KR102211873B1 - 인삼 부산물 추출물의 산처리물을 함유하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법 - Google Patents

인삼 부산물 추출물의 산처리물을 함유하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 (제1단계) 인삼 잎 또는 줄기를 유기용매로 추출하여 인삼 부산물 추출물을 제조하는 단계; (제2단계) 상기 추출물에 산을 처리하여 침전물 상태의 산처리물을 제조하는 단계; 및, (제3단계) 상기 산처리물에 유기용매와 탄산마그네슘을 첨가 후 교반한 뒤 여과액을 얻는 단계;를 포함하는 미백 기능성 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명을 통해 인삼뿌리부분을 대체할 수 있는 저렴한 인삼 가공물을 제공할 수 있고, 희귀 ginsenoside인 ginsenoside-Rg3, Rg5, Rk1을 다량 함유한 미백 기능성 화장료 조성물로의 이용이 가능하여 인삼 부산물의 새로운 활용 방안을 제시하여 상기 인삼 가공물의 산업성을 높일 수 있다.

Description

인삼 부산물 추출물의 산처리물을 함유하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법 {Manufacturing method for cosmetics composition comprising acid treated ginseng byproducts extracts for whitening}
본 발명은 (제1단계) 인삼 잎 또는 줄기를 유기용매로 추출하여 인삼 부산물 추출물을 제조하는 단계; (제2단계) 상기 추출물에 산을 처리하여 침전물 상태의 산처리물을 제조하는 단계; 및, (제3단계) 상기 산처리물에 유기용매와 탄산마그네슘을 첨가 후 교반한 뒤 여과액을 얻는 단계;를 포함하는 미백용 화장용 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
미(美)를 추구하는 인류의 본능에 따라 미용은 고대부터 인간의 주요한 관심사였으며, 근대 들어 인류의 평균 수명이 늘어나고 삶의 질을 중시하게 됨에 따라 미용에 대한 관심은 더욱 커져왔다. 특히 동서고금을 막론하고 공통된 미의 요소로 여겨지는 것 중 하나는 흰 피부로, 피부색을 희게 하는 활동을 통틀어 미백(美白)이라고 정의한다.
우리나라에서의 미백의 역사는 고조선 시대부터 시작되는데 단군 신화에는 쑥을 달인 물에 목욕을 하거나 찧은 마늘을 꿀에 섞어 바른 뒤 씻어내는 미백 방법에 대하여 기재되어 있으며, 삼국 시대에는 활석, 쌀가루, 백토, 황토 등을 갈아 백분을 제조하여 바르는 방법, 고려 시대에는 피부 보호제이자 미백제인 면약을 바르는 방법에 대해 기재되어 있다. 또한 조선 시대에는 점포 또는 방물장수들의 판매로 인해 백분의 유통이 활발해졌고, 개항 이후에는 청나라로부터 크림, 백분 등의 화장품이 수입되었으며, 연부액(미백로션), 유액(밀크로션) 등이 시판되기 시작하였다고 기재되어 있다. 이렇듯 미백의 역사는 매우 오래 되었고 현대에 들어서도 사람들의 미용 활동 중 미백은 높은 비중을 차지하고 있으며, 과학 기술의 발전과 맞물려 전보다 개선된 미백 방법이 대거 연구되고 있다.
인체에 있어서 피부는 외부 환경으로부터 생체를 보호하는 보호막의 기능을 하는 기관으로서, 인체 내의 생체 성분 즉, 물이나 전해질 등의 손실을 방지하는 동시에 외부로부터 유해물질이 인체 내로 침입하지 못하도록 방어하는 역할을 한다. 피부는 크게 표피층, 진피층 및 피하지방층으로 구분되며, 표피층은 각질 세포층, 과립층, 유극층, 기저층으로 구성되는데, 기저층에는 멜라닌(Melanin)을 만드멜라노사이트(Melanocyte)가 존재하고 있다. 멜라닌은 아미노산으로부터 형성이 되는 단백질성 유기색소로, 생물체에 널리 분포되어 있으며, 자외선으로부터 피부를 보호하는 역할 및 체온을 유지하는 역할을 한다.
멜라닌은 동물의 모발색, 눈동자색 및 피부색 등을 조절하는 인자이며 검은색과 갈색 계열의 유멜라닌(Eumelanin)과, 노란색과 붉은 계열 페오멜라닌(Pheomelanin)으로 분류되며, 멜라닌의 합성은 티로신(Tyrosinase), TRP-1(Tyrosinase related protein-1), TRP-2(Tyrosinase related protein-2) 등의 단백질에 의해 발현 및 합성이 조절된다. 멜라닌의 발현에 큰 영향을 미치는 효소인 티로시나아제(Tyrosinase)는 멜라닌 생합성의 레이트-리미팅(rate-limiting) 효소로서 L-티로신을 L-DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine)로, L-DOPA를 도파퀴논(DOPAquinone)으로 변환하여 멜라닌을 생합성하는 역할을 한다.
멜라닌은 자외선으로부터 피부를 보호하는 역할을 하지만 멜라닌이 과도하게 생성될 경우 피부에 색소가 침착되어 기미, 주근깨, 점, 검버섯 등을 형성하며, 자외선 노출 강도가 심할 경우 피부암의 원인이 되기도 한다. 특히 현대인들은 환경 오염에 따른 오존층 파괴로 인하여 전보다 더욱 자외선에 노출되어 있으므로 미적 측면뿐 아니라 건강적 측면에서도 악영향을 받고 있다. 따라서 현대인들의 미백은 미적 차원을 넘어 건강적 차원으로도 행해지고 있다.
가장 대중적으로 사용되는 미백 방법은 미백 성분이 첨가된 화장품을 바르는 방법으로, 미백 화장품은 크게 브라이트닝(brightening) 또는 톤 업(tone up) 제품과 화이트닝(whitening) 제품으로 분류할 수 있는데, 브라이트닝 제품은 얼굴 전체의 피부톤을 밝게하는 데에 중점을 두며, 화이트닝 제품은 기미, 잡티와 같이 국소적인 피부착색을 개선하는 데에 중점을 둔다. 국내 미백 화장품 시장에서는 주로 화이트닝 제품이 중점적으로 생산되고 있다.
상기 미백 화장품에 첨가되는 미백 성분으로 니아신아마이드(Niacinamide), 알파-비사보롤(α- Bisabolol), 아스코빌 글루코시드 (Ascorbyl Glucoside), 알부틴(Albutin) 등의 다양한 성분이 지속적으로 개발되어 왔다. 각 성분들의 미백 기전을 간략히 살펴보면 니아신아마이드는 멜라닌이 각질층으로 이동하는 것을 억제하며, 알파-비사보롤은 멜라닌 합성을 억제한다. 또한 아스코빌 글루코시드는 티로시나아제 효소에 자극받은 티로신의 산화를 억제하며, 알부틴은 티로시나아제의 생성을 억제한다.
그러나 미백 성분의 위험성에 대한 임상 연구 결과가 다수 밝혀지면서 미백 화장품의 안전성에 대한 논란이 지속되고 있다. 일 예로, 일본의 유명 화장품사의 미백 화장품을 사용한 고객 중 일부에 백반증 등의 부작용이 발생하여, 상기 미백 화장품이 45만 개 회수된 바 있다. 상기 화장품사가 자체 개발하고 일본 후생성이 인증하였으며, 티로시나아제의 활성을 저해하는 효능을 보유한 화합물인 로도데놀(Rhododenol) 성분이 문제를 일으킨 것으로 알려졌다.
또 다른 예로, 중국산 미백 화장품에서 국내 허용 기준치(ppm)를 최대 1만 5천 배 넘긴 수은이 검출된 사례가 있다. 수은은 멜라닌 생성을 차단하는 효과가 강하여 과거에는 미백 화장품 원료로 널리 사용됐으나, 현재는 신경 계통 장애를 유발한다는 것이 입증되어 사용이 금지되었다.
또한 미백 화장품에 널리 사용되고 있는 알부틴은 하이드로퀴논(Hydroquinone)과 글루코스(Glucose)가 결합된 화합물이나, 하이드로퀴논-글루코스간의 결합은 고온, 자외선, 효소, 발효물 등에 쉽게 분해되기 때문에 최종적으로 알부틴은 하이드로퀴논과 포도당으로 분리되는 경우가 대다수이다. 하이드로퀴논은 백반증, 피부 알러지, 접촉성 피부염, 여드름 등의 부작용을 유발한다는 임상실험 결과가 도출된 바 있으며, 발암성 물질로 규정되어 있다.
알부틴과 함께 미백 화장품 원료로 널리 사용되는 성분 중 코지산(Kojic acid)은 in vitro 상의 티로시나아제의 저해 능력에 비해 in vivo 상의 멜라닌 생성 억제효과가 미비할 뿐 아니라 제형의 안정성에 문제가 있으며, 최근에는 장기 사용시 간암을 유발할 수 있다고 보고된 바 있다.
이와 같은 미백 성분의 위험성이 밝혀지면서 식약처에서는 미백 화장품의 원료 종류를 8가지로 제한하고 있으며, 그에 따라 미백 효능이 뛰어나면서도 안전성 검증이 완료되어 부작용이 없는 안전한 미백용 조성물이 절실히 요구되고 있는 실정이다.
인삼은 예부터 상약으로 가치를 인정받아온 식물이며, 주로 북반구 온대 지역인 동북아권, 중국서안권, 북미권을 중심으로 자생하며 현재까지 밝혀진 인삼의 생리학적 또는 약리학적 효능을 종합해 보면 강장제 역할에 의한 신체의 항상성 유지, 통증완화작용, 암 예방 효능(암세포의 증식 및 전이 억제, 항암제의 항암활성 증강), 항당뇨 효능, 간기능 항진, 혈압 조절 외에 항피로및 항스트레스, 항산화 활성 및 노화억제 효능 등에 대한 임상실험 결과가 있다.
인삼의 주요 활성성분으로는 polysaccaharide와 phenol계 화합물, 정유성분인 sesquiterpene계 화합물, alkaloid 성분, 그리고 ginsenoside 성분이 알려져 있다. 이 중 ginsenoside (진세노사이드) 성분은 천연 사포닌 중에서도 인삼 속 식물에만 함유되어있는 dammarane 계열의 트리테르펜(triterpene) 사포닌을 일컫는 말로 오랫동안 꾸준한 연구를 통해 인삼이 강한 약리작용을 내는데 큰 기여를 하는 성분으로 약 40여종 이상이 밝혀졌다. Ginsenoside는 protopanaxadiol(PPD)과 protopanaxatriol(PPT)이 aglycone인 구조로 나눌 수 있으며, 인체에 흡수 되면 두 계열의 ginsenoside의 성분 비율에 따라 상호보합 또는 상쇄되며 다양한 약리작용을 나타낸다. 최근에는 인삼의 다양한 효능 가운데 특정 기능성을 강화하기 위해 특정 ginsenoside 발현을 높인 인삼을 생산하거나 수확 후 공정을 통해 특정 진세노사이드 함량을 높이는 연구가 활발히 이루어지고 있다.
인삼 부산물은 농가에서 가공하지 않는 인삼 1차 부산물과 가공 또는 원료로 사용 후 남은 인삼 2차 부산물로 분류한다. 최근 연구결과에 따르면, 수확시기와 재배지역에 따라 차이가 있지만 실제로 뿌리인삼, 인삼 잎, 인삼 꽃, 인삼열매, 인삼 줄기, 인삼 씨앗 등 인삼 부산물에 대한 조사포닌추출물 양을 비교해보면 각각 약 4.45%, 12.8~18.7%, 6.9%, 6.68%, 1.6~2.39%, 3.3% 로 인삼 잎, 꽃, 줄기는 뿌리인삼에 비해 2~4배 정도로 월등히 많은 사포닌을 함유하고 있다는 연구결과와 이를 이용한 약리학적 또는 생리활성 실험결과가 지속적으로 연구되고 있다.
하지만 이전에는 뿌리부분을 제외한 인삼 1차 부산물은 과량의 잔류농약과 중금속 오염의 위험이 있어 식품 또는 상업적 원료로서 사용이 기피되는 경향이 컸고 전량 폐기되어 왔다. 그러나 ginsenoside의 다양한 효능이 각광을 받기 시작하면서 인삼 1차 부산물 중 특히 잎과 줄기부분이 ginsenoside의 함량이 높고 뿌리인삼에 비해 저비용으로 사료첨가물, 화장품 원료, 제약 원료로써 사용 가능성이 증대되고 있다.
그러나 인삼 잎과 인삼줄기에는 ginsenoside-Re, Rg1, Rb, Rd 등을 다량 함유하지만 희귀 ginsenoside인 Rg3, Rk1, Rg5 등은 거의 존재하지 않는다. 희귀 ginsenoside는 증숙, 발효, 산처리 등의 가공을 거쳐야 생성되는 ginsenoside로 일반적인 수삼, 백삼에는 나타나지 않지만 열처리를 가한 홍삼이나 흑삼 등에서 미량 발견된다.
일반 ginsenoside인 Re, Rg1, Rb, Rd 등도 항당뇨 작용, 인슐린 저항성, 신경세포 보호 작용, 정자 수정력 증진, 항산화 작용 등의 효능을 나타내는 것으로 알려져 있지만 glycoside와 물 분자가 많은 고분자 형태로 생체이용률이 낮다. 그러나 희귀 ginsenoside는 일반 ginsenoside에 열처리, 산 처리, 효소 처리, 발효 공정을 통해 glycoside와 물 분자를 제거하여 생체이용률이 높은 저분자 ginsenoside로 변하게 되는데 예를 들면, 진세노사이드 Rb1의 경우 20번 탄소에 연결된 두 개의 glucose 중 하나가 제거되면 Rd가 되고 또 하나가 제거되면 Rg3 (S/R)가 된다. 일반 ginsenoside에서 희귀 ginsenoside로 변환시키면 그에 따라 ginsenoside의 성상이나 약리학적 활성도 바뀐다.
Ginsenoside-Rg3, Rg5, Rk1은 특히 항암활성이 매우 좋은 것으로 알려져 있는데 특히, Rg3는 항암제의 내성억제와 신생혈관형성의 억제를 통한 암전이 억제 효과를 가지고 있어 Rg5, PPD에 비해 암세포에 직접적인 세포독성은 약하지만 in vivo에서 항암제의 항암활성을 증가시키고 생체이용률을 증가시키는 효과를 나타내었다. 이런 효과에 힘입어 이미 2000년도에 ginsenoside-Rg3를 추출, 정제하여 'Rg3-Shenyl Jiaonang'이 중국 최초 천연물 신약으로 개발되어 판매되고 있다. Ginsenoside-Rg5/Rk1 역시 매우 강한 항암활성을 보이는데 특히 간암세포에 대한 직접적인 세포독성을 나타낸다는 연구결과가 있다.
또한, 천연소재의 다양한 기능성을 가진 화장품에 대한 관심이 높아지면서 관련 시장이 급속도로 성장함에 따라 다양한 약리학적 활성을 가진 식물들의 피부생리활성에 대한 연구가 몇년전부터 활발히 진행되었다. 특히 희귀 ginsenoside가 항암활성뿐만 아니라 미백활성, 항산화활성, 주름개선 활성 등이 매우 뛰어나다는 연구결과가 있다. 최근 ginsenoside-Rg5/Rk1을 함유한 흑삼 추출물이 멜라닌 생성에 가장 중요한 효소인 티로시나아제 활성을 감소시켜 멜라닌 합성을 저해한다는 연구결과가 나와 더욱 기능성 화장품 소재로서 주목받고 있다(Lim et al., 2018).
희귀 ginsenoside는 일반 ginsenoside에 열처리, 산처리, 효소 처리, 다양한 발효 공정을 통해서 생산되는데 이미 발표된 대부분의 인삼 뿌리부분 또는 인삼부산물을 연구가 효소 또는 발효공정을 통해 희귀 ginsenoside의 함량을 높이는 방법이 주를 이루고 있다. 특히 미생물을 이용한 발효 공정은 친환경적이고 유해물질 논란 없는 방법으로 각광받고 있지만 실제 산업적으로 이용하기엔 매번 동일한 양의 ginsenoside를 생산하기 어렵고 효율적이지 못한 단점이 있으며 인삼부산물을 원료로 이용할 경우 잔류농약이나 중금속을 충분히 제거해줘야 하는 번거로움이 있다. 열처리는 이미 전통적인 방법으로 홍삼이나 흑삼을 제조하는 방법으로 증기에 찐 후 건조시키는 방법으로 이 역시 정확한 양의 ginsenoside를 생산하는 방법으로는 적합하지 않다.
산처리 공정은 화학적 처리라는 데서 오는 거부감과 인삼의 원형을 유지하기는 어렵다는 단점이 있지만 인삼부산물을 이용할 경우 현재 우리나라에서 판매되고 있는 농약의 대부분이 염기성임을 고려할 때 잔류농약 처리에도 효율적이며, 산업적 생산에 있어 중요한 부분 중 하나인 최종수율을 정확하게 계산할 수 있다는 장점이 있다.
인삼을 이용한 미백용 기능성 화장품 원료 조성물 관련 종래기술로는 대한민국 등록특허 제10-1921832호에 증삼액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물이, 대한민국 등록특허 제10-1711002호에는 인삼 잎추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물이, 대한민국 등록특허 제10-1511308호에는 홍삼박 또는 여정실을 유효성분으로 함유하는 미백 조성물이 알려져 있고, 대한민국 등록특허 제10-1416671호에 초음파 처리를 이용한 인삼 프로사포게닌 고농도 함유 인삼 잎 및 줄기 제제 및 이의 제조방법이 알려져 있으나, 본 발명의 산 용액을 이용하는 피부 미백용 또는 개선용 인삼 잎 추출물의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 대해서는 개시된 바 없다.
이에, 본 발명자들은 이러한 인삼 또는 이의 부산물의 효능에 관해 연구하던 중, 인삼 부산물의 산처리물이 멜라닌 생성 억제 효과, 티로시나아제 활성 억제 효과 등이 우수하고 피부 부작용이 없어 미백용 화장료 조성물로서 사용할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성할 수 있었다.
대한민국 등록특허 제10-1921832호 (발명의 명칭 : 증삼액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물, 출원인 : 주식회사 한국인삼공사, 등록일 : 2018년11월19일) 대한민국 등록특허 제10-1711002호 (발명의 명칭 : 인삼 잎추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물, 출원인 : 주식회사 한국화장품제조, 등록일 : 2017년02월22일) 대한민국 등록특허 제10-1511308호 (발명의 명칭 : 홍삼박 또는 여정실을 유효성분으로 함유하는 미백 조성물, 출원인 : 재단법인 진안홍삼연구소, 등록일 : 2015년04월06일) 대한민국 등록특허 제10-1416671호 (발명의 명칭 : 초음파 처리를 이용한 인삼 프로사포게닌 고농도 함유 인삼 잎 및 줄기 제제 및 이의 제조방법, 출원인 : 세명대학교 산학협력단 외 1인, 등록일 : 2014년07월02일) 대한민국 등록특허 제10-1133739호 (발명의 명칭 : 고 함량의 진세노이드 Ｒｇ3를 함유한 산가수분해 백삼 추출물의 제조방법, 출원인 : 건국대학교 산학협력단 외 1인, 등록일 : 2012년03월29일) 대한민국 공개특허 제10-1133739호 (발명의 명칭 : 홍삼엑스의 산처리 및 온도처리에 의한 기능성사포닌 함량증대, 출원인 : (주)바이오피아, 공개일 : 2006년06월05일)
Lim et al., Ginsenosides Rg5 and Rk1, the skin-whitening agents in black ginseng. Journal of Functional Foods. 45(2018) 67-74.
본 발명의 목적은 (제1단계) 인삼 잎 또는 줄기를 유기용매로 추출하여 인삼 부산물 추출물을 제조하는 단계; (제2단계) 상기 추출물에 산을 처리하여 침전물 상태의 산처리물을 제조하는 단계; 및, (제3단계) 상기 산처리물에 유기용매와 탄산마그네슘을 첨가 후 교반한 뒤 여과액을 얻는 단계;를 포함하는 미백용 화장용 조성물의 제조방법을 제공하는 데에 있다.
본 발명은 인삼 부산물 추출물의 산처리물을 함유하는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
상기 제조방법은, 바람직하게는,
(제1단계) 인삼 잎 또는 줄기를 유기용매로 추출하여 인삼 부산물 추출물을 제조하는 단계;
(제2단계) 상기 추출물에 산을 처리하여 침전물 상태의 산처리물을 제조하는 단계; 및,
(제3단계) 상기 산처리물에 유기용매와 탄산마그네슘을 첨가 후 교반한 뒤 여과액을 얻는 단계;를 포함할 수 있다.
상기 제1단계에서, 인삼 잎 또는 줄기를 유기용매에 침지한 후, 1 ~ 10 시간 동안 교반하고 여과하여 여과액만 수득한 후 감압 농축하여 인삼 부산물 추출물을 얻을 수 있다.
상기 제2단계에서, 제1단계에서 얻은 인삼 부산물 추출물에 산성 수용액을 첨가하여 30 ~ 100 ℃에서 1 ~ 5 시간 교반하고 여과하여 침전물을 얻고, 상기 침전물을 유기용매에 용해한 후 여과지(No.1 (Whatman) 11㎛)로 여과한 여과액을 감압 농축하여 인삼 부산물 산처리물을 얻을 수 있다.
상기 제2단계의 산성 수용액은 염산 (hydrochloric acid), 초산(acertic acid), 구연산(citric acid), 아스코르브산(ascorbic acid) 및 숙신산(succinic acid)으로 이루어진 군 중에서 1종 이상 선택된 산의 수용액일 수 있다. 상기 산성수용액은 0.01 ~ 0.5 N 농도인 것을 사용하는 것이 바람직하다.
상기 제3단계에서, 상기 산처리물을 유기용매에 첨가하여 용해한 후, 탄산마그네슘(MgCO3)을 투입하여 25~60℃에서 10~60분 동안 교반하고 1~10℃에 5~15시간 정치 후 여과하여 여과액을 얻음으로써 최종적인 미백용 화장료 조성물의 수득이 가능하다.
상기 제1단계 내지 제3단계의 모든 단계에서 사용되는 유기용매는 C1~C4 알코올, 에테르, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 이들 유기용매와 물의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
본 발명은 이에 상기 제1단계 내지 제3단계의 방법으로 제조된 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 미백용 화장료 조성물은 티로시나아제의 활성을 저해하고, 멜라닌 생성을 억제하며, DOPA 활성 억제 기능이 있는 것을 특징으로 한다.
이하 본 발명을 더 자세하게 설명한다.
본 발명의 미백용 화장료 조성물의 제조방법에 있어서, 상기 제1단계에서, 인삼 잎 또는 줄기 100 중량부를 유기용매 500 ~ 3000 중량부에 침지하는 것이 좋다.
또한, 상기 제2단계에서, 인삼 부산물 추출물 100 중량부 기준으로 산성 수용액을 300 ~ 1000 중량부 첨가하는 것이 좋다.
상기 제2단계에서, 산성 수용액은 0.01 ~ 0.5 N 농도인 것을 사용하는 것이 바람직하다.
상기 제3단계에서, 산처리물 100 중량부 기준으로 유기용매 500 ~ 1500 중량부를 첨가하는 것이 좋고, 탄산마그네슘(MgCO3)을 상기 산처리물 100 중량부 기준으로 100~300 중량부를 투입하여 25~60℃에서 10~60분 교반하고 1~10℃에 5~15시간 정치 후 여과하여 여과액을 얻을 수 있다.
상기 제1단계 내지 제3단계의 모든 단계에서 사용되는 유기용매는 C1~C4 알코올, 에테르, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 이들 유기용매와 물의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 상기 C1~C4 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올 및 이소부탄올로 이루어진 군에서 선택될 수 있다. 상기 유기용매로서 이용될 수 있는 것으로서 가장 바람직하게는 에탄올 또는 이의 수용액이 선택될 수 있으나, 이에 한정하지는 않는다.
상기 에탄올의 수용액은 이들의 50~90%(v/v) 수용액일 수 있다. 유기용매를 이용한 추출은 2회 이상 추출될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 화장료 제형으로도 제조될 수 있으며, 피부외용연고, 에센스, 미백크림, 로션, 에멀젼, 팩, 일반화장수, 스킨밀크, 스킨, 크림, 세럼, 미용비누, 유연화장수, 약용화장수, 전신세정제, 클렌징 오일, 클렌징 크림, 클렌징 티슈 및 클렌징 워터에서 선택될 수 있다. 상기 화장료 제형에 포함되는 본 발명의 인삼 부산물 추출물의 산처리물은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.0001 ~ 10.0 중량%이고, 바람직하게 0.0005 ~ 10.0 중량%이며, 가장 바람직하게는 0.005 ~ 5.0 중량%이다. 0.0001 중량% 미만일 경우에는 뚜렷한 미백 효능을 기대할 수 없으며, 10.0 중량%를 초과하여도 되지만, 비용 면에서 바람직하지 않다.
본 발명의 화장료 조성물에는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분이 추가로 포함될 수 있다.
수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.
유용성 비타민으로서는 화장료에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E(d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.
고분자 펩티드로서는 화장료에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.
고분자 다당으로서는 화장료 조성물에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.
스핑고 지질로서는 화장료 조성물에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.
해초 엑기스로는 화장료 조성물에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에는 또한 통상의 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수도 있다.
이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.
에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.
탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.
실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.
불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.
동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.
보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.
수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.
지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.
수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.
지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.
에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.
계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.
비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE(폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP(폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.
음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.
양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.
양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.
유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.
유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.
자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.
살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301 호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.
산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.
pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.
알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.
또한 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 내지 5 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 - 3 중량%로 배합될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 균주 유래의 각종 조성물 이외에 화장료에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명은 인삼 부산물 추출물의 산처리물을 원료로 함유하는 미백용 약학 조성물일 수 있다. 상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 균주 유래 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.01㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 1㎎/㎏/일 내지 500㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 균주 유래 조성물은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.
또한, 본 발명은 인삼 부산물의 산처리물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 광보호 효능을 갖는 건강기능식품을 제공한다. 상기 인삼 부산물의 산처리물은 본 발명의 건강기능식품에 0.001~100 중량%로 하여 첨가될 수 있다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 인삼 부산물의 산처리물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 알코올 음료, 탄산음료, 주스, 껌, 차 및 비타민 복합제 등이 있다.
본 발명은 (제1단계) 인삼 잎 또는 줄기를 유기용매로 추출하여 인삼 부산물 추출물을 제조하는 단계; (제2단계) 상기 추출물에 산을 처리하여 침전물 상태의 산처리물을 제조하는 단계; 및, (제3단계) 상기 산처리물에 유기용매와 탄산마그네슘을 첨가 후 교반한 뒤 여과액을 얻는 단계;를 포함하는 미백 기능성 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명을 통해 인삼뿌리부분을 대체할 수 있는 저렴한 인삼 가공물을 제공할 수 있고, 희귀 ginsenoside인 ginsenoside-Rg3, Rg5, Rk1을 다량 함유한 미백 기능성 화장료 조성물로의 이용이 가능하여 인삼 부산물의 새로운 활용 방안을 제시하여 상기 인삼 가공물의 산업성을 높일 수 있다.
도 1은 인삼 잎 추출물과 이의 산처리물의 HPLC 크로마토그램 비교 결과를 나타낸다. 도 1의 핑크색 라인은 제조예 1의 추출물, 검정색 라인은 제조예 2의 산처리물을 나타낸다.
도 2는 인삼 잎 추출물과 이의 정제물(탄산마그네슘 투입 후 여과한 것) 산처리물의 HPLC 크로마토그램 비교 결과를 나타낸다. 도 2의 핑크색 라인은 실시예 1 조성물, 검정색 라인은 제조예 2의 산처리물을 나타낸다.
본 발명은 (제1단계) 인삼 잎 또는 줄기를 유기용매로 추출하여 인삼 부산물 추출물을 제조하는 단계; (제2단계) 상기 추출물에 산을 처리하여 침전물 상태의 산처리물을 제조하는 단계; (제3단계) 상기 산처리물에 유기용매와 탄산마그네슘을 첨가 후 교반한 뒤 여과액을 얻는 단계를 포함하는 미백 기능성 화장품 원료의 제조방법을 제공한다.
보다 자세하게는, 본 발명은, (제1단계) 인삼 뿌리를 제외한 인삼의 부산물로서, 인삼 잎 또는 줄기(건조물) 100 중량부를 유기용매 500 ~ 3000 중량부에 침지한 후 1 ~ 10 시간 이상 강하게 교반하고, 교반한 용액을 걸러 여과액만 수득한 후 감압 농축하여 인삼 부산물 추출물을 얻는 단계;를 포함하여 상기 화장품 원료를 제조할 수 있다. 이 때, 감압농축을 통해 용매를 제거하여 60~80℃ 건조 오븐에 넣고 건조하여 고형분을 수득한다.
상기 인삼 잎 또는 줄기 100 중량부를 기준으로 유기용매가 500 중량부 미만으로 첨가될 경우, 인삼 잎 또는 줄기 내 유용성 성분의 추출이 잘 되지 않을 수 있고, 상기 유기용매가 3000 중량부를 초과하여 첨가할 경우에는 교반시간 또는 감압농축 시간이 더 필요할 수 있어 바람직하지 않다. 한편, 인삼의 잎 또는 줄기를 유기용매에 침지하고 교반시간이 1시간 미만이어도 역시 인삼 잎 또는 줄기 내 유용성 성분의 추출이 잘 되지 않을 수 있으며, 10 시간 초과하여 교반하게 되면 추출액 내 인삼 잎 또는 줄기 내 유용성 성분이 변화되거나 활성이 달라질 수 있기에 바람직하지 않다.
또한, 다음으로, (제2단계) 상기 인삼 부산물 추출물 100 중량부 기준으로 0.01 ~ 0.5 N 농도의 산성 수용액을 300 ~ 1000 중량부 첨가하여 30 ~ 100 ℃에서 1 ~ 5 시간 교반하고 여과하여 침전물을 얻고, 상기 침전물을 유기용매에 용해한 후 여과지로 여과한 여과액을 감압 농축하여 인삼 부산물 산처리물을 얻는 단계;를 포함하여 상기 화장품 원료를 제조할 수 있다. 상기 여과지로서, 0.45 μm membrane fiter를 사용할 수 있다. 한편 더 바람직한 산성 수용액의 농도는 0.1 ~ 0.5 N 인 것이 좋다.
상기 인삼 부산물 추출물 100 중량부 기준으로 산성 수용액을 300 중량부 미만으로 첨가하게 되거나, 1000 중량부를 초과하여 첨가될 경우 진세노사이드의 함량 변화에 영향을 줄 수 있어, 바람직한 미백 효능을 얻지 못할 수 있다. 마찬가지로, 산성 수용액의 농도가 0.01 N 미만이거나 0.5 N 농도를 초과하게 되어도 진세노사이드의 함량 변화에 영향을 줄 수 있어, 바람직한 미백 효능을 얻지 못할 수 있다.
상기 산성 수용액은 그에 포함된 산(acid) 종류가 제한되지 않으나 염산 (hydrochloric acid), 초산(acertic acid), 구연산(citric acid), 아스코르브산(ascorbic acid), 숙신산(succinic acid)이 포함될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 염산(hydrochloric acid), 초산(acertic acid), 구연산(citric acid) 중 1종 또는 이들의 혼합물이 포함될 수 있다.
이 때, 교반기의 온도는 30 ~ 100 ℃ 사이로 유지하며 1 ~ 5 시간 교반하는 것이 좋으며, 교반이 종료된 후 여과지로 여과하여 침전물을 수득한다.
이 때에도, 감압농축을 통해 용매를 제거하여 60~80℃ 건조 오븐에 넣고 건조하여 고형분을 수득한다.
마지막으로, (제3단계) 상기 산처리물 100 중량부 기준으로 유기용매, 더 바람직하게는 물과 유기용매를 혼합한 용액, 500 ~ 1500 중량부를 첨가하여 완전히 용해한 후, 상기 산처리물 100 중량부 기준으로 탄산마그네슘(MgCO3) 100~300 중량부를 투입하여 25~60℃에서 10~60분 교반한 다음, 냉각하여 1~10℃에 5~15시간 정치 후 여과지로 여과하여 여과액을 수득하는 단계;를 포함하여 최종적으로 화장품 원료의 제조가 가능하다.
상기 탄산마그네슘을 첨가하는 단계는 산처리물의 정제 단계에 해당된다.
상기 유기용매가 산처리물 100 중량부 기준으로 500 중량부 미만으로 첨가될 경우 산처리물이 잘 용해되지 않을 수 있으며, 1500 중량부를 초과할 경우 탄산마그네슘이 불순물을 정제하기에 바람직하지 않을 수 있다.
또한 상기 탄산마그네슘이 산처리물 100 중량부 기준으로 100 중량부 미만으로 포함될 경우 불순물의 정제가 잘 되지 않아 최종 제조되는 조성물이 쉽게 부패되거나 변질될 수 있고, 인삼에 뿌려진 각종 농약 등이 제거되지 않을 수 있으며, 탄산마그네슘이 300 중량부를 초과할 경우 산처리물 내의 진세노사이드까지 제거될 수 있어 바람직하지 않다.
이때, 산처리물이 물과 유기용매를 혼합한 용액에 완전히 용해되지 않을 시 용액의 온도를 50 ℃ 이하까지 올려 용해시킨다. 이 때, 탄산마그네슘은 투입 후 교반과정을 통해 용매 내에 분산되나 용해되지 않는 것이 특징이다. 탄산마그네슘의 분산 후 정치 시간은 보다 바람직하게는 7~12시간인 것이 좋다. 상기 여과액 또한 감압농축을 통해 용매를 제거하여 60~80℃ 건조 오븐에 넣고 건조하여 고형분을 수득할 수 있다. 이 단계에서 사용되는 여과지로는 0.2 μm membrane filter를 사용하는 것이 좋다.
상기 제1단계 내지 제3단계의 모든 단계에서 사용되는 유기용매는 C1~C4 알코올, 에테르, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 이들 유기용매와 물의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 상기 C1~C4 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올 및 이소부탄올로 이루어진 군에서 선택될 수 있다. 상기 유기용매로서 이용될 수 있는 것으로서 가장 바람직하게는 에탄올 또는 이의 수용액이 선택될 수 있으나, 이에 한정하지는 않는다.
이와 같은 방법을 통해 제조된 인삼부산물의 산처리물 및 그를 포함하는 화장료 조성물이 알부틴 성분이 함유된 시중 판매 제품보다 피부 미백 효과가 매우 우수하며, 보관 안정성 또한 우수하다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다.
그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지도록, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
<제조예 1. 인삼부산물(잎/줄기) 추출물의 제조>
본 발명에 사용된 인삼 잎과 줄기는 경상북도 농업기술원의 풍기인삼시험장에서 구입하여 사용하였다. 인삼 잎과 줄기를 완전히 건조한 후 분쇄하여 교반기에 담고 60%(v/v) 에탄올 수용액을 인삼 잎 또는 줄기의 건조물 100 중량부 기준으로 1000 중량부를 첨가하여 5시간 동안 교반하였다. 교반이 종료된 후 여과하여 여과액만 수득한 후 감압농축을 통해 용매를 제거하였고, 감압농축물을 건조 오븐에 넣고 60 ℃에서 완전히 건조하였다.
<제조예 2. 인삼부산물 추출물의 산처리물 제조>
제조예 1에서 제조한 인삼의 잎 또는 줄기 추출물을 80 mesh 이하로 분쇄하여 교반기에 담고, 상기 인삼의 잎 또는 줄기 추출물 100 중량부 기준으로 0.1 N의 염산 수용액을 500 중량부 첨가한 후 교반기의 온도를 50℃로 유지하며 3시간 동안 교반하였다. 교반이 종료된 후 Filter paper 1번으로 여과하여 침전물을 수득하였다.
이 후 상기 침전물에 인삼의 잎 또는 줄기 추출물 100 중량부 기준 60%(v/v) 에탄올 수용액을 1000 중량부 첨가하여 침전물을 용해하였고, 용해액을 0.45 μm membrane filter를 이용하여 걸러낸 후 여과액을 감압농축하였다. 감압농축물은 건조 오븐에 넣고 60 ℃에서 완전히 건조하였다.
<실시예 1. 탄산마그네슘 (MgCO 3 )를 이용한 인삼 부산물의 산처리물 정제>
제조예 2에서 얻은 인삼의 잎 또는 줄기 추출물의 산처리물 100 g 기준으로 60%(v/v) 에탄올 수용액을 1000 g을 투입하여 완전히 용해하였다. 이 때, 산처리물이 완전히 용해되도록 60%(v/v) 에탄올 수용액의 온도를 50 ℃로 올려 용해하여 산처리물의 용해액을 얻었다. 이 후 상기 용해액에 최초 투입한 산처리물 100 g 기준으로 탄산마그네슘 (MgCO3) 100 g을 투입하여 35 ℃에서 40분 동안 교반하여 탄산마그네슘을 분산시켰다. 이 때, 탄산마그네슘은 용해액에 용해되지 않고 분산 상태로 교반되기만 한다. 이 후, 분산액을 4℃ 까지 냉각시킨 후 10시간 동안 정치시킨 후, 정치된 액상을 0.2 μm membrane filter를 이용하여 여과하여 여과액을 수득하였다. 이 여과액도 제조예 1 또는 2처럼 감압농축 및 건조하였다.
<실시예 2. 산성 수용액 농도를 0.5N로 변경한 인삼 부산물의 산처리물의 제조>
인삼 잎 건조물을 이용하여 제조예 1 및 2와 실시예 1의 과정을 통해 인삼 부산물의 산처리물을 제조하되, 0.1 N의 염산 수용액 대신 0.5 N 염산 수용액을 이용하여 최종적으로 불순물 정제과정까지 마친 건조상태의 조성물을 제조하였다.
<실시예 3. 탄산마그네슘 함량을 300g으로 변경한 인삼 부산물의 산처리물의 제조>
인삼 잎 건조물을 이용하여 제조예 1 및 2와 실시예 1의 과정을 통해 인삼 부산물의 산처리물을 제조하되, 탄산마그네슘은 100g 대신 300g을 이용하여 최종적으로 불순물 정제과정까지 마친 건조상태의 조성물을 제조하였다.
<비교예 1. 인삼 뿌리 추출물의 제조>
제조예 1과 같은 방법으로 추출물을 제조하되 인삼의 잎 또는 줄기 대신 뿌리를 사용하였다.
<비교예 2. 인삼 뿌리 산처리물의 제조>
제조예 2와 같은 방법으로 산처리물을 제조하되, 제조예 1의 인삼의 잎 또는 줄기 추출물 대신 비교예 1의 인삼 뿌리 추출물을 이용하여 산처리물을 제조하였다.
<비교예 3. 인삼 뿌리 산처리물의 정제>
비교예 2의 산처리물을 실시예 1의 방법으로 최종 여과, 농축 및 건조하여 정제물을 얻었다.
<비교예 4. 산처리 단계를 변경한 인삼 부산물의 산처리물의 제조>
인삼 잎 건조물 100 g 기준으로 0.1 N의 염산 수용액을 500 g 첨가한 후 교반기의 온도를 50℃로 유지하며 3시간 동안 교반한 뒤, 다시 60%(v/v) 에탄올 수용액을 1000 g을 첨가하여 5시간 동안 교반하였다. 교반이 종료된 후 여과하여 여과액만 수득한 후 감압농축을 통해 용매를 제거하였고, 감압농축물을 건조 오븐에 넣고 60 ℃에서 완전히 건조하였다.
이후 감압농축된 추출물을 실시예 1의 전 과정으로 탄산마그네슘을 이용한 방법으로 여과액을 얻어 다시 감압농축 및 건조하였다.
<비교예 5. 산성 수용액 농도를 1N로 변경한 인삼 부산물의 산처리물의 제조>
인삼 잎 건조물을 이용하여 제조예 1 및 2와 실시예 1의 과정을 통해 인삼 부산물의 산처리물을 제조하되, 0.1 N의 염산 수용액 대신 1N 염산 수용액을 이용하여 최종적으로 불순물 정제과정까지 마친 건조상태의 조성물을 제조하였다.
<비교예 6. 산성 수용액 농도를 0.005N로 변경한 인삼 부산물의 산처리물의 제조>
인삼 잎 건조물을 이용하여 제조예 1 및 2와 실시예 1의 과정을 통해 인삼 부산물의 산처리물을 제조하되, 0.1 N의 염산 수용액 대신 0.005N 염산 수용액을 이용하여 최종적으로 불순물 정제과정까지 마친 건조상태의 조성물을 제조하였다.
<비교예 7. 탄산마그네슘 함량을 50g으로 변경한 인삼 부산물의 산처리물의 제조>
인삼 잎 건조물을 이용하여 제조예 1 및 2와 실시예 1의 과정을 통해 인삼 부산물의 산처리물을 제조하되, 탄산마그네슘은 100g 대신 50g을 이용하여 최종적으로 불순물 정제과정까지 마친 건조상태의 조성물을 제조하였다.
<비교예 8. 탄산마그네슘 함량을 400g으로 변경한 인삼 부산물의 산처리물의 제조>
인삼 잎 건조물을 이용하여 제조예 1 및 2와 실시예 1의 과정을 통해 인삼 부산물의 산처리물을 제조하되, 탄산마그네슘은 100g 대신 400g을 이용하여 최종적으로 불순물 정제과정까지 마친 건조상태의 조성물을 제조하였다.
<실험예 1. 진세노사이드의 종류와 함량 확인>
제조예 1, 제조예 2 및 실시예 1의 조성물 중, 잎을 이용한 각 시료를 이용하여 HPLC를 수행하였고, 제조예 1과 제조예 2, 제조예 2와 실시예 1의 잎 유래 조성물이 갖는 진세노사이드의 함량을 비교하여 도 1 및 2에 나타내었다.
도 1의 핑크색 라인은 제조예 1의 추출물, 검정색 라인은 제조예 2의 산처리물을 나타낸다. 또한 도 2의 핑크색 라인은 실시예 1 조성물, 검정색 라인은 제조예 2의 산처리물을 나타낸다.
도 1 및 2를 참고하면, 먼저, 제조예 1에서 일반 ginsenoside인 Rb1, Rb2, Rb3를 확인하였으며, 제조예 2에서는 제조예 1에서 확인한 ginsenoside-Rb1, Rb2, Rb3가 사라지고 희귀 ginsenoside인 Rg3, Rg5, Rk1이 생성된 것을 확인하였다. 제조예 3의 분석결과 희귀 ginsenoside 3가지의 함량에는 변화가 없는 것을 확인하여, 탄산마그네슘을 이용한 정제처리 진행 시 진세노사이드가 아닌 나머지 불순물만 제거하는 공정인 것으로 확인된다.
<실험예 2. 미백 활성 확인>
실험예 2-1. 멜라닌 생성 억제능 확인
세포주 멜라노마(melanoma) B16을 96-웰 플레이트의 웰당 2,500개씩 분주한 다음 10%(v/v) 소태반 혈청을 함유한 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO2 조건에서 24시간 배양하였다. 배양 후 α-멜라노사이트 자극 호르몬(최종농도 1 nM)과 제조예 1 및 2, 실시예 1~3, 비교예 1~6, 8 조성물을 10㎍/㎖로 각각 동시에 처리하고 3일간 추가로 배양한 다음 배지로 방출된 멜라닌의 양을 파장 405 nm에서의 흡광도 측정을 통하여 정량하였다. 이 때, 제조예 1 및 2, 실시예 1 조성물로는 잎 유래 조성물을 이용하였다.
또한 멜란닌 방출량을 확인하여 하기의 표에 나타난 바, 실시예 1 내지 3의 조성물이 가장 멜라닌 방출 억제 효능이 우수한 것을 확인할 수 있다.
조건 멜라닌 생성량 (㎍/㎖)
대조군(무처리군) 60.4
α-멜라노사이트 자극 호르몬 175.2
실시예 1 + α-멜라노사이트 자극 호르몬 75.4
실시예 2 (산 농도 변경) +
α-멜라노사이트 자극 호르몬		 68.5
실시예 3 (탄산마그네슘 함량 변경) +
α-멜라노사이트 자극 호르몬		 69.8
제조예 1 + α-멜라노사이트 자극 호르몬 112.5
제조예 2 + α-멜라노사이트 자극 호르몬 75.1
비교예 1 + α-멜라노사이트 자극 호르몬 126.2
비교예 2 + α-멜라노사이트 자극 호르몬 102.9
비교예 3 + α-멜라노사이트 자극 호르몬 104.2
비교예 4 + α-멜라노사이트 자극 호르몬 115.1
비교예 5 (산 농도 변경) +
α-멜라노사이트 자극 호르몬		 102.1
비교예 6 (산 농도 변경) +
α-멜라노사이트 자극 호르몬		 126.0
비교예 8 (탄산마그네슘 함량 변경) +
α-멜라노사이트 자극 호르몬		 112.1
한편, 위의 결과를 통해 탄산마그네슘을 이용한 정제 과정을 통해서 미백 효능의 큰 차이는 나타나지 않을 것으로 보여 이후의 미백 관련 실험에는 제조예 2와 비교예 2 조성물에 대한 실험은 생략하였다. 또한 비교예 4~6, 8 조성물도 미백 효능이 좋지는 않아 이후의 미백 실험에서는 적용하지 않았다.
실험예 2-2. 티로시나아제 억제 효능 확인
제조예 1, 실시예 1, 비교예 1 및 3 조성물을 농도별로 96 well plate에 1 ㎕씩 넣고, PBS(phosphate buffered saline) 용액에 기질인 티로신(tyrosine)을 1 mM의 농도로 녹인 용액을 각각의 well에 50 ㎕씩 넣고 5분간 정치하였다.
10 unit/ml의 농도로 희석시킨 티로시나아제(tyrosinase) 효소를 PBS에 0.1 unit/ml의 농도로 희석하여 각 well에 50 ㎕씩 넣어준 후 15분간 정치하였다. 이를 microplate reader를 이용하여 490 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 이에 대한 결과는 표 3에 Tyrosnase inhibitory activity의 IC50 값(half maximal inhibitory concentration)을 비교하여 나타내었다.
조건 Tyrosnase inhibitory activity IC50 (㎍/㎖)
실시예 1 15.4
제조예 1 79.2
비교예 1 81.5
비교예 3 34.2
표 3을 참고하면 실시예 1의 조성물이 Tyrosnase inhibitory activity IC50이 가장 낮아 우수한 미백 활성이 있는 것으로 확인된다.
실험예 2-3. DOPA 산화활성저해 효능 확인
제조예 1, 실시예 1, 비교예 1 및 3 조성물을 시료로 하여 미백효과를 검정하는 방법으로써, 멜라닌 합성과정의 속도결정단계를 촉매하는 타이로시나제의 DOPA 산화반응에 대한 활성저해율을 측정하여 미백효과를 판단하였다. DOPA 산화반응에 대한 활성저해효과 측정은 다음과 같이 수행하였다. 추출물 시료를 시험에 적당한 농도범위로 0.1M 인산염완충액(pH 7.0)에 희석한 것을 시료액으로 하였다. 시험관에 0.1M 인산염완충액(pH 7.0) 800uL와 시료액 100uL, 그리고 머시룸타이로시나제(1,650units/mL) 50uL를 순서대로 넣고 37℃에서 3분 동안 반응시켰다. 이 용액에 5mM DOPA 50uL를 넣은 다음, 37℃에서 1분 동안 반응시켰다. 실험 종료 후 UV-Vis spectrophotometer를 이용하여 475㎚ 에서 흡광도를 측정하였다. 상기 DOPA 산화활성저해시험을 위한 대조군은 추출물 시료 대신 0.1M 인산염완충액(pH 7.0)을 넣어 같은 방법으로 측정하였다. 하기 수학식을 이용하여 DOPA 산화활성 저해율을 계산하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 IC50 값으로 나타내었다.
Figure 112019048582450-pat00001
조건 DOPA　IC50 (㎍/㎖)
실시예 1 12.3
제조예 1 59.3
비교예 1 62.2
비교예 3 28.2
표 4에서도 실시예 1의 조성물이 DOPA 산화활성 저해에 대한 IC50이 가장 낮아 우수한 미백 활성이 있는 것으로 확인된다.
<실험예 3. 보존 안정성 확인>
화장품으로 제형화되었을 때의 각 조성물의 보존 안정성이 우수한지 확인하기 위해, 제조예 1 및 2, 실시예 1~3, 비교예 7 조성물을 10㎎/㎖의 50(v/v) 에탄올 수용액 1㎖으로 제조한 후, 이를 다시 3차 증류수 100㎖에 넣고 히알루론산 1g, 1,2-헥산디올 3g을 첨가한 후 개폐가 가능한 멸균 유리병에 넣어 보관하였다. 이 후 상대습도 80% 조건인 상태에서 각 온도별 기간별로 보존 안정성을 확인하였다. 각 상태는 ○, ×로 나타내었는데, ×는 각 측정시 침전물이 생성되어 다시 용액상태가 되지 않거나, 부패한 상태인 것을 확인할 때 표시하였다.
Figure 112019048582450-pat00002
표 5를 참고하면, 실시예 1~3의 조성물이 장기간 고온의 조건에서도 침전물이 생성되거나 액상의 변질이 잘 되지 않음을 확인할 수 있어, 화장료 조성물 내 원료로서 이용되기에 적합함을 입증한다.
<실험예 4. 세포 독성 확인>
제조예 1, 제조예 2와 실시예 1의 잎 유래 조성물을 1, 10, 100, 500, 1000㎍/㎖로 처리되어 세포 수 측정과 함께 Cell Proliferation 확인을 MTT Assay Kit (abcam, ab211091)로 확인하였는데, 실시예 1의 조성물은 각 농도별로 세포주 멜라노마(melanoma) B16 세포의 성장을 억제하지 않고 오히려 증식률이 110~150% 이상 증가하여 각 조성물이 세포 독성이 없음을 확인할 수 있었으나 제조예 1, 제조예 2의 조성물은 500, 1000㎍/㎖에서 25% 이상의 세포 사멸이 관찰되어 독성이 확인되었다. 이는 인삼의 잎에 도포된 잔류농약 등이 정제를 통해 충분히 제거되지 않아 나타나는 것으로 파악되었다.
<화장료 제조예 1. 비누 제조>
올리브오일 2 중량%, 팜 오일 5 중량%, 소르비톨 20 중량%, 카르보머 0.2 중량%, 수소 첨가 피마자 오일 0.5 중량%, 디프로필렌 글리콜 10 중량%, 페녹시에탄올 0.15 중량%, 트리소듐 에틸렌 디아민 테트라 아세트산 0.02 중량%, 물 69.13 중량%, 실시예 1의 인삼 잎 추출물의 산처리물 정제 조성물 1 중량%, 트리에탄올 아민 0.2 중량%를 포함하는 에멀전을 제조하고, 상기 에멀전 10g과 시중에서 판매하는 천연비누 베이스 90g을 혼합하여 비누를 제조하였다.
<화장료 제조예 2. 스킨 제조>
실시예 1의 인삼 잎 추출물의 산처리물 정제 조성물 1 중량%, 프로필렌글리콜 5.2 중량%, 올레일알코올 1.5 중량%, 에탄올 3.2 중량%, 폴리솔베이트 20 3.2 중량%, 벤조페논-9 2.0 중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0 중량%, 글리세린 3.5 중량% 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 스킨을 제조하였다.
<화장료 제조예 3. 로션 제조>
실시예 1의 인삼 잎 추출물의 산처리물 정제 조성물 1 중량%, 세토스테아릴 알코올 1.0 중량%, 글리세릴모노스테아레이트 0.8 중량%, 소르비탄모노스테아레이트 0.3 중량%, 폴리솔베이트 60 1.0 중량%, 미네랄오일 5.0 중량%, 사이크로메치콘 3.0 중량%, 디메치콘 0.5 중량%, 알란토인 0.1 중량%, 글리세린 5.0 중량%, 알코올 2 중량%, 프로필렌글리콜 3.0 중량%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 로션을 제조하였다.
<화장료 제조예 4. 에센스 제조>
실시예 1의 인삼 잎 추출물의 산처리물 정제 조성물 1 중량%, 프로필렌글리콜 4.0 중량%, 글리세린 3.0 중량%, 알란토인 0.5 중량%, EDTA-2Na 0.01 중량%, 에탄올 5.0 중량%, 트리에탄올아민 1.5 중량%, 스쿠알란 2.0 중량%, 밀랍 2.5 중량%, 폴리솔베이트60 중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0 중량%, 솔비탄세스퀴올레이트 2.5 중량%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 에센스를 제조하였다.
<화장료 제조예 5. 크림 제조>
실시예 1의 인삼 잎 추출물의 산처리물 정제 조성물 1 중량%, 폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트 0.7 중량%, 솔비탄세스퀴올레이트 0.5 중량%, 세틸알코올 0.6 중량%, 스테아린산 0.75 중량%, 글리세릴모노스테아레이트 0.6 중량%, 유동파라핀 15.0 중량%, 카르복시비닐폴리머 10.0 중량%, 트리에탄올아민 0.2 중량%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 크림을 제조하였다.

Claims (8)

  1. (제1단계) 인삼 잎 또는 줄기 100 중량부를 50~90%(v/v) 에탄올 수용액 500~3000 중량부로 추출하여 인삼 부산물 추출물을 제조하는 단계;
    (제2단계) 상기 인삼 부산물 추출물 100 중량부에 0.01 ~ 0.5 N 산성 수용액을 300~1000 중량부 첨가하여 침전물 상태의 산처리물을 제조하는 단계; 및,
    (제3단계) 상기 산처리물 100 중량부에 50~90%(v/v) 에탄올 수용액 500~1500 중량부와 탄산마그네슘 100~300 중량부를 첨가 후 교반한 뒤 여과액을 얻는 단계;
    를 포함하여, 인삼 부산물 추출물의 산처리물을 함유하는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 제1단계에서, 인삼 잎 또는 줄기를 50~90%(v/v) 에탄올 수용액에 침지한 후, 1 ~ 10 시간 동안 교반하고 여과하여 여과액만 수득한 후 감압 농축하여 인삼 부산물 추출물을 얻는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 제2단계에서, 제1단계에서 얻은 인삼 부산물 추출물에 산성 수용액을 첨가하여 30 ~ 100 ℃에서 1 ~ 5 시간 교반하고 여과하여 침전물을 얻고, 상기 침전물을 50~90%(v/v) 에탄올 수용액에 용해한 후 여과지로 여과한 여과액을 감압 농축하여 인삼 부산물 산처리물을 얻는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 제2단계의 산성 수용액은 염산 (hydrochloric acid), 초산(acertic acid), 구연산(citric acid), 아스코르브산(ascorbic acid) 및 숙신산(succinic acid)으로 이루어진 군 중에서 1종 이상 선택되는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 제3단계에서, 상기 산처리물을 50~90%(v/v) 에탄올 수용액에 첨가하여 용해한 후, 탄산마그네슘(MgCO3)을 투입하여 25~60℃에서 10~60분 동안 교반하고 1~10℃에 5~15시간 정치 후 여과하여 여과액을 얻는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물의 제조방법.
  6. 삭제
  7. 제1항의 방법으로 제조된 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 조성물은 티로시나아제의 저해 활성, 멜라닌 생성 억제 기능 또는 DOPA(3,4-dihydroxyphenylalanine) 활성 억제 기능이 있는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090089815A (ko) * 2008-02-19 2009-08-24 주식회사 유니젠 파낙스속 식물의 잎 추출물 및 파낙스속 식물의 잎 추출물 가공물의 혼합물을 함유하는 운동능력, 피로회복 및 항산화활성 증진용 조성물
KR101133739B1 (ko) 2009-04-07 2012-04-09 건국대학교 산학협력단 고 함량의 진세노이드 Ｒｇ3를 함유한 산가수분해 백삼 추출물의 제조방법
KR101416671B1 (ko) 2011-12-26 2014-07-11 고성권 초음파 처리를 이용한 인삼 프로사포게닌 고농도 함유 인삼 잎 및 줄기 제제 및 이의 제조방법
KR101511308B1 (ko) 2013-05-15 2015-04-14 재단법인 진안홍삼연구소 홍삼박 또는 여정실을 유효성분으로 함유하는 미백 조성물
KR101711002B1 (ko) 2016-11-21 2017-03-02 주식회사 한국화장품제조 인삼잎추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101921832B1 (ko) 2017-09-19 2018-11-23 주식회사 한국인삼공사 증삼액을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101117072B1 (ko) * 2009-05-19 2012-02-22 한국원자력연구원 방사선 조사를 이용하여 진세노사이드 함량이 증가된 가공삼의 제조방법

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