KR102380457B1 - 고함량의 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법 - Google Patents

고함량의 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법 Download PDF

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Abstract

탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법으로, 진달래 속 뿌리를 건조시키고 분쇄하는 단계; 분쇄된 진달래 속 뿌리를 초임계 추출하는 단계; 초임계 추출후 얻어진 진달래 뿌리 초임계 추출박을 회수하여 주정으로 추출한후, 이를 필터링하는 단계; 상기 필터링된 주정 추출물을 여과하여 탁시폴린 배당체 추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법이 제공된다.

Description

고함량의 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법{A mathod for extracting Taxifolin Glycoside with high content and Taxifolin Non-Saccharide}
본 발명은 고함량의 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 탁시폴린 배당체 고함량추출물과 탁시폴린 비당체를 진달래 속 식물로부터 효과적으로 추출하는, 고함량의 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법에 관한 것이다.
천연물 유래 다양한 생리활성 기능성을 발휘하는 폴리페놀 성분중 하나는 플라보노이드계열의 화합물이다.
그중 탁시폴린 배당체와 비당체 화합물은 다양한 생리활성이 보고되고 있다 그러나 천연물로부터 일반적인 추출방법으로 추출할 경우에는 그 함량이 현저히 낮음. 식물자원 활용의 극대화와 고부가가치를 실현하기 위해서는 고함량 추출방법이 개발될 필요가 있다.
대한민국 공개특허 10-2012-0034298 대한민국 공개특허 10-2008-0071017
따라서, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 항산화 효능 등의 특성을 갖는 탁시폴린 배당체와 비당체 화합물을 연속된 공정으로 고함량으로 추출할 수 있는 방법과 그 용도를 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법으로, 진달래 속 뿌리를 건조시키고 분쇄하는 단계; 분쇄된 진달래 속 뿌리를 초임계 추출하는 단계; 초임계 추출후 얻어진 진달래 뿌리 초임계 추출박을 회수하여 주정으로 추출한후, 이를 여과하는 단계; 및 상기 여과된 주정 추출물을 여과하여 분획하여 탁시폴린 배당체 추출물을 수득하는 단계를 포함하는, 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 초임계 추출하는 단계는 CO2 가스와 고압조건에서 식용주정을 투입하여 추출을 진행한다.
본 발명은 상기 수득된 탁시폴린 배당체 추출물을 효소분해하여 탁시폴린 비당체 추출물을 수득하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 효소분해는 상기 탁시폴린 배당체 추출물을 가수분해하는 방식이다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 탁시폴린 배당체는 하기 식(1)의 화합물을 포함한다.
Figure 112021122609119-pat00001
(1)
본 발명의 일 실시예에서, 상기 탁시폴린 비당체는 하기 식(2)의 화합물을 포함한다.
Figure 112021122609119-pat00002
(2)
본 발명의 일 실시예에서, 상기 탁시폴린 배당체 추출물은 항산화능을 갖는다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 탁시폴린 비당체 추출물은 항산화능을 갖는다.
본 발명은 또한 상술한 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법에 의하여 추출된 탁시폴린 배당체 추출물 또는 비당체를 포함하는, 탈모 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 추출방법에 의하면, 특히 국내 자생 수목자원인 진달래 나무 유래 탁시폴린 배당체의 함량을 현저히 높인 고함량 추출물과 이로부터 효소적 가수분해를 실시하여 탁시폴린 비당체의 함량을 현저히 높인 추출물을 얻을 수 있다.
도 1a 및 1b는 각각 본 발명의 일 실시예에 따른 초임계추출과 효소분해를 이용한 고함량의 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법을 단계도 및 추출방법의 흐름도이다.
도 2 및 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 추출물의 TLC 분석결과이다.
도 4 내지 8은 탁시폴린 비당체(RMRF Ⅱ) 분석결과이다. 여기에서 도 4는 탁시폴린 비당체 표준 HPLC chromatogram이고, 도 5 내지 8은 각각 효소분해를 실시한 후 수득한 탁시폴린 비당체(RMRF Ⅱ), 60%주정 추출물(RMR60E), RMRFⅠ 및 이를 모두 비교한 HPLC 분석결과이다.
도 9 내지 13은 탁시폴린 배당체(RMRF Ⅰ)에 대한 분석결과이다. 여기에서 도 4는 탁시폴린 배당체 표준 HPLC chromatogram이고, 도 5 내지 8은 각각 효소분해를 실시한 후 수득한 탁시폴린 비당체(RMRF Ⅱ), 60%주정 추출물(RMR60E), RMRFⅠ 및 이를 모두 비교한 HPLC 분석결과이다.
도 14 및 15는 RMRFⅡ와 주요 화합물인 탁시폴린 배당체와 탁시폴린 비당체를 대상으로 항산화 실험(DPPH(2,2-디페닐-1-피크릴하이드라질), ABTS 라디칼 소거능 실험) 결과이다.
이하, 도면을 참조하여 본 발명의 구체적인 실시형태를 설명하기로 한다. 그러나 이는 예시에 불과하며 본 발명은 이에 제한되지 않는다.
본 발명을 설명함에 있어서, 본 발명과 관련된 공지기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략하기로 한다. 그리고, 후술되는 용어들은 본 발명에서의 기능을 고려하여 정의된 용어들로서 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 그러므로 그 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다.
본 발명의 기술적 사상은 청구범위에 의해 결정되며, 이하의 실시예는 본 발명의 기술적 사상을 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 효율적으로 설명하기 위한 일 수단일 뿐이다. 본 발명은 진달래 속 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명은 항산화능과 같은 다양한 생리활성을 갖는 탁시폴린 배당체 또는 탁시폴린 비당체를 고함량으로 추출할 수 있는 방법을 제공한다. 이를 위하여 본 발명은 진단래속 식물의 뿌리를 원료로 하여, 하나의 연속된 공정으로 배당체-비당체를 추출한다.
이로부터 얻은 탁시폴린 배당체 또는 탁시폴린 비당체를 포함하는 조성물은 높은 항산화능을 가지며, 이를 이용하여 탈모 치료 또는 예방용의 약학적 조성물로 사용가능하며, 이 경우 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 및 카타플라스마제로 구성된 군으로부터 선택된 제형을 가질 수 있다. 또한, 탁시폴린 배당체 또는 탁시폴린 비당체를 포함하는 조성물은 화장료 조성물로 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어맛사지크림, 헤어왁스, 헤어에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스및 헤어스프레이로 구성된 군으로부터 선택된 제형을 가질 수 있다. 또한 본 발명에 따른 조성물의 탈모는 인간 뿐만 아니라 동물(예를 들어 애완견, 고양이 등)들에게도 적용될 수 있으며, 이는 본 발명의 범위에 속한다.
도 1a 및 1b는 각각 본 발명의 일 실시예에 따른 초임계추출과 효소분해를 이용한 고함량의 탁시폴린 배당체 추출물과 탁시폴린 비당체 추출방법을 단계도 및 추출방법의 흐름도이다.
도 1a 및 1b를 참조하면, 진달래 속 뿌리를 건조시키고 분쇄하는 단계; 분쇄된 진달래 속 뿌리를 초임계 추출하는 단계; 초임계 추출후 얻어진 진달래 뿌리 초임계 추출박을 회수하여 주정으로 추출한후, 이를 여과하는 단계; 상기 여과된 주정 추출물을 여과하여 분획하여 탁시폴린 배당체 추출물을 수득하는 방식으로 탁시폴린 배당체를 추출하며, 이후 가수분해효소를 통하여 탁시폴린 배당체 추출물을 분해하여 비당체를 얻게 된다.
이 경우, 진달래속 뿌리의 높은 탁시폴린을 월등하게 높은 함량비로 유지하는 배당체 또는 비당체를 얻을 수 있다.
이하 실시예와 실험예 등을 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하며, 도 1은 하기 설명하는 추출방법의 흐름도이다.
실시예
초임계 추출
진달래 뿌리 초임계 추출을 위해 초임계유체 추출 연구용 장비 (ISA-SEFE-0500-0700-080, IlsinAutoclave, Daejeon, Korea)를 사용하였다. 진달래 뿌리 시료 이물질을 제거하고 세척한 후, 음건하여 실험재료로 사용하였다.
건조된 시료 100g단위별로 200 mesh의 분쇄망을 통과하도록 분쇄하고, 진달래 뿌리 시료를 추출조의 온도를 40~60℃로 조절하여 온도를 유지시켰다.
온도가 안정화되면 진달래 뿌리 시료를 넣고 CO
Figure 112021122609119-pat00003
가스를 등압으로 유지시킨 후, 고압펌프를 이용하여 line을 통해 실험압력 조건인 400~600 bar에 도달할 때까지 제어밸브(Control valve)를 조절하여 주입하였다.
설정 압력에 도달한 후 추출조 하부로 식용주정을 분당 5mL 또는 10mL씩 60분 또는 240분 동안 총 식용알콜인 주정을 투입하여 추출을 진행하였으며, 시료에 남아있는 잔존 에탄올을 제거하기 위해 설정된 압력과 온도로 30 min 동안 고압펌프를 이용하여 CO
Figure 112021122609119-pat00004
를 흘려보내며 추출을 완료하였다.
용매분획
초임계 추출후 얻어진 진달래 뿌리 초임계 추출박을 회수하여 식용알콜(30~100%)에 실온에 3일 추출후, filter paper 여과를 통해서 감압농축과 동결건조를 통해서 최종 진달래 뿌리 초임계 추출박 주정 추출물(RMSCFR)을 획득하였다. 획득한 RMSCFR을 증류수(1차 또는 3차 증류수)에 녹인후 filter paper 여과를 실시한 후 분별깔때기를 사용하여 Ethyl acetate(EtOAC)층과 물 층을 확보하였다. 이때 얻어진 EtOAC 추출물을 제 1 진달래 유래 고함량 추출물(RMRFⅠ)이라고 할 수 있다
두 번째 진달래 유래 고함량 추출물 (RMRF Ⅱ)확보
상술한 방식으로 수득된 RMRFⅠ 1g을 증류수 150ml에 녹이고 효소를 각각 8ml씩 추가한 뒤, 교반기로 반응시켰다. 여기에서 효소는 가수분해효소인 팩티넥스 계열의 PectinexUltra SP-L, PectinexUltra Pulp를 사용하였다. 이후 10000rpm에서 15분 동안 원심 분리 후 Ethyl Acetate로 용매분획을 실시하고, 농축기로 감압농축을 한 뒤 하루 동안 Vacuum dry oven에서 감압건조시켜, 제 2 진달래 유래 고함량 추출물(RMRF Ⅱ) 0.6g을 확보하였다.
실험예
RMRFⅠ및 RMRF Ⅱ 분석
본 실험에서는 RMRF Ⅰ과 이를 효소처리함에 따라 얻어지는 RMRF Ⅱ에 대한 TLC 분석을 하였다.
도 2 및 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 추출물의 TLC 분석결과이다.
도 2를 참조하면, 탁시폴린(Taxifolin) 배당체(RMRF Ⅰ)가 효소분해로 인해 당을 잃으면서 비당체(RMRF Ⅱ)로 변환된 것을 정성적으로 확인할 수 있다.
또한 도 3을 참조하면, 탁시폴린 비당체와 탁시폴린 배당체와 같이 TLC 분석을 실시했을 때, 효소분해를 실시한 RMRF Ⅱ를 효소분해 전과 비교해보면 탁시폴린 비당체 spot이 매우 진해지고 배당체 spot이 옅어진 것을 확인할 수 있었다. 따라서, 본 발명에 따라 얻어지는 고함량 추출물 중 효소처리 전 추출물은 초임계추출에 따랑 얻어지는 탁시폴린 배당체, 그리고 효소처리 후 얻어지는 추출물은 탁시폴린 비당체이다.
HPLC 분석 결과(비당체 정량 분석)
HPLC 분석을 위해 Waters 2695 Separation module, 2487 Dual
Figure 112021122609119-pat00005
Absorbance Detector를 사용하였다. 컬럼은 SkyPak C18 analytical column (5
Figure 112021122609119-pat00006
), Phenomenex KJ0-4282 guard column을 사용하였으며, 이동상으로 1% Formic acid (A), ACN (B) 사용하였다 (Gradient program: 10%B 0min, 60%B 0-40min, 100%B 40-45min, 10%B 45-50min, 10%B 50-60min)
도 4 내지 8은 탁시폴린 비당체(RMRF Ⅱ) 분석결과이다. 여기에서 도 4는 탁시폴린 비당체 표준 HPLC chromatogram이고, 도 5 내지 8은 각각 효소분해를 실시한 후 수득한 탁시폴린 비당체(RMRF Ⅱ), 60%주정 추출물(RMR60E), RMRFⅠ 및 이를 모두 비교한 HPLC 분석결과이다.
도 4 내지 8을 참조하면, 60%주정 추출물(RMR60E)과 RMRFⅠ에서는 탁시폴린 비당체가 검출되지 않았으나, 효소분해를 실시한 후 수득한 탁시폴린 비당체(RMRF Ⅱ)에서는 그 함량이 194.6925 (μg/ml)까지 검출된 것을 확인할 수 있었다(도 5 참조).
HPLC 분석 결과(배당체 정량 분석)
본 실험예에서는 탁시폴린 배당체에 대한 HPLC 정량실험을 실시하였다.
도 9 내지 13은 탁시폴린 배당체(RMRF Ⅰ)에 대한 분석결과이다. 여기에서 도 4는 탁시폴린 배당체 표준 HPLC chromatogram이고, 도 5 내지 8은 각각 효소분해를 실시한 후 수득한 탁시폴린 비당체(RMRF Ⅱ), 60%주정 추출물(RMR60E), RMRFⅠ 및 이를 모두 비교한 HPLC 분석결과이다.
도 9 내지 13을 참조하면, 기존 RMRFⅠ에 비해 RMRFⅠ 효소분해물(RMRFⅡ)의 탁시폴린 배당체 함량이 268.65% 감소한 것을 확인할 수 있었다. 이는 효소적 가수분해를 통해서 탁시폴린 배당체가 감소하고 탁시폴린 비당체가 증가한 것이라는 것을 증명한다. 또한 진달래 유래 고함량 탁시폴린 배당체 추출물(RMRFⅠ)에서 탁시폴린 배당체 함량을 분석한 결과 60%주정 추출물 대비 684.17% 증가하였고, 진달래 유래 고함량 탁시폴린 배당체 추출물(RMRFⅡ)에서 탁시폴린 배당체 함량을 분석한 결과 60%주정 추출물(RMR60E) 대비 254.67% 증가한 것을 알 수 있다. .
항산화 분석
RMRFⅡ와 주요 화합물인 탁시폴린 배당체와 탁시폴린 비당체를 대상으로 항산화 실험(DPPH(2,2-디페닐-1-피크릴하이드라질), ABTS 라디칼 소거능 실험)을 실시하고, 이를 각각 도 14 및 15에 표시하였다.
도 14를 참조하면, DPPH 라디컬 소거능 실험에서 시료 모두 농도 의존적으로 라디칼 소거능이 된 것을 확인할 수 있었다.
실험에 사용된 모든 시료는 매우 강력한 항산화 활성을 확인할 수 있었으며, 특히 탁시폴린 비당체는 양성대조군인 비타민C와 동등이상의 강력한 항산화 활성을 확인하였다.
도 15를 참조하면, ABTS 실험에는 탁시폴린 배당체와 탁시폴린 비당체 모든 시료의 저농도에서 양성대조군인 비타민C(Vit)의 활성을 넘는 뛰어난 항산화능을 보여주었으며, 본 발명의 일 실시예에 따른 탁시폴린 배당체와 비당체 화합물은 양성대조군인 비타민C에 비교하였을 때 매우 우수한 항산화 활성을 포함하는 것을 알 수 있다.
구조분석
배당체
본 발명의 일 실시예에 따른 배당체의 NMR 분석결과는 다음과 같다.
H-NMR, (700 MHz, MeOH-d4) δ : 3.38 (1H, dd, J = 11.2, 3.5 Hz, H-5''), 3.55 (1H, m, H-3''), 3.58 (1H, m, H-2''), 3.80 (1H, m, H-4''), 3.82 (1H, d, J = 3.5 Hz, H-1''), 3.91 (1H, dd, J=11.2, 7.0 Hz, H-5''), 4.79 (1H, d, J=10.5 Hz, H-3), 5.12 (1H, d, J=10.5 Hz, H-2), 5.90 (1H, d, J=2.1Hz, H-8), 5.92 (1H, d, J=2.1 Hz, H-6), 6.79 (1H, d, J=8.4 Hz, H-5'), 6.84 (1H, dd, J=8.4, 2.1 Hz, H-6'), 6.965 (1H, d, J=2.1 Hz, H-2'); ¹³C-NMR, (175 MHz, MeOH-d4) δ : 196.17 (C-4), 169.04 (C-7), 165.74 (C-5), 164.28 (C-9), 147.18 (C-4'), 146.58 (C-3'), 128.98 (C-1'), 120.79 (C-6'), 116.30 (C-5'), 116.00 (C-2'), 102.40 (C-1"), 101.40 (C-10), 97.41 (C-6), 96.42 (C-8), 83.83 (C-2), 76.67 (C-3), 73.23 (C-2"), 71.12 (C-3"), 66.79 (C-4"), 63.36 (C-5").
즉, 본 실험에서는 RMRFⅠ과 RMRFⅡ로부터 Prep-LC와 MPLC 컬럼크로마토그래피 반복정제를 통해서 최종 단일한 화합물을 순수하게 분리정제를 하였으며, 분리정제한 화합물을 대상으로 구조동정을 실시하기 위해서 NMR과 LC/MS데이터를 측정하였다. 측정결과 NMR데이터 결과는 위와같이 확인이 되었으며, 최종 LC-MS를 통해서 확인된 분자량을 확인하여 기존 참고문헌과 비교하여서 최종 탁시폴린의 배당체형태인 탁시폴린-3-O-α-L-아라비노피라노사이드(탁시폴린-3-O-α-L-arabinopyranoside)로 구조동정을 할 수 있었다.
이에 따라 얻어진 배당체 구조는 하기 구조식과 같다.
Figure 112021122609119-pat00007
비당체
본 발명의 일 실시예에 따른 배당체의 NMR 분석결과는 다음과 같다.
White yellow amorphous powder
Negative LC-MS: m/z 303.0 [M-H]-
1 H-NMR (300 MHz, DMSO-d 6): δ 11.92 (1H, s, 5-OH), 6.75~6.88 (3H in total, m, H-2‘, H-5‘ and H-6‘), 5.92 (1H, d, J=2.1 Hz, H-8), 5.87 (1H, d, J=2.1 Hz, H-6), 5.00 (1H, d, J=11.1 Hz, H-2), 4.52 (1H, d, J=11.1 Hz, H-3).
13C-NMR (75 MHz, DMSO-d6): 197.2 (C-4), 167.1 (C-7), 163.5 (C-5), 162.8 (C-9), 146.0 (C-4'), 145.1 (C-3'), 128.2 (C-1'), 119.6 (C-6'), 115.5 (C-5'), 115.2 (C-2'), 100.6 (C-10), 96.1 (C-6), 95.1 (C-8), 83.1 (C-2), 71.6 (C-3)
RMRFⅡ로부터 Prep-LC와 MPLC 컬럼크로마토그래피 반복정제를 통해서 최종 단일한 화합물을 순수하게 분리정제를 하였으며, 분리정제한 화합물을 대상으로 구조동정을 실시하기 위해서 NMR과 LC/MS데이터를 측정하였다. 측정결과 NMR데이터 결과는 위와같이 확인이 되었으며, 최종 LC-MS를 통해서 확인된 분자량을 확인하여 기존 참고문헌과 비교하여서 최종 탁시폴린의 비당체형태인 탁시폴린으로 구조동정을 할 수 있었다.
이에 따라 얻어진 비당체 구조는 하기 구조식과 같다.
Figure 112021122609119-pat00008
탁시폴린(아글리콘,탁시폴린(aglycone))
이상의 결과는 국내 자생 수목자원인 진달래 나무 유래 탁시폴린 배당체의 함량을 현저히 높인 고함량 추출물과 이로부터 효소적 가수분해를 실시하여 탁시폴린 비당체의 함량을 현저히 높인 추출물을 얻을 수 있다는 것을 의미하며, 이러한 탁시폴린 배당체 또는 비당체의 높은 생리활성(항산화능)은 다양한 치료제나 기능성 조성물(예를 들어 탈모 예방, 방지, 치료용 조성물)로 사용될 수 있음을 시사한다.

Claims (10)

  1. 탁시폴린 비당체 추출방법으로,
    진달래 속 뿌리를 건조시키고 분쇄하는 단계;
    분쇄된 진달래 속 뿌리를 초임계 추출하는 단계;
    초임계 추출후 얻어진 진달래 뿌리 초임계 추출박을 회수하여 주정으로 추출한후, 이를 여과하는 단계;
    상기 여과된 주정 추출물을 여과하여 분획하여 탁시폴린 배당체 추출물을 수득하는 단계; 및
    상기 수득된 탁시폴린 배당체 추출물을 효소분해하여 탁시폴린 비당체 추출물을 수득하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 탁시폴린 비당체 추출방법.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 초임계 추출하는 단계는 CO2 가스와 고압조건에서 식용주정을 투입하여 추출을 진행하는 것을 특징으로 하는, 탁시폴린 비당체 추출방법.
  3. 삭제
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 효소분해는 상기 탁시폴린 배당체 추출물을 가수분해하는 것을 특징으로 하는, 탁시폴린 비당체 추출방법.
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 탁시폴린 배당체는 하기 식(1)의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 탁시폴린 비당체 추출방법.
    Figure 112021149315538-pat00009
    (1)
  6. 제 3항에 있어서,
    상기 탁시폴린 비당체는 하기 식(2)의 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 탁시폴린 비당체 추출방법.
    Figure 112021149315538-pat00010
    (2)
  7. 삭제
  8. 제 1항, 제 2항, 제 4항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 탁시폴린 비당체 추출물은 항산화능을 갖는 것을 특징으로 하는, 탁시폴린 비당체 추출방법.
  9. 삭제
  10. 삭제
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