KR102318173B1 - 임모르텔의 에센셜 오일 및 임모르텔 껍질의 유성 추출물을 포함하는 화장품 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 임모르텔의 에센셜 오일 및 임모르텔 껍질의 유성 추출물을 함유하는 조성물, 뿐만 아니라 피부 관리, 특히 피부 노화 및/또는 건성 피부의 징후를 퇴치하기 위한 이의 미용 용도에 관한 것이다.

Description

임모르텔의 에센셜 오일 및 임모르텔 껍질의 유성 추출물을 포함하는 화장품 조성물
본 발명은 임모르텔(immortelle)의 에센셜 오일 및 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물을 함유하는 화장품 조성물에 관한 것이고, 또한 피부 관리, 특히 피부 노화의 징후를 퇴치하기 위한 이의 미용 용도에 관한 것이다.
남성과 여성은 현재 가능한 한 오랫동안 젊어 보이기를 원하는 경향이 있으며 결과적으로 피부 노화의 흔적, 특히 주름과 잔주름이 발생하는 것을 없애려 한다.
피부는 2 개의 구획으로 이루어져 있는데, 하나는 표피상의, 표피이고, 다른 하나는 보다 깊은, 진피로, 상호작용한다. 자연적인 인간 표피는 매우 우세한, 케라티노사이트, 멜라노사이트 및 랑게르한스 세포인 3 가지 세포 유형으로 주로 구성된다. 각각의 이러한 세포 유형은 특정 기능과 함께, 피부에 의해 신체에서 수행되는 필수적인 역할, 특히 "장벽 기능"이라고 불리는, 외부 공격으로부터 신체를 보호하는 역할에 기여한다.
표피는 통상적으로 표피의 발아층을 구성하는 케라티노사이트의 기저층, 발아층 위에 놓인 다면체 세포의 여러 층으로 이루어진 "가시(spinous)"층, 별개의 세포질 내포물을 함유하는 납작한 세포로 이루어진 1 내지 3 개의 "과립(granular)"층, 케라토하이알린 과립, 및 마지막으로 분화의 말기 단계에서 케라티노사이트층의 집합으로 이루어지며, 각질 세포 (corneocyte)라고 불리우는, 각질층 (horny layer) (또는 각질층 (stratum corneum))으로 구분된다. 표피에서는, 각질층에서 표피 세포의 지속적인 손실을 보상하기 위해 새로운 케라티노사이트의 지속적인 생산이 있다. 피부 항상성, 특히 표피 항상성은, 피부 세포 증식과 분화 과정 사이에 미세하게 조절된 균형으로부터 비롯된다. 이러한 증식 및 분화 과정은 완벽하게 조절된다: 이들은 피부의 재생(renewal) 및/또는 재생(regeneration)에 참여하고 일정한 두께의 피부, 특히 일정한 두께의 표피를 유지하게 된다. 피부 항상성은 또한 피부의 기계적 특성을 유지하는데 참여한다.
표피의 재생 속도 및 품질은 그러나 피부가 받는 물리적 및 화학적 공격에 의해, 그리고 또한 노화에 의해, 지속적으로 변형된다.
따라서, 케라티노사이트의 세포 활력은 특히 노화의 맥락에서 또는 산화적 스트레스 (예를 들어, 태양 복사, 즉 UV, 가시광선, 적외선, 청색광선 복사)로 인해 감소될 수 있으며, 미생물총 (microflora)의 독소 또는 대사산물에 의한 표피에 대한 공격으로 인해, 또는 보다 일반적으로 연대기적인 노화 동안에 감소될 수 있다. 구체적으로, 표피의 재생 잠재력은 덜 중요해지는데, 즉 기저층의 세포가 덜 활발하게 분열하여, 표피의 재생에 있어서 느려지고/거나 감소하여, 표면에서 제거된 세포의 손실을 더이상 보상하지 못한다. 이는 표피의 위축 및/또는 피부 두께의 감소를 초래한다. 표피 항상성의 손상은 또한 칙칙한 안색 및/또는 비색상의 외관을 초래한다. 장벽 기능의 손상도 관찰되며, 이는 위치에 따라 다양한 징후: 건조한 피부, 각화과다증, 얇은 표피, 얇은 입술, 표면 주름을 통해 나타난다.
나이가 들면서 관찰되는 피부 장벽의 손상은 또한 표피의 세포 응집력의 이완과 연관되어, 표피의 약화 및 탈수로 이어진다. 케라티노사이트 분화 및 접착에 관여하는 단백질의 발현 증가는 피부 장벽의 형성 및 누출을 촉진하여, 한편으로는, 피부의 수화를 유지시켜 주고, 다른 한편으로는, 외부 공격으로부터 피부를 보호하고 노화를 억제시켜 준다. 이러한 유전자는 특히 트랜스글루타미나제 1 (transglutaminase　1; TGM1)을 코딩하는 유전자로, 각질 외피의 전구체와 세포막 사이의 결합을 촉매할 수 있는 효소이고, 이는 표피 분화에 중요한 역할을 한다.
피부 노화 징후의 발병을 지연시키거나 진행 속도를 늦추고 건조한 피부를 예방 또는 치료하기 위해, 기저 세포 풀에 실질적으로 영향을 미치지 않으면서 표피 분화를 증가시킬 수 있는 화장품 조성물을 갖는 이점이 이에 따라 이해된다.
출원인은 이미 장벽 기능을 강화하기 위해, 테르펜 화합물이 풍부한 임모르텔의 에센셜 오일을 수성 추출물 및 임모르텔의 유성 추출물의 조합으로 사용하도록 제안하였다 (WO 2012/153064). 임모르텔의 유성 추출물은 예를 들어 마이크로파 추출에 의해 수득되며, 적어도 99 중량%의 지방산과 0.2 내지 0.5 중량%의 피토스테롤 (phytosterol)을 함유하는 것을 특징으로 한다.
이 부분에 대해, 문서 FR 2 819 718은 식물 기원의 트리글리세리드 (카프릴릭/카프릭 트리글리세리드)로 구성된 용매의 존재하에서, 초임계 CO2로 추출하여 수득된 식물, 특히 임모르텔의 지질 추출물을 기재한다. 용매의 제거 및 왁스성 화합물의 첨가 후, 이러한 지질 추출물은 세포 단백질 결합 레티노산을 코딩하고, 또한 내피 성장 인자 (VEGF)를 코딩하는, CRABP-II 유전자의 발현을 증가시킴으로써, 레티노산과 같은 세포 분화에 작용하였고, 이러한 추출물은 케라티노사이트 세포 분열 (증식)을 자극하였음이 입증되었다. 반면에, 지질 추출물은 보통 표피 분화 동안 발현되는 단백질을 코딩하는 유전자, 예컨대 트랜스글루타미나제 1 (TGM1)의 발현을 억제 (-61%)한다는 점이 강조된다.
발명의 요약
이러한 맥락에서, 출원인은 전적으로 놀랍게도, 특히 TGM1 단백질을 코딩하는 유전자의 발현 증가에 따라, 임모르텔의 에센셜 오일이 특히 임모르텔 증류 잔여물로부터 수득된 임모르텔의 유성 추출물과 조합되었을 때, 표피 분화를 조절하는 유전자의 자극을, 시너지적인 방식으로 입증하였다.
보다 구체적으로, 출원인은 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물과 임모르텔 에센셜 오일의 조합이 트랜스글루타미나제 1, 사이토케라틴 10, 인볼루크린, 필라그린, 카텝신 L2 및 로리크린으로 이루어진 분화 마커의 발현을 시너지적인 증가를 가져옴을 입증하였다. 따라서 출원인에게 상기 언급된 조성물이 피부 및/또는 건성 피부의 노화 징후에 대해 효과적인 화장품 조성물을 제형화할 수 있도록 하는 것이 나타났다.
이러한 맥락에서, 본 발명의 주제는 임모르텔의 에센셜 오일 및 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물을 포함하는 화장품 조성물이며, 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물은 스테롤; 포화 또는 불포화된, 2-(Z)-데센산 및 4-(Z)-데센산을 포함하는, 선형 C7-C10 카르복실산; 벤조산; 및 포화 또는 불포화된, 선형 C8-C18 지방산의 에틸 에스테르를 함유한다.
본 발명의 주제는 또한 피부 노화 징후, 특히 주름, 피부 처짐, 피부의 유연성 및/또는 탄력의 손실, 피부 얇아짐, 피부 거칠기 및/또는 안색의 광채 손실의 개시를 지연시키거나, 진행을 늦추거나, 강도를 감소시키거나; 또는 건성 피부를 예방하거나 치료하기 위한 상기 언급된 조성물의 비-치료적 용도이다.
본 발명의 주제는 또한 피부 노화 징후, 특히 주름 형성, 피부 처짐, 피부의 유연성 및/또는 탄력의 손실, 피부 얇아짐, 피부 거칠기 및/또는 안색의 광채 손실의 개시를 지연시키거나, 진행을 늦추거나, 강도를 감소시키거나, 또는 건성 피부를 예방하거나 치료하기 위해, 상기 언급된 조성물의 피부에 국소 적용을 포함하는 미용 방법이다.
발명의 상세한 설명
본 발명은 임모르텔의 에센셜 오일 및 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물을 사용한다.
에센셜 오일 및 증류 잔여물의 유성 추출물을 제조하는데 독립적으로 사용될 수 있는 임모르텔 종 중에서, 헬리크리섬 (Helichrysum) 속, 특히 카레 식물인, 헬리크리섬 이탈리컴 (Helichrysum italicum) (또는 헬리크리섬 앙거스티폴리움 DC (Helichrysum angustifolium DC), 모래 임모르텔인, 헬리크리섬 아레나리움 (Helichrysum arenarium), 및 이 리스트가 제한되지 않은 헬리크리섬 스토에카스 (Helichrysum stoechas) 또는 통상적인 영구화에 속하는 모든 종에 대해 이루어질 것이다. 헬리크리섬 이탈리컴 (Helichrysum italicum)의 에센셜 오일은 문제의 아종에 관계없이, 바람직하게는 사용된다.
이러한 기재에서, 용어 "에센셜 오일"은 임모르텔 또는 전체 식물의 임의의 부분, 및 보다 특히 예를 들어 꽃이나 꽃 머리와 같은 그것의 공중 부분들에 존재하는 휘발성 유기 화합물의 수증류 또는 증기 증류의 생성물을 의미하는 것으로 의도된다. 이러한 과정에서, 식물에 함유된 냄새 분자는 방출되고 식물이 첨가된 물을 끓여서 (기존의 수증류) 생성되거나, 식물에 함유된 물을 끓여서 형성되는 (마이크로파 수증류, 임의로 진공하에서) 증기와 기계적으로 동반되고, 또는 보일러에 의해 제공되고 식물을 통해 순환 (증기 증류)된다. 증류액은 이후, 본 발명에 따라 사용되는 에센셜 오일을 하이드롤레이트 (hydrolate) (또는 꽃의 물)로부터 분리하기 위해 따라내었다. 증류 잔여물을 구성하는 고형 잔여물은 회수 및 처리하여 본 발명에서도 사용되는 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물을 제조할 수 있다.
임모르텔의 에센셜 오일은 본 발명에 따른 조성물의 총 중량에 대해, 유리하게는 0.001 내지 5 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 0.1 중량%를 나타낸다.
이러한 조성물에서는, 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물과 결합된다. 용어 "증류 잔여물"은 임모르텔의 임의의 부분의 수증류 또는 증기 증류 및 에센셜 오일 및 생성된 하이드롤레이트의 분리 후에 잔류하는 고형 잔여물을 의미하는 것으로 의도된다. 증류 잔여물의 유성 추출물은 오일을 추출하는 임의의 과정에 의해 수득될 수 있으며, 보다 특히 초임계 유체, 예컨대 이산화탄소, 일산화질소, 디메틸에테르, 프로판, 에틸렌 또는 메탄올을 사용한 증류 잔여물의 추출에 의해 수득될 수 있으며, 이 리스트에 제한되지 않는다. 초임계 상태에서 이산화탄소의 사용은 바람직하다. 당업자는 추출 매개변수를 조정하는 방법과 특히 원하는 추출 속도 및 수율의 함수로서 유체의 온도, 압력 및 유속을 조정하는 방법을 알 것이다. 예를 들어, 초임계 CO2를 사용한 추출은 250 내지 300 bar의 압력 및 40 내지 80 ℃의 온도에서 수행될 수 있고, 바람직하게는 50 내지 70 ℃의 온도에서 수행될 수 있다. 추출 후, 초임계 유체는 감압에 의해 기체 상태로 되돌아가고 일반적으로 재활용된다. 따라서 수득된 식물 추출물은 추출물에 존재하는 비누화 불가능한 화합물을 농축하기 위해, 예를 들어 180 내지 250 ℃, 바람직하게는 200 내지 220 ℃의 온도에서, 유리하게는 이후 분자 증류 단계를 거친다. 이러한 분자 증류 단계 전에, 식물 추출물은 특히 식물성 오일 예컨대 해바라기 유를 기반으로 하는, 오일 용매에서 임의로 희석될 수 있다. 이러한 유성 용매는 분자 증류 단계 동안에 제거된다. 따라서 특히 30 내지 50 중량%, 보다 특히 35 내지 45 중량%의 비누화 불가능한 화합물, 및 1 내지 10 중량%, 보다 특히 3 내지 7 중량%의 스테롤, 필수 베타-시토스테롤을 함유하는 증류액이 수득된다.
초임계 유체 또는 분자 증류 단계로부터 생성된 증류액을 사용하여 수득된 추출물은 취급을 용이하게 하기 위해, 1 내지 10 중량%, 예를 들어 특히 3 내지 5 중량%의 농도로, 임의로 용매에 희석될 수 있다. 화장품에 사용될 수 있는 모든 유성 용매는 이러한 목적을 위해 사용될 수 있으며, 특히 지방산 트리글리세리드, 예컨대 카프릴릭/카프릭 트리글리세리드가 사용될 수 있다.
출원인은 질량 분석법과 결합된 기체 크로마토그래피에 의해 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물을 특성화하였다. 따라서 본 발명에 따라 사용된 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물은, 이의 조성 측면에서, 팔미톨레산, 리나롤, 2-데시날, 2-트리데칸온, 헵타데칸, 8-헵타데센, 이소부티르산, 이소발레르산, 헥사데세놀, 라우르산, 펜타데칸산, 데칸산 및 이소스테아르산을 실질적으로 함유하지 않는다는 사실 (즉 10 중량% 미만, 또는 5 중량% 미만 또는 심지어 2 중량% 미만), 또는 심지어는 전혀 함유하지 않는다는 사실에 의해 임모르텔 꽃 머리로부터 초임계 CO2로 수득된 추출물과 상이하다는 것이 입증되었다. 반대로, 본 발명에 따라 사용된 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물은 임모르텔 꽃 머리, 즉 2-(Z)-데센산 및 4-(Z)-데센산의 메틸 에스테르로부터 초임계 CO2로 수득된 추출물에서 식별되지 않은 성분을 함유한다. 또한, 임모르텔의 에센셜 오일과 비교하여, 본 발명에 따라 사용되는 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물은 스테롤, 본질적으로 베타-시토스테롤, 포화 또는 불포화의 메틸 에스테르, 선형 C7-C10 카르복실산 (특히 헵탄산, 옥텐산 및 데센산), 벤조산의 메틸 에스테르 및 포화 또는 불포화의 에틸 에스테르, 선형 C8-C18 지방산 (특히 카프릴레이트, 카프레이트 및 리놀레이트)을 함유한다.
이러한 추출은 특히 INCI 이름으로 식별된다: 헬리크리섬 이탈리컴(HELICHRYSUM ITALICUM) 꽃 줄기 추출물 (FLOWER STEM EXTRACT).
임모르텔 증류 잔여물의 오일 추출물은 본 발명에 따른 조성물의 총 중량에 대해, 유리하게는 0.001 내지 5 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 1 중량% 를 나타낸다.
하기 실시예로부터 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 식물 추출물의 조합은 표피 분화의 조절에 관여하는 유전자의 발현을 시너지적으로 활성화할 수 있음이 입증되었다.
이러한 기재의 맥락에서, 용어 "시너지"는 본 발명에 따른 추출물의 조합을 사용하여 수득된 효과가 두 추출물 중 하나를 사용하여 수득된 효과보다 훨씬 더 크고 임의로 각 추출물에 의해 생성되는 효과의 합보다 더 크다는 것을 의미하는 것으로 의도된다.
상기 언급된 조합은 생리학적으로 허용가능한 매질, 특히 화장용으로 허용가능한 매질, 즉 화장품 사용과 양립할 수 없는 따끔거림 또는 발적을 생성하지 않는 매질을 함유하는 화장품 조성물에 포함된다. 이러한 매질은 바람직하게는 수성상 및 지방상 (일반적으로 임모르텔의 에센셜 오일 및 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물을 함유 함)을 함유한다. 조성물은 바람직하게는 수중유 또는 유중수 에멀젼 또는 수중유 분산액의 형태이다.
수성상은 물과 임의로 폴리올 및 수성 겔화제로부터 선택된 적어도 하나의 성분을 함유한다. 물은 조성물의 총 중량에 대해, 유리하게는 40 내지 80 %, 예를 들어 50 내지 70 %를 나타낸다. 폴리올은 특히 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 부틸렌 글리콜, 펜틸렌 글리콜 및 이들의 혼합물로부터 선택될 수 있으며, 이는 조성물의 총 중량에 대해, 5 내지 30 %, 바람직하게는 15 내지 25 %를 나타낼 수 있다.
용어 "수성 겔화제"는 수화하여 수성상의 점도를 증가시킴으로써 물 분자를 고정시킬 수 있는 중합체 화합물을 의미한다. 이러한 겔화제는 하기로부터 선택될 수 있다: 다당류, 예컨대: 셀룰로오스 및 이의 유도체, 개질된 전분, 카라기난, 한천, 크산탄검 및 식물검 예컨대 구아검 또는 로커스트빈검. 합성 중합체 및 특히 임의로 가교된 소듐 아크릴레이트 단독중합체, 및 또한 아크릴릭 공중합체, 특히 소듐 아크릴레이트 및/또는 알킬 (메트)아크릴레이트 및/또는 히드록시알킬 (메트)아크릴레이트 및/또는 (폴리에톡시)알킬 (메트)아크릴레이트의 공중합체, 임의로 적어도 하나의 다른 모노머, 유리하게는 2-아크릴아미도-2-메틸프로판술폰산 (AMPS)과 함께, 이들 공중합체는 임의로 가교됨; 및 이들의 혼합물.
부분적으로, 지방상은 하나 이상의 휘발성 및/또는 비휘발성 오일을 포함할 수 있다. 휘발성 오일의 예로는 분지형 C10-C13알칸, 예컨대 이소도데칸, 및 선형 C10-C13알칸이 있다. 비휘발성 오일로서, 특히 하기를 언급할 수 있다:
- 산 및 모노알코올의 에스테르, 하기에서 선택됨: 포화 선형 C2-C10 (바람직하게는 C6-C10) 산 및 포화 선형 C10-C18 (바람직하게는 C10-C14) 모노알코올의 모노- 및 폴리에스테르, 포화 선형 C10-C20 산 및 분지형 또는 불포화 C3-C20 (바람직하게는 C3-C10) 모노알코올의 모노- 및 폴리에스테르; 분지형 또는 불포화 C5-C20 산 및 분지형 또는 불포화 C5-C20 모노알코올의 모노- 및 폴리에스테르; 분지형 또는 불포화 C5-C20 산 및 선형 C2-C4 모노알코올의 모노- 및 폴리에스테르;
- C6-C12 지방산 트리글리세리드, 예컨대 카프릴산 및 카프르산 트리글리세리드 및 트리헵타노인;
- 분지형 및/또는 불포화 C10-C20 지방산 (예컨대 리놀레산, 라우르산 및 미리스트산);
- 분지형 및/또는 불포화 C10-C20 지방 알코올 (예컨대 옥틸도데칸올 및 올레일 알코올);
- 탄화수소 예컨대 스쿠알란 (C30), 특히 올리브 오일로부터 추출된 식물 스쿠알렌과 헤미스쿠알란 (C15);
- 디알킬 카보네이트, 예컨대 디카프릴릴 카보네이트 및 디에틸헥실 카보네이트;
- 디알킬 에테르 예컨대 디카프릴릴 에테르; 및
- 이들의 혼합물.
언급은 또한 상기 언급된 성분 중 하나 이상을 함유하는 식물 오일로 만들어질 수 있다.
산 및 모노알코올의 에스테르로서, 특히 코코 카프레이트와 카프릴레이트의 혼합물, 에틸 마카다미에이트, 시어 버터 에틸 에스테르, 이소스테아릴 이소스테아레이트, 이소노닐 이소노나노에이트, 에틸헥실 이소노나노에이트, 헥실 네오펜타노에이트, 에틸헥실 네오펜타노에이트, 이소스테아릴 네오펜타노에이트, 이소데실 네오펜타노에이트, 이소프로필 미리스테이트, 옥틸도데실 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 에틸헥실 팔미테이트, 헥실 라우레이트, 이소아밀 라우레이트, 세토스테아릴 노나노에이트, 프로필헵틸 카프릴레이트 및 이들의 혼합물과 같은 모노 에스테르가 언급될 수 있다. 사용될 수 있는 다른 에스테르는 산 및 모노알콜의 디에스테르, 예컨대 디이소프로필 아디페이트, 디에틸헥실 아디페이트, 디이소프로필 세바케이트 및 디이소아밀 세바케이트이다.
식물성 오일의 예로는 특히 밀 배아, 해바라기, 아르간, 히비스커스, 고수풀, 포도씨, 참깨, 옥수수, 살구, 피마자, 시어, 아보카도, 올리브 및 대두유, 스위트 아몬드 오일 및 야자유, 유채씨, 목화씨, 헤이즐넛, 마카다미아, 호호바, 알팔파, 양귀비, 호박, 참깨, 골수, 블랙커런트, 달맞이꽃, 라벤더, 보리지, 기장, 보리, 퀴노아, 호밀, 홍화, 캔들넛, 패션 플라워, 사향 장미, 에키움, 카멜리나 또는 카멜리아 오일이 있다.
지방상은 또한 적어도 하나의 지방상 구조화 제제를 포함할 수 있다. 용어 "지방상 구조화 제제"는 특히 왁스, 지방상 겔화제 및 페이스트성 지방 물질, 및 또한 이들의 혼합물로부터 선택된, 조성물에 함유된 오일을 농축할 수 있는 화합물을 의미하는 것으로 의도된다.
하나의 바람직한 구현예에 따르면, 이 조성물은 또한 임모르텔 추출물 이외의 적어도 하나의 노화 방지 활성제, 특히 주름, 피부 처짐 및/또는 색소 형성을 예방 및/또는 치료하는데 적합한 활성제를 함유하고, 이는 특히 유리-라디칼 스캐빈저, 케라티노사이트 및/또는 섬유아세포 분화 및/또는 증식을 자극하는 제제; 글리코사미노글리칸 및/또는 콜라겐 및/또는 진피 표피 고정 원섬유 및/또는 탄성 섬유의 합성을 자극하는 제제; 콜라겐 및/또는 글리코사미노글리칸 및/또는 진피 표피 고정 원섬유 및/또는 탄성 섬유의 분해를 예방하는 제제; 항당화제; 탈색제 및/또는 멜라닌 생성 억제제; 및 이들의 혼합물로부터 선택될 수 있다.
이러한 노화 방지 활성제의 예는 특히: 아스코르브산, 이의 염, 이의 에테르 및 이의 에스테르, 특히 아스코르빌 글루코사이드; 아데노신; 리보스; 꿀 추출물; 특히 스위트 아몬드에서 추출되는, 단백질 및 당단백질; 특히 쌀, 히비스커스 종자 또는 루핀으로부터의, 가수분해된 식물 단백질; 폴리펩티드 및 유사디펩티드, 예컨대 카르시닌 히드로클로라이드, 특히 Sederma에서 상품명 Matrixyl® 3000 및 Matrixyl® Synthe'6로 판매되는 팔미토일 펜타펩티드-4 (Pal-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser) 및 팔미토일 트리펩티드-38, 각각, Lucas Meyer 사에서 상품명 Nutrazen®으로 판매되는 팔미토일 트리펩티드-8, Lipotec 사에서 상품명 Leuphasyl® Solution으로 판매되는 펜타펩티드-18, Sandream 사에서 상품명 Neoendorphin®으로 판매되는 sh-데카펩티드-9 및 Infinitec 사에서 참조 X50 Myocept® Powder로 판매되는 팔미토일 헥사펩티드-52; 실란, 예컨대 메틸실라놀 만누로네이트; 특히 호 밀가루에서 추출한 아라비녹실란, 특히 낙엽송에서 추출한 갈락토아라비난; 히알루론산 및 이의 염; 특히 미모사에서 추출한, 폴리페놀; 레몬에서 추출한 것을 포함한, 알파-하이드록시산; 식물 추출물 (일반적으로 수성 추출물), 예컨대 조름나물 (buckbean), 야생 팬지 (wild pansy), 쇠뜨기 (field horsetail), 파라크레스 (paracress) (아크멜라 올레라케아 (Acmella oleracea)), 스코틀랜드 엉겅퀴 (Scottish thistle) (오노포디움 아칸티움 (Onopordum acanthium)), 특히 BASF 사의 Neurobiox® 제품에 함유된 톱풀 (yarrow) (아칠레아 밀레포리엄 (Achillea millefolium)), 엠벨리아 (embelia) (Seppic 사에서 판매되는, 엠벨리아 콘킨나 (Embelia concinna)), 바바리 무화과 (Barbary fig) (오푼티아 피쿠스 인디카 (Opuntia ficus indica), 특히 Mibelle AG Biochemistry에서 상품명 AquaCacteen®으로 판매됨), 세이지 (sage) (살비아 오피키날리스 Salvia officinalis, 특히 Provital Group에서 판매됨), 바이텍스 네군도 (Vitex negundo) (특히 Laboratoires Expanscience에서 상품명 Neurovity®으로 판매됨), 달콤한 밤, 파파야, 아르간 나무, 귀리, 해바라기, 데이지, 모란 또는 딜; 조류 및 특히 산호 조류, 야니아 루벤스 (Jania rubens), 운가리아 피나티파다 (Ungaria pinnatifada), 알라리아 에스쿨렌타 (Alaria esculenta), 또는 난노클로롭시스 오큘라타 (Nannochlorosis oculata)의 수성 추출물; 에센셜 오일, 특히 머틀; 아연 글루코네이트 및/또는 구리 글루코네이트; 및 이들의 혼합물이다.
변형으로서 또는 추가로, 본 발명에 따라 사용되는 조성물은 적어도 하나의 인장제를 포함할 수 있다. 이는 기계적 작용에 의해 피부를 팽팽하게 할 수 있고 이에 따라 주름 및 잔주름의 외관을 감소시킬 수 있고, 특히 다당류, 특히 조류 또는 해양 플랑크톤 또는 식물검의 추출물을 감소시킬 수 있는 인장 중합체일 수 있다. 이는 또한 생물학적으로 작용하는, 보톡스와 같은 유형의 인장제, 예를 들어 Gattefosse 사에서 Gatuline® Expression 이름으로 판매되는 아크멜라 올레라케아 (Acmella oleracea) 추출물; BASF BCS 또는 기타 회사에서 Myoxinol® LS9736 이름으로 판매되는 히비스커스 종자 추출물 또는 Lipotec 사에서 Argireline® 이름으로 판매되는 아세틸 헥사펩티드-8 유형의 펩티드일 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 또한 피부에 대한 국소 적용에 적합하다면, 에멀젼의 지방상 및/또는 수성상에 분산될 수 있는 다양한 성분을 함유할 수 있다.
따라서 이는 적어도 하나의 수중유 또는 유중수 에멀젼화제 (emulsifier)를 함유할 수 있으며, 이는 일반적으로 비이온성인, 예컨대 폴리옥시에틸렌 에스테르, 임의로 폴리옥시에틸린화 소르비탄 에스테르, 임의로 지방산 및 글리세롤의 폴리옥시에틸렌화 에스테르, 지방산 및 당의 에테르, 예컨대 알킬 글루코사이드, 및 이들의 혼합물이다. 에멀젼화제는 조성물의 총 중량에 대해, 2 내지 10 % 및 바람직하게는 4 내지 6 %를 나타낼 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 또한 유리하게는 다공성 또는 중공, 바람직하게는 다공성, 마이크로 입자의 형태인, 하나 이상의 미분 충전제를 포함할 수 있다. 이들 마이크로 입자는 원칙적으로 실질적으로 구형이다. 이들 충전제는 특히 하기로부터 선택될 수 있다:
- 유기 충전제 예컨대: 다당류 분말 및 특히 천연 전분 분말, 개질된 전분 분말 또는 셀룰로오스 분말; 아크릴릭 중합체의 분말 예컨대 폴리 (메틸 메타크릴레이트), 폴리아미드의 또는 폴리올레핀의 분말; 건조된 조류 예컨대 코랄리나 오피시날리스 (Corallina officinalis)의 분말;
- 무기 충전제 예컨대 실리카, 점토, 펄라이트 및 탈크;
- 및 이들의 혼합물.
실리카는 바람직하게는 무기 충전제로서 사용된다.
이들 충전제는 조성물의 총 중량에 대해, 1 내지 5 중량%를 나타낼 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 또한 특히 유기 및/또는 무기 광 보호제, 청색광 및/또는 UVA 및/또는 UVB에서 활성 인 제제; 오염 방지 보호 필름을 형성할 수 있는 다당류-기반 필름-형성 중합체, 예컨대 Solabia에서 상품명 Pollustop® 및 Solashield®으로 판매되는 제품; α- 및 β-히드록시산과 같은 박리제; 각질제거 입자; 향료; 항산화제; 격리제; pH 조절제; 보존제; 안료; 염료; 및 이들의 혼합물로부터 선택된 첨가제를 포함할 수 있다.
이러한 조성물은 피부에 국소 적용하기에 적합한 임의의 형태, 특히 유액, 크림, 로션, 젤, 페이스트 또는 필름 형태일 수 있다. 조성물은 일반적으로 리브-온 (leave-on) 조성물, 특히 케어 조성물, 파운데이션과 같은 메이크업 조성물, 또는 자외선 차단 조성물이다.
본 발명에 따른 조성물은 피부 및/또는 건성 피부 (예를 들어 적어도 30 세, 또는 심지어 적어도 40 세)에 징후 또는 노화를 나타내는 개체의 신체의 적어도 하나의 영역, 및 보다 특히 얼굴, 목 및/또는 목선에 적용될 수 있다. 변형으로서, 이는 손에 적용될 수 있다. 추가 변형으로서, 이는 피부 및/또는 건성 피부의 노화 징후를 퇴치하기 위한 목적으로 모든 신체, 특히 가슴, 팔, 다리 및 위에 적용될 수 있다.
이러한 조성물은 하루에 한 번 이상, 예를 들어 아침 및/또는 저녁에, 치료될 부위에 적용될 수 있다.
변형으로서, 본 발명에 따른 조성물은 피부 관리, 특히 얼굴을 위해 및 임의로 신체를 위해 사용되는 린스-오프(rinse-off) 조성물일 수 있다. 이러한 경우, 이는 예를 들어 스크러빙 페이스트 또는 마스크로 사용될 수 있다.
도 1은 비처리 대조군과 비교하여, 본 발명에 따른 조성물로 처리된 배양물에서 케라티노사이트에 의해 발현된, 트랜스글루타미나제 1 (TGM1), 사이토케라틴 10 (KRT10) 및 인볼루크린 (IVL)을 코딩하는 유전자의 발현 수준을 예시한다.
도 2는 비처리 대조군과 비교하여, 본 발명에 따른 조성물로 처리된 배양물에서 케라티노사이트에 의해 발현된 필라그린 (FLG), 카텝신 2 (CSTL2) 및 로리크린 (LOR)을 코딩하는 유전자의 발현 수준을 예시한다.
도 3은 비처리 대조군과 비교하여, 본 발명에 따른 조성물로 처리된 배양물에서 케라티노사이트에 의해 발현된, Ki-67 단일 클론 항체 (MKI67), β1 인테그린 (ITGB1) 및 α6 인테그린 (ITGA6)에 의해 식별된 항원을 코딩하는 유전자의 발현 수준을 예시한다.
실시예
본 발명은 순수하게 예시의 목적으로 제공되며, 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 범주를 제한하려는 의도가 아닌, 하기 실시예에 의해 보다 명확하게 이해될 것이다.
실시예 1 : 인간 케라티노사이트의 1 차 배양에 대한 시험관 내 테스트: 본 발명에 따른 조합이 표피 분화에 미치는 영향
1. 재료 & 방법
이하 테스트에서는 식물의 꽃 머리에서 증기 증류로 수득된 헬리크리섬 이탈리컴 (Helichrysum italicum)의 에센셜 오일 및 증기 증류 잔여물에서 수득된 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물이 사용된다. 이러한 추출물은 60 ℃의 온도 및 285 bar의 압력에서 초임계 CO2로 잔여물 (증류 잔여물)의 추출에 의해 제조되었다. 이에 따라 수득된 비누화 불가능한 화합물은 해바라기유에서 희석된 후, 200 ℃에서 분자 증류 단계를 거쳤으며 생성된 증류액은 카프릴릭/카프릭 트리글리세리드에서 3-5 중량%의 양으로 희석하여 표준화되었다.
a) 세포 배양
유방 생검의 여성 기증자로부터 유래한, 1 차 배양의 케라티노사이트는, 50　μg/ml의 뇌하수체 추출물 (Gibco), 5　mg/ml EGF (Epidermal Growth Factor, Gibco) 및 100　μg/ml의 노르모신 (Invivogen)이 보충된 케라티노사이트 무혈청 배지 (Keratinocyte Serum-Free Medium) (KSFM, Gibco)에서, 웰 당 12,000 개 세포의 비율로 96-웰 플레이트 (Nunc)에 시드되었다. 세포는 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물, 임모르텔의 에센셜 오일 및 이들의 조합으로 처리되기 전에 37 ℃ 및 5 % CO2에서 3 일 동안 배양 상태로 유지되었다.
b) 임모르텔의 에센셜 오일, 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물 및 이들의 조합의 세포독성
배양 72 시간 후, 배지는 0.0005 %의 임모르텔의 에센셜 오일의 부재 또는 존재하에서, 0.001 %의 임모르텔의 증류 잔여물의 유성 추출물 및 이들의 조합으로 변경되었다. 각 농도에 대해, 배양은 6 개의 동일한 웰에서 수행하였다.
배양은 4 일 동안 유지하고 연구 화합물을 함유하는 배지는 배양 시간에 걸쳐 3 회 (매일) 교체하였다.
배양 4 일 후, 배양 배지를 제거하고 XTT 용액 (2,3-비스(2-메톡시-4-니트로-5-설포페닐)-5-[(페닐아미노)카보닐]-2H-테트라졸륨의 나트륨 염)을 함유하는 배지로 교체하였다. 세포는 37 ℃ 및 5 % CO2에서 2 시간 동안 이 용액과 함께 배양하였다.
배양 기간이 끝날 때, 흡광도는 Varioskan® 마이크로플레이트 리더를 사용하여 450nm에서 측정하였다.
세포 생존율은 하기 식을 사용하여 계산하였다:
% 생존율 = (처리를 받은 OD의 평균 - 블랭크) / (처리를 받지 않은 OD의 평균 - 블랭크) X 100
독성 임계값은 처리하지 않은 대조군 값의 85 %로 설정하였다.
c) RNA 추출
세포 생존율에 대한 흡광도를 측정한 후, XTT 용액이 함유된 배지를 제거하고 1 %의 머캅토에탄올 (VWR)이 함유된 버퍼 (RLT 버퍼, Qiagen)로 교체하였다. 용해된 후, 세포는 -80 ℃에서 동결되었다. 실시간 PCR 분석을 수행하기에 충분한 RNA를 갖기 위해, 조건 당 3 개의 웰을 풀링하고 DNase I과 함께 배양하여 RNeasy 미니 키트 (Qiagen)의 프로토콜에 따라 2 개의 별개의 RNA 추출을 수행하여 게놈 DNA를 제거하였다. RNA의 양은 NanoView 분광광도계를 사용하여 측정하였으며 RNA의 품질은 Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies)을 사용하여 미세모세관 전기영동으로 확인하였다.
d) 역전사-PCR
400ng의 RNA는 "AffinityScript QPCR cDNA 합성 키트"(Agilent technologies)를 사용하여 cDNA로 역전사되었다. 실시간 PCR은 MXP 3005 시스템 (Agilent technologies)을 사용하여 각 조건에 대해 중복으로 수행하였다. 사용된 증폭 키트는 Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mix (Agilent technologies)이었다.
사용된 프라이머는 Bio-Rad 에서 가지고 왔다: 트랜스글루타미나제 1 (TGM1, qHsaCED0056475), 케라틴 10 (KRT10, qHsaCED0034304), 인볼루크린 (IVL, qHsaCED0046054), 필라그린 (FLG, qHsaCED003660436), 카텝신 2 (LORCSTL2, qHsaCED0044736) , qHsaCED0048415), β1 인테그린 (ITGB1, qHsaCED0005248) 및 α6 인테그린 (ITGA6, qHsaCED0042632).
2 개의 하우스키핑 유전자, TATA 상자 결합 단백질 (TBP, qHsaCID0007122) 및 리보소말 단백질 L13a (RPL13A, qHsaCED0045063)을 사용하여 관심있는 유전자의 발현을 표준화하였다.
2. 결과
별도로 테스트한 추출물, 및 또는 이들의 혼합물은 세포 독성을 나타내지 않음이 입증되었다 (세포 생존율 > 85 %).
또한, 표피 분화 및 장벽 기능에 관여하는 유전자 (TGM1, KRT10, IVL, FLG, CSTL2 및 LOR)의 발현은 각 추출물을 개별적으로 취한 것과 비교하여, 두 추출물 (임모르텔의 에센셜 오일 및 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물)의 조합을 사용하여 시너지적으로 증가한다는 것이 입증되었다 (도 1 및 2). 이들 유전자의 발현은 이러한 조합으로 3 내지 24 배로 증가되는 반면, 이들 유전자는 각각의 추출물에 의해 실질적으로 과발현되지 않는다. 이러한 효과는 특히 로리크린 (loricrin)을 코딩하는 유전자에 대해 두드러지며, 칼슘 의존성 효소인 TGM1에 의해 서로 연결된, 표피의 장벽 기능에 참여하는 각질화된 외피의 형성에 필수적인 불용성 및 용해성 단백질인, 인볼루크린 (involucrin)을 코딩하는 유전자에 대해 보다 덜 두드러진다. 각질층을 구성하는 케라틴 필라멘트와 천연 보습 인자 (NMF)의 전구체 사이에 시멘트 (cement)를 구성하는, 필라그린 (filaggrin)을 코딩하는 유전자의 매우 강한 과발현도 또한 관찰된다.
또한, 도 3에서 알 수 있듯이, 미분화 케라티노사이트에 대한 마커 (ITGA6 및 ITGB1)의 발현에 변형이 없음이 관찰되는데, 이는 특히 본 발명의 조합이 증식성 세포의 일정한 풀을 보존하여, 표피 재생을 보장함을 시사한다.
따라서 이 실시예는 본 발명에 따른 조합이 피부의 노화를 효과적으로 방지할 수 있고 피부의 장벽 기능을 강화할 수 있음을 입증한다.
실시예 2 : 화장품 조성물
하기 조성물은 지시된 중량 비율로 하기 성분을 혼합함으로써, 당업자에 의해 통상적인 방식으로 제조된다.
임모르텔의 에센셜 오일 0.1 %
임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물 0.1 %
아데노신 0.04 %
오일 5-15 %
유성 겔화제 1-5 %
수성 겔화제 1-3 %
폴리올 20-25 %
격리제 qs
항산화제 qs
방향제 qs
보존제 qs
물 qs 100 %

Claims (10)

  1. 생리학적으로 허용가능한 매질, 임모르텔 (immortelle)의 에센셜 오일 및 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물을 포함하는 화장품 조성물로서, 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물은 스테롤; 2-(Z)-데센산 및 4-(Z)-데센산을 포함하는, 포화 또는 불포화 선형 C7-C10 카르복실산; 벤조산; 및 포화 또는 불포화 선형 C8-C18 지방산의 에틸 에스테르를 함유하는 화장품 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서, 에센셜 오일 및 유성 추출물의 제조에 사용되는 임모르텔은 종 헬리크리섬 이탈리컴 (Helichrysum italicum), 헬리크리섬 아레나리움 (Helichrysum arenarium) 및 헬리크리섬 스토에카스 (Helichrysum stoechas)로부터 독립적으로 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제 1 항에 있어서, 임모르텔의 에센셜 오일은 식물의 공중 부분, 또는 꽃 또는 꽃 머리로부터 수득되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서, 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물은 초임계 유체, 또는 초임계 상태의 이산화탄소를 사용하여 증류 잔여물의 추출에 의해 수득되고, 수득된 추출물은 이후 임의로 분자 증류 단계를 거치는 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서, 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물은 카프릴산/카프르산 트리글리세리드 또는 용매에 희석되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 제 1 항에 있어서, 임모르텔의 에센셜 오일은 조성물의 총 중량에 대해, 0.001 내지 5 중량% 또는 0.001 내지 1 중량%를 나타내는 것을 특징으로 하는 조성물.
  7. 제 1 항에 있어서, 스테롤은 본질적으로 베타-시토스테롤로 이루어지고, 포화 또는 불포화 선형 C7-C10 카르복실산은 헵탄산, 옥텐산 및 데센산을 포함하고, 포화 또는 불포화 선형 C8-C18 지방산의 에틸 에스테르는 에틸 카프릴레이트, 에틸 카프레이트 및 에틸 리놀레이트를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제 1 항에 있어서, 임모르텔 증류 잔여물의 유성 추출물은 조성물의 총 중량에 대해, 0.001 내지 5 중량% 또는 0.001 내지 1 중량%를 나타내는 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 주름, 피부 처짐, 피부의 유연성 및/또는 탄력의 손실, 피부 얇아짐, 피부 거칠기 및/또는 안색의 광채 손실의 개시를 지연시키거나, 진행을 늦추거나, 강도를 감소시키거나; 또는 건성 피부를 퇴치하기 위해 비-치료적으로 사용되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 주름, 피부 처짐, 피부의 유연성 및/또는 탄력의 손실, 피부 얇아짐, 피부 거칠기 및/또는 안색의 광채 손실의 개시를 지연시키거나, 진행을 늦추거나, 강도를 감소시키거나, 또는 건성 피부를 퇴치하기 위해, 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 피부에 국소 적용을 포함하는 미용 방법.
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