KR101987167B1 - Cosmetic composition for improving skin hydration and skin barrier function - Google Patents

Cosmetic composition for improving skin hydration and skin barrier function Download PDF

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Abstract

The present invention relates to a cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier strengthening. The present invention contains 0.1 to 10 wt% of complex extract of hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed as an active ingredient, relative to the total weight of the cosmetic composition. The cosmetic composition comprising the complex extract of hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed as an active ingredient is safe by containing a natural extract, the synergistic effect of which makes excellent skin moisturizing and skin barrier strengthening effect.

Description

피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물 {Cosmetic composition for improving skin hydration and skin barrier function}Cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier strengthening {Cosmetic composition for improving skin hydration and skin barrier function}

본 발명은 본 발명은 가수분해 효소처리 옥수수속대(Zea mays kernel), 맥아(malt), 아마씨(flax seed) 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 효소 분해하여 제조된 천연 유래의 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 피부보습용 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition containing a hydrolytic enzyme-treated corncob ( Zea mays kernel), malt, flax seed complex extract as an active ingredient, specifically prepared by enzymatic decomposition The present invention relates to a cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier reinforcing, comprising a natural extract of corncob, malt and flaxseed as extracts.

피부는 인간의 신체 기관 중 가장 넓은 표면적을 가지고 있을 뿐만 아니라 가장 외곽에 위치하고 있어 병원성 세균, 오염물질, 자외선, 열 등 외부로부터 오는 다양한 충격으로부터 신체를 보호하며, 체내의 노폐물을 배설하고 수분을 조절을 통해 체온을 유지하도록 한다. 또한 피부는 미용적인 측면에서도 매우 중요한 역할을 하는데, 촉촉하고 윤기있으며 탄력있는 건강한 피부를 갖는 것은 모든 여성들이 원하는 바이며 실제로 인간의 자아 존중감과 함께 삶의 만족도 측면에서 긍정적인 요소로 작용한다. 건강한 피부는 피부장벽을 강화하고 보습력을 증대시킴으로서 지속할 수 있다. 피부의 최외각층인 표피(epidermis)의 각질층(stratum corneum)은 외부 유해환경에 대한 장벽 역할을 수행하고 피부의 수분증발을 방지하는 중요한 역할을 한다. 각질층은 두께 약 0.06~1.00㎜로 10~20% 정도의 수분을 함유하고 있으며, 각질층의 수분이 10% 이하로 떨어지게 되면 피부가 건조해지고 거칠어지며 피부 장벽에 이상이 발생하여 외부로의 수분 손실량이 증가하게 된다. 특히 날씨, 온도, 습도, 세정습관 등에 의해 각질층의 수분이 부족한 상태가 되면 피부 장벽 기능에 이상이 발생하게 되고 이에 따라 피부가 건조하게 되어 피부건강을 해치게 된다. 따라서 건강하고 아름다운 피부는 각질층에 충분한 수분을 공급함으로서 정상적으로 유지될 수 있으며, 이를 위해 보습제 등을 충분하게 지속적으로 발라주는 것이 중요하다. The skin has the largest surface area among human body organs as well as the outermost area, protecting the body from various external shocks such as pathogenic bacteria, pollutants, ultraviolet rays, and heat, and excreting waste products and regulating moisture in the body. Keep your body temperature through. In addition, skin plays a very important role in cosmetic aspects. Having a healthy skin that is moist, shiny and elastic is what every woman wants and actually acts as a positive factor in terms of human self-esteem and life satisfaction. Healthy skin can be sustained by strengthening the skin barrier and increasing moisture. The stratum corneum of the epidermis, the outermost layer of the skin, acts as a barrier to the external harmful environment and plays an important role in preventing moisture evaporation of the skin. The stratum corneum has a thickness of about 0.06 ~ 1.00mm and contains about 10 ~ 20% moisture.When the moisture of the stratum corneum falls below 10%, the skin dries and becomes rough, abnormality occurs on the skin barrier and the amount of water loss to the outside Will increase. In particular, when the moisture of the stratum corneum is insufficient due to weather, temperature, humidity, cleaning habits, and the like, an abnormality occurs in the function of the skin barrier, thereby drying the skin and damaging skin health. Therefore, a healthy and beautiful skin can be maintained normally by supplying sufficient moisture to the stratum corneum, it is important to apply a sufficient moisturizer continuously for this purpose.

현재 화장품에 널리 사용되고 있는 보습제로는 글리세롤(glycerol), 히알루론산(hyaluronic acid), 실리콘 오일(silicon oil) 등이 있다. 글리세롤은 한 분자에 3개의 히드록실기(hydroxyl group)를 가지고 있어 물 분자와의 친화성이 높다. 그러므로 화장품 자체의 수분이 증발하는 것을 막을 뿐만 아니라 피부에 수분을 공급하고 지속시키는 역할을 한다. 하지만 피부 탈수증, 알레르기, 피부자극 등을 유발할 수 있다는 보고가 있어 주의가 요구된다. 히알루론산은 다량의 물을 보유할 수 있고 인체 피부에도 존재하는 성분이라 피부친화적 화장품 보습원료로 많이 사용되는 반면, 원료가 고가이기 때문에 실제 유효함량만큼을 제품에 적용시키기 어렵다는 단점이 있다. 또한, 실리콘오일은 밀폐형 보습제의 일종으로 끈적임 없이 피부에 막을 형성하는 특징을 가지고 있으나, 최근 소비자들 사이에서 합성오일에 대한 부정적인 인식이 늘어 무 실리콘 제품에 대한 요구도가 커진 편이다. 그러므로 피부에 수분을 제공할 수 있으고 피부장벽을 개선할 수 있는 경제적이면서도 안전한 천연 보습제 개발이 필요한 실정이다.Current moisturizers widely used in cosmetics include glycerol, hyaluronic acid, silicone oil, and the like. Glycerol has three hydroxyl groups in one molecule, so it has high affinity with water molecules. Therefore, it not only prevents the moisture of the cosmetic itself from evaporating but also serves to hydrate and sustain the skin. However, there is a report that can cause skin dehydration, allergies, skin irritation, so be careful. Hyaluronic acid is a component that can hold a large amount of water and is also present in human skin, and is widely used as a moisturizing material for skin-friendly cosmetics. However, since hyaluronic acid is expensive, it is difficult to apply the effective amount to the product. In addition, silicone oil is a type of hermetic moisturizer that has a feature of forming a film on the skin without stickiness, but recently, there is a growing demand for silicone products without the negative recognition of synthetic oil among consumers. Therefore, there is a need for the development of an economical and safe natural moisturizer that can provide moisture to the skin and improve the skin barrier.

옥수수(Zea mays), 맥아(malt), 아마씨(flax seed)는 기능성 식품소재로서 뿐만 아니라 고기능성 천연 화장품 소재로서도 연구가 활발히 이루어지고 있다. 본 특허에서는 옥수수 중 속대(kernel)을 활용하고자 하며, 옥수수속대의 피부관련 특허로는 대한민국 공개특허 제10-2016-0036202호(발명의 명칭: 옥수수 속대 추출물을 유효성분으로 함유하는 자외선 차단용 화장료 조성물)가 개시되어 있다. 또한, 맥아와 관련된 특허로는 대한민국 공개특허 제10-1998-0087818호(발명의 명칭: 피지제거에 맥아엿을 이용하는 방법), 대한민국 공개특허 제10-2002-0077616호(발명의 명칭: 엿기름(맥아)을 이용한 피부외용제) 등이 개시되어 있으며, 맥아를 유효성분으로 하는 미백, 아토피 개선, 피부자극 완화용 피부외용제에 대한 인체시험결과를 보여주고 있으나 맥아가 피보습 및 피부장벽에 미치는 영향에 대해서는 상세한 내용을 언급하고 있지 않다. 또한, 대한민국 공개특허 제10-2004-0059270호(발명의 명칭: 세코이소라리시레시놀의 제조방법 및 이를유효성분으로 함유하는 화장료 조성물)에는 아마씨 추출물에 산, 알칼리 또는 효소반응을 시켜 피부흡수율이 높고 항산화 효능을 갖는 세코이소라리시레시놀을 제조방법이 개시되어 있고, 대한민국 등록특허 제10-1440844호(발명의 명칭: 아마씨 점액 또는 점액 추출물을 함유하는 화장료 조성물)에는 아마씨의 점액 또는 점액 추출물을 함유하여 피부 보습용 화장료가 개시되어 있다.Corn ( Zea mays ), malt (malt) and flax seed (research) is actively researched not only as a functional food material but also as a highly functional natural cosmetic material. In this patent, to use the corn kernels (kernel), the skin-related patents of corn cob as Republic of Korea Patent Publication No. 10-2016-0036202 (Invention name: sunscreen cosmetics containing corn cob extract as an active ingredient Compositions) are disclosed. In addition, as a patent related to malt, Korean Patent Publication No. 10-1998-0087818 (name of the invention: a method of using malt syrup to remove sebum), Korean Patent Publication No. 10-2002-0077616 (name of the invention: malt ( External malt using malt), etc., and the results of human tests on skin external agent for whitening, improving atopy, and alleviating skin irritation using malt as active ingredients, but the effect of malt on skin moisturizing and skin barrier No details are mentioned. In addition, the Republic of Korea Patent Publication No. 10-2004-0059270 (name of the invention: a method for producing secoisolarysirinol and a cosmetic composition containing the same as an active ingredient) in the flaxseed extract is subjected to acid, alkali or enzyme reaction skin absorption rate A method for producing secoisolarysirinol having high anti-oxidant efficacy is disclosed, and Korean Patent No. 10-1440844 (name of the invention: cosmetic composition containing flaxseed mucus or mucus extract) contains mucus or mucus extract of flaxseed. The cosmetics for skin moisturizing are disclosed.

본 발명자들은 피부 보습력을 증진시키고 피부장벽을 강화하는는 천연소재 유래의 복합추출물을 발굴하고자 연구를 진행하였으며, 스크리닝을 통해 최종적으로 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 3종의 소재를 선택하였다. 이들을 가수분해효소 처리하여 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물의 경우에 피부 보습 및 피부장벽 관련 인자들의 발현 또는 활성 증가 효과가 크게 증진되는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.The present inventors conducted research to discover complex extracts derived from natural materials that enhance skin moisturizing power and strengthen skin barrier, and finally selected three materials of corncob, malt and flaxseed through screening. The present invention was completed by confirming that the hydrolytic enzyme treatment greatly enhanced the expression or activity of skin moisturizing and skin barrier-related factors in the case of corncob, malt and flaxseed extracts.

상기와 같은 문제점을 해결하고자 창출된 본 발명의 목적은, 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 증진 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.An object of the present invention created to solve the above problems, to provide a cosmetic composition for enhancing skin moisturizing and skin barrier reinforcing containing a hydrolase treatment corn cob, malt and flaxseed complex extract as an active ingredient.

이러한 본 발명의 목적은, 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합추출물을 유효성분으로서 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1~10 중량% 함유하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물에 의해 달성될 수 있다.The object of the present invention can be achieved by a cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier reinforcing containing 0.1 to 10% by weight relative to the total weight of the cosmetic composition as the active ingredient hydrolyzed corncob, malt and flaxseed composite extract. have.

바람직하게는, 본 발명상기 가수분해 효소는 β-글루코시다아제인 것을 특징으로 한다.Preferably, the hydrolase is characterized in that the β-glucosidase.

바람직하게는, 본 발명의 상기 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 효소추출물은 패각 용해액을 추출용매로 하여 얻어진 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 혼합추출물을 β-글루코시다아제로 가수분해하여 제조되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the enzyme extract of corncob, malt and flaxseed of the present invention is prepared by hydrolyzing a mixed extract of corncob, malt and flaxseed obtained by using a shell dissolving solution as β-glucosidase. It is done.

바람직하게는, 본 발명의 상기 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물은 옥수수속대, 맥아 및 아마씨가 각각 1~3:1~3:1~3의 중량비율로 혼합되어 제조되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the hydrolase treated corncob, malt and flaxseed mixed extract of the present invention is characterized in that the corncob, malt and flaxseed are prepared by mixing at a weight ratio of 1 to 3: 1 to 3: 1 to 3, respectively. It is done.

바람직하게는, 본 발명상기 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물은 1:3:2의 중량비율로 혼합되어 제조되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the hydrolase treated corncob, malt and flaxseed mixed extract of the present invention is characterized in that it is prepared by mixing in a weight ratio of 1: 3: 2.

바람직하게는, 본 발명의 상기 패각 용해액은 패각을 1,000~1,500℃에서 10~30분간 소성시키는 단계; 100~2,000 매쉬 크기로 분쇄하는 단계와; 패각분말을 정제수에 첨가하고 100~120℃에서 5~30분 가열하는 단계와; 필터로 분말을 분리시키는 단계를 포함하는 제조방법에 의하여 제조되며, pH 8~10인 것을 특징으로 한다.Preferably, the shell solution of the present invention is the step of baking the shell at 1,000 ~ 1,500 ℃ 10-30 minutes; Grinding to 100-2,000 mesh size; Adding shell shell powder to purified water and heating at 100 to 120 ° C. for 5 to 30 minutes; It is prepared by a manufacturing method comprising the step of separating the powder with a filter, characterized in that the pH of 8 to 10.

바람직하게는, 본 발명은 팔미토일글라이신(Palmitoyl Glycine), 엑토인(Ectoin) , 소듐팔미토일프롤린(Sodium Palmitoyl Proline), 알바수련꽃추출물(Nymphaea Alba Flower Extract)을 효능성분으로서 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 각각 0.001~10의 중량%로 혼합되어 제조되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the present invention is palmitoyl glycine (Palmitoyl Glycine), ectoin (Ectoin), sodium palmitoyl proline (Sodium Palmitoyl Proline), Nymphaea Alba Flower Extract (Nymphaea Alba Flower Extract) as an active ingredient to the total weight of the cosmetic composition It is characterized by being prepared by mixing with respect to the weight percent of 0.001 to 10, respectively.

바람직하게는, 본 발명의 상기 화장료 조성물은 화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 바디 로션, 바디 오일, 바디 젤, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 젤, 화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스 중에서 선택된 하나의 제형에 첨가되는 것을 특징으로 한다.Preferably, the cosmetic composition of the present invention is a lotion, cream, essence, cleansing foam, cleansing water, pack, body lotion, body oil, body gel, shampoo, rinse, hair conditioner, hair gel, foundation, lipstick, mascara, It is characterized in that it is added to one of the formulations selected from the makeup base.

이상과 같은 본 발명은 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 천연 추출물을 함유하여 안전하며, 그 상승작용에 의하여 우수한 피부 보습 및 피부장벽 강화 효능이 있다.The present invention as described above is a cosmetic composition containing a hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed complex extract as an active ingredient is safe to contain a natural extract, it has excellent skin moisturizing and skin barrier strengthening effect by its synergism .

이하, 본 발명의 실시예를 참조하여 설명하기로 한다.Hereinafter, with reference to the embodiment of the present invention will be described.

옥수수(Zea mays)는 세계 3대 작물로서, 항당뇨, 항균, 항산화, 항노화 등의 효능이 알려져 있으며, 폴리페놀, 식물성 스테롤, 토코페롤 유도체, 카로테노이드, 안토시아닌 등의 기능성 성분에 대한 연구가 진행되면서 식량작물 외에도 화장품, 식품 및 의약품 소재 분야에서도 널리 사용되고 있다. 옥수수 부위별 연구로는 안토시아닌의 일종인 cyanidin 3-O-glucoside의 함량을 분석해본 결과 속대(kernel)에서의 함량이 잎, 줄기, 수술, 겉껍질보다 높다는 연구결과가 있다. 옥수수속대는 옥수수의 비가식(非可食) 부산물로서 생산량은 높으나 이용도는 낮기 때문에 화장품 원료로의 개발 등을 통해 산업적 활용도를 높일 경우 새로운 부가가치를 창출할 수 있다.Corn ( Zea mays ) is the world's three largest crops, known for its anti-diabetic, antibacterial, anti-oxidant and anti-aging effects. In addition to food crops, it is widely used in cosmetics, food and pharmaceutical materials. According to the corn-based studies, the content of cyanidin 3-O-glucoside, an anthocyanin, was higher than that of leaves, stems, stamens, and husks. Corn cob is a non-edible by-product of corn, and its production is high, but its utilization is low. Therefore, corn cobs can create new added value by increasing industrial utilization through development of cosmetic raw materials.

맥아(malt)는 밀, 보리 등에 적당한 수분, 온도 및 산소조건에서 발아시켜 말린 것을 이용하여 전분분해효소인 아밀라아제를 다량 생성시킨 것으로 일명 엿기름이라고도 부른다. 예로부터 우리나라에서는 맥아를 술, 식혜 제조에 주로 사용하였으며, 시럽, 소화제 제조 등에도 널리 사용해왔다. 맥아에 함유된 성분으론 전분분해효소 이외에 페놀류, 에르고스테롤, 아미노산, 호르데닌(hordenine), 그라민 (gramine), 하이드록시신나믹 에씨드(hydroxycinnamic acid) 등이 보고되었으며 항산화, 피부미백 등의 효능이 알려져 있다.Malt is a malt that is produced by germinating and dried in wheat, barley, etc. at appropriate moisture, temperature, and oxygen conditions to produce a large amount of amylase, a starch, also called malt. Since ancient times, malt has been used mainly in the manufacture of alcohol and sorghum, and has been widely used in the production of syrups and extinguishing agents. In addition to starch degrading enzymes, malt contains phenols, ergosterol, amino acids, hordenine, gramine, and hydroxycinnamic acid. This is known.

아마씨(flax seed)는 아마과 식물(Linum usitatissimum seed)의 종자를 말하며, 주요성분으로 알파-리놀렌산(α-linolenic acid), 리그난, 오메가 3-지방산 등이 보고된 바 있으며, 그 밖에 식이섬유소, 단백질, 비타민, 엽산, 미네랄, 토코페롤 등이 함유된 것으로 알려져 있다. 즉, 우수한 효능을 나타내는 다양한 성분을 함유하고 있어 고기능성 제품의 소재로 활용될 수 있는 가능성이 높다. 실제로도 아마씨의 생리활성으로 종양 성장 억제, 콜레스테롤 저해, 혈액응고 저해, 항산화 등이 알려져 있다. Flax seed refers to the seeds of Linum usitatissimum seed, and has been reported as alpha-linolenic acid, lignans, and omega 3-fatty acids as main ingredients, as well as dietary fiber and protein. It is known to contain vitamins, folic acid, minerals and tocopherols. In other words, it contains a variety of components that exhibit excellent efficacy and is likely to be used as a material of high-functional products. In fact, the physiological activity of flaxseed is known to inhibit tumor growth, inhibit cholesterol, inhibit blood coagulation, and antioxidants.

본 발명에서는 옥수수속대, 맥아 및 아마씨를 가수분해 효소로 처리하여 활성성분을 강화시켜 사용하는 것을 특징으로 한다. 또한 상기 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 혼합추출과 함께 패각 용해액으로 추출 후 가수분해하여 제조되는 천연식물추출물을 유효성분으로 사용하는 것을 특징으로 한다.In the present invention, corncob, malt and flaxseed are characterized in that the active ingredient is used to enhance the active ingredient. In addition, it is characterized by using the natural plant extract prepared by hydrolysis after extraction with a shell solution with a mixed extraction of the hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed as an active ingredient.

먼저, 옥수수속대, 맥아 및 아마씨를 물, 탄소수 1~4의 저급 알코올, 에틸아세테이트, 글리세린, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매로 추출한다. 추출원물인 옥수수속대, 맥아 및 아마씨를 혼합하여 추출할 수도 있고, 각각의 추출물을 제조한 후 혼합할 수도 있다. 이어서, 상기 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물을 가수분해효소, 바람직하게는 β-글루코시다아제로 처리하여 가수분해물을 얻는다. 이때, 상기 옥수수속대, 맥아 및 아마씨는 각각 1~3:1~3:1~3의 중량비율로 혼합하며, 바람직하게는 1:3:2의 중량비율로 혼합한다.First, corncob, malt and flaxseed are extracted with at least one solvent selected from the group consisting of water, lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, ethyl acetate, glycerin, ethylene glycol, propylene glycol and butylene glycol. Extracted corncob, malt and flaxseed may be mixed and extracted, or each extract may be prepared and mixed. Subsequently, the corncob, malt and flaxseed mixed extracts are treated with a hydrolase, preferably β-glucosidase, to obtain a hydrolyzate. At this time, the corncob, malt and flaxseed are each mixed in a weight ratio of 1 to 3: 1 to 3: 1 to 3, preferably in a weight ratio of 1: 3: 2 :.

상기 비율로 혼합한 후 가수분해물을 제조함으로써 활성성분이 강화되어 더욱 우수한 피부개선활성을 나타내었다.After mixing in the above ratio to prepare a hydrolyzate, the active ingredient was strengthened to show more excellent skin improvement activity.

상기 가수분해 효소를 처리한 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 혼합추출물은 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 혼합추출물에 비하여 우수한 피부보습활성을 나타내었다.The mixed extract of corncob, malt and flaxseed treated with the hydrolase showed superior skin moisturizing activity compared to the mixed extract of corncob, malt and flaxseed.

본 발명의 구체예에 따르면 상기 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 효소추출물은 다음과 같이 제조된다. According to an embodiment of the present invention, the enzyme extract of corncob, malt and flaxseed is prepared as follows.

먼저, 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 혼합물은 패각 용해액을 추출용매로 사용하여 추출물을 제조한다. 상기 패각 용해액은 용출(溶出)된 패각의 유용성분을 함유하는 알칼리성 용액으로서, 본 발명의 일 구체예에 따르면 다음과 같은 방법으로 제조된다. 먼저, 패각을 고온으로 소성하여 분말화 하고, 정제수에 상기 분말을 함침시키고 가열하여 강알카리 용액을 제조한다. 보다 구체적으로는 먼저 굴, 모시조개 및 전복으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 패류의 껍질(貝殼)을 1,000~1,500℃에서 10~30분간 소성시켜 100~2,000 매쉬(mesh) 크기로 분쇄한다. 상기 패각분말을 10~20배 부피의 정제수에 넣어 100~120℃에서 5~30분 가열한다. 여과를 통해 고형 분말을 제거하여 여액을 얻는다. 상기 패각 용해액은 pH 8~10, 더욱 바람직하게는 pH 10의 강알칼리성을 나타내는 것을 사용한다.First, a mixture of corncob, malt, and flaxseed is used to prepare shell extract using shell solution as an extractant. The shell solution is an alkaline solution containing the useful components of the eluted shell, according to one embodiment of the present invention is prepared by the following method. First, the shell is calcined to a high temperature to powder, and impregnated and heated the powder in purified water to prepare a strong alkali solution. More specifically, first, the shells of at least one shell selected from the group consisting of oysters, ramie shells and abalone are baked at 1,000 to 1500 ° C for 10 to 30 minutes, and then pulverized to 100 to 2,000 mesh sizes. The shell powder is placed in 10-20 times the volume of purified water and heated at 100-120 ° C. for 5-30 minutes. Filtration removes the solid powder to obtain the filtrate. The shell solution is used to exhibit a strong alkalinity of pH 8-10, more preferably pH 10.

상기 패각 용해액으로 추출한 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물을 다시 가수분해효소, 바람직하게는 β-글루코시다아제를 처리하여 효소추출물을 제조한다. 이때, 상기 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 효소추출물은 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 각각 1~3:1~3:1~3의 중량비율로 혼합되어 제조되는 것이며, 1:3:2의 중량비율로 혼합되어 제조되는 경우에 가장 우수한 피부보습활성을 나타내었다.The corncobs, malt and flaxseed mixed extract extracted with the shell lysate are treated with hydrolase, preferably β-glucosidase, to prepare an enzyme extract. At this time, the enzyme extracts of corncob, malt and flaxseed are prepared by mixing in a weight ratio of corncob, malt and flaxseed 1 to 3: 1 to 3: 1 to 3, respectively, in a weight ratio of 1: 3: 2. When prepared by mixing it showed the best skin moisturizing activity.

유효성분으로서의 상기 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 혼합추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1~10 중량% 함유된다. 이때, 상기 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 혼합추출물은 각각 1:3:2의 중량비율로 함유되는 것이 가장 바람직하다.The mixed extract of the hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed as an active ingredient is contained in an amount of 0.1 to 10% by weight based on the total weight of the cosmetic composition. At this time, the mixed extract of the hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed is most preferably contained in a weight ratio of 1: 3: 2, respectively.

본 발명의 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합추출물은 피부유래 세포주의 생존률에 영향을 미치지 않으면서(시험예 1), 상승작용에 의하여 피부보습 및 피부장벽 기능과 관련된 인자의 발현 또는 활성을 증가시켰다(시험예 2 - 4). 또한 이 복합추출물은 세럼 및 크림제형에 적용하였을 때 실온, 냉장, 항온 조건에서 제형안전성을 나타내었다(시험예 5). 그러므로 상기 화장료 조성물은 피부 보습용 또는 피부장벽 강화용 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.The hydrolase-treated corncob, malt, and flaxseed complex extracts of the present invention do not affect the survival rate of skin-derived cell lines (Test Example 1), and the expression or activity of factors related to skin moisturization and skin barrier function by synergy. Was increased (Test Examples 2-4). In addition, this composite extract showed formulation safety at room temperature, refrigeration and constant temperature when applied to serum and cream formulations (Test Example 5). Therefore, the cosmetic composition may be usefully used as a skin moisturizing or skin barrier reinforcing cosmetic.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 팔미토일글라이신, 엑토인, 소듐팔미토일프롤린, 알바수련꽃추출물을 효능성분으로서 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 각각 0.001~10의 중량%로 혼합되어 제조될 수 있다.In addition, the cosmetic composition of the present invention may be prepared by mixing palmitoylglycine, ectoin, sodium palmitoylproline, alba water lily flower extract as an effective ingredient in an amount of 0.001 to 10% by weight, respectively, based on the total weight of the cosmetic composition.

본 발명의 화장료 조성물은 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조 될 수 있으며, 그 예로는 화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 바디 로션, 바디 오일, 바디 젤, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 젤, 화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스 등을 들 수 있다.  The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any of the formulations commonly prepared, such as lotion, cream, essence, cleansing foam, cleansing water, pack, body lotion, body oil, body gel, shampoo, rinse, hair Conditioners, hair gels, foundations, lipsticks, mascaras, makeup bases, and the like.

[실시예]EXAMPLE

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발병의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.Hereinafter, examples will be described in detail to help understand the present invention. However, the following examples are merely to illustrate the content of the present invention is not limited to the scope of the present invention. The embodiments of the present invention are provided to more completely explain the present invention to those skilled in the art.

제조예 1 : 옥수수속대 추출물의 제조Preparation Example 1 Preparation of Corn Cob Extract

옥수수속대에 추출용매로서 70% 함수 에탄올 5배 중량을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80℃~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다.The corncob was extracted with three times the weight of 70% hydrous ethanol as the extraction solvent and heated to 80 ~ 100 ℃ in an extractor (Cosmos-660, Gyeongseo machine) equipped with a cooling condenser.

위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40℃~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 표제의 추출분말 10g을 얻었다.  After extraction by the above method, the mixture was left at room temperature for 3 days, and the precipitate was filtered through 300 mesh filter paper, and the precipitate was filtered twice with Edventech No. 5 filter paper and Whatman GFC 150 mm filter paper. After concentrating at a temperature of 40 ° C. ~ 50 ° C. using a decompression concentrator (Coolace CCA-1100, EYELA), using a spray dryer (B-290, BUCHI Co.), the inlet temperature is 180 ° C., an aspirator. Efficiency 100% (35 cm3 / hr), Pump efficiency 25% (7.5 ml / min), Nozzle Cleaner 4 and Rotameter: Dry under conditions of 30 mm (357 l / hr) 10 g of the title powder was obtained.

제조예 2: 맥아 추출물의 제조Preparation Example 2 Preparation of Malt Extract

맥아에 추출용매로서 70% 함수 에탄올 5배 중량을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80℃~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다.5 times the weight of 70% hydrous ethanol as the extraction solvent in the malt and heated to 80 ℃ ~ 100 ℃ in an extractor (Cosmos-660, Gyeongseo machine) equipped with a cooling condenser and extracted three times each 2 hours.

위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40℃~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 표제의 추출분말 10g을 얻었다.  After extraction by the above method, the mixture was left at room temperature for 3 days, and the precipitate was filtered through 300 mesh filter paper, and the precipitate was filtered twice with Edventech No. 5 filter paper and Whatman GFC 150 mm filter paper. After concentrating at a temperature of 40 ° C. ~ 50 ° C. using a decompression concentrator (Coolace CCA-1100, EYELA), using a spray dryer (B-290, BUCHI Co., Ltd.), the inlet temperature is 180 ° C., an aspirator. Efficiency 100% (35 cm3 / hr), Pump efficiency 25% (7.5 ml / min), Nozzle Cleaner 4 and Rotameter: Dry under conditions of 30 mm (357 l / hr) 10 g of the title powder was obtained.

제조예 3 : 아마씨 추출물의 제조Preparation Example 3 Preparation of Flax Seed Extract

아마씨에 추출용매로서 70% 함수 에탄올 5배 중량을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80℃~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다.Flaxseed was extracted with 5 times the weight of 70% hydrous ethanol as the extraction solvent, and was heated to 80 ~ 100 ℃ in an extractor (Cosmos-660, Gyeongseo machine) equipped with a cooling condenser and extracted three times for 2 hours.

위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40℃~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 표제의 추출분말 10g을 얻었다.  After extraction by the above method, the mixture was left at room temperature for 3 days, and the precipitate was filtered through 300 mesh filter paper, and the precipitate was filtered twice with Edventech No. 5 filter paper and Whatman GFC 150 mm filter paper. After concentrating at a temperature of 40 ° C. ~ 50 ° C. using a decompression concentrator (Coolace CCA-1100, EYELA), using a spray dryer (B-290, BUCHI Co., Ltd.), the inlet temperature is 180 ° C., an aspirator. Efficiency 100% (35 cm3 / hr), Pump efficiency 25% (7.5 ml / min), Nozzle Cleaner 4 and Rotameter: Dry under conditions of 30 mm (357 l / hr) 10 g of the title powder was obtained.

제조예 4~6 : 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합 추출물의 제조Preparation Example 4-6 Preparation of Corncob, Malt and Flaxseed Mixture Extracts

옥수수속대, 맥아 및 아마씨를 표 1의 중량비로 혼합한 후, 추출용매로서 70% 함수 에탄올 5배 중량을 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80℃~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다.로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다.After mixing corncob, malt and flaxseed at the weight ratio of Table 1, add 5 times the weight of 70% hydrous ethanol as the extraction solvent, and heat it to 80 ~ 100 ℃ in an extractor (Cosmos-660, Gyeongseo machine) equipped with a cooling condenser Extraction was performed 3 times in total for 2 hours. The mixture was heated to 3 times in total for 2 hours.

위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40℃~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 표제의 추출분말 10g을 얻었다.  After extraction by the above method, the mixture was left at room temperature for 3 days, and the precipitate was filtered through 300 mesh filter paper, and the precipitate was filtered twice with Edventech No. 5 filter paper and Whatman GFC 150 mm filter paper. After concentrating at a temperature of 40 ° C. ~ 50 ° C. using a decompression concentrator (Coolace CCA-1100, EYELA), using a spray dryer (B-290, BUCHI Co., Ltd.), the inlet temperature is 180 ° C., an aspirator. Efficiency 100% (35 cm3 / hr), Pump efficiency 25% (7.5 ml / min), Nozzle Cleaner 4 and Rotameter: Dry under conditions of 30 mm (357 l / hr) 10 g of the title powder was obtained.

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제조예 7: 패각 분말 및 용해액 제조 Preparation Example 7: Preparation of Shell Powder and Solution

굴 패각 1kg을 1,200℃ 직, 간접 열로 30분간 소성시켜 분쇄기로 패각을 200매쉬로 분쇄하였다. 굴 패각 분말을 10배 부피의 정제수에 넣어, 100℃의 열로 30분 가열하였다. 필터로 고형 분말을 분리시켜 패각 용해액을 얻었다.1 kg of oyster shells were calcined for 30 minutes with 1,200 ° C. direct and indirect heat, and the shells were pulverized with 200 mesh. The oyster shell powder was placed in 10-fold volume of purified water and heated for 30 minutes with heat of 100 ° C. The solid powder was separated by a filter to obtain a shell solution.

제조예 8~10: 패각 용해액을 이용한 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물의 제조 Preparation Example 8 ~ 10: Preparation of corncob, malt and flaxseed extract using shell solution

제조예 4~6에서 제조한 추출기물을 상기 제조예 7의 패각 용해액(pH 10)을 10배 부피량을 가하여 추출기(Cosmos-660, 경서기계)에서 80~100℃로 가열하여 2 시간씩 총 3회 추출하였다. 위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 얻은 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계(Rotameter):30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 혼합추출물을 얻었다.The extract extract prepared in Preparation Examples 4 to 6 was added to the shell dissolving solution (pH 10) of Preparation Example 7 in a volume of 10 times and heated at 80 to 100 ° C. in an extractor (Cosmos-660, Gyeongseo Machinery) for 2 hours. A total of three extractions were made. After the extraction by the above method, the precipitate obtained by standing at room temperature for 3 days was filtered through a 300 mesh filter paper, and the precipitate was filtered twice with an Adventech No. 5 filter paper and a Whatman GFC 150 mm filter paper. After concentrating at a temperature of 40-50 ° C. using a decompression concentrator (Coolace CCA-1100, EYELA), using a spray dryer (B-290, BUCHI Co., Ltd.), the inlet temperature is 180 ° C., aspirator efficiency. 100% (35 cm 3 / hour), Pump efficiency 25% (7.5 ml / min), Nozzle Cleaner 4 and Rotameter: Dry under conditions of 30 mm (357 liters / hour) A mixed extract was obtained.

실시예 1~3: 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 효소추출물의 제조Examples 1 to 3 Preparation of Corncob, Malt and Flaxseed Enzyme Extracts

제조예 8~10 에서 제조한 추출기물을 아세테이트 버퍼(acetate buffer, pH 4.0) 500ml와, β-글루코시다아제 효소 25ml을 넣어 55℃에서 100rpm으로 4시간 동안 반응시켰다. 다음으로 90℃로 5분간 가온하여 효소 반응을 완료한 후 반응물을 진공 농축하였다. 농축물은 60℃에서 30시간 건조하였다. 위의 방법으로 추출한 뒤 3일간 실온에서 방치하여 침전물을 300메쉬 여과지로 여과하고, 침전물을 에드벤텍 5번 여과지와 와트만 GFC 150mm 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기(Coolace CCA-1100, EYELA)를 이용하여 40℃~50℃의 온도에서 농축한 후 스프레이 드라이어(B-290, BUCHI사)를 이용하여 인렛(Inlet) 온도 180℃, 흡입기(Aspirator) 효율 100%(35㎤/시간), 펌프(Pump) 효율 25%(7.5㎖/분), 노즐클리너 4(Nozzle Cleaner 4) 및 유량계Rotameter): 30㎜(357리터/시간)의 조건으로 건조시켜 효소추출물을 얻었다.500 ml of acetate buffer (acetate buffer, pH 4.0) and 25 ml of β-glucosidase enzyme were added to the extract prepared in Preparation Examples 8 to 10 and reacted at 55 ° C. at 100 rpm for 4 hours. Next, the reaction was concentrated in vacuo after heating to 90 ° C. for 5 minutes to complete the enzymatic reaction. The concentrate was dried at 60 ° C. for 30 hours. After extraction by the above method, the mixture was left at room temperature for 3 days, and the precipitate was filtered through 300 mesh filter paper, and the precipitate was filtered twice with Edventech No. 5 filter paper and Whatman GFC 150 mm filter paper. After concentrating at a temperature of 40 ° C. ~ 50 ° C. using a decompression concentrator (Coolace CCA-1100, EYELA), using a spray dryer (B-290, BUCHI Co., Ltd.), the inlet temperature is 180 ° C., an aspirator. Efficiency 100% (35 cm3 / hr), Pump efficiency 25% (7.5 ml / min), Nozzle Cleaner 4 and Flowmeter: Dried under conditions of 30 mm (357 l / hr) An enzyme extract was obtained.

Figure 112019043139802-pat00002
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시험예 1: 세포 독성 여부 확인 Test Example 1: Confirmation of Cytotoxicity

세포 독성 여부를 확인하기 위해 각질세포주인 HaCaT를 10% FBS를 첨가한 IMDM 배지에 배양하였으며 96 well plate에 5 X 105의 세포 농도로 접종하여 37℃ 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 상기 제조예 및 실시예에서 제조한 추출물을 시료농도가 0.1, 0.5, 1.0%가 되도록 디메틸설폭시드에 희석하여 제조한 희석용액을 처리하여 24시간 배양한 후에 MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2yl] - 2,5-diphenyltetrazoliumboromide, Sigma, U.S.A.)용액을 각 well에 100㎖씩 첨가한 후 (3 ㎎/㎖) 4시간 동안 더 배양하였다. 이후 상층액을 제거하고, 150㎕의 디메틸 설폭시드를 첨가한 후, 30분간 교반하여 생성된 formazan을 녹여 multimicroplate reader(Molecular device Spectra max190)를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포생존율은 수학식 1에 따라 계산하였으며 그 결과는 하기의 표 3에 나타내었다.To determine the cytotoxicity, the keratinocyte line HaCaT was incubated in IMDM medium containing 10% FBS and inoculated at a cell concentration of 5 X 10 5 in 96 well plates for 24 hours in a 37 ° C 5% CO 2 incubator. . After incubation, the medium was removed, and the extract prepared in Examples and Examples above was diluted with dimethyl sulfoxide so as to have a sample concentration of 0.1, 0.5, and 1.0%. [4,5-dimethylthiazol-2yl]-2,5-diphenyltetrazoliumboromide, Sigma, USA) solution was added to each well 100ml (3 mg / ml) and further incubated for 4 hours. Thereafter, the supernatant was removed, 150 μl of dimethyl sulfoxide was added, and the resulting formazan was dissolved for 30 minutes, and the absorbance was measured at 540 nm using a multimicroplate reader (Molecular device Spectra max190). Cell viability was calculated according to Equation 1 and the results are shown in Table 3 below.

Figure 112019043139802-pat00003
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Figure 112019043139802-pat00004
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상기 표 3의 결과에서 보는 바와 같이, 옥수수속대, 맥아 또는 아마씨 추출물 및 이들의 혼합 추출물 등을 적용한 시료 모두 95% 이상의 세포생존율이 확인됨에 따라 세포 독성에는 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었고, 이에 안전에는 문제가 없는 것을 확인하였다.As shown in the results of Table 3, all of the samples to which corncob, malt or flaxseed extract, and a mixed extract thereof were applied did not affect cytotoxicity as the cell survival rate was confirmed to be 95% or higher. It was confirmed that there was no problem.

시험예 2: 히알루론산 합성효소 (HAS-3)의 발현 증가효과 확인Test Example 2 Confirmation of Increased Expression of Hyaluronic Acid Synthetase (HAS-3)

인간 섬유아세포 NHDF를 10% FBS가 첨가된 DMDM 배지를 이용하여 5×105 cell/well로 조절한 후 12 well plate에 접종하고 18시간 동안 배양하였다. 배양한 뒤 시료를 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 Reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR)을 통해 Hyaluronan Synthase-3(HAS-3)의 발현 증가율을 확인하였다. HAS-3 발현 증가율은 수학식 2에 의해 산출되었고, 그 결과는 표 4에 나타내었다. 대조군으로는 히알루론산(Hyaluronic Acid)을 사용하였다.Human fibroblast NHDF was adjusted to 5 × 10 5 cells / well using DMDM medium added with 10% FBS, inoculated into 12 well plates and incubated for 18 hours. After incubation, the samples were treated and incubated for 24 hours. RNA was extracted from the cultured cells, and the expression rate of hyaluronan synthase-3 (HAS-3) was confirmed by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The increase rate of HAS-3 expression was calculated by Equation 2, and the results are shown in Table 4. Hyaluronic acid was used as a control.

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상기 표 4에서 확인되는 바와 같이 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합추출물을 함유하는 실시예 3에서 가장 우수한 HAS-3 증가율을 나타내었다.As shown in Table 4, the highest HAS-3 growth rate was shown in Example 3 containing the hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed complex extracts.

시험예 3 : 히알루로니다제의 활성 억제 효과 확인Test Example 3: Confirmation of the inhibitory effect of hyaluronidase

히알루로니다제 활성억제 효과는 모르간-엘손 (Morgan-Elson)법을 응용하여 다음과 같이 확인하였다. 히알루로니다제의 최종 효소 활성을 400 NF unit/㎖, HA의 최종농도를 0.4 ㎎/㎖로 하고 활성제인 Compound 48/80 완충(buffer) 용액 (0.1 ㎎/㎖)을 사용하여 불활성형 히알루로니다제의 활성화 단계의 저해작용을 중심으로 히알루로니다제 활성을 측정하였다. 시료는 완충용액 (buffer)에 용해하여 시료 용액으로 하고 대조군은 시료 용액 대신에 완충 용액을 사용하였다. 대조군으로는 히알루론산(Hyaluronic Acid)을 사용하였다. 히아루로니다아제의 활성 저해율(%)은 아래의 수학식 3으로 계산하였으며, 그 결과는 표 5에 나타내었다. Hyaluronidase activity inhibitory effect was confirmed by applying the Morgan-Elson method as follows. The final enzyme activity of hyaluronidase was 400 NF unit / ml, the final concentration of HA was 0.4 mg / ml, and the compound 48/80 buffer solution (0.1 mg / ml) was used as an inactive hyaluronic acid. Hyaluronidase activity was measured based on the inhibitory effect of the activation step of nidase. The sample was dissolved in a buffer to prepare a sample solution, and the control group used a buffer solution instead of the sample solution. Hyaluronic acid was used as a control. The inhibition rate (%) of hyaluronidase activity was calculated by Equation 3 below, and the results are shown in Table 5.

Figure 112019043139802-pat00007
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A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 효소 활성A: Enzyme Activity of Wells Without Samples

B: 시료를 첨가한 웰의 효소 활성B: Enzyme Activity of Well Added Samples

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상기 표 5에서 확인되는 바와 같이 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합 추출물을 함유하는 실시예 3에서 다른 제조예들에 비하여 가장 우수한 히아루로니다제 활성 억제효과를 나타내었다.As shown in Table 5 above, Example 3 containing the hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed complex extracts showed the best inhibitory effect of hyaluronidase activity compared to other preparations.

시험예 4 : 트렌스글루타미나제-1 (Transglutaminase-1)의 유전자 발현 증가 효과Test Example 4 Effect of Increased Gene Expression of Transglutaminase-1

제조예 1 내지 10 및 실시예 1 내지 3을 처리한 후 DMED/10 FBS에서 24시간 동안 5% CO2및 37℃의 조건에서 배양하였다. 24시간 후 세포에서 RNA 분리, cDNA 합성 및 RT-PCR은 Komoroski 등(Drug Metab. Dispos. 32:512-518, 2004)이 기술한 방법에 따라 수행하였다. RT-PCR에서 측정한 유전자는 트렌스굴루타미나제-1의 발현을 확인하였다. 유전자 발현의 차이를 확인하기 위해 house keeping gene으로 GAPDH를 사용하였다.Preparation Examples 1 to 10 and Examples 1 to 3 were then incubated in DMED / 10 FBS for 24 hours at 5% CO 2 and 37 ° C. conditions. After 24 hours RNA isolation, cDNA synthesis and RT-PCR in cells were performed according to the method described by Komoroski et al. (Drug Metab. Dispos. 32: 512-518, 2004). The gene measured by RT-PCR confirmed the expression of transgulutaminase-1. GAPDH was used as a house keeping gene to identify the difference in gene expression.

각각의 유전자의 프라이머 서열은 표 6에 나타냈다. 추출된 RNA를 주형으로 올리고 dT-어댑터 프라이머(Oligo dT-adaptor primer)와 DEPC water를 이용하여 총량 15㎕로 하고 70℃ 10분 변성 후, M-MLV(Moloney murine leukemia virus) RNA의 역전사를 수행하여 42℃ 60분, 70℃ 15분 cDNA를 합성하였다. 합성된 cDNA는 PCR 반응을 통해 증폭하였으며, 총 반응액은 25㎕로 하였다. 각 반응물의 최종 농도는 프라이머 100 pmol, 1.0μM, dNTP 혼합액 0.2mM, 5x green or colorless GoTaq Reaction buffer 1x1.5mM, MgCl2(PCR완충액) 및 GoTaq DNA 폴리머라제 1.25 units이었다. 변성(Denaturation), 어닐링(annealing) 및 익스텐션(extension)에 대한 PCR 반응 조건은 다음과 같으며, 95℃ 2분, 95℃ 30초, 60℃ 30초, 72℃ 1분, 72℃ 5분, 30~40 사이클로 수행하였다. PCR 반응 후 생성물의 10㎕를 2% 아가로즈 겔(agarose gel)에서 전기영동 하였다. Gel Documentation system(코리아랩텍, Cat. No DGS-200D)을 이용하여 발현양을 확인했다.The primer sequences of each gene are shown in Table 6. The extracted RNA was used as a template, and the total amount was 15 μl using an oligo dT-adaptor primer and DEPC water. After 10 minutes of denaturation at 70 ° C., reverse transcription of M-MLV RNA was carried out. CDNA was synthesized at 42 ° C. for 60 minutes and 70 ° C. for 15 minutes. The synthesized cDNA was amplified by a PCR reaction, and the total reaction solution was 25 μl. The final concentration of each reaction was 100 pmol primer, 1.0 μM, 0.2 mM dNTP mixture, 5 × green or colorless GoTaq Reaction buffer 1 × 1.5 mM, MgCl 2 (PCR buffer) and 1.25 units of GoTaq DNA polymerase. PCR reaction conditions for denaturation, annealing and extension are as follows: 95 ° C. 2 minutes, 95 ° C. 30 seconds, 60 ° C. 30 seconds, 72 ° C. 1 minute, 72 ° C. 5 minutes, It was performed in 30-40 cycles. After the PCR reaction, 10 μl of the product was electrophoresed on a 2% agarose gel. Expression level was confirmed using Gel Documentation system (Korea Lab Tech, Cat.No DGS-200D).

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수학식 4에 의하여 계산된 결과는 각각 표 7에 나타내었다.The results calculated by Equation 4 are shown in Table 7, respectively.

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상기 표 7에서 확인되는 바와 같이 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합 추출물을 함유하는 실시예 3에서 다른 제조예들에 비하여 가장 우수한 트렌스글루타미나제-1의 유전자 발현 증가 효과를 나타내었다.As shown in Table 7 above, Example 3 containing the hydrolase-treated corncob, malt, and flaxseed complex extracts showed the best gene expression increasing effect of transglutaminase-1 compared to other preparations. .

실시예 4 : 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합 추출물을 함유하는 세럼의 제조 Example 4 Preparation of Serum Containing Hydrolase Treated Corncob, Malt and Flaxseed Complex Extracts

상기 실시예 3의 혼합물을 함유한 세럼을 하기의 표 8의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.Serum containing the mixture of Example 3 was prepared according to the conventional method in the composition and content of Table 8 below.

Figure 112019043139802-pat00012
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실시예 5 : 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합 추출물을 함유하는 크림의 제조Example 5 Preparation of Cream Containing Hydrolase Treated Corncob, Malt and Flaxseed Complex Extracts

상기 실시예 3의 혼합물을 함유한 크림을 하기의 표 9의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.Cream containing the mixture of Example 3 was prepared according to the conventional method in the composition and content of Table 9 below.

Figure 112019043139802-pat00013
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시험예 5 : 제형안정도 확인Test Example 5: Confirmation of formulation stability

상기 실시예 4, 5에서 제조한 제형에 대하여 실온(25℃), 냉장(4℃) 및 항온(50℃)으로 일정하게 유지되는 실내, 냉장고 및 인큐베이터에서 불투명 초자 용기에 담아 12 및 24주 동안 보관 및 관찰(변색, 변취 및 분리)하며, 안정성을 확인 하였다. 결과는 표 10에 나타내었다.The formulations prepared in Examples 4 and 5 were placed in opaque glass containers in indoor, refrigerator and incubators maintained at room temperature (25 ° C.), refrigerated (4 ° C.) and constant temperature (50 ° C.) for 12 and 24 weeks. Storage and observation (discoloration, deodorization and separation) and stability was confirmed. The results are shown in Table 10.

Figure 112019043139802-pat00014
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<제형 안정 등급><Formulation stability grade>

0: 변화없음 1: 미세한 변화 2: 변화 3: 극심한 변화0: no change 1: slight change 2: change 3: extreme change

상기 표 10에서 나타낸 바와 같이 실시예 4, 5 제형 모두 25℃, 4℃ 및 0℃ 온도 조건하에서 변색 변취 및 분리 현상이 나타나지 않고 안정함이 확인되었다.As shown in Table 10, it was confirmed that the formulations of Examples 4 and 5 were stable and did not exhibit discoloration discoloration and separation under 25 ° C, 4 ° C, and 0 ° C temperature conditions.

Claims (8)

가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 복합추출물을 유효성분으로서 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.1~10 중량% 함유하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물.
Cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier reinforcing containing 0.1 to 10% by weight of the total enzyme composition of the hydrolyzed enzyme corncob, malt and flaxseed composite extract as an active ingredient.
제 1 항에 있어서,
상기 가수분해 효소는 β-글루코시다아제인 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The hydrolase is β-glucosidase, characterized in that the skin moisturizing and skin barrier cosmetic composition for strengthening.
제 1 항에 있어서,
상기 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 효소추출물은 패각 용해액을 추출용매로 하여 얻어진 옥수수속대, 맥아 및 아마씨의 혼합추출물을 β-글루코시다아제로 가수분해하여 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The enzyme extract of corncob, malt and flaxseed is a skin moisturizing and skin barrier, characterized in that it is prepared by hydrolyzing a mixed extract of corncob, malt and flaxseed obtained by using the shell dissolving solution as β-glucosidase Reinforcement cosmetic composition.
제 1 항에 있어서,
상기 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물은 옥수수속대, 맥아 및 아마씨가 각각 1~3:1~3:1~3의 중량비율로 혼합되어 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed mixed extract is prepared by mixing corncob, malt and flaxseed at a weight ratio of 1 to 3: 1 to 3: 1 to 3, respectively. Reinforcement cosmetic composition.
제 1 항에 있어서,
상기 가수분해 효소처리 옥수수속대, 맥아 및 아마씨 혼합추출물은 1:3:2의 중량비율로 혼합되어 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The hydrolase-treated corncob, malt and flaxseed mixed extract is a skin composition for skin moisturizing and skin barrier reinforcing, characterized in that the mixture is prepared in a weight ratio of 1: 3: 2.
제 3 항에 있어서,
상기 패각 용해액은 패각을 1,000~1,500℃에서 10~30분간 소성시키는 단계; 100~2000 매쉬 크기로 분쇄하는 단계와; 패각분말을 정제수에 첨가하고 100~120℃에서 5~30분 가열하는 단계와; 필터로 분말을 분리시키는 단계를 포함하는 제조방법에 의하여 제조되며, pH 8~10인 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물.
The method of claim 3, wherein
The shell melt solution is calcined for 10 to 30 minutes at 1,000 ~ 1500 ℃ shell; Grinding to 100-2000 mesh size; Adding shell shell powder to purified water and heating at 100 to 120 ° C. for 5 to 30 minutes; It is prepared by a manufacturing method comprising the step of separating the powder with a filter, cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier reinforcement, characterized in that pH 8 ~ 10.
제 1 항에 있어서,
팔미토일글라이신, 엑토인, 소듐팔미토일프롤린, 알바수련꽃추출물을 효능성분으로서 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 각각 0.001~10의 중량%로 혼합되어 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
Skin moisturizing and skin barrier reinforcing cosmetics, which are manufactured by mixing palmitoylglycine, ectoin, sodium palmitoylproline, and alba water lily flower extract as an active ingredient in an amount of 0.001 to 10% by weight, based on the total weight of the cosmetic composition. Composition.
제 1 항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 바디 로션, 바디 오일, 바디 젤, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 젤, 화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스 중에서 선택된 하나의 제형에 첨가되는 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부장벽 강화용 화장료 조성물.
The method of claim 1,
The cosmetic composition is a formulation selected from a lotion, cream, essence, cleansing foam, cleansing water, pack, body lotion, body oil, body gel, shampoo, rinse, hair conditioner, hair gel, foundation, lipstick, mascara, makeup base Cosmetic composition for skin moisturizing and skin barrier reinforcement, which is added to.
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