KR102348592B1 - 패시플로라 종자들로부터 얻은 지질 추출물 - Google Patents

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소피 르끌레르-비앙페
스떼파니 브르디프
세바스띠에 드브로끄
세바스띠앙 가르니엘
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라보라토이레즈 익스펜사이언스
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Abstract

본 발명은 패시플로라 종자들, 패시플로라 인카르나타 (Passiflora incarnata) 및 패시플로라 에둘리스 (Passiflora edulis), 바람직하게는 패시플로 라 에둘리스로부터 얻은 지질 추출물, 그리고 상기 패시플로라 인카르나타 및 패시 플로라 에둘리스로부터 얻은 종자들의 지질 추출물 및 적합한 부형제를 포함하는 미용적, 피부과학적 또는 영양제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 다른 주제는 패시플로라 종자들로부터 지질 추출물을 추출하는 방법 및 상기 방법을 사용하여 획득될 수 있는 추출물이다. 본 발명은 또한 피부, 점막 또는 피부 부속기관들의 질병들 또는 병리들의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 상기 조성물 또는 상기 추출물에 관한 것이다. 마지막으로 본 발명은 상기 조성물 또는 상기 추출물의 투여를 수반하는 그의 병태 또는 외양을 개선하는 측면에서 피부, 피부 부속기관들 또는 점막의 미용적 관리 방법에 관한 것이다.

Description

패시플로라 종자들로부터 얻은 지질 추출물 {Lipid extract of Passion fruit seeds}
본 발명은 패시플로라 종자들 (Passiflora seeds, Passion fruit seeds), 패시플로라 인카르나타 (Passiflora incarnata) 및 패시플로라 에둘리스 (Passiflora edulis), 바람직하게는 패시플로 라 에둘리스로부터 얻은 지질 추출물, 그리고 상기 패시플로라 인카르나타 및 패시 플로라 에둘리스로부터 얻은 종자들의 지질 추출물 및 적합한 부형제를 포함하는 미용적, 피부과학적 또는 영양제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 다른 주제는 패시플로라 종자들로부터 지질 추출물을 추출하는 방법 및 상기 방법을 사용하여 획득될 수 있는 추출물이다. 본 발명은 또한 피부, 점막 또는 피부 부속기관들의 질병들 또는 병리들의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 상기 조성물 또는 상기 추출물에 관한 것이다. 마지막으로 본 발명은 상기 조성물 또는 상기 추출물의 투여를 수반하는 그의 병태 또는 외양을 개선하는 측면에서 피부, 피부 부속기관들 또는 점막의 미용적 관리 방법에 관한 것이다.
패시플로라
패시플로라 과는 약 500개의 종들로 구성된다. 본 종은 종종 따뜻한 온대 및 열대 지방들, 상세하게는 아메리카 대륙 전체를 통하여 분포하지만, 아시아, 호주 및 열대 아프리카에서는 거의 발견되지 않는다.
식물학
식물들은 관목들 또는 덩굴들의 형태로 존재한다. 잎들은 호생하는 형태이고, 때로 단순한 엽상이거나 장상이다. 꽃들은 반경이 9 cm까지 성장할 수 있고, 양성 또는 단성이며, 규칙성을 띤다. 그들은 흰색과 보라색이 섞여있고, 그리스도의 가시관을 형상화한 잔섬유들과 함께 실모양의 꽃잎 형태 부속기관들을 가진다. 열매는 길이가 4 내지 5 cm이고 계란형이며 색상은 종종 노란색 내지 오렌지색 범위이다.
가장 널리 분포하고 있는 종들은 상세하게 P. 인카르나타 및 P. 에둘리스이다.
식물화학적 관점들
P. 인카르나타 : 주요한 성분들은 잎들 내에 많은 양으로 존재하는 플라보노이드 패밀리로 대표된다. 그들은 높은 이소비텍신 (isovitexin) 함량을 가진다. 그들은 단순한 인돌 알칼로이드들 (하메인, 하민 등), 라피노스, 슈크로스, 과당 및 포도당과 같은 당들, 뿐만 아니라 본 식물의 속성이 되는 진정 및 항-경련 효과들을 부여하는 분자로서 기술된 정유들 및 만톨도 역시 포함한다.
P. 에둘리스 : 건조된 잎들의 메탄올 추출물로부터 특이적 화합물이 확인된 바 있었다: 패시플로린 - 사이클로프로판 트리테르펜 글리코사이드 (E. Bombardelli et al., 1975). 이것은 P. 인카르나타에서는 발견되지 않는 플라보노이드인 이소오리엔틴, 그리고 P. 인카르나타와 동일한 미량들의 정유 및 알칼로이드들을 포함한다. 열매의 과육은 플라보노이드들, 스카프토사이드 (schaftoside), 이소스카프토사이드, 이소오리엔틴, 오리엔틴, 이소비텍신 및 루테올린의 유도체들을 (M.L. Zeraik, J.H. Yariwake - 2010), 및 아스코브산 (약 60　mg/100　g)을 포함한다. 과육은 글리코실화 시안생성 유도체들: 프루나신 (prunasin), 삼부니그린 (sambunigrin) 및 아미그달린 (amygdalin), 그리고 2가지 추가로 최근 확인된 만델오니트릴-β-루티노사이드들 (mandelonitrile-β-rutinoside)도 역시 포함한다 (D. Chassagne and J. Crouzet, 1998; D.S. Seigler, 2002).
독성학
시안생성 성분들이 주로 서로 다른 패시플로라 변종들의 지상 부분들에 포함된다.
종자 특징
종자들은 P. 에둘리스 열매의 6 내지 12% 범위를 차지하고, 다음을 포함한다:
□ 폴리페놀들 , 피시아태놀 (라스베라트롤과 유사한 구조) 및 그의 이량체인 쉬르푸신 B (S. Sano; K. Sugiyama; T. Ito, 2011)를 포함하고, 혈관이완 및 항산화 효과들을 가지는 물질들.
□ 오일 , 파이토스테롤들 (캄페스테롤, 스티그마스테롤, 시토스테롤, 아베나스테롤을 포함하는 0.2%)을 포함하는 용매에 의해 18%, 60% 내지 73% 리놀레산 (오메가 6), 14% 내지 20% 올레산 및 465　ppm 토코페롤들 (G. Piobom, N. Barou et al., 2006; R. de V.V. Lopes et al.).
□ 당들 및 단백질들 .
선행기술
식품 용도
열매는 선사시대 이래로 먹어왔던 것으로 보인다. 16세기 페루에서 화려한 패시플로라 꽃들은 이미 치료 요법로서 고려되었으며, 수많은 패시플로라 종들은 보편적인 치료적 적용들을 위해 수많은 나라들에서 아직도 사용되고 있다.
의학적 용도
패시플로라 (종종 지상 부분들 및 때로 열매들)는 종종 항불안제, 진정제, 이뇨제 및 진통제로서 전세계적으로 사용된다 (모두 "패시플로라: 리뷰 업데이트. K. Dhawan, S. Dhawan, A. Sharma, 2004"에서의 설명들). 말톨 및 그의 일정 유도체들은 진정 효과를 부여하는 것으로 언급된다.
이러한 작용은 P. 인카르나타의 경우 더욱 일정하고 더욱 유의한 것으로 보고되어 있다. P. 인카르나타의 추출물들은 모르핀 의존성을 역전시킬 수 있는 것으로 언급된다. 항-염증 효과들도 역시 P. 에둘리스 잎들의 추출물들의 경우에서 입증되었다.
서로 다른 패밀리들의 폴리페놀들은 P. 에둘리스의 지상 부분들의 항산화 및 단백질들의 항-무효소당화 성질들에 주요한 역할을 담당한다 (M. Rudnicki et al., 2007).
P. 에둘리스 열매 껍질들로부터 얻은 메탄올 추출물의 항-저혈압 효과 및 섬유가 풍부한 탈지화된 종자들의 추출물의 콜레스테롤-감소 효과도 역시 입증되었다. 기질 금속프로테아제들 (MMP2 및 MMP9)의 저해에 의한 열매 달임 (decoction)의 항-종양 효과는 종양 침습, 전이들 및 혈관생성에 관여하였다.
피부- 미용적 용도
브라질에서 P. 포에티다 (P. foetida)의 잎들이 염증성 피부 질환들을 치료하는 데 사용된다. 모리티우스 및 로드리게스 (Mauritius and Rodrigues)에서 P. 수베로사 (P. suberosa) 잎들의 달임들이 피부 질환들을 치료하도록 수조로서 사용된다.
Georges PIOMBO et al, OCL vol. 13 no. 2-3 March-June 2006; Martina RUDNICKI et al., Food Chemistry 100 (2007) 719-724; David CHASSAGNE and Jean CROUZET, Phytochemistry, vol. 49, no. 3 pp 757-759, 1998; Ezio BOMBARDELLI et al. Phytochemistry, 1975, Vol. 14, pp 2661-2665; Shoko SANO et al. Agric. Food Chem., 2011, 59, 6209-6213; Kamaldeep DHAWAN et al. Journal of Ethnopharmacology 94 (2004) 1-23; Zerark et al. Microchemical Journal 96(2010), 86-91; R. de V. Vieira Lopes et al. Eur. J. Lipid. Sci. Technol. 2010, 112, 1253-1262; Seigler et al. Phytochemistry 60 (2012), 873-882.
본 출원인은 패시플로라 인카르나타 및/또는 에둘리스의 종자들의 지질 추출물들이 지금까지 전혀 기술된 바 없었던 미용적 및 피부과학적 성질들을 나타내는 점을 발견하였다. 상세하게, 이러한 패시플로라 지질 추출물들이 이와 같이 그들의 특이적 성질들을 위해 사용된 것은 이번이 처음이다.
본 발명의 주제는 패시플로라 종자들의 지질 추출물을 선택적으로 적합한 부형제와 조합으로 포함하는 조성물이다. 조성물은 유리하게 미용적, 약제학적, 피부과학적, 영양제학적이다. 상기 조성물은 바람직하게 경구적 또는 외부 국소적 경로를 통한 투여를 위해 제형화된다.
본 발명의 주제는 패시플로라 종자들, 패시플로라 인카르나타 (Passiflora incarnata) 및/또는 패시플로라 에둘리스 (Passiflora edulis), 바람직하게 P. 에 둘리스의 지질 추출물로서, 상기 지질 추출물은 전체 추출물 무게와 대비하여 무게로 3 내지 100%, 유리하게는 무게로 4% 내지 100%의 비비누화물을 포함하는 그의 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 종자들의 오일인 것을 특징으로 하는, 추출물에 관한 것이다.
비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 종자들의 오일은 고유한 오일의 지방산들을 포함하고, 농축된 패시플로라 오일의 지방산 분포는 농축 이전의 패시플로 라 오일의 분포와 일치한다. 유사하게, 비비누화 화합물들 및 그들 각각의 분포는 시작 오일 및 농축된 오일의 분포와 일치한다. 한편으로, 오일은 그의 비비누화 분획으로 농축되고, 상세하게 이것은 전체 오일 무게와 대비한 무게로 3% 이상, 유리하게는 무게로 4% 이상의 비비누화물, 더 유리하게는 무게로 4.5% 이상의 비비누화물을 포함한다.
비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 종자들의 오일은 유리하게 12개 내지 22개, 더욱 유리하게는 14개 내지 20개의 탄소 원자들을 가지는 지방산들을 포함한다. 이들 지방산들은 단일-포화 또는 다중-포화되도록 포화될 수 있다.
패시플로라 에둘리스의 미가공 오일의 특징들의 한 가지 예는 다음의 표 1에 주어진다. 표 1은 미가공 패시플로라 오일의 특징들의 예를 나타낸다.
Figure 112016033119659-pct00001
비비누화 분획은 유리하게 토코페롤들, 토코트리에놀들 및 스테롤로 주로 구성된다.
비비누화 분획에서 토코페롤 함량은 유리하게 비비누화 분획의 전체 무게와 대비하여 0.1 및 3 무게% 토코페롤의 범위, 더욱 유리하게 0.5 및 3 무게% 토코페롤의 범위, 보다 더 유리하게 1 및 3 무게% 토코페롤의 범위에서 변화한다. 토코페롤들 중에서, 유리하게는 α-토코페롤, β-토코페롤, δ-토코페롤, 및 γ-토코페롤이 확인된다. 이들 토코페롤들은 유리하게 전체 토코페롤 무게의 60 내지 100 무게%, 더욱 유리하게는 80 내지 100 무게%를 차지한다.
비비누화 분획에서, 토코트리에놀 함량은 유리하게 비비누화 분획의 전체 무게와 대비하여 5 및 25 무게% 토코트리에놀의 범위, 더욱 유리하게 8 및 25 무게% 토코트리에놀의 범위, 보다 더 유리하게 10 및 20 무게% 토코트리에놀의 범위에서 변화한다. 토코트리에놀들 중에서, 유리하게는 α-토코트리에놀, β-토코트리에놀, δ-토코트리에놀, 및 γ-토코트리에놀이 확인된다. 이들 토코트리에놀들은 유리하게 전체 토코트리에놀 무게의 60 내지 100 무게%, 더욱 유리하게는 80 내지 100 무게%를 형성한다.
비비누화 분획에서, 스테롤 함량은 유리하게 비비누화 분획의 전체 무게와 대비하여 30 및 60 무게% 스테롤의 범위, 더욱 유리하게 35 및 55 무게% 스테롤의 범위, 보다 더 유리하게 40 및 50 무게% 스테롤의 범위에서 변화한다. 스테롤들 중에서, 유리하게는 캄페스테롤, 스티그마스테롤, β-시토스테롤 및 △7-스티그마스테롤이 확인된다. 이들 스테롤들은 유리하게 비비누화 분획의 전체 무게의 60 내지 100 무게%, 더욱 유리하게는 70 내지 90 무게%를 형성한다.
비비누화 분획에서, 스쿠알렌 함량은 유리하게 비비누화 분획의 전체 무게와 대비하여 10 및 35 무게% 스쿠알렌의 범위, 더욱 유리하게 15 및 30 무게% 스쿠알렌의 범위, 보다 더 유리하게 15 및 25 무게% 스쿠알렌의 범위에서 변화한다.
따라서 비비누화 분획은 유리하게 토코페롤들, 토코트리에놀들, 스테롤들 및 스쿠알렌들을, 바람직하게 이전에 특정된 함량으로 포함한다. 비비누화 분획은 다른 미확인된 비비누화물들도 역시 포함할 수 있다. 유리하게 미확인된 비비누화물들의 함량은 비비누화 분획의 전체 무게와 대비하여 30 무게% 이하, 더욱 유리하게는 0 내지 25 무게%의 범위이다.
본 발명의 첫 번째 변형물에 따르면, 지질 추출물은 그의 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 종자들의 오일이다. 이것은 유리하게 전체 오일 무게와 대비하여 3 내지 15 무게%의 비비누화물들을 포함한다. 이것은 유리하게 다음의 명세들을 가진다. 표 2는 농축된 패시플로라 오일의 특징들을 나타낸다.
Figure 112016033119659-pct00002
비비누화 분획은 이전에 기술된 바와 같다.
본 발명의 두 번째 변형물에 따르면, 지질 추출물은 비비누화 분획이다. 이러한 비비누화 분획은 이전에 기술된 바와 같다.
지질 추출물은 유리하게 다음의 연속적인 단계들:
a) 미가공 또는 정련된 패시플로라 오일의 분자적 증류;
b) 선택적으로, 비비누화물의 추출;
c) 단계 a) 이후에 획득된 비비누화물로 농축된 오일 또는 단계 b) 이후에 획득된 비비누화물의 회수;
를 포함하는 방법을 사용하여 획득된다.
비비누화물이 풍부한 오일을 회수하는 것이 바람직한 경우라면, 단계 b)는 수행되지 않는다.
비비누화 분획을 회수하는 것이 바람직한 경우라면, 단계 b)가 수행된다. 이러한 단계 b)는 유리하게 다음의 연속적인 단계들:
i. 단계 a) 이후에 획득된 그의 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 오일의 비누화;
ii. 이어서 적합한 용매를 사용하는 비비누화물의 추출;
을 포함한다.
본 방법은 계속하여 더 기술된다.
본 발명의 다른 주제는 본 발명의 추출물을 제조하는 방법으로서, 다음의 연속적인 단계들:
a) 미가공 또는 정련된 패시플로라 오일의 분자적 증류;
b) 선택적으로, 비비누화물의 추출;
c) 단계 a) 이후에 획득된 비비누화물로 농축된 오일 또는 단계 b) 이후에 획득된 비비누화물의 회수;
를 포함하는, 방법이다.
패시플로라 종자들로부터 시작하여, 방법은 당업자라면 숙지하고 있는 기술학들, 예로 프레싱, 용매 추출, 초임계 압력 하 조건을 사용하여, 보다 상세하게는 프레싱 또는 초임계 압력 하 조건에 의한, 바람직하게는 프레싱에 의한 오일의 첫 번째 추출 단계를 포함한다. 오일은 당업자들이라면 숙지하고 있는 기술학들을 사용하여 정련 또는 미정련될 수 있고 바람직하게는 미-정련된다. 이러한 오일은 다음으로 그의 비비누화 분획으로 농축된 오일 (또는 농축물)을 수득하도록 분자적 증류에 착수된다.
오일은 여러 가지 방법들을 사용하여 추출될 수 있다:
- 기계적인 프레스기 상의 콜드 프레싱, 이중-나사 압출기 상의 프레싱;
- 유기 용매들 (지방족 알칸들, 알코올들, 염소화 용매들, 불소화 용매들)을 사용하는 화학적 추출;
- 이산화탄소를 예를 들면 단독으로 및/또는 공동-용매들과 함께 사용하는 초임계 배지로의 추출.
미가공 패시플로라 오일의 추출을 위해, 우선적으로 기계적인 프레스기 상의 콜드 프레싱이 주어진다.
미가공 패시플로라 오일은 물리적 정련 (물로 탈검화, 고온에 의한 탈산성화, 탈취화) 및 화학적 정련 (물로 탈검화, 인지질들을 제거하는 산 처리, 염기성 용액을 사용한 자유 지방산들의 중성화, 탈색소침착, 겨울화 (winterization) 및 탈취화)과 같은 당업자들이 숙지하고 있는 방법들을 사용하여 정련될 수 있다.
이전에 획득된 미가공 패시플로라의 미가공 오일이 유리하게 분자적 증류 방법에 의해 그의 비비누화 분획으로 농축된다.
비비누화물은 알칼리성 염의 확장된 작용 이후에 물-불용성으로 남는 지방의 분획이고 유기 용매로 추출될 수 있다. 5가지 주요한 그룹들의 물질들이 식물성 오일들의 대부분의 비비누화물에 포함된다: 포화 또는 불포화 탄화수소들, 지방족 또는 테르펜 알코올들, 스테롤들, 토코페롤들, 토코트리에놀들, 카로티노이드 색소들 및 크산토필들.
이러한 분자적 증류 단계는 바람직하게 원심분리 유형의 분자적 증류 유닛들 및 스크레이프 필름 유형의 분자적 장치들 중에서 선택되는 장치를 사용하여 시행된다.
원심분리 유형의 분자적 증류 유닛들은 당업자들에게 알려져 있다. 예를 들면 특허출원 제 EP 493 144호가 이러한 유형의 분자적 증류 유닛을 기술하고 있다. 일반적으로, 증류된 산물은 높은 속도로 회전하는 원추형 로터의 가열된 표면 (고온 표면) 위에 박층으로 산포된다. 증류 체임버는 진공 하에 놓아둔다. 이들 조건들 하에서, 비비누화물들과 같은 오일 성분들의 증발 및 비-비등이 고온 표면 위에서 일어나고, 장점은 오일 및 그의 성분들 상세하게는 비비누화물들 (부서지기 쉬운 것으로 고려되는 이들 산물들)이 증발에 의해 변질되지 않는 것이다.
스크레이프된 필름 유형의 분자적 증류 유닛들도 역시 당업자들에게 알려져 있다. 일반적으로, 증발 표면 (고온 표면) 위에서 그들은 증류되는 산물들의 계속적인 산포를 허용하는 회전하는 스크레이퍼가 장착된 증류 체임버를 포함한다. 산물 증기들은 증류 체임버의 중앙에 놓인 식힌 핑거에 의해 농축된다. 말단 피드 및 진공 시스템들은 원심분리 증류 유닛의 시스템들 (피드 펌프들, 진공 오일 분산 날개 펌프들 등)과 매우 밀접하다. 유리 플라스크들에서 잔여물들 및 증류물들의 회수는 중력 이동에 의해 획득된다.
분획화 단계 이후에 비비누화물들이 풍부한 증류된 분획은 유리하게 시작 오일의 3 내지 15 무게%를 나타내고, 트리글리세라이드들이 풍부한 증류된 분획은 유리하게 시작 오일의 85 내지 97 무게%를 나타낸다.
추가적으로, 본 방법이 비비누화물의 화합물들의 화학적 변화 또는 변질을 전혀 유도하지 않고, 높게 미포화된 분획들이 보존되는 점은 확인되어 왔다. 그 결과, 농축된 패시플로라 오일의 지방산 분포는 농축 이전의 패시플로라 오일의 분포와 일치한다.
이러한 분자적 증류 단계 이후에, 획득된 산물은 선택적으로 당업자들이 숙지하고 있는 방법들을 사용하여 탈취되고/거나 탈색될 수 있다.
이에 따라 획득된 그의 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 오일은 상기에 기술된 특징들을 가진다.
비비누화물로 농축강화된 오일을 회수하는 것이 바람직한 경우라면, 단계 b)는 수행되지 않는다.
비비누화 분획을 회수하는 것이 바람직한 경우라면, 단계 b)가 수행된다. 이러한 단계 b)는 유리하게 다음의 연속적인 단계들:
i. 단계 a) 이후에 획득된 그의 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 오일의 비누화;
ii. 이어서 적합한 용매를 사용하는 비비누화물의 추출;
을 포함한다.
패시플로라 오일의 비비누화물은 당업자들이라면 숙지하고 있는 방법들을 사용하여 획득될 수 있다. 예를 들면 이것은 그의 비비누화 분획으로 농축된 패시플 로라 오일를 비누화하고, 다음으로 이러한 비비누화물을 적합한 용매를 사용하여 추출하는 단계에 의해 획득될 수 있다. 이러한 추출물은 다음으로 비누들의 완벽한 제거 시까지 세척되며, 용매는 증발시킨다. 마지막으로 비비누화물은 유리하게 물 증기로 탈취화 및 모든 미량들의 용매를 제거하도록 질소 박피화에 착수된다.
이에 따라 획득된 패시플로라 오일의 비비누화물은 유리하게 상기에 기술된 특징들을 가진다.
본 발명에서, 패시플로라 종자들의 지질 추출물은 그의 비비누화 분획으로 농축된 오일, 비비누화 분획, 이전에 주어진 명세들을 가지는 비비누화 분획으로 형성된 그룹으로부터 선택되는 자체이다.
본 발명의 다른 주제는 활성 성분으로서 본 발명에 따른 패시플로라 종자들의 지질 추출물 및 적합한 부형제를 포함하는 조성물이다.
조성물은 유리하게 전체 조성물 무게와 대비하여 0.01 내지 20 무게%의 상기 지질 추출물을 포함한다.
추출물은 유리하게 활성 제제로서 하나 이상의 적합한 부형제들을 포함할 수 있는 미용적, 피부과학적 또는 약제학적 조성물과 같은 조성물에 사용된다. 조성물은 추가적으로 적어도 하나의 다른 활성 화합물을 패시플로라의 지질 추출물에 추가하여 포함할 수 있다. 이러한 다른 화합물은 상기에 설명된 모든 화합물들 및 그들의 기능적 동등물들 중에서 이로부터 선택될 수 있다.
이러한 다른 화합물은 상세하게 연화제들, 습윤화제들, 케라틴 합성 활성인자들, 케라틴 조절인자들, 각질용해제들, 피부 장벽 재생 제제들 (피부 지질 합성의 활성인자들), PPAR 작동제들 (퍼옥시좀 증식인자 활성화된 수용체), RXR 또는 LXR 작동제들, 피지 조절인자들, 항-자극제들, 진정제들, 항-염증제들, 항산화제들 및 항-노화제들, 탈색소침착 또는 저색소/탈색소침착 제제들, 착색제들, 지질용해제들 또는 지질생성 저해제들, 또는 항-셀룰라이트 또는 슬림화 제제들, 무기 또는 유기 태양 필터들 및 햇볕 차단제들, 항진균 화합물들, 보존제들, 항-세균제들, 프리- 및 프로바이오틱스, 항생제들, 면역-조절인자들와 같은 통상적으로 피부과학 또는 화장품들에 사용되는 활성 제제들 중에서 이로부터 선택될 수 있다.
보다 상세하게, 조합으로 사용될 수 있는 피부 장벽의 치유 및/또는 재생 제제들은 유리하게 판테놀 (비타민 B5), 아라비노갈락탄, 산화아연, 세라마이드들, 콜레스테롤, 스쿠알렌 및 인지질들이다.
조합으로 사용될 수 있는 피지 조절인자들은 유리하게 5-알파-환원효소 저해제들로 형성되는 그룹으로부터 선택된다. 아연 (및 그의 글루코네이트 및 살리실레이트 염들 및 파이로글루탐산과 같은 아연 유도체들) 및 스피로노락톤은 피지 억제성 작용도 역시 가진다. 리놀레산과 같은 다른 피지 조절인자 또는 피지 품질에 작용하는 지질 기원도 역시 흥미롭다.
항-염증 및/또는 항-자극 및/또는 진정 제제는 아라비노갈락탄일 수 있다.
조합으로 사용될 수 있는 햇볕 보호작용의 활성 성분들은 유리하게 그들의 선택 및 농도를 원하는 수준의 보호작용의 함수로서 적용시킬 수 있는 당업자들이라면 숙지하고 있는 무기 및/또는 유기 차단제들 또는 필터들과 같은 UVA 및/또는 UVB 태양광 필터들 및 햇볕 차단제들이다.
조합으로 사용될 수 있는 보존제들은 예를 들면 일반적으로 화장품들에 사용되는 보존제들인, 카프릴 유도체들 예로 카프리로일 글리신 및 글리세릴 카프리레이트, 헥산디올, 소듐 레불리네이트, 그리고 아연 및 구리의 유도체들 (글루코네이트 및 PCA)와 같은 항세균 작용을 가진 분자들 (유사-보존제들)이다.
본 발명의 추출물과 연관하여 추천되는 활성 성분들 중에서 식물 추출물들이 언급될 수 있고, 상세하게는 다음과 같다:
- 콩 오일, 평지씨 오일, 아보카도 오일 (국제특허출원 제 WO 2004/012496호, 제 WO 2004/012752호, 제 WO 2004/016106호, 제 WO 2007/057439호) 및/또는 루핀 오일과 같은 식물성 오일들, 유리하게는 단맛의 흰색 루핀 오일 (국제특허출원 제 WO 98/47479호), 또는 이들 오일들의 혼합물;
- 식물성 또는 동물성 오일 상세하게는 해바라기 오일의 올레오 증류물 또는 농축물들, 보다 상세하게는 엑스팬사이언스 연구소 (Expanscience Laboratory)에 의해 시판되는 비비누화물들 (Soline® - 국제특허출원 제 WO 2001/21150호)이 풍부한 해바라기 오일과 같은 리놀레산 해바라기의 농축물들, 습윤화 및/또는 연화, 치유화 및/또는 피부-장벽 상의 재생 작용, 항-염증 및/또는 항-자극 및/또는 진정 작용에 두드러지게 사용되는 아보카도, 평지씨, 옥수수 오일 유형의 비비누화물들이 풍부한 오일들;
- 국제특허출원 제 WO 01/21605호에 기술된 방법에 의해 획득될 수 있는 식물들 또는 식물성 오일의 비-비누화물들, 유리하게는 아보카도 퓨란들 (아보카도퓨란®), 아보카도 및/또는 콩의 비-비누화물들, 보다 상세하게는 아보카도 퓨란 비비누화물들 및 콩 비비누화물들의 혼합물, 유리하게는 약 1 : 3 내지 2 : 3의 개별적 비율로의 혼합물 (피아스크레딘® (Piascledine®)과 같음), 콩의 비비누화물들 (국제특허출원 제 WO 01/51596호에 기술된 방법을 사용하여 획득된 바와 같음), 스테롤 비비누화물들 (전형적으로 전체 비비누화물들 무게와 대비하여 20 및 95 무게%, 바람직하게는 45 내지 65 무게% 범위의 스테롤들, 메틸스테롤들 및 트리테르펜 알코올들의 함량을 가지는 비비누화물들), 파이토스테롤들, 스테롤 에스테르들 그리고 상세하게 치유화 및/또는 피부-장벽 상의 재생 작용, 그리고 항-노화 및 항-염증 작용을 위해 사용되는 비타민 유도체들;
- 식물 아미노산들, 상세하게는 아보카도의 펩타이드들 또는 복합체들 (국제특허출원 제 WO 2005/105123에 기술된 것들과 같음), 루핀 펩타이드들 (국제특허출원 제 WO 2005/102259호에 기술된 것들과 같음), 퀴노아 펩타이드들 (국제특허출원 제 WO 2008/080974호에 기술된 것들과 같음), 마카 펩타이드들 (국제특허출원 제 WO 2004/112742호에 기술된 것들과 같음), 발효되거나 미-발효된 콩 펩타이드들, 쌀 펩타이드들 (국제특허출원 제 WO 2008/009709호에 기술된 것들과 같음), 상세하게 그들은 습윤화 및/또는 연화 작용 (아보카도), 각질-조절 작용 (루핀, 퀴노아), 치유화 및/또는 피부 장벽 상의 재생 작용 (마카, 퀴노아, 콩), 항-염증 및/또는 항-자극 및/또는 진정 작용 (루핀, 퀴노아), 항산화 (아보카도), 항-노화 (루핀, 마카), 또는 색소침착 (쌀) 활성에 유용함, 스키산드라 (Schisandra) 펩타이드들 (프랑스 특허출원 제 0955344호에 기술된 것들과 같음), 아카시아 마크로스타키아 (Acacia macrostachya) 종자들의 추출물 (국제특허출원 제 2011/064402호에 기술된 추출물과 같음), 비그나 웅귀쿨라타 (Vigna unguiculata) 종자들의 추출물 (국제특허출원 제 2011/064401호에 기술된 추출물과 같음), 패시플로라 종자들의 펩타이드 및 오시드 (osidic) 추출물들 (프랑스 특허 출원 제 FR 1262234호에 기술된 바와 같음);
- 상세하게 그들의 각질-조절, 피부 장벽 치유화 및/또는 재생 성질, 항-염증 및/또는 항-자극 및/또는 진정 작용에 유용한, 식물 당들 상세하게는 아보카도 당들 (국제특허출원 제 WO 2005/115421호에 기술된 것들과 같음);
- 부틸 아보카데이트 (5 알파 아보쿠타®), 5-알파 환원효소 저해제 (국제특허출원 제 WO 01/52837호 및 제 WO 02/06205호) 및 전형적으로 여드름 및 비듬에서 증가되는 피지 분비의 조절인자;
- 폴리페놀들이 풍부한 추출물들, 보다 상세하게는 아보카도 열매의 추출물들 (프랑스 특허출원 제 FR 1 061 055호에 기술된 것들과 같음), 마카 잎들의 추출물들 (프랑스 특허출원 제 FR 1 061 047호에 기술된 것들과 같음), 및 자이난드롭 시스 자이난드라 (Gynandropsis gynandra)의 지상 부분들의 추출물들 (프랑스 특허 제 FR 1 061 051호에 기술된 것들과 같음);
- 상세하게 치유를 촉진하는 데 유용한 루페올 (프랑스 특허출원 제 FR 2 822 821호, 제 FR 2 857 596호);
- 상세하게 그의 습윤화 성질들이 인정되는 쿠푸아쿠 버터.
본 발명의 추출물과 조합으로 추천되는 활성 성분들 중에서, 옥사졸린들 상세하게는 2-운데실-4-하이드록시메틸-4-메틸-1,3-옥사졸린, 2-운데실-4,4-디메틸-1,3-옥사졸린, (E)-4,4-디메틸-2-헵타덱-8-에닐-1,3-옥사졸린, 4-하이드록시메틸-4-메틸-2-헵타데실-1,3-옥사졸린, (E)-4-하이드록시메틸-4-메틸-2-헵타데크-8-에닐-1,3-옥사졸린, 2-운데실-4-에틸-4-하이드록시메틸-1,3-옥사졸린 (바람직하게 OX-100 또는 사이클로세라마이드®라고 불리는 2-운데실-4,4-디메틸-1,3-옥사졸린; 국제특허출원 제 WO 2004050052호, 제 WO 2004050079호, 및 제 WO 2004112741호)로 형성되는 그룹으로부터 선택되는 것들이 언급될 수 있다. 그들은 상세하게 그들의 항-염증 및/또는 항-자극 및/또는 진정화, 항산화, 탈색소침착, 면역조절 작용에 유용하다.
이들 조합들 모두는 패시플로라 종자들의 추출물에 추가하여 적어도 하나의 다른 활성 화합물을 포함하고, 상기에 기술된 바와 같은 2개, 3개 또는 4개 이상의 활성 화합물들을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 국소적 투여, 경구적, 직장, 질내, 비강, 귀내 또는 기관지 투여 및 비경구적 투여에 적합한 서로 다른 조제물들의 형태로 제형화될 수 있다. 유리하게 본 발명의 조성물은 국소적 투여 또는 경구적 투여에 적합한 조제물의 형태로 제형화된다.
첫 번째 변형물에 따르면, 서로 다른 조제물들은 국소적 투여에 적합하고, 상세하게는 크림들, 에멀전들, 밀크들, 연고들, 로션들, 오일들, 수용성, 수용성-알코올 또는 글리콜 용액들, 분말들, 패치들, 스프레이들, 샴푸들, 바니쉬들 또는 외부적 적용을 위한 기타 다른 산물을 포함한다.
지시된 명세들을 가지는 패시플로라 종자들의 추출물을 포함하는 조성물은 상세하게 미용적, 약제학적, 피부과학적, 영양제학적 사용을 목적으로 한다.
미용적, 약제학적 또는 피부과학적 용도를 위해, 조성물은 유리하게 국소적 투여에 적합한 조제물의 형태로 제형화된다. 비비누화 분획, 비비누화물이 농축된 오일로 형성된 그룹으로부터 선택되는 패시플로라 종자들 자체의 지질 추출물을 포함하는 조성물은 상세하게 미용적, 약제학적, 피부과학적, 영양제학적 사용을 목적으로 한다.
영양제 또는 미용적 식품 용도 ("미용 식품 (cosmet-food)")를 위해, 조성물은 유리하게 경구적 투여에 적합한 조제물의 형태로 제형화된다.
본 발명의 다른 주제는 미용적, 약제학적 또는 피부과학적 조성물로서 또는 이에, 또는 기능적 식품으로서 또는 이에 사용하기 위한, 본 발명의 추출물 또는 본 발명의 조성물이다.
기능성 식품은 통상적인 식품 또는 그의 모양을 가지고 정상적인 식사의 일부인 식품이며, 그의 보통의 영양적 기능들을 능가하는 유익한 생리학적 효과들을 제공하거나 만성 질환들의 위험을 감소시키는 특징들을 가진다.
본 발명의 추출물, 상세하게는 비비누화 분획이 농축된 패시플로라 에둘리스 오일은
- 산화적 손상에 대항하여 진피를 보호하는 데 기여하고;
- 하이알루론산의 생합성을 증가시킴으로써 진피의 습윤화 및 진피의 탄력성을 촉진시키고;
- 진피의 더 나은 응집력 및 탄력성을 허용하도록 원섬유생성 및 진피의 세포외 기질의 리모델링을 증가시키는 데 기여하고;
- 정상 인간 섬유모세포들의 증식을 증가시키고;
- 적색 튼살들 (stretch mark)의 섬유모세포들에 의해 생성된 수축력을 감소시키고;
- 지방세포 지방분해를 촉진하고;
- 멜라닌 생성작용에 관여하는 유전자들의 발현을 억제하는:
점이 확인되어 왔다.
유리하게 본 발명의 조성물 또는 추출물은 피부 및/또는 점막 및/또는 피부 부속기관들의 질병들 또는 병리들의 예방 및/또는 치료에 사용된다. 상세하게 본 발명의 조성물 또는 추출물은 피부 및 점막 세포들의 대사를 촉진하거나, 회복시키거나, 조절하는 데 및/또는 진피 조직과 관련된 질병들을 예방하고/거나 치료하는 데 사용된다.
상세하게 본 발명의 추출물은 다음의 적응증들의 하나 이상을 위해
- 항-노화 제제로서;
- 치유화 제제로서;
- 피부 또는 점막의 악화를 예방하고/거나 피부 또는 점막의 항상성을 유지하는 데;
- 항산화제로서;
- 항-염증 제제로서;
- 슬림화 또는 항-셀룰라이트 제제로서;
- 피부 튼살들을 예방하거나 치료하는 데;
- 탈색화 제제로서:
사용될 수 있다.
보다 상세하게 본 발명의 조성물 또는 추출물은 미성숙한 피부 노화, 상세하게는 광-유도성 피부 노화를 예방하거나 지연시키는 데 사용될 수 있다. 따라서 그들은 주름들, 선들 또는 미세이완 악화를 예방하고/거나, 감소시키고/거나, 치료하도록 의도된 크림 또는 제형물에서 유용하다.
섬유모세포들의 증식에, 상세하게는 콜라겐 위에 미치는 그의 작용을 통하여, 본 발명의 조성물 또는 추출물은 피부 및 점막의 기계적인 성질들을 강화하는 데, 상세하게는 쭈그러진, 늘어진, 처진 및/또는 얇아진 피부와 싸우는 데, 및/또는 피부 탄력성 또는 견고성을 강화하고/거나 회복시키는 데 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물 또는 추출물은 변질된 지방 조직의 예방 및/또는 치료에도 역시 사용될 수 있다.
상세하게 본 발명의 조성물 또는 추출물은 알레르기성, 염증성, 자극성 반응들 또는 병리들, 또는 피부의 장벽 또는 항상성의 질병들, 피부 부속기관들 (헤어 및 네일들) 및/또는 미성숙, 정상 또는 성숙한/노화된 점막 (치은, 치주, 생식 점막)의 질병들의 예방 및/또는 치료를 목적으로 한다.
본 발명의 조성물 또는 추출물은 치유화를 촉진하는 데도 역시 사용될 수 있다.
따라서 본 발명의 조성물 또는 추출물은 표면 흉터들, 여린 입술들 및 입술염, 튼살들, 쏘임들 및 물림들 이후의 피부, 피부 찰과상들, 반점들 및/또는 피부 딱지들, 및 여린 민감성 피부로 형성되는 그룹으로부터 선택되는 병리들 또는 병태들의 예방 및/또는 치료에 사용될 수 있다. 따라서 본 발명의 조성물 또는 추출물은 상세하게 피부 튼살들의 예방 또는 치료에 적용된다.
본 발명에 따른 표현 "피부 튼살들의 예방"에 의하여, 임신과 같은 튼살들의 발병을 초래하는 것으로 알려진 사건 이전에 또는 사건 동안 조성물의 적용에 의한 미용적 또는 피부과학적 치료의 일부로서, 튼살들의 예방 또는 예로 그들의 길이, 너비 및/또는 깊이의 적어도 감소된 형성을 허용하는 작용을 의미한다. 본 발명에 따른 표현 "피부 튼살들의 치료"에 의하여, 미용적 또는 피부과학적 치료의 일부로서 퇴행을 초래하고, 예로 이미 형성된 튼살들 예로 그들의 길이, 너비 및/또는 깊이를 퇴행시키고 예로 재흡수시키는 작용을 의미한다.
따라서 본 발명에 따라 사용된 조성물은 형성되고 있는 튼살들 또는 심지어 이미 형성된 튼살들을 포함하여, 튼살들을 형성할 것 같은 피부의 영역들에 적용될 수 있다.
유리하게, 본 발명의 조성물 또는 추출물은 다음의 반응들, 질병들 또는 병리들을 예방하고/거나 치료하는 데 사용될 수 있다:
- 여드름, 장미증 또는 혈관확장증, 건선, 혈관성 장애들, 기저귀 발진, 아토피 피부염, 습진, 접촉성 피부염, 자극성 피부염, 알레르기성 피부염, 피지성 피부염 (유아 지방관), 건선, 민감성 피부, 반응성 피부, 건조한 피부 (건조증), 탈수된 피부, 발적을 가진 피부, 피부 홍반, 노화 또는 광-노화된 피부, 광민감성 피부, 색소침착된 피부 (기미, 염증-후 색소침착), 탈색된 피부 (백반증), 연조직염을 가진 피부, 늘어진 피부, 튼살들, 머리비듬, 피부 균열, 곤충 쏘임들 및 물림들, 상세하게 유방들의 갈라진 피부들, 햇볕 화상들, 모든 종류의 광선들로 인한 염증들, 제제들 예로 화학적 제제들, 물리적 (예로, 임신부들을 위한 서포트 웨어), 세균성, 진균성 또는 바이러스성, 기생충성 (이, 좀진드기, 버짐충, 진드기, 피부사상균들), 방사선학적 제제들에 의한 또는 선천적 면역 결함들 (항미생물성 펩타이드들) 또는 후천적 면역 결함들 (세포성, 체액성, 사이토카인들)을 통한 염증들을 가지는 피부와 같은 피부, 및/또는
- 가능하게는 치은염 (신생아들에서 민감한 잇몸들, 담배 등으로 인한 위생적 문제들), 치주 질환을 나타내는 잇몸들 및 치주와 같은 점막, 또는 남성 또는 여성의 외부 또는 내부 생식기 부위들의 가능한 염증들을 가진 생식기 점막, 및/또는
- 미성숙, 정상 또는 성숙한지 여부와는 상관없이 네일들 (부서지는 여린 네일들 등) 및 헤어 (탈모증, 비듬, 다모증, 피지성 피부염, 모낭염)과 같은 피부 부속기관들, 상세하게는 안드로겐생성, 급성, 국소화된 탈모, 반흔형성, 선천성 탈모, 신생아들의 후두부 탈모, 화학요법/방사선요법으로 인한 원형탈모증, 또는 휴지기 탈모, 성장기 탈모, 헤어 퇴행위축증, 발모광, 백선 또는 오일성 또는 건조한 비듬과 같은 두피 장애들을 가지는 피부 부속기관들.
본 발명은 또한 피부 및/또는 피부 부속기관들 및/또는 점막의 병태 및/또는 외양을 개선하는 측면에서, 유리하게는 피부의 견고성, 탄력성 또는 긴장성을 개선하는 측면에서 피부 및/또는 피부 부속기관들 및/또는 점막의 미용적 관리 방법으로서, 본 발명의 추출물 또는 본 발명의 조성물의 경구적 또는 국소적 경로를 통한 투여 단계를 포함하는, 미용적 관리 방법에 관한 것이다.
본 발명의 다른 주제는 당기는 느낌을 가진 건조한 피부의 미용적 치료 방법으로서, 본 발명의 추출물 또는 본 발명의 조성물의 경구적 또는 국소적 경로를 통한 투여 단계를 포함하는, 미용적 치료 방법이다.
본 발명의 다른 주제는 "오렌지 껍질" 효과를 제한하도록 실루엣을 리모델링하는 미용적 치료 방법으로서, 본 발명의 추출물 또는 본 발명의 조성물의 경구적 또는 국소적 경로를 통한 투여 단계를 포함하는, 미용적 치료 방법이다.
본 발명의 마지막 주제는 이전에 정의된 바와 같은 지질 추출물을 포함하는 기능성 식품이다. 기능성 식품은 다음 중에서 이로부터 선택될 수 있다:
1) 치즈, 버터, 우유 및 기타 우유 음료들, 우유 제품들, 아이스크림들 및 요쿠르트들을 포함하는 혼합물들 및 스프레드들과 같은 유제품들;
2) 마아가린들, 스프레드들, 마요네즈들, 요리 지방들, 튀김 기름들 및 비네그레트들과 같은 지방-포함 산물들;
3) 이들 식품들이 오븐에서 제조되거나 구워지거나 가공되는지 여부와 상관없이 빵, 파스타와 같은 곡물-포함 제품들;
4) 초코렛, 사탕들, 씹는 검, 푸딩들, 토핑들, 빙수들, 얼음들 및 기타 고명들과 같은 과자류;
5) 소다들 또는 기타 비-알코올성 음료들, 과일 주스들, 식이 보충물들, 부스트TM 및 엔슈어TM 등이 시판하는 식품과 같은 드링크들 형태의 대체식들을 포함하는 알코올성 여부와 상관없는 음료들;
6) 달걀들, 스프들과 같은 가공 식품들, 파스트를 위한 기성 소스들, 제조된 식사들 및 기타 유사 산물들과 같은 잡다한 산물들.
본 발명의 조성물 또는 추출물은 식품들, 영양제들, 식이 산물들 상세하게는 고-단백질 산물들, 혼합하기, 주입, 주사하기, 블렌딩, 흡수, 반죽하기 및 분사하기와 같은 기법들을 사용하는 음료들에서 임의의 변형이 없이 직접적으로 도입될 수 있다.
본 발명의 화합물들 및 조성물들의 투여 방식들, 용량들 및 최적의 약제학적 형태들은 환자 또는 동물에게 적응된, 약제학적 상세하게는 피부과학적 치료 또는 수의과적 치료를 위해 일반적으로 고려되는 판정기준들, 예로 환자 또는 동물의 연령 또는 체중, 일반적인 병태의 중증도, 치료에 대한 내성, 검증된 부작용들 및 피부 유형에 따라 결정될 수 있다.
도 1은 GlaSbox® 시스템을 사용하여 신장된 진피 동등물에서 패시플로라 농축물의 존재 또는 부재 시 적색 튼살 섬유모세포들 (FVR)에 의해 발생되는 수축력들을 나타낸 것이다. A: 초기 6시간의 자세한 곡선들; B: 전체 곡선. 통계학은 피셔 테스트가 이어지는 투-팩터 분산 분석이다. °FVR; ▽FVR + MJ 0.005%; □FVR + MJ 0.05%; x-축은 시간의 시간대이고; y-축은 힘들 (임의의 단위/백만개 세포들)이다.
다음의 실시예들은 본 발명을 설명한다.
실시예 1: 본 발명의 농축물
본 발명의 농축물의 한 가지 예는 비비누화 분획으로 농축된 P. 에둘리스의 미가공 오일이다. 추출물은 분자적 증류에 의해 제조된다.
이러한 추출물은 다음의 무게 분포를 가진다.
Figure 112016033119659-pct00003
토코페롤들은 다음의 무게 분포를 가진다.
Figure 112016033119659-pct00004
토코트리에놀들은 다음의 무게 분포를 가진다.
Figure 112016033119659-pct00005
스테롤들은 다음의 무게 분포를 가진다.
Figure 112016033119659-pct00006
실시예 2: 국소적 경로를 통한 적용을 위한 조성물들
국소적 경로를 통한 적용을 위한 여러 조성물들이 하기에 주어진다. 패시플 로라 종자들의 지질 추출물, 그의 비비누화 분획으로 농축된 오일 및 비비누화물로 형성된 그룹으로부터 선택되는 것은 하기에 주어진 예들의 조성들을 가지는 클렌징 워터, 오일-내-물 에멀전들, 물-내-오일 에멀전들, 오일들, 밀크들, 로션들, 샴푸들, 폼 및 스프레이 산물들과 같은 다양한 미용적 산물들 내에 도입될 수 있다.
습윤화 클렌징 워터:
Figure 112016033119659-pct00007
민감성 피부를 위한 클렌징 워터:
Figure 112016033119659-pct00008
항-노화 에멀전:
Figure 112016033119659-pct00009
재생 에멀전:
Figure 112016033119659-pct00010
슬림화 오일:
Figure 112016033119659-pct00011
건조한 아토피성 피부를 위한 밀크:
Figure 112016033119659-pct00012
폼:
Figure 112016033119659-pct00013
진정 스프레이:
Figure 112016033119659-pct00014
정제화 세척 크림:
Figure 112016033119659-pct00015
항-여드름 에멀전:
Figure 112016033119659-pct00016
발적 완화 에멀전:
Figure 112016033119659-pct00017
회복 관리:
Figure 112016033119659-pct00018
탈색화 에멀전:
Figure 112016033119659-pct00019
항-세균 스틱롤
Figure 112016033119659-pct00020
박피 관리:
Figure 112016033119659-pct00021
각질제거 로션:
Figure 112016033119659-pct00022
항-비듬 샴푸:
Figure 112016033119659-pct00023
헤어 콘디셔닝액:
Figure 112016033119659-pct00024
헤어 강화 로션:
Figure 112016033119659-pct00025
광보호 스틱:
Figure 112016033119659-pct00026
SPF 50+ 선크림:
Figure 112016033119659-pct00027
SPF 50+ 선 스프레이:
Figure 112016033119659-pct00028
여린 부서지는 손톱들을 위한 바니쉬:
Figure 112016033119659-pct00029
실시예 3; 본 발명의 추출물의 생물학적 활성 테스트들
테스트된 추출물은 실시예 1의 농축물이었다. 테스트들에서 이것은 "패시플 로라 농축물"이라고 불릴 것이다. 달리 표지되지 않는 경우라면, 백분율들은 테스트된 조성물의 전체 무게와 대비한 농축물의 무게로 표현된다.
A. 시험관내 활성 - 유전자 발현의 조절
본 명세서의 나머지 부분에서 패시플로라 농축물이라고 불리는 - 비비누화 분획으로 농축된 오일에 의한 유전자 발현 조절의 분석은 2가지 서로 다른 모델들 상에서 수행되었다: 정상 인간 섬유모세포들 및 멜라닌화 재구성된 인간 표피.
1. 정상 인간 섬유모세포들의 유전자 발현에 미치는 효과
정상 인간 섬유모세포들에서 패시플로라 농축물의 효과들은 진피 생물학, 연결 조직의 리모델링 및 노화에 관여하는 유전자 발현 상에서 qRT-PCR 및 TaqMan 마이크로플루이드 카드들에 의해 측정되었다.
a. 재료 및 방법
정상 인간 진피 섬유모세포들이 0.01% 및 0.05%의 패시플로라 농축물의 존재 시 24시간 동안 배양되었다. 배양 이후에, 세포들은 용해되었고 전체 RNA들이 추출되었고 검정되었다. 유전자 발현에서 차이들은 TaqMan 카드들을 가진 정량적 RT-PCR을 사용하여 분석되었다. 발현에서 변화들의 분석 및 통계학적 분석들은 데이타 어시스트 소프트웨어 (어플라이드 바이오시스템사)를 사용하여 수행되었다.
b. 결과
패시플로라 농축물은 다음의 기능들에 관여하는 유전자들의 발현들을 유의하게 조절하였다 (표 7 참조). 표 7은 정상 인간 섬유모세포들에서 패시플로라 농축물의 존재 시 유의한 발현의 변화를 가지는 유전자들의 리스트를 나타낸다. RQ = 미처리된 대조군과 대비한 유전자의 상대적 정량 (RQ = 1).
Figure 112016033119659-pct00030
1) 항-산화 반응
패시플로라 농축물은 항산화 효소들 미토콘드리라 펩타이드 메티오닌 설폭사이드 환원효소, NADH 탈수소화효소, 카탈라제 (노화 전체를 통하여 감소되는 활성) 및 글루타치온 (항산화 분자)의 합성을 촉매하는 글루타치온 합성효소의 발현을 유도하였다. 따라서 이들 유전자들을 증가시키는 것에 의해 패시플로라 농축물은 상화적 손상에 대항하여 진피를 보호하는 데 기여한다.
2) 세포외 기질의 항상성
패시플로라 농축물은 하이알루로난 합성효소 2, 물을 보유하고, 조직 구조화 및 피부 탄력성을 지지하며, 세포 이동을 조절하는 그의 능력으로 알려져 있는 다당류인 하이알루론산의 합성에 관여하는 효소의 발현을 유도하였다. 따라서 패시플 로라 농축물은 하이알루론산의 생합성을 증가시키고 이로써 진피의 습윤화 및 탄력성을 촉진시킨다.
패시플로라 농축물은 콜라겐들 제 1형, 제 4형 및 제 7형, 피브릴린 (탄력성 섬유들의 구성성분), 라이실 수산화효소 1 (탄력성 섬유들의 형성에 관여하는 효소), 피브로모듈린 및 루미칸 (원섬유들의 형성을 조절하는 작은 프로테오글리칸들), 피브로넥틴 및 MMP3 (콜라겐 망의 리모델링에 관여함)을 인코딩하는 유전자들의 발현을 유도하였다. 따라서 패시플로라 농축물은 진피의 더 나은 응집력 및 탄력성을 허용하도록 원섬유생성 및 진피의 세포외 기질의 리모델링을 증가시키는 데 기여한다.
2. 멜라닌화 재구성된 인간 표피에서 유전자들의 발현에 미치는 효과
색소침착에 관여하는 유전자들의 발현에 미치는 패시플로라 농축물의 효과들은 멜라닌화 재구성된 인간 표피에서 마이크로플루이드 카드들을 가진 qRT-PCR 및 TaqMan을 사용하여 측정되었다.
a. 재료 및 방법
일차 인간 색소세포들 (검은 표현형의 공여자로부터 얻음)을 포함하는 재구성된 표피 시료들은 0.01% 및 0.05%의 패시플로라 농축물의 존재 시 24시간 동안 배양되었다. 배양 이후에 조직들은 용해되었고 전체 RNA들이 추출되었으며 검정되었다. 유전자 발현에서 차이들은 TaqMan 카드들을 사용하는 정량적 RT-PCR을 사용하여 분석되었다. 발현에서 변화들의 분석 및 통계학적 분석들은 데이타 어시스트 소프트웨어 (어플라이드 바이오시스템사)를 사용하여 수행되었다.
b. 결과
패시플로라 농축물은 둘 다 멜라닌 생성에 관여하는 티로시나제 및 MITF (소안구-관련 전사인자) 유전자들의 발현을 억제하였다 (표 8 참조). 티로시나제는 색소세포들에 의한 멜라닌의 생산에서 핵심 효소인 한편 MITF는 색소세포 분화 및 멜라닌 생성 과정에 관여하는 효소들의 전사를 조절한다. 발현에서의 이들 감소들은 패시플로라 농축물의 탈색화 작용을 제시한다. 또한, 패시플로라 농축물은 NGF, 신경성장인자 수용체, 특히 신경원성 염증에 관여하는 뉴트로핀의 발현을 감소시켰다. 표 8은 멜라닌화 재구성된 인간 표피에서 패시플로라 농축물의 존재 시 유의한 발현의 변화를 가지는 유전자들의 리스트를 나타낸다. RQ = 미처리된 대조군과 대비한 유전자의 상대적 정량 (RQ = 1).
Figure 112016033119659-pct00031
B. 진피 세포외 기질에 미치는 작용
섬유모세포 검색이 진피 기질의 항상성에 미치는 패시플로라 농축물의 잠재적인 효과를 보여주었기 때문에, 우리는 먼저 섬유모세포들의 증식 및 세포외 기질의 구성성분들 대다수를 생산하는 그들의 능력에 미치는 패시플로라 농축물의 효과를 조사하여 이러한 잠재력을 입증하도록 노력하였다. 또한 튼살 섬유모세포 모델이 이들 특정한 세포들에 의해 발생한 힘들에 미치는 패시플로라 농축물의 이완 효과를 평가하는 데 사용되었다.
1. 정상 인간 섬유모세포들의 증식에 미치는 효과
a. 재료 및 방법들
정상 인간 진피 섬유모세포들이 0.005% 및 0.01% 패시플로라 농축물의 존재 시 1% FCS 배양 배지에서 또는 10% FCS 배양 배지 (양성 대조군)에서 72시간 동안 배양되었다. 배양 이후에, 세포 증식이 화학발광 엘라이자 방법을 사용하는 BrdU 검정법에 의해 평가되었다. BrdU (5-브로모-2'-데옥시우리딘)는 세포 주기 동안 증식하는 세포들의 DNA 내로 도입되게 되는 티미딘의 유사체이다.
b. 결과
패시플로라 농축물은 정상 인간 섬유모세포들의 증식을 유의하게 증가시켰다 (표 9) 표 9는 정상 인간 섬유모세포들의 증식, 미처리된 대조군과 대비한 백분율 증가로서 표현되는 도입된 BrdU의 정량과 비례하는 발광 강도를 나타낸다. **p<0.01; ***p<0.001 - 듀넷 테스트가 이어지는 원-팩터 분산 분석이다.
Figure 112016033119659-pct00032
2. 진피 기질 구성성분들의 발현에 미치는 효과
a. 재료 및 방법
정상 인간 진피 섬유모세포들이 0.005% 및 0.05% 패시플로라 농축물 또는 5 ng/mL의 TGFβ1 (표준)의 존재 시 1% FCS 배양 배지에서 24시간 동안 배양되었다. 배양 이후에, 전체 RNA들이 추출되었고, 검정되었으며, 역전사되었다. 콜라겐 I 및 엘라스틴의 유전자 발현은 실시간 정량적 RT-PCRdp 의해 분석되었다.
b. 결과
패시플로라 농축물은 콜라겐 제 1형 및 엘라스틴 (표 10), 세포외 진피 기질의 성분 및 대부분의 거대분자들의 유전자 발현을 증가시켰다. 표 10은 패시플로라 농축물로 처리된 정상 인간 섬유모세포들에서 콜라겐 I 및 엘라스틴의 유전자 발현 (상대적 정량): 미처리된 대조군과 대비한 백분율 증가를 나타낸다. *p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001 - 듀넷 테스트가 이어지는 원-팩터 분산 분석이다.
Figure 112016033119659-pct00033
3. 튼살 섬유모세포 모델에서 이완 효과
GlaSbox® 시스템이 최근의 튼살 (적색)으로부터 채취된 섬유모세포들에 미치는 패시플로라 농축물의 이완 효과를 평가하는 데 사용되었다.
GlaSbox® 시스템은 진피 동등물 내에서 섬유모세포들에 의해 발생된 수축력들의 측정을 허용한다.
적색 튼살로부터 얻은 섬유모세포들은 건강한 피부의 섬유모세포들보다 더 큰 수축력들을 발생시킨다.
a. 재료 및 방법
건강한 피부로부터 얻은 섬유모세포들 및 동일한 환자의 생검 이후 채취된 적색 튼살로부터 얻은 섬유모세포들이 배양에 놓아두었다. 진피 동등물들이 (건강한 피부 또는 적색 튼살의) 섬유모세포들을 콜라겐 용액과 혼합하여 제조되었다. 이러한 혼합물은 GlaSbox® 의 직각형 웰들 내에 부어졌다. 0.005% 또는 0.05% 패 시플로라 농축물을 포함하거나 포함하지 않는 배지가 첨가되었다. 2가지 유연한 실리콘 막대들 (beam)이 각 웰들에 침지되었다. 따라서 진피 동등물이 세포주 게이지 ("센서")가 장착된 2가지 막대들 사이에서 발생하였다. 섬유모세포들에 의해 발생된 수축력의 영향 하에서, 실리콘 막대는 변형되게 된다: 이것은 세포주 게이지의 전기적 저항값에서의 변화로서 해석된다. 실시간으로 측정된 이러한 변화는 진피 동등물 내에서 발생된 힘을 나타낸다. 등척력들 (isometic force)은 24시간 동안 측정되었다.
b. 결과
적색 튼살 섬유모세포들은 인접한 건강한 피부 섬유모세포들보다 더욱 큰 수축력들을 유의하게 발생시켰다 (결과 미도시). 패시플로라 농축물은 적색 튼살 섬유모세포들에 의해 생성된 수축력을 유의하게 감소시켰다 (도 1의 A 및 B).
도 1은 GlaSbox® 시스템으로 신장된 진피 동등물에서 패시플로라 농축물의 존재 또는 부재 시 적색 튼살 섬유모세포들 (FVR)에 의해 발생된 수축력들을 나타낸다. A: 초기 6시간의 자세한 곡선들; B: 전체 곡선. 통계학은 피셔 테스트가 이어지는 투-팩터 분산 분석이다. °FVR; ▽FVR + MJ 0.005%; □FVR + MJ 0.05%; x-축은 시간의 시간대이고; y-축은 힘들 (임의의 단위/백만개 세포들)이다.
GlaSbox® 곡선들의 분석 (표 11)은 곡선 AUC 아래 면적, 최대 수축 및 경사가 수축력들뿐만 아니라 적색 튼살 섬유모세포들의 수축 속도도 이에 따라 감소시키는 패시플로라 농축물의 존재 시 유의하게 감소되는 점을 보여준다. 표 11은 GlaSbox® 곡선들의 분석: AUC, 최대 수축 및 경사를 나타낸다. ** p<0.01; *** p<0.001 vs FVR; aap<0.01　vs MJ 0.005% - 피셔 테스트가 이어지는 원-팩터 분산 분석이다.
Figure 112016033119659-pct00034
4. 결론
이들 결과들은 적색 튼살 섬유모세포들에 의해 생성된 수축력들을 감소시키는 데 미치는 그의 작용을 통하여 패시플로라 추출물의 항-튼살 효과 및 진피 기질에 미치는 재-밀집화 효과를 보여준다.
C. 슬림화 효과: 인간 지방세포 조직의 지방분해에 미치는 효과
인간 흰색지방 조직은 신체 내의 다른 조직들에게 지방세포 지방분해 과정에 의해 방출된 지방산 형태들로의 에너지 분자들을 제공하여 기본적인 대사적 기능을 수행한다: 지방세포들은 저장된 트리글리세라이드들을 지방산들 및 글리세롤로 가수분해시켜서 에너지 보유물들을 가동화시키고; 이에 따라 혈류 내로 방출된 지방산들은 에너지 목적들으로 다른 조직들에 의해 사용될 수 있다. 지방세포 지방분해에 미치는 패시플로라 추출물의 효과는 3차원으로 배양된 인간 성숙한 지방세포들에 저장된 트리글리세라이드들의 가수분해 동안 방출된 글리세롤의 검정법에 의해 측정되었다.
a. 재료 및 방법
5명의 공여자들 (정상-체중 또는 과체중)로부터 채취된 피하 지방세포 조직의 생검들로부터 유래된 성숙한 지방세포들이 분리되었고 배양에서 그들의 생존 및 생물학적 기능성을 허용하는 펩타이드 젤 내에 피막화되었다. 피막화된 성숙한 지방세포들은 0.001% 또는 0.005% 패시플로라 추출물 또는 10 uM 포스콜린 (표준)의 존재 시 4시간 동안 배양되었다.
배양 이후에, 방출된 글리세롤은 검정 키트 (랜독스사)를 사용하여 배양 배지에서 검정되었고, 획득된 수치들은 키트 (인비트로겐사)로 평가된 DNA 양으로 정상화되었다.
b. 결과
지방세포들에 의한 글리세롤의 방출은 조사된 5명의 공여자들 각각에서 패시 플로라 추출물로 증가되었다. 표 12는 5명의 공여자들에서 관찰된 효과의 평균을 나타낸다: 패시플로라 추출물은 글리세롤의 방출을 유의하게 자극하였고, 따라서 이것은 지방세포 지방분해를 촉진시켜서 슬림화 효과의 유익을 준다. 표 12는 성숙한 지방세포들에 의한 글리세롤의 방출에 의해 평가된 패시플로라 추출물의 지방분해 효과를 나타낸다. 평균 ± 표준 편차 (5명의 공여자들), ** p<0.01 - 일콕스/크루스칼 윌리스 비-매개변수 테스트이다.
Figure 112016033119659-pct00035

Claims (32)

  1. 패시플로라 종자들로부터 얻은 지질 추출물로서, 상기 지질 추출물은 전체 추출물 무게와 대비하여 3 내지 100 무게%의 비비누화물들을 함유하는 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 종자들의 오일이고, 상기 비비누화 분획은 토코페롤, 토코트리에놀, 스테롤 및 스쿠알렌을 포함하고, 상기 지질 추출물은 미가공 또는 정련된 패시플로라 오일의 분자적 증류 단계를 포함하는 방법으로 획득되는, 지질 추출물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 지질 추출물은 패시플로라 인카르나타 또는 패시플로라 에둘리스로부터 얻은, 추출물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 지질 추출물은 다음의 특징들을 가지는 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 종자들의 오일인 것을 특징으로 하는, 추출물.
    Figure 112021025450261-pct00036
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 지질 추출물은 다음의 특징들을 가지는 비비누화물인 것을 특징으로 하는, 추출물.
    Figure 112021025450261-pct00037
  5. 제 1항에 있어서,
    상기 지질 추출물은 다음의 연속적인 단계들:
    a) 미가공 또는 정련된 패시플로라 오일의 분자적 증류;
    c) 단계 a)에서 획득된 비비누화물로 농축된 오일의 회수;
    를 포함하는 방법을 사용하여 획득되는 것을 특징으로 하는, 추출물.
  6. 제 1항에 있어서,
    상기 지질 추출물은 다음의 연속적인 단계들:
    a) 미가공 또는 정련된 패시플로라 오일의 분자적 증류;
    b) 비비누화물의 추출;
    c) 단계 a)에서 획득된 비비누화물로 농축된 오일 또는 단계 b) 이후에 획득된 비비누화물의 회수;
    를 포함하는 방법을 사용하여 획득되는 것을 특징으로 하는, 추출물.
  7. 제 6항에 있어서,
    상기 단계 b)는 다음의 연속적인 단계들:
    i. 단계 a) 이후에 획득된 그의 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 오일의 비누화;
    ii. 이어서 용매를 사용하는 비비누화물의 추출;
    을 포함하는 것을 특징으로 하는, 추출물.
  8. 제 1항의 추출물을 제조하는 방법으로서, 다음의 연속적인 단계들:
    a) 미가공 또는 정련된 패시플로라 오일의 분자적 증류;
    c) 단계 a) 이후에 획득된 비비누화물로 농축된 오일의 회수;
    를 포함하는, 방법.
  9. 제 1항의 추출물을 제조하는 방법으로서, 다음의 연속적인 단계들:
    a) 미가공 또는 정련된 패시플로라 오일의 분자적 증류;
    b) 비비누화물의 추출;
    c) 단계 a) 이후에 획득된 비비누화물로 농축된 오일 또는 단계 b) 이후에 획득된 비비누화물의 회수;
    를 포함하는, 방법.
  10. 제 9항에 있어서,
    상기 단계 b)는 다음의 연속적인 단계들:
    i. 단계 a) 이후에 획득된 그의 비비누화 분획으로 농축된 패시플로라 오일의 비누화;
    ii. 이어서 용매를 사용하는 비비누화물의 추출;
    을 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법.
  11. 제 8항 또는 제 9항에 있어서,
    상기 단계 a)의 분자적 증류는 원심분리 유형의 분자적 증류 유닛들 및 스크레이프된 필름 유형의 분자적 장치들 중에서 선택되는 장치를 사용하여 수행되는 것을 특징으로 하는, 방법.
  12. 화장 조성물로서, 활성 성분으로 제 1항에 따른 패시플로라 종자들의 지질 추출물 및 부형제를 포함하는, 화장 조성물.
  13. 제 12항에 있어서,
    상기 조성물은 전체 조성물의 무게와 대비하여 0.01 무게% 내지 20 무게%의 상기 지질 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 제 1항에 따른 패시플로라 종자들의 추출물로서, 피부 또는 점막 세포들의 대사를 촉진하거나, 회복시키거나, 조절하는 데 사용하기 위한 또는 진피 조직과 관련된 질병들의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 추출물.
  21. 제 20항에 있어서,
    다음의 적응증들의 하나 이상에서:
    - 항-노화 제제로서;
    - 치유화 제제로서;
    - 피부 또는 점막의 변질을 예방하거나 피부 또는 점막의 항상성을 유지하는 데;
    - 항산화제로서;
    - 항-염증 제제로서;
    - 슬림화 또는 항-셀룰라이트 제제로서;
    - 피부 튼살들 (stretch mark)을 예방하거나 치료하는 데;
    - 탈색화 제제로서:
    사용하기 위한, 추출물.
  22. 제 20항에 있어서,
    미성숙한 피부 노화를 예방하거나 지연시키기 위한,
    치유를 촉진하는 데 사용하기 위한,
    표면 반흔, 여린 입술들 및 입술염, 튼살들, 쏘임 및 물림 이후의 피부, 피부 찰과상들, 반점들 또는 피부 딱지들, 및 여린 민감성 피부로 형성되는 그룹으로부터 선택되는 병리들 또는 병태들의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 추출물.
  23. 제 20항에 있어서,
    미성숙한 광-유도성 피부 노화를 예방하거나 지연시키기 위한, 추출물.
  24. 제 20항에 있어서,
    주름들, 선들 또는 미세이완 악화를 예방하거나, 감소시키거나, 치료하는 데 사용하기 위한, 추출물.
  25. 제 20항에 있어서,
    쭈그러진, 늘어진, 느슨한, 처진 또는 얇아진 피부와 싸우는 데 (combat), 또는 피부 탄력성 또는 견고성을 강화하거나 회복시키는 데 사용하기 위한, 추출물.
  26. 피부 또는 피부 부속기관들 또는 점막의 상태 또는 외양을 개선하기 위한 미용 방법으로서, 제 1항에 따른 추출물의 경구 경로를 통한 섭취 또는 국소적 경로를 통한 도포 단계를 포함하는, 화장 방법.
  27. 제26항에 있어서, 피부의 견고성, 탄력성 또는 긴장성을 개선하기 위한, 화장 방법.
  28. 당기는 느낌을 가진 건조한 피부의 미용 방법으로서, 제 1항에 따른 추출물의 경구 경로를 통한 섭취 또는 국소적 경로를 통한 도포 단계를 포함하는, 화장 방법.
  29. 피부 또는 피부 부속기관들 또는 점막의 상태 또는 외양을 개선하기 위한 미용 방법으로서, 제 12항에 따른 조성물의 경구 경로를 통한 섭취 또는 국소적 경로를 통한 도포 단계를 포함하는, 화장 방법.
  30. 제29항에 있어서, 피부의 견고성, 탄력성 또는 긴장성을 개선하기 위한, 화장 방법.
  31. 당기는 느낌을 가진 건조한 피부의 미용 방법으로서, 제 12항에 따른 조성물의 경구 경로를 통한 섭취 또는 국소적 경로를 통한 도포 단계를 포함하는, 화장 방법.
  32. 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 의한 지질 추출물을 포함하는 기능성 식품.
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