JP3023543B2

JP3023543B2 - チロシナーゼ活性阻害剤及び化粧料

Info

Publication number: JP3023543B2
Application number: JP8173284A
Authority: JP
Inventors: 克己坂井; 隆一郎近藤; 邦義清水; 賢一柿野; 宏晶佐藤; 博志長福
Original assignee: 関西酵素株式会社
Priority date: 1996-07-03
Filing date: 1996-07-03
Publication date: 2000-03-21
Anticipated expiration: 2016-07-03
Also published as: JPH1017455A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、皮膚のシミ、ソバ
カス等の予防又は治療に有効なチロシナーゼ活性阻害剤
及び該阻害剤を利用した化粧料に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、皮膚のシミ、ソバカスの予防又は
治療を目的として、チロシナーゼ活性を阻害することに
よりメラニン生成を抑制する物質が種々提案されてい
る。具体的には、ビタミンＣ、ハイドロキノン、コウジ
酸、チオール系化合物、種々の動植物抽出物が知られて
おり、これらを配合する化粧料が開発され、商品化され
ている。しかし、前記ビタミンＣ、ハイドロキノン、コ
ウジ酸は極性が高いため、化粧料として配合するにはこ
の点を考慮する必要がある。また前記チオール系化合物
は、化粧料への配合にあたって安定性に問題がある。更
に従来提案されている動植物抽出物は、チロシナーゼ活
性阻害能が十分なものが少ないのが実状である。

【０００３】一方、クロロフォリンは、クワ科（Chloro
phora excelsa)の材に存在することが知られているが、
クロロフォリンがチロシナーゼ活性阻害能を有すること
については従来知られていない。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的
は、メラニン生成に関与するチロシナーゼ活性を強く抑
制するチロシナーゼ活性阻害剤を提供することにある。
本発明の別の目的は、チロシナーゼ活性を抑制すること
によりメラニン生成を抑制し、美白作用等を示す化粧料
を提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、クロロ
フォリンを有効成分として含有するチロシナーゼ活性阻
害剤が提供される。また本発明によれば、前記チロシナ
ーゼ活性阻害剤を含む化粧料が提供される。

【０００６】

【発明の実施の形態】以下本発明を更に詳細に説明す
る。本発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、下記構造式で
表されるクロロフォリンを有効成分とする。

【０００７】

【化１】

【０００８】クロロフォリンは、クワ科（Chlorophora
excelsa)の材に存在し、この材の粉末又は削り屑を温時
エーテル抽出し溶媒を除いてから再結晶して得られるこ
とが知られている。例えば、クワ科パンノキ属(Artocar
pus)に属するパンノキ(Artocarpus incisus)の溶媒抽出
物から精製単離することもできる。

【０００９】本発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、前記
有効成分を含有しておれば良く、その含有割合は、０．
０００１重量％以上である。

【００１０】本発明の化粧料は、前記チロシナーゼ活性
阻害剤を必須成分として含有し、好ましくはチロシナー
ゼ活性阻害作用に基づくメラニン生成抑制作用を示し、
美白化粧料とすることができる。前記チロシナーゼ活性
阻害剤の化粧料への配合割合は、有効成分であるクロロ
フォリンを０．０００１重量％以上、特に０．０００１
〜２０重量％、更には０．０００１〜１０重量％である
のが望ましい。

【００１１】本発明の化粧料には、前記チロシナーゼ活
性阻害剤の他に、その目的に応じて種々の材料を配合す
ることができる。特に従来公知の美白剤、しわ予防剤、
保湿剤又はこれらの混合物を配合することにより、所望
効果を相乗的に向上させることができる。

【００１２】前記美白剤としては、例えばコウジ酸、ア
スコルビン酸、ハイドロキノン、チオール系化合物、こ
れらの誘導体、これらを含有する動植物の抽出物又はこ
れらの混合物等を挙げることができる。前記保湿剤とし
ては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、１，
３−ブチレングリコール、ソルビトール、マンニトー
ル、ポリエチレングリコール、ジプロピレングリコール
等の多価アルコール類；アミノ酸、乳酸ナトリウム、ピ
ロリドンカルボン酸ナトリウム等のＮＭＦ成分；ヒアル
ロン酸；コラーゲン；エラスチン；コンドロイチン硫
酸；フィブロネクチン；セラミド類；ヘパリン類似様物
質；キトサン等の水溶性高分子物質又はこれらの混合物
等を挙げることができる。前記美白剤、しわ防止剤又は
保湿剤を配合する際の配合割合は、好ましくは前記チロ
シナーゼ活性阻害剤の有効成分の０．００１〜１０００
倍量、特に好ましくは０．００５〜５００倍量の範囲で
配合するのが望ましい。

【００１３】本発明の化粧料には、化粧類の種類に応じ
て一般に配合する油脂類、界面活性剤、アルコール類、
脂肪酸類、防腐剤、殺菌剤、増粘剤、酸化防止剤、色
素、香料、水溶性高分子、紫外線吸収剤、キレート剤、
ｐＨ調整剤、緩衝剤、精製水等の他の成分を適宜配合す
ることもできる。

【００１４】前記増粘剤としては、アルギン酸ナトリウ
ム、キサンタンガム、ケイ酸アルミニウム、マルメロ種
子抽出物、トラガントガム、デンプン等の天然高分子物
質；メチルセルロース、可溶性デンプン、ヒドロキシエ
チルセルロース、カルボキシメチルセルロース、可溶性
デンプン、カチオン化セルロース等の半合成高分子物
質；カルボキシビニルポリマー、ポリビニルアルコール
等の合成高分子物質又はこれらの混合物等を挙げること
ができる。前記防腐剤としては、安息香酸塩、ソルビン
酸塩、ジヒドロ酢酸塩、パラオキシ安息香酸エステル、
２，２，４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニ
ルエーテル、３，４，４’−トリクロロカルバニド、塩
化ベンザルコニウム、エタノール等を挙げることができ
る。前記酸化防止剤としては、ジブチルヒドロキシトル
エン、ブチルヒドロキシアニソール、ビタミンＥ、没食
子酸プロピル等を挙げることができる。前記紫外線吸収
剤としては、４−メトキシベンゾフェノン、オクチルジ
メチルパラアミノベンゾエート、エチルヘキシルパラメ
トキシサイナメート、酸化チタン、カオリン、タルク等
を挙げることができる。前記キレート剤としては、エチ
レンジアミン四酢酸塩、ピロリン酸塩、ヘキサメタリン
酸塩、クエン酸塩、酒石酸、グルコン酸等を挙げること
ができる。前記ｐＨ調整剤としては、水酸化ナトリウ
ム、リン酸水素カリウム、炭酸カリウム、クエン酸等を
挙げることができる。

【００１５】本発明の化粧料は、前記必須成分や必要に
応じて他の成分を、各種目的に応じて配合することによ
って、医薬品、医薬部外品又は化粧品として調製するこ
とができる。具体的にはローション、乳液、クリーム、
パック剤、皮膚洗浄剤、ハップ剤、プラスター剤、ペー
スト剤、軟膏、エッセンス、ゲル剤、シャンプー、リン
ス、パウダー、ファンデーション、化粧水、洗顔料、ヘ
アートニック、養毛剤、浴用剤等に調製することができ
る。この際他の成分は、前述の成分の他に、このような
各用途に従来使用されている成分を適宜選択して配合す
ることができる。

【００１６】

【発明の効果】本発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、食
用されているクワ科の材にもその存在が認められたクロ
ロフォリンを有効成分とするので、毒性がなく、メラニ
ン生成に関与するチロシナーゼ活性を強く抑制すること
ができる。また本発明の化粧料は、前記チロシナーゼ活
性阻害剤を必須成分として含有するので、チロシナーゼ
活性を抑制することによりメラニン生成を抑制し、美白
作用等が期待でき、しかも前記有効成分は、化粧料中に
安定に配合することができるので、広範囲に及ぶ各種化
粧料とすることができる。

【００１７】

【実施例】以下、実施例により更に詳細に説明するが、
本発明はこれらに限定されるものではない。

【００１８】実施例１パンノキ(A.incisus)の木部３７ｋｇを粉砕機で細かく
粉砕してパンノキ材粉末を得た。得られたパンノキ材粉
末を、エーテルに浸漬し、室温で一昼夜保持した。次い
で、撹拌後、濾過してエーテル抽出液を得た。得られた
エーテル抽出液から溶媒及びアルトカルピン(artcarpi
n)を留去して母液とした。得られた母液を、ＨＰＬＣで
数回処理して分画し、チロシナーゼ阻害活性を示す画分
を選択した。得られた活性画分に含有される化合物を、
ＬＣ−ＨＲＦＡＢＭＳ(liquid chromatography-high re
solution fast atom bombardment mass spectometry)に
より測定したところ、Ｃ₂₄Ｈ₂₈Ｏ₄と推定され、更にＮ
ＭＲにより分析したところクロロフォリンと同定した。
単離したクロロフォリンについて、以下に示すチロシナ
ーゼ活性阻害試験、Ｂ−１６マウスメラノーマ細胞に対
するメラニン生成抑制試験及びモルモットを用いたメラ
ニン生成抑制効果試験を行った。

【００１９】チロシナーゼ活性阻害試験０．１％Ｌ−チロシン溶液２．０ｍｌ(Mcilvaine 緩衝
液、ｐＨ６．８）、試料段階希釈液としてのクロロフォ
リンを含むジメチルスルフォキシド溶液０．２ｍｌ及び
マッシュルーム由来のチロシナーゼ（シグマ社製）１２
５０ｕｎｉｔ／ｍｌ緩衝液０．１ｍｌを混合し、３７℃
で１０分間反応させた。次いで、４７５ｎｍで吸光度を
測定し、コントロールに対するＩＣ₅₀を求めた。その結
果クロロフォリンのＩＣ₅₀は２６ｐｐｂであり、公知の
チロシナーゼ阻害活性作用を示すコウジ酸（ＩＣ₅₀＝１
２３０ｐｐｂ）の約４７倍の活性があることがわかっ
た。

【００２０】Ｂ−１６マウスメラノーマ細胞に対するメ
ラニン生成抑制試験Ｂ−１６マウスメラノーマ細胞を１０％ＦＢＳを含むＭ
ＥＭ培地で１×１０⁵個／５ｍｌに調整し、Ｔ−２５フ
ラスコに５ｍｌ播種した。次いで５％ＣＯ₂に調整した
ＣＯ₂インキュベーターで３７℃、２４時間培養した。
細胞が完全に接着したことを確認し、ジメチルスルフォ
キシドに溶解した試料を最終濃度１００ｐｐｍになるよ
うに添加した。培養期間は６日間とし、３日目に培地交
換した。培養終了後、トリプシン処理により細胞を回収
し、その白色化度及び細胞培養度を表１及び２の判定基
準に従って肉眼で判定した。結果を表３に示す。表３の
結果より、クロロフォリンにおいては細胞毒性がなく、
実用化に充分なメラニン生成抑制効果が得られた。

【００２１】

【表１】

【００２２】

【表２】

【００２３】

【表３】

【００２４】モルモットを用いたメラニン生成抑制効果
試験茶色モルモットの背部をバリカンで刈毛及び剃毛した。
次いで、１×１．５ｃｍの長方形の穴を６箇所開けたア
ルミ箔で覆い、ＵＶ−Ｂランプ（商品名：FL40S・BLB(東
芝株式会社製)６本、２ｍＷ／ｃｍ²の強度で総照射量１
Ｊ／ｃｍ²）で１週間に３回の割合で照射し、２週間繰
返すことにより色素沈着を形成した。その後１週間は色
素沈着を安定化させるためにモルモットを放置した。４
週目から、１日１回、１週間に５回の割合で各試料１
２．５μｌを色素沈着部位に連続４週間塗布した。塗布
前、塗布１、２、３週間後及び４週間後に、背部の写真
撮影を行った後、塗布前と塗布後の色彩色差を色彩色差
計（商品名：ＲＣ−１００、ミノルタ社製）で測定し、
その差によりΔＬ値を算出して皮膚色の黒化判定を行っ
た。結果を表４に示す。表４の結果より、クロロフォリ
ンにおいてはメラニン生成を顕著に抑制することがわか
った。

【００２５】

【表４】

【００２６】実施例２、比較例２ステアリン酸４．０重量部、セチルアルコール３．０重
量部、ステアリルアルコール１．０重量部、流動パラフ
ィン６．５重量部、ワセリン１０．０重量部、ソルビタ
ンモノステアレート１．５重量部及びポリオキシエチレ
ンモノステアレート（２５Ｅ．Ｏ．）３．０重量部を加
熱溶解した。次いで、この加熱溶解溶液に、実施例１で
調製したクロロフォリン０．５重量部、１．３−ブチレ
ングリコール５．０重量部、水酸化カリウム０．１重量
部及び精製水６５．４重量部を混合した後、冷却してク
リームを得た。また比較として、クロロフォリンを用い
ずに精製水の量を６５．９重量部としたクリームを得
た。得られた各々のクリームを、２０〜３０歳の女性パ
ネル１０人に朝と就寝前１日２回、１か月間使用させ、
その後の肌のシミ及びソバカス改善度を評価した。評価
は有効１０点、やや有効５点、無効０点として肉眼判定
にて行った。その結果、実施例１で調製したクロロフォ
リンを配合した実施例２では平均７．０点、比較クリー
ムでは０点であった。

【００２７】実施例３、比較例３実施例１で調製したクロロフォリン０．５重量部、ポリ
オキシエチレンセチルエーテル０．５重量部、プロピレ
ングリコール２．０重量部、１−メントール０．１重量
部及び精製水９６．９重量部を均一に撹拌して化粧水を
得た。また比較として実施例１で調製したクロロフォリ
ンを用いずに精製水の量を９７．４重量部とした化粧水
を得た。得られた各々の化粧水を、実施例２と同様にパ
ネル１０人に使用させ、肌のシミ及びソバカス改善度を
同様に評価した。その結果、実施例１で調製したクロロ
フォリンを配合した実施例３では平均６．５点、比較化
粧水では０点であった。

【００２８】実施例４、比較例４実施例１で調製したクロロフォリン０．５重量部、ポリ
オキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）１．０重
量部、エタノール１５．０重量部、１，３−ブチレング
リコール４．０重量部及び精製水７９．５重量部を混合
撹拌し、各成分を溶解してローションを調製した。また
比較として実施例１で調製したクロロフォリンを用い
ず、精製水の量を８０．０重量部としたローションを得
た。得られた各々のローションを、実施例２と同様にパ
ネル１０人に使用させ、肌のシミ及びソバカス改善度を
同様に評価した。その結果、実施例１で調製したクロロ
フォリンを配合した実施例４では平均８．５点、比較ロ
ーションでは０点であった。

【００２９】実施例５、比較例５スクワラン８．０重量部、ワセリン２．０重量部、ミツ
ロウ０．５重量部、ソルビタンセスキオレート０．８重
量部及びポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０
Ｅ．Ｏ．）１．２重量部を加熱溶解した。得られた加熱
溶解溶液に、実施例１で調製したクロロフォリン０．５
重量部、カルボキシビニルポリマー０．２重量部、プロ
ピレングリコール５．０重量部、水酸化カリウム０．１
重量部、エタノール２．０重量部及び精製水７９．７重
量部を混合した後、冷却して乳液を調製した。また比較
として実施例１で調製したクロロフォリンを用いず、精
製水の量を８０．２重量部とした乳液を得た。得られた
各々の乳液を、実施例２と同様にパネル１０人に使用さ
せ、肌のシミ及びソバカス改善度を同様に評価した。そ
の結果、実施例１で調製したクロロフォリンを配合した
実施例５では平均７．０点、比較乳液では０点であっ
た。

【００３０】実施例６スクワラン８．０重量部、ワセリン２．０重量部、ミツ
ロウ０．５重量部、ソルビタンセスキオレート０．８重
量部及びポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０
Ｅ．Ｏ．）１．２重量部を加熱溶解した。得られた加熱
溶解溶液に、実施例１で調製したクロロフォリン０．５
重量部、カルボキシビニルポリマー０．２重量部、プロ
ピレングリコール５．０重量部、水酸化カリウム０．１
重量部、エタノール２．０重量部、コウジ酸１．０重量
部及び精製水７８．７重量部を混合した後、冷却して乳
液を調製した。

【００３１】実施例７モノステアリン酸ポリエチレングリコール１．０重量
部、親油型モノステアリン酸グリセリン２．０重量部、
オリーブ油５．０重量部、オレイン酸２．０重量部を加
熱溶解した。得られた加熱溶解溶液に、実施例１で調製
したクロロフォリン０．５重量部、ヒドロキシエチルセ
ルロース０．２重量部、プロピレングリコール２．０重
量部、グリチルリチン酸ジカリウム０．１重量部及び精
製水８７．２重量部を混合した後、冷却して乳液を調製
した。

【００３２】実施例８ステアリン酸４．０重量部、セチルアルコール３．０重
量部、ステアリルアルコール１．０重量部、流動パラフ
ィン６．５重量部、ワセリン１０．０重量部、ソルビタ
ンモノステアレート１．５重量部及びポリオキシエチレ
ンモノステアレート（２５Ｅ．Ｏ．）３．０重量部を加
熱溶解した。次いで、この加熱溶解溶液に、実施例１で
調製したクロロフォリン０．５重量部、１．３−ブチレ
ングリコール５．０重量部、水酸化カリウム０．１重量
部、アルブチン０．２重量部及び精製水６５．２重量部
を混合した後、冷却してクリームを得た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 35/78 Ａ６１Ｋ 35/78 ＤＡ６１Ｐ 17/00 Ａ６１Ｐ 17/00 17/16 17/16 43/00 １２１ 43/00 １２１ (72)発明者柿野賢一福岡県福岡市博多区諸岡２丁目13−38 大和コーポ305号 (72)発明者佐藤宏晶福岡県大野城市山田３−１−25 原田荘 202 (72)発明者長福博志福岡県筑紫野市筑紫駅前通１−10 シティハイム筑紫312 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 7/48 A61K 7/00 A61K 31/05 A61K 35/78 A61P 17/00 A61P 17/16 A61P 43/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ) ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】クロロフォリンを有効成分として含有す
るチロシナーゼ活性阻害剤。
【請求項２】請求項１記載のチロシナーゼ活性阻害剤
を含む化粧料。