JP2021509913A - イモーテルの精油及びイモーテルの蒸留残渣の油性抽出物を含む化粧品組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
これに関連して、本出願人は、全く驚くべきことに、イモーテルの精油をイモーテル蒸留残渣から特に得られるイモーテルの油性抽出物と組み合わせたときの、表皮分化を調節する遺伝子の相乗的な刺激作用、特にTGM1タンパク質をコードする遺伝子の発現の増加を実証している。
本発明は、イモーテルの精油(エッセンシャルオイル)及びイモーテルの蒸留残渣の油性抽出物を使用する。
- 酸とモノアルコールのエステルであって、以下から選択されるもの:飽和直鎖状C2〜C10(好ましくはC6〜C10)酸と飽和直鎖状C10〜C18(好ましくはC10〜C14)モノアルコールとのモノ及びポリエステル、飽和直鎖状C10〜C20酸と分岐状又は不飽和C3〜C20(好ましくはC3〜C10)モノアルコールとのモノ及びポリエステル;分岐状又は不飽和C5〜C20酸と分岐状又は不飽和C5〜C20モノアルコールとのモノ及びポリエステル;分岐状又は不飽和C5〜C20酸と直鎖状C2〜C4モノアルコールとのモノ及びポリエステル;
- C6〜C12脂肪酸トリグリセリド、例えば、カプリル酸及びカプリン酸トリグリセリド並びにトリヘプタノイン;
- 分岐状及び/又は不飽和C10〜C20脂肪酸(例えば、リノール酸、ラウリン酸、及びミリスチン酸);
- 分岐状及び/又は不飽和C10〜C20脂肪アルコール(例えば、オクチルドデカノール及びオレイルアルコール);
- 炭化水素、例えばスクアラン(C30)、特にオリーブオイルから抽出された植物スクアレン、及びヘミスクアラン(C15);
- 炭酸ジアルキル、例えば、炭酸ジカプリリル及び炭酸ジエチルヘキシル;
- ジアルキルエーテル、例えば、ジカプリリルエーテル;並びに
- それらの混合物。
上記の成分の1つ以上を含有する植物油も挙げることができる。
ている)、ニンジンボク(Vitex negundo)(特にLaboratoires Expanscience社から商品参照名Neurovity(登録商標)で販売されている)、栗(sweet chestnut)、パパイヤ、アルガンツリー、オート麦、ヒマワリ、デイジー、牡丹/シャクヤク(peony)、又はディルなどの植物の抽出物(通常は水性抽出物);藻類、特に、サンゴモの、ジャニア・ルーベンス(Jania rubens)の、ウンガリア・ピナティファダ(Ungaria pinnatifada)の、アラリア・エスクレンタ(Alaria esculenta)の、又はナンノクロロシス・オクラタ(Nannochlorosis oculata)の水性抽出物;精油(エッセンシャルオイル)、特にギンバイカ(myrtle)の精油;グルコン酸亜鉛、及び/又はグルコン酸銅;並びにそれらの混合物。
- 有機充填剤、例えば:多糖類粉末、特に天然デンプン粉末、加工デンプン粉末、又はセルロース粉末;ポリ(メチルメタクリレート)などのアクリルポリマーの、ポリアミドの、又はポリオレフィンの粉末;コラリナ・オフィシナリス(Corallina officinalis)などの乾燥された藻類の粉末;
- 無機充填剤、例えば、シリカ、粘土、パーライト、及びタルク;
- 並びにそれらの混合物。
以下の試験では、植物の頭状花から水蒸気蒸留によって得られたヘリクリサム・イタリカム(Helichrysum italicum)の精油、及び水蒸気蒸留残渣から得られたイモーテル蒸留残渣の油性抽出物を使用する。この抽出物は、60℃の温度及び285バールの圧力において超臨界CO2を用いて残留物(蒸留残渣)を抽出することによって調製した。このようにして得られた不鹸化化合物をひまわり油で希釈し、次に200℃において分子蒸留工程にかけ、得られた留出物をカプリル酸/カプリン酸トリグリセリドで3〜5質量%の量に希釈することにより標準化した。
乳房生検の女性ドナーに由来する初代培養のケラチノサイトを、96ウェルプレート(Nunc)に、1ウェルあたり12,000細胞の割合で、50μg/mlの下垂体抽出物(Gibco)、5 mg/mlのEGF(上皮成長因子、Gibco)、及び100 μg/mlのノルモシン(Invivogen)を添加したケラチノサイト無血清培地(KSFM、Gibco)中に播いた。その細胞を37℃、5%CO2において3日間培養し、その後、イモーテル蒸留残渣の油性抽出物、イモーテルの精油、及びそれらの組み合わせ物で処理した。
72時間の培養後、0.0005%のイモーテルの精油、0.001%のイモーテル蒸留残渣の油性抽出物、及びそれらの組み合わせ物の非存在下又は存在下で培地を交換した。各濃度について、培養は6つの同一のウェルで行った。
培養物を4日間維持し、試験化合物を含む培地を、培養期間にわたって3回(毎日)交換した。
4日間の培養後、培養液を取り除き、XTT(2,3-ビス(2-メトキシ-4-ニトロ-5-スルホフェニル)-5-[(フェニルアミノ)カルボニル] -2H-テトラゾリウムのナトリウム塩)の溶液を含む培地に交換した。細胞をこの溶液で37℃及び5%CO2において2時間インキュベートした。
インキュベーション期間の最後に、Varioskan(登録商標)マイクロプレートリーダーを使用して、吸光度を450 nmにて測定した。
細胞生存率は以下の方法で計算した:
生存率%=(処理ありのODの平均−ブランク)/(処理なしのODの平均−ブランク)×100
毒性閾値は、処理なしの対照の値の85%に設定した。
細胞生存率について吸光度を測定した後、XTT溶液を含む培地を除去し、1%のβ-メルカプトエタノール(VWR)を含むバッファー(RLTバッファー、Qiagen)と交換した。 細胞を、溶解した後に-80℃で凍結させた。リアルタイムPCR分析を実施するのに十分なRNAを得るために、条件ごとに3つのウェルをプールし、RNaseyミニキット(Qiagen)のプロトコルに従って、ゲノムDNA除去するためのDNase Iとのインキュベーションとともに、2つの異なるRNA抽出を行った。RNAの量はNanoView分光光度計を使用して測定し、RNAの質はBioanalyzer 2100(Agilent Technologies)を使用したマイクロキャピラリー電気泳動によって検証した。
「AffinityScript QPCR cDNA合成キット」(Agilent Technologies)を使用して、400 ngのRNAをcDNAに逆転写した。リアルタイムPCRは、MXP 3005システム(Agilent technologies)を使用して、各条件ごとに2回ずつ実施した。使用した増幅キットは、Brilliant III Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mix(Agilent Technologies)だった。
使用したプライマーは、Bio-Radからのものだった:トランスグルタミナーゼ1(TGM1、qHsaCED0056475)、ケラチン10(KRT10、qHsaCED0034304)、インボルクリン(IVL、qHsaCED0046054)、フィラグリン(FLG、qHsaCED0036604)、カテプシン2(CSTL2、qHsaCED0044736)、ロリクリン(LOR、qHsaCED0048415)、β1インテグリン(ITGB1、qHsaCED0005248)、及びα6インテグリン(ITGA6、qHsaCED0042632)。
2つのハウスキーピング遺伝子、TATAボックス結合タンパク質(TBP、qHsaCID0007122)及びリボソームタンパク質L13a(RPL13A、qHsaCED0045063)を使用して、目的の遺伝子の発現を規格化した。
別々に試験した抽出物、及びまたそれらの混合物は、いかなる細胞毒性も示さない(細胞生存率>85%)ことが示された。
さらに、表皮の分化に関与する遺伝子の発現とバリア機能(TGM1、KRT10、IVL、FLG、CSTL2、及びLOR)は、別々にとった各抽出物と比較して、2つの抽出物(イモーテルの精油及びイモーテルの蒸留残渣の油性抽出物)の組み合わせを使用して相乗的に大きくなった。これらの遺伝子の発現は、この組み合わせを用いて3〜24倍に増加するが、これらの遺伝子はそれぞれの抽出物によって実質的に過剰発現されることはない。この効果は、ロリクリンをコードする遺伝子について特に顕著であり、インボルクリンをコードする遺伝子についてはそれほど顕著ではなく、これらは、表皮のバリア機能に関与する角質化したエンベロープの形成のために必須の不溶性及び可溶性タンパク質であり、それらはカルシウム依存性酵素であるTGM1によって互いに結合されている。フィラグリンをコードする遺伝子の非常に強い過剰発現も観察され、フィラグリンは角質層をも構成するケラチンフィラメントと天然保湿因子(NMF)の前駆体との間のセメントを構成する。
Claims (10)
- 生理学的に許容される媒体中に、イモーテルの精油及びイモーテル蒸留残渣の油性抽出物を含み、前記イモーテル蒸留残渣の油性抽出物がステロール;2−(Z)−デセン酸及び4−(Z)−デセン酸を含む、飽和又は不飽和の直鎖状C7〜C10カルボン酸;安息香酸;及び、飽和又は不飽和の直鎖状C8〜C18脂肪酸のエチルエステルを含む、化粧品組成物。
- 前記の精油及び油性抽出物の調製に使用されるイモーテルが、独立に、ヘリクリサム・イタリカム(Helichrysum italicum)、ヘリクリサム・アレナリウム(Helichrysum arenarium)、及びヘリクリサム・ストエカス(Helichrysum stoechas)、好ましくはヘリクリサム・イタリカム(Helichrysum italicum)の種から選択されたものであることを特徴とする請求項1に記載の組成物。
- イモーテルの精油が、その植物の地上部から、特にその花または頭状花から得られたものであることを特徴とする、請求項1又は2に記載の組成物。
- イモーテル蒸留残渣の油性抽出物が、超臨界流体、好ましくは、超臨界状態の二酸化炭素を使用して蒸留残渣を抽出することにより得られたものであり、その得られた抽出物が次に任意選択により分子蒸留工程にかけられていてもよいことを特徴とする、請求項1〜3のいずれか一項に記載の組成物。
- イモーテル蒸留残渣の油性抽出物が、溶媒中、例えば、カプリル酸/カプリン酸トリグリセリド中に希釈されていることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組成物。
- イモーテルの精油が、組成物の総質量に対して、0.001〜5質量%、好ましくは0.001〜1質量%であることを特徴とする、請求項1〜5のいずれか一項に記載の組成物。
- ステロールが本質的にベータ-シトステロールからなり、飽和又は不飽和の直鎖状C7〜C10カルボン酸がヘプタン酸、オクテン酸、及びデセン酸を含み、かつ飽和又は不飽和の直鎖状C8〜C18脂肪酸のエチルエステルがカプリル酸エチル、カプリン酸エチル、及びリノール酸エチルを含むことを特徴とする、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組成物。
- イモーテル蒸留残渣の油性抽出物が、組成物の全質量に対して0.001〜5質量%、好ましくは0.001〜1質量%であることを特徴とする、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物。
- 皮膚老化、特に、皮膚のしわ、たるみ、皮膚の柔軟性及び/又は弾性の喪失、皮膚の薄化、皮膚の粗さ及び/又は肌の輝きの喪失の発症を遅らせ、進行を低減し、又は徴候の強さを低減させるための;または乾燥肌の予防又は処置のための、請求項1〜8のいずれか一項に記載の組成物の非治療的使用。
- 請求項1〜8のいずれか一項に記載の組成物を皮膚上に局所適用する工程を含む、皮膚老化、特に、皮膚のしわ、たるみ、皮膚の柔軟性及び/又は弾性の喪失、皮膚の薄化、皮膚の粗さ及び/又は肌の輝きの喪失の発症を遅らせ、進行を低減し、又は徴候の強さを低減させるための、または乾燥肌の予防又は処置のための、化粧方法。
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