KR101230588B1

KR101230588B1 - 천연 비타민 및 식물 복합 추출물을 함유한 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101230588B1
Application number: KR1020110020151A
Authority: KR
Inventors: 박선기; 차영권; 한상호; 권육영; 박애니
Original assignee: 주식회사 코스메카코리아
Priority date: 2011-03-08
Filing date: 2011-03-08
Publication date: 2013-02-22
Also published as: KR20120102186A

Abstract

본 발명은 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 비타민 C 및 아미노산을 포함하는 키위, 파이애플 추출물인 피부 활성 추출물과 아르니카 및 레이디스맨틀 식물혼합 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물은 멜라닌 생합성 과정에 핵심적으로 작용하는 효소인 티로시나제 활성 및 멜라노마 B16에 의한 멜라닌 생성을 효과적으로 억제하므로, 미백용 화장료 조성물로써 유용하게 이용될 수 있다.

Description

천연 비타민 및 식물 복합 추출물을 함유한 화장료 조성물 { Cosmetics Composite }

본 발명은 천연 비타민이 함유된 키위, 파인애플 추출물과 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물을 함유하는 피부 노화방지 및 피부 미백용 화장료조성물에 관한 것이다.

본 발명은 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 비타민 C 및 아미노산을 포함하는 키위, 파이애플 추출물인 피부 활성 추출물과 아르니카 및 레이디스맨틀 식물혼합 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 조성물은 멜라닌 생합성 과정에 핵심적으로 작용하는 효소인 티로시나제 활성 및 멜라노마 B16에 의한 멜라닌 생성을 효과적으로 억제하므로, 미백용 화장료 조성물로써 유용하게 이용될 수 있다.

피부흑화(melanogenesis)는 피부 세포내에 있는 멜라닌 색소생성세포 (melanocyte)에서 자외선 등의 자극에 대한 방어 기작으로 멜라닌 생성활동이 증가되고 이로 말미암아 만들어진 다량의 멜라닌이 각질형성세포(keratinocyte)로 전이되어 피부표피층(epidermis)에 축척된 결과이다. 비록 멜라닌이 피부보호작용을 하나 피부의 과색소침착은 기미, 주근깨, 피부 염증 후의 피부흑화, 노인성 색소반점 등을 일으키며 이로 인해 당사자에게 미용상의 불편뿐만 아니라 정신적으로 부정적인 영향을 미쳐 사회활동에 불편을 초래하기도 한다(M. Kubo, and H. Matsuda, Fragrance Journal, 8, 48, 1995, T. P. Dooley, R. C. Gadwood, K. Kilgore, and L. M. Thomasco, Skin Pharm., 7, 188, 1994). 따라서 최근에는 이러한 문제점을 예방 및 개선하기 위한 여러 미백용 화장품, 의약품 등이 개발되어 시판되고 있다.

구체적으로, 멜라닌은 피부 표피의 기저층에 존재하는 멜라노사이트(melanocyte)라는 세포에서 티로신(Tyrosine)이 효소 및 비효소적 산화반응을 거쳐 생성되며, 표피를 구성하고 있는 각질세포로 전이된다. 멜라닌의 생합성에 관여하는 중요한 효소로는 티로시나제(Tyrosinase), 티로시나제 관련 프로테인 1(Tyrosinase-Related protein 1) 및 도파크롬 토토머라제(dopachrome tautomerase)이 있다. 티로시나제 외의 두 효소는 비교적 최근에 개발되어 최근에 주목을 끌고 있으나멜라닌 합성에 결정적인 역할을 하는 효소는 티로시나제이다(M. Seiji, K. Shimao, M. S. Birbeck, and T. B. Fitzpatrick, Ann. N.Y. Acad. Sci., 100, 497, 1963). 멜라닌의 생합성 첫단계는 티로시나제에 의하여 유발된다. 티로시나제에 의해 티로신이 도파(Dopa)로 되고, 이 도파(Dopa)를 도파퀴논(Dopa-quinone)으로 만든다. 이 두 반응의 다음단계 과정들은 비효소적인 반응에 의해서도 가능한 것으로 알려져 있으며 티로시나제 단독으로도 멜라닌 생성이 가능하다고 알려져 있다(P. Bernard, and J. Y. Berthon, International Journal of Cosmetic Science, 22, 2219, 2000).

최근에는 피부 세포내의 신호 전달물질의 발현에 따른 멜라닌 형성과정에 대한 새로운 이론이 제시되고 있다. 즉, 피부가 자외선에 노출되면 염증을 유발시키는 인터루킨-알파(Interlukin-α)가 상피(Epidermis)내에 있는 케라티노사이트(Keratinocyte)로부터 발현되고, 이 인터루킨-알파가 케라티노사이트 엔도셀린(Endothelin)발현을 촉진시킨다. 이러한 일련의 과정이 멜라노사이트의 형성을 증가시키고 멜라노사이트를 활성화시킨다. 이렇게 형성된 멜라노사이트내 멜라노좀에서 티로신이 티로시나제에 의해 멜라닌이 형성된다(T. Cohen, R. M. Muller, Y. Tomita, and S. Shibahara, Nucleic Acids Res, 18, 2807, 1990, K. Tsukamoto, I. J. Jackson, K. Urabe, P. M. Montague, and V. J. Hearing, EMBO J.,11, 519, 1992).

이미 아스코르빈산(일본특허공개 평4-9320호), 하이드로퀴논(일본특허공개 평6-192062호), 코직산(일본특허공개 소56-7710호), 알부틴(일본특허공개 평4-9315호) 및 일부의 화합물들이 티로시나제 저해 활성을 가지고 있어 미백 화장료의 원료로 이용되고 있으나, 처방계 중에서의 안정성이 나빠 분해되어 착색되거나, 이취의 발생, 생체 레벨에서의 효능, 효과의 불분명 및 안전성 문제 등으로 그 사용이 제한되고 있는 실정이다. 그리고 티로시나제의 억제 효과는 입증되었으나, 실제 생체 레벨과 유사한 실험에서는 그 효과가 낮게 나타난다. 따라서 생체레벨과 유사한 멜라노마 세포 배양에 의한 저해 효과가 요구되고 있는 실정이다. 또한 하이드로퀴논은 발암성 물질로 규정되어 사용이 금지되고 있다. 코직산과 아스코르빈산은 매우 불안정한 물질이다. 소량 함유한 화장료를 실온에서 수주일동안 보관하면 갈변 현상이 발생한다. 따라서, 독성이 상대적으로 적고 자연친화적인 미백화장품을 개발하기 위하여 미백작용을 갖는 생약을 탐색하고 이를 이용하려는 연구도 시행되고 있다. 즉, 오래전부터 멜라닌 생성을 억제하여 미백 효과 기능을 지닌 원료가 갖는 문제점을 해결하기 위해서 한방제로 사용되고 있는 생약, 야채, 과일, 꽃 등의 안전성이 뛰어난 식물추출물로부터 비정상적인 멜라닌 생성을 억제할 수 있는 여러 가지 효과를 가진 추출물을 찾고자 하는 노력이 있어 왔다.

구체적으로, 한국특허공고번호 제1991-8660호에는 닥나무 추출물을 함유한 미백화장료가 공개되었고, 한국특허공고번호 제1991-11645호에는 호장근 추출물을 함유한 미백화장료가 공개되었으며, 한국특허공고번호 제1993-28783호에는 상백피 추출물을 함유한 미백조성물 등이 공개되어 있고, 최근에는 뽕나무로부터 분리된 멜베린을 함유하는 미백화장료가 한국특허 공개공보 제1997-47260호에 공개되어 있다.

키위(Actinidia chinensis)는 쌍떡잎식물 측막태좌목 다래나무과의 낙엽 덩굴식물의 열매로 키위라는 새처럼 생겼다고 해서 영어로 (Kiwi)키위 라고 한다. 특히 비타민 C가 풍부하여 열매 1개로 하루에 성인 1명이 필요로 하는 비타민 섭취량이 충분하며, 엽산, 칼리, 비타민 A, 칼슘, 비타민 B6, 동, 비타민 E, 섬유질, 칼륨 등이 풍부하다.

파인애플(Ananas comosus) 쌍떡잎식물 분질배유목 파인애플과의 상록 여러해살이풀의 열매로 과실중 비타민C가 가장 많으며, 열매는 집합과(集合果)로서 길이 15∼20cm, 지름 10∼12cm이며 큰 품종에서는 길이 약 30cm, 지름 약 17cm에 이르는 것도 있다. 열매 모양은 원통 모양, 원뿔 모양, 달걀 모양 등이 있으며 익으면 주황색에서 노란색으로 되며 향기가 있다. 먹는 부분은 꽃턱·씨방·포의 밑동과 꽃대가 합한 것으로 물기가 많은 과육 모양이다(Udaya Rajapaksha, Traditional Food Plants in Sri Lanka, Hector Kobbekaduwa Agrarian Research and Training Institute, 100p(1998)).

아르니카 (Arnica montana)는 국화과 식물의 한 속으로 남미의 남서쪽에서 50여종이 발견된다. 가장 중요한 종 중의 하나가 Arnica montana인데 이는 중앙 유럽 산지에서 자라는 다년생초이다. 전형적 종인 A.angustifolia는 좁은 잎과 5-7cm(2-2.5인치)의 오렌지빛 꽃을 가지고 있다. 고원의 풀밭에서 자란다. 높이 20～30cm이다. 잎은 뿌리에서 나와 사방으로 퍼지고 줄기에서는 마주달린다. 끝에서 가지가 갈라져서 두화(頭花)가 1～3개 달린다. 꽃은 6～7월에 노란색으로 피며 지름 6～8cm이고 전체적으로 선모와 털이 빽빽이 난다. 총포는 여러 줄로 늘어서고 꽃턱에는 부속체가 없거나 털이 난다. 꽃밥은 무딘 것에서 날카로운 것까지 있으며 꼬리부분이 없다. 관모는 바늘 모양이거나 비늘조각 모양이다. 주요성분은 crystalline, Arnicin, volatile oil, Tannin, phulin, Helenalin (꽃, 뿌리), Arnicin은 뿌리보다는 꽃에 더 많으며, 꽃에는 Tannin이 없다(Chevallier. A. The Encyclopedia of Medicinal Plants Dorling Kindersley. London 1996 ISBN 9-780751-303148).

레이디스맨틀(Alchemilla vulgaris)은 키가 40cm까지 크며 노란색 꽃을 피우는 장미과에 속하는 식물이다. 근경에서 나온 긴 잎줄기에 달려 있는 잎은 처음에는 접혀 있다가 나중에 둥근 형태로 퍼지는데 그 모습이 마치 강한 바람에 뒤집어진 우산의 모습이다. 톱니가 난 잎의 끝 부분에 진주와 같은 물방울이 생기는데 이것은 이슬방울이 아니라 잎에서 나오는 것이다. 꽃차례는 5-10월 사이에 대단히 많은 작은 꽃들이 모여서 원추화서로 피어나고 꿀과 비슷한 냄새가 난다. 주요성분으로는 타닌, 플라빈, 고미질, 약간의 정유가 알려져 있다.(최영전, 허브와 스파이스 가이드북, 예가, (1997)).

이에 본 발명자들은 다량의 천연 비타민을 함유하고 피부 미백에도 효능을 보이는 식물성 천연물질을 찾고자 생약 추출물을 연구한 결과, 본 발명의 키위, 파인애플, 아르니카, 레이디스맨틀 혼합 추출물이 티로시나제의 활성을 저해할 뿐만 아니라 멜라노마 B16의 멜라닌 생성을 억제함을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 티로시나제 효소의 활성을 억제하고 멜라닌 생성을 억제함으로서 우수한 피부 미백효과를 갖고, 안전성에 문제가 없는 식물성 천연 추출물을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 또 다른 목적은 상기와 같은 피부노화 억제 및 피부 미백 효능을 갖는 식물 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀의 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물에 관한 것이다.

또한, 상기 추출물은 메탄올, 에탄올, 프로필렌글라이콜, 부틸렌글라이콜 및 글리세린의 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출된 것을 특징으로 한다.

상기 추출물은 건조 중량으로서 0.01 내지 10 (W/V)%의 양으로 함유하는 것을 특징으로 한다. 상기 조성물은 항산화, 미백 효과를 갖는 것을 특징으로 한다.

상기 조성물은 화장수(스킨로션), 로션, 크림, 마사지 크림, 에센스, 팩으로부터 선택되는 기초화장료; 비비크림, 화운데이션, 마스카라, 아이쉐도우 및 아이라이너로부터 선택되는 메이크업 화장료; 자외선차단용 화장료로 구성되는 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 한다.

이상 설명한 바와 같이, 본 발명에 따르면, 항산화, 미백 효과를 갖는 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀의 혼합추출물을 함유하는 미백 화장료 조성물로 사용될 수 있다.

상기 실시예를 통해 살펴본 바와 같이, 본 발명은 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물에 관한 것으로, 상기 혼합 추출물은 항산화 효과, 티로시나제 억제, B16 멜라노마 억제 작용을 확인할 수 있었다. 따라서, 상기 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물로서의 사용이 기대된다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 식물 혼합 추출물을 함유하는 피부노화 억제 및 미백용 화장료 조성물을 제공한다.

상기 혼합 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매에 가용한 추출물이고, 바람직하게는 상기 유기용매는 에탄올, 메탄올, 부탄올, 프로판올, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌글리콜에 가용한 추출물이다.

상기 혼합 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 ~ 10중량%, 바람직하게는 0.01 ~ 5중량%로 함유한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 생약 조추출물은 다양한 추출방법에 의해 수득될 수 있으며, 수성 또는 유기용매를 가하여 추출하여 얻을 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 생약 조추출물은 일차로 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀을 각각 키위 5~25 중량%, 파인애플 5~25 중량%, 아르니카 20~30 중량%, 레이디스맨틀 20~30 중량%의 건조중량비로 혼합하고, 바람직하게는 1 ~ 3 : 1 ~ 3 : 2 ~ 4 : 2 ~ 4의 비율로 혼합한다. 추출 유기용매로서 증류수, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 아세톤, 에틸아세테이트, 헥산, 프로판올, 함수 부틸렌글리콜, 함수 프로필렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상의 용매를 5 내지 10배의 부피량으로 가한다. 바람직하게는 상기 유기용매는 에탄올, 메탄올, 부탄올, 프로판올, 부틸렌글리콜 또는 프로필렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상인 것이 바람직하다.

추출 방법으로는 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50~95 ℃, 2~20시간 가열하여 추출하거나 5~40℃에서 1~15일간 침적시켜 유효성분을 추출하는 방법을 사용할 수 있다. 이렇게 추출한 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 등의 혼합 식물 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 증발되어 나오는 용매를 회수 하면서 완전히 감압 농축한 후 조추출물을 얻을 수 있다.

상기 제조방법에 의해 얻어진 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물은 각각의 독립적 추출물 보다 티로시나제의 활성 및 멜라노마 B16에 의한 멜라닌 생성을 우수하게 억제하는 바, 우수한 미백 효과를 발휘하였다.

본 발명은 상기 제조방법에 따라 얻어진 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물을 함유하는 피부노화 억제 및 미백용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 혼합 추출물을 포함하는 조성물은 피부노화방지 효과를 위한 화장품, 세안제 및 샴푸 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 각종 크림, 로션, 스킨 등과 같은 화장품류와 샴푸, 린스, 클렌징,세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.

본 발명의 화장료는 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진군에서 선택된 조성물을 포함한다.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유 동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다. 스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, α-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다. 에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE(폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, α-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급암모늄염 등을 들 수 있다.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형,포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다. 유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-β-알라닌칼슘, N-라우로일-β-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ;N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; Nε-라우로일-L-리진, Nε-팔미토일리진, Nα-파리토일올니틴, Nα-라우로일아르기닌, Nα-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; α-아미노카프릴산, α-아미노라우린산 등의 α-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert -부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p -(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301 호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다. pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 - 5 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 - 3중량 % 배합된다.

본 발명의 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 추출물 또는 화합물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.

본 발명의 피부노화방지 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함한다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 한정되는 것은 아니다.

비교예 1 - 4. 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀의 추출물 제조.

키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀을 정선하여 세절한 후 건조된 상기 생약을 각각 100 g을 70% 에탄올 1 kg을 사용하여 상온에서 14일간 침적하여 추출한다. 250메쉬 여과포로 여과하고, 4 ℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 최종 0.45 μm 필터로 여과하여 비교예 1 내지 비교예 3의 여과액 및 고형분 추출물을 수득하였다. 상기 여과액 및 고형분 추출물을 하기 표 1에 나타내었다.

실시예	생약명	여과액(g)	고형분(%)
비교예 1.	키위	987	2.86
비교예 2.	파인애플	991	2.57
비교예 3.	아르니카	862	1.58
비교예 4.	레이디스맨틀	859	1.46

실시예 1 - 8. 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물 제조.

키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀을 정선하여 세절한 후 상기 생약을 혼합한 최종량 100 g을 기준으로 하기 표 2와 같은 비율로 취하여 비교예 1 - 4와 동일한 방법을 사용하여 실시예 1 내지 8의 추출물을 얻었다.

실시예	키위	파인애플	아르니카	레이디스맨틀	여과액(g)	고형분(%)
실시예 1.	1	1	2	2	834	1.65
실시예 2.	1	1	4	4	793	1.51
실시예 3.	2	2	3	3	881	1.98
실시예 4.	1	3	2	4	883	1.74
실시예 5.	1	3	4	2	874	1.81
실시예 6.	3	1	2	4	896	2.16
실시예 7.	3	1	4	2	904	2.03
실시예 8.	3	3	4	4	988	2.54

실시예 9 - 16. 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물 제조.

상기 실시예 1과 동일한 혼합비로 혼합한 원료 100 g을 하기 표 3에서 보는 바와같이 추출용매를 달리하여 비교예 1 - 3과 동일한 방법을 사용하여 실시예 9 내지 16의 추출물을 얻었다.

실시예	용 매	여과액(g)	고형분(%)
실시예 9.	정제수	997	1.80
실시예 10.	메탄올	910	0.89
실시예 11.	함수 에탄올 (30 w/w%)	944	1.87
실시예 12.	함수 프로필렌글라이콜 (30 w/w%)	912	1.86
실시예 13.	함수 프로필렌글라이콜 (70 w/w%)	881	1.35
실시예 14.	함수 부틸렌글라이콜 (30 w/w%)	926	1.89
실시예 15.	함수 부틸렌글라이콜 (70 w/w%)	884	1.32
실시예 16.	함수 글리세린 (80 w/w%)	874	-

실시예 17 - 25. 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물 제조.

상기 표 3과 동일한 용매를 사용하여, 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 80 ℃에서 12 시간 가열, 추출한다. 250메쉬 여과포로 여과하고 상온으로 냉각한 후 5 ~ 15 ℃에서 7일간 방치한다. 최종 0.45 μm 필터로 여과하여 여과액 및 고형분 추출물을 수득하였다. 상기 여과액 및 고형분 추출물을 하기 표 4에 나타내었다.

실시예	용 매	여과액(g)	고형분(%)
실시예 17.	정제수	976	3.20
실시예 18.	메탄올	893	0.89
실시예 19.	함수 에탄올 (30 w/w%)	940	2.57
실시예 20.	함수 에탄올 (70 w/w%)	902	2.06
실시예 21.	함수 프로필렌글라이콜 (30 w/w%)	913	2.35
실시예 22.	함수 프로필렌글라이콜 (70 w/w%)	892	2.09
실시예 23.	함수 부틸렌글라이콜 (30 w/w%)	923	2.60
실시예 24.	함수 부틸렌글라이콜 (70 w/w%)	887	1.89
실시예 25.	함수 글리세린 (80 w/w%)	894	-

실험예 1. 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물의 세포독성 측정.

실험방법

MTT assay는 살아있는 세포의 수를 측정함으로서 세포 증식이나 독성에 많이 사용되는 실험법으로, 세포독성 및 세포생존률을 알아보기 위하여 살아있는 세포의 미토콘드리아 내에 존재하는 숙신산탈수소효소(succinatedehydrogenase 또는 mitochondrial dehydrogenase)에 의해서 수용성이고 노란색 염인 MTT(3-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide)가 수불용성인 포르마잔(formazan) 유도체로 환원되는 원리를 이용하는 것이다. 생성된 포르마잔 유도체는 용해제(보통 dimethylsulfoxide 사용)를 넣고 용해시킨 후 흡광도를 측정한다. 좀 더 자세히 설명하면, 인간 섬유아세포 세포주(human fibroblasts cell line; ATCC, CRL-2076)를 1×10⁴ cells/sell의 농도로 하여 24-well plate에 접종하였다. 배지는 우태아혈청(fetal bovine serum; FBS, BRL, USA) 10%를 함유한 DMEM(Dubelcco'S Modified Eagle Medium, BRL, USA)을 사용하였다. 접종한지 24 시간 후, serum-free DMEM으로 교체하고, 시험 시료(비교예 1 - 4, 실시예 1 - 25)를 100 μg/ml의 농도로 첨가 한 후 3일 동안 37 ℃, 5% CO₂ 인큐베이터에서 배양하였다. 배양이 끝난 후 상등액을 제거 하고 다시 PBS(phosphate buffered saline)를 가하여 세척하고 MTT 용액을 well당 1.0 ml씩 가한 후 4 시간 후에 MTT 용액을 제거하고, DMSO를 well당 1.0 ml씩 가하여 포르마잔을 용해시킨 후 570 nm에서 흡광도를 측정하였다. 아래 수식에 의해 세포생존률을 계산하였다. 시료를 녹이기 위해 사용한 DMSO를 control군으로 하여 나타낸 결과를 표 5에 나타내었다. 실험 결과, 실시비교예 1 - 4와 실시예 1 - 25는 시험 농도 100 μg/ml에서 모두 세포 독성이 없는 것으로 나타났다. 이후 진행된 실험 농도를 100 μg/ml으로 진행하였다.

세포생존률 (%) = (실시예 OD570) / (control OD570) × 100

실 시 예	세포 생존율(%)	실 시 예	세포 생존율(%)
control	100.0	실시예 11.	100.8
비교예 1.	106.2	실시예 12.	101.8
비교예 2.	102.5	실시예 13.	102.6
비교예 3.	100.9	실시예 14.	101.5
비교예 4.	100.2	실시예 15.	101.9
실시예 1.	103.2	실시예 16.	104.1
실시예 2.	100.8	실시예 17.	100.6
실시예 3.	100.7	실시예 18.	102.3
실시예 4.	101.6	실시예 19.	101.1
실시예 5.	102.4	실시예 20.	103.1
실시예 6.	100.2	실시예 21.	102.4
실시예 7.	103.1	실시예 22.	105.1
실시예 8.	103.6	실시예 23.	102.8
실시예 9.	101.8	실시예 24.	103.4
실시예 10.	102.6	실시예 25.	104.2

실험예 2. 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물 프리라디칼 ( free radical ) 소거능 실험

상기 실시 비교예 1 - 4와 실시예 1 - 25를 시료로 사용하여 푸지타(Fujita) 등의 방법(Y.Fugita et al., Yakugak Zasshi, 108, p129, 1988)을 개선한 것으로, 안정한 1,1-디페닐-2-피크릴히드라질 라디칼(1,1-Diphenyl-2- picrylhydrazyl radical)을 사용하였다. 0.2 mM 의 디페닐-2-피크릴히드라질 (DPPH) 용액 1㎖에 시료를 각 농도별로 2㎖을 첨가하고, 상온에서 10분간 반응 시킨 후, 525nm에서 최대 흡광도를 측정하여 하기 수학식 2로 자유 라디칼 소거효과(%)를 계산하여 그 결과를 표 6에 나타내었다.

<수학식 2>

자유 라디칼 소거효과(%) = [1-(A-A')/(B-B')] x 100

A : 시료와 DPPH를 첨가한 반응용액의 525nm에서 흡광도

A' : DPPH를 첨가하지 않은 반응용액의 525nm에서 흡광도

B : DPPH를 첨가한 반응용액의 525nm에서 흡광도

B' : 시료와 DPPH를 첨가하지 않은 반응용액의 525nm에서 흡광도

자유 라디칼 소거효과(%)

실 시 예	SC₅₀(ug/mL)	실 시 예	SC₅₀(ug/mL)
비교예 1.	25.6	실시예 12.	20.6
비교예 2.	28.6	실시예 13.	22.6
비교예 3.	20.5	실시예 14.	21.4
비교예 4.	21.5	실시예 15.	23.1
실시예 1.	25.2	실시예 16.	20.3
실시예 2.	20.5	실시예 17.	78.6
실시예 3.	25.2	실시예 18.	23.8
실시예 4.	35.6	실시예 19.	24.9
실시예 5.	36.2	실시예 20.	10.3
실시예 6.	22.7	실시예 21.	25.7
실시예 7.	20.4	실시예 22.	27.6
실시예 8.	70.3	실시예 23.	29.7
실시예 9.	25.4	실시예 24.	21.3
실시예 10.	22.7	실시예 25.	20.2
실시예 11.	21.5

실험결과, 상기 표 6에 나타난 바와 같이, 모든 실시예를 처리하여 자유라디칼 소거효과를 확인한 결과 비교 실시예와 비슷한 결과를 얻었다. 특히 실시예 20의 경우는 비교실시예 1보다도 약 2배 더 항산화 능력이 좋은 것을 확인하였다.

실험예 3. 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물의 티로시나아제 저해 실험.

상기 실시 비교예 1 - 4과 실시예 1 - 25를 시료로 사용하여 머쉬룸 티로시나제 활성 저해효과를 바니 등의 방법(A. Vanni, Annali di Chimica, 80, p35, 1990)을 이용하여 측정하였다. 구체적으로, 0.1 M 포타슘 포스페이트 완충액(pH 6.8) 1.0 ㎖, 0.3 ㎎/㎖ L-티로신 수용액 1.0 ㎖, 1,250 유닛/㎖ 머쉬룸 티로시나제(SIGMA사, T-7755) 0.1 ㎖를 혼합한 후 여기에 시료용액을 농도에 따라 각각 0.2 ㎖ 첨가하여 37℃에서 10분간 효소반응을 진행시키고, 양성 대조군으로 알부틴(바이오랜드 사)을 사용하였다. 반응용액의 흡광도를 480nm에서 측정하여 하기 수학식 3로 티로시나제 활성 억제 효과를 계산하여 그 결과를 표 7에 나타내었다.

<수학식 3>

머쉬룸 티로시나제 활성 억제율(%) = [1-(A-A')/(B-B')] x 100

A : 시료와 효소를 첨가한 반응용액의 480nm에서 흡광도

A' : 시료만 첨가한 반응용액의 480nm에서 흡광도

B : 시료를 첨가하지 않지 않고 효소만 첨가한 반응용액의 480nm에서 흡광도

B': 시료와 효소를 첨가하지 않은 반응용액의 480nm에서 흡광도

머쉬룸 티로시나제 활성 억제율(%)

실시예	IC₅₀(ug/mL)	실시예	IC₅₀(ug/mL)
비교예 1.	52.6	실시예 12.	40.6
비교예 2.	60.4	실시예 13.	42.6
비교예 3.	55.5	실시예 14.	41.9
비교예 4.	56.8	실시예 15.	43.8
실시예 1.	75.1	실시예 16.	50.1
실시예 2.	50.6	실시예 17.	88.6
실시예 3.	45.1	실시예 18.	43.8
실시예 4.	65.1	실시예 19.	44.9
실시예 5.	66.9	실시예 20.	28.1
실시예 6.	42.3	실시예 21.	45.3
실시예 7.	40.3	실시예 22.	47.6
실시예 8.	80.4	실시예 23.	49.7
실시예 9.	45.2	실시예 24.	51.3
실시예 10.	35.2	실시예 25.	50.2

실험결과, 상기 표 7에 나타난 바와 같이, 모든 실시예를 처리하여 머쉬룸 티로시나제 활성 억제율를 확인한 결과 비교적 비교실시예보다 좋은 결과를 얻었다. 특히 실시예 20의 경우는 비교실시예 1보다도 약 1.8배 더 좋은 미백 활성을 확인하였다.

실험예 4. 키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물의 멜라노마 B16의 멜라닌 생성 억제 활성

상기 비교예 1 - 4과 실시예 1 - 25에 대하여 멜라노마 B16의 멜라닌 생성 억제작용효과를 측정 하였다. 구체적으로, 멜라노사이트 배양을 통하여 멜라닌 생성 억제 기능을 세포 수준에서 검정 하였다. B16 멜라노마 세포는 10 % 소의 멜라노마 세포를 5 % 이산화탄소가 존재하는 곳에서 2일간 배양하여 1.0 X 108 세포 / T25 프라스크가 될 때까지 배양한다. 그 다음 농도별로 혼합 식물 추출물을 넣고 5 % 이산화탄소가 존재하는 곳에서 2일간 배양한다. 그 후 트립신을 첨가하여 세포들을 수거하여 세포의 흑화 정도를 관찰한다. 멜라닌이 생성되어 배출된 T25 프라스크의 상층액을 취해 475 nm 에서 흡광도를 측정하여 멜라닌을 정량하고, 세포수는 수거된 세포: 트립판 블루(tryphan blue) = 1 : 9 의 비율로 혼합하여 현미경으로 관찰하여 살아있는 세포수를 세어 단위 세포당 생성된 멜라닌의 양을 정량하여 저해 효과를 나타낸다. 멜라닌 생성량 및 멜라닌 생성 저해효과는 하기 공식으로 구한 다음, 그 결과를 표 8에 나타내었다.

<수학식 4>

멜라닌 생성량 = 흡광계수(0.1498) × A₄₇₅

<수학식 5>

멜라닌 생성 저해효과 = 1 - 멜라닌 생성량/시료의 세포수

멜라닌 생성 저해효과(%)

실시예(100ug/mL처리)	멜라닌 생성 저해 효과(%)
비교예 1.	23
비교예 2.	25.1
비교예 3.	22.4
비교예 4.	19.5
실시예 1.	20.3
실시예 2.	17.3
실시예 3.	16.1
실시예 4.	21.7
실시예 5.	21.9
실시예 6.	15.6
실시예 7.	12.3
실시예 8.	90.8
실시예 9.	23.4
실시예 10.	23.4
실시예 11.	9.1
실시예 12.	17.9
실시예 13.	18.5
실시예 14.	12.4
실시예 15.	18.9
실시예 16.	17.5
실시예 17.	89.6
실시예 18.	17.6
실시예 19.	16.9
실시예 20.	6.3
실시예 21.	15.3
실시예 22.	13.8
실시예 23.	19.4
실시예 24.	18.6
실시예 25.	18.7

실험결과, 상기 표 8에 나타난 바와 같이, 모든 실시예를 처리하여 멜라닌 생성 저해효과를 확인한 결과 전체적으로 비교실시예보다 좋은 결과를 얻었고, 특히 실시예 11, 20의 경우는 비교실시예 1보다도 약 2~3 배 이상 더 좋은 미백 활성을 확인하였다.

[제형예 1]

키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물을 함유한 화장료 중 화장수(스킨)의 제형예 1은 다음 표 9와 같다. 이때 상기 추출물은 실시예 20의 것이다. 비교예 1은 상기 추출물을 함유하지 않은 제형이다.

번호	원 료	제형예 1	비교제형예 1
1	실시예 20	10.0	-
2	1,3-부틸렌글라이콜	2.00	2.00
3	글리세린	3.00	3.00
4	올레일알코올	2.00	2.00
5	폴리솔베이트 20	1.00	1.00
6	에탄올	6.00	6.00
7	방부제	미량	미량
8	조합향료	미량	미량
9	정제수	잔량	잔량
	계	100.00	100.00

[제형예 2]

키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물을 함유한 화장료 중 영향화장수(로션)의 제형예 2는 다음 표 10과 같다. 이때 상기 추출물은 실시예 20의 것이다. 비교예 2는 상기 추출물을 함유하지 않은 제형이다.

번호	원 료	제형예 2	비교제형예 2
1	실시예 20	10.0	-
2	1,3-부틸렌글라이콜	4.00	4.00
3	글리세린	3.00	3.00
4	올레일알코올	0.05	0.05
5	폴리솔베이트 20	1.00	1.00
6	방부제	미량	미량
7	조합향료	미량	미량
8	정제수	잔량	잔량
	계	100.00	100.00

[ 제형예 3]

키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물을 함유한 화장료 중 영향크림의 제형예 3은 다음 표 11과 같다. 이때 상기 추출물은 실시예 20의 것이다. 비교예 3은 상기 추출물을 함유하지 않은 제형이다.

번호	원 료	제형예 3	비교제형예 3
1	실시예 20	10.0	-
2	글리세린	5.00	5.00
3	트리에탄올아민	0.50	0.50
4	토코페릴 아세테이트	1.00	1.00
5	유동파라핀	5.00	5.00
6	스쿠알란	5.00	5.00
7	마카다미아너트 오일	15.00	15.00
8	폴리솔베이트 60	1.00	1.00
9	솔비탄세스퀴올레이트	1.00	1.00
10	카르복실비닐폴리머	0.20	0.20
11	방부제	미량	미량
12	조합향료	미량	미량
13	정제수	잔량	잔량
	계	100.00	100.00

[ 제형예 4]

키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀 혼합 추출물을 함유한 화장료 중 마사지크림의 제형예 4는 다음 표 12와 같다. 이때 상기 추출물은 실시예 20의 것이다. 비교예 4는 상기 추출물을 함유하지 않은 제형이다.

번호	원 료	제형예 4	비교제형예 4
1	실시예 20	10.0	-
2	바셀린	5.00	5.00
3	유도파라핀	30.00	30.00
4	밀랍	3.00	3.00
5	폴리솔베이트 60	1.00	1.00
6	솔비탄세스퀴올레이트	1.00	1.00
7	1,3-부틸렌글라이콜	5.00	5.00
8	글리세린	5.00	5.00
9	방부제	미량	미량
10	조합향료	미량	미량
11	정제수	잔량	잔량
	계	100.00	100.00

Claims

키위, 파인애플, 아르니카 및 레이디스맨틀의 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 추출물은 메탄올, 에탄올, 프로필렌글라이콜, 부틸렌글라이콜 및 글리세린의 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출된 것을 특징으로 하는 미백 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 추출물은 건조 중량으로서 0.01 내지 10 (W/V)%의 양으로 함유하는 것을 특징으로 하는 미백 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 항산화, 미백 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 미백 화장료 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 화장수(스킨로션), 로션, 크림, 마사지 크림, 에센스, 팩으로부터 선택되는 기초화장료; 비비크림, 화운데이션, 마스카라, 아이쉐도우 및 아이라이너로부터 선택되는 메이크업 화장료; 자외선차단용 화장료로 구성되는 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 미백 화장료 조성물.