KR102347109B1 - Cosmetic composition for improvement of moisturizing with hydrolyzed plant extract - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to a moisturizing cosmetic composition containing hydrolysate extracts of Hordeum vulgare, Gardenia jasminoides, and Viola tricolor. The cosmetic composition of the present invention exhibits excellent cellular moisturizing and intercellular moisturizing effects. Also, the cosmetic composition of the present invention has excellent stability and is harmless to human body by using natural materials.

Description

가수분해 식물추출물을 함유하는 보습용 화장료 조성물 {Cosmetic composition for improvement of moisturizing with hydrolyzed plant extract}Moisturizing cosmetic composition containing hydrolyzed plant extract {Cosmetic composition for improvement of moisturizing with hydrolyzed plant extract}

본 발명은 가수분해 식물추출물을 함유하는 보습용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 맥아(Malt), 치자(Gardenia Florida), 삼색제비꽃(Viola Tricolor) 가수분해물 추출물을 함유하는 보습용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a moisturizing cosmetic composition containing a hydrolyzed plant extract, and more particularly, to a moisturizing cosmetic composition containing a malt, gardenia Florida , and Viola Tricolor hydrolyzate extract. will be.

피부는 인간의 신체 기관 중 가장 넓은 표면적을 가지고 있을 뿐만 아니라 가장 외곽에 위치하고 있는 기관으로서, 인체 내의 물, 전해질 등의 생체 성분의 손실을 방지하며, 동시에 외부로부터 유해물질의 침입을 막는 역할을 한다. 피부의 구조는 외부에서부터 순서대로 표피, 진피, 피하지방 조직의 3개 층으로 구분된다.The skin not only has the largest surface area among human body organs, but is also the outermost organ. It prevents the loss of biological components such as water and electrolytes in the human body, and at the same time prevents the intrusion of harmful substances from the outside. . The structure of the skin is divided into three layers: the epidermis, the dermis, and the subcutaneous tissue in order from the outside.

피부의 수분량은 진피층에서는 70% 정도이나 표피층으로 갈수록 감소하여 표피층에서는 약 10% 내지 30%가 된다. 표피층의 수분함량이 10% 이하가 되면 피부는 거칠어지고 신체의 보호기능을 잃게 되어 노화현상이 일어난다. 표피는 외부로부터 각질층, 과립층, 유극층, 기저층의 4개 층으로 구분되는데 피부의 최외각층인 각질층은 피부의 수분증발 및 흡수 조절기능과 화학물질, 독성물질 및 세균 등의 외부물질의 침투에 대한 장벽기능을 가지고 있다. 각질층은 납작한 모양의 각질세포(keratinocyte)와 그 사이를 세포간 지질(intercelluler lipid)이 채우고 있으며 라멜라 형태를 이루고 있다. 피부의 각질층의 수분함량이 피부의 유연성, 윤택성을 결정하는 중요한 인자가 된다는 것이 잘 알려져 있다.The moisture content of the skin is about 70% in the dermis layer, but decreases toward the epidermis layer and becomes about 10% to 30% in the epidermis layer. When the moisture content of the epidermis layer is less than 10%, the skin becomes rough and the protective function of the body is lost, and aging occurs. The epidermis is divided into four layers from the outside: the stratum corneum, granular layer, stratum corneum, and basal layer. It has barrier function. The stratum corneum is filled with flat keratinocytes and intercellular lipids between them, and forms a lamellar shape. It is well known that the moisture content of the stratum corneum of the skin is an important factor determining the flexibility and luster of the skin.

또한, 건강한 사람의 각질세포에는 고농도의 자연보습인자 (Natural Moisturizing Factor, NMF)가 존재하며, 이는 피부의 수분함유를 돕는 기능을 한다. 하지만, 피부의 이러한 기능에도 불구하고, 실내난방, 오염된 대기 및 자외선 등의 외부 환경에 의한 외인성 노화, 내인성 노화 및 마찰, 면도 및 세안 등의 물리화학적 자극에 따른 피부 구성성분의 탈락으로 인하여 수분 불균형이 생겨 피부 건조가 유발된다. 이를 방지하기 위해 피부 보습제의 필요성이 중요시되고 있으며, 피부 보습 효능을 세포수준에서 확인하기 위한 다양한 연구가 진행되고 있다.In addition, a high concentration of Natural Moisturizing Factor (NMF) exists in the keratinocytes of a healthy person, which helps the skin to contain moisture. However, despite these functions of the skin, extrinsic aging caused by external environments such as indoor heating, polluted air and ultraviolet rays, intrinsic aging, and loss of skin components due to physical and chemical stimuli such as friction, shaving and face washing An imbalance can lead to dry skin. To prevent this, the need for a skin moisturizer is important, and various studies are being conducted to confirm the skin moisturizing effect at the cellular level.

한국등록특허 제10-1987167호(2019.06.03)에는, 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합추출물을 포함하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물에 관하여 기재되어 있다.Korean Patent No. 10-1987167 (June 3, 2019) describes a cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier strengthening, comprising a hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed complex extract. 한국등록특허 제10-1819060호(2018.01.10.)에는, 황련해독탕(황련, 황백, 황금, 치자) 발효물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 주름개선 및 미백용 화장료 조성물에 관하여 기재되어 있다.Korean Patent No. 10-1819060 (2018.01.10.) describes a cosmetic composition for antioxidant, wrinkle improvement and whitening containing fermented Hwangryeonhaedoktang (hwangryeon, hwangbaek, golden, gardenia) as an active ingredient. . 한국등록특허 제10-0858449호(2008.09.08.)에는, 나노리포좀으로 안정화한 삼색제비꽃 추출물을 함유하는 피부 보습 및 주름 개선 화장료 조성물에 관하여 기재되어 있다.Korean Patent No. 10-0858449 (2008.09.08.) describes a skin moisturizing and anti-wrinkle cosmetic composition containing a tricolor violet extract stabilized with nanoliposomes.

본 발명은 기존 보습용 화장료 조성물에 이용되는 화학물질의 문제점을 해결할 목적으로 인체에 무해하며 안정성이 우수하고, 보습에 효과적인 천연물 소재의 화장료 조성물을 개발하여 제공하고자 한다.The present invention aims to develop and provide a cosmetic composition made of natural material that is harmless to the human body, has excellent stability, and is effective for moisturizing, for the purpose of solving the problems of chemical substances used in existing moisturizing cosmetic compositions.

본 발명은 가수분해 맥아(Malt) 추출물, 가수분해 치자(Gardenia Florida) 추출물 및 가수분해 삼색제비꽃(Viola Tricolor) 추출물을 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for moisturizing the skin comprising a hydrolyzed malt extract, a hydrolyzed Gardenia Florida extract, and a hydrolyzed Viola Tricolor extract.

본 발명의 피부 보습용 화장료 조성물에 있어, 상기 보습은, 바람직하게는 세포 보습, 세포 간 보습 중 선택되는 어느 하나 이상을 포함하는 것이 좋다.In the cosmetic composition for moisturizing the skin of the present invention, the moisturizing agent preferably includes at least one selected from cellular moisturizing and intercellular moisturizing.

본 발명의 피부 보습용 화장료 조성물에 있어, 상기 추출은, 일 예로 용매 추출법, 초임계 추출법 및 초음파 추출법 중 선택되는 어느 하나의 추출법을 통해 추출하는 것일 수 있다.In the cosmetic composition for moisturizing the skin of the present invention, the extraction may be, for example, extraction through any one extraction method selected from a solvent extraction method, a supercritical extraction method, and an ultrasonic extraction method.

이때, 상기 용매 추출법은, 일 예로 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 또는 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 추출용매를 이용하는 것일 수 있다.In this case, the solvent extraction method is, for example, water, anhydrous or hydrous lower alcohol having 1-4 carbon atoms, propylene glycol, butylene glycol, glycerin, acetone, ethyl acetate, chloroform, butyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, hexane or Any one extraction solvent selected from the group consisting of mixtures thereof may be used.

본 발명의 화장료 조성물은 세포 보습 및 세포 간 보습에 뛰어난 효과를 발휘한다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 천연물 소재를 이용하여 인체에 무해하며, 안정성이 우수하다.The cosmetic composition of the present invention exhibits an excellent effect in moisturizing cells and intercellular moisturizing. In addition, the cosmetic composition of the present invention is harmless to the human body by using a natural material, and has excellent stability.

도 1은 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물이 세포에 미치는 독성을 측정한 결과이다.
도 2는 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 아쿠아포린(Aquaporin)-3 발현 조절을 통한 세포 보습 효과를 확인한 결과이다.
도 3은 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 클라우딘(Claudin)-1 발현 조절을 통한 피부장벽 보습 효과를 확인한 결과이다.
도 4는 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 수분감소율을 나타낸 결과이다.
도 5는 제형예 1과 비교제형예 1의 적용 시, 피부 수분 함유량을 측정한 결과이다.
도 6은 제형예 1과 비교제형예 1의 적용 시, 경피 수분 손실량을 측정한 결과이다.
1 is a result of measuring the toxicity of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or a mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 on cells.
2 is a result of confirming the cell moisturizing effect through the control of Aquaporin-3 expression of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1.
3 is a result confirming the skin barrier moisturizing effect through control of Claudin-1 expression of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1.
4 is a result showing the moisture reduction rate of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1.
5 is a result of measuring the skin moisture content when applying Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1.
6 is a result of measuring the amount of transdermal water loss when applying Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1.

피부에서 각질세포층의 수분함량을 적절하게 유지하는 것은 매우 중요하다. 이를 위하여 화장품에는 피지와 유사한 성분이나 NMF 성분, 또는 폴리올과 같은 보습제 등이 첨가되어 사용된다. 예를 들어, 수용성 폴리올로서 수산기(OH group)가 3개 이상인 글리세린, 솔리톨 등은 뛰어난 보습력을 나타내나 끈적임이 심하여 사용할 때 불쾌감을 느끼게 하며, 수산기가 2개인 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 등은 피부의 부작용이 발생하기도 한다. 또한, 다른 천연보습인자인 피롤리돈 카르복실산 나트륨(PCA-Na), 젖산나트륨(Sodium lactate), 요소 등은 전해성이 강해 화장료의 유화안정성을 해치는 문제점이 있으며, 아미노산, 콜라겐, 엘라스틴 등도 보습능력이 있다고는 하나 그 보습능력에 한계가 있어, 안전하면서도 피부 보습력을 높이기 위한 천연물 화장품 조성물에 대한 개발이 필요한 실정이다.It is very important to properly maintain the moisture content of the stratum corneum in the skin. For this purpose, a component similar to sebum, an NMF component, or a moisturizing agent such as polyol is added to cosmetics. For example, as water-soluble polyols, glycerin and solitol having three or more hydroxyl groups (OH groups) show excellent moisturizing power, but are sticky and cause discomfort when used, and propylene glycol with two hydroxyl groups, 1,3-butylene Glycol, etc., may cause side effects on the skin. In addition, other natural moisturizing factors, such as sodium pyrrolidone carboxylate (PCA-Na), sodium lactate, and urea, have strong electrolytic properties, which impair the emulsion stability of cosmetics. Although it has the ability, there is a limit to its moisturizing ability, so it is necessary to develop a natural cosmetic composition that is safe and enhances skin moisturizing power.

이에, 본 발명은 가수분해 맥아(Malt) 추출물, 가수분해 치자(Gardenia Florida) 추출물 및 가수분해 삼색제비꽃(Viola Tricolor) 추출물을 함유하는 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.Accordingly, the present invention provides a cosmetic composition for moisturizing the skin comprising a hydrolyzed malt extract, a hydrolyzed Gardenia Florida extract, and a hydrolyzed Viola Tricolor extract.

맥아(Malt)는 벼과의 대맥(Hordeum vulgare Linn:大麥)을 싹틔워 맥아효소인 아밀라아제(amylase)를 생성시킨 것으로 질이 단단하고 싹이 2cm 이내이며, 황색이다. 맥아는 비위허약으로 인한 소화 장애에 효과가 있고, 특히 밀가루 음식에 대한 소화불량에 쓰인다. 또한, 유즙분비 부족에 효과가 있다. 한쪽 끝에는 어린 싹이 있고 다른 쪽에는 어린 뿌리가 있으며 바깥면은 엷은 황색이고 배유는 유백색이다. 질은 단단하며 부서지기 쉽다. 맥아의 이명으로는 대맥아, 대맥벽, 대맥모, 광맥얼, 곡맥이 있다.Malt is produced by germinating Hordeum vulgare Linn (大麥) of the Grape family to produce amylase, a malt enzyme. Malt is effective for digestive disorders caused by weak stomach, especially for indigestion of wheat flour. In addition, it is effective in the lack of milk secretion. There is a young shoot at one end and a young root at the other end, the outer surface is pale yellow, and the endosperm is milky white. The vagina is hard and brittle. Synonyms for malt include malt malt, aorta wall, barley bran, gwangmaekul, and grain malt.

치자(Gardenia Florida)는 상록관목인 꼭두서니과에 속하는 치자나무의 열매 또는 이를 건조시킨 것을 말한다. 치자나무는 우리나라 중부이남, 중국, 대만, 일본 등 더운 지방의 깊은 산중에 자생한다. 열매는 3.5cm 정도 길이로 9월에 황홍색으로 익으며, 약용으로뿐만 아니라 염료로도 사용된다. 약리적으로 당뇨병, 고혈압, 불면증, 황달, 소변장애, 안구충혈, 결막염, 토혈, 자궁출혈, 혈뇨, 타박상 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 관절 타박상을 치료하고 해독효과를 갖는다. 치자 단독으로 또는 다른 약재와 함께 물에 달여 마시거나, 치자를 분말화하여 물 등에 개어 환부에 붙이기도 한다.Gardenia ( Gardenia Florida ) refers to the fruits of the gardenia tree belonging to the genus Apiaceae, which is an evergreen shrub, or dried ones. Gardenia grows wild in the deep mountains of hot regions such as central and southern Korea, China, Taiwan, and Japan. The fruit is about 3.5cm long and ripens to yellowish red in September, and is used not only medicinally but also as a dye. Pharmacologically, it is known to be effective for diabetes, hypertension, insomnia, jaundice, urinary disorders, eye congestion, conjunctivitis, hematemesis, uterine bleeding, hematuria, and bruises. It also treats joint bruises and has a detoxifying effect. Gardenia can be consumed alone or in combination with other medicinal substances in water, or powdered gardenia and mixed with water and attached to the affected area.

삼색제비꽃(Viola Tricolor)은 측막태좌목 제비꽃과 한해살이풀로 팬지라고도 한다. 높이는 10~15㎝이며 줄기는 곧게 자라거나 옆으로 뻗으며 가지가 많이 갈라진다. 밑부분 잎은 둥근 달걀꼴이며 윗부분의 잎은 약간 가늘고 긴 주걱꼴이다. 잎자루는 길고 큰 턱잎이 있다. 꽃은 3~6월에 잎겨드랑이에서 긴 꽃자루가 나와 그 끝에 1개씩 달린다. 꽃잎은 5개이고, 꽃의 지름은 3~12㎝이며, 소륜종(小輪種)·중륜종(中輪種)·대륜종(大輪種)이 있다. 흰색·노란색·자주색의 3색으로 피나 원예품종은 단색이나 오렌지색·갈청색·적색·청색 등 변화가 많다. 열매는 삭과이며 달걀꼴이다.The tricolor violet ( Viola Tricolor ) is also known as pansy, as it is an annual herb of the order Viola Tricolor. The height is 10~15cm, and the stem grows straight or stretches sideways, and the branches are divided a lot. The lower leaves are round egg-shaped, and the upper leaves are slightly thin and long spatula-shaped. The petiole has long and large stipules. In March~June, a long peduncle comes out from the leaf axil and hangs one by one at the end. There are 5 petals, and the diameter of the flower is 3~12cm, and there are small, middle, and large species. There are three colors of white, yellow, and purple, and the horticultural varieties of Pina have a single color, but there are many variations such as orange, brown blue, red and blue. The fruits are capsules and are egg-shaped.

본 발명의 피부 보습용 화장료 조성물에 있어, 상기 보습은, 바람직하게는 세포 보습, 세포 간 보습 중 선택되는 어느 하나 이상을 포함하는 것이 좋다. 본 발명에 따른 가수분해 맥아추출물, 가수분해 치자추출물, 가수분해 삼색제비꽃추출물을 포함하는 피부 보습용 화장료 조성물은 일 실시예에서 Aquaporin-3 및 Claudin-1 발현 확인을 통해 피부 세포 및 세포 간 보습에 우수한 효과를 보임을 확인하였다. 또한, 수분보유능에도 탁월한 효능을 보였다.In the cosmetic composition for moisturizing the skin of the present invention, the moisturizing agent preferably includes at least one selected from cellular moisturizing and intercellular moisturizing. The cosmetic composition for moisturizing the skin comprising the hydrolyzed malt extract, the hydrolyzed gardenia extract, and the hydrolyzed tricolor violet extract according to the present invention in one embodiment is effective for moisturizing skin cells and between cells by confirming the expression of Aquaporin-3 and Claudin-1. It was confirmed that an excellent effect was shown. In addition, it showed an excellent effect on water retention ability.

따라서, 맥아(Malt), 치자(Gardenia Florida), 삼색제비꽃(Viola Tricolor)의 가수분해추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 활용하여 우수한 피부 보습 효과를 갖는 다양한 제형으로 제공될 수 있다.Therefore, it can be provided in various formulations having an excellent skin moisturizing effect by using a cosmetic composition containing a hydrolyzed extract of malt, gardenia Florida , and Viola Tricolor as an active ingredient.

한편, 아쿠아포린 (Aquaporin, AQP)은 세포막에서 물의 수송을 담당하는 막단백질의 일종으로 이온과 용질의 이동을 방해하면서 선택적으로 세포 안팎으로 물 분자의 출입을 조절하는 수분통로로 알려졌다. 포유류에는 13개의 AQP (AQP-0 내지 AQP-12)이 존재하는데, AQP-1, 2, 4, 5 및 8은 주로 물을 선택적으로 운반하며, AQP-3, 7, 9 및 10은 물뿐만 아니라 글리세롤과 다른 작은 용질들을 운반하는 기능을 한다고 알려졌다. 특히, AQP-3는 표피의 기저층 각질형성세포에서 발현되는 것으로 보고되어 있으며, 각질형성세포에서 AQP-3의 활성화는 피부 깊숙이 수분을 전달하여 우수한 피부보습 효과를 얻을 수 있으리라 기대할 수 있다.On the other hand, aquaporin (AQP) is a type of membrane protein responsible for the transport of water in the cell membrane and is known as a water channel that selectively regulates the entry and exit of water molecules into and out of the cell while interfering with the movement of ions and solutes. There are 13 AQPs (AQP-0 to AQP-12) in mammals, with AQP-1, 2, 4, 5 and 8 primarily transporting water selectively, and AQP-3, 7, 9, and 10 transporting water as well as It is known that it functions to transport glycerol and other small solutes. In particular, it has been reported that AQP-3 is expressed in keratinocytes of the basal layer of the epidermis, and activation of AQP-3 in keratinocytes can be expected to deliver moisture deep into the skin, resulting in excellent skin moisturizing effect.

한편, 피부 내 보습 능력은 피부 장벽의 기능과 긴밀한 관계를 가지고 있으며, 피부 장벽기능은 노화 및 외부 자극에 의해 파괴될 수 있다. 피부 장벽 손상은 직접적인 피부 수분량 감소와 주름 생성을 유발하고, 이를 해결하기 위한 많은 연구가 진행되고 있다. 그 중 층을 구성하는 주된 세포인 각질형성세포 간의 밀착연접(tight junction, TJ)이 중요한 요인으로 작용하고 있다. On the other hand, the moisturizing ability in the skin has a close relationship with the function of the skin barrier, and the skin barrier function may be destroyed by aging and external stimuli. Damage to the skin barrier causes a direct decrease in skin moisture content and wrinkle formation, and many studies are being conducted to solve the problem. Among them, the tight junction (TJ) between keratinocytes, the main cells constituting the layer, is acting as an important factor.

밀착연접은 세포 간 부착을 연계하여 인체 내부의 수분 손실 및 외부 유해 물질의 침입을 막는 역할을 수행한다. 밀착연접 단백질로는 옥클루딘(Occludin), 클라우딘(Claudin), ZO-1 등이 알려졌으며, 대부분의 밀착연접 단백질은 표피의 과립세포층의 사이에 존재한다. 그 중 막투과단백질인 클라우딘(Claudin)-1은 고리 형태의 구조로 이루어져 세포 사이의 공간을 단단히 채워 세포 간 간격을 조절함으로써 수분의 이동 경로를 효율적으로 차단한다. 최근, 연구결과를 통해 클라우딘(Claudin)-1이 피부 장벽 기능에 있어 중요한 역할을 담당하고 있으며, 이는 피부 세포 간 보습에 영향을 미치는 것으로 보고되었다. Tight junctions link cell-to-cell adhesion to prevent water loss inside the human body and intrusion of external harmful substances. As tight junction proteins, Occludin, Claudin, ZO-1, etc. are known, and most of the tight junction proteins exist between the granular cell layers of the epidermis. Among them, claudin-1, a transmembrane protein, has a ring-shaped structure and effectively blocks the movement of water by filling the space between cells and controlling the intercellular space. Recently, through research results, it was reported that Claudin-1 plays an important role in the skin barrier function, which affects moisture between skin cells.

본 발명의 피부 보습용 화장료 조성물에 있어, 상기 추출은, 일 예로 용매 추출법, 초임계 추출법 및 초음파 추출법 중 선택되는 어느 하나의 추출법을 통해 추출하는 것일 수 있다. 이때, 상기 용매 추출법은, 일 예로 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 또는 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 추출용매를 이용하는 것일 수 있다.In the cosmetic composition for moisturizing the skin of the present invention, the extraction may be, for example, extraction through any one extraction method selected from a solvent extraction method, a supercritical extraction method, and an ultrasonic extraction method. In this case, the solvent extraction method is, for example, water, anhydrous or hydrous lower alcohol having 1-4 carbon atoms, propylene glycol, butylene glycol, glycerin, acetone, ethyl acetate, chloroform, butyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, hexane or Any one extraction solvent selected from the group consisting of mixtures thereof may be used.

특히, 본 발명의 일 실시예에서는 가수분해 맥아(Malt) 추출물, 가수분해 치자(Gardenia Florida) 추출물, 가수분해 삼색제비꽃(Viola Tricolor) 추출물 각각 및 이들 혼합물의 우수한 보습 효능을 확인하였으며, 상기 추출물을 각각 동일한 비율로 혼합하였을 시 매우 우수한 보습효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.In particular, in one embodiment of the present invention, the hydrolyzed malt extract, the hydrolyzed Gardenia Florida extract, the hydrolyzed Viola Tricolor extract, and the excellent moisturizing effect of each and a mixture thereof were confirmed, and the extract was When mixed in the same ratio, it was confirmed that a very good moisturizing effect was exhibited.

한편, 본 발명에 있어, 상기 혼합 추출물은, 바람직하게 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.0001~30.0중량%가 함유되는 것이 좋다. 더욱 바람직하게는 화장료 조성물 전체 중량에 대해서 0.01~10중량% 함유되는 것이 좋다. 혼합 추출물의 함량이 0.0001중량% 미만인 경우에는 피부 보습효과가 미미하고, 30.0중량% 초과할 경우 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과가 증가하지 않는다.On the other hand, in the present invention, the mixed extract is preferably contained in an amount of 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. More preferably, it is good to contain 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. When the content of the mixed extract is less than 0.0001% by weight, the skin moisturizing effect is insignificant, and when it exceeds 30.0% by weight, the distinct effect does not increase according to the content increase.

한편, 본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 본 발명의 혼합 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.On the other hand, the components included in the cosmetic composition of the present invention may include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the mixed extract of the present invention as an active ingredient, for example, antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and fragrances. It includes conventional adjuvants such as, and carriers.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing , oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, pack, massage cream, spray, etc., but is not limited thereto. More specifically, it may be prepared in the form of a flexible lotion, a nourishing lotion, a nourishing cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray, or a powder.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide, etc. This can be used.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as a carrier component, for example, water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene fatty acid esters of glycol, 1,3-butylglycol oil, glycerol fatty esters, polyethylene glycol or sorbitan.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, a suspending agent such as polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester , microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth may be used.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in particular, in the case of a spray, additional chlorofluorohydro It may contain a propellant such as carbon, propane/butane or dimethyl ether.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is cleansing containing surfactant, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate, Fatty acid amide ether sulfate, alkylamidobetaine, fatty alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester and the like can be used.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.When the cosmetic composition of the present invention is a soap, a surfactant-containing cleansing formulation, or a surfactant-free cleansing formulation, it may be applied to the skin and then wiped off, removed, or washed off with water. As a specific example, the soap is liquid soap, powder soap, solid soap, and oil soap, the surfactant-containing cleansing formulation is a cleansing foam, cleansing water, cleansing towel, and cleansing pack, and the surfactant-free cleansing formulation is a cleansing cream , cleansing lotion, cleansing water, and cleansing gel, but not limited thereto.

이하, 본 발명의 구성을 하기 실시예 및 실험예를 통해 구체적으로 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.Hereinafter, the configuration of the present invention will be described in detail through the following examples and experimental examples. However, the scope of the present invention is not limited only to the following examples and experimental examples, and includes modifications of technical ideas equivalent thereto.

[제조예 1: 가수분해 맥아(Malt) 추출물의 제조][Preparation Example 1: Preparation of hydrolyzed malt extract]

맥아(Malt) 100g을 분쇄하여 정제수 1,000g을 넣고 100℃에서 3시간 동안 열수 추출한 후, 400메쉬(mesh) 여과포로 여과하였다. 그 후, 감압 농축하여 '맥아 추출물'을 제조하였다.100 g of malt was ground, 1,000 g of purified water was added, and hot water was extracted at 100° C. for 3 hours, followed by filtration with a 400 mesh filter cloth. After that, it was concentrated under reduced pressure to prepare a 'malt extract'.

이후, 맥아 추출물 5g에 1M의 HCl 용액 500g을 첨가한 다음 25℃의 온도에서 3시간 동안 교반한 후, 1M의 NaOH 용액으로 중화시켜 '가수분해 맥아 추출물'을 제조하였다.Thereafter, 500 g of 1M HCl solution was added to 5 g of malt extract, followed by stirring at a temperature of 25° C. for 3 hours, followed by neutralization with 1 M NaOH solution to prepare 'hydrolyzed malt extract'.

[제조예 2: 가수분해 치자([Preparation Example 2: Hydrolyzed gardenia ( Gardenia FloridaGardenia Florida ) 추출물의 제조]) Preparation of extract]

치자(Gardenia Florida) 100g을 분쇄하여 정제수 1,000g을 넣고 100℃에서 3시간 동안 열수 추출한 후, 400메쉬(mesh) 여과포로 여과하였다. 그 후, 감압 농축하여 '치자 추출물'을 제조하였다.100 g of gardenia ( Gardenia Florida ) was crushed, 1,000 g of purified water was added, and hot water was extracted at 100° C. for 3 hours, followed by filtration with a 400 mesh filter cloth. Thereafter, it was concentrated under reduced pressure to prepare a 'Gardenia extract'.

이후, 치자 추출물 5g에 1M의 HCl 용액 500g을 첨가한 다음 25℃의 온도에서 3시간 동안 교반한 후, 1M의 NaOH 용액으로 중화시켜 '가수분해 치자 추출물'을 제조하였다.Thereafter, 500 g of a 1M HCl solution was added to 5 g of the gardenia extract, followed by stirring at a temperature of 25° C. for 3 hours, followed by neutralization with a 1M NaOH solution to prepare a 'hydrolyzed gardenia extract'.

[제조예 3: 가수분해 삼색제비꽃([Preparation Example 3: Hydrolyzed tricolor violet ( Viola TricolorViola Tricolor ) 추출물의 제조]) Preparation of extract]

삼색제비꽃(Viola Tricolor) 100g을 분쇄하여 정제수 1,000g을 넣고 100℃에서 3시간 동안 열수 추출한 후, 400메쉬(mesh) 여과포로 여과하였다. 그 후, 감압 농축하여 '삼색제비꽃 추출물'을 제작하였다. 100 g of Viola Tricolor was ground, 1,000 g of purified water was added, and hot water was extracted at 100° C. for 3 hours, followed by filtration with a 400 mesh filter cloth. After that, it was concentrated under reduced pressure to prepare a 'tricolor violet extract'.

이후, 삼색제비꽃 추출물 5g에 1M의 HCl 용액 500g을 첨가한 다음 25℃의 온도에서 3시간 동안 교반 후, 1M의 NaOH 용액으로 중화시켜 '가수분해 삼색제비꽃 추출물'을 제조하였다.Thereafter, 500 g of 1M HCl solution was added to 5 g of Tricolor violet extract, stirred at 25° C. for 3 hours, and neutralized with 1M NaOH solution to prepare 'hydrolyzed Tricolor violet extract'.

[실시예 1 및 비교예 1 내지 6: 가수분해 맥아(Malt) 추출물, 가수분해 치자([Example 1 and Comparative Examples 1 to 6: Hydrolyzed malt extract, hydrolyzed gardenia ( Gardenia FloridaGardenia Florida ) 추출물 및 가수분해 삼색제비꽃() extract and hydrolysis of tricolor violet ( Viola TricolorViola Tricolor ) 추출물 혼합물의 제조]) preparation of extract mixture]

상기 제조예 1 내지 3에서 제조한, 가수분해 맥아(Malt) 추출물, 가수분해 치자(Gardenia Florida) 추출물 및 가수분해 삼색제비꽃(Viola Tricolor) 추출물의 혼합물을 하기 표 1의 조성 비율로 혼합하여, DMSO에 100㎎/㎖의 농도로 녹여 하기 실험에 사용하였다. The mixture of the hydrolyzed malt extract, the hydrolyzed Gardenia Florida extract and the hydrolyzed Viola Tricolor extract prepared in Preparation Examples 1 to 3 was mixed in the composition ratio of Table 1 below, and DMSO It was dissolved in a concentration of 100 mg/ml and used in the following experiment.

성분ingredient 실시예 1Example 1 비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 비교예 4Comparative Example 4 비교예 5Comparative Example 5 비교예 6Comparative Example 6 가수분해 맥아 추출물Hydrolyzed Malt Extract 1One 33 -- -- 1.51.5 1.51.5 -- 가수분해 치자 추출물Hydrolyzed Gardenia Extract 1One -- 33 -- 1.51.5 -- 1.51.5 가수분해 삼색제비꽃 추출물Hydrolyzed Tricolor Violet Extract 1One -- -- 33 -- 1.51.5 1.51.5

[실험예 1: 세포 생존율 측정][Experimental Example 1: Measurement of cell viability]

본 실험에서는 상기 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물이 세포에 미치는 독성을 측정하고자 하였다. 이를 위하여, MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyl tetrazolium bromide) 시약을 이용하여 세포 생존율을 측정하였다.In this experiment, the toxicity of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 on cells was measured. For this, cell viability was measured using MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyl tetrazolium bromide) reagent.

구체적으로, 인간각질형성세포(HaCaT, keratinocyte)를 96웰 플레이트에 2×104 cells/well의 농도로 분주하여, 37℃, 5% CO2 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거하고, 상기 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물을 농도별로(1, 3, 10, 30 및 100 ㎍/㎖) 계열 희석하여 24시간 동안 배양하였다.Specifically, human keratinocytes (HaCaT, keratinocytes) were aliquoted in a 96-well plate at a concentration of 2×10 4 cells/well, and cultured at 37° C., 5% CO 2 condition for 24 hours. The culture medium was removed, and the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixtures of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 were serially diluted by concentration (1, 3, 10, 30 and 100 μg/ml) and cultured for 24 hours. did

그 후, 5㎎/㎖로 녹인 MTT 시약을 20㎕ 넣고, 37℃, 5% CO2 조건에서 2시간 동안 반응시켰다. 배지를 완전히 제거한 뒤, 생성된 포르마잔(formazan)을 DMSO 100㎕를 넣어 완전히 녹아준 뒤, 540nm에서 흡광도를 측정하였다. Then, 20 μl of MTT reagent dissolved at 5 mg/ml was added, and reacted at 37° C., 5% CO 2 conditions for 2 hours. After the medium was completely removed, 100 μl of DMSO was added to the generated formazan to completely dissolve, and absorbance was measured at 540 nm.

실험 결과, 실시예 1의 혼합물과 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6의 혼합물은 100㎍/㎖의 농도까지 세포독성을 보이지 않았다 (도 1). 도 1은 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물이 세포에 미치는 독성을 측정한 결과이다.As a result of the experiment, the mixture of Example 1 and the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 did not show cytotoxicity up to a concentration of 100 μg/ml ( FIG. 1 ). 1 is a result of measuring the toxicity of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or a mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 on cells.

[실험예 2: 아쿠아포린(Aquaporin)-3 발현 확인을 통한 세포 보습 효과 확인][Experimental Example 2: Confirmation of cell moisturizing effect through confirmation of expression of Aquaporin-3]

세포수준에서의 보습효과를 평가하기 위하여, 세포 내 수분 흡수에 관여하는 채널인 AQP-3에 대한 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 영향을 확인하였다. 양성 대조군으로는 덱사메타존(Dexamethasone)을 사용하였다.In order to evaluate the moisturizing effect at the cellular level, the effect of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 on AQP-3, a channel involved in intracellular water absorption, was confirmed. As a positive control, dexamethasone was used.

또한, HaCaT 세포를 6웰 플레이트에 분주하고 80% 정도 세포가 찼을 때, 배지에 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물을 100㎍/㎖의 농도로 처리하였다. 이후, 24시간 동안 배양시킨 뒤 세포를 수집한 후, 1× 세포 용해 버퍼(cell lysis buffer)를 이용하여 단백질을 분리하였다.In addition, when HaCaT cells were dispensed in a 6-well plate and the cells were filled to about 80%, the medium was treated with the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 at a concentration of 100 μg/ml. . Thereafter, after culturing for 24 hours, cells were collected, and proteins were isolated using 1× cell lysis buffer.

그 후, BCA 어세이(assay)로 단백질을 정량하여 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동 시켰다. 이후, PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시켜 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1시간 동안 블록킹(blocking)하였다. 1차 항체(AQP-3, Santa cruz, USA)를 4℃에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, TBS/T로 세척하고 ECL 반응 키트를 이용하여 Chemi Doc 기기로 밴드를 확인하였다. 각 밴드의 정량화는 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 AQP-3 발현량을 계산하였다.Then, the protein was quantified by BCA assay and a certain amount of protein was electrophoresed on a 10% SDS-PAGE gel. Thereafter, it was transferred to a PVDF membrane and blocked for 1 hour using 5% skim milk. After reacting the primary antibody (AQP-3, Santa cruz , USA) at 4°C overnight (over night), the HRP-conjugated secondary antibody was reacted at room temperature for 2 hours. After that, it was washed with TBS/T and the band was confirmed by Chemi Doc instrument using the ECL reaction kit. Quantification of each band was quantified based on the expression of beta-actin (β-actin) to calculate the expression level of AQP-3.

실험 결과, 양성대조군인 덱사메타존은 약 73.0%의 AQP-3 발현이 증가하였고, 실시예 1의 혼합물은 100㎍/㎖ 농도에서 약 113.2%의 AQP-3 발현이 증가하였다. 비교예 2의 추출물은 62.1%, 비교예 3의 추출물은 78.4%, 비교예 4의 혼합물은 27.2%, 비교예 5의 혼합물은 61.5%, 비교예 6의 혼합물은 59.8%의 AQP-3 발현을 증가시켰다. 그 외 비교예 1의 추출물에서는 AQP-3 발현에 유의한 증가가 나타나지 않았다. 상기 결과에 따라, 실시예 1의 혼합물이 세포 보습에 가장 효과적임을 확인할 수 있었다 (도 2). 도 2는 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 아쿠아포린(Aquaporin)-3 발현 조절을 통한 세포 보습 효과를 확인한 결과이다.As a result of the experiment, dexamethasone, a positive control, increased AQP-3 expression by about 73.0%, and the mixture of Example 1 increased AQP-3 expression by about 113.2% at a concentration of 100 μg/ml. The extract of Comparative Example 2 was 62.1%, the extract of Comparative Example 3 was 78.4%, the mixture of Comparative Example 4 was 27.2%, the mixture of Comparative Example 5 was 61.5%, the mixture of Comparative Example 6 was 59.8% of AQP-3 expression increased. In the other extracts of Comparative Example 1, there was no significant increase in AQP-3 expression. According to the above results, it was confirmed that the mixture of Example 1 was most effective for moisturizing the cells ( FIG. 2 ). 2 is a result of confirming the cell moisturizing effect through the control of Aquaporin-3 expression of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1.

[실험예 3: Claudin-1 발현 확인을 통한 세포 간 보습 효과 확인][Experimental Example 3: Confirmation of intercellular moisturizing effect through confirmation of Claudin-1 expression]

피부 내부의 수분 손실에 관여하는 클라우딘(Claudin)-1에 대한 상기 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 세포 간 보습 효과를 다음과 같은 방법으로 측정하였다.The intercellular moisturizing effect of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 on Claudin-1 involved in moisture loss inside the skin was measured as follows.

HaCaT 세포를 6웰 플레이트에 분주하고 80% 정도 세포가 찼을 때 배지에 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물을 100㎍/㎖의 농도로 처리하였다. 이후, 24시간 동안 배양시킨 뒤 세포를 수집한 후, 1× 세포 용해 버퍼(cell lysis buffer)를 이용하여 단백질을 분리하였다. 그 후, BCA 어세이(assay)로 단백질을 정량하여 일정량의 단백질을 10% SDS-PAGE 겔에서 전기영동 시켰다. 이후, PVDF 멤브레인에 전이(transfer)시켜 5% 스킴밀크(skim milk)를 이용하여 1시간 동안 블록킹(blocking)하였다. 1차 항체(Claudin-1, cell signaling, USA)를 4℃에서 오버나잇(over night) 반응시킨 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 그 후, TBS/T로 세척하고 ECL 반응 키트를 이용하여 Chemi Doc 기기로 밴드를 확인하였다. 각 밴드의 정량화는 베타-액틴(β-actin)의 발현을 기준으로 정량하여 클라우딘(Claudin)-1 발현량을 계산하였다.HaCaT cells were dispensed in a 6-well plate, and when the cells were about 80% full, the extract of Comparative Examples 1 to 3 or a mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 was treated at a concentration of 100 μg/ml in the medium. Thereafter, after culturing for 24 hours, cells were collected, and proteins were isolated using 1× cell lysis buffer. Then, the protein was quantified by BCA assay and a certain amount of protein was electrophoresed on a 10% SDS-PAGE gel. Thereafter, it was transferred to a PVDF membrane and blocked for 1 hour using 5% skim milk. After reacting the primary antibody (Claudin-1, cell signaling , USA) at 4°C overnight (over night), the HRP-conjugated secondary antibody was reacted at room temperature for 2 hours. After that, it was washed with TBS/T and the band was confirmed by Chemi Doc instrument using the ECL reaction kit. Quantification of each band was quantified based on the expression of beta-actin (β-actin) to calculate the expression level of claudin-1.

실험 결과, 실시예 1의 혼합물은 100㎍/㎖ 농도에서 약 112.5% 클라우딘(Claudin)-1의 발현이 증가하였다. 비교예 1의 추출물은 62.2%, 비교예 2의 추출물은 13.4%, 비교예 4의 혼합물은 61.3%, 비교예 5의 혼합물은 67.8%, 비교예 6의 혼합물은 22.9% 클라우딘(Claudin)-1의 발현을 증가시켰다. 비교예 3의 추출물의 경우, 클라우딘(Claudin)-1 발현에 유의한 증가가 나타나지 않았다. 따라서, 피부 세포 간 보습에 실시예 1의 혼합물이 가장 효과적임을 확인할 수 있었다 (도 3). 도 3은 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 클라우딘(Claudin)-1 발현 조절을 통한 세포 간 보습 효과를 확인한 결과이다.As a result of the experiment, the mixture of Example 1 increased the expression of about 112.5% Claudin-1 at a concentration of 100 μg/ml. The extract of Comparative Example 1 was 62.2%, the extract of Comparative Example 2 was 13.4%, the mixture of Comparative Example 4 was 61.3%, the mixture of Comparative Example 5 was 67.8%, the mixture of Comparative Example 6 was 22.9% Claudin-1 increased the expression of In the case of the extract of Comparative Example 3, there was no significant increase in claudin-1 expression. Therefore, it was confirmed that the mixture of Example 1 was most effective for moisturizing between skin cells ( FIG. 3 ). 3 is a result confirming the moisturizing effect between cells through control of Claudin-1 expression of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1.

[실험예 4: 수분 보유(Water Holding)능 확인][Experimental Example 4: Confirmation of Water Holding Ability]

본 실험에서는 상기 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 수분 보유 능력(Water holding capacity)을 측정하고자 하였다. 비교 샘플로는 물에 히아루론산(Hyaluronic acid: HA)을 첨가한 용액을 이용하였다.In this experiment, the water holding capacity of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 was measured. As a comparative sample, a solution in which hyaluronic acid (HA) was added to water was used.

이를 위하여, 일정한 온도에서 실험이 진행되었으며, 상기의 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물을 페트리디쉬에 각 20㎖씩 넣어 준 뒤, 시간별로(0, 2, 4, 6, 12 및 24시간 후) 정밀 저울로 무게를 측정하여 하기 표 2에 기록하였다.To this end, the experiment was carried out at a constant temperature, and 20 ml of each of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1 were put in a Petri dish, and each time (0, 2 , after 4, 6, 12 and 24 hours) were measured with a precision scale and recorded in Table 2 below.

TimeTime
(시간)(hour)
VehicleVehicle
(HA)(HA)
실시예 1Example 1 비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 비교예 4Comparative Example 4 비교예 5Comparative Example 5 비교예 6Comparative Example 6
00 21934.021934.0 23562.123562.1 24401.324401.3 23468.723468.7 22993.222993.2 21395.721395.7 22822.622822.6 23250.223250.2 22 21276.021276.0 23185.123185.1 23766.923766.9 22905.522905.5 22372.422372.4 20903.620903.6 22297.722297.7 22785.222785.2 44 20508.320508.3 22737.422737.4 23010.423010.4 22318.822318.8 21590.621590.6 20368.720368.7 21658.721658.7 22227.222227.2 66 19301.919301.9 21936.321936.3 21668.321668.3 21121.921121.9 20394.920394.9 19363.119363.1 20563.220563.2 21181.021181.0 1212 17108.517108.5 20876.020876.0 19789.419789.4 19526.019526.0 18440.518440.5 17972.317972.3 19011.319011.3 20041.720041.7 2424 13379.713379.7 18402.018402.0 16031.616031.6 16287.316287.3 14991.514991.5 15233.715233.7 15930.215930.2 16972.716972.7

실험 결과, 실시예 1(21.9%), 비교예 6(27.0%), 비교예 4(28.8%), 비교예 5(30.2%), 비교예 2(30.6%), 비교예1(34.3%), 비교예 3(34.8%), 물(HA)(39.0%) 순으로 수분감소율이 적은 것으로 나타났다.Experimental results, Example 1 (21.9%), Comparative Example 6 (27.0%), Comparative Example 4 (28.8%), Comparative Example 5 (30.2%), Comparative Example 2 (30.6%), Comparative Example 1 (34.3%) , Comparative Example 3 (34.8%), water (HA) (39.0%) was found to have a small moisture reduction in the order.

즉, 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6의 혼합물과 비교하였을 때, 실시예 1의 혼합물이 물과의 결합력이 우수하여 증발된 수분의 양이 가장 적은 것을 확인할 수 있었다 (도 4). 도 4는 비교예 1 내지 3의 추출물 또는 비교예 4 내지 6 및 실시예 1의 혼합물의 수분감소율을 나타낸 결과이다.That is, when compared with the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6, it was confirmed that the mixture of Example 1 had excellent water binding force and thus the amount of evaporated moisture was the smallest (Fig. 4). ). 4 is a result showing the moisture reduction rate of the extracts of Comparative Examples 1 to 3 or the mixture of Comparative Examples 4 to 6 and Example 1.

[제형예 1: 화장료 조성물의 제조][Formulation Example 1: Preparation of cosmetic composition]

상기 실시예 1의 혼합물인, 가수분해 맥아(Malt) 추출물, 가수분해 치자(Gardenia Florida) 추출물 및 가수분해 삼색제비꽃(Viola Tricolor) 추출물이 각각 0.1 중량% 포함된 화장료 조성물을 하기 표 3의 조성으로 제조하여 이를 제형예 1라 하였으며, 대조군으로 비교제형예 1을 제조하였다.A cosmetic composition containing 0.1 wt% of each of the hydrolyzed malt extract, the hydrolyzed Gardenia Florida extract, and the hydrolyzed Viola Tricolor extract, which is the mixture of Example 1, was prepared as shown in Table 3 below. This was called Formulation Example 1, and Comparative Formulation Example 1 was prepared as a control.

성분ingredient 제형예 1Formulation Example 1
(중량%)(weight%)
비교제형예 1Comparative Formulation Example 1
(중량%)(weight%)
가수분해 맥아 추출물Hydrolyzed Malt Extract 0.10.1 -- 가수분해 치자 추출물Hydrolyzed Gardenia Extract 0.10.1 -- 가수분해 삼색제비꽃 추출물Hydrolyzed Tricolor Violet Extract 0.10.1 -- 1,3-BG1,3-BG 10.0 10.0 10.0 10.0 글리세린glycerin 5.1 5.1 5.1 5.1 프로필렌글리콜propylene glycol 4.2 4.2 4.2 4.2 토코페릴아세테이트tocopheryl acetate 3.0 3.0 3.0 3.0 유동파라핀liquid paraffin 4.6 4.6 4.6 4.6 트리에탄올아민triethanolamine 1.0 1.0 1.0 1.0 스쿠알란squalane 3.1 3.1 3.1 3.1 마카다미아너트오일Macadamia Nut Oil 2.5 2.5 2.5 2.5 폴리솔베이트polysorbate 1.6 1.6 1.6 1.6 솔비탄세스퀴롤레이트Sorbitan sesquirolate 1.6 1.6 1.6 1.6 프로필파라벤Propylparaben 0.6 0.6 0.6 0.6 카르복실비닐폴리머carboxyl vinyl polymer 1.5 1.5 1.5 1.5 incense 미량a very small amount 미량a very small amount 방부제antiseptic 미량a very small amount 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량remaining amount 잔량remaining amount total 100.0 100.0 100.0 100.0

[실험예 5: 피부 수분 함유량 측정][Experimental Example 5: Measurement of skin moisture content]

본 실험에서는 상기 제형예 1의 피부 수분 함유량을 확인하고자 하였다. 이를 위하여, 피부 수분 함유량을 측정함으로써 피부 보습력을 평가하였다. 피부수분 측정기에 의한 보습력 측정은 피부표면(예, 각질층)의 수분함량을 정전부하용량 계측법(capacitance measurement)으로 측정하는 장비로서, 피부표면 수분함량 측정 시 이미 국소에 도포된 시료의 영향을 받지 않으며, 탐침센서 접촉부위 아래로 30~40㎛ 깊이의 일정한 측정레벨을 유지하는 장점이 있다. 측정단위는 기기에서 부여하는 임의의 단위(Arbitary unit, A.U.)로 표시된다.In this experiment, it was attempted to confirm the skin moisture content of Formulation Example 1. To this end, the skin moisturizing power was evaluated by measuring the skin moisture content. Moisturizing power measurement by a skin moisture meter is a device that measures the moisture content of the skin surface (eg, stratum corneum) by means of capacitance measurement. , it has the advantage of maintaining a constant measurement level at a depth of 30-40 μm below the probe sensor contact area. The unit of measurement is displayed in an arbitrary unit (Arbitary unit, A.U.) assigned by the device.

또한, 실내온도 20~25℃, 상대습도 40~55%로 유지시킨 항온항습 조건에서 피부수분측정기(Corneometer)를 이용하여 시료 도포 전 초기 값을 측정하고 상기 제형예 1 및 비교제형예 1을 도포하였다. 이후, 시간별로(10, 30, 60, 90 및 180분 후) 피부수분 측정기를 이용하여 피부 수분 함유량을 측정하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다.In addition, the initial value was measured before application of the sample using a skin moisture meter (corneometer) under constant temperature and humidity conditions maintained at room temperature of 20 to 25° C. and relative humidity of 40 to 55%, and Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1 were applied. did Thereafter, the skin moisture content was measured using a skin moisture meter for each time (after 10, 30, 60, 90, and 180 minutes), and the results are shown in Table 4.

(단위: A.U.)(Unit: A.U.) 0 min0 min 10 min10 min 30 min30 min 60 min60 min 90 min90 min 180 min180 min 제형예 1Formulation Example 1 35.535.5 46.546.5 45.845.8 43.543.5 40.440.4 38.138.1 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 35.935.9 40.740.7 38.438.4 36.436.4 35.435.4 36.136.1

실험 결과, 제형예 1은 비교제형예 1에 비하여 피부 수분 함유량이 크게 증가함을 확인할 수 있었다 (도 5). 도 5는 제형예 1과 비교제형예 1의 적용 시, 피부 수분 함유량을 측정한 결과이다.As a result of the experiment, it was confirmed that Formulation Example 1 significantly increased skin moisture content compared to Comparative Formulation Example 1 ( FIG. 5 ). 5 is a result of measuring the skin moisture content when applying Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1.

[실험예 6: 경피 수분 손실량 측정][Experimental Example 6: Measurement of transdermal water loss]

본 실험에서는 상기 제형예 1의 경피 수분 손실량(TEWL, trans epidermal water loss)을 확인하고자 하였다. 경피 수분 손실량은 피부의 장벽기능이 상실되었을 때, 피부 내부의 수분이 증발되는 것을 의미한다. 수분 증발량의 평가는 시간당 단위면적에서 증발하는 g/h/m2으로 표시된다.In this experiment, the amount of trans epidermal water loss (TEWL, trans epidermal water loss) of Formulation Example 1 was to be confirmed. The amount of transdermal water loss means that moisture inside the skin is evaporated when the barrier function of the skin is lost. The evaluation of water evaporation is expressed as g/h/m 2 that evaporates per unit area per hour.

테이프를 이용하여 팔 하박부 안쪽의 피부를 스트래핑 방법으로 피부의 각질을 인위적으로 제거한 후, 상기 제형예 1 및 비교제형예 1을 도포하였다. 이후, 시간별로(10, 30, 60, 90 및 180분 후) 경피 수분 손실량 측정기(Tewameter TM 210, Courage and Khazaka, Germany)를 이용하여 피부의 수분 증발량을 측정하였으며, 그 결과를 표 5에 나타내었다. After using a tape to artificially remove dead skin cells from the skin by strapping the skin on the inside of the forearm, Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1 were applied. Thereafter, the amount of evaporation of water in the skin was measured by time (after 10, 30, 60, 90 and 180 minutes) using a transdermal water loss meter (Tewameter TM 210, Courage and Khazaka, Germany), and the results are shown in Table 5 it was

(단위: g/m(Unit: g/m 22 /h)/h) 0 min0 min 10 min10 min 30 min30 min 60 min60 min 90 min90 min 180 min180 min 제형예 1Formulation Example 1 10.410.4 20.720.7 12.412.4 11.111.1 10.810.8 10.110.1 비교제형예 1Comparative Formulation Example 1 10.910.9 21.421.4 18.418.4 16.516.5 13.413.4 12.112.1

실험 결과, 제형예 1은 비교제형예 1에 비하여 경피 수분 손실이 매우 낮음을 확인할 수 있었다 (도 6). 도 6은 제형예 1과 비교제형예 1의 적용 시, 경피 수분 손실량을 측정한 결과이다.As a result of the experiment, it was confirmed that Formulation Example 1 had a very low transdermal water loss compared to Comparative Formulation Example 1 ( FIG. 6 ). 6 is a result of measuring the amount of transdermal water loss when applying Formulation Example 1 and Comparative Formulation Example 1.

Claims (4)

가수분해 맥아(Malt) 추출물, 가수분해 치자(Gardenia Florida) 추출물 및 가수분해 삼색제비꽃(Viola Tricolor) 추출물을 동일비율로 함유하되,
상기 가수분해추출물은 맥아, 치자 및 삼색제비꽃 각각을 열수추출한 후 산 가수분해한 것을 특징으로 하는 피부 보습용 화장료 조성물.
Hydrolyzed malt extract, hydrolyzed Gardenia Florida extract, and hydrolyzed Viola Tricolor extract are contained in equal proportions,
The hydrolyzed extract is a cosmetic composition for moisturizing the skin, characterized in that malt, gardenia, and tricolor violet are each extracted with hot water and then acid hydrolyzed.
제1항에 있어서,
상기 보습은,
세포 보습, 세포 간 보습 중 선택되는 어느 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 보습용 화장료 조성물.
According to claim 1,
The moisturizing is
A cosmetic composition for skin moisturizing, comprising at least one selected from cell moisturizing and intercellular moisturizing.
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