所定义；
(f)对于其中Q表示S(O)1-2的式I的化合物，使其中Q表示S的相应的式I的化合物氧化；
(g)对于其中Q表示C(O)NH的式I的化合物，使式VIII的化合物，
其中LG3表示OH、ORx或离去基团，Rx如上所定义和R1至R3和A如权利要求1-11中任一项所定义，与式IX的化合物反应，
其中R5a、R5b、Z、G和n如权利要求1-11中任一项所定义；
(h)对于其中G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H的式I的化合物，使式Xa的醇氧化，
其中T、R4、R5a、R5b、A、Q、Z、n、r和Het1如权利要求1-11中任一项所定义；或
(i)对于其中G表示-C(O)N(H)OH、-C(O)N(H)OCH3、-C(O)N(H)-S(O)2CH3或-C(O)N(H)-S(O)2N(CH3)2的式I的化合物，使其中G表示–CO2H的相应的式I的化合物分别与羟基胺、甲氧基胺、甲烷磺酰胺或二甲基硫酰胺偶联；
(k)对于其中G表示具有以下结构的羟基-取代的异噁唑的式I的化合物：
使式Xb的化合物，
其中T、A、R4、R5a、R5b、Q、Z和n如权利要求1-11中任一项所定义和Rx如上所定义，与羟基胺反应；
(l)对于其中G表示四唑-5-基的式I的化合物，使式Xc的化合物，
其中T、A、R4、R5a、R5b、Q、Z和n如权利要求1-11中任一项所定义，与叠氮化物源反应；
(m)对于其中G表示5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基的式I的化合物，使如上定义的式Xc的化合物与羟基胺反应，接着使得到的N-羟基脒(偕胺肟)化合物与–C(O)-源反应；
(n)使式I的化合物的受保护的衍生物脱保护，其中受保护的衍生物在式I的化合物的O-或N-原子上带有保护基。
21.权利要求20中定义的式I(P)的化合物，或其盐。
22.权利要求21的式I(P)的化合物，其中：
R1表示甲氧基；
R2表示–NHS(O)2CH3；
R3表示叔丁基；
A表示CH；
R4表示甲氧基；
R5a和R5b均表示H；
Q表示O；
Z表示O；
n表示2；和/或
Rx表示乙基。
23.权利要求21或22的化合物，所述化合物是：
(2-(2-(2-(3-((4-((4-(3-(5-(叔丁基)-2-甲氧基-3-(甲基磺酰氨基)苯基)脲基)-萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯)或其盐。
24.一种化合物：
(a)具有式II或IIb，如权利要求20所定义的，或其盐或受保护的衍生物，其中Z1是式V的结构片段，如权利要求20所定义的，
其中式II或IIb的化合物的受保护的衍生物是其中当G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H时，C(O)2H部分作为式C(O)ORx的酯受到保护的化合物，其中Rx如权利要求20或22所定义；或
(b)具有式III，如权利要求20所定义的，或其盐或受保护的衍生物，其中Z2是式V的结构片段，如权利要求20所定义的，
其中式III的化合物的受保护的衍生物是以下的化合物：
(i)其中式III的NH2基团被硝基置换，或其中式III的NH2基团的H-原子被以下基团置换：
R’-C(O)-，其中R’是任选地被一个或多个氟基团取代的C1-8烷基或R’是H、苯基或苄基，后两个基团任选地被一个或多个选自卤素、羟基、甲基和甲氧基的基团取代；或
R”-O-C(O)-，其中R”是叔丁基、苯基、苄基或芴基，后三个基团任选地被一个或多个选自卤素、羟基、甲基和甲氧基的基团取代；和/或
(ii)其中当G表示–[(CH2)r-Het1]0-1-C(O)2H时，式III的C(O)2H部分作为式C(O)ORx的酯受到保护，其中Rx如权利要求20或22所定义。
25.权利要求24的式II、IIb或III的化合物，或其盐或受保护的衍生物，其中：
A表示CH；
R4表示甲氧基；
R5a和R5b均表示H；
Q表示O；
Z表示O；和/或
n表示2。
26.权利要求24或25的式III的化合物或其盐，所述化合物是
(2-(2-(2-(3-((4-((4-((叔丁氧基羰基)氨基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)-氨基)-5-甲氧基苯氧基)乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯)或
(2-(2-(2-(3-((4-((4-氨基萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯氧基)-乙氧基)乙氧基)乙酸乙酯)。
27.权利要求24或25的式IIb的化合物或其盐或受保护的衍生物，其中LG1表示咪唑基、氯或芳基氧基。
28.权利要求24、25和27中任一项的式IIb的化合物或其盐或受保护的衍生物，其中：
LG1表示苯氧基；和
G表示C(O)2H，
其中式IIb的化合物的受保护的衍生物是其中C(O)2H部分作为式C(O)ORx的酯受到保护的化合物，其中Rx如权利要求20或22所定义。
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI641592B (zh) * 2013-04-02 2018-11-21 英商瑞斯比維特有限公司 激酶抑制劑
BR112018067552A2 (pt) * 2016-04-06 2019-01-08 Topivert Pharma Ltd inibidores de cinase
IT201800006337A1 (it) * 2018-06-14 2019-12-14 Procedimento per la preparazione di lifitegrast
WO2021200975A1 (ja) * 2020-03-31 2021-10-07 田辺三菱製薬株式会社 医薬組成物

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014033446A1 (en) * 2012-08-29 2014-03-06 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014162121A1 (en) * 2013-04-02 2014-10-09 Topivert Pharma Limited Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles
WO2015092423A1 (en) * 2013-12-20 2015-06-25 Respivert Limited Urea derivatives useful as kinase inhibitors
CN105246884A (zh) * 2013-04-02 2016-01-13 瑞斯比维特有限公司 用作激酶抑制剂的脲衍生物
WO2016051187A1 (en) * 2014-10-01 2016-04-07 Respivert Limited Diaryl urea derivatives as p38 kinase inhibitors

Family Cites Families (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001521934A (ja) 1997-11-03 2001-11-13 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗炎症薬としての芳香族ヘテロ環式化合物
EP1140840B1 (en) 1999-01-13 2006-03-22 Bayer Pharmaceuticals Corp. -g(v)-carboxyaryl substituted diphenyl ureas as raf kinase inhibitors
CA2359244C (en) 1999-01-13 2013-10-08 Bayer Corporation .omega.-carboxy aryl substituted diphenyl ureas as p38 kinase inhibitors
UA73492C2 (en) 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
WO2000055139A2 (en) 1999-03-12 2000-09-21 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic urea and related compounds useful as anti-inflammatory agents
ATE312823T1 (de) 1999-07-09 2005-12-15 Boehringer Ingelheim Pharma Verfahren zur herstellung heteroarylsubstituierter ureaverbindungen
US6492393B1 (en) 1999-11-16 2002-12-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
US6525046B1 (en) 2000-01-18 2003-02-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
US6492529B1 (en) 2000-01-18 2002-12-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Bis pyrazole-1H-pyrazole intermediates and their synthesis
EP1381592A1 (en) 2001-04-13 2004-01-21 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. 1,4-disubstituted benzo-fused compounds
CA2490819A1 (en) 2001-04-13 2002-10-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
WO2002092576A1 (en) 2001-05-16 2002-11-21 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Diarylurea derivatives useful as anti-inflammatory agents
CA2448626A1 (en) 2001-05-25 2002-12-05 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Carbamate and oxamide compounds as inhibitors of cytokine production
DE60219793T2 (de) 2001-07-11 2008-01-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Verfahren zur Behandlung von Cytokin-Vermittelten Erkrankungen
US20040023961A1 (en) 2002-02-11 2004-02-05 Bayer Corporation Aryl ureas with raf kinase and angiogenisis inhibiting activity
DK1478358T3 (da) 2002-02-11 2013-10-07 Bayer Healthcare Llc Sorafenibtosylat til behandling af sygdomme kendetegnet ved unormal angiogenese
EP1480973B1 (en) 2002-02-25 2008-02-13 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. 1,4-disubstituted benzofused cycloalkyl urea compounds useful in treating cytokine mediated diseases
US6872726B2 (en) 2002-08-08 2005-03-29 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Fluorinated di-aryl urea compounds
WO2004113352A1 (en) 2003-06-19 2004-12-29 Amedis Pharmaceuticals Ltd. Silylated heterocyclylurea derivatives as cytokine-inhibitors
CN1812975A (zh) 2003-06-30 2006-08-02 贝林格尔·英格海姆药物公司 制备二芳基脲化合物的方法
CN1838958A (zh) 2003-08-22 2006-09-27 贝林格尔·英格海姆药物公司 治疗慢性阻塞性肺病和肺动脉高血压的方法
SG146624A1 (en) 2003-09-11 2008-10-30 Kemia Inc Cytokine inhibitors
WO2005044825A1 (en) 2003-10-21 2005-05-19 Amedis Pharmaceuticals Ltd. Silicon compounds and their use
US20060035893A1 (en) 2004-08-07 2006-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for treatment of respiratory and gastrointestinal disorders
GB0423554D0 (en) 2004-10-22 2004-11-24 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds
TW200740820A (en) 2005-07-05 2007-11-01 Takeda Pharmaceuticals Co Fused heterocyclic derivatives and use thereof
AR056582A1 (es) 2005-10-28 2007-10-10 Lilly Co Eli COMPUESTOS DE PIRAZOLIL UREA CON ACTIVIDAD INHIBITORIA DE CINASA P38 Y FORMULACIoN FARMACÉUTICA QUE LO COMPRENDE
US7790756B2 (en) 2006-10-11 2010-09-07 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Kinase inhibitors useful for the treatment of myleoproliferative diseases and other proliferative diseases
GB0818033D0 (en) 2008-10-02 2008-11-05 Respivert Ltd Novel compound
NZ591427A (en) 2008-10-02 2012-12-21 Respivert Ltd P38 map kinase inhibitors
WO2010067131A1 (en) 2008-12-11 2010-06-17 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
GB0905955D0 (en) 2009-04-06 2009-05-20 Respivert Ltd Novel compounds
GB0921731D0 (en) 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Theraputic uses
GB0921730D0 (en) 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Method of treatment
GB201005589D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Respivert Ltd Novel compounds
WO2011124923A2 (en) 2010-04-08 2011-10-13 Respivert Limited Novel compounds
WO2011124930A1 (en) 2010-04-08 2011-10-13 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
GB201010196D0 (en) 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Methods
EP2582700B1 (en) 2010-06-17 2016-11-02 Respivert Limited Respiratory formulations containing p38 mapk inhibitors
GB201010193D0 (en) 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Medicinal use
WO2013050757A1 (en) 2011-10-03 2013-04-11 Respivert Limited 1-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p38 map kinase inhibitors
EP2578582A1 (en) 2011-10-03 2013-04-10 Respivert Limited 1-Pyrazolyl-3-(4-((2-anilinopyrimidin-4-yl)oxy)napththalen-1-yl)ureas as p38 MAP kinase inhibitors
ES2612259T3 (es) 2011-12-09 2017-05-16 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Inhibidores de cinasa
GB201214750D0 (en) * 2012-08-17 2012-10-03 Respivert Ltd Compounds
US20150225373A1 (en) 2012-08-29 2015-08-13 Respivert Limited Kinase inhibitors
US9783556B2 (en) 2012-08-29 2017-10-10 Respivert Limited Kinase inhibitors
GB201215357D0 (en) 2012-08-29 2012-10-10 Respivert Ltd Compounds
US9732063B2 (en) 2012-11-16 2017-08-15 Respivert Limited Kinase inhibitors
EP2970190A1 (en) 2013-03-14 2016-01-20 Respivert Limited Kinase inhibitors
KR102413704B1 (ko) 2014-02-14 2022-06-24 레스피버트 리미티드 항염증성 화합물로서의 방향족 헤테로사이클릭 화합물
EP3201189A1 (en) 2014-10-01 2017-08-09 Respivert Limited N-phenyl-3-quinazolin-6-yl-benzamide derivatives as p38 kinase inhibitors
BR112018067552A2 (pt) * 2016-04-06 2019-01-08 Topivert Pharma Ltd inibidores de cinase

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014033446A1 (en) * 2012-08-29 2014-03-06 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014162121A1 (en) * 2013-04-02 2014-10-09 Topivert Pharma Limited Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles
CN105246884A (zh) * 2013-04-02 2016-01-13 瑞斯比维特有限公司 用作激酶抑制剂的脲衍生物
CN105408315A (zh) * 2013-04-02 2016-03-16 瑞斯比维特有限公司 激酶抑制剂
WO2015092423A1 (en) * 2013-12-20 2015-06-25 Respivert Limited Urea derivatives useful as kinase inhibitors
WO2016051187A1 (en) * 2014-10-01 2016-04-07 Respivert Limited Diaryl urea derivatives as p38 kinase inhibitors

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