KR102199858B1

KR102199858B1 - 한방 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102199858B1
Application number: KR1020200056499A
Authority: KR
Inventors: 김소영; 민진우; 강희철
Original assignee: (주)지에프씨생명과학
Priority date: 2020-05-12
Filing date: 2020-05-12
Publication date: 2021-01-08

Abstract

본 발명은 인삼(Panax ginseng C. A. Meyer), 측백나무잎(Thuja orientalis L.), 상백피(Morus alba L.), 구절초(Dendranthema zawadskii var. latilobum), 구기자(Lycium chinense Miller), 석창포(Acorus gramineus), 창이자(Xanthium strumarium var. japonicum HARA), 감초(Glycyrrhiza uralensis) 및 박하잎(Mentha piperascens)의 한방 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명으로부터 제공되는 추출물은 DPPH 소거 활성, 엘라스테이즈 저해 활성, 멜라닌 생성 억제 활성 및 산화질소 생성 억제 효능이 우수하기 때문에, 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물로 활용 가능하다.

Description

한방 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물{Cosmetic Compositions Comprising Complex Extracts of Oriental Medicinal Herbs}

본 발명은 한방 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

생체 외부로부터 유입되거나, 생체 내에서 발생하는 활성산소는 생체의 노화를 촉진시키거나, 암 발생의 원인이 되기도 한다. 따라서 활성산소에 의한 산화를 억제하는 항산화 물질에 대한 연구가 진행되며, 항산화 물질은 페놀성 화합물, 플라보노이드, 토코페롤, 비타민 C, 셀레늄 등이 알려져 있다. 그러나 천연에 존재하는 항산화 물질은 피부에 적용할 경우 실질적으로 충분한 효과를 기대할 수 없는 실정이다. 반면, 항산화력이 뛰어나고 저가의 합성 항산화제는 인체 부작용 등 안전성에 대한 우려로 그 사용이 제한되는 문제점이 있다.

주름이 형성되는 원인은 자연적 노화에 의한 주름의 생성과 자외선 노출(광노화)에 의한 주름의 생성으로 크게 나눌 수 있는데, 두 가지 원인에 의한 주름 형성 메커니즘은 아직까지 정확하게 밝혀져 있지 않은 상태이다. 자연적 노화와 광노화에 의한 피부변화와 관련되어 발견되는 공통적인 현상은 진피 내의 주 구성단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형, 진피의 기질인 히알루론산의 감소에 의한 피부 탄력 감소이다. 특히 지금까지의 연구결과 의하면 진피 내 주 단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형이 주름의 생성 및 피부의 탄력저하에 직접적으로 관여하는 것으로 알려져 있다. 콜라겐은 피부의 섬유아세포에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포외 간질에 존재하고, 중요한 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포 접착의 지탱, 세포분할과 분화(유기체의 성장 혹인 상처 치유시)의 유도 등이 알려져 있다. 이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다. 또한 근래에 들어 피부 노화에 대한 광범위한 연구 결과가 보고되면서 피부에서의 콜라겐의 중요한 기능이 밝혀지고 있다. 콜라겐 합성을 촉진하여 주름개선 효과를 나타내는 유효성분들이 알려져 있다. 예를 들어, 레티노산(retinoic acid), TGF(Transforming growth factor), 동물 태반 유래의 단백질, 베툴린산(betulinic acid), 클로렐라 추출물 등이 콜라겐 합성 촉진 물질로서 알려져 있다.

일반적으로 피부 미백과 가장 밀접하게 연관되어 있는 것은 멜라닌으로 알려져 있다. 사람의 피부색은 피부 내부의 멜라닌(Melanin)의 함량, 분포에 따라 결정되는데, 유전적인 요인 외에도 태양 자외선이나 피로, 스트레스 등의 환경적 또는 생리적 조건에 의해서도 영향을 받는다. 멜라닌은 피부 표피층에 있는 멜라노사이트(Melanocyte)에서 합성되는데, 멜라노사이트 내 소기관인 멜라노좀(Melanosome)에서 아미노산의 일종인 티로신(Tyrosine)에 티로시나제(Tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(Dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화반응을 거쳐 만들어진다. 이와 같은 멜라닌의 합성이 피부 내에서 과도하게 일어나면, 피부 톤을 어둡게 하고, 기미, 주근깨, 노인성 흑자, 모반 등을 발생시킨다. 따라서, 피부 내의 티로시나제 활성을 저해하여 멜라닌 색소의 합성을 저해시키면, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현할 수 있을 뿐만 아니라 자외선, 호르몬 및 유전적인 원인에 기인하여 발생하는 기미, 주근깨 등의 피부 과색소 침착증을 개선시킬 수 있다.

최근 기술의 발달과 삶의 질 향상으로 미(美)에 대한 욕구와 관심이 증대되면서 과도한 멜라닌 생성을 막는 미백 제품 개발이 필요하게 되었고, 이에 따라 미백제 및 미백 화장품 개발에 관한 연구가 활발히 진행 중이다. 멜라닌 침착 질환들을 치료하기 위해 오늘날 여러 미백 물질들이 사용되고 있으나 이들 대부분은 멜라닌형성세포에 독성을 나타내며 여러 부작용들을 유발한다. 예를 들면, 미백 효과가 우수한 하이드로퀴논(Hydroquinone)은 세포독성이 있으며, 신장독성 및 발암 가능성이 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 조직흑변증(Ochonosis)과 같은 피부손상으로 인해 유럽에서는 미백화장품에 사용이 금지되어 있다. 코직산(Kojic acid)은 미백효과가 우수하지만 세포독성이 있으며, 접촉성 피부염 또는 암을 일으킬 수 있는 것으로 알려져 있다.

염증(Inflammation)이란 외부 감염원(박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질)의 침입에 의하여 형성되는 농양의 병리적 상태를 뜻한다. 즉, 염증은 생체 내 면역 반응 중 하나로 생체 내로 외부인자가 침입 시 작동하는데 피부에서는 자극이나 상처가 생길 경우 또는 화농성 여드름 주변부에 보면 부어오르며 붉어지는 현상을 관찰할 수 있는데 이것들이 면역 반응에 의해 염증이 생긴 것이다. 구체적으로, 외부 세균이 특정 조직에 침입하여 증식을 하게 되면 생체의 백혈구가 이를 인지하여 증식된 외부 세균을 활발히 공격하게 되는데, 이 과정 중 발생되는 백혈구의 사해가 균에 의하여 침입받은 조직에 축적됨과 동시에 백혈구에 의하여 사멸된 침입균의 세포 파괴물이 침입받은 조직 내로 융해되어 농양이 형성된다. 염증에 의한 농양의 치료는 소염작용을 통하여 촉진될 수 있는데, 소염작용이란 항균제를 이용하여 침입균의 증식을 억제하거나 농양 중에 축적된 이물질들을 탐식하는 대식세포(Macrophage)를 활성화하여 이물질들을 소화 및 배설하는 대식세포의 기능을 항진시키는 등의 염증 치료 촉진작용이다.

일반적으로 염증 반응은 생체의 세포나 조직에 기질적 변화를 가져오는 침습으로 인한 손상을 수복 및 재생하기 위한 생체방어 반응과정이고, 이 반응과정에는 국소의 혈관, 체액의 각종 조직세포 및 면역세포 등이 작용한다. 정상적으로 외부 침입균에 의하여 유도되는 염증 반응은 생체를 보호하기 위한 방어 시스템인 반면, 비정상적으로 과도한 염증반응이 유도되면 다양한 질환들이 나타나게 되는데, 이러한 질환들을 염증 질환이라 한다. 염증 질환은 외부자극에 의하여 활성화된 표적세포로부터 분비되는 다양한 염증 매개물질이 염증을 증폭 및 지속시켜 인체의 생명을 위협하는 질환으로서 급성염증, 류마티스 관절염과 같은 관절 내에서의 질환, 건선 등의 형태로 나타나는 피부질환 및 기관지 천식 등의 알레르기성 염증질환 등을 포함한다.

여러 면역 반응 요소 중에 대식세포(Macrophage)는 거의 모든 조직에 존재하는 면역계 세포로 단핵구와 함께 선천성 면역 반응뿐만 아니라 후천성 면역반응에도 관여하여 생체 방어에 중요한 역할을 한다. LPS(Lipo poly saccharide)는 그람음성균 세포외막이 구성성분으로 인체가 세균에 감염되었을 때 폐혈성 쇼크상태를 야기하는 내독소로 알려져 있다. 생쥐 유래 RAW 264.7 대식세포에 LPS를 처리하면 IL-1β, IL-6, TNF-α 및 IL-13와 같은 전염증성 사이토카인의 합성이 증가되고, iNOS 및 COX-2 단백질 발현이 유도된다. 그리고 LPS에 의한 전염증성 사이토카인 및 염증 매개 단백질의 발현인자인 NF-kB 및 MAPK의 활성화 경로를 통해 일어나서 산화질소를 생성한다. 따라서, 대식세포는 LPS에 의해 염증반응을 유도하기 때문에 염증 개선 소재 탐색에 광범위하게 사용되고 있다.

이와 같이, 다양한 분야에서 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증 효과를 가지는 연구 및 개발이 활발하게 진행되고 있으며, 특히 피부에 독성이나 자극을 주지 않기 위하여 천연 물질을 이용한 연구가 계속되고 있다.

한방 추출물을 이용하는 화장료 조성물 기술로는, 국내의 경우 대한민국 등록특허공보 제10-2057614호「천문동, 구기자, 및 당귀 복합 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 피부 미백, 항균 및 항염증용 화장료 조성물」, 대한민국 등록특허공보 제10-0820009호「감잎，감초，백년초，및 상백피를 함유하는 항산화 및 피부 진정용 한방 화장료 조성물 및 그 제조방법」, 대한민국 등록특허공보 제10-0966835호「자외선에 대한 피부 보호 효과와 미백 및 항주름 효과를 가지는 감초, 승마, 하수오, 흑임자, 상황버섯, 당귀, 상백피, 백작약, 고삼, 황금으로 구성되어진 식물 혼합물의 추출물을 함유한 화장료 조성물 및 그의 제조방법」, 대한민국 등록특허공보 제10-1492196호「백복령, 유백피 및 감초의 혼합 추출물을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물」등이 개시되어 있다.

이에, 본 발명자들은 인삼(Panax ginseng C. A. Meyer), 측백나무잎(Thuja orientalis L.), 상백피(Morus alba L.), 구절초(Dendranthema zawadskii var. latilobum), 구기자(Lycium chinense Miller), 석창포(Acorus gramineus), 창이자(Xanthium strumarium var. japonicum HARA), 감초(Glycyrrhiza uralensis) 및 박하잎(Mentha piperascens)의 한방 복합 추출물이 우수한 DPPH 소거 활성, 엘라스테이즈 저해 활성, 멜라닌 생성 억제 활성 및 산화질소 생성 억제 효능을 동시에 나타내어, 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증 효과를 동시에 부여할 수 있다는 사실을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

대한민국 등록특허공보 제10-2057614호 대한민국 등록특허공보 제10-0820009호 대한민국 등록특허공보 제10-0966835호 대한민국 등록특허공보 제10-1492196호

본 발명의 목적은 천연물 유래의 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 포함하는 화장품을 제공하는 데 있다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 인삼(Panax ginseng C. A. Meyer), 측백나무잎(Thuja orientalis L.), 상백피(Morus alba L.), 구절초(Dendranthema zawadskii var. latilobum), 구기자(Lycium chinense Miller), 석창포(Acorus gramineus), 창이자(Xanthium strumarium var. japonicum HARA), 감초(Glycyrrhiza uralensis) 및 박하잎(Mentha piperascens)의 한방 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 있어서, 상기 한방 복합 추출물은 물, 유기용매 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출되는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 있어서, 상기 한방 복합 추출물은 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎을 건조중량으로 하여 1~20:1~20:1~20:1~20:1~20:1~20:1~20:1~20:1~20의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 한다.

본 발명에 있어서, 상기 한방 복합 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 50 중량% 포함되는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 있어서, 상기 한방 복합 추출물은 DPPH 소거 활성, 엘라스테이즈 저해 활성, 멜라닌 생성 억제 활성 및 산화질소 생성 억제 효능을 갖는 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 화장품을 제공한다.

본 발명으로부터 제공되는 추출물은 DPPH 소거 활성, 엘라스테이즈 저해 활성, 멜라닌 생성 억제 활성 및 산화질소 생성 억제 효능이 우수하기 때문에, 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물로 활용 가능하다.

도 1은 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎의 한방 복합 추출물의 자유라디칼 소거 활성 평가를 나타낸 그래프이다.
도 2는 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎의 한방 복합 추출물의 마우스 대식세포주(RAW 264.7 cell) 세포독성 평가를 나타낸 그래프이다.
도 3은 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎의 한방 복합 추출물의 마우스 흑색종 세포주(B16F10 cell) 세포독성 평가를 나타낸 그래프이다.
도 4는 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎의 한방 복합 추출물의 엘라스테이즈 저해 활성을 나타낸 그래프이다.
도 5는 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎의 한방 복합 추출물의 세포 외 멜라닌 합성 억제 활성을 나타낸 그래프이다.
도 6은 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎의 한방 복합 추출물의 산화질소(NO) 생성 억제 활성을 나타낸 그래프이다.

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법 은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.

본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명은 인삼(Panax ginseng C. A. Meyer), 측백나무잎(Thuja orientalis L.), 상백피(Morus alba L.), 구절초(Dendranthema zawadskii var. latilobum), 구기자(Lycium chinense Miller), 석창포(Acorus gramineus), 창이자(Xanthium strumarium var. japonicum HARA), 감초(Glycyrrhiza uralensis) 및 박하잎(Mentha piperascens)의 한방 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따른 추출물은 본 발명이 속한 분야에 공지된 다양한 추출방법을 통해 얻어질 수 있고, 구체적으로는 물, 유기용매 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출되는 것일 수 있다. 그 중에서도 에탄올로 추출되는 것이 유효 성분을 안정적으로 추출할 수 있는 측면에서 더욱 바람직하다.

상기 물은 알칼리 물일 수 있고, 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 예를 들면, 에탄올, 프로판올, 메탄올, n-부탄올, 아세톤, 1,3-부틸렌글라이콜 등의 극성 유기용매; 에테르, 헥산, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트 등의 비극성 유기용매; 콩기름, 참기름 등의 식물성 유기용매; 및 이들의 혼합물 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 상기 유기용매는 1종을 단독으로 사용하거나 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다.

상기 추출 시 사용되는 용매로서 에탄올, 메탄올, n-부탄올, 프로판올 중 하나 이상의 유기용매 및 1,3-부틸렌글라이콜 또는 이들의 용매에 물을 포함하여 혼합용매로 사용할 수 있다. 상기 추출용매로서, 상기 혼합용매를 사용하는 경우, 유효성분의 추출 효율이 더욱 향상될 수 있다. 이때, 상기 혼합용매를 사용하는 경우 임의의 목적에 따라 적절히 혼합하여 사용 가능하다.

구체적으로, 추출용매의 함량은 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎의 한방 복합물 고형분 중량의 1 내지 500배, 더욱 바람직하게는 5 내지 200배, 가장 바람직하게는 10 내지 100배인 것일 수 있다.

또한, 상기 추출물은 추출물의 유효 성분이 파괴되지 않거나 파괴가 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출 방법은 특별히 제한되지 않고 추출물의 종류와 추출하는 방법에 따라 예를들어, 중탕추출, 환류냉각추출, 초음파추출, 냉침추출 및 퍼콜레이션(percolation) 추출방법을 이용할 수 있다.

상기 추출하는 단계에서 추출 횟수는 구체적으로 1 내지 5회 반복될 수 있다. 이러한 경우, 유효성분의 추출 효율이 더욱 향상될 수 있다.

일 예로, 상기 추출하는 단계는 환류 냉각기가 달린 추출기에 추출 물질 및 추출 용매를 투입한 후, 50 내지 100℃에서 4 내지 20시간 동안 가열 환류 냉각 추출하는 것일 수 있다. 이때 상기 가열 환류 냉각 추출 방법은 가열하면서 환류시킨 후, 냉각하여 추출하는 방법인데, 구체적으로 가열로 인해 기화현상이 발생하여 용매 손실이 발생할 수 있기 때문에 냉각과정을 함께 실시함으로써, 용매 손실을 최소화하는 추출 방법을 의미한다. 다른 방법으로 상기 추출하는 단계는 추출 물질에 추출 용매를 투입한 후, 5 내지 37℃에서 1 내지 15일간 침적시켜 냉침하여 추출할 수 있다.

또 다른 방법으로 상기 추출하는 단계는 추출 물질에 추출 용매를 투입한 후, 1 내지 200시간 동안 퍼콜레이션(Percolation)할 수 있다.

또 다른 방법으로 상기 추출하는 단계는 추출 물질에 추출 용매를 투입한 후, 50 내지 100℃에서 0.5 내지 72시간 동안 중탕하여 추출할 수 있다.

또 다른 방법으로 상기 추출하는 단계는 한방 복합물의 건조 고형물 기준으로 상기 추출 물질 중량의 10 내지 100배의 에탄올을 가하고, 20 내지 80℃에서 1 내지 72시간 동안 추출하고, 필터여과 및 농축하여 농축물 상태의 추출액을 얻을 수 있다.

또한, 본 발명의 추출 물질은 상술한 추출 용매에 의해 추출된 추출 물질뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거쳐 추출된 추출 물질도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 추출물에 포함되는 것이다.

여과는 추출액으로부터 부유하는 고체 입자를 제거하는 과정으로 면, 나일론, 종이 등을 이용하여 입자를 걸러 내거나 한외여과법, 냉동여과법, 원심분리법 등을 이용할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

여액을 농축한 다음 건조하는 단계는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조, 적외선건조 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 경우에 따라 최종 건조된 추출물을 분쇄하는 공정을 추가할 수 있다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 추출물은 추출액, 상기 추출액을 건조시킨 분말, 상기 추출액을 농축여과한 농축물 등 다양한 형태로 가공되어 이용될 수 있다. 또한, 상기 추출물은 특별히 제한되지 않으나, 예를 들면 함수 알코올을 침출 용매로 포함하는 틴크, 농축물, 엑기스, 유동엑기스 등의 형태로 이용될 수 있다

본 발명의 일 구현예에 따르면, 한방 복합 추출물은 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎을 건조중량으로 하여 1~20:1~20:1~20:1~20:1~20:1~20:1~20:1~20:1~20의 중량비로 혼합하여 이루어진 것이 측면에서 바람직하고, 1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10:1~10의 중량비로 혼합하여 이루어진 것이 더욱 바람직하고, 1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5:1~5의 중량비로 혼합하여 이루어진 것이 항산화, 항염증, 주름 방지 및 피부 미백 효과를 모두 향상시킬 수 있다는 측면에서 가장 바람직하다. 만일, 상기 범위를 벗어날 경우에는 피부 미용 효과가 감소될 수 있기 때문에 바람직하지 않다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기와 같은 방법으로부터 수득된 인삼, 측백나무잎, 상백피, 구절초, 구기자, 석창포, 창이자, 감초 및 박하잎의 한방 복합 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 50 중량% 포함될 수 있고, 더욱 바람직하게는 0.1 내지 10 중량% 포함될 수 있다. 상기 추출물이 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 중량% 미만일 경우에는 항산화, 주름개선, 미백, 보습 및 항염증 효과를 충분히 얻을 수 없기 때문에 조성물로서의 기능이 떨어지고, 50 중량%를 초과하는 경우에는 그 이상을 함유하지 않아도 충분한 효능을 나타낼 수 있기 때문에 비경제적일 뿐만 아니라, 제형의 안정성 및 발림성 등이 저하되어 화장품으로 사용에 어려움이 있기 때문에 바람직하지 않다.

상기 한방 복합 추출물은 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증 효과를 동시에 부여할 수 있기 때문에 단순히 피부 미용 뿐만 아니라, 근본적인 피부 건강 개선을 구현할 수 있는 효과가 있다.

전술된 바와 같이, 한방 복합 추출물은 DPPH 소거 활성, 엘라스테이즈 저해 활성, 멜라닌 생성 억제 활성 및 산화질소 생성 억제 효능이 우수하기 때문에, 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물로 사용될 수 있다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 화장료 조성물은 정제수(water), 글리세린(glycerin), 미리스틱애씨드(myristic acid), 부틸렌글라이콜(butylene glycol), 포타슘하이드록사이드(potassium hydroxide), 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol), 스테아레이트(stearate), 스테아릭애씨드(stearic acid), 라우릭애씨드(lauric acid), 라우라마이드디이에이(lauramide DEA), 글리세릴스테아레이드(glyceryl stearate), 배헤닐알코올(behenyl alcohol), 마이크로크리스탈린왁스(microcrystalline wax), 페녹시에탄올(phenoxyethanol), 에칠헥실글리세린(ethylhexylglycerin), 토코페릴아세테이트(tocopheryl acetate),1,2-헥산디올(1,2-hexanediol), 카프릴릴글라이콜(caprylyl glycol), 히드록시에틸렌셀룰로오스(hydroxyethylene cellulose), 잔탄검(xanthan gum), 콜라겐(collagen), 시트르산나트륨(sodium citrate), 시트르산(citrate), 아스코르빈산마그네슘(magnesium ascorbate) 및 향료(fragrance)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물에는 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다. 일예로, 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물추출물, pH 조정제, 알코올, 색소, 향료, 혈행 촉진제 냉감제, 제한(制汗)제 또는 정제수가 바람직하나 이에 한정되지 않는다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 화장료 조성물로 사용할 경우, 피부외용연고, 크림, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 팩, 마스크 시트, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 스프레이, 젤, 젤 연고, 패치, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 크림, 마사지크림, 영양크림, 아이크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 클렌징워터, 파우더, 바디로션 및 바디 클렌저로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성 기름, 식물성 기름, 왁스, 파라핀, 전분, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탤크 또는 산화아연, 산화 티타늄 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 바디젤인 경우에 전술한 유효성분들 이외에 일반적으로 바디젤 제조 시에 사용되는 성분인, 카보머, 트리에탄올아민, 멘톨, 에탄올, 글리세린, 디소디움이디티에이, 메틸파라벤, 향 등이 이용될 수 있다. 여기서, 카보머, 트리에탈올아민은 점증제로 작용하고, 멘톨은 향 성분으로 작용하며, 에탄올은 청량감을 부여하는 기능을 하고, 글리세린은 보습제로서의 역할을 하며, 디소디움이디티에이는 금속성분 킬레이트로 기능하고, 메틸파라벤은 방부제로의 기능을 위해 첨가된다. 또한, 상기 향은 멘톨향 이외에도 허브향 등과 같은 다양한 향이 첨가될 수 있다.

전술한 구체적인 성분 이외에도, 상기에서 설명한 점증제, 청량감 부여, 향 성분, 보습제 등의 기능을 달성하기 위해 본 기술 분야에서 널리 사용되고 있는 공지의 물질들을 적용하여 조성물을 제조하는 것 또한 본 발명의 범위에 포함될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이(분무제)인 경우에 담체 성분으로서 락토스, 탤크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 첨가될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 첨가되는데, 이의 예로는 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물은 통상의 첨가제를 부가하여 지방 분해 촉진을 위한 바디젤, 바디 로션, 바디 크림, 바디 오일 등의 조성물로 제조될 수 있으며, 에어졸 타입으로도 제조될 수 있다. 이 경우에 화장료 조성물은 피부에 직접 도포하거나 살포하는 경피 투여의 방법으로 사용되는 것이 바람직하다.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물의 사용량은 연령, 피부 지방의 상태 정도 등의 개인차나 제형, 형태에 따라 적절하게 조절될 수 있으며, 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증 효과를 위한 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

상기와 같은 방법으로부터 수득된 조성물은 DPPH 소거 활성, 엘라스테이즈 저해 활성, 멜라닌 생성 억제 활성 및 산화질소 생성 억제 효능을 나타내어 우수한 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장품을 제공할 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

<실시예 1> 한방 복합 추출물 제조

건조된 인삼(인삼, 제천한방약초) 0.1g, 건조된 측백나무잎(측백엽, 제천한방약초) 0.1g, 건조된 상백피(상백피, 제천한방약초) 0.1g, 건조된 구절초(구절초, 제천한방약초) 0.1g, 건조된 구기자(구기자, 제천한방약초) 0.1g, 건조된 석창포(석창포, 제천한방약초) 0.1g, 건조된 창이자(도꼬마리, 제천한방약초) 0.1g, 건조된 감초(감초, 제천한방약초) 0.1g 및 건조된 박하잎(박하, 제천한방약초) 0.1g을 혼합한 다음, 정제수 100mL를 첨가하여 97℃에서 2시간 동안 중탕 추출하였다. 추출한 다음, 0.45㎛ 필터로 여과하여 최종 한방 복합 추출물을 제조하였다.

<비교예 1 내지 9> 한방 복합 추출물 제조

아래 표 1과 같은 함량(g)으로 혼합된 건조 시료를 사용하여, 실시예 1과 동일한 방법으로 추출물을 제조하였다.

	비교예
	1	2	3	4	5	6	7	8	9
인삼	-	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
측백나무잎	0.1	-	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
상백피	0.1	0.1	-	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
구절초	0.1	0.1	0.1	-	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
구기자	0.1	0.1	0.1	0.1	-	0.1	0.1	0.1	0.1
석창포	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	-	0.1	0.1	0.1
창이자	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	-	0.1	0.1
감초	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	-	0.1
박하잎	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	-

<실험예 1> 항산화 시험 : DPPH 소거 활성

실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 이용하여 항산화 효과를 알아보기 위하여 DPPH(2,2-diphenyl-1-picryl hydrezyl) 라디칼 소거활성을 평가하였다.

상기 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 농도별로 55μM DPPH 용액 450㎕와 혼합시킨 후 30분간 4℃에서 반응시켰다. 반응이 끝나면 각 sample을 96-well plate에 담아 ELISA reader기를 이용하여 520nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 시료를 넣지 않은 sample을 대조군으로 하여 아래의 수학식 1과 같이 시료의 자유라디칼 소거능(Free radical scavenging activity, %)을 계산하였다.

이때, 라디칼을 소거하는 양성 대조군(positive control)으로 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였고, 자유라디칼 소거능이 50%일 때 아스코르브산(ascorbic acid)의 농도는 1.90㎍/mL로 나타났다.

[수학식 1]

자유라디칼 소거율(%)=[(1-시료 처리군의 흡광도/무처리군의 흡광도) X 100]

시료	DPPH radical 소거율(%)
실시예 1	80.48%
비교예 1	29.18%
비교예 2	27.16%
비교예 3	42.45%
비교예 4	27.36%
비교예 5	33.60%
비교예 6	45.67%
비교예 7	59.38%
비교예 8	48.66%
비교예 9	23.35%
Ascorbic acid (IC₅₀)	1.90㎍/mL

IC₅₀은 첨가한 시료에 의해 자유라디컬 소거능이 50% 일 때의 시료 농도를 의미한다. 그 결과, 표 2 및 도 1에서 확인할 수 있듯이 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 처리농도가 4% 일 때의 DPPH 라디칼 소거 활성 결과를 확인했을 때, 실시예 1이 비교예 1 내지 9 보다 항산화 효과가 더 우수한 것을 확인하였으며, 한방 복합 추출물에서 한 가지 소재라도 제외될 경우 항산화 효과가 현저하게 감소함을 확인하였다.

<실험예 2> 세포독성 시험 : WST(Water-soluble tetrazolium salt) assay

실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 이용하여 세포에 대한 독성을 갖는지 확인하기 위해 마우스의 대식세포주인 RAW 264.7 세포 및 B16F10 melanoma 세포를 이용하여 세포독성 실험을 진행하였다.

마우스의 대식세포주인 RAW 264.7 세포 및 마우스의 흑색종 세포주인 B16F10 세포에 독성을 미치는지 확인하기 위해 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배지를 이용하여 24-well plate에 1X10⁵ cell/well 및 3X10⁴ cell/well의 농도로 세포를 각각 분주한 후, 37℃ 및 5% CO₂ 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양한 cell에 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 농도별로 배지와 혼합하여 각 well에 처리 후, 37℃ 및 5% CO₂ 조건에서 24시간 동안 배양한 다음, 배양액을 제거하고 각 well에 WST-1 assay solution(ez-cytox)를 처리하여 배양기에서 2시간 반응시킨 후 ELISA reader기로 450nm에서 흡광도를 측정하였으며, 아래의 수학식 2와 같이 세포 생존율을 계산하였다.

[수학식 2]

세포 생존률(%)=[(시료 처리군의 흡광도/무처리군의 흡광도) X 100]

그 결과, 도 2~3에서 확인할 수 있듯이 실시예 1은 세포 독성이 나타나지 않아 화장품에 안전한 소재로 사용이 가능함을 확인하였다.

<실험예 3> 주름방지 효능 시험 : Elastase 저해 활성

실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 이용하여 주름방지 효과를 알아보기 위하여 엘라스테이즈(Elastase) 저해 활성을 확인하였다.

상기 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 농도별로 10mM Tris-HCL buffer(pH 8.0)에 녹인 N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide 1.6mM 농도의 기질과 Elastase from procine pancreas Type IV 0.4U/mL를 혼합하여 25℃에서 5분 동안 반응한 후 96-well plate에 담아 410nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 시료를 넣지 않은 sample을 대조군으로 하여 아래의 수학식 3과 같이 시료의 엘라스테이즈 저해 활성(Elastase inhibition activity, %)를 계산하였다.

이때, 양성 대조군으로 올레아놀릭산(Oleanolic acid)를 사용하여 진행하였고, 엘라스테이즈 저해활성이 50%일 때 올레아놀릭산의 농도는 5.44㎍/mL로 나타났다.

[수학식 3]

엘라스테이즈 저해 활성(%)=[(1-시료 처리군의 흡광도/무처리군의 흡광도) X 100]

시료	Elastase 저해 활성(%)
실시예 1	52.33%
비교예 1	1.64%
비교예 2	3.44%
비교예 3	7.93%
비교예 4	2.48%
비교예 5	6.72%
비교예 6	6.62%
비교예 7	10.92%
비교예 8	5.71%
비교예 9	1.47%
Oleanolic acid (IC₅₀)	5.44㎍/mL

그 결과, 표 3 및 도 4에서 확인할 수 있듯이 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 처리농도가 4% 일 때의 엘라스테이즈 저해 활성 결과를 확인했을 때, 실시예 1이 비교예 1 내지 9 보다 주름 방지 효과가 현저하게 우수한 것을 확인하였으며, 한방 복합 추출물에서 한 가지 소재라도 제외될 경우 주름 방지 효과가 감소함을 확인하였다.

<실험예 4> 미백 효능 시험 : 세포 외 멜라닌 생성량 확인

실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 이용하여 미백 효과를 알아보기 위하여 B16F10 melanoma cell을 이용하여 세포 외 멜라닌 생성량 확인 실험을 진행하였다.

B16F10 melanoma 세포의 세포 외 멜라닌 생성량을 확인하기 위해 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배지를 이용하여 24-well plate에 3X10⁴ cell/well의 농도로 세포를 분주한 후, 37℃ 및 5% CO₂ 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양한 cell에 멜라닌 생성을 유도하기 위한 α-MSH 50nM과 함께 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 농도별로 배지와 혼합하여 각 well에 처리 후, 37℃ 및 5% CO₂ 조건에서 72시간 동안 배양한 다음, 배양액을 회수하였다. 72시간 반응시킨 배양액은 세포 외 멜라닌 생성량을 측정하기 위하여 1mL을 덜어 ELISA plate reader를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 양성 대조군으로 알부틴(β-arbutin)을 사용하여 진행하였다.

시료	멜라닌 생성량(㎍/mL)
실시예 1	26.92
비교예 1	61.32
비교예 2	49.65
비교예 3	59.65
비교예 4	69.18
비교예 5	70.25
비교예 6	70.96
비교예 7	45.73
비교예 8	74.89
비교예 9	47.99
arbutin	26.56

그 결과, 표 4 및 도 5에서 확인할 수 있듯이 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 처리농도가 4% 일 때의 멜라닌 생성 결과를 확인했을 때, 실시예 1이 비교예 1 내지 9 보다 멜라닌 생성 억제 활성이 현저하게 우수한 것을 확인하였으며, 한방 복합 추출물에서 한 가지 소재라도 제외될 경우 미백 효과가 감소함을 확인하였다.

<실험예 5> 항염증 효과 : NO 생성 저해 효과

실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 이용하여 항염증 효과를 확인하기 위해 마우스의 대식세포주인 RAW 264.7 cell을 이용하여 LPS(Lipopolysaccharide)로 유도시킨 NO 생성 저해 실험을 진행하였다.

마우스의 대식세포주인 RAW 264.7 세포의 NO 생성을 저해하는지 확인하기 위해 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배지를 이용하여 24-well plate에 1X10⁵ cell/well의 농도로 세포를 분주한 후, 37℃ 및 5% CO₂ 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양한 cell에 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 한방 복합 추출물을 농도별로 배지와 혼합하여 각 well에 처리하고, 이때 NO 생성을 촉진시키는 염증유발인자인 LPS를 1ug/mL의 농도로 같이 처리하여 37℃ 및 5% CO₂ 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 각 well의 상등액만을 따로 취한 뒤 각 well에 Nitric Oxide detection kit를 이용하여 배양액 중 100uL를 96-well plate에 취하고 Griess reagent A(N-1-Naphthylethylenediamine (NEDHC)) 50uL 및 Griess reagent B(Sulfanilamide) 50uL를 각각 넣어준 뒤 각각 10분 동안 반응시킨 후, ELISA plate reader를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였으며, 아래의 수학식 4와 같이 NO 생성 저해율을 계산하였다.

[수학식 4]

NO 생성 저해율(%)=[(1-시료 처리군의 흡광도/무처리군의 흡광도) X 100]

시료	NO 생성 저해율(%)
실시예 1	68.27%
비교예 1	35.25%
비교예 2	25.87%
비교예 3	38.23%
비교예 4	30.77%
비교예 5	31.00%
비교예 6	34.31%
비교예 7	39.27%
비교예 8	27.89%
비교예 9	26.79%

그 결과, 표 5 및 도 6에서 확인할 수 있듯이 실시예 1 및 비교예 1 내지 9의 처리농도가 4% 일 때의 NO 생성 저해 활성 결과를 확인했을 때, 실시예 1이 비교예 1 내지 9 보다 항염증 효과가 현저하게 우수한 것을 확인하였으며, 한방 복합 추출물에서 한 가지 소재라도 제외될 경우 항염증 효과가 감소함을 확인하였다.

<제조예 1> 화장수 제조

아래의 표 6에 기재된 성분을 사용하여 통상의 방법에 의하여 화장수를 제조하였다.

성분	함량(중량%)
실시예 1의 한방 복합 추출물	3.00
히드록시에틸렌셀룰로오스 (2% 수용액)	12.00
잔탄검(2% 수용액)	2.00
1,3-부틸렌글라이콜	6.00
글리세린	4.00
히알루론산나트륨(1% 수용액)	5.00
정제수	잔량
계	100.0

<제조예 2> 로션 제조

아래의 표 7에 기재된 성분을 사용하여 통상의 방법에 의하여 로션을 제조하였다.

성분	함량(중량%)
실시예 1의 한방 복합 추출물	3.00
아스코르빈산-2-인산마그네슘염	1.00
수용성콜라겐(1% 수용액)	1.00
시트르산나트륨	0.01
시트르산	0.05
1,3-부틸렌글라이콜	3.00
정제수	잔량
계	100.0

<제조예 3> 크림 제조

아래의 표 8에 기재된 성분을 사용하여 통상의 방법에 의하여 크림을 제조하였다.

성분	함량(중량%)
실시예 1의 한방 복합 추출물	1.00
폴리에틸렌글리콜모노스테아레이트	2.00
자기유화형 모노스테아르산글리세린	5.00
세틸알코올	4.00
스쿠알렌	6.00
트리2-에틸헥산글리세릴	6.00
스핑고당지질	1.00
1,3-부틸렌글라이콜	7.00
정제수	잔량
계	100.0

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

인삼(Panax ginseng C. A. Meyer), 측백나무잎(Thuja orientalis L.), 상백피(Morus alba L.), 구절초(Dendranthema zawadskii var. latilobum), 구기자(Lycium chinense Miller), 석창포(Acorus gramineus), 창이자(Xanthium strumarium var. japonicum HARA), 감초(Glycyrrhiza uralensis) 및 박하잎(Mentha piperascens)을 건조중량으로 하여 1:1:1:1:1:1:1:1:1의 중량비로 혼합한 다음, 혼합물 0.9g에 정제수 100mL를 첨가하여 97℃에서 2시간 동안 중탕 추출하여 수득된 한방 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
삭제
삭제
제1항에 있어서, 상기 한방 복합 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 50 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
제1항에 있어서, 상기 한방 복합 추출물은 DPPH 소거 활성, 엘라스테이즈 저해 활성, 멜라닌 생성 억제 활성 및 산화질소 생성 억제 효능을 갖는 것을 특징으로 하는 항산화, 주름방지, 미백 및 항염증용 화장료 조성물.
제1항, 제4항 및 제5항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 화장품.