KR102356519B1

KR102356519B1 - 붓꽃 구근 추출물의 안정화 방법 및 이를 포함한 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102356519B1
Application number: KR1020210118646A
Authority: KR
Inventors: 김정수; 박시준; 윤은정; 김현민; 김영석; 김준오
Original assignee: 주식회사 에이바이오머티리얼즈; 주식회사 신세계인터내셔날
Priority date: 2021-09-06
Filing date: 2021-09-06
Publication date: 2022-02-08

Abstract

본 발명은 붓꽃 추출물의 항산화 활성 안정화 방법 및 안정화된 붓꽃 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 나노 에멀젼화, 다공성 무기입자 담지를 통하여 붓꽃 추출물의 항산화 활성을 효과적으로 안정화하고 이를 화장료로 이용하는 기술에 관한 것이다.

Description

붓꽃 구근 추출물의 안정화 방법 및 이를 포함한 화장료 조성물{Stabilizing method of Iris root extract and cosmetic composition containing the same}

본 발명은 붓꽃 추출물의 항산화 활성 안정화 방법에 관한 것으로서, 구체적으로는 나노 에멀젼화, 다공성 무기입자 담지를 통하여 붓꽃 추출물의 항산화 활성을 효과적으로 안정화하고 이를 화장료로 이용하는 기술에 관한 것이다.

화장품은 피부를 보호하고 아름다움을 부여하는 목적으로 사용되어 왔다. 그러나 최근에는 기능성을 강조하여 기존의 단순한 피부보호나 보습 등을 넘어서 피부주름이나 탄력개선, 항산화, 미백 등 다양한 기능을 가지는 기능성 화장품이 각광을 받고 있다. 또한, 우리 몸에 있어서, 피부는 외부 환경과 직접 접해 있으면서 다양한 유래 인자로부터 우리 몸을 보호하는 기능을 담당하고 있다. 그러나 피부는 노화, 자외선, 외부 오염 물질 및 스트레스에 의해 점점 손상되고, 이러한 요인들로부터 피부를 보호하는 기능이 약화됨으로써, 세포 보호 및 증식 유지 능력이 떨어진다.

이러한 내적, 외적 요인에 의한 피부 자극, 피부 노화 등으로 인한 피부 손상을 방지하여 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻어진 생리 활성 물질들을 화장품 등의 피부 외용제에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유 기능을 유지시키고 피부 세포 항산화 활성화시켜 피부 신진대사를 촉진하여 피부 건강을 유지하고자 하는 노력이 계속되고 있으며, 이에 따른 연구가 다양하게 진행되어 왔다.

한편 붓꽃(Iris)은 외떡잎식물 백합목의 붓꽃과 식물로 북반구의 온대지방에 200여 종이 자라고 한국에 14종이 있다. 여러 품종이 있으나, 영국 붓꽃, 저먼아이리스, 스페인붓꽃, 더치아이리스 4 계통으로 나눈다. 뿌리줄기를 약재로 쓰는데 소화불량, 타박상, 치질 등에 효능을 지니고 있는 것으로 알려져 있다. 특히 독일 붓꽃(Iris germanica)은 높이 30∼60cm로 가지가 갈라지며 잎은 칼 모양이다. 꽃은 4∼5월에 크기 6∼8cm 정도로 핀다. 5개의 꽃이 피고 향기가 있는 것도 있으며, 외화피는 자주색으로 구부러져 밑으로 쳐져 있다. 안쪽 꽃잎은 달걀을 거꾸로 세운 듯이 돔(dome) 모양으로 곧게 서고 짙은 등자색이다.

이리게닌(irigenin)은 이소플라본(isoflavone)으로 붓꽃과(Iridaceae) 식물의 뿌리줄기에 배당체 이리딘으로 포함되어 있으며, 분자량은 360, 융점은 185℃이다. 이리게닌의 당뇨병합병증 예방 또는 치료효과, 퇴행성 뇌질환 예방 및 치료효과는 알려져 있으나, 아직까지 붓꽃의 이리게닌에 대한 피부개선 효능효과 및 안정성 개선에 대한 것은 구체적으로 보고된 바 없다.

대한민국 공개특허 제10-2007-0115507호 “독일붓꽃, 병풀, 캐모마일, 달맞이꽃 및 어성초 추출물을 함유하는 여드름 피부 개선을 위한 피부 외용제 조성물”에는 붓꽃 등의 복합 생약 추출물이 여드름성 피부의 치료 및 개선 효과를 나타낼 수 있음이 개시되어 있다. 또한, 대한민국 공개특허 제10-2017-0136956호 "혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물"에는 '장미, 작약 및 아이리스의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습, 항산화, 항염 등의 우수한 효과를 나타낸다'는 것이 개시되어 있다.

본 발명자들은 이러한 붓꽃 구근 추출물을 화장료로 사용함에 있어서, 그 항산화 활성을 장기간 유지시킬 수 있는 안정화 방법에 대하여 연구하였으며 그 결과 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 붓꽃 구근 추출물의 항산화활성을 장기간 유지시키는 붓꽃 구근 추출물의 항산화활성 안정화 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 함유하는 항산화용, 미백용, 주름개선용, 보습용 화장료 조성물을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, (A)글리세린 30~50 중량%와 1,3-butylene glycol 5~15 중량%에 유화제 5~12 중량%를 가하여 혼합하는 단계; (B)붓꽃 구근 추출물 0.1~5 중량%, 콩/왕겨 발효추출물 1~12 중량%를 가하여 혼합 교반하는 단계; (C)붓꽃 구근 열수 추출물 10~25 중량%를 가하고 유화한 후, 수용성 양이온 개질제 0.1~3 중량%를 가하여 혼합 교반하는 단계; (D)고압균질기(Microfludizer)를 통해 균질화하여 O/W형 나노 에멀젼을 제조하는 단계; 및 (E)실리카 용액, 염화칼슘 용액 및 탄산나트륨 용액을 가하여 혼합 교반하고, 균질기(Homogenizer)를 이용하여 1,000~3,000rpm으로 균질화하는 단계를 포함하는 붓꽃 구근 추출물의 항산화활성 안정화 방법이 제공된다.

상기 (B)단계의 붓꽃 구근 추출물은 붓꽃 구근 또는 뿌리에 5~20배 중량의 70-90% 에탄올을 가하고 24~36시간 교반한 후, 침전물을 여과하여 비활성 다당체를 제거한 추출물인 것을 특징으로 한다.

상기 유화제는 PGA(Polyglycolic acid), PLLA(Poly-L-lactide), PDLLA(Poly-D,L-lactide), PCL(Poly-ε-caprolactone), 메톡시 PEG-22/도데실글리콜 코폴리머(Methoxy PEG-22/Dodecyl Glycol Copolymer), 이눌린(Inulin), 이눌린 라우릴 카바메이트(Inulin Lauryl Carbamate), 레시틴(Lecithin), 글리세릴/씨트레이트/락테이트/리놀리에이트/올레이트(Glyceryl citrate/Lactate/Linoleate/Oleate), 폴리글리세릴-10 미리스테이트(Polyglyceryl-10 Myristate) 및 폴리소르베이트(Polysorbate)로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 것임을 특징으로 한다.

상기 콩/왕겨 발효추출물은 콩/왕겨를 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드(caprylic/capric triglyceride)로 추출한 후 유산균 발효시킨 것이다.

상기 수용성 양이온 개질제는 소듐코코피지-다이모늄클로라이드포스페이트(Sodium Coco PG-Dimonium Chloride Phosphate), 폴리(디메틸디알릴 암모늄 클로라이드)(Poly(Dimethyldiallyl Ammonium Chloride)), 디메틸설페이트(Dimethylsulfate)와 비닐피롤리돈/디메틸아미노에틸 메타크릴레이트 공중합체(Vinylpyrrolidone/Dimethylaminoethyl Methacrylate Copolymer)의 반응에 의한 4급 암모늄, 메틸비닐이미다졸리움 클로라이드(Methylvinylimidazolium Chloride), 비닐피롤리돈(Vinylpyrrolidone), 탈로트리모늄 클로라이드(Tallowtrimonium Chloride), 세트리모늄 클로라이드(Cetrimonium Chloride), 아몬드아미도프로말코늄 클로라이드(Almondamidopropalkonium Chloride), 바바수아미도프로팔코늄 클로라이드(Babassuamidopropalkonium Chloride), 베헨트리모늄 클로라이드(Behentrimonium Chloride), 카프릴릴알코늄 클로라이드(Caprylylalkonium Chloride) , 세틸베라네이트 클로라이드(Cetyl Berainate Chloride), 디세틸다이모늄 클로라이드(Dicetyldimonium Chloride) 및 헥사디메트린 클로라이드(Hexandimethrine Chloride)로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 것이다.

상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면 상기 방법에 의하여 항산화 활성이 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.0001 중량％ 내지 30 중량％ 함유하는 화장료 조성물이 제공된다.

상기 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 이리게닌(Irigenin), 이리딘(Iridin), 나린제닌(Naringenin), 제니스테인(Genistein), 이리린(Irilin), 아이리스텍토리게닌(Iristectorigenin), 이리소리돈(Irisolidone), 텍토리게닌(Tectorigenin), 이리스쿠마오닌 메칠 에테르(Iriskumaonin methyl ether), 이리플로제닌(Iriflogenin), 8-하이드록시이리론 5-메칠 에테르(8-Hydroxyirilone 5-methyl ether), 8-하이드록시이리론(8-hydroxyirilone), 아이리스카쉬미리아닌(Iriskashmirianin), 이리론(Irilone), 이리론 4-메틸 에테르(Irilone 4′-methyl ether), 5,3-디하이드록시-4,5-디메톡시6,7-메틸렌디옥시이소플라(5,3'-Dihydroxy-4',5'-dimethoxy 6,7-methylenedioxyisofla), 이리소론(Irisolone), 디초토민(Dichotomin), 니그리캐닌(Nigricanin), 아이리스플레틴(Irisflorentin), 무닌진(Muningin), 저매나즘(Germanaism), 이리론 4-O-글루코사이드(Irilone 4'-O-glucoside), 이리소리돈 7-O-beta-D-글루코사이드(Irisolidone 7-O-beta-D-glucoside), 호모텍토리딘(Homotectoridin), 파라텐세인 7-O-글루코사이드(Pratensein 7-O-glucoside), 텍토리제닌-40-O-이글루코사이드(Tectorigenin-40-O-diglucoside), 옴부인(Ombuin), 5,2-디하이드록시-3-메톡시-6,7-메칠렌디옥시플라본(5,2'-dihydroxy-3-methoxy-6,7-methylenedioxyflavone), 5,7,2-트리하이드록시-6-메톡시플라보논(5,7,2'-trihydroxy-6-Methoxyflavanone), 카테킨(Catechin), 스웨르티아자포닌(Swertiajaponin), 엠비제닌(Embigenin), 시르실리올-4-글루코사이드(Cirsiliol-4'-glucoside), 아이리스저메니컬(Irisgermanical A, B, C), 이소이리도제머널(Isoiridogermanal), 16-O-아세틸이소이리도저머널(16-O-acetylisoiridogermanal), 이리저머널(irigermanal), 디하이도이리제머널(α-dehydoirigermanal), 이리플로렌탈(Iriflorental), 이리팔리달(Iripallidal) 이리저머논(Irigermanone), 이리다이얼(Iridial), 이론(irone), 이리사이드(Iriside A), 하이드록시이리달(hydroxyiridal), 스티그마스테롤(Stigmasterol), 스티그마스테롤 3-B-D-글루코피리노사이드(Stigmasterol-3-β-D-glucopyranoside), 베타시토스테롤(β-sitosterol), 다우코스테롤(Daucosterol), 프로토카테츄산(Protochatechuic acid), 클로로겐산(Chlorogenic acid), 페롤산(Ferulic acid), 아포시닌(Apocynin), 안드로신(Androsin), 아이리스아마이드(Irisamide A, B)로 이루어진 군에서 선택된 적어도 1종의 활성이 안정화된 것이며, 더욱 바람직하게는 이리게닌의 활성이 안정화된 것 일 수 있으나, 제한적이지 않다.

상기 화장료 조성물은 항산화용, 미백용, 주름개선용, 및 보습용임을 특징으로 한다.

본 발명의 안정화 방법에 의하여 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 항산화활성을 장기간 유지 가능하므로 기능성 화장료 원료로서 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 실시예에서 제조된 안정화된 붓꽃 구근 추출물의 SEM 이미지를 나타낸다.

본 발명은 유화제 및 수용성 양이온 개질제를 이용하여 나노 에멀젼화하고, 이를 다시 실리카 용액을 이용하여 붓꽃 구근 추출물을 효과적으로 안정화시킴으로써 그 활성을 장기간 유지시켜 적은 양의 사용으로도 화장료의 항산화 및 항염 효과를 확보하는데 그 기술적 특징이 있다.

이하 붓꽃 구근 추출물의 안정화 방법에 관하여 상세하게 설명한다.

본 발명의 일 구체예에 따르면, (A)글리세린 30~50 중량%와 1,3-butylene glycol 5~15 중량%에 유화제 5~12 중량%를 가하여 혼합하는 단계; (B)붓꽃 구근 추출물 0.1~5 중량%, 콩/왕겨 발효추출물 1~12 중량%를 가하여 혼합 교반하는 단계; (C)붓꽃 구근 열수 추출물 10~25 중량%를 가하고 유화한 후, 수용성 양이온 개질제 0.1~3 중량%를 가하여 혼합 교반하는 단계; (D)고압균질기(Microfludizer)를 통해 균질화하여 O/W형 나노 에멀젼을 제조하는 단계; 및 (E)실리카 용액, 염화칼슘 용액 및 탄산나트륨 용액을 가하여 혼합 교반하고, 균질기(Homogenizer)를 이용하여 1,000~3,000rpm으로 균질화하는 단계를 포함하는 붓꽃 구근 추출물의 항산화활성 안정화 방법이 제공된다.

먼저 붓꽃 구근 추출물을 유화제와 콩/왕겨 발효 추출물을 이용하여 혼합 교반하고 캡슐화시킨다.

상기 붓꽃 구근 추출물은 붓꽃 구근 또는 뿌리에 5~20배 중량의 70-90% 에탄올을 가하고 24~36시간 교반한 후, 침전물을 여과하여 비활성 다당체를 제거한 추출물인 것이 바람직하다. 본 발명의 일 구체예에 따르면 붓꽃의 구근에 5-20배 중량의 70-90% 에탄올를 가하여 침전물이 생길 때까지 1일 이상 교반하고, 여과하여 비활성 다당체를 제거하고, 잔여 용매를 제거함으로써 항산화 활성이 우수한 붓꽃 구근 추출물이 제조된다.

붓꽃 구근 추출물에 함유되어 있는 이리게닌(Irigenin)과 같은 활성물질이 수용액에 용해되지 않으므로 오일류에 용해시킨다. 사용되는 오일류로는 글리세린, 1,3-butylene glycol, 카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드, 옥틸도데칸올, 에틸헥실글리세린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나가 사용될 수 있다.

상기 유화제로는 PGA(Polyglycolic acid), PLLA(Poly-L-lactide), PDLLA(Poly-D,L-lactide), PCL(Poly-ε-caprolactone), 메톡시 PEG-22/도데실글리콜 코폴리머(Methoxy PEG-22/Dodecyl Glycol Copolymer), 이눌린(Inulin), 이눌린 라우릴 카바메이트(Inulin Lauryl Carbamate), 레시틴(Lecithin), 글리세릴/씨트레이트/락테이트/리놀리에이트/올레이트(Glyceryl citrate/Lactate/Linoleate/Oleate), 폴리글리세릴-10 미리스테이트(Polyglyceryl-10 Myristate) 및 폴리소르베이트(Polysorbate)로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 것이 사용될 수 있다. 상기 레시틴은 하이드로제네이티드 포스파티딜콜린, 하이드로제네이티드 라이소포스파티딜콜린, 하이드로제네이티드 라이소레시틴, 하이드로옥실레이티드 레시틴 및 불포화레시틴으로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 레시틴이며, 바람직하게는 하이드레제네이트 라이소레시틴이다.

상기 유화제와 함께 콩/왕겨 발효추출물을 함께 혼합 교반하여 캡슐화 한다. 상기 콩/왕겨 발효추출물은 콩/왕겨를 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드(caprylic/capric triglyceride)로 추출한 후 유산균 발효시킨 것이다. 바람직한 일 구체예에 따르면 상기 콩/왕겨 발효 추출물은 콩과 왕겨를 동일 중량비율로 혼합하여 소수성 오일인 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드(caprylic/capric triglyceride)로 추출하여 콩/왕겨의 지용성 성분을 추출한 후, 이를 유산균 발효시켜 제조되는 것이다. 상기 콩/왕겨 발효 추출물은 그 자체로서 항염 및 자극완화 효과가 우수한 물질이며, 에멀젼의 안정화에도 기여하므로, 상기 콩/왕겨 발효 추출물의 첨가는 붓꽃 추출물의 안정화에 있어서도 중요하다.

이어서, 활성성분인 붓꽃 열수 추출물을 다시 첨가하여 유화한 후, 수용성 양이온 개질제을 가하여 혼합 교반한다. 본 발명에 있어서, 활성성분인 붓꽃 구근 추출물을 나누어 첨가하는 경우 항산화 유지율이 더 우수하였다. 구체적으로는 항산화 활성이 조금 더 우수한 에탄올 추출물을 먼저 유화제와 콩/왕겨 발효추출물과 함께 안정화시킨 후, 붓꽃 구근 열수 추출물을 유화단계에서 다시 첨가 하는 경우에 항산화활성의 유지율이 더 우수하다는 것을 확인하였다.

본 발명에서는 장기간 항산화 활성을 유지하기 위해 에멀젼의 표면을 수용성 양이온으로 개질하여 피부 외용제로 사용시 정전기적 인력에 의하여 피부 또는 모발에 부착되도록 하는 나노 에멀젼을 제조하는 것을 특징으로 한다. 본 발명에서는 음전하를 띄는 에멀젼을 양전하로 개질하여 에멀젼 표면의 전하를 바꿔줌으로써, 피부, 모발 등의 음전하를 띄는 영역에서 전기적 결합으로 인해 보다 오랫동안 효능이 유지되도록하는 캡슐화 기법을 적용하였다.

상기 수용성 양이온 개질제로는 소듐코코피지-다이모늄클로라이드포스페이트(Sodium Coco PG-Dimonium Chloride Phosphate), 폴리(디메틸디알릴 암모늄 클로라이드)(Poly(Dimethyldiallyl Ammonium Chloride)), 디메틸설페이트(Dimethylsulfate)와 비닐피롤리돈/디메틸아미노에틸 메타크릴레이트 공중합체(Vinylpyrrolidone/Dimethylaminoethyl Methacrylate Copolymer)의 반응에 의한 4급 암모늄, 메틸비닐이미다졸리움 클로라이드(Methylvinylimidazolium Chloride), 비닐피롤리돈(Vinylpyrrolidone), 탈로트리모늄 클로라이드(Tallowtrimonium Chloride), 세트리모늄 클로라이드(Cetrimonium Chloride), 아몬드아미도프로말코늄 클로라이드(Almondamidopropalkonium Chloride), 바바수아미도프로팔코늄 클로라이드(Babassuamidopropalkonium Chloride), 베헨트리모늄 클로라이드(Behentrimonium Chloride), 카프릴릴알코늄 클로라이드(Caprylylalkonium Chloride) , 세틸베라네이트 클로라이드(Cetyl Berainate Chloride), 디세틸다이모늄 클로라이드(Dicetyldimonium Chloride) 및 헥사디메트린 클로라이드(Hexandimethrine Chloride)로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 것이 사용될 수 있다.

이어서, 상기 에멀젼 용액을 고압균질기(Microfludizer)를 통해 균질화하여 100 ~ 200nm의 크기를 가지는 O/W형 나노 에멀젼을 제조함으로써 활성성분인 붓꽃 구근 추출물을 안정화시킨다.

2차 안정화를 위하여 실리카 용액, 염화칼슘 용액 및 탄산나트륨 용액을 가하여 혼합 교반하고, 균질기(Homogenizer)를 이용하여 1,000~3,000rpm으로 균질화한다. 이때, 상기 실리카 용액, 염화칼슘 용액 및 탄산나트륨 용액은 상기 에멀젼 용액 전체 중량에 대하여 각각 1~20중량%, 1~20 중량% 및 1~20 중량%의 비율로 사용할 수 있다.

이를 통하여 1~20 마이크로미터 크기의 입자로서, 각 입자 표면은 작은 구형 결정체 형태로 존재하는 다공성 무기입자에 담지됨으로써 붓꽃 구근 추출물이 더욱 안정화되는 것을 확인할 수 있었다(도 1).

본 발명의 안정화 방법에 의하여 안정화된 붓꽃 구근 추출물의 항산화 안정성을 확인한 결과 12주가 경과한 이후에도 그 활성이 그대로 유지되어 안정성이 우수함을 확인할 수 있었다(시험예 3). 또한, 로션을 제조하여 성상안정성을 평가한 결과 16주가 경과되는 동안에도 그 성상에 변화가 없음을 확인할 수 있었다(시험예 8).

상기 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.0001 중량％ 내지 30 중량％ 함유된다.

상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 피부 점착타입의 화장료, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 샴푸, 린스, 바디크렌저, 비누, 치약, 구강청정제, 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제의 제형으로 적용될 수 있다.

[실시예]

이하 실시예 및 시험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명이 하기의 예에 의하여 제한되지는 않는다.

제조예 1: 붓꽃 구근 추출물 제조

붓꽃(Iris germanica) 구근 100g을 자연상태에서 72시간 동안 상온에서 건조하여 건조된 붓꽃 구근 52g을 얻었다. 건조된 붓꽃 구근 40g에 90% 에탄올 400g을 가하여 침전물이 발생할 때까지 24시간 이상 교반한다. 침전된 붓꽃 구근 다당체를 제거하기 위하여 필터프레스를 이용하여 여과 및 회수한 후, 잔여 용매를 감압증류하여 제거하였다. 이어 45℃, 24~48 시간 조건으로 진공건조하여 추출물 파우더 10.62g(수율 26.55%)을 회수하였다.

제조예 2: 붓꽃 구근 열수 추출물 제조

건조된 붓꽃(Iris germanica) 구근 20g을 정제수 400g에 넣고, 80℃ 조건으로 3시간 중탕가온하여 추출하였다. 추출이 완료된 후 여과하여 추출액 380g을 회수하였다.

실시예 1: 안정화된 붓꽃 구근 추출물 제조

가온한 글리세린 250g과 1,3-butylene glycol 50g을 혼합하였다. 여기에 폴리카프로락톤(Polycaprolactone) 25g을 에탄올에 용해 후, 레시틴 25g을 첨가하여 용해한다. 여기에 상기 제조예 1에서 제조된 붓꽃(Iris germanica) 구근 추출물 10g과 콩과 왕겨를 동일 중량비율로 혼합하여 소수성 오일인 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드(caprylic/capric triglyceride)로 추출하고, 이를 유산균 발효시켜 제조한 콩/왕겨 발효 추출물 50g을 첨가하고 혼합하여 1시간 동안 교반하였다. 이를 용매 증발법을 통해서 에탄올을 완전히 제거하였다.

여기에 상기 제조예 2에서 제조된 붓꽃(Iris germanica) 열수 추출물 120g을 혼합하여 넣어주고 유화한 후, 다시 헥사디메트린 클로라이드 5g을 혼합하여 40분간 교반하였다. 여기에 고압균질기를 이용하여 800~1,000bar의 조건으로 3회 반복하여 나노 에멀젼을 제조하였다.

실리카 용액 10g, 염화칼슘 용액 10g과 탄산나트륨 용액 10g을 혼합하여 넣어주고 30분간 교반한 다음에, 균질기(Homogenizer)를 이용하여 1,000~3,000rpm으로 균질화하여 제조하였다.

비교예 1: 붓꽃 구근 추출물

상기 제조예 1에서 제조된 붓꽃 구근 추출물 10g을 글리세린 500g에 투입하여 60℃에서 완전용해하여 혼합하였다.

비교예 2: 붓꽃 구근 열수 추출물

상기 제조예 2에서 제조된 붓꽃 구근 열수 추출액 200g을 비교예 2로 하였다.

비교예 3: 안정화된 붓꽃 구근 추출물 제조

상기 실시예 1에 있어서 붓꽃 구근의 에탄올 추출물만을 첨가하여 에멀젼을 제조한 것만 달리하여 동일한 방법으로 아래와 같이 붓꽃 추출물 나노 에멀젼을 제조하였다. 가온한 글리세린 250g과 1,3-butylene glycol 50g을 혼합하였다. 여기에 폴리카프로락톤(Polycaprolactone) 25g을 에탄올에 용해 후, 레시틴 25g을 첨가하여 용해하였다. 여기에 붓꽃 구근 추출물 10g과 콩/왕겨 발효 추출물 50g을 첨가하여 혼합하여 1시간 동안 교반하였다. 이를 용매 증발법을 통해서 에탄올을 완전히 제거하였다. 여기에 정제수 120g을 혼합하여 넣어주고 유화한 후, 다시 헥사디메트린 클로라이드 5g을 혼합하여 40분간 교반한다. 여기에 고압균질기를 이용하여 800bar의 조건으로 3회 반복하여 나노 에멀젼을 제조하였다.

비교예 4: 안정화된 붓꽃 구근 추출물 제조

붓꽃 열수 추출물만을 첨가하여 나노 에멀젼을 아래와 같은 방법으로 제조하였다. 가온한 글리세린 250g과 1,3-butylene glycol 50g을 혼합하였다. 여기에 폴리카프로락톤(Polycaprolactone) 25g을 에탄올에 용해 후, 레시틴 25g을 첨가하여 용해한다. 여기에 콩/왕겨 발효 추출물 50g을 첨가하여 혼합하여 1시간 동안 교반하였다. 이를 용매 증발법을 통해서 에탄올을 완전히 제거하였다. 여기에 붓꽃 열수 추출물 120g을 혼합하여 넣어주고 유화한 후, 다시 헥사디메트린 클로라이드 5g을 혼합하여 40분간 교반한다. 여기에 고압균질기를 이용하여 800bar의 조건으로 3회 반복하여 나노 에멀젼을 제조하였다.

비교예 5: 붓꽃 구근 추출물 나노 에멀젼 제조

상기 실시예 1에서의 실리카 용액, 수용성 염화칼슘과 수용성 탄산나트륨을 첨가하지 않고 붓꽃 추출물 나노 에멀젼을 아래와 같은 방법으로 제조하였다. 가온한 글리세린 250g과 1,3-butylene glycol 50g을 혼합하였다. 여기에 폴리카프로락톤(Polycaprolactone) 25g을 에탄올에 용해 후, 레시틴 25g을 첨가하여 용해한다. 여기에 붓꽃 구근 추출물 10g과 콩/왕겨 발효 추출물 50g을 첨가하여 혼합하여 1시간 동안 교반하였다. 이를 용매 증발법을 통해서 에탄올을 완전히 제거하였다. 여기에 붓꽃 열수 추출물 120g을 혼합하여 넣어주고 유화한 후, 다시 헥사디메트린 클로라이드 5g을 혼합하여 40분간 교반한다. 여기에 고압균질기를 이용하여 800bar의 조건으로 3회 반복하여 나노 에멀젼을 제조하였다.

비교예 6: 안정화된 붓꽃 구근 추출물 제조

상기 실시예 1에서의 콩/왕겨 발효 추출물를 첨가하지 않고 붓꽃 추출물 나노 에멀젼을 아래와 같은 방법으로 제조하였다. 가온한 글리세린 250g과 1,3-butylene glycol 50g을 혼합하였다. 여기에 폴리카프로락톤(Polycaprolactone) 25g을 에탄올에 용해 후, 레시틴25g을 첨가하여 용해한다. 여기에 붓꽃 구근 추출물 10g과 글리세린 50g을 첨가하여 혼합하여 1시간 동안 교반하였다. 이를 용매 증발법을 통해서 에탄올을 완전히 제거하였다. 여기에 다시 헥사디메트린 클로라이드 5g과 붓꽃 열수 추출물 120g을 혼합하여 넣어주고 40분간 교반한 다음에, 고압 호모게나이저를 이용하여 800~1000bar의 조건으로 3회 반복하여 나노 에멀젼을 제조하였다.

시험예 1: 항산화 효능 시험

붓꽃 구근 추출물의 항산화활성을 평가하기 위하여 상기 제조예 1, 2에서 제조된 붓꽃 구근 추출물과 열수 추출물을 사용하여 DPPH 라디칼에 대한 프리라디칼 소거활성 시험(DPPH free radical scavenging effect assay)을 다음과 같은 방법으로 수행하였다.

DPPH 라디칼 소거활성은 DPPH 라디칼에 대한 시료의 환원력으로 측정하였다. DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)을 에탄올에 용해하여 0.4mM 용액을 제조한다. Standard로 사용하는 BHT(Butylated hydroxyl toluene 또는 2,6-Di-tert-butyl-p-cresol)을 에탄올에 용해하여 준비한다. 96 well plate에 농도별로 준비된 시료 또는 BHT 100㎕와 0.4 mM DPPH 용액 100㎕을 넣고 혼합한다. 37℃에서 30분간 반응시킨다. ELISA reader를 이용하여 517㎚에서 흡광도를 측정한다. 아래 계산식을 이용하여 시료 또는 standard(BHT)의 DPPH 프리 라디칼 소거능(%)을 계산하였다.

DPPH 프리라디칼 소거능(%) = {1-(STD. 또는 시료의 흡광도 / 대조군의 흡광도)} Х 100

그 결과를 하기의 표 1에 나타내었다.

농도(ppm)	DPPH free radical scavenging effect
농도(ppm)	구근 추출물(비활성 다당체 제거)	열수 추출물
10	0.10	0.00
50	8.32	2.54
100	30.12	7.91
200	82.85	10.05
BHT(200ppm)	79.82

상기 표 1에 나타나는 바와 같이, 붓꽃 구근 추출물은 모두 농도에 따라 DPPH 프리라디칼 소거능이 증가하는 것으로 확인할 수 있었다. 붓꽃 구근 추출물이 열수 추출물에 비해 모든 농도에서 효능이 우수했고, 특히, 붓꽃 구근 추출물 200ppm에서 비교물질인 BHT와 비슷한 값의 효능을 나타내었다.

시험예 2: 항산화 활성 안정성 시험

상기 실시예 1 및 비교예들에서 제조된 붓꽃 구근 추출물들의 항산화활성 유지율을 평가하였다. 항산화활성 시험은 상기 시험예 1의 방법과 동일하게 하였으며, 기준 농도 200ppm을 기준으로, 실시예 및 비교예 1~5의 항산화 유지율을 비교하였다. 0주차에 측정한 항산화 결과를 100% 기준으로 하여 고온(45℃)에서 주차별로 항산화활성을 평가하였다.

그 결과를 하기 표 2 에 나타내었다.

주차별	실시예 1	비교예 1	비교예 2	비교예 3	비교예 4	비교예 5	비교예 6
0주차	100	100	100	100	100	100	100
1주차	100	79	70	91	88	92	95
2주차	100	71	61	85	79	86	92
4주차	100	67	55	81	75	82	85
8주차	100	51	38	67	58	78	79
12주차	92	48	32	59	38	72	77

상기 표 2에 나타나는 바와 같이, 본 발명 실시예 1에 의하여 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 항산화활성 유지능이 비교예들에 비하여 월등히 우수함을 확인할 수 있다. 본 발명 실시예 1에 의하여 안정화된 붓꽃 구근 추출물은, 붓꽃 구근 추출물, 붓꽃 구근 열수추출물이나, 붓꽃 추출물을 1회만 첨가한 경우, 실리카 용액 및 콩/왕겨 발효추출물을 함유하지 않는 비교예들에 비하여 항산화 활성 유지율이 월등히 우수하였다.

시험예 3: 붓꽃 추출물이 함유된 함량 안정성 평가

상기 실시예 1 및 비교예들에서 제조된 붓꽃 추출물들의 안정성을 확인하기 위하여, 이리게닌(irigenin)의 함량 변화를 관찰하였다. 0주차에 측정한 함량 결과를 100% 기준으로 하여 고온(45℃)에서 주차별로 함량을 평가하였다

주차별	실시예 1	비교예 1	비교예 3	비교예 5	비교예 6
0주차	100	100	100	100	100
1주차	99.8	81.1	80.5	92.5	91.7
2주차	99.5	55.2	78.2	80.7	81.2
4주차	95.4	35.5	65.2	70.6	68.4
8주차	92.1	31.1	61.7	65.3	67.0
12주차	90.0	30.0	60.2	62.5	65.3

상기 표 3에 나타나는 바와 같이, 본 발명 실시예 1에 의하여 안정화된 붓꽃 구근 추출물의 이리게닌 함량 유지율이 비교예들에 비하여 월등히 우수함을 확인할 수 있다. 본 발명 실시예 1에 의하여 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 12주 경과 후에도 높은 이리게닌 함량을 유지하였다.

시험예 4: SEM 이미지 분석

상기 실시예 1에서 제조된 안정화된 붓꽃 구근 추출물의 SEM 이미지를 분석하였다. 도 1에서 확인되는 바와 같이 균질기로 안정화된 후에는 1~20 마이크로미터 크기의 입자로서, 각 입자 표면은 작은 구형 결정체 형태로 존재하는 것을 확인할 수 있었다.

시험예 5: 붓꽃 추출물의 B16F10 멜라닌형성세포에 대한 멜라닌 생성 억제효과

상기 실시예 1 및 비교예들에서 제조된 붓꽃 추출물들의 미백 효과를 확인하기 위해 B16F10 멜라닌 형성 세포에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 보고 미백 효과를 판단하였다. 실험에 사용된 B16F10 멜라닌 형성 세포는 마우스에서 유래한 세포균주이며, 멜라닌이라는 흑색 색소를 분비하는 세포이다.

이 세포의 인공배양 중에 시료를 처리하여 멜라닌 흑색색소가 감소하는 정도를 비교 평가하였다. 본 실험예에 사용된 B16F10 멜라닌 형성 세포는 ATCC(American Type Culture Collection)로부터 분양받아 사용하였다.

B16F10 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생합성 억제 효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16F10 멜라닌 형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2Х10⁶ 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 실시예 1에 따른 붓꽃 추출물을 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신-EDTA로 떼어낸 후 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan: Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50 mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2 mM PMSF) 1ml를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000 rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후 마이크로 플레이트 판독기로 405nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라닌형성세포의 멜라닌생성 저해율(%)은 하기 식에 의하여 계산하였으며, 그 결과를 표 4에 기재하였다. 이때 멜라닌 생성 저해 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 하이드로퀴논과 알부틴을 비교군으로 사용하였다.

멜라닌 생성저해율(%) = [(A-B)/A] Х 100

A : 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양

B : 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양

시료명	처리 농도	멜라닌 생성저해율(%)
실시예1	200ppm	0.08
비교예3	200ppm	0.01
비교예5	200ppm	0.02
비교예6	200ppm	0.04
하이드로퀴논	200ppm	0.07
알부틴	200ppm	0.02

상기 표 4의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 B16F10 멜라닌 형성 세포에서 멜라닌 생성을 크게 저해하는 것을 알 수 있다. 안정화된 붓꽃 추출물은 200pp, 농도에서 멜라닌 생성 저해율 값이 0.08%로 나타났으며, 동일한 농도에서 기존의 미백 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 알부틴 및 하이드로퀴논과 비교했을 때, 하이드로퀴논과 알부틴보다는 우수한 멜라닌 생성 저해효과를 나타내었다. 따라서 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 특히 멜라닌 생성 억제에 매우 우수한 효과가 있음을 알 수 있다.

시험예 6: 붓꽃 추출물의 MMP-1 생성 억제 효과

상기 실시예 1 및 비교예들에서 제조된 붓꽃 추출물들의 콜라겐 분해효소인 MMP-1 생성을 억제하는 효과가 있는지의 여부를 측정하기 위해, MMP-1의 생성을 억제하는 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β(10ng/ml, Roche)를 비교군으로 하여 MMP-1의 생성을 억제하는 효과를 측정하였다.

인간 정상 피부 세포인 섬유아세포(한국 세포주은행, 대한민국)를 48-웰 마이크로 플레이트(Nunc, 덴마크)에 각 웰당 1Х10⁶ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma) 및 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양한 후, 상기 실시예 1의 안정화된 붓꽃 구군 추출물을 최종 농도 200 ppm 첨가한 무혈청 DMEM 배지에서 48시간 동안 추가로 배양하였다.

배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 MMP-1 분석 킷트(Amersham)를 이용하여 새로 합성된 MMP-1의 양(ng/㎖)을 측정하고, 하기식에 따라 MMP-1 생성 억제율(%)을 계산하였으며, 그 결과를 표 5에 나타내었다.

MMP-1 생성억제율(%)=[1-실험군의 MMP-1의 양/대조군의 MMP-1의 양]Х100

시료명	MMP-1 생성 억제율(%)
실시예1	76.9
비교예3	58.5
비교예5	69.4
비교예6	72.5
양성 대조군 TGF-β(10ng/ml)	68.5

상기 표 5의 결과에서 나타나는 바와 같이, 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 200 ppm 농도에서 MMP-1 생성 억제율을 측정했을 때 76.9%의 억제율을 나타냈다. MMP-1 생성 억제효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β의 농도(10ng/ml)와 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물의 실험 농도 차이를 감안해도, 상기와 같은 정도의 MMP-1 억제율을 나타낸 것은 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 MMP-1 생성 억제효과가 우수하다는 것을 보여준다.

시험예 7: 붓꽃 추출물의 콜라겐 합성 증진 효과

인간 정상 상피 세포인 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트에 각 웰당 1Х10⁶ 세포가 되도록 접종하고, DMEM배지에서 24시간 동안 배양하였다. 상기 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 최종농도 200 ppm으로 첨가한 무혈청 DMEM 배지에서 48시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 콜라겐 키트(Takara, 일본)를 이용하여 프로콜라겐(procollagen) 타입 I C-펩타이드(PICP) 양을 측정하여 ng/㎖ 환산하였으며, 이에 의해 합성된 콜라겐 양을 측정하였다.

본 실험의 비교군으로는 콜라겐 합성 증진 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β(10ng/ml, Roche)를 비교군으로 사용하였고, 콜라겐 생합성 증가율(%)은 하기 식에 따라 계산하였으며, 그 결과를 표 6에 나타내었다.

콜라겐 생합성 증가율(%)=(실험군의 콜라겐 양/대조군의 콜라겐 양-1)Х100

시료명	콜라겐 생합성 증가율(%)
실시예1	88.9
비교예3	68.5
비교예5	79.4
비교예6	82.5
양성 대조군 TGF-β(10ng/ml)	78.5

표 6은 섬유아세포를 이용하여 안정화된 붓꽃 구근 추출물를 첨가한 배양액의 콜라겐 합성 증진효과를 측정한 결과를 나타낸 것이다. 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 200ppm 농도에서 콜라겐 생합성율을 측정했을 때, 88.9%의 생합성율을 나타내는 것을 알 수 있다. 콜라겐 합성 증진 효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β의 농도(10ng/ml)와 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물의 농도(200ppm) 차이를 감안해도, 여러 종류의 물질이 혼합된 추출물 수준에서 상기와 같은 정도의 콜라겐 생합성율을 나타낸 것은 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 콜라겐 합성 증진 효과가 우수하다는 것을 보여준다.

실시예 2: 로션의 제조

하기 표 7의 조성으로 상기 실시예 1의 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 함유하는 로션을 통상의 방법으로 제조하였다.

성 분(중량%)	함량(중량%)
안정화된 붓꽃 구근 추출물(실시예 1)	3.00
글리세린	10.00
부틸렌글라이콜	5.00
글리세릴올리에이트	1.80
세테아릴올리베이트	0.50
솔비탄올리베이트	0.50
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	5.00
세틸에틸헥사노에이트	1.00
비즈왁스	0.50
스쿠알란	0.20
1,2-헥산다이올	2.00
콜레스테릴/베헤닐/옥틸도데실라우로일글루타메이트	1.00
디메치콘	0.50
사이클로펜타실론삭/사이클로헥사실록산	2.00
세티아릴알코올	1.00
미네랄 오일	2.50
디소듐이디티에이	0.02
비에이치티	0.05
토코페릴아세테이트	0.30
판테놀	0.20
에칠헥실메톡시신나메이트	0.20
향	0.01
정제수	잔량

비교예 7~14: 로션의 제조

상기 실시예 2에서 안정화된 붓꽃 구근 추출물(실시예 1) 대신에 비교예 1~6의 추출물을 첨가하여 동일한 방법으로 로션을 제조하였다. 또한 안정화된 붓꽃 구근 추출물 대신에 주름개선효과가 있는 것으로 알려진 물질인 아데노신을 0.04% 함유하는 로션(비교예 13)과 보습효과가 있는 것으로 알려진 히아루론산 3.00%을 함유하는 로션(비교예 14)를 제조하였다.

시험예 8: 성상 안정성 시험

상기 실시예 2 및 비교예들에서 제조된 로션의 성상안정성 시험을 하였다. 제조된 로션을 온도 Cycling Chamber에서 24시간 간격으로 4℃↔45℃의 온도변화를 주면서 그 성상의 변화를 관찰하였다. 그 결과를 하기의 표 8에 나타내었다.

주차	실시예 2	비교예 7	비교예 8	비교예 9	비교예 10	비교예 11	비교예 12
0주차	-	-	-	-	-	-	-
2주차	-	+	-	-	-	-	-
4주차	-	++	+	-	+	+	-
8주차	-	+++	++	++	++	+	-
12주차	-	+++	++	++	+++	++	+
16주차	-	+++	+++	+++	+++	++	++

(-; 변화없음, +; 약간 색의 변화, ++; 색변화 또는 약간의 침전, +++; 색변화와 침전 발생)

상기 표 8에서 확인되는 바와 같이 안정화된 붓꽃 추출물을 함유하는 실시예 2의 크림은 16주 후에도 그 성상의 변화가 없어 성상안정성이 우수한 것으로 확인되었다.

시험예 9: 피부주름개선 효과 시험

본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 함유하는 화장료의 주름 개선 효과를 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다. 상기 표 7에 제시한 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 함유하는 로션(실시예 2), 실리카 용액, 수용성 염화칼슘과 수용성 탄산나트륨을 첨가하지 않고 붓꽃 추출물 나노 에멀젼을 첨가한 로션(비교예 11), 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 대신 주름개선효과가 있는 것으로 알려진 물질인 아데노신을 함유하는 로션(비교예 13)을 사용하였다. 60명의 여성을 대상으로 얼굴 양쪽면을 사용하여 6주 후의 주름 개선 효과를 육안으로 평가하여 주름 개선 정도를 확인하였다. 이 평가를 토대한 주름 개선 효과 결과는 하기의 표 9에 나타내었다.

시료명	주름개선효과			유효율(%)
시료명	우수	약간	없음	유효율(%)
실시예 2	17	2	1	49
비교예 11	9	8	3	20
비교예 13	15	3	2	42

상기 표 9의 결과에서 확인되는 바와 같이, 본 발명의 안정화된 붓꼿 구근 추출물을 함유한 실시예 2 제형의 로션은 실리카 용액, 수용성 염화칼슘과 수용성 탄산나트륨을 첨가하지 않고 붓꽃 추출물 나노 에멀젼(비교예 5)을 첨가한 로션 비교예 11에 비하여 높은 주름개선 효과를 보여주었으며, 아데노신을 함유하는 비교예 13의 로션과 유사한 우수한 피부 주름개선 효과를 나타내었다.

시험예 10: 피부 보습력 개선효과

본 발명의 안정화된 붓꼿 구근 추출물 추출물을 함유하는 화장료의 피부 보습력 개선효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 실시하였다. 피부 질환이 없는 20-40대 60명을 대상으로 1조 당 20명씩 3개조로 나누고, 각 조별로 상기 표 7의 조성으로 제조된 실시예 2, 실리카 용액, 수용성 염화칼슘과 수용성 탄산나트륨을 첨가하지 않고 붓꽃 추출물 나노 에멀젼(비교예 5)을 첨가한 로션(비교예 11), 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 대신 보습효과가 있는 것으로 알려진 물질인 히아루론산을 함유하는 로션(비교예 14)을 매일 2회씩 1개월간 얼굴 및 전박부에 도포하게 하였다.

미리 도포 시작 전 항온, 항습 조건(24도, 습도 40%)에서 corneometer(CM820 courage Khazaka electronic GmbH)를 이용하여 피부 전도도를 측정하여 기본 값을 삼고, 1주, 2주, 4주 경과 후의 피부 전도도를 측정하여 그 증가율을 평가하였다. 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다.

시료명	1주후	2주후	4주후
실시예 2	45	52	48
비교예 11	21	25	22
비교예 14	48	46	47

상기 표 10의 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 함유한 실시예 2 제형의 로션은 비교예 11에 비하여 피부 전도도 증가율이 매우 우수하였다. 또한 보습효과가 있는 것으로 알려진 히아루론산을 함유하는 화장료인 비교예 14와 비교하여 높은 피부 전도도 증가율을 나타내었다.

일반적으로 피부 전도도는 피부 수분량에 비례하므로, 상기의 결과로부터 본 발명에 안정화된 함유하는 화장료는 정제수를 함유하는 화장료에 비해 피부 수분 함량도 높게 유지한다는 것을 확인할 수 있다. 따라서, 본 발명의 안정화된 붓꽃 구근 추출물 함유하는 화장료는 피부 보습력 개선 효과가 탁월하다.

Claims

(A)글리세린 30~50 중량%와 1,3-butylene glycol 5~15 중량%에 유화제로서 하이드로제네이티드 포스파티딜콜린, 하이드로제네이티드 라이소포스파티딜콜린, 하이드로제네이티드 라이소레시틴, 하이드로옥실레이티드 레시틴 및 불포화레시틴으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 레시틴 5~12 중량%를 가하여 혼합하는 단계;
(B)붓꽃 구근 추출물 0.1~5 중량%, 콩/왕겨 발효추출물 1~12 중량%를 가하여 혼합 교반하는 단계;
(C)붓꽃 구근 열수 추출물 10~25 중량%를 가하고 유화한 후, 수용성 양이온 개질제로서 헥사디메트린 클로라이드(Hexandimethrine Chloride) 0.1~3 중량%를 가하여 혼합 교반하는 단계;
(D)고압균질기(Microfludizer)를 통해 균질화하여 O/W형 나노 에멀젼을 제조하는 단계; 및
(E)실리카 용액, 염화칼슘 용액 및 탄산나트륨 용액을 가하여 혼합 교반하고, 균질기(Homogenizer)를 이용하여 1,000~3,000rpm으로 균질화하는 단계를 포함하는 붓꽃 구근 추출물의 항산화활성 안정화 방법.
제1항에 있어서, 상기 (B)단계의 붓꽃 구근 추출물은 붓꽃 구근 또는 뿌리에 5~20배 중량의 70-90% 에탄올을 가하고 24~36시간 교반한 후, 침전물을 여과하여 비활성 다당체를 제거한 추출물인 것을 특징으로 하는 붓꽃 구근 추출물의 항산화활성 안정화 방법.
삭제
제1항에 있어서, 상기 콩/왕겨 발효추출물은 콩/왕겨를 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드(caprylic/capric triglyceride)로 추출한 후 유산균 발효시킨 것임을 특징으로 하는 붓꽃 구근 추출물의 항산화활성 안정화 방법.
삭제
제1항, 제2항 또는 제4항에 의하여 안정화된 붓꽃 구근 추출물을 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.0001 중량％ 내지 30 중량％ 함유하는 화장료 조성물.
제6항에 있어서, 상기 안정화된 붓꽃 구근 추출물은 이리게닌(Irigenin)의 활성이 안정화된 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제6항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 항산화용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제6항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 미백용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제6항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 주름개선용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제6항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 보습용임을 특징으로 하는 화장료 조성물.